HU229234B1 - Use of a pharmaceutical composition comprising an appetite-suppressing peptide - Google Patents
Use of a pharmaceutical composition comprising an appetite-suppressing peptide Download PDFInfo
- Publication number
- HU229234B1 HU229234B1 HU9902670A HUP9902670A HU229234B1 HU 229234 B1 HU229234 B1 HU 229234B1 HU 9902670 A HU9902670 A HU 9902670A HU P9902670 A HUP9902670 A HU P9902670A HU 229234 B1 HU229234 B1 HU 229234B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- peptide
- glp
- pharmaceutical composition
- arg
- dna
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 91
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 23
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 13
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 29
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 28
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 23
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 claims description 23
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 21
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 19
- 101800000221 Glucagon-like peptide 2 Proteins 0.000 claims description 13
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 11
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000002830 appetite depressant Substances 0.000 claims description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 9
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 8
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 8
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 7
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 claims description 6
- 230000036528 appetite Effects 0.000 claims description 6
- 235000021407 appetite control Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 230000036186 satiety Effects 0.000 claims description 6
- 235000019627 satiety Nutrition 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 claims description 5
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 4
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 4
- TWSALRJGPBVBQU-PKQQPRCHSA-N glucagon-like peptide 2 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 TWSALRJGPBVBQU-PKQQPRCHSA-N 0.000 claims description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims description 3
- OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 2
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 claims description 2
- 241000149420 Bothrometopus brevis Species 0.000 claims description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 2
- NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N 0.000 claims description 2
- NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 2
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 2
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 claims description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical group O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 2
- JQFZHHSQMKZLRU-IUCAKERBSA-N Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N JQFZHHSQMKZLRU-IUCAKERBSA-N 0.000 claims 1
- 241000351920 Aspergillus nidulans Species 0.000 claims 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 claims 1
- 241000193749 Bacillus coagulans Species 0.000 claims 1
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 claims 1
- OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 Chemical compound C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N 0.000 claims 1
- 241000193385 Geobacillus stearothermophilus Species 0.000 claims 1
- 102400000326 Glucagon-like peptide 2 Human genes 0.000 claims 1
- 101100273566 Humulus lupulus CCL10 gene Proteins 0.000 claims 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 1
- 241000221960 Neurospora Species 0.000 claims 1
- 101710176384 Peptide 1 Proteins 0.000 claims 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 claims 1
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 claims 1
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 claims 1
- 238000005266 casting Methods 0.000 claims 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 claims 1
- ODJHDWLIOUGPPA-URVXVIKDSA-N dimemorfan phosphate Chemical compound OP(O)(O)=O.C1C2=CC=C(C)C=C2[C@@]23CCN(C)[C@@H]1[C@H]2CCCC3 ODJHDWLIOUGPPA-URVXVIKDSA-N 0.000 claims 1
- 208000018685 gastrointestinal system disease Diseases 0.000 claims 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 claims 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 claims 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 56
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 24
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 18
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 14
- 102100040918 Pro-glucagon Human genes 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 9
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 9
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 9
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 9
- 101710198884 GATA-type zinc finger protein 1 Proteins 0.000 description 8
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 8
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 8
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 230000003880 negative regulation of appetite Effects 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 8
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 7
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N EtOH Substances CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 206010018404 Glucagonoma Diseases 0.000 description 7
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 7
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 7
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 6
- 101500028771 Homo sapiens Glucagon-like peptide 2 Proteins 0.000 description 6
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 6
- 230000000578 anorexic effect Effects 0.000 description 6
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 6
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 6
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 6
- -1 Argys Chemical compound 0.000 description 5
- 108010058003 Proglucagon Proteins 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 4
- 102000035554 Proglucagon Human genes 0.000 description 4
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 4
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 4
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 4
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 4
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 4
- 108010024044 Glucagon-Like Peptide-2 Receptor Proteins 0.000 description 3
- 102100032879 Glucagon-like peptide 2 receptor Human genes 0.000 description 3
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 3
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 3
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091016366 Histone-lysine N-methyltransferase EHMT1 Proteins 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 210000003158 enteroendocrine cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 3
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 101100448893 Caenorhabditis elegans glr-2 gene Proteins 0.000 description 2
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010063919 Glucagon Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102100040890 Glucagon receptor Human genes 0.000 description 2
- 108010086246 Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Proteins 0.000 description 2
- 102100032882 Glucagon-like peptide 1 receptor Human genes 0.000 description 2
- 102100035043 Histone-lysine N-methyltransferase EHMT1 Human genes 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 2
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 2
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N WHWLQLKPGQPMY Chemical group C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 2
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 238000003277 amino acid sequence analysis Methods 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 235000021061 dietary behavior Nutrition 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 101150021650 gluA gene Proteins 0.000 description 2
- 210000001511 glucagon-secreting cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-fluorophenyl)oxane-4-carboxylic acid Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C1(C(=O)O)CCOCC1 CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150106774 9 gene Proteins 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 101800002326 Adipokinetic hormone Proteins 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 208000000103 Anorexia Nervosa Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004580 Aspartic Acid Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010017640 Aspartic Acid Proteases Proteins 0.000 description 1
- 101710082738 Aspartic protease 3 Proteins 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241001513093 Aspergillus awamori Species 0.000 description 1
- 210000002237 B-cell of pancreatic islet Anatomy 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100280051 Brucella abortus biovar 1 (strain 9-941) eryH gene Proteins 0.000 description 1
- 101100504103 Caenorhabditis elegans gpb-2 gene Proteins 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 102400000322 Glucagon-like peptide 1 Human genes 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 101000886868 Homo sapiens Gastric inhibitory polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 101001070498 Homo sapiens Golgin subfamily A member 6A Proteins 0.000 description 1
- 101000877314 Homo sapiens Histone-lysine N-methyltransferase EHMT1 Proteins 0.000 description 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 1
- 108700001097 Insect Genes Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000255777 Lepidoptera Species 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001490312 Lithops pseudotruncatella Species 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101100235161 Mycolicibacterium smegmatis (strain ATCC 700084 / mc(2)155) lerI gene Proteins 0.000 description 1
- 241000859665 Odonus Species 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 101710182846 Polyhedrin Proteins 0.000 description 1
- 101710093543 Probable non-specific lipid-transfer protein Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 101500026175 Rattus norvegicus Glucagon-like peptide 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 244000037909 Scirpus dichotomus Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 1
- 102100024173 Stomatin-like protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710082021 Stomatin-like protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100024172 Stomatin-like protein 2, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 101710196524 Stomatin-like protein 2, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 241000187398 Streptomyces lividans Species 0.000 description 1
- 101150106031 TRI gene Proteins 0.000 description 1
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 1
- 240000002657 Thymus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000007303 Thymus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 102000005924 Triose-Phosphate Isomerase Human genes 0.000 description 1
- 108700015934 Triose-phosphate isomerases Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150074732 U gene Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- NEHMKBQYUWJMIP-UHFFFAOYSA-N chloromethane Chemical compound ClC NEHMKBQYUWJMIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 235000019788 craving Nutrition 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 235000001434 dietary modification Nutrition 0.000 description 1
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 230000008508 epithelial proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001400 expression cloning Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 108010061330 glucan 1,4-alpha-maltohydrolase Proteins 0.000 description 1
- 230000009229 glucose formation Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N glycerine monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHUSDOQQWJGJQS-UHFFFAOYSA-N glycerol 1,2-dioctadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC UHUSDOQQWJGJQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N glycerol monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002414 glycolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 102000055817 human GOLGA6A Human genes 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000008141 laxative Substances 0.000 description 1
- 230000002475 laxative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 108010026228 mRNA guanylyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001577 neostriatum Anatomy 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 210000004739 secretory vesicle Anatomy 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001540 sodium lactate Substances 0.000 description 1
- 235000011088 sodium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 229940005581 sodium lactate Drugs 0.000 description 1
- DFIWJEVKLWMZBI-UHFFFAOYSA-M sodium;dihydrogen phosphate;phosphoric acid Chemical compound [Na+].OP(O)(O)=O.OP(O)([O-])=O DFIWJEVKLWMZBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 239000001585 thymus vulgaris Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 101150080369 tpiA gene Proteins 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/605—Glucagons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/26—Glucagons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Description
Étvágycsökkentő pepiidet. tartalmazó gyógyszerkészítmény alkalmazása
A találmány egy étvágycsökkentő pépeidét vagy egy étvágycsökkentő pépeid tartalmú frakciót tartalmazó gyógyszerkészítmény alkalmazására valamint egy említett pepiid segítségével történő étvágyézabáiyozási eljárásra vonatkozik.
A glukagont a hasnyálmirigy A-sejtje termeli# és az alacsony vércukorszintekre adott válaszreakcióban szabadul fel. Hatásának legfőbb helyszíne a máj# ahol a glökőztermeiést stimulálja. Ezért a vérgiüköz-hom.eosztázisban ez a legfőbb inzalinsemlegesitő hormon [ Unger, R, H. és L, őrei# Giukagon, Díabetes Mellitus, 4. kiadás, New York, Blsevíer, 104-120 (1990)] «
A olukagon egy nagyobb prekurzorből korlátozott proteoiízissel alakul. ki. A giukagon génjének molekuláris klónozása alapján kiderült, hogy a progiukagon prekurzor nemcsak a glukagont hanem két további GLF-l-nek és GLP-2-nek nevezett glukagonsserü pepiidet is kódol. A GLP-1~t és a GLP~2~t elkülönült exonok kódolják, mely alapján feltételezhető, hogy eltérő a biológiai aktivitások. Később kimutatták, hogy a progiukagon prekurzor eltérő feldolgozása folyamaton esik át abban a három különböző szövetben, melyekről ismeretes, hogy progiukagont termelnek: ezek a hasnyálmirigy A-sejtje, az intesztinális L-sejt, es a központi idegrendszer (CNS;. A giukagon tehát a sziget A»«« sejtjében a prekurzorbói szelektíven hasítódik ki, míg a GLPI és GLP-2 szelektíven az intesztinális L-sejtekból és a CNS-boi szabadul fel. [ ismertetve: Ungsr, A, H. ás L. Őrei, Glukagon, Diahetes Mellítus, 4. kiadás, New York., Elsevier, 104-120 (1.990)] „
Olyan specifikus GLP-1 receptorokat azonosítottak ('Thorens, B. Proc. Nati. Acad.. Sci. USA 89, 8841-864 5 (1592)] , melyek világosan eltérnek a glukagonreceptortői [ L. a. Jelinek és mtsai, .Science 259, 1014-1516 (1993)3 , és szöveti eloszlásuk különböző ( R. V. Campos és mtsai, Sndocrinology 134, 2156-2163 (1994)(, A GLP-1 az L-sejtekhől étkezés után szabadul fel, és inkretín hormonként működik (azaz elősegíti a glukóz-indukált inzulin felszabadulást a hasnyálmirigy B-sejtjéből) . A GLP-1 receptor ezért nagy mennyiségben expresszálódik a sziget B-sejtjeinek felszínén ( Möens és mtsai, Diahetes, 45, 257-261 (1996)] .
Kimutatták, hogy a GLP-2 indukálja az epitéiiális proliferációt (.Drucker, D. J. és mtsai, Proc, Natl. Acad- Sci. USA. 93, 7911-7916 (I9S6)j , és gasztrointesztinális betegségek kezelését ismertették GLP-2 tépközegben növesztett sejtekkel [Drucker, D. J. és Keneford, J. R., WO 96/32414 számú nemzetközi közzétételi irat). GLP-2 receptorról eddig még nem számoltak be.
Proglukagonból származó peptidek és táplálkozási viselkedés
Már korábban beszámoltunk transzplantálható anorexiás •glukagonőmák [0. D. Marisén és mtsai, Bndocrinoiogy 133, 20222030 (1993)4, valamint hipoglikérniás inzulinömák származtatásáról és alapításáról patkányban [0. D. Marisén és mtsai, Proc. Kati. Acad, Sói. USA. 85, 6652-6050 (1938)3 - Ilyen tumorok származtathatók a közös klonális eredetű piurípotens MSL-sejtekböl (0. D. Hadsen és mtsai, J. Ceil Bioi. 203, 2025-2034 (1986)),
melyek, bemutatják a: A~sejt illetőleg a. B-sejtek felé irányuló érési folyamatot (0. 3. Madsen és mtsai, Endocrinoiogy 133,
2022-2030! .
Az anorexiával összefüggő glukagonóma nagyon súlyos: akut kezdetű és- néhány nap elteltével a táplálékfelvétel teljes leállásához vezet . Az ilyen súlyos anorexia nehezen, mérhető össze a rágcsálókban lévő egyéb kísérletes tumorokkal,, és feltételezhető, hogy a glukagonőma egy nagyon erős jőllskottsági faktort termel, mely perifériás beadási módon keresztül hat. Már korábban bebizonyították, hogy az anorexiás giukagonómák egy nem fiziológiás átalakulást mutatnak, mely mind a glukagon mind a GLP1 kialakulását eredményezi [-0. D-. Madsen és mtsai, Endocrinoiogy 133, 2022-2030 (139331 - Sőt egy nem anorexiás glukagonóma variáns nem volt képes a prekurzor feldolgozására (0, D. Madsen és mtsai, Scand. -J. Clín. Láb, Invest. 55, suppl. 20,- 27-36 (19553] , Az emberi glukagonóma szindróma egyik összetevőjeként is a tömegcsökkenést említik ( J. J, Holst, Giucagon-producing tumora, Hormone-producing tumora of the -gastrointestinal tra-ct.. New York, Chureill Livingstone, 57-84 (1985sj , bár a különböző betegek között nagyfokú a variabilitás [S. J. Bhathena és mtsai, Glúcágonoma and glucsgohoma syhdrómé, Glucágón. Phisíoiogy, pathophísiology and morphology of the pancreatíc Acells, New York, Blsevier, 513-333 (1931)] «
Glukagon
A glukagonró1 kimutatták, hogy patkányokban részt vesz a spontán táplálékmennyiség szabályozásában, de általános hatása minimális, és a májra, bolygóidegí kapcsolódásokon keresztül fejti ki a hatását.. [ N. Gea.ry es m.tsa.i, Am. J. Physiol., 2.64, RÍ 16·™ * *
RÍ 22 (1993)] . gs a hatás csak akkor figyelhető meg, ha. a giukagont máj kapuér infűsióval adják he, mig a gyógyszerdözisok intröperitoneáiis beadása nincs hatással a tápiálékfelvételre áhestetett patkányokban (O. D. Madsen és mtsai, Sndocrinoiogy 133, 2022-2030 {1993}] ,
SLP-1
A GLP-1 tápiálkozásszabáiyQzásban betöltött központi szerepéről számoltak he (M. D. Tartón és mtsai, Natúré 379, 69-72 (1996)] . A GLP-1 Intraoerebroventrikuiáris CICY} beadása gátolja éhezhetett patkányokban a tápiálékfeivéteitA GLP-1 újbóli perifériás beadása nem volt hatással a táplálkozási .magatartásra ( M„ üc Törten és mtsai, Natúré 379, 69-72 (1996); O< Ό, Madsen és msai, Sndo-crinology 133, 2022-2030}], mely alapján feltételezhető-, hogy a tumor által termeit GLP-1 nem járulhat hozzá jelentősen a megfigyelt anorexiához.
ügy találtuk, hogy a GLP-2-nek erőteljes hatása van a táplálékfel vétel gátlására perifériásán beadva.
Feltételezhető, hogy a GLP-2, mely normális esetben a GLP-1gyei együtt szabadul fel az intesztinális L-sejtekből, perifériás: jóllakottság! faktorként saját, elkülönült szerepet iát el.
Következésképpen a találmány egy olyan gyógyszerkészítmény alkalmazására vonatkozik, mely egy gyógyászatilag elfogadható segédanyaggal vagy hordozóval együtt egy sav-etanolos extrakcióval, gélstöréssel és preparativ HPLC-vel előállított giukagonóma tumor extráktűm HPLC frakcióját tartalmazza, ahol az említett frakciót a 2. ábrán G4H9 frakcióként mutatjuk be, és fő
Összetevőként (több mint 40%) giukagonszerű peptid 2-t (G-LP-2) tartalmaz, vagy az említett frakció egy komponensét vagy az erű5 litert frakció kettő vagy több komponensét tartalmazza.
A találmány másik tárgya glnkagonszerű peptid~2~t (GLP-2) vagy annak egy variánsát vagy homológját tartalmazó gyógyszerkészítmény alkalmazása megromlott étvágyszabályozással Összefüggő betegségek vagy rendellenességek, megelőzésére vagy kezelésére.
A találmány további tárgya a következő aminosavszekvenciával rendelkező peptidet tartalmazó gyógyszerkészítmény alkalmazása,
X1 Η X2 D G 3 F S D £ Μ N T X3 L S X4 L A XS X® D F 1 X X L X? Xs T K I T D X* ahol, X1 jelentése NH2, Ö'FPEEVAIVEELGRR, DFPSBVTIVEELGRR, DFPEEVN1VEELRRR, vagy ezek fragmense, >Γ jelentése Alá vagy Gly,
X3 jelentése Ile vagy Val,
X* jelentése Asn, Ser vagy His,
Xs jelentése Alá vagy Thr,
X* jelentése Arg vagy Lys,
X' jelentése Ile vagy Let,
X” jelentése Gin vagy His, és
X jelentése OH, Lys, Arg, Arg-tys, Lys-Arg, Arg-Arg vagy LysLys, megromlott étvágyszabályozással összefüggő betegségek vagy rendellenességek. megelőzésére vagy kezelésére,
A találmány mégtovánfoi tárgya megromlott étvágy-szabályozással összefüggő betegségek vagy rendellenességek kezelési eljárása, ahol az eljárás során egy egyénnek, akinek Ilyen kezelésre van szüksége,· az. Itt meghatározott pepiid olyan mennyiségét adjuk be, mely az említett egyénben elegendő az étvágy csökkentésére vagy a jóllakottság kiváltására.
y
A találmány további tárgya egy itt meghatározott peptid alkalmazása megromlott étvágy-szabályozással összefüggő- betegségek, vagy rendellenességek kezelésére szolgáló gyógyszer előállítására .
A leírásabn a *pépeid kifejezés úgy értendő, hogy magában foglalja a GLP-2 pep-tidet vagy annak egy prekursor formáját valamint az olyan funkcionális- fragmensét, mely lényegében rendelkezik a teljes hosszúságú pepiid aktivitásával. Továbbá a ''pepiid kifejezés magában kívánja foglalni az említett pepiid homológjait. ís. Az ilyen homológok a humán GLP-2 aminosav szekvenciájával legalább- 50%-os, mint például 75%-os, mégjellemzőbben .90%~os azonos sági homológ! a fokot mutató aminosav szekvenciát tartalmaznak. Az azonossági fokot hagyományos módszerekkel. lehet megállapítani, lásd például Altshul és mtsai. (Bull. Mafch. Bio. 48, 603-618 (1986)] és He-nikoff és Henikoff (Proc. Natl, Acad. Sói. USA 89, 10915-10919 (1992)] cikkét.
A találmány homológjai egy vagy több aminosavszubsztitúcióval, -delécióal vagy -addicióvai rendelkezhetnek.
Erek a változtatások kismértéknek lehetnek, erez konzervatív aminosav-szubsztitúciók, melyek nem hatnak jelentősen a pepiid hajtogató-dására vagy aktivitására, kis deléciók, jellemzően egytől körülbelül öt aminosavig terjedő méretűek, kicsi amino- és karboxlterminális meghosszabbítások, mint például egy aminoterminális metionin-m-aradék, egy kicsi, legfeljebb körűibetűi 15 ami.nosavmaradékből álló linkerpeptíd, vagy egy olyan kis meghosszabbítás, mely a tisztítást teszi lehetővé, mint például egy poiihisztidinrész, egy antigén epitop vagy egy kötődőmén. Általánosan lásd Ford és munkatársai cikkét ( Protein Expressic.n ♦ * * * *ΧΦ
and Purificstion 2, 95-107 *1951)} . Konzervatív szubsztitúciók például a bázison aminosak (úgymint arginin,· lizin, hísztidin) a savas am.i.n.o-savak (úgymint giutaminsev ás aszparaginsav) , a poláros aminosavak (úgymint glutamin és aszparagin), a hitíro-fób aminosavak (úgymint lencin, izoleucín, valin) , az aromás aminosavak (úgymint fenilalanin, triptofán., tirozín) és a kis aminosavak (úgymint glícin, alanin, szerit, troonin, metionin) csoportján belüli szubsztitúciók...
A homológ egy ailélikus variáns lehet, azaz egy mutációból származó alternatív génforma, vagy egy mutált gén által kódolt megváltoztatott peptid, mely azonban lényegében azonos aktiivtással rendelkezik mint a natív GLP~2 peptid. Ezért ezek a mutációk némák lehetnek (a kódolt péptidben nincs változás) vagy megváltozott amínos&vssekvenciával rendelkező peptideket kódolhatnak .
A peptid homológja agy fajhomológ is lehet, azaz egy másik fajból származó hasonló aktivitású peptid. A GLP-2 peptid fajhomológjaira példa a humán, szarvasmarha, patkány, hörcsög, tengeri malac és sertés GLP-2.
A találmány egyik előnyös megvalósítási módjában a GL.P-2 peptid olyan, melyben X'1 jelentése Nrb, X' jelentése Aia, X5 jelentése Ile, χ1* jelentése Asn, X'1 jelentése Alá, X*3 jelentése Arg, X' jelentése Ile, Xá jelentése Gin, Xs jelentése OH. A peptid különösen a következő amínosavszekvenoiával rendelkezik::
HADGSFSDEMNTILDNLAARDF1NXL IQTKI
T D (humán GLP-2) vagy
H A D G S F S S X d K T 1 L b X L A T R D F 1 X X L I Q T X 1
T D (patkány GLP-2) vagy
Η A D G S F S D ΰ Μ N Τ V L D N L A T H D F I N N L L Η Τ Κ I
T B (.sertés GLP-2) ,
A peptid egy homológját úgy lehet izolálni, hogy előállítjuk a kérdéses faj egy sejtjének genomiális vagy cDNS könyv tárát > és a teljes homológot vagy annak egy részét kódoló DNS szekvenciákét szintetikus oligonukleotid próbákat alkalmazó szkrineiéss-el izoláljuk standard módszereket alkalmazva, például olyan módon, ahogy azt Sambrook és mtsai leírták [ Moleoular Cioníng: A Laboratory dánnál, 2. kiadás, Colé Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York (1989)1 vagy specifikus primereket alkalmazó· polimeráz láncreakció (PCR) segítségével, ahogy azt Sambrook és mtsai (fentebb) leírták.
A találmány a GLP-2 pepfcid egy variánsát tartalmazó készítményre is vonatkozik. A variáns egy olyan pepiid, melyben egy vagy több aminosavmaradékot más aminosavmaradékokkal helyettesitettünk. Egyik különösen előnyös megvalósítási módban az Aia-t Gly-vel helyettesítettük az érett peptid. 2-es helyzetében, Várhatóan ez a variáns hosszabb plazma féléletidőt mutat majd mint a natív peptid, ásd előnyös, mivel, a megfelelő étvágycsökkentéshez vagy jóliakottságindufcáiő hatás eléréséhez szükséges dózis így általában kisebb lesz.
A GLB-2 pepiidet vagy fentebb meghatározott homológját vagy variánsát a szakterületen jól bevált eljárások szerinti rekombináns DNS-teohnikákkal lehet előállítani.
Mégpontosabban, a GLP-2 pepiidet kódoló DNS-szekvencia a publikált humán preproglukagon DNS-szekvencia alapján izolálható vagy szintetizálható [ lásd J. M. White és mtsai, duciéin Acids
Rés. 14, 4719-47.30 (13665; G. I. Bell és mtsai. Natúré 304, 3S8~
3-71. (1983)] , például úgy állítható elő, hogy a megfelelő szövetből egy genomiáiis vagy cDNS könyvtárat állítunk elő, és a. GLP-2 peptid -egészét vagy részét kódoló DNS-szekvenciákra szkríne'liük :sm teta kus odaonu xieo-tio iii. Wa d >aKat hwnai nációval standard módszerek szerint (lásd Sambrook és mtsai, fentebb:) . £ célból a GLP-2-t kódoló DNS szekvencia előnyösen humán eredetű,
A GLP-2 pepiidet kódoló D-NS~s-s-erkezetet szintetikusan is előállíthatjuk jói bevált módszereket alkalmazva, például S-eaucage és Caruthers által leirt foszfoamidit módszerrel (. Tetrahedron Letters 22, 1859-1869 (1981)], vagy Matthes és mtsai által leírt módszerrel [ EMBO Journal 3, 801-305 (1984)1 , A foszfoamidit módszer szerint az oligonukleotídokaö megs-síntetitáljuk, például egy automata DNS-szintatizálóval,· tisztítjuk, snneáljuk., ligái juk és megfelelő vektorokba klónozzuk..
Továbbá a DNS-szerkezet kevert szintetikus és genomiáiis, kevert szintetikus és oDUS vagy kevert genomiáiis és oDNS- eredetű lehet (ahogy az alkalmas), melyet a teljes DUS-sserkeset különböző részeinek megfelelő szintetikus·, genomiáiis vagy cDNS eredetű fragmens-e-k iigáiásával állíthatunk elő standard technikák szerint.
A DNS szerkezetet specifikus prímereket alkalmazó polimeráz. láncreakcióval is elő lehet állítani, például ahogy azt az US 4 683 202 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban vagy Sarki és mtsai ( Science 239, 487-491 (1988) vagy Sambrook és mtsai (fentebb) leírták.
Egy jelenleg előnyben részesített megvalósítási módban a DÚSszerkezet -a Beli és- mtsai cikkének [ Natúré 304, 368-371 (1933)]
3. ábrásán bemutatott DNS~szekvencíát tartalmazza, valamint
X X X· ν olyan humán GLP-2-t kódoló nukleinsavszekveneiákat tartalma?., mely a genetikai kód degeneráltsága folytán különbözik a Bell ós mtsai cikkének (fentebb) 3. ábráján bemutatott DNSszekvenciájától. A DNS-szerkezet továbbá olyan nukieínsavszekvenciákat tartalmaz. mely egy humán GLP-2-t kódoló nukleinsavmolekulához { genomiális, szintetikus, cD'NS vagy RNS) nagyon szigorú körülmények között hibridisál (azaz eloáztatva 5X S5C-ben, és egy órán át előhitoriöizálva 40 C*-o.n 20%-os formamid oldat, 5X Dendhardt oldat, 5ömd nátrium-fos?fát «legyében, pB-S,8-on 50pg denaturált ultrahanggal kezeit borjú timusz DNSsel, mely után ugyanezen, 100 uM ATP-vei kiegészített oldatban 18 órán át hiforidizáljuk körülbelül 4ö*C-on, majd 0,4XSSC~ben 45°C körüli hőmérsékleten mossuk). Ez például egy más fajból származó GLP~2-t, például, patkány, szarvasmarha, hörcsög, tengeri malac vagy sertés GLP-2-t kódoló DNS-szekvencia lehet.
A GLP-2: kifejezéséhez a. GLP-l pepiidet kódoló DNS-szerkezetet egy megfelelő rekombínáns vektorba illesztjük. Ez bármilyen, a rekombínáns DNS-eljárásokban hagyományosan alkalmazott vektor lehet, és a vektor kiválasztása gyakran attól a gazdasejttől függ, amelybe a vektort be akarjuk vinni. Tehát a vektor egy autonóm módon replikalódó vektor lehet, azaz egy olyan vektor, mely eztrskromoszömáiis formában van jelen, melynek repiíkáciöja a kromoszómáidé repiikáciötői független, például, egy plazmid. Alternatív lehetőségként a vektor egy olyan vektor lehet, mely •egy gazdasejtbe bevíve a gazdasejt genomjába. Integrálódik, és azzal a kromoszóma (k)kai együtt repiikáiödik, melybe integrálóHot* t*
A vektor előnyösen egy olyan expressziős vektor, melyben a * χGLP-2 peptidet kódoló DNS-szekvencia működőképesen további, a DNS transzkripciójához szükséges szegmensekhez kapcsolódik. Általában az expresszíós vektor egy piazmídböl vagy egy virális BNS-ből származik, vagy mindkettő elemeit is tartalmazhatja. A működőképesen kapcsolódik kifejezés azt jelenti, hogy a szegmensek ágy vannak elrendezve, hogy a kívánt célnak megfelelően funkcionáljanak, például, a. transzkripció 'egy promoternél kezdődik, és a pépeidét kódoló DNS szekvencián át folytatódik.
Á promoter bármely olyan szekvencia lehet, mely transzkripciós aktivitást mutat a kiválasztott gazdasejtben, és a gazda sejttel homológ vagy heterológ fehérjéket kódoló génekből származhat .
A GLP-2 peptidet kódoló DNS transzkripcióját irányító megfelelő promóterek például emlős sejtekben az SV4Q- promoter ( Subramani és mtsai, Mól. Cell Bioi. 1, 8.54-864 (1981), az MT-1 (metállotionein gén) p.romotere ( Pa.imiter és mtsai, Science 222, 809-814 (1983)1, vagy az adenovírus 2 fő késői promotere.
Rovarsejtekben történő alkalmazáshoz megfelelő promoter például a. poiihedrin promoter [ US 4 745 051 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leíás, Vasuvedan és mtsai, FESS Lett. 311, 7-11 (1992) ) , a Plö promoter [ U - (4. Vlak és mtsai, J. Gén.
Virology 69, 765-776 (1988:)}, az Autografica californica polihedrőzis- vírus· bázikus fehérje promoter (EP 397 485 .számú közrebocsátás1 irat} a bakulovírus közvetlen korai gén 1 promoter ( EP 397 435 számú közrébocsátá.si irat) , vagy a.
b-akuiovirus 33X késleltetett-korai gén promotere- í US 5 155 037 számú és US 5 162 222 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás-] .
* ♦ *fc« X Λ > fc *♦*· ♦ * fc i fc * X*fc «fcfcfc fcfcfc» ««
JL- xi
Élesztő gasdasej tben történő alkalmazáshoz megfelelő promoterek például as élesztő glikolltikus génjelből származó promoterek ( Hitzeman és mtsai, u, Bioi, Chem,, 25 5, 12073-120-80 (1930).; Alfeer és Kawasaki, 1. Mól. áppl. Gén.. 419-434 {1982)] vagy az alkohol dehidrogenáz génekből szárstazó promoterek [ Young és mtsai, Génét io Sn.gineeri.ng of íiicro-organisms fór Chemicals (Hollaender és mtsai szerkesztésében.), Plenum Press, Few York (1982)) , vagy a TPI1 f BS 4 599 311 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) vagy ADH2-4c ( Busseii és mtsai, Natúré 304, 552-654 (1983)) promoterek.
Fonalat gomba gazdasejtekben történő alkalmazáshoz megfelelő promoter például az ADH.3 promoter ( 'McKnight és mtsai, The EMBO J, 4, 2093-2099 (1935)] vagy a tpiA promóter. Egyéb használható promoterek például az A, oryzaa ?AKA amilázát, a Bhizomucor miehei aszparáginsav proteinázét, az A. ni per semleges aamílázát, az A. ni per savstabil a-amilázát, az A. niper vagy az A. awamori glukoa-miiázát (gluA), a Ahlzomucor mieh-ei lipázt, az A, oryzae alkalikus proteázát, az A. oryzae trióz foszfát izomerézt vagy az A, nidúians acetamldázt kódoló génekből származó promóterek.. Előnyben részesítjük a TAKA-amiiáz és a gluA promotereket.
Bakteriális gazdasejtekben történő alkalmazásra megfelelő promóterek közé tartozik például a Bscilles stearothermophiius maltogén amiláz génjének, a Saoilias ilrteniíormis alfa-amiláz géngének, a Bacillus arnylöllgaefaciers BÁN amiláz génjének, a Saciiius subtiiis alkalikus proteáz génjének, vagy a Saoilius pumiiüs xilozidáz génjének promotere, vagy a Lambda Ρ« vagy P,, promoterek vagy az E. coli lac, trp vagy tac promoterei.
»«
A GLP-.2 pépeidét kódoló DNS-szekvenciát ha szükséges, működőképesen egy megfelelő terminátorhoz, mint például humán növekedési hormon terminátorhos { raimiter és mtsai idézett müvében] vagy (gomba gazdasejtek eseten; Téli [ Alber és Kawasaki idézett műve] vagy az ADK3 (Mchnight és mtsai idézett műve] terrrdhátorhoz is hozzákapcsolhatjuk, A, vektor további elemeket is tartalmazhat, mint például poiiadeniláciős szignálokat (például SV4G vagy adehovírus 5 Sic régiójából származókat), transzkripciós enhanszer szekvenciákat (például az SV4Ö enhanszert! és transzlációs enhanszer szekvenciákat (például az adenovirus VA RNS-eket kódoló szekvenciákat) tartalmazhat,
A rekombináns vektor továbbá tartalmazhat egy olyan DNSszekvenciát ís, mely lehetővé teszi a vektor replíkáíödását a kérdéses gazdasejtben. Sgy ilyen szekvencia például (amikor a gazdasejt egy emlőssejt) az SV40 repükációs origó.
Amikor a gazdasejt egy élesztősejt, a megfelelő, a vektor replikációját lehetővé tévő szekvencia az élesztő 2p-os piazmidjának RSR 1-3 replikáeíos génjei és replikáeíos origója,
A vektor egy szelektálható markert ís tartalmazhat, például egy olyan gént, melynek terméke egy hibát komplementéi a gazdasejtben, mint például a dihidrofolát reduktázt (dnfrí kódoló gén vagy a Schizosacoharomyces pombe TRI génje { leírta 9. R. Russell, Gene áy, 125-130 (1985)1 , vagy egy olyan gént, mely rezisztenciát biztosit egy gyógyszerrel, például ampiciliinnei, kanamicínnel, tétraeiklínnei, kloramfenikoilai, neomroinnei, higromícinnel vagy metotrexátcai szemben, A fonalas gombák esetén a szelektálható markerek közé tartozik az amdS, pyrG, ergo, níaD, sC,
Abból a célból, hogy a GLP-2 pepiidet a gazdasejtek szekréciós útjába irányítsuk, egy szekréciós .szign-álszekvenciával. (mely leader-sze-kvenciá.ként, preproasekvenciaként vagy pressekvenciaként is ismert) is elláthatjuk a .rekomblnáns vektort, A szekréciós szígnálszekveneiát a peptidet kódoló DNSszekvenciához kapcsoljuk a helyes leolvasási keretben. A szekréciós szignál szekvenciákat általában a peptidet kódoló DNSssekvencia 5” végéhez illesztjük. A szekréciós szignálszekvencia lehat olyan., mely normális esetben is a génhez kapcsolódik, vagy származhat egy olyan génből is, mely egy másik szekretáió-dó proteint kódol.
Az élesztősejtékből történő szekréció céljából a szekréciós szignálszekvencia bármely olyan szignáipeptidet kódolhat, mely biztosítja a kifejezett peptidnek a sejt szekréciós útjába történő hatásos irányítását, A szignálpeptid természetesen előforduló szignálpeptid vagy ennek agy funkcionális része lehat, vagy egy szintetikus peptid lehet. Ügy találták, hogy megfelelő szignálpeptid az α-faktor szignálpeptid ( lásd az US 4 870 008 számú, amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást! , az egér nyál amiláz szig.nálpeptidje [lásd 0. Hagenbuohle és mtsai, Natúré 269, 643-646 (1881)] , egy módosított karboxipeptidáz szignálpeptid ( lásd L.A. Wells és mtsai, Cell 48, 887-89'?
(1987)1 , az élesztő BARI szignálpeptid .( lásd a WO 87/02670 számé nemzetközi közzétételi iratot), vagy az élesztő asparagínsav proteáz 3 (YAPui szignálpeptid ( lásd M. Egei-Mitani és mtsai,
Yeast 6, 127-137 (1980)] .
Az élesztőben történő hatásos szekréció érdekében egy leaderpeptidet kódoló szekvenciát is beilleszthetünk, a -szignálφ * szekvenciától downstream és a G.LP-2 pe.pt ide t. kódoló DNSs-zekvenöiától upstream irányba. A Ieaderpeptid szerepe, hogy lehetővé tegye a kifejezett peptid irányítását az endopiazmatikus rétikuIámból a Golgi-kászülékbe és tovább egy szekréciós vezikuiumba abból a célból, hogy az a tényésztőkő-zagbe szekretálódjék (azaz, hogy a peptid a sejtfalon vagy legalább a sejtmembránon keresztül az élesztőseit periplazmatikus terébe exportáiödjékj . A. Ieaderpeptid az élesztő α-faktor ieaderje lehet [melynek alkalmazását például az US 4 546 082 amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban, az EP 16 202, SP 123 294, EP 123 544 és EF 163 529 számú európai közrebocsátásé iratokban írták le] . Alternatív lehetőségként a Ieaderpeptid egy szintetikus leade.rpe.ptid is lehet, azaz egy olyan Ieaderpeptid,· mely a természetben nem fordul elő. Szintetikus leaderpeptidék például a WO 89/92963 vagy a WO 92/11378 számú nemzetközi közzétételi iratben leírt módon állithatőak elő.
Fonalas gombákban történő alkalmazásra a szignáipeptid hagyományosan egy Aspergilius sp, amiláz vagy giukoamíiáz génjéből, egy Fóizomccor miebei lipáz vagy proteázt kódoló génjéből, egy önmicola lanugínosa lépést kódoló génjéből származhat. A szignáipeptid előnyösen egy A. ©ryzae TAFA amiiázt, A. nlger semleges α-amiiázt, A. ni per savstabil amiiázt vagy A. nigrer giukoamiláz't kódoló génből származhat.
Rovarsejtekben történő alkalmazáshoz a szignáipeptid hagyományosan egy rovargenböi származhat [ lásd a WO 90/05733 számú nemzetközi közzétételi iratot; , mint például a iepidoptora Manőcca sexta adipokinetikus hormon preknrzor szignál peptíöje ( lásd az US 5 0.23 328 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi le-
.1 c .írást) .
A G.LP-2-t kódoló ONB-szekvenoiák, a promoter és adott esetben a terminátor és/vagy szekréciós szignálszekvencia ilgálására és ezeknek a replikádéhoz szükséges információt tartalmazó megfelelő vektorba történő .1 nszertálására alkalmazott eljárások jól ismertek a szakterületen jártas személyek számára f lásd például Samferook és mtsai idézett művét] . A gazdasejtbe bevitt GLP-2 peptidet kódoló DNS-szekvencia homológ vagy heterológ lehet a kérdéses gazdasejthez viszonyítva- Ha homológ a gazdasejttel, azaz a gazdasejt a természetben termeli azt, jellemzően egy másik promoter szekvenciához vagy, ha alkalmazható, más szekréciós szignáiszekveneiához és/vagy terminátor szekvenciához kapcsoljuk működőképesen, mint a természetes környezetében. A homológ kifejezés egy a kérdéses gazdaszervezet számára natív poiipeptídet kódoló cDNS szekvenciát kívánja magában foglalni. A heterológ kifejezés egy olyan DNS-szekveuciát kivan magában foglalni, melyet a gazdasejt a természetben nem fejez ki. Tehát a DNSszekvencia egy másik organizmusból származhat, vagy egy szintetikus szekvencia 1ehet.
A gazdasejt, melybe a találmány szerinti DNS-szerkezetet vagy rekombináns vektort bevisszük, bármely olyan sejt lehet, mely képes ennek a pepiidnek a termelésére, és ezek közé baktériumok, élesztők, gombák és magasaobrendű eukarióta sejtek tartoznak.
Tenyészetben GLP-2 peptid termelésére alkalmas bakteriális gazdasejtek például a gram-pozitiv baktériumok, mint például a Baciiius törzsei, úgy mint S, subtilis, 8. iicheniforrniaf S.
lentus, B. brevis, B. stearotbermophiius, B. alka.lophii us, B.
ami lo.I Iquefaclens, S. coapa.Ians, B, oirculaos, B. la u tus, B,
XX χ * X ♦ xX X Χ Χ-Ζχ χχχ * χ«
X .-Λ • X ί megatóéri um vagy Β. thuringien-stis törzsek vagy a Strepiomyces törzsei/ úgy mint S. iívidans vagy 5. murinus vagy gram-negatív baktériumok, mint például az. Bscberichia coli. A baktériumok transzformációja pro toplaszt-transzí rotációval vagy kompetens sejtek alkalmazásával hajtható végre önmagában ismert módon { Sambrook és mtsai, fentebb] .
Amikor a pepiidet baktériumokban, mint például S. coliban expresszáljuk, a peptid a oítoplazmábsn maradhat, jellemzően nem szolubiiis granulumok formájában (zárványtestek.ként ismerjük őket), vagy egy bakteriális szekréciós szekvencia segítségévei a periplazmatikos térbe irányítható, A korábban említett esetben a sejteket üzáljuk, és a granuiumokat kinyerjük és denaturáljuk, ezután a pepiidet a denaturáló ágens hígításával űjrahajtógát juk. A később említett esetben a pepiidet a periplazmaiikus térből a sejtek szétroncsoiásával nyerhetjük ki, melyet például ultrahangos kezeléssel vagy ozmotikus sokkal hajthatunk végre abból a célból, hogy a periplazmatikvs tér tartalma felszabaduljon, és kinyerjük a pepiidet.
Alkalmas emlőssejtvonalak például a COS (ATCC CÉL 1650}; BHK (ATCC CRL 1632, ATCC COL IG}, CHL (ATCC CCL39} vagy GHO (ATCC COL 61} sejtvonalak. Az emlőssejtek transzíektáiásának és a sejtekbe bevitt DbS-szekvenoíák expresszáiásának módszereit írja le például. Kaufman és Sharp, J, Hol. Bíol. 159, 601-621 {1992] ;
Southern és Berg. J. Mól. Appi. Génét. 327-341 {1962); Loyter és mtsai, Proc. háti. Acad. Sci, USA 79, 422-426 {1992}; Higier és .mtsai, Celi 14, 725 {1998}; Corsaro és Bearson, Somatic Celi
Genetios 7, 503 {19815; Graham és van dér Eb, Virology 52, 456 (1973} és Neumann és mtsai, EMBö 0. 1, 841-645 {1982}.
φφ * * **< X X *♦*« « « φ * »*** φφφ*
Alkalmas élesztősejtek közé tartozik például a .Saccberomyces spp. vagy a Schi'sosaccöarczsyces spp., különösen a .Saccbatromyces' .cerevislae vagy a Facebaromyces ki uy veri törzsei, élesztőseitek heterológ DNS-sel történő transzformálására és éhből heterológ polipeptidek előállítására szolgáló eljárásokat ír le például as US 4 599 311, az US 4 931 373, az US 4 87ö 008, az US 5 37 743 és az US 4 395 075 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás, melyek mindegyike referenciaként épül be a leírásba. A transzformált sejteket egy szelektálható marker, általában gyögyszerrezísztenci-a vagy egy bizonyos tápanyag, például leucin hiányában történő növekedési képesség segítségével meghatározható fenotipus alapján szelektáljuk. Élesztőben történő alkalmazáshoz előnyben részesítjük a POTI vektort, melyet az US 4 931 373 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás ismertet. A SLP-2 peptidet kódoló DNS-szekvenciát megelőzheti egy szignáiszekveneia, adott esetben egy leaderszekvencía, például ahogy fentebb leírtuk. További megfelelő élesztősejtek például a KI uy veromyces törzsei, mint például X. iactis,Fanseruia, például F. polímorpha, vagy Pichia, például P. pástoris ( lásd Gleeson és másai#U- Gén, Microbioi. 132, 34593465 (1936); US 4 832 279 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás] .
Egyéb gombasejtekre példák a fonalas gombák sejtjei, például Aspergiiius' ssp., bénrospora spp., Fusarium spp. vagy Trioboberma. spp., különösen az A. orvsáé, A. nbduisns vagy A.
niper törzsei, A fehérjék expressziéjára az Aspergüiiss spp. alkalmazását írják le például az EP 272 277 és az S? 230 023 számú európai közrebocsátás! iratban, az F, oxysporum transzformálását * ·'« ♦ * ♦ « « * * * «*9 9 Μ * * « * « « » * *»* »»«« X**v például úgy lehet végrehajtani, ahogy azt Malardier és mtsai í Gene 78, Í47-15S (1989)] leírták.
Amikor egy fonalas gombát alkalmazunk gazdasejtként., a GLP-2 peptidet kódoló DNS~szer.kezetfcei alkalmas módon úgy transzformáljuk, hogy A DNS-s.zsrkezetet a gazda kromoszómájába integráljuk, hogy rekombináns gazdasejtet kapjunk. Az integráció általában előnyösnek tekintehetó-., mivel a DNS-szekvencia sokkal valószínűbben fennmarad a sejtben. A DNS-szerkezetek gazdakromoszőmába történő integrációját hagyományos módszerekkel lehet végrehajtani, például homológ vagy heterológ rekombinációval.
A rovarsejtek transzformációját és a sejtekben a heterológ poiipeptidek előállítását ágy hajthatjuk végre, ahogy azt az. OS 4 745 051, az US 4 879 236, az US 5 155 037, az US 5 162 222 amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leirásfosan és az EP 397 485 számú európai közrebocsátás! iratban leírták, melyek mindegyike referenciaként épül be a leírásba. A gazdaként alkalmazott rovar sejtvonal alkalmas módon egy Lepíd.optera sejtvonal, mint például Spodoptera frugiperda sejtek vagy Tríohopíosia ni sejtek ( lásd az US 5 077 214 száma amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást] . A tenyésztési körülmények megfelelő- módon, olyanok lehetnek, melyet például a NO 89/01029 vagy a WO 89/01028 számú nemzetközi közzétételi iratban vagy a korábban említett hivatkozásokban leírtak.
A fentebb leírt tranaszformált vagy transzfektált gazdasejteket ezután egy megfelelő- tápközegben tenyésztjük olyan körülmények mellett, melyek lehetővé teszik a GLP-2 peptid expresszióját, ezután a kapott GLP-2 peptidet kinyerjük a tenyészetből .
·# . . Λ
A sejtek tenyésztésére alkalmazott tápközeg valamely a gazdasejtek tenyésztésére- alkalmas hagyományos tápközeg lehet, mint például megfelelő kiegészítő anyagokat tartalmazó minimál vagy komplex tápközeg. A megfelelő tápközegek a kereskedelmi forgalmazóktól beszerezhetőek, vagy a publikált receptek (például, az American Type Culture Colleetion katalógusainán lévő receptek) alapján előállíthatóak. A sejtek által termelt GLP-2 peptid ezután a tenyészközegből hagyományos módszerekkel nyerhető ki, ezek közé tartozik a gazdasejtek. centrifugálással vagy szűréssel történő elkülönítése a tápközegből, a fehérje-szerű komponensek kicsapása a felülúszőbói vagy a szűrletből egy só, például ammőnium-szulfát segítségévei, tisztítás különböző kromatográfiás eljárásokkal, például ioncserés kromatográfiávaí, g-élszöréses kromatográf iával, affinitáskromatográfiával vagy hasonlóakkal>
A találmány szerinti gyógyszerkészítményben a GLP peptidet bármely a. gyógyszerkészítmények formálásának jól bevált eljárásával szerelhetjük ki, például úgy, ahogy azt a Remington' s Fh-armaeeutical Sdiences-ben (1985) leírták. A készítmény lehet egy szisztémás injekcióhoz vagy infúzióhoz alkalmas formában, és mint ilyet egy alkalmas folyékony hordozóval, mint például, steril viszel vagy egy izotóniás sóoldattal vagy glukózoldattal formálhatjuk. A készítményeket a szakterületen jói ismert hagyományos sterilizálásos- technikákkal sterilizálhatjuk. A kapott vizes oldatokat a felhasználáshoz csomagolhatjuk, vagy aszeptikus körülmények között szűrhetjük és liofilízálhatjuk, és a líofiiizált készítményt a beadás előtt steril vizes oldattal keverhetjük össze. A készítmény olyan gyógyászatilag elfogadható segédanyagokat tartalmazhat, melyek a megfelelő fiziológiás körül*
» * * « b »’ ϊ ·»♦* menyekhez szükségesek, mint például pufferoló szereket, tónus beállító szereket és hasonléakat, például nátrium-acetátor,· nátrium-laktatót, nátrlum-kloridot, kálium-kloridot, kalciumklóridőt, stb.
A találmány szerinti gyógyszerkészítményt orron, bőrön, tüdőn és végbélen keresztüli beadáshoz alakíthatjuk ki. A készítményben alkalmazott gyógyászatílag elfogadható hordozó vagy oldószer bármely .hagyományos szilárd hordozó lehet. Szilárd, hordozók például: laktóz, fehér agyag, szacharóz, tálkám, zselatin, agar, pektin, gumíerábi kum, magnézium-sztearát és .szfcearinsav. Hasonló módon a hordozó vagy oldószer valamilyen szakterületen Ismert, elnyújtott felszabadulást okozó anyagot, mint például glicerinmo-nosstearátot vagy glícerin-disztearátot. tartalmazhat Önmagában vagy egy viasszal keverve.
Különösen előnyös lehet a találmány szerinti készítményt egy elnyújtott fel szabadulás-ó. készítmény formájában biztosítani·. Mint ilyent, a. készítményt a G1P-2 peptidet tartalmazó mikrokapszulákként vagy mikrorészecskékként formálhatjuk, a peptidet egy megfelelő gyógyászatílag elfogadható, biológiailag lebomlö polimerbe, mint például egy poli tej; savba, poilglikolsavba vagy egy tejsav/glxkolsav kopolimerbe diszpergálva.
Az orron keresztüli beadáshoz a. készítmény egy folyékony hordozóba, különösen egy vizes hordozóba feloldott vagy sznszpendált GLF-2 peptidet tartalmazhat aeroszolod használatra. A hordozó adalékanyagokat, mint például szoiubiiizáió szereket,· például propilénglikolt, felületaktív anyagokat, abszorpciótokozókat, mint például lecitínt (foszfatidil-koiint) vagy eiklo* # * * X ·> <· > V <
-* # .«.«« V V V » « « y χ >
* ♦ » * s«»í »«*♦ *» dextrínr, vagy tartósítószereket, mint például parabénekei tartalmazhat .
Általánosságban a találmány szerinti vegyületeket egységdózis formává alakítjuk ki, mely egységdózisonként agy gyógyászatilag elfogadható hordozóval együtt 0,5~5uOmg peptídet tartalmaz.
A GLP-2 peptid előnyös az étvágycsökkentés vagy a jóllakottság kiváltásban történő aiakalmazáshoz, mint például a megromlott étvágyszabályozással összefüggő betegségek vagy rendellenességek megelőzésére vagy kezelésére. Ilyen betegség vagy rendellenesség például az elhizottság és a II~es típusú diabétesz. Egy betegnek beadott GLP-2 peptid dózisa a kezelendő állapot típusától és súlyosságától függ majd# és általában körülbelül iöpg/kg testtömegtől körülbelül 5mg/kg testtömegig terjed.
A találmány szerinti gyógyszerkészítményben a GLP-2 pepiidet egy másik étvágycsökkentő vagy jöllakottságkiváitó szerrel lehet összekeverni. Az egyik ilyen szer a GLP-1, melyről kimutatták, hogy van bizonyos étvágycsökkentő hatása { lásd M. D. Tartón és mtsai, Natúré 379, 69-72 (199S január é.}J .
A találmány magában foglalja, hogy a megfelelően jelölt GLP-2 peptídet, például a radioaktívan jelzett GLP-2-t egy GLP-2: receptor aznosítására lehet felhasználni, olyan szövet (ek) et alkalamazó kötési vizsgálatokban, melyek várhatóan GLP-2 receptort expresszálnak, ilyen például a hípotaiamusz szövet. Araikor a receptort a GLP-2 kötéssel lokalizáltuk, azt expresszios klónozással klónozhatjuk, azaz oly módon, hogy a kérdéses szövetből cDNS könyvtárat készítünk, a cDNS-t megfelelő vektorokba klónozzuk, és a vektorokat egy megfelelő sejtbe vezetjük be, hogy végrehajtsuk a cDNS expresszíóját, majd ezután egy recep❖ * tort expresszálo kiónt azonosítunk a GLF-2-höz történő kötés segítségévei. Sgy, a receptort stabilan expresszálo sejtvonalat ezután GLP-2 agonisták (azaz a receptorra ható azon vegyületek, melyek jőiiafcotságot indukálnak vagy étvágyat csökkentének} vagy GLB--2 antagonisták (azaz olyan vegyületek, melyek gátolják a GLR-2 hatását a receptorra, azaz rák anorexia vagy anorexia nervosa kezelésére alkalmazhatóak) szűrővizsgálatára használhatjuk fel.
A találmányt a továbbiakban a következő példákban mutatjuk be az igényelt oltalmi kör korlátozásának szándéka nélkül.
a
Anorexiás tumorokat hoztunk létre patkányokban úgy,, ahogy azt már korábban leírták ( Madsen, 0. D. és mtsai, Sndocrinology X33, 2022-2030 (1993)1 ötven anorexiás 12C3AH (HSL-G-AN) tumort (-80 *€~on), mely 5ö,Q7g nedves szövetnek felel meg, 4°C-on 700mi sav-etanollai (36% etanoI/ö,7M HCl, 3/1 tf/tf) homogenizáltunk. A homogén!zárást 5 percen át egy előhűtött (4°C) 2 literes
Naring Commercial Slender keverőben a maximális sebességen végeztük, A homogenizáiás után az elegyet 4aü~on 16 órán át kevertük. Az elegyet 9000 RPM-nél 9 cC--on 1 órán át centrlfugáituk. Vákuumrotációval a feiülüszo térfogatát 20%~ra csökkentettük. Ezalatt az eljárás alatt, melyben az. etanol nagyrészét eltávolijak, egy kevés csapadék alakul ki. őzt a csapadékot 4 °C-on egy órán át 20 000 RPH-mei végzett centrifugálással eitávoiitottuk, A feiüiúszót, ami még mindig tartalmazott némi lipidszern anyagot, szűrtük, és áml/pere átfolyási sebességnél egy LiChroprep Ra-lS (Merck) osslepra (2,5 x lOcm) vettük fel, melyet 0,1%-os TS’A-val egyensúlyoztunk ki zmi/perc átfolyási se»4* Χ««4 94 bességnél, Az oszlooot IQöml 0,1%-ös TFA-va.l mostuk folyási sebességnél. A kötött anyagot áOOmi,
4mi/perc a;
70% (tf/tl acetonitrílt tartalmazó 0,1%-cs T'FA-val acetonitrílt vákaumrotáciővaí távolítottak el, és a kapott elegyet líofilizáltuk. Liofilizálás után az anyagot Somi vízben feloldottuk, és pH-t 42ö pl Ib-os NaOH-val 5,3~as értékre igazítottuk. Az elegy további ρΗ-6-ra történő titrálása egy csapadék képződéséhez vezetett. Hintán pH-5,3-ra visszatitráltuk, az a csapadék ismét feloldódott. Ezért a pK-t 5,3-as értéken hagytuk, és az eiegyet líofilizáltuk.
Az 50 tumor üofilizált anyagának teljes hozama 359 mg száraz por volt,
2. példa: Első tisztításilépés:Szűrés Sephsdex G-?5-ön A sa.vas~etano!os extraktumból származó liofilizált anyagot (278 mg) , mely 38 egyedi tumornak felel meg, 20 mi !M HAc-ban újra feloldottuk, és. Sephadex G75 oszlopra (5 x 50cm) vittük fel, Az oszlopot 1M HAc-cal egyensúlyoztuk, ki és eluáltunk 55 ml/óra átfolyási sebesség mellet, és iöml-es frakciókat gyűjtöttünk. Minden frakciónál rögzítettük a 280nm-nél mért abszorpciót. A. géiszűréses kromatogrammot az 1. ábrán mutatjuk be. A különálló frakciókat a 'következő 5 főfrakcícoa gyűjtöttük Össze:
GI (30-39. frakció), G2 (40-45. frakció), G3 (40-66. frakció),
G4 (67-91. frakció) és G5 (92-118. frakció), és ilofiiisás után tisztítási lépés:
SPLC-je
A gélszúréses· csoportok étvágycsökkentő aktivitása közül néhány azt mutatta, hogy az aktivitás a G4 csoportban van, és ezt a csoportot preparatív HPLC-vel tovább frakcionáltuk . A iiofilizált. G4 anyagot (30 tumornak felei meg) 15 ml 0,1%-os TFA-ban újra feloldottuk# és egy Vydac 2Ι4ΤΡΓ022 €4 oszlopba {2/2 x 25cm) pumpáltuk# melyet 0,1%-os TFA-ban egyensúlyoztunk ki. Az oszlopot 2öml ü,l%-os TFA-val, majd IQöml M.eCN/H2O/TFA-vaI (10,0:39,9:0,1 térfcgatarányban) mostuk. Az anyagot 25 &C-on alacsony, 4ml/perc átfolyási sebesség mellett MeCh/H^O/TFA-bői (10:79/9:0,1 térfogatarányú) és MeCN/H2Q/TFA-ből (35,0:34,9:0,1 térfogatarányú) kialakított lineáris gradienssel eluáltuk 110 percen át. Az UV abszorpciót 214 nm-en és 280 nm-en nyomonkovettük. A HPLC kromatogrammot (280 nm-en nézve) a 2. ábrán mutatjuk be. Tíz fő csoportnak megfelelő frakciót hoztunk létre, ahogy azt a 2. ábra mutatja. A térfogatot vákuumrotációval hozzávetőleg 25%-ára csökkentettük, a frakciókat iiofílízáltuk, és biológiai vizsgálattal teszteltük.
Étvágycsökkentő aktivitást találtunk a G4H9 frakcióban (6. példa), ennek a frakciónak a peptiójeít amínosavszekvenciaanalízissel és tömegspektrometriás analízissel elemeztük Í4.
példa).
4. példa: A G4H9 frakcióban lévő peptldek kémiai jellemzése
Egy Applied Biosystems Hodel 477 gázfázisú szekvenátcrt alkalmazva automatizált Somán iebontásos aminosav-szekvenciaanalízist hajtottunk végre lényegében a gyártó által leírt módon. A tömegspetrometrlás analízist egy Api 111 LC/HS/MS rendszert íScíex, Thornhiil, Ont., Kanada) alkalmazva végeztük el. A.
háromszor négypólusos berendezés tömeg-töltés aránya ím/zi 02400 kiterjedésű, és egy pneumatikusan segített elktrospray fionspraynek is hívják) interfésszei rendelkezik í Bruins, A.P., > * « * φ φ φ. β φ Φ χ X *
Covey, Τ. R-, és Honion, J. D. Anal. Chem. 53,- 2642-2646 (1237} és Covey, T. R. Bonner, R. F., Sinusban, Β. 1, és Honion, J, D.f Rapid Commun. Mass Spectrom. 2,- 249-256 {1385}. A minta bevezetését egy fecskendős infúziós pumpával hajtottuk végre (S'age Instruments, Cambridge, MA} egy hozzá fuzionált kapillárison keresztül (75mm-es belső átmérő} 0,5-1 ml/percre beállított tolvadekátfolyási sebesség mellett. A készülék m/z skáláját poli(propílén-glikölokü (PFC-k; egyszeresen töltött ammóniám addukt ionjaival kalibráltuk egység feloldás mellett, A tömegmérések pontossága általában 0,02%-nál jobb volt.
G4H9 frakciói
Ögy találtuk, hogy az ebben a frakcióban túlsúlyban lévő peptid aminosav-szekvenciája a következő:
HADGSESDEMNIlLDKLATRDFINhLIQTKll
Ώ.
Tömegspektrometriával mért molekulatömege 3736 volt.
Sz a peptid azonos a patkány GLF-2 (1-33} pepiiddel. Kisebb mennyiségben a következő két péptidet találtuk:
D F Ρ E S V A I A £ S 1 G P, R H A D G S F S D £ Μ Κ Τ I 1 D N L
Ε I N v? L I Q Τ Κ I T D és
F £ R Η A S 0 T F T S D V S S Y L £ G Q A A Κ E F I A W L
Ezek a peptidek azonosak space rpep t idde 1 megköss z abb i t ot t patkány 'GLP-1 pepiiddel (1-36. amid}.
a:
N-terminálisán a atkán? GLR-2-vei illetőién
5. példa: Tasztáljárás az étvágy:
ás mérésére egerekben
AMUU.KMhKhhhKUhUAWU.XhXhhhhhWO.hhhhhUUMdMMdeH^hkhkXXXhKMU.hkkhUUAUW
Az egerektől két napon át megvontuk a normái táplálékukat, és a táolálékmeqvonás első naogán szabadon hozzáférhetően 20%—os
Φ X * » szacharóz oldatát adtunk. A táplálékmegvonási időszak második napja után az egerekbe intraperitoneállsan ö,o ml tesztanyagot tartalmazó oldatot oltottunk. Harminc perccel az oltás után az egereket külön-küiön a nyolc 15 cm4~s box egyikébe helyeztük, melynek rozsdamentes acélrács alja volt, és egy üveg itatőcső nyúlt a bo-xba. Az itatócső egy 20%-os szacharóz oldatot tartalmazó tartállyal volt összekötve, az itatócsö belseje egy elektródot tartalmazott# mellyel ki lehetett mutatni# amikor az egér •az oldattal ívási kontaktusba lépett, oly módon# hogy mértük az egéren átfolyó gyenge (nem érzékelhető) elektromos áramot az itatócső elektródját a rozsdamentes acélháló aljazatta! összekötő elektromos készüléken keresztül. A szacharóz oldat fogyását tízperces időszak elteltével mértük oly módon# hogy a tesztidő alatti szacharóz-oldattal történő érintkezés teljes mennyiségét elektromosan rögzítettük. Az adott tesztanyaggal elért étvágycsökkenés mértékét úgy határoztuk meg, hogy statisztikailag őszszehasonlítottuk a kontrol! (hordozóval kezeit) egerek szacharózfogyasztását a tesztanyaggal kezelt egerek fogyasztásával. Az étvágycsökkenés· mértékét a kontrolicsoport válaszának százalékában fejeztük ki 6. példa: Stvágycsökkenés tesztelése aGbP-2-t tartalmazó frakciókkal
Az egereket étvágycsökkenésükre teszteltük (lásd 5, példa) egy tesztanyaggal végzett kezelés után. A teszhanyag a 3. példa szerint előállított (G4 gélszuréses frakció) vagy a 4. példa szerint előállított (G4H? HPLC frakció) anorexiás glukegonóma tumor extraktumaiból állt, melyeket foszfáttal, puffe.ro.lt fiziológiás sóoldatban oldottunk fel·. A 3,3 tumornak megfelelő G4 géifiltráció.s- frakcióból származó liofilizált am íqc . arfcaImaζo
Oá gélssűréses frakció· (lásd 4. példa és· 2. ábra) 10 HPIC alfrakciői körül csak a G4H9 G-LP-2 tartalmazó frakció- adott egv statisztikaisag <·? ·γ φ* ή V* t: e
-Ο ... %·« Λ £ Μ. Λ. Λ· JVVA Α » >
etvagyosö.asenést?
szacharózéogyasztást 49%-kal -csökkentve, amikor megfelelő liofilizált anyagot adtunk be.
GLP-2 alkalmazásával
Egereket teszteltünk étvágycs-Ökkenésükre az 5. példában leírt módon, miután foszfáttal pufférólt fiziológiás sóoldatban oldott szintetikus sertés GLP-2-bŐl álló tesztanyaggal kezeltük őket. A sertés GLP~2~nek a következő az aminosavs2ekven-ciája:
B A D G S F S D E Μ Ν T V L D S L A T R D F X N W 1 L Η T Κ I ϊ D, mikrogramm szintetikus sertés GLP-2-t tartalmazó tesztoldat intraperit-oneélis injekciója a szacharózfogyasztást 38%-kal csökkentette.
8. példa: Teszteljárás az étvágycsökkenés mérésére egerekben
Az eljárás megegyezik, az 5. példa szerinti eljárással, azzal a különbséggel, hogy a 20%-os szacharóz oldat helyett csecsemő tápszer tejet (Gompiain j alkalmaztunk. A tesztanyagot 1% albn~ minta 1 kiegészített foszfáttal puff-erőit fizioióoi-ás sőoldatből álló hordóséban oldottuk fel. A hordozóban oldott tesztanyagokat vagy intravénásán (IV) 100 mikről!teres térfogatban, vagy intracerebroventrikulár lsen (1CV) 10 míkro-literes mennyiségben adtuk be.
ökkenés tesztelése egerekben szintetikus
X ♦ 0 *«00
GLP-2-veI kezeltük ötét. A ami η os avs zekveneiája:
H A D G - S F S D S Μ N T I
| .A ,A Z i? | ||
| módon | s egerését | L&S & |
| , tus | humán GLP·· | 2-be· |
| urnán | r\m ·> | η β k |
r> A 5 '.· Λ
U U J- Λ
A R D F 1 N W L I 0 ϊ X
A teszt-oldat 3 mikrogramm szintetikus humán GLP-2-t tartalmazó IV injekciója 24%-kal csökkentette a te j fogyasztást, míg a 3 mlkrogramm illetve 10 mikrogra® szintetikus humán GLP-'2-t tartalmazó ICV injekció 32%-kal. illetőleg 35%-ksi csökkentette a te j fogyasztást.
Claims (42)
1. Pepiid, amely az alábbi amínosav-szekvencíával rendelkezik:
X? Η X2D G S FS DEMN T X3 LD X4 L AX5/D FIN W1X7 X*T Κ IT D X* ahol X! jelentése NH?, ÖFFEEVAIVEBLGRR, DFPEEVTIVEBLGRR, DFPEEVNIVEELRKR, vagy ezek egy íragmense,
X.’· jelentése Gly,
X3 jelentése Se vagy Vak X4 jelentése Asn, Ser vagy His,
X5 jelentése Alá vagy Thr,
X ' jelentése Arg vagy Lys,
X; jelentése Se vagy tea,
X* jelentése Gin vagy His, és
X* jelentése OH, Lys, Arg, Arg-Lys, Lys-Arg, Arg-Arg vagy Lys-Lys,
2. Az 1. igénypont szerinti pepiid, amelyben X1 jelentése NHj.
3. Az 1. igénypont szerinti pepiid, amelyben X’jelentése Ile.
4. Az. 1. igénypont szerinti pepiid, amelyben X4 jelentése Asn
5. Az 1. igénypont szerinti pepiid, amelyben X5 jelentése Alá, χ χ««> «Φ Φ* * ♦*♦♦ «φ ♦ Φ χ * Φ ♦ ♦ · « « χ ♦ ♦ Λ « * » * χ χ φ X * Κ * *«** * ««« ♦'♦.' φφ«* ** *ίί ♦ *
6, Áz. 1, igénypont szerinti peptid, amelyben X°jel öntése .Arg.
7. Az 1, igénypont szerinti peptid, amelyben X'jelentése be,
8. Az 1, igénypont szerinti peptid, amelyben X'' jelentése Gin.
9. Az 1, igénypont, szerinti peptid, amelyben X9jelentése OH.
10. Az 19. igénypontok bármelyike szerinti pepiid, amelyben a peptid aminosav-szekvenciája az alábbi: H A D G S F S DΈ Μ N ϊ I L D N L A A. R D· F 1 N W L í Q T Κ ί T D.
11. Gyógyászati készítmény, amely az l-lö, igénypontok bármelyike szerinti pepiidet tartalmazza.
12. All. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, amely líoflllzáll formáié.,
13. A 11. igénypont, szerinti gyógyászati készítmény, .amely említeti gyógyászati készítményt a beadás előtt steril vizes oldattal elegyítünk.
14, A li. vagy 13. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, amely az alábbiakat tartalmazza:
- egy megfelelő folyékony vivőanyag, és adott esetben győgyászatilag. elfogadható segédanyagok.
φ ΦφΧ» ** Φ« ΧΦ * *♦**
Φ:χ Φ ♦ Φ ♦ « * * * * * « » * φ φ * * * φ φ * Φ X φ Φ Χ«ΦΦ »
Λφφ ΦΧ ΧΦΦΦ Φ* Φφφ * ♦
15, A II,, 13, vagy 14, igénypont szerbit gyógyászati készíúnény egységadag formájában, amely a peptid 0,5-500 mg~nyí mennyiségét tartalmazza egy gyógyászatilag elfogadható vivöanyaggal együtt.
16, A 11-15, igénypontok bármelyike szerinti gyógyászati készítmény7 sAsztemikus injekció vagy infúzió útján történő beadásra alkalmas formában.
17. Az 1 -10. igénypontok· bármelyike szerinti peptidet kódoló DNS szekvencia.
18, Ál 7. igénypont szerinti DNS szekvenciát tartalmazó rekombináns vektor.
19. A 18. igénypont szerinti rekombináns vektor, amely említett vektor egy szekréciós jelszekveneiáí tartalmaz.
20. A 17, igénypont szerinti DNS szekvenciát vagy a 18, vagy 19. igénypont szerinti rekombináns vektort tartalmazó gazdasejt.
21. Eljárás az 1-10. igénypontok bármelyike szerinti GLP-2 pepiid előállítására, amely eljárás tartalmaz egy az említett GLP-2 peptidet kódoló DNS konstrukció előállításra szolgáló eljárási lépést.
22, A 21. igénypont szerinti, GLP-2 peptid előállítására szolgáló eljárás, amely eljárás során az említett GLP-2 peptidet kódoló DNS konstrukciót szintetikus úton állítjuk elő.
23. A 21. igénypont szerinti, GLP-2 peptid előállítására szolgáló eljárás, amely eljárás egy olyan eljárási lépést tartalmaz, amelynek során a szintetikus úton előállítött. DNS és a genomiális DNS fragmensek ligáljuk, amelynek eredményeképpen egy az említett GLP-2 β* pepiidet kódoló DNS konstrukció keletkezik.
24. A. 21, igénypont szerinti, GLP-2 peptid előállítására szolgáló eljárás, amely eljárás során az említett GLP-2 peptidet kódoló DNS konstrukciót polimeráz. láncreakcióval állítjuk elő.
25.. A 21-24. igénypontok bármelyike szerinti, GLP-2 peptid előállítására szolgáló eljárás, amely eljárás egy olyan, eljárási lépést tartalmaz, amely során egy gazdasejtbe egy a IS; vagy 19, igénypontok bármelyike szerinti rekombináns vektort mzertákmk.
26, A 25. igénypont szerinti, vegyület előállítására szolgáló eljárás, ahol az említett gazdasejtet az alábbi csoportból választjuk: B. sahíilis, B. licheniformis, B. íentus; B brevís, B. stearothermophilus, B. alkalophiíus, B. amybfiqnefáciens, B, coagulans,. B, círculans, 20 B. butus.,. B, megatherium vagy B. thurmgíensís, S. Ilvidans, S, murinusand, E. coli, COS (ÁTCC CRL 1650), BHK (ATCC CRL 1632, ATCC CCL10), CHL (ATCC CCL 39), CHO (ATCC CCL ló)Áspergittes spp., Neurospora spp,, Fusariutn spp. vagy Tríehoderma spp. és A. oryzae, A. nidulans vagy A níger.
27, A 21-26, igénypontok bármelyike szerinti eljárás, amely eljárás egy olyan eljárási lépést tartalmaz, amely során egy megfelelő folyékony vivőanyagot adunk.
28. A 27. igénypont szerinti, készítmény előállítására szolgáló eljárás, ahol az említett megfelelő folyékony vivőanyag steril víz, izotóniás söoldat vagy glukóz oldat.
29. A 27, vagy 28 igénypont szerinti, készítmény előállítására szolgáló eljárás, amelynek során továbbá a fiziológiai körülményeket megközelítő állapothoz szükséges, gyógyászatilag elfogadható segédanyagokat ís alkalmazunk.
« « φ φ Φ Φ * X * < < S φ ΦΦΦ φχχφ * φφφ φ» ΦΧΧΦ ΦΦ ΧΦΦ Φ φ
30. Α. 29. igénypont szerinti, készítmény elállítására szolgáló eljárás, ahol az említett, gyógyászatilag elfogadható segédanyagokat az alábbiak közül választjuk; pufferelő szerek, tonicitást szabályozó szerek.
31. A 27-30. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, amely egy sterilizálási lépést is tartalmaz.
32. A 27-30, igénypontok bármelyike szerinti eljárás, amelynél a keletkező vizes oldatot aszeptikus körülmények között színjük és lioiílizáljok.
33, A 32, Igénypont szerinti e járás, ahol a liofilizált készítményt vizes oldattal kombináljak, a beadás előtt steril
34, Az 1-10. igénypontok bármelyike szerinti GLP-2 peptid gasztromtesztmálís betegségek kezelésénél történő alkalmazásra.
35. A 11-16. igénypontok bármelyike szerinti gyógyászati készítmény gasztromtesztináiis betegségek kezelésénél történő alkalmazásra.
36, A 11-16. igénypontok bármelyike szerinti gyógyászati készítmény károsodott étvágy-szabályozással összefüggő betegségek vagy rendellenességek megelőzésénél vagy kezelésénél történő alkalmazásra.
37. A 11-16. igénypontok bármelyike szerinti gyógyászati készítmény gasztrointesztínális betegségek kezelésénél történő alkalmazásra, ahol a kezelés során egy a 12. igénypont szerinti liofilizált készítményt beadás előtt steril vizes oldattal kombinálunk.
38, Az Í-1.Ö·, igénypontok bármelyike szerinti pepiidet gyógyászatilag elfogadható exeípienssel vagy hordozóval együtt tartalmazó gyógyászati készítoény étvágy elnyomásánál vagy telítettségi érzés· kiváltásánál történő alkalmazásra.
39. Gyógyászati készítmény 38. igénypont szerinti alkalmazásra, ahol a pepiid szekvenciája az alábbi:
-HÁDGSFSDEMNTILDNLAARDF1 QTK1T D,
- H A D G S F S D E Μ N TIL D N t A A R D F IN W L 1Q TK. I T D vagy
- H A D G S F S D £ Μ N T V L D N L A T R D P 1N W L L Η T Κ 1T D,
40. A 1 l~lő. igénypontok bármelyike szerinti készítmény elhízás vagy Π-es típusú diabétesz megelőzésénél vagy kezelésénél történő alkalmazásra.
41. Gyógyászati készítmény, amely az 1 -10, igénypontok bármelyike szerinti peptidet tartalmazza egy további étvágy-elnyomó vagy telítettségi érzést kiváltó szerrel együtt.
43. A 42. Igénypont szerinti gyógyászati készítmény, ahol az említett további étvágy elnyom vagy telítettségi érzést kiváltó szer az 1 -es glhkagon-szerü peptid (GLP-1),
A megha talmazó ti try tóám
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DK23196 | 1996-03-01 | ||
| DK23096 | 1996-03-01 | ||
| PCT/DK1997/000086 WO1997031943A1 (en) | 1996-03-01 | 1997-02-27 | Use of a pharmaceutical composition comprising an appetite-suppressing peptide |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUP9902670A3 HUP9902670A3 (en) | 2000-02-28 |
| HU229234B1 true HU229234B1 (en) | 2013-09-30 |
Family
ID=26063575
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9902670A HU229234B1 (en) | 1996-03-01 | 1997-02-27 | Use of a pharmaceutical composition comprising an appetite-suppressing peptide |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (4) | EP2295453A3 (hu) |
| JP (1) | JP4064460B2 (hu) |
| KR (1) | KR100611130B1 (hu) |
| CN (1) | CN1112367C (hu) |
| AT (3) | ATE227737T1 (hu) |
| AU (1) | AU710818B2 (hu) |
| BR (1) | BR9707807A (hu) |
| CA (1) | CA2246733C (hu) |
| CY (2) | CY2619B2 (hu) |
| CZ (1) | CZ297338B6 (hu) |
| DE (3) | DE69717092T2 (hu) |
| DK (2) | DK0891378T3 (hu) |
| ES (3) | ES2306685T3 (hu) |
| FR (1) | FR13C0009I2 (hu) |
| HU (1) | HU229234B1 (hu) |
| IL (1) | IL125805A0 (hu) |
| NO (2) | NO323043B1 (hu) |
| PL (1) | PL187095B1 (hu) |
| PT (1) | PT1975177E (hu) |
| RU (1) | RU2197261C2 (hu) |
| UA (1) | UA70283C2 (hu) |
| WO (1) | WO1997031943A1 (hu) |
Families Citing this family (61)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5990077A (en) * | 1995-04-14 | 1999-11-23 | 1149336 Ontario Inc. | Glucagon-like peptide-2 and its therapeutic use |
| US6184201B1 (en) | 1995-04-14 | 2001-02-06 | Nps Allelix Corp. | Intestinotrophic glucagon-like peptide-2 analogs |
| US5834428A (en) | 1995-04-14 | 1998-11-10 | 1149336 Ontario Inc. | Glucagon-like peptide-2 and its therapeutic use |
| US6852690B1 (en) | 1995-08-22 | 2005-02-08 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Method and composition for enhanced parenteral nutrition |
| WO1997031943A1 (en) * | 1996-03-01 | 1997-09-04 | Novo Nordisk A/S | Use of a pharmaceutical composition comprising an appetite-suppressing peptide |
| ES2351661T3 (es) | 1996-04-12 | 2011-02-09 | 1149336 Ontario Inc. | Péptido-2 análogo al glucagón. |
| US6458924B2 (en) | 1996-08-30 | 2002-10-01 | Novo Nordisk A/S | Derivatives of GLP-1 analogs |
| US7235627B2 (en) | 1996-08-30 | 2007-06-26 | Novo Nordisk A/S | Derivatives of GLP-1 analogs |
| UA65549C2 (uk) | 1996-11-05 | 2004-04-15 | Елі Ліллі Енд Компані | Спосіб регулювання ожиріння шляхом периферійного введення аналогів та похідних glp-1 (варіанти) та фармацевтична композиція |
| ATE289517T1 (de) * | 1996-11-12 | 2005-03-15 | Novo Nordisk As | Verwendung von glp-1 peptiden |
| US6051557A (en) * | 1997-05-16 | 2000-04-18 | 1149336 Ontario Inc. | Methods of enhancing functioning of the upper gastrointestinal tract |
| WO1999014239A1 (de) * | 1997-09-12 | 1999-03-25 | Wolf Georg Forssmann | Zusammensetzung zur therapie von diabetes mellitus und fettsucht |
| CA2312190A1 (en) | 1997-12-05 | 1999-06-17 | Eli Lilly And Company | Glp-1 formulations |
| JP2002504527A (ja) * | 1998-02-27 | 2002-02-12 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | 部分的に組織化したミセル様凝集物を形成する２５％を越えるヘリックス成分を有するｇｌｐ−２誘導体 |
| AU2610599A (en) * | 1998-02-27 | 1999-09-15 | Novo Nordisk A/S | N-terminally truncated glp-1 derivatives |
| JP2002506792A (ja) * | 1998-02-27 | 2002-03-05 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | Ｎ末端修飾ｇｌｐ−１誘導体 |
| US6998387B1 (en) | 1998-03-19 | 2006-02-14 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Human appetite control by glucagon-like peptide receptor binding compounds |
| AU3087599A (en) * | 1998-03-19 | 1999-10-11 | Bionebraska, Inc. | Human appetite control by glucagon-like peptide receptor binding compounds |
| GB2396815B (en) | 1999-10-27 | 2004-09-08 | Phytopharm Plc | A composition comprising a pregnenone derivative and an NSAID |
| GB2363985B (en) | 2000-06-30 | 2004-09-29 | Phytopharm Plc | Extracts,compounds & pharmaceutical compositions having anti-diabetic activity and their use |
| US7371721B2 (en) | 2000-09-18 | 2008-05-13 | Sanos Bioscience A/S | Use of GLP-2 and related compounds for the treatment, prevention, diagnosis, and prognosis of bone-related disorders and calcium homeostasis related syndromes |
| US7186683B2 (en) | 2000-09-18 | 2007-03-06 | Sanos Bioscience A/S | Use of GLP for the treatment, prevention, diagnosis, and prognosis of bone-related and nutrition-related disorders |
| AU2002213925A1 (en) * | 2000-09-18 | 2002-03-26 | Osteometer Biotech As | Use of glp-1 and flp-2 peptides for treatment of bone disorders |
| DE60136958D1 (de) | 2000-12-01 | 2009-01-22 | Takeda Pharmaceutical | Verfahren zur herstellung einer zubereitung mit einer bioaktiven substanz |
| GB0121709D0 (en) * | 2001-09-07 | 2001-10-31 | Imp College Innovations Ltd | Food inhibition agent |
| WO2003060071A2 (en) | 2001-12-21 | 2003-07-24 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
| WO2003059934A2 (en) | 2001-12-21 | 2003-07-24 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
| WO2004035624A2 (en) | 2002-10-14 | 2004-04-29 | Novo Nordisk A/S | Glucagon - like peptide - 2 variants |
| EP1592471B1 (en) | 2003-02-04 | 2011-03-23 | Novo Nordisk A/S | Injection device with rotatable dose setting mechanism |
| ATE498404T1 (de) | 2003-12-09 | 2011-03-15 | Novo Nordisk As | Regulierung der nahrungspräferenz mit glp-1- agonisten |
| CN1909930B (zh) | 2004-01-21 | 2015-12-16 | 诺和诺德医疗保健公司 | 转谷氨酰胺酶介导的肽的接合 |
| ES2567634T3 (es) | 2004-02-09 | 2016-04-25 | Human Genome Sciences, Inc. | Proteínas de fusión de albúmina |
| EA200601904A1 (ru) * | 2004-04-15 | 2007-02-27 | Алкермес, Инк. | Система отсроченного высвобождения лекарственного средства на основе полимеров |
| US7456254B2 (en) | 2004-04-15 | 2008-11-25 | Alkermes, Inc. | Polymer-based sustained release device |
| JP2008501765A (ja) | 2004-06-11 | 2008-01-24 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | Ｇｌｐ−１アゴニストを用いた薬剤誘発性肥満の中和 |
| US11246913B2 (en) | 2005-02-03 | 2022-02-15 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Suspension formulation comprising an insulinotropic peptide |
| US7563770B2 (en) † | 2005-05-04 | 2009-07-21 | Zealand Pharma A/S | Glucagon-like-peptide-2 (GLP-2) analogues |
| ES2397289T3 (es) | 2005-09-22 | 2013-03-06 | Biocompatibles Uk Ltd. | Polipéptidos de fusión de GLP-1 (péptido 1 de tipo glucagón) con resistencia a peptidasa incrementada |
| DE602006009631D1 (de) | 2006-05-10 | 2009-11-19 | Biocompatibles Uk Ltd | GLP-1 Peptide enthaltende kugelförmige Mikrokapseln, deren Produktion und deren Verwendung |
| EP2359808B1 (en) | 2006-08-09 | 2013-05-22 | Intarcia Therapeutics, Inc | Osmotic delivery systems and piston assemblies |
| BRPI0718566A2 (pt) | 2006-11-08 | 2014-03-11 | Zealand Pharma As | Peptídeo, análogo do mesmo, composição farmacêutica, usos de um análogo de peptídeo, e de uma molécula de ácido nucléico, de um vetor de expressão, ou de uma célula hospedeira, molécula de ácido nucléico, vetor de expressão, célula hospedeira, métodos para produzir o análogo de peptídeo-2 tipo-glucagon (glp-2), e, kit terapêutico. |
| ES2402172T3 (es) | 2007-04-23 | 2013-04-29 | Intarcia Therapeutics, Inc | Formulación en suspensión de péptidos insulinotrópicos y usos de los mismos |
| WO2009021293A1 (en) * | 2007-08-16 | 2009-02-19 | St Vincent's Hospital Sydney Limited | Agents and methods for modulating macrophage inhibitory cytokine (mic-1) activity |
| EP2240155B1 (en) | 2008-02-13 | 2012-06-06 | Intarcia Therapeutics, Inc | Devices, formulations, and methods for delivery of multiple beneficial agents |
| ES2360782B1 (es) * | 2009-07-28 | 2012-03-12 | Grifols, S.A. | Medios para cultivo de células de mamíferos que comprenden sobrenadante de etapas del fraccionamiento de Cohn y uso de los mismos. |
| EP3323423B1 (en) | 2009-09-28 | 2020-06-17 | Intarcia Therapeutics, Inc | Rapid establishment and/or termination of substantial steady-state drug delivery |
| US20120208755A1 (en) | 2011-02-16 | 2012-08-16 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Compositions, Devices and Methods of Use Thereof for the Treatment of Cancers |
| AU2013255752B2 (en) | 2012-05-03 | 2017-11-09 | Zealand Pharma A/S | Glucagon-like-peptide-2 (GLP-2) analogues |
| EP2873422A4 (en) | 2012-07-10 | 2015-12-30 | Takeda Pharmaceutical | PHARMACEUTICAL PREPARATION FOR INJECTION |
| US9889085B1 (en) | 2014-09-30 | 2018-02-13 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Therapeutic methods for the treatment of diabetes and related conditions for patients with high baseline HbA1c |
| KR101576126B1 (ko) | 2014-12-29 | 2015-12-11 | 부경대학교 산학협력단 | αＡＬ１４ 펩타이드를 유효성분으로 함유하는 신규 비만 예방 및 치료용 약학적 조성물 |
| KR101669140B1 (ko) | 2015-04-28 | 2016-10-26 | (주)케어젠 | 항비만 및 항당뇨 효능을 갖는 펩타이드 및 이의 용도 |
| AU2016270984B2 (en) | 2015-06-03 | 2021-02-25 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Implant placement and removal systems |
| US10188135B2 (en) * | 2015-11-04 | 2019-01-29 | Stokley-Van Camp, Inc. | Method for inducing satiety |
| KR101887576B1 (ko) * | 2016-04-15 | 2018-08-13 | (주)케어젠 | 항비만 및 항당뇨 효능을 갖는 펩타이드 및 이의 용도 |
| KR20240037175A (ko) | 2016-05-16 | 2024-03-21 | 인타르시아 세라퓨틱스 인코포레이티드 | 글루카곤-수용체 선택적 폴리펩티드 및 이들의 이용 방법 |
| USD860451S1 (en) | 2016-06-02 | 2019-09-17 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Implant removal tool |
| USD840030S1 (en) | 2016-06-02 | 2019-02-05 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Implant placement guide |
| KR102502040B1 (ko) | 2016-12-09 | 2023-02-24 | 질랜드 파마 에이/에스 | 아실화 glp-1/glp-2 이중 효능제 |
| IL307966A (en) | 2017-01-03 | 2023-12-01 | Intarcia Therapeutics Inc | Methods involving continuous administration of a GLP-1 receptor agonist and co-administration of a drug |
| EP3966224A4 (en) * | 2019-05-06 | 2023-08-23 | The University of Sydney | PROTEIN FRACTIONATION METHODS |
Family Cites Families (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4203570A (en) | 1978-08-23 | 1980-05-20 | The Western States Machine Company | Power-operated loading gate for centrifugal machines incorporating an auxiliary drive device |
| US4546082A (en) | 1982-06-17 | 1985-10-08 | Regents Of The Univ. Of California | E. coli/Saccharomyces cerevisiae plasmid cloning vector containing the alpha-factor gene for secretion and processing of hybrid proteins |
| US4599311A (en) | 1982-08-13 | 1986-07-08 | Kawasaki Glenn H | Glycolytic promotersfor regulated protein expression: protease inhibitor |
| DE3382547D1 (de) | 1983-01-12 | 1992-05-27 | Chiron Corp | Sekretorische expression in eukaryoten. |
| JPS60501140A (ja) | 1983-04-22 | 1985-07-25 | アムジエン | 酵母による外因性ポリペプチドの分泌 |
| NZ207926A (en) | 1983-04-25 | 1988-04-29 | Genentech Inc | Use of yeast #a#-factor to assist in expression of proteins heterologus to yeast |
| US4745051A (en) | 1983-05-27 | 1988-05-17 | The Texas A&M University System | Method for producing a recombinant baculovirus expression vector |
| US4870008A (en) | 1983-08-12 | 1989-09-26 | Chiron Corporation | Secretory expression in eukaryotes |
| US4879236A (en) | 1984-05-16 | 1989-11-07 | The Texas A&M University System | Method for producing a recombinant baculovirus expression vector |
| US4931373A (en) | 1984-05-25 | 1990-06-05 | Zymogenetics, Inc. | Stable DNA constructs for expression of α-1 antitrypsin |
| DK58285D0 (da) | 1984-05-30 | 1985-02-08 | Novo Industri As | Peptider samt fremstilling og anvendelse deraf |
| US4766073A (en) | 1985-02-25 | 1988-08-23 | Zymogenetics Inc. | Expression of biologically active PDGF analogs in eucaryotic cells |
| US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
| HU206897B (en) | 1985-10-25 | 1993-01-28 | Zymogenetics Inc | Process for utilizing bar-1 gen for selecting strange proteins |
| US4882279A (en) | 1985-10-25 | 1989-11-21 | Phillips Petroleum Company | Site selective genomic modification of yeast of the genus pichia |
| AU607690B2 (en) | 1985-12-24 | 1991-03-14 | Marion Laboratories, Inc. | Use of synthetic sulfated saccharides to enhance wound healing |
| US4935349A (en) | 1986-01-17 | 1990-06-19 | Zymogenetics, Inc. | Expression of higher eucaryotic genes in aspergillus |
| JP3179455B2 (ja) | 1987-07-24 | 2001-06-25 | カイロン コーポレイション | エアーリフト昆虫細胞培養 |
| US5024947A (en) | 1987-07-24 | 1991-06-18 | Cetus Corporation | Serum free media for the growth on insect cells and expression of products thereby |
| DK463887D0 (da) | 1987-09-07 | 1987-09-07 | Novo Industri As | Gaerleader |
| US5037743A (en) | 1988-08-05 | 1991-08-06 | Zymogenetics, Inc. | BAR1 secretion signal |
| AU4647889A (en) | 1988-11-18 | 1990-06-12 | Cetus Corporation | Insect signal peptide mediated secretion of recombinant proteins |
| GB8910962D0 (en) | 1989-05-12 | 1989-06-28 | Natural Environment Res | Novel baculovirus expression vectors and use thereof in the expression of foreign proteins in insects or insect cells |
| US5077214A (en) | 1989-07-07 | 1991-12-31 | The Texas A&M University System | Use of baculovirus early promoters for expression of foreign genes in stably transformed insect cells |
| US5162222A (en) | 1989-07-07 | 1992-11-10 | Guarino Linda A | Use of baculovirus early promoters for expression of foreign genes in stably transformed insect cells or recombinant baculoviruses |
| US5155037A (en) | 1989-08-04 | 1992-10-13 | The Texas A&M University System | Insect signal sequences useful to improve the efficiency of processing and secretion of foreign genes in insect systems |
| US5023328A (en) | 1989-08-04 | 1991-06-11 | The Texas A&M University System | Lepidopteran AKH signal sequence |
| DK300090D0 (da) | 1990-12-19 | 1990-12-19 | Novo Nordisk As | Fremgangsmaade til fremstilling af leadersekvenser |
| DK36392D0 (da) * | 1992-03-19 | 1992-03-19 | Novo Nordisk As | Anvendelse af kemisk forbindelse |
| US5990077A (en) | 1995-04-14 | 1999-11-23 | 1149336 Ontario Inc. | Glucagon-like peptide-2 and its therapeutic use |
| WO1997031943A1 (en) * | 1996-03-01 | 1997-09-04 | Novo Nordisk A/S | Use of a pharmaceutical composition comprising an appetite-suppressing peptide |
-
1997
- 1997-02-27 WO PCT/DK1997/000086 patent/WO1997031943A1/en active IP Right Grant
- 1997-02-27 AU AU18715/97A patent/AU710818B2/en not_active Expired
- 1997-02-27 CA CA2246733A patent/CA2246733C/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 KR KR1019980706861A patent/KR100611130B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1997-02-27 CZ CZ0273698A patent/CZ297338B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-02-27 DE DE69717092T patent/DE69717092T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 ES ES01122701T patent/ES2306685T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 DE DE69740176T patent/DE69740176D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 DK DK97905000T patent/DK0891378T3/da active
- 1997-02-27 JP JP53052497A patent/JP4064460B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 PT PT08103786T patent/PT1975177E/pt unknown
- 1997-02-27 BR BR9707807A patent/BR9707807A/pt not_active Application Discontinuation
- 1997-02-27 EP EP10180925A patent/EP2295453A3/en not_active Withdrawn
- 1997-02-27 EP EP08103786A patent/EP1975177B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 AT AT97905000T patent/ATE227737T1/de active
- 1997-02-27 RU RU98117915/14A patent/RU2197261C2/ru active
- 1997-02-27 CN CN97193525A patent/CN1112367C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 ES ES08103786T patent/ES2364705T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 DK DK08103786.3T patent/DK1975177T3/da active
- 1997-02-27 AT AT01122701T patent/ATE395359T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-02-27 PL PL97328732A patent/PL187095B1/pl unknown
- 1997-02-27 IL IL12580597A patent/IL125805A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1997-02-27 DE DE69738695T patent/DE69738695D1/de not_active Revoked
- 1997-02-27 AT AT08103786T patent/ATE505485T1/de active
- 1997-02-27 UA UA98084651A patent/UA70283C2/uk unknown
- 1997-02-27 EP EP97905000A patent/EP0891378B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 ES ES97905000T patent/ES2187756T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 EP EP01122701A patent/EP1231218B1/en not_active Revoked
- 1997-02-27 HU HU9902670A patent/HU229234B1/hu unknown
-
1998
- 1998-08-31 NO NO19984005A patent/NO323043B1/no not_active IP Right Cessation
-
2012
- 2012-10-12 CY CY201200011A patent/CY2619B2/el unknown
-
2013
- 2013-02-12 FR FR13C0009C patent/FR13C0009I2/fr active Active
- 2013-02-27 CY CY2013008C patent/CY2013008I2/el unknown
- 2013-03-12 NO NO2013006C patent/NO2013006I1/no unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU229234B1 (en) | Use of a pharmaceutical composition comprising an appetite-suppressing peptide | |
| US5912229A (en) | Use of a pharmaceutical composition comprising an appetite-suppressing peptide | |
| US9168312B2 (en) | Growth hormone polypeptides and methods of making and using same | |
| EP2440241B1 (en) | Growth hormone polypeptides and methods of making and using same | |
| JP5553742B2 (ja) | 血糖値を降下させるペプチド | |
| KR20050083713A (ko) | 안정화된 엑센딘-4 화합물 | |
| JP2007537141A (ja) | 新規なｇｌｐ−１化合物 | |
| CN101389648A (zh) | 肽胃泌酸调节素衍生物 | |
| US9849188B2 (en) | Growth hormone polypeptides and methods of making and using same | |
| JP2023024674A (ja) | インスリン受容体との結合力が減少されたインスリンアナログの結合体及びその用途 | |
| KR20160007295A (ko) | 인슐린 아날로그 | |
| JP2013527178A (ja) | 新規のグルカゴン様ペプチド類似体、組成物、および使用方法 | |
| KR20160001391A (ko) | 신규한 지속형 인슐린 아날로그 결합체 및 이의 용도 | |
| US20140066370A1 (en) | Polypeptide Conjugate | |
| WO2023284822A1 (en) | Fusion polypeptides for metabolic disorders | |
| KR20160017313A (ko) | 피부투과성이 향상된 펩타이드 및 이를 포함하는 융합단백질 | |
| KR20160017312A (ko) | 경피 투과 촉진 펩타이드 및 이를 포함하는 융합단백질 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TH4A | Erratum |