BG63963B1 - Закваска за пробиотичен хранителен продукт и приложението му като имуномодулиращо средство - Google Patents

Abstract

Продуктите имат отлични органолептични качества, показват ясно изразено имуномодулиращо, по-специално имуностимулиращо действие. Ще намерят приложение като добавка към всекидневното меню за подпомагане лечението на заболявания или увреждания на лица, при които е налице придобит имунен дефицит с различен произход, по-специално при туберкулозно болни деца, както и за оказване на профилактично и протективно действие при клинично здрави деца или рискови контингенти, като подложени на облъчване с йонизиращи лъчения и на химиотерапия. Млечнокиселиятпродукт се получава чрез заквасване на пастьоризирано пълномаслено или обезмаслено мляко със закваска, представляваща монокултура на щам Lactobacillus delbruueckii subsp. bulgarucus LBB.B120 или монокултура на щам Streptococcus thermophilus LBB.T60 или смесена култура - LBB.BY 120/60, състояща се от двата щама. Изобретението се отнася и до закваска за получаване на млечнокисели продукти и по-специално на посочените продукти.

Description

Изобретението се отнася до пробиотичен хранителен продукт с имуномодулиращо действие, който може да намери приложение като добавка към ежедневното меню за подпомагане на лечението на заболявания или увреждания на лица, при които е налице придобит имунен дефицит с различен произход и за оказване на профилактично и протективно действие при рискови контингенти. Изобретението включва и нова закваска за получаване на млечнокисели продукти, по-специално за получаване на млечнокисел продукт с имуномодулиращо действие.

Предшестващо състояние на техниката

През последните години пазарът предлага все повече т.нар. функционални храни -храни, включващи компоненти, които оказват ясно изразено профилактично или терапевтично въздействие върху човешкия организъм или друго благоприятно въздействие върху физическото и/или психическото състояние на човека. В употреба навлезнаха и т.нар. пробиотици. Пробиотикът може също да бъде и функционална храна, по-специално съдържаща живи полезни микроорганизми, хранителна добавка или хранителен продукт, които, включени в диетата, подобряват интестиналния баланс на организма. Също така пробиотикът може да окаже полезно въздействие чрез продуциране и отделяне в интестиналния тракт на полезен ензим, например лактаза, която често намалява или липсва при възрастните хора.

Най-много изследвания и разработки в тази насока са правени с млечнокисели бактерии, по-специално тези, които са присъщи на човешката храносмилателна система, Lactobacillus, Bifidobacterium Streptococcus или Enterococcus, поотделно или като смесена култура.

Съгласно изследванията на много автори пробиотиците могат да повлияват бла гоприятно лактозния интолеранс, да понижават нивото на серумния холестерол, да стимулират имунната система, да оказват контрол върху инфекции, да действат като антибиотици, да потискат тумори и да предпазват от рак на дебелото черво и на пикочния мехур чрез реализиране на здравословен баланс на чревната микрофлора /Schenbach S., “Probiotics: Functionality and commercial status”, Biotechnology Advances, Vol. 16, No 3, pp. 581-608, 1998/. Други автори предупреждават, че в много случаи липсват достатъчно статистически достоверни експериментални данни за здравословния ефект на комерсиалните пробиотици и препоръчват извършването на по-прецизно охарактеризиране на щамовете и техните ефекти.

Основните технически проблеми в тази насока се състоят в подбирането на такива щамове млечнокисели бактерии, с които да могат да се получават млечнокисели продукти, които да са приемливи като храна, т.е. с подходящи органолептични качества и същевременно да оказват ясно изразено имуномодулиращо въздействие при придобити имунодефицитни състояния.

Техническа същност на изобретението

Съгласно изобретението е създаден пробиотичен хранителен продукт, който представлява млечнокисел продукт, получен чрез заквасване на пастьоризирано пълномаслено или обезмаслено мляко с 2% закваска, представляваща монокултура на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LBB.B120 или монокултура на щам Streptococcus thermophilus LBB.T60 или смесена култура - LBB.BY 120/60, състояща се от двата щама - щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, щам LBB.B120 и щам Streptococcus thermophilus LBB.T60. Храната може да се използва в течна форма или да се подложи на лиофилизиране. Сухата лиофилна форма е за предпочитане, поради по-високата си трайност, възможността за стандартизиране и други.

Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus щам LBB.B120 има регистрационен № 2483 в НБПМКК и е познат от патент BG 61712, като компонент на закваска за българско кисело мляко, в комбинация с щамове Streptococcus thermophilus.

Streptococcus thermophilus LBB.T60 e щам от LBB колекцията на фирма “Ел Би Булгарикум”, с регистрационен № 2790 в НБПМКК.

Продуктите съгласно изобретението имат отлични органолептични качества, особено този, получен със смесена закваска. Проведените изпитания показват ясно изразено имуномодулиращо действие, по-специално имуностимулиращо действие, както при моделните изпитания, така и при приемане от болни от туберкулоза деца и от здрави деца. Подбраните щамове са особено подходящи за получаване на пробиотична функционална храна с благоприятни ефекти върху гастро-интестиналния тракт и върху други органи и системи на човешкия организъм. Високият резултат по отношение на преживяемостта след облъчване е особено предимство на тази функционална храна, тъй като тя може да се включва в храненето на онкоболни, подложени на химиотерапия и лъчетерапия за благоприятно повлияване не само на имунната система, но и на целия организъм.

Устойчивостта на закваската при условията на лиофилилното сушене също е особено предимство, поради това, че едновременно с възможността да се получи стандартизиран продукт, се осигурява достатъчно висока концентрация на живи клетки в готовия за консумация хранителен продукт.

Примерни изпълнения на изобретението

Пример 1. Получаване на млечнокисел продукт

Чиста култура Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus щам LBB.B120, поддържана в MRS бульон, се посява на твърда хранителна среда и се изолират подходящи колонии. Следва трикратно препосяване в обезΙθ маслено мляко, предварително стерилизирано при налягане 0,1 МРа за 5 min и охладено след това до температура на заквасване 43 ± 1°С. Чиста култура щам Streptococcus thermophilus LBB.T60, поддържана в М17 бульон, се пося15 ва на твърда хранителна среда, изолират се подходящи колонии, следва трикратно препосяване в обезмаслено мляко, стерилизирано, както е посочено по-горе. От подготвените щамове Lactobacillus delbrueckii subsp.

bulgaricus щам LBB.B120 и Streptococcus thermophilus LBB.T60 се създава смесена закваска LBB.BY 120/60, като монокултурите се смесват в съотношение 1:1. Изчислено като 2% количество от смесената закваска се ино25 кулира в пастьоризирано пълномаслено обезмаслено мляко. Термостатира се на 43 ± 1“С в продължение на 3 до 3,5 h. Охлажда се до 10°С. Съхранява се в хладилник при 4-6°С до 20 дни или след охлаждане до Ю°С се подла20 га на лиофилизационно сушене.

Характеристика на течен и сух продукт, получен със закваска LBB.BY 120/60.

Показатели

Течен Сух

Пълномаслен Обезмаслен Пълномаслен

1. Сухо вещество, %	11,00	95,46	97,24
2. Общ белтък, %	3,00	35,59	28,85
3. Масленост, %	3,30	1,83	30,07
4. Лактоза, %	2,80	37,80	24,02
5. Галактоза, %	0,55	6,87	4,79
6. Глюкоза, %	0,00	0,00	0,00
7. L(+)млечна киселина, %	0,40	4,62	3,32
8. D(-)млечна киселина, %	0,20	1,95	1,20
9. Титруема киселинност, “Т	95,00	90,00	92,00
10. pH	4,05	4,44	4,35
11. Пепел, %	0,75	7,50	5,63
12. Брой клетки (cfu/g)
Lactobacillus bulgaricus	не по-малко от 1	х 106 в течния продукт
	не по-малко от 1	х 105 в сухия продукт
Streptococcus thermophilus	не по-малко от 1	х 107

Пример 2. Имуностимулиращият ефект на млечнокиселия продукт е установен при моделни изследвания с опитни животни мъжки мишки-хибриди BDF1, които са подложени на облъчване с кобалтов гама- източник с мощност на дозата 101 rad/min. Скринирани са 12 щама млечнокисели бактерии, вкл. Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus щам LBB.B120 и Streptococcus thermophilus LBB.T60, и смесена закваска LBB.BY 120/60. При изпитване на течните форми на щамове В 120, Т 60 и тяхната комбинация е установено, че те влияят благотворно върху възстановяването на кръвотворенето. При третирането на животните с щам В 120 се наблюдава по-слабо изразена левкопения и по-бързо възстановяване на левкоцитите, а прилагането на комбинацията от двата щама води до по-бързо и отчетливо възстановяване на лимфоцитите.

По отношение на интегралния показател преживяемост, от течните форми само щам В 120 показа добър ефект. Третирането с лиофилните форми повишава преживяемостта, както при отделните щамове, така и при комбинацията, като ефектът на последната е най-висок.

Пример 3. Клинично изпитване

Млечнокиселият продукт, получен със смесената закваска LBB.BY 120/60, се изпитва в клинични условия при деца с различни форми на първична туберкулоза по следния начин. Млечнокиселият продукт се предлага като хранителна добавка към ежедневното меню на 33 деца с различни форми на туберкулоза и контролна група от 18 здрави деца, в количество 180 g, два пъти дневно. Проследени са следните клинични показатели: пълна кръвна картина, диференциално броене на клетки в периферна кръв, скорост на утаяване на еритроцити, имуноглобулини в серум, имуноглобулин Г (ИгГ), имуноглобулин А (ИгА), имуноглобулин М (ИгМ), секреторен имуноглобулин А в слюнка и серум, фагоцитарен индекс и фагоцитарно число.

Получените резултати показват при болни деца следните имунологични ефекти. Имуномодулиращ ефект по отношение на ИгГ и ИгМ, имуностимулиращ ефект по отношение на секреторен ИгА, имуностимулиращ ефект по отношение на фагоцитоза и фагоцитарна активност. При контролната група здрави деца се получава имуностимулиращ ефект по отношение секреторен ИгА, имуностимулиращ ефект по отношение фагоцитоза и фагоцитарна активност, имуностимулиращ ефект по отношение лимфоцити в периферна кръв.

Проведените изследвания доказаха, че продуктът има значително проявен имуномодулиращ и имуностимулиращ ефект, както при болните от туберкулоза деца, така и при здравите деца.

Патентни претенции

Claims (6)

1. Закваска за получаване на млечнокисел продукт, характеризираща се с това, , че се състои от Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus щам LBB.B120 (№ 2483 в. НБПМКК) и Streptococcus thermophilus; LBB.T60 (№ 2790 в НБПМКК) в съотношение 1:1 до 1:100.

2. Пробиотичен хранителен продукт с имуномодулиращо действие при придобити имунодефицитни състояния, характеризиращ* се с това, че представлява пастьоризирано обезмаслено или пълномаслено мляко, заквасено с монокултура на щам Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus щам LBB.B120 (№ 2483 в НБПМКК) или монокултура на Streptococcus thermophilus LBB.T60 (№ 2790 в НБПМКК), или със смесена култура от двата щама, в течна или суха форма, и съдържащ живи клетки Lactobacillus bulgaricus, не по-малко от 1 х 10⁶ cfu/g в течния продукт, и не по-малко от 1 х 10⁵ cfu/g в сухия продукт, и Streptococcus thermophilus, не помалко от 1 х 10’ cfu/g.

3. Приложение на пробиотичен хранителен продукт съгласно претенция 2, в случаи на имунодефицитно състояние при деца с различна форма на първична туберкулоза.

4. Приложение на пробиотичен хранителен продукт съгласно претенция 2, в случаи на имунодефицитно състояние вследствие на облъчване с йонизиращи лъчения.

5. Приложение на пробиотичен хранителен продукт съгласно претенция 2, в случаи на имунодефицитно състояние вследствие на химиотерапия.

6. Приложение на пробиотичен хранителен продукт съгласно претенция 2, в случаи на имунодефицитно състояние вследствие на вирусно заболяване.