JP2003219863A - バシルスｓｐ．Ｄ７４７菌株およびそれを用いた植物病害防除剤および害虫防除剤 - Google Patents

バシルスｓｐ．Ｄ７４７菌株およびそれを用いた植物病害防除剤および害虫防除剤

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Abstract

(57)【要約】 【課題】 様々な植物病および害虫を防除でき、生物農
薬として使用可能な菌株を得る。 【解決手段】 本発明は新菌株、バシルスｓｐ．Ｄ７４
７（ＦＥＲＭ Ｐ−１８１２８）に関するものであり、
また、本発明はバシルスｓｐ．Ｄ７４７菌株を有効菌と
して含有する植物病害防除剤および害虫防除剤に関す
る。バシルスｓｐ．Ｄ７４７は、その培養物（生菌体を
含む）又はその培養分離生菌体を根、茎、葉、種子など
の植物体上、あるいはその栽培土壌中に存在させること
によって、きわめて広範囲に各種の植物病害の発生を抑
止し、害虫を防除することができ、かつ、本発明のＤ７
４７菌株を含んだ植物病害防除剤および害虫防除剤を散
布した植物は、各種植物病および害虫に対して高い防除
効果を有することとなる。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明はバシルスｓｐ．Ｄ７
４７菌株およびその利用に関し、さらに詳しくは植物病
害の発病抑制効果および害虫防除効果を有するバシルス
ｓｐ．Ｄ７４７菌株を有効菌として含有する植物病害防
除剤又は／及び害虫防除剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】植物病害および害虫防除法としては、輪
作や太陽熱を利用した耕種的あるいは物理的防除、化学
農薬を用いる化学的防除、病害抵抗性品種の利用による
防除、弱毒ウィルスや病原菌に対する拮抗微生物を用い
た生物的防除等が挙げられる。これらのうち、化学農
薬、特に有機合成殺菌剤の開発研究は近年に至るまで目
覚ましく発達し、効力が高く様々な作用を有する多数の
薬剤が次々と開発され、更には様々な施用法も開発され
た。これらを用いた化学的防除法は植物の病害防除並び
に防除作業の省力化等に大きく貢献し、広く普及してい
る。しかしながら、近年いわゆる薬剤耐性菌の出現によ
り、化学的防除法による防除効果が低下するという現象
が一部作物、病害で認められ、問題となってきている。
また作物の指定産地化が進むにつれて連作を余儀なくさ
れる結果、化学農薬では難防除とされる土壌伝染性病害
の発生も各地で深刻な問題となっている。さらに、化学
農薬を大量に何度も繰り返して用いる方法は、自然界に
存在しない化学物質を環境中に放出するため、動植物に
直接毒性を有する薬剤はもちろん、そうでない薬剤であ
っても、環境へ悪影響を引き起こすことが心配されてい
る。
【０００３】以上のように化学農薬による病害防除は耐
性菌の出現によって防除効果が低下する可能性が高く、
その場合新たなる殺菌剤の開発が必要となってしまう。
また化学農薬では難防除とされる病害防除に対しては、
代替手段あるいは他の方法を併用する手段を講じなくて
はならない。さらに、環境に対してより安全性の高い防
除技術の確立も望まれている。
【０００４】近年このような背景のもと、化学農薬の使
用に偏った防除方法を見直し、化学農薬からより環境へ
の安全性が高いと想定される微生物を利用した生物防除
（いわゆる生物農薬）方法が提案され、その一部は実用
化されている。
【０００５】植物病害の生物防除に関する研究として、
弱毒ウイルスの利用、病原菌の弱病原性あるいは非病原
性系統微生物の利用、拮抗微生物の利用等が試みられて
いる。その中でも拮抗微生物の利用に関する研究事例は
多数あり、また拮抗微生物のうちバシルス属菌を用いた
病害防除研究についても多数の報告はあるが、広い病害
防除スペクトラムを有するバシルス属菌は見いだされて
なかった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、複数
種の植物病害の発病抑制又は／及び害虫防除の効果を有
する新規な菌株を分離することにある。本発明の更なる
課題は、上記菌株を有効菌として含有し、生物農薬とし
て有効に使用できる植物病害防除剤又は／及び害虫防除
剤を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、自然界か
ら分離したバシルス属に属する一新菌株が、植物体の成
長には悪影響をおよぼすことなく、数種の植物病害の発
病抑制効果及び害虫防除効果を有することを見出し、本
発明を完成するに至った。
【０００８】本発明は以下の菌株および植物病害防除剤
及び害虫防除剤である。 （１） バシルス(Bacillus）ｓｐ．Ｄ７４７菌株。 （２） バシルス(Bacillus）ｓｐ．Ｄ７４７菌株を有
効菌として含有する植物病害防除剤。 （３） バシルス(Bacillus）ｓｐ．Ｄ７４７菌株を有
効菌として含有する害虫防除剤。
【０００９】（Ｄ７４７菌株の単離と寄託）本発明のＤ
７４７菌株は静岡県小笠郡菊川町の空気中から単離され
た菌株である。これらの菌株は後記する細菌学的性質を
もとに、Bergey’s Manual of Systematic Bacteriolog
y volume 1(1984）を参考に同定したところ、バシルス
属に属する新菌株であり、最初バシルス・セレウスに属
するのではないかと思われ、平成１２年１１月２８日に
Bacillus cereus D747として工業技術院生命工学工業技
術研究所に寄託した。しかしながら、後日バシルス・セ
レウスに属することに疑問をもち、詳細に検討し、バシ
ルス属に属するまでの確信に至るのみであったので、平
成１４年４月１日にBacillus sp. D747への記載事項変
更届を提出した。従って、本発明のＤ７４７菌株は現
在、独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託セ
ンターにおいて、Bacillus sp. D747（ＦＥＲＭ Ｐ−
１８１２８）として寄託されている。
【００１０】（Ｄ７４７菌株の細菌学的性質）本発明の
Ｄ７４７株の細菌学的性質は以下に示す通りである。な
お、菌学的性質の試験は前記Bergey’s Manual of Syst
ematic Bacteriologyに基づいて行った。 （Ａ）形態学的性質 形態： 桿菌 大きさ： 幅１．０〜１．２μｍ、長さ３〜５μｍ 運動性： ＋ 鞭毛の着生状態： 周鞭毛 内生胞子： ＋ 胞子の位置： 中央 胞子の膨張： −
【００１１】（Ｂ）培養的性質 コロニーの色： 白色〜薄い茶色 肉汁寒天平板培養： 白色〜クリーム色のコロニーを形
成し、表面はしわ状
【００１２】（Ｃ）生理学的性質 グラム染色性： ＋ 硝酸塩の還元： ＋ ＭＲ試験： − ＶＰ試験： ＋ インドールの生成： − 澱粉の加水分解： ＋ クエン酸の資化性： ＋ 無機窒素源： ＋ オキシダーゼ： − カタラーゼ： ＋ 生育ｐＨ ６．８、肉エキス培地： ＋ ５．７、肉エキス培地： ＋ 生育温度 ３０℃： ＋ ５０℃： − 生育ＮａＣｌ濃度 ２％： ＋ ５％： ＋ ７％： ＋ 好気的生育： ＋ 嫌気的生育： − Ｏ−Ｆテスト： Ｆ 卵黄反応： − グルコースからの酸生成： ＋ マンニトールからの酸生成： − Ｌ−アラビノースからの酸生成： − Ｄ−キシロースからの酸生成： − グルコースからのガス生成： − β−ガラクトシダーゼ： − ＮａＣｌ及びＫＣｌ要求性： −
【００１３】（Ｄ７４７菌株の培養）本発明に用いられ
るＤ７４７菌株の培養方法においては、培地の種類およ
び培養条件等、適宜任意なものを選択できる。例えば肉
エキス培地など一般的な培地の他、グルコース、ペプト
ン、イーストエキスを含む培地などが挙げられる。また
液体培地以外に寒天入りの斜面培地および平板培地等の
固体培地を用いてもよい。培養によってＤ７４７菌株を
増殖させて、所望の菌体量を得ることができる。
【００１４】培地の炭素源としては、上記菌株が同化し
うるあらゆるものが利用可能である。具体的にはグルコ
ース、ガラクトース、ラクトース、スクロース、マルト
ース、麦芽エキス、澱粉加水分解物などの糖の外に、Ｄ
７４７菌株が利用し得る各種の合成または天然炭素源を
あげることができる。
【００１５】培地の窒素源として、同様に、ペプトン、
肉エキス、酵母エキスなどの有機窒素含有物をはじめ、
該菌株が利用し得る各種の合成又は天然物も利用可能で
ある。
【００１６】微生物培養の常法に従って、食塩、リン酸
塩などの無機塩類、カルシウム、マグネシウム、鉄など
の金属の塩類、ビタミン、アミノ酸などの微量栄養源も
必要に応じて添加することができる。
【００１７】培養は、振盪培養、通気培養などの好気的
条件下で行なうことができる。培養温度は２０〜３０
℃、好ましくは２５〜３０℃、ｐＨは５〜８、好ましく
は６〜７、培養期間は１〜４曰、好ましくは２〜３日が
適当である。
【００１８】本発明のバシルスｓｐ．Ｄ７４７菌株は、
その培養物（菌体を含む）またはその処理物（培養物と
他成分との混合物など）、又は培養分離菌体（培養物を
遠心分離処理した菌体もしくはその洗浄菌体など）また
はその処理物（培養分離菌体と他成分の混合物など）更
に又は、これらの処理物（これらの液体や固体による希
釈物など）を、根、茎、葉、種子などの植物体上、ある
いはその栽培土壌中に存在させることで、各種の植物病
害を抑止し、また害虫を防除する性質を有する。
【００１９】本発明のＤ７４７菌株は施用形態により、
藻菌類（Oomycetes）、子嚢菌類（Ascomycetes）、担子
菌類（Basidiomycetes）、及び不完全菌類（Deuteromyc
etes）に属する菌類、および細菌類に起因する植物の病
害を防除することができる。
【００２０】Ｄ７４７菌株が防除することができる病気
の原因菌として、具体的には、シュウドペロノスポラ
（Pseudoperonospora）属菌、例えばキュウリべと病菌
（Pseudoperonospora cubensis）、ベンチュリア（Vent
uria）属菌、例えばリンゴ黒星病菌（Venturia inaequa
lis）、エリシフェ（Erysiphe）属菌、例えばコムギう
どんこ病菌（Erysiphe graminis）、ピリキュラリア（P
yricularia）属菌、例えばイネいもち病菌（Pyriculari
a oryzae）、ボトリチス（Botrytis）属菌、例えばキュ
ウリ灰色かび病菌（Botrytis cinerea）、リゾクトニア
（Rhizoctonia）属菌、例えばイネ紋枯病菌（Rhizocton
ia solani）、パクシニア（Puccinia）属菌、例えばコ
ムギ赤さび病菌（Puccinia recondita）、セプトリア
（Septoria）属菌、例えばコムギふ枯病菌（Septoria n
odorum）、スクレロティニア（Sclerotinia）属菌、例
えばキュウリ菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）、
ピシウム（Pythium）属菌、例えばキュウリ苗立枯病菌
（Pythium debaryanum Hesse）、また細菌として、バー
クホルデリア（Burkholderia）、例えばイネ苗立枯細菌
病（Burkholderia plantarii）などをあげることができ
るが、本発明はこれらの例により限定されるものではな
い。
【００２１】また、本発明のＤ７４７菌株は、半翅目害
虫、鱗翅目害虫、鞘翅目害虫、双翅目害虫、直翅目害
虫、シロアリ目害虫、アザミウマ目害虫、ハダニ類など
の害虫を防除することができる。
【００２２】Ｄ７４７菌株が防除することができる害虫
として、具体的には、半翅目害虫、例えばホソヘリカメ
ムシ（Ｒｉｐｔｏｒｔｕｓ ｃｌａｖａｔｕｓ）等のカ
メムシ類（異翅類；ＨＥＴＥＲＯＰＴＥＲＡ）、ツマグ
ロヨコバイ（Ｎｅｐｈｏｔｅｔｔｉｘ ｃｉｎｃｔｉｃ
ｅｐｓ）等のヨコバイ類、トビイロウンカ（Ｎｉｌａｐ
ａｒｖａｔａ ｌｕｇｅｎｓ）等のウンカ類、Ｐｓｙｌ
ｌａ ｓｐ．等のキジラミ類、シルバーリーフコナジラ
ミ（Ｂｅｍｉｓｉａ ｔａｂａｃｉ）等のコナジラミ
類、モモアカアブラムシ（Ｍｙｚｕｓ ｐｅｒｓｉｃａ
ｅ）等のアブラムシ類、クワコナカイガラムシ（Ｐｓｅ
ｕｄｏｃｏｃｃｕｓ ｃｏｍｓｔｏｃｋｉ）等のカイガ
ラムシ類、鱗翅目害虫、例えばチャハマキ（Ｈｏｍｏｎ
ａ Ｍａｇｎａｎｉｍａ）等のハマキガ類、ブドウホソ
ハマキ（Ｅｕｐｏｅｃｉｌｌｉａ ａｍｂｉｇｕｅｌｌ
ａ）等のホソハマキガ類、Ｂａｍｂａｌｉｎａ ｓｐ．
等のミノガ類、コクガ（Ｎｅｍａｐｏｇｏｎ ｇｒａｎ
ｅｌｌｕｓ）等のホソガ類、ミカンハモグリガ（Ｐｈｙ
ｌｌｏｃｎｉｓｔｉｓ ｃｉｔｒｅｌｌａ）等のコハモ
グリガ類、コナガ（Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅ
ｌｌａ）等のスガ類、二カメイガ（Ｃｈｉｌｏ ｓｕｐ
ｐｒｅｓｓａｌｉｓ）等のメイガ類、タバコバッドワー
ム（Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓ ｖｉｒｅｓｃｅｎｓ）等のヤ
ガ類、鞘翅目害虫、例えばドウガネブイブイ（Ａｎｏｍ
ａｌａ ｃｕｐｒｅａ）等のコガネムシ類、ニジュウヤ
ホシテントウ（Ｅｐｉｌａｃｈｎａ ｖｉｇｉｎｔｉｏ
ｃｔｏｐｕｎｃｔａｔａ）等のテントウムシ類、イネミ
ズゾウムシ（Ｌｉｓｓｏｒｈｏｐｔｒｕｓ ｏｒｙｚｏ
ｐｈｉｌｕｓ）等のゾウムシ類、双翅目害虫、例えばア
カイエカ（Ｃｕｌｅｘ ｐｉｐｉｅｎｓ）、シナハマダ
ラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ｓｌｎｅｎｓｉｓ）、コダ
タアカイエカ（Ｃｕｌｅｘ ｔｒｉｔａｅｎｉｏｒｈｙ
ｎｃｈｕｓ）、直翅目害虫、例えばチャバネゴキブリ
（Ｂｌａｔｅｌｌａ ｇｅｒｍａｎｉｃａ）、シロアリ
目害虫、例えばヤマトシロアリ（Ｒｅｔｉｃｕｌｉｔｅ
ｒｍｅｓ ｓｐｅｒａｔｕｓ）、アザミウマ目害虫、例
えばチャノキイロアザミウマ（Ｓｃｉｒｔｏｔｈｒｉｐ
ｓ ｄｏｒｓａｌｉｓ）、ハダニ類、例えばナミハダニ
（Ｔｅｔｒａｎｙｃｈｕｓ ｕｒｔｉｃａｅ）、また、
その他有害動物、不快動物、衛生害虫、寄生虫、例えば
スクミリンゴガイ（Ｐｏｍａｃｅａ ｃａｎａｌｉｃｕｌ
ａｔａ）、ナメクジ（Ｉｎｃｉｌａｒｉａ ｓｐ．）等
の腹足綱類（Ｇａｓｔｒｏｐｏｄａ）、ダンゴムシ（Ａ
ｒｍａｄｉｌｌｉｄｉｕｍ ｓｐ．）等の脚目類などをあ
げることができるが、本発明はこれらの例により限定さ
れるものではない。
【００２３】（植物病害防除剤および害虫防除剤）本発
明の植物病害防除剤および害虫防除剤は、上記のように
植物病害や害虫を防除できるＤ７４７菌株を有効菌とし
て含有するものである。本発明の植物病害防除剤および
害虫防除剤においては、Ｄ７４７菌株を単体で使用する
こともできるが、Ｄ７４７菌株として単体で、またはＤ
７４７菌株とともに、Ｄ７４７菌株の変異体も使用する
ことができる。変異体は、上記Ｄ７４７菌株の細菌学的
特性を有し、植物病害防除作用および害虫防除作用を有
するものであり、自然突然変異株、紫外線や化学変異剤
を用いての突然変異株、また細胞融合株および遺伝子組
み替え株も利用が可能である。本発明では植物病害防除
剤および害虫防除剤に含有されるＤ７４７菌株には、Ｄ
７４７菌株の変異体が含まれる。
【００２４】本明細書中において「防除」とは病気や害
虫の予防、忌避のみならず、除去、死滅をも含む意味で
用いるものとする。したがって、病原菌に既に感染した
植物であっても本発明の植物病害防除剤を適用すること
によって、植物から病原菌を除去することができ、病原
菌による発病や病気の悪化を防止することができる。ま
た、害虫についても、忌避および殺虫効果により防除す
ることができる。
【００２５】本発明による植物病害防除剤および害虫防
除剤においてＤ７４７菌株が生菌として適用される場
合、１０5〜１０10個／ｍｌの濃度で、植物体に添加さ
れることが好ましい。
【００２６】また、Ｄ７４７菌株の培養物を使用する場
合、その適用時期および適用量は上記生菌の場合に準じ
て適宜決定されてよい。
【００２７】さらに本発明による植物病害防除剤および
害虫防除剤においてＤ７４７菌株は、菌体または培養物
を単独で用いるほか、不活性な液体または固体の担体で
希釈し、必要に応じて界面活性剤、その他の補助剤を加
えた薬剤として用いてもよい。具体的な製剤例として
は、粒剤、粉剤、水和剤、懸濁製剤、乳剤等の剤型等が
あげられる。好ましい担体の例としては、タルク、ベン
トナイト、クレー、カオリン、珪藻士、ホワイトカーボ
ン、バーミキュライト、消石灰、珪砂、硫安、尿素、多
孔質な固体担体、水、イソプロピルアルコール、キシレ
ン、シクロヘキサノン、メチルナフタレン、アルキレン
グリコールなどの液体担体等があげられる。界面活性剤
および分散剤としては、例えばジナフチルメタンスルホ
ン酸塩、アルコール硫酸エステル塩、アルキルアリール
スルホン酸塩、リグニンスルホン酸塩、ポリオキシエチ
レングリコールエーテル、ポリオキシエチレンアルキル
アリールエーテル、ポリオキシエチレンソルビタンモノ
アルキレート等があげられる。補助剤としては、カルボ
キシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、プロ
ピレングリコール、アラビアゴム、キサンタンガム等、
保護剤としてはスキムミルク、ｐＨ緩衝剤等があげられ
る。この場合、Ｄ７４７菌株の生菌体の量および／また
はその培養物の量、さらには適用時期および適用量は上
記生菌の場合に準じて適宜決定することができる。
【００２８】さらに、本発明の植物病害防除剤および害
虫防除剤は、有効成分として必要に応じて殺虫剤、他の
殺菌剤、除草剤、植物生長調節剤、肥料などのその他の
成分を含むことができる。また本発明の植物病害防除剤
および害虫防除剤は、Ｄ７４７菌株とともに、他の種類
の菌株を含有してもよい。
【００２９】本発明の植物病害防除剤および害虫防除剤
は、そのまま直接施用するか、あるいは水などで希釈し
て施用することができる。植物病害防除剤および害虫防
除剤の施用方法は、特に限定されず、例えば、直接植物
や害虫に散布する方法、土壌に散布する方法、植物や土
壌に添加する水や肥料に添加する方法などがあげられ
る。その他、製剤の施用量は、対象病害、対象害虫、対
象作物、施用方法、発生傾向、被害の程度、環境条件、
使用する剤型などによって変動するので、適宜調整され
ることが好ましい。
【００３０】以上のように本発明のバシルス ｓｐ．（B
acillus ｓｐ．）Ｄ７４７菌株は、広い病害および害虫
防除スペクトラムを有し、複数種の植物病害や害虫を防
除することができる。本発明のＤ７４７菌株を含有する
本発明の植物病害防除剤および害虫防除剤は、植物病害
や害虫を防除できるので、生物農薬として使用できる。
したがって、本発明の植物病害および害虫防除剤は環境
に対して安全性が高く、また複数種の病害や害虫に対し
て防除効果を有するので、他の併用手段を用いなくても
広く病害や害虫を防止することができる。
【００３１】
【発明の実施の形態】本発明を以下の実施例によって具
体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定され
るものではない。
【００３２】（Ｄ７４７菌株の培養）Ｄ７４７菌株を静
岡県小笠郡菊川町の空気中から分離した。詳細に述べる
と、静岡県小笠郡菊川町加茂の空気中に漂う微生物を分
離するため、ポテト−デキストロース寒天培地が入った
平板培地を蓋を取って１０分間放置し、空気に接触させ
た。これを２７℃で３日間培養し、形成したコロニーを
分離した。分離したコロニーを、ポテト−デキストロー
ス液体培地で振とう培養を行い、植物病害菌に対して効
果のある菌株を見出してＤ７４７菌株を分離した。分離
したＤ７４７菌株をグルコース１％、可溶性澱粉２％、
ポリペプトン０．５％、乾燥酵母１％、脱脂大豆１％、
ＫＨ2ＰＯ4 ０．２％、ＮａＣｌ ０．２％、炭酸カル
シウム０．３％を含む、ｐＨ６．０の培地で２７℃、１
２０ｒｐｍ、３日間振盪培養した後、遠心集菌（１０，
０００×ｇ、１５分間）し、滅菌水中に懸濁し、培地成
分を洗浄した。この操作を２回行い、再び滅菌水中に約
１０ 9／ｍｌの濃度で懸濁した。
【００３３】。（イネいもち病防除効果試験）直径７．
５ｃｍの素焼鉢各々に、イネ種子（品種：愛知旭）を１
０粒ずつ播種し、温室内で育成した。第４葉が展開した
イネに、上記のようにして得られたＤ７４７菌株の懸濁
液を１ポット当たり１０ｍｌ散布し、風乾した後、イネ
いもち病菌（Pyricularia oryzae）の胞子懸濁液を噴霧
接種し、湿室内で管理した。接種５日後に第４葉の病斑
数を調査し、これを発病度として以下の表１の基準によ
り評価した。試験結果を表２に示す。
【００３４】 ［表１］ ――――――――――――――――――――――――― 評価 ――――――――――――――――――――――――― Ａ 発病を認めず Ｂ 無処理の発病度の２０％未満 Ｃ 無処理の発病度の２０％以上５０％未満 Ｄ 無処理の発病度の５０％以上 ―――――――――――――――――――――――――
【００３５】（イネ紋枯病防除効果試験）直径６．０ｃ
ｍの素焼鉢各々に、イネ種子（品種：金南風）を１０粒
づつ播種し、温室内で育成した。２〜３葉期のイネに、
上記のようにして得られたＤ７４７菌株の懸濁液を１ポ
ット当たり１０ｍｌ散布し、風乾した後、イネ紋枯病菌
（Thanatephor uscucumeris）を接種し、湿室内で管理
した。接種５日後に病斑高を調査し、これを発病度とし
て上記表１の基準により評価した。試験結果を表２に示
す。
【００３６】（コムギふ枯病防除効果試験）直径６．０
ｃｍのプラスチックポット各々に、コムギ種子（品種：
農林６１号）を１０粒づつ播種し、温室内で育成した。
第２葉が展開したコムギに、上記のようにして得られた
Ｄ７４７菌株の懸濁液を１ポット当たり１０ｍｌ散布し
た。風乾後、コムギふ枯病菌（Septoria nodorum）の柄
胞子を接種し、温室内で管理した。接種１０日後にポッ
ト全体の第１葉の発病面積を調査し、これを発病度とし
て上記表１の基準により評価した。試験結果を表２に示
す。
【００３７】（コムギうどんこ病防除効果試験）直径
６．０ｃｍのプラスチックポット各々に、コムギ種子
（品種：農林６１号）を１０粒づつ播種し、温室内で育
成した。１．５〜２葉期のコムギに、上記のようにして
得られたＤ７４７菌株の懸濁液を１ポット当たり１０ｍ
ｌ散布した。風乾後、コムギうどんこ病菌（Erysiphe g
raminis）分生胞子を接種し、温室内のベンチ上に調査
まで置いて、温室内で管理した。接種１０日後にポット
全体の第１葉の発病面積を調査し、これを発病度として
上記表１の基準により評価した。試験結果を表２に示
す。
【００３８】（キュウリ灰色かび病防除効果試験）直径
６．０ｃｍのプラスチックポット各々に、キュウリ種子
（品種：相模半白）を４粒ずつ播種し、温室内で育成し
た。子葉が展開したキュウリ幼苗に、上記のようにして
得られたＤ７４７菌株の懸濁液を１ポット当たり１０ｍ
ｌ散布した。風乾後、キュウリ灰色かび病菌（Botrytis
cinerea）の胞子懸濁液を浸したぺーパーディスクをキ
ュウリ子葉表面に置床接種し、２０℃湿室で管理した。
接種３日後に子葉の発病面積を調査し、これを発病度と
して上記表１の基準により評価した。試験結果を表２に
示す。
【００３９】（キュウリベと病防除効果試験）直径６．
０ｃｍのプラスチックポット各々に、キュウリ種子（品
種：相模半白）を４粒ずつ播種し、温室内で育成した。
子葉が展開したキュウリ幼苗に、上記のようにして得ら
れたＤ７４７菌株の懸濁液を１ポット当たり１０ｍｌ散
布した。風乾後、キュウリベと病菌（Pseudoperonospor
a cubensis）の遊走子嚢懸濁液を噴霧接種し、２２℃湿
室で２４時間放置後、温室内で管理した。接種８日後に
子葉の発病面積を調査し、これを発病度として上記表１
の基準により評価した。試験結果を表２に示す。
【００４０】 ［表２］ ―――――――――――――――――――――――――― 試験病害 Ｄ−７４７菌株による防除効果 ―――――――――――――――――――――――――― イネいもち病 Ａ イネ紋枯病 Ａ コムギふ枯病 Ａ コムギうどんこ病 Ａ キュウリ灰色かび病 Ａ キュウリべと病 Ａ ――――――――――――――――――――――――――
【００４１】（イネミズゾウムシ殺虫試験）上記のよう
にして得られたＤ７４７菌株の懸濁液３０ｍｌを容量６
０ｍｌのプラスチックカップに入れ、長さ３ｃｍのイネ
葉片を３枚浮かべた。これにイネミズゾウムシ（Ｌｉｓ
ｓｏｒｈｏｐｔｒｕｓ ｏｒｙｚｏｐｈｉｌｕｓ）成虫
を１０頭放った後、蓋をして２５℃の恒温室に放置し
た。３日後に生存虫数を数えた。試験は３回行い、下記
の式（１）により死虫率を求め、最終的な死虫率を３回
の平均値をとることにより決定した。試験結果を表３に
示す。
【００４２】 ［数１］ １０−(生存虫の数) 死虫率(％)＝――――――――――×１００ (１) １０
【００４３】 ［表３］ ―――――――――――――――――――――――――― ｜ 最終的な死虫率（％） ―――――――――――――――――――――――――― Ｄ７４７菌株で処理 ｜ １００ ―――――――――――――――――――――――――― 無処理 ｜ ０ ――――――――――――――――――――――――――
【００４４】上記結果からわかるように、本発明のＤ７
４７菌株を含んだ植物病害防除剤および害虫防除剤を散
布した植物は、各種植物病および害虫に対して高い防除
効果を有していた。
【００４５】
【発明の効果】本発明は新菌株、バシルス ｓｐ．Ｄ７
４７（ＦＥＲＭ Ｐ−１８１２８）を見出したところに
特色を有する。バシルス ｓｐ．Ｄ７４７は、その培養
物（生菌体を含む）又はその培養分離生菌体を根、茎、
葉、種子などの植物体上、あるいはその栽培土壌中に存
在させることによって、きわめて広範囲に各種の植物病
害の発生を抑止し、害虫を防除することができ、かつ、
本発明のＤ７４７菌株を含んだ植物病害防除剤および害
虫防除剤を散布した植物は、各種植物病および害虫に対
して高い防除効果を有することとなる。
【手続補正書】
【提出日】平成１４年１２月４日（２００２．１２．
４）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００９】（Ｄ７４７菌株の単離と寄託）本発明のＤ
７４７菌株は静岡県小笠郡菊川町の空気中から単離され
た菌株である。これらの菌株は後記する細菌学的性質を
もとに、Bergey’s Manual of Systematic Bacteriolog
y volume 1(1984）を参考に同定したところ、バシルス
属に属する新菌株であり、最初バシルス・セレウスに属
するのではないかと思われ、平成１２年１１月２８日に
Bacillus cereus D747として工業技術院生命工学工業技
術研究所に寄託した。しかしながら、後日バシルス・セ
レウスに属することに疑問をもち、詳細に検討し、バシ
ルス属に属するまでの確信に至るのみであったので、平
成１４年４月１日にBacillus sp. D747への記載事項変
更届を提出した。本発明のＤ７４７菌株は現在、独立行
政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターにお
いて、Bacillus sp. D747（ＦＥＲＭ ＢＰ−８２３
４）として寄託されている。（旧受託番号：ＦＥＲＭ
【書類名】 受託番号変更届
【整理番号】 ６５７５
【提出日】 平成１４年１２月５日
【旧寄託機関の名称】 独立行政法人産業技術総合研究
所 特許生物寄託センター
【旧受託番号】 ＦＥＲＭ Ｐ−１８１２８
【新寄託機関の名称】 独立行政法人産業技術総合研究
所 特許生物寄託センター
【新受託番号】 ＦＥＲＭ ＢＰ−８２３４
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 山路 孝二 静岡県小笠郡菊川町加茂1809 (72)発明者 永山 孝三 静岡県掛川市八坂2384−４ (72)発明者 矢野 祐幸 静岡県小笠郡菊川町加茂1809 Ｆターム(参考） 4B065 AA15X AC12 AC20 BA22 BB03 BB15 BB18 BB23 BB27 BB28 BC02 BC03 BC26 CA47 4H011 AA01 AC01 BB21 DA15 DD03

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 バシルスｓｐ．Ｄ７４７菌株。
  2. 【請求項２】 バシルスｓｐ．Ｄ７４７菌株を有効菌と
    して含有することを特徴とする植物病害防除剤。
  3. 【請求項３】 バシルスｓｐ．Ｄ７４７菌株を有効菌と
    して含有することを特徴とする害虫防除剤。
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