JP2000046828A - 免疫学的測定試薬及び免疫学的測定試薬の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 検体中成分による非特異的凝集反応や血清干
渉の低減が図られ、検体中の被測定物質である抗原（ま
たは抗体）を、感度および特異性良く検出または定量で
きる免疫学的測定試薬及び免疫学的測定試薬の製造方法
を提供する。 【解決手段】 被測定物質である抗原（または抗体）に
対する抗体（または抗原）を不溶性担体に担持してなる
免疫学的測定試薬であって、測定時の最終反応系中に免
疫学的に不活性なタンパク質が１．５〜２０（重量／体
積）％含まれる免疫学的測定試薬。抗原抗体反応により
生じる不溶性担体の凝集の度合いを検出することによ
り、被測定物質を測定するための免疫学的測定試薬の製
造方法であって、不溶性担体を被測定物質である抗原
（または抗体）に対する抗体（または抗原）溶液中、及
び不溶性担体に対し１０〜１００重量倍の免疫学的に不
活性なタンパク質を含む溶液中で同時または別々に感作
することを特徴とする方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、抗原抗体反応を用
いる免疫学的測定試薬及び免疫学的測定試薬の製造方法
に関する。特に、抗原抗体反応への血清成分の干渉が抑
制された免疫学的測定試薬及び免疫学的測定試薬の製造
方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】以下、本明細書において、一文章中に、
抗原（または抗体）という表現と、抗体（または抗原）
という表現がある場合、括弧内は括弧内同士が対応し、
括弧外は括弧外同士が対応しているものとする。

【０００３】臨床検査分野において、抗原抗体反応を用
いて、被測定物質である抗原（または抗体）を測定する
方法が普及している。一般に、抗原抗体反応は非常に特
異的反応であるが、非特異的な抗原抗体反応、あるいは
他の反応により正しい測定結果を示さない場合がある。
これには２つの原因が考えられている。１つは抗原抗体
反応の非特異的な反応である。つまり、測定検体内に被
測定物質である抗体と類似した抗体が存在している場
合、または被測定物質である抗原のエピトープと類似し
たエピトープが存在している場合である。このような問
題の解決には、特開平３−９４１６１号公報に示される
ように、測定試薬作製の際のブロッキング時に、不活性
タンパク質量を増加させることが提案されている。ま
た、抗原抗体反応により補体系が活性化され、その凝集
を阻害するために非特異反応が起こる場合もある。この
ような場合には補体系阻害物質である、エチレンジアミ
ン４酢酸塩、及び塩化コリンを添加することが提案され
ている。もう一つは、検体が血清である場合、血清中に
含まれている成分は人により変動するために、その変動
した成分が測定に悪影響を与えるという血清干渉と呼ば
れる現象による場合である。この血清干渉という現象を
具体的に述べると、被測定物質である抗原（または抗
体）が高値で含まれる検体を、生理食塩水（変動成分が
ない血清のモデル）で希釈したときの測定値と、同じ検
体を被測定物質である抗原（または抗体）を含まない血
清で希釈したときの測定値とが乖離するという現象であ
る。

【０００４】体液中の微量成分等の測定法のひとつとし
て、目的とする被測定物質に対する抗体（または抗原）
を不溶性担体に担持させ、被測定物質との抗原抗体反応
により生じた不溶性担体の凝集の度合いを検出すること
により、被測定物質を測定する方法がある。このような
測定法としては、ラテックス凝集法、赤血球凝集法等が
知られている。

【０００５】例えば、このラテックス凝集法では、被測
定物質である抗原（または抗体）に対応する抗体（また
は抗原）がその表面に吸着されたラテックス粒子が用い
られる。測定に際して、このようなラテックス粒子は、
緩衝液等の媒体中に浮遊され、検体と混合される。それ
により、検体中の抗原（または抗体）と、ラテックス粒
子表面上の抗体（または抗原）とが、抗原抗体反応を起
こし、結合する。検体中の抗原（または抗体）は、抗原
決定基を通常複数有するので検体中の抗原（または抗
体）を介してラテックス粒子が架橋され凝集する。この
凝集の程度は、検体中の被測定物質である抗原（または
抗体）の量に比例するので、この凝集の程度を測定する
ことによって検体中の抗原（または抗体）を定量するこ
とができる。この凝集の程度は該混合液の吸光度や光の
透過率を分光光度計によって測定することによって簡単
に測定できる。この方法は、感度が高く、測定方法が簡
便で、大がかりな装置を必要としないので広く用いられ
ている。また、被測定物質の定性的な検出方法として、
凝集の有無を肉眼で判定する方法も盛んに行われてい
る。

【０００６】しかし、上記のような測定法において、血
清のような検体の中に含まれる被測定物質を測定する場
合、被測定物質である抗原（または抗体）を含む陽性血
清のみならず、これらの抗原（または抗体）を含まない
陰性血清に対しても、凝集反応を起こすことがある。こ
のような凝集反応は、前述のように、非特異的凝集反応
と呼ばれており、これが特異性の低下を引き起こし、測
定の正確性、精密性を低下させる。

【０００７】また、検体が血清または血漿である場合
は、前述と同様に、血清干渉が問題となる。

【０００８】そこで、特異性の高いラテックス凝集法の
試薬を得るためには、前記の検体中成分による非特異的
凝集反応や血清干渉を抑制することが重要となる。

【０００９】非特異的反応を抑制する方法としては、従
来から抗体（または抗原）を結合させたラテックス粒子
のような担体に、ゼラチン、牛血清アルブミン等の蛋白
質、または界面活性剤を物理吸着させておくことが提案
されている。

【００１０】また、前述の特開平３−９４１６１号公報
には、ラテックス粒子に抗体（または抗原）を感作した
後、ラテックス固形分に対し、３〜２０重量倍の免疫学
的に不活性な蛋白質で処理して得られるラテックス試薬
が提案されている。

【００１１】しかしながら、このような手段をとった場
合、非特異的凝集反応の抑制効果はある程度期待できる
ものの、血清干渉を抑制できないという問題があった。

【００１２】免疫学的測定試薬を用いる臨床検査項目の
一つに梅毒検査がある。以下、梅毒検査について説明す
る。梅毒の病原体であるトレポネーマ・パリダム（Ｔｒ
ｅｐｏｎｅｍａ Ｐａｌｌｉｄｕｍ）が生体に感染する
と、該病原体に対する抗体とともに、リン脂質と反応性
を持つワッセルマン抗体（抗りん脂質抗体）が産生され
る。従来の梅毒の検査法は、梅毒菌体に対する抗体を検
出するために、梅毒菌体から抽出した抗原そのものを用
いる方法と、ワッセルマン抗体を検出するために、カル
ジオリピンを含む脂質類を抗原として用いる方法との２
つに大別される。

【００１３】現在、脂質抗原を用いる方法としては、Ｖ
ＤＲＬ法、緒方法、ＲＰＲ（Ｒａｐｉｄ Ｐｌａｓｍａ
ｒｅａｇｉｎ）法、ガラス板法等があるが、定性スク
リーニングには、ＲＰＲ法、ガラス板法が主に行われて
いる。このような脂質抗原を用いる検査法は、梅毒以外
の疾患においても陽性反応を呈するという欠点がある
が、ワッセルマン抗体は梅毒の感染状態をよく反映する
利点があり、これを利用して梅毒治療経過を追うことな
どにも応用されている。

【００１４】上記ＲＰＲ法は、カルジオリピン及びレシ
チンを含む脂質をカオリン又は炭素末に吸着させたもの
を、白色プレート上で検体と混合し、カオリン又は炭素
末の凝集の有無を判定する方法である。上記ガラス板法
は、ガラス板上において、カルジオリピン、レシチン及
びコレステリンを含む脂質抗原液を検体と混合し、コレ
ステリン結晶の凝集の有無を判定する方法である。

【００１５】上記２つの方法は用手法であるので、大量
の検体を検査する場合には適していない。また、ＲＰＲ
法の場合には、炭素末の凝集を目視で判定を行い、ガラ
ス板法の場合には、コレステリン結晶の生成を顕微鏡下
で観察し判定するので、いずれも判定には熟練を要す
る。そのため、判定者によっては判定結果が異なること
も起こり得るという欠点があった。

【００１６】カルジオリピンを含む脂質抗原をマイクロ
タイタープレートに吸着させ、ＥＬＩＳＡ法により検出
を行う方法（Ｎ．Ｓ．Ｐｅｄｅｒｓｅｎ ｅｔ ａ
ｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２５
（９），１７１１−１７１６（１９８７））も知られて
いる。この方法では、反応の程度を吸光度で測定するの
で、陰陽の判定は客観的に行うことができるが、マイク
ロタイタープレートへの試薬の分注や検体の分注が手作
業となり操作が煩雑である、また、反応時間が長いとい
う問題がある。

【００１７】特開平５−３１２８０８号公報には、担体
に固定化された脂質抗原と検体中に含まれる目的抗体と
の抗原抗体反応を行い、ついで、磁界の存在下で、脂質
抗原に結合した目的抗体と、この目的抗体に対する抗体
で感作した磁性粒子との抗原抗体反応を行って担体上に
パターンを形成させることにより、抗リン脂質抗体の検
出を行う方法が開示されているが、磁力をかける装置等
が必要であり汎用性に乏しい欠点があった。

【００１８】上述のように、一般的な生化学自動分析機
に適用することが可能な抗リン脂質抗体測定試薬はこれ
までになく、このような簡便な分析機に適用可能な抗リ
ン脂質抗体測定試薬が望まれていた。

【００１９】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記問題を
解決するものであり、その目的は、検体中成分による非
特異的凝集反応や血清干渉の低減が図られ、検体中の被
測定物質である抗原（または抗体）を、感度および特異
性良く検出または定量できる免疫学的測定試薬及び免疫
学的測定試薬の製造方法を提供することである。本発明
の請求項３記載の発明は、更に、血清干渉の影響が抑制
されるとともに、生化学自動分析機に適用可能とされて
いることにより、迅速、簡便に大量の検体を測定するこ
とができ、かつ、客観性が高い梅毒の検出法に用いるこ
とができる抗リン脂質抗体測定試薬を提供することを目
的とする。

【００２０】

【課題を解決するための手段】本発明の請求項１記載の
免疫学的測定試薬（以下、本発明１という）は、被測定
物質である抗原（または抗体）に対する抗体（または抗
原）を不溶性担体に担持してなる免疫学的測定試薬であ
って、測定時の最終反応系中に免疫学的に不活性なタン
パク質が１．５〜２０（重量／体積）％含まれることを
特徴とする。

【００２１】本発明の請求項２記載の免疫学的測定試薬
（以下、本発明２という）は、免疫学的に不活性なタン
パク質がウシ血清アルブミンであることを特徴とする請
求項１記載の免疫学的測定試薬である。

【００２２】本発明の請求項３記載の免疫学的測定試薬
（以下、本発明３という）は、被測定物質が、抗リン脂
質抗体、ＨＢＳ抗原、ＨＢＳ抗体及びフェリチンからな
る群より選ばれた少なくとも１種であることを特徴とす
る請求項１または２記載の免疫学的測定試薬である。

【００２３】本発明の請求項４記載の免疫学的測定試薬
の製造方法（以下、本発明４という）は、被測定物質で
ある抗原（または抗体）との抗原抗体反応により生じる
不溶性担体の凝集の度合いを検出することにより、被測
定物質を測定するための免疫学的測定試薬の製造方法で
あって、不溶性担体を被測定物質である抗原（または抗
体）に対する抗体（または抗原）溶液中、及び不溶性担
体に対し１０〜１００重量倍の免疫学的に不活性なタン
パク質を含む溶液中で同時または別々に感作することを
特徴とする。

【００２４】本発明の請求項５記載の免疫学的測定試薬
の製造方法（以下、本発明５という）は、免疫学的に不
活性なタンパク質がウシ血清アルブミンであることを特
徴とする請求項４記載の免疫学的測定試薬の製造方法で
ある。

【００２５】本発明の請求項６記載の免疫学的測定試薬
（以下、本発明６という）は、請求項４または５記載の
製造方法により得られることを特徴とする。

【００２６】以下、本発明１〜３について説明する。本
発明１〜３の免疫学的測定試薬は、被測定物質である抗
原（または抗体）に対する抗体（または抗原）を不溶性
担体に担持してなる免疫学的測定試薬であって、測定時
の最終反応系中に免疫学的に不活性なタンパク質が１．
５〜２０（重量／体積）％含まれることを特徴とする。

【００２７】上記免疫学的に不活性なタンパク質とは、
被測定物質である抗原（または抗体）の抗原抗体反応に
関与しないタンパク質という意味である。

【００２８】上記免疫学的に不活性なタンパク質として
は、例えば、血清アルブミン（ヒト、ウシ、マウス、ラ
ット、ウサギなどの動物由来）、卵性アルブミン（ニワ
トリなどの鳥類由来）、乳性アルブミン（ウシ等の動物
由来）などが代表的であるが、免疫学的に不活性である
ことが証明されたものであれば、分子量、構成アミノ酸
を問わず、どのようなものであってもよく、またこれら
のタンパク質が混合されたものであっても構わない。こ
れらの中で最も好ましくは、本発明２のように、ウシ血
清アルブミンである。

【００２９】本発明１〜３において、測定時の最終反応
系中に含まれる免疫学的に不活性なタンパク質の量は、
１．５（重量／体積）％未満では十分な血清干渉抑制効
果が得られず、２０（重量／体積）％を超えると、該タ
ンパク質が十分に溶解しなかったり、溶液粘度が増加し
て検体との攪拌混合が不十分となり反応不足になり易い
ので、１．５〜２０（重量／体積）％に限定され、好ま
しくは、１．７〜１５（重量／体積）％である。この場
合、最終反応系中に含まれる免疫学的に不活性なタンパ
ク質には、不溶性担体に担持されているものも含まれる
ものとする。上記の最終反応系とは、抗原（または抗
体）担持不溶性担体が分散している溶液、検体希釈液及
び検体が混合された反応系という意味である。また、検
体希釈液が使用されない場合は、抗原（または抗体）担
持不溶性担体が分散している溶液及び検体が混合された
反応系という意味である。また、抗原（または抗体）担
持不溶性担体が分散している溶液、検体希釈液及び検体
のそれぞれに含まれる免疫学的に不活性なタンパク質
は、同じであっても、各々異なってもよい。

【００３０】上記不溶性担体としては、例えば、有機高
分子粉末、炭素末、無機物質粉末、微生物、血球、細胞
膜片及びプラスチック製マイクロタイタープレート等が
挙げられる。有機高分子粉末としては、例えば、不溶性
アガロース、セルロース、不溶性デキストランなどの天
然高分子粉末；ポリスチレン、スチレン−スチレンスル
ホン酸（塩）共重合体、メタクリル酸重合体、アクリル
酸重合体、アクリロニトリル−ブタジエン−スチレン共
重合体、塩化ビニル−アクリル酸エステル共重合体、酢
酸ビニル−アクリル酸エステル共重合体などの合成高分
子粉末などが挙げられる。特に、合成高分子粉末を均一
に懸濁させたラテックスが好ましい。用いるラテックス
粒子の平均粒径は、被測定物質の検出濃度または測定機
器によって０．０５〜１．０μｍの範囲で適宜選択され
る。無機物質粉末としてはシリカ、アルミナ等や、金、
チタン、鉄、ニッケルのような金属片等が例示される。

【００３１】上記被測定物質である抗原（または抗体）
としては、特に限定されず、一般に抗原抗体反応を利用
して測定し得る生理活性物質及び病原体（ウイルス、細
菌等）の抗原、抗体の全てが挙げられる。具体的には、
生理活性物質としては生体内に存在する各種生体内レセ
プター、酵素などが挙げられる。病原体の抗原及び抗体
としては梅毒菌体由来抗原、抗梅毒菌体抗体、梅毒リン
脂質抗原、抗リン脂質抗体、ＨＢＳ抗原、ＨＢＳ抗体、
フェリチン、ＨＣＶ抗原、ＨＩＶ抗原、ＡＴＬＡ抗原、
クラミジア抗原、ヘルペス抗原、ヘリコバクター・ピロ
リ抗原等が挙げられる。

【００３２】抗リン脂質抗体を測定する場合、リン脂質
抗原としてはカルジオリピン、レシチン（ホスファチジ
ルコリン）及びコレステロールからなるものを用いるの
が好ましい。上記リン脂質抗原は３種類の混合比により
試薬感度は異なるが、最も適しているのは重量比でカル
ジオリピン：レシチン：コレステロール＝１：５：３〜
１：１５：３の割合で混合される場合である。カルジオ
リピンに対するレシチンまたはコレステロールの割合
が、上記比率よりも低くなった場合は、測定に必要な感
度が得られない。また、これより高くなった場合は、測
定のときのブランク値（ＲＰＲ値０の時の吸光度）が大
きくなってしまう。これは、脂質抗原が不溶性担体に過
剰に担持されることによる非特異反応と考えられ、試薬
測定系を不安定にしてしまう原因となるので好ましくな
い。

【００３３】本発明１〜３の免疫学的測定試薬を製造す
るには、例えば、被測定物質である抗原（または抗体）
に対する抗体（または抗原）を不溶性担体に担持させ
る。抗原（または抗体）に対する抗体（または抗原）が
担持された不溶性担体を用いて、測定時の最終反応系中
に免疫学的に不活性なタンパク質が１．５〜２０（重量
／体積）％含まれるようにするには、抗原（または抗
体）担持不溶性担体を分散させる溶液、検体希釈液及び
検体のいずれか一種以上に免疫学的に不活性なタンパク
質を添加して、上記濃度になるようにすればよい。

【００３４】上記検体希釈液には、測定感度の向上、及
び、抗原抗体反応の促進のために、種々の増感剤を添加
することができる。上記増感剤としては、例えば、特開
平２−１７３５６７号公報に記載されているメチルセル
ロース、エチルセルロース等のアルキル化多糖類；特開
平５−１８０８３８号公報に記載されているプルラン及
びポリビニルピロリドン等が挙げられる。

【００３５】本発明１〜３によって得られる試薬は、凝
集の程度を光学的に測定する生化学自動分析機であれば
どのようなものにも適用可能である。

【００３６】以下、本発明４及び５について説明する。
本発明４で用いられる免疫学的に不活性なタンパク質に
ついては、本発明１の説明で述べた免疫学的に不活性な
タンパク質と同様であり、これらの中で最も好ましく
は、本発明５のように、ウシ血清アルブミンである。

【００３７】本発明４で用いられる不溶性担体として
は、例えば、有機高分子粉末、炭素末、無機物質粉末、
微生物、血球及び細胞膜片が挙げられ、特にポリスチレ
ン、スチレン−スチレンスルホン酸（塩）共重合体、メ
タクリル酸重合体、アクリル酸重合体、アクリロニトリ
ル−ブタジエン−スチレン共重合体、塩化ビニル−アク
リル酸エステル共重合体、酢酸ビニル−アクリル酸エス
テル共重合体などの合成高分子粉末を均一に懸濁させた
ラテックスが好ましい。用いるラテックス粒子の平均粒
径は、測定対象物の検出濃度または測定機器によって
０．０５〜１．０μｍの範囲で適宜選択される。

【００３８】本発明４の免疫学的測定試薬の製造方法
は、前述のように、不溶性担体を被測定物質である抗原
（または抗体）に対する抗体（または抗原）溶液中、及
び不溶性担体に対し１０〜１００重量倍の免疫学的に不
活性なタンパク質を含む溶液中で同時または別々に感作
する。別々に感作させる場合、被測定物質である抗原
（または抗体）に対する抗体（または抗原）の感作と、
免疫学的に不活性なタンパク質の感作の順序はどちらが
先でもよく、特に限定されないが、上記抗体（または抗
原）の感作を先にするのが、より好ましい。感作によっ
て、不溶性担体に上記の抗体（または抗原）及び免疫学
的に不活性なタンパク質を担持させるには、公知の物理
的または化学的結合のいずれでもよい。感作時の抗原
（または抗体）に対する抗体（または抗原）の溶液、及
び免疫学的に不活性なタンパク質を含む溶液における溶
媒は、従来から感作時に用いられてきた公知の溶媒でよ
く、例えば、各種の緩衝液や水が挙げられる。

【００３９】この方法において、不溶性担体に免疫学的
に不活性なタンパク質を感作する際の、不溶性担体に対
する免疫学的に不活性なタンパク質の量は、１０重量倍
未満では、得られた試薬において、検体中の成分による
非特異的凝集反応及び血清干渉が十分に低減されなくな
り、１００重量倍を超えると、得られた試薬において、
かえって抗原抗体反応が阻害されてしまい十分な反応性
が得られなくなるので、１０〜１００重量倍に限定さ
れ、２０〜５０重量倍が好ましい。感作時間は５分以上
が好ましく、１０分〜１２時間がより好ましい。

【００４０】本発明４の製造方法で得られる免疫学的測
定試薬（本発明６）において、被測定物質である抗原
（または抗体）としては、特に限定されず、一般に抗原
抗体反応を利用して測定し得る物質はいずれも測定可能
である。被測定物質としては、タンパク、脂質等があ
り、より詳しくは、例えば、各種抗原、各種抗体、レセ
プター、酵素等が挙げられる。具体的には、抗原として
は、Ｃ反応性たんぱく（ＣＲＰ）、ヒトフィブリノーゲ
ン、フェリチン、リウマチ因子、α−フェトプロティン
（ＡＦＰ）、ＨＢＳ抗原等が例示される。抗体として
は、例えば、各種の毒素や病原菌などに対する抗体が挙
げられ、具体的には、抗ストレプトリジンＯ抗体、梅毒
トレポネーマ抗体、梅毒脂質抗原に対する抗体、ＨＢＳ
抗体、ＨＢｃ抗体、ＨＢｅ抗体等が例示される。

【００４１】不溶性担体を感作する際に用いられる抗体
としては、免疫グロブリン分子自体のほか、例えば、Ｆ
（ａｂ' ）₂ のような断片であってもよい。抗原として
は、生体成分由来のもの、培養で得られたもの、化学合
成されたもの、遺伝子組換え等の技術によって得られた
もの、またはこれらの処理物など特に限定されない。

【００４２】本発明４で得られた免疫学的測定試薬（本
発明６）は、上記免疫学的測定試薬と被測定物質である
抗原（または抗体）との抗原抗体反応により生じる不溶
性担体の凝集の度合いを検出することにより、被測定物
質を測定する。

【００４３】上記凝集の度合いは、光学的に測定または
目視観察することにより検出される。具体的には、光学
的に検出する方法では、散乱光強度、吸光度または透過
光強度の増加または減少を測定すればよい。また、これ
らの方法を併用してもよい。

【００４４】不溶性担体の凝集の程度を肉眼で判定する
試薬では、通常、検体と感作不溶性担体を含む溶液を判
定板上で混合し、１〜５分間揺り動かした後、凝集の有
無を判定する。凝集判定には、単に肉眼判定以外に、凝
集状態をビデオカメラで撮影し、画像処理を施すことも
可能である。

【００４５】上記抗原抗体反応の条件は通常の条件と同
様でよく、反応媒体としては、被測定物質の種類に応じ
た各種緩衝液が適宜選ばれる。この緩衝液は、被測定物
質を失活させることがなく、かつ抗原抗体反応を阻害し
ないようなイオン濃度やｐＨを有するものであればよ
い。例えば、リン酸緩衝液、グリシン緩衝液、トリス緩
衝液が使用される。反応のｐＨは、５〜１０、特に６〜
８が好ましい。反応温度は０〜５０℃、特に２０〜４０
℃が好ましい。反応時間は適宜決められる。反応時に
は、反応系に、感度を高めるために、ポリエチレングリ
コール、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、
ポリビニルピロリドン、プルランなどの水溶性高分子を
添加することも可能である。また、反応系に、特異性を
高めるために、塩化コリン等の第４級アンモニウム塩、
ＥＤＴＡ、ポリアニオン、カオトロピックイオン（Ｃｌ
^- 、Ｉ^- 、ＳＣＮ^- 等）、ゼラチンなどを添加すること
も可能である。

【００４６】また、更に、非特異的反応を抑制するた
め、または試薬の安定性を高めるために、アルブミン、
カゼイン、ゼラチン等のタンパク質、またはその分解
物、またはアミノ酸、界面活性剤等を不溶性担体に感作
してもよい。

【００４７】

【実施例】以下に実施例を掲げて本発明を更に詳しく説
明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるもの
ではない。

【００４８】［Ａ］抗リン脂質抗体測定試薬 実施例１ （１）脂質抗原液の作成 カルジオリピンのエタノール溶液（５ｍｇ／ｍｌ、シグ
マ社製）２ｍｌ、精製レシチン（ナカライテスク社製）
のエタノール溶液（１０ｍｇ／ｍｌ）１０ｍｌ及びコレ
ステロール（ナカライテスク社製）のエタノール溶液
（１０ｍｇ／ｍｌ）３ｍｌを混合し、脂質抗原液を得
た。

【００４９】（２）脂質抗原感作ラテックス試薬の作成 ポリスチレンラテックス（平均粒径０．４μｍ、１０
（ｗ／ｖ）％、積水化学工業社製）１００μｌを予め３
７℃で緩やかに攪拌しながらあたためておいた。これに
先に作成した脂質抗原液２５０μｌを一気に添加し、そ
のまま３７℃で緩やかに２時間攪拌した。次に５（ｗ／
ｖ）％濃度でウシ血清アルブミン（以下、ウシ血清アル
ブミンのことをＢＳＡという）を含むリン酸塩緩衝食塩
水（ｐＨ６．５、リン酸塩の濃度３６ｍＭ、食塩の濃度
０．７４重量％、以下、リン酸塩緩衝食塩水のことをＰ
ＢＳという）３ｍｌを一気に添加し、更に１時間、３７
℃で攪拌した。１５０００ｒｐｍ、４℃で１５分間遠心
分離し、上清を除き、沈殿したラテックスを１（ｗ／
ｖ）％濃度でＢＳＡを含むＰＢＳ３ｍｌに再び懸濁し
た。この操作を３回繰り返しラテックスを洗浄し、最後
に５（ｗ／ｖ）％濃度でＢＳＡ、１０ｍＭ濃度でＥＤＴ
Ａ・４Ｎａ、５００ｍＭ濃度で塩化コリンを含むＰＢＳ
１０ｍｌに懸濁した。このようにして脂質抗原感作ラテ
ックス試薬を得た。ラテックス粒子上に担持されている
ＢＳＡは、遠心分離後の上清中のタンパク質量を測定す
ることにより、最終濃度にして上記懸濁液中の濃度とし
て約０．２（ｗ／ｖ）％が担持されていることが分かっ
た。結果的に、脂質抗原感作ラテックス試薬中に５．２
（ｗ／ｖ）％のＢＳＡが含有されていることになる。

【００５０】（３）感度の測定（血清干渉抑制の検討） 上記（２）で得た脂質抗原感作ラテックス試薬と検体希
釈液（１（ｗ／ｖ）％濃度でプルラン（林原社製）、３
（ｗ／ｖ）％濃度でＢＳＡを含有する１００ｍＭリン酸
緩衝液、ｐＨ７．４）を使用し、日立７１７０型生化学
自動分析機を用いて測定を行った。測定波長は７００ｎ
ｍ、１検体測定につき脂質抗原感作ラテックス試薬は６
０μｌ、検体希釈液は１８０μｌ、検体は２０μｌ使用
した。この３種の液が混合された後の混合液中のＢＳＡ
濃度は約３．３（ｗ／ｖ）％となる。この測定方法をよ
り具体的に説明すると、検体２０μｌに、検体希釈液１
８０μｌを混合し、３７℃で適時保持した後、脂質抗原
感作ラテックス試薬６０μｌを添加攪拌し、この後、１
分後および５分後の波長７００ｎｍでの吸光度を測定
し、この間の吸光度の変化量（△ａｂｓ）を求め、それ
を１００００倍したものを吸光度変化量（△ａｂｓ×１
００００）とした。

【００５１】血清干渉抑制の検討のために、ＲＰＲ法に
よる測定値（ＲＰＲ値）が１６倍の検体を、ＲＰＲ陰性
ヒト血清を用いて希釈倍率２倍、４倍、８倍、１６倍に
希釈したもの、及び希釈に用いたＲＰＲ陰性ヒト血清そ
のものを検体として用いて、上記の測定方法で測定し吸
光度変化量（△ａｂｓ×１００００）を求めた。また、
同じ１６倍の検体を、生理食塩水を用いて希釈倍率２
倍、４倍、８倍、１６倍に希釈したもの、及び希釈に用
いた生理食塩水そのものを検体として用いて、上記の測
定方法で測定し吸光度変化量（△ａｂｓ×１００００）
を求めた。これらの測定結果を表１に示した。この両者
の吸光度変化量に差がないものほど血清干渉が改善され
ていることになる。

【００５２】実施例２ （１）脂質抗原液の作成 実施例１と同様の脂質抗原液を使用した。

【００５３】（２）脂質抗原感作ラテックス試薬の作成 実施例１と同様にして脂質抗原感作ラテックス試薬を作
成した。

【００５４】（３）感度の測定（血清干渉抑制の検討） 上記（２）で得た脂質抗原感作ラテックス試薬と検体希
釈液（１％（ｗ／ｖ）濃度でプルラン（林原社製）、１
（ｗ／ｖ）％濃度でＢＳＡを含有する１００ｍＭリン酸
緩衝液、ｐＨ７．４）を使用し、日立７１７０型生化学
自動分析機を用いて測定を行った。測定波長は７００ｎ
ｍ、１検体測定につき脂質抗原感作ラテックス試薬は６
０μｌ、検体希釈液は１８０μｌ、検体は２０μｌ使用
した。この３種の液が混合された後の混合液中のＢＳＡ
濃度は約１．９（ｗ／ｖ）％となる。具体的な測定方法
は、実施例１と同様である。実施例１と同様にして血清
干渉抑制の検討を行い、結果を表１に示した。

【００５５】実施例３ （１）脂質抗原液の作成 実施例１と同様の脂質抗原液を使用した。

【００５６】（２）脂質抗原感作ラテックス試薬の作成 実施例１と同様にして脂質抗原感作ラテックス試薬を作
成した。

【００５７】（３）感度の測定（血清干渉抑制の検討） 上記（２）で得た脂質抗原感作ラテックス試薬と検体希
釈液（１．２（ｗ／ｖ）％濃度でプルラン（林原社
製）、１０（ｗ／ｖ）％濃度でＢＳＡを含有する１００
ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ７．４）を使用し、日立７１７
０型生化学自動分析機を用いて測定を行った。測定波長
は７００ｎｍ、１検体測定につき脂質抗原感作ラテック
ス試薬は６０μｌ、検体希釈液は１８０μｌ、検体は２
０μｌ使用した。この３種の液が混合された後の混合液
中のＢＳＡ濃度は約８．１（ｗ／ｖ）％となる。具体的
な測定方法は、実施例１と同様である。実施例１と同様
にして血清干渉抑制の検討を行い、結果を表１に示し
た。

【００５８】実施例４ （１）脂質抗原液の作成 実施例１と同様の脂質抗原液を使用した。

【００５９】（２）脂質抗原感作ラテックス試薬の作成 実施例１と同様にして脂質抗原感作ラテックス試薬を作
成した。

【００６０】（３）感度の測定（血清干渉抑制の検討） 上記（２）で得た脂質抗原感作ラテックス試薬と検体希
釈液（１．４（ｗ／ｖ）％濃度でプルラン（林原社
製）、１５（ｗ／ｖ）％濃度でＢＳＡを含有する１００
ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ７．４）を使用し、日立７１７
０型生化学自動分析機を用いて測定を行った。測定波長
は７００ｎｍ、１検体測定につき脂質抗原感作ラテック
ス試薬は６０μｌ、検体希釈液は１８０μｌ、検体は２
０μｌ使用した。この３種の液が混合された後の混合液
中のＢＳＡ濃度は約１１．６（ｗ／ｖ）％となる。具体
的な測定方法は、実施例１と同様である。実施例１と同
様にして血清干渉抑制の検討を行い、結果を表１に示し
た。

【００６１】比較例１ （１）脂質抗原液の作成 実施例１と同様の脂質抗原液を使用した。

【００６２】（２）脂質抗原感作ラテックス試薬の作成 ポリスチレンラテックス（平均粒径０．４μｍ、１０
（ｗ／ｖ）％、積水化学工業社製）１００μｌを予め３
７℃で緩やかに攪拌しながらあたためておいた。これに
先に作成した脂質抗原液２５０μｌを一気に添加し、そ
のまま３７℃で緩やかに２時間攪拌した。次に１（ｗ／
ｖ）％濃度でＢＳＡを含むＰＢＳ３ｍｌを一気に添加
し、更に１時間３７℃で攪拌した。１５０００ｒｐｍ、
４℃で１５分間遠心分離し、上清を除き、沈殿したラテ
ックスを１（ｗ／ｖ）％濃度でＢＳＡを含むＰＢＳ３ｍ
ｌに再び懸濁した。この操作を３回繰り返しラテックス
を洗浄し、最後に１（ｗ／ｖ）％濃度でＢＳＡ、１０ｍ
Ｍ濃度でＥＤＴＡ・４Ｎａ、５００ｍＭ濃度で塩化コリ
ンを含むＰＢＳ１０ｍｌに懸濁した。このようにして脂
質抗原感作ラテックス試薬を得た。ラテックス粒子上に
担持されているＢＳＡは、遠心分離後の上清中のタンパ
ク質量を測定することにより、最終濃度にして上記懸濁
液中の濃度として約０．０５（ｗ／ｖ）％が担持されて
いることが分かった。結果的に、脂質抗原感作ラテック
ス試薬中に１．０５（ｗ／ｖ）％のＢＳＡが含有されて
いることになる。

【００６３】（３）感度の測定（血清干渉抑制の検討） 上記（２）で得た脂質抗原感作ラテックス試薬と検体希
釈液（１（ｗ／ｖ）％濃度でプルラン（林原社製）、１
（ｗ／ｖ）％濃度でＢＳＡを含有する１００ｍＭリン酸
緩衝液、ｐＨ７．４）を使用し、日立７１７０型生化学
自動分析機を用いて測定を行った。測定波長は７００ｎ
ｍ、１検体測定につき脂質抗原感作ラテックス試薬は６
０μｌ、検体希釈液は１８０μｌ、検体は２０μｌ使用
した。この３種の液が混合された後の混合液中のＢＳＡ
濃度は約０．９４（ｗ／ｖ）％となる。具体的な測定方
法は、実施例１と同様である。実施例１と同様にして血
清干渉抑制の検討を行い、結果を表１に示した。

【００６４】

【表１】

【００６５】［Ｂ］ＨＢＳ抗原測定試薬 実施例５ （１）ＢＳＡ溶解液の調製 ４０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）に、５重量％濃度
になるようにＢＳＡを溶解した。

【００６６】（２）抗ＨＢＳ抗体及びＢＳＡ感作ラテッ
クス液の調製 抗ＨＢＳ抗体を１ｍｇ／ｍｌの濃度で０．１Ｍリン酸緩
衝液（ｐＨ７．５）に溶解した液１．０ｍｌに、平均粒
径０．３０μｍのポリスチレンラテックス（固形分１０
重量％、積水化学工業社製）０．５ｍｌを添加し、２５
℃にて６０分間攪拌した。次いで、この液に上記（１）
項で得られたＢＳＡ溶解液を２５ｍｌ添加し（すなわ
ち、ＢＳＡ量はラテックス粒子の２５重量倍量とな
る）、２５℃にて６０分間攪拌した後、この混合液を１
８０００ｒｐｍで遠心分離した。得られた沈殿物に０．
１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８．０）５０ｍｌを添加し、ラ
テックスを懸濁させ、抗ＨＢＳ抗体及びＢＳＡ感作ラテ
ックス液を調製した。

【００６７】（３）緩衝液の調製 １重量％濃度でＢＳＡを含有する０．０５Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ７．０）に、ポリエチレングリコール（和光純
薬社製、平均分子量：５００００）を２．０重量％の濃
度になるように溶解した。

【００６８】（４）ヒトＨＢＳ抗原測定試薬 本実施例のヒトＨＢＳ抗原測定試薬は、上記（２）項の
抗ＨＢＳ抗体及びＢＳＡ感作ラテックス液からなる第１
試薬と、上記（３）項の緩衝液からなる第２試薬とから
構成される２液系の試薬である。

【００６９】（５）標準ＨＢＳ抗原液 ＨＢＳ抗原を０、５０、１００、３００、５００ＩＵ／
ｍｌ濃度で含むヒト血清を使用した。

【００７０】（６）測定用血清 ・血清干渉評価用検体 精製ＨＢＳ抗原を約１００ＩＵ／ｍｌの濃度で含む標準
液（以下、１００ＩＵＨＢＳ抗原液という）を、ＨＢＳ
抗原及び抗ＨＢＳ抗体ともに陰性の血清を用いて、以下
に示す希釈率で希釈したものを、血清干渉評価用検体と
した。 ０／５・・・希釈に用いた陰性血清そのもの。 １／５・・・１００ＩＵＨＢＳ抗原液：陰性血清＝１：
４の比率で希釈。 ２／５・・・１００ＩＵＨＢＳ抗原液：陰性血清＝２：
３の比率で希釈。 ３／５・・・１００ＩＵＨＢＳ抗原液：陰性血清＝３：
２の比率で希釈。 ４／５・・・１００ＩＵＨＢＳ抗原液：陰性血清＝４：
１の比率で希釈。 ５／５・・・希釈せず。すなわち、１００ＩＵＨＢＳ抗
原液そのもの。また、同じ１００ＩＵＨＢＳ抗原液を生
理食塩水で上記と同様に希釈し、希釈系列を作製して、
血清干渉評価用検体とした。 ・非特異的凝集反応評価用検体 健常人血清を１５種類（検体Ｎｏ．１〜１５）用いた。

【００７１】（７）標準ＨＢＳ抗原液の測定及びＨＢＳ
抗原検量線の作成 上記（５）項の標準ＨＢＳ抗原液２０μｌに、上記
（３）項の緩衝液１５０μｌを混合し、３７℃で適時保
持した後、上記（２）項の抗ＨＢＳ抗体及びＢＳＡ感作
ラテックス液１５０μｌを添加攪拌し、この後、１分後
および５分後の波長７００ｎｍでの吸光度を測定した。
この間の吸光度の変化量を吸光度変化量とする。測定は
日立自動分析装置７０５０形を用いて行った。得られた
吸光度変化量と標準ＨＢＳ抗原濃度からＨＢＳ抗原の検
量線を作成した。結果を表２及び図１に示した。

【００７２】（８）測定用血清の測定 上記（７）項における標準ＨＢＳ抗原液の代わりに、上
記（６）項で用意した測定用血清（血清干渉評価用検体
及び非特異的凝集反応評価用検体）を用いたことの他
は、上記（７）項と同様の操作を行い、吸光度変化量を
求めた。得られた、それぞれの測定用血清の吸光度変化
量から、上記（７）項で作成した検量線を用いて、それ
ぞれの測定用血清のＨＢＳ抗原濃度を求めた。血清干渉
評価用検体の測定結果を表３及び図２に示した。非特異
的凝集反応評価用検体（健常人血清）の測定結果を表４
に示した。なお、表４において、判定の欄は、ＨＢＳ抗
原濃度測定値が１０ＩＵ／ｍｌ未満の場合はＨＢＳ抗原
陰性（−）、１０ＩＵ／ｍｌ以上の場合はＨＢＳ抗原陽
性（＋）と判定した結果を示したものである。

【００７３】実施例６ 実施例５における、（２）抗ＨＢＳ抗体及びＢＳＡ感作
ラテックス液の調製の項を次のようにして行ったことを
除いては、実施例５と同様にしてＨＢＳ抗原測定試薬を
作製し、実施例５と同様にして、標準ＨＢＳ抗原液及び
測定用血清の測定を行った。この結果、 （２）項で得ら
れた抗ＨＢＳ抗体及びＢＳＡ感作ラテックス液、（３）
項で得られた緩衝液及び検体の３種の液が混合された後
の混合液中のＢＳＡ濃度は約４．７％（ｗ／ｖ）とな
る。標準ＨＢＳ抗原液の測定結果を表２に、検量線を図
１に示した。血清干渉評価用検体の測定結果を表３及び
図３に示した。非特異的凝集反応評価用検体（健常人血
清）の測定結果を表４に示した。

【００７４】（２）抗ＨＢＳ抗体及びＢＳＡ感作ラテッ
クス液の調製 抗ＨＢＳ抗体を１．０ｍｇ／ｍｌの濃度で０．１Ｍリン
酸緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解した液１．０ｍｌに、平
均粒径０．３μｍのポリスチレンラテックス（固形分１
０％（ｗ／ｖ）、積水化学工業社製）０．５ｍｌとリン
酸塩緩衝食塩水（ｐＨ６．６ リン酸塩の濃度３６ｍ
Ｍ、食塩の濃度０．１Ｍ、以下このリン酸塩緩衝食塩水
をＰＢＳと略す）を添加し、 ３０℃にて６０分間攪拌し
た。次いで、この液に上記（１）項で得られたＢＳＡ溶
解液を８ｍｌ添加し（すなわち、ＢＳＡ量はラテックス
粒子の８重量倍量となる）、３０℃にて６０分間攪拌し
た後、この液を４℃にて２０分間、 １８０００ｒｐｍで
遠心分離することによって、洗浄した。 洗浄操作は、 ３
回行った。 得られた沈殿物に５％（Ｗ／Ｖ）濃度でＢＳ
Ａを含有する０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８．０）５０
ｍｌを添加し、ラテックスを懸濁した後、超音波破砕機
にて分散処理を行い、 固形分０．１％（Ｗ／Ｖ）の抗Ｈ
ＢＳ抗体及びＢＳＡ感作ラテックス液を調製した。ラテ
ックス上に担持されているＢＳＡは、遠心分離後の上清
中のタンパク質量を測定することにより、最終濃度とし
て上記懸濁液中の濃度として約０．０４％（Ｗ／Ｖ）が
担持されていることが分かった。 結果的に、抗ＨＢＳ抗
体及びＢＳＡ感作ラテックス液中に、５．０４％（Ｗ／
Ｖ）のＢＳＡが含有されていることになる。

【００７５】（３）緩衝液の調製 ＢＳＡを５％（Ｗ／Ｖ）含有する０．０５Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ７．０）に、ポリエチレングリコール（和光純
薬社製、平均分子量：５００００）を２％（Ｗ／Ｖ）の
濃度になるように溶解した。

【００７６】比較例２ 実施例５における、（２）抗ＨＢＳ抗体及びＢＳＡ感作
ラテックス液の調製の項を次のようにして行ったことを
除いては、実施例５と同様にしてヒトＨＢＳ抗原測定試
薬を作製し、実施例５と同様にして、標準ＨＢＳ抗原液
及び測定用血清の測定を行った。標準ＨＢＳ抗原液の測
定結果を表２に、検量線を図１に示した。血清干渉評価
用検体の測定結果を表３及び図４に示した。非特異的凝
集反応評価用検体（健常人血清）の測定結果を表４に示
した。

【００７７】（２）抗ＨＢＳ抗体及びＢＳＡ感作ラテッ
クス液の調製 抗ＨＢＳ抗体を１ｍｇ／ｍｌの濃度で０．１Ｍリン酸緩
衝液（ｐＨ７．５）に溶解した液１．０ｍｌに、平均粒
径０．３０μｍのポリスチレンラテックス（固形分１０
重量％、積水化学工業社製）０．５ｍｌを添加し、２５
℃にて６０分間攪拌した。次いで、この液に上記（１）
項で得られＢＳＡ溶解液を８ｍｌ添加し（すなわち、Ｂ
ＳＡ量はラテックス粒子の８重量倍量となる）、２５℃
にて６０分間攪拌した後、この混合液を１８０００ｒｐ
ｍで遠心分離した。得られた沈殿物に０．１Ｍリン酸緩
衝液（ｐＨ８．０）５０ｍｌを添加し、ラテックスを懸
濁させ、抗ＨＢＳ抗体及びＢＳＡ感作ラテックス液を調
製した。

【００７８】

【表２】

【００７９】

【表３】

【００８０】

【表４】

【００８１】表２及び図１より、実施例５・６及び比較
例２のヒトＨＢＳ抗原測定試薬は、ほぼ同等の検量線感
度を有していることがわかる。

【００８２】また、表３及び図２・３より、実施例５・
６のヒトＨＢＳ抗原測定試薬では、精製ＨＢＳ抗原を陰
性血清及び生理食塩水のいずれで希釈しても希釈検体の
測定値は、いずれも直線性が保たれており、また、両者
の測定値はほぼ一致していたことがわかる。一方、表３
及び図４より、比較例２のヒトＨＢＳ抗原測定試薬で
は、精製ＨＢＳ抗原を生理食塩水で希釈した場合は、そ
の希釈検体の測定値は、直線性が保たれているが、陰性
血清で希釈した場合は、その希釈検体の測定値は、直線
性が崩れ、生理食塩水での希釈検体に比べ負の誤差を生
じていることがわかる。すなわち、この測定値の乖離が
血清干渉による誤差ということになる。

【００８３】また、表４より、実施例５・６のヒトＨＢ
Ｓ抗原測定試薬では、健常人血清は測定値が全て１０Ｉ
Ｕ／ｍｌ未満となりＨＢＳ抗原陰性（−）であることが
判別できるが、比較例２のヒトＨＢＳ抗原測定試薬で
は、健常人血清の中には測定値が１０ＩＵ／ｍｌ以上の
ものがあり、これは非特異的凝集による偽陽性であると
考えられる。

【００８４】［Ｃ］ＨＢＳ抗体測定試薬 実施例７ （１）ＢＳＡ溶解液の調製 ４０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）に、５％（ｗ／
ｖ）濃度になるようにＢＳＡを溶解した。

【００８５】（２）ＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラテック
ス液の調製 ＨＢＳ抗原を２．０ｍｇ／ｍｌの濃度で１０ｍＭトリス
塩緩衝液（ｐＨ７．４）に溶解した液１．０ｍｌに、平
均粒径０．３μｍのポリスチレンラテックス（固形分１
０％（ｗ／ｖ）、積水化学工業社製）０．５ｍｌとリン
酸塩緩衝食塩水（ｐＨ６．６ リン酸塩の濃度３６ｍ
Ｍ、食塩の濃度０．１Ｍ、以下このリン酸塩緩衝食塩水
をＰＢＳと略す）を添加し、 ３０℃にて６０分間攪拌し
た。 次いで、この液に上記（１）項で得られたＢＳＡ溶
解液を３０ｍｌ添加し（すなわち、ＢＳＡ量はラテック
ス粒子の３０重量倍量となる）、３０℃にて６０分間攪
拌した後、この混合液を４℃にて２０分間、 １８０００
ｒｐｍで遠心分離することにより洗浄した。洗浄操作
は、 ３回行った。 得られた沈殿物に０．１Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ８．０）５０ｍｌを添加し、ラテックスを懸濁
させた後、超音波破砕機にて分散処理を行い、 固形分
０．１％（ｗ／ｖ）のＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラテッ
クス液を調製した。

【００８６】（３）緩衝液の調製 ＢＳＡを１％（ｗ／ｖ）濃度で含有する０．０５Ｍリン
酸緩衝液（ｐＨ７．０）に、平均分子量１，２００，０
００のポリビニルピロリドン（Ｌｕｖｉｓｋｏｌ Ｋ−
９０、ＢＡＳＦ社製、以下ＰＶＰと略す）を１．０％
（ｗ／ｖ）の濃度になるように溶解した。

【００８７】（４）抗ＨＢＳ抗体定試薬 本実施例の抗ＨＢＳ抗体測定試薬は、上記（２）項のＨ
ＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラテックス液からなる第１試薬
と、上記（３）項の緩衝液からなる第２試薬とから構成
される２液系の試薬である。

【００８８】（５）標準ＨＢＳ抗体液 ＨＢＳ抗体を０、１５０、３００、６００、１２００ｍ
ＩＵ／ｍｌ濃度で含むヒト血清を使用した。

【００８９】（６）測定用血清 ・血清干渉評価用検体 ＨＢＳ抗体を約３００ｍＩＵ／ｍｌの濃度で含む生理食
塩水（以下、３００ｍＩＵ／ｍｌＨＢＳ抗体液という）
を、ＨＢＳ抗原及びＨＢＳ抗体ともに陰性の血清を用い
て、以下に示す希釈率で希釈したものを、血清干渉評価
用検体とした。 ０／５：希釈に用いた陰性血清そのもの。 １／５：３００mIU/mlＨＢＳ抗体液／陰性血清＝１／４
の比率で希釈。 ２／５：３００mIU/mlＨＢＳ抗体液／陰性血清＝２／３
の比率で希釈。 ３／５：３００mIU/mlＨＢＳ抗体液／陰性血清＝３／２
の比率で希釈。 ４／５：３００mIU/mlＨＢＳ抗体液／陰性血清＝４／１
の比率で希釈。 ５／５：希釈せず。すなわち、３００mIU/mlＨＢＳ抗体
液そのもの。 また、同じ３００ｍＩＵ／ｍｌＨＢＳ抗体液を生理食塩
水で上記と同様に希釈し、希釈系列を作製して、血清干
渉評価用検体とした。 ・非特異的凝集反応評価用検体 健常人血清を１５種類（検体Ｎｏ．１〜１５）用いた。

【００９０】（７）標準ＨＢＳ抗体液の測定及びＨＢＳ
抗体検量線の作成 上記（５）項の標準ＨＢＳ抗体液２０μｌに、上記
（３）項の緩衝液１２０μｌを混合し、３７℃で適時保
存した後、上記（２）項のＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラ
テックス液１２０μｌを添加攪拌し、この後、１分後お
よび５分後の波長７５０ｎｍでの吸光度を測定した。こ
の間の吸光度の変化量を吸光度変化量（ΔＡｂｓ）とし
た。測定は日立自動分析装置７１５０形を用いて行っ
た。得られた吸光度変化量と標準ＨＢＳ抗体濃度からＨ
ＢＳ抗体の検量線を作成した。

【００９１】（８）測定用血清の測定 上記（７）項における標準ＨＢＳ抗体液の代わりに、上
記（６）項で用意した測定用血清（血清干渉評価用検体
及び非特異的凝集反応評価用検体）を用いたことの他
は、上記（７）項と同様の操作を行い、吸光度変化量を
求めた。得られた、それぞれの測定用血清の吸光度変化
量から、上記（７）項で作成した検量線を用いて、それ
ぞれの測定用血清のＨＢＳ抗体濃度を求めた。血清干渉
評価用検体の測定結果を表５及び図５に示した。非特異
的凝集反応評価用検体（健常人血清）の測定結果を表６
に示した。なお、表６において、判定の欄は、ＨＢＳ抗
体濃度測定値が３０ｍＩＵ／ｍｌ未満の場合はＨＢＳ抗
体陰性（−）、３０ｍＩＵ／ｍｌ以上の場合はＨＢＳ抗
体陽性（＋）と判定した結果を示したものである。

【００９２】比較例３ 実施例７における、（２）ＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラ
テックス液の調製の項を次のようにして行ったことを除
いては、実施例７と同様にして抗ＨＢＳ抗体測定試薬を
作製し、実施例７と同様にして、標準ＨＢＳ抗体液及び
測定用血清の測定を行った。血清干渉評価用検体の測定
結果を表５及び図６に示した。非特異的凝集反応評価用
検体（健常人血清）の測定結果を表６に示した。

【００９３】（２）ＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラテック
ス液の調製 ＨＢＳ抗原を２．０ｍｇ／ｍｌの濃度で１０ｍＭトリス
塩緩衝液（ｐＨ７．４）に溶解した液１．０ｍｌに、平
均粒径０．３μｍのポリスチレンラテックス（固形分１
０％（ｗ／ｖ）、積水化学工業社製）０．５ｍｌとＰＢ
Ｓを添加し、３０℃にて６０分間攪拌した。次いで、こ
の液に上記（１）項で得られたＢＳＡ溶解液を８ｍｌ添
加し（すなわち、ＢＳＡ量はラテックス粒子の８重量倍
量となる）、３０℃にて６０分間攪拌した後、この混合
液を４℃にて２０分間、１８０００ｒｐｍで遠心分離す
ることにより洗浄した。洗浄操作は、 ３回行った。 得ら
れた沈殿物に０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８．０）５０
ｍｌを添加し、ラテックスを懸濁させた後、超音波破砕
機にて分散処理を行い、 固形分０．１％（ｗ／ｖ）のＨ
ＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラテックス液を調製した。

【００９４】実施例８ 実施例７における、（２）ＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラ
テックス液の調製の項及び（３）緩衝液の調製の項を次
のようにして行ったことを除いては、実施例７と同様に
して抗ＨＢＳ抗体測定試薬を作製し、実施例７と同様に
して、標準ＨＢＳ抗体液及び測定用血清の測定を行っ
た。実施例８においては、（２）項で得られたＨＢＳ抗
原及びＢＳＡ感作ラテックス液、（３）項で得られた緩
衝液及び検体の３種の液が混合された後の混合液中のＢ
ＳＡ濃度は、 約４．８％（ｗ／ｖ）となる。血清干渉評
価用検体の測定結果を表５及び図７に示した。非特異的
凝集反応評価用検体（健常人血清）の測定結果を表６に
示した。

【００９５】（２）ＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラテック
ス液の調製 ＨＢＳ抗原を２．０ｍｇ／ｍｌの濃度で１０ｍＭトリス
塩緩衝液（ｐＨ７．４）に溶解した液１．０ｍｌに、平
均粒径０．３μｍのポリスチレンラテックス（固形分１
０％（ｗ／ｖ）、積水化学工業社製）０．５ｍｌとＰＢ
Ｓを添加し、３０℃にて６０分間攪拌した。次いで、こ
の液に上記（１）項で得られたＢＳＡ溶解液を１５ｍｌ
添加し、３０℃にて６０分間攪拌した後、この混合液を
４℃にて２０分間、１８０００ｒｐｍで遠心分離するこ
とにより洗浄した。洗浄操作は、３回行った。 得られた
沈殿物に２％（ｗ／ｖ）濃度でＢＳＡを含む０．１Ｍリ
ン酸緩衝液（ｐＨ８．０）５０ｍｌを添加し、ラテック
スを懸濁させた後、超音波破砕機にて分散処理を行い、
固形分０．１％（ｗ／ｖ）のＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作
ラテックス液を調製した。ラテックス上に担持されてい
るＢＳＡは、遠心分離後の上清中のタンパク質量を測定
することにより、 最終濃度にして上記懸濁液中の濃度と
して約０．３％（ｗ／ｖ）が担持されていることが分か
った。 結果的にＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラテックス試
薬中に２．３％（ｗ／ｖ）のＢＳＡが含有されているこ
とになる。

【００９６】（３）緩衝液の調製 ＢＳＡを８％（ｗ／ｖ）濃度で含有する０．０５Ｍリン
酸緩衝液（ｐＨ７．０）に、平均分子量１，２００，０
００のＰＶＰを１．０％（ｗ／ｖ）の濃度になるように
溶解した。

【００９７】比較例４ 実施例８における、（２）ＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラ
テックス液の調製の項及び（３）緩衝液の調製の項を次
のようにして行ったことを除いては、実施例８と同様に
して抗ＨＢＳ抗体測定試薬を作製し、実施例８と同様に
して、標準ＨＢＳ抗体液及び測定用血清の測定を行っ
た。比較例４においては、（２）項で得られたＨＢＳ抗
原及びＢＳＡ感作ラテックス液、（３）項で得られた緩
衝液及び検体の３種の液が混合された後の混合液中のＢ
ＳＡ濃度は、 約１．１％（ｗ／ｖ）となる。血清干渉評
価用検体の測定結果を表５及び図８に示した。非特異的
凝集反応評価用検体（健常人血清）の測定結果を表６に
示した。

【００９８】（２）ＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラテック
ス液の調製 ＨＢＳ抗原を２．０ｍｇ／ｍｌの濃度で１０ｍＭトリス
塩緩衝液（ｐＨ７．４）に溶解した液１．０ｍｌに、平
均粒径０．３μｍのポリスチレンラテックス（固形分１
０％（ｗ／ｖ）、積水化学工業社製）０．５ｍｌとＰＢ
Ｓを添加し、３０℃にて６０分間攪拌した。次いで、こ
の液に上記（１）項で得られたＢＳＡ溶解液を１５ｍｌ
添加し、３０℃にて６０分間攪拌した後、この混合液を
４℃にて２０分間、１８０００ｒｐｍで遠心分離するこ
とにより洗浄した。洗浄操作は、３回行った。 得られた
沈殿物に１％（ｗ／ｖ）濃度でＢＳＡを含む０．１Ｍリ
ン酸緩衝液（ｐＨ８．０）５０ｍｌを添加し、ラテック
スを懸濁させた後、超音波破砕機にて分散処理を行い、
固形分０．１％（ｗ／ｖ）のＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作
ラテックス液を調製した。ラテックス上に担持されてい
るＢＳＡは、遠心分離後の上清中のタンパク質量を測定
することにより、 最終濃度にして上記懸濁液中の濃度と
して約０．３％（ｗ／ｖ）が担持されていることが分か
った。 結果的にＨＢＳ抗原及びＢＳＡ感作ラテックス試
薬中に１．３％（ｗ／ｖ）のＢＳＡが含有されているこ
とになる。

【００９９】（３）緩衝液の調製 ＢＳＡを１％（ｗ／ｖ）濃度で含有する０．０５Ｍリン
酸緩衝液（ｐＨ７．０）に、平均分子量１，２００，０
００のＰＶＰを１．０％（ｗ／ｖ）の濃度になるように
溶解した。

【０１００】表５及び図５・７より、実施例７・８の抗
ＨＢＳ抗体測定試薬では、ＨＢＳ抗体を、ＨＢＳ抗原及
びＨＢＳ抗体共に陰性の血清及び生理食塩水のいずれで
希釈しても希釈検体の測定値は、いずれも直線性が保た
れており、また、両者の測定値はほぼ一致していたこと
がわかる。一方、表５及び図６・８より、比較例３・４
の抗ＨＢＳ抗体測定試薬では、ＨＢＳ抗体を生理食塩水
で希釈した場合は、その希釈検体の測定値は、直線性が
保たれているが、陰性血清で希釈した場合は、その希釈
検体の測定値は、直線性が崩れ、生理食塩水での希釈検
体に比べ負の誤差を生じていることがわかる。すなわ
ち、この測定値の乖離が血清干渉による誤差ということ
になる。

【０１０１】また、表６より、実施例７・８の抗ＨＢＳ
抗体測定試薬では、健常人血清は測定値が全て３０ｍＩ
Ｕ／ｍｌ未満となりＨＢＳ抗体陰性（−）であることが
判別できるが、比較例３・４の抗ＨＢＳ抗体測定試薬で
は、健常人血清の中には測定値が３０ｍＩＵ／ｍｌ以上
のものがあり、これは非特異的凝集によるものであると
考えられる。

【０１０２】

【表５】

【０１０３】

【表６】

【０１０４】［Ｄ］フェリチン測定試薬 実施例９ （１）ＢＳＡ溶解液の調製 ４０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）に、５％（ｗ／
ｖ）濃度になるようにＢＳＡを溶解した。

【０１０５】（２）抗フェリチン抗体及びＢＳＡ感作ラ
テックス液の調製 抗フェリチン抗体を１．０ｍｇ／ｍｌの濃度で０．１Ｍ
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解した液１．０ｍｌ
に、平均粒径０．３μｍのポリスチレンラテックス（固
形分１０％（ｗ／ｖ）、積水化学工業社製）０．５ｍｌ
とリン酸塩緩衝食塩水（ｐＨ６．６ リン酸塩の濃度３
６ｍＭ、食塩の濃度０．１Ｍ、以下このリン酸塩緩衝食
塩水をＰＢＳと略す）を添加し、 ３０℃にて６０分間攪
拌した。 次いで、この液に上記（１）項で得られたＢＳ
Ａ溶解液を２５ｍｌ添加し（すなわち、ＢＳＡ量はラテ
ックス粒子の２５重量倍量となる）、３０℃にて６０分
間攪拌した後、この混合液を４℃にて２０分間、 １８０
００ｒｐｍで遠心分離することにより洗浄した。洗浄操
作は、 ３回行った。 得られた沈殿物に０．１Ｍリン酸緩
衝液（ｐＨ８．０）５０ｍｌを添加し、ラテックスを懸
濁させた後、超音波破砕機にて分散処理を行い、 固形分
０．１％（ｗ／ｖ）の抗フェリチン抗体及びＢＳＡ感作
ラテックス液を調製した。

【０１０６】（３）緩衝液の調製 ＢＳＡを１％（ｗ／ｖ）濃度で含有する０．０５Ｍリン
酸緩衝液（ｐＨ７．０）に、平均分子量５０，０００の
ポリエチレングリコール（和光純薬社製、以下ＰＥＧと
略す）を２％（ｗ／ｖ）の濃度になるように溶解した。

【０１０７】（４）フェリチン測定試薬 本実施例のフェリチン測定試薬は、上記（２）項の抗フ
ェリチン抗体及びＢＳＡ感作ラテックス液からなる第１
試薬と、上記（３）項の緩衝液からなる第２試薬とから
構成される２液系の試薬である。

【０１０８】（５）標準フェリチン液 フェリチンを０、５０、１００、３００、６００ｎｇ／
ｍｌ濃度で含むヒト血清を使用した。

【０１０９】（６）測定用血清 ・血清干渉評価用検体 フェリチンを約４００ｎｇ／ｍｌの濃度で含む生理食塩
水（以下、４００ｎｇ／ｍｌフェリチン液という）をフ
ェリチンを、５ｎｇ／ｍｌ以下しか含まない血清（以下
５ng/ml フェリチン血清という）を用いて、以下に示す
希釈率で希釈したものを、血清干渉評価用検体とした。 ０／５：５ng/ml フェリチン血清そのもの。 １／５：４００ng/ml フェリチン液／５ng/ml フェリチ
ン血清＝１／４の比率で希釈。 ２／５：４００ng/ml フェリチン液／５ng/ml フェリチ
ン血清＝２／３の比率で希釈。 ３／５：４００ng/ml フェリチン液／５ng/ml フェリチ
ン血清＝３／２の比率で希釈。 ４／５：４００ng/ml フェリチン液／５ng/ml フェリチ
ン血清＝４／１の比率で希釈。 ５／５：希釈せず。すなわち、４００ng/ml フェリチン
液そのもの。 また、同じ４００ng/ml フェリチン液を生理食塩水で上
記と同様に希釈し、希釈系列を作製して、血清干渉評価
用検体とした。

【０１１０】（７）標準フェリチン液の測定及びフェリ
チン検量線の作成 上記（５）項の標準フェリチン液２０μｌに、上記
（３）項の緩衝液１５０μｌを混合し、３７℃で適時保
存した後、上記（２）項の抗フェリチン抗体及びＢＳＡ
感作ラテックス液１５０μｌを添加攪拌し、この後、１
分後および５分後の波長７５０ｎｍでの吸光度を測定し
た。この間の吸光度の変化量を吸光度変化量（ΔＡｂ
ｓ）とした。測定は日立自動分析装置７１５０形を用い
て行った。得られた吸光度変化量と標準フェリチン濃度
からフェリチンの検量線を作成した。結果を表７及び図
９に示した。

【０１１１】（８）測定用血清の測定 上記（７）項における標準フェリチン液の代わりに、上
記（６）項で用意した測定用血清（血清干渉評価用検
体）を用いたことの他は、上記（７）項と同様の操作を
行い、吸光度変化量を求めた。得られた、それぞれの測
定用血清の吸光度変化量から、上記（７）項で作成した
検量線を用いて、それぞれの測定用血清のフェリチン濃
度を求めた。血清干渉評価用検体の測定結果を表８及び
図１０に示した。

【０１１２】実施例１０ 実施例９における、（２）抗フェリチン抗体及びＢＳＡ
感作ラテックス液の調製の項及び（３）緩衝液の調製の
項を次のようにして行ったことを除いては、実施例９と
同様にしてフェリチン測定試薬を作製し、実施例９と同
様にして、標準フェリチン及び測定用血清の測定を行っ
た。実施例１０においては、（２）項で得られた抗フェ
リチン及びＢＳＡ感作ラテックス液、（３）項で得られ
た緩衝液及び検体の３種の液が混合された後の混合液中
のＢＳＡ濃度は、 約４．７％（ｗ／ｖ）となる。血清干
渉評価用検体の測定結果を表８及び図１１に示した。

【０１１３】（２）抗フェリチン抗体及びＢＳＡ感作ラ
テックス液の調製 抗フェリチン抗体を１．０ｍｇ／ｍｌの濃度で０．１Ｍ
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解した液１．０ｍｌ
に、平均粒径０．３μｍのポリスチレンラテックス（固
形分１０％（ｗ／ｖ）、積水化学工業社製）０．５ｍｌ
とＰＢＳを添加し、３０℃にて６０分間攪拌した。次い
で、この液に上記（１）項で得られたＢＳＡ溶解液を８
ｍｌ添加し、３０℃にて６０分間攪拌した後、この混合
液を４℃にて２０分間、１８０００ｒｐｍで遠心分離す
ることにより洗浄した。洗浄操作は、 ３回行った。 得ら
れた沈殿物に５％（ｗ／ｖ）濃度でＢＳＡを含む０．１
Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８．０）５０ｍｌを添加し、ラテ
ックスを懸濁させた後、超音波破砕機にて分散処理を行
い、 固形分０．１％（Ｗ／Ｖ）の抗フェリチン抗体及び
ＢＳＡ感作ラテックス液を調製した。ラテックス上に担
持されているＢＳＡは、遠心分離後の上清中のタンパク
質量を測定することにより、 最終濃度にして上記懸濁液
中の濃度として約０．０４％（ｗ／ｖ）が担持されてい
ることが分かった。 結果的に抗フェリチン抗体及びＢＳ
Ａ感作ラテックス試薬中に５．０４％（ｗ／ｖ）のＢＳ
Ａが含有されていることになる。

【０１１４】（３）緩衝液の調製 ＢＳＡを５％（ｗ／ｖ）濃度で含有する０．０５Ｍリン
酸緩衝液（ｐＨ７．０）に、平均分子量５０，０００の
ＰＥＧを２％（ｗ／ｖ）の濃度になるように溶解した。

【０１１５】比較例５ 実施例９における、（２）抗フェリチン抗体及びＢＳＡ
感作ラテックス液の調製の項及び（３）緩衝液の調製の
項を次のようにして行ったことを除いては、実施例９と
同様にしてフェリチン測定試薬を作製し、実施例９と同
様にして、標準フェリチン及び測定用血清の測定を行っ
た。実施例１０においては、（２）項で得られた抗フェ
リチン及びＢＳＡ感作ラテックス液、（３）項で得られ
た緩衝液及び検体の３種の液が混合された後の混合液中
のＢＳＡ濃度は、 約０．４９％（ｗ／ｖ）となる。血清
干渉評価用検体の測定結果を表８及び図１２に示した。 （２）抗フェリチン抗体及びＢＳＡ感作ラテックス液の
調製 抗フェリチン抗体を１．０ｍｇ／ｍｌの濃度で０．１Ｍ
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解した液１．０ｍｌ
に、平均粒径０．３μｍのポリスチレンラテックス（固
形分１０％（ｗ／ｖ）、積水化学工業社製）０．５ｍｌ
とＰＢＳを添加し、３０℃にて６０分間攪拌した。次い
で、この液に上記（１）項で得られたＢＳＡ溶解液を８
ｍｌ添加し（すなわち、ＢＳＡ量は、 ラテックス粒子の
８重量倍量となる）、３０℃にて６０分間攪拌した後、
この混合液を４℃にて２０分間、１８０００ｒｐｍで遠
心分離することにより洗浄した。洗浄操作は、 ３回行っ
た。得られた沈殿物に０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８．
０）５０ｍｌを添加し、ラテックスを懸濁させた後、超
音波破砕機にて分散処理を行い、 固形分０．１％（Ｗ／
Ｖ）の抗フェリチン抗体及びＢＳＡ感作ラテックス液を
調製した。

【０１１６】（３）緩衝液の調製 ＢＳＡを１％（ｗ／ｖ）濃度で含有する０．０５Ｍリン
酸緩衝液（ｐＨ７．０）に、平均分子量５０，０００の
ＰＥＧを２％（ｗ／ｖ）の濃度になるように溶解した。

【０１１７】

【表７】

【０１１８】

【表８】

【０１１９】表８及び図１０・１１より、実施例９・１
０のフェリチン測定試薬では、フェリチンを、５ｎｇ／
ｍｇフェリチン血清、及び生理食塩水のいずれで希釈し
ても希釈検体の測定値は、いずれも直線性が保たれてお
り、また、両者の測定値はほぼ一致していたことがわか
る。一方、表８及び図１２より、比較例５のフェリチン
測定試薬では、フェリチンを生理食塩水で希釈した場合
は、その希釈検体の測定値は、直線性が保たれている
が、５ｎｇ／ｍｇフェリチン血清で希釈した場合は、そ
の希釈検体の測定値は、直線性が崩れ、生理食塩水での
希釈検体に比べ負の誤差を生じていることがわかる。す
なわち、この測定値の乖離が血清干渉による誤差という
ことになる。

【０１２０】

【発明の効果】本発明１〜３の免疫学的測定試薬の構成
は上述の通りであり、本発明１〜３によると、検体中成
分による非特異的凝集反応や血清干渉の低減が図られ、
検体中の被測定物質である抗原（または抗体）を、感度
および特異性良く検出または定量できる免疫学的測定試
薬が提供される。

【０１２１】本発明３の免疫学的測定試薬の構成は上述
の通りであり、本発明３によると、血清干渉の影響が抑
制されるとともに、更に、生化学自動分析機に適用可能
とされていることにより、迅速、簡便に大量の検体を測
定することができ、かつ、客観性が高い梅毒の検出法に
用いることができる抗リン脂質抗体測定試薬・ＨＢＳ抗
原測定試薬・ＨＢＳ抗体測定試薬・フェリチン測定試薬
が提供される。

【０１２２】本発明４または５の免疫学的測定試薬の製
造方法の構成は上述の通りであり、本発明４または５の
方法を用いると、検体中成分による非特異的凝集反応や
血清干渉の低減が図られ、検体中の被測定物質である抗
原（または抗体）を、感度および特異性良く検出または
定量できる免疫学的測定試薬が提供される。

【０１２３】本発明６の免疫学的測定試薬の構成は上述
の通りであり、本発明６によると、検体中成分による非
特異的凝集反応や血清干渉の低減が図られ、検体中の被
測定物質である抗原（または抗体）を、感度および特異
性良く検出または定量できる免疫学的測定試薬が提供さ
れる。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例５・６及び比較例２の試薬による検量線
であり、横軸はＨＢＳ抗原濃度、縦軸は吸光度変化量を
示す。

【図２】実施例５の試薬によって、血清干渉評価用検体
を測定した結果であり、横軸は精製ＨＢＳ抗原の希釈
率、縦軸は測定値（ＨＢＳ抗原濃度）を示す。

【図３】実施例６の試薬によって、血清干渉評価用検体
を測定した結果であり、横軸は精製ＨＢＳ抗原の希釈
率、縦軸は測定値（ＨＢＳ抗原濃度）を示す。

【図４】比較例２の試薬によって、血清干渉評価用検体
を測定した結果であり、横軸は精製ＨＢＳ抗原の希釈
率、縦軸は測定値（ＨＢＳ抗原濃度）を示す。

【図５】実施例７の試薬によって、血清干渉評価用検体
を測定した結果であり、横軸は希釈率、縦軸は測定値
（ＨＢＳ抗体濃度）を示す。

【図６】比較例３の試薬によって、血清干渉評価用検体
を測定した結果であり、横軸は希釈率、縦軸は測定値
（ＨＢＳ抗体濃度）を示す。

【図７】実施例８の試薬によって、血清干渉評価用検体
を測定した結果であり、横軸は希釈率、縦軸は測定値
（ＨＢＳ抗体濃度）を示す。

【図８】比較例４の試薬によって、血清干渉評価用検体
を測定した結果であり、横軸は希釈率、縦軸は測定値
（ＨＢＳ抗体濃度）を示す。

【図９】実施例９・１０及び比較例５の試薬による検量
線であり、横軸はフェリチン濃度、縦軸は吸光度変化量
を示す。

【図１０】実施例９の試薬によって、血清干渉評価用検
体を測定した結果であり、横軸は希釈率、縦軸は測定値
（フェリチン濃度）を示す。

【図１１】実施例１０の試薬によって、血清干渉評価用
検体を測定した結果であり、横軸は希釈率、縦軸は測定
値（フェリチン濃度）を示す。

【図１２】比較例５の試薬によって、血清干渉評価用検
体を測定した結果であり、横軸は希釈率、縦軸は測定値
（フェリチン濃度）を示す。

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 被測定物質である抗原（または抗体）に
   対する抗体（または抗原）を不溶性担体に担持してなる
   免疫学的測定試薬であって、測定時の最終反応系中に免
   疫学的に不活性なタンパク質が１．５〜２０（重量／体
   積）％含まれることを特徴とする免疫学的測定試薬。
2. 【請求項２】 免疫学的に不活性なタンパク質がウシ血
   清アルブミンであることを特徴とする請求項１記載の免
   疫学的測定試薬。
3. 【請求項３】 被測定物質が、抗リン脂質抗体、ＨＢＳ
   抗原、ＨＢＳ抗体及びフェリチンからなる群より選ばれ
   た少なくとも１種であることを特徴とする請求項１また
   は２記載の免疫学的測定試薬。
4. 【請求項４】 被測定物質である抗原（または抗体）と
   の抗原抗体反応により生じる不溶性担体の凝集の度合い
   を検出することにより、被測定物質を測定するための免
   疫学的測定試薬の製造方法であって、不溶性担体を被測
   定物質である抗原（または抗体）に対する抗体（または
   抗原）溶液中、及び不溶性担体に対し１０〜１００重量
   倍の免疫学的に不活性なタンパク質を含む溶液中で同時
   または別々に感作することを特徴とする免疫学的測定試
   薬の製造方法。
5. 【請求項５】 免疫学的に不活性なタンパク質がウシ血
   清アルブミンであることを特徴とする請求項４記載の免
   疫学的測定試薬の製造方法。
6. 【請求項６】 請求項４または５記載の製造方法により
   得られることを特徴とする免疫学的測定試薬。