JP2003515590A5 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
（抗腫瘍特性および抗脈管形成特性を有するクルクミンアナログ）
（関連出願の相互参照）
本出願は、１９９９年１２月３日に出願された米国特許仮出願番号６０／１６８，９１３（これは、その全体が本明細書中で参考として援用される）の利益を主張する。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、癌の処置に有用な化合物に関し、そして詳細には、抗腫瘍特性および抗脈管形成特性を示す化合物、ならびにこのような化合物を使用するための方法に関する。
【０００３】
（発明の背景）
組織因子（ＴＦ）は、４２〜４７ｋＤａの推定分子量を有する、沈降性の（ｓｅｄｉｍｅｎｔａｂｌｅ）膜内レセプタータンパク質である。腫瘍周辺のフィブリン沈着（これは、多くの型のヒト癌に特徴的である）は、腫瘍細胞、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）および腫瘍関連血管内皮細胞（ＶＥＣ）における、強力な凝血原様組織因子（ＴＦ）の局所発現の結果である。癌患者に一般的な血栓性の合併症の病状におけるＴＦ発現の重要性に加えて、ＴＦ発現を腫瘍の脈管形成、増殖および転移の調節に結び付ける証拠が増えている。例えば、インビボでの脈管形成は、ＴＦアンチセンスによって阻害される。さらに、ＴＦを過剰発現するようトランスフェクトされたマウス腫瘍細胞は、血管透過性因子（ＶＥＧＦ）の転写および翻訳を増強する。反対に、ＴＦアンチセンスをトランスフェクトした腫瘍細胞は、ＶＥＧＦの転写および翻訳を減少する。ＶＥＧＦは、ＶＥＣに特異的に作用し、血管透過性、内皮細胞増殖および脈管形成を促進し、そしてＶＥＣにおけるＴＦ活性の発現を誘導することが示されており、そして単球、骨芽細胞およびＶＥＣに対して走化性である。癌細胞におけるＴＦおよびＶＥＧＦの発現は、低酸素条件下でさらに増強される。従って、ＴＦが、癌におけるＶＥＧＦ合成、およびそれ故、腫瘍脈管形成における調節に関与する鍵分子であることを示唆する証拠が存在する。
【０００４】
癌の処置に有用な抗脈管形成特性を示す化合物は、それほど調査されてこなかった。クルクミン（ジフェルロイルメタン（ｄｉｆｅｒｕｌｏｙｌｍｅｔｈａｎｅ））（カレー粉中の芳香族の黄色色素）、ウコンおよびカラシは、抗脈管形成特性、抗腫瘍特性および抗腫瘍促進特性を有することが公知である。さらに、クルクミンは、多くの他の治療特性を示し、これらには、抗酸化特性、抗血栓特性、抗炎症特性、抗コレステロール特性および抗糖尿病特性が挙げられる。かなり注目されてきた２つの他の化合物は、ゲニステイン（ダイズ由来イソフラボンチロシンキナーゼＣインヒビター）およびリノミド（ｌｉｎｏｍｉｄｅ）（キノリン−３−カルボキサミド）である。特定のフラボノイド（例えば、アピゲニン）は、ゲニステインよりも、細胞増殖およびインビトロ脈管形成のより強力なインヒビターであることが示されている。癌治療における使用のための抗腫瘍特性および抗脈管形成特性を示す化合物について、当該分野における必要性が依然存在する。
【０００５】
（発明の要旨）
本発明は、癌細胞においておよび腫瘍環境下の血管内皮細胞において、ＴＧ発現およびＶＥＧＦ発現を阻害する、クルクミンアナログのグループを提供することである。この阻害によって、正常な血管内皮細胞に対する高レベルの毒性を示すことなく、腫瘍の脈管形成および増殖をブロックする。本発明の抗脈管形成および抗腫瘍化合物は、癌のような、脈管形成阻害から利益を受ける任意の状態の処置に有用であり得る。
【０００６】
１つの局面において、本発明は、以下の式（Ｉ）の化合物を提供する。
【０００７】
別の局面において、本発明は、薬学的に受容可能なキャリア中に以下の式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物を含む、薬学的処方物を提供する。
【０００８】
第３の局面において、本発明は、被験体における癌性組織を処置する方法を提供し、この方法は、この被験体に、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物の有効量を投与する工程を包含する。好ましくは、この化合物は、薬学的に受容可能なキャリア中で投与される。有効量は、好ましくは、この癌性組織においてＶＥＧＦおよびＴＦの産生を阻害するに十分の量である。
【０００９】
（発明の詳細な説明）
本発明は、以下（その好ましい実施形態を含む）でより完全に記載される。しかし、本発明は、多くの異なる形態で具体化され得、そして本明細書中に示される実施形態に限定されると解釈されるべきではなく；むしろ、これらの実施形態は、本開示が綿密かつ完全であり、そして本発明の範囲を当業者に完全に伝えるように提供される。
【００１０】
本明細書中で使用される場合、用語「化合物」は、固相、液相、または気相であろうと、そして粗製混合物、または精製物および単離物であろうと、化学的な物質をいうように意図される。用語「アルキル」、「アルケン」および「アルコキシ」は、それぞれ直鎖状および分枝状のアルキル、アルケン、およびアルコキシを含む。用語「低級アルキル」は、Ｃ１−Ｃ４アルキルをいう。用語「アルコキシ」とは、例えば、式−ＯＲまたは−ＲＯＲ¹の酸素置換アルキルをいい、ここで、ＲおよびＲ¹は、各々独立してアルキルから選択される。用語「置換アルキル」および「置換アルケン」とは、それぞれ、１つ以上の干渉しない置換基（例えば、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル（例えば、シクロプロピル、シクロブチルなど）；アセチレン；シアノ；アルコキシ（例えば、メトキシ、エトキシなど）；低級アルカノイルオキシ（例えば、アセトキシ）；ヒドロキシ；カルボキシル；アミノ；低級アルキルアミノ（例えば、メチルアミノ）；ケトン；ハロ（例えば、クロロまたはブロモ）；フェニル；置換フェニルなどであるが、これらに限定されない）で置換されたアルキルおよびアルケンをいう。用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、ヨウ素および臭素を含む。
【００１１】
「アリール」は、各々５または６個の炭素原子の、１つ以上の芳香族環を意味する。複数のアリール環は、ナフチルのように縮合され得るか、またはビフェニルのように非縮合であり得る。アリール環はまた、１つ以上の環状炭化水素、ヘテロアリール、または複素環式環と縮合され得るか、または非縮合であり得る。
【００１２】
「置換アリール」は、１つ以上の干渉しない基を置換基として有するアリールである。
【００１３】
「ヘテロアリール」は、１〜４個のＮ、Ｏ、またはＳ原子、あるいはその組み合わせを含むアリール基であり、このヘテロアリール基は、必要に応じて、Ｃ１−６アルキル、−ＣＦ₃、フェニル、ベンジル、もしくはチエニルで炭素原子もしくは窒素原子を置換されるか、またはこのヘテロアリール基の炭素原子は、酸素原子と一緒になってカルボニル基を形成するか、あるいはこのヘテロアリール基は、必要に応じてフェニル環と縮合される。ヘテロアリール環はまた、１つ以上の環状炭化水素、複素環式、アリール、またはヘテロアリール環と縮合され得る。ヘテロアリールとしては、１つのヘテロ原子を有する５員のヘテロアリール（例えば、チオフェン、ピロール、フラン）；１，２位または１，３位に２つのヘテロ原子を有する５員のヘテロアリール（例えば、オキサゾール、ピラゾール、イミダゾール、チアゾール、プリン）；３つのヘテロ原子を有する５員のヘテロアリール（例えば、トリアゾール、チアジアゾール）；３つのヘテロ原子を有する５員のヘテロアリール；１つのヘテロ原子を有する６員のヘテロアリール（例えば、ピリジン、キノリン、イソキノリン、フェナントリン（ｐｈｅｎａｎｔｈｒｉｎｅ）、５，６−シクロヘプテノピリジン）；２つのヘテロ原子を有する６員のヘテロアリール（例えば、ピリダジン、シンノリン、フタラジン、ピラジン、ピリミジン、キナゾリン）；３つのヘテロ原子を有する６員のヘテロアリール（例えば、１，３，５−トリアジン）；および４つのヘテロ原子を有する６員のヘテロアリールが挙げられるがこれらに限定されない。
【００１４】
「置換ヘテロアリール」は、１つ以上の干渉しない基を置換基として有するヘテロアリールである。
【００１５】
「複素環」または「複素環式」は、不飽和または芳香族特性を有するかまたは有さず、そして少なくとも１つの環原子が炭素ではない、５、６または７原子の１つ以上の環を意味する。好ましくは、ヘテロ原子は、硫黄、酸素、および窒素を含む。複数の環は、キノリンまたはベンゾフランにおけるように、縮合され得る。
【００１６】
「置換複素環」は、干渉しない置換基から形成される１つ以上の側鎖を有する複素環である。
【００１７】
「干渉しない置換基」は、安定な化合物をもたらす基である。適切な干渉しない置換基または基としては、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル、Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₁₀アルキニル、Ｃ₁−Ｃ₁₀アルコキシ、Ｃ₇−Ｃ₁₂アラルキル、Ｃ₇−Ｃ₁₂アルカリール、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルケニル、フェニル、置換フェニル、トルオイル、キシレニル、ビフェニル、Ｃ₂−Ｃ₁₂アルコキシアルキル、Ｃ₇−Ｃ₁₂アルコキシアリール、Ｃ₇−Ｃ₁₂アリールオキシアルキル、Ｃ₆−Ｃ₁₂オキシアリール、Ｃ₁−Ｃ₆アルキルスルフィニル、Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキルスルホニル、−（ＣＨ₂）_m−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）（ここで、ｍは１〜８である）、アリール、置換アリール、置換アルコキシ、フルオロアルキル、複素環式基、置換複素環式基、ニトロアルキル、−ＮＯ₂、−ＣＮ、−ＮＲＣ（Ｏ）−（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、Ｃ₂−Ｃ₁₀チオアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、−ＯＨ、−ＳＯ₂、＝Ｓ、−ＣＯＯＨ、−ＮＲ₂、カルボニル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）−ＣＦ₃、−Ｃ（Ｏ）−ＣＦ₃、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ₂、−（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）−Ｓ−（Ｃ₆−Ｃ₁₂アリール）、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ₆−Ｃ₁₂アリール）、−（ＣＨ₂）_m−Ｏ−（ＣＨ₂）_m−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）（ここで、各ｍは１〜８である）、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ₂、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ₂、−ＳＯ₂ＮＲ₂、−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ₂、−ＮＲＣ（Ｓ）ＮＲ₂、それらの塩などが挙げられるがこれらに限定されない。各Ｒは、本明細書中で使用される場合、Ｈ、アルキルまたは置換アルキル、アリールまたは置換アリール、アラルキル、あるいはアルカリールである。
【００１８】
本発明は、以下の式の化合物またはその薬学的に受容可能な塩に関し：
【００１９】
【化８】

ここで、
Ｘ _１ は、Ｃ−ＹまたはＮであり；
Ｙは、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、ＣＦ _３ 、アルキル、置換アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アルカリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボン酸、カルボン酸エステル、カルボキサミド、ニトロ、シアノ、アジド、アルキルカルボニル、アシル、およびトリアルキルアンモニウムからなる群より選択され；
Ｘ _２ は、Ｃ−Ｒ _２ またはＮであり；
Ｘ _３ は、Ｃ−Ｒ _６ またはＮであり；
Ｒ _１ 〜Ｒ _８ は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、ＣＦ _３ 、アルキル、置換アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アルカリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボン酸、カルボン酸エステル、カルボキサミド、ニトロ、シアノ、アジド、アルキルカルボニル、アシル、およびトリアルキルアンモニウムからなる群より選択され；
Ａは、以下からなる群より選択され：
【００２０】
【化９】

ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ _２ 、またはＮＲであり；Ｑは、ＮＲであり；そして各Ｒは、独立して、水素、アルキル、アルコキシ、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、アシル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、およびジアルキルアミノカルボニルからなる群より選択され；
破線は、任意の二重結合の存在を示し；そして
Ｌは、該化合物の構造に対するＡの結合点であり；
ただし、１）Ｘ _１ 、Ｘ _２ 、およびＸ _３ のいずれもＮではなく、Ａが以下：
【００２１】
【化１０】

であり、ＸがＯまたはＳであり、そしてＹが水素である場合、Ｒ _２ およびＲ _６ はヒドロキシルではなく；そして
２）Ｘ _１ 、Ｘ _２ 、およびＸ _３ のいずれもＮではなく、Ａが以下：
【００２２】
【化１０Ａ】

であり、ＸがＮＲであり、Ｙが水素、ハロゲン、ＣＦ _３ 、アルキル、またはアルコキシである場合、Ｒは水素ではない。
本発明はまた、ヒトまたは他の哺乳動物のような被験体における癌性組織を処置する方法を提供し、この方法は、この被験体に、上記の式（Ｉ）の化合物または以下の式（ＩＩ）の化合物の有効量を投与する工程を包含する：
【００２３】
【化１１】

ここで：
Ｘ₄は、（ＣＨ₂）_m、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ₂、またはＮＲ₁₂であり、ここで、Ｒ₁₂は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アシル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、またはジアルキルアミノカルボニルであり；
ｍは、１〜７であり；
各Ｘ₅は、独立してＮまたはＣ−Ｒ₁₁であり；
そして各Ｒ₃−Ｒ₁₁は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、ＣＦ₃、アルキル、置換アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アルカリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボン酸、カルボン酸エステル、カルボキサミド、ニトロ、シアノ、アジド、アルキルカルボニル、アシル、またはトリアルキルアンモニウムであり；そして
破線は、任意の二重結合を示し；
ただし、Ｘ₄が（ＣＨ₂）_mの場合、ｍは２〜６であり、そして各Ｘ₅は、Ｃ−Ｒ₁₁であり、Ｒ₃−Ｒ₁₁はアルコキシではなく、そしてＸ₄がＮＲ₁₂でありかつ各Ｘ₅がＮの場合、Ｒ₃−Ｒ₁₀は、アルコキシ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アルカリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボン酸、またはアルキルカルボニルではない。
【００２４】
本発明は、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物の全ての立体異性体の配置（エナンチオマーおよびジアステレオマーのような両方の光学異性体、ならびに幾何（ｃｉｓ−ｔｒａｎｓ）異性体を含む）を含む。
【００２５】
本発明の化合物の例としては、以下およびその薬学的に受容可能な塩が挙げられるがこれらに限定されない：
【００２６】
【化１２】

さらに、例示的な化合物は、添付の実施例で与えられる。
【００２７】
本発明の化合物は、当該分野で公知の方法に従って（特に、本明細書中の開示および示される実施例を考慮して）調製され得る。本発明の化合物の合成のために使用される出発物質は、市販されているか、または当該分野で公知の方法を用いて調製され得る。例えば、本発明のうちのいくつかの化合物は、塩基性アルドール縮合条件下での、芳香族アルデヒド（例えば、ヒドロキシベンズアルデヒドまたはフルオロ置換されたベンズアルデヒド）と、ケトン（例えば、アセトン、シクロヘキサノン、シクロペンタノン、テトラヒドロ−４−Ｈ−ピラン−４−オン、Ｎ−メチル−４−ピペリドン、ピペリジン−４−オンなど）との反応によって調製され得る。同様に、本発明の他の化合物は、アルコキシ置換されたベンズアルデヒドまたはアニスアルデヒドとケトンとの反応によって調製され得る。理解されるように、使用される実際のケトンまたはアルデヒドは、所望の最終化合物の置換基の型および位置に依存する。本発明の塩は、一般に、溶液中での本発明の化合物と所望の酸または塩基との反応によって調製され得る。この反応の完了後、この塩は、この塩が不溶の溶媒の適切な量の添加によって、この溶液から結晶化され得る。
【００２８】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、薬学的活性を有し得、そして、新脈管形成の阻害によって利益を受ける１つ以上の状態に罹っている被験体の処置に有用であり得る。例えば、本発明の化合物は、癌組織およびそこに関連する腫瘍（乳癌、結腸癌、前立腺癌および皮膚癌を含む）の処置において用いられ得る。さらに、本発明の化合物は、炎症、慢性関節リウマチ、および糖尿病の特定の形態を媒介するのに有用であり得る。処置され得る被験体としては、動物被験体、代表的には、哺乳動物（例えば、ヒト、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、サル、類人猿など）、および鳥類被験体（例えば、ニワトリ、七面鳥、アヒル、ガチョウ、ウズラ、キジなど）の両方を含む脊椎動物が挙げられる。例えば、被験体に対する式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物の有効量の投与は、癌組織の新脈管形成の阻害を生じ得ると考えられる。従って、本発明は、腫瘍保有被験体を処置するための方法を提供し得る。ここでは、本発明の化合物が有効量で、かつこのような疾患に対抗するのに効果的な様式で、（例えば、腫瘍内の新脈管形成の阻害によって）このような処置の必要な被験体に投与される。抗新脈管形成効果は、少なくとも部分的には、腫瘍内のＴＦおよび／またはＶＥＧＦの産生の阻害から生じると考えられる。さらに、本発明の化合物は、特定のタイプの炎症性皮膚状態（皮膚炎および軽症の皮膚癌が挙げられるがこれらに限定されない）を予防するための予防処置として用いられ得ると考えられる。
【００２９】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、それ自体で、または薬学的に受容可能な塩の形態で投与され得る。医薬に用いる場合、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物の塩は、薬理学的にそして薬学的に受容可能でなければならないが、薬学的に受容可能でない塩を都合よく用いて、遊離の活性な化合物またはその薬学的に受容可能な塩を調製し得、そしてこれらは、本発明の範囲から除外されない。このような薬学的に受容可能な塩および薬学的に受容可能な塩は、本明細書中に詳述される標準的方法を用いて、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物と、有機酸または無機酸との反応によって調製され得る。有用な塩の例としては、以下の酸から調製される塩が挙げられるがこれらに限定されない：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、蟻酸、マロン酸、コハク酸、ナフタレン−２−スルホン酸、およびベンゼンスルホン酸など。また、薬学的に受容可能な塩、は、アルカリ金属またはアルカリ土類塩（例えば、カルボキシル酸基のナトリウム塩、カリウム塩またはカルシウム塩）として調製され得る。
【００３０】
従って、本発明はまた、獣医学およびヒトの医学用途の両方のための、薬学的処方物または組成物を提供する。これには、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩を、その１つ以上の薬学的に受容可能なキャリアおよび必要に応じて任意の他の治療成分（例えば、化学療法剤）とともに含む。このキャリアは、この処方物の他の成分と適合するという意味で薬学的に受容可能でなければならず、そしてそのレシピエントに有害過ぎてはならない。
【００３１】
この組成物は、経口投与、直腸投与、局所投与、経鼻投与、眼科投与、または非経口投与（腹腔内注射、静脈内注射、皮下注射、または筋肉内注射を含む）に適切な組成物を含む。この組成物は、単位投与形態で都合よく存在し得、そして製薬の当該分野で周知の任意の方法によって調製され得る。全ての方法には、活性因子と、１つ以上のアクセサリー成分を構成するキャリアとを会合させる工程を含む。概して、この組成物は、この活性な化合物を液体キャリア、細粒固体キャリアまたはその両方、と均一に、かつ最初に会合させることによって、次いで、必要であれば、この産物を所望の処方物に形成することによって調製される。
【００３２】
経口投与に適切な本発明の組成物は、別々の単位（例えば、カプセル、カチェット（ｃａｃｈｅｔ）、錠剤、トローチなど）で存在し得、それぞれが粉末または顆粒；または水溶液もしくは非水溶液中の懸濁液（例えば、シロップ、エリキシル、エマルジョン、ドラフトなど）として事前に決定した量の活性因子を含む。る。
【００３３】
錠剤は、必要に応じて、１つ以上のアクセサリー（付属）成分と共に、圧縮または成型によって作成され得る。圧縮錠剤は、適切な機械での圧縮によって、粉末または顆粒のような自由に動ける形態である活性化合物とともに調製され得る。活性化合物、必要に応じて、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、内部希釈物、界面活性剤、または分散剤と混合される。適切なキャリアとともに成型された錠剤は、適切な機械で成型され得る。
【００３４】
シロップは、糖（例えば、スクロース）の濃縮水溶液に対して活性化合物を添加することにより作成され得る。この溶液にはまた、任意のアクセサリー成分も添加され得る。このようなアクセサリー成分は、香味料、適切な防腐剤、糖の結晶化を遅らせる因子、および任意の他の成分の可溶性を増大させる因子（例えば、多価アルコール（例えば、グリセロールまたはソルビトール））を含み得る。
【００３５】
非経口投与のために適切な処方物は、都合よく、活性化合物の滅菌の水性調製物を含む。これは、レシピエントの血液と等張であり得る。
【００３６】
経鼻スプレー処方物は、防腐剤および等張剤とともに活性因子の精製した水溶液を含む。このような処方物は、好ましくは、鼻粘膜に適切なｐＨおよび等張状態に調節される。
【００３７】
直腸投与のための処方物は、ココアバター、または硬化油脂もしくは硬化油脂カルボキシル酸のような適切なキャリアを有する座剤として調製され得る。
【００３８】
眼科処方物は、ｐＨおよび等張性因子が好ましくは眼の状態に調節されること以外は、経鼻スプレーの方法と類似の方法によって調節される。
【００３９】
局所処方物は、局所処方物に用いられる、鉱物油、石油、ポリヒドロキシアルコールまたは他の塩基のような１つ以上の媒体中に溶解または懸濁された活性化合物を含む。上記される他のアクセサリー成分の添加が所望され得る。
【００４０】
さらに、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物およびこれらの塩のリポソーム処方物を提供する。リポソーム懸濁物を処方するための技術は、当該分野で周知である。式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物およびこれらの塩が水性の可溶性塩である場合、従来のリポソーム技術を用いて、これらは、脂質小胞中に組み込まれ得る。このような場合、化合物または塩の水溶性に起因して、この化合物または塩は、親水性中心またはリポソームのコアに内に実質的に運ばれる。使用される脂質層は、任意の従来の組成物の層であり得、そしてコレステロールを含んでもよいし、コレステロールを含まなくてもよくいずれかである。目的の化合物または塩が水に不溶性である場合、従来のリポソーム処方技術を再び使用して、この塩は、リポソームの構造を形成する疎水性脂質二分子層内に実質的に運ばれ得る。いずれかの例において、生成されるリポソームは、標準的な超音波処理技術およびホモジナイズ技術の使用を介して、大きさが減少され得る。式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物およびこれらの塩を含むリポソーム処方物は、凍結乾燥されて、水のような薬学的に受容可能なキャリアで再構築されてリポソーム懸濁物を再生成し得る凍結乾燥物を生成し得る。
【００４１】
吸入によるエーロゾルとしての投与に適した薬学的処方物がまた、提供される。これらの処方物は、所望の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物またはこれらの塩の、溶液または懸濁物、あるいはこの化合物または塩の多数の固体粒子を含む。所望の処方物は、小さなチャンバに配置され得るかまたは噴霧され得る。噴霧は、加圧した空気によってかまたは超音波エネルギーによって達成されて、この化合物または塩を含む多数の液滴または固体粒子を形成し得る。
【００４２】
上記の成分に加えて、本発明の組成物は、希釈材、緩衝液、矯味矯臭薬、結合材、崩壊剤、表面活性剤、濃化剤、潤滑剤、防腐剤（酸化防止剤を含む）などからなる群より選択される１つ以上の付属成分をさらに含み得る。
【００４３】
好ましくは、癌治療の目的に対して、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、ＴＦまたはＶＥＧＦの産生を阻害するのに十分な量で被験体に投与され、それによって、新脈管形成を阻害する。しかし、任意の特定の化合物の治療有効量は、化合物間、患者間でいくらか変化し、そして患者の状態および送達経路に依存する。一般的な提案として、約０．５〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重（好ましくは約１．０〜約５．０ｍｇ／ｋｇ）の投薬量が、治療有効性を有する。他の薬学的に活性な薬剤と組合わせて投与される場合、より少ない式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物であっても、治療的に有効であり得る。式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、１日に１回または数回投与され得る。処置期間は、２〜３週間の期間に対して１日に１回であり得るか、そして数ヶ月の期間または数年の期間に対してされ続けられ得る。日用量は、個々の投薬量単位もしくは数回のより小さい投薬量単位の形態で単一用量によって投与され得るか、または特定の間隔での子分けされた投薬量の複数投与によって投与され得るかのいずれかである。
【００４４】
以下の実施例に関して、ＲＰＭＩ−７９５１ヒト黒色腫、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１およびＭＤＡ−ＭＢ−４３５ヒト乳癌細胞株は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ
Ｃｅｌｌ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）から購入された。ＨＵＶＥＣは、Ｅｍｏｒｙ大学の皮膚科学学部から得られた。ＳＶ ４０（ＳＶ４０）ラージＴ抗原および活性化Ｈ−ｒａｓ（ＳＶＲ）で感染されたマウス内皮細胞は、ＥｍｏｒｙのＪａｃｋ Ａｒｂｉｓｅｒ博士から好意により供与された。ＲＰＭＩ−７９５１、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１およびＭＤＡ−ＭＢ−４３５細胞株は、１０％胎仔ウシ血清（ＲＰＭＩ−７９５１、ＭＤＡ−２３１）または５％ ＦＢＳ（ＭＤＡ−ＭＢ−４３５）を含むＭＥＭ−α培地（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ，Ｌｏｎｇ Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ）中で３７℃および５％ＣＯ₂／９５％大気で培養された。ＳＶＲ細胞は、１０％ ＦＢＳおよび２ｍＭ Ｌ−グルタミンを含むＤＭＥＭ（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ ｃｅｌｌｇｒｏ）中で培養された。完全ＨＵＶＥＣ培地は、Ｅｍｏｒｙ大学の皮膚科学学部の細胞培養センターから供与された。細胞は、記載された実験の全てにおいて、４８ウェルプレート中で培養された。
【００４５】
ニュートラルレッドアッセイを使用して、本発明の化合物の細胞生存力に対する効果を決定した。ニュートラルレッドは、ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ（Ｌｏｎｇ Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ）から購入された。細胞は、２０，０００細胞／ウェルの濃度でプレートに播かれ、そして一晩培養された。次いで、化合物またはビヒクル（ＤＭＳＯ ０．１％）は添加され、そしてこのプレートは、７２時間インキュベートされた。各ウェルからの上清は、吸引または収集のいずれかをされ、次いで、１５μｌ／ｍｌの濃度のニュートラルレッド（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ、Ｌｏｎｇ
Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ）を含む培地が、各ウェルに添加された。次いで、このプレートは、３７℃で３０分間インキュベートされた。次に、細胞は、ＰＢＳで２回洗浄され、そしてアルコール性ＨＣｌ（０．５Ｎ−ＨＣｌ／３５％ エタノール）が、各ウェルに添加された。次いで、このプレートは、すべての残渣が可溶化されるまで（ピンク色）、プレート攪拌器上に配置された。次いで、可溶化された混合物は、９６ウェルプレートに移され、そして吸光度は、マイクロ試験プレートリーダー上で５７０ｎＭの波長で読み取られた。
【００４６】
ＶＥＧＦ酵素結合イムノソルベント検定法（ＥＬＩＳＡ）は、種々のヒト癌細胞株のＶＥＧＦ産生に対する本発明の化合物の効果を決定するために使用された。ＶＥＧＦアッセイに関して、細胞は、８０，０００細胞／ウェルの濃度で配置され、そして一晩培養された。次いで、化合物またはビヒクル（ＤＭＳＯ ０．１％）が添加され、そしてこのプレートは、７２時間インキュベートされた。次いで、上清は、各ウェルから収集され、必要とされるまで−８０℃フリーザーで凍結された。細胞の生存能は、ニュートラルレッドアッセイによって決定された。ＶＥＧＦ ＥＬＩＳＡキット（Ｒ ＆ Ｄ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）は、培養上清中のＶＥＧＦ量を決定するために使用された。このＥＬＩＳＡは、製造者らの手順に従って実行された。
【００４７】
ＴＦ ＥＬＩＳＡアッセイは、ヒト癌細胞株のＴＦ産生に対する本発明の化合物の効果を決定するために使用された。ＴＦアッセイに関して、細胞は、８０，０００細胞／ウェルの濃度で配置され、そして一晩培養された。次いで、化合物またはビヒクル（ＤＭＳＯ ０．１％）が添加され、そしてこのプレートは、７２時間インキュベートされた。細胞は、ＰＢＳ中の１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で処理され、そしてＴＦを可溶化するために４℃で一晩、置かれた。次いで、上清は、各ウェルから収集され、必要とされるまで凍結された。ＩＭＵＢＩＮＤ Ｔｉｓｓｕｅ Ｆａｃｔｏｒ ＥＬＩＳＡキット（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ Ｉｎｃ，Ｇｒｅｅｎｗｉｃｈ，ＣＴ）は、各サンプル中のＴＦ濃度を決定するために使用された。このＥＬＩＳＡは、製造者らの手順に従って実行された。
【００４８】
（実施例）
（実施例１）
（ＥＦ１、ＥＦ２、ＥＦ３、ＥＦ４、ＥＦ２５、ＥＦ３１、ＥＦ３４化合物の調製）
このシリーズの化合物は、全て以下の手順によって合成された：水性ＮａＯＨ（２０重量％、１５ｍｌ、７５ｍｍｏｌ）を、無水ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中のヒドロキシベンズアルデヒド（５１ｍｍｏｌ）およびケトン（２５ｍｌ）の激しく攪拌した溶液に滴下した。反応物を室温で４８時間攪拌し、蒸留Ｈ₂Ｏ（１００ｍＬ）を加え、そして紫色の溶液を、そこを通してＣＯ₂を穏やかにバブリングすることによって中和した。沈殿する黄色の固体を濾別し、蒸留Ｈ₂Ｏで洗浄し、そして減圧で乾燥した。生成物を再結晶により精製した。上記プロセスにより得られたそれぞれの化合物についての記載を以下に与える。
【００４９】
（１，５−ビス（４−ヒドロキシフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ１））：黄色固体（６％）、融点２３６℃（アセトン／Ｈ₂Ｏ）。
【００５０】
【数１】

（１，５−ビス（２−ヒドロキシフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ２））：黄色固体（７５％）、融点１５５℃（アセトン／Ｈ₂Ｏ）。
【００５１】
【数２】

（１，５−ビス（３−ヒドロキシフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ３））：黄色固体（１５％）、融点１９８〜２００℃（アセトン／Ｈ₂Ｏ）。
【００５２】
【数３】

（２，６−ビス（２−ヒドロキシベンジリデン）シクロヘキサンノン（ＥＦ４））：黄色固体（７０％、アセトン／Ｈ₂Ｏから再結晶）。
【００５３】
【数４】

（３，５−ビス（２−ヒドロキシベンジリデン）テトラヒドロ−４−Ｈ−ピラン−４−オン（ＥＦ２５））：黄色固体（６０％、アセトン／Ｈ₂Ｏから再結晶）。
【００５４】
【数５】

（２，５−ビス（２−ヒドロキシフェニル）シクロペンタノン（ＥＦ３１））：黄色固体（８１％、アセトンから再結晶）。
【００５５】
【数６】

（３，５−ビス（２−ヒドロキシベンジリデン）１−メチル−４−ピペリドン（ＥＦ３４））：黄色固体（７５％、メタノール／Ｈ₂Ｏから再結晶）。
【００５６】
【数７】

（実施例２）
（ＥＦ８、ＥＦ９、ＥＦ１０、ＥＦ２３、ＥＦ２９、ＥＦ３０、ＥＦ３３の調製）
このシリーズの化合物は、全て以下の手順によって合成された：無水エタノール（１ｍＬ）中のフルオロ置換ベンズアルデヒド（５．００ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で５分間かけて、攪拌しながら、無水エタノール（７ｍＬ）および蒸留Ｈ₂Ｏ（７ｍＬ）の混合物中のＮａＯＨ（０．７５ｍｍｏｌ）およびケトン（アセトン、テトラヒドロ−４−Ｈ−ピラン−４−オン、Ｎ−メチル−ピペロジン−４−オン）（２．５０ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。溶液はすぐに黄色に変わり、そして通常、黄色の沈殿が１０分以内に形成し始める（油状物形態であるＥＦ８を除く）。反応物を室温で３時間攪拌し、黄色の固体を濾別し、水およびヘキサンで洗浄し、そして減圧で乾燥した。生成物を分析的に純粋な形態で得、さらなる精製は、示した場合のみ必要であった。上記プロセスにより得られたそれぞれの化合物についての記載を以下に与える。
【００５７】
（１，５−ビス（２−フルオロフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ８））：黄色固体（５０％）。
【００５８】
【数８】

（１，５−ビス（２，４−ジフルオロフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ９））：黄色固体（７２％）。
【００５９】
【数９】

（１，５−ビス（３，４−ジフルオロフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ１０））：黄色固体（８６％）。
【００６０】
【数１０】

（１，５−ビス（２，６−ジフルオロフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ２３））：黄色固体（９１％）。
【００６１】
【数１１】

（３，５−ビス（２−フルオロベンジリデン）テトラヒドロ−４−Ｈ−ピラン−４−オン（ＥＦ２９））：（８４％、熱エタノールから再結晶化）。
【００６２】
【数１２】

（３，５−ビス（２，４−ジフルオロベンジリデン）テトラヒドロ−４−Ｈ−ピラン−４−オン（ＥＦ３０））：（８２％、エタノール／Ｈ₂Ｏから再結晶化）。
【００６３】
【数１３】

（３，５−ビス（２−フルオロベンジリデン）ｌ−メチル−４−ピペリドン（ＥＦ３３））：（８２％、黄色固体）。
【００６４】
【数１４】

（実施例３）
（ＥＦ１１、ＥＦ１２、ＥＦ１３、ＥＦ１４、ＥＦ１５の調製）
このシリーズの化合物は、全て以下の手順によって合成された：ビスジメチルホスホリルメチルスルフィド、−スルホキシドおよび−スルホンを、文献の手順（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９９２、４８、８０６５−８０７２；Ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ Ｓｕｌｆｅｒ １９８１、１０、３６９−３７４）に従って得た。ＣＨ₂Ｃｌ₂（３ｍＬ）中のホスホネート（０．６０ｍｍｏｌ）およびアルデヒド（１．２５ｍｍｏｌ）の溶液を、トリエチルベンジルアンモニウムクロライド（ＴＥＢＡ、０．０６ｍｍｏｌ）を含む、５０％水性ＮａＯＨ（２ｍＬ）およびＣＨ₂Ｃｌ₂（２ｍＬ）の不均一な混合物に加えた。反応物を室温で一晩攪拌し、生成物をＣＨ₂Ｃｌ₂を用いて反応混合物から抽出し、カラムクロマトグラフィーによって精製した。上記プロセスにより得られたそれぞれの化合物についての記載を以下に与える。
【００６５】
（３，５−ビス（２−ヒドロキシベンジリデン）−スルホン（ＥＦ１１）：黄色固体（４５％、３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。
【００６６】
【数１５】

（３，５−ビスベンジリデンスルホン（ＥＦ１２）：白色固体（７８％、２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。
【００６７】
【数１６】

（Ｅ，Ｅ−３，５−ビスベンジリデンスルホキサイド（ＥＦ１３）：白色固体（３３％、２０％ＥｔＯＡｃ、ヘキサン）。
【００６８】
【数１７】

（Ｅ，Ｚ−３，５−ビスベンジリデンスルホキサイド（ＥＦ１４）：白色固体（１５％、２０％ＥｔＯＡｃ、ヘキサン）。
【００６９】
【数１８】

（３，５−ビスベンジリデンスルフィド（ＥＦ１５）：白色固体（２０％、５％ＥｔＯＡｃ、ヘキサン）。Ｅ，ＥおよびＥ，Ｚの混合物（約２．５：１）。
【００７０】
【数１９】

（実施例４）
（ＥＦ１６、ＥＦ１７、ＥＦ１８、ＥＦ２７、ＥＦ２８の調製）
このシリーズの化合物は、全て以下の手順によって合成された：ＮａＯＨ（０．１０ｍｍｏｌ）を、固体として、無水ＥｔＯＨ（５ｍＬ）中のメトキシ置換ベンズアルデヒド／アニスアルデヒド（２．５０ｍｍｏｌ）およびケトン（アセトン、テトラヒドロ−４−Ｈ−ピラノン）の攪拌溶液に加えた。黄色溶液が、一時間以内に形成し始めた。反応物を室温で２０時間攪拌し、生成物を濾別し、冷無水ＥｔＯＨおよび蒸留Ｈ₂Ｏで洗浄し、減圧で乾燥した。上記プロセスにより得られたそれぞれの化合物についての記載を以下に与える。
【００７１】
（１，５−ビス（２−メトキシフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ１６））：黄色固体（６０％）、融点１２３〜１２４℃（ＥｔＯＨ）。
【００７２】
【数２０】

（１，５−ビス（３−メトキシフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ１７））：黄色固体（４０％）、２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するクロマトグラフィー）。
【００７３】
【数２１】

（１，５−ビス（４−メトキシフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ１８））：黄色固体（９３％）、融点１２９〜１３０℃（ＥｔＯＨ）。
【００７４】
【数２２】

（３，５−ビス（４−メトキシベンジリデン）テトラヒドロ−４−Ｈ−ピラン−４−オン（ＥＦ２７））：黄色固体（４０％）。
【００７５】
【数２３】

（３，５−ビス（２−メトキシベンジリデン）テトラヒドロ−４−Ｈ−ピラン−４−オン（ＥＦ２８））：黄色固体（６７％）。
【００７６】
【数２４】

（実施例５）
（ＥＦ１９、ＥＦ２０、ＥＦ３２の調製）
このシリーズの化合物は、全て以下の手順によって合成された：無水ＥｔＯＨ（２９ｍＬ）中の置換ジエノン（０．６９ｍｍｏｌ）の溶液を、触媒としてＲａｎｅｙ Ｎｉｃｋｅｌを使用して４時間３３ｐｓｉで水素化に供した。ＣＥＬＩＴＥを通して濾過し、減圧で濃縮して、粗生成物を得、これを２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるクロマトグラフィーによって精製した。上記プロセスにより得られたそれぞれの化合物についての記載を以下に与える。
【００７７】
（１，５−ビス（２，４−ジフルオロフェニル）ペンタン−３−オール（ＥＦ１９））：白色固体（９２％）。
【００７８】
【数２５】

（１，５−ビス（３，４−ジフルオロフェニル）ペンタン−３−オール（ＥＦ２０））：白色固体（８１％）。
【００７９】
【数２６】

（１，５−ビス（２−ヒドロキシフェニル）ペンタン−３−オール（ＥＦ３２））：白色固体（４５％）。
【００８０】
【数２７】

（実施例６）
（ＥＦ２１、ＥＦ２２の調製）
このシリーズの化合物は、全て以下の手順によって合成された：ＰＣＣ（１０７ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を、室温で、ＣＨ₂Ｃｌ₂（５ｍＬ）中のアルコール（１０３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の溶液に、一部で加えた。反応物を室温で１４時間攪拌し（ＴＬＣ−分析、ｓｍ残りなし）、ＣＥＬＩＴＥで濾過し、そして濃縮した。粗製の生成物を２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製した。上記プロセスにより得られたそれぞれの化合物についての記載を以下に与える。
【００８１】
（１，５−ビス（２，４−ジフルオロフェニル）−ペンタン−３−オン（ＥＦ２１））：白色固体（９２％）。
【００８２】
【数２８】

（１，５−ビス（３，４−ジフルオロフェニル）−ペンタン−３−オン（ＥＦ２２））：白色固体（８６％）。
【００８３】
【数２９】

（実施例７）
（ＥＦ７の調製）
ＥＦ７を、３工程の合成で得た。ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の２，５−ビス（２−ヒドロキシベンジリデン）アセトン（８００ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）の溶液に、イミダゾール（５４５ｍｇ、７．５６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１０ｍｇ）を加えた。明るい黄色の溶液を０℃に冷却し、そしてｔブチルジフェニルクロロシラン（１．７５ｍＬ、６．７３ｍｍｏｌ）を、滴下した。３０分間攪拌した後に、冷却浴を除き、そして反応を室温で、開始物質またはモノ保護化アルコールがＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝２／１、Ｒｆ（開始物質）＝０．１７、Ｒｆ（モノ）＝０．４４、Ｒｆ（ジ）＝０．７８）により検出されなくなるまで、進行させた。オレンジ色溶液を氷水（５０ｍＬ）に注ぎ、そしてエーテル（３×）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３×）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして濃縮した。粗製の生成物を、シリカゲルでのプラグクロマトグラフィー（１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製した。生成物（１０８％）を黄色泡状物として得、そしていくらかのｔブチルジフェニルシリルアルコールを得た。これをさらなる精製なしで使用した。
【００８４】
【数３０】

ジシリル保護化ケトン（１．７４ｇ、２．３４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ中に溶解させ、そして−７８℃に冷却し、ＣＨ₃Ｌｉ（１．９０ｍＬ、２．６６ｍｍｏｌ、１．４Ｍ／エーテル）を滴下した。１０分間攪拌した後、最初の明るい溶液は、完全に透明になり、これを、飽和ＮＨ₄Ｃｌでクエンチし、層を分離し、そして水相をエーテルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濃縮した。粗製の生成物をシリカゲルでのクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製した。６０％、白色泡状物。
【００８５】
【数３１】

ＥＦ７：アルコールの脱保護を、ＴＨＦ中のテトラブチルアンモニウムフルオリド（２．２当量）で行った。生成物をシリカゲルでのクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）の後に、白色固体として得た（４８％）。
【００８６】
【数３２】

（実施例８）
（ＥＦ５の調製）
１，５−ビス（２−ヒドロキシフェニル）ペンタ−１−エン−３−オール（ＥＦ５）：ＴＨＦ／メタノール（１０／１）（２．５ｍＬ）中の１，５−ビス（２−ヒドロキシフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ１）（１０９ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ₄（４０ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）を、０℃で一度に添加した。この温度で３０分間撹拌した後、この反応を蒸留水および冷却ブラインでクエンチし、Ｅｔ₂Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、そしてこの濃赤色の溶液にＣＯ₂をバブリングすることによって中和（淡黄色に変化）した。水層をエーテルで抽出し、合わせたエーテル層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして濃縮した。粗生成物を、シリカゲルのクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用）で精製した。生成物を白色固体として得た（６６％）。
【００８７】
【数３３】

（実施例９）
（ＥＦ６の調製）
Ｎ−（メトキシ）−１，５−ビス（２−ヒドロキシフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−イミン（ＥＦ６）：メタノール／ＣＨＣｌ₃（２／３）（５ｍＬ）中の１，５−ビス（２−ヒドロキシフェニル）ペンタ−１，４−ジエン−３−オン（ＥＦ１）の溶液に、メトキシルアミンヒドロクロリド（Ｈ₂Ｏ中３０〜３５重量％、０．３０ｍＬ、１．１２ｍｍｏｌ）を一度に添加した。この反応を室温で２４時間進行させ、次いで、追加のメトキシルアミンヒドロクロリド（０．１５ｍＬ、０．５６ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの反応物をさらに２４時間撹拌した。完了後（ＴＬＣ）、この溶媒をエバポレートし、残渣をメタノールに溶解し、シリカゲルと共に撹拌し、そしてシリカゲルのクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用する）によって、濃縮後に精製した。生成物を淡黄色の泡状物として得た（８６％）。
【００８８】
【数３４】

（実施例１０）
（ＭＤ２７９ＵおよびＭＤ２７９Ｌの調製）
無水ＥｔＯＨおよびＴＨＦ（５／１）の混合物中の１，５−ビス（３，４−ジメトキシフェニル）ペンタ−１，３−ジエン−３−オンの溶液を、触媒としてＲａｎｅｙニッケルを使用して、５０ｐｓｉで８時間水素化した。ＣＥＬＩＴＥを通して濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を得、これをシリカゲルのクロマトグラフィー（２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用する）によって精製した。
【００８９】
１，５−ビス（３，４−ジメトキシフェニル）ペンタ−３−オン（ＭＤ２７９Ｕ）：３７％、白色固体。
【００９０】
【数３５】

１，５−ビス（３，４−ジメトキシフェニル）ペンタ−３−オール（ＭＤ２７９Ｌ）：５１％、白色固体。
【００９１】
【数３６】

（実施例１１）
（３，５−ビス−（α，α，α−トリフルオロ−２−トルイルベンジリデン）−ピペリジン−４−オン酢酸塩）
【００９２】
【化１３】

氷酢酸（６０．０ｍＬ）中の１．７６ｇ（１１．４９ｍｍｏｌ）の４−ピペリドン水和物のＨＣｌ塩の懸濁液を、乾燥ＨＣｌガスで飽和し、そして得られた溶液に、５．０ｇ（２８．７２ｍｍｏｌ）のα，α，α−トリフルオロ−２−トルアルデヒドを添加した。この混合物を室温で７２時間撹拌し、次いで、５０．０ｍＬのトルエンで希釈し、そして減圧下でエバポレートした。残渣を５０．０ｍＬのトルエンで２回以上希釈し、そして減圧下でエバポレートした。ゴム状の残渣を、５．０ｍＬの酢酸エチルを含む５０ｍＬのトルエンに懸濁し、還流温度までわずかに加熱し、そして室温まで冷却した。形成した固体を、吸引濾過によって回収し、高真空下で乾燥して、３．６３ｇ（６７％）の明るい黄色の固体を得た。
【００９３】
（実施例１２）
（３，５−ビス−（ピリジニリデン）−ピペリジン−４−オン）
【００９４】
【化１４】

ＮａＯＨ（２２．８２ｍｍｏｌ）の０．２５Ｍ溶液（９１ｍＬ）中の、１．００ｇ（６．５２ｍｍｏｌ）の４−ピペリドン水和物のＨＣｌ塩、および１．４０ｇ（１３．０５ｍｍｏｌ）の２−ピリジンカルボアルデヒドの溶液に、セチルトリメチルアンモニウムクロリドの２５％ｗ／ｗ溶液（０．６５ｍｍｏｌ）を０．８６ｍＬ添加した。この混合物を室温で３時間激しく撹拌し、１００ｍｌのブラインで希釈し、そして５０ｍＬの塩化メチレンで３回抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチルから再結晶して、１．２５ｇ（６９％）の赤黄色の固体を得た。
【００９５】
（実施例１３）
（３，５−ビス−（２−フルオロ−３−α，α，α−トリフルオロメチルベンジリデン）−ピペリジン−４−オン）
【００９６】
【化１５】

ＮａＯＨ（９．１１ｍｍｏｌ）の０．２５Ｍ水溶液（３６ｍＬ）中の４００ｍｇ（２．６１ｍｍｏｌ）の４−ピペリドン水和物のＨＣｌ塩、および１．００ｇ（５．２１ｍｍｏｌ）の２−フルオロ−３−α，α，α−トリフルオロメチルベンズアルデヒドの溶液に、セチルトリメチルアンモニウムクロリドの２５％ｗ／ｗ溶液（０．２６ｍｍｏｌ）を０．３５ｍＬ添加した。この混合物を室温で４８時間激しく撹拌し、１００ｍｌのブラインで希釈し、そして５０ｍＬの塩化メチレンで２回抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃縮して、１．０２ｇ（８６％）の黄色の泡状物を得た。
【００９７】
（実施例１４）
【００９８】
【化１６】

（３，５−ビス−（２−クロロベンジリデン）−ピペリジン−４−オン）
ＮａＯＨ（２２．８２ｍｍｏｌ）の０．２５Ｍ水溶液（９６ｍＬ）中の１．０ｇ（６．５２ｍｍｏｌ）の４−ピペリドン水和物のＨＣｌ塩、および１．８８ｇ（１３．３７ｍｍｏｌ）の２−クロロベンズアルデヒドの溶液に、セチルトリメチルアンモニウムクロリドの２５％ｗ／ｗ溶液（０．６５ｍｍｏｌ）を０．９０ｍＬ添加した。この混合物を室温で４８時間激しく撹拌し、１００ｍｌのブラインで希釈し、そして３５ｍＬの塩化メチレンで２回抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチルから再結晶して、０．９２ｇ（４１％）の淡黄色の粉末を得た。
【００９９】
（実施例１５）
【０１００】
【化１７】

３，５−ビス−（２−α，α，α，−トリフルオロメチルベンジリジエン）−１−メチルピペリジン−４−オン
１．０ｇ（８．８４ｍｍｏｌ）の１−メチルピペリジン−４−オンおよび３．０８ｇ（１３．３７ｍｍｏｌ）のα，α，α，−トリフルオロ−２−トルアルデヒドのＮａＯＨ（２２．０９ｍｍｏｌ）水溶液（８８ｍＬ、０．２５Ｍ）に、塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液（１．１６ｍＬ（０．８８ｍｍｏｌ）、２５％ ｗ／ｗ）を添加した。この混合物を、室温で３時間激しく攪拌させ、１００ｍＬのブラインで希釈し、そして３部の５０ｍＬの塩化メチレンで抽出した。有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして減圧下で濃縮し、３．６５ｇ（９５％）の淡黄色の粉末を得た。
【０１０１】
（実施例１６）
（３，５−ビス−（２−ピリリジニリデン）−１−メチルピペリジン−４−オン）
【０１０２】
【化１８】

１．０ｇ（８．８４ｍｍｏｌ）の１−メチルピペリジン−４−オンおよび１．８９ｇ（１６．７０ｍｍｏｌ）の２−ピリジンカルボキシアルデヒドのＮａＯＨ（２２．０９ｍｍｏｌ）水溶液（８８ｍＬ、０．２５Ｍ）に、塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液（１．１６ｍＬ（０．８８ｍｍｏｌ）、２５％ ｗ／ｗ）を添加した。この混合物を、室温で３時間激しく攪拌させ、１００ｍＬのブラインで希釈し、そして３部の５０ｍＬの塩化メチレンで抽出した。有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして減圧下で濃縮し、２．５０ｇ（９７％）の淡黄色の粉末を得た。
【０１０３】
（実施例１７）
（３，５−ビス−（４−ピリリジニリデン）−１−メチルピペリジン−４−オン）
【０１０４】
【化１９】

１．０ｇ（８．８４ｍｍｏｌ）の１−メチルピペリジン−４−オンおよび１．８９ｇ（１６．７０ｍｍｏｌ）の４−ピリジンカルボキシアルデヒドのＮａＯＨ（２２．０９ｍｍｏｌ）水溶液（８８ｍＬ、０．２５Ｍ）に、塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液（１．１６ｍＬ（０．８８ｍｍｏｌ）、２５％ ｗ／ｗ）を添加した。この混合物を、室温で３時間激しく攪拌させ、１００ｍＬのブラインで希釈し、そして２部の６０ｍＬの塩化メチレンで抽出した。有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして減圧下で濃縮し、２．１５ｇ（８４％）の淡橙色の粉末を得た。
【０１０５】
（実施例１８）
（３，５−ビス−（２，６−ジフルオロベンジリデン）−１−メチルピペリジン−４−オン）
【０１０６】
【化２０】

１．０ｇ（８．８４ｍｍｏｌ）の１−メチルピペリジン−４−オンおよび２．５７ｇ（１８．０９ｍｍｏｌ）の２，６−ジフルオロベンズアルデヒドのＮａＯＨ（２２．５９ｍｍｏｌ）水溶液（９０ｍＬ、０．２５Ｍ）に、塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液（１．１６ｍＬ（０．８８ｍｍｏｌ）、２５％ ｗ／ｗ）を添加した。この混合物を、室温で１２時間激しく攪拌させ、１００ｍＬのブラインで希釈し、そして３部の４０ｍＬの塩化メチレンで抽出した。有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残渣を、１００ｍｌの沸騰酢酸エチル中でスラリー化し、そして不溶物を迅速な吸引濾過によって除去した。この濾液を減圧下で濃縮し、そして酢酸エチルから再結晶し、３．０１ｇ（９４％）の明黄色の固体を得た。
【０１０７】
（実施例１９）
（３，５−ビス−（２，６−ジフルオロベンジリデン）−トロピン−４−オン）
【０１０８】
【化２１】

０．５０ｇ（３．５９ｍｍｏｌ）のトロピノンおよび１．０５ｇ（７．３９ｍｍｏｌ）の２，６−ジフルオロベンズアルデヒドのＮａＯＨ（９．０４ｍｍｏｌ）水溶液（３６ｍＬ、０．２５Ｍ）に、塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液（０．７１ｍＬ（０．５４ｍｍｏｌ）、２５％ ｗ／ｗ）を添加した。この混合物を、室温で４時間激しく攪拌させ、１００ｍＬのブラインで希釈し、そして２部の２５ｍＬの塩化メチレンで抽出した。有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残渣を、酢酸エチルから再結晶し、８４０ｍｇ（６０％）の明黄色の固体を得た。
【０１０９】
（実施例２０）
（３，５−ビス−（２−フルオロベンジリデン）−トロピン−４−オン）
【０１１０】
【化２２】

０．５０ｇ（３．５９ｍｍｏｌ）のトロピノンおよび０．９１４ｇ（７．３６ｍｍｏｌ）の２−フルオロベンズアルデヒドのＮａＯＨ（９．０４ｍｍｏｌ）水溶液（３６ｍＬ、０．２５Ｍ）に、塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液（０．４７ｍＬ（０．３６ｍｍｏｌ）、２５％ ｗ／ｗ）を添加した。この混合物を、室温で１２時間激しく攪拌させ、１００ｍＬのブラインで希釈し、そして２部の５０ｍＬの塩化メチレンで抽出した。有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残渣を、酢酸エチルから再結晶することで得られた。
【０１１１】
（実施例２１）
（３，５−ビス−（２−ピリジニリデン）−トロピン−４−オン）
【０１１２】
【化２３】

０．７５ｇ（５．３９ｍｍｏｌ）のトロピノンおよび１．１８ｇ（７．３９ｍｍｏｌ）の２−ピリジンカルボキシアルデヒドのＮａＯＨ（１３．４７ｍｍｏｌ）水溶液（５４ｍＬ、０．２５Ｍ）に、塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液（０．７１ｍＬ（０．５４ｍｍｏｌ）、２５％ ｗ／ｗ）を添加した。この混合物を、室温で４８時間激しく攪拌させ、１５０ｍＬのブラインで希釈し、そして３部の５０ｍＬの塩化メチレンで抽出した。有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残渣を、酢酸エチルから再結晶し、１８０ｍｇ（１１％）の黄褐色の粉末を得た。
【０１１３】
（実施例２２）
（１，５−ビス−（２，３−ジメトキシフェニル）−ペンタ−１，４−ジエン−３−オン）
【０１１４】
【化２４】

０．５ｇ（８．６１ｍｍｏｌ）のアセトンおよび２．８６ｇ（１７．２２ｍｍｏｌ）の２，３−ジメトキシベンズアルデヒドのＮａＯＨ（２１．５９ｍｍｏｌ）水溶液（８６ｍＬ、０．２５Ｍ）に、塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液（２．８３ｍＬ（２．１５ｍｍｏｌ）、２５％ ｗ／ｗ）を添加した。この混合物を、室温で７２時間激しく攪拌させ、１００ｍＬのブラインで希釈し、そして３部の５０ｍＬの塩化メチレンで抽出した。有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残渣を、酢酸エチルから再結晶し、１．９９ｇ（６５％）の明黄色の固体を得た。
【０１１５】
（実施例２３）
（１，５−ビス−（２，３−メチレンジオキシフェニル）−ペンタ−１，４−ジエン−３−オン）
【０１１６】
【化２５】

３５ｍＬのＮａＯＨの０．２５Ｍ水溶液（８．７９ｍｍｏｌ）中の０．１９ｇ（３．２７ｍｍｏｌ）のアセトンおよび１．００ｇ（６．６６ｍｍｏｌ）の２，３−メチレンジオキシベンズアルデヒドの溶液に、０．６５ｍＬ（０．４９ｍｍｏｌ）の２５ｗ／ｗ％の塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液を加えた。この混合物を２時間室温で、激しく攪拌し、この時点で、これを１５ｍＬの９５％エタノールで希釈し、攪拌をさらに２時間継続した。この溶液を塩化ナトリウムで飽和し、２回分の３５ｍＬの塩化メチレンで抽出した。この有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃縮した。この残渣を、酢酸エチルから再結晶し、１．０３ｇ（９８％）の黄色固体を得た。
【０１１７】
（実施例２４）
（１，５−ビス−（４−ジメチルアミノフェニル）−ペンタ−１，４−ジエン−３−オン）
【０１１８】
【化２６】

１７２ｍＬのＮａＯＨの０．２５Ｍ水溶液（４３．０５ｍｍｏｌ）中の１．０ｇ（１７．２２ｍｍｏｌ）のアセトンおよび５．２６ｇ（３５．３０ｍｍｏｌ）の４−ジメチルアミノベンズアルデヒドの溶液に、２．２６ｍＬ（１．７２ｍｍｏｌ）の２５ｗ／ｗ％の塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液を加えた。この混合物を７２時間室温で、激しく攪拌し、１００ｍｌのブラインで希釈し、２回分の７５ｍＬの塩化メチレンで抽出した。この有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃縮した。この残渣を、酢酸エチルから再結晶し、１．２１ｇ（２２％）の暗赤色粉末を得た。
【０１１９】
（実施例２５）
（１，５−ビス−（２，６−ジメトキシフェニル）−ペンタ−１，４−ジエン−３−オン）
【０１２０】
【化２７】

４３ｍＬのＮａＯＨの０．２５Ｍ水溶液（１０．８０ｍｍｏｌ）中の０．２５ｇ（４．３１ｍｍｏｌ）のアセトンおよび１．４７ｇ（８．８５ｍｍｏｌ）の２，６−ジメトキシベンズアルデヒドの溶液に、０．５７ｍＬ（０．４３ｍｍｏｌ）の２５ｗ／ｗ％の塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液を加えた。この混合物を７２時間室温で、激しく攪拌し、１００ｍｌのブラインで希釈し、２回分の７５ｍＬの塩化メチレンで抽出した。この有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃縮した。この残渣を、酢酸エチルから再結晶し、１．１０ｇ（７２％）の黄色粉末を得た。
【０１２１】
（実施例２６）
（１，５−ビス−（２，３−ジフルオロフェニル）−ペンタ−１，４−ジエン−３−オン）
【０１２２】
【化２８】

８６ｍＬのＮａＯＨの０．２５Ｍ水溶液（２１．５２ｍｍｏｌ）中の０．５ｇ（８．６１ｍｍｏｌ）のアセトンおよび２．５１ｇ（１７．６５ｍｍｏｌ）の２，３−ジフルオロベンズアルデヒドの溶液に、１．１３ｍＬ（０．８６ｍｍｏｌ）の２５ｗ／ｗ％の塩化セチルトリメチルアンモニウムの水溶液を加えた。この混合物を４８時間室温で、激しく攪拌し、この時点で１００ｍｌのブラインで希釈し、２回分の７５ｍＬの塩化メチレンで抽出した。この有機相を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃縮した。この残渣を、酢酸エチルから再結晶し、１１０ｍｇ（４％）の黄色粉末を得た。
【０１２３】
（実施例２７）
（（Ｅ）−３−（２−フルオロベンジリデニル）インドリン−２−オン）
【０１２４】
【化２９】

３０ｍＬの無水エタノール中の２．０ｇ（１５．０２ｍｍｏｌ）の２−オキシインドールおよび２．０５ｇ（１６．５２ｍｍｏｌ）の２−フルオロベンズアルデヒドを含む溶液に、１９０ｍｇ（２．２５ｍｍｏｌ）ピペリジンを加え、この混合物を１２時間還流した。この混合物を、室温まで冷却し、形成された固体を吸引濾過によって回収し、２回分の２５ｍＬの冷却無水エタノールで洗浄した。回収した物質を高真空下で１２時間乾燥し、３．２２ｇ（９０％）の輝黄色粉末を得た。
【０１２５】
（実施例２８）
（（Ｅ）−３−（２−ピリジニリデニル）インドリン−２−オン）
【０１２６】
【化３０】

３０ｍＬの無水エタノール中の２．０ｇ（１５．０２ｍｍｏｌ）の２−オキシインドールおよび１．７７ｇ（１６．５２ｍｍｏｌ）の２−ピリジンカルボキサアルデヒドを含む溶液に、１９２ｍｇ（２．２５ｍｍｏｌ）ピペリジンを加え、この混合物を１２時間還流した。この混合物を、室温まで冷却し、形成された固体を吸引濾過によって回収し、２回分の２５ｍＬの冷却無水エタノールで洗浄した。回収した物質を高真空下で１２時間乾燥し、２．８２ｇ（８４％）の薄赤色粉末を得た。
【０１２７】
（実施例２９）
（（Ｅ）−３−（２，３−ジフルオロベンジリデニル）インドリン−２−オン）
【０１２８】
【化３１】

３０ｍＬの無水エタノール中の２．０ｇ（１５．０２ｍｍｏｌ）の２−オキシインドールおよび２．２０ｇ（１６．５２ｍｍｏｌ）の２，３−ジフルオロベンズアルデヒドを含む溶液に、１９２ｍｇ（２．２５ｍｍｏｌ）ピペリジンを加え、この混合物を１２時間還流した。この混合物を、室温まで冷却し、形成された固体を吸引濾過によって回収し、２回分の２５ｍＬの冷却無水エタノールで洗浄した。回収した物質を高真空下で１２時間乾燥した。
【０１２９】
（実施例３０）
（１，３−ビス−（２−フルオロベンジリデン）インダン−２−オン）
【０１３０】
【化３２】

３．０ｍＬの無水エタノール中の１．８８ｇ（１５．１３ｍｍｏｌ）の２−フルオロベンズアルデヒドの溶液を、無水エタノールと水との４０ｍＬの１：１混合物中の１．００ｇ（７．５７ｍｍｏｌ）の２−インダノンおよび９０ｍｇ（２．２７ｍｍｏｌ）のＮａＯＨを含む溶液に５分間にわたって加えた。この混合物を１２時間攪拌し、形成された固体を吸引濾過によって回収し、冷エタノールで洗浄し、高真空下で乾燥した。
【０１３１】
（実施例３１）
（３，５−ビス−（２−フルオロベンジリデン）−ピペリジン−４−オン−アアセテート ＥＦ２４）
４−ピペリドン塩酸塩一水和物（３０７ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）を氷酢酸（８ｍＬ）中に懸濁し、室温で、ＨＣｌガスで飽和した。得られた透明な溶液に、２−フルオロベンズアルデヒド（０．５９ｍＬ、５．６０ｍｍｏｌ）を加え、この反応溶液を室温で４８時間放置した。形成する黄色結晶を濾過し、無水ＥｔＯＨで洗浄し、減圧下で乾燥した。さらなる精製は、必要でなかった。
【０１３２】
【数３７】

（実施例３２）
（細胞生存能力およびＶＥＧＦ／ＴＦ阻害分析）
上記のように、ニュートラルレッド取り込み、ＶＥＧＦ産生およびＴＦ産生に対する本発明の化合物の効果を、種々のヒト癌細胞株について測定した。このデータのいくつかもまた、図１〜５に要約する。図において、化合物ＥＦ４、ＭＤ６およびＭＤ１０に適用されるように、用語「公知の」は、列挙された化合物が、文献に見られるが、これらの化合物が抗脈管形成特性または癌処置としての有用性を示すというどんな示唆もないことに留意すること。以下の表１は、クルクミンならびにＲＰＭＩ−７９５１細胞についてのその他の公知の化学療法剤および抗脈管形成因子の結果と比較した、本発明の選択されたクルクミンアナログについての結果を列挙する。
【０１３３】
（表１）
ニュートラルレッドアッセイ、ＶＥＧＦ ＥＬＩＳＡ^aアッセイおよびＴＦ ＥＬＩＳＡ^dアッセイにより測定した場合の、ヒト黒色腫細胞株ＲＰＭＩ−７９５１における選択された新規なクルクミンアナログの特徴；黒色腫薬剤および抗脈管形成剤との比較
【０１３４】
【表１】

^a脈管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）対ＤＭＳＯコントロールおよびクルクミンの抑制の程度の測定。
^bコントロールの％。
^cｐｇ／ｍｌ／ウェルの濃度単位。
^d組織因子（ＴＦ）対ＤＭＳＯコントロールおよびクルクミンの、抑制の程度の測定。
【０１３５】
表および添付の図面に示されるように、アナログの２つのシリーズが発見された。シリーズＩのアナログは、いくつかの癌細胞株について、ＶＥＧＦ産生を阻害し、そして同時に細胞成長を阻害することが明らかになった。この群の中のいくつかの化合物はまた、ヒト乳癌細胞株の成長を防止する際に、ＴＡＸＯＬより有効であり、そして正常ヒトＶＥＣおよび形質転換されたマウスＶＥＣの増殖を阻害する際にクルクミンおよびＣＩＳＰＬＡＴＩＮよりも強力であった。
【０１３６】
シリーズＩＩのアナログ（ＥＦ１５、ＥＦ１９−２２、ＭＤ２７９ＬおよびＭＤ２７９Ｕを含む）は、細胞死を引き起こすことなくＶＥＧＦ産生を選択的に遮断した。これらの化合物はまた、正常ＶＥＣまたは悪性ＶＥＣに対して細胞傷害性ではなかった。
【０１３７】
これらの結果は、本発明のアナログが、腫瘍増殖および脈管内皮細胞増殖を直接阻害し得、かつ腫瘍誘発脈管形成に必要なＶＥＧＦの産生を遮断し得ることを示す。従って、これらの結果は、新規なシリーズＩのアナログが潜在的な抗癌剤／抗脈管形成剤であり、一方、シリーズＩＩの化合物が、正常ＶＥＣに対してほとんど毒性を有さない有望な抗脈管形成薬であることを示唆する。
【０１３８】
（実施例３３）
（表２）
ＶＥＧＦ ＥＬＩＳＡアッセイにより測定された、ヒト黒色腫細胞株ＲＰＭＩ−７９５１による脈管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）産生
【０１３９】
【表２】

値は、２回のアッセイの平均である。
^*ＤＭＳＯ（０．１％）：ＶＥＧＦ １０４５ｐｇ／ｍｌ＝１００％
^**ダカルバジン（Ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）：ヒト黒色腫の処置に現在使用される化学療法剤。
^***サリドマイド：現在臨床試験中の抗脈管形成薬。
ｎ．ｄ．：行われていない。
【０１４０】
（実施例３４）
（表３）
それぞれＶＥＧＦ ＥＬＩＳＡおよびＴＦ ＥＬＩＳＡにより測定したヒト前立腺癌細胞株ＤＵ−１４５およびＰＣ−３による、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）および組織因子（ＴＦ）の産生
全ての化合物を、２０μＭおよびＤＭＳＯ（溶媒コントロール）（最終濃度で０．１％）で使用する。
【０１４１】
【表３】

値は、３回のアッセイの平均および標準偏差（Ｓ．Ｄ．）である。ｎ．ｄ．：行われていない
示されるように、ＤＵ−１４５は、ＰＣ−３細胞よりも２０倍高いレベルのＶＥＧＦ産生を有する。このレベルは、他には細胞株ＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌細胞１種のみで見られる。ＶＥＧＦ産生およびＴＦ産生が多くなるほど、同じパーセントを阻害するために必要とされる化合物の濃度が高くなる（例えば、ＤＵ−１４５細胞およびＰＣ−３細胞に対するＥ−２の効果）。
両方の細胞株とも、塩基性ＦＧＦ（ｂＦＧＦ）を全く産生しない。
【０１４２】
（実施例３５）
（表４）
ＶＥＧＦ ＥＬＩＳＡアッセイにより測定されたヒト前立腺癌細胞株ＤＵ−１４５およびＰＣ−３による脈管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）産生
全ての化合物を２０μＭおよびＤＭＳＯ（溶媒コントロール）（最終濃度で０．１％）にて使用する。
【０１４３】
【表４】

示されるように、ＤＵ−１４５は、ＰＣ−３細胞よりも２０倍高いレベルのＶＥＧＦ産生を有する。このレベルは、他には細胞株ＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌細胞１種のみで見られる。ＶＥＧＦ産生が多くなるほど、同じパーセントを阻害するために必要とされる化合物の濃度が高くなる（例えば、ＤＵ−１４５細胞およびＰＣ−３細胞に対するＥ−２の効果）。両方の細胞株とも、塩基性ＦＧＦを全く産生しない。
値は、３回のアッセイの平均および標準偏差である。
【０１４４】
（実施例３６）
（表５）
ＴＦ ＥＬＩＳＡアッセイにより測定された、ヒト黒色腫細胞株ＲＰＭＩ−７９５１による組織因子（ＴＦ）産生
【０１４５】
【表５】

ｎ．ｄ．：行われていない。値は、二回のアッセイの平均である。
【０１４６】
（実施例３７）
（表６）
ＴＦ ＥＬＩＳＡアッセイにより測定されたヒト乳癌細胞株ＭＤＡ−ＭＢ−２３１による組織因子（ＴＦ）産生
【０１４７】
【表６】

ｎ．ｄ．：行われていない。値は、二回のアッセイの平均である。
【０１４８】
（実施例３８）
本発明の多くの化合物を、ＮＣＩ Ａｎｔｉ−Ｔｕｍｏｒ Ｓｃｒｅｅｎを用いて、活性についてスクリーニングした。その結果を、以下の表７〜９に示す。６０のヒト腫瘍細胞株を５濃度（０．０１μＭ〜１００μＭ）の最小限度で化合物の１０倍希釈物と４８時間処理した。スルホローダミン（ｓｕｌｆｏｒｈｏｄａｍｉｎｅ）Ｂ（ＳＲＢ）アッセイを用いて、細胞生存度または増殖を算出した。ＧＩ５０は、薬物が腫瘍細胞増殖を５０％阻害する濃度を言う。ＬＣ５０は、５０％の腫瘍細胞死を引き起こす薬物の濃度を言う。ＥＦ２４およびＥＦ２５は、３つの別の実験の平均を示す。
（表７）
（ＮＣＩ Ａｎｔｉ−Ｔｕｍｏｒ Ｓｃｒｅｅｎにおける化合物の培地増殖阻害濃度（ＧＩ５０、μＭ））
【０１４９】
【表７】

示されるように、ＥＦ４、ＥＦ２４およびＥＦ２５は、いくつかの細胞型について、化学療法剤ＣＩＳＰＬＡＴＩＮより低いＧＩ５０を示した。
（表８）
（ＮＣＩ Ａｎｔｉ−Ｔｕｍｏｒ Ｓｃｒｅｅｎにおける化合物の培地致死濃度（ＬＣ５０、μＭ））
【０１５０】
【表８】

ＥＦ４、ＥＦ９、ＥＦ２４およびＥＦ２５は、いくつかの細胞型について化学療法剤ＣＩＳＰＬＡＴＩＮより低いＬＣ５０を示した。
【０１５１】
ヒト腫瘍細胞株および内皮細胞株を、０．１μＭ〜４０μＭの間の４濃度の最小限度で化合物で７２時間処理した。ニュートラルレッド（Ｎｕｅｔｒａｌ Ｒｅｄ）アッセイを用いて、細胞の生存度を算出した。表９の数値は、少なくとも３つの別の実験の代表である。
（表９）
（Ｅｍｏｒｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｃｅｌｌ Ｓｃｒｅｅｎにおける化合物の培地増殖阻害濃度（ＧＩ５０、μＭ））
【０１５２】
【表９】

本発明の多くの改変および他の実施形態が、前述の説明および関連する図面において示される教示の利益を有して、本発明が関係する分野の当業者の心に浮かぶ。従って、本発明は、開示される特定の実施形態に限定されず、そして改変および他の実施形態が添付される特許請求の範囲の範囲内に含まれることが意図されることが理解されるべきである。特定の用語が、本明細書中で用いられるが、これらは、一般的かつ説明的な意味のみで使用され、そして限定の目的のためではない。