JP2000511161A

JP2000511161A - 身体通路の疾患を処置または予防するための組成物および方法

Info

Publication number: JP2000511161A
Application number: JP09541313A
Authority: JP
Inventors: エル．ハンター，ウイリアム; エス．マチャン，リンゼイ
Original assignee: アンジオテックファーマシュウティカルズ，インコーポレイテッド; ユニバーシティオブブリティッシュコロンビア
Priority date: 1996-05-24
Filing date: 1997-05-26
Publication date: 2000-08-29
Also published as: EP0914102B8; US20050096388A1; US20050107291A1; AU737078B2; CA2255891C; US20040224023A1; DE69734060D1; EP0914102A1; US6759431B2; KR20040097250A; CA2255891A1; AU2760497A; EP1616563A3; US20060121088A1; NO319946B1; US20050192235A1; NO20045602L; US20020052404A1; EP0914102B1; NO985463L

Abstract

(57)【要約】本発明は、身体通路に関連した疾患を処置または予防するための方法であって、上記身体経路の外部に治療剤を送達する工程を包含する方法を提供する。治療剤の代表的な例として、抗血管新生因子、抗増殖剤、抗炎症性剤、および抗生物質が挙げられる。

Description

【発明の詳細な説明】身体通路の疾患を処置または予防するための組成物および方法技術分野本発明は、一般的に、身体通路の疾患を処置または予防するための組成物および方法に関し、より詳細には、身体通路の外壁に送達され得る治療剤を含む組成物に関する。発明の背景必須物質の流動を可能にする身体内の多くの通路が存在する。これらは、例えば、動脈および静脈、食道、胃、小腸および大腸、胆汁管、尿管、膀胱、尿道、鼻経路、気管および他の気道、ならびに雄性および雌性生殖管を含む。傷害、種々の外科的手順、または疾患は、このような身体通路の狭窄、脆弱、および／または閉塞をもたらし、重篤な合併症および／または死さえももたらし得る。例えば、多くの型の腫瘍（良性および悪性の両方）は、身体通路壁への損傷または管腔の閉塞をもたらし、それにより通路を通した物質流動を遅延させるか、または妨げ得る。1996年のみで、合衆国において、11,200人以上が食道ガンにより、51,000人以上が大腸ガンおよび小腸ガンにより、そしてほぼ17,000人が直腸ガンにより死亡すると評価された。ガンにより冒される身体通路の閉塞は、それら自体でおよび自発的に生命をおびやかすだけでなく、それらはまた患者人生の質を制限する。新生物閉塞を引き起こす大多数の腫瘍の最初の処置は、外科的除去および／または化学療法、放射線治療またはレーザー治療である。不運なことに、その時までに、腫瘍は、しばしば手術不可能な、そして通常、一般的な慣習的な治療に応答しない、身体通路の閉塞を引き起こす。この問題に対する１つのアプローチは、内腔ステントの挿入であった。簡単には、ステントは、腫瘍または他の組織／物質によりブロックされている通路を物理的に開いたままにするための、身体通路の管腔に配置されるデバイスである。通常に配置されるステントの代表的な例として、Wallstent、Steckerステント、Gianturcoステント、およびPalmazステントが挙げられる（例えば、米国特許第5,102,417号、同第5,195,984号、同第5,17 6,626号、同第5,147,370号、同第5,141,516号、同第4,776,337号を参照のこと）。しかし、新生物閉塞におけるステントの使用に対する著しい欠点は、腫瘍がしばしばステントの隙間を通って管腔へ増殖し得ることである。さらに、管腔におけるステントの存在は、反応性または炎症性組織（例えば、血管、繊維芽細胞および白血球）のステント表面への内増殖を誘導し得る。この内増殖（腫瘍細胞および／または炎症性細胞からなる）がステントの内面に達し、そして管腔を傷つける場合、その結果は、ステントが正しく挿入された身体通路の再封鎖である。それにもかかわらず、他の疾患（増殖を含む新生物ではないけれど）もまた身体通路を同様に閉塞し得る。例えば、60歳以上の全男性の60％および80歳以上の全男性の100％に罹患する、良性前立腺過形成による前立腺尿道の狭窄は重大な問題である。現在の薬理学的処置（例えば、5-アルファレダクターゼインヒビター（例えば、フィナステライド(Finasteride)またはアルファアドレナリン作動性ブロッカー（例えば、テラゾザン（Terazozan））は、一般的に、患者の限定された集団においてのみ有効である。さらに、実施され得る外科的手順（例えば、前立腺の経尿道切除(TURP)；開いた(open)前立腺切除術、または閉じた(endo)泌尿器学的手順（例えば、レーザー前立腺切除術、マイクロ波の使用、低体温法、冷凍手術、またはステンティング (stenting)）は、代表的に、多くの合併症（例えば、出血、感染、失禁、インポテンス、および再発性疾患）を生じる。新生物性疾患または増殖性疾患に加えて、他の疾患（例えば、脈管疾患）は、身体通路の狭窄、脆弱、および／または閉塞をもたらし得る。1993年の評価（情報源-U.S．Heart and Stroke Foundationホームページ）によれば、6000万以上のアメリカ人は、心臓血管疾患の１つ以上の形態を有する。これらの疾患は、同年に954,138人の生命を奪った（合衆国の全死亡の41％）。バルーン血管形成（ステンティングありまたはなし）は、脈管疾患のために最も広く使用される処置の１つである；レーザー血管形成のような他の選択もまた、利用可能である。これは脈管構造の重篤な狭窄の多くの症例における選り抜きの処置であるが、バルーン血管形成を受けた約1/3の患者（情報源Heart and Strok e Foundationホームページ）は、最初の手順の６ヶ月以内に；しばしばさらなる介入を必要とするのに十分重篤な、処置動脈の狭窄を再生した（再狭窄）。このような脈管疾患（例えば、再狭窄を含む）は、少なくとも部分的に血管平滑筋細胞(VSMC)移動、VSMC増殖、および細胞外マトリックス沈着に続く内膜の肥厚によるものである。簡単には、血管内皮は、血液が滑らかに流れ得る非血栓形成性表面および血管壁を含む組織から血液成分を分離する障壁として作用する。内皮細胞はまた、ヘパリン硫酸、プロスタサイクリン、EDRF、ならびに血小板および白血球接着、VSMC収縮、VSMC移動、ならびにVSMC増殖を阻害する他の因子を放出する。例えば、バルーン血管形成、アテローム切除術、またはステント切除術間に生じる、内皮に対する任意の喪失または損傷は、血小板接着、血小板凝集、および血栓形成をもたらし得る。活性化血小板は、血管収縮を生じる物質（セロトニンおよびトロンボキサン）ならびに／またはVSMC移動および増殖を促進する物質（PDGF、上皮増殖因子、TGF-β、およびヘパリナーゼ）を放出し得る。動脈により放出される組織因子は血餅形成を刺激し、平滑筋細胞が移動および増殖し得るフィブリンマトリックスをもたらす。この事象のカスケードは、血管平滑筋細胞の収縮性表現型から分泌性表現型への形質転換を導く。血管形成により誘導される細胞溶解およびマトリックス破壊は、塩基性繊維芽細胞増殖因子(bFGF)の局所的放出をもたらし、これは順にPDGF 生成の誘導を通して直接的および間接的にVSMC増殖を剌激する。PDGFおよびbFGF に加えて、VSMC増殖もまた、血小板放出EGFおよびインシュリン増殖因子-1により剌激される。血管平滑筋細胞はまた、血管の中膜および内膜に移動するように誘導される。これは、細胞外マトリックスおよび血管壁の内部弾力層を通してVSMCのための経路を分解するマトリックスメタロプロテアーゼの放出および活性化により可能にされる。移動および増殖後、次いで、血管平滑筋細胞は、内膜肥厚の最も大きな部分を含む、グリコサミノグリカン、エラスチン、およびコラーゲンからなる細胞外マトリックスを沈着する。再狭窄プロセスの著しい部分は、全サイズの動脈における変化を導く血管壁；（中膜に加えて）外膜内での増殖に二次的なものの少なくともいくつか、の再構築（リモデリング）によるものであり得る。これらのプロセスの正味の結果は、反復する介入を必要とするに十分なほど、しばしば重篤な脈管壁の狭窄の再発である。まとめると、血管の管腔内での実質的に任意の強力な操作は、その内皮の裏打ちに損傷を与えるか、または露出させる。従って、脈管疾患自体および治療介入後の再狭窄のための処置選択は、このような状態の長期結果に関した主な問題であり続ける。新生物閉塞および脈管疾患に加えて、身体通路の閉塞をもたらす、多くの急性および慢性炎症性疾患がある。例えば、これらは、脈管炎、胃腸脈管疾患（例えば、クローン病、潰瘍性大腸炎）、および呼吸管疾患（例えば、喘息、慢性閉塞性肺疾患）を含む。これらの疾患のそれぞれは、抗炎症剤または免疫抑制剤のような薬物を用いて種々の成功度で処置され得る。しかし、現在のレジメは、しばしば疾患進行を遅延させることに有効でなく、そして全身性毒性および所望でない副作用をもたらし得る。外科的手順はまた、薬物レジメの代わりにまたは加えて利用され得る。しかし、このような外科的手順は、瘢痕形成により高率の局所的再発を有し、そして（例えば、バルーンカテーテルの使用による）特定の条件下で、良性反応性過増殖をもたらし得る。身体通路を閉塞もし得る他の疾患は、感染疾患を含む。簡単には、身体通路の閉塞をもたらし得る多くの急性および慢性感染プロセス（例えば、尿道炎、前立腺炎および雄性生殖管の他の疾患、雌性生殖管の種々の疾患、膀胱炎、および尿道炎（尿管疾患）、慢性気管支炎、結核、および他のマイコバクテリア感染、ならびに他の呼吸問題、ならびに特定の心臓血管疾患）がある。このような疾患は、現在、種々の異なる治療レジメおよび／または外科的手順のいずれかにより処置される。しかし、上記のように、このような治療レジメは、所望でない副作用をもたらし得る関連した全身性毒性の困難を有する。さらに、上記で議論されたような外科的手順は、瘢痕形成により局所的再発をもたらし得、そして特定の手順（例えば、市販のステントの挿入）において良性反応性過増殖をもたらし得る。ほとんどの部分に対する上記の疾患および状態のための現存する処置は、同じ制限を共有する。治療剤の使用は、これらの状態の逆転をもたらさず、そして介入がこの状態を処置するために使用されるときはいつでも、介入に対する身体応答の結果として患者に対して危険性がある。本発明は、一般的に上記の状態および疾患の処置に適切な組成物および方法を提供する。これらの組成物および方法は、現存する手順に関連した問題に取り組み、現存する手順と比較した場合に著しい利点を提供し、そしてさらに他の関連する利点を提供する。発明の要旨簡単に述べると、本発明は、身体通路に関連した疾患を処置または予防するための方法を提供し、身体経路の外部に治療剤を送達する工程を含む。関連した局面では、この身体経路の平滑筋細胞に外膜(adventia)を介して治療剤を送達する工程を含む、身体通路に関連した疾患を処置または予防するための方法が提供される。治療化合物を疾患部位に局所的に送達することにより、全身性および所望でない副作用が避けられ得、そして総投薬量は潜在的に低減され得る。疾患通路への二次的なまたは周囲への送達はまた、組織の上皮裏打ちへの損傷を含む、内腔操作の多くの不利を避ける。例えば、上皮への損傷は、血栓症、層流パターンの変化、および／または内腔デバイスに対する外来性身体反応をもたらし得、これらのいずれかが再狭窄カスケードを開始し得る。前立腺疾患において、尿道の器具設置を避けることは狭窄の可能性を低減し、そして抑制および性的能力を保存し得る。広範な種々の治療剤（例えば、抗血管新生剤、抗増殖剤、抗炎症剤、および抗生物質を含む）は、本発明の範囲内で利用され得る。本発明の好ましい実施態様では、治療剤は、抗微小管剤（例えば、本明細書中に記載される「より小さな(l ighter)dグループ」剤（例えば、バナジウム酸塩もしくはバナジル化合物））、または微小管安定剤（例えば、D₂Oジスコデルモライド（discodermolide）、エピシロン（epithilones）、およびパクリタキセル）、またはそれらのアナログもしくはその誘導体である。本発明の特定の実施態様では、治療剤は、例えば、ポリ(エチレン-ビニルアセテート)(40％架橋)、乳酸およびグリコール酸のコポリマー、ポリ(カプロラクトン)、ポリ(乳酸)、ポリ(乳酸)およびポリ(カプロラクトン)のコポリマー、ゼラチン、ヒアルロン酸、コラーゲンマトリックス、ならびに卵白のようなポリマーをさらに含み得る。他のキャリア（例えば、リポソーム）もまた、１つ以上の治療剤を含むようにおよび／または送達するように利用され得る。治療剤は、広範な種々の疾患（例えば、脈管疾患、新生物閉塞、炎症性疾患および感染疾患を含む）を処置または予防するために利用され得る。処置され得る代表的な身体通路として、例えば、動脈、食道、胃、十二指腸、小腸、大腸、胆汁管、尿管、膀胱、尿道、前立腺、涙腺、気管、気管支、細気管支、鼻気道、耳管、外耳道、子宮およびファロビウス管が挙げられる。本発明の１つの特に好ましい実施態様では、治療剤は、動脈の外壁を介して外膜に直接注射により動脈に送達される。単に例示目的のために、本発明の特定の実施態様は、疾患を罹患した身体通路に抗微小管剤（例えば、本明細書中で記載される「より小さなdグループ」剤（例えば、バナジウム酸塩もしくはバナジル化合物））、または微小管安定剤（例えば、D₂Oジスコデルモライド、エピシロン、およびパクリタキセル）、またはこれらのいずれかのアナログもしくは誘導体を投与することにより、脈管疾患（例えば、狭窄）、胃腸疾患、泌尿生殖器疾患（例えば、良性前立腺肥大または前立腺ガン）、および肺疾患（上記のそれぞれの特定の例は、以下により詳細に議論される）を処置するための方法を提供する。本発明のこれらおよび他の局面は、以下の詳細な説明および添付の図面を参照して明らかになる。さらに、より詳細に特定の手順、デバイス、または組成物を記載し、従ってそれらの全体が参考として援用される、種々の参考文献が以下に示される。図面の簡単な説明図１は、好中球の化学発光応答についてのポリマー性ミクロスフェアの血漿オプソニン作用の効果を示すグラフである（PCLミクロスフェアに対する細胞（濃度５×10⁶細胞/ml）0.5ml中の20mg/mlミクロスフェア）。図２は、PCLミクロスフェアに対する好中球（５×10⁶細胞/ml）の化学発光応答についてのプレコーティング血漿+/-２％プルロニックF127の効果を示すグラフである。図３は、PMMAミクロスフェアに対する好中球（５×10⁶細胞/ml）の化学発光応答についてのプレコーティング血漿+/-２％プルロニックF127の効果を示すグラフである。図４は、PLAミクロスフェアに対する好中球（５×10⁶細胞/ml）の化学発光応答についてのプレコーティング血漿+/-２％プルロニックF127の効果を示すグラフである。図５は、EVA:PLAミクロスフェアに対する好中球（５×10⁶細胞/ml）の化学発光応答についてのプレコーティング血漿+/-2％プルロニックF127の効果を示すグラフである。図６は、PCLミクロスフェアに対する好中球の化学発光応答についてのプレコーティングIgG(２mg/ml)または２％プルロニックF127、次いでIgG(２mg/ml)の効果を示すグラフである。図７は、PMMAミクロスフェアに対する好中球の化学発光応答についてのプレコーティングIgG(２mg/ml)または２％プルロニックF127、次いでIgG(２mg/ml)の効果を示すグラフである。図８は、PVAミクロスフェアに対する好中球の化学発光応答についてのプレコーティングIgG(２mg/ml)または２％プルロニックF127、次いでIgG(２mg/ml)の効果を示すグラフである。図９は、EVA:PLAミクロスフェアに対する好中球の化学発光応答についてのプレコーティングIgG(２mg/ml)または２％プルロニックF127、次いでIgG(２mg/ml) の効果を示すグラフである。図10Aは、ミクロスフェア凝集の際のEVA:PLAポリマー混和比の効果を示すグラフである。図10Bは、「小さな」ミクロスフェアのサイズを示す走査型電子顕微鏡写真である。図10C（拡大挿入写真を含む-「10C挿入写真」と標識）は、「大きな」ミクロスフェアのサイズを示す走査型電子顕微鏡写真である。図10Dは、0 .6％w/vパクリタキセル充填50:50EVA:PLAポリマー混和ミクロスフェアからリン酸緩衝化生理食塩水(pH7.4)への37℃でのインビトロパクリタキセル放出の時間経過を示すグラフである。白丸は「小さな」サイズのミクロスフェアであり、そして黒丸は「大きな」サイズのミクロスフェアである。図10Eは、ミクロスフェア( 「MS」)によるパクリタキセル放出の結果を示すCAMの写真である。図10Fは、増大した倍率での10Eと同様の写真である。図11Aは、１％、２％、５％、または10％パクリタキセルを含むポリカプロラクトンミクロスフェアからリン酸緩衝化生理食塩水への37℃での放出速度プロフィールを示すグラフである。図11Bは、コントロールミクロスフェアで処理されたCAMを示す写真である。図11Cは、５％パクリタキセル充填ミクロスフェアで処理されたCAMを示す写真である。図12Aおよび12Bは、それぞれ、EVAフィルムからのパクリタキセルの放出、および時間に対するその同じフィルムに残存するパクリタキセルパーセントを示す２つのグラフである。図12Cは、時間に対するパクリタキセルを含まないEVA/F12 7フィルムの膨張を示すグラフである。図12Dは、時間に対するパクリタキセルを含まないEVA/Span 80フィルムの膨張を示すグラフである。図12Eは、種々のEVA/ F127混和物についての圧力対ひずみ曲線を示すグラフである。図13Aおよび13Bは、処方物中の％MePEGの関数としてのPCL/MePEGポリマー混和物の融点（13A）、および処方物中のMePEG量の関数としての凝固するために60℃ のPCLペーストに必要とされる時間の増加パーセント（13B）を示す２つのグラフである。図13Cは、種々のPCL/MePEGポリマー混和物の柔軟性を示すグラフである。図13Dは、種々のMePEG濃度のポリマー混和物についての時間に対する重量％の変化を示す。図13Eは、時間に対する１％パクリタキセルで充填された種々のポリマー混和物からのパクリタキセル放出速度を示すグラフである。図13Fおよび1 3Gは、20％MePEG/PCLブレンドから放出された総パクリタキセル量に対する種々の量のパクリタキセルの効果を示すグラフである。図13Hは、MePEG/PCLポリマーの引っ張り強度に対するMePEGの効果を示すグラフである。図14は、種々のポリマー処方物からのパクリタキセルの放出を示すグラフである。図15は、時間経過に対してPCLペーストからPBSへの37℃でのパクリタキセルの放出を示すグラフである。PCLペーストは、メッシュ#140を用いて調製したパクリタキセルの微粒子および種々の添加剤を含む。誤差棒は、３サンプルの標準偏差を示す。図16は、パクリタキセル-ゼラチン-PCLペーストからPBSへの37℃でのパクリタキセル放出の時間経過を示すグラフである。このグラフは、ゼラチン濃度（メッシュ#140）およびメッシュ#140またはメッシュ#60を用いて調製したパクリタキセル-ゼラチン(1:1)微粒子のサイズの効果を示す。誤差棒は、３サンプルの標準偏差を示す。図17Aおよび17Bは、37℃で蒸留水中への懸濁後、20％パクリタキセルを含むPC Lペーストの膨張挙動に対する、添加剤（17A；メッシュ#140）および微粒子のサイズ（170B；メッシュ#140またはメッシュ#60）ならびに添加剤（メッシュ#140 ）の比率の効果を示すグラフである。パクリタキセル-ゼラチン中に270μｍ微粒子で調製したペーストおよび30％ゼラチンを含むペーストに対する測定を、マトリックスの分解により４時間後に中断した。誤差棒は、３サンプルの標準偏差を示す。図18A、18B、18C、および18Dは、蒸留水に懸濁する前(18A)および37℃で６時間懸濁した後(18B)のパクリタキセル-ゼラチン-PCL(20:20:60)ペーストの代表的な走査型電子顕微鏡写真である。18Cおよび18Dの顕微鏡写真は、18Bより高倍率であり、パクリタキセル（棒型）およびゼラチンマトリックスの密接な関連を示す。図19Aおよび19Bは、パクリタキセル処理CAMにおいて無脈管分布(avascularity )ゾーンを示すゼラチン-PCL(19A)およびパクリタキセル-ゼラチン-PCL(20:20:60 ；19B)ペーストで処理されたCAMの顕微鏡写真である。図20は、樹立した腫瘍を有するマウスへのパクリタキセル-ゼラチン-PCLペーストの腫瘍周囲注射の効果を示す表である。図21は、PDLLA-PEG-PDLLA組成物の融解温度、エンタルピー、分子量、多分散、および固有粘度を示す表である。図22は、PDLLA-PEG-PDLLAおよびPEGのDSCサーモグラフを示すグラフである。加熱速度は10℃/分であった。融解温度およびエンタルピーについては図21を参照のこと。図23は、20％パクリタキセル充填PDLLA-PEG-PDLLAシリンダーからのPBSアルブミン緩衝液への37℃でのパクリタキセルの累積放出を示すグラフである。誤差棒は、４サンプルの標準偏差を示す。40％PEGのシリンダーは、分解により４日目で中断された。図24A、24B、および24Cは、37℃でのパクリタキセルインビトロ放出間の20％パクリタキセル充填PDLLA-PEG-PDLLAシリンダーの寸法、長さ(Ａ)、直径（Ｂ）、および湿重量（Ｃ）の変化を示すグラフである。図25は、37℃でのPBSアルブミン緩衝液への放出間の20％パクリタキセル充填P DLLA-PEG-PDLLAシリンダー(20％PEG、１mm直径)のゲル浸透クロマトグラムを示すグラフである。図26は、37℃でのPBSアルブミン緩衝液への放出間のPDLLA-PEG-PDLLAシリンダー（20％パクリタキセル充填）の質量喪失およびポリマー組成物変化を示す表である。図27A、27B、27C、および27Dは、パクリタキセル放出前および間の乾燥PDLLA- PEG-PDLLAシリンダー（20％パクリタキセル充填、１mm直径）のSEMである。Ａ： 20％PEG、０日目；Ｂ：30％PEG、０日目；Ｃ：20％PEG、69日目；Ｄ：30％PEG、 69日目。図28は、20％パクリタキセル充填PDLLA:PCL混和物およびPCLから37℃でのPBS アルブミン緩衝液へのパクリタキセルの累積放出を示すグラフである。誤差棒は、４サンプルの標準偏差を示す。図29は、マウスの皮下腫瘍に局所的に適用されたパクリタキセル充填された外科用ペースト処方物の効力を示す表である。図30は、パクリタキセル放出に対する放射線効果を示すグラフである。図31は、コントロールミクロスフェア(PLLA:GA-85:15)の粒子サイズの範囲を示すグラフである。図32は、20％パクリタキセル充填ミクロスフェア(PLLA:GA-85:15)の粒子サイズの範囲を示すグラフである。図33は、コントロールミクロスフェア(PLLA:GA-85:15)の粒子サイズの範囲を示すグラフである。図34は、20％パクリタキセル充填ミクロスフェア(PLLA:GA-85:15)の粒子サイズの範囲を示すグラフである。図35A、35B、および35Cは、種々の比のPLLAおよびGA粒子サイズの範囲を示すグラフである。図36Aおよび36Bは、種々の比のPLLAおよびGA粒子サイズの範囲を示すグラフである。図37A、37B、および37Cは、種々の比のPLLAおよびGA粒子サイズの範囲を示すグラフである。図38Aおよび38Bは、種々の比のPLLAおよびGAの粒子サイズの範囲を示すグラフである。図39は、選択したジブロック（diblock）コポリマーの分子量、CMC、および最大パクリタキセル充填を示す表である。図40Aおよび40Bは、コポリマーおよびクレモフォア(Cremophor)ELによるパクリタキセル結晶の水(37℃)中での可溶化を示すグラフである。40A:クレモフォアでのコポリマー濃度効果（20時間インキュベーション）；40B：時間の効果（コポリマーまたはクレモフォア濃度0.5％）。図41Aおよび41Bは、室温（22℃）でのミセルパクリタキセル溶液の濁度（450n mでのUV-可視吸光度）を示すグラフである。パクリタキセル濃度は、水中で２mg /mlであった。パクリタキセル充填は、充填が５％であったMePEG-5000-30/70を除いて10％であった。図42は、パクリタキセルナイロンマイクロカプセルからのパクリタキセル放出を示すグラフである。図43Aは、腫瘍増殖に対するパクリタキセル/PCLの効果を示すグラフである。図43Bおよび43Cは、腫瘍増殖に対するコントロール、10％および20％パクリタキセル充填熱ペースト（thermopaste）の効果を示す２つの写真である。図44は、数によるミクロスフェアのサイズ分布を示す棒グラフである（５％PV Aへの10mgスラミン(suramin)ナトリウムを含む５％ポリ(エチレン-ビニルアセテート)）。図45は、重量によるミクロスフェアのサイズ分布を示す棒グラフである（５％ PVAへの10mgスラミンナトリウムを含む５％ポリ(エチレン-ビニルアセテート)）。図46は、50mgポリ(エチレン-ビニルアセテート)中のスラミンナトリウムのカプセル化重量を示すグラフである。図47は、50mgポリ(エチレン-ビニルアセテート)中のスラミンナトリウムのカプセル化のパーセントを示すグラフである。図48は、10％NaClを含む５％PVA中で作製した10mgスラミンナトリウムを含む５％ELVAXミクロスフェアの重量によるサイズ分布を示す棒グラフである。図49は、10％NaClを含む５％PVA中で作製した10mgスラミンナトリウムを含む５％ミクロスフェアの重量によるサイズ分布を示す棒グラフである。図50は、10％NaClを含む５％PVA中で作製された10mgスラミンナトリウムを含む５％ミクロスフェアの数によるサイズ分布を示す棒グラフである。図51Aは、CAM上のスラミンおよび酢酸コルチゾンの写真である（倍率＝８倍）。簡単には、この画像は、0.5％メチルセルロース中の20μｇのスラミンおよび7 0μｇの酢酸コルチゾンで処理した無脈管ゾーンを示す。血管は、薬物供給源から離れて再指向される無脈管ゾーンの周辺に位置したことに留意のこと。図51B は、より高倍率（倍率＝20倍）で効果のあった領域の脈管の詳細を示す写真である。無脈管領域および無脈管ゾーンに隣接する血管の典型的な「押し分け(elbow ing)」効果に留意のこと。図52A、B、C、D、およびEは、時間に対するPCLからのMTXの放出効果を示す。図53は、PLA:GA(50:50)から作製した10％メトトレキサート充填ミクロスフェアの写真である；固有粘度「IV」＝0.78。図54は、PCLからの10％充填バナジルサルフェートの放出を示すグラフである。図55は、硫酸バナジウムを含むヒアルロン酸ミクロスフェアの写真である。図56Aは、PCLからの有機バナジウム酸塩の放出を示すグラフである。図56Bは、時間経過に対する残存する有機バナジウム酸塩の割合を示す。図57は、有機バナジウム酸塩を含むポリD,L,乳酸ミクロスフェアを示す写真である。図58Aおよび58Bは、PCL(150mgスラブ)からのBMOV放出の時間経過を示すグラフである。（Ａ）放出された薬物のμｇまたは（Ｂ）スラブに残存する薬物の％。 PCL中のBMOVの最初の充填を、（○）５％；（●）10％；（△）15％；（▲）20 ％；（）30％；および（▽）35％により与えられる。図59Aおよび59Bは、（Ａ）放出された薬物のμｇまたは（Ｂ）スラブに残存する薬物の％として表す、PCL:MEPEG(80:20、w/w)の150mgスラブからのBMOV放出の時間経過を示すグラフである。PCL:MEPEG中のBMOVの最初の充填を、（○）５％；（●）10％；（△）15％；（▲）20％により与える。図60A、60B、および60Cは、（60A：上）BMOV結晶；（60B：中）薬物放出実験の開始での20％BMOVを含むPCLスラブの表面形態、および（60C：下）薬物放出実験の終わり(PBS中で72日)での20％BMOVを含むPCLスラブの表面形態の走査型電子顕微鏡写真である。図61Aおよび61Bは、細胞のBMOVに対する１時間の暴露(61A)、またはBMOVに対する連続暴露(61B)を用いた細胞生存に対する漸増濃度のBMOVの効果を示す２つのグラフである。細胞を、（○)HT-29結腸細胞；（●）MCF-7乳房細胞；（△）S kmes-1非小肺細胞、および（▲）正常骨髄細胞により記載する。図62は、マウスにおいて増殖したMDAY-D2腫瘍の重量に対するBMOV充填ペーストの効果を示す表である。簡単には、25％、30％、または35％BMOVのいずれかを含むPCLペースト（150mg）を、MDAY-2腫瘍を有するマウスに皮下に注射した。腫瘍重量を処置後10日目に測定した。この表は、（上の表）25％BMOVおよび（下の表）30％または35％BMOVを用いた２つの別々の実験からの結果を示す。コントロールデータは、BMOVを含まないPCLで処置されたマウスを記載する。図63は、マウスにおいて増殖したRIF-1腫瘍の重量に対するBMOV充填PCL:MePEG ペーストの効果を記載する表である。簡単には、RIF-1腫瘍を５日間マウスにおいて増殖させ、その時点で腫瘍の90％を外科的に除去し、そして切除部分をBMOV を含まないか（コントロール）または５％BMOVを含むかのいずれかのPCL:MePEG( 80:20、w/w)ペースト150mgで処置した。腫瘍の再増殖を、この処置後の４、５、および６日目に測定した。図64Aおよび64Bは２つのグラフである。図64Aは、15mL PBS/ALBへ放出されたB EMOVの時間経過に対するPCL熱ペースト（150mgペレット）中のBEMOVの増加した充填の効果を示す。図64Bはまた、15mL PBS/ALBへ放出されたBEMOVの時間経過に対するPCL熱ペースト（150mgペレット）中のBEMOVの充填増加の効果を示す。薬物放出を、ペレット中に残存するBEMOVの％として表す。図65Aおよび65Bは２つのグラフである。図65Aは、15mL PBS/ALBへ放出されたV 5の時間経過に対するPCL熱ペースト（150mgペレット）中のV5の増加した充填の効果を示す。図65Bはまた、15mL PBS/ALBへ放出されたV5の時間経過に対するPCL 熱ペースト（150mgペレット）中のV5の充填増加の効果を示す。薬物放出を、ペレット中に残存するV5の％として表す。図66Aおよび66Bは２つのグラフである。図66Aは、15mL PBS/ALBへ放出されたP RC-Vの時間経過に対するPCL熱ペースト（150mgペレット）中のPRC-Vの増加した充填の効果を示す。図66Bはまた、15mL PBS/ALBへ放出されたPRC-Vの時間経過に対するPCL熱ペースト（150mgペレット）中のPRC-Vの充填増加の効果を示す。薬物放出を、ペレット中に残存するPRC-Vの％として表す。図67A、67B、67C、および67Dは、15mL PBS/ALBへ放出されたBMOVの時間経過に対する、５％BMOV(67A)、10％BMOV(67B)、15％BMOV(67C)、および20％BMOV(67D) を含むPCL熱ペースト（150mgペレット）中の異なる濃度のMePEG充填の効果を示す一連のグラフである。図68A、68B、68C、および68Dは、15mL PBS/ALBへ放出されたBMOVの時間経過に対する、０％MePEG(68A)、５％MePEG(68B)、10％MePEG(68C)、および15％MePEG( 68D)を含むPCL熱ペースト（150mgペレット）中の異なる濃度のMePEG充填の効果を示す一連のグラフである。薬物放出を、ペレット中に残存するBMOVの％として表す。図69Aおよび69Bは、膀胱組織上のフィブロネクチンコートPLLAミクロスフェアの写真(69A)および膀胱組織上のポリ(L-リジン)ミクロスフェアの写真である。図70Aおよび70Bは、コントロール（非充填）熱ペーストで処置した腫瘍を有するCAMの２つの写真である。簡単には、図70Aの中央の白い塊は腫瘍組織である。全方向にCAMから腫瘍に進入する多数の血管に留意のこと。腫瘍は、「血管新生因子」の生成により宿主脈管構造の内増殖を誘導する。腫瘍組織は、それを供給する血管に沿って遠くに拡大する。図70Bは、70Aに示すCAMの下側の図である。簡単には、この図は、車輪のスポークのように腫瘍に進入する血管の急進的な出現を証明する。血管密度は、周囲の正常なCAM組織より腫瘍付近において大きなことに留意のこと。図70Cおよび70Dは、20％パクリタキセル充填熱ペーストで処置した腫瘍を有するCAMの２つの写真である。簡単には、図70Cの中央の白い塊は腫瘍組織である。腫瘍組織付近の少数の血管に留意のこと。血管新生インヒビターの徐放は、腫瘍により生成される血管新生刺激を克服し得る。腫瘍自体は不十分に脈管化され、そしてサイズが進行的に減少する。図70Dは、70Cに示すCAMの下側から撮影され、そしてコントロール腫瘍組織と比較した場合、血流の腫瘍への血流の破壊を証明する。血管密度が腫瘍付近に低減され、そして正常な周囲の CAM組織のものよりまばらなことに留意のこと。本発明の詳細な説明本発明を示す前に、本明細書で後に使用される特定の用語の定義を示すことは、その理解に役立ち得る。本明細書中で使用する「身体通路」は、内腔を有し、そして身体内の物質の流れを可能にする、任意の数の通路、管（tube）、パイプ、管、溝、洞、または導管をいう。身体通路の代表的な例として、動脈および静脈、涙腺、気管、気管支、細気管支、鼻管（洞を含む）および他の気道、耳管、外耳道、口腔、食道、胃、十二指腸、小腸、大腸、胆汁管、尿管、膀胱、尿道、ファロビウス管、子宮、膣および雌性生殖管の他の通路、精管および雄性生殖管の他の通路、ならびに脳および脊髄の空洞系（脳脊髄液）が挙げられる。本明細書中で使用する「治療剤」は、所定の疾患または状態を軽減するか、処置するか、治癒するか、または予防するそれらの薬剤をいう。代表的な治療剤の例は以下でより詳細に議論され、そして例えば、抗血管新生剤、抗増殖剤、抗炎症剤、および抗生物質が挙げられる。上記のように、本発明は、身体通路に関連した疾患を処置または予防するための方法を提供し、この方法は、身体通路の外部（すなわち、非管腔表面）に治療剤を含む組成物を送達する工程を包含し、好ましい実施態様では、組成物は治療剤およびポリマー性キャリアを含む。簡単には、治療剤の身体通路の外部への（例えば、二次的なまたは周囲への）送達は、管腔内操作を含む従来のアプローチの多くの不利を避ける。さらに、本明細書中に記載される治療剤の送達は、送達されるべき容量に対して制限なく、より多量の治療剤の投与を可能にする。以下により詳細に記載されるように、広範な種々の治療剤が、身体通路に関連した疾患を処置または予防するために、キャリア（例えば、ポリマー性）を伴ってまたはこれを伴わずにのいずれかで身体通路の外部に送達され得る。これらの局面のそれぞれは、以下により詳細に議論される。治療剤上記のように、本発明は、広範な種々の治療剤を利用する方法および組成物を提供する。本発明に１つの局面では、治療剤は抗血管新生因子である。簡単には、本発明の状況では、抗血管新生因子は、脈管増殖を阻害するように作用する、任意のタンパク質、ペプチド、化学物質、または他の分子を含むことが理解されるべきである。種々の方法（例えば、ニワトリ漿尿膜（「CAM」）アッセイを含む）が、所定の因子の抗血管新生活性を測定するために容易に利用され得る。簡単には、新鮮なニワトリ受精卵から殼の一部を除去し、そして試験されるべき抗血管新生因子のサンプルを含むメチルセルロースディスクを膜上に置く。数日（例えば、48時間）後、試験されるべきサンプルによる脈管増殖の阻害は、メチルセルロースディスクを取り囲む領域のニワトリ漿尿膜の視覚化により容易に測定され得る。脈管増殖の阻害はまた、例えば、コントロールメチルセルロースディスクと比較して、メチルセルロースディスクを取り囲む血管の数およびサイズを測定することにより定量的に測定され得る。本明細書中に記載される抗血管新生因子は、コントロールと比較して、単に統計学的に有意な様式で阻害する場合、新たな血管の形成を阻害すると考えられるが、好ましい局面では、このような抗血管新生因子は、新たな血管の形成を完全に阻害し、ならびに以前から現存する管のサイズおよび数を低減する。上記のCAMアッセイに加えて、種々の他のアッセイもまた、インビボでの抗血管新生因子の抗力を測定するために利用され得、例えば、この目的のために開発されたマウスモデルを含む（Roberstonら、Cancer.Res.51:1339-1344,1991を参照のこと）。広範な種々の抗血管新生因子は、本発明の状況で容易に利用され得る。代表的な例として、抗浸潤因子、レチノイン酸およびその誘導体、スラミン、メタロプロテイナーゼ-1組織インヒビター、メタロプロテイナーゼ-2組織インヒビター、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター-1、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター-2、微小管機能を破壊する化合物、およびより小さな「dグループ」遷移金属の種々の形態が挙げられる。これらのおよび他の抗血管新生因子は以下に詳細に記載される。簡単には、軟骨抽出物から調製される抗浸潤因子すなわち「AIF」は、新たな血管の増殖の阻害を担う構成物質を含む。これらの構成物質は７つの低分子量タンパク質（＜50,000ダルトン）のファミリーを含み（KuettnerおよびPauli，「軟骨因子による新脈管化の阻害」Development of the Vascular System，Pitman Books(CIBA Foundation Symposium 100)，163-173頁，1983）、これらは種々のプロテアーゼに対して阻害効果を有する種々のタンパク質を含む（Eisenteinら，Am.J.Pathol.81:337-346，1975; Langerら，Science 193:70-72，1976；およびHortonら，Science 199:1342-1345，1978）。本発明での使用に適したAIFは、当該分野で公知の技術（例えば、Eisenteinら,前出; KuettnerおよびPauli,前出；ならびにLangerら,前出）を利用して容易に調製され得る。軟骨由来インヒビター（「CDI」）のようなAIFの精製した構成物質（Mosesら，Science 248:1408-14 10，1990を参照のこと）はまた、本発明の状況内で容易に調製され、そして利用され得る。レチノイン酸は、細胞外マトリックス成分の代謝を変え、これは血管新生の阻害をもたらす。プロリンアナログ、血管停止（angiostatic）ステロイド、またはヘパリンの添加は、トランスレチノイン酸の抗血管新生効果を相乗的に増大するために利用され得る。本発明の状況で利用されもし得るレチノイン酸ならびにその誘導体は、例えば、Sigma Chemical Co.(#R2625)を含む商業的供給源から容易に得られ得る。スラミンは、代表的に抗トリパノソーマ剤として使用されるポリスルホン化ナフチル尿素化合物である。簡単には、スラミンは、種々の増殖因子（例えば、血小板由来増殖因子（「PDGF」）、上皮増殖因子（「EGF」）、トランスフォーミング増殖因子（「TGF-β」）、インシュリン様増殖因子（「IGF-1」）、および繊維芽細胞増殖因子（「βFGF」)）の特異的細胞表面結合をブロックする。スラミンは、公知の技術に従って調製され得るか、または種々の商業的供給源（例えば、Mobay Chemical Co.,New Yorkを含む）から容易に得られ得る（Gagliardiら，Cancer Res.52:5073-5075，1992;およびCoffey,Jr.ら，J．of Cell.Phys.132: 143-148，1987を参照のこと）。メタロプロテイナーゼ-1組織インヒビター(「TIMP」)は、MMPアーゼもまた分泌する内皮細胞により分泌される。TIMPはグリコシル化され、そして28.5kDaの分子量を有する。TIMP-1は、活性化メタロプロテイナーゼへの結合し、それにより血管の細胞外マトリックスへの進入を抑制することにより血管新生を調節する。メタロプロテイナーゼ-2組織インヒビター(「TIMP-2」)はまた、血管新生を阻害するために利用され得る。簡単には、TIMP-2は、活性および潜伏性プロ酵素形態の両方のメタロプロテイナーゼに結合する21kDaの非グリコシル化タンパク質である。TIMP-1およびTIMP-2は、Synergen，Boulder，Coloradoのような商業的供給源から得られ得る。プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター-1(PA)は、血液血小板に存在する50kDaの糖タンパク質であり、そしてまた内皮細胞および筋細胞により合成され得る。PAI-1は、内皮の側底側でt-PAおよびウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターを阻害し、そして繊維素溶解プロセスをさらに調節する。プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター-2(PAI-2)は、一般的に、特定の環境下（例えば、妊娠）および腫瘍の存在下での血液中にのみ見出される。簡単には、PA I-2は、単球およびマクロファージにより分泌される56kDaのタンパク質である。繊維素溶解活性を調節し、そして特に、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターおよび組織プラスミノーゲンアクチベーターを阻害し、それにより繊維素溶解を妨げると考えれる。本発明の治療剤はまた、微小管機能を破壊する化合物を含む。このような化合物の代表的な例として、エストラムスチン（Sigmaから入手可能;WangおよびSte ars Cancer Res.48:6262-6271，1988）、エポシロン(epothilone)、クラシン-A 、コルヒチン、メトトレキサート、およびパクリタキセル、ビンブラスチン、ビンクリスチン、D₂O、ならびに4-tert-ブチル-[3-(2-クロロエチル)ウレイド］ベンゼン（「tBCEU」）が挙げられる。簡単には、このような化合物は、いくつかの異なる様式で作用し得る。例えば、コルヒチンおよびビンブラスチンのような化合物は、微小管を脱重合することにより作用する。本発明の１つの好ましい実施態様では、治療剤は、チューブリンへの結合により微小管形成を破壊して異常な紡錘体を形成する化合物であるパクリタキセルである。簡単には、パクリタキセルは、Taxus brevifoliaパシフィックユー(Pacif ic Yew.)の採集され乾燥された樹皮、ならびにパシフィックユーのTaxomyces An dreanaeおよびEndophytic Fungus(Stierleら，Science 60:214-216，1993)から得られた、高度に誘導体化されたジテルペノイドである（Waniら，J.Am.Chem.So タキセルの10-デスアセチルアナログ、およびパクリタキセルの3'N-デスベンゾイル-3'N-t-ブトキシカルボニルアナログのようなプロドラック、アナログ、および誘導体を含むことが本明細書中で理解されるべきである）は、当業者に公知の技術(WO94/07882、WO94/07881、WO94/07880、WO94/07876、WO93/23555、WO93/ 10076、WO94/00156、WO93/24476、EP590267、WO94/20089；米国特許第5,294,637 号、同第5,283,253号、同第5,279,949号、同第5,274,137号、同第5,202,448号、同第5,200,534号、同第5,229,529号、同第5,254,580号、同第5,412,092号、同第 5,395,850号、同第5,380,751号、同第5,350,866号、同第4,857,653号、同第5,27 2,171号、同第5,411,984号、同第5,248,796号、同第5,248,796号、同第5,422,36 4号、同第5,300,638号、同第5,294,637号、同第5,362,831号、同第5,440,056号、同第4,814,470号、同第5,278,324号、同第5,352,805号、同第5,411,984号、同第5,059,699号、同第4,942,184号；Tetrahedron Letters 35(52):9709-9712，19 94;J.Med.Chem.35:4230-4237,1992；J.Med.Chem.34:992-998，1991；J.Natural Prod.57(10):1404-1410,1994；J.Natural Prod.57(11):1580-1583，1994;J.Am.C hem.Soc.110:6558-6560，1988を参照のこと）を利用して容易に調製され得るか、または例えば、Sigma Chemical Co.,St.Louis，Missouri(T7402-Taxus brevif oi a由来)を含む、種々の商業的供給源から得られ得る。このようなパクリタキセル誘導体またはアナログの代表的な例として、7-デオキシードセタキソール、7,8-シクロプロパタキサン、N-置換2-アゼチドン、6,7- エポキシパクリタキセル、6,7修飾パクリタキセル、10-デスアセトキシタキソール、10-デアセチルタキソール（10-デアセチルバカチンIII由来）、タキソールのホスホノオキシおよび炭酸塩誘導体、タキソール2',7-ジ(1,2-ベンゼンジカルボン酸ナトリウム)、10-デスアセトキシ-1l,12-ジヒドロタキソール-10,12(18)- ジエン誘導体、10-デスアセトキシタキソール、プロタキソール（2'-および/または7-0-エステル誘導体）、（2'-および/または7-0-炭酸塩誘導体）、タキソール側鎖の不斉合成、フルオロタキソール、9-デオキソタキサン、（13-アセチル- 9-デオキソバカチンIII)、9-デオキソタキソール、7-デオキシ-9-デオキソタキソール、10-デスアセトキシ-7-デオキシ-9-デオキソタキソール、水素またはアセチル基ならびにヒドロキシおよびtert-ブトキシカルボニルアミノを含む誘導体、スルホン化2'-アクリロイルタキソールおよびスルホン化2'-0-アシル酸タキソール誘導体、スクシニルタキソール、2'-γ-アミノブチリルタキソールホルメート、2'-アセチルタキソール、7-アセチルタキソール、7-グリシンカルバメートタキソール、2'-OH-7-PEG(5000)カルバメートタキソール、2'-ベンゾイルおよび2'-7-ジベンゾイルタキソール誘導体、他のプロドラック（2'-アセチルタキソール；2',7-ジアセチルタキソール；2'スクシニルタキソール；2'-(β-アラニル )-タキソール；2'γ-アミノ酪酸（butyryl）タキソールホルメート；2'-スクシニルタキソールのエチレングリコール誘導体；2'-グルタリルタキソール；2'-(N ,N-ジメチルグルシル)タキソール；2'-[2-(N,N-ジメチルアミノ)プロピオニル] タキソール；2'オルトカルボキシベンゾイルタキソール；タキソールの2'脂肪族カルボン酸誘導体、プロドラック｛2'(N,N-ジエチルアミノプロピオニル)タキソール、2'(N,N-ジメチルグリシル)タキソール、7(N,N-ジメチルグリシル)タキソール、2',7-ジ-(N，N-ジメチルグリシル)タキソール、7(N,N-ジエチルアミノプロピオニル)タキソール、2',7-ジ-(N，N-ジエチルアミノプロピオニル)タキソール、2'-(L-グリシル)タキソール、7-(L-グリシル)タキソール、2',7-ジ(L-グリシル)タキソール、2'-(L-アラニル)タキソール、7-(L-アラニル)タキソール、2' ,7-ジ(L -アラニル)タキソール、2'-(L-ロイシル)タキソール、7-(L-ロイシル)タキソール、2',7-ジ(L-ロイシル)タキソール、2-(L-イソロイシル)タキソール、7-(L-イソロイシル)タキソール、2',7-ジ(L-イソロイシル)タキソール、2'-(L-バリル) タキソール、7-(L-バリル)タキソール、2',7-ジ(L-バリル)タキソール、2'-(L- フェニルアラニル)タキソール、7-(L-フェニルアラニル)タキソール、2',7-ジ(L -フェニルアラニル)タキソール、2'-(L-プロリル)タキソール、7-(L-プロリル) タキソール、2',7-ジ(L-プロリル)タキソール、2'-(L-リジル)タキソール、7-(L -リジル)タキソール、2',7-ジ(L-リジル)タキソール、2'-(L-グルタミル)タキソール、7-(L-グルタミル)タキソール、2',7-ジ(L-グルタミル)タキソール、2'-(L -アルギニル)タキソール、7-(L-アルギニル)タキソール、2',7-ジ(L-アルギニル )タキソール｝、修飾フェニルイソセリン側鎖を有するタキソールアナログ、タキソテレ（taxotere）、（N-デベンゾイル-N-tert-(ブトキシカルボニル)-10-デアセチルタキソール、ならびにタキサン（例えば、バカチンIII、セファロマンニン、10-デアセチルバカシンIII、ブレビフォリオール、ユナンタクシン、およびタクシン）が挙げられる。本発明で利用され得る他の治療剤として、より小さな「ｄ族」遷移金属（例えば、バナジウム、モリブデン、タングステン、チタン、ニオブ、およびタンタル核種）が挙げられる。このような遷移金属種は、遷移金属錯体を形成し得る。上記の遷移金属種の適切な錯体として、オキソ遷移金属錯体が挙げられる。バナジウム錯体の代表的な例として、オキソバナジウム錯体（例えば、バナジウム酸およびバナジル錯体）が挙げられる。適切なバナジウム酸錯体として、メタバナジウム酸（すなわちVO₃ ^-）およびオルトバナジウム酸（すなわちVO₄ ^3-）錯体（例えば、メタバナジウム酸アンモニウム（すなわちNH₄VO₃）、メタバナジウム酸ナトリウム（すなわちNaVO₃）、およびオルトバナジウム酸ナトリウム（すなわちNa₃VO₄）が挙げられる。適切なバナジル（すなわちVO²⁺）錯体として、例えば、バナジルアセチルアセトネートおよびバナジルサルフェート（バナジルサルフェートハイドレート（例えば、バナジルサルフェートモノ-およびトリハイドレート）を含む）、ビス[マルトラト（オキソバナジウム）](IV)(「BMOV」) 、ビス[(エチルマルトラト)オキソバナジウム](IV)(「BE0V」)、およびビス（システイン、アミドN-オクチル）オキソバナジウム(IV)（「ナグリバン」）が挙げられる。タングステン錯体およびモリブデン錯体の代表的な例にもまた、オキソ錯体が挙げられる。適切なオキソタングステン錯体として、タングステン酸およびタングステン酸化物錯体が挙げられる。適切なタングステン酸（すなわちWO₄ ^2-）錯体として、タングステン酸アンモニウム（すなわち(NH₄)₂WO₄）、タングステン酸カルシウム（すなわちCaWO₄）、タングステン酸ナトリウム二水和物（すなわちNa₂WO₄・2H₂O）、およびタングステン酸(すなわちH₂WO₄)が挙げられる。適切なタングステン酸化物として、タングステン(IV)酸化物（すなわちWO₂）およびタングステン(VI)酸化物（すなわちWO₃）が挙げられる。適切なオキソモリブデン錯体として、モリブデン酸塩、モリブデン酸化物、およびモリブデニル錯体が挙げられる。適切なモリブデン酸（すなわちMoO₄ ^2-）錯体として、モリブデン酸アンモニウム（すなわち(NH₄)₂MOO₄）およびその水和物、モリブデン酸ナトリウム（すなわちNa₂MoO₄）およびその水和物、ならびにモリブデン酸カリウム（すなわちK₂MoO₄）およびその水和物が挙げられる。適切なモリブデン酸化物として、モリブデン(IV)酸化物（すなわちMoO₂）、モリブデン(VI)酸化物（すなわちMo O₃）、およびモリブデン酸が挙げられる。適切なモリブデニル（すなわちMoO₂ ²⁺ ）錯体として、例えば、モリブデニルアセチルアセトネートが挙げられる。他の適切なタングステンおよびモリブデン錯体として、例えば、グリセロール、酒石酸、および糖に由来する水酸基誘導体が挙げられる。広範な種々の他の抗血管新生因子もまた、本発明の状況で利用され得る。代表的な例として、血小板因子４（Sigma Chemical Co.,#F1385）；硫酸プロタミン（クルペイン）(Sigma Chemical Co.,#P4505)；硫酸化キチン誘導体（クイーンクラブ(queen clab)の殼から調製）、（Sigma Chemical Co.,#C3641; Murataら，Cancer Res.51:22-26，1991）；硫酸化多糖ペプチドグリカン複合体(SP-PG)（この化合物の機能は、ステロイド（例えば、エストロゲン）およびクエン酸タモキシフェンの存在により増強され得る）；スタウロスポリン(Sigma Chemical Co .,#S4400）；マトリックス代謝のモジュレーター（例えば、プロリンアナログ｛［L-アゼチジン-2-カルボン酸(LACA)（Sigma Chemical Co.,#A0760）、シスヒドロキシプロリン、d,L-3,4-デヒドロプロリン（Sigma Chemical Co.,#D0265）、チアプロリン(Sigma Chemical Co.,#T0631)］、α,α-ジピリジル(Sigma Chem ical Co.,#D7505）、フマル酸β-アミノプロピオニトリル(Sigma Chemical Co., #A3134)｝;MDL 27032(4-プロピル-5-(4-ピリジニル)-2(3H)-オキサゾロン；Meri on Merrel Dow Research Institute)；メトトレキサート(Sigma Chemical Co.,# A6770;Hirataら，Arthritis and Rheumatism 32:1065-1073，1989）；ミトキサントロン（PolveriniおよびNovak，Biochem.Biophys.Res.Comm.140:901-907）；ヘパリン（Folkman，Bio.Phar.34:905-909，1985;Sigma Chemical Co.,#P8754）；インターフェロン（例えば、Sigma Chemical Co.,#13265）；２マクログロブリン血清（Sigma Chemical Co.,#M7151）；ChIMP-3(Pavloffら，J.Bio.Chem.267 :17321-17326，1992)；キモスタチン（Sigma Chemical Co.,#C7268；Tomkinson ら，Biochem J.286:475-480，1992）；β-シクロデキストリンテトラデカサスルフェート（Sigma Chemical Co.,#C4767）；エポネマイシン；カンプトテシン；フマギリンおよび誘導体（Sigma Chemical Co.,#F6771；カナダ国特許第2,024,3 06号；Ingberら，Nature 348:555-557，1990）；チオリンゴ酸金ナトリウム（「G ST」；Sigma G4022;MatsubaraおよびZiff，J.Clin.Invest.79:1440-1446,1987）；（D-ペニシラミン（「CDPT」；Sigma Chemical Co.,#P4875またはP5000(HCl) ）；β-1-抗コラゲナーゼ血清；α2-抗プラスミン（Sigma Chem．Co.,：A0914； Holmesら，J.Biol.Chem.262(4):1659-1664，1987）；ビサントレン（National C ancer Institute）；ロベンザリット二ナトリウム（N-(2)-カルボキシフェニル- 4-クロロアントロニル酸二ナトリウムまたは「CCA」；Takeuchiら，Agents Acti ons 36:312-316，1992）；サリドマイド；血管停止ステロイド；AGM-1470；カルボキシナミノルミダゾール；ならびにメタロプロテイナーゼインヒビター（例えば、BB94）、エストロゲンおよびエストロゲンアナログ、抗エストロゲン、抗酸化剤、バイオフラボノイド（フィクノゲノール(Pycnogel)）、エーテル脂質（s- ホスホネート、ET-18-OCH₃）、チロシンキナーゼインヒビター（ゲニステイン、エルブスタチン、ヘルバマイシンA、ラベンダスチン-c、ヒドロキシシナメート）、αケモカイン[ヒトインターフェロン誘導性タンパク質10(IP-10)]、-C-X-C- ケモカイン(Gro-β)、一酸化窒素、抗真菌剤（ラジシコール）、15 -デオキシスペルグアリン、金属錯体（チタノセン二塩化物−シクロペンタジエニルチタン二塩化物）、トリフェニルメタン誘導体（オーリントリカルボン酸）、リノミド、サリドマイド、IL-12、ヘパリナーゼ、アンギオスタシン、抗微生物剤（ミノマイシン）、血漿タンパク質（アポリポタンパク質Ｅ）、アンスラサイクリン(TAN-1120)、プロリフェリン関連タンパク質、FR-111142、Panax ginse ngのサポニン（ギンセノサイド-Rb2）、ペントサンポリスルフェートが挙げられる。本発明の組成物はまた、広範な種々の他の治療剤を含み得る。例えば：α- アドレナリン作動性ブロッキング剤、アンギオテンシンIIレセプターアンタゴニストおよびヒスタミン、セロトニン、エンドセリンに対するレセプターアンタゴニスト；ナトリウム／水素アンチポーターのインヒビター（例えば、アミロライドおよびその誘導体）；細胞内Ca²⁺輸送を調節する薬剤（例えば、L型（例えば、ジルチアゼム、ニフェジピン、ベラパミル）またはT型Ca²⁺チャンネルブロッカー（例えば、アミロライド）、カルモジュリンアンタゴニスト（例えば、H₇）、およびナトリウム／カルシウムアンチポーターのインヒビター（例えば、アミロライド））；ap-1インヒビター（チロシンキナーゼ、プロテインキナーゼＣ、ミオシン軽鎖キナーゼ、Ca²⁺／カルモジュリンキナーゼII、カゼインキナーゼII にプター（例えば、インターロイキン、α、β、またはγ-IFN、GM-CSF、G-CSF、上皮増殖因子、トランスフォーミング増殖因子αおよびβ、TNF、ならびに血管上皮増殖因子、内皮増殖因子、酸性または塩基性繊維芽細胞増殖因子、および血小板由来増殖因子のアンタゴニスト）；IP₃レセプターのインヒビター（例えば、ヘパリン）；プロテアーゼおよびコラゲナーゼインヒビター（例えば、上記の TIMP）；ニトロ血管拡張剤（例えば、イソソルビドジニトレート）；抗有糸分裂剤（例えば、コルヒチン、アンスラサイクリンおよび他の抗生物質、葉酸アンタゴニストおよび他の抗代謝剤、ビンカアルカロイド、ニトロソウレア、DNAアルキル化剤、トポイソメラーゼインヒビター、プリンアンタゴニストおよびアナログ、ピリミジンアンタゴニストおよびアナログ、アルキルスルホネート）；免疫抑制剤（例えば、副腎皮質ステロイド、シクロスポリン）；センスまたはアンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、DNA、RNA、核酸アナログ（例えば、ペプチド核酸）またはこれらの任意の組み合せ）；ならびに転写因子活性のインヒビター（例えば、より小さなｄグループ遷移金属）が挙げられる。本発明で利用され得る他の治療剤として、広範な種々の抗生物質（抗細菌剤、抗微生物剤、抗ウイルス剤、抗原生動物剤、および抗真菌剤を含む）が挙げられる。このような薬剤の代表的な例として、アミノグリコシド（例えば、ストレプトマイシン、アミカシン、ゲンタマイシン、ネチルマイシン、トブラマイシン）のような全身性抗生物質；第１、第２、および第３世代のセファロスポリン（例えば、セファロシン、セファゾリン、セファピリン、セファラジン、セファレキシン、セファドロキシル、セファクロル、セファマンドール、セフロキシム、セフロキシムアクセチル、セフォニシド、セフォラニド、セフォキシチン、セフォタキシム、セフォテタン、セフチゾキシム、セフォペラゾン、セフタジジム、セフトリアキソン、モキサラクタム、他の半合成セファロスポリン（例えば、セフィキシムおよびセフポドキシムプロキセチル））；ペニシリン（例えば、ペニシリンＧ（ベンザチンおよびプロカイン塩）、クロキサシリン、ジクロキサシリン、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、ペニシリンＶ、アンピシリン、アモキシシリン、バカンピシリン、サイクラシリン、カルベニシリン、チカルシリン、メズロシリン、ピペラシリン、アズロシリン、アムジノシリン、およびクラブラン酸と組み合わせたペニシリン）；キノロン（例えば、シノキサシン、シプロフロキサシン、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、ピペミジン酸、ペルロキサシン、フレロキサシン、エノキサシン、オフロキサシン、トスフロキサシン、ロメフルオキサシン、キノロンの立体異性体）；スルホンアミド（例えば、スルファシチン、スルファメチゾール、スルファメトキサゾール、スルフイソキサゾール、スルファサラジン、およびトリメトプリム＋スルファメトキサゾールの組み合せ）；テトラサイクリン（例えば、ドキシサイクリン、デメクロサイクリン、メタサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、テトラサイクリン）；マクロライド（例えば、エリスロマイシン、他の半合成マクロライド（例えば、アジスロマイシンおよびクラリスロマイシン））；モノバクタム（新規の合成クラス）（例えば、アズトレオナム、ロラカルベフ）；ならびに多方面にわたる薬剤（例えば、アクチノマイシンＤ、ドキソルビシン、マイトマイシンＣ、ノボビオシン、プリカマイシン、リファムピン、ブレオマイシン、クロラムフェニコール、クリンダマイシン、オレアンドマイシン、カナマイシン、リンコマイシン、ネオマイシン、パロモマイシン、スペクチノマイシン、トロレアンドマイシン、アンホテリシンＢ、コリスチン、ナイスタチン、ポリミキシンＢ、グリセオフルビン、アズトレオナム、シクロセリン、クリンダマイシン、コリスチメサート、イミペネム−シラスタチン、メセナミン、メトロニダゾール、ニトロフラントイン、リファブタン、スペクチノマイシン、トリメソプリム、バシトラシン、バンコマイシン、他のβ-ラクタム抗生物質）が挙げられる。本発明で使用され得るさらなる治療剤として、局所的抗生物質（例えば、バシトラシン、亜鉛、ネオマイシン、ムピロシン、クリンダマイシン）；抗病原体ポリペプチド（例えば、セクロピオニン、マンガイニン）；および抗結核剤（例えば、スルファジメトキシン、スルフィソキサゾール、スルフィソミジン、塩酸エタンブトール、イソニアジド、パラアミノサリチル酸カルシウム）が挙げられる。本発明で使用され得る他の治療剤として、例えば、ヨウ素、プロビドンヨウ素、ホウ酸、ホウ酸ナトリウム、オキシデール、過マンガン酸カリウム、エタノール、イソプロパノール、ホルマリン、クレゾール、ジマゾール、シカニン、フェニルヨードウンデシノエート、ヘキサクロロフェン、レゾルシン、塩化ベンゼトニン、ラウリル硫酸ナトリウム、塩化水銀、マーキュロクロム、スルファジアジン銀、ならびに他の無機および有機銀塩ならびに亜鉛塩、１価および２価カチオンの塩、グルコン酸クロルヘキシジン、塩酸アルキルポリアミノエチルグリシン、塩化ベンズアルコニウム、ニトロフラゾン、ナイスタチン、アセスルファミン、クロトリマゾール、スルファメチオゾール、スルファセトアミド、ジオラミン、トルナフテート、ピロールニトリン、ウンデシレン酸、ミクロアゾール、バリオチン、ハロプロギン、ならびにジマゾール、（メクロサイクリン、トリコマイシン、およびペンタマイシン）、ペニシリンのような抗生物質が挙げられる。抗真菌剤として、フルシトシン、フルコナゾール、グリセオフルビン、ケトコナゾール、およびミコナゾールが挙げられる。抗ウイルス剤およびAIDS剤として、アシクロビル、アマンタジン、ジダノシン（以前はddI）、グリセオフルビン、フルシトシン、フォスカルネット、ガンシクロビル、ヨードクリジン、ミコナゾール、クロトリマゾール、ピリメタミン、リバビリン、リマンタジン、スタブジン（以前は d4T）、トリフルリジン、トリスルファピリミジン、バラシクロビル、ビダラビン、ザルシタビン（以前はddC）、およびジドブジン（以前はAZT）が挙げられる。AIDSに対する補助治療剤（例えば、エリスロポエチン；フルコナゾール（抗真菌）；インターフェロンα-2aおよび-2b（カポジ肉腫）；アトバキュオン、ペンタミジン、およびトリメトレキセート（抗原生動物）；酢酸メゲストラオール（食欲増強剤）；リファブチン（抗マイコバクテリア）。抗原生動物剤の代表的な例として、ペンタミジンイセチオネート、キニン、クロロキン、およびメフロキンが挙げられる。本発明で使用され得る他の治療剤として、抗増殖剤、抗新生物剤、または化学療法剤が挙げられる。このような薬剤の代表的な例として、アンドロゲンインヒビター、抗エストロゲンおよびホルモン（例えば、フルタミド、ロイプロリド、タモキシフェン、エストラジオール、エストラムスチン、メゲストロール、ジエチルスチベステロール、テストラクトン、ゴセレリン、メドロキシプロゲステロン）；細胞傷害剤（例えば、アルトレタミン、ブレオマイシン、ブスルファン、カルボプラチン、カルムスチン(BiCNU)、シスプラチン、クラドリビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エストラムスチン、エトポシド、ロムスチン、シクロフォスファミド、シタラビン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、インターフェロンα-2aおよび-2b、イフォスファミド、マイトキサントロン、マイトマイシン、パクリタキセル、ストレプトゾシン、テニポシド、チオテパ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン）；抗代謝剤および抗有糸分裂剤（例えば、フロクスリジン、5-フルオロウラシル、フルアラビン、インターフェロンα-2aおよび-2b、ロウコボリン、メルカプトプリン、メトトレキサート、マイトタン、プリカマイシン、チオグアニン、コルヒチン、アンスラサイクリンおよび他の抗生物質、葉酸アンタゴニストおよび他の抗代謝物、ビンカアルカロイド、ニトロソウレア、DNAアルキル化剤、プリンアンタゴニストおよびアナログ、ピリミジンアンタゴニストおよびアナログ、アルキルスルホネート）；酵素（例えば、アスパラギナーゼ、ペグアスパルガーゼ(pegaspa rgase)）；放射性薬剤（例えば、Cu-64、Ga-67、Ga-68、Zr-89、Ru-97、Tc-99m 、Rh-105、Pd-109、In-111，I-123、I-125、I-131、Re-186、Re-188、Au-198、A u-199、Pb-203、At-211、Pb-212、およびBi-212）；毒素（例えば、リシン、アブリン、ジフテリア毒素、コレラ毒素、ゲロニン、ヨウシュヤマゴボウ抗ウイルス性タンパク質、トリチン、Shigella毒素、およびPseudomonas外毒素Ａ）、補助治療剤（例えば、グラニセトロンおよびオンダンセトロン（抗悪心剤、抗嘔吐剤）、デキスラゾキサン（心筋症）、硝酸ガリウム（高カルシウム血症）、GCSF およびGMSCF(化学療法およびBMT)、IL-1α、IL-2、IL-3、IL-4、レバミゾール、ピロカルピン（放射線治療設定における唾液生成）、ストロンチウム89(骨腫瘍) が挙げられる。本発明で利用され得るさらなる治療剤として、心臓血管剤；抗高血圧剤；アドレナリン作用ブロッカーおよびスティミュレーター（例えば、ドキサゾシン、グアナドレル、グアネチジン、フェオキシベンザミン、プラゾシン＋ポリチアジド、テラゾシン、メチルドーパ、クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン）； α-/β-アドレナリン作用ブロッカー（例えば、ラベタロール）；アンギオテンシン変換酵素（ACE）インヒビター（例えば、ベナゼプリル、カトプリル、エナラプリル、エナラプリラト、フォシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、キナプリル、ラミプリル、ならびにカルシウムチャンネルブロッカーおよび利尿剤との組み合せ）；ACEレセプターアンタゴニスト（例えば、ロサルタン）；β ブロッカー（例えば、アセブトロール、アテノロール、ベタキソノール、ビソプロロール、カルテオロール、エスモロール、フィモロール、ピンドロール、プロプラノロール、ペンバトロール、メトプロロール、ナドロール、ソタロール）；カルシウムチャンネルブロッカー（例えば、アミロライド、アムロジピン、ベプリジル、ジルチアゼム、イスラジピン、ニフェジピン、ベラパミル、フェロジピン、ニカルジピン、ニモジピン）；抗不整脈剤、グループＩ〜IV（例えば、ブレチリウム、ジソピラミド、エンカイニド、フレカイニド、リドカイン、メキシレチン、モリシジン、プロパフェノン、プロカイナミド、キニジン、トカイニド、エスモロール、プロプラノーロール、アセブトロール、アミオダロン、ソタロール、ベラパミル、ジルチアゼン、ピンドロール、塩酸ブプラノロール、トリクロルメチアジド、フロセミド、塩酸プラゾジン、酒石酸メトプロロール、塩酸カルテオロール、塩酸オクスプレノロール、および塩酸プロプラノロール）；ならびに多方面にわたる抗不整脈剤および強心剤（例えば、アデノシン、ジゴキシン；メチルジゴキシン、カフェイン、塩酸ドーパミン、塩酸ドブタミン、塩酸オクトパミン、ジプロフィリン、ユビデカレノン、ジギタリス）が挙げられる。本発明で利用され得る他の治療剤として、利尿剤（例えば、アセタゾラミド、アミロリド、トリアムテレン＋ヒドロクロロチアジドの組み合せ、スピロノラクトン＋ヒドロクロロチアジドの組み合せ、トルセミド、フロセミド、エタクリネン酸、ブメタニド、トリアムテレン、メチルクロロチジド、ヒドロクロロチアジド、メトダゾン、クロルサリドン、ヒドロフルメチアジド、メトラゾン、メチクロチアジド、ポリチアジド、キニタゾン、トリクロルメチアジド、ベンロフルメチアジド、ベンズチアジド）；低血圧利尿剤（例えば、メフルシド、ペンフルチジド、ブメタミド、ヒドロチアジド、ベントロフルメチアジド、レセルピン）；変力(inotropic)剤（例えば、ジゴキシン、ジギトキシン、ドブタミン、アムリノン、ミルリノン）；血管拡張剤（例えば、パパベリン、イソソルビドモノ-およびジニトレート、ニトログリセリン、ジゾキシド、ヒドララジン、ミノキシジル、ニトロプルシド、プラゾシン、テラゾシン、1,2,3-プロパントリオールモノニトレート、1,2,3-プロパントリオールニトレートおよびそれらのエステル誘導体、ペンタエリスリトールテトラニトレート、ヘプロニケート、モルシドミン、ニコモール、シムフィブレート、塩酸ジルチアゼム、シンナリジン、ジピリダモール、トラピジル、塩酸トリメタジジン、カルボクロメン、乳酸プレニルアミン、ジラゼプジハイドロクロライド）；昇圧剤（例えば、メタラミノール、イソプロテレノール、フェニレフリン、メタキサミン）；抗凝固剤および血栓溶解剤（例えば、組織プラスミノーゲンアクチベーター(TPA)、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼ、ヘパリン、ワーファリン）；カルモジュリンアンタゴニスト（例えば、H₇）；ナトリウム/カルシウムアンチポーターのインヒビター（例えば、アミロライド）；ならびにリアノジンレセプターのインヒビター（例えば、リアノジン）；IP₃レセプターのインヒビター（例えば、ヘパリン）が挙げられる。本発明で利用され得る他の治療剤として、抗炎症剤が挙げられる。このような薬剤の代表的な例として、非ステロイド剤（「NSAIDS」）（例えば、サリチル酸塩（例えば、サルサレート、メサラミン、ジフルニサル、コリントリサリチル酸マグネシウム）、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、フェノプロフェン、フルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、メフェナム酸、ナブメトン、ナプロキセン、ピロキシカム、フェニルブタゾン、ケトプロフェン、S- ケトプロフェン、ケトロラク、トロメタミン、スリンダク、トルメチン）が挙げられる。他の抗炎症薬物として、ステロイド剤（例えば、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、コルチゾン、デキサメタゾン、フルオシノロン、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、フッ素化コルチコイド、トリアムシノロン-ジアセテート、ヒドロコルチゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、およびプレドニゾン）が挙げられる。免疫抑制剤（例えば、アデノコルチコステロイド、シクロスポリン）；ならびに抗ヒスタミン剤および鬱血除去剤（例えば、アステミゾール（ヒスタミンH1-レセプターアンタゴニスト）、アザチジン、ブロムフェニラミン、クレマスチン、クロルフェニラミン、クロモリン、シプロヘプタジン、ジフェニルイミダゾール、塩酸ジフェンヒドラミン、ヒドロキシジン、グリチルレチン酸、塩酸ホモクロロサイクリジン、ケトチフェン、ロラタジン、ナファゾリン、フェニンダミン、フェニラミン、プロメタジン、テルフェナジン、トリメプラジン、トリペレナミン、トラニラスト、ならびに鬱血除去剤フェニルプロパノールアミンおよびプソイドエフェドリン）。本発明で利用され得るさらなる治療剤として、中枢神経系薬剤が挙げられる。このような薬剤の代表的な例として、抗抑制剤（例えば、Prozac、Paxil、Luvox 、Mannex、およびEffexor）；CNS刺激剤（例えば、ペモリン、メタムフェタミン、デキストロアンフェタミン）；睡眠剤（例えば、ペントバルビタール、エスタゾラム、エトクロリノール、フルラゼパム、プロポフォール、セコバルビタール、テマゼパム、トリアゾラム、キアゼパム、酒石酸ゾルピデム）；抗躁病剤（例えば、リチウム）；鎮静剤および抗痙攣性バルビツール剤（例えば、ペントバルビトール、フェノバルビタール、セコバルビタール、メフォバルビタール、ブタバルビタール、プリミドン、アモバルビタール）；非バルビツール鎮静剤（例えば、ジフェヒドラミン、ドキシルアミン、ミダゾラム、ジアゼパム、プロメタジン、ロラゼパム、テマゼパム）；ならびに他の多方面にわたる睡眠剤および鎮静剤（例えば、メタカロン、グルテチミド、フルラゼパム、ブロモバレリルウレア、フルラゼパム、塩酸塩、ハロキサゾラム、トリアゾラム、フェノバルビタール、抱水クロラール、ニメタゼパム、エスタゾラム）が挙げられる。本発明で利用され得る他の治療剤として、アルツハイマー剤（例えば、タクリン（可逆性コリンエステラーゼインヒビター）；パーキンソン病剤（例えば、アマンタジン、ブロモクリプチンメシレート、ビペリデン、ベンズトロピンメシレート、カルビドーパ-レボドパ、ジフェニルヒドラミン、ヒヨスチアミン、レボドパ、ペルゴリドメシレート、プロシクリジン、セレジリンHCl、トリヘキシフェニジルHCl）；および他の多方面にわたるCNS剤（例えば、フルフェナジン、フルタゾラム、フェノバルビタール、メチルフェノバルビタール、チオリダジン、ジアゼパム、ベンズブロマロン、塩酸クロカプラミン、クロチアゼパム、クロルプロマジン、ハロペリドール、炭酸リチウム）が挙げられる。本発明で利用され得るさらなる治療剤として、抗偏頭痛剤（例えば、エルゴタミン、メチルセルジド、プロプラノールオール（propanolol）、ジヒドロエルゴタミン、Sertroline、およびImmitrex）；後脳塞栓症剤（例えば、塩酸二カルジピン、マレイン酸シネパジド、ペントキシフィリン、酒石酸イフェンプロジル）；局所麻酔剤（例えば、リドカイン、ベンゾカイン、エチルアミノベンゾエート、塩酸プロカイン、ジブカイン、プロカイン）；抗潰瘍／抗還流剤（例えば、Lo sec（オメパラゾール）、アセグルタミドアルミニウム、塩酸セトラキセート、塩酸ピレンゼピン、シメチジン、ファモチジン、メトクロプラミド、ラニチジン、L-グルタミン、ゲファルネート、およびこれらの化合物の任意の立体異性体、ならびにこれらの化合物の薬学的に受容可能な塩（例えば、適切に選択された、単一でまたは１を超える化合物を組み合わせて使用される化合物））；プロテアーゼインヒビター（例えば、セリンプロテアーゼ、メタロエンドプロテアーゼおよびアスパルチルプロテアーゼ（例えば、HIVプロテアーゼ、レニン、およびカセプシン）ならびにチオールプロテアーゼインヒビター（例えば、ベンジルオキシカルボニル-leu-ノルロイシナル（カルペプチン）およびアセチル-leu-leu-ノウロイシナル）；ホスホジエステラーゼインヒビター（例えば、イソブチルメチルキサンチン）；フェノチアジン；増殖因子レセプターアンタゴニスト（例えば、血小板由来増殖因子(PDGF)、上皮増殖因子、インターロイキン、トランスフォーミング増殖因子αおよびβ、ならびに酸性または塩基性繊維芽細胞増殖因子）；アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、DPGFまたは他の増殖因子をコードするmRNAの部分に相補的な配列）；ならびにプロテインキナーゼインヒビター（例えば、チロシンキナーゼ、プロテインキナーゼＣ、ミオシン軽鎖キナーゼ、Ca²⁺ /カルモジュリンキナーゼII、カゼインキナーゼII対する）が挙げられる。本発明で利用され得る他の治療剤として、抗組織損傷剤が挙げられる。このような薬剤の代表的な例として、スーパーオキシドジスムターゼ；免疫モジュレーター（例えば、リンホカイン、モノカイン、インターフェロンα、β、τ-1b、 α-n3、α-2b、α-2b）；増殖レギュレーター（例えば、IL-2、腫瘍壊死因子、上皮増殖因子、ソマトレム、フィブロネクチン、GM-CSF、CSF、血小板由来増殖因子、ソマトトロピン、rG-CSF、上皮増殖因子、IGF-1）が挙げられる。本発明で利用され得る他の治療的薬剤として、モノクローナルおよびポリクローナル抗体（例えば、以下に対して活性な抗体：毒液、毒素、腫瘍壊死因子、細菌）；ホルモン（例えば、エストロゲン、プロゲスチン、テストステロン、ヒト成長ホルモン、エピネフリン、レバルテレノール、チロキシン、チログロブリン、オキシトシン、バソプレッシン、ACTH、ソマトロピン、チロトロピン、インシュリン、パラサイリン、カルシトニン）；ビタミン（例えば、ビタミンＡ、Ｂ、およびそのサブビタミンＣ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｊ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、PP、Ｔ、Ｕならびにそれらの亜種）；アミノ酸（例えば、アルギニン、ヒスチジン、プロリン、リジン、メチオニン、アラニン、フェニルアラニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、スレオニン、トリプトファン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、バリン）；プロスタグランジン（例えば、E₁、E₂、F₂ _α、I₂）；酵素（例えば、ペプシン、パンクレアチン、レニン、パパイン、トリプシン、パンクレリパーゼ、キモパパイン、ブロメライン、キモトリプシン、ストレプトキナーゼ、ウロキナーゼ、組織プラスミノーゲンアクチベーター、フィブリノリシン、デオキシリボヌクレアーゼ（desoxyribonuclease）、スチライン、コラゲナーゼ、アスパラギナーゼ、ヘパリナーゼ）；緩衝液および塩（例えば、NaCl、以下を含むカチオン：Na⁺、K⁺、Ca⁺⁺、Mg⁺⁺、Zn⁺⁺、NH₄ ⁺、トリエタノールアミン、以下を含むアニオン：リン酸、硫酸、塩化物、クエン酸、アスコルビン酸、酢酸、ホウ酸、炭酸イオン）；防腐剤（例えば、塩化ベンザルアルコニウム、重亜硫酸NaまたはK、チオ硫酸NaまたはK、パラベン）；抗痛風剤（例えば、アロプリノール、co chicine、プロベニシド、スルフィンピラゾン）；抗抑制剤（例えば、アミトリプチリン、アモキサピン、デシプラミン、ドキセピン、イミプラミン、ノルトリプチリン、プロトリプチリン、トリミプラミン）；避妊薬（例えば、ノエチンドロンの組み合せ（例えば、エチニルエストラジオールまたはメスタラノールとの））；ならびに抗悪心剤／抗嘔吐剤（例えば、ジメンヒドリネート、ヒドロキシジン、メクリジン、メトクロプラミド、プロクロルペラジン、プロメタジン、スコポラミン、チエチルペラジン、トリエトベンザミド）が挙げられる。本発明で同様に利用され得る他の治療剤として、抗喘息剤、抗精神薬、気管支拡張薬、金化合物、低血糖剤、低脂肪血症剤、麻酔薬、ワクチン、骨代謝に作用する薬剤、抗下痢剤、排卵誘発剤、筋肉弛緩剤、食欲抑制剤、ホルモン（例えば、甲状腺ホルモン、エストロゲン、プロゲステロン、コルチゾンおよび／または成長ホルモン）、他の生物学的に活性な分子（例えば、インシュリン）、ならびにT_H1サイトカイン（例えば、インターロイキン-2、-12、および-15、γインターフェロン）またはT_H2(例えば、インターロイキン-4および-10)サイトカインが挙げられる。上記の治療剤は例示目的のために提供されたが、本発明はそれに限定されないことが理解されるべきである。例えば、薬剤は上記で詳細に言及されるが、本発明は、このような薬剤のアナログ、誘導体、および結合体を含むことが理解されるべきである。例示として、パクリタキセルは、パクリタキセルの一般的に化学的に利用可能な形態だけでなく、アナログ（例えば、上記のタキソテレ）およびパクリタキセル結合体（例えば、パクリタキセル-PEG、パクリタキセル-デキストラン、またはパクリタキセル-キシロース(xylos)）もまた言及ことを理解されるべきである。さらに、当業者には明らかであるように、上記に示された試薬は１つのクラスの文脈で言及され得るが、実際に列挙された薬剤の多くは、複数の生物学的活性を有する。さらに、１を超える治療剤は、一度に（すなわち、組み合わせて）利用され得るか、または連続的に送達され得る。ポリマー上記のように、本発明の治療組成物は、さらにポリマーを含み得る。広範な種々のポリマーは、上記の１つ以上の治療剤を含みおよび/または送達するように利用され得る（例えば、生分解性および非生分解性の組成物の両方を含む）。生分解性組成物の代表的な例として、アルブミン、コラーゲン、ゼラチン、デンプン、セルロース（メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロール、セルロースアセテートフタレート、セルロースアセテートスクシネート、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、カゼイン、デキストラン、多糖、フィブリノーゲン、ポリ(D,Lラクチド)、ポリ(D,L-ラクチド-co-グリコリド)、ポリ（グリコリド）、ポリ（ヒドロキシ酪酸）、ポリ（アルキル炭酸）、およびポリ（オルトエステル）、ポリエステル、ポリ（ヒドロキシ吉草酸）、ポリジオキサノン、ポリ（エチレンテレフタレート）、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（タルトロン酸(tartronic a cid)）、ポリ無水物、ポリホスファゼン、ポリ（アミノ酸およびそれらのコポリマー）が挙げられる（一般的に、Illum,L.,Davids,S.S.(編)「制御薬物送達におけるポリマー」Wright,Bristol，1987;Arshady，J.Controlled Release 17:1-22 ，1991；Pitt,Int.J.Phar.59:173-196，1990；Hollandら，J.Controlled Releas e 4:155-0180，1986を参照のこと）。非生分解性ポリマーの代表的な例として、 EVAコポリマー、シリコーンゴム、アクリル性ポリマー（ポリアクリル酸、ポリメチルアクリル酸、ポリメチルメタクリレート、ポリアルキルシノアクリレート）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリアミド（ナイロン6,6）、ポリウラタン、ポリ（エステルウラタン）、ポリ（エーテルウラタン）、ポリ（エステル- ウレア）、ポリエーテル（ポリ（エチレン酸化物）、ポリ（プロピレン酸化物）、プルロニック、ポリ（テトラメチレングリコール））、シリコーンゴム、およびビニルポリマー［ポリビニルピロリドン、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（ビニルアセテートフタレート）］が挙げられる。アニオン性（例えば、アルギン酸、カラゲナン、カルボキシメチルセルロース、およびポリ（アクリル酸））またはカチオン性（例えば、キトサン、ポリ-1-リジン、ポリエチレンイミン、およびポリ（アリルアミン））のいずれかである、ポリマーもまた開発される（一般的に、Dunnら，J.Applied Polymer Sci.50:353-365，1993;Casconeら，J. Materials Sci.:Materials in Medicine 5:770-774，1994;Shiraishiら，Biol.P harm.Bull.16(11):1164-1168，1993;ThacharodiおよびRao，Int'l J.Pharm.120: 115-118，1995;Miyazakiら，Int'l J.Pharm.118:257-263，1995を参照のこと）。特に好ましいポリマー性キャリアとして、ポリ（ポリエチレン-ビニルアセテート）（40％架橋）、ポリ(D,L-乳酸)オリゴマーおよびポリマー、ポリ(L-乳酸) オリゴマーおよびポリマー、ポリ（グリコール酸）、乳酸およびグリコール酸のコポリマー、ポリ（カプロラクトン）、ポリ（バレロラクトン）、ポリ無水物、ポリ（カプロラクトン）またはポリ（乳酸）のポリエチレングリコールとのコポリマーならびにそのブレンドが挙げられる。所望の放出特徴および／または特定の所望の特性を有するポリマー性キャリアが、種々の形態で形成され得る。例えば、ポリマー性キャリアは、特定の誘発事象（例えば、pH）への暴露の際に治療剤を放出するように形成され得る(例えば、Hellerら「化学的に自己調節された薬物送達系」Polymers in Medicine III， Elsevier Science Publishers B.V.,Amsterdam，1988，175-188頁;Kangら，J.Ap plied Polymer Sci.48:343-354，1993;Dongら，J.Controlled Release 19:171-1 78，1992;DongおよびHoffman，J.Controlled Release 15:141-152，1991;Kimら，J.Controlled Release 28:143-152，1994;Cornejo-Bravoら，J.Controlled Re lease 33:223-229，1995;WuおよびLee，Pharm.Res.10(10):1544-1547，1993;Ser resら，Pharm.Res.13(2):196-201，1996;Peppas「pHおよび温度感受性送達系の基礎」Gurnyら（編）,Pulsatile Drug Delivery，Wissenschaftliche Verlagsge sellschaft mbH，Stuttgart，1993，41-45頁；Doelker，「セルロース誘導体」, 1993，PeppasおよびLanger(編)，Biopolymers 1，Springer-Verlag，Berlinを参照のこと)。pH感受性ポリマーの代表的な例として、ポリ（アクリル酸）およびその誘導体（例えば、ホモポリマー（例えば、ポリ（アミノカルボン酸）；ポリ（アクリル酸）；ポリ（メチルアクリル酸））、このようなホモポリマーのコポリマー、ならびにポリ（アクリル酸）および上記のもののようなアクリルモノマーのコポリマーが挙げられる。他のpH感受性ポリマーとして、多糖（例えば、セルロースアセテートフタレート；フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース；ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート；セルロースアセテートトリメリレート；およびキトサン）が挙げられる。さらに他のpH感受性ポリマーとして、pH感受性ポリマーおよび水溶性ポリマーの任意の混合物が挙げられる。同様に、温度感受性であるポリマー性キャリアが形成され得る（例えば、Chen ら「膣薬物送達のための生体接着性ポリアクリル酸骨格へ融合された温度感受性プルロニックの新規のヒドロゲル」Proceed.Intern.Symp.Control.Rel.Bioact.M ater.22:167-168，Controlled Release Society，Inc.,1995；Okano，「時間的な制御薬物送達のための刺激応答性ヒドロゲルの分子設計」Proceed.Intern.Sym p.Control.Rel.Bioact.Mater.22:111-112，Controlled Release Society，Inc., 1995；Johnstonら，Pharm.Res.9(3):425-433，1992；Tung，Int'l J.Pharm.107: 85-90，1994;HarshおよびGehrke，J.Controlled Release 17:175-186，1991；Ba eら，Pharm.Res.8(4):531-537，1991;DinarvandおよびD'Emanuele，J.Controlle d Release 36:221-227，1995;YuおよびGrainger，「新規の熱感受性両親媒性ゲル：ポリN-イソプロピルアクリルアミド-co-アクリル酸ナトリウム-co-n-N-アルキルアクリルアミドネットワーク合成および物理化学的特徴」Dept.of Chemical ＆Bioligal Sci.,Oregon Graduate Institute of Science＆Technology，Beaver ton，OR，820-821頁；ZhouおよびSmid，「結合スターポリマーの物理的ヒドロゲル」Polymer Research Institute，Dept.of Chemistry，College of Environmen tal Science and Forestry，State Univ.of New York，Syracuse，NY，822-823 頁；Hoffmanら，「刺激応答性ヒドロゲルにおける孔サイズおよび水「構造」の特徴付け」Center for Bioengineering，Univ.of Washington，Seattle，WA，82 8頁；YuおよびGrainger，「架橋N-イソプロピルアクリルアミドネットワークにおける熱感受性膨張反応：カチオン性、アニオン性、および両親媒性ヒドロゲル」Dept.of Chemical＆Bioligical Sci.,Oregon Graduate Institute of Science ＆ Technology,Beaverton，OR，829-830頁；Kimら，Pharm.Res.9(3):283-290，1992 ；Baeら，Pharm.Res.8(5):624-628，1992;Konoら，J.Controlled Release 30：6 9-75，1994;Yoshidaら，J.Controlled Release 32:97-102，1994;Okanoら，J.Co ntrolled Release 36:125-133，1995；ChunおよびKim，J.Controlled Release38 :39-47，1996;D'EmanueleおよびDinarvand，Int'l J.Pharm.118:237-242，1995; Katonoら，J.Controlled Release 16:215-228，1991;Hoffman，「生物学的に活性な種を含む熱可逆性ヒドロゲル」Migliaresiら（編），Polymers in Medicine III，Elsevier Science Publishers B.V.，Amsterdam，1988，161-167頁；Hoff man，「治療薬および診断薬における熱可逆性ポリマーおよびヒドロゲルの適用」Third International Symposium on Resent Advances in Drug Delivery Syst ems，Salt Lake City，UT，1987年２月24〜27日，297-305頁;Gutowskaら，J.Con trolled Release 22:95-104，1992;PalasisおよびGehrke，J.Controlled Releas e 18:1-12，1992;Paavolaら，Pharm.Res.12(12):1997-2002，1995を参照のこと) 。熱ゲル化ポリマーおよびそれらのゼラチン温度(LCST(℃))の代表的な例として、ホモポリマー（例えば、ポリ（N-メチル-N-n-ポリアクリルアミド）、19.8；ポリ（N-n-プロピルアクリルアミド）、21.5；ポリ（N-メチル-N-イソプロピルアクリルアミド）、22.3；ポリ（N-n-プロピルメタクリルアミド）、28.0；ポリ（N-イソプロピルアクリルアミド）、30.9；ポリ（N，n-ジエチルアクリルアミド）、32.0；ポリ（N-イソプロピルメタクリルアミド）、44.0；ポリ（N-シクロプロピルアクリルアミド）、45.５；ポリ（N-エチルメチアクリルアミド）、50. 0；ポリ（N-メチル-N-エチルアクリルアミド）、56.0；ポリ（N-シクロプロピルメタクリルアミド）、59.0；ポリ（N-エチルアクリルアミド）、72.0が挙げられる。さらに、熱ゲル化ポリマーは、上記のモノマー間でコポリマーを調製することによるか、またはこのようなホモポリマーを他の水溶性ポリマー（例えば、アクリルモノマー（例えば、アクリル酸およびその誘導体（例えば、メチルアクリル酸））、アクリレートおよびその誘導体（例えば、ブチルメタクリレート）、アクリルアミド、およびN-n-ブチルアクリルアミド）とを組み合わせることにより作製され得る。熱ゲル化ポリマーの他の代表的な例として、セルロースエーテル誘導体（ヒドロキシプロピルセルロース、41℃；メチルセルロース、55℃；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、66℃；およびエチルヒドロキシエチルセルロース、ならびにプルロニック（例えば、F-127、10〜15℃；L-122、19℃；L-92、26℃；L-81、 20℃；およびL-61、24℃）が挙げられる。広範な種々の形態（例えば、棒型デバイス、ペレット、スラブ、またはカプセルを含む）が、本発明のポリマー性キャリアにより形成され得る（例えば、Good ellら，Am.J.Hosp.Pharm.43:1454-1461，1986；Langerら，「ポリマーからの巨大分子の制御放出」Biomedical polymers，Polymeric materials and pharmaceu ticals for biomedical use，Goldberg,E.P.，Nakagim,A（編）Academic Press ，113-137頁，1980；Rhineら，J.Pharm.Sci.69:265-270，1980；Brownら，J.Pha rm.Sci.72:1181-1185，1983；およびBawaら，J.Controlled Release 1:259-267 ，1985を参照のこと）。治療剤は、ポリマーのマトリックス内で吸蔵により連結されるか、共有結合により結合されるか、またはマイクロカプセル内にカプセル化され得る。本発明の特定の好ましい実施態様では、治療組成物は、非カプセル処方物（例えば、ミクロスフェア（サイズがナノメーターからマイクロメーターの範囲）、ペースト、種々のサイズの糸、フィルム、およびスプレー）において提供される。好ましくは、本発明の治療組成物は、意図される使用に適切な様式で形成される。本発明の特定の局面では、治療組成物は生体適合性であり、そして数日から数ヶ月の期間にわたって１つ以上の治療薬剤を放出すべきである。例えば、７日〜10日の期間にわたって治療剤（例えば、パクリタキセル）の10％、20％、または25％(w/v)を超えて放出する、「急速放出」または「バースト」治療組成物が提供される。このような「急速放出」組成物は、特定の実施態様では、化学療法レベル（適用可能な場合）の所望の薬剤を放出し得るべきである。他の実施態様では、７日〜10日の期間にわたって治療剤の１％(w/v)未満を放出する、「低放出」治療組成物が提供される。さらに、本発明の治療組成物は、好ましくは、数ヶ月間安定であり、そして無菌条件下で生成され、そして維持され得るべきである。本発明の特定の局面では、治療組成物は、特定の使用に依存して、50nm〜500 μｍの範囲の任意のサイズで形成され得る。あるいは、このような組成物はまた、フィルムまたはコーティングに凝固する、「スプレー」として容易に適用され得る。このようなスプレーは、例えば、0.1μｍ〜３μｍ、10μｍ〜30μｍ、および30μｍ〜100μｍを含む、広範な多数のサイズのミクロスフェアから調製され得る。本発明の治療組成物はまた、種々の「ペースト」またはゲル形態で調製され得る。例えば、本発明の１つの実施態様では、ある温度（例えば、37℃を超える温度（例えば、40℃、45℃、50℃、55℃、または60℃））で液体、そして別の温度（例えば、環境(ambient)体温または37℃より低い任意の温度）で固体または半固体である治療組成物が提供される。このような「熱ペースト」は、本明細書中に提供された開示があれば容易に作製され得る。本発明のさらに他の局面では、本発明の治療組成物は、フィルムとして形成され得る。好ましくは、このようなフィルムは、一般的に、５、４、３、２、または１mm厚未満、より好ましくは0.75mmまたは0.5mm厚未満、そして最も好ましくは500μｍ〜100μｍ厚未満である。このようなフィルムは、好ましくは曲げやすく、良好な引っ張り強さ（例えば、50N/cm²を超える、好ましくは100N/cm²を超える、より好ましくは150または200N/cm²を超える）、良好な接着特性を有し（すなわち、湿ったまたは濡れた表面に容易に接着する）、そして制御された浸透性を有する。本発明の特定の実施態様では、治療組成物はまた、界面活性剤（例えば、プルロニック（例えば、F-127、L-122、L-92、L-81、およびL-61）のようなさらなる成分を含み得る。本発明のさらなる局面では、疎水性化合物を含みそして放出するように適合されるポリマー性キャリアが提供され、このキャリアは、炭水化物、タンパク質、またはポリペプチドと組み合わせた疎水性化合物を含む。特定の実施態様では、ポリマー性キャリアは、１つ以上の疎水性化合物の領域、ポケット、または顆粒を含む。例えば、本発明の１つの実施態様では、疎水性化合物は、疎水性化合物含むマトリックスに取り込まれ、続いてこのマトリックスはポリマー性キャリアに取り込まれ得る。種々のマトリックス（例えば、炭水化物および多糖（例えば、デンプン、セルロース、デキストラン、メチルセルロース、およびヒアルロン酸）、タンパク質またはポリペプチド（例えば、アルブミン、コラーゲン、およびゼラチン）を含む）はこれに関して利用され得る。代替の実施態様では、疎水性化合物は、疎水性コア内に含まれ得、そしてこのコアは疎水性の殼内に含まれ得る。例えば、実施例に記載のように、パクリタキセルは、親水性殻を有する疎水性コア（例えば、ポリD,L乳酸-PEGまたはMePEG凝集体）に取り込まれ得る。広範な種々の疎水性化合物（例えば、パクリタキセルおよびエストラムスチンのような微小管機能を破壊する特定の疎水性化合物、ミエリン塩基性タンパク質のような疎水性タンパク質、CNSミエリンのプロテオリピドタンパク質、疎水性細胞壁タンパク質、ポーリン、膜タンパク質（EMBO J.12(9):3409-3415，1993）、ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質（「MOG」）(Biochem.and Mol.Bi ol.Int.30(5):945-958，1993，P27 Cancer Res．53(17):4096-4101，1913、バクテリオオプシン、ヒトサーファクタントタンパク質（「HSB」；J.Biol.Chem.268 (15):11160-11166，1993）、およびSP-BまたはSP-C(Biochimica et Biophysica Acta 1105(1):161-169，1992)を含む)は、上記のポリマー性キャリアから放出され得る。治療組成物を形成するためのポリマー性キャリアへの治療薬剤（例えば、上記のもの）の取り込みの代表的な例は、以下の実施例においてより詳細に記載される。他のキャリア本明細書中に記載される治療薬剤を含みおよび／または送達するために同様に利用され得る他のキャリアとして以下が挙げられる：ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン(CserhatiおよびHollo，Int.J.Pharm.108:69-75，1994)、リポソーム（例えば、Sharmaら，Cancer Res.53:5877-5881，1993；SharmaおよびStrau binger，Pharm.Res.11(60):889-896，1994；WO93/18751；米国特許第5,242,073 号を参照のこと）、リポソーム/ゲル（WO94/26254）、ナノカプセル（Bartoliら ,J.Microencapsulation7(2):191-197，1990）、ミセル（Alkan-Onyukselら,Phar m.Res.11(2):206-212,1994）、インプラント（Jampelら,Invest.Ophthalm.Vis. Science 34(11):3076-3083，1993；Walterら，Cancer Res.54:22017-2212，1994 ）、ナノ粒子（ViolanteおよびLanzafame PAACR）、ナノ粒子−改変（米国特許第5,145,684号）、ナノ粒子（表面改変）（米国特許第5,399,363号）、タキソールエマルジョン／溶液（米国特許第5,407,683号）、ミセル（界面活性剤）（米国特許第5,403,858号）、合成リン脂質化合物（米国特許第4,534,899号）、気体媒介分散（米国特許第5,301,664号）、液体エマルジョン、泡スプレー、ゲルローションクリーム、軟膏、分散ベシクル、粒子または小滴、固体または液体エアゾール、マイクロエマルジョン（米国特許第5,330,756号）、ポリマー殻（ナノカプセルおよびマイクロカプセル）（米国特許第5,439,686号）、表面活性剤中のタキソイドベース組成物（米国特許第5,438,072号）、エマルジョン（Tarrら，Pharm Res.4:62-165，1987）、ナノスフェア（Haganら，Proc.Intern.Symp.Co ntrol Rel.Bioact.Mater.22，1995；Kwonら，Pharm Res.12(2):192-195；Kwonら，Pharm Res.10(7):970-974；Yokoyamaら，J.Contr.Rel.32:269-277，1994；Gre fら，Science 263:1600-1603，1994；Bazileら,J.Pharm.Sci.84:493-498，1994 ）、およびインプラント（米国特許第4,882,168号）を参照のこと）。以下により詳細に議論されるように、治療組成物を形成するために本明細書中に記載されるキャリアのうちの１つに必要に応じて取り込まれる本発明の治療剤は、広範な種々の疾患を処置または予防するために調製され、そして利用され得る。疾患の処置または予防上記のように、本発明は、身体通路の閉塞に関連する広範な種々の疾患（例えば、脈管疾患、新生物閉塞、炎症性疾患、および感染性疾患を含む）を処置するかまたは予防するための方法を提供する。例えば、本発明の１つの局面では、本明細書中に記載される広範な種々の治療組成物は、脈管系の閉塞を引き起こす脈管疾患を処置するために利用され得る。このような疾患の代表的な例としては、全ての管（任意の動脈、静脈、または移植片周囲）（冠状動脈、大動脈、腸骨動脈、頚動脈、一般的な大腿動脈、表在性大腿骨動脈、膝窩動脈、および移植片吻合部位を含むが、それらに制限されない）のアテローム性動脈硬化症；血管痙縮（例えば、冠状動脈血管痙縮およびレイノー病）；再狭窄（バルーン血管形成、バイパス手術、ステント挿入、および移植片挿入のような以前の介入の部位での管の閉塞）；炎症および自己免疫状態（例えば、一過性動脈炎、脈管炎）が挙げられる。簡単には、アテローム性動脈硬化症のような脈管疾患において、白血球、特に単球およびＴリンパ球は、内皮細胞に、特に動脈分岐の位置で接着する。内皮への接着後、白血球は、走化性(chemostatic)刺激に応答して内皮細胞の裏打ちを横切って移動し、そして平滑筋細胞に沿って動脈壁の脈管内壁に蓄積する。アテローム性動脈硬化症発達のこの初期の障害は、「脂肪線条（fatty streak）」として公知である。脂肪線条内の単球はマクロファージに分化し；そしてマクロファージおよび平滑筋細胞は、脂質およびリポタンパク質を連続的に吸収して、泡沫細胞になる。マクロファージが蓄積すると、重層する内皮は機械的に破壊され、そして酸化脂質、酸素由来フリーラジカルおよびマクロファージにより放出されるプロテアーゼにより化学的に変えられる。泡沫細胞は、脈管壁の微小潰瘍化を引き起こす内皮表面を通して侵食する。血流成分への潜在的な血栓形成性内皮下組織（例えば、コラーゲンおよび他のタンパク質）の暴露は、破壊された内皮領域への血小板の接着をもたらす。血小板接着および他の事象は、同化作用および増殖因子（血小板由来増殖因子(PDGF)、血小板活性化因子(PAF)、およびインターロイキン１および６（IL-1、IL-6）を含む）のこの環境（mileau）への放出を誘発する。このパラクリン因子は、血管平滑筋細胞（VSMC）移動および増殖を刺激すると考えられる。正常な（非疾患）血管壁において、血管平滑筋細胞は、収縮表現型および低い指数の有糸分裂活性を有する。しかし、血小板、マクロファージ、および内皮細胞により放出されたサイトカインおよび増殖因子の影響下で、VSMCは、成熟収縮細胞から未熟分泌細胞への表現型変化を受ける。形質転換されたVSMCは、血管壁の中膜で増殖し、血管内膜に移動し、血管内膜で増殖し、そして多量の細胞外マトリックスを生成し続ける。これは、発達している脈管障害を繊維状プラークに変換する。分泌性VSMCにより合成された細胞外マトリックスは、コラーゲン、エラスチン、糖タンパク質、およびグリコサミノグリカンを含み、コラーゲンはアテローム性動脈硬化症プラークの主要な細胞外マトリックス成分を含む。エラスチンおよびグリコサミノグリカンはリポタンパク質に結合し、そしてまた障害増殖に寄与する。繊維状プラークは、平滑筋細胞および重層するマクロファージ、Ｔ細胞、ならびに細胞外物質を含む種々の厚さの密な結合組織の繊維状キャップからなる。 PDGF、IL-1、およびIL-6に加えて、他の有糸分裂促進性因子（形質転換増殖因子β(TGF-β、繊維芽細胞増殖因子(FGF)、トロンボスポンジン、セロトニン、トロンボキサンA₂、ノルエピネフリン、およびアンギオテンシンIIを含む)は、管壁に浸潤する細胞により生成される。これは、より多くの細胞の補充、さらなる細胞外マトリックスの合成、およびさらなる脂質の蓄積をもたらす。これは、血管管腔を著しく侵害するまで、アテローム性動脈硬化症障害を進行的に大きくする。最初に、血管を通る閉塞した血流は、増大した流れが必要とされる場合に、アテローム性動脈硬化症プラークから遠位の組織の虚血を引き起こす−この障害がさらに動脈をブロックした後に、虚血は静止して生じる。拡大しているアテローム性動脈硬化症プラークにおけるマクロファージは、細胞傷害および隣接組織の壊死を引き起こす酸化脂質、フリーラジカル、エラスターゼ、およびコラゲナーゼを放出する。この障害は壊死コアを発現させ、そして複合プラークへ変換させる。複合プラークは、塞栓；局所的出血（これは、障害の急速な拡大による管腔閉塞をもたらすプラークを供給する脈管の血管破裂に派生的である）；または潰瘍化および裂溝形成（これは、血栓形成性壊死コアを、局所的血栓または遠位の塞栓を生じる血流に暴露する）を引き起こすのを止めさせ得る不安定な障害である。上記の後遺症がいずれも生じなくても、接着血栓は組織化され得、そしてプラークに取り込まれ得、それによりその増殖を促進する。さらに、フィブリノーゲンおよびトロンビンの局所的濃度が増大するにつれて、中膜および血管内膜内の血管平滑筋細胞の増殖は刺激される；このプロセスはまた、最終的に、管のさらなる狭窄を導く。正常動脈の脈管内膜および中膜は、動脈の管腔からまたは外膜中の脈管の血管から酸素を送り込まれ、そして栄養分が供給される。アテローム性動脈硬化症プラークの発現により、外膜の脈管の血管から生じる微細血管は、厚くなった脈管内膜および中膜に伸長する。この脈管ネットワークは、プラークがより悪くなり、そしてプラーク後退を減少させるにつれて、より拡張性になる。これらの微細血管からの出血は、動脈の切開、潰瘍化、または血栓に関連したプラークの急な拡大および破裂を促進し得る。これらの微小血管からの血漿タンパク質の漏出が炎症性浸出物をこの領域内へ誘引し得、そしてこれらの炎症性細胞がアテローム性動脈硬化症プラークの急速な成長および関連する合併症（局所的浮腫および炎症による）に寄与し得ることもまた仮定される。脈管疾患（例えば、上記のような疾患）を処置するために、広範な種々の治療剤（キャリアを伴うかまたは伴わないかのいずれか）は、身体通路の外部へ、または身体通路の外膜を介して平滑筋細胞へ送達され得る。これに関して特に好ましい治療剤として、抗血管新生因子、血小板接着／凝集インヒビター（例えば、アスピリン、ジピリダモル、トロンボキサン合成インヒビター、より強力なトロンボキサンA2よりむしろトロンボキサンAEの生成をもたらす魚油、フィブリノーゲンおよびプロスタサイクリンに結合する血小板IIb/IIIaレセプターに対する抗体）、血管拡張剤（例えば、カルシウム流入ブロッカー、および一酸化窒素ドナーニトログリセリン、ニトロプルシド、およびモルシドミン）、ならびに抗血栓剤およびトロンビンアンタゴニスト（例えば、ヘパリン（低分子量ヘパリン）、ワルファリンアンジュジン(andudin)）が挙げられる。利用され得る他の治療剤として、抗炎症剤（例えば、グルコルチコイド、デキサメタゾン、およびメチルプレドニゾロン）、増殖因子インヒビター（例えば、PDGFアンタゴニスト（例えば、トラピジル）；チロシンキナーゼおよびチロシンホスファターゼプロモーターのインヒビターを含むレセプターインヒビター(例えば、FGF、VEGF、PDGF、およびTNFに対するレセプターのインヒビター)；ソマトスタチンアナログ（アンジオペプチン(angiopeptin)を含む）；アンジオテンシン変換酵素インヒビター；ならびに5HT₂セロテン作動性（serotenergic）レセプターアンタゴニスト（例えば、ケタンセリン））が挙げられる。さらに別の治療剤として、抗増殖剤（例えば、コルヒチン、ヘパリン、β放射体(例えばP-32)またはγ放射体（例えばIr-1 92）、カルシウム流入ブロッカー（例えば、ベラパミル、ジルチアゼム、およびニフェジピン）、コレステロール低下HMB Co-Aレダクターゼインヒビター（例えば、ロバスタチン）、微小管機能を破壊する化合物（例えば、パクリタキセルおよび上記の一酸化窒素ドナー）、ならびに再内皮化のプロモーター（例えば、bF GFおよび血管内皮細胞増殖因子）が挙げられる。本発明の他の局面では、本明細書中に記載される治療剤または組成物は、新生物閉塞を処置するために利用され得る。簡単には、本明細書中で利用される場合に、「新生物閉塞」は、管の位置または存在する悪性腫瘍の組織学的型態にかかわらず、身体の管の任意の新生物（良性または悪性）閉塞を含むことが理解されるべきである。代表的な例として、胃腸疾患（例えば、口-咽頭ガン（腺ガン）、食道ガン腫（偏平上皮細胞、腺ガン、リンパ腫、黒色腫）、胃ガン（腺ガン、形成性胃組織炎、リンパ腫、平滑筋肉腫）、小腸腫瘍（腺腫、平滑筋腫、脂肪腫、腺ガン、リンパ腫、類ガン腫）、結腸ガン（腺ガン）、および肛門直腸ガン）；胆汁管疾患（例えば、膵臓ガン（管腺ガン、島細胞腫瘍、嚢胞腺ガン）のような胆管閉塞をもたらす新生物、胆管ガン、および肝細胞ガン）；肺疾患（例えば、肺および／または気管／気管支通路のガン腫（小細胞肺ガン、非小細胞肺ガン）；雌性生殖疾患（例えば、ファロピーウス管の悪性腫瘍、子宮ガン、子宮頸ガン、膣ガン）；雄性生殖疾患（例えば、精巣ガン、精巣上体ガン、精管ガン、前立腺ガン、良性前立腺肥大）；ならびに尿路疾患（例えば、腎臓細胞ガン腫、腎盤の腫瘍、尿収集系の腫瘍（例えば、移行上皮ガン、膀胱ガン、および良性狭窄または悪性腫瘍による尿道閉塞）が挙げられる。例として、良性前立腺肥大(BPH)は、長期のアンドロゲン刺激に応答して生じる、前立腺、特に尿道周囲の腺の中央部の拡大である。これは、80％を超える50 歳以上の男性に罹患する。この拡大は、前立腺を通って走る尿道部分の圧迫をもたらし得、膀胱流出管(outflow tract)閉塞をもたらす（すなわち、異常に高い膀胱圧が尿の流れを生じるために必要とされる）。1980年に、367,000の前立腺の経尿道の切除が、BPHの処置として合衆国で行われた。他の処置として、投薬、経尿道の括約筋切除、経尿道のレーザーまたはマイクロ波、経尿道の温熱療法、経尿道の超音波、経直腸のマイクロ波、経直腸の温熱療法、経直腸の超音波および外科的除去が挙げられる。すべては、失禁および狭窄形成をもたらす括約筋機序の妨害を含む不利益を有する。新生物疾患（例えば、上記のような疾患）を処置するために、広範な種々の治療剤（キャリアを伴うかまたは伴わないかのいずれか）は、身体通路の外部へ、または身体通路の外膜を介して平滑筋細胞へ送達され得る。これに関して特に好ましい治療剤として、例えば、微小管機能を破壊する化合物（例えば、パクリタキセルおよびその誘導体またはアナログ）を含む、上記の抗血管新生剤、抗増殖剤、または抗新生物剤が挙げられる。例えば、１つの好ましい実施態様では、針またはカテーテルは、超音波ガイダンス下で経直腸的経路を介して尿道に隣接した前立腺に（または、かわりに会陰貫通的(transperineally)に）ガイドされ、そして好ましくは腺のいくつかの四分円、特に尿道周囲に治療剤を送達する。針またはカテーテルはまた、直接触診下で、または内視鏡、蛍光透視鏡、CT、もしくはMRIガイダンス下で配置され、そして時間間隔で投与され得る。代替物として、カテーテルまたはトロカールを介したペレットの配置もまた達成され得る。上記の手順は、単独でかまたは前立腺尿道に配置されたステントと共に達成され得る。尿道器具使用または尿道損傷を避けることにより、括約筋機構は無傷なままにされ、失禁を避け、そして狭窄は恐らくより少ない。本発明の他の局面では、身体通路の閉塞に影響するか、または引き起こす炎症性疾患を予防または処置するための方法が提供される。炎症性疾患として、種々の身体管の閉塞をもたらす、急性および慢性両方の炎症が挙げられる。代表的な例として、脈管炎（例えば、巨大(Giant)細胞動脈炎（一過性動脈炎、高安動脈炎）、結節性多発動脈炎、アレルギー性脈管炎および肉芽腫症(チャーグ−ストラウス病)、多発血管炎重複症候群、過敏症脈管炎（ヘーノホ−シェーンライン紫斑病）、血清の疾患、薬物誘導脈管炎、感染性脈管炎、新生物脈管炎、結合組織疾患に関連した脈管炎、補体系の先天的不全に関連した脈管炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、川崎病、中枢神経系の脈管炎、バーガー病、および全身性硬化症）；胃腸管疾患（例えば、膵臓炎、クローン病、潰瘍性結腸炎、潰瘍性直腸炎、原発性硬化性胆管炎、特発性を含む任意の原因の良性狭窄（例えば、胆汁管、食道、十二指腸、小腸、結腸の狭窄）；呼吸管疾患（例えば、喘息、過敏性肺炎、石綿症、珪肺症、ならびに塵肺の他の形態、慢性気管支炎、および慢性閉塞性気道疾患）；鼻涙管疾患（例えば、特発性を含む全ての原因の狭窄）；ならびにエウスターキオ管疾患（例えば、特発性を含む全ての原因の狭窄）が挙げられる。炎症性疾患（例えば、上記の疾患）を処置するために、広範な種々の治療剤（キャリアを伴うかまたは伴わないかのいずれか）は、身体通路の外部へ、または身体通路の外膜を介して平滑筋細胞へ送達され得る。これに関して特に好ましい治療剤として、上記の非ステロイド剤（「NSAIDS」）およびステロイド剤、ならびに上記の抗血管新生因子が挙げられる。利用もされ得る他の薬剤はとして、例えば、微小管機能を破壊する化合物（例えば、パクリタキセル）およびより軽い「ｄ」族遷移元素を含む、広範な種々の抗血管新生因子が挙げられる。本発明のさらに他の局面では、身体通路の閉塞に関連するか、または原因となる感染性疾患を処置または予防するための方法が提供される。簡単には、感染性疾患として、身体通路の閉塞（例えば、雄性生殖管の閉塞（例えば、尿道炎、精巣上体炎、前立腺炎に起因する狭窄）；雌性生殖管の閉塞（例えば、膣炎、子宮頸炎、子宮炎症疾患（例えば、結核、淋菌、クラミジア、エンテロコッカス、および梅毒）；尿管閉塞（例えば、膀胱炎、尿道炎）；呼吸管閉塞（例えば、慢性気管支炎、結核、他のマイコバクテリア感染(MAIなど)、嫌気性生物感染、真菌感染、寄生動物感染）、ならびに心臓血管閉塞（例えば、糸状菌動脈瘤および感染性心内膜炎を含む））をもたらし得る、いくつかの急性および慢性感染性プロセスが挙げられる。感染性疾患（例えば、上記の疾患）を処置するために、広範な種々の治療剤（キャリアを伴うかまたは伴わないかのいずれか）は、身体通路の外部へまたは身体通路の外膜を介して平滑筋細胞へ送達され得る。これに関して特に好ましい治療剤として、上記の広範な種々の抗生物質が挙げられる。処方および投与上記のように、本発明の治療組成物は、種々の形態（例えば、ミクロスフェア、ペースト、フィルム、またはスプレー）で処方され得る。さらに、本発明の組成物は、１より多い治療剤を含み、種々のさらなる化合物を含み、特定の物理的特性（例えば、弾力性、特定の融点、または特定された放出速度）を有するように処方され得る。本発明の特定の実施態様では、組成物は、所望の効果を達成するために組み合わされ得る（例えば、ミクロスフェアのいくつかの調製物は、１つ以上の抗血管新生因子の急速かつ緩慢の両方または延長した放出を達成するために組み合わされ得る）。本発明の治療剤および組成物は、単独で、あるいは薬学的または生理学的に受容可能なキャリア、賦形剤、もしくは希釈剤と組み合わせてのいずれかで投与され得る。一般的に、このようなキャリアは、使用される投薬量および濃度でレシピエントに対して非毒性であるべきである。通常、このような組成物の調製は、治療剤と緩衝液、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸）、低分子量（約10残基未満）ポリペプチド、タンパク質、アミノ酸、炭水化物（グルコース、スクロース、またはデキストリンを含む）、キレート剤（例えば、EDTA）、グルタチオン、ならびに他の安定化剤および賦形剤とを組み合すことを含む。中性緩衝化生理食塩水または非特異性血清アルブミンと混合した生理食塩水は、例示的で適切な希釈剤である。上記のように、本明細書中に提供される治療剤、治療組成物、または薬学的組成物は、種々の異なる経路（例えば、直接視下で（例えば、手術時または内視鏡手順を介して）身体通路に直接、または身体通路の外（外膜）表面への経皮的薬物送達（例えば、脈管周囲送達）を介することを含む）により投与され得る。投与の他の代表的な経路として、十分な手術手順および入院を必要としないが、医療従事者の存在を必要とし得る胃鏡検査、ECRP、および結腸鏡検査が挙げられる。簡単には、脈管周囲薬物送達は、疾患部位への超音波、CT、蛍光透視鏡、MRI 、または内視鏡ガイダンスを介して指向される針またはカテーテルを用いた、局在化（しばしば、徐放）治療処方物の経皮的投与を含む。あるいは、この手順は、直接観察下でまたはさらなる画像ガイダンスを用いて手術中に行われ得る。このような手順はまた、脈管内手順（例えば、血管形成、アテレクトミー、またはステンティング(stenting)）と共に、あるいは外科的動脈手順（例えば、動脈内膜切除、管もしくは移植片修復、または移植片挿入）と共同して行われ得る。例えば、１つの実施態様では、ポリマー性パクリタキセル処方物は、脈管壁に注射され得るか、または外膜表面に適用され得る。これは、生物学的活性が最も必要とされる領域において、薬物濃度が最も高いままであることを可能にする。これは、脈管内薬物送達デバイス（例えば、薬物コートステント）の表面上の連続血流により亢進され得る、薬物の局所的「流出」を低減する能力を有する。脈管の外面への効果的な治療剤の投与は管の閉塞を低減し、そして脈管内操作に関連した合併症（例えば、再狭窄、塞栓、血栓、プラーク破裂、および全身性薬物毒性）の危険性を低減し得る。例えば、表在性大腿動脈の狭窄を有する患者において、バルーン血管形成は、通常の様式で行われる（すなわち、バルーン血管形成カテーテルをガイドワイヤ上で動脈に通し、そして障害を横切りバルーンを膨張させる）。血管形成前、血管形成時、または血管形成後に、針は、超音波、蛍光透視鏡、またはCTガイダンス下で皮膚を通して挿入され、そして治療剤（例えば、遅い放出ポリマーに染み込まされたパクリタキセル）は、動脈の狭窄領域周囲に直接円周様式で、針またはカテーテルを通して浸透される。これは、任意の動脈、静脈、または移植片の周囲で行われ得るが、この介入の理想的な候補として、頚動脈、冠状動脈、腸骨動脈、一般的な大腿骨動脈、表在性大腿骨動脈および膝窩動脈、ならびに移植片吻合部位の疾患が挙げられる。理論的な静脈部位として、留置カテーテルが挿入される、静脈周囲の浸潤が挙げられる。本明細書中に提供される治療剤、治療組成物、および薬学的組成物は、このような材料の使用に関する使用説明書を提供するパッケージ材料と共に、容器内に入れられ得る。一般的に、このような使用説明書は、試薬濃度、ならびに特定の実施態様では、抗血管新生因子、抗血管新生組成物、または薬学的組成物を再構成するために必要であり得る、賦形剤成分または希釈剤（例えば、水、生理食塩水、またはPBS）の相対量を記載する明白な表現を含む。以下の実施例は、例示のために提供されるが、限定のために提供されない。実施例実施例１「ペースト」の製造上記のように、本発明は、種々の臨床的状況で利用され得る種々のポリマー含有薬物組成物を提供する。例えば、組成物は、（１）所望の部位に液体として適用され、そして特定の温度（例えば、体温）で所望の形状の固体に硬化する「熱ペースト」；（２）直接または特殊装置（例えば、内視鏡）のいずれかにより所望部位に送達され得、その後、適用される組織に接着する固体に硬化する、スプレー（すなわち「ナノスプレー」）；（３）直接または特殊装置のいずれかにより所望部位に適用され、そして好ましくは適用される部位に接着する、接着性の柔軟な弾力のある薬物充填ポリマーフィルム；および（４）直接または特殊装置のいずれかにより所望部位に適用され、そして適用部位でミクロスフェア層を離す、適切なキャリア媒体中のミクロスフェア懸濁液からなる液体として生成され得る。上記の実施態様のそれぞれの代表的な例は、以下により詳細に示される。Ａ．熱ペーストを生成するための手順以下の実施例で利用される試薬および器具は、滅菌ガラスシリンジ（１ml）、 Corningホットプレート/攪拌器、20mlガラスシンチレーションバイアル、型（例えば、50μｌ DSC皿または50ml遠心分離チューブキャップ内部）、メスおよびピンセット、ポリカプロラクトン（「PCL」-モル分子量10,000〜20,000；Polyscie nces，Warrington，Pennsylvania USA）ならびにパクリタキセル（Sigmaグレード95％純度最小）を含む。 20mlガラスシンチレーションバイアル内で直接5.00gのポリカプロラクトンを秤量する。バイアルを、50mlの水を含む600mlのビーカーに入れる。穏やかにビーカーを65℃まで加熱し、そしてそれをその温度で20分間保持する。これにより、ポリマーが溶解する。既知量のパクリタキセルまたは他の血管新生インヒビターを溶解したポリマー中に65℃で完全に混合する。溶解ポリマーを予め暖めた（ 60℃以上）型に注入する。注入プロセスを補助するためにスパーテルを使用する。型を冷却させ、そしてポリマーを凝固する。ポリマーを小片（サイズが約２mm ×２mm）を切断するか、または破壊する。これらの断片は、１mlガラスシリンジに合わなければならない。１mlガラスシリンジからプランジャーをはずし（先端からキャップをはずさない）、そしてそれを天秤に置く。天秤をゼロの目盛りにあわせる。シリンジの開いた端で直接0.5gの断片を秤量する。ガラスシリンジを垂直にして（キャップをした先端を下にして）蒸留水を含む500mlのガラスビーカーに65 ℃で（Corningホットプレート）置き、その結果、水は注射筒に入らない。ポリマーは、この装置で10分以内に完全に溶解する。ポリマー断片を完全に溶解すると、水浴から注射筒を取り出し、それを水平に保持し、そしてキャップをはずす。プランジャーを注射筒に挿入し、そして溶解ポリマーを注射筒の先端で粘着性の塊に圧縮する。シリンジにキャップをし、そしてそれを室温まで冷却する。適用のために、シリンジを60℃まで再加熱し、そして体温まで冷却した場合に凝固する液体として投与し得る。Ｂ．ナノスプレーを生成するための手順ナノスプレーは、生理食塩水中の小さなミクロスフエアの懸濁液である。ミクロスフェアが非常に小さな場合（すなわち、直径が１μｍ以下）、それらはコロイドを形成し、その結果、懸濁液は重力下で沈降しない。以下により詳細に記載されるように、0.1ｐm〜１μｍ微粒子の懸濁液は、指で押し出す噴霧器による組織上への沈着に適して作製され得る。ナノスプレーを生成するために利用され得る器具および材料は、200ml水ジャケット付きビーカー(KimaxまたはPyrex)、Haa ke循環水浴、２インチ直径を有するオーバーヘッド攪拌器およびコントローラー（４刃、プロペラ型ステンレス鋼攪拌器；Fisherブランド）、500mlガラスビーカー、ホットプレート/攪拌器（Corningブランド）、４×50mlポリプロピレン遠心管（Nalgene）、プラスチック挿入キャップを有するガラスシンチレーションバイアル、卓上遠心分離器（Beckman）、高速遠心分離器-床型（JS 21 Beckman ）、Mettler分析用天秤（AJ 100、0.1mg）、Mettlerデジタル上皿(top loading) 天秤（AE 163、0.01mg）、自動ピペッター(Gilson)、滅菌ピペットチップ、ポンプ作動噴霧器(Pfeiffer pharmaceuticals)20ml、層流フード、ポリカプロラクトン（「PCL」-モル分子量10,000〜20,000；Polysciences，Warrington，Pennsylv ania USA）、「洗浄」（前を参照のこと）エチレンビニルアセテート（「EVA」）、ポリ(DL)乳酸（「PLA」モル分子量15,000〜25,000；Polysciences）、ポリビニルアルコール（「PVA」-モル分子量124,000〜186,000;99％水和；Aldrich C hemical Co.,Milwaukee，WI USA）、ジクロロメタン（「DCM」または「塩化メチレン」;HPLCグレードFisher scientific）、蒸留水、滅菌生理食塩水(Bect on and Dickensonまたは等価物)を含む。１．５％(w/v)ポリマー溶液の調製調製されるポリマー溶液に依存して、20mlガラスシンチレーションバイアルで直接、1.00gのPCLまたはPLAあるいは各0.50gのPLAおよび洗浄EVAを秤量する。測定シリンダーを用いて20mlのDCMを添加し、そしてバイアルをきつくキャップする。室温（25℃）で１時間、または全てのポリマーが溶解するまでバイアルを放置する（時々、手による振盪を使用し得る）。ポリマーの溶解を、視覚によるチェックにより決定し得る；溶液は透明であるべきである。バイアルを生成した溶液名および日付で標識する。溶液を室温で保存し、そして２週間以内に使用する。２．PVAの3.5％(w/v)ストック溶液の調製溶液を、以下に与えられる手順に従うか、またはミクロスフェアの生成のために調製された５％(w/v)PVAストック溶液（実施例２を参照のこと）を希釈することにより調製され得る。簡単には、17.5gのPVAを600mlガラスビーカー内で直接秤量し、そして500mlの蒸留水を添加する。３インチテフロンコートスターラーバーをビーカーに入れる。蒸発の消失を減らすためにビーカーにカバーガラスをかぶせる。ビーカーを300mlの水を含む2000mlガラスビーカーに入れる。これは、水浴として働く。PVAを、300rpm、85℃（Corningホットプレート/攪拌器）で２時間または完全に溶解するまで攪拌する。PVA溶解を視覚によるチェックにより決定し得る；溶液は透明であるべきである。ピペットを使用して溶液をガラスねじぶた保存容器に移し、そして４℃で最大２ヶ月保存する。この溶液を、使用または希釈前に室温で暖めるべきである。３．ナノスプレーを生成するための手順ヒユームフード内に攪拌組み立て部品を置く。100mlの3.5％PVA溶液を200ml水ジャケット付きビーカーに入れる。Haake水浴をこのビーカーに接続し、そして内容物を27℃（+/-1℃）で10分間平衡化させる。オーバーヘッド攪拌器の開始速度を3000rpm（+/-200rpm）に設定する。オーバーヘッド攪拌器の刃をPVA溶液の中間点に置き、そして攪拌器を開始する。10mlのポリマー溶液（生成されるナノスプレーの型に基づいて使用されるポリマー溶液）を、５ml自動ピペッターを用いて２分間の期間にわたって攪拌PVAに滴下する。３分後、攪拌速度を2500rpm （+/-200rpm）に調節し、そして2.5時間組み立て部品を放置する。2.5時間後、攪拌刃をナノスプレー調製物から取り出し、そして10mlの蒸留水でリンスする。リンス溶液をナノスプレー調製物に加える。ミクロスフェア調製物を500mlビーカーに注ぐ。ジャケット付き水浴を70mlの蒸留水で洗浄する。70mlのリンス溶液をミクロスフェア調製物に加える。180ml のミクロスフェア調製物をガラス棒で攪拌し、そしてその等量を４つのポリプロピレン50ml遠心管に注ぐ。管にキャップをする。キャップした管を10000g（+/-1 000g）で10分間遠心分離する。５ml自動ピペッターまたは真空吸引を用いて、45 mlのPVA溶液を各ミクロスフェアペレットから引き出し、そしてそれを捨てる。５mlの蒸留水を各遠心管に添加し、そしてボルテックスを使用して各管にミクロスフェアを再懸濁する。20mlの蒸留水を用いて、１つの遠心管に４つのミクロスフェア懸濁液をプールする。ミクロスフェアを洗浄して、10000g（+/-1000g）で 10分間、ナノスプレー調製物を遠心分離する。上清をミクロスフェアペレットから引き出す。40mlの蒸留水を添加し、そしてボルテックスを使用してミクロスフェアを再懸濁する。このプロセスを、計３回の洗浄の間に２回を越えて繰り返す。４回目の洗浄を行うが、ミクロスフェアを再懸濁する場合には、10mlのみ（40 mlではない）の蒸留水を使用する。４回目の洗浄後、ミクロスフェア調製物を予め秤量したガラスシンチレーションバイアルに移す。バイアルをキャップし、そしてそれを１時間室温（25℃）で放置して、２μｍおよび３μｍの直径のミクロスフェアを重力下で沈降させる。１時間後、５ml自動ピペッターを用いて、上部９mlの懸濁液を引く。滅菌しキャップした50ml遠心管に９mlを入れる。10000g（+/-1000g)で10分間懸濁液を遠心分離する。上清を捨て、そしてペレットを20mlの滅菌生理食塩水に再懸濁する。10000g（+/-1000g ）で10分間懸濁液を遠心分離する。上清を捨て、そしてペレットを滅菌生理食塩水に再懸濁する。使用する生理食塩水量は、最終の必要とされる懸濁液濃度（通常10％w/v）に依存する。滅菌生理食塩水において噴霧器装置を完全にリンスし、そしてナノスプレー懸濁液を噴霧器に添加する。Ｃ．パクリタキセル充填ナノスプレーの製造パクリタキセルを含むナノスプレーを製造するために、パクリタキセル（Sigm aグレード95％純度）を使用する。ポリマー性薬物溶液を調製するために、20ml ガラスシンチレーションバイアル内で直接に適切な量のパクリタキセルを秤量する。適切な量を、ナノスプレー内に存在するべきパクリタキセルの割合に基づいて決定する。例えば、５％パクリタキセルを含むナノスプレーを必要とすれば、次いで、添加されるポリマー量がDCM溶液中の10mlの５％ポリマーであるので、秤量されるパクリタキセル量は25mgである（以下の工程を参照のこと）。 10mlの約５％ポリマー溶液を、パクリタキセルを含むバイアルに添加する。バイアルをキャップし、そしてボルテックスかまたは手で旋回して、パクリタキセルを溶解する（パクリタキセルが溶解されたのを確実にするために、視覚によりチェックする）。生成された日付でバイアルを標識する。これは、生成された日に使用されなければならない。ポリマー／薬物（例えば、パクリタキセル）ストック溶液がポリマー溶液に置換されることを除いて、上記の手順に従う。Ｄ．フィルムを生成するための手順用語フィルムは、多くの幾何学的形状のうちの１つに形成されたポリマーをいう。フィルムは、ポリマーの薄い弾力性のあるシートまたはポリマーの２mm厚ディスクであり得る。このフィルムは、暴露された組織上に配置されるように設計され、その結果任意のカプセル化薬物は、組織部位で長期間にわたってポリマーから放出される。フィルムは、いくつかのプロセス（例えば、鋳造またはスプレーを含む）により作製され得る。鋳造技術において、ポリマーを融解し、そして型に注ぐか、またはジクロロメタンに溶解し、そして型に注ぐかのいずれかである。次いで、ポリマーは、それぞれ、それが冷えると凝固するか、または溶媒が蒸発すると凝固するかのいずれかである。スプレー技術において、ポリマーを溶媒に溶解し、そしてガラスにスプレーし、溶媒が蒸発すると、ポリマーはガラス上で凝固する。反復スプレーは、ポリマーのガラスからはがれ得るフィルムへの蓄積を可能にする。これらの実験で利用された試薬および器具は、小さなビーカー、Corningホットプレート攪拌器、鋳造型（例えば、50ml遠心管キャップ）および型保持装置、キャップ付きの20mlガラスシンチレーションバイアル（プラスチック挿入型）、 TLC噴霧器、窒素ガスタンク、ポリカプロラクトン（「PCL」-モル分子量10,000 〜20,000；Polysciences）；パクリタキセル（Sigma95％純度）、エタノール、「洗浄」（上を参照のこと）エチレンビニルアセテート（「EVA」）、ポリ(DL) 乳酸（「PLA」モル分子量15,000〜25,000；Polysciences）、ジクロロメタン（H PLCグレードFisher Scientific）を含む。１．フィルムを生成するための手順−融解鋳造小さなガラスビーカー内で直接、既知量のPCLを秤量する。ビーカーを水を含むより大きなビーカー（水浴として働く）に入れ、そしてそれをホットプレート上に70℃で15分間か、またはポリマーが完全に融解するまで置く。既知量の薬物を融解ポリマーに添加し、そして混合物を完全に攪拌する。融解PCL中での薬物の拡散を助けるために、薬物を、少容量（融解PCL容量の＜10％）の100％エタノールに再懸濁／溶解し得る。次いで、このエタノール懸濁液を、融解ポリマーに混合する。融解ポリマーを型に注ぎ、そしてそれを冷却する。冷却後、フィルムを容器に保存する。２．フィルムを生成するための手順−溶媒鋳造(Solvent Casting) 20mlガラスシンチレーションバイアル内で直接既知量のPCLを秤量し、そして十分なDCMを添加して10％w/v溶液を達成する。バイアルにキャップをし、そして溶液を混合する。十分なパクリタキセルを溶液に添加して、所望の最終パクリタキセル濃度を達成する。手による振盪またはボルテックスを使用して、パクリタキセルを溶液に溶解する。溶液を１時間放置し（空気の泡の存在を減らすために）、次いで、それを型にゆっくりと注ぐ。使用する型は、必要とされる形状に元づく。ヒュームフード内に一晩型を置く。これによりDCMは蒸発する。型にフィルムを放置してそれを保存するか、またはそれをはがし、そして密封容器においてそれを保存する。３．フィルムを生成するための手順−スプレー 20mlガラスシンチレーションバイアル内で直接十分なポリマーを秤量し、そして十分なDCMを添加して、２％w/ｖ溶液を達成する。バイアルにキャップをし、そして溶液を混合して、ポリマーを溶解する（手による振盪）。型をヒュームフード内で適切な型保持装置において垂直方向に組み立てる。この型保持装置を、適切な支持体（例えば、逆にした2000mlガラスビーカー）上でヒュームフード床の６〜12インチ上に置いて、水平スプレーを可能にする。自動ピペットを用いて、適切な容量（最小５ml）の２％ポリマー溶液を別々の20mlガラスシンチレーションバイアルに移す。十分なパクリタキセルを溶液に添加し、そしてそれをキャップしたバイアルを手で振盪することにより溶解する。スプレー用に調製するために、このバイアルのキャップをはずし、そしてTLC噴霧器の円筒部（のみ）をポリマー溶液に浸す。注意：噴霧器のリザーバーをこの手順で使用しない−20ml ガラスバイアルがリザーバーとして働く。窒素タンクを噴霧器の吸入口に接続する。噴霧およびスプレーが開始するまで圧力を徐々に増加させる。圧力に注意し、この手段の間中この圧力を使用する。型にスプレーするために、スプレー間の15秒の乾燥時間と共に５秒の振動を使用する。乾燥時間の間、スプレーの消耗を避けるためにガスラインの端を指で圧着する。スプレーを、適切な厚さのポリマーが型に沈着するまで続ける。厚さは要求に基づく。型に付着したスプレーフィルムを離し、そして密封容器に保存する。Ｅ．ナノペーストを生成するための手順ナノペーストは、親水性ゲルに懸濁したミクロスフェアの懸濁液である。本発明の１つの局面では、ゲルまたはペーストは、薬物充填ミクロスフェアを標的組織に密接して配置する方法として組織上に塗り付けられ得る。水ベースの場合、ペーストは体液ですぐに希釈され、これはペーストの厚さの減少およびミクロスフェアが近くの組織に沈着される傾向を引き起こす。それにより、ミクロスフェアカプセル化薬物のプールは、標的組織に密接して位置する。これらの実験で利用された試薬および器具は、ガラスビーカー、カルボポール (Carbopol)925(薬学的グレード、Goodyear Chemical Co.)、蒸留水、水溶液中の水酸化ナトリウム（１M）、水溶液中の水酸化ナトリウム（５M）、水に懸濁された0.11m〜0.31mのサイズ範囲のミクロスフェア（20％w/v）を含む（上記を参照のこと）。１．５％w/vカルボポールゲルの調製十分な量のカルボポールを、１M水酸化ナトリウムに添加して５％w/v溶液を達成する。１M水酸化ナトリウムにカルボポールを溶解して、混合物を約１時間放置する。この期間の間、混合物をガラス棒を用いて攪拌する。１時間後、混合物のpHを測定する。低いpHは、カルボポールが十分に溶解していないことを示す。達成したいpHは7.4である。５M水酸化ナトリウムを使用してpHを調節する。これは、５M水酸化ナトリウムを混合物へゆっくりと滴下し、混合物を攪拌し、そして混合物のpHを測定することにより達成される。pHを7.4に調節するのに通常約１時間かかる。一旦pH7.4が達成されると、ゲルを覆い、そして２〜３時間放置する。この時間の後、なお7.4であることを確実にするためにpHをチェックする。変化している場合、5M水酸化ナトリウムを用いて元のpH7.4へ調整する。pHが7 .4で安定であることを確実にするためにゲルを２、３時間放置する。所望のpHが達成され、そして安定するまでこのプロセスを繰り返す。ゲルの名前と日付で容器を標識する。ゲルを使用して、次週のうちにナノペーストを作製する。２．ナノペーストを生成するための手順十分な0.1μｍ〜３μｍのミクロスフェアを水に添加して、ミクロスフェアの2 0％懸濁液を生成する。８mlの５％w/vカルボポールゲルをガラスビーカーに入れる。２mlの20％ミクロスフェア懸濁液をビーカーに添加する。ガラス棒または混合スパーテルを用いて混合物を攪拌して、ゲル中にミクロスフェアを完全に分散させる。これは通常30分かかる。一旦ミクロスフェアがゲル中に分散すると、混合物を保存瓶に入れる。４℃で瓶に保存する。これは一ケ月の期間内に使用しなければならない。実施例２ミクロスフェアの製造下記のミクロスフェアの製造に好ましい器具は、200ml水ジャケット付きビーカー（KimaxまたはPyrex）、Haake循環水浴、２インチ直径を有するオーバーヘッド攪拌器およびコントローラー（４刃、プロペラ型ステンレス鋼攪拌器；Fish erブランド）、500mlガラスビーカー、ホットプレート/攪拌器（Corningブランド）、４×50mlポリプロピレン遠心管（Nalgene）、プラスチック挿入キャップを有するガラスシンチレーションバイアル、卓上遠心分離器（GPR Beckman）、高速遠心分離器-床型（JS 21 Beckman）、Mettler分析用天秤（AJ 100、0.1mg）、 Mettlerデジタル上皿天秤（AE 163、0.01mg）、自動ピペッター(Gilson)を含む。試薬は、ポリカプロラクトン（「PCL」-モル分子量10,000〜20,000；Polyscie nces，Warrington，Pennsylvania USA）、「洗浄」（「洗浄」の後の方法を参照のこと）エチレンビニルアセテート（「EVA」）、ポリ(DL)乳酸（「PLA」モル分子量15,000〜25,000；Polysciences）、ポリビニルアルコール（「PVA」-モル分子量124,000〜186,000;99％水和；Aldrich Chemical Co.,Milwaukee,WI USA）、ジクロロメタン（「DCM」または「塩化メチレン」；HPLCグレードFisher scient ific）、および蒸留水を含む。Ａ．５％(w/v)ポリマー溶液の調製調製されるポリマー溶液に依存して、1.00gのPCLもしくはPLA、または0.50gの各PLAおよび洗浄EVAを、20mlガラスシンチレーションバイアル内で直接秤量する。次いで、20mlのDCMを添加し、そしてバイアルをきつくキャップする。バイアルを室温（25℃）で１時間（時々振盪を使用し得る）、または全てのポリマーが溶解するまで（溶液は透明になるはずである）保存する。溶液は、少なくとも２週間室温で保存し得る。Ｂ．５％(w/v)PVAストック溶液の調製 25グラムのPVAを、600mlガラスビーカー内で直接秤量する。500ミリリットルの蒸留水を、３インチテフロンコートスターラーバーと共に添加する。ビーカーをガラスで覆って蒸発喪失を減少させ、そして300mlの水を含む2000mlガラスビーカー（水浴として働く）に入れる。PVAを85℃（Corningホットプレート／攪拌器）で２時間または完全に溶解するまで300rpmで攪拌する。PVAの溶解を視覚によるチェックで測定し得る；溶液は透明になるはずである。次いで、溶液をガラスねじぶた保存容器に移し、そして４℃で最大２ヶ月間保存する。しかし、溶液は、使用または希釈前に室温で暖めるべきである。Ｃ．ミクロスフェアを生成するための手順作製されるミクロスフェアのサイズに基づいて（表Ｉを参照のこと）、100ml のPVA溶液（表Ｉに与えられる濃度）を、200ml水ジャケット付きビーカーに入れる。Haake循環水浴をこのビーカーに接続し、そして内容物を27℃（+/-1℃）で1 0分間平衡化させる。作製されるミクロスフェアのサイズに基づいて（表Ｉを参照のこと）オーバーヘッド攪拌器の開始速度を設定し、そしてその刃をPVA溶液の中間点に置く。次いで、攪拌器を開始させ、次いで、10mlのポリマー溶液（生成されるミクロスフェアの型に基づいて使用するポリマー溶液）を、５ml自動ピペッターを用いて２分間にわたって攪拌PVAに滴下する。３分後、攪拌速度を調節し（表Ｉを参照のこと）、そして溶液をさらに2.5時間攪拌する。次いで、攪拌刃をミクロスフェア調製物から取り出し、そしてリンス溶液をミクロスフェア調製物中に排出させるように10mlの蒸留水でリンスする。次いで、ミクロスフェア調製物を500mlビーカーに注ぎ、そしてジャケット付き水浴を70mlの蒸留水で洗浄し、これもまたミクロスフェア調製物中に排出させる。次いで、180mlのミクロスフェア調製物をガラス棒で攪拌し、そして等量を４つのポリプロピレン50 ml遠心管に注ぐ。次いで、管をキャップし、そして10分間遠心分離する（力は表Ｉに与えられる）。次いで、５ml自動ピペッターまたは真空吸引を利用して、各ミクロスフェアペレットから45mlのPVA溶液を引く。表Ｉ各直径範囲のミクロスフェアについてのPVA濃度、攪拌速度、および遠心力必要条件次いで、５ミリリットルの蒸留水を各遠心管に添加し、次いで、これをボルテックスしてミクロスフェアを懸濁する。ついで、４つのミクロスフェア懸濁液を、 20mlの蒸留水と共に１つの遠心管に注ぎ、そしてさらに10分間遠心分離する（力は表Ｉに与えられる）。このプロセスを、計３回の洗浄の間にさらに２回繰り返す。次いで、ミクロスフェアを最後の回に遠心分離し、そして10mlの蒸留水に再懸濁する。最後の洗浄の後、ミクロスフェア調製物を、予め秤量したガラスシンチレーションバイアルに移す。このバイアルをキャップし、そしてミクロスフェアを重力下で沈降させるために、室温（25℃）で一晩放置する。0.1μｍ〜３μ ｍのサイズの範囲内にあるミクロスフェアは重力下で沈降せず、そのためそれらは10ml懸濁液に残る。Ｄ．10 μｍ〜30ｐｍまたは30μｍ〜100μｍの直径のミクロスフェアの乾燥ミクロスフェアを室温で一晩放置した後、５ml自動ピペッターまたは真空吸引を使用して沈降ミクロスフェアから上清を引く。ミクロスフェアを、１週間またはそれらが十分に乾燥するまで、ドローアー(drawer)内のキャップをしていないバイアル内で乾燥させる（バイアルは一定の重量）。より速い乾燥は、キャップをしていないバイアルを、ヒュームフード内で窒素ガスの遅い流れ（約10ml/分の流れ）に放置することにより達成され得る。十分に乾燥すると（バイアルは一定の重量）、バイアルの重量を計り、そしてキャップする。標識しキャップしたバイアルを、ドローアー内で室温で保存する。通常、ミクロスフェアを３ヶ月を超えて保存しない。Ｅ．0.1 μｍ〜３μｍの直径のミクロスフェアの乾燥このサイズ範囲のミクロスフェアは沈降せず、そのためそれらを４℃で最大４週間懸濁液中に放置する。10mlの懸濁液中のミクロスフェア濃度を測定するために、懸濁液の200μｌサンプルを、1.5mlの予め秤量した微量遠心管にピペッティングする。次いで、管を10,000gで遠心分離し（Eppendorf卓上微量遠心分離器）、上清を除去し、そして管を50℃で一晩乾燥させる。次いで、管を再秤量して、管内の乾燥ミクロスフェアの重量を測定する。Ｆ．パクリタキセル充填ミクロスフェアの製造パクリタキセルを含むミクロスフェアを調製するために、適切な量の秤量パクリタキセル（カプセル化されるべきパクリタキセルの割合に基づく）を、20mlガラスシンチレーションバイアル内に直接入れる。次いで、10ミリリットルの適切なポリマー溶液を、パクリタキセルを含むバイアルに添加し、次いでこれをパクリタキセルが溶解するまでボルテックスする。次いで、パクリタキセルを含むミクロスフェアを、工程（Ｃ）から（Ｅ）において本質的に上記のように生成し得る。実施例３界面活性剤コートミクロスフェアＡ．材料および方法ミクロスフェアを、実施例２に本質的に記載のように、ポリ(DL)乳酸(PLA)、ポリメチルメタクリレート（PMMA）、ポリカプロラクトン（PCL）、および50:50 エチレンビニルアセテート(EVA):PLAから製造した。10〜100μｍのサイズ範囲であり、平均直径は45μｍであった。ヒト血液を健康なボランティアから得た。好中球（白血球）を、デキストラン沈降およびフィコールハイパーク(Ficoll Hypaque)遠心分離技術を用いて血液から分離した。好中球を、ハンクス(Hanks)緩衝化塩溶液（「HBSS」）１mlあたり５百万個の細胞で懸濁した。好中球活性化レベルを、化学発光により測定されるように活性酸素種の生成により測定した。特に、化学発光を、１μＭルミノールエンハンサーを用いたLKB ルミノメーターを使用することにより測定した。ミクロスフェアの血漿プレコーティング（またはオプソニン作用）を、10mgのミクロスフェアを0.5mlの血漿に懸濁し、そして37℃で30分間転がすことにより行った。次いで、ミクロスフェアを１mlのHBSS中で洗浄し、そして遠心分離したミクロスフェアペレットを時間ｔ＝０、37℃で好中球懸濁液に添加した。ミクロスフェア表面を、10mgのミクロスフェアを0.5mlのHBSS中の２％w/w F127溶液に37℃で3 0分間懸濁することにより、プルロニック(Pluronic)F127（BASF）と呼ばれる界面活性剤を用いて修飾した。次いで、ミクロスフェアを、さらにプレコーティングするために好中球または血漿に添加する前に１mlのHBSSで２回洗浄した。Ｂ．結果図１は、未処理ミクロスフエアが50mV未満の化学発光値を与えることを示す。これらの値は、低レベルの好中球活性化を示す。比較のために、炎症性微結晶は 1000mV近い値を与え、可溶性化学アクチベーターは5000mV近い値を与える。しかし、ミクロスフェアを血漿でプレコーティングする場合、全ての化学発光値は、 100〜300mVの範囲で増幅する（図１を参照のこと）。これらのレベルの好中球応答または活性化は、おだやかな炎症であると考えられ得る。PMMAは最も大きな応答を与え得、そして最も炎症性であるとみなされ得た。PLAおよびPCLの両方は、血漿前処理（またはオプソニン作用）後に好中球活性化において３〜４倍より強力になるが、これに関して２つのポリマー間ではほとんど差異はない。EVA:PLA は、このミクロスフェアが乾燥し難く、そして水性緩衝液に懸濁し難いので、血管新生処方物に恐らく使用されない。この血漿効果はオプソニン作用と呼ばれ、そして抗体または補体分子の表面への吸着から生じる。これらの吸着種は、白血球上のレセプターと相互作用し、そして増幅された細胞活性化を引き起こす。図２〜５は、それぞれ、PCL、PMMA、PLA、およびEVA:PLAの血漿プレコーティングの効果を記載し、ならびにミクロスフェアの血漿プレコーティング前のプルロニックF127プレコーティング効果を示す。これらの図は、全て同じ効果：（１）血漿プレコーティングは応答を増幅する；（２）プルロニックF127プレコーティングはそれ自体で効果を有さない；（３）血漿プレコーティングにより引き起こされる増幅された好中球応答は、ミクロスフェア表面を２％プルロニックF127 で前処理することにより強く阻害され得る、を示す。血漿由来の吸着タンパク質種の性質はまた、電気泳動により研究された。この方法を用いて、ポリマー表面のプルロニックF127での前処理は、抗体のポリマー表面への吸着を阻害することが示された。同様に、図６〜９は、PCL、PMMA、PLA、またはEVA:PLAミクロスフェア（それぞれ）を、IgG（２mg/ml）または２％プルロニックF127、次いでIgG（２mg/ml）のいずれかでプレコーティングする効果を示す。これらの図から示され得るように、ミクロスフェアをIgGでプレコーティングすることにより引き起こされる増幅された応答は、プルロニックF127での処理により阻害され得る。この結果は、４つの型全てのミクロスフェアのポリマー表面をプルロニックF1 27で前処理することにより、好中球のミクロスフェアへの「炎症性」応答が阻害され得ることを示す。実施例４パクリタキセルのカプセル化 500マイクログラムのパクリタキセルまたはバカチン（パクリタキセルのアナログ、Inflazyme Pharmaceuticals Inc.,Vancouver，British Columbia，Canada から入手可能）のいずれかを、１mlのDCM中の50:50ELVAX:ポリ-1-乳酸混合物に溶解する。次いで、ミクロスフェアを、200rpm、42℃、３時間、３連で溶解機械（６軸（six-spindle）溶解テスター，VanderKanp，Van Kell Industries Inc. ，U.S.A）において調製する。このように調製されたミクロスフェアを水で２回洗浄し、そして顕微鏡でサイズを分類する。パクリタキセルカプセル化の測定を、UV-可視アッセイ（237nmでUV-可視ラムダ最大、励起237nm、発光325nmでの蛍光アッセイ；蛍光結果は角括弧[]に示される）において行う。上記の手順を使用して、58μｇ（+/-12μg）[75μｇ（＋/-2 5μg）]のパクリタキセルを、計500μｇの開始材料からカプセル化し得る。これは、最初の重量の12％（+/-2.4％）[15％（+/-５％）]、またはポリマーの1.2重量％（+/-0.25重量％）[1.5重量％（+/-0.5重量％）]を示す。37℃でオーブン内で18時間転がした後、総パクリタキセルの10.3％（+/-10％）[6％（+/-5.6％）] が、ミクロスフェアから放出された。バカチンについては、、100+/-15μg[83+/-23μｇ）]のバカチンを、計500μ ｇの開始材料からカプセル化し得る。これは、最初のバカチン重量の20％（+/- ３％）[17％（+/-５％）]、およびポリマーの２重量％（+/-0.3重量％）[1.7重量％（+/-0.5重量％）]を示す。37℃でオーブン内で18時間転がした後、バカチンの55％（+/-13％）[60％（+/-23％）]が、ミクロスフェアから放出される。実施例５エチレン-ビニル-アセテートコポリマーおよびポリ(D,L乳酸)の混和物からなるミクロスフェアからのパクリタキセルの制御送達。CAMアッセイにおけるミクロスフェアのインビボ試験本実施例は、生分解性ポリ(d,l-乳酸)(PLA)ポリマーおよび非生分解性エチレン-ビニルアセテート(EVA)コポリマーの混和物からなるパクリタキセル充填ミクロスフェアの調製を記載する。さらに、インビトロ放出速度およびCAM上に配置されたミクロスフェアから放出されるパクリタキセルの抗血管新生活性が証明される。これらの実験において利用された試薬は、パクリタキセル（Sigma Chemical C o.(St.Louis，MO)から購入）;PLA(分子量15,000〜25,000)およびEVA（60％ビニルアセテート）（Polysciences(Warrington，PA)から購入）；ポリビニルアルコール（PVA）（分子量124,000〜186,000、99％水和、Aldrich Chemical Co.(Milw aukee，WI)から購入）、ならびにジクロロメタン（DCM）（HPLCグレード、Fishe r Scientific Coから購入）を含む。蒸留水を終始使用する。Ａ．ミクロスフェアの調製ミクロスフェアを、溶媒蒸発法を使用して実施例２に記載のように本質的に調製する。簡単には、20mL DCM中の５％w/vポリマー溶液を、35:65〜90:10のEVA:P LAの混和物を用いて調製する。20mLガラスバイアル中の水中の2.5％w/v PVA ５m lに、１mLのポリマー溶液小滴を攪拌しながら添加する。６つの同様のバイアルを、６位置(position)オーバーヘッド攪拌溶解試験装置（Vanderkamp）に組み立て、そして200rpmで攪拌する。バイアルの温度を、15分にわたって室温から40℃ に増大させ、40℃で２時間保持する。バイアルを500×gで遠心分離し、そしてミクロスフェアを水で３回洗浄する。いくつかのEVA:PLAのポリマー混和物において、ミクロスフェアサンプルは、分散剤または乳化剤であるPVAの除去により洗浄段階の間に凝集する。この凝集効果は、凝集ミクロスフェアが融合し、そして融合ポリマー塊が洗浄水の表面上に浮いたので、半定量的に分析され得た。この表面ポリマー層を洗浄処理の間に捨て、そして残存ペレット化ミクロスフェアを秤量する。％凝集を以下の式から決定する。パクリタキセル充填ミクロスフェア(0.6％w/wパクリタキセル)を、パクリタキセルをDCM中の５％w/vポリマー溶液に溶解することにより調製する。使用するポリマー混和物は50:50のEVA:PLAである。ミクロスフェアの「大きな」サイズ画分および「小さな」サイズ画分を、パクリタキセル／ポリマー溶液をそれぞれ2.5 ％w/v PVAおよび５％w/v PVAに滴下することにより生成する。分散物を、40℃20 0rpmで２時間攪拌し、遠心分離し、そして上記のように水で３回洗浄する。ミクロスフェアを風乾し、そしてサンプルを、ステージマイクロメーターを有する光学顕微鏡を用いてサイズ分類する。１サンプルあたり300を超えるミクロスフェアを計数する。コントロールミクロスフェア（パクリタキセルなし）を調製し、そして上記のようにサイズ分類する。Ｂ．カプセル化効率既知量のパクリタキセル充填ミクロスフェアを１mL DCMに溶解し、50℃の水中の40％アセトニトリル20mLを添加し、そしてDCMが蒸発するまでボルテックスする。40％アセトニトリル中のパクリタキセル濃度を、１mL/分の流速（Beckman無勾配(isocratic)ポンプ）での水：メタノール：アセトニトリル（37：５：58）の移動相、C8逆相カラム（Backman）、および232nmでのUV検出を用いてHPLCにより測定する。この抽出手順の回収効率を測定するために、100〜1000μｇの既知量のパクリタキセルを１mLのDCMに溶解し、そして上記のように３連で同じ抽出手順に供する。回収率はいつも85％より高く、そしてカプセル化効率の値は適切に補正される。Ｃ．薬物放出研究 15mLガラスねじぶた管に、10mLの10mMリン酸緩衝化生理食塩水（PBS）（pH7.4 ）および35mgパクリタキセル充填ミクロスフェアを入れる。管を37℃でかつ所定の時間間隔で転がし、1500×gで５分間遠心分離し、そして上清を分析のために補完する。ミクロスフェアペレットを、新鮮なPBS(10mL)に37℃で再懸濁し、そして再インキュベートする。パクリタキセル濃度を、１mL DCMへ抽出し、続いて窒素の流れ下で乾燥するまで蒸発させ、１mLの水中の40％アセトニトリルに再構成し、そして上記のようにHPCLを用いて分析することにより測定する。Ｄ．走査型電子顕微鏡（SEM）ミクロスフェアをサンプルホルダーに入れ、金でスパッター(sputter)コートし、そして15kVで操作するPhilips 501B SEMを用いて顕微鏡写真を得る。Ｅ．CAM 研究受精家禽胚を、殻なしの培養前に４日間インキュベートする。卵の内容物を、 90％相対湿度および３％CO₂で２日間インキュベートする。インキュベーションの６日目に、0.6％パクリタキセル充填またはコントロール（パクリタキセルなし）ミクロスフェアの1mgアリコートを、CAM表面上に直接置く。２日間の暴露後、脈管構造を、ビデオカメラに接続した実体顕微鏡を用いて調べ；次いで、ビデオ信号をコンピューター上にディスプレイし、そして映像を印刷する。Ｆ．結果 100％EVAから調製されたミクロスフェアはPVA溶液に大量に懸濁されるが、PVA を除去するための後の水洗浄の際に凝集し、そして癒着するか、または広範に融合する。EVAと漸増比率のPLAとの混和は、図10Aに記載されたように、水で洗浄した場合に凝集および癒着する傾向の減少を示す、ミクロスフェアを生成した。 EVA:PLAの50:50混和物は、良好な物理的安定性を有するミクロスフェアを形成した。すなわち、ミクロスフェアは分離して残存し、そして良好に懸濁し、凝集および癒着はごくわずかであった。「小さな」サイズ画分ミクロスフェアについてのサイズ範囲を、10〜30mmのミクロスフェアサンプルの＞95（重量）％、「大きな」サイズ画分については、30 〜100mmのサンプルの＞95（重量）％であるように決定する。「小さな」および「大きな」サイズ範囲におけるパクリタキセル充填50:50 EVA:PLAミクロスフェアの代表的な走査型電子顕微鏡写真を、それぞれ10Bおよび10Cに示す。ミクロスフェアは、平滑な表面を有し、そしてミクロスフェアの表面上に固体薬物の証拠を有さない球である。50:50 EVA:PLAミクロスフェアをパクリタキセルで充填する効率は、50mgポリマーあたり最初のパクリタキセル濃度の100〜1000mgパクリタキセルの95〜100％である。「小さな」または「大きな」ミクロスフェアのいずれかについてのカプセル化効率間の有意な差異はない（スチューデントのt検定、p＜0.05）。 0.6％w/v充填50:50 EVA:PLAミクロスフェアからのパクリタキセル放出の時間経過を、「小さな」サイズ（白丸）および「大きな」サイズ（黒丸）ミクロスフェアについて図10Dに示す。放出速度研究を、３つの別々の実験において３連の管で行う。放出プロフィールは、両方のサイズ範囲のミクロスフェアから最初の４日間にわたって生じる、パクリタキセルの最初の急速な放出すなわち「バースト」相を有する２相性(biphasic)である。この後、非常に遅い放出相が続く。「小さな」または「大きな」ミクロスフェアからの放出速度間で有意な差異はない。ミクロスフェアの総パクリタキセル含有量の10〜13％は50日以内に放出される。パクリタキセル充填ミクロスフェア（0.6％w/v充填）をCAMアッセイを用いて試験し、そして結果を図10Eに示す。パクリタキセルミクロスフェアは、周囲組織において無脈管分布ゾーンを生じるのに十分な薬物を放出した（図10F）。血管が完全に存在しない領域（ゾーン１）はミクロスフェア（図10Eおよび10Fの「 MS」）にすぐ隣接し；破壊された機能しない毛細血管の領域は（ゾーン２）、ミクロスフェアからさらに遠くなり；毛細血管が正常に戻るのは、ミクロスフェアから約６mmの距離しかないことに留意のこと。コントロールミクロスフェア（パクリタキセルなし）で処置されたCAMにおいて、正常な毛細血管ネットワーク構造がある（図に示さず）。議論管周囲薬物投与は、穏やかな侵襲性の外科的手順である。従って、理想的には、抗増殖薬物（例えば、パクリタキセル）の脈管周囲処方は、数ヶ月オーダーの延長した期間について活性に十分な濃度で腫瘍または疾患部位で薬物を放出する。EVAは、長期間にわたる（＞100日）巨大分子の制御送達のために広範に使用されている、組織適合性非分解性ポリマーである。 EVAを、ポリマーマトリックスに分散されたパクリタキセルを有するミクロスフェアを調製するためのポリマー性生体適合物質として最初に選択する。しかし、100％EVAで調製されたミクロスフェアは、洗浄手順の間にほとんど完全に凝集し、そして癒着した。乳酸およびグリコール酸に基づくポリマーおよびコポリマーは、生理学的に不活性でかつ生体適合性であり、そして毒物学的に受容可能な産物に加水分解により分解する。乳酸およびグリコール酸のコポリマーは、PLAより急速な分解速度を有し、そしてこれらのコポリマーを用いて調製された薬物充填ミクロスフェアは、数ヶ月月にわたる延長した制御放出に不適切である。図10Aは、EVA:PLA混和物におけるPLAの比率の増加が、ミクロスフェア懸濁液の凝集程度を減少したことを示す。EVA:PLAマトリックスにおける50％以下のEVA の混和物は、生理学的に安定な水またはPBS中のミクロスフェア懸濁液を生成した。50:50EVA:PLAの混和物を、全ての後の研究のために選択する。ミクロスフェアの異なるサイズ範囲の画分を、水相中の乳化剤であるPVAの濃度を変えることにより調製し得た。「小さな」ミクロスフェアを５％w/vのより高いPVA濃度で生成するが、「大きな」ミクロスフェアを2.5％w/v PVAで生成する。全ての他の生成変数は、両方のミクロスフェアサイズ画分について同じである。より高い濃度の乳化剤は、より粘性の水性分散媒体を与え、そして水相に乳化されたポリマー／パクリタキセル／DCMのより小さな小滴を生成し、従ってより小さなミクロスフェアを生成した。パクリタキセル充填ミクロスフェアは、固体ミクロスフェア内にカプセル化された有機相に添加された最初のパクリタキセルの95〜100％を含んだ。パクリタキセルの低い水溶性は、ポリマーを含む有機相への分配に有利である。 50日以内に放出された50:50 EVA:PLAミクロスフェアからのパクリタキセルの放出速度は、充填パクリタキセルの15％未満で非常に遅い。薬物放出の最初のバースト相は、（ミクロスフェア表面に密接した）ミクロスフェアの外面領域からの薬物の拡散によるものであり得る。非分解性ポリマー性マトリックス（例えば、EVA）からの薬物放出機構は、ポリマー内の分散薬物相を通る水の拡散、薬物の溶解、および一連の相互連絡した液体で満たされた孔を通る溶質の拡散を含むと考えられる。EVAおよびPLAの混和は、PLAにおける30〜70％EVAの範囲にわたって混合することができないか、または２連続性（bicontinuous）であることが示された。37℃でのPBS緩衝液における分解研究において、インキュベーションまたは遅延期間の後に、PLAは加水分解的に分解し、そして不活性スポンジ様骨格を残してEVA:PLAポリマー混和物マトリックスから侵食した。インキュベーション期間ならびにPLA分解および混和物マトリックスからの侵食の速度は、マトリックス中のPLAの比率およびプロセスの歴史に依存するが、40〜50日後までPLAの喪失は一貫してほとんどまたは全くない。 50:50 EVA:PLAミクロスフェアからのPLAのいくらかの侵食は、インビトロ放出速度研究の50日以内に生じ得るが（図10C）、ポリマー混和物からの薬物放出の主な機構は、ポリマーマトリックス中の孔ネットワークを通る溶質の拡散である。放出速度研究の終わりに、ミクロスフェアは、薬物残存の量から分析される。 50日インキュベーションミクロスフェアサンプルにおけるパクリタキセル残存のパーセントの値は、「大きな」および「小さな」サイズ画分ミクロスフェアについて、それぞれ94％+/-９％および89％+/-12％である。ポリマー(0.6％)1mgあたり６mgで充填されたミクロスフェアは、ニワトリ胚の CAM上に置かれた場合、血管新生の広範な阻害を提供した（図10Eおよび10F）。実施例６ポリ（E-カプロラクトン）ミクロスフェア中の治療剤カプセル化。パクリタキセル充填ミクロスフェアによるCAMアッセイにおける血管新生の阻害本実施例は、ポリ（ε-カプロラクトン）の生分解性ミクロスフェアからのパクリタキセルのインビトロ放出速度プロフィールを評価し、そしてCAM上に置かれた場合の、これらのミクロスフェアから放出されたパクリタキセルのインビボ血管新生活性を証明する。これらの実験において利用された試薬は、ポリ（ε-カプロラクトン）（「PCL 」）（分子量35,000〜45,000；Polysciences(Warrington，PA)から購入）；Fish er Scientific Co.からのジクロロメタン（「DCM」）；Aldrich Chemical Co.(M ilwaukee，Wls.)からのポリビニルアルコール（PVP）（分子量12,000〜18,000、 99％加水分解）、およびSigma Chemical Co.(St.Louis，MO)からのパクリタキセルを含む。他に述べられない限り、全ての化学物質および試薬を、供給されたように使用する。蒸留水を終始使用する。Ａ．ミクロスフェアの調製ミクロスフェアを、溶媒蒸発法を利用して実施例２に記載のように本質的に調製する。簡単には、５％w/wパクリタキセル充填ミクロスフェアを、10mgのパクリタキセルおよび190mgのPCLを２mlのDCMに溶解し、100mlの１％PVP水性溶液に添加し、そして25℃で２時間1000rpmで攪拌することにより調製する。ミクロスフェア懸濁液を、1000×gで10分間遠心分離し（Beckman GPR）、上清を除去し、そしてミクロスフェアを水で３回洗浄した。洗浄ミクロスフェアを一晩風乾し、そして室温で保存した。コントロールミクロスフェア（パクリタキセルなし）を上記のように調製する。１％および２％パクリタキセルを含むミクロスフェアもまた調製する。ミクロスフェアを、ステージマイクロメーターを有する光学顕微鏡を用いてサイズ分類する。Ｂ．カプセル化効率既知量の薬物充填ミクロスフェア（約５ｍｇ）を８mlのアセトニトリルに溶解し、そして２mlの蒸留水を添加して、ポリマーを沈澱させる。混合物を1000gで1 0分間遠心分離し、そしてカプセル化されたパクリタキセル量を、UV分光光度計（Hewlett-Packard 8452Aダイオードアレイ分光光度計）において232nmで測定された上清の吸光度から計算する。Ｃ．薬物放出研究約10mgのパクリタキセル充填ミクロスフェアを、ねじぶた管内で、20mlの10mM リン酸緩衝化生理食塩水(pH7.4)（PBS）に懸濁する。管を37℃にて回転させながら転がし、そして所定の時間間隔で（ミクロスフェアを底に安定させた後）19.5 mlの上清を除去し、0.45μｍメンブレンフィルターを通して濾過し、そしてパクリタキセル分析のために保持する。等量のPBSを各管に置換して、研究の間中の吸込み(sink)条件を維持する。濾過物を３×１ml DCMで抽出し、DCM抽出物を窒素の流れ下で乾燥するまで蒸発させ、１mlのアセトニトリルに再溶解し、そして１ml分^-lの流速での水：メタノール：アセトニトリル（37:５:58）の移動相（Be ckman無勾配ポンプ）、C8逆相カラム（Beckman）、および232nmでのUV検出（Shi madzu SPD A）を用いてHPLCにより分析する。Ｄ．CAM 研究受精家禽胚を、殻なしの培養前に４日間インキュベートする。インキュベーションの６日目に、５％パクリタキセル充填またはコントロール（パクリタキセルなし）ミクロスフェアの1mgアリコートを、CAM表面上に直接置く。２日間の暴露後、脈管構造を、ビデオカメラに接続した実体顕微鏡を用いて調べ；次いで、映像信号をコンピューター上にディスプレイし、そして映像を印刷する。Ｅ．走査型電子顕微鏡ミクロスフェアをサンプルホルダーに入れ、金でスパッターコートし、次いで、15kVで操作するPhilips 501B SEM走査型電子顕微鏡に置く。Ｆ．結果ミクロスフェアサンプルのサイズ範囲は30〜100μｍであるが、全てのパクリタキセル充填またはコントロールミクロスフェアバッチにおいて、この範囲外に落ちるいくつかのミクロスフェアの証拠が存在する。PCLミクロスフェアをパクリタキセルで充填する効率は、常に、研究された全ての薬物充填について95％より大きい。走査型電子顕微鏡は、ミクロスフェアが全て球であることを証明し、そして多くが粗いかまたはあばたのある表面形態を示した。ミクロスフェア表面上に固体薬物の証拠はないようであった。１％、２％、および５％充填PCLミクロスフェアからのパクリタキセル放出の時間経過を図11Aに示す。放出速度プロフィールは２相性である。全ての薬物充填で最初の急速なパクリタキセルの放出すなわち「バースト相」があった。バースト相は、１％および２パクリタキセル充填で１〜２日にわたって、ならびに５％充填ミクロスフェアについては３〜４日にわたって生じた。急速な放出の最初の相の後に、著しく遅い薬物放出の相が続く。１％および２％パクリタキセルを含むミクロスフェアについて、21日後にさらなる薬物放出はなかった。５％パクリタキセル充填で、ミクロスフェアは、21日後に総薬物含有量の約20％を放出した。図11Bは、コントロールPCLミクロスフェアで処置されたCAMを示し、図11Cは、５％パクリタキセル充填ミクロスフェアでの処置を示す。コントロールミクロスフェアを用いたCAMは、正常な毛細血管ネットワーク構造を示す。パクリタキセル-PCLミクロスフェアで処置されたCAMは、著しい脈管後退および毛細血管ネットワークが全く存在しないゾーンを示す。Ｇ．議論パクリタキセル充填ミクロスフェアの溶媒蒸発法は、95〜100％の非常に高いパクリタキセルカプセル化効率を生じた。これは、パクリタキセルの乏しい水溶性およびポリマーを含む有機溶媒相での分配に有利なその疎水性性質によるものである。パクリタキセルの２相性放出プロフィールは、生分解性ポリマーマトリックスからの多くの薬物の放出パターンを代表する。ポリ（ε-カプロラクトン）は、生理学的条件下で加水分解により分解され得、そして非毒性かつ組織適合性である、脂肪族ポリエステルである。PCLの分解は、広範に調査されたポリマーならびに乳酸およびグリコール酸のコポリマーの分解より著しく遅く、従って、長期の管周囲薬物送達系の設計に適する。パクリタキセルの最初の急速、すなわちバースト相は、（ミクロスフェア表面に密接した）ミクロスフェアの外面領域からの薬物の拡散放出によるものであると考えられる。放出プロフィールの第２の（遅い）相におけるパクリタキセルの放出は、PCLの分解または侵食によるようではない。なぜなら、研究は、インビトロ条件下で水中で、7.5週期間にわたってP CLの有意な重量喪失または表面侵食がないことを示したからである。パクリタキセル放出の遅い相は、恐らく、ポリマーマトリックス内の液で満たされた孔内での薬物の溶解および孔を通した拡散によるものである。より高いパクリタキセル充填でのより大きな放出速度は、恐らく、ポリマーマトリックス内のより広範な孔ネットワークの結果である。５％充填を有するパクリタキセルミクロスフェアは、CAM上に置かれた場合に血管新生の広範な阻害を生じるのに十分な薬物を放出することが示された。血管増殖の阻害は、図11Cに示されるような無脈管ゾーンをもたらした。実施例７治療剤を充填されたエチレンビニルアセテートおよび界面活性剤からなる管周辺ポリマー性フィルム２つの型のフィルムを、本実施例で調べる：パクリタキセルで充填された純粋なEVAフィルムおよびパクリタキセルで充填されたEVA/界面活性剤混和フィルム。調べられる界面活性剤は、２つの疎水性界面活性剤（スパン(Span)80およびプルロニックL101）ならびに１つの親水性界面活性剤（プルロニックF127）である。プルロニック界面活性剤自体はポリマーであり、それらが種々の薬物送達特性を最適化するためにEVAと混和物され得るので魅力的な特性である。スパン80は、いくつかの様式においてポリマー性マトリックスに分散され、そして混和物を形成しない、より小さな分子である。界面活性剤は、パクリタキセルのフィルムからの放出速度を調節し、そしてフィルムの特定の物理的パラメーターを最適化するのに有用である。薬物放出速度が制御され得ることを示す界面活性剤混和フィルムの１つの局面は、化合物が水中で膨張する速度および程度を変える能力である。水のポリマー-薬物マトリックスへの拡散は、キャリアからの薬物の放出に重要である。図12Cおよび12Dは、混和物中の界面活性剤レベルが変化するにつれてのフィルムの膨張度を示す。純粋なEVAフィルムは、２ヶ月を超えても任意の有意な程度で膨張しない。しかし、EVAに添加される界面活性剤のレベルを増大させることにより、化合物の膨張度を増大させることが可能になり、そして親水性を増大させることにより、膨張もまた増大され得る。これらのフィルムでの実験結果を、図12A〜Eに以下に示す。簡単には、図12A は、純粋なEVAフィルムからの経時のパクリタキセル放出（mg）を示す。図12Bは、同じフィルムに残存する薬物の割合を示す。これらの２つの図から示されるように、パクリタキセル充填が増大する（すなわちパクリタキセルの重量での割合が増大する）につれて薬物放出速度は増大し、これは期待された濃度依存性を示す。パクリタキセル充填が増大するにつれて、フィルムに残存するパクリタキセルパーセントもまた増大し、これはより高い充填が長期の放出処方物により魅力的であり得ることを示す。フィルムの物理的な強度および弾力性を図12Eにおいて評価する。簡単には、図12Eは、純粋なEVAおよびEVA-界面活性剤混和フィルムの圧力／ひずみ曲線を示す。この粗い圧力の測定は、フィルムの弾力性がプルロニックF127の添加と共に増大し、そして引っ張り強さ（破壊に対する圧力）がプルロニックF127の添加と共に濃度依存性様式で増大することを証明する。弾力性および強度は、化合物の恒久的な変形を引き起こすことなく特定の管周辺臨床的適用のために操作され得るフィルムの設計において重要な考察である。上記のデータは、薬物放出速度を制御し、そしてベシクルの物理的特徴を変える、特定の界面活性剤添加剤の能力を証明する。実施例８ペーストからの治療剤の制御送達の処方物を開発するための、メトキシポリエチレングリコール350(MePEG)のポリ（E-カプロラクトン）への取り込みこれらの実験で利用された試薬および器具は、メトキシポリエチレングリコール350(「MePEG」−Union Carbide，Danbury，CT)を含む。MePEGは室温で液体であり、そして10℃〜−５℃の凝固点を有する。Ａ．MePEG/PCL パクリタキセル含有ペーストの調製 MePEG/PCLペーストを、最初にある量のパクリタキセルをMePEGに溶解し、次いでこれを融解PCLに取り込ませることにより調製する。この方法を用いる１つの利点は、DCMを必要としないことである。Ｂ．融点の分析 PCL/MePEGポリマー混和物の融点を、１分あたり2.5℃の加熱速度で30℃〜70℃ の示差走査型熱量測定により測定し得る。この実験の結果を図13Aおよび13Bに示す。簡単には、図13Aに示されるように、ポリマー混和物の融点（熱分析により測定される）は、濃度依存性様式でMePEGにより減少される。MePEG濃度の関数としてのポリマー混和物の融点を図13Aに示す。この低い融点はまた、図13Bに示されるようにポリマー混和物が融解から凝固する時間の増大に言い換える。MePEG: PCLの30:70混和物は、PCL単独より融解液体から凝固するのに２倍を超えてかかる。Ｃ．脆性の測定 MePEGのPCLへの取り込みは、PCL単独と比較して砕けやすくない固体を生成するようである。これを定量する「粗い」方法として、秤量した針を、同じ高さからPEG中に０％〜30％MePEGを含むポリマー混和物に落とし、次いで針が固体に貫通する距離を測定する。得られたグラフを図13Cに示す。４回の測定の平均+/-1S .D.として点を与える。比較の目的のために、パラフィンワックスのサンプルもまた試験し、そして針は、7.25mm+/-0.3mmの距離でこれに貫通した。Ｄ．パクリタキセル放出の測定ポリマー（０％、５％、10％、または20％MePEGを含むPCL）のペレットを、リン酸緩衝化生理食塩水（PBS、pH7.4）中で37℃でインキュベートし、そしてポリマー重量の％変化をその時間にわたって測定する。図13Dで理解され得るように、喪失した重量は、混和物に最初に存在するMePEGの濃度と共に増大する。この重量喪失は、ポリマーマトリックスからインキュベート液体へのMePEGの放出によるものであるようである。これは、パクリタキセルが容易にMePEG/PCL混和物から放出されることを示す。なぜならパクリタキセルは、PCLへの取り込み前に最初にMePEGに溶解されるからである。Ｅ．パクリタキセル放出に対する種々のMePEG量の効果 PCL中に0.8％〜20％のMePEGを含む熱ペーストを作製する。これらに１％のパクリタキセルを充填する。37℃でのPBS緩衝液中の10mgのペレットからのその時間にわたるパクリタキセル放出を、HPLCによりモニターする。図13Eに示されるように、処方物中のMePEG量は、放出されるパクリタキセル量に影響しない。Ｆ．20 ％ MePEG/PCL混和物から放出される総パクリタキセル量に対する種々のパクリタキセル量の効果 PCL中に20％のMePEGを含む熱ペーストを作製し、そして0.2％〜10％のパクリタキセルを充填する。その時間にわたるパクリタキセルの放出を上記のように測定する。図13Fに示されるように、その時間にわたって放出されるパクリタキセル量は、パクリタキセル充填の増大と共に増大する。しかし、放出された総パクリタキセルパーセントとしてプロットした場合、順番は逆転する（図13G）。これは、ペーストに残る残存パクリタキセルについての情報を与え、そしてパクリタキセルが20％MePEG熱ペーストから放出され得る期間の予測を可能にする。Ｇ．種々のMePEG/PCL混和物の強度分析 CT-40機械的強度試験器を使用して、直径0.88cmおよび平均厚0.560cmの固体ポリマー「錠剤」の強度を測定する。ポリマー錠剤は、PCL中の０％、５％、10％、または20％濃度のMePEG混和物である。この試験の結果を図13Hに示し、ここで引っ張り強さおよび破損までの時間の両方を、混和物中の％MePEGの関数としてプロットする。単一の可変性ANOVAは、各群での錠剤厚が異ならないことを示した。図１3Hから示され得るように、MePE GのPCLへの添加は、得られた固体の硬度を減少させた。Ｈ．パクリタキセル放出に対するγ線照射の効果 20％パクリタキセルで充填されたPCL:MePEG(80:20)ペーストをγ線照射し、そしてその時間にわたるパクリタキセル放出について分析した。結果を図30に示す。要約すると、上記の実験に基づいて、MePEGの添加はポリマーを砕けやすくさせずかつよりワックス様にし、融点を低減させ、そしてポリマーの凝固時間を増大させることが結論づけられ得る。全てのこれらの因子は、ペーストの適用特性を改善する。低濃度(20％)のMePEGは、PCLからのパクリタキセル放出に対して効果を有さない。γ線は、パクリタキセル放出に対してほとんど効果を有さないようである。実施例９低分子量ポリ(D,L乳酸)を用いた熱ペーストからの治療剤放出の変化上記のように、所望の治療効果に依存して、素早い放出または遅い放出のいずれかのポリマー性キャリアが所望され得る。例えば、ポリカプロラクトン（PCL ）およびPCLとポリ（エチレングリコール）（PEG）との混合物は、数ヶ月の期間にわたってパクリタキセルを放出する組成物を生成する。特に、ポリマー中のパクリタキセルの拡散は、その大きな分子サイズおよび極端な疎水性により非常に遅い。他方では、低分子量ポリ（DL-乳酸）(PDLLA)は、その最初の分子量に依存して、１日から２、３ヶ月の範囲で速い分解を与える。この場合、パクリタキセルの放出は、ポリマー分解により支配される。低分子量PDLLAの別の特性は、その低い融解温度（すなわち、40℃〜60℃）であり、これはそれを熱ペーストの作製に適した物質にする。以下に、より詳細に記載されるように、いくつかの異なる方法が、ポリマー分解速度を制御するために利用され得る（例えば、PDLLAの分子量を変化させることによる方法、および／またはそれと高分子量PCL、PDLLA、またはポリ（ラクチド-コ-グリコリド）(PLGA)とを混合することによる方法を含む）。Ａ．実験材料 D,L-乳酸を、Sigma Chemical Co.,St.Louis，MOから購入した。PCL(分子量10 〜20,000)を、Polysciences，Warrington，PAから得た。高分子量PDLLA（固有粘度0.60dl/g）およびPLGA(50:50組成物、粘度0.58dl/g)は、Birmingham Polymers 由来であった。Ｂ．低分子量PDLLAの合成低分子量PDLLAを、重縮合によりDL-乳酸から合成した。簡単には、DL-乳酸を、窒素パージと共に200℃でガラスビーカー内で加熱し、そして所望の時間の間磁気攪拌した。粘度は、分子量の増大により重合の間に増大した。３つのバッチを、異なる重合時間（すなわち、40分（分子量800）、120分、160分）で得た。Ｃ．パクリタキセル熱ペーストの処方パクリタキセルを、約60℃の温度で手で混合することにより、20％で、以下の物質に充填した。１．重合時間40分での低分子量PDLLA。２．重合時間120分での低分子量PDLLA。３．重合時間160分での低分子量PDLLA。４．高分子量PDLLAおよび低分子量PDLLAの40分の50:50混合。５．高分子量PLGAおよび低分子量PDLLAの40分の50:50混合。６．10:90、20:80、40:60、60:40、および20:80のPCL:PDLLAでの高分子量PCL および低分子量PDLLAの40分の混合。高分子量PDLLAまたはPLGAと低分子量PDLLAとの混合物を、アセトンに物質を溶解し、その後乾燥することにより得た。Ｄ．放出研究 37℃でのPBSアルブミン緩衝液へのパクリタキセルの放出を、種々の時間でHPL Cを用いて上記のように測定した。Ｅ．結果低分子量PDLLA40分は、淡黄色の柔らかい物質であった。この色は、恐らく重縮合の間の酸化によるものである。低分子量PDLLA120分（黄色）および160分（褐色）は、室温で砕けやすい固体であった。それらは全て60℃で融解物になる。 50:50高分子量PDLLAまたはPLGAと低分子量PDLLAとの40分の混合もまた約60℃で融解した。放出の間、低分子量PDLLA40分および120分は１日以内に断片に粉砕し、他の物質はこの執筆まで（３日間）インタクトであった。処方物２〜５からのパクリタキセルの放出を図14に示した。低分子量PDLLA40 分および120分は、ペーストの粉砕のため最も速い放出を与えた。この放出は、恐らく限定された可溶性であった。低分子量PDLLA160分もまた最も速い放出を与え、インタクトなペレットを維持した。例えば、10％の充填パクリタキセルは、１日以内に放出された。高分子量PDLLAまたはPLGAと低分子量PDLLAとの40分の50 :50混合物は、１日以内でより遅い（すなわち、3.4％および2.2％）放出であった。上記では特に示されないが、広範な種々の他のポリマー性キャリアが作製され得る。これらは、例えば、（１）低分子量（500〜10,000）ポリ（D,L-乳酸）、ポリ（L-乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（6-ヒドロキシカプロン酸）、ポリ（5-ヒドロキシ吉草酸）、ポリ（4-ヒドロキシ酪酸）、およびそれらのコポリマー；（２）上記（＃１）の混和物；（３）上記（＃１）と高分子量ポリ（DL- 乳酸）、ポリ（L-乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（6-ヒドロキシカプロン酸）、ポリ（5-ヒドロキシ吉草酸）、ポリ（4-ヒドロキシ酪酸）、およびそれらのコポリマーとの混和物；ならびに（４）ポリ（エチレングリコール）およびポリ（D,L-乳酸）を含むプルロニック、ポリ（L-乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（6-ヒドロキシカプロン酸）、ポリ（5-ヒドロキシ吉草酸）、ポリ（4-ヒドロキシ酪酸）、およびそれらのコポリマーとのコポリマーを含む。実施例10 水溶性添加剤およびパクリタキセルを含むポリマー性組成物の調製Ａ．ポリマー性組成物の調製パクリタキセル／添加剤の同時沈澱物の微粒子を調製し、そしてその後PCLに添加して、ペーストを形成した。簡単には、パクリタキセル（100mg）を、0.5ml のエタノール(95％)に溶解し、そして予め溶解して添加剤（100mg）と混合するか、または1.0mlの蒸留水に分散させた。混合物を、平滑なペーストを形成するまで摩砕した。ペーストをペトリ皿上に広げ、そして37℃で一晩風乾した。乾燥した塊を乳鉢および乳棒を用いて砕き、そしてメッシュ＃140（106μｍ）ふるい（Endecotts Test Sieves Ltd，London，England）に通して通過させた。次いで、微粒子(40％)を、パクリタキセルの20％充填に対応する融解PCL(60％)に65℃ で取り込ませた。本研究で使用した添加剤は、ゼラチン(Ｂ型、100ブルーム(blo om)，Fisher Scientific)、メチルセルロース（British Drug Houses）、デキストランT500（Pharmacia，Sweden）、アルブミン(Fisher Scientific)、および塩化ナトリウム（Fisher Scientific）であった。パクリタキセルおよびゼラチンまたはアルブミンの微粒子を上記のように調製したが、メッシュ＃60（270μｍ）ふるい（Endecotts Test Sieves Ltd，London，England）に通して通過させて、ペーストからのパクリタキセルの放出に対する微粒子サイズの効果を評価した。ペーストもまた、PCL中に10％、20％、または30％ゼラチンおよび20％パクリタキセルを含むように調製して、薬物放出に対する添加剤の比率の効果を研究した。他に特定されない限り、PCL中に分散された20％パクリタキセルを含むペーストを、放出速度研究のためのコントロールとして働くように調製した。Ｂ．薬物放出研究パクリタキセル充填ペーストの約2.5mgのペレットを、ねじぶた管内で50mlの1 0mMリン酸緩衝化生理食塩水、pH7.4（PBS）に懸濁した。管を回転させながら37 ℃で転がし、そして所定の時間間隔で49.5mlの上清を除去し、0.45μｍ膜フィルターに通して濾過し、そしてパクリタキセル分析のために保持した。等量のPBS を各管に置換して、研究の間中の吸い込み条件を維持した。分析のために、濾過物を３×１mlのジクロロメタン（DCM）で抽出し、DCM抽出物を窒素の流れ下で乾燥するまで蒸発させ、１mlのアセトニトリルに再溶解した。１ml分^-1の流速での水：メタノール：アセトニトリル（37:５:58：）の移動相（Beckman無勾配ポンプ）、C8逆相カラム（Beckman）、および232nmでのUV検出（Shimadzu SPD A）を用いてHPLCにより分析した。Ｃ．膨張研究メッシュサイズ＃140（そして、ゼラチンのみについては＃60）パクリタキセル-添加剤微粒子を用いて調製されたパクリタキセル/添加剤/PCLペーストを押し出して、シリンダーを形成し、断片に切断し、秤量し、そして各断片の直径および長さをマイクロメーター(Mitutoyo Digimatic)を用いて測定した。断片を37℃ で蒸留水（10ml）に懸濁し、そして予め決定された間隔で水を捨て、そしてシリンダー断片の直径および長さを測定し、そしてサンプルを秤量した。サンプルの形態（水中の懸濁の前後）を、走査型電子顕微鏡（SEM）（Hitachi F-2300）を用いて調べた。サンプルを、Hummer Instrument(Technics，USA)を用いて60％Au .および40％Pd（厚さ10〜15mm）でコートした。Ｄ．ニワトリ胚尿漿膜（CAM）研究受精家禽胚を、殻なしの培養前に４日間インキュベートした。卵の内容物を、 90％相対湿度および３％CO₂でインキュベートし、そしてインキュベーションの６日目に、６％パクリタキセル、24％ゼラチン、および70％PCLを含むパクリタキセル充填ペーストまたはコントロール（PCL中の30％ゼラチン）ペーストの1mg 断片を、CAM表面上に直接置いた。２日間の暴露後、脈管構造を、ビデオカメラに接続した実体顕微鏡を用いて調べ；次いで、映像信号をコンピューター上にディスプレイし、そして映像を印刷した。Ｅ．インビボ抗腫瘍活性 20％パクリタキセル、20％ゼラチン、および60％PCLを含む、上記のように（パクリタキセル-ゼラチン微粒子のメッシュサイズ140画分を用いて）調製されたペーストを、８×１mlシリンジ（BDインシュリンシリンジ、1/2cc）に満たした。各シリンジは150mgのペースト（30mgのパクリタキセルと等価）を含む。18 〜20gの重さの10週齢のDBA/2j雌性マウス（16）を到着後４日間順化させ、そして各マウスに、１日目にリン酸緩衝化生理食塩水100μｌ中のMDAY-D2腫瘍細胞（ 10×10⁶ml^-1）を後側腹部において注射した。６日目に、マウスを８匹の２つのグループに分け、腫瘍部位を麻酔下で開き、そして約60℃で予め加熱された150m gのペーストを腫瘍部位に押し出し、そして傷を閉じた。１つのグループに、パクリタキセル充填ペーストを移植し、そしてもう１つのグループにゼラチンおよびPCLのみを含むコントロールペーストを移植した。16日目に、マウスを屠殺し、そしてマウスおよび摘出した腫瘍の重量を測定した。Ｆ．結果および議論同時沈澱したパクリタキセルおよびゼラチンまたはアルブミンの微粒子は、硬くかつ砕けやすく、そして容易にPCLに取り込まれたが、一方他の添加剤は、ペーストの調製間に粉砕する傾向を示す軟らかい粒子を生成した。図15は、PCL中の20％パクリタキセルまたは20％パクリタキセル、20％添加剤、および60％PCLを含むペーストからのパクリタキセル放出の時間経過を示す。添加剤を伴うか、または伴わないPCLからのパクリタキセルの放出は２相性放出パターンに従い；最初に、より速い薬物放出速度、その後薬物のより遅い薬物放出がある。ペーストからのパクリタキセルのより速い放出速度の最初の期間は、表面上に位置するパクリタキセルの溶解またはペーストの外面領域からのパクリタキセルの拡散によるものであると考えられた。後のより遅い相の放出プロフィールは、溶媒に接触する薬物粒子の有効表面領域の減少、ポリマーマトリックスへの溶媒の遅い進入、またはポリマーマトリックスを通る薬物の平均拡散通路の増大に起因し得る。両方の相のパクリタキセルのPCLからの放出プロフィールは、親水性添加剤とゼラチン、アルブミン、およびメチルセルロースとの存在下で増大し、これは薬物放出速度の最も大きな増大を生じた（図15）。より小さなパクリタキセル-添加剤粒子（106μｍ）を使用した場合と比較して、より大きなパクリタキセル-添加剤粒子（270μｍ）を使用してペーストを調製した場合に、パクリタキセルのポリマーマトリックスからの放出はさらに増大した（図16）。添加剤（例えば、ゼラチン）量の増大は、薬物放出において対応する増大を生じた（図16）。図17A は、20％パクリタキセル、20％添加剤、および60％PCLを含むペーストの膨張作用を示す。膨張速度は、ゼラチン＞アルブミン＞メチルセルロース＞デキストラン＞塩化ナトリウムの順に従う。さらに、膨張速度は、より高い比率の水溶性ポリマーをペーストに添加した場合に増大した（図17B）。ゼラチンまたはアルブミンを含むペーストは最初の８〜10時間以内に急速に膨張し、そしてその後、サンプルの容量変化が40％を超えた場合に膨張速度は減少した。より大きな（270 μｍ）パクリタキセル-ゼラチン粒子を用いて調製されたペーストは、より小さな（106μｍ）パクリタキセル-ゼラチン粒子を用いて調製されたペーストより速い速度で膨張した。全てのペーストは、容量増加が50％を超えた場合に分解した。SEM研究は、ペースト膨張がマトリックスの熱分解に付随したことを示した（図18）。高倍率では（図18Cおよび18D）、ペーストの表面上に、そして膨張後のゼラチンに密接に結合した針または棒型のパクリタキセル結晶の証拠があった（図18Cおよび18D）。別々の粒子として疎水性ポリマー内に埋め込まれる浸透性または膨張性の親水性薬剤は、マトリックスの侵食、ポリマーマトリックスを通る薬物の拡散、および／または水溶性添加剤の溶解によるマトリックス内に作られた孔を通る対流的な流れの組み合せにより薬物放出をもたらす。疎水性ポリマー内に分散された浸透性薬剤および膨張性ポリマーは、水を吸収し（水を運ぶ(wicking)薬剤として働く）、溶解するか、または膨張しそして隣接粒子間の隔壁（ポリマー層）を裂き得る膨圧を出す。これは、マイクロチャンネル(microchannel)を作り、従って、拡散または対流的な流れによる薬物分子の周囲の媒体への漏れを容易にする。ペーストマトリックスの膨張および熱分解（図18）は、恐らく、マトリックスの内部中にマイクロチャンネルの形成をもたらす。ポリマー膨張の異なる速度および程度（図17）は、観察されたパクリタキセル放出速度の差異を説明し得る（図 15および16）。図19は、コントロールゼラチン-PCLペースト（図19A）および20％パクリタキセル-ゼラチン-PCLペースト（図19B）で処置されたCAMを示す。CAM表面上のペーストを図の矢印で示す。コントロールペーストを用いたCAMは、正常な毛細血管ネットワーク構造を示す。パクリタキセル-PCLペーストで処置されたCAMは、一貫して、脈管後退および毛細血管ネットワークが全くないゾーンを示した。ペースト内の添加剤の取り込みは、無脈管分布ゾーンの直径を非常に増大させた（図 19）。インビボ研究の結果を図20に示す。簡単には、確立しそして触診可能な腫瘍を有するマウスへのパクリタキセル-ゼラチン-PCLペーストの腫瘍周囲注射は、この調製物がコントロールと比較して腫瘍塊において63％の平均低減を生じることを示した。さらに、処置後のマウスの重量に対して有意な効果はなかった。パクリタキセル-PCLペースト（添加剤なし）は、腫瘍塊において任意の有意な低減を生じなかった。この研究は、PCLからのパクリタキセルのインビトロ放出が、パクリタキセル／親水性ポリマー微粒子のPCLマトリックスへの取り込みにより増大され得ることを示した。マウスの皮下腫瘍の処置における処方物効率を評価するインビボ研究はまた、パクリタキセル/ゼラチン/PCLペーストが腫瘍塊を有意に低減することを示した。水溶性薬剤の型、微粒子サイズ、および添加剤の比率のような因子は、薬物の放出特徴に影響することが示された。悪性過増殖により閉塞される管の外膜への化学療法ペーストの管周囲注射は、局所的腫瘍増殖を低減し得、そして侵襲性外科的手順を伴わずに閉塞徴候を軽減し得た。実施例11 PDLLA-PEG-PDLLAおよび低分子量ポリ（D,L,乳酸）を用いた熱ペーストからのパクリタキセル放出の改変Ａ．PDLLA-PEG-PDLLA および低分子量PDLLAの調製 DL-ラクチドをAldrichから購入し、分子量8,000を有するポリエチレングリコール（PEG）、オクタン酸スズ（stannous octoate）およびDL-乳酸をSigmaから得た。分子量20,000を有するポリ-ε-カプロラクトン（PCL）を、Birmingham Po lymers(Birmingham，AL)から得た。パクリタキセルをHauser Chemicals(Boulder ， CO)から購入した。狭い分子量分布を有するポリスチレン標準を、Polysciences( Warrington，PA)から購入した。アセトニトリルおよび塩化メチレンはHPLCグレードであった（Fisher Scientific）。 PDLLA-PEG-PDLLAの３ブロック(triblock)コポリマーを、開環重合により合成した。異なる比のDL-ラクチドおよびPEGのモノマーを混合し、そして0.5重量％オクタン酸スズを添加した。重合を150℃で3.5時間行った。低分子量PDLLAを、D L-乳酸の重縮合により合成した。反応を穏やかな窒素パージの条件下でガラスフラスコ内で行い、機械的に攪拌し、そして180℃で1.5時間加熱した。カルボキシル酸末端基を滴定することにより測定されたPDLLA分子量は約800であった。Ｂ．ペースト処方物の製造 20％または30％の充填でのパクリタキセルを、約60℃で融解されたPDLLA-PEG- PDLLAコポリマーまたはPDLLA:PCL 90:10、80:20、および70:30の混和物のいずれかに完全に混合した。パクリタキセル充填ペーストを1mlシリンジ内で秤量し、そして４℃で保存した。Ｃ．PDLLA-PEG-PDLLA およびペースト混和物の特徴付け PDLLA-PEG-PDLLAの分子量および分布を、Shimadzu LC-10AD HPLCポンプおよび 10⁴ÅHewlett Packerd PlgelカラムにつなげたShimadzu RID-6A屈折率検出器（K yoto，Japan）を用いてGPCにより室温で決定した。移動相は、流速lml/分でクロロホルムであった。サンプルの注入容量は、0.2％(w/v)のポリマー濃度で20μｌであった。ポリマー分子量を、ポリスチレン標準と比較して決定した。25℃での CHCl₃中のPDLLA-PEG-PDLLA固有粘度を、Cannon-Fenske粘度計を用いて測定した。コポリマーの熱分析を、TA Instruments 2000コントローラーおよびDuPont 91 OS DSC(Newcastle，Delaware)を用いて示差走査型熱量測定（DSC)により行った。加熱速度は10℃/分であり、そしてコポリマーおよびパクリタキセル／コポリマーマトリックスサンプルを、覆いのない端を曲げたアルミニウム試薬皿で秤量した（３〜５mg）。 ¹H核磁気共鳴（NMR）を使用して、ポリマーの化学組成を決定した。パクリタキセル充填PDLLA-PEG-PDLLAの¹HNMRスペクトルを、200MHzでNMR装置（Bruker， AC-200E）を用いてCDCl₃中で得た。ポリマー濃度は１〜２％であった。パクリタキセル／PDLLA-PEG-PDLLAペーストの形態を、走査型電子顕微鏡（SEM ）（Hitachi F-2300）を用いて調べた。サンプルを、Hummer装置（Technics，US A）を用いて60％Auおよび40％Pd(厚さ10〜15nm)でコートした。Ｄ．パクリタキセルのインビトロ放出 20％パクリタキセル充填PDLLA:PCLの小さなペレット（約２mg）または20％パクリタキセル充填PDLLA-PEG-PDLLAペーストのシリンダー（針のないシリンジを通した融解ペーストの押し出しにより作製された）を、10mlの0.4g/Lアルブミンを含むリン酸緩衝化生理食塩水（PBS、pH7.4）を含むキャップした14mlガラス管に入れた。管を、穏やかに回転混合しながら37℃でインキュベートした。上清をパクリタキセル分析のために定期的に回収し、そして新鮮なPBS／アルブミン緩衝液で置換した。上清（10ml）を、1mlの塩化メチレンで抽出した。水相をデカンテーションし、そして塩化メチレン相を60℃で窒素の流れ下で乾燥した。乾燥残渣を、40:60水：アセトニトリル混合物に再構成し、そして10,000gで約１分間遠心分離した。次いで、上清中のパクリタキセル量をHPLCにより分析した。HPLC 分析を、110AポンプおよびC-8超球形（ultrasphere）カラム（Beckman）、ならびに232nmに設定されたSPD-6A UV検出器、SIL-9AオートインジェクターおよびC- R3Aインテグレーター(Shimadzu)を用いて行った。注入容量は20μｌであり、そして流速は1ml/分であった。移動相は58％アセトニトリル、５％メタノール、および37％蒸留水であった。Ｅ．インビボ動物研究 10週齢のDBA/2j雌性マウスを到着後３〜４日順化させた。各マウスに、１日目に100μｌ PBS中の10×10⁵個MDAY-D2腫瘍細胞を後側腹部において皮下に注射した。６日目に、マウスを２つのグループにランダムに分けた。グループ１にペーストのみ（コントロール）を移植し、そしてグループ２にパクリタキセル充填ペーストを移植した。腫瘍近くの皮下ポケットを外科的に麻酔下で形成し、そして約100mgの融解ペースト（50℃〜60℃に暖めた）をそのポケットに置き、そして傷を閉じた。16日目に、マウスを屠殺し、そして腫瘍を取り出し、そして重量を測定した。16日目に、倫理的制限内の容易に測定可能なサイズに増殖した腫瘍を考慮するために選択した。Ｆ．結果および議論 PDLLA-PEG-PDLLAの分子量および分子量分布を、ポリスチレン標準と比較してG PC（図21）により測定した。25℃でのCHCl₃におけるコポリマーの固有粘度を、C anon-Fenske粘度計を用いて決定した。分子量および固有粘度は、PEG含有量の増大と共に減少した。10％〜40％のPEG含有量を有するPDLLA-PEG-PDLLAの多分散は、2.4〜3.5であった。しかし、70％PEGを有するコポリマーは、1.21の多分散の狭い分子量分布を有した。これは、高いPEG含有量がポリマー分子量の広い分布をもたらすトランスエステル化のような副反応の機会を低減するからであり得る。あるいは、疎水性-親水性ブロックコポリマーのコイル構造は、人工的な多分散値をもたらし得る。純粋なPEGおよびPDLLA-PEG-PDLLAコポリマーのDSCスキャンを図21および22に与える。PEGおよび70％〜40％のPEG含有量を有するPDLLA-PEG-PDLLAは、コポリマーのPEG含有量が減少するにつれて、エンタルピーおよび温度の減少を伴う吸熱ピークを示した。40％および70％PEGのコポリマーにおける吸熱ピークは、恐らく、PEG領域の融解によるものであり、これは相分離の出現を示した。純粋なP EGは急な溶解ピークを有したが、一方40％および70％の両方のPEGコポリマーは、70％PEGでのはっきりした肩と共に広いピークを示した。広い融解ピークは、P DLLAのPEGの結晶化への干渉から生じ得た。70％PEGの場合での肩は、PDLLA領域のガラス転移を示し得る。熱変化は、10℃〜250℃の温度範囲において10％、20 ％、および30％のPEG含有量を有するコポリマーでは生じなかった。これは、有意な結晶化（従って、相分離であり得る）が生じなかったことを示す。パクリタキセルを含まないか、または20％パクリタキセルを含むPDLLA:PCL(70 :30、80:20、90:10)混和物のDSCサーモグラフは、PCL融解から生じる、約60℃での吸熱ピークを示した。PDLLAおよびその低分子量（800）の不定形性質のため、 PDLLAの融解およびガラス転移は観察されなかった。パクリタキセルの再結晶化または融解による熱変化は観察されなかった。 20％および30％のPEG含有量のPDLLA-PEG-PDLLAコポリマーを、以下の反応のためのペーストに最適な処方材料として選択した。10％PEGのPDLLA-PEG-PDLLAは、約60℃の温度で融解され得なかった。40％および70％PEGのコポリマーは60℃で容易に溶解され、そして20％および30％PEGコポリマーは50℃〜60℃で粘性の液体になった。40％および70％PEGコポリマーの水中での膨張は非常に高く、水中のペーストの急速な分散をもたらした。 PDLLA-PEG-PDLLAシリンダーからのパクリタキセルのインビトロ放出プロフィールを図23に示す。40％PEGシリンダーからの放出を測定する実験を、シリンダーが非常に高度の膨張（１日以内で約200％の水の取り込み）を有し、そして２、３日で分解したので終結した。30％PEGシリンダーから放出されたパクリタキセル画分は、70日を超えて徐々に増加した。20％PEGシリンダーから放出されたパクリタキセル画分は、30日までにゆっくりと増大し、次いで突然増大し、続いてさらなる期間で徐々に増加した。有意な差異が、それぞれ個々のシリンダー（ 20％PEG含有量）がパクリタキセル放出の突然の変化を示す程度で存在した。突然の増大の前のパクリタキセルの放出画分は、同じシリンダー直径（１mm）で低 PEG含有量のコポリマーについて低かった。40％および30％PEGシリンダーは、20 ％PEGシリンダーより非常に大きなパクリタキセル放出速度を示した。例えば、3 0％PEGシリンダーは、20％PEGシリンダーからの２％放出と比較して30日で17％のパクリタキセルを放出した。シリンダーの直径が小さいほど、より速い放出速度をもたらした。例えば、30日で、0.65mmおよび１mm直径を有する30％PEGシリンダーは、それぞれ、26％および17％のパクリタキセルを放出した（図23）。上記の観察は、シリンダーからのパクリタキセルの放出機構により説明され得る。パクリタキセルは、光学顕微鏡により観察されたように結晶としてポリマー内に分散された。結晶は、170℃でコポリマーマトリックス内で溶解し始め、そして熱ステージ顕微鏡により観察されたように180℃で完全に溶解した。20％パクリタキセル充填PDLLA-PEG-PDLLA（30％PEG）ペーストのDSCサーモグラムは、パクリタキセルについて小さな再結晶化発熱（16J/g、190℃）および融解吸熱（６J/g、212℃）（図21）を明らかにした。これは、180℃の後に融解したコポリマーからのパクリタキセルの再結晶化を示す。この型の薬物／ポリマーマトリックスにおいて、パクリタキセルは、拡散および／またはポリマー侵食を介して放出され得た。拡散の制御された場合において、薬物は、ポリマー内の分子拡散によりおよび／または接続した薬物粒子により形成された開いたチャンネルを通って放出され得る。従って、20％充填でパクリタキセルのいくつかの粒子は単離され、そしてパクリタキセルはコポリマー内での溶解、続いて拡散により放出され得る。パクリタキセルの他の粒子は、表面で接続するクラスターを形成し、そしてチャンネル拡散により放出され得る。両方の場合において、シリンダーの直径がより小さいほど、より短い拡散経路のためより速い薬物放出を与えた（図23）。シリンダーの寸法変化および水の取り込みを放出間に記録した（図24）。30％ PEGシリンダーの長さ、直径、湿重量の変化は、最大２日以内まで急速に増大し、約15日間変化しないままであり、次いで徐々に減少した。シリンダーの最初の直径は、膨張作用に影響しなかった。20％PEGのシリンダーについては、長さは1 日で10％まで減少し、そして平らになったが、一方直径および水の取り込みは徐々に経時的に増大した。コポリマー内のより多くのPEGがより多くの水を取り込んで、パクリタキセルの拡散を容易にするので、より速い放出が観察された（図 23）。 PDLLA-PEG-PDLLAペーストのコポリマー分子量分解をGPCによりモニターした。 20％PEGのシリンダーについては、ピーク位置での溶出容量は時間と共に増大し、これは放出実験の経過間の低減したポリマー分子量を示す（図25）。２相性分子量分布は69日目に観察された。ポリマー分子量はまた、30％PEGのシリンダー（lmmおよび0.65mm）について減少した。しかし、２相性分布は観察されなかった。 NMRスペクトルは、3.6ppmでのPEGピークならびに1.65ppmおよび5.1ppmでのPDL LAピークを明らかにした。コポリマーにおけるPDLLAと比較したPEGのピーク領域は、69日後に有意に減少し（図26）、これはPDLLAからのその解離後のPEG溶解を示す。シリンダーの乾燥質量喪失もまた記録し（図26）、そして30％PEG-0.65mm ＞30％PEG-1mm＞20％PEG-1mmの順で減少する分解速度を示す。パクリタキセル放出前および放出間の乾燥したシリンダーの形態変化をSEMを用いて観察した（図27）。簡単には、放出前の固体パクリタキセル結晶および非孔性ポリマーマトリックスを示す（図27Aおよび27B）。放出の69日後に、パクリタキセル結晶は観察されず、そしてマトリックスはポリマー分解および水の取り込みにより多くの孔を含んだ（図27Cおよび27D）。 30％PEGシリンダーは、水中で２日のみの後に広範な膨張を示し(図24)、従って分離した水溶性PEGブロックおよび分解したPDLLA（すなわち、DL-乳酸オリゴマー）の拡散に対する障害は低減した。30％PEGシリンダーの質量喪失および分解は継続したので、侵食放出寄与は徐々に増大し、任意の突然の変化を伴わないパクリタキセルの徐放をもたらした（図23）。20％PEGのシリンダーについて、膨張は最初は低く（図24）、これは分解産物の遅い拡散をもたらした。従って、内部領域の分解産物は主に保持されるが、一方短い拡散経路により外領域の分解産物は非常に少なかった。オリゴマーのカルボキシル酸末端基が加水分解を触媒したので、分解産物は分解速度を促進した。これは、２相性コポリマー分子量分布により示されるように（図25、69日目）、高分子量の殻および低分子量の内部をもたらす。殻の破裂は、殻の強度、厚さおよび欠陥ならびに内部分解産物のような因子に依存するので、内部分解産物の喪失の開始および程度は非常に変化しやすい。殻の破裂は一貫せず、そしてポリマー内の薬物は顕微鏡的に均一ではないので、放出バーストの時点およびバーストの程度は、試験した４サンプルについて異なった（図23）。 PDLLAおよびPCL混和物ならびに純粋なPCLからのパクリタキセルの放出を図28 に示す。簡単には、放出画分は、混和物中のPDLLA含有量と共に増大した。例えば、10日以内で、80:20、70:30、および0:100のPDLLA:PCLからの放出パクリタキセルは、それぞれ17％、11％、および６％であった。１日での最初のバースト後に、ほぼ一定の放出を80:20のPDLLA:PCLペーストから得た。有意な膨張度は放出間に観察されなかった。PDLLA:PCL混和物については、PDLLAは約800の非常に低い分子量を有したので、質量喪失の長い遅延なく水溶性産物に急速に加水分解された。PCLは、急速な分解からペーストを守るための「保持」物質として働いた。従って、放出速度は、増強した分解により混和物中のPDLLA含有量と共に増大した。PDLLAの継続侵食はパクリタキセルの放出を制御し、そして一定の放出をもたらした。純粋なPCLからのパクリタキセル放出は、恐らく、PCLの遅い分解速度（１〜２年）により制御される拡散であった。インキュベーション24時間以内のペーストペレットの分解のため20％パクリタキセル充填90:10 PDLLA:PCLペーストについての放出研究において困難に遭遇した。簡単には、インキュベーションの最初の12時間の間に、パクリタキセル放出の吸い込み条件を確実にするために、サンプルを１時間毎に採取した。90:10ペーストからの放出パクリタキセルは10時間以内で25〜35％であった。マウスにおける腫瘍増殖の消失に対するペースト処方物の効力を評価した（図 29）。簡単には、試験されるペーストは、PCL±20％パクリタキセル、80:20 PDL LA:PCL±20％パクリタキセル、90:10 PDLLA:PCL±20％パクリタキセル、およびP DLLA-PEG-PDLLA（30％PEG）±20％パクリタキセルであった。パクリタキセルを含む、90:10 PDLLA:PCLおよびPDLLA-PEG-PDLLAのペースト処方物は、それぞれ、 54％および40％、インビボで腫瘍増殖を低減した。対照的に、パクリタキセルを含む、PCLおよび80:20 PDLLA:PCLのペースト処方物は、腫瘍増殖に対してほとんどまたは全く効果を有さなかった。全てのコントロールペースト（薬物なし）は、腫瘍増殖に対して有意な効果を有さなかった。パクリタキセルのより速い放出速度を有するペースト処方物（90:10 PDLLA:PCLおよびPDLLA-PEG-PDLLA）はまた、腫瘍増殖の低減においてより効果的であった。これは重要な局所的濃度のパクリタキセルが腫瘍増殖阻害のために腫瘍部位で必要とされることを示唆する。パクリタキセルをゆっくりと放出するペースト処方物（例えば、PCLおよび80:20 P DLLA:PCL）は効果的でなかった。調べられた全てのペースト処方物は、マウスの体重に対して有意な効果を有さなかった。これは、パクリタキセル充填ペーストがインビボで十分に寛容であることを示す。これらのデータは、腫瘍部位におけるパクリタキセルの局所的適用が、全身性毒性を増大することなく局所的腫瘍増殖を阻害するために有効な治療ストラテジーであることを示唆する。パクリタキセル充填処方物が腫瘍増殖を完全に阻害し得ないことは、ほとんど恐らく、ポリマーからのパクリタキセルの不十分な放出およびMDAY-D2腫瘍の急速な増殖によるものである。20％パクリタキセルを含む9 0:10 PDLLA:PCLペーストより多くのパクリタキセルを放出し、そしてより効果的に腫瘍増殖を阻害した、30％パクリタキセルを含む90:10 PDLLA:PCLペーストの能力はこれに関して一致した。従って、ポリマーおよび化学療法剤の特性ならびに投与部位により調節される、パクリタキセルの放出速度の調節は、腫瘍増殖の阻害のための局所的治療の開発において重要な工程である。実施例12 PCLミクロスフェアの調製：スケールアップ研究ミクロスフェア（50g）を、以下に記載の溶媒蒸発法を用いるPCL（名目分子量 80,000）を用いて調製した。Ａ．方法塩化メチレン中の10％PCL500mlおよび１％PVA（分子量13,000〜23,000；99％水和）の4000ml溶液の調製物を、10時間40設定で加減抵抗器により制御されたホモミキサーを用いて乳化した。混合物を、ミクロスフェアが底に沈澱するまで＃ 140ふるいを用いて漉し、次いで上清をデカンテーションした。次いで、上清を蒸留水で３回洗浄し（沈降、続いてデカンテーション法を用いて）、次いで250m lの蒸留水に再懸濁し、そして濾過した。次いで、ミクロスフエアを37℃で一晩風乾した。Ｂ．結果ミクロスフェア収率は以下の通りであった： PCLの最初の重量＝50.1g 得られたミクロスフェアの重量＝41.2g ％収率＝（43.2/50.0）×100 ＝86.4 収率（10〜50μｍ）約72％平均サイズ21.4μｍ、中央値22.0μｍ、最頻値24.7μｍより狭いサイズ範囲（20〜40μｍ）を、ふるい分けまたは沈降法を用いた分離により得ることができる。実施例13 PLGAミクロスフェアの製造ミクロスフェアを、（PLLA）乳酸−グリコール酸（GA）コポリマーから製造した。Ａ．方法：ミクロスフェアを、標準的な方法を用いて0.5〜10μｍ、10〜20μｍ、および3 0〜100μｍのサイズ範囲で製造した（PCLまたはPDLLAミクロスフェア製造法において上記のように、ポリマーをジクロロメタンに溶解し、そしてポリビニルアルコール溶液に攪拌しながら乳化した）。種々の比のPLLA:GAを、異なる分子量を有するポリマーとして使用した[固有粘度（I.V.）として与えられる]。Ｂ．結果：ミクロスフェアを以下の開始ポリマーから首尾良く製造した： PLLA：GA I.V. 50：50 0.74 50：50 0.78 50：50 1.06 65：35 0.55 75：25 0.55 85：15 0.56 10％または20％充填のパクリタキセルを、全てのこれらのミクロスフェアに首尾良く組み込んだ。１つの出発ポリマー（85:15、IV＝0.56）のサイズ分布の例を図31〜34に与える。パクリタキセル放出実験を、種々のサイズのミクロスフェアおよび種々の組成物を用いて行った。放出速度を図35〜38に示す。実施例14 ２ブロックコポリマーポリ(DL-ラクチド)-ブロック-メトキシポリエチレングリコール(PDLLA-MePEG) 、ポリカプロラクトン-ブロック-メトキシポリエチレングリコール(PCL-MePEG) 、およびポリ(DL-ラクチド-コ-カプロラクトン)-ブロック-メトキシポリエチレングリコール(PDLLACL-MePEG)の２ブロックコポリマーを、バルク融解重合手順を用いて合成した。簡単には、所定の量のモノマー、DL-ラクチド、カプロラクトン、および異なる分子量を有するメトキシポリエチレングリコールを加熱して（ 130℃）、窒素のバブリングおよび攪拌下で融解した。触媒オクタン酸スズ（0.2 ％w/w）を融解モノマーに添加した。重合を４時間行った。分子量、臨界ミセル濃度、および最大パクリタキセル充填を、それぞれ、GPC、蛍光、および可溶化試験を用いて測定した（図39）。高いパクリタキセル保持能力を得た。パクリタキセルを可溶化する能力は、コポリマーの組成および濃度に依存する（図39および40）。PDLLA-MePEGは、最も安定な可溶化パクリタキセルを与えた（図40および41）。実施例15 ナイロンマイクロカプセルにおけるパクリタキセルのカプセル化Ａ．パクリタキセル充填マイクロカプセルの調製パクリタキセルを、界面重合技術を用いてナイロンマイクロカプセルにカプセル化した。簡単には、100mgのパクリタキセルおよび100mgのプルロニックF-127 を１mlのジクロロメタン(DCM)に溶解し、そして0.4ml（約500mg）の塩化アジポイル(adipoyl chloride)(ADC)を添加した。この溶液を、Polytronホモジナイザー（１設定）を用いて15秒間、２％PVA溶液中でホモジナイズした。５ml蒸留水中の1,6-ヘキサン-ジアミン（HMD）の溶液を、ホモジナイズの間滴下した。混合物を、HMD溶液の添加の後さらに10秒間ホモジナイズした。混合物をビーカーに移し、そして３時間磁気スターラーを用いて攪拌した。混合物を遠心分離し、回収し、そして１mlの蒸留水に再懸濁した。Ｂ．カプセル化効率／パクリタキセル充填約0.5mlの懸濁液を濾過し、そしてミクロスフェアを乾燥した。約2.5mgのミクロスフェアを秤量し、そして24時間10mlのアセトニトリルに懸濁した。上清をパクリタキセルについて分析し、そして結果をパクリタキセルの割合として表した。予備研究は、パクリタキセルが高い充填（60％まで）および高いカプセル化効率（80％を超える）でナイロンマイクロカプセルにカプセル化され得ることを示した。Ｃ．パクリタキセル放出研究約2.5mgのパクリタキセル-ナイロンミクロスフェアを、それぞれ１Mの塩化ナトリウムおよび尿素を含む50mlの水に懸濁し、そして定期的に分析した。マイクロカプセルからのパクリタキセル放出は、72時間後に放出された薬物の95％を超えて速かった（図42）。実施例16 ポリマー性ミセルパクリタキセル PDLLA-MePEGは、疎水性（PDLLA）および親水性（MePEG）領域を有するブロックコポリマーである。適切な分子量および化学組成で、それらは、疎水性PDLLA コアおよび親水性MePEG殻のミセルを形成する。パクリタキセルは、疎水性コアに充填され得、それにより増大した「可溶性」を有するパクリタキセルを提供する。Ａ．PDLLA-MePEG の２ブロックコポリマーの合成メトキシポリエチレングリコール（例えば、分子量2000、150g）およびDL-ラクチド（100g）のモノマーを、丸底フラスコに添加し、そして温度を130〜150℃ に上昇させる。モノマーの融解後、0.6gの触媒オクタン酸スズを添加する。重合を０時間以内に終える。反応は、N₂保護下であり、そして攪拌しながらである。Ｂ．ミセルパクリタキセルの調製 PDLLA-MePEGコポリマーを、アセトニトリルまたは50:50エタノール：アセトンに溶解する（ポリマー濃度＜40％）。ポリマー溶液を５分間遠心分離する（1400 0rpm）。上清（不溶性ポリマーは捨てる）を、ガラス試験管に移す。パクリタキセルをアセトニトリルまたは50:50エタノール：アセトンに溶解し、そして精製ポリマー溶液に添加する。ボルテックス混合の後、溶媒を、窒素流下で60℃で蒸発させる（代表的な40mgパクリタキセルバッチでは通常２時間かかる）。残渣溶媒を、真空および熱を適用することにより除去し得る。マトリックスを、それが透明なゲルになるまで約60℃で加熱する。次いで、特定の容量の水（マトリックス重量の４倍を超える）をマトリックスに添加する。この後すぐに、パクリタキセル／ポリマーマトリックスの可溶化までボルテックス混合する。処方物を表II に与える。表II．パクリタキセル／PDLLA-MePEG^*の処方物Ｃ．ミセルパクリタキセル／熱ゲル化ポリマーの送達系の調製熱ゲル化ポリマー（例えば、ポリ（N-イソプロピルアクリルアミド）を蒸留水に溶解する。別に、水をミセルパクリタキセル／ポリマーマトリックス（例えば、10％パクリタキセル充填PDLLA-MePEG 2000-40/60）に添加して、ミセルパクリタキセル溶液を形成する。両方の溶液を冷却し（例えば、４℃）、そして混合して熱ゲル化送達系を形成する。実施例17 薬物放出の分析既知量のポリマー（代表的に、2.5mgペレット）を、10mm Na₂HPO₄-NaH₂PO₄、0 .145m NaClおよび0.4g/lウシ血清アルブミンを含む14mlの緩衝液を含む15ml試験管に添加する。管にキャップをし、そして37℃で転がす。特定の時間で、14ml全ての液体緩衝液を除去し、そして新鮮な液体緩衝液で置換する。液体緩衝液を１ミリリットルの塩化メチレンに添加し、そして１分間振盪して、塩化メチレンへ全てのパクリタキセルを抽出する。次いで、水相を除去し、そして塩化メチレン相を窒素下で蒸発させる。次いで、残渣を60％アセトニトリル：40％水に溶解し、そして溶液を以下の条件を用いるHPLC系に注入する：C8カラム（Beckman Instruments USA）、流速１ml/分での58％:５％:37％のアセトニトリル：メタノール：水の移動相。次いで、回収された緩衝液を、232nmでパクリタキセルについて分析する。MTX のために、回収された緩衝液を、塩化メチレンにおける抽出を必要とせずにHPLC カラムに直接適用する。MTXを302nmで分析する。バナジウム含有化合物について、液体緩衝液を、200〜300nm範囲でUV/可視分光光度計を用いて直接分析する。実施例18 インビボでの腫瘍増殖および腫瘍血管新生に対するパクリタキセル熱ペーストの効果受精家禽胚を、それらの殻を除去する前に３日間インキュベートする。気室周辺に位置する殻を除去し、内側の殻の膜を切り、殻の反対側に穴をあけ、そして卵の内容物を丸くした端から穏やかにすべり出させることにより、卵の内容物を移す。内容物を、丸底滅菌ガラスボウルに移し、ペトリ皿カバーで覆い、そして 90％の相対湿度および３％の二酸化炭素でインキュベートする。 MDAY-D2細胞（マウスリンパ腫瘍）をマウスに注射し、そして0.5〜1.0gの重さの腫瘍に増殖させる。マウスを屠殺し、腫瘍部位をアルコールで拭き、摘出し、滅菌組織培養培地に置き、そして層流フード下で１mm片にさいの目に切る。９日齢ニワトリ胚上に切断した腫瘍を置く前に、CAM表面を腫瘍移植を保証するために30ゲージ針で穏やかにこする。次いで、腫瘍を、インキュベーションの８日後に（殻を除去した４日後）CAM上に置き、そして脈管供給を確立するために４日間CAM上で増殖させる。４つの胚をこの方法を利用して調製し、各胚は３つの腫瘍を受ける。これらの胚に対して、１つの腫瘍は20％パクリタキセル充填熱ペーストを受け、第２の腫瘍は未充填の熱ペーストを受け、そして第３の腫瘍は処置を受けない。処置は、結果を記録する前に２日間続けられる。外植されるMDAY-D2腫瘍は、（CAMに由来する）毛細血管の内増殖(ingrowth)を腫瘍塊に誘導し、そしてそれをあるサイズに増殖し続けさせる、血管新生因子を分泌する。腫瘍の全ての管はCAMに由来するが、一方全ての腫瘍細胞は外植片に由来するので、これらの２つのプロセスに対して独立して治療介入の効果を評価することは可能である。このアッセイを使用して、以下に対するパクリタキセル充填熱ペーストの有効性を決定した：（ａ）腫瘍の脈管化の阻害および（ｂ）腫瘍細胞自体の増殖の阻害。直接的インビボ実体顕微鏡評価およびこの研究からの固定組織の組織学的調査は以下を証明した。20％パクリタキセル充填熱ペーストで処置された腫瘍において、コントロール腫瘍と比較して（図70Aおよび70B）、腫瘍を供給する血管数の低減（図70Cおよび70Dを参照のこと）、腫瘍内の血管数の低減、および腫瘍周囲（代表的に、固形腫瘍において最も高度に脈管化する領域）の血管数の低減があった。研究が行われた２日間、腫瘍はサイズおよび質量が減少し始めた。さらに、多くの内皮細胞は、細胞分裂が休止されることを示された。これは、内皮細胞増殖が影響を及ぼされたことを示す。腫瘍細胞もまた、しばしば、有糸分裂が休止されることを示された。４つ全ての胚は、腫瘍脈管分布を抑制する20％パクリタキセル充填熱ペーストで一致したパターンを示したが、一方未充填熱ペーストは効果を有さなかった。比較すると、未充填熱ペーストで処置されたCAMにおいて腫瘍は、正常な周囲組織のものと比較した場合の管の数および密度における増大、およびパクリタキセル充填ペーストで処置された腫瘍で観察されたものより劇的に多くの管を有して十分に脈管化された。新たに形成された管は全ての角度から腫瘍に進入し、車輪の中心に接する輻のように出現した（図70Aおよび70Bを参照のこと）。コントロール腫瘍は、研究経過間にサイズおよび質量を増大し続けた。組織学的に、多くの横に広がった壁の薄い毛細血管は腫瘍周囲で示され、そして内皮が細胞分裂中であることはほとんど示されなかった。腫瘍組織は十分に脈管化され、そして至る所に生存した。例として、同じCAM上に配置された２つの同様のサイズ（最初、移植時）の腫瘍において以下のデータを得た。20％パクリタキセル充填熱ペーストで処置された腫瘍について、この腫瘍は330mm×597mmを測定した；腫瘍のすぐ周囲は14本の血管を有するが、一方腫瘍塊は３〜４本のみの小さな毛細血管を有する。未充填熱ペーストで処置された腫瘍について、腫瘍サイズは623mm×678mmであった；腫瘍のすぐ周囲は54本の血管を有するが、一方腫瘍塊は12〜14本の小さな毛細血管を有する。さらに、周囲のCAM自体は、パクリタキセル処置腫瘍の周囲領域と比較して多くの血管を含んだ。この研究は、熱ペーストが、腫瘍増殖および発達に付随する病理学的な血管新生を阻害する、十分な量の抗増殖剤（この場合パクリタキセル）を放出することを証明する。これらの条件下で、血管新生は、周囲組織から腫瘍塊への毛細血管の内増殖を誘導し得る血管新生因子を生成する腫瘍細胞により最高に刺激される。20％パクリタキセル充填熱ペーストは、このプロセスをブロックし、そして十分な血液供給を維持する腫瘍組織の能力を制限し得る。これは、腫瘍細胞自体に対する薬物の細胞傷害性効果、ならびに組織から増殖および拡大に必要とされる栄養分を奪うことの両方により腫瘍塊の減少をもたらす。実施例19 マウス腫瘍モデルにおけるインビボでの腫瘍増殖に対する治療剤充填熱ペーストの効果マウスMDAY-D2腫瘍モデルを使用して、腫瘍増殖、腫瘍転移、および動物生存に対する抗増殖化合物（例えば、パクリタキセル）の局所的な遅い放出の効果を調べ得る。簡単には、MDAY-D2腫瘍細胞株を、αMEM培地中の５％ウシ胎児血清からなる細胞懸濁液中で増殖させた。細胞を、５％二酸化炭素を補充した加湿雰囲気中で37℃でインキュベートし、そして十分な数の細胞が得られるまで３日毎に因数15で希釈する。インキュベーション期間の後、細胞を生存能力について光学顕微鏡により調べ、次いで1500rpmで５分間遠心分離する。PBSを細胞に添加して、1,000,000細胞/mlの希釈を達成する。 10週齢DBA/2j雌性マウスを到着後３〜４日順化させる。次いで、各マウスに、 100ml PBS中の100,000個のMDAY-D2腫瘍細胞を後側腹部において皮下に注射する。前の研究は、この手順が３〜４日で注射部位に目で見える腫瘍を生じ、14日で 1.0〜1.7gのサイズに達し、そして注射後19〜25日で肝臓に目に見える転移を生じることを示した。研究の目的に依存して、治療介入は、疾患進行の任意の時点で設けられ得る。上記の動物モデルを使用して、20匹のマウスに140,000個のMDAY-D2細胞を皮下注射し、そして腫瘍を増殖させる。５日目に、マウスを５匹のグループに分ける。腫瘍部位を外科的に麻酔下で開き、局所領域を、存在する腫瘍組織を妨害することなく薬物充填熱ペーストまたはコントロール熱ペーストで処置し、そして傷を閉じた。５匹のグループは、処置なし（単に傷を閉じた）、ポリマー（PCL）単独、10％パクリタキセル充填熱ペースト、または腫瘍部位に隣接して移植された 20％パクリタキセル充填熱ペースト（４匹の動物のみに注射した）のいずれかを受けた。16日目に、マウスを屠殺し、腫瘍を切り裂き、そして腫瘍増殖、腫瘍転移、処置から生じる局所的および全身的毒性、創傷治癒に対する効果、腫瘍脈管分布に対する効果、ならびに切開部位に残存するペーストの状態について（肉眼で見てそして組織学的に）調べた。各動物の腫瘍重量を以下の表IVに示す。表IV 腫瘍重量（gm）動物番号コントロールコントロール10%パクリタキセル20%パクリタキセル 20％パクリタキセル充填熱ペーストは、コントロール動物（平均重量0.681）と比較して85％以上腫瘍増殖を低減させた（平均重量0.105）。熱ペースト単独または10％パクリタキセルを含む熱ペーストで処置された動物は、腫瘍増殖に対して最も控えめな効果のみを有し；腫瘍重量は、それぞれ10％および35％しか低減されなかった（図43A）。従って、20％パクリタキセルを含む熱ペーストは、10 ％パクリタキセルを含む熱ペーストより腫瘍増殖の低減において効果的であった（図43Cを参照のこと；図43Bもまた参照のこと）。熱ペーストは、投与部位で動物の何匹かで検出された。0.026g〜0.078gの重量で変化するポリマーが、15匹のマウスのうち８匹で検出された。20％パクリタキセル充填熱ペーストを含むグループの全ての動物は、いくらかの残渣ポリマーを含んだ。これは、ポリマーが溶解しにくいことを示唆する。組織学的に、パクリタキセル充填熱ペーストで処置された腫瘍は、コントロール腫瘍より低い細胞性および大きな組織壊死を含んだ。脈管構造は低減され、そして内皮細胞は細胞分裂が休止されていることをしばしば示された。パクリタキセル充填熱ペーストは、組織周囲の皮膚または組織の完全性または細胞性に影響しないようであった。肉眼で見て、創傷治癒は影響しなかった。実施例20 マウスにおいて部分的に切除されたRIF-1腫瘍の再増殖を遅延するためのパクリタキセル充填外科用ペーストの使用 C3H/HeJマウスにおいて部分的に切除されたRIF-1腫瘍の再増殖遅延におけるパクリタキセルの生分解性ポリマー性徐放外科用ペースト処方物の有効性を調べた。Ａ．方法パクリタキセル（20％）を、ポリ（ε-カプロラクトン）およびメトキシポリエチレングリコールの4:1混和物に取り込んだ。37℃のアルブミン（0.4mg/mL）を含むリン酸緩衝化生理食塩水中のこの処方物についてのインビボ放出プロフィールを、パクリタキセルについてのHPLCアッセイを用いて調べた。簡単には、17 匹のマウスの右側腹部に、100μｌのハンクス緩衝液中のRIF細胞懸濁液（1.0×1 0⁶個細胞）を注射した。腫瘍を５日間増殖させ、この後、各腫瘍の70％を超えて外科的に切除し、そして残存腫瘍塊を未処置のままか、または20〜30μＬの外科用ペースト中の20％パクリタキセルもしくは外科用ペースト単独（薬物なし）のいずれかでコートした。これは０日目であった。皮膚の真下の目に見える腫瘍塊の寸法を４〜７日目および９日目に測定した。この目に見える円筒形腫瘍表面の面積が、腫瘍容積に相関することを示した（r=0.812）。Ｂ．結果パクリタキセルのインビボ放出曲線を、最初の１日のバースト相、続いて長期の遅い徐放により特徴付けられる。４〜７日目の各マウスからの目に見える円筒形腫瘍表面の面積を表Ｖに示す。パクリタキセルを受け取らなかった２グループのそれぞれにおいて１を除く全てのマウスは、４日目までに広範な腫瘍再増殖を示した。ポリマーのみを受け取った１匹のマウスは遅延した腫瘍再増殖を示したが、一方処置を受けなかった１匹のマウスは再増殖を示さなかった。対照的に、パクリタキセル外科用ペーストで処置された１匹以外の全てのマウスは、少なくとも５日目まで腫瘍再増殖を示さず、そして２匹のマウスは６日目までもなお再増殖を示さなかった。Ｃ．結論パクリタキセル充填ペーストは、１〜５日目で腫瘍再増殖を有意に阻害した。再増殖は、細胞株の攻撃性により６日後に生じた。表Ｖ腫瘍切除手術後の日で測定されたRIF-1細胞腫瘍のサイズ（皮膚の真下の目に見える腫瘍塊の面積として表す（mm²）） ⁵ 腫瘍を測定しなかったか、または動物を既に屠殺した。実施例21 スラミンのカプセル化ジクロロメタン（「DCM」）中の５％ELVAX（５％酢酸ビニルで架橋したポリ（エチレン-ビニルアセテート））１ミリリットルを、固定重量のミクロン以下の粉にしたスラミンナトリウムと混合する。この混合物を、30ml平底試験管中の水中の５％ポリビニルアルコール（「PVA」）５mlに注入する。次いで、異なる重量の薬物を含む管を、自動攪拌しながら40℃で90分間、マルチサンプル水浴に吊るす。混合物を除去し、そしてミクロスフェアサンプルをサイズ分析のために採取する。管を1000gで５分間遠心分離する。PVA上清を取り出し、そして分析のために蓄える（カプセル化薬物なし）。次いで、ミクロスフェアを５mlの水で洗浄し（ボルテックスし）、そして再遠心分離する。５mlの洗浄液を分析のために蓄える（表面結合薬物）。次いで、ミクロスフェアを50μｌのメタノールで湿らせ、１mlのDCM中でボルテックスしてELVAXを溶解する。次いで、ミクロスフェアを 40℃まで暖め、そして５mlの50℃の水を攪拌しながらゆっくりと添加する。この手順は、DCMの即座の蒸発をもたらし、それにより５mlの水へのスラミンナトリウムの放出を引き起こす。全てのサンプルを、蛍光定量により薬物含有量についてアッセイした。簡単には、スラミンナトリウムは、312nmのλ最大でUV/可視を吸収する。この吸収は、水および５％PVAの両方において０〜100μｇ/ml範囲で線形である。スラミンナトリウムはまた、312nmの励起最大および400nmの発光最大で強力に蛍光を発する。この蛍光は０〜25μｇ/ml範囲で定量可能である。これらの実験の結果を図44〜50に示す。簡単には、数による（図44）または重量による（図45）ミクロスフェアのサイズ分布は、DCM中の薬物の含有により影響されないようである。20〜60μｍ範囲でのミクロスフェアの良好な収率が得られ得る。スラミンのカプセル化は、非常に低い（＜１％）（図47を参照のこと）。しかし、薬物重量がDCM中で増大するにつれて、カプセル化された薬物の総量は増大するが、％カプセル化は減少する。図46に示されるように、50μｇの薬物は50mg のELVAXにカプセル化され得る。10％NaClを含む2.5％PVA中のスラミンナトリウムのカプセル化を図48に示す（重量によるサイズ分布）。10％NaClを含む５％PV A中のスラミンナトリウムのカプセル化を図49および50に示す（それぞれ、重量および数によるサイズ分布）。潜在的な抗血管新生剤としてのスラミンおよび酢酸コルチゾンを評価するために、各薬剤を0.5％メチルセルロースと混合し、そして薬剤を含む乾燥ディスクを６日齢CAMの発達している血管に適用した。スラミン（70μｇ）の酢酸コルチゾン（20μｇ）との組み合せ処置は、48時間CAM上で試験した場合、血管新生の阻害において成功した。得られた無脈管領域は直径が6mmあり、そして血流の非存在およびまばらな血島の出現を明らかにした（図51Aおよび51B）。実施例22 メトトレキサート充填ペーストＡ．メトトレキサート充填ペーストの製造メトトレキサート（「MTX」；Sigma Chemical Co.）を乳棒および乳鉢で粉にして、粒子サイズを５ミクロン以下に減らした。次いで、乾燥粉末としてポリカプロラクトン（分子量18000 Birmingham Polymers，AL USA）と混合する。混合物を65℃で５分間加熱し、そして融解したポリマー／メトトレキサート混合物を、５分間、平滑なペーストに入れてかき混ぜる。次いで、融解ペーストを１mLのシリンジに採取し、そして所望であれば押し出す。Ｂ．結果結果を図52A〜Eに示す。簡単には、図52Aは、20％MePEGおよび種々の濃度のMT Xを含むPCLディスクからのMTX放出を示す。図52Bは、MePEGを含まないペーストについての同様の実験を示す。図52C、D、およびEは、ディスクに残存するMTX量を示す。上記の結果により示され得るように、MTXの実質的な量は、高MePEG濃度を利用する場合のポリマーから生じ得る。実施例23 メトトレキサートを含むミクロスフェアの製造Ａ．MTX のみを含むミクロスフェアメトトレキサート（Sigma）を乳棒および乳鉢で粉にして、粒子サイズを５ミクロン以下に減らした。100ミリリットルの水中の2.5％PVA(w/v)(Aldrichまたは Sigma)を、25℃で500mgの粉にしていないMTXと共に15分間攪拌して、溶液をMTX で飽和させた。次いで、この溶液を2000rpmで遠心分離して、溶解してないMTXを除去し、そして上清をミクロスフェアの製造において使用した。簡単には、10:90w/w MTX(粉にした)：ポリマーを含む、ポリ(DL)乳酸（分子量 500,000；Polysciences）、ポリ乳酸：ポリグリコール酸（50:50 IV 0.78 Polys ciences）またはポリカプロラクトン（分子量18,000、BPI）の５％w/v溶液10ml を、600rpmで攪拌しながら、MTX飽和したPVA(AldrichまたはSigma)の2.5w/v％溶液の100mlにゆっくりと滴下した。混合物を25℃で２時間攪拌し、そして得られたミクロスフェアを洗浄し、そして乾燥した。この方法を用いて、MTX充填ミクロスフェアを、30〜160ミクロン範囲で再現的に製造し得る（図53を参照のこと）。Ｂ．MTX およびヒアルロン酸を含むミクロスフェア MTX充填ミクロスフェアを、本質的に以下に記載するように、油中水型エマルジョン製造法によりキャリアとしてヒアルロン酸（「HA」）を用いて作製し得る。簡単には、50mlのパラフィン油（軽油；Fisher Scientific）を200rpmで攪拌しながら60℃まで暖める。種々の量のMTXを含む、水中のヒアルロン酸ナトリウム（20/mL）；供給源＝雄鶏のとさか、Sigma）の５mL溶液をパラフィン油に滴下する。混合物を200rpmで５時間攪拌し、500×gで５分間遠心分離する。得られたミクロスフェアをヘキサンで４回洗浄し、乾燥させる。実施例24 バナジウム化合物を含むポリマー性組成物の製造Ａ．バナジルサルフェートを含むポリマー性ペーストバナジルサルフェート（Fisher Scientific）を最初に乳棒および乳鉢で粉にして、粒子サイズを減らし、次いでMTXについて上記のように融解PCLに分散させる。次いで、シリンジに採取して凝固させると使用のために準備ができている。薬物放出を10％w/w VOSO₄:PCLの65mgペレットを10mlの水に懸濁し、そして上清を、200〜300nm範囲でのピークのUV/可視吸光度分光測定法を用いて放出バナジルサルフェートについて分析した以外は、本質的に上記の実施例31のように決定した。結果を図54に示す。簡単には、10％VOSO₄を含むポリマー性組成物から、１mg のVOSO₄が６時間で、３mgが２日目後に、そして５mgが６日目に放出された。Ｂ．バナジルサルフェートを含むポリマー性ミクロスフェアバナジルサルフェートを、本質的に実施例23に記載のようにポリ乳酸またはヒアルロン酸のミクロスフェアに取り込んだ。結果を図55に示す。Ｃ．有機バナジウム酸塩を含むポリマー性ペースト有機バナジウム酸塩を、本質的に実施例22に上記されるようにPCLペーストに充填する。ミクロスフェアからのバナジウム酸塩放出を、上記のように決定した。結果を図56Aおよび56Bに示す。Ｄ．有機バナジウム酸塩を含むミクロスフェア有機バナジウム酸塩もまた、本質的に実施例23に記載のようにミクロスフェアに充填し得る。このようなミクロスフェアを、ポリD,L乳酸（分子量500,000；Po lysciences）について図57に示す。実施例25 ビス（マルトラト）オキソバナジウム(BMOV)を含むポリマー性組成物Ａ．ビス（マルトラト）オキソバナジウム充填ペーストの作製ポリ（E-カプロラクトン）（分子量20000）(BPI Birmingham Al)およびBMOVを、適切な比率でガラスビーカー内で直接秤量した。いくつかの処方物において、メトキシプロピレングリコール（MEPEG）（分子量350）(Union Carbide，Danb ury CT.)もまたPCLおよびBMOVに添加した。ビーカーおよび内容物を、BMOVが融解ポリマーに完全に分散するまで、５分間穏やかに攪拌しながら55℃まで暖めた。次いで、融解混合物を予め暖めたシリンジに採取し、そして使用まで４℃で保存した。Ｂ．薬物放出研究 15mlの10mMリン酸緩衝化生理食塩水（PBS pH7.4）および100μg/mlウシ血清アルブミン（画分５Boehringer Mannheim，Germany）を含む管に、150mgのディスク型スラブのPCL-BMOVペーストに添加した。管を封印し、そして37℃にて30rpm で回転させながら転がした。適切な時間で、PCL-BMOVスラブを５分間重力下で沈澱させ、そして全ての上清を除去した。BMOV濃度を、256nmでの吸光度（A256）および276nmでの吸光度（A276）を測定することにより上清中で決定した。上清を15mlの新鮮なPBSで置換し、そして管を再度転がした。BMOV濃度対A276またはA 276の直線的な検量線を、０〜25μｇ/ml範囲のBMOV標準を用いて得た。これらの標準の256nmまたは276nmでの吸光度値は、37℃で２〜３日間の密封管での保存により影響されないことが示された（同じ条件を薬物放出研究に使用した）。薬物放出実験の終わりに、PCL-BMOVマトリックスのサンプルを、0.5mlのジクロロメタン(DCM)(Fisher)における既知乾燥重量のマトリックスの溶解により残存薬物含有量についてアッセイした。この溶液に、50mlの温水（50℃）を混合しながら添加して、分光側光法分析（A256）用の水にBMOVを残してDCMを蒸発させた。Ｃ．走査型電子顕微鏡（SEM）２ヶ月の薬物放出実験に使用したPCL-BMOVマトリックスのサンプルをSEMを用いて調べた。これらのサンプルを、新鮮に調製されたコントロールサンプルと比較した。ポリマーサンプルを、コートし（60:40の金：パラジウム）（Hummer in struments，Technics，USA）、そしてIBMデータ収集システムを有するHitachi( モデルF-2300)走査型電子顕微鏡を用いて調べた。Ｄ．結果 BMOVのPCLマトリックスからの放出を図58Aおよび58Bに示す。PCLマトリックス中の５％から35％へのBMOV充填の増大は、２ヶ月の期間にわたる薬物放出速度を増大させた（図58A）。35％BMOV充填で、放出速度は劇的に増大した。20％〜30 ％のBMOV充填についての放出プロフィールは、最初の２日で最初のより急速な薬物放出相、続いてその次の２ヶ月にわたって制御されたほとんどゼロオーダーの放出を示した。薬物放出プロフィールはまた、ペレット中に残存する薬物の％によって表される。簡単には、PCLマトリックス中に残存するBMOVの％は、30％までの（および含む）全てのBMOV充填について全ての時点でほとんど同一であり、その結果、最初のBMOVの65％〜80％は２ケ月後になお存在した（25％および30％BMOV充填についての結果のみを、明瞭のために図58Bに示す）。マトリックス中に残存する薬物の割合は、充填35％BMOVでより急速に減少し、その結果、最初のBMOVの50％を少し多く１ヶ月後にマトリックス中に存在した。累積薬物放出データを証明するために、PCL-BMOVマトリックスのサンプルを、各薬物放出実験での終わりでの残存薬物含有量についてアッセイした。この残渣アッセイにより決定される70日で残存している％薬物は以下の通りである：67％+/-10％（５％BMOV）、56％+/-10 ％（10％BMOV）、80％+/-20％（15％BMOV）、84％+/-20％（20％BMOV）、85％+/ -12％（25％BMOV）、77％+/-14％（30％BMOV）、および57％+/-15％（35％BMOV ）。図59Aおよび59Bは、種々の充填濃度のBMOVについての薬物放出プロフィールに対する20％MEPEGのPCLマトリックスへの添加の効果を示す。MEPEGのPCLマトリックスへの添加は、PCL単独からのBMOVの放出と比較して、劇的にBMOVの放出速度を増大させる（図58）。50％を超えるBMOVが、７日から１週間以内に、全てのBM OV充填濃度でポリマーマトリックスから放出された。PCL-BMOV-MEPEGペレットの残渣分析は、ペレット中に７日で残存するBMOV％について以下の値を与えた：24 ％(+/-9％)、５％BMOV；25％(+/-8％)、10％BMOV；22％(+/-4％)、15％BMOV；27 ％(+/-7％)、20％BMOV。図60Aは、高倍率下でのBOMV結晶の形態を示す。図60Bおよび60Cは、水性緩衝液中での２ヶ月薬物放出研究の前および後両方のポリマー薬物マトリックスの形態を示す。15％、20％、および30％BMOV充填についてのPCL-BMOVマトリックスは、代表的に放出研究前にそれらの外面上で平滑であり、そして代表的なSEMを図6 0Bに示す。２ヶ月間の水性緩衝液中でのインキュベーション後に、外表面は粗く、そしてあばたがある。Ｅ．議論この化合物は、バナジウムの持続濃度の維持にほとんど理想的な放出特徴を有して、PCLマトリックスから非常にゆっくりと放出することが見出された。これらの特徴は、ほとんどの薬物充填で、最初の２、３日における薬物放出の小さなバースト効果、続いてほとんどゼロオーダーの放出キネティクスのみを含んだ（図58）。BMOVは、バナジルサルフェートまたはオルトバナジウム酸ナトリウムほど水溶性でなく、そして分子の疎水性は、恐らく、疎水性PCLマトリックスに対するBMOV分子の親和性を増大し、そして水性インキュベーション媒体への薬物放出速度を減少させる。 20％MePEGのPCLへの添加は、マトリックスの粘度およびポリマーが凝固する温度を低減させることによりペーストの熱流動特性を改善することが示された。これらの特性は、部位のより良好な適用範囲がこれらの条件下で得られるので、ペーストを管周囲腫瘍部位における適用に重要である。MEPEGのBMOV-PCLペーストマトリックスへの添加は、BMOV-PCL（MEPEGなし）（図58）からの放出速度と比較して、全てのBMOV充填濃度（５％〜20％）で、インビトロでのBMOV放出速度を増強することが示された（図59）。５％BMOV充填PCL-MEPEGペーストは、１日あたり500〜1000μｇのBMOV（これは、35％BMOV充填PCLからの放出速度と同様であった）を放出することが示された。実施例26 ビス（マルトラト）オキソバナジウム充填熱ペーストのインビトロおよびインビボ効力 BMOV充填ポリマー性PCL熱ペーストを上記のように調製し、そしてインビトロおよびインビボの両方での腫瘍細胞株に対するその効力に対して試験した。Ａ．ヒト腫瘍細胞株 HT-29結腸、MCF-7乳房、およびSKMES1非小細胞肺のヒト腫瘍細胞株を、アメリカンタイプカルチャーコレクションから得た。HT-29結腸細胞株を10％熱不活化ウシ胎児血清(HIFBS)を含むRPMI 1640中で、MCF-7乳房細胞株を５％HIFBS＋10-9 Mインスリンを含むIscove改変イーグル培地中で、SKMES1肺細胞株を10％非熱不活化FBSを含むイーグル最小必須培地中で培養した。Ｂ．正常ヒト骨髄細胞正常ヒト骨髄（腫瘍細胞について組織学的に陰性）を、それらの固形腫瘍に対する骨髄移植を有する予定であったが、骨髄を使用する前に死亡した患者から得た。遠心分離の後、バフィーコートを取り出し、そして細胞を溶解緩衝液で処理し、そして20％HIFBSを含むRPMI 1640で２回洗浄し、次いでそれに再懸濁した。細胞を25gの針を通して採取し、そして計数した。Ｃ．放射線分析（Bactec）システム Bactecシステム（Johnston Laboratories，Towson，MD）は、血液培養物中の細菌を検出するために開発された臨床器具に基づき、そして新規の抗新生物剤をスクリーニングするために使用されてきた。この放射線分析システムは、細胞傷害性の指標として¹⁴Ｃグルコースの¹⁴CO₂への変換阻害を利用する、迅速な半自動システムである。Bactec機械は、¹⁴CO₂を、放射性標識CO₂の信号を１〜1000のスケールの比例した電気信号または増殖指数値に変えるイオン室に自動的に流す。連続暴露のために、腫瘍細胞または正常骨髄細胞を、２uCの¹⁴Ｃグルコース＋最終濃度0.01、0.1、１、10、25および50μＭのBMOVを含む２mlの適切な増殖培地に添加し、そして５％CO₂および空気の混合物を含む、20mlのゴムで栓をした血清バイアルに注入し、そして37℃で24日間インキュベートした。さらなる１時間の暴露のために、細胞および同じ最終濃度のBMOVを、15mlポリプロピレンコニカル(conical)中で、37℃の水浴において１時間インキュベートした。次いで、細胞を遠心分離し、そして培地で洗浄し、次いで２uCiの¹⁴Ｃグルコースを含む２mlの適切な増殖培地に再懸濁し、そして５％CO₂および空気の混和物を含む、2 0mlのゴムで栓をした血清バイアルに注入し、そして37℃で24日間インキュベートし、腫瘍細胞株については６、９、12日目に、および骨髄細胞については６、 15、および24日目にバイアルを取り出し、そして¹⁴Ｃグルコースの代謝の際に細胞により生成される¹⁴CO₂量の測定用のBactec器具に挿入した。BMOV処理細胞の増殖指数値を非処理細胞の増殖指数値と比較し、そして未処理コントロールと比較した％生存を計算した。Ｄ．切除された腫瘍の研究７週齢の雄C3H/HeJマウスをこれらの研究に使用した。RIF-1(マウス放射線誘導された線維肉腫)細胞を、10％FBS（Gibco Canada）を含むα-MEM培地中で培養した。細胞を、１×10⁷個細胞/mlの濃度で１％ハンクス緩衝化塩溶液（HBSS pH7 .4）（Gibco Canada）に懸濁した。100マイクロリットルのこれらの細胞（１×1 0⁶個細胞）を各マウスの右側腹部注射した。腫瘍を５日間増殖させた（この時点で、腫瘍は直径が６〜８mmの範囲である）。５日目に、マウスをケタミン：ロムポム（70mg/kg:10mg/kg）の組み合せ（0.02ml/g）で麻酔した。腫瘍の縁から５m m切開し、そして各腫瘍の約90％を除去し、そして150mgの融解（50℃）PCL-BMOV またはPCL単独（コントロール）を、500μlシリンジから切除腫瘍部位の全表面に押し出した。PCLは30秒以内に凝固し、そしてその領域を5-0プロレン縫糸で閉じた。マウスを、４、５、６、および７日目に調べた。それぞれの日に、腫瘍を測定し（長径および短径）、そして画像をとった。腫瘍が９mmの最大直径に達すると、マウスを屠殺し、そして腫瘍領域を将来的な組織学的研究のために摘出した。結果を図63に示す。Ｅ．腫瘍阻害研究 MDAY-D2造血細胞株（Dr.J Dennis，Mount Sinai Hospital，Torontoから得た）をプレートするか、または５％FBS（Gibco Canada）を含むDMEMの懸濁液中で増殖させた。各マウスに、100μｌ PBS中の４×10⁵個細胞を後側方に皮下注射した。５日の腫瘍増殖後に、150mgのPCLまたはPCL-BMOV融解ペーストを、各マウスの腫瘍部位に隣接した領域に移植した。15日後、マウスを屠殺し、秤量し、そして腫瘍を切り裂き、そして秤量した。結果を図62に示す。Ｆ．結果および議論正常なヒト骨髄細胞に対して、１時間暴露のBMOVはまた、50μMの濃度でさえもほとんど効果を有さなかった。連続暴露を用いた骨髄細胞に対するBMOVの効果はなおあまり著しくなく、感受性（49％生存）は50μＭ濃度のみで観察された。従って、BMOV化合物は、試験された濃度および暴露であまり骨髄抑制性ではないようであった。この研究において、BMOVの抗新生物効果は、薬物に対する連続暴露を確実にする条件下で３つのヒトガン細胞株に対してインビトロで示された。しかし、インビボでは、この効果は、腫瘍細胞のBMOVへの連続暴露に依存し得る。この研究の主な目的は、低濃度のバナジウム（BMOV形態）の連続供給を提供し得る生分解性ポリマー送達系を設計し、そして（インビボで）試験することであった。インビボ実験は、PCL-BMOVペーストの単一投与がMDAY D2腫瘍増殖を皮下的に阻害することを示した。図62は、コントロールマウス（PCL-BMOVなし）ならびに 25％、30％、および35％BMOV充填PCLで処置されたマウスからの腫瘍重量についてのデータを示す。25％BMOV充填PCLについては腫瘍増殖の54％阻害があった（p ＜0.05で有意）。30％および35％BMOV充填は、それぞれ腫瘍増殖の76％および80 ％阻害を生じ、そして35％BMOVグループにおける６匹のマウスのうちの１匹が腫瘍の完全な根絶を示した。興味深いことに、インビボ薬物放出プロフィールは、25％および30％からなるペーストが、以前に効力を示した１日あたり約500μｇのBMOV放出することを示した。しかし、腫瘍増殖の低減において最も効果的であった35％BMOV充填PCLペーストは、インビトロでのこの薬物量の約２倍を放出した。これらのデータは、低量のバナジウム化合物の徐放が、毎日のバナジン酸塩投与レジメと比較して、等しくまたはより効果的な抗新生物レジメであることを証明する。 PCL-BMOVペーストは腫瘍増殖の阻害において等しく効果的であったが、マウスはストレスおよび重量喪失の徴候を示さなかった。高用量のバナジン酸塩の毎日の注射により一般に観察されたストレスおよび重量喪失の増大は、投与直後の血漿中の高バナジン酸塩レベルにより誘導される毒性に非常に関連するらしい。長期のバナジン酸塩の徐放を提供するPCL-BMOVペーストを用いて、血漿バナジン酸塩濃度中の大きな変動を低減し、そしてバナジン酸塩により誘導される毒性を予防し得る。これらのデータは、BMOVの遅い徐放が腫瘍増殖の低減において等しいかまたはより効果的であり、そしてバナジン酸塩より誘導される毒性を予防するという本発明者らの仮説と一致する。実施例27 マウスにおける腫瘍増殖に対するBMOVミクロスフェアの効果本研究の目的は、マウスにおける腫瘍増殖を後退する、BMOV充填PLLAミクロスフェア（20％）の能力を試験することであった。 24匹のマウスのうち20匹に、10×10⁶細胞/mlの密度を有する100mlのMDAY-D2細胞を皮下注射した。６日目に、マウスを６つのグループに分けた。グループ１、空のコントロール、グループ２、腫瘍コントロール、グループ３は、１日に２回 0.25mg/100μｌのBMOVを皮下注射した。グループ４は、５mgのBMOVを含む20mgの PLLAミクロスフェアを腹腔内注射した。グループ５は、６日目および９日目に、それぞれ10mgのBMOVミクロスフェアを腹腔内注射した。グループ６は、６日目および９日目に10mgのBMOVミクロスフェアを筋肉内注射した。16日目に、マウスを屠殺し、そして腫瘍を切り裂いた。これらの実験結果を以下の表VIおよびVIIに示す。表VI コントロールグループおよび処置グループにおけるマウスの体重表VII コントロールグループおよび処置グループの腫瘍重量実施例28 制御放出ポリマー性薬物送達システム：ポリ（ε-カプロラクトン）(PCL)熱ペーストおよびPCL-メトキシポリエチレングリコール(PCL-MePEG)熱ペーストからの有機バナジウム錯体のインビトロ薬物送達プロフィールの比較研究本研究を、ポリ（ε-カプロラクトン）(PCL)熱ペーストおよび／またはPCL-メトキシポリエチレングリコール(PCL-MePEG)熱ペースト中のバナジウムの４つの有機錯体形態（BMOV，BEMOV、V5、PRC-V）のカプセル化およびインビトロ放出キネティックスを調べるために行った。Ａ．方法定量分析（UV/可視分光計分析）を、ピーク吸光度の波長および較正式を得るために異なる濃度のバナジウム溶液を用いて行った。バナジウムの溶解度を、アルブミンを含む10mMリン酸緩衝化生理食塩水(PBS/ALB)(pH7.4)中で研究した。１％、５％、10％、および20％（PCL中のバナジウム錯体％）のバナジウムの各有機錯体形態を、生分解性ポリマーPCLおよび／またはPCLとMePEG（分子量350）とのブレンドにカプセル化して、「熱ペースト」と呼ばれるポリマー性薬物送達産物を生成した。熱ペーストからのバナジウムの種々の形態のインビトロ放出研究を、UV/可視吸光度分光学により測定されるバナジウム放出を用いて、PBS/ALB中で37℃で行った。Ｂ．結果結果を図64〜68に示す。簡単には、BMOV、BEMOV、およびV5のピーク吸光度は2 76nmで生じ、そしてPRC-Vの吸光度は266nmであった。バナジウムの各形態の溶解度の速度および程度は、V5＞BMOVおよびBEMOV＞PRC-Vの順であった。インビトロ放出研究は、熱ペーストから放出される薬物の速度が、（１）薬物溶解度の増大、（２）薬物濃度の増大、および（３）熱ペーストに取り込まれるMePEG量の増大と共に増大することを示した。Ｃ．結論バナジウムの制御用量は、（薬物としての）バナジウムの異なる形態を使用することにより、PCL中のバナジウムの特定の形態の％充填を変えることにより、またはMePEGをPCLに含ませることによりPCL熱ペーストから放出され得る。バナジウムの特定の形態の％充填を変えることは短期間の放出速度を制御し得るが、制御用量の送達は、莫大な（および潜在的に毒性の）薬物（PCL中の）貯蔵物の動物への移植を含み得る。従って、バナジウムの代替形態の使用またはMePEGのP CLへの含有は、制御用量のバナジウムを送達する代替方法を提供し得る。実施例29 カンプトセシンのPCL熱ペーストへのカプセル化および抗血管新生分析Ａ．カンプトセシンのPCLへの取り込みカンプトセシンを乳棒および乳鉢で粉にして、粒子サイズを５ミクロン以下に減らした。次いで、ポリカプロラクトン（分子量18,000 Birmingham Polymers， AL USA）と共に乾燥粉末として混合した。混合物を65℃で５分間加熱し、そして融解したポリマー／薬剤混合物を平滑なペーストに５分間かきまぜた。次いで、融解ペーストを１mlシリンジに採取し、そして押し出して３mgのペレットを形成した。次いで、これらのペレットをCAM上に置いて、それらの抗血管新生特性を評価した。Ｂ．結果カンプトセシン充填熱ペーストは、コントロールPCLペレットと比較した場合、血管新生の阻害において効果的であった。５％薬物充填で、試験したCAMの4/5 は、強い血管新生阻害を示した。さらに、１％および0.25％充填で、CAMの2/3および3/4は、それぞれ血管新生阻害を示した。従って、カンプトセシンが十分にP CL熱ペーストから放出され、そして治療的抗血管新生効力を有することは、これらの結果から明らかである。実施例30 S-ホスホネート充填熱ペーストの製造この研究において、本発明者らは、抗新生物活性を有するエーテル脂質である s-ホスホネートがPCL熱ペーストに首尾良く取り込まれ、そしてCAMアッセイにおいて効力を示すことを証明した。Ａ．S- ホスホネート充填ペーストの製造ポリカプロラクトン（Birmingham Polymers，Birmingham，AL）およびs-ホスホネートを、55℃で２分間適切な比率ですりつぶした。次いで、融解混合物を、３mg半球ペレットにピペットで移し、そして４℃で凝固させた。Ｂ．CAM バイオアッセイ受精家禽胚（Fitzsimmons Consulting＆Research Services Ltd.,B.C.）を４日間インキュベートし、次いで窓をつけた。簡単には、殻および殻内側の膜を、卵（気室部位）の平滑な端から除去することにより、小さな穴（直径が約２cmある）を形成し、次いで暴露された領域を滅菌パラフィルムワックスで密封した。次いで、卵を、窓を真上にしてさらに２日間37℃でインキュベーターに置く。インキュベーションの６日目に、s-ホスホネート充填ポリマーまたはコントロール（薬物なし）ポリマーの３mgペレットを、増殖しているCAM管の表面上に置いた。２日の暴露後（インキュベーションの８日目）、脈管構造をContaxカメラシステムに合わせた実体顕微鏡を用いて調べた。管のコントラストを増大させ、そして任意のバックグラウンド情報を遮断するために、画像化の前に、１mlの脂質内 (intralipid)溶液(Abbott Labratories)をCAMに注入した。Ｃ．結果０％、１％、２％、４％、および８％のs-ホスホネートで充填されたPCLペレットは、CAMにおいて用量依存性抗血管新生反応を誘導した。抗血管新生反応は、s-ホスホネート充填ペレット直下の領域における血管の非存在により特徴づけられる。コントロールCAMにおいて見られる密集した毛細血管ネットワークの正常な増殖は、s-ホスホネート処置CAMにおいて明らかに阻害された。より高い濃度（４％および８％）で、処置されたCAMは、薬物／ポリマーペレット付近で構造的に変えられた。この変化は、s-ホスホネート／ポリマーペレットに直ぐ隣接したCAMの著しい肥厚化、およびペレット直下の膜の薄弱化を含んだ。s-ホスホネートで処置されたCAMの全てにおいて、無脈管ゾーンは２日間の暴露後に明らかであった；これは、面積が約３mm²の毛細血管ネットワークが全くない領域として定義された。実施例31 チロシンキナーゼインヒビターのPCL熱ペーストへのカプセル化およびCAMアッセイを用いた分析チロシンキナーゼインヒビターを乳棒および乳鉢で粉にして、粒子サイズを５ミクロン以下に減らした。次いで、それらを、ポリカプロラクトン（分子量1800 0 Birmingham Polymers，AL USA）と共に乾燥粉末として混合した。混合物を65 ℃で５分間加熱し、そして融解ポリマー／薬剤混合物を５分間かき混ぜて、平滑なペーストにした。次いで、融解ペーストを１mlシリンジに採取し、そして押し出して３mgのペレットを形成した。次いで、これらのペレットをCAMアッセイで試験した。CAMアッセイにおいて試験されたチロシンキナーゼインヒビターとして、ラベンダスチネク、エルブスタチン、ハービマイシン、およびゲニステインが挙げられる。これらの薬剤の抗血管新生阻害効果を比較すると、ハービマイシン（PCL中２％）が、試験されたCAMの4/4において無脈管ゾーンを誘導して最も強力であった。実施例32 ビンカアルカロイドのPCL熱ペーストへのカプセル化およびCAMアッセイを使用した分析Ａ．インヒビターのPCL熱ペーストへの取り込みビンカアルカロイド（ビンブラスチンおよびビンクリスチン）を乳棒および乳鉢で粉にして、粒子サイズを５ミクロン未満に減らした。次いで、それらを、ポリカプロラクトン（分子量18000 Birmingham Polymers，AL USA）と共に乾燥粉末として混合した。混合物を65℃で５分間加熱し、そして融解したポリマー／薬剤混合物を５分間かき混ぜてなめらかなペーストにした。次いで、融解したペーストを１mlシリンジに採取し、そして押し出して、３mgのペレットを形成した。次いで、これらのペレットをCAMアッセイで試験した。Ｂ．結果 CAM上で処方物を試験した場合、薬剤が、生物学的効果を誘導するのに十分な量でPCLペレットから放出されたことは明らかであった。ビンブラスチンおよびビンクリスチンの両方は、コントロールPCL熱ペーストペレットと比較した場合、CAMアッセイにおいて抗血管新生効果を誘導した。 0.5％および0.1％薬物充填の濃度で、ビンクリスチンは、試験された全てのCA Mにおいて血管新生阻害を誘導した。２％を超える濃度を試験した場合、毒性薬物レベルが達成され、そして期待されない胚の死が生じた。ビンブラスチンはまた、0.25％、0.5％、および１％の濃度でCAMにおいて血管新生を阻害することに効果的であった。しかし、２％を超える濃度で、ビンブラスチンはまた胚に対して毒性であった。実施例33 生体接着ミクロスフェアＡ．生体接着ミクロスフェアの調製 10〜60μmの粒子直径範囲のミクロスフェアを、100kg/モルPLLAから作製した。ミクロスフェアを水酸化ナトリウム溶液中でインキュベートして、ポリエステルの加水分解により表面上にカルボン酸基を生成した。反応を、表面電荷を測定することにより水酸化ナトリウム濃度およびインキュベーション時間に関して特徴づけた。反応は、0.1M水酸化ナトリウム中での45分のインキュベーション後に完全に達した。塩基処理後、ミクロスフェアを、DECのアルコール溶液中でミクロスフェアを懸濁し、そして混合物を分散性粉末に乾燥させることにより、架橋剤であるジメチルアミノプロピルカルボジイミド(DEC)でコートした。ミクロスフェア：DECの重量比は９：１であった。ミクロスフェアが乾燥した後、それらをポリ（アクリル酸）２％w/v溶液に攪拌しながら分散させ、DECをPAAと反応させて、ミクロスフェア表面上に架橋PAAの水不溶性ネットワークを生成した。走査型電子顕微鏡を使用して、ミクロスフェアの表面上にPAAの存在を確認した。塩基での処理前後のミクロスフェアの示差走査型熱量測定は、大半の(bulk)熱特性（Tg、融解、および結晶度）における変化が走査型電子顕微鏡により観察されないことを明らかにした。Ｂ．インビトロパクリタキセル放出速度同じ粒子直径サイズ範囲を有するパクリタキセル充填ミクロスフェア（10％および30％w/w充填）を製造し、そしてリン酸緩衝化生理食塩水中の10日間放出についてのインビトロ放出プロフィールを得た。放出は薬物充填に比例し、400μg のパクリタキセルが10日間で５mgの30％充填ミクロスフェアから放出され、そして150μgが同じ期間で10％充填ミクロスフェアから放出された。カプセル化効率は約80％であった。パクリタキセル充填ミクロスフェアを、0.1M水酸化ナトリウム中で45分間インキュベートし、そしてゼータポテンシャルを水酸化ナトリウム中のインキュベーション前後に測定した。パクリタキセル充填ミクロスフェアの表面電荷は、塩基を用いた処理前後の両方でパクリタキセルを含まないミクロスフェアより低かった。Ｃ．ポリリジンまはたフィブロネクチンのいずれかでコートされたPLLAの調製およびインビトロ評価１％スーダンブラック（ミクロスフェアを着色するため）を含むPLLAミクロスフェアを調製した。これらの球体を、ポリリジン（Sigma chemicals-ハイドロブロメル(Hydrobromell)形態またはフィブロネクチン（Sigma）のいずれかの２％（w/体積）溶液に10分間懸濁した。ミクロスフェアを緩衝液で１回洗浄し、そしてラット由来の新鮮に調製された膀胱の内表面に置いた。膀胱を10分間放置し、次いで緩衝液で３回洗浄した。残渣（結合）ミクロスフェアは、プロセス後に膀胱壁に存在し、従って生体接着が、フィブロネクチンおよびポリ-1-リジンでコートされたミクロスフェアの両方について生じたことを示した（図69Aおよび69B ）。実施例34 ポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)の合成ポリアクリルアミドおよびその誘導体を、フリーラジカル重合および放射線誘導重合により容易に合成し得る。以下はポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)の合成の例であり、ここでモノマーN-イソプロピルアクリルアミドを、有機溶媒（例えば、ヘキサンおよびトルエン）からの再結晶により精製する。簡単には、N-イソプロピルアクリルアミドを60℃のような温度でトルエンに溶解する。この溶液を、モノマーの再結晶化を可能にするためにより低い温度（例えば４℃）に冷却する。次いで、モノマーを濾過により回収し、そして真空下で乾燥する。合成のために、精製モノマー（20g）を、丸底ガラスフラスコ中の蒸留水（180ml）に溶解する。溶液を30分間窒素でパージして、溶解酸素を置換する。次いで、温度を65℃に上昇させ、そして少量（0.1g）の開始剤（例えば、過硫酸アンモニウムおよび2,2'-アゾビス-イソブチロニトリル）を添加して、重合を開始する。重合は10時間以内に完了され、そして窒素保護および攪拌下である。最後に、ポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)を、エタノール添加により沈殿させる。ポリマーを乾燥し、そして保存する。実施例35 ポリ（アクリル酸）誘導体の合成ポリ（アクリル酸）およびその誘導体を、フリーラジカル重合および放射線誘導重合により容易に合成し得る。以下はポリ(アクリル酸)の合成の例であり、ここでモノマーアクリル酸を、低圧（例えば、10mmHg）下で蒸留（例えば、40℃）により精製する。簡単には、精製モノマー（20g）を、丸底ガラスフラスコ中のジオキサン（180 ml）に溶解する。溶液を30分間窒素でパージして、溶解酸素を置換する。次いで、温度を65℃に上昇させ、そして少量（0.1g）の開始剤2,2'-アゾビス-イソブチロニトリルを添加して、重合を開始する。重合は24時間以内に完了され、そして窒素保護および攪拌下である。最後に、ポリ(アクリル酸)を、ｎ−ヘキサン添加により沈殿させる。ポリマーを乾燥し、そして保存する。実施例36 パクリタキセルの脈管周囲投与 250〜300gの重量のWISTARラットを、インノバー（0.33ml/kg）の筋肉内注射により麻酔する。一旦鎮静剤を飲ませると、次いでそれらをハロタン麻酔下に置く。一般的な麻酔を確立した後、首の上の部分の柔毛をそり、皮膚を鉗子で留め、そしてベタジンを綿棒で塗る。左頚動脈上を垂直に切開し、そして外頚動脈を曝す。２本の結紮糸を外頚動脈のまわりに置き、そして横方向の動脈切開をする。次いで、番号２FRENCH FOGARTバルーンカテーテルを頚動脈に導入し、そして左総頚動脈に通し、そしてバルーンを生理食塩水で膨らませる。カテーテルを、頚動脈に３回上下に通す。次いで、カテーテルを取り出し、そして結紮糸で左外頚動脈を縛る。次いで、エチレンビニルアセテート（EVA）中のパクリタキセル（33％）を、1 0匹のラットの総頚動脈周囲に円周様式で注射する。EVA単独を、10匹のさらなるラットの総頚動脈周囲に注射する。各グループからの５匹のラットを14日目に屠殺し、そして28日目に最後の５匹を屠殺する。ラットを、重量喪失または全身性疾患の他の徴候について観察する。14または28日で動物を麻酔し、そして左頚動脈を最初の実験の様式で暴露する。頚動脈を単離し、10％緩衝化ホルムアルデヒドで固定し、そして組織学について調べる。実施例37 アテローム性動脈硬化症Ａ．アテローム性動脈硬化症アテローム性動脈硬化症病変を、食餌のみによりニュージーランド白ウサギにおいて作り出す。簡単には、約1.6kgの重量のニュージーランド白ウサギを、0.2 5重量％コレステロールを補充した粉末固形飼料上に置く。総血漿コレステロールを、血管を拡張するためのインノバー（0.1ml/kg）の注射後に、サンプルを辺縁耳静脈から採取することにより毎週ベースで測定する。サンプルをEDTAと混合してサンプル中の0.15％濃度を達成し、そして低速遠心分離による血漿分離まで氷上に置く。十分なコレステロール食餌開始の１週間後、動物を、10匹の３グループに無作為化する。ケタミン35mg/kgおよびキシラジン７mg/kgでの麻酔の誘導、次いで挿管を介した一般的な麻酔の後に、柔毛を剃り、そして腹部上の皮膚を滅菌する。腹壁切開を行い、そして腹部大動脈を単離する。22g針を用いて、エチレンビニルアセテートペースト、５％パクリタキセルを含むエチレンビニルアセテートペースト、33％パクリタキセルを含むエチレンビニルアセテートペーストを、腎臓下腹部大動脈の近位半分の周囲に円周に沿って置く。大動脈分岐に伸長する大動脈の遠位半分は処置しない。10匹のコントロールウサギにおいて、腎臓下腹部大動脈を単離するが、その周囲には何も注射しない。アテローム発生性飼料は24週間続ける。その時点で、動物をケタミン（350mg/ kg）およびキシラジン（７mg/kg）の注射で筋肉内的に麻酔し、次いでユータノール(240mg/ml；２ml/4.5kg)の静脈内過剰用量で屠殺する。次いで、動物を、ヘパリン（１IU/ml）を含む、0.15mmol/リットルのN-2-ヒドロキシエチルパパラジン-N'-2-エタンスルホン酸（pH7.4）を含むハンクス平衡化塩溶液を10分間、続いて希釈Karnovsky固定液で15分間還流することにより、左心室を介して100mm水銀で還流固定する。胸部大動脈および腹部大動脈ならびに腸骨動脈をひとまとめに取り出し、そしてさらに30分間同様の溶液に入れる。次いで、連続の薄い切断を、胸部大動脈、特に腎臓下腹部大動脈で行う。Mova t、H&E、およひMasson染色を行い、そして管腔損傷の程度、アテローム性動脈硬化症病変の発達の程度、および動脈周囲への薬物療法に対する任意の管腔周囲の反応を調べるために組織学的分析を行う。実施例38 再狭窄の処置 250〜300gの重量のWISTARラットを、インノバー（0.33ml/kg）の筋肉内注射により麻酔する。一旦それらに鎮静剤を飲ませると、それらをハロタン麻酔下に置く。一般的な麻酔を確立した後、首の上の部分の柔毛をそり、皮膚をベタジンで清潔にする。左頚動脈上を垂直に切開し、そして外頚動脈を曝す。２本の結紮糸を外頚動脈周辺に置き、そしてそれらの間で横方向の動脈切開をする。２Fr F ogartyバルーンカテーテルを外頚動脈に導入し、そして左総頚動脈に通し、そしてバルーンを生理食塩水で膨らませる。カテーテルを、３回頚動脈に上下に通して、内皮を露出させる。カテーテルを取り出し、そして結紮糸で左外頚動脈を縛る。動物を５匹のグループに無作為化する。５匹のラットのサブグループは、コントロール、キャリアポリマー単独、キャリアポリマー＋１、５、10、20、および 33％パクリタキセルが送達されるグループである。２つのキャリアポリマー：EV AおよびEVA/PLAブレンドが調べられる。ポリマー混合物を、頚動脈周囲に円周のまわりに置く。次いで、傷を閉じる。各グループのラットを14日目および28日目で屠殺する。その中間に、ラットを重量喪失または他の全身性徴候について観察する。14日または28日後、動物を、筋肉内インノバー（0.33ml/kg）を用いた最初の鎮静により屠殺する。次いで、動脈を組織学的に調べる。実施例39 移植片狭窄を引き起こす内膜過形成Ａ．動物研究一般的な麻酔を家畜ブタに誘導する。首領域を剃り、そして皮膚をクレンジング溶液で滅菌する。首の各側面を垂直に切開し、そして頚動脈を曝し、そして８ mmのPTFE移植片を、２端より、側面の吻合（両側的に、総頚動脈上の近位吻合および内部頚動脈上の遠位吻合）に挿入する。介在するバイパス動脈を連結する。動物を、左側のみにそれぞれ外科的に作られた吻合に隣接して、キャリアポリマー単独を受ける10匹のブタ、キャリアポリマー＋５％パクリタキセルを受ける10 匹のブタ、およびキャリアポリマー＋33％パクリタキセルを受ける10匹のブタのグループに無作為化する。右側移植片は、各ブタにおいてコントロールとして働く。傷を閉じ、そしてブタを回復させる。第２グループのブタを研究する。移植片を類似の様式で作る。血管作用剤を、手術時に吻合部位に隣接して置かない。動物を回復させる。移植を行った２週間後、第２の一般的な麻酔薬を投与し、そして左頚動脈を再診査する。近位および遠位の吻合に隣接して、各10匹のブタは、近位および遠位両方の吻合に隣接して円周に沿って、キャリア単独、キャリアポリマー＋５％パクリタキセル、およびキャリアポリマー＋33％パクリタキセルを受ける。傷を閉じ、そしてブタを回復させる。反対の右側移植片はコントロールとして働く。３ヶ月で、全てのブタは一般的な麻酔を受ける。大腿動脈を切開し、そしてピッグテールカテーテルを、蛍光顕微鏡ガイダンス下で上行胸部大動脈に挿入する。頚動脈血管系の画像化を用いるアーチ注入を行う。特に、近位および遠位の移植片ならびに移植片の遠位吻合に直ぐ遠位の動脈の狭窄の程度を測定し、そして％狭窄を計算する。必要であれば、総頚動脈の選択的な注射を行う。各グループにおける５匹のブタを屠殺する。次いで、ヘパリン（１IU/ml）を含む、0.15mmol/リットルのN-2-ヒドロキシエチルパパラジン-N'-2-エタンスルホン酸（pH7.4）を含むハンクス平衡化塩溶液を10分間還流し、続いて希釈Karno vsky固定液で15分間還流することにより、動物を左心室を介して100mm水銀で還流固定する。胸部大動脈および腹部大動脈ならびに頚動脈をひとまとめに取り出し、そしてさらに30分間同様の溶液に入れる。近位吻合に直ぐ近位の頚動脈での、近位吻合での、遠位吻合での、および遠位吻合に直ぐ遠位の頚動脈での組織学的切片を作る。切片を、MovatおよびH&EおよびMasson染料で染色する。脈管内膜および外膜の反応ならびに脈管周囲反応の組織学的分析を記録する。管腔狭窄化の程度を伴う形態計測的分析を計算する。残ったブタを６ヶ月目に研究し、そして同様の血管造影屠殺手順を行う。上記より、本発明の特定の実施態様は例示のために本明細書中で記載されたが、種々の改変が、本発明の精神および範囲を逸脱することなくなされ得ることが理解される。従って、本発明は、添付の請求の範囲による以外は制限されない。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 47/34 Ａ６１Ｋ 47/34 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ (71)出願人ユニバーシティオブブリティッシュコロンビアカナダ国ブイ６ティー１ゼット３ブリティツシュコロンビア，バンクーバー，ヘルスサイエンシズモール 2194，アイアールシー 331 (72)発明者ハンター，ウイリアムエル. カナダ国ブイ５ケイ３エル７ブリティツシュコロンビア，バンクーバー，ペンティクトンストリートノース 525 (72)発明者マチャン，リンゼイエス. カナダ国ブイ６ケイ１エイチ３ブリティツシュコロンビア，バンクーバー, ダブリュー．１エスティーストリート 2778

Claims

【特許請求の範囲】１．身体通路に関連した疾患を処置または予防するための方法であって、該身体経路の外部に治療剤を送達する工程を包含する、方法。２．身体通路に関連した疾患を処置または予防するための方法であって、該身体経路の平滑筋細胞に外膜を介して治療剤を送達する工程を包含する、方法。３．前記治療剤が抗血管新生因子である、請求項１または２に記載の方法。４．前記治療剤がポリマーをさらに含む、請求項１または２に記載の方法。５．前記ポリマー性キャリアがポリ（エチレンビニルアセテート）(40％架橋)である、請求項３に記載の方法。６．前記ポリマー性キャリアが乳酸およびグリコール酸のコポリマーである、請求項３に記載の方法。７．前記ポリマー性キャリアがポリ（カプロラクトン）である、請求項３に記載の方法。８．前記ポリマー性キャリアがポリ（乳酸）である、請求項３に記載の方法。９．前記ポリマー性キャリアがポリ（乳酸）およびポリ（カプロラクトン）のコポリマーである、請求項３に記載の方法。１０．前記治療剤が抗微小管剤である、請求項１または２に記載の方法。１１．前記抗微小管剤が微小管を安定化する、請求項１０に記載の方法。１２．前記抗微小管剤がパクリタキセルまたはそのアナログもしくは誘導体である、請求項１１に記載の方法。１３．前記身体通路が、動脈、食道、胃、十二指腸、小腸、大腸、胆汁管、尿管、膀胱、尿道、涙腺、気管、気管支、細気管支、鼻気道、耳管、外耳道、およびファロビウス管からなる群より選択される、請求項１または２に記載の方法。１４．前記治療剤が、動脈の外壁を介して外膜に直接注射により動脈に送達される、請求項１３に記載の方法。１５．前記疾患が、脈管疾患、胃腸疾患、尿生殖器疾患、および肺疾患からなる群より選択される、請求項１または２に記載の方法。１６．前記治療剤が抗微小管剤である、請求項１５に記載の方法。１７．前記抗微小管剤が微小管を安定化する、請求項１６に記載の方法。１８．前記抗微小管剤がパクリタキセルまたはそのアナログもしくは誘導体である、請求項１７に記載の方法。１９．前記抗微小管剤が、バナジウム酸塩もしくはバナジル化合物、またはそのアナログもしくは誘導体である、請求項１６に記載の方法。