KR100812544B1 - 제대혈 유래 다분화능 줄기세포 및 이를 함유하는 허혈성괴사질환 치료용 세포치료제 - Google Patents
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Abstract
Description
상기 실시예 1에서 배양된 다분화능 줄기세포를 PBS로 2회 세척한 다음, 0.25% 트립신으로 처리하여 세포를 수거하고, 원심분리를 통해 상층액을 제거하였다. 이후 PBS로 세척하여 트립신을 불활성화 시킨 후 2차 원심분리를 실시하여 1.3×106∼107개의 세포를 수거하였다. 이를 멸균생리식염수 100㎕에 부유시켜 다분화능 줄기세포 즉시 투여군 8마리의 각 대퇴부 근육에 투여하였다. 또한 상기 허혈성 괴사유발후 24시간후에 같은 방법으로 1.3×106∼107개의 다분화능 줄기세포를 멸균생리식염수 100㎕에 부유시켜, 다분화능 줄기세포 하루 후 투여군 3마리의 각 왼쪽 대퇴부 근육에 투여하였다.
세포를 멸균생리식염수 100㎕에 부유시켜, 다분화능 줄기세포 하루 후 투여군 3마리의 각 왼쪽 대퇴부 근육에 투여하였
다.
실험 개체수 | 실험전 체중(g)±SD | 실험후 체중(g)±SD | 절단 개체수 (절단율) | 증상일자 ± 표준편차 | 절단일자 ± 표준편차 | |
대조군 | 7 | 20.0 ±0.89 | 20.2 ±1.07 | 7 (100%) | 1.86 ±0.38 | 6.57 ±2.64 |
다분화능 줄기세포 즉시 투여군 | 8 | 20.0 ±0.74 | 20.4 ±0.55 | 5 (62.5%) | 4.00 ±1.77 | 7.80 ±3.56 |
다분화능 줄기세포 하루 후 투여군 | 3 | 20.1 ±1.27 | 20.4 ±1.78 | 3 (100%) | 1.00 ±0 | 3.33 ±0.58 |
Claims (8)
- 제대혈 유래 혈액을 5~20%의 인간 혈청 또는 플라즈마를 함유하는 배지에서 배양하여 수득되고, 다음과 같은 특성을 나타내는 성체 줄기세포:(a) CD45, SH-2 및 SH-3에 대하여 양성의 면역학적 특성을 나타내고, CD34 에 대하여 음성의 면역학적 특성을 나타냄;(b) 플라스틱에 부착되어 성장하며, 둥근형태(round-shape) 또는 선형태(spindle-shape)의 형태학적 특성을 나타냄; 및(c) 중배엽, 내배엽 또는 외배엽 유래 세포로 분화하는 능력을 가짐.
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- 제1항에 있어서, 상기 중배엽 유래 세포는 골형성 세포이고, 외배엽 유래 세포는 신경세포이며, 내배엽 유래 세포는 혈관내피세포(endothelial cell)인 것을 특징으로 하는 성체 줄기세포.
- 제대혈 유래 혈액을 5∼20%의 인간 혈청 또는 플라즈마를 함유하는 배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는 다음과 같은 특성을 나타내는 성체 줄기세포의 제조방법:(a) CD45, SH-2 및 SH-3에 대하여 양성의 면역학적 특성을 나타내고, CD34 에 대하여 음성의 면역학적 특성을 나타냄;(b) 플라스틱에 부착되어 성장하며, 둥근형태(round-shape) 또는 선형태(spindle-shape)의 형태학적 특성을 나타냄; 및(c) 중배엽, 내배엽 또는 외배엽 유래 세포로 분화하는 능력을 가짐
- 제5항에 있어서, 인간 혈청 또는 플라즈마는 자가(autologous) 또는 타가(allologous)인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항 또는 제4항의 성체 줄기세포를 유효성분으로 함유하고, 혈관 결절 직후에 바로 투여하여 폐쇄성 동맥 또는 정맥 질환에 의한 허혈성 괴사질환 또는 심혈관 질환 치료 효과를 가지는 세포치료제.
- 제7항에 있어서, 상기 폐쇄성 동맥 질환에 의한 허혈성 괴사 질환은 심근경색, 뇌경색, 고관절의 무혈성 골괴저(avascular necrosis of hip joint), 버거씨 병, 및 당뇨 합병증에 의한 사지괴저병으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 세포치료제.
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