JP2006502116A - タンパク質の酸化分解を防ぐ方法及び組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、この引用をもってその出願の内容全体をここに援用することとする、2002年7月12日出願の米国仮特許出願第60/395,411号に基づく優先権を主張するものである。
タンパク質は精製及び保管中に様々な程度の分解を起こす。酸化はタンパク質の主な分解経路の一つであり、タンパク質の安定性に破壊的な影響を及ぼす。タンパク質が酸化分解すると電子が失われ、アミノ酸残基の破壊やタンパク質の凝集 [Davies, J. Biol. Chem. 262: 9895-901 (1987)]、ペプチド結合の加水分解 [Kang and Kim, Mol. Cells 7: 553-58 (1997)]が起き、従ってタンパク質の三次構造変化を原因とするタンパク質の不安定性が生ずる。
本発明は、酸化を原因とする損傷からタンパク質を保護するための優れた組成物及び調合物を提供するものである。本組成物は、金属キレート剤と、任意に、やはり一種以上のフリーラジカル中和剤、特に酸素ラジカルの中和剤(「ROS中和剤」)、との組合せと一緒に調合された酸化し易い一種以上のタンパク質を含有する。本組成物は、酸化に対する高い耐性を示し、その結果、例えば製品貯蔵寿命も長く、安定性が高いために室温での保存が可能であり、及び/又は、製品梱包上の柔軟性も大きくなっている。加えて、本組成物は、一つ以上のサブユニット又はポリペプチド鎖を有すると共に、酸化による損傷を特に頻繁に受けやすいような多ユニットのタンパク質にさえも、著しい保護作用があることを示した。従って、本発明は、抗体組成物など、多ユニットのタンパク質組成物でも保護する(即ち安定化させる)ための重要な手段を提供するものである。
本発明は、タンパク質の分解及び凝集などを起こすタンパク質の酸化を減少又は防ぐ方法及び組成物を提供するものである。ここに示すように、遷移金属キレート剤、ROS中和剤及び他の活性薬剤など、多様な組合せの酸化保護性化合物と一緒にタンパク質を調合することにより、著しい保護を達成することができる。ある具体的な実施態様では、本発明の被酸化保護組成物には、酸化機序によって損傷を受けやすく、従って安定な形で維持することが困難なモノクローナル抗体が含まれる。
ここで用いる場合、本発明を記述するために用いられた以下の用語及び文言は、以下に提供する意味を有するものとする。
RP=100%−[(保護性化合物を含有する、Asc及び金属で処理された試料中の特定のバンドの強度)÷(保護性化合物のない、Asc及び金属で処理された試料中の特定のバンドの強度)]
酸素/酸化損傷
タンパク質の酸化は、どこにでもある元素の酸素が参与しているために、分解の最もよくある原因の一つである。過酸化水素及び遊離過酸化物(O2-)及び水酸基ラジカル(-OH)を含め、反応性の酸素種は、タンパク質の凝集 (Davies, JBC 1987 vol. 262 pg. 9895)、ペプチド結合の加水分解(Kang and Kim, Mol. Cells 1997 vol.7 pg. 553) 及び分子間架橋ジチロシン (Davies, JBC 1987 vol. 262 pg. 9908)を含め、タンパク質に対して相当な損傷を及ぼすことができる。
大半のタンパク質の化学的分解プロセスは温度依存的である。しかしながら、酸化の場合、逆説が存在する。温度が低いと酸素の可溶性が増すが、酸素分解率は低下する。温度が高いと酸素の可溶性が低下するが、酸素分解率は増す (J. Par. Sci Tech. Vol.36,1982, pg.222)。
大半のタンパク質凝集型は、新しいジスルフィド間の架橋か、又は、新たに形成された非ジスルフィド間の架橋の結果である。酸化により引き起こされる二種類の非還元性の架橋には、Trpのキヌレニン(開環したペンチル環構造)への転化が関与しており、その結果、蛍光の減少及びタンパク質凝集が起きるか、あるいは、介在ジチロシンが形成されて、410-420nm域(315nmでの励起)での蛍光スペクトル放出が増加する (Wold and Moldave, ME, 1984 vol. 107, pg. 377)。
ここで説明するように、本発明は、ある実施態様において、化合物によるタンパク質分解のレベルを判定するための確認済みの方法を用いる。この方法を用いると、このような分解から保護する化合物を同定したり、提供された保護レベルを判定することができる。具体的には、紹介する方法は、タンパク質の酸化損傷を亢進させるステップと、この損傷が、リアルタイムで、加速された経時変化の間に観察されるのと同じ種を生じるかどうかを確認するステップとを含む。ある具体的な実施態様では、酸化条件を、試料をアスコルビン酸ナトリウムに曝露することでシミュレートする(例えば 4 mM、pH 7.5、37℃、48時間)。酸化性の種は、試料をSDS-PAGEに泳動させた後、銀染色することにより、可視化することができる。我々の分析の場合、3μgの材料を泳動させたが、これは、ナノグラム・レベルの感受性を有する銀染色の典型的な泳動量よりも多い。これにより、存在度がかなり低い場合でも種の検出が保証される。当業では、ゲルのバンド強度を分析して試料間の比較を簡単に行うデンシトメトリが公知である。この方法は、例えば、酸化発生性化合物により提供される保護のレベルを、多種の金属との関連から評価するために、用いることができる。RP-HPLC、UV測定、蛍光測定及びイソクラティック(原語:isocratic)溶出法などの数多くの分析法を、酸化した生成物の存在を確認するために用いることができる(Reubasaet et al., (1998) J. Pharm. Biomed. Anal. 17: 955-978)。適当な酸化は、典型的には、試料をpH 7.5、37℃のアスコルビン酸に48時間曝露することにより、達成される。酸化は、銀染色SDS-PAGE法により可視化するなどの分析法で確認することができる。
結合タンパク質、免疫グロブリン、酵素、受容体、ホルモン及びこれらのフラグメントを含め、酸化を起こし易い、いずれのタンパク質も、本発明の方法及び組成物により、安定化させる(即ち保護する)ことができる。例えば適した精製スキームで細胞又は組織源から単離されたか、組換えDNA技術で作製されたか、標準的なペプチド合成技術を用いて化学的に合成されたか、など、当該タンパク質を得る又は作製する源又は態様は重要ではない。例えば、キメラ及び/又は融合タンパク質を含め、多種の天然、合成及び/又は組換えタンパク質を、本発明の方法及び組成物により安定化させることができる。
金属キレート剤は、フリーラジカルの形成及びTween(ポリソルベート)の酸化を阻害/減少させることが示されている。それらの有効性は、実験条件によって様々であるが、文献に記載されている。最もよく用いられているキレート剤であるEDTAは、Cu触媒性フェントン反応においてフリーラジカルの形成を阻害することが示されている。特定の場合において、EDTAはFe触媒性フェントン反応でのフリーラジカルの形成を促進する(Bioch. Biophy. Acta 1997, vol. 1337, pg. 319)。これが起きる理由はFe-EDTAの錯体が、水酸基ラジカル(HO・)を逃がしてしまう開放構造を有するからである。さらに、EDTAは、Feを溶液中に維持して、生理pHでそれが沈殿する妨げとなることも示されている(ME 1990, vol 186 pg 16)。
本発明の酸化保護性化合物を、投与に適した医薬組成物中に組み込むことができる。さらに本発明の酸化保護性化合物を、診断及び/又は研究目的に適した組成物中に組み込むこともできる。このような組成物は、典型的には、目的のタンパク質を、酸化保護性化合物及び薬学的に許容可能な担体の組合せと一緒に含有する。ここで用いられる場合の言語「薬学的に許容可能な担体」とは、薬学的投与に適合する、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗カビ剤、等張剤並びに吸収遅延剤等を包含するものと、意図されている。薬学的に活性な物質のためのこのような媒質及び薬剤の使用は当業で公知である。いずれかの従来の媒質又は薬剤が当該活性化合物と不適合でない限り、組成物中へのその使用は、考察されたところである。補助的な活性化合物も、本組成物中に組み込むことができる。
この項では、本発明に従った例示的な組成物を作製するための範囲及び処方を紹介する。熟練した実務者であれば、ごく慣例的な実験を用いるのみで、本発明の範囲内でさらに代替的な組成物を容易に処方することができる。
材料及び方法
1. タンパク質酸化検定
タンパク質を酸化に曝露する数多くの方法が当業で公知であり、本発明に従って酸化条件からの保護能について調合物を検査するために用いることができる。通常用いられている方法には、タンパク質のH2O2又はアスコルビン酸+金属及びO2への曝露(空気への曝露)がある (Reubsaet, J. Pharm. Biomed. Ana. (1998) 17: 955。本実施例では、試料をアスコルビン酸ナトリウム(4mMの濃度)、pH7.5の1μMの銅又は鉄で処理し、37℃で典型的には48時間インキュベートすることにより、酸化条件をシミュレートした。特に記載しない限り、用いた試料タンパク質濃度は1 mg/mLだった。
適した温度を選択することは、精確な加速された安定性実験にとって重要である。当業においては、高温によりタンパク質の折り畳み構造が部分的にほどけて不可逆的な変性を起こすことがあることが知られている。このような変化のために安定性実験が複雑になる場合がある。なぜなら、タンパク質の変性遷移が起きる温度又はそれより高い温度で行われる加速された安定性実験で観察される化学的変化は、最終的なバイアル製品の保管温度、例えば4℃、で起きる実際の変性を表していないかも知れないからである。熱量測定法及び蛍光分光法などの生物物理学的技術を用いると、高温がこのような変化を引き起こすかどうかを確認することができる。従って、この実験の場合、37℃が、タンパク質構造中で折り畳み構造の破壊を何ら引き起こさないことが判明した。
銅及び鉄が媒介する酸化損傷からタンパク質を保護する上での金属キレート剤の保護能を調べるために、EDTA、EGTA、DTPA、及びDEF などの金属キレート剤を、上の1で解説した通りの加速された酸化条件下で行われた一連の実験で調べた。タンパク質試料は、SDS-PAGE、GPC-HPLC、及びELISA(所定の試料)により分析された。
SDS-PAGEを、バイオ・ラド社のクライテリオン・ゲル(還元試料の場合4-20%、未還元試料の場合4-15%)を用いて行った。ゲルはすべて、1ウェル当たり3μgの試料の一定充填量で充填した。GPC-HPLC分析を、Tosohaas TSK3000 SWXLカラム(7.8mm×30 cm)を用いて75μgの注射で行った。
対生物活性を、抗Tリンパ球抗原抗体に特異的なELISAを用いて判定した。96ウェル・プレートを、可溶性Tリンパ球抗原で被覆した。該抗体を多様な濃度でプレートに加え、可溶性Tリンパ球抗原を結合させた。結合した抗体は、抗ヒトIgGアルカリホスファターゼ結合抗体の次に、ホスファターゼ基質パラニトロフェニルホスフェートで検出された。OD405をELISAプレート・リーダを用いて測定した。報告されている活性は、酸化剤又は酸化保護性化合物のいずれにも曝露していない抗Tリンパ球抗原抗体の参照標準の結合活性を100%としたときの相対値である。
タンパク質試料を高温だが、タンパク質の変性に必要な遷移温度よりは低い温度(37℃)で48時間、インキュベートした。酸化からの保護の程度を分析するために、タンパク質試料を還元性SDS-PAGEで泳動させ、銀染色法を用いて可視化した。タンパク質のバンドの強度は、デンシトメトリを用いて定量された。コントロール組成物中の酸化に関連する種の強度を、被酸化保護組成物の強度と比較した。
バンド強度の10%以上の減少、又は、少なくとも約10%の相対的保護;
バンド強度の20%以上の減少、又は、少なくとも約20%の相対的保護;
バンド強度の40%以上の減少、又は、少なくとも約40%の相対的保護;
バンド強度の60%以上の減少、又は、少なくとも約60%の相対的保護;
バンド強度の80%以上の減少、又は、少なくとも約80%の相対的保護;
キレート剤を、銅を加えた、及び、銅を加えていない、モノクローナル抗体を含有するアスコルビン酸処理試料に加え、分解を3回の時点(48、96、144時間目)で評価した。加えて、Tween-80を(DTPAを加えた、及び、加えていない)含有する試料も評価した。結果を表1に示す。
抗Tリンパ球抗原抗体を含有する試料を37℃で48時間、アスコルビン酸処理すると、銀染色されたSDS-PAGEゲルで可視化したときの分解及び凝集が、明白に亢進されていた。新たなバンドが観察され、モノクローナル抗体に、低レベルながら通常伴う特異的な凝集体及び分解生成物(即ち、参照標準中にバンドの総強度の5%未満の強度で存在するもの)がアスコルビン酸処理で亢進されていた。酸化損傷は、銅イオンの存在により悪化しており、凝集体及び分解生成物の両者を表す約12本のバンドが形成されていた。EDTA(0.1又は1mM)の添加により、酸化損傷が亢進した。
以下の実験では、2つの主なパラメータ:有効なキレート剤濃度(例えば、実施例1で用いられたものより低い濃度を調べる)及び多様な金属処理に基づく示差的な効果、に焦点を当てた。
金属の非存在下では、銀染色SDS-PAGEで可視化したところ、DTPAは、たとえ0.025 mMのときでも保護効果を示したが、DEFで処理された試料はいくらかの程度、保護された。
前述の研究(実施例2)では、DTPA及びDEFが、酸化に対して金属特異的な保護効果を有することを示した。具体的には、DTPAは、銅が媒介するタンパク質損傷に対して保護効果を有し、DEFは、鉄が媒介する損傷に対して保護効果を有する。銅及び鉄は両者とも、医薬用等級のガラスに通常見られるため、銅及び鉄で処理されたDTPA及びDEFの組合せの効果を、一緒の場合及び別々の場合で、研究した。加えて、DTPAの濃度を(0.1mMを越えて)高くすると鉄の存在下で酸化に対する保護があるかどうかも研究した。従って、モノクローナル抗体、0.02% Tween-80、銅もしくは鉄又は両者の金属、及び多様な濃度のDTPA濃縮液又はDTPA/DEF組合せ、を含有するタンパク質試料を評価した。
DTPA濃度を高く(0.5 及び1.0 mM)すると、鉄で処理された試料では保護効果が見られた。銅もしくは鉄又は両者の金属で処理された試料では、DTPA及びDEFの組合せにより、驚くべき保護効果があることが観察された。具体的には、実施例1及び2に示すように、0.1 mM のDTPA又はDEFのいずれかで処理されたタンパク質試料は、いくらかの酸化損傷を、SDS-PAGE上の様々なバンド・パターンにより、示した。しかしながら、0.1 mMのDTPA 及び DEF の組合せ処理では、これら個々のキレート剤による観察上の保護との比較から予測されるよりもはるかに大きな保護効果があった。さらに、1 mM のDTPA及び0.1 mMのDEF組合せでは、0.1 mMの DTPA/DEFの組合せの提供する保護より小さかった。
タンパク質調合物の酸化に対するDTPA及びDEF の相乗的な保護効果を、DTPA及びDEFを様々な濃度にしたタンパク質組成物を調合することにより、調べた。具体的には、抗体、0.02% Tween-80を含有するタンパク質試料を、銅及び鉄に一緒に曝露し、様々な濃度のDTPA/DEFで処理した。
検査された試料はすべて、酸化損傷からの抗体保護をいくらかの程度、示した。いくつかの組合せは、より高分子量の凝集を防ぐのに役立ったが、重鎖及び軽鎖バンド間で溶出する種の形成は防がなかった。最も大きな保護が観察されたのは、1 mM のDTPA/0.5 mM のDEF、0.02 mM のDTPA/0.1 mM のDEF、及び0.1 mMのDTPA/0.5 mMのDEFで処理された試料においてであった。
DTPAとDEFとの間の相乗効果の観察をもとに、いずれか又は両者のキレート剤が、EDTAにより亢進する酸化損傷を「救う」ことができるかどうかを判定する研究に至った。加えて、単独の場合、又は、前に調べられたキレート剤との組合せの場合の、保護効果を提供する上でのEGTAの能力を研究した。具体的には、0.02%のTween-80及びEGTA又はEDTAを、他のキレート剤と組み合わせて含有するタンパク質試料を銅及び/又は鉄に曝露し、評価した。
DTPA、DEF又は両方のキレート剤の存在下で、ひどい酸化損傷が、EDTAで処理された試料で観察された。1mMのEGTAがCuに基づく酸化に対する(コントロールに比較して)相当な保護を提供し、また程度はより小さいが、(コントロールに比較したときの付加的な凝集体及び分解生成物を証左とすると)Feにより引き起こされる酸化に対しても保護を提供した。1 mM のEGTA+0.1 mM のDTPAは僅かな酸化の増加を示したが、1 mM のEGTA+0.1 mM のDEFは(コントロールに比較して)良好な保護を示した。しかしながら、1 mM のEGTA+0.1 mMの両DEF及びDTPAでは、保護は小さかった。興味深いことに、両DEF及びDTPAをより高濃度(1mM)にしても、EDTA又はEGTAのいずれでも向上は見られなかった。
前記の実施例で紹介された酸化保護性組成物の融通性を調べるために、二種のモノクローナル抗体並びに五種の他のタンパク質及びペプチドを、金属及びアスコルビン酸と、付加的なキレート剤、及び、酸素に関与するフリーラジカル(ここでは反応性酸素種又は「ROS」と言及)の中和剤の組合せとに曝露した。これらの実験では、本発明の酸化保護性かつ安定化作用のある組成物を、広範囲の分子量、濃度及び生物物理学的及び生化学的特徴を有する多種のタンパク質に用いることができることが、実証されている。
二種のモノクローナル抗体(抗Tリンパ球抗原抗体及び抗表面腫瘍抗原抗体)を、キレート剤及びROS中和剤の更なる組合せの存在下で調べた。
RP=100%−[(保護化合物のあるバンド強度)÷(保護化合物のないバンド強度)]
キレート剤の組合せ、又は、キレート剤及びROS中和剤の組合せの非存在下では、両方のモノクローナル抗体タンパク質試料とも、銀染色SDS-PAGEで可視化された新しい別個のバンドや、アスコルビン酸、金属、Tween-80及びグリセロールなど、酸化、分解及び凝集を起こす化合物を含有することが公知のバンドの強度の上昇に見られるように、酸化を示した。キレート剤の組合せ、又は、キレート剤及びROS中和剤の組合せを含有する条件のそれぞれで、タンパク質試料の分解及び凝集は、ゲル上のバンド強度が大きく低下したことで証左されるように、著しく弱まった。
ヒトIgG、ウシ血清アルブミン(BSA)、ヒト成長ホルモン、副甲状腺ホルモン(PTH)及び副腎皮質刺激ホルモン(ACTH)を、キレート剤及びROS中和剤の付加的な組合せの存在化で調べた。保護のレベルを、SDS-PAGEにより、当該タンパク質又はペプチドの分子量にとって最適なゲル濃度を用いて判定した。ゲルを銀染色した後、BIO-RAD GS-800デンシトメータを用いてスキャンした。もれなく観察された、一揃いの酸化関連種(凝集体及び分解生成物の両方)を表すバンドを検出し、付属のQuantity Oneソフトウェアを用いて定量した。デンシトメータによる分析では、「調節された体積」、即ち、バンドの強度がその体積に対して積分され、着色のバックグラウンドに関して調節されたもの、が提供される。最適な保護混合物は、これらの調節された体積の数値を減らすはずである。タンパク質試料の濃度及び対応するゲル濃度を表5に要約する。
金属及びアスコルビン酸に曝露すると、IgGは、前の実施例で研究した抗体と同様に、より高分子量の酸化誘導性凝集体や、抗体酸化の重鎖及び軽鎖の間で泳動する分解生成物及び種での増加を示した。酸化保護性化合物の組合せを当該IgG試料に導入すると、酸化による分解が減少した。
GPC-HPLC
銀染色SDS-PAGEに加え、GPC-HPLCを用いて、酸化を原因とするタンパク質凝集の発生や、分子量及び/又は三次構造の変化を調べた。抗Tリンパ球抗原抗体を、この研究全般で用いた。この研究の焦点は、主な単量体ピークの変化、即ち全(影響を受けていない)タンパク質(典型的には12乃至12.2で溶出する)や、凝集体ピークの発生であった。酸化損傷に曝露された試料は、主なピーク保持(減少)及び主なピーク形状(拡がった)の両方で大きな変化を示した。酸化損傷が広汎だったタンパク質試料の場合、2つの更なるピークが、9 乃至9.5分と7.3分という(カラムのボイド体積に相当する)保持時間で見られた。アスコルビン酸及び金属キレート剤は、典型的には、14 乃至16分の保持時間で溶出し、相当するピークは無視された。
4つの代表的な試料を、対生物活性に関する検査の対象に選抜した。ELISAを用いて、抗原を力価測定するのに必要な抗体の濃度を測定することにより対生物活性を判定した。結果を表7に示す。
3つの方法、即ち、SDS-PAGE、GPC及びELISAすべてで、酸化によりタンパク質構造に損傷が起きて、活性が大きく失われ、また、DTPA、DEF、及びこれらの組合せなど、酸化保護性の医薬品添加物を加えると、酸化プロセスを原因とした対生物活性の消失が妨げられることが、例外なく示された。
試料の光酸化を、SDS-PAGEを用いて観察されるバンドは、化学的に酸化させた、リアルタイムの安定性実験で見られたバンドと整列する。当該のタンパク質試料の分子量及びゲル上の溶出プロファイルは、凝集体及び分解生成物は、例えば重鎖及び軽鎖の連結部の酸化など、生成物に関連していることを示している。この実験では、化学的酸化実験と並行して行われた、より短いタイムスケールの光酸化実験に焦点を当てた。これにより、2つの種類の酸化プロセスにより生じる種を並行して比較することができる。
1mMのDTPAで処理された試料は、未保護の試料に対していくらかの向上を示した。マンニトール、DTPA/マンニトール、及びヒスチジンで処理された試料も、保護効果を示した。メチオニンは、SDS-PAGE上で重鎖及び軽鎖間で可視化される光酸化種の形成を減らす上で、特に有効だった。
前述の実施例では、酸化により、タンパク質、特にモノクローナル抗体に大きな損傷が起きること、そして、この酸化損傷は、DTPA、EGTA、及びDEFを含む金属キレート剤を、単独で、又は、一種以上のROS中和剤(例えばマンニトール、ヒスチジン及び/又はメチオニン)と組み合わせる、といった所定の組合せと一緒にタンパク質を調合することにより、減らすことができることを実証するものである。前述の実施例は、さらに、 DTPA 及びDEFは、酸化を減らす上で意外な相乗効果を有することを示している。具体的には、少なくとも0.1 mMのDTPA 及び0.02 mMのDEFを、ROS中和剤を加えて、又は加えずに組み合わせると、抗体及び他のタンパク質調合物に対する、酸化から保護するための万能の添加物として有効である。さらに前述の実施例では、キレート剤EDTAがタンパク質に対して有する破壊的作用を示し、前述の組成物が、酸化から保護する、即ち、この作用からタンパク質を「救う」ことができることも示されている。
当業者であれば、慣例的な実験を用いるのみで、ここに解説した本発明の具体的な実施態様の均等物を数多く、認識し、又は確認できることであろう。このような均等物は以下の請求の範囲の包含するところと、意図されている。本出願全体を通じて引用された全参考文献、特許及び公開済み特許出願の内容全文を、引用をもってここに援用することとする。
Claims (44)
- DTPA及びDEFと一緒に調合されたタンパク質を含む組成物。
- EGTA及びDEFと一緒に調合されたタンパク質を含む組成物。
- マンニトール、メチオニン及びヒスチジンから成る群より選択されたROS中和剤をさらに含む、請求項1又は2に記載の組成物。
- タンパク質と、DTPAと、マンニトール、メチオニン及びヒスチジンから成る群より選択されたROS中和剤とを含む組成物。
- DTPAの濃度が約1μM乃至約10 mMである、請求項1、3又は4のいずれかに記載の組成物。
- DEFの濃度が約1μM乃至約5 mMである、請求項1乃至3のいずれかに記載の組成物。
- マンニトールを約0.01%乃至約25%の濃度含む、請求項3乃至5のいずれかに記載の組成物。
- メチオニンを約10μM乃至約200mMの濃度含む、請求項3乃至5のいずれかに記載の組成物。
- ヒスチジンを約100μM乃至約200mMの濃度含む、請求項3乃至5のいずれかに記載の組成物。
- タンパク質の凝集を阻害する薬剤をさらに含む、請求項1乃至9のいずれかに記載の組成物。
- タンパク質の凝集を阻害する前記薬剤が、ポリソルベート 80、ポリソルベート20、グリセロール、及びポロキサマ・ポリマから成る群より選択される、請求項10に記載の組成物。
- タンパク質の凝集を阻害する前記薬剤が、濃度が0.001%乃至約0.1%のポリソルベート 80又はポリソルベート 20である、請求項11に記載の組成物。
- 組成物のpHを約5.0乃至約8.0に維持する緩衝剤をさらに含む、請求項1乃至12のいずれかに記載の組成物。
- 前記緩衝剤が、リン酸塩、クエン酸塩、Tris、酢酸塩、MES、コハク酸、PIPES、Bis-Tris、MOPS、ACES、BES、TES、HEPES、EPPS、エチレンジアミン、リン酸、及びマレイン酸から成る群より選択される、請求項13に記載の組成物。
- マンニトール、ポリソルベート、Tris、及び塩化ナトリウムを含み、前記タンパク質が抗体又はその一フラグメントである、請求項1に記載の組成物。
- 前記タンパク質の濃度が約1μg/mL 乃至約500 mg/mLである、請求項1乃至15のいずれかに記載の組成物。
- 前記タンパク質が抗体又はその一フラグメントである、請求項1乃至16のいずれかに記載の組成物。
- 前記抗体がモノクローナル抗体又はその一フラグメントである、請求項17に記載の組成物。
- 前記抗体がヒト抗体又はその一フラグメントである、請求項17に記載の組成物。
- 前記抗体が、毒素、ポリマ、撮像剤及び薬物から成る群より選択される薬剤に結合されている、請求項17乃至19のいずれかに記載の組成物。
- 前記タンパク質がマイクロ封入されている、請求項1乃至20のいずれかに記載の組成物。
- 前記組成物が医薬組成物である、請求項1乃至21のいずれかに記載の組成物。
- タンパク質をDTPA及びDEFと一緒に調合するステップを含む、安定化したタンパク質組成物を調製する方法。
- タンパク質をEGTA及びDEFと一緒に調合するステップを含む、安定化したタンパク質組成物を調製する方法。
- マンニトール、メチオニン及びヒスチジンから成る群より選択されるROS中和剤を加えるステップをさらに含む、請求項23又は24に記載の方法。
- 安定化したタンパク質組成物を調製する方法であって、DTPAと、マンニトール、メチオニン及びヒスチジンから成る群より選択されるROS中和剤とをタンパク質と一緒に調合するステップを含む、方法。
- タンパク質をDTPA及びDEFと一緒に調合するステップを含む、タンパク質を酸化から保護する方法。
- タンパク質をEGTA及びDEFと一緒に調合するステップを含む、タンパク質を酸化から保護する方法。
- マンニトール、メチオニン及びヒスチジンから成る群より選択されるROS中和剤を加えるステップをさらに含む、請求項27又は28に記載の方法。
- タンパク質を酸化から保護する方法であって、DTPAと、マンニトール、メチオニン及びヒスチジンから成る群より選択されるROS中和剤とをタンパク質と一緒に調合するステップを含む、方法。
- DTPA又はEGTAの濃度が、約1μM乃至約10mMである、請求項23乃至30のいずれかに記載の方法。
- DEFの濃度が、約1μM乃至約5mMのDEFである、請求項23乃至30のいずれかに記載の方法。
- 前記酸化保護性化合物が、約0.01% 乃至約25%のマンニトール、約10 μM 乃至約200 mM のヒスチジン、及び約10μM乃至約200 mMのメチオニンから成る群より選択される、請求項25、26、及び29乃至32のいずれかに記載の方法。
- タンパク質凝集を阻害する薬剤を組成物に加えるステップをさらに含む、請求項23乃至33のいずれかに記載の方法。
- pHを約5.0乃至約8.0に維持する緩衝剤を組成物に加えるステップをさらに含む、請求項23乃至33のいずれかに記載の方法。
- 前記緩衝剤が、約5 mM 乃至約100 mMのリン酸塩、クエン酸塩、Tris、酢酸塩、MES、コハク酸、PIPES、Bis-Tris、MOPS、ACES、BES、TES、HEPES、EPPS、エチレンジアミン、リン酸、及びマレイン酸から成る群より選択される、請求項35に記載の方法。
- 前記組成物が、マンニトール、ポリソルベート、Tris、及び塩化ナトリウムを含み、前記タンパク質が抗体又はその一フラグメントである、請求項36に記載の方法。
- 前記タンパク質の濃度が、約1μg/mL 乃至約500 mg/mLである、請求項23乃至37のいずれかに記載の方法。
- 前記タンパク質が抗体又はその一フラグメントである、請求項23乃至38のいずれかに記載の方法。
- 前記抗体がヒト抗体又はその一フラグメントである、請求項39に記載の方法。
- 前記抗体がモノクローナル抗体又はその一フラグメントである、請求項39又は40に記載の方法。
- 前記抗体が、毒素、ポリマ、撮像剤又は薬物から選択される薬剤に結合されている、請求項39乃至41のいずれかに記載の方法。
- 前記タンパク質がマイクロ封入されている、請求項23乃至42のいずれかに記載の方法。
- 前記組成物が医薬組成物である、請求項23乃至43のいずれかに記載の方法。
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Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016117756A (ja) * | 2010-01-20 | 2016-06-30 | 中外製薬株式会社 | 安定化抗体含有溶液製剤 |
JP2018513159A (ja) * | 2015-04-17 | 2018-05-24 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーBristol−Myers Squibb Company | 抗pd−1抗体と他の抗体の組み合わせを含む組成物 |
JP2018521129A (ja) * | 2015-07-07 | 2018-08-02 | ナノビオ コーポレイションNanobio Corporation | タンパク質の安定化のための方法および組成物 |
JP2020508331A (ja) * | 2017-02-24 | 2020-03-19 | アレコル リミテッド | 安定化された抗体溶液 |
JP2020052012A (ja) * | 2018-09-28 | 2020-04-02 | 株式会社Lsiメディエンス | 不溶性担体を使用する免疫学的測定試薬 |
JP7467438B2 (ja) | 2018-10-18 | 2024-04-15 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー | 抗rsv抗体の製剤及びその使用方法 |
Families Citing this family (45)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7883704B2 (en) * | 1999-03-25 | 2011-02-08 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Methods for inhibiting the activity of the P40 subunit of human IL-12 |
US6914128B1 (en) | 1999-03-25 | 2005-07-05 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Human antibodies that bind human IL-12 and methods for producing |
US20040033228A1 (en) | 2002-08-16 | 2004-02-19 | Hans-Juergen Krause | Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders |
MY150740A (en) | 2002-10-24 | 2014-02-28 | Abbvie Biotechnology Ltd | Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental |
LT1585548T (lt) | 2002-12-09 | 2018-09-25 | Abraxis Bioscience, Llc | Farmakologinių agentų kompozicijos ir įvedimo būdai |
KR20190034694A (ko) * | 2002-12-09 | 2019-04-02 | 아브락시스 바이오사이언스, 엘엘씨 | 약리학적 물질의 조성물 및 그 전달방법 |
JP4707327B2 (ja) * | 2004-01-27 | 2011-06-22 | 旭化成ファーマ株式会社 | ポリペプタイド類の吸着防止剤 |
WO2006096461A2 (en) * | 2005-03-08 | 2006-09-14 | Pharmacia & Upjohn Company Llc | Composition comprising an antibody against macrophage colony-stimulating factor (m-csf) and a chelating agent |
JP4689340B2 (ja) * | 2005-05-02 | 2011-05-25 | キヤノン株式会社 | 吐出用液体医薬組成物 |
JP5235661B2 (ja) | 2005-05-25 | 2013-07-10 | ノボ・ノルデイスク・エー/エス | 安定化ポリペプチド製剤 |
WO2007092829A2 (en) * | 2006-02-07 | 2007-08-16 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Stabilized compositions of proteins having a free thiol moiety |
AU2008205512B2 (en) * | 2007-01-16 | 2014-06-12 | Abbvie Inc. | Methods for treating psoriasis |
EP2142565A4 (en) * | 2007-03-29 | 2010-03-31 | Abbott Lab | CRYSTALLINE HUMAN ANTI-IL-12 ANTIBODIES |
WO2009006520A1 (en) * | 2007-07-03 | 2009-01-08 | Medimmune, Llc | Hinge domain engineering |
CN101687046B (zh) * | 2007-07-10 | 2012-12-26 | 株式会社美地拓斯 | 稳定性改善的肉毒毒素药物液体组合物 |
US8883146B2 (en) | 2007-11-30 | 2014-11-11 | Abbvie Inc. | Protein formulations and methods of making same |
EP2274333A4 (en) | 2008-03-18 | 2011-06-15 | Abbott Lab | PROCESS FOR TREATING PSORIASIS |
WO2010048184A2 (en) * | 2008-10-21 | 2010-04-29 | Baxter International Inc. | Methods for determining active ingredients in pro-drug peg protein conjugates with releasable peg reagents (in vitro de-pegylation) |
WO2010062896A1 (en) * | 2008-11-28 | 2010-06-03 | Abbott Laboratories | Stable antibody compositions and methods for stabilizing same |
DE102008063843A1 (de) | 2008-12-19 | 2010-06-24 | Beiersdorf Ag | Stabilisierung von hydrolisiertem Milchprotein durch Citrusöle |
CN102630168A (zh) * | 2009-09-14 | 2012-08-08 | 雅培制药有限公司 | 用于治疗银屑病的方法 |
CN110835373A (zh) | 2010-03-01 | 2020-02-25 | 拜耳医药保健有限公司 | 针对组织因子途径抑制剂(tfpi)的优化的单克隆抗体 |
JP6055412B2 (ja) | 2010-09-17 | 2016-12-27 | バクスアルタ ゲーエムベーハー | 弱酸性〜中性のpHにおける、ヒスチジンを有する水性製剤を介した免疫グロブリンの安定化 |
EP2500035A1 (en) * | 2011-03-15 | 2012-09-19 | Icon Genetics GmbH | Pharmaceutical formulation containing immunglobulin |
BR112014013099A8 (pt) | 2011-11-30 | 2023-05-09 | 3M Innovative Properties Company | Dispositivo de microagulhas incluindo um agente terapêutico peptídeo e um aminoácido e métodos para produzir e usar o dispositivo |
US8613919B1 (en) | 2012-08-31 | 2013-12-24 | Bayer Healthcare, Llc | High concentration antibody and protein formulations |
US9592297B2 (en) | 2012-08-31 | 2017-03-14 | Bayer Healthcare Llc | Antibody and protein formulations |
AR095398A1 (es) | 2013-03-13 | 2015-10-14 | Genentech Inc | Formulaciones con oxidación reducida |
AR095399A1 (es) | 2013-03-13 | 2015-10-14 | Genentech Inc | Formulaciones con oxidación reducida, método |
CA3135558A1 (en) * | 2013-03-13 | 2014-10-02 | Genentech, Inc. | Prevention of protein oxidation in a composition |
RU2015144020A (ru) | 2013-03-15 | 2017-04-21 | Дженентек, Инк. | Среды для культивирования клеток и способы получения антител |
US20150157742A1 (en) * | 2013-12-11 | 2015-06-11 | The European Atomic Energy Community (Euratom), Represented By The European Commission | SYNTHESIS OF BIOLOGICAL COMPOUNDS LABELED WITH THE ALPHA EMITTER Ac-225 |
AU2015357068B2 (en) | 2014-12-03 | 2021-07-29 | Csl Behring Ag | Pharmaceutical product with increased stability comprising immunoglobulins |
MX2021005561A (es) | 2015-04-29 | 2022-07-01 | Radius Pharmaceuticals Inc | Rad1901 para usarse en el tratamiento de cancer en sujetos con cancer positivo a receptor de estrogeno alfa resistente a farmaco. |
US11173197B2 (en) | 2015-07-07 | 2021-11-16 | Bluewillow Biologics, Inc. | Methods and compositions for nanoemulsion vaccine formulations |
CN110191707A (zh) | 2017-01-05 | 2019-08-30 | 雷迪厄斯制药公司 | Rad1901-2hcl的多晶型形式 |
US11608357B2 (en) | 2018-08-28 | 2023-03-21 | Arecor Limited | Stabilized antibody protein solutions |
EP3372242A1 (en) | 2017-03-06 | 2018-09-12 | Ares Trading S.A. | Liquid pharmaceutical composition |
EP3372241A1 (en) | 2017-03-06 | 2018-09-12 | Ares Trading S.A. | Liquid pharmaceutical composition |
FI3631454T3 (fi) | 2017-05-30 | 2023-11-30 | Bristol Myers Squibb Co | Lag-3-positiivisten kasvainten hoitaminen |
WO2018222722A2 (en) * | 2017-05-30 | 2018-12-06 | Bristol-Myers Squibb Company | Compositions comprising an anti-lag-3 antibody or an anti-lag-3 antibody and an anti-pd-1 or anti-pd-l1 antibody |
KR20200044023A (ko) * | 2017-08-22 | 2020-04-28 | 바이오젠 엠에이 인코포레이티드 | 항-베타 아밀로이드 항체를 함유하는 약제학적 조성물 |
WO2020010216A1 (en) | 2018-07-04 | 2020-01-09 | Radius Pharmaceuticals, Inc. | Polymorphic forms of rad 1901-2hcl |
MX2021004356A (es) * | 2018-10-18 | 2021-05-31 | Merck Sharp & Dohme Llc | Formulaciones de anticuerpos anti-rsv y metodos de uso de las mismas. |
CN116421705A (zh) * | 2023-02-27 | 2023-07-14 | 迈迪速能医学技术(天津)有限公司 | 降低宫颈癌发病风险的药物制剂 |
Citations (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6197229A (ja) * | 1984-10-18 | 1986-05-15 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 安定なエリトロポエチン製剤 |
JPS6267032A (ja) * | 1985-09-13 | 1987-03-26 | シタス コ−ポレイシヨン | 組換ヒトβ―インターフェロンを含有する医薬組成物及びその製造方法 |
JPH07506001A (ja) * | 1992-01-22 | 1995-07-06 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | 活性化因子xiii |
JPH0859498A (ja) * | 1994-06-14 | 1996-03-05 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | アポリポ蛋白a−1の加熱処理法 |
JPH0925297A (ja) * | 1996-07-01 | 1997-01-28 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | ヒト由来の糖蛋白質及び該糖蛋白質からなる生理活性因子とそれを活性成分とする製剤 |
JPH10182481A (ja) * | 1996-04-26 | 1998-07-07 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | エリスロポエチン溶液製剤 |
JPH10513433A (ja) * | 1993-02-02 | 1998-12-22 | ゾーマ コーポレイション | 殺菌性、浸透性が向上したタンパク質及び界面活性剤を含有する医薬組成物 |
JPH11507072A (ja) * | 1996-03-27 | 1999-06-22 | ウイスコンシン アラムナイ リサーチ フオンデーシヨン | ボツリヌス毒素またはボツリヌス神経毒の薬学的組成物および製造方法 |
JP2001086984A (ja) * | 1999-08-06 | 2001-04-03 | Aventis Behring Gmbh | アフィニティークロマトグラフィーによって血液凝固第vii因子を活性化するプロテアーゼ、そのプロ酵素または両タンパク質の混合物を純粋形態で調製する方法 |
JP2001517635A (ja) * | 1997-09-23 | 2001-10-09 | レントシュレール ビオテクノロジー ゲー・エム・ベー・ハー ウント コー. カーゲー | インターフェロン−β液状組成物 |
WO2002013860A1 (fr) * | 2000-08-11 | 2002-02-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Preparations stabilisees contenant un anticorps |
WO2002017957A1 (fr) * | 2000-09-01 | 2002-03-07 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Preparations de solutions stabilisees sur une longue periode de temps |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4522811A (en) * | 1982-07-08 | 1985-06-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides |
US4672028A (en) * | 1984-05-23 | 1987-06-09 | Icn Micromedic Systems, Inc. | Compositions and method for simultaneous multiple array of analytes using radioisotope chelate labels |
CA1329760C (en) * | 1987-10-29 | 1994-05-24 | Ted C. K. Lee | Plasma and recombinant protein formulations in high ionic strength media |
ES2097120T3 (es) * | 1989-07-24 | 1997-04-01 | Bayer Ag | Estabilizacion de proteinas altamente purificadas. |
US5217954A (en) * | 1990-04-04 | 1993-06-08 | Scios Nova Inc. | Formulations for stabilizing fibroblast growth factor |
US6165467A (en) * | 1991-07-20 | 2000-12-26 | Yoshihide Hagiwara | Stabilized human monoclonal antibody preparation |
US5217890A (en) * | 1991-08-20 | 1993-06-08 | Eastman Kodak Company | Stabilized composition containing creatine kinase and protein having blocked sulfhydryl groups |
US5358708A (en) * | 1993-01-29 | 1994-10-25 | Schering Corporation | Stabilization of protein formulations |
US5929031A (en) * | 1995-05-02 | 1999-07-27 | Baxter Biotech Technology Sarl | Storage stable hemoglobin solutions |
US6281175B1 (en) * | 1997-09-23 | 2001-08-28 | Scimed Life Systems, Inc. | Medical emulsion for lubrication and delivery of drugs |
US6482799B1 (en) * | 1999-05-25 | 2002-11-19 | The Regents Of The University Of California | Self-preserving multipurpose ophthalmic solutions incorporating a polypeptide antimicrobial |
WO2001085952A2 (en) * | 2000-05-10 | 2001-11-15 | Bristol-Myers Squibb Company | Modified inosine 5'-monophosphate dehydrogenase polypeptides and uses thereof |
WO2002020720A2 (en) * | 2000-09-06 | 2002-03-14 | University Of Massachusetts | High efficiency protein extraction |
US7041787B2 (en) * | 2000-12-29 | 2006-05-09 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Design and use of advanced zinc chelating peptides to regulate matrix metalloproteinases |
US20030114362A1 (en) * | 2001-06-08 | 2003-06-19 | Novaspin Biotech Gmbh | Penta-or tetrapeptide binding to somatostatin receptors and the use of the same |
US6803046B2 (en) * | 2002-08-16 | 2004-10-12 | Bracco International B.V. | Sincalide formulations |
-
2003
- 2003-07-11 JP JP2004521809A patent/JP2006502116A/ja active Pending
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Patent Citations (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6197229A (ja) * | 1984-10-18 | 1986-05-15 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 安定なエリトロポエチン製剤 |
JPS6267032A (ja) * | 1985-09-13 | 1987-03-26 | シタス コ−ポレイシヨン | 組換ヒトβ―インターフェロンを含有する医薬組成物及びその製造方法 |
JPH07506001A (ja) * | 1992-01-22 | 1995-07-06 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | 活性化因子xiii |
JPH10513433A (ja) * | 1993-02-02 | 1998-12-22 | ゾーマ コーポレイション | 殺菌性、浸透性が向上したタンパク質及び界面活性剤を含有する医薬組成物 |
JPH0859498A (ja) * | 1994-06-14 | 1996-03-05 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | アポリポ蛋白a−1の加熱処理法 |
JPH11507072A (ja) * | 1996-03-27 | 1999-06-22 | ウイスコンシン アラムナイ リサーチ フオンデーシヨン | ボツリヌス毒素またはボツリヌス神経毒の薬学的組成物および製造方法 |
JPH10182481A (ja) * | 1996-04-26 | 1998-07-07 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | エリスロポエチン溶液製剤 |
JPH0925297A (ja) * | 1996-07-01 | 1997-01-28 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | ヒト由来の糖蛋白質及び該糖蛋白質からなる生理活性因子とそれを活性成分とする製剤 |
JP2001517635A (ja) * | 1997-09-23 | 2001-10-09 | レントシュレール ビオテクノロジー ゲー・エム・ベー・ハー ウント コー. カーゲー | インターフェロン−β液状組成物 |
JP2001086984A (ja) * | 1999-08-06 | 2001-04-03 | Aventis Behring Gmbh | アフィニティークロマトグラフィーによって血液凝固第vii因子を活性化するプロテアーゼ、そのプロ酵素または両タンパク質の混合物を純粋形態で調製する方法 |
WO2002013860A1 (fr) * | 2000-08-11 | 2002-02-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Preparations stabilisees contenant un anticorps |
WO2002017957A1 (fr) * | 2000-09-01 | 2002-03-07 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Preparations de solutions stabilisees sur une longue periode de temps |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6009036745, VARTIO,T., "Regular fragmentation of hydrogen peroxide−treated fibronectin", J Biol Chem, 1989, Vol.264, No.8, p.4471−5 * |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016117756A (ja) * | 2010-01-20 | 2016-06-30 | 中外製薬株式会社 | 安定化抗体含有溶液製剤 |
US10022319B2 (en) | 2010-01-20 | 2018-07-17 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Stabilized antibody-containing liquid formulations |
US11612562B2 (en) | 2010-01-20 | 2023-03-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Solution preparation containing stabilized antibody |
JP2018513159A (ja) * | 2015-04-17 | 2018-05-24 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーBristol−Myers Squibb Company | 抗pd−1抗体と他の抗体の組み合わせを含む組成物 |
US11612654B2 (en) | 2015-04-17 | 2023-03-28 | Bristol-Myers Squibb Company | Combination therapy comprising nivolumab and ipilimumab |
JP2018521129A (ja) * | 2015-07-07 | 2018-08-02 | ナノビオ コーポレイションNanobio Corporation | タンパク質の安定化のための方法および組成物 |
JP2020508331A (ja) * | 2017-02-24 | 2020-03-19 | アレコル リミテッド | 安定化された抗体溶液 |
JP2020052012A (ja) * | 2018-09-28 | 2020-04-02 | 株式会社Lsiメディエンス | 不溶性担体を使用する免疫学的測定試薬 |
JP7467438B2 (ja) | 2018-10-18 | 2024-04-15 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー | 抗rsv抗体の製剤及びその使用方法 |
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