JP2003529538A - パラミロンを含有する凍結乾燥した薬剤、その製法と使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、0.1〜100重量％の凍結乾燥したパラミロンを含有することを特徴とする薬剤に関する。また本発明はその製造及び使用にも関する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 本発明は、局所投与、非経口投与又は経口投与用の、パラミロンを含有する凍
結乾燥した薬剤、その薬剤の製造方法、並びにその薬剤の、生体用マトリックス
、特にプラスター、栄養補助剤としての使用、そして化粧成分又は医薬成分の投
与のための使用に関する。

【０００２】 例えばUS-A 5,158,772は、皮膚に用いる局所用の化粧組成物及び医薬組成物で
あって、担体として、Cellulomonas flavigena又はその遺伝的なクローンの貯蔵
炭水化物を構成するβ-1,3-グルカン多糖ポリマーを含有する前記組成物が開示
している。IR及びNMR分析データから、このβ-1,3-グルカンは、カードラン多糖
の亜群に属するものであるが、重合度200〜400を有するものとは異なり、基準か
ら外れた約550の値を有する。

【０００３】 EP-B 417,254(US-A 5,385,832と同じ)は、ユーグレナ細胞から得たβ-1,3-グ
ルカンの製造と更なる加工処理を開示している。その場合、培養後にその培養上
清から当該細胞を分離し、それを、有機溶媒を用いて破壊及び抽出し、その後細
胞塊を分離し、そして生成したβ-1,3-グルカンを洗浄する。このβ-1,3-グルカ
ンは、医薬品、化粧品又は食品中で用いられるだろう。この方法とは異なり、本
発明の製造方法では、毒性の有機抽出、例えばメタノール及びクロロホルム抽出
を行うことがなく、数日後に既に、通常99〜99.5重量％の純度で、β-1,3-グル
カンのパラミロンを得る。この純度は、溶媒抽出によって得た当該グルカンの純
度、すなわちほんの95〜97％を十分に超えている。以下に記載の通り、１つの態
様例の繰り返しからも、この細胞増殖が、必須アミノ酸を欠失する場合、技術上
実際的な培養方法にとって全く不適当であることが示されている。

【０００４】 ドイツ特許DE-C 43 28 329は、10〜80重量％の天然多糖と、20〜90重量％の修
飾多糖とを含んで成る、局所投与用の、凍結乾燥した生体用マトリクスを開示し
ている。

【０００５】 EP-A-0,317,079は、成分物質が、実際上、例えば圧縮された形ではあるが、カ
プセル内に置かれた剤形、あるいはそれらがプレスされた錠剤形をとる薬剤を開
示している。そのカプセル又は圧縮した錠剤は、摂取された後に胃内で溶解し、
その中の成分は、膨潤した塊を形成する。それは胃内に存在する液体と結合して
いて、そして消化管を経由して分解又は除去される。この薬剤は、カロリーを含
まないが、胃内に存在する膨潤塊のために満腹感を与えるので、減量を目的とし
て多大な労力を払うことなく、食物摂取を止める、又は減らすことができる。こ
の膨潤塊は本質的に結合することが無いので、比較的に早く胃から腸管内に通過
し、その結果、比較的に短時間のみ、得られた満腹感が持続する。

【０００６】 DE 29 723 220は、少なくとも１つの、圧縮された、非毒性の担体を含有する
経口投与剤を開示している。この担体は、スポンジ様の構造と、少なくとも部分
的にはコラーゲン構造とを有し、胃内で膨脹した後に消化管を介して、少なくと
も部分的に分解される、又は分解され得る、あるいは除去される、又は除去され
得るものである。

【０００７】 EP-A 0,202,159は、胃内で溶解する少なくとも１つのポリマーと、胃内で溶解
しない少なくとも１つのポリマーとから成る手段を開示している。この不溶性ポ
リマーは、特に不溶性型のセルロースから選択される。

【０００８】 EP-A 0,471,217（及び部分的には、優先権の基礎である、対応するDE-A 40 25
917）は、胃内で溶解して、その内容物を放出するケーシングと組み合わせた経
口投与剤を開示している。このケーシングには、放出されるとその容量が増加す
る非毒性の低カロリー物質が充填されていて、この物質は消化管内で分解又は除
去されうるもので、圧縮された形でケーシング内に置かれ、ケーシングによって
その形に維持される。この低カロリー物質は、好ましくはセルローススポンジ又
はポリウレタン泡である。

【０００９】 しかしこの方法は、実際的には実現可能ではない。なぜなら圧縮された、膨脹
可能な物質としてのポリウレタン泡の使用は、ドイツにおいても、あるいは添加
剤に関する一般的な指令89/107/EEC又は欧州共同体内のその他の添加剤に関する
指令に従ういくつかのその他の国においても、認可されていないからである。更
に、次の出願において初めて明記されたスポンジセルロース又は蜂小窩状セルロ
ースは、少なくとも食品ガイドラインによって認可されていない。このガイドラ
インは、微晶質セルロース及び粉末セルロース、メチルセルロース、ヒドロキシ
プロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルエチルセル
ロース及びナトリウムカルボキシメチルセルロースのみを認めている。また前記
特許出願に記載した薬剤は、胃内で溶解し、その内容物を放出するケーシング、
すなわち硬ゼラチンカプセルが必須成分の一つであるという点で、技術上複雑で
ある。

【００１０】 本発明の目的は、局所、非経口又は経口投与のための薬剤を作製することであ
る。この目的を、凍結乾燥した、パラミロンを含有する薬剤を用いることによっ
て達成する。 従って、本発明は、0.1〜100重量％、好ましくは３〜100重量％、特に５〜100
重量％の凍結乾燥したパラミロンを含有する薬剤に関する。

【００１１】 前記の凍結乾燥したパラミロンを既知の方法で調製する。E. Ziegler, "Die n
aturlichen und kunstlichen Aromen" Heidelberg, Germany, 1982, Chapter 4.
3 "Gefriertrocken"及びこの文献に引用されている文献、並びにDE 43 28 329を
参照すること。

【００１２】 本発明でパラミロンとは、第一に、製造中に最初に形成される種類である顆粒
型であり、そして1.2 g/mL〜1.7 g/mLの密度を有する水不溶性のパラミロンを指
す。更にこれは、前記の顆粒パラミロンから、例えば水性環境中でアルカリ処理
により得られる膨潤された型のパラミロンを指す。このパラミロンは、94〜99.9
重量％の水を含有し、すなわち0.1〜6 gのパラミロンと94〜99.9 gの水とを含有
する。この様にして得られたゲルは、低粘度からほぼ固体の程度の範囲の粘稠性
を示し、もはや流動性を示さない。

【００１３】 更にパラミロンとは、溶解された又は溶解性を有するパラミロン又はその誘導
体、例えばエーテル又はエステル、例えばカルボキシメチルパラミロン又はパラ
ミロン硫酸を指す。これらは、膨潤されたパラミロンから、加水分解、酵素的分
解、物理的処置、又は化学反応により得られる。20℃で、この生成物は、30〜90
g/100 mL水、好ましくは50〜75 g/mL水の水溶性を示す。

【００１４】 最後にパラミロンとは、溶解されたパラミロンから既知の方法で得られ、その
残存含水量が１〜15重量％である乾燥した型のパラミロンを指す（空気乾燥した
パラミロンを、乾燥箱中で100℃で３時間インキュベーションし、そしてその差
を計量した）。

【００１５】 前記パラミロンを、培地中でユーグレナ細胞の培養；その培地からユーグレナ
細胞の分離；そのユーグレナ細胞からパラミロンの単離；そのパラミロンの精製
；場合により修飾された多糖と、場合により生物学的に活性な成分との追加；そ
して冷却と、その後の凍結乾燥によって得る。

【００１６】 本発明では、全ての種類のユーグレナ細胞、例えばEuglena gracilis、Euglen
a intermedia、Euglena piride、及びその他のユーグレナ類、例えばAstaia lon
gaを用いることができる。好ましくはEuglena gracilisを用いる。 本発明では、ユーグレナ細胞からパラミロンを、有機溶媒を添加せずに、しか
し少なくとも１種の界面活性剤を添加して単離することが好ましい。あるいは、
溶媒も界面活性剤も無しに単離することもできる。

【００１７】 前記方法では、EP-B 417,254に詳述された通り、ユーグレナ綱の全ての藻類を
用いることができるが、特に好ましくは、その藻類としてEuglena gracilis細胞
を用いる。 好ましくは、供給バッチ法でユーグレナ細胞を培養することによって、本発明
の薬剤のために用いる担体を得る。 別の好ましい態様では、後に担体として用いるパラミロンを、大部分が生物分
解される種類の非イオン性又は陰イオン性の界面活性剤を用いて、ユーグレナ細
胞から単離する。

【００１８】 陰イオン性界面活性剤の例はスルホネートであり、例えばアルキルベンゼンス
ルホネート、アルカンスルホネート、αオレインスルホネート、スルホ脂肪酸エ
ステル、スルホコハク酸エステル、スルホスクシナメート、アシルオキシアルカ
ンスルホネート、アシルアミノアルキルスルホネート、スルフェート、カルボキ
シレート、アルキルエーテルスルフェート、アルキルアリールエーテルスルホネ
ート、及びアルキルエーテルカルボキシレートである。

【００１９】 非イオン性界面活性剤の例は、ポリグリコールエーテル、例えばアルキルポリ
グリコールエーテル、アルキルアリールポリグリコールエーテル、アシルアミド
ポリグリコールエーテル、アルキルアミンポリグリコールエーテル；エチレンオ
キサイド−プロピレンオキサイド付加物、例えばアルキルエチレンオキサイド−
プロピレンオキサイド付加物、ポリプロピレンオキサイド−ポリエチレンオキサ
イド付加物、三官能価エチレンオキサイド−プロピレンオキサイド付加物、四官
能価エチレンオキサイド−プロピレンオキサイド付加物；ポリオールエステル、
例えば糖エステル、例えばアルキルポリグリコシド、ポリオールポリグリコール
エーテル、脂肪酸アルカノールアミド、脂肪酸モノエタノールアミド、脂肪酸ジ
エタノールアミド及びアミンオキサイドである。

【００２０】 １つの態様として、US-A5,385,832に、窒素源として1.9 g/L超の濃度で硫酸ア
ンモニウムを用いた培地が記載されている。これは、600 mg/L超のアンモニウム
濃度に相当し、ユーグレナの増殖及びパラミロンの合成の双方に重大な影響を及
ぼす。この培地は、本発明で示した通り、その中のいくつかが必須であるアミノ
酸を欠失している。そのアミノ酸は、アスパルギン酸、グルタミン酸及びグリシ
ンである。これらのアミノ酸の１つが欠失した場合、ユーグレナの増殖及びパラ
ミロンの合成の双方が抑制される。

【００２１】 更に、アンモニウムによるストレス下では、ユーグレナは、形成されたパラミ
ロンを再び分解する現象が知られている。このことは、S. Sumiida, Plant and
Cell Physiology 28 (8), 1987, page 1587、特にその図１及び３において既に
証明されている。従って本発明では、パラミロン生産のための培地中に、硫酸ア
ンモニウムは存在しない。本発明では、発酵の最初の部分的な処置過程において
、100〜250 mg/mLの濃度のアンモニウムが存在するが、このほとんどは、アミノ
酸の分解及び添加した硫酸アンモニウム鉄(II)に由来する。

【００２２】 本発明で用いる培地の組成を以下に示す。 ビタミンB₁（チアミン） 0.3mg〜1.0mg ビタミンB₁₂ 0.01mg〜0.1mg KH₂PO₄ 0.2g/L〜0.6g/L MgSO₄ ×7H₂O 0.05g/L〜0.3g/L Fe(SO₄)₂(NH₄)₂×6H₂O 10mg/L〜30mg/L ZnSO₄ ×7H₂O 5mg/L〜20mg/L MnSO₄ ×H₂O 2mg/L〜10mg/L (NH₄)₆Mo₇O₂₄×4H₂O 0.5mg/L〜5mg/L CoSO₄ ×7H₂O 0.1mg/L〜0.5mg/L CuSo₄ ×5H₂O 0.3mg/L〜1.0mg/L H₃BO₃ 0.1mg/L〜0.5mg/L NaNO₃ ×4H₂0 0.1mg/L〜1mg/L MgCO₃ 0.1g/L〜0.8g/L グルコース 5g/L〜15g/L 尿素 0.1g/L〜0.6g/L L-グルタミン酸 4g/L〜15g/L D, L- アスパラギン酸 1g/L〜5g/L グリシン 2g/L〜6g/L D, L- リンゴ酸 3g/L〜6g/L コハク酸ナトリウム×6H₂O 0.05g/L〜0.5g/L CaCO₃ 0.05g/L〜0.5g/L

【００２３】 下記の増殖実験では、前記培地を培地(C)とする。 図１〜３は、下記の種々の培地中で細胞培養した場合における、Euglena grac
ilisの細胞増殖及びそのパラミロン含量の比較を示す。 １）パラミロン生産のために本発明で用いた培地(C)； ２）米国特許US-A 5,385,832 (及びEP-B 417,254)の実施例に記載された培地(比
較例：米国特許の培地)； ３）パラミロン生産のために本発明で用いた培地(C)において、アンモニウム濃
度を600〜700 mg/Lに増加するために、硫酸アンモニウムを予め添加したもの(C
＋アンモニウム)； ４）パラミロン生産のために本発明で用いた培地(C)において、アミノ酸(AA)を
欠失したもの(C, AA無し)。

【００２４】 実施例１から明らかに、前記の米国特許培地中の細胞は、96時間後までに2.5x
10⁶細胞/mLを超えないことが分かる。このことは、アミノ酸欠失培地でも当ては
まる。米国特許培地中の細胞の多くは空胞を有し、これは、アンモニウムの欠失
、及びアンモニウムの消費過程の徴候である。これらの細胞はパラミロンの顆粒
をほとんど含有しない。コントロール培養では、約14x10⁶細胞/mLに到達する。
従って下記実験における培養では、栄養成分の補充をしなかった。しかしコント
ロール培地に更にアンモニウムを添加すると、細胞増殖が明確な増加した。しか
しこのことは、エネルギーが主に細胞分裂のために消費され、図２から明らかな
通り、パラミロン合成のために用いられないことを意味する。

【００２５】 図２によると、高濃度のアンモニウムのせいで、72時間後に細胞がパラミロン
を分解する。72時間後でも、アンモニウムを補充した場合には、合計でほんの6
mgパラミロン/mL培地のみが検出されたが、コントロール培養では、約15 mgパラ
ミロン/mL培地が認められた。また本発明のコントロール培養の場合、パラミロ
ンの分解は72時間後に始まる。ただしこの分解は、炭素源を使い尽くしたことに
よる。しかし72時間後にグルコース及びアミノ酸を補充すれば、細胞数及びパラ
ミロン含量は再び増加するだろう。

【００２６】 しかしこのことは、アンモニウム中での培養の場合には当てはまらない。この
場合、72時間後でも、多量のグルコース(7 〜 8 g/L)が培地中に依然として存在
する。アミノ酸無しでのコントロール培養、そして米国特許による培養では、図
１から明らかな通り、パラミロンはほとんど合成されない。更に指摘すべき点は
、米国特許による培地中で培養した細胞は、栄養成分の補給にも関わらず、約10
〜12日後に死亡した。

【００２７】 図３から明らかに、米国特許による培地及びアンモニウムを補充したコントロ
ール培地中で、細胞数に対するパラミロン含量は、発酵過程において減少するこ
とが分かる。コントロール培地及びアミノ酸無しのコントロール培地では、細胞
あたりパラミロン含量は上下するが、これは細胞分裂のためである。細胞分裂毎
に、当然にパラミロン顆粒は娘細胞間に分配され、その結果、細胞あたりのパラ
ミロン含量は一時的に下がる。しかしアミノ酸無しの培養では、コントロール培
養に比べて顕著により少ない量のパラミロンが合成される。

【００２８】 これらの図の評価から、高アンモニウム濃度での培養では、パラミロンは分解
されることが示される。これは、本発明では望ましくない。生命にとって必要な
アミノ酸の欠損のせいで、従来技術の米国特許による培養では、細胞増殖はほと
んど認められない。しかしコントロール培養では、細胞増殖及びパラミロン含量
は、培養の最初の72時間目に、相互に最適な比率に成る。これらの細胞はパラミ
ロンにより十分に満たされている。このことは、容易な単離を可能にするだけで
なく、特に、単離したパラミロンのより高い純度を保証する。なぜならタンパク
質及び脂質の割合が、パラミロンの量に対してより低いからである。

【００２９】 例えば噴霧式乾燥などのその他の乾燥方法とは異なり、凍結乾燥により、急速
に再水和化することができるスポンジ様物質を形成することができ、これは、都
合の良い特性を示し、そして適当な原材料の選択により、寸法的に安定な立体構
造を有する。

【００３０】 本発明の好ましい態様では、当該薬剤は、担体としての１〜99重量％、好まし
くは５〜95重量％のパラミロンと、１〜99重量％、好ましくは５〜95重量％の、
天然の多糖及び／又は修飾された多糖及び／又はコラーゲンの中から選択される
別の担体とを含んで成る。 好ましい別の態様では、当該薬剤は、担体としての１〜99重量％、好ましくは
５〜95重量％のパラミロンと、１〜99重量％、好ましくは５〜95重量％の別の担
体、すなわちコラーゲンを含んで成る。

【００３１】局所投与用薬剤 この様に、本発明は、少なくとも１つの凍結乾燥した、パラミロンを含有する
担体を含んで成る局所投与用薬剤に関する。 前記の天然多糖は、好ましくは、ペクチン、アルギナート、カラゲーニン、寒
天、及びイナゴマメ種子粉の中から選択される。

【００３２】 前記の担体成分として用いることもできる修飾された多糖の例は、セルロース
誘導体、例えばセルロースエーテルである。フィルム形成性結合剤、例えばカル
ボキシメチルセルロース又はその誘導体が好ましい。カルボキシメチルセルロー
スを、他のセルロースエーテル、ポリエステル又はポリビニルアルコールと混合
することが有益であることがある。

【００３３】 本発明で担体成分として用いる多糖を、植物由来のタンパク質と混合すること
が有益であることがある。この例は、ダイズのタンパク質又は穀物のタンパク質
である。更に、グリコサミノグリカン、例えばヒアルロン酸、その誘導体、及び
コンドロイチン硫酸から成る群から選択される多糖を追加的に用いることができ
る。

【００３４】 前記の天然多糖又は修飾された多糖に加えて、本発明の薬剤は、安定性の向上
のために繊維、有益には紡糸を含有してよく、そして生物学的に活性な成分、特
に化粧上又は医薬上活性な成分を含有してよい。 本発明の別の好ましい態様では、当該薬剤は、ミセル形成性物質、例えばイソ
パラフィンを含み、その平均合計量は、典型的には、４〜30重量％、特には５〜
20重量％である。

【００３５】 本発明で担体成分として用いる多糖は、好ましくは植物由来のものであり、機
能の点から、保護コロイド性という特徴を有する。修飾された多糖の例は、全て
の皮膜形成性結合剤であり、これは、一方で天然多糖に対して特別な親和性を有
し、他方で任意に用いられる紡糸に対して特別な親和性を有する。カルボキシセ
ルロースの利点は、可逆的な水溶性産物であり、非毒性であり、そして国際的に
化粧品のベース材及び補助剤（結合剤及び増粘剤、保護コロイド）として容認さ
れていることである。またカルボキシメチルセルロースは、利点として、他のセ
ルロースエーテルと混合することができ、従って種々の等級の、凍結乾燥した生
体用マトリックスを製造することが可能である。

【００３６】 基本的には、本発明の局所剤において、任意の天然繊維、修飾天然繊維又は合
成繊維、例えば分散、膨潤したコラーゲン繊維を用いてよい。しかし紡糸が好ま
しい。紡糸の例は、セルロースエステル繊維、ポリエステル繊維、ポリアミン繊
維、ポリビニルアルコール繊維、ウール繊維、綿繊維、絹繊維及びレーヨン繊維
であり、特にレーヨン繊維が好ましい。有益には、この紡糸は、３〜30mmの長さ
、そして１〜６dtex (1dtex=7.85x10^-3ρd²;ρ=密度g/cm³, d=直径μm)の力価を
有する。

【００３７】 好ましい態様では、パラミロンを含有する凍結乾燥した薬剤は、３〜30重量％
、特に３〜15重量％の紡糸を含有する。 レーヨン繊維は、普通に入手できる繊維の中で最も親水性が高く、従って可溶
性生成物を作製するために最も適するので、その使用が好ましい。担体中の他の
好ましい成分と同様に、本剤中のレーヨン繊維も、非毒性の修飾された多糖であ
る。そのために、レーヨン繊維は、他の成分に対して非常に高い親和性を有し、
従ってその紡糸は、少量で担体の安定化に寄与する。レーヨンは、その使用が好
ましく、化粧品及び医薬品への適用が容認されている。

【００３８】 本発明の薬剤において担体物質として使用される上記の成分は、それ自体が皮
膚保湿効果を有し、従って、身体ケア用の化粧品での使用に特に良く適している
。それらはまた、皮膚に活性な物質のための担体物質としても使用でき、当該多
糖の皮膚保湿効果のために、その活性物質は、所望の形で角質層のみへ浸透でき
、又はその浸透が促進される。

【００３９】 化粧上活性な物質の例は多数あり、例えばビタミン、タンパク質、水溶性植物
エキスなどである。本発明の凍結乾燥した薬剤は、有益には、顔及び肌のための
特別な身体ケア剤として適し、従って特に好ましくは美顔用パックとして使用さ
れる。

【００４０】 皮膚活性物質の急速な経皮輸送は、角質層の保湿の程度に比例して起こり、そ
して主成分自体が皮膚保湿効果を有する、パラミロンを含有する凍結乾燥した薬
剤を用いることによって、その輸送を促進することができる。担体又は水性溶液
に添加した小分子は、過水飽和になった本剤の高濃度領域から拡散し、そして表
皮上の低濃度領域に移動する。比較的に浸透する分子の例は、短鎖ペプチド、AT
P、尿素及び電解質などの物質である。

【００４１】 他方、皮膚の炎症を惹起する可能性から、皮膚の角質層を通過して浸透するこ
とが望ましくなく、そして危険ですらある低分子物質にも、この様な理想的な経
皮輸送条件が適用される。炎症性が証明された望ましくない物質の例として、化
粧品の保存剤及び香料、並びに市販の乳状製品に普通に用いられる種類の界面活
性物質が知られている。 本発明の、凍結乾燥した、パラミロンを含有する薬剤の特徴は、前記の望まし
くない物質を、ほとんど、好ましくは完全に用いなくてよいことである。

【００４２】 周知のキセロゲルは、水の除去後に、その網状構造（マトリクス）の空間的な
配置が、その構造元素間の距離が、核間の距離の次元にのみ到達する程度で変化
する。これに対して、本発明の、パラミロンを含有する薬剤の凍結乾燥品は、溶
媒液が、妨害なく非常に急速に浸透しうる空間を形成する。凍結乾燥の方法によ
り、食物の原材料、例えば茶又はコーヒーから昇華によって水を除去する場合と
同様に、非常に急速に再水和することができる毛管構造が形成される。多数の極
性基を有する物質、例えばセルロース及びタンパク質の使用により、前記の水性
溶媒は、それらの基の間を多量に架橋形成する傾向を有し、その結果、溶解性及
び拡散性が影響を受ける。

【００４３】 十分な水を加えて、架橋結合を形成することによって、当該ポリマーマトリク
スを膨潤させ、従って、水分子及びその中に存在する活性成分の高い流動性が保
証される。本発明の凍結乾燥した薬剤において認められるこの効果は、化粧品へ
の適用、そして化粧活性成分の脱着性及び浸透性の点で、非常に重要である。ま
た、溶媒として添加した水が、例えばアルギン酸塩から、そのナトリウムイオン
を部分的又は完全に交換するために十分な量のカルシウムを含有する場合、本発
明の凍結乾燥した薬剤は、湿気に対して安定なマトリクス形を形成することがで
きる。同時に形成されたアルギン酸カルシウム骨格は、このポリマーの予め定め
た部分のみをゲル状態に転換することができる程度で、本発明の薬剤を安定化す
る。

【００４４】 親水性の繊維物質、例えばレーヨン繊維の追加によって、凍結乾燥したマトリ
クスを更に安定化することができる。コラーゲン繊維の追加により、加湿後でも
、寸法安定性が得られる。これにより、乾燥安定性が大きく向上するので、例え
ばスキンケアのためのマトリクスの取扱、すなわち局所成形、配置較正などが容
易になる。

【００４５】 溶解したパラミロンから成る、紡糸を含有しない本発明の凍結乾燥した薬剤の
特徴は、化粧上の適用のために作られたゲルを、それが完全に消失するまで皮膚
にマッサージすることができることである。一方、構造繊維を含有する本剤では
、常に不溶性繊維残査が皮膚上に残り、化粧処置後に、それを除く必要がある。

【００４６】 いずれの場合でも、繊維の選択的な使用、又はカルシウムイオンによる安定化
によって、本発明の凍結乾燥した薬剤の粘稠性を系統的に調整することができ、
従って製品を、希望の適用領域に適合させることができる。これは、必要な単純
かつ実際的な取扱を保証する行程である。

【００４７】 別の好ましい態様では、本発明の、パラミロンを含有する凍結乾燥した薬剤に
、ミセル形成することのできる物質を追加する。当該物質は、本発明の凍結乾燥
した薬剤中に４〜30重量％、好ましくは５〜20重量％の量で存在する。この様な
生体マトリクスにおいて使用するミセル形成性物質は、例えばイソパラフィンで
あり、これは、ミセル形成の結果、安定なゲルの生成を可能にする凝集性の骨格
を構築することができる。

【００４８】 別の好ましい点として、本発明の薬剤は、いずれの香料、色素又は保存剤を含
有しない。 化粧上の活性成分、及び／又は植物ベースの活性成分、及び／又は医薬上の活
性成分は、好ましくは0.1〜50重量％、特には３〜30重量％の含量で、本発明の
、凍結乾燥した局所用物質中に容易に組み込むこともできる。有益には、その活
性成分を、封入化した形で、例えばリポソーム又はリポソーム様小胞の形で組み
込む。 既知のバイオポリマー製スポンジと比べて、本発明の凍結乾燥した薬剤は下記
の利点を有する。

【００４９】 皮膚刺激性物質、例えば保存剤、色素及び香料を全く使用しないことが可能で
ある。また本発明の局所剤は、特に、従来既知の製剤系に比べて、活性成分が皮
膚に対して、より良く制御され、かつより良く標的に向かって放出されうる製剤
系の製造に非常に適する。従って、本発明の凍結乾燥した薬剤により、活性成分
を、狭小な耐性な濃度範囲で正確に、且つ高い活性能で投与することができる。
これは、例えばビタミンA誘導体の場合に当てはまる。通常の活性成分の活性能
は、障壁物質の欠失、例えば脂肪の欠失の結果として、妨害されずに皮膚を通過
する輸送経路のために、相互作用の欠如のために、より短い輸送経路のために、
そしてまた、より高い可能な投与レベルの点で、すなわちより高い活性濃度の点
で、達成される。この様にして、本発明の薬剤では、活性成分がより経済的に使
用される。

【００５０】局所投与用薬剤の製造 本発明の凍結乾燥した薬剤を、最初に、いわゆる膨潤したパラミロンの生産に
より製造する。このために、顆粒状又は結晶性のパラミロンを先ずNaOH溶液に溶
かし、次にHClで中和し、これによってパラミロン繊維をゼラチン状粘液として
沈殿させる。この粘液を数回洗浄して、望ましくない塩を除く。この膨潤したパ
ラミロンの粘度及び乾燥重量レベルを、水の添加によって調整することができる
。あるいは、酵母から得たザイモサン(16.9〜22.3%マンナン、50.7〜57.8%β-1,
6-グルカンβ-1,3-グルカン鎖、並びに残りとしてタンパク質、アミラーゼ、及
び脂質；“Polysaccharide, die immunstimulierend wirken”, Hansel R. 1987
, Farmaceutisch Tijdschrift voor Belgie 64, pages 313-326参照)に関する従
来技術(US-A 5,663,324)と類似的に、結晶性パラミロンを溶解する。

【００５１】 膨潤したパラミロン又は溶解したパラミロンに加えて、天然多糖及び／又は修
飾多糖及び／又はコラーゲンの中から選択されるその他の担体、並びに場合によ
り所望の化粧上又は医薬上の活性成分を、水性媒体中で均一に混合し、その後そ
の混合液を冷却する。この冷却過程中にゲルが形成される。次にこのゲル中に紡
糸を緩やかに導入し、そして均一に分配する。撹拌し、そして再度冷却し、例え
ば約１℃に冷却した後、この化合物を鋳型にそそぎ込む。この鋳型内で再び、元
となるゲル構造が形成され、そして次の凍結乾燥過程によって、純粋なコラーゲ
ンスポンジに構造的に非常に似た物質が得られる。このマトリクスの形成の最初
の相として、凍結が必須な過程であり、本発明では、低温での加速した凍結が好
ましい。この凍結乾燥したゲルを次に高真空下で凍結乾燥すると、溶媒が凍結除
去され、そして凝縮される（昇華）。凍結乾燥の本質的な特徴は、容量変化なく
孔形成することである。急速に再水和する効果は、このことに基づく。

【００５２】 本発明の好ましい態様では、先ず、膨潤したパラミロンとその他の担体成分と
から成る混合物を調製し、次にこれを水中で撹拌する。この混合液を10℃に冷却
した後、この混合液に、紡糸、化粧上及び／又は医薬上活性な成分、及び／又は
ミセル形成物質から成る混合物を分散することができる。生成した混合液を、板
形で、-10〜-60℃で、好ましくは-20℃で、0.5〜４時間で、好ましくは１〜３時
間で凍結する。厚さ0.5〜5cm、好ましくは1.5〜2.5cmの層を有する板形が好まし
い。凍結中、孔のサイズは、凍結の速度と温度により本質的に調節される。場合
によってその板を-10〜-50℃で中間的に保存してから、40〜150℃の加熱温度で
、そして約0.5〜3.0mbarの真空下で凍結乾燥する。好ましくは、この凍結乾燥過
程を約15〜48時間で行う。その後、その板を割って調製することができる。

【００５３】 凍結乾燥後、前記の方法で得られた凍結乾燥した担体物質を含有する薬剤の含
水量は、好ましくは５〜15％の範囲であり、特に好ましくは10％である。本発明
の凍結乾燥した薬剤の生産において使用した開始物質の乾燥物濃度、すなわち脱
ミネラル化水中の成分混合物の乾燥物濃度は、約１〜５％に達する。

【００５４】局所投与用薬剤の使用 本発明の凍結乾燥した薬剤を、活性成分の局所的な経皮投与のために用いるこ
とができる。好ましい態様では、この薬剤は、プラスターとして、例えば免疫賦
活剤として、あるいは特に好ましい形では、薬剤供給系として機能する。特に有
利な態様では、本発明の凍結乾燥した薬剤を、化粧上又は医薬上の活性成分の局
所的適用又は経皮適用のために、すなわち顔のトリートメント又は顔パックとし
て、用いることができる。

【００５５】経口投与用薬剤 従ってまた、本発明は、少なくとも１つの凍結乾燥した、パラミロンを含有す
る担体を含んで成る経口投与剤に関する。この様な製剤を、通常顆粒形で、又は
圧縮した形で、例えば散剤の形で投与し、そして場合により予め外皮を有する形
及び／又は封入した形で提供する。詳しくは下記参照。

【００５６】 経口投与剤の好ましい態様では、当該担体は最初は圧縮されており、そして胃
内で膨脹した後にスポンジ様構造をとる。この担体が弾性なスポンジ様構造をと
るために、これは、１〜80重量％、好ましくは５〜75重量％のパラミロンに加え
て、20〜99重量％、好ましくは25〜95重量％の、その他の担体成分、すなわちコ
ラーゲンも含有する。

【００５７】 本発明でもう１つの担体成分として用いるコラーゲン構造物は、本質的に、い
わゆる硬タンパク質と呼ばれ、またこれは繊維状タンパク質、骨格タンパク質又
は構造タンパク質とも呼ばれ、水不溶性であり、繊維状であり、純粋に骨格機能
及び支持機能を有する動物タンパク質の一群を構成するものである。コラーゲン
は、支持組織及び結合組織、皮膚、骨及び軟骨から得られる。

【００５８】 別の好ましい態様では、本発明の薬剤中のその他の担体成分、すなわちコラー
ゲンは、トリペプチド配列GlyXyの形で、アミノ酸のグリシン及びヒドロキシプ
ロリンを含んでいる。ただしXは任意の所望のアミノ酸を表し、そしてyの位置に
ヒドロキシプロリンがしばしば出現する。

【００５９】 別の好ましい態様では、担体中の追加成分、すなわちコラーゲンは、海綿類（
門）、特に普通海綿類（綱）に由来する。これは動物学的な命名であり、一般的
に海綿動物と称される水生動物の一群を意味する。この海の生物は、対称性を欠
くが、極性を有した形で、クラスター、痂皮、漏斗及びボールとして、並びにマ
ッシュルーム及び枝角として構築され、方解石及び珪酸の骨片が堆積するコラー
ゲン（海綿質）繊維から成る骨格を有する。海綿動物は通常三層から成り、その
中の最も大きい中間層、すなわち葉肉は、コラーゲン繊維を含むゼラチン状のマ
トリクスから成る。Lexikon der Biologie(生物学辞典), vol.7, Freiburg, Ger
many 1986のsponges(海綿動物)の項、並びにvol.8のspongia(ユアミ海綿), spon
gin(海綿質)の項を参照のこと。

【００６０】 海綿動物門は、綱として石灰海綿類、すなわち方解石の堆積を有する海綿動物
と、六放海綿類、すなわち特別の珪酸の堆積を有するものと、繊維又は珪酸から
成る骨格を有する海綿を包含する普通海綿類とに分類される。綱として普通海綿
類が好ましく、これは特に、角型珪質海綿(horn siliceous sponge)(Cornacu-sp
ongia)、淡水性海綿(freshwater sponge)及び鉱泉性海綿(bath sponge)(Spongia
officinalis)、そしてその亜種レヴァント海綿(Levantine sponge)(Spongia of
ficinalis mollissima)、ジモッカ海綿(zimocca sponge)(Spongia officinalis
zimocca)、象耳海綿(elephant-ear sponge)(Spongia officinalis lamella)、並
びに巨孔を有するウマ海綿(Hippospongia communis)を含む。

【００６１】 本発明の薬剤の必須成分としてのコラーゲン担体を単離するために、海から採
取した海綿から、既知の方法により、例えば酸性消化により鉱物成分を除く。 別の好ましい態様では、本発明の薬剤中に用いられる追加の担体、すなわちコ
ラーゲンは、天然動物の物質に由来するものである。好ましいこれらのコラーゲ
ン繊維網、すなわちコラーゲンスポンジの調製は、周知であり、例えばドイツ公
開出願18 11 290、ドイツ公開出願26 25 289、ドイツ特許27 34 503、そして特
に本出願人によるドイツ公開出願32 03 957に記載の周知の方法による。

【００６２】 別の好ましい態様では、圧縮過程の後、本発明の薬剤は、0.005〜1.0 g/cm³、
好ましくは0.01〜0.1 g/cm³の範囲の密度を有するスポンジ様担体を有する。こ
の密度は、ドイツ基準DIN 53 420に従って測定する。

【００６３】 別の好ましい態様では、本発明の薬剤中の担体は、封入化されないで、むしろ
プレスしたブランクの形である。これに関して、Ms. Schoffling-Krauseの論文"
Arzneimittelformenlehre" (Stuttgart, Germany, 3rd edition, 1998, pages 1
81-210)、及びそこに記載された製造方法と機器、並びにRudolf Voigtの論文"Ph
armazeutische Technologie fur Studium und Beruf" (Ullstein Mosby出版, Be
rlin, Germany, 1993, page 205-)内の章"Tablets"、及びそこに記載された製造
方法と機器を参照されたい。錠剤のプレスに供給される材料は、その材料の機能
に従って修飾される。

【００６４】 別の好ましい態様では、本発明の薬剤中の担体は錠剤の形である。再度Schoff
ling-Krauseの論文を参照されたい。製造条件に応じて、この錠剤は、当該薬剤1
00ｇに対して0.001〜５ｇ、好ましくは0.2〜１ｇの、少なくとも１つの滑沢剤を
、（マトリクス鋳型の）離型剤として含有する。この例は、シリコーン化タルク
、セチルタルク、ステアリン酸マグネシウム、PEG 4000-6000、ステアリン酸、
セチルアルコール、パラフィン、蜜蝋、水和した脂肪及び油、並びにその他の生
理学的に許容される離型剤である。これに関する概説は、Rudolf Voigtの論文の
章"Tablets"にある。長方形の錠剤が特に好ましい。

【００６５】 別の好ましい態様では、前記錠剤は、その錠剤を被う可溶性コーティングを有
する。これに関して、Schoffling-Krauseの論文(1998, pages 93-98)及びBauer
の論文397-413頁を参照されたい。このコーティングは通常、本薬剤100ｇに対し
て0.1〜50ｇ、好ましくは１〜20ｇの量で施され、そして胃液中で可溶性である
皮膜形成コーティング、例えば水和ゲルに基づくコーティングシロップ、又はコ
ーティング粉末、色素縣濁液、滑らかなシロップ、又は硬いワックス溶液若しく
は縣濁液から成りうる。唾液に対して抵抗性を示すが、胃液内では可溶性である
ポリマーによる皮膜コーティングを用いてもよい。その他の皮膜コーティングは
可溶性セルロース誘導体、例えばヒドロキシプロピルセルロースである。適当な
皮膜形成物質に関する概説は、Voigtの論文の章"Dragees", page 261-にある。
その他の適当なコーティングは、前記概説に見られる通り、糖衣のための製法に
従って調製されたものである。

【００６６】 別の好ましい態様では、本発明の薬剤中の担体は封入される。すなわち当該担
体は、胃液中で可溶であるカプセル中に、軟ゼラチンカプセルの形で、硬ゼラチ
ン外皮カプセルの形で、又は活性成分の調節放出が可能なカプセルとして、含ま
れる。これに関して、Schoffling-Krauseの論文"Arzneimittelformenlehre" (St
uttgart, Germany, 1998, pages 64-81)、及びそこに記載された製造方法と機器
、並びにRudolf Voigtの論文"Pharmazeutische Technologie fur Studium und B
eruf" (Ullstein Mosby出版, Berlin, Germany, 1993, page 205-)内の章"Capsu
les"、及びそこに記載された製造方法と機器を参照されたい。

【００６７】 別の好ましい態様では、本発明の薬剤中の担体は、少なくとも１つの活性成分
及び／又は添加剤を含有する。この活性成分は、スポンジ様担体物質の製造中の
種々の時点で加えられる。添加剤の例は、認可された着色剤、例えばカロテノイ
ド、又はビタミン、例えばビタミンB2である。活性成分、例えばオメプラゾール
を、例えば当該スポンジを圧縮する前に、種々の時点で添加してもよい。

【００６８】 本発明の薬剤の別の好ましい態様では、活性成分は、マトリクス、ケーシング
、ベッディング及び／又は放出調節可能な担体物質中に含まれる。これにより、
膜拡散、孔拡散、膨潤、腐食、マトリクスからの孔拡散、拡散を伴う膨潤、及び
崩壊を伴う膨潤を介して、活性成分の放出が行われる。R. Voigtの論文の章"Per
orale Depotarzneimittelformen"、Bauer, pages 533-555、及びSchoffling, 19
98, page 176-, pages 199-205を参照されたい。この場合、放出を調節する担体
物質として、特にヒドロキシプロピルメチルセルロースを用いる。

【００６９】経口投与用薬剤の製造 本発明はまた、前記薬剤の製造方法を提供することを目的とする。 従って本発明は、前記薬剤の製造方法であって、0.0005〜1.0 g/cm³の密度を
有し、細孔を有する凍結乾燥したスポンジ（これは場合により、圧縮過程の前に
、少なくとも１つの活性成分及び／又は添加剤によって、更に場合により離型剤
によっても処理されている）を、元の大きさの1/2〜1/50に、好ましくは1/3〜1/
30に圧縮し、そして場合により、胃液中で可溶であるカプセルによって被うこと
を特徴とする前記方法に関する。

【００７０】 本発明の製造方法の別の好ましい態様では、細孔を有するスポンジを、少なく
とも１つの活性成分のための担体層と組み合わせる。層を有する錠剤の製造方法
に従って、その担体層を、予め密集化したスポンジ上に圧縮する。

【００７１】 本発明の製造方法の別の好ましい態様では、この細孔を有するスポンジを、少
なくとも１つの活性成分及び／又は添加剤により、少なくとも１つの過程から成
る圧縮過程の前又はその最中に処理する。好ましくは、活性成分及び／又は添加
剤を、周知の通りに、スポンジ形の担体上に、例えば溶媒中に溶解された純粋な
形で、又は乳状液又は縣濁液の形で分散液として施す。

【００７２】 スポンジの生産及び圧縮を、例えばスポンジの事前の密集化の後に、それを偏
心プレス内に配置し、そして錠剤生産のために一般に用いられる上下のパンチと
適当なマトリクス（例えば1.8cm x 0.9cmの長方形）とを有する圧縮機器を用い
て、行う。パンチすることによって、予め密集化したスポンジを圧縮して、厚さ
４mmの錠剤を形成する。凍結乾燥する前に、活性成分をコラーゲン分散物中に組
み込むこともできる。

【００７３】経口投与用薬剤の使用 本発明では、生物学的に活性な物質、例えば化粧上又は医薬上の活性物質を、
活性成分として用いることができ、これを特に胃内での滞留期間中に放出するこ
とができる。 これに加えて、ミネラル及び痕跡量の元素を、活性成分として用いることもで
きる。 好ましくは、栄養補助剤、特にビタミン、ミネラル、脂肪酸及び／又は食事用
繊維もまた当該担体中に添加する、又は組み込む。

【００７４】 この様な栄養補助剤の例は脂溶性ビタミンであり、例えばレチノール、レチノ
イン酸、レチナール、カルシフェロール、すなわちビタミンＤ、トコフェロール
、すなわちビタミンＥ、そしてビタミンＫ、すなわちフィロキノンである。ビタ
ミンＡ欠乏は夜盲症を誘発し、ビタミンＤ欠乏はくる病を誘発し、そしてビタミ
ンＥ欠乏は酸化的溶血の傾向を増加して、溶血性貧血、浮腫及び過敏性亢進を誘
発する。ビタミンＫ欠乏は血液凝固を害して、出血を誘発する。

【００７５】 本発明において栄養補助剤として用いる別の群は、水溶性ビタミンであり、例
えばビタミンＢ類、例えばビタミンB1、チアミン、リボフラビン、ピロキシジン
、ニコチン酸、コリノイド、葉酸、そして別の群としてアスコルビン酸、すなわ
ちビタミンＣを含む。チアミン欠乏は脚気を起こし、リボフラビン欠乏は角膜の
炎症を起こして、血管新生を亢進することがある。ビタミンB6欠乏は脂漏性皮膚
炎、低色素性貧血、末梢性神経炎、そして大脳痙攣を起こしうる。妊娠中又は放
射線治療後にビタミンB6の要求性が増加する。ニコチン酸の欠乏はペラグラを起
こし、コリノイドの欠乏は悪性貧血又は索性脊髄症をも起こす。葉酸の欠乏は妊
娠中の問題を起こす。不十分なアスコルビン酸は壊血病及びMoller-Barlow病を
起こす。

【００７６】 例えばドイツ栄養協会(DGE)による補助剤摂取の勧告に従って、本発明の薬剤
を介して毎日ビタミンを摂取する。典型的な毎日のビタミン摂取は、例えばFort
hの論文"Pharmakologie und Toxikologie", 4th edition, 1983, page 401にも
引用されている。

【００７７】 本発明の経口剤において栄養補助剤として用いるその他の典型的な成分はミネ
ラル又は痕跡量の元素であり、これらは予防又は治療目的で供給される。この例
は、人体の必須元素としての鉄、亜鉛、銅、マンガン、モリブデン、ヨウ素、コ
バルト及びセレニウムである。典型的な毎日摂取に関して、前記のForthの論文
の416頁の表を参照されたい。

【００７８】 人体に必須な元素の他に、多くの場合、カルシウムの補給も必要であり、これ
は骨及び細胞の構造のためばかりでなく、体内の代謝にも必要である。食物から
標準的に得られるカルシウム量は必ずしも必要量を満たしていない。カルシウム
は骨及び歯に強度を与える。

【００７９】 本発明において供給し得る別の必須元素はカリウムであり、これは細胞内の浸
透圧の調節に積極的に役立つ。カリウムは、胃及び腸の消化管の成分であり、急
速に再吸収される。 栄養補給のための別の必須元素はマグネシウムであり、これは筋機能に影響す
る。マグネシウムはほぼ全ての細胞に存在し、エネルギー代謝に関与する酵素の
活性化を調節する必須栄養素である。

【００８０】 更に、本発明の薬剤は、少なくとも１つの、少なくとも部分的に可溶性の、医
薬上活性のある物質、特に局所効果又は全身効果を有するものを投与するために
用いることもできる。前記物質は、例えば、中枢神経系に作用する医薬上活性な
物質、例えば抑制薬、催眠薬、鎮静薬、精神安定薬、筋弛緩薬、抗パーキンソン
薬、鎮痛薬、高血圧防止薬、化学療法剤、抗炎症薬、ホルモン、避妊薬、交感神
経作用薬、利尿薬、駆虫薬、高血糖治療薬、電解質、心血管薬を含む。

【００８１】 本発明の薬剤によって遅延放出的に供給されうる水溶性医薬物質の例は、硫酸
鉄、アミノカプロン酸、塩化カリウム、塩酸メカミルアミン、硫酸アンフェタミ
ン、塩酸メタンフェタミン、塩酸フェンメトラジン、塩化ベタネコール、硫酸ア
トロピン、臭化メタスコポラミン、ヨウ化イソプロパミド、塩化トリジヘキセチ
ル、塩酸オキソプレノロン、塩酸メトロプロロン、塩酸シメチジン及び類似物で
ある。

【００８２】 本発明の薬剤によって放出されうる、水溶性の限定された医薬活性物質の例は
、塩酸メシチン、フェノキシベンズアミン、マレイン酸チエチルペラジン、アニ
シンドン、レセルピン、アセトールアミド、メタゾールアミド、クロロプロパミ
ド、トラジミド、酢酸クロロマジノン、アスピリン、プロゲスチン、コルチコス
テロイドなどである。本発明の薬剤によって放出されうる医薬物の例に関して、
"Pharmazeutische Stoffliste" 7th ed., Frankfurt am Main, Germany, 1989を
参照する。当該担体中に組み込まれうる医薬物の典型的な例はアシクロビル、レ
ボドパ及びリボフラビンである。

【００８３】 本発明の薬剤の別の好ましい態様では、それらのものを、胃内に滞留する形で
、すなわち胃内に数時間とどまる形で用いる。 本発明はまた、活性成分の改変された放出のための、前記薬剤の使用にも関す
る。 経口投与のための本発明の薬剤は、消化管の疾患、特に胃の疾患、例えば胃粘
膜炎の治療又は予防処置のための薬剤、あるいは免疫系の刺激が必要である疾患
の予防及び治療のための薬剤の生産のために特に良く適する。

【００８４】非経口投与用薬剤 本発明はまた、少なくとも１つの、凍結乾燥した、パラミロンを含有する担体
を含んで成る非経口投与のための薬剤に関する。特に、これらは滞留型移植物又
は滞留型非経口系であって、一旦その移植物が、例えば皮膚下又は筋肉内に投与
されたならば、生物学的に活性な、特に医薬上活性な成分を、複数日間、複数週
間、更に複数週間にわたって投与することができるものである。これらの移植物
は通常、0.5から５mm、好ましくは１〜４mmの範囲の厚さを有し、そしてそれら
は、例えば50mgの重量では、一月あたり10mgまでの医薬活性成分を放出すること
ができる。

【００８５】 最後に、本発明は、１〜80重量％、好ましくは５〜75重量％のパラミロンと、
20〜99重量％、好ましくは75〜95重量％の追加の担体、すなわちコラーゲンとを
含んで成り、凍結乾燥した立体的な生体用マトリクスの形である、パラミロンを
局所投与及び／又は非経口投与及び／又は人体の開口部から投与するための薬剤
にも関する。この様な薬剤又は製剤は、長期間にわたって寸法的にも安定であり
、濡れた後でも又は体液の存在下でも人体によって再吸収されうるし、そして医
薬上有効な量のパラミロンを、体表面を介して局所的に、及び非経口的に、例え
ば皮下的に人体に供給することができ、そして人体の開口部を介して、例えば口
、鼻、膣又は直腸を介して投与することもできる。

【００８６】 以下では、製造と適用の実施例を参照して本発明を説明し、それを従来技術と
比較する。これに関して、用語「部」は常に重量の割合を表す。 酵母に由来するグルカン（ザイモサン）と、藻類に由来するパラミロンとの区
別は、下記の通りグルコースの有無による酵素的な分解を介して行うことができ
る。パラミロンを特異的酵素、すなわちβ-1,3-グルカナーゼ(Merck、例えばロ
ーマカタツムリHelix pomatia由来)によって分解すると、グルコースが得られ、
これを薄層クロマトグラフィーによって検出することができる。対照的に、パラ
ミロンをα-1,4-アミラーゼによって処理しても、分解産物は得られない。この
様にして、結合の種類を特異的に確認することができる。酵母グルカンは更に1,
6-架橋結合されており、その結果、それをβ-1,3-グルカナーゼによって分解し
ても、純粋なグルコースは生じないが、いくつかの分解産物、そして二糖も生じ
る。

【００８７】 結合の種類を確認するために、pH 5の数μgのパラミロン（例えば100μL)を、
0.2 mg/mLのβ-1,3-グルカナーゼと混合して、水槽中で35℃で最大12時間インキ
ュベーションする。次に、２分間の煮沸によって分解反応を停止する。その後、
10〜50mLの透明な上清をシリカゲル60のプレート(Merck, 10cm x 10cm)にかけ、
そして薄層クロマトグラフィー用のチャンバー内で、イソプロパノール：氷酢酸
：水(29:4:9)から成る溶媒系によって2.5〜３時間展開する。最後に、そのプレ
ートにアニリン−フタレート試薬(Merck)又はオルシノール−硫酸試薬(Merck)を
スプレーして、乾燥器中で100℃で５分間放置する。この様にしてグルコースの
バンドが視認される。

【００８８】製造実施例１ （活性成分を含まない、凍結乾燥したパラミロン） 約15〜20 x10⁶個のEuglena gracilis細胞(the Plant Physiology Institute o
f the University of Gottingen, Germanyの藻類培養のための収集株からNo.122
4-5/25として入手される(Euglena gracilis株Z))を、０〜120時間の範囲で、典
型的には72時間、供給バッチ式に培養した。このことは、この細胞を、発酵の最
初に一回栄養素を添加する密閉バッチ系によって培養するのではなく、一定の時
間間隔で系に栄養素を補給したことを意味する。前記栄養素は、主にはグルコー
ス、アミノ酸及びビタミンであった。この様にして、細胞を至適に増殖し、そし
て添加したグルコースの至適な代謝によってパラミロンを形成させた。

【００８９】 培養温度は20〜30℃であり、この温度でEuglena gracilisは至適な増殖速度を
得る。更に、至適なパラミロン合成のためには、細胞への適当な酸素供給が必要
である。この供給を培養の全期間中制御して、その培地へ、酸素の添加を介して
１分間あたり０〜20Nリッターの空気量を供給する様に設定し、そして生じた二
酸化炭素を取り除く。酸素の飽和度は典型的には20〜80％である。これによって
、添加した量の90％までのグルコースを反応させてパラミロンを形成する。 細胞培養１Ｌあたりパラミロンの収量は、約72時間の培養後に12〜18ｇの範囲
にある。発酵中のpH値は3.5〜６の範囲であり、必要ならば、酸の添加によって
調整する。

【００９０】 この培養後に、培養液の遠心又は単純な沈降によって細胞を分離し、そして再
度水中に縣濁する。その後、その細胞を超音波で、例えば400ワットの超音波で
溶解する。最後に、沈降したパラミロンを、陰イオン性又は非イオン性界面活性
剤、例えば、生物分解性の界面活性剤である脂肪アルキルポリグリコシドPlanta
ren(登録商標)又はGlucupon(登録商標)(Henkel KGaA)、あるいは脂肪アルコール
エーテルスルフェートZETESOL(Zschimmer & Schwarz GmbH)によって洗浄し、そ
して超音波処理する。あるいは、陰イオン性界面活性剤、例えばドデシル硫酸ナ
トリウム(SDS)によって洗浄するか、又は還流しながらSDSによって煮沸する。そ
して一旦パラミロンが沈降したら、上清を捨てる。次に、そのパラミロンを水に
よって洗浄し、そして凍結又は乾燥することができる。

【００９１】 本発明の方法に基づいて得られたパラミロンは、元素分析と残存タンパク質測
定から99％超の純度を示す。そのパラミロンを、前記界面活性剤によって冷温で
洗浄した場合、残存タンパク質の含量は0.07〜0.09重量％であり、一方熱温で洗
浄した場合、残存タンパク質の含量は0.01〜0.03重量％である。

【００９２】 洗浄した後、そのパラミロンを、0.5〜1Mの水酸化ナトリウム水溶液中で撹拌
しながら溶解する。その結果、水酸化ナトリウム溶液中で濃度約５〜10％のパラ
ミロンが得られる。次にその溶液を水によって元の容量の５〜10倍に希釈し、そ
して濃塩酸又は1M塩酸によって洗浄する。次に、生成したゼラチン状化合物を水
によって洗浄し、そして塩化ナトリウムを除く。

【００９３】 最後に水の添加によって、注ぐことが可能な0.5〜１％の化合物に調整し、次
にそれを、厚さ0.5〜３cmの層を形成する様に平滑面上に注ぎ、そして次に約-40
℃で凍結する。次に、その層を凍結乾燥する。 この様にして生産した生体用マトリクスを、その密度に関して本質的に評価す
ることができる。それは約0.003〜0.2 g/cm³に成る。この様な生体用マトリクス
を局所的又は非経口的に用いることができる。

【００９４】製造実施例２ （コラーゲンを含む凍結乾燥したパラミロン） 製造実施例１の製造を行った。ただし凍結乾燥の前に、15重量％のパラミロン
と85重量％のコラーゲンとの混合液を作製する。その場合、溶媒として水を用い
る。

【００９５】製造実施例３ （カルボキシメチルセルロースと一般的に用いられる添加剤とを含
む凍結乾燥したパラミロン） 製造実施例１の製造を行った。ただし凍結乾燥の前に、85ｇのパラミロンと10
ｇのカルボキシメチルセルロースとから成る混合液を、脱ミネラル水1000ｇを用
いて作製し、そして凍結乾燥する。この生産物を、局所用に、例えば顔パックと
して用いることができる。

【００９６】製造実施例４ （活性成分を含まない経口投与剤） 製造実施例２に従って作製した、重さ12ｇのスポンジ（長さ46cm、幅8cm、厚
さ1.3cm）を、空気圧プレスによって幅1.5cmまで予め密集化して、細片を形成し
た（長さ46cm、幅1.5cm、厚さ1.3cm）。

【００９７】 この細片を偏心プレス（錠剤プレスEK 0, Korsch company of Berlin, German
y製造）内のセグメントに配置し、そして長方形(1.8cm x 0.9cm)の錠剤を形成す
るために、その物質を、上下のパンチと適当なマトリクスとを用いて打ち抜く。
ただし各錠剤は上面と底面とに４つのノッチを有する。この錠剤は、厚さ４mm、
重さ約200mgである。この錠剤は、圧縮操作の後、寸法的に安定である。プレス
したこのブランクは、37℃で水中で膨脹し、一方これは最大５分以内に液体を吸
収してスポンジを形成する(1.9cm x 0.8cm x 8cm)。この様にして得られた経口
剤は、湿気中で少なくとも２ヶ月間保存した後も、なんら容量増加を示さなかっ
た。

【００９８】製造実施例５ （離型剤を含む経口投与剤） 製造実施例４の記載通り、パラミロンを含むスポンジを予め密集化して、細片
を作製する。その細片の上面と底面を、微粉の離型剤ステアリン酸マグネシウム
によって被覆してから、圧縮を行う。この実施例では、細片１個あたり65mgのス
テアリン酸マグネシウムを用いる。各錠剤は、約２mgの離型剤をその表面に有す
る。疎水性の離型剤のために、最初の１分間内のスポンジの膨脹は遅れる。37℃
の水中で、このプレスしたブランクは、５分以内に液体を吸収してスポンジを形
成する(1.9cm x 0.8cm x 8cm)。この様にして得られた経口剤は、湿気中で少な
くとも２ヶ月間保存した後も、なんら容量増加を示さなかった。

【００９９】製造実施例６ （栄養補給剤としての経口投与剤） 製造実施例４の製造を行った。ただし当該薬剤100ｇに付き５ｇの天然ビタミ
ンＥを追加した。この様にして得られた栄養補給剤は、湿気中で少なくとも２ヶ
月間保存した後も、なんら容量増加を示さなかった。

【０１００】製造実施例７ （医薬物質を含む経口投与剤） 製造実施例４の製造を行った。ただし当該薬剤100ｇに付き20ｇの薬物レボド
パ(L-ジオキシフェニルアラニン)を、細孔を有するスポンジ出発材料に追加した
。この様にして得られた栄養補給剤は、湿気中で少なくとも２ヶ月間保存した後
も、なんら容量増加を示さなかった。

【０１０１】製造実施例８ （活性成分の放出が改変された経口投与剤） 製造実施例４の製造を行った。ただし活性成分の放出を改変する系として、約
100mgのレボドパを含有する200mgのヒドロキシプロピルメチルセルロースと25mg
のベンセラジド(1-DL-セリン-2-(2,3,4-トリヒドロキシベンジル)ヒドラジド)と
から成るもう１つの層を、滞留する薬剤のための担体として、前記の圧縮したス
ポンジと組み合わせる。この活性成分の放出は、インビトロで10時間以内に起き
る。この様にして得られた経口投与剤は、湿気中で少なくとも２ヶ月間保存した
後も、なんら容量増加を示さなかった。

【０１０２】適用実施例１ （インビトロ経口投与） 製造実施例２に記載したプレスしたブランクを、消化管中の分解性に関して、
US Pharmacopoeia (USP XXIII)に基づく、ペプシンを添加した合成胃液中に置く
ことによって37℃で検査した。この実験から、当該スポンジは、240分後から分
解し始めることが示された。その胃液を、US Pharmacopoeia (USP XXIII)に基づ
く、パンクレアチンを添加した合成腸液に置換したところ、当該スポンジは、約
５時間後に完全に崩壊した。また合成腸液中に置いた場合、当該スポンジは約７
時間以内に完全に溶解した。

【０１０３】適用実施例２ （インビトロ局所投与） 製造実施例２に記載した、パラミロンを含有するスポンジを、リンパ液のモデ
ルとしての生理食塩水(0.9% NaCl)中で、電解質への耐性に関して37℃で検査し
た。視覚的な検査により、３日間以内に何らの変化、例えば分解も認められなか
った。対照的に、製造実施例１に記載の、純粋なパラミロンにより作製されたス
ポンジは、180分後に既に崩壊した。

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１：種々の培地中でのEuglena gracilis細胞の増殖性。

【図２】 図２：種々の培地中での96時間にわたる発酵過程における、Euglena gracilis
細胞内のパラミロン含量。

【図３】 図３：４種類の培地中での発酵における、1x10⁶個のEuglena細胞内のパラミロ
ン含量。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ボイメル，ディートリッヒ ドイツ連邦共和国，デー−32139 スペン ゲ，ドロッゼルシュトラーセ 16 (72)発明者 カーマン，ウベ ドイツ連邦共和国，デー−33813 オエル リンクハウゼン，ベルクシュトラーセ ６ Ｆターム(参考） 4B064 AF12 BE01 CA08 CD09 CE17 DA01 4C076 AA19 AA37 AA82 BB01 BB32 CC01 CC23 DD41 DD51 EE30 EE32 EE43 FF31 FF63 4C083 AA022 AD241 AD242 AD272 CC07

Claims (48)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 0.1〜100重量％、好ましくは３〜100重量％、特に５〜100重
   量％の凍結乾燥したパラミロンを含んで成る薬剤。
2. 【請求項２】 0.1〜99重量％、好ましくは５〜95重量％のパラミロンと、
   １〜99重量％、好ましくは５〜95重量％の、天然の多糖及び／又は修飾された多
   糖及び／又はコラーゲンの中から選択されるもう１つの担体とを含んで成る、請
   求項１に記載の薬剤。
3. 【請求項３】 0.1〜99重量％、好ましくは５〜95重量％のパラミロンと、
   １〜99重量％、好ましくは５〜95重量％の、別の担体であるコラーゲンとを含ん
   で成る、請求項１に記載の薬剤。
4. 【請求項４】 生物学的に活性な成分の局所的な投与のために用いられ、か
   つ前記担体と、場合により生物学的に活性な成分とから成る水性混合液を反応さ
   せ、冷却し、そしてその生成したゲルを凍結乾燥することによって得ることがで
   きる、請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤。
5. 【請求項５】 繊維、カルシウムイオン、化粧上及び医薬上活性な成分、並
   びにミセル形成性物質を更に含んで成り、しかもそれらが凍結乾燥過程の前に追
   加される、請求項１〜４のいずれかに記載の薬剤。
6. 【請求項６】 25〜75重量％のパラミロン、25〜70重量％の修飾された多糖
   、及び５〜15重量％の水を含んで成る、請求項１に記載の薬剤。
7. 【請求項７】 前記の修飾された多糖としてフィルム形成性結合剤を含んで
   成る、請求項１〜６のいずれかに記載の薬剤。
8. 【請求項８】 前記の修飾された多糖としてセルロースのエーテル誘導体又
   はセルロースのエステル誘導体を含んで成る、請求項１〜７のいずれかに記載の
   薬剤。
9. 【請求項９】 繊維として、紡糸の形でセルロースエステル、ポリエステル
   又はポリビニルアルコールを更に含んで成る、請求項８に記載の薬剤。
10. 【請求項１０】 ３〜30重量％、好ましくは３〜15重量％の紡糸を含んで成
    る、請求項１〜９のいずれかに記載の薬剤。
11. 【請求項１１】 前記の紡糸が、セルロースエステル、ポリエステル、ポリ
    アミド、ポリビニルアルコール、ウール、綿、絹、及びレーヨン繊維から成る群
    から選択される、請求項８〜１０のいずれかに記載の薬剤。
12. 【請求項１２】 前記の紡糸が、３〜30mmの長さ及び１〜６dtexの力価を有
    する、請求項５又は９〜１１のいずれかに記載の薬剤。
13. 【請求項１３】 植物ベースのタンパク質及び／又は動物性タンパク質を更
    に含んで成る、請求項１〜１２のいずれかに記載の薬剤。
14. 【請求項１４】 グルコサミノグルカンを更に含んで成る、請求項１〜１３
    のいずれかに記載の薬剤。
15. 【請求項１５】 前記グルコサミノグルカンが、ヒアルロン酸、その誘導体
    、及び／又はコンドロイチン硫酸から成る群から選択される、請求項１４に記載
    の薬剤。
16. 【請求項１６】 ミセル形成性物質を含んで成る、請求項１〜１５のいずれ
    かに記載の薬剤。
17. 【請求項１７】 前記のミセル形成性物質がイソパラフィンである、請求項
    １６に記載の薬剤。
18. 【請求項１８】 前記担体が、生物学的に活性な成分として、化粧上及び／
    又は医薬上の活性成分を含んで成る、請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤。
19. 【請求項１９】 前記活性成分を、0.1〜50重量％、特に３〜30重量％の量
    で含んで成る、請求項１８に記載の薬剤。
20. 【請求項２０】 前記活性成分が、封入された形で存在する、請求項１８又
    は１９に記載の薬剤。
21. 【請求項２１】 前記活性成分が、リポソーム又はリポソーム様小胞内に封
    入されている、請求項２０に記載の薬剤。
22. 【請求項２２】 カルシウムイオンによって、湿気に対して安定化された、
    請求項１〜２１のいずれかに記載の薬剤。
23. 【請求項２３】 プラスターとしての、特に薬物供給系としての、又は経皮
    パッチの成分としての、請求項３〜２２のいずれかに記載の薬剤の使用。
24. 【請求項２４】 顔用トリートメント又は顔パックとしての、請求項１〜２
    ２のいずれかに記載の凍結乾燥した薬剤の使用。
25. 【請求項２５】 請求項１〜２２のいずれかに記載の凍結乾燥したパラミロ
    ン担体の製造方法であって、 ・培地中でのユーグレナ細胞の培養； ・その培地からのユーグレナ細胞の分離； ・そのユーグレナ細胞からのパラミロンの単離； ・そのパラミロンの精製； ・パラミロン及び／又は修飾したパラミロンと、場合により、請求項２に記載の
    修飾された多糖及びその他の担体と、そして適用可能な場合には、生物学的に活
    性な成分との反応； ・冷却、そしてその後の凍結乾燥 を含んで成る、前記方法。
26. 【請求項２６】 パラミロンを、有機溶媒を添加せずに、しかし界面活性剤
    を用いて又は用いないで、ユーグレナ細胞から単離する、請求項２５に記載の方
    法。
27. 【請求項２７】 ユーグレナ細胞を、供給バッチ式培養系で培養する、請求
    項２５又は２６に記載の方法。
28. 【請求項２８】 ユーグレナ細胞からパラミロンを単離するために、非イオ
    ン性界面活性剤又は陰イオン性界面活性剤の中から選択される、本質的に生物分
    解性の界面活性剤を用いる、請求項２５〜２７のいずれかに記載の方法。
29. 【請求項２９】 経口投与のために用いる、請求項１〜３のいずれかに記載
    の薬剤。
30. 【請求項３０】 少なくとも１つの圧縮された担体を含んで成る、ただしこ
    の担体は、一旦胃内で膨脹したら、スポンジ様構造を取る、請求項２９に記載の
    薬剤。
31. 【請求項３１】 コラーゲン構造を有する担体が、アミノ酸グリシン及びヒ
    ドロキシプロリンを含んで成る、請求項１〜３又は３０のいずれかに記載の薬剤
    。
32. 【請求項３２】 前記担体が、海綿動物門、特に普通海綿綱に由来する、請
    求項２、３、３０又は３１のいずれかに記載の薬剤。
33. 【請求項３３】 前記スポンジ様担体が、圧縮する前に0.005〜1 g/cm³、好
    ましくは0.01〜0.1 g/cm³の密度を有する、請求項２、３又は３０〜３２のいず
    れかに記載の薬剤。
34. 【請求項３４】 前記担体が封入化されていない、請求項１〜３又は２９〜
    ３３のいずれかに記載の薬剤。
35. 【請求項３５】 前記担体が、錠剤、好ましくは長方形の錠剤である、請求
    項１〜３又は２９〜３４のいずれかに記載の薬剤。
36. 【請求項３６】 前記錠剤が可溶性コーティングされている、請求項３５に
    記載の薬剤。
37. 【請求項３７】 前記担体が、少なくとも１つの活性成分及び／又は添加剤
    を更に含んで成る、請求項１〜３又は２９〜３６のいずれかに記載の薬剤。
38. 【請求項３８】 前記活性成分が、その放出を調節するマトリクス、外皮(s
    hell)、埋込用担体及び／又はその他の担体物質中に含まれる、請求項３８に記
    載の薬剤。
39. 【請求項３９】 前記担体が封入化されている、請求項１〜３、２９〜３３
    、３７又は３８のいずれかに記載の薬剤。
40. 【請求項４０】 圧縮の前に、0.005〜1 g/cm³の密度を有し、場合により少
    なくとも１つの活性成分及び／又は添加剤により処理された、細孔を有する、凍
    結乾燥したスポンジを、場合により離型剤の存在下で、元のサイズの１／２〜１
    ／５０に、好ましくは１／３〜１／３０に圧縮し、そして場合により、胃液中で
    可溶であるカプセルによって包囲化する、請求項１〜３又は２９〜３９のいずれ
    かに記載の薬剤の製造方法。
41. 【請求項４１】 前記の圧縮を、少なくとも１つの過程で、好ましくは少な
    くとも２つの過程で行う、請求項４０に記載の方法。
42. 【請求項４２】 前記の細孔を有するスポンジに、少なくとも１つの活性成
    分のための担体層を与え、その層状錠剤を生産した後に、前記担体層を、予め圧
    縮したスポンジ上に既知の方法で圧縮する、請求項４０又は４１に記載の方法。
43. 【請求項４３】 非経口投与のために、特に滞留移植片として用いられる、
    請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤。
44. 【請求項４４】 栄養補助剤、特にビタミン、ミネラル、脂肪酸及び／又は
    食餌用繊維の栄養補助剤としての、請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤又は請
    求項４０〜４２のいずれかに記載の方法により得られる薬剤の使用。
45. 【請求項４５】 少なくとも１つの、少なくとも部分的に可溶な、好ましく
    は局所的又は全身的効果を有する、薬理学的に活性な成分を投与するための、特
    に活性成分の改変された放出のための、請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤又
    は請求項４０〜４２のいずれかに記載の方法により得られる薬剤の使用。
46. 【請求項４６】 消化管の疾患、特に胃の疾患、例えば胃粘膜炎の治療又は
    予防処置のための、請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤又は請求項４０〜４２
    のいずれかに記載の方法により得られる薬剤の使用。
47. 【請求項４７】 胃内に滞留する期間を有する形での、請求項１〜３のいず
    れかに記載の薬剤又は請求項４０〜４２のいずれかに記載の方法により得られる
    薬剤の使用。
48. 【請求項４８】 パラミロンの局所投与及び／又は非経口投与及び／又は身
    体開口部を介した適用のために、１〜80重量％、好ましくは５〜75重量％のパラ
    ミロンと、20〜99重量％、好ましくは25〜95重量％のその他の担体、すなわちコ
    ラーゲンとを、凍結乾燥した立体的な生体用マトリクスの形で含有する薬剤。