JP2003517828A

JP2003517828A - 非病原性乳酸菌の催眠活性

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Publication number: JP2003517828A
Application number: JP2001546661A
Authority: JP
Inventors: ジェイムズ・エム・クルーガー; マイケル・ジェイ・パブスト; シャンタル・カユラ; マリー−クリスティーヌ・ドゥジヴリー; ドナ・ハートリー
Original assignee: コンパニー・ジェルヴェ・ダノン
Priority date: 1999-12-20
Filing date: 2000-12-20
Publication date: 2003-06-03
Anticipated expiration: 2020-12-20
Also published as: HUP0300025A3; DE60028613D1; US20010051152A1; RU2262943C2; CZ20022483A3; SK10662002A3; EP1251860A1; WO2001045722A9; PL356459A1; PT1251860E; EP1251860B1; AU3161801A; WO2001045722A1; ATE328601T1; ZA200204974B; DK1251860T3; DE60028613T2; BR0016523A; US6444203B2; RU2002119413A

Abstract

(57)【要約】非病原性乳酸菌は、ムラミダーゼ-型酵素による消化に感受性のある細胞壁を有し、この細胞壁はムラミルペプチドと呼ばれるフラグメントを生ずる。直接、または非病原性乳酸菌の消化によるかのいずれかによりムラミルペプチドを摂取することで、睡眠が促され、かつ睡眠の質が改善される。特に、非急速眼球運動睡眠相が増す。非病原性乳酸菌のムラミルペプチド消化生成物により、スーパーオキシドアニオン、およびＩＬ-１βおよびＴＮＦαのサイトカインの、単球における産生が促される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】発明の背景発明の分野本発明は、非病原性乳酸菌および該細菌を含む食品に関する。これらの乳酸菌
の細胞壁はムラミダーゼ型酵素の活性に影響を受ける。該酵素により、ムラミル
ペプチドと呼ばれる細胞壁フラグメントであって、摂取された場合に睡眠の質を
改善する細胞壁フラグメントが生ずる。

【０００２】技術水準今日、多くの人々が睡眠困難を有するか、または不眠症などの睡眠障害に苦し
んでいる。これらの問題を減じるために、ベンゾジアゼピンまたはバルビツレー
トを含む多くの医薬品が開発されている。しかし、これらの製品は薬物依存、昼
間の眠気、記憶喪失、および他の物質、顕著にはアルコールとの相互作用などの
その二次的作用のために、医師の管理下で投与されなければならない。

【０００３】感染症に関する研究から、病原性細菌による感染により、感染した患者に少な
くとも３つの生理反応：免疫反応、発熱、および睡眠変化が引き起こされること
が示されている。宿主中でこれらの反応を媒介するのは、感染の原因である細菌
細胞壁成分、詳細にはムラミルペプチド（およびさらに、グラム陰性細菌におい
てはリポポリサッカライド）である。研究により、スタフィロコッカスアウレ
ウス(Staphylococcus aureus)などの病原性細菌の細胞壁がマクロファージによ
り加水分解されて遊離ムラミルペプチドが生じることが示されている(Johannsen
L. et al., 1994)。

【０００４】ベンゾジアゼピンまたはバルビツレートを含む医薬の二次的作用を回避するた
め、Ｕ．Ｓ．特許４,６９８,３３０には、催眠活性を有する精製ムラミルペプチ
ドに基づく組成物の使用が提案されている。これらのムラミルペプチドの投与に
より非急速眼球運動（ＮＲＥＭ）睡眠と呼ばれる深い睡眠が増すが、それは体温
の上昇をも引き起こし、解熱性化合物の付随投与を必要とする。

【０００５】特許出願ＣＨ６５４３３０Ａ、ＣＮ１１１４２１７ＡおよびＷＯ８８００４３
８Ａには、睡眠を改善する細菌、特に乳酸菌を含む組成物が開示されている。し
かし、これらの文献では、乳酸菌が睡眠の改善にどのように介入しているかは明
らかにされていない。乳酸菌を含むそのような組成物の睡眠への影響ならびに請
求項に記載されている他の利点（エネルギーが高いこと、食欲および消化が進む
こと、リューマチが緩和することなど）は、開示された組成物中に含まれる栄養
素と微量元素の独特のバランスから生じると記載されている。

【０００６】発明の概要発明者等は、乳酸菌などの、感染を引き起こさない非病原性細菌が、睡眠の相
を変化させ得ること、例えばＮＲＥＭの深い睡眠の長さを増すことができること
を見出した。発明者等は、ＮＲＥＭ相を増す乳酸菌は、その細胞壁がムラミダー
ゼ型酵素、例えばリソチームまたはムタノリシンなどの活性に感受性があるもの
であることを特に示した。

【０００７】発明者等は、種々の乳酸菌の細胞壁、特にラクトバシラスガセリ(Lactobaci
llus gasseri)９２２１（ＣＮＣＭＩ−２１３１）、ラクトバシラスアシドフ
ィラス(Lactobacillus acidophilus)９２２３（ＣＮＣＭＩ−２２７４）、ラク
トバシラスアシドフィラス９１７３（ＣＮＣＭＩ−２１３２）、ラクトバシラ
スヘルベティカス(Lactobacillus helveticus)９３４３（ＣＮＣＭＩ−２２７
５）、ストレプトコッカスサーモフィラス(Streptococcus thermophilus)９３
４０（ＣＮＣＭＩ−１５２０）、およびストレプトコッカスサーモフィラス１
００９０（ＣＮＣＭＩ−２２７２）の細胞壁におけるムラミダーゼ、ムタノリシ
ンの作用を研究した。発明者等は、ラクトバシラスアシドフィラス９２２３（
ＣＮＣＭＩ−２２７４）、ラクトバシラスアシドフィラス９１７３（ＣＮＣＭ
Ｉ−２１３２）、ラクトバシラスヘルベティカス９３４３（ＣＮＣＭＩ−２２
７５）、ストレプトコッカスサーモフィラス９３４０（ＣＮＣＭＩ−１５２０
）およびストレプトコッカスサーモフィラス１００９０（ＣＮＣＭＩ−２２７
２）の細胞壁がムタノリシンにより加水分解され、２のフラクション：ムラミル
ペプチドを含む溶解性フラクション、および不溶解性フラクションを生じること
を示した。これに対し、ラクトバシラスガセリ９２２１（ＣＮＣＭＩ−２１３
１）の細胞壁はムタノリシンにより加水分解されず、ムラミルペプチドは遊離し
なかった。ラクトバシラスガセリ９２２１（ＣＮＣＭＩ−２１３１、２４／２
／９９に寄託）をムタノリシンとインキュベートした後では、不溶解性のフラク
ションのみが回収された。

【０００８】その細胞壁がムラミダーゼ型酵素により加水分解される乳酸菌の睡眠への影響
が、２の実験系を試験することにより確認された。１）ヒトの単球を用いるインビトロ実験により、その細胞壁がムタノリシンによ
り加水分解されてムラミルペプチドを含む溶解性フラクションを生じる乳酸菌に
より、単球が強く活性化されて、スーパーオキシドアニオンの産生の増加が誘発
され、および、サイトカインＩＬ−１βおよびＴＮＦαの産生も誘発されること
が示された。スーパーオキシドアニオンは、微生物の死滅に直接関与する、単球
により産生される酸素ラジカルである。サイトカインは、睡眠の調節に関与する
ことが知られているタンパク質炎症媒介因子の一ファミリーである。これらの単
球の活性化の影響が、ラクトバシラスアシドフィラス９２２３、ラクトバシラ
スアシドフィラス９１７３、ラクトバシラスヘルベティカス９３４３、スト
レプトコッカスサーモフィラス９３４０およびストレプトコッカスサーモフ
ィラス１００９０を含むラクトバシラスおよびストレプトコッカスの両方を用い
て確認された。２）ウサギのインビボ実験により、その細胞壁がムタノリシンにより加水分解さ
れてムラミルペプチドを含む溶解性フラクションを生じる乳酸菌が、睡眠相に影
響を与えることが示された。睡眠は、脳波（ＥＥＧ）により分析された。注目す
べきは、そのようなムラミルペプチドがＮＲＥＭ（非急速眼球運動）と呼ばれる
睡眠相を増し、ＲＥＭ（急速眼球運動）と呼ばれる睡眠相を減じたことである。

【０００９】本発明は、非急速眼球運動（ＮＲＥＭ）睡眠相の長さを増すことにより睡眠の
質を改善するいくつかの細菌を開示する。該細菌の他の重要な特徴は、それらが
ヒトにとって非病原性であること、およびその細胞壁がムラミダーゼ型酵素の活
性に、特にムタノリシンの活性に感受性があることである。

【００１０】発明の詳細な記載本発明に開示される乳酸菌は、ラクトバシラス、ストレプトコッカス、ラクト
コッカス、およびビフィドバクテリウムから成る属の中から選択されることがで
きる。細菌は、好ましくは以下の中から選択される乳酸菌である。 −ラクトバシラスアシドフィラス９２２３（ＣＮＣＭＩ−２２７４、３／８／
９９に寄託）；ＤＮ−１１２０８９ −ラクトバシラスアシドフィラス９１７０（ＣＮＣＭＩ−２２７３、３／８／
９９に寄託）；ＤＮ−１１２００１； −ラクトバシラスアシドフィラス９１７３（ＣＮＣＭＩ−２１３２、２４／２
／９９に寄託）； −ラクトバシラスヘルベティカス９３４３；（ＣＮＣＭＩ−２２７５、３／８
／９９に寄託）；ＤＮ−１１９０２８ −ストレプトコッカスサーモフィラス９３４０（ＣＮＣＭＩ−１５２０、３０
／１２／９４に寄託）； −ストレプトコッカスサーモフィラス１００９０（ＣＮＣＭＩ−２２７２、３
／８／９９に寄託）；ＤＮ−００１１４３。

【００１１】他の株も一般的に公的に入手可能である。ＣＮＣＭＩ−２２７４、ＣＮＣＭＩ
−２２７３、ＣＮＣＭＩ−２１３２、ＣＮＣＭＩ−２２７５、ＣＮＣＭＩ−１５
２０、およびＣＮＣＭＩ−２２７２は、the Collection Nationale de Cultures
de Microorganismes, Institut Pasteur, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Par
is Cedex 15, Franceに寄託されている。これらの寄託は、ブダペスト条約の規
定に従ってなされた。

【００１２】本発明は、本発明において単一の株について記載されているが、２またはそれ
以上の乳酸菌株を組み合わせた乳酸菌培養物も含む。本発明は、睡眠の質を改善する乳酸菌を含む栄養補助食品または食品も開示す
る。栄養補助食品は、その細胞壁がムタノリシンの活性に感受性がある乳酸菌株
を含む乳基剤、特に発酵乳から成る。そのような栄養補助食品または食品の摂取
により、睡眠の質が改善される。

【００１３】乳は、様々な動物種の乳から選択される。乳は部分的に、または完全に脱脂さ
れていてもよい。乳基剤には、これらの乳の希釈または濃縮から生じる生成物、
例えば超濾過または透析濾過の保持物などが含まれてよい。乳基剤には、乳食品
のための基剤、またはヨーグルトもしくは発酵乳としての乳混合物など、乳に基
づく媒質が含まれてよい。これらの乳には、ラクトース、ミネラル、ビタミン、
脂肪、水溶性乳固形物、植物エキス、調味料などを追加することができる。

【００１４】別法として、この栄養補助食品または食品は、植物性基質、例えば豆乳、ジュ
ースまたはフルーツパルプなどから得られることもできる。例えば本発明による栄養補助食品または食品は、以下の方法を実施することに
より得られる。：乳基剤に１ｍｌ当たり１０^６〜１０^７のコロニー形成ユニット
を含む少なくとも一の乳酸菌株を接種する。インキュベーション条件は、用いら
れる乳酸菌株またはその培養物によって異なる。例えば、培養物は、ストレプト
コッカスサーモフィラスの株、またはストレプトコッカスサーモフィラスの
少なくとも一の株を含む混合物からなり、最適培養条件は２５〜４４℃にて３時
間〜２４時間行われるものである。培養物がラクトバシラスアシドフィラスも
しくはラクトバシラスヘルベティカスの株、またはラクトバシラスアシドフ
ィラスもしくはラクトバシラスヘルベティカスの少なくとも一の株を含む混合
物から成る場合、最適培養条件は３７〜４４℃にて少なくとも８時間〜１６時間
行われるものである。

【００１５】培養物を接種した乳基剤には、ペプチドＮ３、酵母エキス、抗酸化剤、例えば
システインなど、ビタミン、可溶性繊維、例えばオリゴサッカライドなど、また
は用いられる乳酸菌株の生育を促進するのに一般に用いられている他の基質を追
加することができる。

【００１６】乳酸菌またはそれらを含む栄養補助食品により、ＮＲＥＭ相を増すことにより
、および／またはＲＥＭ相を減らすことにより睡眠の質が改善される。睡眠のＮ
ＲＥＭ相が増すことは、深い睡眠が増すことに対応する。深い睡眠相が増すこと
で、疲労が良好に回復し、昼間の注意力が増し、さらに他の利点が得られる。

【００１７】さらに、非病原性微生物である乳酸菌を投与して、免疫系の過剰反応を誘発す
る危険を伴わずに睡眠の質を改善することができる。乳酸菌は免疫系とポジティ
ブに相互作用するが、病原性細菌により誘発される反応のような、（サイトカイ
ンの過剰産生のような）病的反応を誘発することはない。さらに、睡眠の質を改善するための乳酸菌の使用によっては、バルビツレート
またはベンゾジアゼピンを摂取することに伴う二次的作用は誘発されない。本発明は、本発明による乳酸菌株の性質を示す無制限の例を提供するものであ
る以下の追加的情報を用いてよりよく理解されるであろう。

【００１８】インビトロ実験種々の乳酸菌細胞壁のムタノリシンによる加水分解細胞壁を、定常期の乳酸菌培養物から調製した。細菌細胞を、フレンチプレス
で破壊した。この調製物をドデシル硫酸ナトリウム界面活性剤およびトリプシン
で処理し、タンパク質が除去された細胞壁粗抽出物を得た。乳酸菌からの細胞壁
ペプチドグリカンを次いでストレプトマイセスグロビスポラス(Streptomyces
globisporus)(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO)由来のムタノリシンで消化した。
ペプチドグリカン（５−１０ｍｇ／ｍｌ）は、リン酸バッファー、ｐＨ５．８中
０．１〜０．２５ｍｇのムタノリシンと共に３７℃で２４時間インキュベートし
た。生じた加水分解生成物を遠心分離濃縮装置(Pall Filtron Microsep^TM, Nort
hborough, MA)、および残存高分子量物質から低分子量分子を分けるための１０
ｋＤａのカットオフを有する膜を用いて遠心分離により分離した。

【００１９】試験された細菌は、ラクトバシラスガセリ９２２１、ラクトバシラスアシ
ドフィラス９２２３、ラクトバシラスアシドフィラス９１７３、ラクトバシラ
スヘルベティカス９３４３、ストレプトコッカスサーモフィラス９３４０お
よびストレプトコッカスサーモフィラス１００９０であった。試験された細菌中、５の細菌の細胞壁がムタノリシンにより部分的に加水分解
され、ムラミルペプチドを含む溶解性フラクション、およびムタノリシンの活性
に抵抗性のある不溶解性フラクションが回収された。ラクトバシラスガセリ９２２１（ＣＮＣＭＩ−２１３１、２４／２／９９に
寄託）の細胞壁だけはムタノリシンにより加水分解されず、ムラミルペプチドが
遊離しなかった。

【００２０】ヒト単球におけるスーパーオキシドアニオンおよびサイトカインの産生の、乳酸
菌による誘導単球を健康なヒトの成人から単離した。赤血球を高分子量デキストランを用い
て沈降した。単核細胞をヒストパック勾配（Sigma-Aldrich)により好中球から分
離した。単球およびリンパ球両方を含む単核細胞を、インキュベーター中３７℃
、５％ＣＯ_２にて、変更されたEarleの塩溶液培地中、約０．５×１０^６単球／
ｍｌに対応する１．５×１０^６細胞／ｍｌの密度で培養した。単球によるＴＮＦ
αの産生を測定するべく設計された実験では、単球を０．２％熱−不活性化（５
６℃、３０分）タイプＡＢヒト血清の存在下で培養した。

【００２１】細菌ラクトバシラスガセリ９２２１、ラクトバシラスアシドフィラス９２
２３、ラクトバシラスアシドフィラス９１７３、ラクトバシラスヘルベティ
カス９３４３、ストレプトコッカスサーモフィラス９３４０およびストレプト
コッカスサーモフィラス１００９０。乳酸菌のペレットを懸濁液に入れ、１ｍ
ｇ／ｍｌ（Ｌｏｗｒｙタンパク質アッセイにより測定）の細菌タンパク質濃度と
した。０．１〜３００ｎｇ／ｍｌの細菌タンパク質を含む希釈懸濁液を試験した
。

【００２２】ホルボールミリステートアセテート（ＰＭＡ）を用いて４０分間３７℃、イン
キュベーター中５％ＣＯ_２にて単球を活性化させた後、単球によるスーパーオキ
シドアニオン（Ｏ_２）の産生をシトクロムｃ法により測定した。スーパーオキシ
ドアニオンによるシトクロムの還元を、分光光度計で５５０ｎｍにて測定した。
０．０２１μＭ^−１の吸光度を用いて、産生されたスーパーオキシドアニオンの
量を産出した。

【００２３】サイトカインの産生は、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着法）により、単球培養
培地のサンプルにおいて測定した。ＩＬ−１β用ＥＬＩＳＡキット（BioSource
International, Carmarillo, CA)およびＴＮＦα用ＥＬＩＳＡキット(Genzyme D
iagnostics, Cambridge, MA)を用いた。

【００２４】図１はラクトバシラスアシドフィラス９２２３、ラクトバシラスアシドフ
ィラス９１７３、ラクトバシラスヘルベティカス９３４３、ストレプトコッカ
スサーモフィラス９３４０、およびストレプトコッカスサーモフィラス１０
０９０によりヒトの単球が強く活性化されて、スーパーオキシドアニオンおよび
ＩＬ−１βの産生が誘導され得たことを示す。これに対し、その細胞壁がムタノ
リシンの活性に感受性がないラクトバシラスガセリ９２２１によっては、ヒト
の単球において弱い活性しか誘導されなかった。図２は、ＩＬ−１βの産生とＴ
ＮＦαの産生が密接に関連したことを示す（Ｒ^２＝０．９５）。

【００２５】インビボ実験ウサギにおける、乳酸菌細胞壁の睡眠改善作用インビトロ試験でポジティブな感受性を示した乳酸菌株の一つ、ラクトバシラ
スアシドフィラス９２２３と、インビトロ試験でネガティブであった一の乳酸
菌株ラクトバシラスガセリ９２２１を用いて、ウサギを用いた睡眠実験を行っ
た。試験される乳酸菌の細胞壁は静脈注射により投与した。

【００２６】試験動物は、３．５〜４．５ｋｇの体重の大人のオスのニュージーランド白ウ
サギ(Myrtle Rabbitery, Thompson Station, TN)であった。ウサギを手術して、その心電図（ＥＥＧ）を記録するシステムを埋め込んだ。
該システムは、動物に自由に動くことを許容するものであった。別々の日に、ビ
ヒクル、または試験されるべき物質の一つのいずれかを各動物に投与した。それ
ゆえ、各動物はそれ自身が対照となる。末端の耳静脈を静脈内注射のために用い
た。注射容積は０．１ｍｌ／ｋｇであった。

【００２７】記録を解析し、目覚めの３段階：覚醒相、ＮＲＥＭ相（低周波脳電図、高振幅
脳電図、および非常に深い眠りを特徴付ける体の不動）、およびＲＥＭ相（高周
波脳電図、低振幅脳電図、および浅い眠りを特徴付ける時折の体の動き）により
分類した。各相の長さは、記録された時間を１時間当たりの割合として表した。

【００２８】図３は、０．１ｍｇ／ｋｇおよび１．０ｍｇ／ｋｇの投与量にて投与されたラ
クトバシラスアシドフィラス９２２３の細胞壁が、ＮＲＥＭ相を増すことによ
り、およびＲＥＭ相を減らすことにより睡眠に影響することを示す。ＮＲＥＭ相
の増加は注射後２時間の間に始まり、試験中持続した。これに対し、図４はラク
トバシラスガセリ９２２１の細胞壁が睡眠に有意に影響しなかったことを示す
。

【００２９】治療のための投与本発明の対象である物質は、ヒトを含む哺乳動物に経口で有効に投与される。
有効量は個人、個人の状態または状況、所望される効果などにより大きく異なる
であろう。乳酸菌の細胞壁のムラミダーゼ型酵素による消化は、口腔から始まっ
て胃および腸へと続く消化管を通じて自然に起こるので、経口投与はヒトを含む
哺乳動物に有効である。別法として、予め消化されたムラミルペプチドが、経口
にて、注射により、または坐薬により投与されてよい。注射はＩＶまたはＩＭの
いずれであってもよい。好ましくは、投与の簡便のために、および患者の快適の
ために、投与は経口経路によるものである。

【００３０】活性因子、ムラミルペプチドは水溶性である。乳酸菌そのものが投与される場
合、乳酸菌はいずれかの医薬上許容されるキャリア中に提供されてよく、好まし
くは乳または発酵乳製品を含む食品に対する成分または添加物として提供される
。一の好ましい具体例では、乳酸菌または予め消化されたムラミルペプチドがヨ
ーグルト製品中に提供される。ヨーグルトは調味されていてもされていなくても
よく、本明細書中に提供される活性因子を除き、ヨーグルトそのものの性質は本
発明の態様を構成しない。乳酸菌は、１日当たり１ミリグラム−１グラム／キロ
グラムの範囲の量で都合よく経口投与される。睡眠の改善は複雑な機構であり、
処置される患者の状況が有効投与量に大きく影響するであろう。投与のためのビ
ヒクルは、投与が経口である場合、ムラニルペプチド消化酵素を含まない限り、
またはさもなくば、単球によるスーパーオキシドアニオンの産生ならびにサイト
カインの産生を刺激する本発明の活性因子の活性を妨げない限り、実質上制限さ
れない。

【００３１】有効量の決定に関する別法として、１ｍｇ／ｍｌ乳酸菌タンパク質懸濁液の有
効投与量は、０．０１−１００ｍｌ／ｋｇの範囲である。本発明は一般的に、かつ、特定の具体例を引用して開示されている。実施例は
、特に示さない限り、制限を意図するものではなく、またそのように解釈される
べきではない。特に非病原性乳酸菌、ビヒクルまたはキャリア、濃度または懸濁
、または調製に関する他の態様の同定に関して、当業者には別法が考えられるで
あろう。これらの別法は、前記の請求の範囲の記載により除外されない限り、本
発明の範囲内にある。

【図面の簡単な説明】

本明細書中の図を参考にして本発明の理解を深めることができるが、これらの
図は本発明の理解に欠かせないものではない。

【図１】図１は、本発明による細菌懸濁液と接触させた後の単球培養物上
清において測定されたスーパーオキシドアニオンおよびＩＬ−１βの量を図示し
たものである。

【図２】図２は、単球を細菌細胞に曝した後で測定されたＩＬ−１βの濃
度とＴＮＦαの濃度の間の相関を示す図である。

【図３】図３は、２の異なるレベルの濃度の本発明による細胞壁物質を注
射した後の各時間における、ＮＲＥＭ相およびＲＥＭ相に関して費やされた時間
の割合についての図表を示す。

【図４】図４は、図３で図示したものと類似する図表を示すが、ここでは
、細菌細胞壁物質は、ムラミルペプチドを含む溶解性フラクションを提供するム
ラミダーゼタイプの酵素による消化に影響を受けないものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者シャンタル・カユラフランス、エフ−75116パリ、リュ・スポンティーニ20番 (72)発明者マリー−クリスティーヌ・ドゥジヴリーフランス、エフ−92350ル・プレシー−ロバンソン、アヴニュ・エスティエンヌ・ドルヴ18番 (72)発明者ドナ・ハートリーアメリカ合衆国76016テキサス州アーリントン、ミルウッド・コート6210番Ｆターム(参考） 4B018 LB07 MD20 MD86 ME14 MF01 MF12 MF13 4C087 AA01 AA02 BC56 BC57 BC58 BC59 BC61 CA09 MA52 NA14 ZA06

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】哺乳動物の睡眠の質を改善する方法であって、有効量の非病
原性乳酸菌を動物に投与することを含む方法。
【請求項２】乳酸菌の細胞壁がムラミダーゼ酵素の活性に感受性がある、
請求項１記載の方法。
【請求項３】非病原性乳酸菌の細胞壁がムタノリシンにより加水分解され
て、ムラミルペプチドを含む溶解性フラクションが提供される、請求項１記載の
方法。
【請求項４】哺乳動物の単球によるスーパーオキシドアニオンの産生が誘
発される、請求項１記載の方法。
【請求項５】哺乳動物がヒトである、請求項１記載の方法。
【請求項６】哺乳動物の非急速眼球運動睡眠相を増す方法であって、該哺
乳動物に有効量の非病原性乳酸菌を投与することを含む方法。
【請求項７】哺乳動物に有効量の非病原性乳酸菌を投与することにより哺
乳動物の単球が活性化され、スーパーオキシドアニオン、ＩＬ−１βまたはＴＮ
Ｆαの少なくとも一つが産生される方法。
【請求項８】哺乳動物の非急速眼球運動睡眠相を増す方法であって、有効
量の非病原性乳酸菌細胞壁を投与することを含む方法。
【請求項９】細胞壁タンパク質がムラミルペプチドの形態である、請求項
８記載の方法。
【請求項１０】非病原性乳酸菌が、ラクトコッカス属、ラクトバシラス属
、ストレプトコッカス属、およびビフィドバクテリウム属の中の一つである、請
求項１、６、７、または８のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１】非病原性乳酸菌が、ラクトバシラスヘルベティカス、ラ
クトバシラスデルブリュッキイ亜種、ブルガリカス、ラクトバシラスアシド
フィラス、ラクトバシラスカセイ、ラクトバシラスファーメンタム、および
ストレプトコッカスサーモフィラスから成る群から選択される、請求項１記載
の方法。
【請求項１２】乳酸菌が、ＣＮＣＭＩ−２２７４、ＣＮＣＭＩ−２１３２
、ＣＮＣＭＩ−２２７５、ＣＮＣＭＩ−１５２０、ＣＮＣＭＩ−２２７２、およ
びそれらの混合物から成る群から選択される、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】乳酸菌が、経口摂取可能な食品の構成成分として提供され
る、請求項１記載の方法。
【請求項１４】食品が、非急速眼球運動睡眠相を増すのに有効な量の非病
原性乳酸菌を含む、哺乳動物により経口摂取可能な食品。
【請求項１５】食品が乳製品である、請求項１４記載の食品。
【請求項１６】乳製品が発酵乳製品である、請求項１５記載の食品。
【請求項１７】発酵乳製品がヨーグルトである、請求項１６記載の食品。
【請求項１８】非急速眼球運動睡眠相を増すのに有効な量の非病原性乳酸
菌および医薬上許容されるキャリアを含む、睡眠の質を改善するための組成物。
【請求項１９】乳酸菌の細胞壁がムラミダーゼ酵素の活性に感受性がある
、請求項１８記載の組成物。
【請求項２０】非病原性乳酸菌が、ＣＮＣＭＩ−２２７４、ＣＮＣＭＩ−
２２７３、ＣＮＣＭＩ−２１３２、ＣＮＣＭＩ−２２７５、ＣＮＣＭＩ−１５２
０およびＣＮＣＭＩ−２２７２から成る群から選択される、請求項１８記載の組
成物。
【請求項２１】ＣＮＣＭＩ−２２７４、ＣＮＣＭＩ−２２７３、ＣＮＣＭ
Ｉ−２１３２、ＣＮＣＭＩ−２２７５、ＣＮＣＭＩ−１５２０およびＣＮＣＭＩ
−２２７２から成る群から選択される生物学的に純粋な細菌株を含む物質から成
る組成物。