HU218045B - Eljárás szelénben gazdag adalékanyag előállítására - Google Patents

Eljárás szelénben gazdag adalékanyag előállítására Download PDF

Info

Publication number
HU218045B
HU218045B HU9303417A HU9303417A HU218045B HU 218045 B HU218045 B HU 218045B HU 9303417 A HU9303417 A HU 9303417A HU 9303417 A HU9303417 A HU 9303417A HU 218045 B HU218045 B HU 218045B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
selenium
additive
trace
bacteria
trace elements
Prior art date
Application number
HU9303417A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT70260A (en
HU9303417D0 (en
Inventor
Berghe Dirk Vanden
Original Assignee
Innovi N.V.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Innovi N.V. filed Critical Innovi N.V.
Publication of HU9303417D0 publication Critical patent/HU9303417D0/hu
Publication of HUT70260A publication Critical patent/HUT70260A/hu
Publication of HU218045B publication Critical patent/HU218045B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/065—Microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/16—Inorganic salts, minerals or trace elements
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/38—Chemical stimulation of growth or activity by addition of chemical compounds which are not essential growth factors; Stimulation of growth by removal of a chemical compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/123—Bulgaricus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

A találmány tárgya eljárás szelénben és kívánt esetben egy vagy többtovábbi nyomelemben dúsult, a Lacto- bacillus nemzetségbe tartozómikroorganizmusokat tartalmazó adalék előállítására. A fenti,élelmiszer-ipari adalékként, valamint szelénhiány kiküszöböléséreszolgáló terápiás készítményként alkalmazható adalékot úgy állítjákelő, hogy a) kiegészítésül szelént és kívánt esetben más nyomelemetvagy ezek valamely vegyületét tartalmazó tápközeget készítenek; b) atápközegben a Lactobacillus nemzetségbe tartozó mikroorganizmusttenyésztenek, minek során a mikroorganizmus a nyomeleme(ke)takkumulálja; és c) a mikroorganizmust a tápközegből elválasztják. ŕ

Description

A találmány tárgya eljárás szelénben és kívánt esetben más nyomelemekben is gazdag adalékanyag előállítására, közelebbről ezekben dúsult baktériumokat tartalmazó adalékanyag előállítására.
A humán és az állati szervezet különféle rendellenességeket mutathat nyomelemek, például szelén, mangán, réz, cink, kobalt, vas, nikkel és króm krónikus hiánya esetén. Ismeretes, hogy bizonyos diéták, például a csecsemőké, gyerekeké, mesterségesen táplált kórházi betegeké, idős betegeké és másoké szelénben hiányos. A szelén fő forrása az ember számára az élelmiszer. Az alacsony szeléntartalmú élelmiszer ezért elkerülhetetlenül a szervezet csökkent szelénkoncentrációjához vezet.
Azoknál az embereknél, akiket teljesen parenterális úton (tisztított készítményekkel) táplálnak, és hosszú időtartamon át orális úton nem jutnak táplálékhoz, például szelénhiány kifejlődését figyelték meg, mivel a kizárólagos parenterális táplálék gyakorlatilag nem tartalmaz szelént. Ezért azoknál a betegeknél, akik tartósan kizárólagosan parenterális táplálékban részesülnek, csökkent szelénszintet és glutation-peroxidáz-aktivitást észlelnek a vérben. Az ezt kísérő klinikai tünetek izomgyengeség, szívritmus-rendellenességek, artritisz, a hajszín megváltozása, a körmök fehéredése és a plazmakreatin-foszfokináz-aktivitás növekedése. Szelénnek a táplálékhoz való adagolása a szelénkoncentráció és a GSH-Px-aktivitás megnövekedésével és a klinikai tünetek megszűnésével jár.
Hiány jelentkezik azoknál a betegeknél is, akik szintetikus tápot kapnak. Ezek közé tartoznak többek között az olyan betegek, akik örökletes anyagcsere-rendellenességben szenvednek. Az anyagcsere-rendellenességben szenvedő betegek kezelése meghatározott diéta követésében áll, amely diéta többnyire korlátozott fehérjetartalmú, és amely diétához esszenciális aminosavakat adagolnak. Németországban azt találták, hogy az ilyen diéták igen alacsony szeléntartalmúak.
A keshan-kór - egy fiatalkori szívizombántalom, amely Kína szelénhiányos területein élő fiatal nők és gyermekek körében fordul elő - ugyancsak a csökkent szelénbevitel eredménye. Bár ennek a betegségnek feltehetően nem kizárólag a szelénhiány az oka, az ebben a kórban szenvedő betegek mindegyikének haj- és plazmaszelén-koncentrációja alacsony, és a betegség megfelelő szelenit kiegészítésével gyógyítható.
Számos olyan lehetőség van, amely a szelénhiány ellen hat az erre érzékeny betegekben.
Először szervetlen szelén adagolható a betegeknek, szelenit vagy szelenát formájában. Az eredmények, amelyeket például Kínában a keshan-kórban szenvedő betegeknél kaptak, igen pozitívak. Igen fontos hátrány azonban, hogy a szervetlen szelenit a legyengült állapot bizonyos eseteiben, például a szeléntől eltérő nyomelemekben való hiány vagy proteinhiány esetén toxikus tüneteket okozhat. Az adagolás egy másik lehetősége a szeleno-metionin-készítmények formájában való adagolás. Ez a termék a szervezetben a metioninhoz hasonlóan szívódik fel. A szeleno-metionin nagy hiányossága az, hogy különféle fehérjék igen gyorsan abszorbeálják, azok a fehérjék is, amelyek szokásos esetben nem tartalmaznak szelént. Ez veszélyes lehet, különösen gyermekek esetén, akiknél még a sejtek többsége felépülőben van. Továbbá a szeleno-metionin-készítmények igen költségesek.
A szelén adagolásának egy harmadik módja a nagy szeléntartalmú élesztő útján való adagolás. Azonban ezzel az adagolással is számos hiányosság kapcsolódik. Egyrészt az élesztősejtekre adott allergiás reakcióként bekövetkező csalánkiütés és mitogén poliszacharidok jelenléte az élesztősejtekben, amelyek legyengült betegekre veszélyesek lehetnek. Másrészt a szelén az élesztőben többnyire szeleno-metionin formájában van jelen. Erre az előzőekben a szeleno-metionin-készítményekre leírt hátrányok vonatkoznak. A szeleno-metionin fölöslegben történő bevitele hosszú idő során káros lehet a nem reprodukálható fehérjék és sejtek minőségére, például az agysejtekre.
A JP, A, 62 091 177 számú japán közzétételi iratban a Bacillus nemzetségbe tartozó baktériumok szeléntartalmú táptalajon való tenyésztéséről és a sejtek kinyeréséről számolnak be. A Bacillus nemzetségbe tartozó baktériumok azonban nem alkalmasak táplálkozási célra, sőt, emberre potenciálisan károsak, nem ajánlhatók élelmiszer-ipari alkalmazásra, különösen nem a szelén bevitelére szükséges nagy mennyiségben (mintegy napi ΙΟ8—109 baktérium). Továbbá a fenti anterioritás nem tartalmaz arra vonatkozó utalást, hogy milyen formában halmozódik fel a szelén a Bacillus fajokban. Elképzelhető, hogy ez a forma az élesztőben való felhalmozódáshoz hasonlóan szeleno-metionin, amellyel kapcsolatos problémára az előzőekben már utaltunk.
A JP, A, 62 134 083 számú japán közzétételi iratban közölt megoldás vastartalmú mikroorganizmusok előállítására vonatkozik, szelénről nem történik említés, így nem oldják meg azt a problémát, hogy a szokásosan alkalmazott, ismert kiegészítők hátrányaitól mentes formában nyújtsanak szelénforrást.
A WO-A 81/02 242 számú PCT közzétételi iratban ismertetett eljárásban Lactobacillusnak pernyét tartalmazó táptalajban való tenyésztését ismertetik, azonban ennek eredménye nem a nyomelemek baktériumokban való feldúsulása, hanem az, hogy a pernyében lévő nyomelemek a Lactobacillus által termelt tejsav hatására kioldódnak, és a baktériumoknak a tenyésztés befejeztével a fermentléből való eltávolítása után végtermékül a kioldott elemekben dús folyadékot nyernek.
A találmány célja ennek megfelelően olyan eljárás biztosítása, amellyel legalább szelénben, kívánt esetben további egy vagy több nyomelemben gazdag adalék készíthető, olyan eljárásé, amellyel olyan adalék nyerhető, amelyhez nem társulnak az előbbiekben leírt hiányosságok és hátrányok.
A találmány szerint ezt a célt egy olyan eljárással érjük el, amely abban áll, hogy
a) olyan tápközeget készítünk, amelyhez szelént és kívánt esetben egy vagy több további nyomelemet vagy ezeket tartalmazó vegyületet adagolunk;
b) a tápközegben egy, a Lactobacillus nemzetségbe tartozó mikroorganizmust tenyésztünk, amely mikroor2
HU 218 045 Β ganizmus a szelént és a további nyomelemeket akkumulálja, és
c) a mikroorganizmust a tápközegtől elválasztjuk.
A szelén mellett kívánt esetben alkalmazott további nyomelemek más, élettani szerepet betöltő nyomelemek lehetnek, különösen előnyös a mangán, cink, réz, kobalt, vas, nikkel, króm vagy ezek kombinációjának szelén mellett történő alkalmazása.
A találmány szerinti eljárással olyan adalékot nyerünk, amely olyan tisztított mikroorganizmusokból áll, amelyek szelénből és kívánt esetben más nyomelemből megnövekedett mennyiséget tartalmaznak. A mikroorganizmusnak fel kell halmoznia minden olyan nyomelemet, amely a tápközegben különféle szerves vagy szervetlen vegyületek formájában jelen van. Ennek elérésére a Lactobacillus nemzetségbe tartozó baktériumokat alkalmazunk, ezek a bélben nem képeznek telepet. Az L. casei és L. plantarum mellett L. bulgaricus is használható. Használhatunk olyan, a Lactobacillus nemzetségbe tartozó más mikroorganizmusokat is, amelyek élelmiszerekben, például tejben fordulnak elő.
Vizsgálataink azt mutatják, hogy különösen a Lactobacillus bulgaricus lóg fázisában konstans mennyiségű szelént épít be olyan tápközegben, amelyhez nyomelemként szelént adtunk akár szerves, akár szervetlen vegyülete formájában. A szelén lényegében szelenocisztein formájában gyűlik fel. A szeleno-cisztein a 23. aminosav, amely saját t-RNS-sel és saját, DNS-en kódolt kodonnal bír. Azt találtuk, hogy a Lactobacillus nemzetségbe tartozó baktériumok szelenobaktériumok, amelyek képesek szervetlen szelénvegyületekből szeleno-cisztein képzésére. A szeleno-cisztein a szeléntartalmú proteinekbe épül be. Ha a baktériumok által termelt természetes szelénvegyületeket, például a szeléntartalmú proteineket a bélsejtek számára hozzáférhetővé tesszük, ezek választanak ezekből a vegyületekből. Minthogy különféle szeléntartalmú vegyületek állnak rendelkezésre, az előzőekben említett problémák, például a toxicitás elkerülhetők. A baktériumok maguk soha nem akkumulálják feleslegben a szeleno-proteineket. A szeleno-metioninnal ellentétben a mikroorganizmusok találmány szerinti alkalmazása során különös hangsúly tevődik a proteinek szeléneződésére. Egy, még nem tisztázott mechanizmus szerint a szelenit a jól meghatározott szelenoproteinekbe épül be. Hasonlóan a baktériumokból származó más szelenovegyületekhez, ezek a proteinek is jól metabolizálhatók ember és állatok által.
A baktériumok ráadásul még vitaminokat, nyomelemeket és proteineket tartalmaznak. Ezek az anyagok nemcsak a baktériumot fogyasztó egyén számára bírnak pozitív hatással, hanem lehetővé teszik azt is, hogy a szelén saját sajátos útján kövesse, és antagonizmus is lehetséges.
A Lactobacillus baktériumok nemtoxikusak. A Lactobacillus bulgaricus ezenfelül még tumorellenes hatás kifejtéséről is ismert, egyensúlyba hozza a bélbaktériumokat és számos nehézfém-, például higany-, ólom- és kadmiumdetoxifikálást végez. Az L. bulgaricus nem képez a bélben telepeket. Továbbá az L. bulgaricus tenyészet 45 °C hőmérsékleten, savas környezetben a patogének szaporodását gátolja.
A találmány szerinti eljárással előállított adalék előállítható például L. bulgaricusnak olyan tápközegben való tenyésztésével, amelyhez meghatározott mennyiségű szelént adagoltunk. Előnyösen legfeljebb 3 pg/ml szelenitet adagolunk. Az L. bulgaricus számára igen megfelelő tápközeg a savó, amely a sajtgyártás egy mellékterméke. A savót előnyösen először proteinmentes itjük, mivel a proteinek kicsapódásra hajlamosak. A proteinek eltávolításának további előnye az, hogy a végtermékül kapott adalék lényegében nem fog szabad proteineket tartalmazni, ezáltal alkalmassá válik olyan betegeknek való adagolásra, akik proteinben korlátozott diétára szorulnak.
A mikroorganizmusokat a tápközegből előnyösen úgy különítjük el, hogy sértetlenek maradjanak. Ez az elválasztás történhet centrifugálással vagy szűréssel.
A következőkben a találmány szerinti eljárást példákban mutatjuk be a korlátozás szándéka nélkül.
1. példa tömeg/térfogat% savó-permeátot (Government Dairy Research Centre, Melle, Belgium), 0,7 tömeg/térfogat% élesztőextraktumot (Merck, Németország) és 1 tömeg/térfogat% kazein eredetű peptont (Merck, Németország) tartalmazó, Lactobacillus fajok tenyésztésére szolgáló tápközeget készítünk. A tápközeget sterilezzük, és ionmentes vízben készült steril nátrium-szelenitoldatot adunk hozzá 2 pg Se4+-ion/ml tápközeg-koncentrációig. A tápközeget ezután Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus (ATTC 11 842) oltóanyaggal oltjuk be, és 16 órán át 43 °C hőmérsékleten inkubáljuk. A tenyészet pH-ját az inkubálás során 1 mol/l-es nátrium-hidroxid ellenőrzés mellett végzett adagolásával 5,5 értéken tartjuk. Az inkubálás befejezése után a biomasszát (baktériumsejteket) a tápközegtől centrifugálással elválasztjuk, és foszfáttal pufferolt sóoldattal mossuk. A biomasszát liofüizáljuk, majd salétromsav és perklórsav elegyével történő emésztést követően szeléntartalmát atomabszorpciós spektrometriás eljárással (áramlásos injektálásos generáció) meghatározzuk. A biomassza szelénkcncentrációja 200-300 pg szelén/g biomassza-száraztömeg. A száraz biomasszát közvetlenül keményzselatin kapszulába kapszulázzuk, és ezeket a kapszulákat alkalmazzuk szelénkiegészítésként vagy táplálékkiegészítők gy ártására szolgáló nyersanyagként.
2. példa tömeg/térfogat% savó-permeátot (Government Dairy Research Centre, Melle, Belgium), 0,7 tömeg/térfogat% élesztőextraktumot (Merck, Németország) és 1 tömeg/térfogat% kazein eredetű peptont (Merck, Németország) tartalmazó, Lactobacillus fajok tenyésztésére szolgáló tápközeget készítünk. A tápközeget sterilezzűk, és steril, ionmentes vízben készült a) nátriumszelenit- és b) mangán-szulfát-oldatokat adunk hozzá 1 pg Se4+ és 1 pg Mn2+/ml tápközeg-koncentráció eléréséig. A tápközeget Lactobacillus plantarum (ATCC 14 917) oltóanyaggal oltjuk be, és 16 órán át 37 °C hő3
HU 218 045 Β mérsékleten inkubáljuk. Az inkubálást követően a biomasszát a tápközegtől centrifügálással elválasztjuk, és foszfáttal pufferolt sóoldattal mossuk. A biomasszát liofilizáljuk, majd salétromsav és perklórsav elegyével történő emésztést követően a) atomabszorpciós spektrometriás eljárással (áramlásos injektálásos generáció) meghatározzuk szeléntartalmát és b) elektrotermális grafitkemencés spektrometriával meghatározzuk mangántartalmát. A biomassza szelén- és mangánkoncentrációját 240-400 pg szelén és 1,4-1,8 mg mangán/g szárazbiomasszatömeg-értékűnek találtuk. A száraz biomasszát közvetlenül keményzselatin kapszulákba kapszulázzuk, és a kapszulákat kombinált szelén- és mangánkiegészítőként alkalmazzuk vagy táplálékkiegészítők gyártásának nyersanyagaként használjuk fel.
3. példa tömeg/térfogat%-os sajtsavót (Government Dairy Research Centre, Melle, Belgium) használunk Lactobacillus delbrückii spp. bulgaricus (ATCC 11 842) tenyésztésére. A tápközegben a nyomelemek koncentrációja: 0,05 ppm réz, 0,125 ppm cink és 0,312 ppm vas. A tápközeget beoltás után 16 órán át 43 °C hőmérsékleten inkubáljuk. Az inkubálást követően a biomasszát centrifügálással elválasztjuk a tápközegtől, és foszfáttal pufferolt sóoldattal mossuk. Ezután a biomasszát liofílizáljuk, majd multielemanalízist végzünk részecskeindukált röntgensugár-emissziós spektrometriás eljárással. A koncentrálóhatás (az elem összmennyisége az összbiomasszában/az elem összmennyisége az össztenyészetben) a különböző nyomelemek esetén: 74% rézre, 32% cinkre és 4% vasra, míg a makroelemeknél, például kalciumnál és káliumnál a kapott 0,05% és 0,03% értékek nem jelzik a biomasszában való koncentrálódást. A fentiek azt jelzik, hogy a baktériumok intracellulárisan koncentrálják azokat a nyomelemeket, amelyek a kiindulási tápközegben jelen voltak vagy ahhoz szervetlen sók formájában adagolásra kerültek.
Egy sejt szelénállapota a sejt glutation-peroxidázaktivitását szabályozza, ez egy szelenoenzim, amely az oxidatív stressz és az öregedés ellen nyújt védelmet. A szelén mennyiségének növekedése megnövekedett glutation-peroxidáz-aktivitást és glutation-peroxidázmRNS-felesleget eredményez. Általában feltételezik, hogy fontos a glutation-peroxidáz-aktivitásnak egy állandó szinten való tartása. Különösen csecsemők esetén szükséges ennek a platónak a gyors elérése annak érdekében, hogy az oxidatív stresszel szembeni optimális védelmet biztosítsuk. A vizsgálatok azt mutatják, hogy a találmány szerinti adalék lehetővé teszi, hogy az adalék alacsony koncentrációjának alkalmazásával a glutation-peroxidáz-aktivitás igen gyorsan emelkedjen.
A találmány szerinti adalékot korlátozott proteintartalmú táplálékon tartott gyermekek számára jól elviselhetőnek találtuk. Azt találtuk, hogy a szelénvegyületek abszorpciója a vérbe ugyanolyan jól megy végbe, mint a szelenit, szelenát, szeleno-metionin és szeleno-élesztő abszorpciója, anélkül, hogy a felszívódást a fenti szelénvegyületeknél bekövetkező hátrányok kísérnék.
Azt találtuk, hogy a találmány szerinti adalékokban a szelén főként szeleno-cisztein vagy származéka formájában van jelen szeleno-metionin helyett. A szelenometioninhoz kapcsolódó hátrányok tükrében, nevezetesen azt figyelembe véve, hogy a proteinek szelénezése nem fajlagos, ez egy fontos jellemző. Ezenkívül feltételezik, hogy a szeleno-cisztein a szelenithez hasonlóan közvetlen vagy közvetett tumorellenes aktivitást fejt ki. fiz ellentétben van a szeleno-metionin tulajdonságaival.
Végül a találmány szerinti adalék az L. bulgaricus alkalmazásának előnyével is bír, nevezetesen tumorellenes aktivitással és a nehézfémeknek a baktériumok sejtfalához való tapadásával. A szelenit egy része, amelynek a baktériumok a tenyésztés során voltak kitéve, a sejtfalukon helyezkedik el elemi szelén formájában, és ily módon a higanydetoxifikálást végzi.
A találmány szerinti adalék különböző formákban adagolható. Az egyik lehetőség élelmiszerekhez való hozzáadása. Erre igen alkalmas élelmiszerek azok, amelyek már tartalmaznak Lactobacillus fajokat, ilyenek például a tejtermékek. Ezek egy példája a margarin.
Lehetséges továbbá az adalékoknak terápiás készítmények formájában való adagolása is. Ezek a készítmények az adalék aktív mennyiségét és kívánt esetben megfelelő hígító- és hordozóanyagokat tartalmaznak. Az ilyen terápiás készítmények a nyomelemhiány kiküszöbölésére használhatók, sőt betegség esetén, például immunhiány, immunológiai stressz, kardiovaszkuláris rendellenességek, pajzsmirigy-rendellenességek, asztma, mérgezés, izom-rendellenességek, vérrendellenességek, neurológiai degeneratív rendellenességek esetén és rák megelőzésére, valamint öregedés tüneteinek kezelésére alkalmazhatók. A készítmények adagolásra megfelelő formájúak.
A találmány szerinti eljárással előállított adalékok hatását az alábbi példákban mutatjuk be.
1. vizsgálati példa
Szelénhiányos tápon tartott egerek tömeggyarapodása
Szelénhiányos tápon tartott egerek csoportjainak különböző koncentrációban szeleno-metionint (10~4, 10 5, 10~6 és 10~7 mol/1), szeleno-ciszteint (10 4, 10 5, 10~6 és 10 7 mol/1) és a találmány szerinti adalékot (10~5 és 1()7 mol/1) adagoltuk. Azoknál az egereknél, amelyeknél a találmány szerinti adalékot adagoltuk, nagyobb tömeggyarapodást észleltünk (lásd a csatolt ábrán).
2. vizsgálati példa
A találmány szerinti adalék in vivő hatása plazmaglutation-peroxidáz-aktivitásra
Egy hároméves, protein-lizin-intoleranciában (PLI) szenvedő kislánynak három héten át naponta 3 pg szelént adtunk be a találmány szerinti adalék formájában. A tápláléknak ilyen kiegészítése során a plazma szeléntartalmának és glutation-peroxidáz-aktivitásának növekedését jegyeztük fel (lásd a táblázatban). Egy 13 hónap múlva alkalmazott második szelenitkiegészítés során a szeléntartalomban és a glutationaktivitásban már nem észleltünk növekedést (lásd a táblázatban).
HU 218 045 Β
Táblázat
Kiegészítés Glutation- peroxidáz- aktivitás (E/ml) Sc-tartalom (ng/ml)
Nincs 0,11 20
Nincs 0,12 10
L. bulgaricus-Se 0,19 16
L. bulgaricus-Se 0,34 27
L. bulgaricus-Se 0,19 35
L. bulgaricus-Se 0,28 32
Nincs 0,13 21
Nincs 0,17 22
Nincs 0,14 22
Szelenit 0,13 20
Szelenit 0,12 22
Szelenit 0,13 24
Szelenit 0,13 23

Claims (3)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás megnövekedett szelénnyomelem- artalmú és kívánt esetben más nyomelemben is dúsult baktériumokat tartalmazó adalékanyag előállítására, amelynek során
    a) tápközeget készítünk, amelyhez kiegészítésül szelént és kívánt esetben más nyomelemet vagy ezek valamely vegyületét adjuk,
    b) a baktériumokat a tápközegben tenyésztjük, minek során azokban a nyomelem vagy nyomelemek felhalmozódnak, és
    c) a baktériumokat a tápközegtől elválasztjuk, azzal jellemezve, hogy a szelént és kívánt esetben más nyomelemet vagy ezek valamely vegyületét tartalmazó tápközegben egy Lactobacillus nemzetségbe tartozó fajt tenyésztünk.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Lactobacillus bulgaricust tenyésztünk.
  3. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a szelén mellett kiegészítésül mangán, cink, réz, kobalt, vas, nikkel és/vagy króm nyomelemet vagy nyomelemelegyet adunk a tápközegbe.
HU9303417A 1991-06-03 1992-06-03 Eljárás szelénben gazdag adalékanyag előállítására HU218045B (hu)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP91201350 1991-06-03

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9303417D0 HU9303417D0 (en) 1994-03-28
HUT70260A HUT70260A (en) 1995-09-28
HU218045B true HU218045B (hu) 2000-05-28

Family

ID=8207688

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9303417A HU218045B (hu) 1991-06-03 1992-06-03 Eljárás szelénben gazdag adalékanyag előállítására

Country Status (17)

Country Link
US (1) US6479050B1 (hu)
EP (1) EP0587711B1 (hu)
JP (1) JP3338446B2 (hu)
AT (1) ATE188247T1 (hu)
AU (1) AU657763B2 (hu)
CA (1) CA2110256A1 (hu)
CZ (1) CZ283936B6 (hu)
DE (1) DE69230495T2 (hu)
DK (1) DK0587711T3 (hu)
ES (1) ES2139599T3 (hu)
FI (1) FI111383B (hu)
GR (1) GR3032842T3 (hu)
HU (1) HU218045B (hu)
NO (1) NO314549B1 (hu)
PL (1) PL170970B1 (hu)
SK (1) SK280475B6 (hu)
WO (1) WO1992021749A1 (hu)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9226182D0 (en) * 1992-12-16 1993-02-10 Biotechna Ltd Binding of metals and metalloids by microorganisms
FR2827301B1 (fr) * 2001-07-13 2004-10-01 Blue Energy Laboratoire Procedes de fixation/complementation de molecules biologiquement actives par des cyanobacteries et des micro-algues ou des fractions de cyanobacteries et de micro-algues
AU2003214316A1 (en) * 2003-01-14 2004-09-06 Francois Bruneau Photosynthetic micro-organisms enriched with biologically-active molecules, preparation method thereof and uses of same
ATE405634T1 (de) * 2004-06-03 2008-09-15 Bioman S R L Biomasse angereichert an selenium, verfahren zu deren herstellung, und solche biomasse enthaltende, probiotische und diätetische produkte
JP4514534B2 (ja) * 2004-07-09 2010-07-28 キユーピー株式会社 飲食品
JP4700497B2 (ja) * 2005-01-14 2011-06-15 オリエンタル酵母工業株式会社 ミネラル含有乳酸菌体によるクロロフィル含有食品の緑色の退色を防止し又は退色した緑色を復元する方法、及びクロロフィル含有食品の緑色の退色防止剤又は退色した緑色の復元剤
KR20080009680A (ko) * 2005-01-31 2008-01-29 기린 야쿠르트 넥스트 스테이지 가부시키가이샤 미네랄 함유 유산균을 포함하는 식품 또는 의약품
JP2006230404A (ja) * 2005-01-31 2006-09-07 Kirin Well Foods Co Ltd ミネラル含有乳酸菌を含んでなる食品または医薬品
SE529199C2 (sv) * 2005-07-05 2007-05-29 Probi Ab Förstärkt absorption
US20070077238A1 (en) * 2005-10-04 2007-04-05 Teo Alex Y Production of organic and inorganic selenium compounds by lactic acid bacteria
ITTO20070555A1 (it) * 2007-07-26 2009-01-27 Bioman S R L Biomassa arricchita in zinco, procedimento per la sua preparazione e prodotti probiotici, cosmetici, dietetici e nutraceutici comprendenti tale biomassa
CZ303782B6 (cs) 2008-11-18 2013-05-02 Univerzita Palackého Zarízení pro ozarování vzorku ultrazvukem
DK2556835T3 (en) 2010-02-10 2015-11-09 Japan Eco Science Co Ltd Mixing, dissolving solution and the pharmaceutical agent, each containing a thermophilic microorganism
CN103283974A (zh) * 2013-03-27 2013-09-11 广州格拉姆生物科技有限公司 一种保加利亚乳杆菌活菌制剂的生产方法
CN111088185A (zh) * 2019-12-30 2020-05-01 光明乳业股份有限公司 一种富硒乳酸菌制剂及其制备方法
CN110951652A (zh) * 2019-12-30 2020-04-03 光明乳业股份有限公司 一种富硒乳酸菌制剂及其制备方法
CN110951651A (zh) * 2019-12-30 2020-04-03 光明乳业股份有限公司 一种富硒乳酸菌制剂及其制备方法
CN110982758A (zh) * 2019-12-30 2020-04-10 光明乳业股份有限公司 一种富硒乳酸菌制剂及其制备方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3024076A1 (de) * 1980-02-11 1981-08-20 Anders Marius Holte Vognsen Verfahren zur herstellung eines mineralstoffhaltigen praeparats
JPS61109729A (ja) 1984-11-05 1986-05-28 Advance Res & Dev Co Ltd コレステロ−ル低下剤
US5185165A (en) * 1989-01-23 1993-02-09 Superior Fermitech Liquidating Trust Fermentation system
CN1023409C (zh) * 1989-07-11 1994-01-05 杨振华 一种营养液的生产方法
JPH0675279A (ja) * 1992-08-28 1994-03-18 Canon Inc カメラのフィルム給送装置
JPH06291177A (ja) * 1993-03-31 1994-10-18 Sony Corp 半導体材料収納用具

Also Published As

Publication number Publication date
PL297843A1 (en) 1993-11-02
HUT70260A (en) 1995-09-28
US6479050B1 (en) 2002-11-12
FI111383B (fi) 2003-07-15
NO314549B1 (no) 2003-04-07
FI935408A (fi) 1993-12-02
CA2110256A1 (en) 1992-12-10
EP0587711A1 (en) 1994-03-23
JP3338446B2 (ja) 2002-10-28
DE69230495D1 (de) 2000-02-03
NO934379D0 (no) 1993-12-02
AU657763B2 (en) 1995-03-23
DE69230495T2 (de) 2000-06-21
PL170970B1 (pl) 1997-02-28
WO1992021749A1 (en) 1992-12-10
JPH06508516A (ja) 1994-09-29
EP0587711B1 (en) 1999-12-29
CZ255793A3 (en) 1994-04-13
GR3032842T3 (en) 2000-07-31
DK0587711T3 (da) 2000-05-08
SK280475B6 (sk) 2000-02-14
ES2139599T3 (es) 2000-02-16
AU1929392A (en) 1993-01-08
SK134893A3 (en) 1994-05-11
NO934379L (no) 1994-01-31
CZ283936B6 (cs) 1998-07-15
ATE188247T1 (de) 2000-01-15
HU9303417D0 (en) 1994-03-28
FI935408A0 (fi) 1993-12-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU218045B (hu) Eljárás szelénben gazdag adalékanyag előállítására
US4806368A (en) Shelf life and subsequent growth of lactobacillus acidophilus, propionibacterium shermanii and leuconostoc citrovorum in dietary fiber based supplement preparation
US6197295B1 (en) Dietary supplementation with, and methods for administration of yeast-derived selenium product
US20200239922A1 (en) Means and methods for vitamin b12 production in duckweed
JP5855939B2 (ja) セレノヒドロキシ酸化合物を使用してセレンが濃縮された光合成微生物、並びに栄養食品、化粧品及び医薬におけるこれらの使用
CN103478507A (zh) 不含抗生素的獭兔生长兔预混料
JP4193269B2 (ja) 新規な生体浄化活性型乳酸菌製剤
CN105831739A (zh) 一种儿童食用的钙铁锌咀嚼片
EP1587913B1 (en) New strains of bifidobacterium having the ability to produce glutamine
Liao et al. Factors affecting selenium-enrichment efficiency, metabolic mechanisms and physiological functions of selenium-enriched lactic acid bacteria
CN107484547B (zh) 一种以乌饭树叶为主料制成培养基培养蛹虫草的方法
CN103478506A (zh) 不含抗生素的獭兔种兔预混料
WO1998037172A1 (en) Dietary supplementation with, and methods for preparation of yeast-derived selenium salts
JP3850740B2 (ja) 乳由来の非タンパク態窒素化合物、ｌ−カルニチンの濃縮方法、ｌ−カルニチン濃縮物及びその利用
TW201315387A (zh) 促進鈣吸收的胜肽產物及其製造方法
KR960009004B1 (ko) 셀레늄 함유 유산균 식품 및 그의 제조방법
Vorobjeva et al. Economic and medical applications
CN118340269A (zh) 一种提高儿童免疫力的组合物及其制备方法
CN117752014A (zh) 一种宠物益生菌及其制备方法
JP2024500742A (ja) 高いトリペプチド生産能を有する微生物およびその用途
CN117731007A (zh) 南瓜籽蛋白组合物和其应用
HU216895B (hu) Eljárás biológiai szempontból nagy értékű aludttej- vagy joghurtkészítmények előállítására
JPH06105678A (ja) 単細胞蛋白生成アゾトバクター及びその生産法
Harding Nutritional aspects
MXPA00012300A (en) Dietary supplement derived from fermented milks for the prevention of osteoporosis

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee