RU2262943C2 - Сомногенная активность непатогенных молочно-кислых бактерий - Google Patents

Сомногенная активность непатогенных молочно-кислых бактерий Download PDF

Info

Publication number
RU2262943C2
RU2262943C2 RU2002119413/15A RU2002119413A RU2262943C2 RU 2262943 C2 RU2262943 C2 RU 2262943C2 RU 2002119413/15 A RU2002119413/15 A RU 2002119413/15A RU 2002119413 A RU2002119413 A RU 2002119413A RU 2262943 C2 RU2262943 C2 RU 2262943C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cncm
lactic acid
bacteria
acid bacteria
cell walls
Prior art date
Application number
RU2002119413/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2002119413A (ru
Inventor
Джеймс М. КРЮГЕР (US)
Джеймс М. КРЮГЕР
Майкл Дж. ПАБСТ (US)
Майкл Дж. ПАБСТ
Шанталь КАИЮЭЛА (FR)
Шанталь КАИЮЭЛА
Мари-Кристин ДЕЖИВРИ (FR)
Мари-Кристин Деживри
Донна ХАРТЛИ (US)
Донна ХАРТЛИ
Original Assignee
Компани Жервэ Данон
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Компани Жервэ Данон filed Critical Компани Жервэ Данон
Publication of RU2002119413A publication Critical patent/RU2002119413A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2262943C2 publication Critical patent/RU2262943C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C11/00—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions
    • A23C11/02—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins
    • A23C11/10—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing or not lactose but no other milk components as source of fats, carbohydrates or proteins
    • A23C11/103—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing or not lactose but no other milk components as source of fats, carbohydrates or proteins containing only proteins from pulses, oilseeds or nuts, e.g. nut milk
    • A23C11/106—Addition of, or treatment with, microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1238—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using specific L. bulgaricus or S. thermophilus microorganisms; using entrapped or encapsulated yoghurt bacteria; Physical or chemical treatment of L. bulgaricus or S. thermophilus cultures; Fermentation only with L. bulgaricus or only with S. thermophilus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L11/00—Pulses, i.e. fruits of leguminous plants, for production of food; Products from legumes; Preparation or treatment thereof
    • A23L11/60—Drinks from legumes, e.g. lupine drinks
    • A23L11/65—Soy drinks
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/065—Microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/46—Streptococcus ; Enterococcus; Lactococcus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/853—Lactobacillus
    • Y10S435/854—Lactobacillus acidophilus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/885—Streptococcus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицине. Способ улучшения качества сна у млекопитающих включает введение им эффективного количества непатогенных молочнокислых бактерий, причем клеточные стенки указанных бактерий гидролизуют мутанолизином, с получением растворимой фракции, содержащей мурамилпептиды. Прием внутрь мурамилпептидов, непосредственно или путем переваривания непатогенных молочнокислых бактерий, способствует сну и улучшает качество сна, в часности, увеличивая фазу сна с небыстрыми движениями глаз. Изобретение позволяет улучшить восстановление при усталости, не вызывает патологических реакций, таких как сверхпродукция цитокинов, а также не дает побочных эффектов, как при приеме барбитуратов и других снотворных. 6 н. и 10 з.п. ф-лы, 4 ил.

Description

Область изобретения
Настоящее изобретение касается непатогенных молочнокислых бактерий и пищевых продуктов, содержащих данные бактерии. Клеточные стенки данных молочнокислых бактерий восприимчивы к действию ферментов типа мурамидазы. Данные ферменты продуцируют фрагменты клеточных стенок, называемые мурамилпептидами, которые при приеме внутрь улучшают качество сна.
Уровень техники
В наше время многие люди трудно засыпают или страдают от нарушений сна, таких как бессонница. Для решения этих проблем разработано много фармацевтических продуктов, содержащих бензодиазепины или барбитураты. Однако данные продукты следует принимать под наблюдением врача из-за их вторичных эффектов, таких как лекарственная зависимость, сонливость в дневное время, потеря памяти и взаимодействие с другими веществами, особенно алкоголем.
Исследование инфекционных заболеваний показало, что заражение патогенными микробами вызывает, по меньшей мере, три физиологических реакции у инфицированного субъекта: иммунный ответ, лихорадку и изменение сна. Медиаторы данных реакций в организме-носителе являются компонентами клеточных стенок бактерий, ответственных за инфицирование, в частности мурамилпептидами (а также липополисахаридами в грамотрицательных бактериях). Исследование показало, что клеточные стенки патогенных бактерий, таких как Staphylococcus aureus, гидролизуются макрофагами с образованием свободных мурамилпептидов (Johannsen L. и др., 1994).
Чтобы избежать вторичных эффектов лекарственных препаратов, содержащих бензодиазепины или барбитураты, в патенте США 4698330 предлагается использование композиций на основе очищенных мурамилпептидов, которые обладают сомногенной активностью. Хотя введение таких мурамилпептидов ведет к увеличению глубины сна, называемого сном с небыстрыми движениями глаз (NREM), оно вызывает также повышение температуры тела, что требует сопутствующего введения жаропонижающих соединений.
В патентных заявках СН 654330 A, CN 1114217 А и WO 8800438 А описаны композиции, содержащие бактерии, особенно молочнокислые бактерии, которые улучшают сон. Однако данные документы не раскрывают, как молочнокислые бактерии участвуют в улучшении сна. Указано, что влияние на сон, а также другие заявленные преимущества (больше энергии, лучше аппетит и пищеварение, облегчение ревматизма и др.) таких композиций, содержащих молочнокислые бактерии, являются результатом специфического баланса питательных веществ и питательных микровеществ, содержащихся в описанных композициях.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Понимание данного изобретения можно расширить, ссылаясь на имеющиеся здесь чертежи, которые не являются необходимыми для понимания данного изобретения.
На фигуре 1 графически показаны количества супероксидного аниона и IL-1β, определенные в супернатанте культуры моноцитов после контакта с бактериальной суспензией, соответствующей данному изобретению.
На фигуре 2 графически показана корреляция между концентрациями IL-1β и TNFα, определенными после воздействия на моноциты бактериальными клетками.
На фигуре 3 графически представлен процент времени, проведенного в NREM-фазе и REM-фазе, как функция времени (часы) после инъекции двух различных концентраций материала клеточных стенок, соответствующего данному изобретению.
На фигуре 4 представлен график, аналогичный графику фигуры 3, где материал стенок бактериальных клеток невосприимчив к расщеплению под действием ферментов типа мурамидазы с обеспечением растворимой фракции, содержащей мурамилпептиды.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Заявители данного изобретения обнаружили, что непатогенные бактерии, которые не вызывают заражения, такие как молочнокислые бактерии, могут изменять фазы сна, например увеличивать продолжительность глубокого NREM-сна. Они отмечают, что молочнокислые бактерии, которые ведут к увеличению фазы NREM-сна, представляют собой бактерии, клеточная стенка которых чувствительна к действию ферментов типа мурамидазы, таких как лизоцим или мутанолизин.
Заявители данного изобретения изучали действие мурамидазы, мутанолизина на клеточные стенки различных молочнокислых бактерий, в частности на клеточные стенки Lactobacillus gasseri 9221 (CNCM I-2131), Lactobacillus acidophilus 9223 (CNCM I-2274), Lactobacillus acidophilus 9173 (CNCM I-2132), Lactobacillus helveticus 9343 (CNCM I-2275), Streptococcus thermophilus 9340 (CNCM I-1520) и Streptococcus thermophilus 10090 (CNCM I-2272). Они заметили, что клеточные стенки Lactobacillus acidophilus 9223 (CNCM I-2274), Lactobacillus acidophilus 9173 (CNCM I-2132), Lactobacillus helveticus 9343 (CNCM I-2275), Streptococcus thermophilus 9340 (CNCM I-1520) и Streptococcus thermophilus 10090 (CNCM I-2272) гидролизуются мутанолизином, давая две фракции: растворимую фракцию, содержащую мурамилпептиды, и нерастворимую фракцию. В противоположность этому, клеточные стенки Lactobacillus gasseri 9221 (CNCM I-2131) не гидролизовались мутанолизином, и мурамилпептиды не высвобождались. После инкубации Lactobacillus gasseri 9221 (CNCM I-2131, депонирован 24/2/99) с мутанолизином могла быть получена только нерастворимая фракция.
Эффекты молочнокислых бактерий, клеточные стенки которых гидролизуются ферментами типа мурамидазы, на сон оценивали посредством изучения двух экспериментальных систем:
1) Эксперименты in vitro с моноцитами человека показали, что молочнокислые бактерии, клеточные стенки которых гидролизуются мутанолизином, давая растворимую фракцию, содержащую мурамилпептиды, способны сильно активировать моноциты, индуцируя повышенную продукцию супероксидного аниона, а также индуцируя продукцию цитокинов IL-1β и TNFα. Супероксидный анион представляет собой продуцируемый моноцитами радикал кислорода, который непосредственно включен в поражение микробов. Цитокины являются семейством белковых медиаторов воспаления, которые, как известно, включены в регуляцию сна. Данные эффекты активации моноцитов наблюдались и с Lactobacillus, и со Streptococcus, включая Lactobacillus acidophilus 9223, Lactobacillus acidophilus 9173, Lactobacillus helveticus 9343, Streptococcus thermophilus 9340 и Streptococcus thermophilus 10090.
2) Эксперименты in vivo на кроликах показывали, что молочнокислые бактерии, клеточные стенки которых гидролизуются мутанолизином, давая растворимую фракцию, содержащую мурамилпептиды, оказывают влияние на фазы сна. Сон анализировали по электроэнцефалограммам (ЭЭГ). Особенно такие мурамилпептиды увеличивали фазу сна, называемую NREM (небыстрые движения глаз), и уменьшали фазу сна, называемую REM (быстрые движения глаз).
Настоящее изобретение описывает несколько бактерий, которые улучшают качество сна, увеличивая продолжительность фазы сна с небыстрыми движениями глаз (NREM). Другим важным свойством бактерий является то, что они непатогенны для людей и их клеточные стенки чувствительны к действию ферментов типа мурамидазы, в частности к действию мутанолизина.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Молочнокислые бактерии, описанные в данном изобретении, могут быть выбраны из родов, включающих Lactobacillus, Streptococcus, Lactococcus и Bifidobacterium. Предпочтительными бактериями являются молочнокислые бактерии, выбранные из следующих:
- Lactobacillus acidophilus 9223 (CNCM I-2274, депонирован 3/8/99); DN-112089;
- Lactobacillus acidophilus 9170 (CNCM I-2273, депонирован 3/8/99); DN-112001;
- Lactobacillus acidophilus 9173 (CNCM I-2132, депонирован 24/2/99);
- Lactobacillus helveticus 9343 (CNCM I-2275, депонирован 3/8/99); DN-119028;
- Streptococcus thermophilus 9340 (CNCM I-1520, депонирован 30/12/94);
- Streptococcus thermophilus 10090 (CNCM I-2272, депонирован 3/8/99); DN-001143.
Как правило, общедоступны другие штаммы. CNCM I-2274, CNCM I-2273, CNCM I-2132, CNCM I-2275, CNCM I-1520 и CNCM I-2272 депонированы в Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, Institut Pasteur, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex 15, France. Данные депозиты сделаны согласно условиям Будапештского договора.
Настоящее изобретение включает также культуры молочнокислых бактерий, которые объединяют два или более штаммов молочнокислых бактерий, как описано в данном изобретении для одного штамма.
Настоящее изобретение описывает также диетические добавки или пищевые продукты, содержащие молочнокислые бактерии, которые улучшают качество сна. Диетические добавки включают молочную основу, в частности подвергнутое брожению молоко, содержащее штаммы молочнокислых бактерий, клеточные стенки которых чувствительны к действию мутанолизина. Прием внутрь таких диетических добавок или пищевых продуктов будет улучшать качество сна.
Молоко выбирают из молока различных видов животных. Молоко может быть частично или полностью обезжиренным. Молочная основа может включать продукты, полученные разбавлением или концентрированием такого молока, такие как, например, остаток ультрафильтрации или диафильтрации. Молочная основа может включать среду на основе молока, такую как основы для молочных пищевых продуктов, или молочные смеси для йогурта, или подвергнутое брожению молоко. В это молоко можно добавить лактозу, минералы, витамины, жиры, водорастворимые молочные твердые вещества, экстракты растений, вкусовые добавки и др.
В другом варианте данные диетические добавки или пищевые продукты можно также получить из растительного субстрата, такого как соевое молоко, сок или фруктовая мякоть.
Например, диетические добавки или пищевые продукты согласно данному изобретению получают, осуществляя следующий процесс: молочную основу засевают, по меньшей мере, одним штаммом молочнокислой бактерии с содержанием 106-107 колониеобразующих единиц на мл. Условия инкубации варьируют в соответствии с использованным штаммом или культурой молочнокислой бактерии. Например, если культура состоит из штамма Streptococcus thermophilus или смеси, содержащей, по меньшей мере, один штамм Streptococcus thermophilus, оптимальны условия культивирования при 25-44°С в течение 3-24 час. Если культура состоит из штаммов Lactobacillus acidophilus или Lactobacillus helveticus, или смеси, содержащей, по меньшей мере, один штамм Lactobacillus acidophilus или Lactobacillus helveticus, оптимальны условия культивирования при 37-44°С в течение по меньшей мере 8-16 час.
Молочную основу, засеянную культурой, можно дополнить пептидом N3, дрожжевым экстрактом, антиоксидантами, такими как цистеин, витаминами, растворимыми волокнами, такими как олигосахариды, или другими субстратами, которые применяют в настоящее время для поощрения роста используемых штаммов молочнокислых бактерий.
Молочнокислые бактерии или диетические добавки, которые их содержат, позволяют улучшать качество сна, увеличивая NREM-фазу и/или уменьшая REM-фазу. Увеличение NREM-фазы сна соответствует увеличению продолжительности глубокого сна. Увеличение фазы глубокого сна ведет к лучшему восстановлению при усталости, большей живости днем и другим преимуществам.
Кроме того, так как молочнокислые бактерии являются непатогенными микроорганизмами, их можно вводить для улучшения качества сна без риска активации чрезмерной реакции иммунной системы. Молочнокислые бактерии положительно взаимодействуют с иммунной системой, не вызывая патологических реакций (таких как сверхпродукция цитокинов), подобных реакциям, провоцируемым патогенными бактериями.
Кроме того, применение молочнокислых бактерий для улучшения качества сна не дает вторичных эффектов, связанных с приемом барбитуратов или бензодиазепинов.
Настоящее изобретение будет легче понять при помощи примеров, иллюстрирующих свойства штаммов молочнокислых бактерий, соответствующих данному изобретению.
Эксперименты in vitro
Гидролиз клеточных стенок различных молочнокислых бактерий мутанолизином
Клеточные стенки получали из культур молочнокислых бактерий в стационарной фазе. Бактериальные клетки разрушали под прессом French press. Данный препарат обрабатывали детергентом додецилсульфатом натрия и трипсином, получая сырой экстракт депротеинизированных клеточных стенок. Затем расщепляли пептидогликан клеточной стенки из молочнокислых бактерий при помощи мутанолизина из Streptomyces globisporus (Sigma-Aldrich, St.Louis, МО). Пептидогликан 5-10 мг/мл инкубировали с 0,1-0,25 мг мутанолизина при 37°С в фосфатном буфере, рН 5,8, в течение 24 часов. Полученный гидролизат отделяли центрифугированием, используя центрифужные концентраторы (Pall Filtron Microsep™, Northborough, MA) и мембрану с порогом 10 кДа для отделения молекул с низкой молекулярной массой от остального высокомолекулярного материала.
Исследованы бактерии Lactobacillus gasseri 9221, Lactobacillus acidophilus 9223, Lactobacillus acidophilus 9173, Lactobacillus helveticus 9343, Streptococcus thermophilus 9340 и Streptococcus thermophilus 10090.
Клеточные стенки пяти исследованных бактерий частично гидролизовали мутанолизином, делая возможным выделение растворимой фракции, содержащей мурамилпептиды, и нерастворимой фракции, устойчивой к действию мутанолизина.
Только клеточные стенки Lactobacillus gasseri 9221 (CNCM I-2131, депонирован 24/2/99) не гидролизовались мутанолизином и не высвобождали мурамилпептиды.
Индуцирование молочнокислыми бактериями продукции супероксидного аниона и цитокинов в моноцитах человека
Моноциты выделяли из здоровых взрослых людей. Осаждали эритроциты высокомолекулярным декстраном. Моноядерные клетки отделяли от нейрофилов посредством градиента Histopaque (Sigma-Aldrich). Мононуклеарные клетки, которые содержали моноциты и лимфоциты, культивировали при плотности 1,5×106 клеток/мл, что примерно соответствует 0,5×106 моноцитов/мл, в модифицированной среде солевого раствора Эрла в инкубаторе при 37°С с 5% CO2. В экспериментах, предназначенных для измерения продукции TNFα моноцитами, моноциты культивировали в присутствии 0,2% инактивированной нагреванием (56°С, 30 мин) сыворотки человека типа АВ.
Исследованы бактерии Lactobacillus gasseri 9221, Lactobacillus acidophilus 9223, Lactobacillus acidophilus 9173, Lactobacillus helveticus 9343, Streptococcus thermophilus 9340 и Streptococcus thermophilus 10090. Гранулы молочнокислых бактерий представляли в виде суспензии, получая концентрацию бактериальных белков 1 мг/мл (определяют, исследуя белок по Лоури). Исследовали разбавленные суспензии, содержащие от 0,1 до 300 нг/мл бактериальных белков.
Продукцию моноцитами супероксидного аниона (О2) определяли методом с цитохромом с после активации моноцитов форболмиристатацетатом (РМА) в течение 40 мин при 37°С в инкубаторе с 5% CO2. Восстановление цитохрома супероксидным анионом определяли спектрофотометрически при 550 нм. Для расчета количества продуцированного супероксидного аниона использовали коэффициент экстинции 0,021 мкМ-1.
Продукцию цитокинов определяли способом ELISA (Enzyme Link Immunosorbent Assay) на образцах среды культуры моноцитов. Использовали наборы ELISA для IL-lβ (BioSource International, Carmarillo, СА) и TNFα (Genzyme Diagnostics, Cambridge, MA).
На фигуре 1 показано, что Lactobacillus acidophilus 9223, Lactobacillus acidophilus 9173, Lactobacillus helveticus 9343, Streptococcus thermophilus 9340 и Streptococcus thermophilus 10090 способны сильно активировать моноциты человека, с индуцированием продукции супероксидного аниона и IL-1β. В противоположность этому, Lactobacillus gasseri 9221, клеточная стенка которого нечувствительна к действию мутанолизина, индуцирует только слабую активность в моноцитах человека. На фигуре 2 показано, что продукции IL-1β и TNFα тесно коррелируют (R2=0,95).
Эксперименты in vivo
Активность клеточных стенок молочнокислых бактерий по улучшению сна у кроликов
Эксперименты по исследованию сна проводили на кроликах, используя один из штаммов молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophilus 9223, который давал положительную реакцию в тесте in vitro, и один штамм Lactobacillus gasseri 9221, который давал отрицательную реакцию в тесте in vitro. Исследуемые клеточные стенки вводили путем внутривенной инъекции.
Исследуемые животные представляли собой взрослых самцов новозеландских белых кроликов (Myrtle Rabbitery, Thompson Station, TN) весом от 3,5 до 4,5 кг.
Кроликов оперировали, имплантируя систему регистрации электроэнцефалограмм (ЭЭГ). Данная система позволяла животным двигаться без стеснения. В отдельные дни исследовали каждое животное, получившее либо носитель, либо одно из исследуемых веществ. Таким образом, каждое животное служило в качестве собственного контроля. Для внутривенной инъекции использовали маргинальную ушную вену. Объем инъекции составлял 0,1 мл/кг.
Данные интерпретировали и классифицировали в соответствии с тремя состояниями бодрствования: фаза пробуждения, NREM-фаза (низкочастотная электроэнцефалограмма, электроэнцефалограмма с высокой амплитудой и отсутствие движений тела, что характеризует глубокий хороший сон) и REM-фаза (высокочастотная электроэнцефалограмма, электроэнцефалограмма с низкой амплитудой и случайные движения тела, что характеризует парадоксальный сон). Продолжительность каждой фазы выражали как процент регистрируемого времени в час.
На фигуре 3 показано, что клеточные стенки Lactobacillus acidophilus 9223, введенные при дозах 0,1 мг/кг и 1,0 мг/кг, влияют на сон, увеличивая NREM-фазу и уменьшая REM-фазу. Увеличение NREM-фазы начиналось на втором часу после инъекции и продолжалось на протяжении всего исследования. В противоположность этому, на фигуре 4 показано, что клеточные стенки Lactobacillus gasseri 9221 не оказывали существенного влияния на сон.
Терапевтическое введение
Рассматриваемый материал данного изобретения эффективно вводят млекопитающим, включая людей, перорально. Эффективные количества будут сильно меняться в зависимости от индивидуума, состояния или симптомов пациента, требуемого результата и др. Пероральный прием эффективен для млекопитающих, включая людей, так как переваривание клеточных стенок молочнокислых бактерий ферментами типа мурамидазы естественно происходит в пищеварительном тракте, начинаясь в полости рта и продолжаясь в желудке и кишечнике. Иначе, предварительно переваренные мурамилпептиды можно вводить перорально, путем инъекции или в виде суппозитория. Инъекция может быть внутривенной или внутримышечной. Из-за простоты введения и удобства пациента предпочтителен пероральный способ введения.
Активный агент (мурамилпептиды) растворим в воде. Молочнокислые бактерии, если их вводят как таковые, можно представить в любом фармацевтически приемлемом носителе и предпочтительно как элемент или добавку к пищевому продукту, предпочтительно включающему молоко или подвергнутые брожению молочные продукты. В одном предпочтительном варианте молочнокислые бактерии или предварительно расщепленные мурамилпептиды готовят в йогуртовом продукте. Йогурт может иметь или не иметь вкусовые добавки, и природа самого йогурта, безопасная для находящегося в нем активного агента, не является аспектом данного изобретения. Молочнокислые бактерии полезно вводить перорально в количестве от 1 мг до 1 г/кг веса тела в день. Улучшение сна имеет сложный механизм, и состояние подлежащего лечению пациента будет оказывать влияние на эффективную дозу. Носитель для введения, если введение производят перорально, по существу неограничен при условии, что он не содержит ферментов, расщепляющих мурамилпептиды, или, иначе, не блокирует активность активного агента данного изобретения по стимуляции продукции супероксидного аниона моноцитами, а также продукции цитокинов.
При другом способе определения эффективных количеств эффективная дозировка 1 мг/мл суспензии белков молочнокислых бактерий составляет величину в диапазоне 0,01-100 мл/кг.
Данное изобретение описано в общем виде и со ссылкой на конкретные варианты. Подразумевается, что примеры не являются и не должны толковаться как ограничивающие, если только это специально не указано. У специалистов в данной области будут возникать альтернативы, в частности, в отношении идентификации непатогенных молочнокислых бактерий, разбавителей или носителей, концентраций или суспензий или других аспектов получения. Такие альтернативы входят в объем данного изобретения, если они не исключены при изложении пунктов формулы изобретения, представленной ниже.

Claims (16)

1. Способ улучшения качества сна у млекопитающих, включающий введение им эффективного количества непатогенных молочно-кислых бактерий, причем указанные бактерии выбраны из группы, состоящей из CNCM I-2274, CNCM I-2273, CNCM I-2132, CNCM I-2275, CNCM I-1520, CNCM I-2272 и их смесей, а клеточные стенки указанных бактерий гидролизуют мутанолизином, с получением растворимой фракции, содержащей мурамилпептиды.
2. Способ по п.1, в котором клеточные стенки молочно-кислых бактерий чувствительны к действию ферментов типа мурамидазы.
3. Способ по п.1, который индуцирует продукцию супероксидных анионов моноцитами указанного млекопитающего.
4. Способ по п.1, в котором указанное млекопитающее является человеком.
5. Способ содействия фазе сна с небыстрыми движениями глаз у млекопитающего, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества непатогенных молочно-кислых бактерий, причем указанные бактерии выбраны из группы, состоящей из CNCM I-2274, CNCM I-2273, CNCM I-2132, CNCM I-2275, CNCM I-1520, CNCM I-2272 и их смесей, а клеточные стенки указанных бактерий гидролизуют мутанолизином, с получением растворимой фракции, содержащей мурамилпептиды.
6. Способ содействия фазе сна с небыстрыми движениями глаз у млекопитающего, включающий введение эффективного количества клеточных стенок непатогенных молочно-кислых бактерий, причем указанные клеточные стенки получены из бактерий, выбранных из группы, состоящей из CNCM I-2274, CNCM I-2273, CNCM I-2132, CNCM I-2275, CNCM I-1520, CNCM I-2272 и их смесей, а указанные клеточные стенки гидролизуют мутанолизином с получением растворимой фракции, содержащей мурамилпептиды.
7. Способ по одному из пп.1, 5 или 6, в котором указанные непатогенные молочно-кислые бактерии принадлежат одному из родов Lactococcus, Lactobacillus, Streptococcus и Bifidobacterium.
8. Способ по п.1, в котором указанные непатогенные молочно-кислые бактерии выбраны из группы, состоящей из Lactobacillus helveticus, Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus fermentum и Streptococcus thermophilus.
9. Способ по п.1, в котором указанные молочно-кислые бактерии являются составной частью пищевого продукта для перорального употребления.
10. Пищевой продукт, перорально потребленный внутрь млекопитающим, причем указанный пищевой продукт включает непатогенные молочно-кислые бактерии в количестве, эффективном для содействия фазе сна с небыстрыми движениями глаз, при этом указанные бактерии выбраны из группы, состоящей из CNCM I-2274, CNCM I-2273, CNCM I-2132, CNCM I-2275, CNCM I-1520, CNCM I-2272 и их смесей, а клеточные стенки указанных бактерий гидролизуют мутанолизином, с получением растворимой фракции, содержащей мурамилпептиды.
11. Пищевой продукт по п.10, причем указанный продукт является молочным продуктом.
12. Пищевой продукт по п.11, в котором указанный молочный продукт является подвергнутым брожению молочным продуктом.
13. Пищевой продукт по п.12, в котором указанный молочный продукт является йогуртом.
14. Композиция для улучшения качества сна, включающая непатогенные молочно-кислые бактерии в количестве, эффективном для содействия фазе сна с небыстрыми движениями глаз, и фармацевтически приемлемый носитель, причем указанные бактерии выбраны из группы, состоящей из CNCM I-2274, CNCM I-2273, CNCM I-2132, CNCM I-2275, CNCM I-1520, CNCM I-2272 и их смесей, а клеточные стенки указанных бактерий гидролизуют мутанолизином с получением растворимой фракции, содержащей мурамилпептиды.
15. Композиция по п.14, в которой указанные непатогенные молочно-кислые бактерии выбраны из группы, состоящей из CNCM I-2274, CNCM I-2273, CNCM I-2132, CNCM I-2275, CNCM I-1520 и CNCM I-2272 и их смесей.
16. Композиция веществ, включающая биологически чистый бактериальный штамм, выбранный из группы, состоящей из CNCM I-2274, CNCM I-2273, CNCM I-2132, CNCM I-2275, CNCM I-1520 и CNCM I-2272 и их смесей, и фармацевтически приемлемый носитель.
RU2002119413/15A 1999-12-20 2000-12-20 Сомногенная активность непатогенных молочно-кислых бактерий RU2262943C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/466,768 US6444203B2 (en) 1999-12-20 1999-12-20 Administering bacteria to improve sleep
US09/466,768 1999-12-20

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2002119413A RU2002119413A (ru) 2004-02-27
RU2262943C2 true RU2262943C2 (ru) 2005-10-27

Family

ID=23853027

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2002119413/15A RU2262943C2 (ru) 1999-12-20 2000-12-20 Сомногенная активность непатогенных молочно-кислых бактерий

Country Status (19)

Country Link
US (1) US6444203B2 (ru)
EP (1) EP1251860B1 (ru)
JP (1) JP4527922B2 (ru)
AT (1) ATE328601T1 (ru)
AU (1) AU3161801A (ru)
BR (1) BR0016523A (ru)
CA (1) CA2394802A1 (ru)
CZ (1) CZ20022483A3 (ru)
DE (1) DE60028613T2 (ru)
DK (1) DK1251860T3 (ru)
ES (1) ES2266023T3 (ru)
HU (1) HUP0300025A3 (ru)
MX (1) MXPA02006116A (ru)
PL (1) PL202465B1 (ru)
PT (1) PT1251860E (ru)
RU (1) RU2262943C2 (ru)
SK (1) SK10662002A3 (ru)
WO (1) WO2001045722A1 (ru)
ZA (1) ZA200204974B (ru)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2785809B1 (fr) * 1998-11-18 2001-01-12 Gervais Danone Sa Selection et utilisations de souches de bacteries lactiques modulatrices de l'immunite non-specifique
TW200533299A (en) * 2004-03-31 2005-10-16 Calpis Co Ltd Functional food for improving endogenous rhythm of melatonin secretion, and functional food for improving circadian rhythm
US20150147298A1 (en) * 2006-07-24 2015-05-28 CortControl, Inc. Sleep enhancement with cortisol reduction medical food
EP2110028A1 (en) * 2008-04-15 2009-10-21 Nestec S.A. Bifidobacterium longum and hippocampal BDNF expression
AU2014221272B2 (en) * 2008-11-03 2016-01-21 Société des Produits Nestlé S.A. A nutritional composition comprising probiotics and improving sleep patterns
AU2009319257B2 (en) * 2008-11-03 2014-10-09 Société des Produits Nestlé S.A. A nutritional composition comprising probiotics and improving sleep patterns
FR2938552B1 (fr) 2008-11-19 2010-12-03 Gervais Danone Sa Souche hypocholesterolemiante de lactobacillus delbrueckii
JP5923238B2 (ja) * 2010-07-07 2016-05-24 アサヒグループホールディングス株式会社 迷走神経活性化剤
WO2014064488A1 (en) * 2012-10-25 2014-05-01 Compagnie Gervais Danone Streptococcus thermophilus strains for treating helicobacter pylori infection
CN106132424A (zh) * 2014-03-25 2016-11-16 株式会社益力多本社 睡眠质量改善剂
JP6127169B2 (ja) * 2016-02-15 2017-05-10 三基商事株式会社 睡眠改善剤
JP7154473B2 (ja) * 2017-05-31 2022-10-18 学校法人順天堂 疲労回復用および／または疲労蓄積予防用組成物
MA51307A (fr) 2017-12-19 2021-03-31 Gervais Danone Sa Compositions laitières fermentées et procédés de préparation de celles-ci
CN111297915B (zh) * 2019-04-12 2021-11-23 首都医科大学附属北京友谊医院 治疗帕金森病快速眼动期睡眠行为障碍的益生菌组合物、制剂及用途
CA3146927A1 (en) * 2019-08-09 2021-02-18 Fanny LARRERE Fermented plant-based probiotic compositions and processes of preparing the same
CA3146915A1 (en) * 2019-08-09 2021-02-18 Fanny LARRERE Fermented compositions and processes of preparing the same
JP6873291B1 (ja) 2020-02-05 2021-05-19 雪印メグミルク株式会社 睡眠促進用組成物及び組成物を含む食品、医薬品、飼料
CN113854457A (zh) * 2021-09-18 2021-12-31 山东绿丰生态农业股份有限公司 一种助睡眠促消化樱桃酵素固体饮品及其制备方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4110476A (en) * 1977-01-10 1978-08-29 Johnson/Rhodes Cultured Foods, Inc. Preparation of liquid and frozen yogurt products
CH654330A5 (en) 1980-01-31 1986-02-14 Sp Kt Bjuro Dezi Process for the preparation of a biological product for stimulating vitality of humans and animals
US4624853A (en) * 1983-02-07 1986-11-25 S. C. Johnson & Son, Inc. Instant yogurt food product
US4698330A (en) 1983-06-27 1987-10-06 President & Fellows Of Harvard College Somnogenic compositions and method of use
DE3624010A1 (de) 1986-07-16 1988-01-28 Sen Wilhelm Kanne Arznei- bzw. heilmittel zur behandlung des ganzheitlichen menschlichen organismus
US4837036A (en) * 1987-05-22 1989-06-06 The Pro-Mark Companies, Inc. Low fat thin-bodied yogurt product and method
US5716615A (en) 1992-02-10 1998-02-10 Renata Maria Anna Cavaliere Vesely Dietary and pharmaceutical compositions containing lyophilized lactic bacteria, their preparation and use
CN1114217A (zh) 1994-06-23 1996-01-03 南京肉类联合加工厂 生物活性口服液
DE69420397T2 (de) * 1994-06-29 1999-12-23 Societe Des Produits Nestle S.A., Vevey Fermentiertes Futtermittel
AUPM864894A0 (en) 1994-10-07 1994-11-03 Borody, Thomas Julius Treatment of bowel-dependent neurological disorders
WO1996020607A1 (fr) * 1995-01-02 1996-07-11 Compagnie Gervais Danone Ferment lactique, et son utilisation pour la preparation de produits anti-diarrheiques
FR2771600B1 (fr) * 1997-11-28 2000-06-09 Gervais Danone Co Preparation de produits alimentaires par fermentation d'un melange de jus de soja et d'hydrolysat cerealier par streptococcus thermophilus
FR2793257B1 (fr) * 1999-05-06 2001-07-27 Gervais Danone Sa Bacteries lactiques a proprietes anxiolytiques, et leurs utilisations

Also Published As

Publication number Publication date
PL356459A1 (en) 2004-06-28
DK1251860T3 (da) 2006-10-16
AU3161801A (en) 2001-07-03
CZ20022483A3 (cs) 2004-08-18
ATE328601T1 (de) 2006-06-15
BR0016523A (pt) 2002-09-24
SK10662002A3 (sk) 2005-06-02
RU2002119413A (ru) 2004-02-27
CA2394802A1 (en) 2001-06-28
EP1251860B1 (en) 2006-06-07
HUP0300025A3 (en) 2004-12-28
US6444203B2 (en) 2002-09-03
DE60028613D1 (de) 2006-07-20
MXPA02006116A (es) 2004-08-23
ZA200204974B (en) 2005-10-31
JP4527922B2 (ja) 2010-08-18
EP1251860A1 (en) 2002-10-30
JP2003517828A (ja) 2003-06-03
ES2266023T3 (es) 2007-03-01
PT1251860E (pt) 2006-10-31
HUP0300025A2 (en) 2003-05-28
WO2001045722A1 (en) 2001-06-28
US20010051152A1 (en) 2001-12-13
WO2001045722A9 (en) 2002-09-12
DE60028613T2 (de) 2007-05-31
PL202465B1 (pl) 2009-06-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2262943C2 (ru) Сомногенная активность непатогенных молочно-кислых бактерий
AU779414B2 (en) Lactobacillus strains preventing diarrhoea pathogenic bacteria
JP3186202B2 (ja) 親生物
RU2378370C2 (ru) Штамм молочнокислой бактерии для лечения воспаления при воспалительном заболевании кишечника, компонент, эффективный для лечения язвы, способ лечения воспаления при воспалительном заболевании кишечника, продукт (варианты) и композиция (варианты)
NZ248056A (en) A lactobacillus acidophilus strain and a pharmaceutical composition containing it
CN101374533A (zh) 利用选择的乳酸杆菌减少婴儿腹痛
RU2522282C2 (ru) Применение штамма вifidobacterium для получения композиции, предназначенной для профилактики и/или лечения проявлений аллергического типа
CN101328468B (zh) 抗过敏的乳酸菌
US6887465B1 (en) Lactobacillus strains capable of preventing diarrhoea caused by pathogenic bacteria and rotaviruses
JPH10309178A (ja) ビフィズス菌を有効成分とする抗アレルギー剤および醗酵食品
JP4112021B2 (ja) 乳酸菌を用いた免疫賦活剤
US20100158882A1 (en) Immunomodulating probiotic lactic acid bacteria
KR100575022B1 (ko) 인터루킨-18 유도제
CN111743158B (zh) 一种具有增强免疫功能的益生菌片剂及其制备方法
CN111685255A (zh) 一种增强免疫功能的益生菌固体饮料及其制备方法
JP2004277381A (ja) 免疫機能調節剤および免疫機能調節食品
EA000283B1 (ru) Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791, b.longum b379m, b.breve 79-119, b.infantis 73-15, b.adolescentis г7513 для приготовления кисломолочных продуктов лечебно-диетического питания, неферментированных пищевых продуктов и бактерийных препаратов
RU2215028C1 (ru) Штамм bifidobacterium bifidum 792, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов
MXPA01008976A (en) Lactobacillus strains preventing diarrhoea pathogenic bacteria
BG63963B1 (bg) Закваска за пробиотичен хранителен продукт и приложението му като имуномодулиращо средство

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20111221