JP2004141162A - 酵素の安定化方法および組成物 - Google Patents
酵素の安定化方法および組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2004141162A JP2004141162A JP2003345233A JP2003345233A JP2004141162A JP 2004141162 A JP2004141162 A JP 2004141162A JP 2003345233 A JP2003345233 A JP 2003345233A JP 2003345233 A JP2003345233 A JP 2003345233A JP 2004141162 A JP2004141162 A JP 2004141162A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- preservative
- enzyme
- solution
- stabilizing
- reagent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 35
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims abstract description 37
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims abstract description 36
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 6
- -1 isothiazoline compound Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract description 26
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 8
- GUUULVAMQJLDSY-UHFFFAOYSA-N 4,5-dihydro-1,2-thiazole Chemical compound C1CC=NS1 GUUULVAMQJLDSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 5
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 abstract 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 abstract 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 abstract 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 17
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 9
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 9
- 102000057621 Glycerol kinases Human genes 0.000 description 8
- 108700016170 Glycerol kinases Proteins 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 7
- 229940100555 2-methyl-4-isothiazolin-3-one Drugs 0.000 description 4
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 4
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- BEGLCMHJXHIJLR-UHFFFAOYSA-N methylisothiazolinone Chemical compound CN1SC=CC1=O BEGLCMHJXHIJLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010077078 Creatinase Proteins 0.000 description 3
- 102000000587 Glycerolphosphate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 108010041921 Glycerolphosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 108010060059 Sarcosine Oxidase Proteins 0.000 description 3
- 102000008118 Sarcosine oxidase Human genes 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 4-aminoantipyrine Chemical compound CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940100484 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one Drugs 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 239000006173 Good's buffer Substances 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methylglycine Chemical compound OCC(CO)(CO)[NH2+]CC([O-])=O SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAHXYMFVNNUHCP-UHFFFAOYSA-N Naphazoline nitrate Chemical compound O[N+]([O-])=O.C=1C=CC2=CC=CC=C2C=1CC1=NCCN1 ZAHXYMFVNNUHCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DMSMPAJRVJJAGA-UHFFFAOYSA-N benzo[d]isothiazol-3-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NSC2=C1 DMSMPAJRVJJAGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- DHNRXBZYEKSXIM-UHFFFAOYSA-N chloromethylisothiazolinone Chemical compound CN1SC(Cl)=CC1=O DHNRXBZYEKSXIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 2
- HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N furfural Chemical compound O=CC1=CC=CO1 HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FVVCFHXLWDDRHG-UPLOTWCNSA-N (2s,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2s,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O1 FVVCFHXLWDDRHG-UPLOTWCNSA-N 0.000 description 1
- VRYALKFFQXWPIH-RANCGNPWSA-N (3r,4s,5r)-3,4,5,6-tetrahydroxy-2-tritiohexanal Chemical compound O=CC([3H])[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO VRYALKFFQXWPIH-RANCGNPWSA-N 0.000 description 1
- 229940116368 1,2-benzisothiazoline-3-one Drugs 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 2,2'-piperazine-1,4-diylbisethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AJTVSSFTXWNIRG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+](CCO)CCS([O-])(=O)=O AJTVSSFTXWNIRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVQFQZZGTZFUNF-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3-[4-(2-hydroxy-3-sulfonatopropyl)piperazine-1,4-diium-1-yl]propane-1-sulfonate Chemical compound OS(=O)(=O)CC(O)CN1CCN(CC(O)CS(O)(=O)=O)CC1 LVQFQZZGTZFUNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QEYKLZYTRRKMAT-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-3h-1,2-thiazole 1-oxide Chemical compound CN1CC=CS1=O QEYKLZYTRRKMAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 3-(N-morpholino)propanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCN1CCOCC1 DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007991 ACES buffer Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000007992 BES buffer Substances 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 239000008000 CHES buffer Substances 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N D-glucono-1,5-lactone Chemical compound OC[C@H]1OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- RUPBZQFQVRMKDG-UHFFFAOYSA-M Didecyldimethylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCC RUPBZQFQVRMKDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- FSVCELGFZIQNCK-UHFFFAOYSA-N N,N-bis(2-hydroxyethyl)glycine Chemical compound OCCN(CCO)CC(O)=O FSVCELGFZIQNCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBXNUXBLKRLWFA-UHFFFAOYSA-N N-(2-acetamido)-2-aminoethanesulfonic acid Chemical compound NC(=O)CNCCS(O)(=O)=O DBXNUXBLKRLWFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MKWKNSIESPFAQN-UHFFFAOYSA-N N-cyclohexyl-2-aminoethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCNC1CCCCC1 MKWKNSIESPFAQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JOCBASBOOFNAJA-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methyl-2-aminoethanesulfonic acid Chemical compound OCC(CO)(CO)NCCS(O)(=O)=O JOCBASBOOFNAJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007990 PIPES buffer Substances 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- UZMAPBJVXOGOFT-UHFFFAOYSA-N Syringetin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UZMAPBJVXOGOFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007994 TES buffer Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000007997 Tricine buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 208000034953 Twin anemia-polycythemia sequence Diseases 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N anthrone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=CC=CC=C3CC2=C1 RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N beta-melibiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N 0.000 description 1
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 description 1
- 239000007998 bicine buffer Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N bis-tris Chemical compound OCCN(CCO)C(CO)(CO)CO OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 1
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N dihydrochrysin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003028 enzyme activity measurement method Methods 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N galactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZNJHFNUEQDVFCJ-UHFFFAOYSA-M sodium;2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid;hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+].OCCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 ZNJHFNUEQDVFCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- CBDKQYKMCICBOF-UHFFFAOYSA-N thiazoline Chemical compound C1CN=CS1 CBDKQYKMCICBOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
【課題】 本発明が解決しようとする課題は、防腐剤を含む溶液中において長期間安定な液状試薬として耐えうる安定性を有した酵素溶液を提供することにある。
【解決手段】 安定化剤として糖類を共存させることを特徴とする、防腐剤共存下における酵素の安定化方法および安定化組成物。さらには、防腐剤としてイソチアゾリン系化合物を用いる上記安定化方法および安定化組成物。さらには、糖類の添加濃度が防腐剤に対して０．０５〜５００倍量（Ｗ／Ｗ）である上記安定化方法および安定化組成物。
【解決手段】 安定化剤として糖類を共存させることを特徴とする、防腐剤共存下における酵素の安定化方法および安定化組成物。さらには、防腐剤としてイソチアゾリン系化合物を用いる上記安定化方法および安定化組成物。さらには、糖類の添加濃度が防腐剤に対して０．０５〜５００倍量（Ｗ／Ｗ）である上記安定化方法および安定化組成物。
Description
本発明は酵素の安定化方法およびその組成物に関する。特に臨床診断に用いられる生体成分測定試薬に用いられる酵素の安定化方法およびその組成物に関する。
近年、臨床検査用試薬は液状化が主流となっている。そのため、臨床検査用試液を長期保存する場合、試液中への防腐剤の添加は不可欠である。このような目的で使用される防腐剤としては種々のものが挙げられるが、イソチアゾリン系化合物はｐＨが中性付近の溶液中に於ける防腐効果に優れ、酵素反応系への影響も少ない、等の利点を有する事から、上記した試液に添加される。しかしながら、チアゾリン系化合物は他方に於いて一部の酵素を失活させる作用を有しており、試液の保存期間も必然的に短くならざるを得ない。その為、イソチアゾリン系化合物を防腐剤として含む溶液中での酵素の効果的な安定化方法が望まれている現状にある。
本発明が解決しようとする課題は、防腐剤を含む溶液中において長期間安定な液状試薬として耐えうる安定性を有した酵素溶液を提供することにある。
本発明者らは、上記目的を達成するために種々検討した結果、イソチアゾリン系化合物と酵素の混合試液中に糖類を共存させることにより、酵素を液状状態で長期間安定に保つことを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は以下のようなものである。
（１）安定化剤として糖類を共存させることを特徴とする、防腐剤共存下における酵 素の安定化方法。
（２）防腐剤としてイソチアゾリン系化合物を用いる請求項１記載の酵素の安定化方 法。
（３）糖類の添加濃度が防腐剤に対して０．０５〜５００倍量（Ｗ／Ｗ）である請求 項１または２記載の酵素の安定化方法。
（４）安定化剤として糖類を共存させることを特徴とする、防腐剤共存下における酵 素の安定化組成物。
（５）防腐剤としてイソチアゾリン系化合物を用いた請求項４記載の酵素の安定化組 成物。
（６）糖類の添加濃度が防腐剤に対して０．０５〜５００倍量（Ｗ／Ｗ）である請求 項４または５記載の酵素の安定化組成物。
（１）安定化剤として糖類を共存させることを特徴とする、防腐剤共存下における酵 素の安定化方法。
（２）防腐剤としてイソチアゾリン系化合物を用いる請求項１記載の酵素の安定化方 法。
（３）糖類の添加濃度が防腐剤に対して０．０５〜５００倍量（Ｗ／Ｗ）である請求 項１または２記載の酵素の安定化方法。
（４）安定化剤として糖類を共存させることを特徴とする、防腐剤共存下における酵 素の安定化組成物。
（５）防腐剤としてイソチアゾリン系化合物を用いた請求項４記載の酵素の安定化組 成物。
（６）糖類の添加濃度が防腐剤に対して０．０５〜５００倍量（Ｗ／Ｗ）である請求 項４または５記載の酵素の安定化組成物。
本発明においては、防腐剤を含む溶液中において糖類を共存させることで、長期間安定な液状試薬として耐えうる安定性を有した酵素溶液を提供できる。
本発明の一実施態様は、安定化剤として糖類を共存させることを特徴とする、防腐剤共存下における酵素の安定化方法である。
本発明に用いる防腐剤は、試薬を保存している間の微生物の増殖を抑制することを目的として、試薬に添加される物質をいう。本発明における防腐剤としては特に限定されないが、中でもイソチアゾリン系防腐剤は酵素の失活が大きく効果が期待できる。イソチアゾリン系化合物としては、例えば２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン（ＭＩＴ）、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン（ＣＭＩＴ）、１，２−ベンズイソチアゾリン−３−オン（ＢＩＴ）等が挙げられる。また、一般に市販されているものとしては、混合物としてプロクリン１５０（スペルコ製、シグマアルドリッチジャパンより入手）、プロクリン３００（スペルコ製、シグマアルドリッチジャパンより入手）、アクチサイドＭＢＳ（ソー・ジャパン製）、単一製品としてアクチサイドＢ２０（Ｎ）（ソー・ジャパン製）、ＭＩＴ（ロシュ製、シグマ製）等が挙げられる。
防腐剤として抗生物質を使用する場合、微生物が比較的容易に、当該物質の膜透過性を抑制したり、当該物質を分解し無毒化する能力を獲得することができるため、耐性菌の発生を招き、実質的に試薬の防腐効果を失うことがよくあると考えられる。一方、Ｎ−メチルイソチアゾロン（N-Methylisothiazolone、略称ＭＩＴ）および／またはその誘導体などは、蛋白質のＳＨ基やアミノ基に直接作用することができるため、微生物が耐性を得ることが難しいと考えられる点でより好ましく、今後汎用されていく可能性が高い。
しかし、このような蛋白質に直接作用する防腐剤は当然、共存する酵素蛋白質にも作用するため、蛋白質の構造によっては不安定化を招く可能性がある。このように、防腐剤に対する耐性は、その防腐剤の作用機構と蛋白質の構造の両面に起因すると考えられる。
防腐剤の添加濃度は、防腐剤の種類や添加する試薬の組成などによって異なるのは当然であり、適当な添加濃度の決定は当業者が適宜実施できることである。十分な防腐能を有し診断薬用途に用いられる濃度範囲であれば特に限定されないが、例えば溶液中の下限濃度として０．０００１％、好ましくは０．００１％、更に好ましくは０．０１％である。上限濃度として１％、好ましくは０．５％、更に好ましくは０．１％である。
本発明における糖類は、単糖、二糖、オリゴ糖、環状オリゴ糖などの中から適宜選択され、特に限定されるものではない。例えばキシロース、グルコース、ガラクトース、フルクトース、シュークロース、ラクトース、トレハロース、マルトース、２−デオキシ−Ｄ−グルコース、メリビオース、リビトース、イノシトール、ズルシトール、グルシトール、グルコノ−１，５−ラクトン、Ｇ２−β−サイクロデキストリン、シュークロースモノカプレート、シュークロースモノコレート等が挙げられる。中でもシュークロースを骨格とする化合物、例えばシュークロース、ラクトシュークロース、ラフィノース、イヌロオリゴ糖類、シュークロースモノカプレート、シュークロースモノコレート等が好適に用いられる。いずれも、市販のものなどを使用することができる。
本発明における糖類の添加濃度は防腐剤に対して、０．０１倍量（Ｗ／Ｗ）以上であり、好ましい下限は０．０５倍量（Ｗ／Ｗ）、好ましい上限は５００倍量（Ｗ／Ｗ）である。
糖類の濃度は種々の公知の方法で測定することができる。一般的に用いられる糖類の測定方法として、ソモジー法に代表される還元法やアンスロン法に代表されるフルフラール発色法、ガスクロマトグラフィー法やＨＰＬＣ法に代表されるクロマト法等が挙げられる。（参考文献１：石井暢編 臨床検査技術全書 第６巻 臨床化学検査 第１版第２刷、１９８０、医学書院、参考文献２：分析化学便覧 改定五版、２００１、社団法人 日本分析化学会）
防腐剤の濃度は種々の公知の方法で測定することができる。たとえば、イソチアゾリン系化合物は、ＨＰＬＣ分析により測定することができる。図１にその一例を示す。
本発明において「安定」とは、加温処理に対しても酵素活性が維持されていることを意味し、典型的には、５0mM HEPES (pH7.5)緩衝液中に、３Ｕ／ｍＬのグリセロールキナーゼとイソチアゾリン系化合物とを共存させたとき、３５℃１４日間保存後の残存酵素活性が、調製直後と比較して、６７％以上、好ましくは８０％以上維持されていることをいう。なお、酵素活性測定法は、本願明細書記載の方法、市販品であればカタログ記載の方法、文献等に記載の方法などの中から当業者が適宜採用することができる。
本発明により安定化し得る酵素としては、通常の診断薬用途に用いられるものであれば特に限定される事はない。また、本発明により安定化されうる酵素の濃度は、通常臨床検査用試液に用いられる濃度範囲であれば特に限定されないが、本発明に好ましいものとして、イソチアゾリン系化合物により失活を受ける酵素が挙げられる。具体的には、グリセロールキナーゼ、ザルコシンオキシダーゼ、クレアチンアミジノヒドロラーゼ等、が挙げられる。酵素は、いずれも、市販のものなどを使用することができる。
本発明の方法により安定化し得る溶液のｐＨとしては、酵素を不安定化する範囲でなければ特に限定されないが、好ましくは５．０〜９．０で選択される。このｐＨ範囲を維持する為には、適当な緩衝液が添加されるが、このような目的に添加される緩衝液としては、例えばリン酸緩衝液、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン緩衝液、グッド緩衝液などが挙げられる。なかでも、リン酸緩衝液、トリス緩衝液は濃度、温度によってｐＨが変動しやすいが、安価であるという利点がある。一方、ＧＯＯＤ緩衝液にはＭＥＳ、Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ、ＡＣＥＳ、ＢＥＳ、ＭＯＰＳ、ＰＩＰＥＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＥＳ、Ｔｒｉｃｉｎｅ、Ｂｉｃｉｎｅ、ＰＯＰＳＯ、ＴＡＰＳ、ＣＨＥＳ、ＣＡＰＳなどが例示される。緩衝液は、いずれも、市販のものなどを使用することができる。
また、酵素溶液中には診断用試薬として必要な他の試薬が含まれていてもよい。例えば中性脂肪測定試薬としては、一般にグリセロールキナーゼの他、リパーゼ、グリセロリン酸オキシダーゼ、ＡＴＰ、マグネシウム、ペルオキシダーゼ、色源体が含有される。マグネシウム測定試薬としては、一般にグリセロールキナーゼの他、グリセロリン酸オキシダーゼ、グリセリン、ＡＴＰ、色源体が含有される。また、クレアチニン測定試薬としては、一般にザルコシンオキシダーゼ、クレアチンアミジノヒドロラーゼの他、クレアチニンアミドヒドロラーゼ、ペルオキシダーゼ、色源体などが含有される。また、クレアチン測定試薬としては、一般にザルコシンオキシダーゼ、クレアチンアミジノヒドロラーゼの他、ペルオキシダーゼ、色源体などが含有される。これらの試薬類は、いずれも、市販のものなどを使用することができる。
グリセロールキナーゼの活性測定は以下の測定条件で行うのが好ましい。
〈測定試薬〉
（１）基質液
０．３Ｍ グリセロール溶液
（２）発色液
１００ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液、ｐＨ７．９
２ｍＭ ＡＴＰ
１ｍＭ 塩化マグネシウム
０．１ｇ／Ｌ フェノール
０．２ｇ／Ｌ ４-アミノアンチピリン
８ＫＵ／Ｌ グリセロリン酸オキシダーゼ
５．５ＫＵ／Ｌ ペルオキシダーゼ
〈測定条件〉
（１）発色液３ｍＬをキュベット（ｄ＝１ｃｍ）に採り、酵素液０．１ｍＬを加え、 ゆるやかに混和後、３７℃で約５分間予備加温する。
（２）グリセロール溶液０．０５ｍＬを添加し、ゆるやかに混和後、水を対照に３７ ℃に制御された分光光度計で５００ｎｍの吸光度変化を３〜４分間記録し、その初期直 線部分から１分間当たりの吸光度を求める（ΔＯＤｔｅｓｔ）。
（３）盲検は発色液３ｍＬに酵素溶液の代わりに酵素希釈液（２０ｍＭ Ｋリン酸緩 衝液、ｐＨ７．５）を０．１ｍＬ加え、上記同様に操作を行なって、１分間当たりの吸 光度変化を求める（ΔＯＤｂｌａｎｋ）。
〈測定試薬〉
（１）基質液
０．３Ｍ グリセロール溶液
（２）発色液
１００ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液、ｐＨ７．９
２ｍＭ ＡＴＰ
１ｍＭ 塩化マグネシウム
０．１ｇ／Ｌ フェノール
０．２ｇ／Ｌ ４-アミノアンチピリン
８ＫＵ／Ｌ グリセロリン酸オキシダーゼ
５．５ＫＵ／Ｌ ペルオキシダーゼ
〈測定条件〉
（１）発色液３ｍＬをキュベット（ｄ＝１ｃｍ）に採り、酵素液０．１ｍＬを加え、 ゆるやかに混和後、３７℃で約５分間予備加温する。
（２）グリセロール溶液０．０５ｍＬを添加し、ゆるやかに混和後、水を対照に３７ ℃に制御された分光光度計で５００ｎｍの吸光度変化を３〜４分間記録し、その初期直 線部分から１分間当たりの吸光度を求める（ΔＯＤｔｅｓｔ）。
（３）盲検は発色液３ｍＬに酵素溶液の代わりに酵素希釈液（２０ｍＭ Ｋリン酸緩 衝液、ｐＨ７．５）を０．１ｍＬ加え、上記同様に操作を行なって、１分間当たりの吸 光度変化を求める（ΔＯＤｂｌａｎｋ）。
以下、本発明を実施例により具体的に説明する。なお、本発明は実施例により特に限定されるものではない。
（実施例１）
グリセロールキナーゼ（東洋紡績製ＧＹＫ−３１１）３Ｕ／ｍＬ、各種糖類５ｇ／Ｌ含有し、防腐剤としてプロクリン３００（スペルコ製）を０．３ｍＬ／Ｌとなるように調製した下記試薬にて３５℃で１４日間保存し、残存活性（溶解直後の活性値に対する保存後の活性値の割合）を検討した。
（実施例１）
グリセロールキナーゼ（東洋紡績製ＧＹＫ−３１１）３Ｕ／ｍＬ、各種糖類５ｇ／Ｌ含有し、防腐剤としてプロクリン３００（スペルコ製）を０．３ｍＬ／Ｌとなるように調製した下記試薬にて３５℃で１４日間保存し、残存活性（溶解直後の活性値に対する保存後の活性値の割合）を検討した。
（試薬の調製）
下記組成からなる試薬をそれぞれ調製した。
ＨＥＰＥＳ−ＮａＯＨ ５０ｍＭ ｐＨ７．５
グリセロールキナーゼ（東洋紡社製ＧＹＫ−３１１） ３Ｕ／ｍＬ
プロクリン３００ ０．３ｍＬ／Ｌ
各種糖類（名称は表に記載） ５ｇ／Ｌ
下記組成からなる試薬をそれぞれ調製した。
ＨＥＰＥＳ−ＮａＯＨ ５０ｍＭ ｐＨ７．５
グリセロールキナーゼ（東洋紡社製ＧＹＫ−３１１） ３Ｕ／ｍＬ
プロクリン３００ ０．３ｍＬ／Ｌ
各種糖類（名称は表に記載） ５ｇ／Ｌ
結果 表１に示す。比較例では６６％まで活性が低下するのに対し、実施例では保存後も良好な安定性を示す。
（実施例２）
グリセロールキナーゼ（東洋紡績製ＧＹＫ−３１１）３Ｕ／ｍＬ、プロクリン３００（ロシュ製）０．３ｍＬ／Ｌ含有試薬に、シュークロース０〜５ｇ／Ｌとなるように添加濃度を変えて調製した試薬にて３５℃で１４日間保存し、残存活性（溶解直後の活性値に対する保存後の活性値の割合）を検討した。
グリセロールキナーゼ（東洋紡績製ＧＹＫ−３１１）３Ｕ／ｍＬ、プロクリン３００（ロシュ製）０．３ｍＬ／Ｌ含有試薬に、シュークロース０〜５ｇ／Ｌとなるように添加濃度を変えて調製した試薬にて３５℃で１４日間保存し、残存活性（溶解直後の活性値に対する保存後の活性値の割合）を検討した。
結果 表２に示す。０．０１％で安定化効果を認め、０．３％以上では更に良好な安定性を示す。
（実施例３）
グリセロールキナーゼ（東洋紡製ＧＹＫ−３１１）１２Ｕ／ｍＬ、プロクリン３００（スペルコ製）０．３ｍＬ／Ｌ、シュークロース５ｇ／Ｌ含有試薬を９℃にて６週間保存し、残存活性（溶解直後の活性値に対する保存後の活性値の割合）を検討した。
グリセロールキナーゼ（東洋紡製ＧＹＫ−３１１）１２Ｕ／ｍＬ、プロクリン３００（スペルコ製）０．３ｍＬ／Ｌ、シュークロース５ｇ／Ｌ含有試薬を９℃にて６週間保存し、残存活性（溶解直後の活性値に対する保存後の活性値の割合）を検討した。
結果 表３に示す。比較例では６５％まで活性が低下するのに対し、実施例では低温保存下に於いても良好な安定性を示す。
本発明の防腐剤共存下における酵素の安定化方法は、防腐剤を含む溶液中において長期間安定な液状試薬として耐えうる等の特性を持つため、臨床検査分野で用いられる診断薬として優れており、産業界に寄与することが大である。
Claims (6)
- 安定化剤として糖類を共存させることを特徴とする、防腐剤共存下における酵素の安定化方法。
- 防腐剤としてイソチアゾリン系化合物を用いる請求項１記載の酵素の安定化方法。
- 糖類の添加濃度が防腐剤に対して０．０５〜５００倍量（Ｗ／Ｗ）である請求項１または２記載の酵素の安定化方法。
- 安定化剤として糖類を共存させることを特徴とする、防腐剤共存下における酵素の安定化組成物。
- 防腐剤としてイソチアゾリン系化合物を用いた請求項４記載の酵素の安定化組成物。
- 糖類の添加濃度が防腐剤に対して０．０５〜５００倍量（Ｗ／Ｗ）である請求項４または５記載の酵素の安定化組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2003345233A JP4565311B2 (ja) | 2002-10-03 | 2003-10-03 | 酵素の安定化方法および組成物 |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002291491 | 2002-10-03 | ||
| JP2003345233A JP4565311B2 (ja) | 2002-10-03 | 2003-10-03 | 酵素の安定化方法および組成物 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2009290521A Division JP2010063467A (ja) | 2002-10-03 | 2009-12-22 | 酵素の安定化方法および組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2004141162A true JP2004141162A (ja) | 2004-05-20 |
| JP4565311B2 JP4565311B2 (ja) | 2010-10-20 |
Family
ID=32473425
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2003345233A Expired - Fee Related JP4565311B2 (ja) | 2002-10-03 | 2003-10-03 | 酵素の安定化方法および組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4565311B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007055284A1 (ja) | 2005-11-11 | 2007-05-18 | Toyo Boseki Kabushiki Kaisha | 生体分子の安定化方法および組成物 |
| WO2011086293A1 (fr) | 2009-12-22 | 2011-07-21 | Institut National De La Recherche Agronomique - Inra | Sulfatase modifiant selectivement les glycosaminoglycanes |
Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62174299A (ja) * | 1985-12-06 | 1987-07-31 | ユニリ−バ−・ナ−ムロ−ゼ・ベンノ−トシヤ−プ | 酵素液体洗剤組成物 |
| JPH0466087A (ja) * | 1990-07-05 | 1992-03-02 | Sunstar Inc | 安定化されたアスコルビン酸酸化酵素組成物 |
| JPH0856694A (ja) * | 1994-08-24 | 1996-03-05 | Toyobo Co Ltd | 生体試料中の特定成分を測定する液状試薬 |
| JPH08187095A (ja) * | 1995-01-10 | 1996-07-23 | Toyobo Co Ltd | コレステロールオキシダーゼの安定化法 |
| JPH0952845A (ja) * | 1995-08-10 | 1997-02-25 | Amano Pharmaceut Co Ltd | 保存安定性の高められた酵素含有内服液剤 |
| JPH10179195A (ja) * | 1996-12-26 | 1998-07-07 | Katayama Kagaku Kogyo Kk | クレアチンキナーゼ活性測定用液状試薬 |
| JPH10507750A (ja) * | 1994-10-24 | 1998-07-28 | チロン ダイアグノスティクス コーポレーション | 診療用診断システムにおいて促進された性能を有する試薬 |
| JPH1169973A (ja) * | 1997-08-29 | 1999-03-16 | Kao Corp | 酵素の安定化方法 |
| WO1999055850A1 (fr) * | 1998-04-24 | 1999-11-04 | International Reagents Corporation | Methode de stabilisation d'enzymes et compositions enzymatiques |
| JP2000508530A (ja) * | 1996-04-03 | 2000-07-11 | コレティカ | スーパーオキシドジスムターゼ複合体製品 |
| JP2002233362A (ja) * | 2001-02-05 | 2002-08-20 | Lion Corp | ラッカーゼ活性の安定化方法および安定化されたラッカーゼ組成物 |
-
2003
- 2003-10-03 JP JP2003345233A patent/JP4565311B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62174299A (ja) * | 1985-12-06 | 1987-07-31 | ユニリ−バ−・ナ−ムロ−ゼ・ベンノ−トシヤ−プ | 酵素液体洗剤組成物 |
| JPH0466087A (ja) * | 1990-07-05 | 1992-03-02 | Sunstar Inc | 安定化されたアスコルビン酸酸化酵素組成物 |
| JPH0856694A (ja) * | 1994-08-24 | 1996-03-05 | Toyobo Co Ltd | 生体試料中の特定成分を測定する液状試薬 |
| JPH10507750A (ja) * | 1994-10-24 | 1998-07-28 | チロン ダイアグノスティクス コーポレーション | 診療用診断システムにおいて促進された性能を有する試薬 |
| JPH08187095A (ja) * | 1995-01-10 | 1996-07-23 | Toyobo Co Ltd | コレステロールオキシダーゼの安定化法 |
| JPH0952845A (ja) * | 1995-08-10 | 1997-02-25 | Amano Pharmaceut Co Ltd | 保存安定性の高められた酵素含有内服液剤 |
| JP2000508530A (ja) * | 1996-04-03 | 2000-07-11 | コレティカ | スーパーオキシドジスムターゼ複合体製品 |
| JPH10179195A (ja) * | 1996-12-26 | 1998-07-07 | Katayama Kagaku Kogyo Kk | クレアチンキナーゼ活性測定用液状試薬 |
| JPH1169973A (ja) * | 1997-08-29 | 1999-03-16 | Kao Corp | 酵素の安定化方法 |
| WO1999055850A1 (fr) * | 1998-04-24 | 1999-11-04 | International Reagents Corporation | Methode de stabilisation d'enzymes et compositions enzymatiques |
| JP2002233362A (ja) * | 2001-02-05 | 2002-08-20 | Lion Corp | ラッカーゼ活性の安定化方法および安定化されたラッカーゼ組成物 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007055284A1 (ja) | 2005-11-11 | 2007-05-18 | Toyo Boseki Kabushiki Kaisha | 生体分子の安定化方法および組成物 |
| WO2011086293A1 (fr) | 2009-12-22 | 2011-07-21 | Institut National De La Recherche Agronomique - Inra | Sulfatase modifiant selectivement les glycosaminoglycanes |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4565311B2 (ja) | 2010-10-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3873222B2 (ja) | 臨床診断システムにおいて促進された性能を有する試薬 | |
| Vanderlinde | Measurement of total lactate dehydrogenase activity | |
| Stancel et al. | Reversible dissociation of yeast glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase by adenosine triphosphate | |
| US20080173064A1 (en) | Creatinine Sensor Calibration | |
| JP2539225B2 (ja) | グルコ−ス定量用安定化液体酵素組成物、それを用いる試薬キット及び定量方法 | |
| EP0215170A1 (en) | Single color reading method for determining fructosamine | |
| Dror et al. | Glucose 6-phosphate dehydrogenase assay in liver and blood | |
| JP3619865B2 (ja) | 液体の安定なチオール活性化剤 | |
| JP4565311B2 (ja) | 酵素の安定化方法および組成物 | |
| CA2045704A1 (en) | Stable aqueous nadh reagent and kit | |
| JP5216968B2 (ja) | テトラゾリウム化合物を色原体として用いる試料中の測定対象物質の測定方法及び測定試薬、非特異的発色を抑制する方法、並びに非特異的発色抑制剤 | |
| JP4022799B2 (ja) | 電解質測定用試薬組成物 | |
| JP2010063467A (ja) | 酵素の安定化方法および組成物 | |
| JP3310295B2 (ja) | グルコース測定用試薬 | |
| JP6891368B2 (ja) | アミラーゼ活性測定試薬及びアミラーゼ活性測定方法 | |
| KR100319653B1 (ko) | 크레아틴키나제측정용시약 | |
| JP4013108B2 (ja) | リパーゼの安定化方法 | |
| EP0430991B1 (en) | Reagent for use in ld-1 assay | |
| JP3541677B2 (ja) | 直接型ビリルビンの測定方法および測定用試薬 | |
| US6013527A (en) | Preservative mixture for diagnostic test liquids | |
| JPH0195779A (ja) | 安定な酵素組成物および酵素組成物の安定化方法 | |
| JP7521846B1 (ja) | 比色分析用高吸水性ポリマー及びそれを用いた分析方法 | |
| JP4544598B2 (ja) | 液状試薬および保存方法 | |
| JP4288559B2 (ja) | アスコルビン酸オキシダーゼの安定化方法および安定化組成物 | |
| US5304469A (en) | Propylene glycol as an activator for phosphoenolpyruvate carboxylase |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060907 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090618 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090811 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20091001 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20091222 |
|
| A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20100112 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100311 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100426 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100610 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100617 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100708 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100721 |
|
| R151 | Written notification of patent or utility model registration |
Ref document number: 4565311 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R151 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130813 Year of fee payment: 3 |
|
| S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
| S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |