HRP20050624A2

HRP20050624A2 - Diazepinoindole derivatives as kinaze inhibitors

Info

Publication number: HRP20050624A2
Application number: HR20050624A
Authority: HR
Inventors: Ninkovic Sacha; John Bennett Michael; Yuanjin Rui Eugene; Wang Fen; Pritchett Benedict Suzanne; Teng Min; Wang Yong; Zhu Jinjiang
Original assignee: Pfizer Inc.
Priority date: 2003-01-09
Filing date: 2005-07-07
Publication date: 2006-02-28
Also published as: US20050075499A1; JP2006516274A; NO20053775D0; US7132533B2; DE602004015724D1; IS7884A; ZA200504674B; EA200500893A1; AP2005003353A0; US20070135415A1; AU2004203977A1; EP1585749B1; MA27703A1; IL169082A; CN1759118A; ECSP055911A; DK1585749T3; NO20053775L; WO2004063198A1; EA009337B1

Abstract

Triciklički spojevi sljedeće formule (gdje su R2,R3 i R4 definirani kao u u specifikaciji), koji inhibiraju proteinske kinaze, primjerice CHK-1, farmaceutski pripravci koji sadrže djelotvorne količine navedenih spojeva ili njihovih soli korisni su kao samo sredstvo, ili u kombinaciji s antineoplastičnim sredstvom ili terapijskim ozračivanjem s antineoplastičnim učinkom u liječenju bolesti ili stanja, poput raka.

Description

Područje izuma

Ovaj izum odnosi se na nove tricikličke spojeve formule I koji inhibiraju proteinske kinaze, po mogućnosti CHK-1. Ovaj izum također se odnosi na farmaceutske pripravke koji sadrže takve spojeve, te na postupke liječenja stanja koje se može liječiti inhibiranjem proteinskih kinaza, po mogućnosti CHK-1, kod sisavca, primjenom djelotvornih količina takvih spojeva u sprezi s antineoplastičnim sredstvom, terapijom zračenjem ili kao zasebno sredstvo.

Pozadina izuma

Eukariotski stanični ciklus ima pažljivo regulirani slijed faza: Primarni razmak (G1), sintezu DNA (S), sekundarni razmak (G2), te mitozu (M). G1, S i G2 poznati su kao interfaza. U fazi G1 je u stanici, čiji su biosintetski putovi usporeni tijekom mitoze, jaka biosinteza RNA i proteina. S faza počinje s početkom sinteze DNA, a završava kada je sadržaj DNA u jezgri repliciran. Stanica zatim ulazi u fazu G2, gdje ponovno dolazi do biosinteze RNA i proteina. Nakon G2, stanica ulazi u M fazu, koja počinje dijeljenjem jezgre, a završava potpunim dijeljenjem citoplazme u dvije stanice-kćeri. Ovo označuje početak interfaze za nove stanice. Stanice koje se ne dijele postoje u fazi G0, što je vrijeme nakon mitoze, a prije sinteze DNA.

Enzimi nadzorne točke, poput serinske/treoninske proteinske kinaze nazvane kinaza nadzorne točke 1 (CHK-1 ili p56CHK-1) odgovorni su za održavanje reda i vjernosti događaja u staničnom ciklusu. CHK-1 prenosi signale iz kompleksa za provjeru oštećenja DNA za sprječavanje aktiviranja kompleksa Cdc2-ciklin B koji potiče ulazak u mitozu (Science, 277, 1501-1505, (1997.); Science, 277, 1497-1501, (1997.)). Kod eukariota Cdc2 je poznat kao Cdk1 (ciklinski ovisna kinaza 1). CHK-1 regulira Cdc25, dvojno specifičnu fosfatazu koja aktivira Cdc2. Prema tome, CHK-1 služi kao izravna veza između G2 nadzorne točke i negativne regulacije Cdc2.

Zdrave stanice imaju nadzorne točke i za G1 i za G2, kao i odgovarajuće sustave za popravak kako bi se osiguralo vijabilnost nakon liječenja oštećenja DNA (kemoterapija i/ili zračenje). Stanice raka se, međutim, isključivo oslanjaju na nadzornu točku G2 i odgovarajuće sustave za popravak kako bi ostale vijabilne i nastavile replikaciju. Ukidanje nadzorne točke G2 ostavilo bi stanice raka bez sustava za kočenje ulaska u mitozu nakon oštećenja DNA. Pokazalo se da inaktiviranje CHK-1 ukida G2 zastoj uzrokovan oštećenjem DNA, bilo zbog sredstava protiv raka ili endogenog oštećenja DNA. Uz to, inaktiviranje CHK-1 dovodi do selektivnog ubijanja nastalih stanica s oštećenom DNA i defektnom nadzornom točkom (Cell, 91, 865-867, (1997.); Science, 277, 1450-1451, (1997.); Nature, 363, 368-371, (1993.); Molec. Biol. Cell, 5, 147-160, (1994.)). Prema tome, postoji potreba za niskomolekulskim inhibitorima CHK-1 radi selektivnog ukidanja nadzorne točke G2 u odnosu na G1, te za djelotvorno uklanjanje jedine kontrolne nadzorne točke nađene u mnogim oblicima raka. Kada ga se primjenjuje tijekom događaja oštećivanja DNA, poput kemoterapije u kojoj se primjenjuje antineoplastična sredstva, terapije zračenjem, imunoterapija i antiangiogenih terapija, inhibitor CHK-1 može senzibilizirati stanice raka, te tako potaknuti apoptozu uzrokovanu oštećenjem. Prema tome, postoji potreba for a kombinacijskom terapijom koja uključuje inhibitor CHK-1 tijekom događaja oštećivanja DNA.

Kako su proteinske kinaze sveprisutne i međusobno povezane, selektivna modulacija jedne kinaze, poput CHK-1, ili porodice kinaza ne mora dovesti do djelotvornog terapijskog liječenja. Prema tome, postoji potreba za niskomolekulskim inhibitorima koji će utjecati na jedan ili više ciljanih proteinskih kinaza čija bi inhibicija, u cjelini, dovela do željenog terapijskog liječenja. Iako je selektivnost kinaze i njena veza s općom toksičnošću važna, terapijska djelotvornost može ovisiti o inhibiciji više od jedne proteinske kinaze. Kemijske osnovne strukture koje se može pogodno prilagođavati za selektivno i potentno međudjelovanje s ciljanim proteinskim kinazama vrijedno su oruđe za otkrivanje lijekova i znanstveno istraživanje. Prema tome, postoji potreba za takvom osnovnom strukturom kao inhibitorom jedne ili više proteinskih kinaza. Bilo da ih se primjenjuje kao jedno sredstvo ili kao suterapija, inhibitori proteinskih kinaza, poput inhibitora CHK-1, prema ovom izumu, mogli bi biti pogodni za liječenje niza ljudskih bolesti, poput raka.

Izvjesni inhibitori CHK-1 predloženi su za terapiju raka (vidjeti Y. Sanchez i suradnici: Science, 277, 1497-1501, (1997.) i G. Flaggs i suradnici: Current Biology, 7, 977-986, (1997.); US patente br. 6,413,755, 6,383,744, te 6,211,164; i Međunarodne patente br. WO 01/16306, WO 01/21771, WO 00/16781, te WO 02/070494).

Bit izuma

Cilj ovog izuma je osigurati spojeve koji inhibiraju aktivnost jedne ili više proteinskih kinaza, poput CHK-1.

U općem aspektu ovaj izum se odnosi na inhibitor proteinskih kinaza, po mogućnosti inhibitor CHK-1, a to su triciklički spojevi Formule I:

[image] ,

gdje:

X je =O ili =S;

A je =CR1- ili =N-;

skupina -Y-Z- ima formulu -O-CH2- ili -N=CH-;

R1 je:

(a) (C1-C8)alkil;

(b) -C(=O)-R5;

(c) -C(=O)-NR6R7; ili

(d) R35 ili R36, (C2-C8)alkenil ili (C2-C8)alkinil {gdje je svaki od navedenih (C2-C8)alkenila ili (C2-C8)alkinila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine F, Cl, OH, -NH2, R40 i R42};

R2 je:

(a) H, OH ili (C1-C8)alkil;

(b) -C(=O)-R8;

(c) -(C=S)-R9 ili -(C=S)-NR10R11; ili

(d) R38 ili R39;

R3 je:

(a) (C1-C8)alkil;

(b) -C(=O)-R12;

(c) -C(=O)-NR13R14;

(d) -NR15-C(=O)-R16;

(e) -NR17-SO2R18;

(f) -NR19-SOn-NR20R21 (gdje n je 1 ili 2};

(g) -NR22-(C=S)-R23 ili -NR22-(C=S)-NR23R24;

(h) R36, (C2-C8)alkenil ili (C2-C8)alkinil {gdje je svaki od navedenih R3 (C2-C8)alkenila ili (C2-C8)alkinila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, R40, R41 i R42};

(i) R37, -NH2, -NH((C2-C8)alkenil), -NH((C2-C8)alkinil), -N((C1-C8)alkil)((C2-C8)alkenil) ili -N((C1-C8) alkil)((C2-C8)alkinil) {gdje je svaki od navedenih R26 (C2-C8)alkenila ili (C2-C8)alkinila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine R40, R41 i R42}; ili

(j) R38;

R4 se bira iz skupine koju čine H, F, Br, Cl i (C1-C8)alkil;

R5 se bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil, (C1-C8)alkil-O- i R36;

svaki R6 i R7 se neovisno bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil i R36;

R8 se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, (C2-C8)alkenil, (C2-C8)alkinil, -NH2, R36 i R37;

svaki od R9, R10 i R11 se neovisno bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil i R36;

R12 se bira iz skupine koju čine H, OH, (C1-C8)alkil, (C1-C8)alkil-O- i R36;

R13 je H ili (C1-C8)alkil;

R14 se bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil, -CH2-(C=O)-O-(C1-C8)alkil i R36;

R15 je H ili (C1-C8)alkil;

R16 se bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil, (C2-C8)alkenil, (C2-C8)alkinil, -NH2, R36 i R37;

gdje je svaki od navedenih R15 i R16 (C2-C8)alkenila ili (C2-C8)alkinila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine R40, R41 i R42;

R17 se bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil i R36;

R18 je (C1-C8)alkil ili R36;

R19, R20, i R21 se neovisno bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil i R36;

R22, R23 i R24 se neovisno bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil i R36;

R25 je H ili (C1-C8)alkil;

R26 se bira iz skupine koju čine -C(=O)-O-C(CH3)3, (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril;

ili R25 i R26 se može izborno uzeti zajedno s dušikom na koji su vezani kako bi tvorili 5- do 8- člani heteroarilni ili heterociklilni prsten;

R27 se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril;

R28 se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril;

R29 je H ili (C1-C8)alkil;

R30 je (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril ili (C1-C10)heteroaril;

ili R29 i R30 se može izborno uzeti zajedno s dušikom na koji su vezani kako bi tvorili 5- do 8- člani heteroarilni ili heterociklilni prsten;

R31 je H ili (C1-C8)alkil;

R32 se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril;

ili R31 i R32 se može izborno uzeti zajedno s dušikom na koji su vezani kako bi tvorili 5- do 8- člani heteroarilni ili heterociklilni prsten;

R33 je (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril ili (C1-C10)heteroaril;

R34 je (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril ili (C1-C10)heteroaril;

svaki R35 se neovisno bira iz skupine koju čine H, F, Cl, Br, I, CN, OH, NO2, -NH2, -NH-C(=O)-O-C(CH3)3 i CF3;

svaki R36 se neovisno bira iz skupine koju čine (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril;

svaki R37 se neovisno bira iz skupine koju čine:

(a) -NR25R26; i

(b) R27-O-;

R38 je R28-SOn-; gdje n je 0, 1 ili 2 kada je -SOn- vezan na R28 preko atoma ugljika u R28, ili gdje n je 1 ili 2 kada je -SOn- vezan na R28 preko atom dušika u prstenu R28;

R39 je R29R30N-SOn-; gdje n je 1 ili 2;

gdje je svaki od navedenih (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje u bilo kojem od navedenih R1(a)-(d), R2(a)-(d), R3(a)-(j), R4, R37, R38 ili R39, nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C2-C8)alkenil, R40, R41 i R42;

gdje je svaki od navedenih (C3-C10)cikloalkila, (C2-C10)heterociklila, (C6-C10)arila ili (C1-C10)heteroarila, gdje god se pojavljuje u navedenim R36, R37, R38 ili R39, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz R40;

R40 se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, R41, R42 i R43;

svaki R41 se neovisno bira iz skupine koju čine F, Cl, Br, I, CN, OH, NO2, -NH2, -NH-C(=O)-O-C(CH3)3, COOH, -C(=O)(C1-C8)alkil, -C(=O)-O-(C1-C8)alkil, -NH-SO2-(C1-C8)alkil, -NH-SO2-(C6-C10)aril i CF3;

svaki R42 se neovisno bira iz skupine koju čine (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril;

svaki R43 se neovisno bira iz skupine koju čine:

(a) -NR31R32;

(b) R33-O-; i

(c) R34-SOn-; gdje n je 0, 1 ili 2 kada je -SOn- vezan na R34 preko atoma ugljika u R34, ili gdje n je 1 ili 2 kada je -SOn- vezan na R34 preko atoma dušika u prstenu R34;

gdje je svaki od navedenih (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje u bilo kojem od R40, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine R44 i R45;

gdje je svaki od navedenih (C3-C10)cikloalkila, (C2-C10)heterociklila, (C6-C10)arila ili (C1-C10)heteroarila, gdje god se pojavljuje u bilo kojem od navedenih R42 ili R43, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine R47, kojeg se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, R44 i R45;

svaki R44 se neovisno bira iz skupine koju čine F, Cl, Br, I, CN, OH, NO2, -NH2, -CF3, -C(=NH)-NH2, C(=NH)-NH-OH, -C(=NH)-NH-O-(C1-C8)alkil, -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-NH2, -(C=O)-NH(C1-C8)alkil, -(C=O)-N<[(C1-C8)alkil]2, -NH-(C=O)-(C1-C8)alkil, R37 i R38;

svaki R45 se neovisno bira iz skupine koju čine (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril;

gdje je svaki od navedenih (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje u bilo kojem od navedenih R44 ili R45, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine R46 i R47;

gdje je svaki od navedenih (C3-C10)cikloalkila, (C2-C10)heterociklila, (C6-C10)arila ili (C1-C10)heteroarila, gdje god se pojavljuje u bilo kojem od navedenih R43 ili R44, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, R46 i R47;

svaki R46 se neovisno bira iz skupine koju čine F, Cl, Br, I, CN, OH, NO2, -C(=NH)-NH2, -C(=NH)-NH-OH, -C(=NH)-NH-O-(C1-C8)alkil, -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-NH2, -(C=O)-NH(C1-C8)alkil, -(C=O)-N<[(C1-C8)alkil]2, -NH-(C=O)-(C1-C8)alkil, -C(=NH)-NH2, -C(=NH)-NH-OH, -C(=NH)-NH-O-(C1-C8)alkil, -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-NH2, -(C=O)-NH(C1-C8)alkil, -(C=O)-N>[(C1-C8)alkil]2, -NH-(C=O)-(C1-C8)alkil, R37 i R38; i

svaki R47 se neovisno bira iz skupine koju čine (C3-C10)cikloalkil; (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril;

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.

Ovaj izum također se odnosi na farmaceutski prihvatljive predlijekove, farmaceutski aktivne metabolite, te farmaceutski prihvatljive soli spojeva Formule I. Također su osigurane i farmaceutski prihvatljive soli takvih aktivnih metabolita. Također su opisani i pogodni postupci dobivanja spojeva Formule I.

Spojevi prema ovom izumu uključuju sve stereoizomere (npr. cis- i trans-izomere) i sve optičke izomere spojeva Formule I (npr. R- i S-enantiomere), kao i racemske, dijastereomerne i druge smjese takvih izomera.

Spojevi ovog izuma također mogu postojati u različitim tautomernim oblicima. Ovaj izum odnosi se na sve tautomere Formule I.

Spojevi prema ovom izumu mogu sadržavati dvostruke veze, poput onih u olefinima. Kada su prisutne takve veze, spojevi prema ovom izumu postoje kao cis- i trans-konfiguracije, i kao njihove smjese.

U jednoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R3 je (C1-C8)alkil supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine F, OH, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C6-C10)heteroaril.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje se R3 bira iz skupine koju čine (C2-C8) alkenil, (C2-C8)alkinil, (C3-C6)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, fenil i (C1-C10)heteroaril; gdje je svaki od navedenih (C2-C8)alkenila ili (C2-C8)alkinila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 3 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine F, OH, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N-, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10) heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril; te gdje je svaki od navedenih (C3-C6)cikloalkila, (C2-C10) heterociklila, fenila ili (C1-C10)heteroarila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, F, OH, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N-, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril.

U poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R3 je -C(=O)-NR13R14 {gdje R13 je H ili (C1-C8)alkil}, gdje navedeni R13 je (C1-C4)alkil nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine F, OH, -NH2, R41 i R42; gdje je svaki od navedenih R36 nesupstituiran ili supstituiran s 1 ili 2 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C6-C10)aril, (C1-C10)heteroaril, (C2-C10)heterociklil, (C1-C8)alkil-NH- i [(C1-C8)alkil]2>N-; te gdje je svaki od navedenih (C6-C10)arilnih supstituenata nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 3 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, F, Cl, -CF3 i OH.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R15 je (C1-C8)alkil nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine OH, CN, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N-, [(C1-C8)alkil][(C3-C10)cikloalkil]>N-, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril; gdje je navedeni (C6-C10)arilni supstituent nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, F, Cl, Br, CN, OH i CF3; te gdje je navedeni (C2-C10) heterociklilni supstituent nesupstituiran ili supstituiran s 1 ili 2 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -S-(C1-C8)alkil, F, Br, OH i CF3.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R3 je -NR15-C(=O)-R16; gdje R16 je (C2-C8) alkenil nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C3-C10) cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril; gdje je navedeni (C6-C10)arilni supstituent nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, F, Cl, Br, CN, OH i CF3; te gdje je navedeni (C2-C10)heterociklilni supstituent nesupstituiran ili supstituiran s 1 ili 2 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-O-(C1-C8) alkil, -S-(C1-C8)alkil, F, Br, OH i CF3.

U poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R3 je -NR15-C(=O)-R16; gdje R16 je (C1-C10) heteroaril nesupstituiran ili supstituiran s 1 ili 2 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, -S-(C1-C8)alkil, F, Cl, CN, OH i CF3. Poželjnije je da R16 (C1-C10)heteroaril je piridinil.

U sljedećoj poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R3 je -NR15-C(=O)-R16; gdje R16 je (C3-C10)cikloalkil nesupstituiran ili supstituiran s 1 ili 2 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, F, Cl, CN, OH, NH2, CF3, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril; gdje je navedeni (C6-C10)arilni supstituent nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, F, Cl, Br, CN, OH i CF3; te gdje je navedeni (C2-C10)heterociklilni supstituent nesupstituiran ili supstituiran s 1 ili 2 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -S-(C1-C8)alkil, F, Br, OH i CF3. Poželjnije navedeni R16 (C3-C10) cikloalkil se bira iz skupine koju čine ciklopropil i cikloheksil. Poželjnije je da su navedeni (C6-C10)arilni supstituenti nesupstituirani.

U sljedećoj poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R3 je -NR15-C(=O)-R16; gdje R16 je (C2-C10)heterociklil nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, F, Cl, CN, OH i CF3. Poželjnije je da se navedeni R16 (C2-C10)heterociklil bira iz skupine koju čine piperazinil, piperidinil, pirolidinil, pirolidinil, tiadiazolil, tetrahidroizokinolinil, tetrahidronaftalenil i indanil.

U sljedećoj poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R3 je -NR15-C(=O)-R16; gdje R16 je fenil nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 3 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, (C1-C8)alkil-O-, F, Cl, Br, CN, OH i CF3.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R1 je (C1-C8)alkil supstituiran s 1 do 2 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine F, Cl, -OH, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N- i (C1-C8)alkil-O-; gdje je svaki od navedenih (C1-C8)alkilnih supstituenata, gdje god se pojavljuje, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 3 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N-, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R1 je nesupstituirani (C1-C8)alkil; poput metila ili etila.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R1 je (C2-C8)alkenil ili (C2-C8)alkinil; gdje je svaki od navedenih (C2-C8)alkenila ili (C2-C8)alkinila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 2 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N-, (C2-C10)heterociklil i (C1-C10) heteroaril; gdje je svaki od navedenih (C1-C8)alkilnih supstituenata, gdje god se pojavljuje, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 3 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N-, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril.

U sljedećoj poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R1 je R36, kojeg se bira iz skupine koju čine H, Cl, i Br.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje se R1 bira iz skupine koju čine (C3-C6) cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, fenil i (C1-C10)heteroaril; gdje je svaki od navedenih (C2-C10)heterociklila, fenila ili (C1-C10)heteroarila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 3 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, F, Cl, -NH2, -OH, (C1-C8)alkil-NH- i [(C1-C8)alkil]2>N-; gdje je svaki od navedenih (C1-C8) alkilnih supstituenata, gdje god se pojavljuje, nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 3 supstituenta, koje se bira između -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N-, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, (C2-C10)heterociklila, (C6-C10)arila i (C1-C10)heteroarila. U ovoj izvedbi po mogućnosti R1 je fenil, tetrahidropiridinil, piperidinil ili piridinil.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R1 je -C(=O)-R5, a R5 je (C1-C8)alkil-O- ili (C2-C10)heterociklil, poput morfolinila; gdje je navedeni R5 (C2-C10)heterociklil nesupstituiran ili supstituiran s (C1-C8)alkilom, poput metila ili etila.

U sljedećoj poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R1 je -C(=O)-NR6R7; gdje svaki od navedenih R6 i R7 je neovisno H ili (C1-C8)alkil; te gdje je svaki od navedenih R6 i R7 (C1-C8)alkila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 3 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine OH, -NH2, (C1-C8) alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N-, (C2-C10)heterociklil i (C1-C10)heteroaril.

U sljedećoj poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R2 je H ili (C1-C8)alkil, nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine OH, -NH2, (C1-C8) alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N-, (C2-C10)heterociklil i (C1-C10)heteroaril.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje A je =N-.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R2 je -C(=O)-R8, gdje se R8 bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, (C2-C8)alkenil, (C2-C8)alkinil, -NH2 i R37, kojeg se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N- i (C1-C8)alkil-O-; gdje je svaki od navedenih R8 i R37 (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz R40, kojeg se bira iz skupine koju čine F, OH, -NH2, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril, (C1-C10)heteroaril; (C1-C8)alkil-NH- i [(C1-C8)alkil]2>N-;

gdje je svaki od navedenih R40 (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz R44, kojeg se neovisno bira iz skupine koju čine OH, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N- i (C3-C10)cikloalkil-NH-;

gdje je svaki od navedenih svaki od navedenih R40 (C3-C10)cikloalkila, (C2-C10)heterociklila, (C6-C10)arila ili (C1-C10)heteroarila, gdje god se pojavljuje, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz R47, kojeg se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, OH, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8) alkil]2>N- i (C3-C10)cikloalkil-NH-; i

gdje je svaki od navedenih R47 (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine OH, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8) alkil]2>N- i (C3-C10)cikloalkil-NH.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje R2 je -C(=O)-R8, gdje se R8 bira iz skupine koju čine (C3-C6)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, fenil ili (C1-C10)heteroaril; gdje je svaki od navedenih R8 (C3-C6)cikloalkila, (C2-C10)heterociklila, fenila ili (C1-C10)heteroarila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz R40, kojeg se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, F, OH, -NH2, (C1-C8) alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N-, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril; gdje je svaki od navedenih R40 (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz R44, kojeg se neovisno bira iz skupine koju čine OH, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N- i (C3-C10)cikloalkil-NH-; gdje je svaki od navedenih R40 (C3-C10)cikloalkila, (C2-C10) heterociklila, (C6-C10)arila ili (C1-C10)heteroarila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz R47, kojeg se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, OH, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8) alkil]2>N- i (C3-C10)cikloalkil-NH-; gdje je svaki od navedenih R47 (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje, nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine OH, -NH2, (C1-C8) alkil-NH-, [(C1-C8)alkil]2>N- i (C3-C10)cikloalkil-NH.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje navedeni R3 je na bilo kojem od položaja 7, 8 ili 9 u navedenom spoju formule I. Po mogućnosti, ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje navedeni R3 je na položaju 8 u navedenom spoju formule I.

U sljedećoj poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje navedeni R4 je na položaju 7 u navedenom spoju formule I. Poželjnije je da navedeni R3 je na položaju 8 u navedenom spoju formule I, a navedeni R4 na položaju 7 u navedenom spoju formule I.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje navedeni R4 je Cl ili Br na položaju 7 u navedenom spoju formule I.

U sljedećoj poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje navedeni R4 je H na položaju 7 u navedenom spoju formule I.

U sljedećoj poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje X je O.

U sljedećoj poželjnoj izvedbi ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I gdje skupina -Y-Z- ima formulu N=CH-.

Po mogućnosti, ovaj izum se odnosi na spojeve Formule I koje se bira iz ove skupine:

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilacetamid;

2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid;

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-fenilbutiramid;

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamid;

3-fluor-2-metil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid;

2-fluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-trifluormetilbenzamid;

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-trifluormetilbenzamid;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

2-(3-klorfenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid;

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-tien-2-ilbutanamid;

1-acetil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)piperidin-4-karboksamid;

3-(2-metilfenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propanamid;

(2S)-2-amino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,23diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-fenilbutiramid; spoj s trifluoroctenom kiselinom;

(2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)etanamid-trifluoracetat;

2-etilsulfanil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)nikotinamid;

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

N-[2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-2-fluor-3-trifluormetilbenzamid;

6-okso-2-fenil-N-(2-fenilciklopropil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid;

N-[1-(4-fluorfenil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid;

[2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol);

3-{6-okso-8-[((1R,2R)-2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}benzilni ester octene kiseline;

[2-(3-hidroksimetilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

(2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid (hidrokloridna sol);

N-[1-(4-hidroksifenil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid;

2,3-difluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid;

N-(4-fluorbenzil)-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid;

[2-(3-ciklobutilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol);

[6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilmetilfenil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol);

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-(1,2-trans)-2-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]ciklopropankarboksamid-trifluoracetat;

(2R)-2-amino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilacetamid (hidrokloridna sol);

(2R)-2-amino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamid (hidrokloridna sol);

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (3E)-4-fenilbut-3-enske kiseline;

2-indan-2-il-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-fluorfenil) ciklopropan karboksilne kiseline;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-3-il ciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol);

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-metoksifenil) ciklopropan karboksilne kiseline;

2-indan-2-il-(6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid;

(2R)-2-hidroksi-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-feniletanamid;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-2-il ciklopropan karboksilne kiseline; spoj s octenom kiselinom;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(1H-imidazol-4-il) ciklopropan karboksilne kiseline; spoj s octenom kiselinom;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (2R)-piperidin-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol);

(2S)-2-amino-3-cijano-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propionamid; spoj s octenom kiselinom;

(2R)-2-amino-3-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid (hidrokloridna sol);

metilni ester (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-2-karboksilne kiseline;

(2R)-3-(4-hidroksifenil)-2-(metilamino)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid (hidrokloridna sol);

(2R)-2-amino-3-(4-fluorfenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid (hidrokloridna sol);

metilamid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-2-karboksilne kiseline;

(2-hidroksietil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline;

(2-dimetilaminoetil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline;

(2R)-2-amino-2-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) etanamid (hidrokloridna sol);

(6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline;

(2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

(2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-bromfenil)ciklopropan karboksilne kiseline;

(6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline;

2-(3,4-dihidroizokinolin-2(1H)-il)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) acetamid;

(2-brom-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[6-okso-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol);

(1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid;

N-(6-okso-2-piridin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-(1,2-trans)-2-piridin-3-il ciklopropankarboksamid;

N-(6-okso-2-piridin-3-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-(1,2-trans)-2-piridin-3-il ciklopropankarboksamid;

(1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-3-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid;

[2-(3-dimetilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[2-(3-dimetilaminopropil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[2-(3-dimetilaminopropenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

(1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline [2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (hidrokloridna sol);

[2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline (dihidrokloridna sol);

(2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-[2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il]acetamid (dihidrokloridna sol);

(1,2-trans)-N-[1-(2-hidroksietil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-2-fenilciklopropan karboksamid;

(2-dimetilaminometil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[1-(2-aminoetil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[2-(3-morfolin-4-ilprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilprop-1-inil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; i

[1-(2-aminoetil)-2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[2-(1H-imidazol-2-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

(2-cijano-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; i

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati.

Sljedeće poželjne spojeve bira se iz skupine koju čine:

(2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid;

[2-(3-ciklobutilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilmetilfenil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-fluorfenil)ciklopropan karboksilne kiseline;

(2R)-2-amino-3-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propanamid;

(2R)-2-amino-2-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) etanamid;

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil) ciklopropan karboksilne kiseline;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil) ciklopropan karboksilne kiseline;

[6-okso-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

(2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-[2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il]acetamid;

(2-hidroksimetil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2-cd]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

[6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilprop-1-inil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline;

(2R)-2-amino-2-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) etanamid-hidroklorid;

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati.

Sljedeće poželjne spojeve formule I bira se iz skupine koju čine:

(2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid (hidroklorid);

6-okso-2-fenil-N-[(1R)-1-feniletil]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-2-il ciklopropan karboksilne kiseline (sol octene kiseline);

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(1H-imidazol-4-il) ciklopropan karboksilne kiseline (sol octene kiseline);

(2R)-2-amino-3-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid-hidroklorid;

Primjer 182: (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline;

(1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-3-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid; i

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se također odnosi na spojeve Formule I koji su selektivni za CHK-1 u odnosu na CHK-2, uz odnos selektivnosti između približno 5 × i približno 5000 ×; po mogućnosti između približno 50 × i približno 1000 ×; te poželjnije između približno 70 × i približno 830 ×. U ovoj izvedbi poželjnije spojeve se bira iz skupine koju čine:

(2-dimetilaminoetil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline;

(2R)-2-amino-2-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)etanamid-hidroklorid;

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline; i

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati.

Sljedeći cilj ovog izuma je osigurati pripravak za liječenje novotvorina, te za pojačavanje antineoplastičnih učinaka antineoplastičnih sredstava i terapijskog zračenja.

U jednoj izvedbi ovaj izum se odnosi na pripravak koji sadrži spoj Formule I, njegovu farmaceutski prihvatljivu sol, solvat ili predlijek, i antineoplastično sredstvo kao kombinirani pripravak za istodobnu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu u liječenju novotvorine.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na pripravak koji sadrži spoj Formule I, njegovu farmaceutski prihvatljivu sol, solvat ili predlijek, i antineoplastično sredstvo kao kombinirani pripravak za istodobnu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu u liječenju novotvorine, gdje se antineoplastično sredstvo bira iz skupine koju čine alkilacijska sredstva, antibiotici i biljni alkaloidi, hormoni i steroidi, sintetska sredstva s antineoplastičnom aktivnošću, antimetaboliti i biološke molekule s antineoplastičnom aktivnošću.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na pripravak koji sadrži spoj Formule I, njegovu farmaceutski prihvatljivu sol, solvat ili predlijek, i antineoplastično sredstvo kao kombinirani pripravak za istodobnu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu u liječenju novotvorine, gdje se antineoplastično sredstvo bira iz skupine koju čine Ara-C�, VP-16�, cisplatin, adriamicin, 2-klor-2-deoksiadenozin, 9-�-d-arabinozil-2-fluoradenin, karboplatin, gemcitabin, Camptothecin�, paklitaksel, BCNU, 5-fluoruracil, irinotekan i doksorubicin.

Sljedeći cilj ovog izuma je osigurati postupak liječenja novotvorina.

U jednoj izvedbi ovaj izum se odnosi na postupak liječenja novotvorine, koji se sastoji u primjeni, na sisavcu kojem je to potrebno, antineoplastičnog sredstva u kombinaciji sa spojem Formule I, njegovom farmaceutski prihvatljivom solju, solvatom ili predlijekom.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na postupak liječenja novotvorine, koji se sastoji u primjeni, na sisavcu kojem je to potrebno, antineoplastičnog sredstva u kombinaciji sa spojem Formule I, njegovom farmaceutski prihvatljivom solju, solvatom ili predlijekom, gdje se antineoplastično sredstvo bira iz skupine koju čine Ara-C�, VP-16�, cisplatin, adriamicin, 2-klor-2-deoksiadenozin, 9-�-d-arabinozil-2-fluoradenin, karboplatin, gemcitabin, Camptothecin�, paklitaksel, BCNU, 5-fluoruracil, irinotekan i doksorubicin. U sljedećoj izvedbi može se upotrijebiti više od jednog antineoplastičnog sredstva u kombinaciji sa spojem Formule I, njegovim farmaceutski prihvatljivim solima, solvatima ili predlijekovima.

Sljedeći cilj ovog izuma je osigurati postupke pojačavanja antineoplastičnog učinka terapijskog zračenja.

U jednoj izvedbi ovaj izum se odnosi na postupak liječenja novotvorine, koji se sastoji u primjeni, na sisavcu kojem je to potrebno, terapijskog zračenja s antineoplastičnim učinkom u kombinaciji sa spojem Formule I, njegovom farmaceutski prihvatljivom solju, solvatom ili predlijekom.

Sljedeći cilj ovog izuma je osigurati postupke pojačavanja antineoplastičnog učinka antineoplastičnog sredstva.

U jednoj izvedbi ovaj izum se odnosi na postupak pojačavanja antineoplastičnog učinka antineoplastičnog sredstva kod sisavca, koji se sastoji u primjeni, na sisavcu kojem je to potrebno, spoja Formule I, njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata ili predlijeka, u kombinaciji s antineoplastičnim sredstvom. Antineoplastična sredstva uključuju alkilacijska sredstva, antibiotike i biljne alkaloide, hormone i steroide, sintetska sredstva s antineoplastičnom aktivnošću, antimetabolite i biološke molekule s antineoplastičnom aktivnošću. Specifična antineoplastična sredstva uključuju Ara-C�, VP-16�, cisplatin, adriamicin, 2-klor-2-deoksiadenozin, 9-�-d-arabinozil-2-fluoradenin, karboplatin, gemcitabin, Camptothecin�, paklitaksel, BCNU, 5-fluoruracil, irinotekan i doksorubicin.

U sljedećoj izvedbi ovaj izum se odnosi na postupak pojačavanja antineoplastičnog učinka terapijskog zračenja kod sisavca, koji se sastoji u primjeni, na sisavcu kojem je to potrebno, spoja Formule I, njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata ili predlijeka, u kombinaciji s terapijskim zračenjem s antineoplastičnim učinkom.

Sljedeći cilj ovog izuma je osigurati postupak liječenja stanja koje se može liječiti inhibiranjem proteinskih kinaza. U jednoj izvedbi ovog izuma proteinske kinaze se bira iz skupine koju čine kinaza nadzorne točke 1 (CHK-1), kinaza nadzorne točke 2 (CHK-2), ciklinski ovisna kinaza 1 (CDK1), serumski i glukokortikoidima regulirana kinaza (SGK), adenozin-5'-monofosfatom (AMP) aktivirana proteinska kinaza (AMPK), tirozinska kinaza iz limfoidnih T-stanica (LCK), mitogenima aktivirana proteinska kinaza-2 (MAPK-2), mitogenima i stresom aktivirana proteinska kinaza 1 (MSK1), Rho kinaza (ROCK-II), P70 S6 kinaza (p70S6K), cAMP (adenozin-3',5'-ciklički monofosfat)-ovisna proteinska kinaza (PKA), mitogenima aktivirana proteinska kinaza (MAPK), mitogenima aktivirana proteinska kinaza-1 (MAPK-1), proteinskoj kinazi C srodna kinaza 2 (PRK2), 3'-fosfoinozitidno ovisna kinaza 1 (PDK1), Fyn kinaza (FYN), proteinska kinaza C (PKC), proteinska kinaza C � 2 (PKC�II), proteinska kinaza C � (PKC�), receptor čimbenika rasta vaskularnog endotela 2 (VEGFR-2), receptor fibroblastnog čimbenika rasta (FGFR), fosforilaza-kinaza (PHK), Wee1 kinaza (Wee1), i proteinska kinaza B (PKB). Po mogućnosti, proteinske kinaze se bira iz skupine koju čine kinaza nadzorne točke 1 (CHK-1), kinaza nadzorne točke 2 (CHK-2), mitogenima aktivirana proteinska kinaza (MAPK), mitogenima aktivirana proteinska kinaza-1 (MAPK-1), mitogenima aktivirana proteinska kinaza-2 (MAPK-2), receptor čimbenika rasta vaskularnog endotela 2 (VEGFR-2), receptor fibroblastnog čimbenika rasta (FGFR), fosforilaza-kinaza (PHK), proteinska kinaza B � (PKB�) i Wee1 kinaza (Wee1).

U jednoj izvedbi ovaj izum se odnosi na postupak liječenja stanja koje se može liječiti inhibiranjem proteinskih kinaza kod sisavca, uključujući čovjeka, koji se sastoji u primjeni, na sisavcu kojem je to potrebno, spoja Formule I, njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata ili predlijeka.

U sljedećoj izvedbi se navedeno stanje koje se može liječiti inhibiranjem proteinskih kinaza bira iz skupine koju čine poremećaji vezivnog tkiva, upalni poremećaji, imunološki/alergijski poremećaji, infektivne bolesti, bolesti dišnog sustava, kardiovaskularne bolesti, bolesti oka, metaboličke bolesti, poremećaji središnjeg živčanog sustava (CNS), bolesti jetre i bubrega, poremećaji reproduktivnog zdravlja, želučani poremećaji, poremećaji kože, te razni oblici raka.

Sljedeći aspekti, pogodnosti i poželjne karakteristike ovog izuma bit će očigledni iz detaljnog opisa, niže.

Detaljni opis i poželjne izvedbe ovog izuma

U svrhe prema ovom izumu, kao što se otkriva i štiti u ovoj specifikaciji, sljedeći termini i kratice su definirani kao što slijedi:

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "gdje god se pojavljuje" odnosi se na svako pojavljivanje bilo koje funkcionalne skupine (poput R1, R2 ili bilo kojeg njihovog supstituenta), uključujući svako pojavljivanje bilo koje komponente bilo koje funkcionalne skupine koje se navodi u ovoj specifikaciji (npr. "(C1-C8)alkilna komponenta u (C1-C8)alkil-O-).

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "(C1-C8)alkil" kao i (C1-C8)alkilna komponenta kod drugih termina koje se navodi u ovoj specifikaciji (npr. "(C1-C8)alkilna komponenta u (C1-C8)alkil-O-), može biti nerazgranata ili razgranata (poput metila, etila, n-propila, izopropila, n-butila, iso-butila, sec-butila, tert-butila).

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "(C2-C8)alkenil" znači nerazgranati ili razgranati ugljikovodični radikal, supstituent, ostatak ili podostatak, za koje se navodi u ovoj specifikaciji da imaju 2-8 atoma ugljika, s najmanje jednom dvostrukom vezom, uključujući, no ne ograničujući se na etenil, 1-propenil, 2-propenil (alil), iso-propenil, 2-metil-1-propenil, 1-butenil ili 2-butenil.

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "(C2-C8)alkinil" se upotrebljava u ovoj specifikaciji sa značenjem nerazgranati ili razgranati ugljikovodični radikal, supstituent, ostatak ili podostatak, za koje se navodi u ovoj specifikaciji da imaju 2-8 atoma ugljika s jednom trostrukom vezom, uključujući, no ne ograničujući se na etinil (-C�C-H), propinil (-CH2-C�C-H ili -C�C-CH3) ili butinil (-CH2-CH2-C�C-H ili -CH2-C�C-CH3 ili -C�C-CH2CH3).

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "(C3-C10)cikloalkil" odnosi se na nearomatski, zasićeni ili djelomično zasićeni, monociklički ili kondenzirani, spiro ili nekondenzirani biciklički ili triciklički ugljikovodični radikal, supstituent, ostatak ili podostatak, za koje se navodi u ovoj specifikaciji da sadrže ukupno 3-10 atoma ugljika, po mogućnosti 5-8 atoma ugljika u prstenu. Primjeri (C3-C10)cikloalkila uključuju monocikličke prstene s 3 do 7, po mogućnosti 3-6, atoma ugljika, poput ciklopropila, ciklobutila, ciklopentila, cikloheksila, cikloheptila i slično. Ilustrativni primjeri (C3-C10)cikloalkila izvode se iz, no ne ograničuju se na sljedeće:

[image]

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "(C2-C10)heterociklil" odnosi se na nearomatski, zasićeni ili djelomično zasićeni, jednovalentni, monociklički ili kondenzirani, spiro ili nekondenzirani biciklički ili triciklički radikal, supstituent, ostatak ili podostatak, za koje se navodi u ovoj specifikaciji da sadrže ukupno 2-10 atoma ugljika u prstenu, a 1 do 5 heteroatoma u prstenu bira se između dušika, kisika i sumpora. Ilustrativni primjeri (C2-C10) heterociklila uključuju azetidinil, pirolidil, piperidil, piperazinil, morfolinil, kromenil, tetrahidro-2H-1,4-tiazinil, tetrahidrofuril, dihidrofuril, tetrahidropiranil, dihidropiranil, 1,3-dioksolanil, 1,3-dioksanil, 1,4-dioksanil, 1,3-oksatiolanil, 1,3-oksatianil, 1,3-ditianil, azabiciklo[3.2.1]oktil, azabiciklo[3.3.1]nonil, azabicilo[4.3.0]nonil, oksabiciklo[2.2.1]heptil, 1,5,9-triazaciklododecil i slično. Daljnji ilustrativni primjeri (C2-C10)heterociklila izvode se iz, no ne ograničuju se na sljedeće:

[image]

ukoliko se drugačije ne naznači, gore navedeni (C2-C10)heterociklil može biti C-vezan ili N-vezan, gdje je to moguće. Kao primjer, piperidil može biti piperid-1-il (N-vezan) ili piperid-2-il (C-vezan).

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "(C6-C10)aril" odnosi se na aromatski, jednovalentni, monociklički ili kondenzirani ili nekondenzirani biciklički ili triciklički radikal, supstituent, ostatak ili podostatak, za koje se navodi u ovoj specifikaciji da sadrže ukupno 6-10 atoma ugljika u prstenu. Ilustrativni primjeri (C6-C10)arila izvode se iz, no ne ograničuju se na sljedeće:

[image]

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "(C1-C10)heteroaril" odnosi se na aromatski, jednovalentni monociklički, kondenzirani ili nekondenzirani biciklički ili triciklički radikal, supstituent, ostatak ili podostatak, za koje se navodi u ovoj specifikaciji da sadrže ukupno 1-10 atoma ugljika u prstenu, a 1 do 5 heteroatoma u prstenu bira se između dušika, kisika i sumpora. Ilustrativni primjeri (C1-C10)heteroarila uključuju, no ne ograničuju se na tienil, pirolil, imidazolil, pirazolil, furil, izotiazolil, furazanil, izoksazolil, tiazolil, piridil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil, triazinil, benzo[b]tienil, nafto[2,3-b]tiantrenil, izobenzofuranil, kromenil, ksantenil, fenoksatienil, indolizinil, izoindolil, indolil, indazolil, purinil, izokinolil, kinolil, ftalazinil, naftiridinil, kinoksalinil, kinazolinil, benzotiazolil, benzimidazolil, tetrahidrokinolinil, cinolinil, pteridinil, karbazolil, �-karbolinil, fenantridinil, akridinil, perimidinil, fenantrolinil, fenazinil, izotiazolil, fenotiazinil i fenoksazinil. Daljnji primjeri (C1-C10) heteroarila izvode se iz, no ne ograničuju se na sljedeće:

[image]

ukoliko se drugačije ne naznači, gore navedeni (C1-C10)heteroaril može biti C-vezan ili N-vezan, gdje je to moguće. Kao primjer, piridil može biti pirid-1-il (N-vezan) ili pirid-3-il (C-vezan).

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "((C3-C10)cikloalkil)((C1-C8)alkil)>N-" odnosi se na radikal, supstituent, ostatak ili podostatak, za koje se navodi u ovoj specifikaciji da imaju formulu:

[image]

gdje su termini "(C3-C10)cikloalkil" i "(C1-C8)alkil kao što je definirano gore.

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "((C6-C10)aril)((C1-C8)alkil)>N-" odnosi se na radikal, supstituent, ostatak ili podostatak, za koje se navodi u ovoj specifikaciji da imaju formulu:

[image]

gdje su termini "(C6-C10)aril" i "(C1-C8)alkil" kao što je definirano gore.

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "(C1-C10)heteroaril-NH-" odnosi se na radikal, supstituent, ostatak ili podostatak, za koje se navodi u ovoj specifikaciji da imaju formulu:

[image]

gdje je termin "(C1-C10)heteroaril" kao što je definirano gore, te gdje je navedeni (C1-C10)heteroaril vezan na -NH- preko atoma ugljika u (C1-C10)heteroarilnom prstenu.

Ukoliko se drugačije ne naznači, termin "(C2-C10)heterociklil-NH-" odnosi se na radikal, supstituent, ostatak ili podostatak, za koje se navodi u ovoj specifikaciji da imaju formulu:

[image]

gdje je termin "(C2-C10)heterociklil" kao što je definirano gore, te gdje je navedeni (C2-C10)heterociklil vezan na -NH- preko atoma ugljika u (C2-C10)heterociklilnom prstenu.

Termin "farmaceutski prihvatljiva sol" odnosi se na sol koja zadržava biološku djelotvornost slobodnih kiselina i baza specificiranog spoja, te koja nije biološki ili drugačije nepoželjna. Spoj prema ovom izumu može posjedovati dovoljno kiselih, dovoljno bazičnih, ili obih funkcionalnih skupina, te odgovarajuće reagirati s bilo kojom od niza anorganskih ili organskih baza i anorganskih i organskih kiselina kako bi se dobilo farmaceutski prihvatljivu sol. Primjeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju soli koje se dobiva reakcijom spojeva prema ovom izumu s mineralnom ili organskom kiselinom ili anorganskom bazom, poput soli koje uključuju sulfate, pirosulfate, bisulfate, sulfite, bisulfite, fosfate, monohidrogenfosfate, dihidrogenfosfate, metafosfate, pirofosfate, kloride, bromide, jodide, acetate, propionate, dekanoate, kaprilate, akrilate, formijate, izobutirate, kaproate, heptanoate, propiolate, oksalate, malonate, sukcinate, suberate, sebakate, fumarate, maleate, butin-1,4-dioate, heksin-1,6-dioate, benzoate, klorbenzoate, metilbenzoate, dinitrobenzoate, hidroksibenzoate, metoksibenzoate, ftalate, sulfonate, ksilensulfonate, fenilacetate, fenilpropionate, fenilbutirate, citrate, laktate, �-hidroksibutirate, glikolate, tartarate, metansulfonate, propansulfonate, naftalen-1-sulfonate, naftalen-2-sulfonate i mandelate.

Termin "predlijek", kao što ga se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnosi se na metaboličkog preteču spoja Formule I (ili njegove soli) koji je farmaceutski prihvatljiv. Predlijek može biti inaktivan prilikom primjene na subjektu no in vivo se prevede u aktivni spoj Formule I. Termin "aktivni metabolit", kao što ga se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnosi se na metabolički produkt spoja Formule I koji je farmaceutski prihvatljiv i djelotvoran. Predlijekove i aktivne metabolite spojeva Formule I može se odrediti tehnikama poznatim u struci. Predlijekove i aktivne metabolite spoja može se identificirati rutinskim tehnikama poznatim u struci. Vidjeti, npr., Bertolini i suradnici: J. Med Chem., 40, 2011-2016, (1997.); Shan i suradnici: J. Pharm. Sci., 86 (7), 765-767; Bagshawe: Drug Dev. Res., 34, 220-230, (1995.); Bodor: Advances u Drug Res., 13, 224-331, (1984.); Bundgaard: "Design of Prodrugs", (Elsevier Press, (1985.)); te Larsen: "Design and Application of Prodrugs, Drug Design and Development", (Krogsgaard-Larsen i suradnici, ur., Harwood Academic Publishers, (1991.)).

Inhibitor CHK-1 prema ovom izumu može se primijeniti u kombinaciji s drugim antineoplastičnim terapijama, uključujući antineoplastična sredstva i terapiju zračenjem.

Termin "u kombinaciji s" znači da se spoj Formule I može primijeniti neposredno prije, neposredno poslije, istodobno, ili u bilo kojoj kombinaciji, prije, poslije ili istodobno, s takvim drugim antineoplastičnim terapijama. Prema tome, spoj i antineoplastično sredstvo može se primijeniti istodobno, bilo kao jedan pripravak ili kao dva odvojena pripravka, ili uzastopno, kao dva odvojena pripravka. Isto tako, spoj i terapiju zračenjem može se primijeniti istodobno, odvojeno ili uzastopno. Spoj se može primijeniti u kombinaciji s više od jedne antineoplastične terapije. U poželjnoj izvedbi spoj se može primijeniti 2 tjedna do 1 dan prije bilo koje kemoterapije ili 2 tjedna do 1 dan prije bilo koje terapije zračenjem. U sljedećoj poželjnoj izvedbi inhibitor CHK-1 se može primijeniti tijekom antineoplastične kemoterapije i terapije zračenjem. Ako ga se primjenjuje nakon takve kemoterapije ili terapije zračenjem inhibitor CHK-1 može se dati unutar 1-14 dana nakon primarnih liječenja. Inhibitor CHK-1 također se može primjenjivati kronično ili polukronično, u periodu od približno 2 tjedna do približno 5 godina. Stručnjak u ovom području tehnike shvatit će da količina inhibitora CHK-1 koju će se primijeniti prema ovom izumu u kombinaciji s drugim antineoplastičnim sredstvima ili terapijama količina dovoljna za pojačavanje antineoplastičnih učinaka antineoplastičnih sredstava ili terapija zračenjem, ili količina dovoljna za aktiviranje apoptoze ili stanične smrti, zajedno s antineoplastičnom ili terapijom zračenjem i/ili za održavanje antiangiogenog učinka. Takva količina može, između ostalog, varirati ovisno o veličini i tipu novotvorine, koncentraciji spoja u terapijskoj formulaciji, konkretnim upotrijebljenim antineoplastičnim sredstvima, vremenskom usklađivanju primjene inhibitora CHK-1 u odnosu na druge terapije, te o dobi, veličini i stanju pacijenta.

Termin "proteinske kinaze", kao što ga se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnosi se na enzime koji kataliziraju fosforiliranje hidroksi skupina na tirozinskim, serinskim i treoninskim ostacima u proteinima. Posljedice ove naoko jednostavne aktivnosti su zapanjujuće: stanični rast, diferencijacija i proliferacija, tj. praktički svi aspekti staničnog života na ovaj ili onaj način ovise o aktivnosti proteinskih kinaza. Nadalje, abnormalna aktivnost proteinskih kinaza povezana je s čitavim nizom poremećaja, u rasponu od bolesti koje su relativno neopasne po život, poput psorijaze, do krajnje pogibeljnih bolesti, poput glioblastoma (rak mozga). Proteinske kinaze može se pogodno podijeliti u dvije velike klase, proteinske tirozinske kinaze (PTK) i serinsko/treoninske kinaze (STK). Uz to, poznata je i treća klasa dvojno specifičnih kinaza, koje mogu fosforilirati kako tirozinske, tako i serinske i treoninske ostatke. Primjeri proteinskih kinaza i njihovih izoformi koje se razmatra u ovom izumu uključuju, no ne ograničuju se na kinazu nadzorne točke 1 (CHK-1), kinazu nadzorne točke 2 (CHK-2), ciklinski ovisnu kinazu 1 (CDK1), serumski i glukokortikoidima reguliranu kinazu (SGK), adenozin-5'-monofosfatom (AMP) aktiviranu proteinsku kinaza (AMPK), tirozinsku kinazu iz limfoidnih T-stanica (LCK), mitogenima aktiviranu proteinsku kinazu 2 (MAPK-2), mitogenima i stresom aktiviranu proteinsku kinazu 1 (MSK1), proteinsku kinazu B (PKB), proteinsku kinazu B � (PKB�), Rho kinazu (ROCK-II), P70 S6 kinazu (p70S6K), cAMP (adenozin-3',5'-ciklički monofosfat)-ovisnu proteinsku kinazu (PKA), mitogenima aktiviranu proteinsku kinazu 1 (MAPK-1), proteinskoj kinazi C srodnu kinazu 2 (PRK2), 3'-fosfoinozitidno ovisnu kinazu 1 (PDK1), Fyn kinazu (FYN), proteinsku kinazu C (PKC), proteinsku kinazu C � 2 (PKC�II), proteinsku kinazu C � (PKC�), receptor čimbenika rasta vaskularnog endotela 2 (VEGFR-2), receptor fibroblastnog čimbenika rasta (FGFR), fosforilaza-kinazu (PHK), Wee1 kinazu (Wee1), te proteinsku kinazu B (PKB).

Kinaza nadzorne točke 2 (CHK-2) djeluje kao kontrolor nadzorne točke staničnog ciklusa u odgovor na oštećenje DNA. CHK-2 je nizvodni efektor ATM koji fosforilira protein p53 i utječe na tijek staničnog ciklusa od faze G1 do faze S. Aktiviranje CHK-2 također utječe na tijek faze S. Uz to, zajedno s CHK-1, CHK-2 utječe na prijelaz G2/M i ima ulogu u apoptozi ako se oštećenje ne može popraviti. CHK-2 moguće ima ulogu u senzibiliziranju stanica raka na terapije koje oštećuju DNA. CHK-2 također možda ima ulogu kao tumor-supresor. J. Bartek i suradnici: Nature, Reviews, Molecular Cell biology, 2, 877-886, (2001.).

Ciklinski ovisna kinaza 1 (CDK1) također je poznata kao Cdc2 u stanicama kvasca. Stanični ciklus upravlja specifičnim događajima koji kontroliraju rast i proliferaciju stanica. Kompleks ciklin B/Cdk1 potiče ulazak u mitozu. Hiperekspresija ciklina B1 opažena je u 90 % slučajeva kolorektalnih karcinoma. Kako je stanični ciklus dereguliran u oblicima raka kod ljudi, modulacija aktivnosti CDK je moguća terapija. Pokazalo se da olomoucin, inhibitor CDK, inhibira staničnu proliferaciju u stanicama raka kod ljudi. U stanicama limfoma olomoucin zaustavlja stanični ciklus i u fazi G1 i fazi G2 inhibirajući ciklin E/CDK2 i ciklin B/CDK1. J.K. Buolamwini: Current Pharmaceutical Design, 6, 379-392, (2000.); S. Fan i suradnici: Chemotherapy, 45, 437-445, (1999.).

Serumski i glukokortikoidima reguliranu kinaza (SGK) brzo i snažno reguliraju kortikosteroidi u stanicama A6 na razini mRNA i proteina. SGK se također inducira aldosteronom u bubregu adrenalektomiranih štakora. SGK se aktivira 3'-fosfoinozitidno ovisnom kinazom 1 (PDK1). SGK možda ima kritičnu ulogu u stanicama osjetljivim na aldosteron i možda je fiziološki važna u ranom odgovoru na aldosteron. Antagonisti aldosteronskog receptora nedavno su se pokazali kao vrlo obećavajući u kliničkim ispitivanjima na pacijentima sa srčanom insuficijencijom. Sposobnost posredovanja fizioloških odgovora na aldosteron bi isto tako mogla biti od koristi. Vidjeti N.R. Leslie i suradnici: Chemical Reviews, 101(8), 2365-2380, (2001.); J.W. Funder: Molecular and Cellular Endocrinology, 151(1-2), 1-3, (1999.); F. Verrey i suradnici: Kidney International, 57(4), 1277-1282, (2000.).

Adenozin-5'-monofosfatom (AMP) aktivirana proteinska kinaza (AMPK), izoforma �2 (AMPK �2), prisutna je u visokim koncentracijama u skeletnim mišićima, srcu i jetri, dok je izoforma �1 široko rasprostranjena. AMPK, vjerojatno izoforma �2, fosforilira acetil-CoA-karboksilazu, izoforma � (ACC�), i inaktivira je u uvjetima električne stimulacije ili vježbanja. U štakorskom skeletnom mišiću ACC� regulira malonil-CoA i sudjeluje u regulacijskom mehanizmu prijenosa masnih kiselina dugog lanca u mitohondrije, gdje ih se oksidira. AMPK bi prema tome mogla biti povezana s pretilošću i/ili otpornosti na inzulin, a modulacija AMPK bi možda mogla biti povoljna u liječenju ovih bolesti. AMPK inhibitra enzime koji sudjeluju u sintezi glikogena i kolesterola. Ovo je vjerojatno regulacijski enzim koji u odgovor na pad razine adenozin-5'-trifosfata (ATP) smanjuje daljnju potrošnju ATP potičući stanične prilagodbe usmjerene na održavanje razina ATP. Uz to, AMPK je povezana s transkripcijom, regulacijom kreatinin-kinaze, apoptozom i transportom glukoze. Vidjeti B.E. Kemp i suradnici: Trends in Biochemical Sciences, 24 (1), 22-25, (1999.); J. Friedman: Nature, 415(6869), 268-269, (2002.); N.B. Ruderman i suradnici: American Journal of Physiology, 276 (1, Pt. 1), E1-E18, (1999.).

Tirozinska kinaza iz limfoidnih T-stanica (LCK) je citosolina nereceptorska tirozinska kinaza i T-limfocitni član Src porodice. LCK je impliciran u ranoj fazi aktiviranja T-staničnih receptora antigenima i ima kritičnu ulogu u imunosnim odgovorima posredovanim T-stanicama. Prilikom aktiviranja autofosforiliranjem LCK fosforilira �-lance T-staničnih receptora koji mogu zatim privući drugu citoplazmatsku proteinsku tirozinsku kinazu ZAP-70, koja potiče aktiviranje T-stanica. Inhibitore se može upotrijebiti u liječenju reumatoidnog artritisa, bolesti povezanih s imunosnim odgovorom i leukemija na bazi T-stanica i limfoma. Vidjeti C. Garcia-Echeverria: Current Medicinal Chemistry, 8 (13), 1589-1604, (2001.); M.B. Majolini i suradnici: Leukemia & Limphoma, 35(3/4), 245-254, (1999.).

Mitogenima i stresom aktivirana proteinska kinaza 1 (MSK1) aktivira se na stimulaciju puta Ras-mitogenom aktivirane proteinska kinaze (MAPK), a također i puta stresom aktivirane kinaze p38. Oba puta implicirana su u tumorogenezi. Stimulacija prijenosa signala preko Ras-MAPK puta čimbenicima rasta ili esterima forbola dovodi do fosforiliranja histona H3. Pokazalo se da MSK1 posreduje fosforiliranje H3 potaknuto čimbenikom rasta epiderma (EGF) ili s TPA (12-O-tetradekanoilforbol-13-acetat, ester forbola). Postoji dokaz da trajno aktiviranje Ras-MAPK puta i MSK1 koje dovodi do porasta razina fosforiliranog H3 može doprinijeti ekspresiji oštećenog gen opaženoj kod onkogenom transformiranih stanica. Inhibicija MSK1 suprimira indukciju c-fos (protoonkogen) i uPA gena u roditeljskim i onkogenom transformiranim stanicama. I c-fos i uPA sudjeluju u tumorskoj invaziji i metastaziranju. Vidjeti I. Strelkov i suradnici: Cancer Research, 62(1), 75-78, (2002.); S. Zhong i suradnici: Journal of Biological Chemistry, 276(35), 33213-33219, (2001.); M. Nomura i suradnici: Journal of Biological Chemistry, 276(27), 25558-25567, (2001.).

Rho kinaza (ROCK-II) također je poznata i kao ROK�. Inhibicijom ROCK-II moglo bi se možda utjecati na Rho GTPaze, koje djeluju kao molekulske kontrole koje reguliraju mnoge životno važne stanične procese, uključujući dinamiku aktina, tijek staničnog ciklusa, te stanično prianjanje. Biološki učinci Y-27632, specifičnog inhibitora ROCK, in vitro i in vivo opisani su u literaturi i uključuju snižavanje krvnog tlaka kod hipertenzivnih štakora, inhibiciju nastajanja stresnih vlakna i žarišnih prianjanja koje inducira Rho, te inhibiciju tumorskog rasta. Vidjeti S. Narumiya i suradnici: Methods in Enzymology, 325 ("Regulators and Effectors of Small GTPases, Part D"), 273-284, (2000.) (i s tim povezane tamo nabrojane reference); Bishop i suradnici: Biochem. J., 348, 241-255, (2000.).

P70 S6 kinaza (p70S6K) nađena je u dvije izoforme: jedna je citoplazmatska, a druga u jezgri. One su međusobno slične, s izuzetkom N-kraja, i obje su nazvane p70S6K ili S6K1. Također je identificiran još jedan funkcionalni homolog, S6K2. P70S6K je nizvodna meta lipidne kinaze, fosfoinozitid-3-OH-kinaze (PI(3)K). P70S6K je implicirana u kontroli staničnog ciklusa i diferencijaciji neurona. P70S6K također vjerojatno funkcionira u reguliranju stanične pokretljivosti, što može utjecati na tumorske metastaze, imunosni odgovor i popravke u tkivu. Uz PKB/Akt, p70S6K je ključni efektor u prijenosu signala putem onkogenih proteinskih tirozinskih kinaza (PTK). P70S6K je vjerojatno jača kinaza za BAD od PKB/Akt (vidjeti gore) u odgovor na stimulacija inzulinu sličnim čimbenikom rasta 1 (IGF-1). P70S6K prema tome vjerojatno ima važnu antiapoptotsku ulogu. Vidjeti P. Blume-Jensen i suradnici: Nature, 411(6835), 355-365, (2001.); D. Accili: Journal of Clinical Investigation, 108(11), 1575-1576, (2001.); M. Hidalgo i suradnici: Oncogene, 19(56), 6680-6686, (2000.); L. Berven, i suradnici: Immunology and Cell Biology, 78(4), 447-451, (2000.).

cAMP (adenozin-3',5'-ciklički monofosfat)-ovisna proteinska kinaza (PKA) sudjeluje u širokom rasponu fizioloških odgovora nakon međudjelovanja s cAMP. cAMP je drugi glasnik, koji regulira mnoge različite stanične aktivnosti, poput transkripcije gena, staničnog rasta i diferencijacije, vodljivost ionskih kanala, te otpuštanje neurotransmitera. Međudjelovanje cAMP/PKA je glavni regulacijski mehanizam kod sisavaca, a pokazalo se da PKA fosforilira nebrojeno mnogo fizioloških supstrata. PKA ima dvije glavne izoforme: PKAI i PKAII. Pokazalo se da inhibitori PKAI pojačavaju učinke kada ih se upotrebljava u kombinaciji s izvjesnim citotoksičnim terapijama raka. Pokazalo se da antisense-oligonukleotidi koji ciljaju na podjedinicu PKAI RI� pojačavaju antitumorske učinke u kombinaciji s Taxol�-om. Glucagon aktivira PKA, a PKA može utjecati na odgovor na inzulin zajedno s kalmodulinski ovisnom proteinskom kinazom i proteinskom kinazom C. PKA sudjeluje u reguliranju L-tipa srčanih kalcijskih kanala, a modulacija impliciranih regulacijskih putova mogla bi se pokazati korisnom u liječenju bolesti srca. Uz to, disfunkcionalne T-stanice izolirane iz pacijenata s HIV-om oporavile su se dodavanjem antagonista PKAI. Vidjeti B.S. Skalhegg i suradnici: Frontiers in Bioscience, [elektronsko izdanje] 5, D678-D693, (2000.); E.P. Brandon i suradnici: Current Opinion in Neurobiology, 7(3), 397-403, (1997.); R. Nesher i suradnici: Diabetes, 51 (dod. 1): S68-S73, (2002.); J.B. Shabb: Chemical Reviews, 101(8), 2381-2411, (2001.); T.J. Kamp, i suradnici: Circulation Research, 87(12), 1095-1102, (2000.); G. Tortora i suradnici: Clinical Cancer Research, 8, 303-304, (2002.); Tortora, G. i suradnici: Clinical Cancer Research, 6, 2506-2512, (2000.).

Mitogenima aktivirana proteinska kinaza (MAPK) je također poznata kao ERK. Kod tumorogeneze, ras onkogeni prenose izvanstanične signale za rast. MAPK put je važan put prijenosa signala između membranski vezanog ras i jezgre. U pitanju je fosforilacijska kaskada koja uključuje tri ključne kinaze. To su Raf, MEK (MAP-kinaza-kinaza) i MAPK/ERK. Izoforme Raf fosforiliraju i aktiviraju izoforme MEK1 i MEK2. MEK1 i 2 su dvojno specifične kinaze, koje pak fosforiliraju i aktiviraju izoforme MAPK MAPK1/ERK1 i MAPK2/ERK2. U fibroblastima MAPK1/ERK1 i MAPK2/ERK2 su obje snažno aktivirane čimbenicima rasta i esterima forbola koji potiču rast tumora. MAPK1/ERK1 i MAPK2/ERK2 također sudjeluju u reguliranju glukoze, reguliranju neurotransmitera, te reguliranju sekretagoga (u endokrinim tkivima). MAPK put također je povezan s induciranjem mRNA ciklina D1, te je tako povezan s fazom G1 staničnog ciklusa. Vidjeti C.P. Webb i suradnici: Cancer Research, 60(2), 342-349, (2000.); K. Roovers i suradnici: BioEssays, 22(9), 818-826, (2000.); Z. Chen, i suradnici: Chemical Reviews, 101(8), 2449-2476, (2001.); J.C. Lee i suradnici: Immunopharmacology, 47(2-3), 185-201, (2000.); J.S. Sebolt-Leopold: Oncogene, 19, 6594-6599, (2000.); F.Y. Cheng i suradnici: Journal of Biological Chemistry, 276(35), 32552-32558, (2001.); M.H. Cobb i suradnici: Trends in Biochemical Sciences, 25(1), 7-9, (2000.); M.H. Cobb i suradnici: Journal of Biological Chemistry, 270(25), 14843-14846, (1995.); M. Deak i suradnici: EMBO Journal, 17(15), 4426-4441, (1998.); J.D. Davis: Journal of Biological Chemistry, 268(20), 14553-14556, (1993.).

cSrc (također poznat kao p60 c-src) je citosolna, nereceptorska tirozinska kinaza. c-Src sudjeluje u prijenosu mitogenih signala od niza polipeptidnih čimbenika rasta, poput čimbenika rasta epiderma (EGF) i čimbenika rasta iz trombocita (PDGF). c-Src je hipereksprimiran kod raka dojke, raka gušterače, neuroblastoma i drugih. Mutantni c-Src identificiran je kod ljudskog raka debelog crijeva. c-Src fosforilira niz proteina koji sudjeluju u reguliranju dijaloga između izvanstaničnog matriksa i citoplazmatskog aktinskog citoskeleta. Moduliranje aktivnosti cSrc moglo bi biti od utjecaja kod bolesti povezanih sa staničnom proliferacijom, diferencijacijom i smrti. Vidjeti J.D. Bjorge i suradnici: Oncogene, 19(49), 5620-5635, (2000.); M.S. Halpern i suradnici: Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 93(2), 824-7, (1996.); A.P. Belsches i suradnici: Frontiers in Bioscience, [elektronsko izdanje] 2, D501-D518, (1997.); X. Zhan i suradnici: Chemical Reviews, 101, 2477-2496, (2001.); M.D. Haskell i suradnici: Chemical Reviews, 101, 2425-2440, (2001.); proteinskoj kinazi C srodna kinaza 2 (PRK2) regulirana je G-proteinom Rho. PRK2 je nađena u regijama jakim aktinskim metabolizmom. Aktivnost endogene PRK2 kinaze raste s diferencijacijom keratinocita i povezana je sa staničnim prianjanjem keratinocita i aktiviranjem Fyn kinaze. Vidjeti C. Gross i suradnici: FEBS Letters, 496 (2,3), 101-104, (2001.); E. Calautti i suradnici: Journal of Cell Biology, 156(1), 137-148, (2002.).

3'-fosfoinozitidno ovisna kinaza 1 (PDK1) fosforilira i aktivira članove porodice AGC (cAMP-ovisna, cGMP-ovisna i proteinska kinaza C) kinaza koje se aktiviraju nizvodno fosfoinozitid-3-kinaze (PI3K). PI3K se aktivira preko stimulacije inzulinom. PDK1 aktivira niz proteinskih kinaza i prema tome može biti povezan s regulacijom niza događaja specifičnih za inzulin. fosforiliranje i aktiviranje PKC� s PDK1 nužno je za inzulinski ovisnu translokaciju GLUT4. Inzulinski ovisna translokacija GLUT4 fiziološki je povezana s aktinskim citoskeletom. Poremećaji aktinskih filamenata povezani su s gubitkom učinka inzulina na transport glukoze i smanjenom translokacijom GLUT4. Vidjeti K.L. Wick i suradnici: Current Drug Targets: Immune, Endocrine and Metabolic Disorders, 1(3), 209-221, (2001.); R.T. Peterson i suradnici: Current Biology, 9(14), R521-R524, (1999.); A. Toker i suradnici: Cell, 103(2), 185-188, (2000.); N.R. Leslie: Chem. Rev., 101, 2365-2380, (2001.).

Fyn kinaza (FYN) član je Src porodice tirozinskih kinaza. Fyn je implicirana u pozitivnoj kontroli staničnog prianjanja keratinocita. Adhezija ima ključnu funkciju u uspostavljanju i održavanju organiziranih tkiva. Pomoću Fyn nokautiranih i transgenih miševa ustanovljeno je da Fyn sudjeluje u prijenosu signala preko T-staničnih receptora (TCR). Hiperekspresija fyn(T) transgena daje T stanice s povećanom osjetljivošću na TCR prijenos signala. S druge strane, ekspresija inaktivnog oblika kinaze je inhibicijska. Fyn bi mogao biti prava meta u liječenju autoimunih bolesti. Fyn –/– miševi su preosjetljivi na alkohol, što ukazuje da bi Fyn mogao biti meta liječenja kod alkoholizma. Promjena razine Fyn također bi mogla pomoći u liječenju poremećaja kože. Fyn je impliciran u regulaciji programirane stanične smrti, a Fyn –/– miševi pokazuju smanjenu apoptozu. Vidjeti također PRK2. Vidjeti E. Calautti, i suradnici: Journal of Cell Biology, 156(1), 137-148, (2002.); M.D. Resh: Journal of Biochemistry & Cell Biology, 30(11), 1159-1162, (1998.).

Receptor čimbenika rasta vaskularnog endotela 2 (VEGFR-2) također je poznat kao FLK-1 i kao KDR (receptor kinazne insercijske domene). Druge VEGF receptorske tirozinske kinaze uključuju VEGFR-1 (Flt-1) i VEGFR-3 (Flt-4). Angiogeneza ili razvoj nove vaskulature središnja je točka procesa kojim čvrsti tumori rastu. Stupanj vaskulariziranosti povezan je s povećanom mogućnošću metastaziranja. VEGFR-2, koji se eksprimira samo u stanicama endotela, veže potentni angiogeni čimbenik rasta VEGF i posreduje u daljnjem prijenosu signala. Inhibicija aktivnosti VEGF-R2 dovodi do smanjene angiogeneze i tumorskog rasta u modelima in vivo, a inhibitore VEGFR-1 se trenutno u klinički ispituju na liječenje raka. Vidjeti Strawn i suradnici: Cancer Research, 56, 3540-3545, (1996.); Millauer i suradnici: Cancer Research, 56, 1615-1620, (1996.); K.M. Sakamoto; Drugs, 4(9), 1061-1067, (2001.); L.M. Ellis i suradnici: Oncologist, 5 (dod. 1), 11-15, (2000.); D.B. Mendel i suradnici: Anti-Cancer Drug Design, 15, 29-41, (2000.); C.C. Kumar, i suradnici: Expert Opin. Emerging Drugs, 6(2), 303-315, (2001.); P. Vajkoczy i suradnici: Neoplasia, 1(1), 31-41, (1999.).

Receptor fibroblastnog čimbenika rasta (FGFR) veže angiogene čimbenike rasta aFGF i bFGF i posreduje u daljnjem unutarstaničnom prijenosu signala. Čimbenici rasta poput bFGF vjerojatno imaju kritičnu ulogu u poticanju angiogeneze kod čvrstih tumora koji su dosegli određenu veličinu. FGFR se eksprimira u nizu različitih staničnih tipova u tijelu, te možda imaju (a možda i ne) važne uloge u normalnim fiziološkim procesima kod odraslih ljudi. Objavljeno je da sistemna primjena niskomolekulskih inhibitora FGFR blokira angiogenezu kod miševa koju potiče bFGF. Vidjeti Yoshiji i suradnici: Cancer Research, 57, 3924-3928, (1997.); Mohammad i suradnici: EMBO Journal, 17, 5996-5904, (1998.).

Fosforilaza-kinaza (PHK) aktivira glikogen-fosforilazu. Osnovna posljedica ovog aktiviranja je otpuštanje glukoza-1-fosfata iz glikogena. Prevođenje u glikogen je glavni način kojim se glukoza skladišti kod sisavaca. Unutarstanične zalihe glikogena upotrebljava se za održavanje homeostaze glukoze u krvi tijekom gladovanja i izvor su energije za mišićnu kontrakciju. In vivo, PHK je fosforilirana s cAMP-ovisnom proteinskom kinazom (PKA), što povećava specifičnu aktivnost PHK. Oba tipa dijabetičara 1 i 2 pokazuju smanjene razine glikogena u jetri i mišićnim stanicama. Razine glikogena strogo reguliraju hormoni i metabolički prijenos signala. Inhibitori kinaza koji bi mogli povećati unutarstanične razine glikogena mogli bi se pokazati kao povoljni u liječenju dijabetesa. Vidjeti R.J. Brushia i suradnici: Frontiers in Bioscience, [elektronsko izdanje] 4, D618-D641, (1999.); C.B. Newgard, i suradnici: Diabetes, 49, 1967-1977, (2000.); C. Venien-Bryan i suradnici: Structure, 10, 33-41, (2002.); D. Graves i suradnici: Pharmacol. Ther., 82, (2-3) 143-155, (1999.); M.W. Kilimann: "Protein Dysfunction and Human Genetic Disease", pogl. 4, 57-75, (1997.).

Pokazalo se da Wee1 kinaza (Wee1) zajedno s Mik1 kinazom fosforilira Cdc2. Pokazalo se da fosforiliranje Cdc2 sprječava ulazak u mitozu. Wee1 možda ima važnu ulogu u normalnom ciklusu staničnog rasta i može biti impliciran u nadzornoj kontrolnoj točki staničnog ciklusa. N. Rhind, i suradnici: Molecular and Cellular Biology, 21(5), 1499-1508, (2001.).

Proteinska kinaza B (PKB) također je poznata kao Akt. Postoje tri vrlo slične izoforme, poznate kao PKB �, � i � (ili Akt 1, 2 i 3). UV-zračenje u rasponu od 290-320 nM povezano je sa štetnim učincima sunčevog svjetla. Ovo zračenje uzrokuje aktiviranje PKB/Akt i može biti implicirano u tumorogenezi. Hiperekspresija PKB/Akt dokazana je kod raka jajnika, prostate, dojke i gušterače. PKB/Akt također sudjeluje u tijeku staničnog ciklusa. PKB/Akt potiče preživljavanje stanica na niz različitih načina. Ona fosforilira proapoptotski protein, BAD, tako da se ne može vezati i inaktivira antiapoptotski protein Bcl-xl. PKB/Akt također služi za inhibiranje apoptoze inhibiranjem kaspaze 9 i transkripcijskog čimbenika forkhead, te aktiviranjem IkB kinaze. Vidjeti A.J. Barber: Journal of Biological Chemistry, 276(35), 32814-32821, (2001.); R.H. Medema i suradnici: Nature, 404, 782-787, (2000.); R.C. Muise-Helmerniks i suradnici: Journal of Biological Chemistry, 273(45), 29864-29872, (1998.); M. Nomura i suradnici: Journal of Biological Chemistry, 276(27), 2558-25567, (2001.); K.M. Nicholson i suradnici: Cellular Signaling, 14(5), 381-395, (2002.); D.P. Brazil i suradnici: Trends in Biochemical Sciences, 26(11), 657-664, (2001.); N.R. Leslie: Chem Rev., 101, 2365-2380, (2001.).

Klasične izoforme proteinske kinaze C (PKC) označuje se kao �, �1, �2 i � i sve su Ca2+-ovisne. Izoforme PKC sudjeluju u putovima prijenosa signala povezanim s nizom fizioloških odgovora, uključujući membranski transport, staničnu diferencijaciju i proliferaciju, organiziranje citoskeletnih proteina i ekspresija gena. Esteri forbola koji potiču tumore aktiviraju klasične izoforme PKC, a antisense-oligonukleotidi mogu blokirati ovo aktiviranje. Izoforme PKC često su hipereksprimirane u različitim oblicima raka. Pokazalo se da inhibitori PKC poništavaju otpornost na više lijekova posredovanu P-glikoproteinom, te mogu povećati unutarstanične koncentracije drugih antikanceroznih sredstava. U miocitima su izoforme PKC implicirane za izvjesne srčane patologije. PKC-� se snažno eksprimira u mozgu i kralježničnoj moždini i primarno je lokalizirana u dendritima i somama neurona. PKC-�2 sudjeluje u staničnoj proliferaciji, a njena hiperekspresija povećava osjetljivost na rak. Inhibitori PKC� su moguća nova terapija dijabetične retinopatije, a klinička ispitivanja su u tijeku. Vidjeti L. Magnelli i suradnici: Journal of Cancer Research and Clinical Oncology, 123(7), 365-369, (1997.); A. Clerk i suradnici: Circulation Research, 89(10), 847-849, (2001.); C. Carter: Current Drug Targets, 1(2), 163-183, (2000.); S. Greenberg i suradnici: Alcohol, 16(2), 167-175, (1998.); T. Rosenzweig, i suradnici: Diabetes, 51(6), 1921-1930, (2002.); A. Deucher i suradnici: Journal of Biological Chemistry, 277(19), 17032-17040, (2002.); R.N. Frank: American Journal of Ophthalmology, 133(5), 693-698, (2002.); D. Parekh i suradnici: EMBO Journal, 19(4), 496-503, (2000.); A.C. Newton: Chem. Rev., 101, 2353-2364, (2001.).

Termin "liječiti" ili "liječen", kao što ga se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnosi se na povlačenje, ublažavanje, inhibiranje napredovanja ili sprječavanje poremećaja ili stanja na koje se takav termin odnosi, ili jedan ili više simptoma takvog poremećaja ili stanja. Termin "liječenje", kao što ga se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnosi se na čin liječenja, kao što je "liječiti" definirano neposredno gore.

"Poremećaji vezivnog tkiva", kao što ga ih upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput degenerativno propadanje hrskavice nakon traumatske ozljede zgloba, osteoartritisa, osteoporoze, Pagetovu bolest, labavljenje umjetnih zglobnih usadaka, bolesti periodonta i gingivitisa.

"Razaranje zglobne hrskavice", kao što ga se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnosi se na poremećaje vezivnog tkiva koji dovode do uništenja zglobne hrskavice, po mogućnosti ozljedu zgloba, reaktivni artritis, akutni pirofosfatni artritis (pseudogiht), psorijatični artritis ili juvenilni reumatoidni artritis, poželjnije osteoartritis.

"Upalni poremećaji" kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput reumatoidnog artritisa, ankilozantnog spondilitisa, psorijatičnog artritisa, psorijaze, hondrokalcinoze, gihta, upalne bolesti crijeva, ulceroznog kolitisa, Crohnove bolesti, fibromialgije i kaheksije.

"Imunološki/alergijski poremećaji", kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput toksičnosti organskog presatka, alergijskih reakcija, alergijske kontaktne preosjetljivosti, autoimunih poremećaja, poput poremećaja povezanih s granulomatoznom upalom/preoblikovanjem tkiva (poput astme), imunosupresije i sarkoida.

"Infektivne bolesti", uključujući one koju uzrokuju virusi, bakterije, gljivice ili mikobakterijske infekcije, kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput septičnog artritisa, AIDS-a, groznice; prionske bolesti, miasteniju gravis, malariju, sepsu, hemodinamski šok i septični šok.

"Bolesti dišnog sustava", kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput kronične opstruktivne plućne bolesti (uključujući emfizem), akutnog sindroma dišnog distresa, astme, hiperoksične ozljede alveola i idiopatske plućne fibroze i drugih fibrotičnih bolesti pluća.

"Kardiovaskularne bolesti", kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput ateroskleroze, uključujući rupturu aterosklerotskog plaka; aneurizme aorte, uključujući aneurizmu abdominalne aorte i aneurizmu moždane aorte; kongestivne srčane insuficijencije; infarkta miokarda i velikog mozga; inzulta; cerebralne ishemije; koagulacije i odgovora akutne faze; proširenost lijeve klijetke; postishemijske reperfuzijske ozljede; angiofibroma; hemangioma; te restenoze.

"Bolesti oka", kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput aberantne angiogeneze, okularne angiogeneze, upale oka, keratokonusa, Sjögrenovog sindroma, kratkovidnosti, tumora oka, odbacivanja presađene rožnice, ozljede rožnice, neovaskularnog glaukoma, ulceracije rožnice, ožiljaka na rožnici, makularne degeneracije (uključujući "makularnu degeneraciju uzrokovanu starenjem (ARMD)", uključujući i vlažni i suhi oblik), proliferativne vitreoretinopatije i retinopatije u ranijoj dobi.

"Metabolički bolesti", kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput dijabetesa (uključujući inzulinski neovisni dijabetes melitus, dijabetičnu retinopatiju, otpornost na inzulin, dijabetičnu ulceraciju).

Poremećaji "središnjeg živčanog sustava" (CNS), kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput ozljede glave, ozljede kralježnične moždine, upalne bolesti središnjeg živčanog sustava, neurodegenerativne poremećaje (akutne i kronične), Alzheimerovu bolest, demijelinacijske bolesti živčanog sustava, Huntingtonovu bolest, Parkinsonovu bolest, perifernu neuropatiju, bol, cerebralnu amiloidnu angiopatiju, poboljšanje nootropnih ili kognitivnih funkcija, amiotrofnu lateralnu sklerozu, multiplu sklerozu, migrenu, depresiju i anoreksiju.

"Bolesti jetre i bubrega", kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput nefrotskih sindroma, poput glomerulonefritisa i glomerulske bolesti bubrega, proteinuriju, cirozu jetre i interstcijskog nefritisa.

"Poremećaji reproduktivnog zdravlja", kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput endometrioze, kontracepcije (muške ili ženske), dismenoreje, disfunkcionalnog krvarenja iz maternice, prijevremene rupture fetalnih membrana i abortifaktant.

"Želučani poremećaji", kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput anastomoze debelog crijeva i želučani vrijed.

"Poremećaji kože", kao što ih se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnose se na poremećaje poput starenja kože, dekubitusa, psorijaze, ekcema, dermatitisa, radijacijskog oštećenja, ulceracije tkiva, dekubitusne ulceracije, bulozne epidermolize, abnormalnog zacjeljivanja rana (topikalne i oralne formulacije), opeklina i skleritisa.

"Rak", kao što ga se upotrebljava u ovoj specifikaciji, odnosi se na poremećaje poput čvrstih kanceroznih tumora, uključujući rak debelog crijeva, rak dojke, rak pluća i rak prostate, tumorske invazije, tumorskog rasta, tumorskih metastaza, raka usne šupljine i ždrijela (usne, jezik, usta, ždrijelo), jednjaka, želuca, tankog crijeva, debelog crijeva, rektuma, jetre i žučnih vodova, gušterače, grkljana, pluća, kosti, vezivnog tkiva, kože, vrata maternice, tijela endometrija, jajnika, testisa, mokraćnog mjehura, bubrega i drugih urinarnih tkiva, oka, mozga i središnjeg živčanog sustava, štitnjače i drugih endokrinih žlijezda, Hodgkinove bolesti, ne-Hodgkinskih limfoma, multiplog mijeloma i hematopoetskih malignoma, uključujući leukemije i limfome, uključujući limfocitni, granulocitni i monocitni.

Sljedeće reakcijske Sheme prikazuju dobivanje spojeva prema ovom izumu. Ukoliko se drugačije ne naznači, svaki od A, skupine -Y-Z-, X, R1, R2, R3 i R4 u reakcijskim Shemama i raspravi koji slijede su definirani kao gore.

Shema 1

[image]

Shema 2

[image]

Shema 3

[image]

Shema 4

[image]

Shema 5

[image]

Shema 6

[image]

Shema 1 odnosi se na dobivanje spojeva formule I. Prema Shemi 1 spoj formule I, gdje skupina -Y-Z- ima formulu -N=CH-, a R2 nije vodik, može se dobiti reakcijom spoja formule II, gdje R2 nije vodik, te gdje Lv je izlazna skupina, s hidrazinom u otapalu. Pogodne izlazne skupine Lv uključuju metoksi, etoksi ili benziloksi, po mogućnosti metoksi. Pogodna otapala uključuju alkohole (poput etanola), po mogućnosti metanol. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 25 °C do približno 90°C, po mogućnosti približno 65°C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 30 minuta.

Spojeve formule II, gdje R2 nije vodik, te gdje je Lv kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule III, gdje R2 nije vodik, te gdje je Lv kao što je opisano gore, s formilacijskim reagensom Vilsmeierovog tipa, u otapalu. Pogodni formilacijski reagensi Vilsmeierovog tipa uključuju POCl3 i DMF ili (CF3SO2)2O i DMF; po mogućnosti POCl3 i DMF. Pogodna otapala uključuju kloroform, dioksan, tetrahidrofuran, dimetilformamid ili metilen-klorid; po mogućnosti metilen-klorid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 0 °C do približno 25 °C, po mogućnosti približno 0 °C, prilikom dodavanja reagensa, te se reakcijsku smjesu ostavi da se zagrije do 23 °C, u trajanju od približno 30 minuta. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 30 minuta.

Spojeve formule III, gdje R2 nije vodik, te gdje je Lv kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule IV, gdje je Lv kao što je opisano gore, sa spojem formule:

R2-Lv1,

gdje Lv1 je izlazna skupina, poput halogena, po mogućnosti brom ili klor, u prisustvu pogodne baze, u polarnom otapalu. Pogodne baze uključuju alkoksidne baze (poput natrijevog metoksida, natrijevog etoksida ili kalijevog tert-butoksida); hidridne baze (poput natrijevog hidrida); ili karbonatne baze (poput kalijevog karbonata ili cezijevog karbonata); po mogućnosti kalijev karbonat. Pogodna polarna otapala uključuju tetrahidrofuran, dimetilformamid, dimetil-sulfoksid ili alkohole (poput etanola), po mogućnosti dimetilformamid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 0 °C do približno 100 °C, po mogućnosti približno 80 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 30 minuta do približno 72 sata, po mogućnosti približno 24 sata.

Spoj formule I, gdje skupina -Y-Z- je -O-CH2-, a gdje R2 nije vodik, može se dobiti reakcijom spoja formule V, gdje R2 nije vodik, gdje Pg je zaštitna skupina, a Lv je kao što je opisano gore, sa sredstvom za uklanjanje Pg kao zaštite. Pogodni Pg uključuje ftaloil, tert-butoksikarbonil, benziloksikarbonil ili etoksikarbonil; po mogućnosti ftaloil. Pogodna sredstva za uklanjanje Pg kao zaštite uključuju hidrazin, trifluoroctenu kiselinu, klorovodičnu kiselinu, klorovodik, bromovodik u octenoj kiselini, ili plinoviti vodik i Pd katalizator; po mogućnosti hidrazin. Kisele reakcijske smjese može se neutralizirati nakon uklanjanja zaštite pogodnom bazom, uključujući tercijarne amine (poput trietilamina ili diizopropiletilamina) ili karbonatne baze (poput kalijevog karbonata); po mogućnosti trietilamin. Pogodna otapala uključuju dimetilformamid, metilen-klorid, kloroform, ili alkohol, (poput metanola), po mogućnosti metanol. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 20 °C do približno 130 °C, po mogućnosti približno 65 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 30 minuta do približno 48 sati, po mogućnosti približno 2 sata.

Spoj formule V, gdje R2 nije vodik, gdje Pg je zaštitna skupina, a Lv je kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule VI, gdje R2 nije vodik, Lv2 je izlazna skupina, a Lv je kao što je opisano gore, sa spojem formule

Pg-N-OH,

u prisustvu baze, u otapalu. Pogodne izlazne skupine Lv2 uključuju halogen, toluensulfonil, metansulfonil, trifluormetansulfonil, ili reakcijske adukte Mitsunobuovog tipa. Pogodni spojevi formule Pg-N-OH uključuju N-hidroksiftalimid, tert-butil-N-hidroksilkarbamat, N-hidroksiuretan ili benzil-N-hidroksikarbamat. Pogodne baze uključuju natrijev hidrid, 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en, piridin, tercijarne amine (poput diizopropiletilamina ili trietilamina) ili karbonatne baze (poput natrijevog karbonata); po mogućnosti natrijev karbonat. Pogodna otapala uključuju dimetilformamid, dimetil-sulfoksid, tetrahidrofuran, metilen-klorid, kloroform ili alkohol (poput metanola); po mogućnosti dimetil-sulfoksid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno –25 °C do približno 80 °C, po mogućnosti približno 23 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 48 sati, po mogućnosti približno 20 sati.

Spoj formule VI, gdje R2 nije vodik, a Lv2 i Lv su kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule VII, gdje R2 nije vodik, a Lv je kao što je opisano gore, sa sredstvom za dobivanje Lv2, u otapalu. Pogodna sredstva za dobivanje Lv2 uključuju (C6H5)3P i CCl4; (C6H5)3P i PBr3; para-CH3C6H4SO2Cl; CH3SO2Cl; (CF3SO2)2O; ili reagense Mitsunobuovog tipa (poput dietil-azodikarboksilata i (C6H5)3P); po mogućnosti (C6Hs)3P i CCl4. Pogodna otapala uključuju metilen-klorid, kloroform, tetrahidrofuran, ugljični tetraklorid, benzen ili toluen; po mogućnosti metilen-klorid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno –25 °C do približno 80 °C, po mogućnosti približno 23 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 20 sati.

Spoj formule VII, gdje R2 nije vodik, a Lv je kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule II, gdje R2 nije vodik, a Lv je kao što je opisano gore, s reducensom, u otapalu. Pogodni reducensi uključuju natrijev borohidrid, litijev borohidrid, cinkov borohidrid, diboran, boranske komplekse, triacetoksiborohidrid, natrijev cijanoborohidrid ili litijev cijanoborohidrid; po mogućnosti natrijev borohidrid. Pogodna otapala uključuju alkohol (poput metanola), tetrahidrofuran, smjesu metanola i bezvodnog HCl, ili smjesu metanola i octene kiseline; po mogućnosti metanol. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 0 °C do približno 50 °C, po mogućnosti približno 23°C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 15 minuta.

Shema 2 odnosi se na dobivanje spojeva formule Ia, što je spoj formule I gdje R2 je vodik. Prema Shemi 2 spoj formule Ia, gdje skupina -Y-Z- ima formulu -N=CH-, može se dobiti reakcijom spoja formule VIII, gdje Lv je izlazna skupina, kao što je opisano gore, s hidrazinom u otapalu. Reakcijski uvjeti su kao što je opisano gore, u opisu za Shemu 1, za dobivanje spoja formule I iz spoja formule II.

Spojeve formule VIII, gdje je Lv kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule IV, gdje je Lv kao što je opisano gore, s Vilsmeierovim reagensom, u otapalu. Reakcijski uvjeti su kao što je opisano gore, u opisu za Shemu 1, za dobivanje spojeva formule II iz spoja formule III.

Spoj formule Ia, gdje skupina -Y-Z- je -O-CH2-, može se dobiti reakcijom spoja formule XIV, gdje Pg2 je zaštitna skupina, sa sredstvom za uklanjanje Pg2 kao zaštite, u otapalu. Pogodne zaštitne skupine Pg2 uključuju tert-butoksikarbonil, benziloksikarbonil ili 2-(trimetilsilil)etoksimetil; po mogućnosti tert-butoksikarbonil. Pogodna sredstva za uklanjanje Pg2 kao zaštite uključuju trifluoroctenu kiselinu, klorovodičnu kiselinu, klorovodik, bromovodik u octenoj kiselini, plinoviti vodik i Pd katalizator ili tetrabutilamonijev fluorid; po mogućnosti trifluoroctenu kiselinu. Pogodna otapala uključuju metilen-klorid, kloroform, dioksan, dimetilformamid ili alkohol (poput metanola); po mogućnosti metilen-klorid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 20 °C do približno 80 °C, po mogućnosti približno 23 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 15 minuta do približno 48 sati, po mogućnosti približno 2 sata.

Spoj formule XIV, gdje je Pg2 kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule XIII, gdje Pg je zaštitna skupina kao što je opisano za spoj formule V u Shemi 1, a Pg2 i Lv su kao što je opisano gore, sa sredstvom za uklanjanje Pg kao zaštite. Reakcijski uvjeti su kao što je opisano gore, u opisu za Shemu 1, za dobivanje spoja formule I iz spoja formule V.

Spoj formule XIII, gdje su Pg2, Lv i Lv2 kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule XII, gdje su Pg2, Lv i Lv2 kao što je opisano gore, sa spojem formule

Pg-N-OH,

gdje je Pg kao što je opisano gore, u prisustvu baze, u otapalu. Reakcijski uvjeti su kao što je opisano gore, u opisu za Shemu 1, za dobivanje spoja formule V iz spoja formule VI.

Spoj formule XII, gdje su Pg2, Lv2 i Lv kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule XI, gdje su Pg2 i Lv kao što je opisano gore, sa sredstvom za dobivanje Lv2, u otapalu. Reakcijski uvjeti su kao što je opisano gore, u opisu za Shemu 1, za dobivanje spoja formule VI iz spoja formule VII.

Spoj formule XI, gdje su Pg2 i Lv kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule IX, gdje su Pg2 i Lv kao što je opisano gore, s reducensom, u otapalu. Reakcijski uvjeti su kao što je opisano gore, u opisu za Shemu 1, za dobivanje spoja formule VII iz spoja formule II.

Spoj formule IX, gdje su Pg2 i Lv kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule VIII, gdje je Lv kao što je opisano gore, sa zaštitnim sredstvom za Pg2 u prisustvu pogodne baze, u otapalu. Pogodna zaštitna sredstva za Pg2 uključuju di-tert-butil-dikarbonat, benzil-klorformijat ili 2-(trimetilsilil)etoksimetil-klorid; po mogućnosti di-tert-butil-dikarbonat. Pogodne baze uključuju hidridne baze (poput natrijevog hidrida, litijevog hidrida ili kalijevog hidrida); po mogućnosti natrijev hidrid. Pogodna otapala uključuju tetrahidrofuran ili dimetilformamid; po mogućnosti tetrahidrofuran. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 0 °C do približno 60 °C, po mogućnosti približno 23 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 15 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 1 sat.

Shema 3 odnosi se na dobivanje spoja formule Ib, što je spoj formule I gdje A je =CR1-. Prema Shemi 3 spoj formule Ib može se dobiti reakcijom spoja formule Ic, gdje se halogen bira između broma ili joda, s kondenzacijskim reagensom formule:

R1-M,

gdje M je H ili metal, u prisustvu paladijskih i bakrenih katalizatora, u otapalu. Pogodni metali uključuju bor i kositar, po mogućnosti bor. Pogodni kondenzacijski reagensi uključuju Stilleov kondenzacijski reagens (vidjeti S. Chamoin, S. Houldsworth, V. Snieckus: Tetrahedron Lett., 39, 4175-4178, (1998.), uključen u ovu specifikaciju kao referenca), Suzukijev kondenzacijski reagens (vidjeti A.F. Littke, D. Chaoyang, G.C. Fu: J. Am. Chem. Soc., 122, 4020-4028, (2000.), uključen u ovu specifikaciju kao referenca) ili Sonogashirin kondenzacijski reagens (vidjeti K. Sonogashira, Y. Tohda, N. Hagihara: Tetrahedron Lett., 16, 44467-4470, (1975.), uključen u ovu specifikaciju kao referenca); po mogućnosti Suzukijev kondenzacijski reagens ili Stilleov kondenzacijski reagens. Pogodni paladijski i bakreni katalizatori uključuju Pd(C6H5)3P)4, Pd(dba)2, Pd(P(C6H5)3)Cl2 i CuI. Pogodna otapala uključuju dimetilformamid ili tetrahidrofuran; po mogućnosti dimetilformamid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 22 °C do približno 110 °C, po mogućnosti približno 90 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 48 sati, po mogućnosti približno 2 sata.

Neki spojevi formule Ib, poput onih gdje R1 je supstituirani alkin (primjerice metilaminopropinil) mogu zahtijevati dodatne korake u kojima ne nužna upotreba zaštitne skupine (primjerice tert-butoksikarbonila). Ove zaštitne skupine i postupci njihovog uklanjanja dobro su poznate u struci i može ih se naći u Greene i Wuts: "Protecting Groups in Organski Synthesis", (John Wiley & Sons, 2. izdanje). Nadalje se spojeve Ib, poput onih gdje R1, R2 ili R3 je supstituirani alkil, alkinil, aromat ili vinil podvrgava dodatnim standardnim kemijskim pretvorbama (primjerice katalitičko hidrogeniranje, oksidativno cijepanje s OsO4/NMMO/NalO4, mesiliranje/izmjena, redukcije i reduktivno aminiranje). Ovi postupci također su dobro poznati u struci i može ih se naći u R.C. Larock: "Comprehensive Organski Transformations", (Wiley-VCH, 2. izdanje).

Spoj formule Ib, gdje A je =CR1-, a R1 je -(C=O)-O-(C1-C6)alkil, može se dobiti reakcijom spoja formule Ic, gdje se halogen bira između broma ili joda, s ugljičnim monoksidom, u prisustvu paladijskog katalizatora, baze i spoja formule H-O-(C1-C6)alkil (ovisno o -(C1-C6)alkilnom dijelu u željenom R1), u otapalu. Pogodni paladijski katalizatori uključuju Pd(dppf)Cl2. Pogodne baze uključuju tercijarne aminske baze, poput trietilamina. Pogodni spojevi formule H-O-(C1-C6)alkil uključuju metanol, etanol ili propanol. Pogodna otapala uključuju dimetilformamid ili tetrahidrofuran; po mogućnosti dimetilformamid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 22 °C do približno 110 °C, po mogućnosti približno 85 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 30 minuta do približno 48 sati, po mogućnosti približno 16 sati.

Spoj formule Ib, gdje A je =CR1-, a R1 je -(C=O)-NH-(C1-C6)alkil ili -(C=O)-NH-(C1-C6)alkil-OH ili -(C=O)-NH-(C1-C6)alkil-N(CH3)2 ili -(C=O)-1-(4-N-metilpiperazin), može se dobiti reakcijom spoja formule Ic, gdje se halogen bira između broma ili joda, s ugljičnim monoksidom, u prisustvu paladijskog katalizatora, baze i spoja formule H2N-(C1-C6)alkil ili H2N-(C1-C6)alkil-OH ili H2N-(C1-C6)alkil-N(CH3)2 ili N-metilpiperazina (ovisno o -(C1-C6)alkilnom dijelu u željenom R1), u otapalu. Pogodni paladijski katalizatori uključuju Pd(dppf)Cl2. Pogodne baze uključuju tercijarne aminske baze, poput trietilamina. Pogodni spojevi formula H2N-(C1-C6)alkil ili H2N-(C1-C6)alkil-OH ili H2N-(C1-C6)alkil-N(CH3)2 ili N-metilpiperazin uključuju 2-aminoetanol, N,N-dimetiletilendiamin, metilamin i N-metilpiperazin Pogodna otapala uključuju dimetilformamid ili toluen; po mogućnosti dimetilformamid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 22 °C do približno 110 °C, po mogućnosti približno 85 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 30 minuta do približno 48 sati, po mogućnosti približno 16 sati.

Spoj formule Ic, gdje halogen je brom ili jod, može se dobiti reakcijom spoja formule Id s pogodnim halogenacijskim sredstvom, u otapalu. Pogodna halogenacijska sredstva uključuju N-bromsukcinimid ili N-jodsukcinimid; po mogućnosti N-bromsukcinimid. Pogodna otapala uključuju tetrahidrofuran ili dimetilformamid, po mogućnosti dimetilformamid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 0 °C do približno 75 °C, po mogućnosti približno 22 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 1 sat.

Spoj formule Ic, gdje halogen je klor, može se dobiti reakcijom spoja formule Id s pogodnim kloracijskim sredstvom, u otapalu. Pogodna kloracijska sredstva uključuju N-klorsukcinimid. Pogodna otapala uključuju tetrahidrofuran ili dimetilformamid; po mogućnosti dimetilformamid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 0 °C do približno 75 °C, po mogućnosti približno 45 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 1 sat.

Shema 4 odnosi se na dobivanje spoja formule IVa, što je spoj formule IV u Shemi 1, gdje A je =CH-. Prema Shemi 4 spoj formule IVa, gdje je Lv kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule XV, gdje je Lv kao što je opisano gore, a svaki od Lv3 je izlazna skupina, s pogodnom kiselinom, u polarnom protonskom otapalu (vidjeti J.W. Coe, M.G. Vetelino, M.J. Bradlee: Tetrahedron Lett., 37, 6045-6047, (1996.), uključen u ovu specifikaciju kao referenca). Pogodne izlazne skupine Lv3 uključuju metoksi ili etoksi, po mogućnosti metoksi. Pogodne kiseline uključuju HCl, H2SO4, para-toluensulfonsku kiselinu, kamforsulfonska kiselina ili Lewisove kiseline; po mogućnosti HCl. Pogodna polarna protonska otapala uključuju alkohole (poput metanola ili etanola), po mogućnosti metanol. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 0 °C do približno 100 °C, po mogućnosti približno 65 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 1 sat.

Spoj formule XV, gdje su Lv i Lv3 kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule XVI, gdje Lv i Lv3 su kao što je opisano gore, s reducensom u polarnom otapalu. Pogodni reducensi uključuju katalitičke transportne reagense, poput hidrazin hidrata, amonijevog formijata, amonijevog klorida, cikloheksena, ili plinoviti vodik u prisustvu katalizatora [poput Pd na ugljiku (vidjeti J.W. Coe, M.G. Vetelino, M.J. Bradlee: Tetrahedron Lett., 37, 6045-6047, (1996.), uključen u ovu specifikaciju kao referenca), Ru, Rh, Raneyevog nikla ili Pt]; HCl ili octenu kiselinu u prisustvu In, Fe, Sn ili Zn; HCl/SnCl2; SnCl2·2H2O; Bu3SnH/AIBN; ili Fe3(CO)12; po mogućnosti SnCl2·2H2O, ili plinoviti vodik u prisustvu Pd na ugljiku ili Raneyev nikal. Pogodna polarna otapala uključuju alkohole (poput metanola ili etanola), po mogućnosti metanol. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 0 °C do približno 100 °C, po mogućnosti približno 23 °C. Kada se upotrebljava plinoviti vodik reakcijski tlak može biti 101,3-405,5 kPa (1-4 atm), po mogućnosti 101,3 (1 atm). Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 2 sata do približno 48 sati, po mogućnosti približno 24 sata.

Spoj formule XVI, gdje su Lv i Lv3 kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule XVII, gdje je Lv kao što je opisano gore, s pogodnom kiselinom, u bezvodnom polarnom protonskom otapalu formule Lv3-H. Pogodne kiseline uključuju HCl, H2SO4 ili para-toluensulfonsku kiselinu, po mogućnosti HCl. Alternativno se HCl može dobiti na licu mjesta, uz upotrebu sredstva za dobivanje HCl, poput TMS-Cl ili acetil-klorida, po mogućnosti TMS-Cl, u bezvodnom polarnom protonskom otapalu poput metanola. Pogodna bezvodna polarna protonska otapala formule Lv3-H uključuju bezvodne alkohole (poput metanola ili etanola), po mogućnosti bezvodni metanol. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 23 °C do približno 78 °C, po mogućnosti približno 65 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 30 minuta do približno 48 sati, po mogućnosti približno 24 sata.

Spoj formule XVII, gdje je Lv kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule XVIII, gdje je Lv kao što je opisano gore, sa spojem formule

[image] ,

gdje je svaki od Lv3 kao što je opisano gore, u polarnom otapalu. Pogodni spojevi formule (CH3)2-N-CH-(Lv3)2 uključuju dimetilformamid-dimetil-acetal. Pogodna polarna otapala uključuju dimetilformamid, toluen ili alkohol (poput etanola), po mogućnosti dimetilformamid. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 22 °C do približno 150 °C, po mogućnosti približno 110 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 15 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 6 sati.

Spojevi formule (CH3)2-N-CH-(Lv3)2 dostupni su na tržištu.

Spojevi formule XVII, gdje je Lv kao što je opisano gore, dostupni su na tržištu ili ih se alternativno može dobiti postupcima dobro poznatim stručnjacima u ovom području tehnike.

Shema 5 odnosi se na dobivanje spoja formule IVb, što je spoj formule IV u Shemi 1, gdje A je =CR1-. Prema Shemi 5 spoj formule IVb može se dobiti reakcijom spoja formule XIX, gdje je Lv kao što je opisano gore, a Lv4 je izlazna skupina, s pogodnim supstituiranim alkinom formule

M1-C�C-R1

gdje M1 je H ili metal (poput Sn ili B), po mogućnosti H ili Sn, u prisustvu metalnog katalizatora u polarnom otapalu. Pogodne izlazne skupine Lv4 uključuju halogen, po mogućnosti brom ili jod. Pogodni metalni katalizatori uključuju paladijske ili bakrene katalizatore (vidjeti M.C. Fagnola i suradnici: Tetrahedron Lett., 38, 2307-2310, (1997.), uključen u ovu specifikaciju kao referenca). Pogodna polarna otapala uključuju dimetilformamid, dioksan, dimetil-sulfoksid, ili njihove smjese, po mogućnosti smjesu dimetilformamida i dioksana. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 22 °C do približno 120 °C, po mogućnosti približno 90 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 8 sati.

Spojevi formule M1-C�C-R1 dostupni su na tržištu, ili ih se može dobiti postupcima dobro poznatim stručnjacima u ovom području tehnike.

Spoj formule XIX, gdje su Lv i Lv4 kao što je opisano gore, može se dobiti reakcijom spoja formule XX, gdje su Lv i Lv4 kao što je opisano gore, s reducensom u prisustvu (CH3CO)2O, u polarnom otapalu. Pogodni reducensi uključuju plinoviti vodik u prisustvu katalizatora, poput Pd/C (vidjeti J.W. Coe, M.G. Vetelino, M.J. Bradlee: Tetrahedron Lett., 37, 6045-6047, (1996.), uključen u ovu specifikaciju kao referenca), Rd, Raneyevog nikla ili Pt; octene kiseline u prisustvu In, Fe ili Zn; SnCl2; ili Fe3(CO)12; po mogućnosti plinovitog vodika u prisustvu Pd/C; ili octene kiseline u prisustvu Fe. Pogodna polarna otapala uključuju dimetilformamid, metanol, etanol ili octenu kiselinu; po mogućnosti metanol ili octenu kiselinu. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 20 °C do približno 100 °C, po mogućnosti približno 22 °C. Kada se upotrebljava plinoviti vodik reakcijski tlak može biti 101,3-405,5 kPa (1-4 atm), po mogućnosti 101,3 (1 atm). Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 2 sata do približno 48 sati, po mogućnosti približno 24 sata.

Spojevi formule XX dostupni su na tržištu, ili ih se može dobiti postupcima dobro poznatim stručnjacima u ovom području tehnike.

Shema 6 odnosi se na dobivanje spoja formule If, što je spoj formule I u Shemi 1, gdje skupina -Y-Z- ima formulu -N=CH-, A je =N-, a R2 nije vodik. Prema Shemi 6 spoj formule If može se dobiti reakcijom spoja formule Ie, što je spoj formule I u Shemi 1, gdje skupina -Y-Z- ima formulu -N=CH-, A je =N-, a R2 je vodik, sa spojem formule

R2-Lv1,

gdje Lv1 je izlazna skupina, poput halogena, po mogućnosti broma ili klora, u prisustvu pogodne baze, u polarnom otapalu. Reakcijski uvjeti su kao što je opisano gore, u opisu za Shemu 1, za dobivanje spojeva formule III iz spoja formule IV.

Spojeve formule Ie može se dobiti reakcijom spoja formule VIIIa, što je spoj formule VIII u Shemi 2, gdje A je =N-, a Lv je kao što je opisano gore, s hidrazinom u otapalu. Reakcijski uvjeti su kao što je opisano gore, u opisu za Shemu 1, za dobivanje spoja formule I iz spoja formule II.

Spojeve formule VIIIa može se dobiti reakcijom spoja formule IVa, koji je produkt u Shemi 4, s sredstvom za dobivanje dušičaste kiseline, u prisustvu kiseline, u otapalu. Pogodna sredstva za dobivanje uključuju dušičasta kiselina NaNO2, KNO2, izoamil-nitrit ili tert-butil-nitrit; po mogućnosti NaNO2. Pogodne kiseline uključuju octenu kiselinu ili vodenu otopinu HCl; po mogućnosti octenu kiselinu. Pogodna otapala uključuju octenu kiselinu, benzen, dimetilformamid, toluen ili alkohole (poput metanola), po mogućnosti octenu kiselinu. Gore navedenu reakciju može se provesti na temperaturi od približno 0 °C do približno 30 °C, po mogućnosti približno 0 °C warming to 23 °C. Gore navedenu reakciju može se provesti u trajanju od približno 5 minuta do približno 24 sata, po mogućnosti približno 1 sat.

U ovom izumu podrazumijeva se da spoj Formule I može pokazivati fenomen tautomerije, te da crteži formula u ovoj specifikaciji predstavljaju samo jedan od mogućih tautomernih oblika. Treba shvatiti da ovaj izum obuhvaća sve tautomerne oblike koji moduliraju i/ili inhibiraju kinaznu aktivnost, te da se ne ograničuje samo na one tautomerne oblike koje se upotrebljava u crtežima formula.

Neki od spojeva prema ovom izumu mogu postojati kao pojedinačni stereoizomeri (tj. uglavnom čist od drugih stereoizomera), racemata i/ili smjese enantiomera i/ili dijastereomera. Namjera je da svi takvi pojedinačni stereoizomeri, racemati i njihove smjese uđu u opseg zaštite ovog izuma. Po mogućnosti, spojeve prema ovom izumu koji su optički aktivni upotrebljava se u optički čistom obliku.

Kao što to općenito podrazomijevaju stručnjaci u ovom području tehnike, optički čisti spoj s jednim kiralnim centrom (tj. jednim asimetričnim atomom ugljika) je onaj koji je uglavnom jedan od dva moguća enantiomera (tj. enantiomerno je čist), a optički čisti spoj s više od jednog kiralnog centra je onaj koji je i dijastereomerno čist i enantiomerno čist. Po mogućnosti, spojeve prema ovom izumu upotrebljava se u obliku koji je najmanje 90 % optički čist, tj., oblik koji sadrži najmanje 90 % jednog izomera (80 % enantiomera u suvišku ("e.e.") ili dijastereomera u suvišku ("d.e.")), poželjnije najmanje 95 % (90 % e.e. ili d.e.), još poželjnije najmanje 97,5 % (95 % e.e. ili d.e.), te najpoželjnije najmanje 99 % (98 % e.e. ili d.e.).

Uz to, Formula I treba obuhvatiti solvatirane kao i nesolvatirane oblike identificiranih struktura. Kao primjer, Formula I uključuje spojeve naznačene strukture, kako u hidratiranim, tako i u nehidratiranim oblicima. Drugi primjeri solvata uključuju strukture u kombinaciji s izopropanolom, etanolom, metanolom, DMSO-om, etil-acetatom, octenom kiselinom ili etanolaminom.

Ako je spoj prema ovom izumu baza, željenu farmaceutski prihvatljivu sol može se dobiti bilo kojim pogodnim postupkom dostupnim u struci, primjerice obradom slobodne baze anorganskom kiselinom, poput klorovodične kiseline, bromovodične kiseline, sumporne kiseline, dušične kiseline, fosforne kiseline i slično, ili organskom kiselinom, poput octene kiseline, maleinske kiseline, jantarne kiseline, bademove kiseline, fumarne kiseline, malonske kiseline, pirogrožđane kiseline, oksalne kiseline, glikolne kiselina, salicilne kiseline, piranozidilne kiseline, poput glukuronske kiseline ili galakturonske kiseline, �-hidroksikiselinom, poput limunske kiseline ili vinske kiseline, aminokiselinom, poput asparaginske kiseline ili glutaminske kiseline, aromatskom kiselinom, poput benzojeve kiseline ili cimetne kiseline, sulfonskom kiselinom, poput p-toluensulfonske kiseline ili etansulfonske kiseline, ili slično.

Ako je spoj prema ovom izumu kiselina, željenu farmaceutski prihvatljivu sol može se dobiti bilo kojim pogodnim načinom, primjerice obradom slobodne kiseline anorganskom ili organskom baza, poput amina (primarnog, sekundarnog ili tercijarnog), hidroksida alkalnog ili zemnoalkalnog metala, ili slično. Ilustrativni primjeri pogodnih soli uključuju organske soli, koje se dobiva iz aminokiselina, poput glicina i arginina, amonijaka, primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, te cikličkih amina, poput piperidina, morfolina i piperazina, te anorganske soli, koje se dobiva iz natrija, kalcija, kalija, magnezija, mangana, željeza, bakra, cinka, aluminija i litija.

U slučaju sredstava koja su krutine, stručnjaci u ovom području tehnike podrazumijevaju da spojevi prema ovom izumu i soli mogu postojati u različitim kristalnim ili polimorfnim oblicima, a namjera je da svi oni uđu u opseg zaštite ovog izuma i specificiranih formula.

Farmaceutski prihvatljive soli spoja Formule I također mogu postojati kao različiti solvati, primjerice s vodom, metanolom, etanolom, dimetilformamidom, etil-acetatom i slično. Također se može dobiti i smjese takvih solvata. Izvor takvog solvata može biti otapalo za kristalizaciju, otapalo za dobivanje ili kristalizaciju, ili dodatak takvom otapalu.

Spoj Formule I može se upotrijebiti u kombinaciji s konvencionalnim antineoplastičnim terapijama za liječenje sisavaca, osobito ljudi, s novotvorinama. Postupci kod konvencionalnih antineoplastičnih terapija, uključujući kemoterapije u kojima se upotrebljava antineoplastična sredstva i terapijsko zračenje, su već dostupni, i rutinski ih se primjenjuje u praksi, npr. vidjeti Harrison: "Principles Of Internal Medicine", 11. izdanje, McGraw-Hill Book Company.

Za novotvorinu je karakterističan abnormalan rast stanica što često rezultira invazijom u normalna tkiva, npr. kod primarnih tumora, ili širenjem u udaljene organe, npr. kod metastaza. Liječenje bilo koje novotvorine konvencionalnim nekirurškim antineoplastičnim terapijama može se pojačati ovim izumom. Takav neoplastični rast uključuje, no ne ograničuje se na primarne tumore, primarne tumore nepotpuno uklonjene kirurškim tehnikama, primarne tumore koji su adekvatno liječeni, no pod visokim rizikom za naknadni razvoj metastatske bolesti, te postojeću metastatsku bolest.

Specifično, inhibitor CHK-1 Formule I, gore, može pojačati antineoplastične učinke antineoplastičnog sredstva. Široki raspon dostupnih antineoplastičnih sredstava razmatra se za kombinacijsku terapiju prema ovom izumu. U poželjnoj izvedbi, antineoplastična sredstva koja pokazuju svoje citotoksične učinke aktiviranjem programirane stanične smrti ili apoptoze može se upotrijebiti u kombinaciji s opisanim inhibitorom CHK-1. Antineoplastična sredstva koja se razmatra prema ovom izumu uključuju, no ne ograničuju se na alkilacijska sredstva, uključujući busulfan, klorambucil, ciklofosfamid, ifosfamid, melfalan, dušični iperit, streptozocin, tiotepu, uracil-dušični iperit, trietilenmelamin, temozolomid i SARCnu; antibiotike i biljne alkaloide, uključujući aktinomicin-D, bleomicin, kriptoficine, daunorubicin, doksorubicin, idarubicin, irinotekan, l-asparaginazu, mitomicin-C, mitramicin, navelbin, paklitaksel, docetaksel, topotekan, vinblastin, vinkristin, VM-26 i VP-16-213; hormone i steroide, uključujući inhibitor 5�-reduktaze, aminoglutetimid, anastrozol, bikalutamid, klortrianizen, DES, dromostanolon, estramustin, etinilestradiol, flutamid, fluoksimesteron, goserelin, hidroksiprogesteron, letrozol, leuprolid, medroksiprogesteron-acetat, megestrol-acetat, metilprednizolon, metiltestosteron, mitotan, nilutamid, prednizolon, SERM3, tamoksifen, testolakton, testosteron, triamiknolon, te zoladeks; sintetske tvari, uključujući sve-trans-retinoičnu kiselinu, BCNU� (karmustin), CBDCA karboplatin (paraplatin), CCNU� (lomustin), cis-diamindikloroplatinu (cisplatin), dakarbazin, gliadel, heksametilmelamin, hidroksiureu, levamizol, mitoksantron, o,p'-DDD (Lysodren�, mitotan), oksaliplatin, porfimer-natrij, prokarbazin, GleeVec�; antimetabolite, uključujući klordeoksiadenozin, citozin-arabinozid, 2'-deoksikoformicin, fludarabin-fosfat, 5-fluoruracil, 5-FUDR, gemcitabin, Camptothecin�, 6-merkaptopurin, metotreksat, MTA, te tiogvanin; te biološke tvari, uključujući �-interferon, BCG, G-CSF, GM-CSF, interleukin-2, herceptin; i slično.

U poželjnoj izvedbi prema ovom izumu antineoplastično sredstvo se bira iz skupine koju čine alkilacijska sredstva, antibiotici i biljni alkaloidi, hormoni i steroidi, sintetska sredstva s antineoplastičnom aktivnošću, antimetaboliti i biološke molekule s antineoplastičnom aktivnošću.

U poželjnoj izvedbi ovog izuma antineoplastično sredstvo se bira iz skupine koju čine Ara-C�, VP-16, cisplatin, adriamicin, 2-klor-2-deoksiadenozin, 9-�-D-arabinozil-2-fluoradenin, karboplatin, gemcitabin, Camptothecin�, paklitaksel, BCNU�, 5-fluoruracil, irinotekan, te doksorubicin; poželjnije gemcitabin.

Sva neoplastična stanja koja se može liječiti takvim antineoplastičnim sredstvima može se liječiti prema ovom izumu, uz upotrebu kombinacije spoja Formule I s jednim ili više antineoplastičnih sredstava. Antineoplastična sredstva pokazuju svoju citotoksičnost ili antineoplastiče učinke kod niza različitih specifičnih neoplastičnih stanja. Kao primjer, Ara-C� se normalno upotrebljava u liječenju childhood-null akutne limfoidne leukemije (ALL), timične ALL, B-stanične ALL, akutne mijeloidne leukemije, akutne granulocitne leukemije i njenih varijanti, ne-Hodgkinskog limfoma, mijelomonocitoidne leukemije, akutne megakariocitoidne leukemije i Burkittovog limfoma, B-ALL kod odraslih, akutne mijeloidne leukemije, kronične limfoidne leukemije, kronične mijeloidne leukemije, te T-stanične leukemije. VP-16 se normalno upotrebljava u liječenju karcinoma testisa, karcinoma malih i velikih stanica pluća, Hodgkinovog limfoma, ne-Hodgkinskih limfoma, koriokarcinoma, Ewingovog sarkoma, te akutne granulocitne leukemije. Cisplatin se može upotrijebiti u liječenju karcinoma testisa, tumora germinativnih stanica, karcinoma jajnika, raka prostate, raka pluća, sarkoma, raka vrata maternice, raka endometrija, raka želuca, raka dojke, te raka glave i vrata. 2-klor-2-deoksiadenozin i 9-�-d-arabinozil-2-fluoradenin se može upotrijebiti u liječenju kronične limfoidne leukemije, limfoma i leukemije vlasastih stanica. Doksorubicin se može upotrijebiti u liječenju akutne granulocitne leukemije i njenih varijanti, ALL, raka dojke, raka mokraćnog mjehura, raka jajnika, raka štitnjače, raka pluća, Hodgkinovog limfoma, ne-Hodgkinskih limfoma, sarkoma, karcinoma želuca, raka prostate, raka endometrija, Wilmsovog tumora i neuroblastoma.

Klinički učinci antineoplastičnih sredstava kod svih neoplastičnih stanja koja se može liječiti antineoplastičnim sredstvima, uključujući one prodiskutirane gore, može se potencirati upotrebom kombinacijske terapije s identificiranim inhibitorom CHK-1 prema ovom izumu.

Inhibitor CHK-1 identificiran u ovom izumu također može pojačati antineoplastične učinke radioterapije. Obično se zračenje može upotrijebiti u liječenju mjesta čvrstog tumora izravno, ili se primijeniti brahiterapijskim usatcima. Različiti tipovi terapijskog zračenja koje se razmatra za kombinacijsku terapiju prema ovom izumu mogu biti oni koje se upotrebljava u liječenju raka, što uključuje, no ne ograničuje se na rendgensko zračenje, �-zračenje, visokoenergijske elektrone, visoko-LET (Linear Energy Transfer) zračenje, poput protona, neutrona i �-čestica. Ionizacijsko zračenje može se upotrijebiti tehnikama dobro poznatim stručnjacima u ovom području tehnike. Kao primjer, rendgensko zračenje i �-zračenje primjenjuje se izvana i/ili intersticijski, iz linearnih akceleratora ili radioaktivnih izvora. Visokoenergijske elektrone može se dobiti linearnim akceleratorima. Visoko-LET zračenje također se primjenjuje iz radioaktivnih izvora usađenih intersticijski.

Specifičnu dozu spoja Formule I, njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata ili predlijeka, koju se primjenjuje se kako bi se postiglo terapijski ili inhibicijski učinak, može se odrediti na način poznat u struci, s obzirom na određene okolnosti slučaja, uključujući, npr., specifično sredstvo koje se primjenjuje, način primjene, stanje koje se liječi, te subjekt ili osobu koju se liječi. Primjer ukupne dnevne doze spoja Formule I, koju se može primijeniti z jednoj ili više doza, sadrži količinu doziranja od približno 0,01 mg/kg tjelesne težine do približno 50 mg/kg tjelesne težine.

Spojeve Formule I prema ovom izumu može se primijeniti bilo kojim od različitih pogodnih načina, primjerice oralno, rektalno, transdermalno, supkutano, intravenski, intramuskularno ili intranazalno. Spojeve Formule I po mogućnosti se formulira u pripravke pogodne za željene načine prije primjene.

Farmaceutski pripravak ili preparat prema ovom izumu sadrži djelotvornu količinu spoja Formule I, izborno jedno ili više drugih aktivnih sredstava, te farmaceutski prihvatljivu podlogu, poput razrjeđivača ili pomoćne tvari za sredstvo; kada podloga služi kao razrjeđivač, ona može biti čvrsti, polučvrsti ili tekući materijal koji djeluje kao vehikulum, pomoćna tvar ili medij za jedan ili više aktivnih sastojaka. Pripravke prema ovom izumu može se načiniti miješanjem jednog ili više aktivnih sastojaka s podlogom, ili njegovim razrjeđivanjem s podlogom, ili njegovim uklapanjem ili inkapsuliranjem u podlogu, što može biti u obliku kapsule, vrećice, papirnog spremnika, ili slično. Primjeri sastojaka, uz jedan ili više spojeva Formule I i bilo koje druge aktivne sastojke, uključuju Avicel� (mikrokristalna celuloza), škrob, laktoza, kalcijev sulfat dihidrat, terra alba, saharoza, talk, želatina, agar, pektin, arapska guma, magnezijev stearat, stearinska kiselina, kikirikijevo ulje, maslinovo ulje, gliceril-monostearat, Tween 80 (polisorbat 80), 1,3-butandiol, kakao-maslac, pčelinji vosak, polietilen-glikol, propilen-glikol, sorbitan-monostearat, polisorbat 60, 2-oktildodekanol, benzil-alkohol, glicin, sorbinska kiselina, kalijev sorbat, dinatrijev hidrogenfosfat, natrijev klorid, te vodu.

Pripravke se može načiniti u bilo kojem od različitih oblika pogodnih za željeni način primjene. Kao primjer, farmaceutske pripravke može se načiniti u obliku tablete, pilule, prašci, pastile, vrećice, kašete, ljekoviti napici, suspenzije, emulzije, otopine, sirupi, aerosoli (u obliku krutina ili u tekućim medijima), masti (npr. one koje sadrže do 10 %, težinski, spoja Formule I), meke i tvrde želatinske kapsule, supozitoriji, sterilni injekcijski otopine, sterilni pakirani prašci i slično.

Slično tome, podloga ili razrjeđivač mogu sadržavati i materijal za vremensko kašnjenje ili vremenski ovisno otpuštanje poznat u struci, poput gliceril-monostearata ili gliceril-distearata samog ili s voskom, etilcelulozom, hidroksipropilmetilcelulozom, metil-metakrilatom i slično.

Može se upotrijebiti niz različitih farmaceutskih oblika. Prema tome, ako se upotrebljava čvrsta podloga, pripravak se može tabletirati, staviti u tvrdu želatinsku kapsulu u obliku praha ili peleta, ili biti u obliku dražeje ili pastile. Količina čvrste podloge može varirati, no općenito će se kretati od približno 25 mg do približno 1 g. Ako se upotrebljava tekuća podloga, pripravak može biti u obliku sirupa, emulzije, meke želatinske kapsule, sterilne injekcijske otopine ili suspenzije u ampuli ili bočici, ili u obliku suspenzije u nevodenoj tekućini.

Kako bi se načinilo stabilni oblik doziranja topiv u vodi farmaceutski prihvatljivu sol sredstva prema ovom izumu otopi se u vodenoj otopini organske ili anorganske kiseline, poput 0,3 M otopine jantarne kiseline ili limunske kiseline. Ako topivi solni oblik nije dostupan, sredstvo se može otopiti u pogodnom suotapalu ili kombinacijama suotapala. Primjeri pogodnih suotapala uključuju, no ne ograničuju se na alkohol, propilen-glikol, polietilen-glikol 300, polisorbat 80, glicerol i slično, u rasponu koncentracija od 0-60 % ukupnog volumena. Spoj Formule I može se otopiti u DMSO-u, te razrijediti vodom. Pripravak također može biti u obliku otopine solnog oblika aktivnog sastojka u odgovarajućem vodenom vehikulumu, poput vode ili izotonične fiziološke otopine ili dekstrozne otopine.

Pripravke prema ovom izumu može se načiniti na načine općenito poznate za pripravu farmaceutskih pripravaka, npr. konvencionalnim tehnikama poput miješanja, otapanja, granuliranja, dražiranja, levigiranja, emulgiranja, inkapsuliranja, uklapanja ili liofiliziranja. Farmaceutske pripravke može se formulirati na konvencionalan način, u z upotrebu jedne ili više fiziološki prihvatljivih podloga, koje se može birati između pomoćnih tvari i pomoćnih sredstava koja olakšavaju oblikovanje aktivnih spojeva u pripravke koje se može upotrijebiti u farmaceutske svrhe.

Pravilno formuliranje ovisi o odabranom načinu primjene. Za injekcije se sredstva prema ovom izumu može formulirati u vodene otopine, po mogućnosti u fiziološki kompatibilnim puferima, poput Hanksove otopine, Ringerove otopine, ili puferirane fiziološke otopine. Prilikom transmukozne primjene se za formuliranje upotrebljava sredstva za prodiranje koja odgovaraju barijeru koju treba proći. Takva sredstva za prodiranje općenito su poznata u struci.

Priliokom oralne primjene spojeve se lako formulira miješanjem aktivnih spojeva s farmaceutski prihvatljivim podlogama poznatim u struci. Takve podloge omogućuju formuliranje spojeva prema ovom izumu u tablete, pilule, dražeje, kapsule, tekućine, gelove, sirupe, emulzije, suspenzije i slično, da ih može progutati pacijent kojeg treba liječiti. Farmaceutske pripravke za oralnu upotrebu može se načiniti pomoću čvrste pomoćne tvari u smjesi s aktivnim sastojkom (sredstvom), uz izborno mljevenje dobivene smjese, te obradu smjese granula nakon dodavanja pogodnih pomoćnih sredstava, po želji, kako bi se načinilo tablete ili dražejne jezgre. Pogodne pomoćne tvari uključuju: punila, poput šećera, uključujući laktozu, saharozu, manitol ili sorbitol; i celulozne pripravke, primjerice, kukuruzni škrob, pšenični škrob, rižin škrob, krumpirov škrob, želatinu, gumu, hidroksipropilmetilcelulozu, natrij-karboksimetilcelulozu, metilcelulozu ili polivinilpirolidon (PVP). Po želji, može se dodati sredstva za raspadanje, poput umreženog polivinilpirolidona, agara ili alginske kiseline ili njene soli, poput natrijevog alginata.

Dražejnim jezgrama doda se pogodne obloge. U tu svrhu može se upotrijebiti koncentrirane šećerne otopine, koje izborno mogu sadržavati arapsku gumu, polivinilpirolidon, Carbopol� gel, polietilen-glikol, i/ili titanijev dioksid, lakirne otopine, te pogodna organska otapala ili smjese otapala. Tabletama ili dražejnim oblogama može se dodati i bojila ili pigmente radi identifikacije ili karakteriziranja različitih kombinacija aktivnih sredstava.

Farmaceutski pripravci koje se može upotrijebiti oralno uključuju push-fit kapsule načinjene od želatine, kao i meke, zatvorene kapsule načinjene od želatine i plastifikatora, poput glicerola ili sorbitola. Push-fit kapsule mogu sadržavati aktivne sastojke u smjesi s punilima poput laktoze, vezivima, poput škrobova i/ili mazivima, poput talka ili magnezijevog stearata, te, izborno, stabilizatorima. U mekim kapsulama aktivna sredstva se može otopiti ili suspendirati u pogodnim tekućinama, poput masnih ulja, tekućeg parafina ili tekućih polietilen-glikola. Uz to, može se dodati i stabilizatore. Sve formulacije za oralnu primjenu trebali bi biti u doziranjima pogodnim za takvu primjenu. Prilikom bukalne primjene pripravci mogu biti u obliku tableta ili pastila formuliranih na konvencionalan način.

Prilikom intranazalne primjene ili inhaliranjem spojeve koje se upotrebljava prema ovom izumu se pogodno unaša u obliku aerosolnog spreja kao prezentacije iz spremnika pod tlakom ili nebulizatora, uz upotrebu pogodnog pogonskog plina, npr. diklordifluormetana, triklorfluormetana, diklortetrafluoretana, ugljičnog dioksida ili drugog pogodnog plina. U slučaju aerosola pod tlakom jedinicu doze može se odrediti pomoću ventila kojim se unaša odmjerena količina. Kapsule i uloške od želatine za upotrebu u inhalatoru ili insuflatoru i slično može se tako formulirati da sadrže praškastu smjesu spoja i pogodne praškaste podloge, poput laktoze ili škroba.

Spojeve se može formulirati za parenteralnu primjenu injekcijom, npr. bolusnom injekcijom ili kontinuiranom infuzijom. Formulacije za injekcije može se prezentirati u obliku jedinice doze, npr. u ampulama ili u višedoznim pakiranjima, uz dodatak konzervansa. Pripravci mogu biti u oblicima poput kao suspenzija, otopina ili emulzija u uljnim ili vodenim vehikulumima i mogu sadržavati formulacijska sredstva, poput suspendirajućih, stabilizacijskih i/ili dispergirajućih sredstava.

Farmaceutske formulacije za parenteralnu primjenu uključuju vodene otopine aktivnih spojeva u obliku topivom u vodi. Uz to, suspenzije aktivnih sredstava može se načiniti kao odgovarajuće uljne injekcijske suspenzije. Pogodna lipofilna otapala ili vehikulumi uključuju masna ulja, poput sezamovog ulja ili sintetske estere masnih kiselina, poput etil-oleata ili triglicerida, ili liposome. Vodene injekcijske suspenzije mogu sadržavati tvari koje povećavaju viskoznost suspenzije, poput natrij-karboksimetilceluloze, sorbitola ili dekstrana. Izborno suspenzija također može sadržavati i pogodne stabilizatore ili sredstva koja povećavaju topivost spojeva kako bi se omogućilo dobivanje visoko koncentriranih otopina.

Prilikom primjene na oku aktivno sredstvo se unaša u farmaceutski prihvatljivom oftalmičkom vehikulumu, tako da spoj ostaje u kontaktu s površinom oka dovoljno dugo da se omogući prodiranje spoja u rožnicu i unutarnje dijelove oka, uključujući, primjerice, prednju komoru, stražnju komoru, staklasto tijelo, očnu vodicu, staklovinu, rožnicu, šarenicu/cilijarno tijelo, leću, žilnicu/mrežnicu i bjeloočnicu. Farmaceutski prihvatljivi oftalmički vehikulum može biti mast, biljno ulje ili inkapsulacijski materijal. Spoj prema ovom izumu također se može injicirati izravno u staklovinu i očnu vodicu.

Alternativno aktivni sastojak može biti u obliku praha za prislagivanje s pogodnim vehikulumom, npr. sterilnom apirogenom vodom, prije upotrebe. Spojeve se također može formulirati u rektalne pripravke, poput supozitorija ili retencijskih klizmi, koji npr. sadrže konvencionalne supozitorijske podloge, poput kakao-maslaca ili drugih glicerida.

Spojeve se također može formulirati kao depo-pripravak. Takve dugodjelujuće formulacije može se primijeniti usađivanjem (primjerice supkutano ili intramuskularno) ili intramuskularnom injekcijom. Prema tome se, primjerice, spojeve može formulirati s pogodnim polimernim ili hidrofobnim materijalima (primjerice, kao emulziju u prihvatljivom ulju) ili ionskoizmjenjivačkim smolama, ili kao niskotopive derivate, primjerice kao niskotopivu sol.

Farmaceutska podloga za hidrofobne spojeve je sustav suotapala koji sadrži benzil-alkohol, nepolarni surfaktant, organski polimer koji se miješa s vodom, te vodenu fazu. Sustav suotapala može biti VPD sustav suotapala. VPD je otopina 3 % tež./vol. benzil-alkohola, 8 % tež./vol. nepolarnog surfaktanta polisorbata 80, te 65 % tež./vol. polietilen-glikola 300, uz dodatak apsolutnog etanola do odgovarajućeg volumena. VPD sustav suotapala (VPD/5W) sadrži VPD razrijeđen 1:1 5 % dekstrozom u vodenoj otopini. Ovaj sustav suotapala dobro otapa hidrofobne spojeve, a sam je niskotoksičan prilikom sistemne primjene. Naravno da odnosi u sustavu suotapala mogu znatno varirati, a da to nije štetno po njegove karakteristike topivosti i toksičnosti. Nadalje, identitet komponenata suotapala može varirati: kao primjer, umjesto polisorbata 80 može se upotrijebiti i druge niskotoksične nepolarne surfaktante; veličina polietilen-glikolske frakcije može varirati; polietilen-glikol mogu zamijeniti drugi biokompatibilni polimeri, npr. polivinilpirolidon; a dekstrozu mogu zamijeniti drugi šećeri ili polisaharidi.

Alternativno se može upotrijebiti i druge sustave za unos hidrofobnih farmaceutskih spojeva. Liposomi i emulzije su poznati primjeri vehikuluma za unos ili podloga za hidrofobne lijekove. Također se može upotrijebiti i neka organska otapala, poput dimetil-sulfoksida, iako obično po cijenu veće toksičnosti. Uz to, spojeve se može unositi pomoću sustava za produljeno otpuštanje, poput polupropusnih matriksa čvrstih hidrofobnih polimera koji sadrže terapijsko sredstvo. Prihvaćeni su različiti materijali za produljeno otpuštanje i poznati su stručnjacima u ovom području tehnike. Kapsule s produljenim otpuštanjem mogu, ovisno o svojoj kemijskoj prirodi, otpuštati spojeve nekoliko tjedana, pa do preko 100 dana. Ovisno o kemijskoj prirodi i biološkoj stabilnosti terapijskog reagensa može se upotrijebiti dodatne strategije stabiliziranja proteina.

Farmaceutski pripravci također mogu sadržavati pogodne čvrste ili gel-fazne podloge ili pomoćne tvari. Primjeri takvih podloga ili pomoćnih tvari uključuju kalcijev karbonat, kalcijev fosfat, šećere, škrobove, celulozne derivate, želatinu i polimere poput polietilen-glikola.

Neke od spojeva prema ovom izumu može se dati kao soli s farmaceutski kompatibilnim protuionima. Farmaceutski kompatibilne soli može se dobiti s mnogim kiselinama, uključujući klorovodičnu, sumpornu, octenu, mliječnu, vinsku, jabučnu, jantarnu itd. Soli su obično topivije u vodenim ili drugim protonskim otapalima od odgovarajućih slobodnobaznih oblika.

Spojevi Formule I, njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati ili predlijekovi, korisni su kao antiangiogenetska sredstva i kao sredstva za moduliranje i/ili inhibiranje aktivnosti proteinskih kinaza, čime omogućuju liječenje raka ili drugih bolesti povezanih sa staničnom proliferacijom posredovanom proteinskim kinazama.

Terapijski djelotvorne količine sredstava prema ovom izumu može se upotrijebiti za liječenje bolesti uzrokovanih moduliranjem ili reguliranjem proteinskih kinaza. "Djelotvorna količina" treba značiti da količina sredstva koja je, prilikom primjene na sisavcu kojem je potrebno takvo liječenje, dovoljna da se provede liječenje bolesti uzrovane aktivnošću jedne ili više kinaza. Prema tome, npr., terapijski djelotvorna količina spoja Formule I, njegova farmaceutski prihvatljiva sol, solvat ili predlijek, je količina dovoljan za moduliranje, reguliranje ili inhibiranje aktivnosti jedne ili više kinaza, tako da se bolesno stanje uzrokovano tom aktivnošću olakša ili ublaži.

Biokemijska i biološka procjena

Enzimska ispitivanja

CHK-1 Konstrukt za ispitivanje

Kao što je prethodno detaljno opisano u Evropskoj patentni prijavi br. 1 096 014 A2 (podnesena 31. listopada 2000.), the C-terminalno His-obilježena kinazna domena ljudskog CHK-1 (KH289), aminokiselinski ostaci 1-289, može se eksprimirati pomoću sustava bakulovirus/stanica kukca. Za ovaj konstrukt pokazalo se da posjeduje katalitičku aktivnost približno 10 × veću od CHK-1 pune duljine. Sustav Bac-to-Bac (Life Technologies) može se upotrijebiti za dobivanje rekombinantnog bakulovirusa za ekspresiju KH289, prema uputama. Rekombinantne viruse može se potvrditi PCR-om na prisustvo insercije CHK-1 cDNA. Ekspresiju proteina može se potvrditi pomoću SDS-PAGE ili Western-blot analizom s poliklonskim protutijelima na CHK-1. Stanice kukca Sf9 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) može se upotrijebiti za početno umnažanje matične količine rekombinantnih virusa. Visokotitarske matične količine rekombinantnih virusa može se dobiti u 2-3 ciklusa umnažanja pomoću stanica kukca Sf21. Hi-S stanice kukca (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) može se upotrijebiti za proizvodnju proteina. I Sf9 i Hi-S stanične linije može se prilagoditi za rast u mediju za stanice kukaca koji sadrži 1 % fetalnog goveđeg seruma (Life Technologies, Grand Island, NY, USA). Matičnu količinu virusa skladišti se na 10 °C, te upotrijebi za proizvodnju proteina u visokom obimu unutar 2 mjeseca kako bi se izbjeglo nestabilnost virusa. Prilikom proizvodnje proteina inficirane Hi-S stanice može se prikupiti centrifugiranjem, te uskladištiti na –80 °C. Iz tih stanica može se dobiti 6 × His obilježeni KH289 (identificiran pomoću SDS-PAGE) nakon pročišćavanja i može se brzo smrznuti u tekućem N2, te uskladištiti na –80 °C. Pokazalo se da je održavanje koncentracije soli na približno 500 mM NaCl, uz dodatak 5 % glicerola, kritično za sprječavanje agregacije CHK-1 proteina tijekom pročišćavanja i skladištenja.

Ispitivanje na CHK-1

Kao što je prethodno detaljno opisano u Evropskoj patentni prijavi br. 1 096 014 A2 (podnesena 31. listopada 2000.), enzimsku aktivnost kinaze može se mjeriti pomoću njene sposobnosti da katalizira prijenos fosfatnog ostatka s nukleozid-trifosfata na aminokiselinski pobočni lanac u odabranoj proteinskoj meti. Tu katalitičku reakciju općenito prati prevođenje ATP-a u ADP. Ovdje se može upotrijebiti sintetski peptid kao supstrat, sintid-2, s aminokiselinskim slijedom PLARTLSVAGLPGKK. Nastajanje ADP iz ATP-a koje prati prijenos fosforila na supstrat može se spregnuti s oksidacijom NADH pomoću fosfoenolpiruvata (PEP), djelovanjem piruvat-kinaze (PK) i laktat-dehidrogenaze (LDH). Oksidaciju NADH može se promatrati prateći pad apsorbancije na 340 nm (e340 = 6,22 cm–1 mM–1) pomoću spektrofotometra HP8452. Tipične reakcijske otopine sadrže: 4 mM PEP, 0,15 mM NADH, 28 i.j. LDH/ml, 16 i.j. PK/ml, 3 mM DTT, 0,125 mM sintida-2, 0,15 mM ATP i 25 mM MgCl2 u 50 mM TRIS pH 7,5; 400 mM NaCl. Ispitivanja se može započeti s 10 nM kinazne domene CHK-1, KH289. Vrijednosti Ki može se odrediti mjerenjem početne enzimske aktivnosti u prisutnosti različitih koncentracija inhibitora. Podatke se može analizirati softverom Enzyme Kinetic i Kaleidagraph.

Konstrukt VEGF-R2 za ispitivanje

Ovim konstruktom određuje se sposobnost ispitivanog spoja da inhibira aktivnost tirozinske kinaze. Konstrukt (VEGF-R2�50) citosolne domene (ljudskog) receptora čimbenika rasta vaskularnog endotela 2 (VEGF-R2) kojem nedostaje 50 središnjih ostataka od 68 ostataka kinazne insercijske domene može se eksprimirati u sustavu bakulovirus/stanica kukca. Od 1356 ostataka VEGF-R2 pune duljine VEGF-R2�50 sadrži ostatke 806-939, te 990-1171, a također i jednu točkastu mutaciju (E990V) u kinaznoj insercijskoj domeni u odnosu na divlji tip VEGF-R2. Autofosforiliranje pročišćenog konstrukta može se provesti inkubacijom enzima u koncentraciji od 4 µM, u prisutnosti 3 mM ATP i 40 mM MgCl2, u 100 mM HEPES, pH 7,5, koji sadrži 5 % glicerol i 5 mM DTT, na 4 °C, u trajanju od 2 sata. Pokazalo se da ovaj konstrukt nakon autofosforiliranja posjeduje katalitičku aktivnost uglavnom ekvivalentnu onoj kod divljeg tipa autofosforiliranog konstrukta kinazne domene. Vidjeti Parast i suradnici: Biochemistry, 37, 16788-16801, (1998.).

Ispitivanje na VEGF-R2

Spregnuto spektrofotometrijsko ispitivanje (FLVK-P)

Nastajanje ADP iz ATP-a koje prati prijenos fosforila može se spregnuti s oksidacijom NADH pomoću fosfoenolpiruvata (PEP) i sustava s piruvat-kinazom (PK) i laktat-dehidrogenazom (LDH). Oksidaciju NADH može se promatrati prateći pad apsorbancije na 340 nm (e340 = 6,22 cm–1 mM–1) pomoću spektrofotometra Beckman DU 650. Uvjeti ispitivanja za fosforilirani VEGF-R2�50 mogu biti sljedeći: 1 mM PEP; 250 µM NADH; 50 i.j. LDH/ml; 20 i.j. PK/ml; 5 mM DTT; 5.1 mM poli(E4Y1); 1 mM ATP; te 25 mM MgCl2 u 200 mM HEPES, pH 7,5. Uvjeti ispitivanja za nefosforilirani VEGF-R2�50 mogu biti sljedeći: 1 mM PEP; 250 nM NADH; 50 i.j. LDH/ml; 20 i.j. PK/ml; 5 mM DTT; 20 mM poli(E4Y1); 3 mM ATP; te 60 mM MgCl2 i 2 mM MnCl2 u 200 mM HEPES, pH 7,5. Ispitivanja se može započeti s 5-40 nM enzima. Vrijednosti postotka inhibiranja enzima može se odrediti mjerenjem enzimske aktivnosti u prisutnosti 0,05 µM ispitivanog spoja. Podatke se može analizirati softverom Enzyme Kinetic i Kaleidagraph.

FGFR

Konstrukt FGF-R1 za ispitivanje

Unutarstaničnu kinaznu domenu (ljudskog) FGF-R1 može se eksprimirati pomoću bakulovirusnog vektora kao ekspresijskog sustava, počevši od endogenog metioninskog ostatka 456 do glutamata 766, prema sustav za numeriranje ostataka u Mohammadi i suradnici: Mol. Cell. Biol., 16, 977-989, (1996.). Uz to, konstrukt također ima sljedeće 3 aminokiselinske supstitucije: L457V, C488A, te C584S.

Ispitivanje na FGF-R

Spektrofotometrijsko ispitivanje može se provesti kao što je opisano gore, za VEGF-R2, uz sljedeće promjene koncentracije: FGF-R = 50 nM, ATP = 2 mM, te poli(E4Y1) = 15 mM. Vrijednosti Ki može se odrediti mjerenjem enzimske aktivnosti u prisutnosti različitih koncentracija ispitivanih spojeva.

PHK

Konstrukt fosforilaza-kinaze za ispitivanje

Skraćeni katalitička podjedinica (�-podjedinica) fosforilaza-kinaze (aminokiseline 1-298) može se eksprimirati u E. coli, te izdvojiti iz inkluzijskih tijela. Fosforilaza-kinazu može se zatim premotati, te uskladištiti u glicerolu na –20 °C.

Ispitivanje na Fosforilaza-kinazi

U ispitivanju se za fosforiliranje fosforilaze b može upotrijebiti pročišćena katalitička podjedinica, uz upotrebu radioaktivno obilježenog ATP. Ukratko, 1,5 mg/ml fosforilaze b može se inkubirati s 10 nM fosforilaza-kinazom u 10 mM MgCl2, 50 mM Hepes pH 7,4, na 37 °C. Reakciju se može započeti dodavanjem ATP-a u 100 µM, te inkubirati 15 minuta na 25 °C ili 37 °C. Reakciju se može prekinuti, a proteine istaložiti dodavanjem TCA u 10 % konačne koncentracije. Istaložene proteine može se izdvojiti na filtarsku ploču Millipore MADP NOB s 96 jažica. Filtarsku ploču može se obilno ispirati s 20 % TCA, te osušiti. Na ploču se zatim može dodati scintilacijska tekućina, a ugrađeni radioaktivni biljeg može se brojati na brojaču Wallac microbeta. Zatim se može mjeriti % inhibiranja prijenosa fosforila s ATP-a na fosforilazu b u prisutnosti 10 µM spoja.

Ispitivanje na CHK-2

Enzim CHK-2 može se dobiti iz Upstate Group, Inc., a to je fuzijski protein, N-terminalno obilježen s GST i C-terminalno obilježen s His, koji odgovara aminokiselinama 5-543 ljudskog CHK-2, kao što je potvrđeno masenim triptičkim fingerprintingom, kojeg se eksprimira u E. coli; Mr ~87 kDa. Uvjeti ispitivanja za CHK-2 mogu biti kao što je opisano gore za CHK-1, s tim što se može upotrijebiti enzim CHK2 (0,059 µM) umjesto KH289. Nadalje, ne može se dodati NaCl.

Ispitivanje na CDK-1

CDK-1/ciklin B, aktivni kompleks, može se dobiti iz Upstate Group, Inc., a to je CDK-1 C-terminalno obilježen s His i ciklin B N-terminalno obilježen s GST, kao što je potvrđeno masenim triptičkim fingerprintingom i sekvenciranjem proteina, kojeg se proizvodi pojedinačno u Sf21 stanicama, te kompleksira u vitro. Uvjeti ispitivanja za CDK-1 mogu biti kao što je opisano gore za CHK-1, s tim što se može upotrijebiti enzimski kompleks CDK-1/ciklin B (0,2 µM) umjesto KH289, a histon H1 (Upstate USA, Inc.) (0,059 µM) se može upotrijebiti kao supstrat umjesto sintida-2. Nadalje, ne može se dodati NaCl.

Ispitivanje na WEE-1

Protokol za Delfia� ispitivanje za WEE-1

Enzim WEE-1 može se dobiti iz Upstate Group, Inc., a to je fuzijski protein N-terminalno obilježen s GST s štakorskim WEE-1 pune duljine, kojeg se eksprimira u E. coli; Mr ~100 kDa. Ovo ispitivanje kinaze može se provesti na filtarskim pločama s 96 jažica (NoAb Diagnostics) obloženim s poli(Glu-Tyr) 4:1 (nasumični kopolimer). Ispitni volumen može biti 100 µl po jažici plus 2 µl DMSO-a (kontrola) ili 2 µl spoja u DMSO-u. Pufer A može biti 10 % glicerol, 20 mM TRIS (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 50 mM NaCl i 5 mM DTT. Ploče se može pripraviti automatizacijom.

U odgovarajuću jažicu može se dodati bilo 2 µl DMSO-a (kontrola) ili 2 µl spoja u DMSO-u. U jažice za pozitivnu kontrolu može se dodati 30 µl 0,5 M EDTA. U svaku jažicu može se dodati 50 µl ATP-a u Puferu A, tako da ispitna koncentracija ATP može biti 33 µM. Kako bi se započelo reakciju u svaku jažicu se može dodati po 50 µl Wee1 u Puferu A, tako da ispitna koncentracija Wee1 može biti 0,1 ng/ µl. Ploču se može miješati tresenjem, te je se ostavi 30 minuta na sobnoj temperaturi. Kako bi se zaustavilo reakciju ploču se može 1 × isprati otopinom za ispiranje Delfia�, na uređaju za ispiranje ploča EL405. U svaku jažicu može se dodati 100 µl EuPY u puferu za ispitivanje Delfia�, tako da ispitna koncentracija EuPY može biti 0,0149 ng/ µl. Ploču se može ostaviti da stoji 1 sat ili preko noći. Ploču se može ponovno 1 × isprati otopinom za ispiranje Delfia� (uređaj za ispiranje ploča EL405), te ostaviti da se osuši. U svaku jažicu može se dodati 100 µl otopine za pojačavanje Delfia�, a ploču se može ostaviti da stoji 10 minuta. Ploču se može očitati na Wallacovom fluorescentnom čitaču Victor (Europijski protokol). Vrijednosti Ki može se odrediti mjerenjem enzimske aktivnosti u prisutnosti različitih koncentracija ispitivanih spojeva.

Ispitivanje na SGK

SGK (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 8 mM MOPS pH 7,0, 0,2 mM EDTA, 30 µM Crosstide, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 50 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanih spojeva.

Ispitivanje na AMPK

AMPK (štakorski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 50 mM Hepes pH 7,4, 1 mM DTT, 0,02 % Brij35�, 200 µM AMP, 200 µM AMARAASAAALARRR, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na LCK

LCK (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 50 mM Tris pH 7,5, 0,1 mM EGTA, 0,1 mM Na vanadata, 250 µM KVEKIGEGTYGWYK (CDC2 peptid), 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na MAPK2

MAPK2 (mišji) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 25 mM Tris pH 7,5, 0,02 mM EGTA, 0,33 mg/ml mijelinskog bazičnog proteina, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µM reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na MSK1

MSK1 (ljudski) (Upstate Group, Inc, KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 8 mM MOPS pH 7,0, 0,2 mM EDTA, 30 pM Crosstide, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 50 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na PKB�

PKB� (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 8 mM MOPS pH 7,0, 0,2 mM EDTA, 30 µM Crosstide, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 50 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na ROCKII

ROCKII (štakorski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 50 mM Tris pH 7,5, 0,1 mM EGTA, 30DM KEAKEKRQEQIAKRRRLSSLRASTSKSGGSQK, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na p70S6K

p70S6K (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 8 mM MOPS pH 7,0, 0,2 mM EDTA, 100 µM KKRNRTLTV, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na PKA

PKA (bovine) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 8 mM MOPS pH 7,0, 0,2 mM EDTA, 30 µM LRRASLG (Kemptide), 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te isprati 3 × 5 minuta u 50 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na MAPK1

MAPK1 (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 25 mM Tris pH 7,5, 0,02 mM EGTA, 1 mM sintetskog peptida, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µ1. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na cSRC

cSRC (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 8 mM MOPS pH 7,0, 0,2 mM EDTA, 250 µM KVEKIGEGTYGWYK (CDC2 peptid), 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline, 10 µ1 reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na PRK2

PRK2 (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 50 mM Tris pH 7,5, 0,1 mM EGTA, 0,1 % �-merkaptoetanola, 30 µM AKRRRLSSLRA, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na PDK1

PDK1 (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 50 mM Tris pH 7,5, 100 µM KTFCGTPEYLAPEVRREPRILSEEEQEMFRDFDYIADWC (PDKtide), 0,1 % �-merkaptoetanola, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25jil. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na FYN

FYN (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 50 mM Tris pH 7,5, 0,1 mM EGTA, 0,1 mM Na vanadata, 250 µM KVEKIOEGTYGWYK (CDC2 peptid), 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

PKC�II (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 20 mM Hepes pH 7,4, 0,03 % Triton X-100, 0,1 mM CaCl2, 0,1 mg/ml fosfatidilserina, 10 µg/ml diacilglicerola, 0,1 mg/ml histona H1, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+ [�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 µl 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ispitivanje na PKC�

PKC� (ljudski) (Upstate Group, Inc., KINASEPROFILER�) (5-10 mi.j.) može se inkubirati s 20 mM Hepes pH 7,4, 0,03 % Triton X-100, 0,1 mM CaCl2, 0,1 mg/ml fosfatidilserina, 10 µg/ml diacilglicerola, 0,1 mg/ml histone H1, 10 mM Mg acetata i [�-33P-ATP] (Specifična aktivnost približno 500 cpm/pmol, koncentracija po potrebi) kako bi se dobilo konačni reakcijski volumen od 25 µl. Spojeve se može ispitati na 1 µM. Reakciju se može započeti dodavanjem Mg2+[�-33P-ATP]. Koncentracija ATP može biti 10 µM. Nakon 40-minutne inkubacije na sobnoj temperaturi reakciju se može zaustaviti dodavanjem 5 �l 3 % otopine fosforne kiseline. 10 µl reakcijske smjese može se zatim nanijeti na filtarsku podlogu P30, te 3 × 5 minuta ispirati u 75 mM fosfornoj kiselini, te 1 × u metanolu prije sušenja i scintilacijskog brojanja. Rezultati predstavljaju prosjek za 2 eksperimenta, a enzimsku aktivnost može se izraziti kao postotak one u kontrolnim inkubacijama bez ispitivanog spoja.

Ukidanje nadzornih točaka na razini stanice

ELISA ispitivanje mitotskog indeksa za Chk1

Kako bi se ispitalo u vitro učinke inhibicijskih spojeva na Chk1 može se osmisliti ELISA ispitivanje za praćenje ukidanja kontrole na nadzornoj točci uzrokovane oštećenjem DNA. Ispitivanje se može temeljiti na hvatanju i detekciji stanica u mitozi nakon mirovanja uzrokovanog oštećenjem DNA. Pokazalo se da fosforiliranje histona H3 na serinu 10 korelira s mitozom, te stoga može biti nužno za kondenziranje kromosoma; prema tome se mitotski specifični fosfoepitop na histonu H3 može upotrijebiti kao signal za ukidanje nadzorne točke.

Stanice CA-46 (limfom) može se obraditi sredstvom za oštećivanje DNA, kao što je Camptothecin� (Sigma), u koncentraciji od 50 nM, u trajanju od 8 sati, kako bi se uzrokovalo oštećenje DNA. Kontrolni spoj ili inhibitor Chk1 može se zatim dodati u rastućim koncentracijama uz Nocodazole (Sigma), u koncentraciji od 0,1 µg/ml, a ploče se može inkubirati 16 sati. Može se pripraviti kontrolne stanice gdje se može dodati samo inhibitore Chk1, te kako bi se osiguralo da sami inhibitori nemaju učinka na stanični ciklus. Stanice se može zatim prikupiti, ispirati PBS-om, te se može provesti sirovu kiselu ekstrakciju. Talog se može resuspendirati u 80 µl kiselog ekstrakcijskog pufera (10 mM Hepes pH 7,9, 1,5 mM MgCl2, 10 mM KCl, 0,5 mM DTT, 1,5 mM PMSF, 0,4 N sumporna kiselina), kratko se vorticira, te inkubira 30 minuta na ledu. Uzorke se može zatim centrifugirati, a 75 µl supernatanta se može prebaciti na ploču s 96 jažica ravnog dna (VWR 3596). Zatim se u svaku jažicu može dodati po 15 µl neutralizacijskog koktela (br. uzoraka × (10 µl 10 N NaOH + 5 µl 1 M Tris baze), a nakon miješanja 5 µl navedenog može se prebaciti na drugu ploču s 96 jažica s 100 µl 50 mM Tris baze (pH 9,6) po jažici. Uzorke se može osušiti preko noći. Jažice se može zatim 5 × ispirati s 200 µl ELISA pufera za ispiranje (PBS s 20 mM Tris pH 7,5, 0,05 % Tween 20), te blokirati s 200 µl pufera za blokiranje (PBS s 20 mM Tris pH 7,5, 0,05 % Tween 20, 3,5 % suho mlijeko, 1,5 % BSA, pH do 7,5 nakon priprave), u trajanju od 1 sat, na sobnoj temperaturi. Nakon ispiranje i blokiranja može se dodati protutijela na fosfohiston H3 (Upstate USA, Inc., kunićja poliklonska), u koncentraciji od 0,5 µg/ml za blokiranje (100 µl po jažici), te inkubirati 2 sata na sobnoj temperaturi. Jažice se može ponovno ispirati kako bi se uklonilo nevezano primarno protutijelo, te se može dodati 100 µl sekundarnih protutijela konjugiranih s alkalnom fosfatazom, u koncentraciji od 0,3 mg/ml (Pierce, kozji protukunićji IgG (HOURS+L)), prilikom blokiranja, u trajanju od 1 sat, na sobnoj temperaturi. Jažice se može ispirati 5 × kako bi se uklonilo nevezano sekundarno protutijelo, te ponovno isprati 3 × samo PBS-om kako bi se uklonilo detergente. Zatim se u jažice doda 100 µl supstrata za alkalnu fosfatazu (Pierce 1-Step pNPP). Ploče se može zaštititi od svijetla, te 1 sat inkubirati na sobnoj temperaturi. OD se može očitati na čitaču mikroploča Molecular Devices Vmax Kinetic, na 405 nm. Odnos OD (optička gustoća) spojem obrađenog uzorka i uzorka obrađenog samo s Nocodazole (približno 100 % za mitozu ili ukidanje) može se izraziti u kao postotak, te kvantificira postotak ukidanja nadzorne točke. Koncentracija u kojoj spoj uzrokuje 50 %-tno ukidanje nadzorne točke može se zvati EC50. Sirove vrijednosti OD može se grafički prikazati u Excel-u, a vrijednost EC50 može se dobiti softverom Kaleidograph. Jaki signal dolazi iz stanica obrađenih samo s Nocodazole, i jednak je 100 % mitoze u ovom ispitivanju. Kontrolni uzorci obrađeni s Camptothecin� + Nocodazole daju slabi signal, što ukazuje da nema mitoze, te stoga ni ukidanja nadzorne točke. Kada se doda potentne inhibitore Chk1 stanicama obrađenim s Camptothecin uz Nocodazole, može se dobiti jak signal (općenito dozno-ovisno), zbog ukidanja aktivnosti nadzorne točke uzrokovanog kombiniranom obradom.

Primjeri, gore, ilustriraju spojeve Formule I i ispitivanja koja se može lako provesti radi određivanja razine njihove aktivnosti protiv različiti kinaznih kompleksa. Bit će očigledno da se takva ispitivanja ili druga pogodna ispitivanja poznata u struci može upotrijebiti za odabiranje inhibitora sa željenom razinom aktivnosti protiv odabrane mete.

Primjere gore opisanih spojeva može se formulirati u farmaceutske pripravke prema sljedećim općim primjerima.

Parenteralni pripravak

Kako bi se načinilo parenteralni farmaceutski pripravak pogodan za primjenu injekcijom 100 mg soli topive u vodi spoja Formule I ili II se može otopiti u DMSO-u, te miješati s 10 ml 0,9 % sterilne fiziološke otopine. Smjesu se može uključiti u oblik jedinice doziranja pogodan za primjenu injekcijom.

Oralni pripravak

Kako bi se načinilo farmaceutski pripravak za oralni unos 100 mg spoja Formule I ili II se može miješati s 750 mg laktoze. Smjesu se može uključiti u oralnu jedinicu doziranja, poput tvrde želatinske kapsule, koja može biti pogodna za oralnu primjenu.

Polazni materijali koje se upotrebljava u primjerima dostupni su na tržištu i/ili ih se može pripraviti tehnikama poznatim u struci. Slobodne baze i soli pripravljenih polaznih materijala i međuprodukata upotrebljava se međusobno zamjenjivo, te su naznačeni. Slobodne baze dobije se dodavanjem tercijarne baze soli, uz kromatografiju na silikagelu dobivene slobodne baze, po potrebi. Soli se dobije dodavanjem ekvivalentne količine odgovarajuće kiseline slobodnoj bazi u mulju ili otopini.

Dobivanje specifičnih poželjnih spojeva prema ovom izumu opisano je detaljno u sljedećim primjerima. Stručnjak u ovom području tehnike shvatit će da se opisane kemijske reakcije može lako prilagoditi za dobivanje niza drugih inhibitora kinaza prema ovom izumu. Kao primjer, sintezu spojeva koji nisu dani kao primjeri prema ovom izumu može se uspješno provesti modifikacijama očiglednim stručnjacima u ovom području tehnike, npr. odgovarajućih zaštitnih ometačkih skupina, zamjenom s drugim pogodnim reagensima poznatim u struci, ili rutinskim modificiranjem reakcijskih uvjeta. Alternativno će druge reakcije otkrivene u ovoj specifikaciji ili poznate u struci biti očigledne kao primjenjive u dobivanju drugih spojeva prema ovom izumu.

U primjerima opisanim niže, ukoliko se drugačije ne naznači, sve temperature su iznijete u °C, a svi udjeli i postoci su težinski. Reagensi su dobavljeni od komercijalnih dobavljača, poput Aldrich Chemical Company ili Lancaster Synthesis Ltd., te ih se upotrebljava bez daljnjeg pročišćavanja, ukoliko se drugačije ne naznači. Tetrahidrofuran (THF) destiliran iz kalcijevog hidrida i N,N-dimetilformamida (DMF) dobavljeni su od strane firme Aldrich, u Sure seal bocama, te upotrijebljeni kako su primljeni. Sva otapala pročišćena su standardnim postupcima, dobro poznatim stručnjacima u ovom području tehnike, ukoliko se drugačije ne naznači.

Reakcije iznijete niže općenito se provodi pod pozitivnim tlakom argona ili u epruveti za sušenje, na temperaturi okoliša (ukoliko se drugačije ne navede), u bezvodnim otapalima, a reakcijske tikvice su opremljene gumenim pregradama za uvođenje supstrata i reagensa putem injekcije. Stakleno posuđe osušeno je u peći i/ili je osušeno grijanjem. Analitičku tankoslojnu kromatografiju (TLC) provodi se na pločama silikagela 60 F 254 Analtech (0,25 mm) na staklenoj podlozi, uz eluiranje uz odgovarajuće odnose otapala (vol./vol.), te je napomenuta gdje je to bilo potrebno. Reakcije su ispitane TLC-om i prekinute kada je procijenjeno da je polazni materijal potrošen.

Vizualiziranje TLC ploča provedeno je pomoću jodne komore, UV, uz sprejanje p-anisaldehidom kao reagensom ili fosfomolibdenskom kiselinom kao reagensom (Aldrich Chemical 20 %, težinski, u etanolu), uz ninhidrin kao reagens, te aktivaciju grijanjem. Dorade se u pravilu provodi udvostručavanjem reakcijskog volumena reakcijskim otapalom ili ekstrakcijskim otapalom, te ispiranjem naznačenim vodenim otopinama, uz upotrebu 25 %, volumno, ekstrakcijskog volumena, ukoliko se drugačije ne naznači. Otopine produkta osuši se preko bezvodnog Na2SO4 ili MgSO4 prije filtriranja i otparavanja otapala pod sniženim tlakom na rotacijskom otparivaču, što je naznačeno kao uklanjanje otapala u vakuumu. Flash-kromatografiju na stupcu (Still i suradnici: J. Org. Chem., 43, 2923, (1978.)) provodi se flash-silikagelu Bakerovog stupnja finoće (47-61 µm), uz odnos silikagel/sirovi materijal od približno 20:1 do 50:1, ukoliko se drugačije ne navede. Hidrogeniranje se provodi pod tlakom naznačenim u primjerima ili pod atmosferskim tlakom.

1H-NMR spektri zabilježeni su na Brukerovom instrumentu, uz rad na 300 MHz, 400 MHz ili 500 MHz, a 13C-NMR spektri zabilježeni su, uz rad na 75 MHz. NMR spektri dobiveni su kao otopine u CDCl3 (zabilježeno u ppm), uz kloroform kao referentni standard (7,25 ppm i 77,00 ppm) ili DMSO-d6 (2,50 ppm i 39,51 ppm) ili CD3OD (3,4 ppm i 4,8 ppm i 49,3 ppm), ili uz interni tetrametilsilan (0,00 ppm), po potrebi. Druga otapala za NMR upotrebljava se po potrebi. Kada se bilježe multipliciteti signala upotrebljavaju se sljedeće kratice: s (singlet), d (dublet), t (triplet), m (multiplet), br (proširen), dd (dublet dubleta), dt (dublet tripleta). Konstante sprezanja, kada su dane, zabilježene su u Hertzima (Hz).

U ovoj specifikaciji može se sljedeće kratice upotrebljavati: Et2O (dietil-eter); DMF (N,N-dimetilformamid); DMSO (dimetil-sulfoksid); MeOH (metanol); EtOH (etanol); EtOAc (etil-acetat); THF (tetrahidrofuran); Ac (acetil); Me (metil); Et (etil); te Ph (fenil).

PRIMJERI

Primjer 1

7-piridin-3-il-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 6-amino-2-metil-3-nitrobenzojeve kiseline 1(a)

5-metil-6-nitro-1H-benzo[d][1,3]oksazin-2,4-dion (8 g, 36,0 mmol), dobiven iz 2-amino-6-metilbenzojeve kiseline (Aldrich), kao što je opisano u N.A. Abood i suradnici: Bioorganic & Med. Chem. Lett., 7, 2105-2108, (1997.) i natrijevog karbonata (3,82, 36,0 mmol), miješa se u metanolu (180 ml, 0,1 M) 30 minuta na 0 °C, te 3 sata na temperaturi okoliša. Jako kiselu ionskoizmjenivačku smolu (Dowex� 50 WX4-200) dodaje se do neutralnog pH, a otopinu filtrira. Otapalo se ukloni pod sniženim tlakom, a kromatografijom na silikagelu (60:40 heksan/etil-acetat) dobije se Međuprodukt 1(a) (6,59 g) u prinosu od 87 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 7,88 (d, 1H, J = 9,1Hz), 6,65 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 6,55 (s, 2H), 3,86 (s, 3H), 2,38 (s, 3H).

LCMS: [M – H]+ 209,1.

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 6-brom-2-metil-3-nitrobenzojeve kiseline 1(b)

Međuprodukt 1(a) (0,29 g, 1,38 mmol) doda se u ledeno hladnu otopinu HBr (30 % u octenoj kiselini, 1,6 ml) i vodu (3,0 ml). Ukapa se natrijev nitrit (0,103 g, 1,5 mmol) u vodi (2,0 ml), a smjesu miješa 30 minuta na 0 °C. Suvišnu dušičnu kiselinu eliminira se dodatkom uree. Otopinu diazonijeve soli doda se u smjesu CuBr (0,6 g, 4,18 mmol), HBr (30 % u octenoj kiselini, 3,5 ml) i vode (5,0 ml) na 35 °C, a reakcijsku smjesu grije 1,5 sati na 80 °C. Dobiveni talog se filtrira i ispere vodom kako bi se dobilo Međuprodukt 1(b) (0,307 g) u prinosu od 81 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 7,99 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,85 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 3,94 (s, 3H), 2,39 (s, 3H)

Korak 3 Dobivanje metilnog estera 5-brom-1H-indol-4-karboksilne kiseline 1(c)

Međuprodukt 1(b) (2,6 g, 9,5 mmol) otopi se u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (0,5 M, 20 ml). N,N-dimetilformamid-dimetil-acetal (3,0 ekv., 3,8 ml, 28,5 mmol) doda se u atmosferi argona na temperaturi okoliša, uz miješanje. Smjesu se grije 5 sati na 130 °C, te ohladi do temperature okoliša. N,N-dimetilformamid i neizreagirani N,N-dimetilformamid-dimetil-acetal ukloni se pod sniženim tlakom (35 °C, približno 6,7 hPa (5 mmHg)). Doda se toluen (~50 ml), a hlapive tvari ukloni u vakuumu. Sirovi enamin otopi se u N,N-dimetilformamidu (0,2 M, 50 ml), te se doda Ra/Ni (~300 mg). Reakcijsku smjesu miješa se 7 sati u atmosferi vodika, filtrira preko Celite-a, te koncentrira. Kromatografijom na silikagelu (80:20 heksan/etil-acetat) dobije se Međuprodukt 1(c) (1,1 g) u prinosu od 46 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,54 (s, 1H), 7,51 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,49 (dd, 1H, J = 8,5, 0,8 Hz), 7,33 (dd, 1H, J = 8,7 Hz), 6,50-6,47 (m, 1H), 3,92 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 252,1.

Korak 4 Dobivanje metilnog estera 5-brom-3-formil-1H-indol-4-karboksilne kiseline 1(d)

Prethodno pomiješani Vilsmeierov reagens, koji je POCl3 (0,53 ml, 5,7 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,2 ml, 15,6 mmol), ukapa se na 0 °C u Međuprodukt 1(c) (0,66 g, 2,6 mmol) u bezvodnom CH2Cl2 (13 ml, 0,2 M), uz snažno miješanje. Smjesu se miješa 30 minuta na temperaturi okoliša, ugasi vodenom otopinom natrijevog acetata (2,0 M, 10 ml), te neutralizira čvrstim Na2CO3. Smjesu se razdijeli između etil-acetata (50 ml) i H2O (10 ml). Slojeve se razdvoji, a vodeni ekstrahira etil-acetatom (1 × 20 ml). Organske slojeve se pomiješa, ispere slanom vodom, osuši preko Na2SO4, te koncentrira kako bi se dobilo Međuprodukt 1(d) (0,51 g) u prinosu od 69 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,54 (s, 1H), 9,80 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,59-7,48 (m, 2H), 3,91 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 306,0.

Korak 5 Dobivanje metilnog estera 3-formil-5-piridin-3-il-1H-indol-4-karboksilne kiseline 1(e)

Otopinu Međuprodukta 1(d) (0,05 g, 0,18 mmol), piridin-3-boronske kiseline (0,034 g, 0,27 mmol), paladijevog(II) acetata (0,004 g, 0,0018 mmol), trifenilfosfina (0,009 g, 0,035 mmol) i trietilamina (0,08 ml, 0,55 mmol) u N,N-dimetilformamidu (0,7 ml, 0,25 M) grije se 96 sati na 100 °C. Reakcijsku smjesu se ohladi i filtrira kroz Celite, gdje se kromatografijom na stupcu dobije Međuprodukt 1(e) (0,015 g) u prinosu od 30 %.

LCMS: [M + H]+ 281,1.

Korak 6 Dobivanje naslovnog spoja: 7-piridin-3-il-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

Otopinu Međuprodukta 1(e) (0,015 g, 0,054 mmol), hidrazina (0,008 ml, 0,135 mmol) i octene kiseline (0,020 ml, 2 %) u bezvodnom metanolu (1,0 ml, 0,05 M) grije se 24 sata na 80 °C. Reakcijsku smjesu se ohladi na temperaturu okoliša, a naslovni spoj (0,0035 g) se dobije pročišćavanjem preparativnim HPLC-om, u prinosu od 23 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,03 (s, 1H), 9,97 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,65 (d, 1H, J = 4,6 Hz), 8,09 (d, 1H, J = 8,3Hz), 7,77 (d, 1H, J = 2,7 Hz), 7,76-7,68 (m, 1H), 7,61 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,54 (s, 1H), 7,01 (d, 1H, J = 8,4Hz).

LCMS: [M + H]+ 263,1.

Primjer 2

8-amino-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 2-metil-3,5-dinitrobenzojeve kiseline 2(a)

Koncentriranu sumpornu kiselinu (0,5 ml) polako se dodaje na temperaturi okoliša, uz miješanje, 2-metil-3,5-dinitrobenzojevoj kiselini (5,22 g, 23,06 mmol) u bezvodnom metanolu (200 ml). Nakon refluksiranja preko noći u atmosferi argona utvrđeno je da je reakcija približno 50 % gotova. Toluen (100 ml) se upotrijebi za azeotropiranje H2O koja nastaje u reakciji, te se doda svježi bezvodni metanol (300 ml) i H2SO4 (0,5 ml), a smjesu ponovno refluksira preko noći u atmosferi argona, te se hlapive komponente koncentrira u vakuumu. Doda se etil-acetat i 5 % vodena otopina NaOH, uz miješanje, a produkt ekstrahira u etil-acetat. Etil-acetat se zatim 2 × ispere, svaki put 5 % vodenom otopinom NaOH i zasićenom vodenom otopinom NaHCO3, 1 × slanom vodom, te osuši s Na2SO4 kako bi se dobilo Međuprodukt 2(a) (4,65 g, 19,37 mmol) u obliku bijele krutine, u prinosu od 84 %.

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 6-amino-1H-indol-4-karboksilne kiseline 2(b)

U modificiranom postupku opisanom u J.W. Coe i suradnici: Tetrahedron Letters, 37 (34), 6045-6048, (1996.) Međuprodukt 2(a) (268 mg, 1,12 mmol) otopi se u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (0,56 ml), te se doda N,N-dimetilformamid-dimetil-acetal (0,445 ml, 3,35 mmol) u atmosferi Ar, uz miješanje. Smjesu se grije preko noći na 120 °C, a zatim se neizreagirani N,N-dimetilformamid-dimetil-acetal ukloni u vakuumu (35-40 °C, približno 6,7 hPa (5 mmHg)). Dobivenom crvenom enaminu doda se bezvodni N,N-dimetilformamid (približno 10 ml) i 10 % paladij na ugljiku (230 mg), a smjesu 5 sati hidrogenira pod tlakom od 7,3 kPa (55 psi). Pd kao katalizator filtrira se kroz diatomejsku zemlju, te se doda H2O u filtrat. Vodenu komponentu se zatim više puta ekstrahira etil-acetatom, a pomiješane ekstrakte osuši s Na2SO4, filtrira, a hlapive komponente ukloni u vakuumu kako bi se dobilo sirovi Međuprodukt 2 (90 mg) u obliku smeđeg stakla. Pročišćavanje se provodi eluiranjem kroz čep od silikagela 20 % etil-acetatom i 20 % etanolom u heksanu, čime se dobije Međuprodukt 2(b) (45 mg, 0,24 mmol) u obliku smeđe krutine, u prinosu od 21 %.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: 8-amino-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

(hidrokloridna sol)

Uz hlađenje ledenom kupelji u atmosferi argona Međuproduktu 2(b) (45 mg, 0,24 mmol) u bezvodnom CH2Cl2 (0,3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,3 ml) ukapa se prethodno pomiješani Vilsmeierov reagens (0,1 ml), koji je POCl3 (0,47 ml) u N,N-dimetilformamidu (0,77 ml). Nakon što se makne ledenu kupelj smjesu se miješa 30 minuta, zatim se reakcijsku smjesu ponovno ohladi u ledenoj kupelji, te se doda još Vilsmeierovog reagensa (0,1 ml). Nakon što se makne ledenu kupelj reakcijsku smjesu se miješa 30 minuta, te izlije na led. Doda se etil-acetat, a zatim zasićena vodena otopina NaHCO3. Produkt se zatim ekstrahira u etil-acetat, ispere slanom vodom, osuši s Na2SO4, te filtrira kako bi se dobilo (prema LCMS) di-N-formilirani 3-formil-1H-indol-4-karboksilne kiseline metilni ester (37 mg, 0,13 mmol) u obliku smeđeg stakla, koje se zatim otopi u bezvodnom metanolu (2,2 ml). Doda se octena kiselina (0,022, 0,384 mmol) i H2NNH2·H2O (0,038 ml, 0,78 mmol), a smjesu refluksira 2 sata. Nakon što se ukloni hlapive komponente u vakuumu sirovi produkt otopi se u H2O, te filtrira, vodu se liofilizira, a dobiveno žuto staklo (36 mg) kromatografira na silikagelu, uz eluiranje 10 % metanolom u CH2Cl2. Frakcije za koje je procijenjeno da su čiste se prikupi, a produkt u metanolu zakiseli s 1 M HCl. Hlapive komponente ukloni se u vakuumu uz upotrebu acetonitrila za azeotropiranje preostale vode, čime se dobije naslovni spoj (4 mg, 0,016 mmol) u obliku smeđe krutine, u prinosu od 7 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,99 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,52-7,41 (m, 2H).

HRMS [MALDI M + H]+ izračunato za C10H8N4O: 201,0771, opaženo: 201,0776.

Altenativni postupak dobivanja Međuprodukta 2(b), hidroklorida

[image]

Korak 4 Dobivanje metilnog estera 2-(2,2-dimetoksietil)-3,5-dinitrobenzojeve kiseline 2(c)

[Pažnja!: 2-(2-dimetilaminovinil)-3,5-dinitrobenzojeve kiseline metilni ester kojeg se dobije tijekom (prvi korak u Koraku 4) dobivanja enamina može dovesti do eksplozivne razgradnje!]

2-metil-3,5-dinitrobenzojevu kiselinu (100 g, 0,442 mol) otopi se u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (1 M, 400 ml). u atmosferi argona 10 minuta se dodaje N,N-dimetilformamid-dimetil-acetal (188 ml, 1,33 mol) na temperaturi okoliša, uz miješanje. Smjesu se grije 5 sati na 110 °C iza zaklona, te ohladi na temperaturu okoliša. N,N-dimetilformamid i neizreagirani N,N-dimetilformamid-dimetil-acetal ukloni se pod sniženim tlakom (35 °C, približno 6,7 hPa (5 mmHg)). Doda se toluen (~50 ml), a hlapive tvari ukloni u vakuumu. 2-(2-dimetilaminovinil)-3,5-dinitrobenzojeve kiseline metilni ester, izdvojen u obliku tamnocrvene krutine, pomiješa se s bezvodnim metanolom (880 ml), te se 10 minuta dodaje klortrimetilsilan (140 ml, 1,10 mol). Otopinu se 20 sati grije na refluksu (ulja kupelj, 67-70 °C) u atmosferi argona, ohladi do temperature okoliša, a smjesu koncentrira u vakuumu do približno 100 ml. Istaloženu krutinu prikupi se filtriranjem, te ispere hladnim metanolom (100 ml). Tamnosmeđu krutinu osuši se u vakuumu, triturira acetonom (100 ml), ponovno prikupi filtriranjem, te ispere s dietil-eterom (150 ml) kako bi se dobilo Međuprodukt 2(c) (79 g). Matični lug iz prvog taloženja i različitih trituriranja se pomiješa, te koncentrira. Dodatni Međuprodukt 2(c) (21 g) se zatim prekristalizira iz smjese cikloheksan/etil-acetat (9:1), čime se dobije druga šarža. Dobiveni matični lug se ponovno koncentrira u vakuumu, a treću šaržu Međuprodukta 2(c) (4 g) prekristalizira iz smjese aceton/H2O (6:4). Kombinirani prinos za sve tri šarže Međuprodukta 2(c) (104 g) je 75 %.

Korak 5 Dobivanje hidroklorida metilnog estera 6-amino-1H-indol-4-karboksilne kiseline 2(b)

Međuprodukt 2(c) (20 g, 63,6 mmol) otopi se u bezvodnom etil-acetatu (350 ml), te se doda 10 % paladij na ugljiku (7,4 g, 6,36 mmol) u atmosferi argona. Smjesu se hidrogenira pod tlakom od 101, 3 kPa (1 atm), dok se LCMS-om ne procjeni da je reakcija gotova. Pd kao katalizator se ukloni filtriranjem kroz diatomejsku zemlju, a filtrat koncentrira u vakuumu. Sirovi 3,5-diamino-2-(2,2-dimetoksietil)benzojeve kiseline metilni ester otopi se u bezvodnom metanolu (40 ml), te se doda 4,0 M HCl u dioksanu (160 ml). Smjesu se 1 sat miješa na temperaturi okoliša. Istaloženu krutinu prikupi se filtriranjem, te ispere s CH2Cl2 i dietil-eterom, te osuši u vakuumu kako bi se dobilo Međuprodukt 2(b) (hidroklorid) (11,85 g) u obliku sive krutine. Filtrat se koncentrira, te se istaloži još Međuprodukta 2(b), hidroklorida (1,48 g). Kombinirani prinos za obje šarže Međuprodukta 2(b) (13,33 g) je 92 %.

Primjer 3

N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-il)acetamid

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 5-acetilamino-2-metil-3-nitrobenzojeve kiseline 3(a)

Metilnom esteru 5-amino-2-metil-3-nitrobenzojeve kiseline (428 mg, 2,04 mmol), dobivenom kao što je opisano u Cannon i suradnici: J. Med. Chem., 27, 386-389, (1984.), u CH2Cl2 (4 ml), doda se trietilamin (1,71 ml, 12,2 mmol), acetanhidrid (0,77 ml, 8,14 mmol) i 4-(dimetilamino)piridin (30 mg, 0,25 mmol), uz miješanje na temperaturi okoliša. Nakon miješanja preko noći LCMS ukazuje na smjesu mono- i diacetiliranog produkta. Doda se zasićena vodena otopina NaHCO3, a smjesu ponovno ostavi miješati preko noći. Doda se još CH2Cl2, a slojeve razdvoji. Organski sloj se koncentrira, te se doda etil-acetat. Organski sloj ispere se zasićenom vodenom otopinom NaHCO3, s H2O, zasićenom vodenom otopinom KHSO4, te slanom vodom, osuši (Na2SO4), filtrira, te otpari do ulja, koje se zatim ponovno otopi u minimalnoj količini etil-acetata. Doda se heksan, a dobiveni talog izdvoji u obliku žućkastosmeđe krutine (469 mg), koju se zatim pročisti na silikagelu, uz eluiranje 1:2 smjesom etil-acetat/heksan, a zatim 1:1 etil-acetat/heksan, kako bi se dobilo Međuprodukt 3(a) (133 mg, 0,53 mmol) u obliku krutine krem-boje, u prinosu od 26 %. (Također se izdvoji 5-diacetilamino-2-metil-3-nitrobenzojeve kiseline metilni ester (248 mg, 0,84 mmol).)

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,46 (brs, 1H, izmjene), 8,34 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 3,89 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).

LCMS:[M – H]– 251,3.

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 6-acetilamino-1-hidroksi-1H-indol-4-karboksilne kiseline 3(b)

Međuproduktu 3(a) (117 mg, 0,46 mmol) u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (0,5 ml) doda se, u atmosferi Ar, uz miješanje, N,N-dimetilformamid-dimetil-acetal (0,185 ml, 1,39 mmol). Smjesu se grije 5-6 sati na 120 °C, a zatim se neizreagirani N,N-dimetilformamid-dimetil-acetal ukloni u vakuumu (35-40 °C, približno 6,7 hPa (5 mmHg)). Dobivenom crvenom enaminu doda se bezvodni N,N-dimetilformamid (približno 20 ml), etil-acetat (10 ml) i 10 % paladij na ugljiku (150 mg). Smjesu se 4 sata hidrogenira pod tlakom od 7,3 kPa (55 psi), te se N,N-dimetilformamid ukloni u vakuumu, doda se metanol, zatim se Pd kao katalizator ukloni filtriranjem. Hlapive komponente ponovno se ukloni u vakuumu. Nakon trituriranja dietil-eterom triturat se otpari kako bi se dobilo sirovi Međuprodukt 3(b) (70 mg, 0,28 mmol) u obliku žućkastosmeđe krutine, u prinosu od 61 %, koju se prenese dalje bez daljnjeg pročišćavanja.

LCMS: [M – H]– 247,3.

Korak 3 Dobivanje metilnog estera 6-acetilamino-1H-indol-4-karboksilne kiseline 3(c)

Međuproduktu 3(b) (39 mg, 0,16 mmol) u octenoj kiselini (1 ml) doda se cinkov prah (206 mg, 3,15 mmol), uz miješanje. Smjesu se grije 30 minuta na 50 °C, te 30 minuta na 65 °C, za koje vrijeme smjesa pozeleni. Nakon hlađenja do sobne temperature doda se metanol, a smjesu filtrira kroz diatomejsku zemlju, uz ispiranje nekoliko puta metanolom. Nakon otparavanja dobivenu žućkastosmeđu krutinu se triturira metanolom, a hlapive komponente triturata ukloni u vakuumu kako bi se dobilo sirovi Međuprodukt 3(c) (35 mg, 0,15 mmol) u obliku žućkastosmeđe krutine, u sirovom prinosu od 94 %, koju se zatim prenese bez daljnjeg pročišćavanja.

LCMS: [M – H]– 231,2.

Korak 4 Dobivanje metilnog estera 6-acetilamino-3-formil-1H-indol-4-karboksilne kiseline 3(d)

Uz hlađenje ledenom kupelji u atmosferi argona se 0,2 ml prethodno pomiješanog Vilsmeierovog reagensa, koji je POCl3 (0,47 ml) u N,N-dimetilformamidu (0,77 ml) doda u 2 jednaka obroka Međuproduktu 3(c) (35 mg, 0,15 mmol) u 1:1 smjesi CH2Cl2/N,N-dimetilformamid (1 ml). Nakon 30 minuta reakcijsku smjesu se ugasi vodom, te ekstrahira etil-acetatom. Vodeni sloj se zatim 5 % vodenom otopinom NaOH zaluži do približno pH 8, te ponovno ekstrahira etil-acetatom. Prikupljene etil-acetatne ekstrakte se osuši s Na2SO4, filtrira, te otpari kako bi se dobilo Međuprodukt 3(d) (19 mg, 0,07 mmol) u obliku žute krutine, u sirovom prinosu od 44 %, koju se zatim prenese bez daljnjeg pročišćavanja.

LCMS: [M – H]– 259,3.

Korak 5 Dobivanje naslovnog spoja: N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

Međuproduktu 3(d) (19 mg, 0,07 mmol) u bezvodnom metanolu (2,0 ml) doda se octena kiselina (0,006 ml, 0,1 mmol) i H2NNH2·H2O (11 mg, 0,22 mmol), a smjesu refluksira približno 1 sat, nakon čega se hlapive komponente ukloni u vakuumu, a dobiveno žuto staklo ponovno otopi u metanolu. Nakon prekristaliziranja iz smjese metanol/dietil-eter naslovni spoj (9 mg, 0,04 mmol) se dobije u obliku žutog praha, u prinosu od 51 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,60 (br s, 1H, izmjene), 10,10 (s, 1H, izmjene), 9,90 (s, 1H, izmjene), 8,00 (s, 1H), 7,45 (br s, 2H), 7,30 (s, 1H), 1,90 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 243,1, [M + Na]+ 265,1.

Primjer 4

2,2,2-trifluor-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Uz miješanje se trifluoracetanhidrid (0,032 ml, 0,23 mmol) ukapa trietilaminu (0,088 ml, 0,63 mmol) i naslovnom spoju iz Primjera 2 (slobodna baza) (43 mg, 0,21 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2 ml). Nakon 2,5 sati doda se još trifluoracetanhidrida (0,032 ml, 0,23 mmol) da se dovrši reakciju, a zatim se doda dietil-eter da se istaloži smeđa krutina (25 mg), koju se odbaci. Triturat se koncentrira, te podvrgne preparativnom HPLC-u (MetaChem Metasil AQ C18 reverzna faza 10 µm, 120 Ĺ, 250 × 21,2 mm stupac, uz eluiranje s CH3CN/0,1 %TFA u H2O, pri brzini protoka od 20 ml/min, uz upotrebu gradijenta 5-95 % CH3CN, u trajanju od 20 minuta) kako bi se, nakon izdvajanja, dobilo naslovni spoj (3,7 mg, 0,01 mmol) u obliku smeđe krutine, u prinosu od 6 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,01 (s, 1H), 11,41 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,61 (s, 1H).

LCMS: [M – H]– 295,2.

Primjer 5

7-amino-2-fenil-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 3-amino-2-brombenzojeve kiseline 5(a)

Metilni ester 2-brom-3-nitrobenzojeve kiseline (12,9 g, 49,5 mmol) (dobije se iz 2-amino-3-nitrobenzojeve kiseline, kao što je opisano u E.S. Webber i suradnici, vidjeti patentnu prijavu broj WO 01/16136 A2) i SnCl2 (42 g, 223 mmol) refluksira se 2 sata u metanolu (225 ml, 0,2 M) i H2O (5,3 g, 243 mmol). Nakon hlađenja na temperaturi okoliša doda se diatomejska zemlja (20 g) i diklormetan (1 l), a zatim 3 N vodena otopina natrijevog hidroksida (150 ml), uz snažno miješanje. Smjesu se filtrira, a organsku fazu ispere zasićenom vodenom otopinom natrijevog klorida. Organsku otopinu osuši se preko natrijevog sulfata, te filtrira, a sve hlapive tvari ukloni pod sniženim tlakom kako bi se dobilo Međuprodukt 5(a) (11,4 g) u prinosu od 98 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 7,12 (dd, 1H, J = 8,1, 7,5 Hz), 6,93 (dd, 1H, J = 8,1, 1,6 Hz), 6,80 (dd, 1H, J = 7,4, 1,6 Hz), 5,57 (s, 2H), 3,81 (s, 3H).

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 3-acetilamino-2-brombenzojeve kiseline 5(b)

Međuprodukt 5(a) (2,21 g, 9,6 mmol) i acetanhidrid (1,82 ml, 19,2 mmol) miješa se 24 sata u CH2Cl2 (100 ml, 0,1 M) na 22 °C. Hlapive tvari ukloni se u vakuumu, a kromatografijom na silikagelu dobije Međuprodukt 5(b) (2,08 g) u prinosu od 79 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 9,58 (s, 1H), 7,70 (dd, 1H, J = 6,9, 2,7 Hz), 7,50-7,41 (m, 2H), 3,86 (s, 3H), 2,09 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 272,0, 274,0

Korak 3 Dobivanje metilnog estera 3-acetilamino-2-brom-6-nitrobenzojeve kiseline 5(c)

Međuprodukt 5(b) (1,0 g, 3,7 mmol) nitrira se na način analogan onom u Koraku 1 u Primjeru 2. Međuprodukt 5(c) (1,0 g, 89 %) dobije se kromatografijom na silikagelu.

1H-NMR (d6-DMSO): � 9,83 (s, 1H), 8,3 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 8,15 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 3,93 (s, 3H), 2,20 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 315,0, 317,0

Korak 4 Dobivanje metilnog estera 3-acetilamino-6-nitro-2-feniletinilbenzojeve kiseline 5(d)

Međuprodukt 5(c) (0,85 g, 2,7 mmol) acetilira se na način analogan onom u Koraku 3 u Primjeru 6 kako bi se dobilo Međuprodukt 5(d) (0,4 g, 44 %) kromatografijom na silikagelu.

1H-NMR (d6-DMSO): � 9,93 (s, 1H), 8,32-8,25 (m, 2H), 7,65-7,59 (m, 2H), 7,53-7,47 (m, 3H), 3,97 (s, 3H), 2,25 (s, 3H).

LCMS: [M – H]+ 337,1.

Korak 5 Dobivanje metilnog estera 5-nitro-2-fenil-1H-indol-4-karboksilne kiseline 5(e)

Međuprodukt 5(d) (0,096 g, 0,28 mmol), bakreni jodid (0,076 g, 0,4 mmol) i N,N,N,N-tetrametilgvanidin (0,36 ml, 2,8 mmol) miješa se 2 sata u smjesi dimetilformamid/dioksan (1:4, 2 ml, 0,15 M) na 90 °C. Reakcijsku smjesu ohladi se do temperature okoliša, te izlije u etil-acetatu (30 ml). Organski sloj ispere se uzastopce zasićenom otopinom amonijevog klorida (3 × 5 ml), s H2O (2 × 5 ml), te zasićenom vodenom otopinom natrijevog klorida (2 × 5 ml), osuši preko natrijevog sulfata, te filtrira, a hlapive tvari ukloni u vakuumu. Kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 5(e) (0,073 g) u prinosu od 86 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,50 (s, 1H), 7,98-7,88 (m, 3H), 7,69-7,40 (m, 4H), 7,13 (široki s, 1H), 3,97 (s, 3H).

LCMS: [M – H]+ 295,1.

Korak 6 Dobivanje metilnog estera 5-amino-2-fenil-1H-indol-4-karboksilne kiseline 5(f)

Na način analogan onom u dobivanju u Primjeru 2 (Korak 5), Međuprodukt 5(e) (0,072 g, 0,24 mmol) se hidrogenira kako bi se dobilo Međuprodukt 5(f) (0,06 g, 95 %).

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,68 (s, 1H), 7,86 (d, 2H, J = 7,4 Hz), 7,52-7,43 (m, 3H), 7,31 (dd, 1H, J = 7,4, 7,2 Hz), 7,20 (s, 1H), 6,83 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 3,94 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 235,1.

Korak 7 Dobivanje naslovnog spoja: 7-amino-2-fenil-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

Provodi se analogno onom u koracima 4 i 5 u Primjeru 3, Međuprodukt 5(f) (0,055g, 0,21 mmol) se formilira, te ciklizira kako bi se dobilo naslovni spoj (0,012g, 21 %).

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,17 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,95-7,84 (m, 3H), 7,74 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,55-7,47 (m, 2H), 7,42 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 7,37 (dd, 1H, J = 7,4, 7,3 Hz), 5,91 (s, 2H).

LCMS: [M + H]+ 277,1

Primjer 6

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilacetamid

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 2-brom-3,5-dinitrobenzojeve kiseline 6(a)

Koncentriranu sumpornu kiselinu (20 ml) polako se dodaje to 2-brom-5-nitrobenzojeve kiseline metilni ester (20,52 g, 78,91 mmol), uz miješanje. Nakon nekoliko minuta doda se dimeća dušična kiselina (20 ml), a smjesu zatvori, te grije približno 60 sati na 40°C, te se tikvicu ohladi do temperature okoliša, pažljivo otvori, a rekcijsku smjesu izlije u ledenu vodu i etil-acetat. Produkt se ekstrahira u etil-acetat, te 2 × ispere s H2O, 2 × zasićenom vodenom otopinom NaHCO3, te slanom vodom, osuši (Na2SO4), te filtrira kako bi se dobilo Međuprodukt 6(a) (15,64 g, 51,26 mmol) u obliku krutine krem-boje, u prinosu od 65 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 9,07 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 3,98 (s, 3H).

LCMS: [M – CO2CH3]– 245,1, 247,1.

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 3,5-bisacetilamino-2-brombenzojeve kiseline 6(b)

U octenu kiselinu (250 ml) na sobnoj temperaturi doda se Međuprodukt 6(a) (15,49 g, 50,79 mmol). Smjesu se približno 10 minuta stavi u uljnu kupelj na 40 °C, te snažno miješa u atmosferi Ar dok se otopina ne izbistri. Doda se željezni prah (25,34 g, 453,72 mmol), a smjesu grije približno 6 sati na 40 °C. Smjesu se filtrira kroz diatomejsku zemlju, uz ispiranje metanolom. Prikupljeni filtrat i ispirke se otpari kako bi se dobilo narančastu krutinu, za koju je utvrđeno da je smjesa produkata (13,2 g) nepotpune redukcije nitro skupina. Ovu smjesu (13,1 g) u CH2Cl2 (48 ml) i N,N-dimetilformamidu (5 ml) se zatim obradi acetanhidridom (36 ml, 382 mmol), te miješa preko noći u atmosferi Ar. CH2Cl2 se otpari, a smjesu razdijeli između etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3. Vodeni sloj se 2 × ekstrahira etil-acetatom, a pomiješane ekstrakte uzastopce ispere 1:1 smjesom H2O/zasićena vodena otopina NaHCO3 (više ispiranja), 0,5 M vodenom otopinom HCl (× 2), zasićenom vodenom otopinom NaHCO3 (× 2) i slanom vodom. Etil-acetatnu otopinu se zatim osuši (Na2SO4), filtrira, te otpari kako bi se dobilo žutu krutinu, koju se zatim triturira dietil-eterom (približno 75 ml) kako bi se dobilo smjesu acetiliranih produkata (11,4 g) u obliku žute krutine. Dio ove smjese acetiliranih produkata (5,5 g) u octenoj kiselini (17,4 ml) se zatim obradi acetanhidridom (16,5 ml, 174 mmol) i željeznim prahom (9,74 g, 174 mmol), te grije preko noći na 40°C u atmosferi Ar. Zatim se doda metanol, a reakcijsku smjesu miješa približno 1,5 sati na slobodnoj temperaturi. Zatim se doda 9:1 smjesa CH2Cl2/metanol, te se smjesu filtrira kroz diatomejsku zemlju, uz ispiranje 9:1 smjesom CH2Cl2/metanol. Prikupljeni filtrat i ispirke se otpari, te se ponovno doda metanol, a smjesu miješa približno 30 minuta, nakon čega se metanol otpari. Doda se etil-acetat, a zatim heksan da se istaloži narančastu krutinu (6,9 g), koju se prikupi. Kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje 1:1 smjesom aceton/heksan, nakon izdvajanja se dobije Međuprodukt 6(b) (4,1 g, 12,46 mmol) u obliku krutine krem-boje, u prinosu od 49 %.

Korak 3 Dobivanje metilnog estera 3,5-bisacetilamino-2-feniletinilbenzojeve kiseline 6(c)

Uz miješanje, argon se propuhuje kroz bezvodni toluen (18 ml) koji sadrži Međuprodukt 6(b) (1,08 g, 3,29 mmol). Uzastopce se doda tributilfeniletinilstanan (1,73 ml, 4,94 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladij(0) (310 mg, 0,28 mmol), te se reakcijsku smjesu još propuhuje s Ar. Nakon čvrstog zatvaranja smjesu se preko noći grije na 90 °C u atmosferi argona. Nakon hlađenja do temperature okoliša doda se H2O, te zasićena vodena otopina KHSO4, a produkt ekstrahira u etil-acetatu i izdvoji. Nakon kromatografije na silikagelu, uz eluiranje 2:3 smjesom aceton/heksan, frakcije za koje je procijenjeno da su čiste se prikupi. Opaženo je da je izdvojeni Međuprodukt 6(c) (1,14 g, 3,25 mmol) onečišćen s približno 5-10 % trifenilfosfin-oksida, te ga se prenese u sljedeći korak bez daljnjeg pročišćavanja.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,30 (s, 1H), 9,50 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,08 s, 1H), 7,63-7,51 (m, 2H, onečišćen s Ph3PO), 7,50-7,38 (m, 3H, onečišćen s Ph3PO), 3,90 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 351,1, [M + Na]+ 373,1, [M – H]– 349,1.

Korak 4 Dobivanje metilnog estera 6-acetilamino-2-fenil-1H-indol-4-karboksilne kiseline 6(d)

Nečistom Međuproduktu 6(c) (853 mg, 2,4 mmol) doda se koncentrirana sumporna kiselina (15 ml). Nakon 30 minuta miješanja smjesu se pažljivo izlije na metanol (30 ml), uz snažno vrtloženje. Doda se etil-acetat (približno 300 ml) i H2O (približno 100 ml). Vodeni sloj ekstrahira se 3 × etil-acetatom, a prikupljene ekstrakte ispere zasićenom vodenom otopinom NaHCO3 do prestanka razvijanja CO2. Produkt u etil-acetatu se zatim ispere slanom vodom, osuši (Na2SO4), filtrira, a hlapive komponente otpari kako bi se dobilo sirovi Međuprodukt 6(d) (790 mg, približno 2,4 mmol) u obliku žutog praha, kojeg se prenese bez daljnjeg pročišćavanja.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,75 (s, 1H, izmjene), 10,07 (s, 1H, izmjene), 8,33 (s, 1H), 7,90-7,80 (m, 3H), 7,66-7,23 (m, 4H, djelomično zasjenjen), 3,93 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 309,1, [M + Na]+ 331,1, [M – H]– 307,1.

Korak 5 Dobivanje naslovnog spoja: N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-ilacetamid

Sirovi Međuprodukt 6(d) (312 mg, približno 1 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2 ml) i CH2Cl2 (5 ml) obradi se Vilsmeierovim reagensom (0,9 ml) na način sličan onom opisanom za Primjer 3, Korak 4. Nakon uklanjanja CH2Cl2, podešavanja pH do približno 8 s 1 N NaOH, te uklanjanja hlapivih komponenti u vakuumu, žutu krutinu se triturira etil-acetatom i metanolom. Triturat se otpari kako bi se dobilo sirovi 6-acetilamino-3-formil-2-fenil-1H-indol-4-karboksilne kiseline metilni ester (405 mg) u obliku žute krutine onečišćene solima iz vodene otopine za gašenje. U postupku sličnom onom opisanom za Primjer 3, Korak 5, se zatim doda bezvodni metanol (15 ml), octena kiselina (0,084 ml, 1,47 mmol) i H2NNH2·H2O (0,147 ml, 3,03 mmol), a smjesu refluksira 2 sata. Hlapive komponente se otpari, a dobivenu krutinu triturira metanolom kako bi se otopilo produkt, uz zaostatanje većeg dijela netopive krutine. Triturat se otpari, a ovaj postupak ponovi. Drugi triturat otpari se kako bi se dobilo žutu krutinu (70 mg) obogaćenu produktom, koju se zatim podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje smjesi heksan/etil-acetat/etanol (4:1:1) kako bi se dobilo naslovni spoj (12 mg, 0,04 mmol) nakon izdvajanja u obliku žutog praha, u približno ukupnom prinosu od 4 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,10 (s, 1H, izmjene), 10,33 (s, 1H, izmjene), 10,06 (s, 1H, izmjene), 8,17 (s, 1H), 7,70-7,43 (m, 7H), 2,05 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 319,1, [M + Na]+ 341,1, [M – H]– 317.

Altenativni postupak dobivanja Međuprodukta 6(b)

[image]

U octenu kiselinu (10 ml) na sobnoj temperaturi doda se acetanhidrid (10,0 ml, 106 mmol), željezni prah (5,5 g, 98 mmol) i Međuprodukt 6(a) (3,0 g, 9,8 mmol). Smjesu se stavi u uljnu kupelj na 43 °C, te snažno miješa 48 sati u atmosferi argona. Gusti mulj od narančastog postane žućkastosmeđ. Doda se još octene kiseline (2 ml), acetanhidrida (2 ml, 21,2 mmol) i željeznog praha (1,0 g, 17,9 mmol), a smjesu miješa još 24 sata na 43 °C, zatim se smjesu izlije u 10 % metanol u CH2Cl2 (300 ml), te filtrira kroz diatomejsku zemlju. Filtrat se koncentrira, te se doda etil-acetat (300 ml) i H2O (300 ml). Produkt se ekstrahira u etil-acetatu, te 2 × ispere s H2O, 2 × slanom vodom, osuši (MgSO4), te filtrira. Nakon prekristaliziranja iz vrućeg etil-acetata (10 ml) prikupljanjem filtriranjem, a zatim ispiranjem krutine s CH2Cl2 (5 ml) i dietil-eterom (30 ml) dobije se Međuprodukt 6(b) (1,8 g, 5,47 mmol) u obliku bijele krutine, u prinosu od 56 %.

Primjer 7

8-amino-2-fenil-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 6-amino-2-fenil-1H-indol-4-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol) sol 7(a)

Međuprodukt 6(d) u Primjeru 6 (9,3 g, 30,2 mmol) i bezvodni 4 M HCl u dioksanu (160 ml, 604 mmol) grije se 3 sata u bezvodnom metanolu (160 ml) na refluksu, ohladi do temperature okoliša, a hlapive tvari ukloni u vakuumu. Dobivenu krutinu triturira se smjesom etil-acetat/CH2Cl2 (1:1, 50 ml), te osuši kako bi se dobilo Međuprodukt 7(a) (8,7 g) u prinosu od 95 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,26 (s, 1H), 10,10 (široko, 1H), 7,93 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 7,71 (d, 2H, J = 12,2 Hz), 7,52 (dd, 2H, J = 7,7, 7,6 Hz), 7,43-7,36 (m, 2H), 3,96 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 267,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: 8-amino-2-fenil-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

U dva koraka, analogno kao u koracima 4 i 5 u Primjeru 3, Međuprodukt 7(a) (8,7 g, 28,7 mmol) se ciklizira kako bi se dobilo naslovni spoj (5,47 g, 69 %).

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,53 (s, 1H), 10,15 (s, 1H), 7,62-7,40 (m, 6H), 6,98 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 6,65 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 5,21 (s, 2H).

LCMS: [M + H]+ 277,2.

Primjer 8

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)sukcinaminska kiselina

[image]

Sukcinanhidrid (3 ekv., 0,022 g) doda se u otopinu naslovnog spoja iz Primjera 7 (0,02 g, 0,072 mmol) u N,N-dimetilformamidu (0,7 M, 1 ml) i metanolu (2,5 M, 0,3 ml). Reakcijsku smjesu miješa 24 sata se na 22 °C, te koncentrira pod sniženim tlakom. Žutu krutinu triturira se metanolom (1,0 ml), te prikupi filtriranjem. Nakon ispiranja metanolom (4 ml) i dietil-eterom (5,0 ml) naslovni spoj (21 mg) se dobije u prinosu od 77 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,03 (s, 1H), 10,31 (s, 1H), 10,09 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,68-7,45 (m, 7H), 2,60-2,53 (m, 4H).

LCMS: [M + H]+ 377,1.

Primjer 9

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)metansulfonamid

[image]

Metansulfonil-klorid (1,5 ekv., 0,003 g) doda se u otopinu naslovnog spoja iz Primjera 7 (0,005 g, 0,018 mmol) u CH2Cl2 (0,045 M, 0,4 ml) i piridinu (0,045 M, 0,4 ml). Smjesu se miješa 24 sata na 22 °C, te koncentrira pod sniženim tlakom. Kromatografijom na silikagelu (trietilamin/metanol/CH2Cl2; 1:5:94) dobije se naslovni spoj (1,7 mg) u prinosu od 30 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,15 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 9,71 (s, 1H), 7,70-7,43 (m, 8H), 2,30 (m, 3H).

LCMS: [M + H]+ 355,1.

Primjer 10

1-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)pirolidin-2,5-dion

[image]

Trietilamin (0,18 mmol, 0,025 ml) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (0,04 mmol, 0,013 g) doda se u otopinu naslovnog spoja iz Primjera 8 (0,013 g, 0,036 mmol) u N,N-dimetilformamidu (0,05 M, 0,75 ml). Reakcijsku smjesu miješa 12 sati se na 22 °C, te koncentrira pod sniženim tlakom. Žutu krutinu triturira se metanolom (3,0 ml), prikupi filtriranjem, te ispere metanolom (4,0 ml) i dietil-eterom (5,0 ml) kako bi se dobilo naslovni spoj (5,8 mg) u prinosu od 47 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,38 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 9,71 (s, 1H), 7,74-7,42 (m, 8H), 2,79 (m, 3H).

LCMS: [M + H]+ 359,1.

Primjer 11

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid 2-metilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Trietilamin (0,030 ml, 0,22 mmol), naslovni spoj iz Primjera 7 (15 mg, 0,054 mmol) i 2-metil-ciklopropankarboksilnu kiselinu (6 mg, 0,062 mmol) miješa se u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml). Doda se O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (25 mg, 0,065 mmol), a reakcijsku smjesu miješa preko noći, te se hlapive komponente ukloni u vakuumu. Dobivenu smjesu pročisti se na silikagelu, uz eluiranje 3:2 smjesom heksan/etil-acetat. Najčišće frakcije se pomiješa, te se nakon uklanjanja otapala dobivenu krutinu triturira dietil-eterom kako bi se dobilo naslovni spoj (7 mg, 0,020 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 36 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,03 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 10,27 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,67-7,48 (m, 7H), 1,54 (m, 1H), 1,11(8, 1H), 1,09 (d, 3H), 1,07 (m, 1H), 1,03 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 359,1, [M + Na]+ 381,1.

Primjer 12

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-tetrazol-1-ilacetamid

[image]

Dobivanje primjera 12 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (15 mg, 0,054 mmol), tetrazol-1-iloctene kiseline (8 mg, 0,062 mmol), trietilamina (0,030 ml, 0,22 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (25 mg, 0,065 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Nakon približno 18 sati doda se još tetrazol-1-iloctene kiseline (1,0 mg, 0,008 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (3,0 mg, 0,008 mmol) kako bi se dovršilo reakciju. Filtriranjem, koncentriranjem i prekristalizacijom dobije se naslovni spoj (12 mg, 0,031 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 58 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,13 (s, 1H), 10,71 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 9,44 (s, 1H), 8,07 (m, 1H), 7,68-7,47 (m, 7H), 5,05 (s, 2H).

LCMS: [M + H]+ 387,2, [M + Na]+ 409,1.

Primjer 13

2-ciklopentil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Dobivanje primjera 13 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (15 mg, 0,054 mmol), ciklopentiloctene kiseline (8 mg, 0,062 mmol), trietilamina (0,030 ml, 0,22 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (25 mg, 0,065 mmol) u dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (1:1 etil-acetat/heksan), također na analogan način, a zatim trituriranjem dietil-eterom, dobije se naslovni spoj (3 mg, 0,008 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 14 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,03 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 9,99 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,67-7,49 (m, 7H), 2,33-2,26 (m, 3H), 1,78 (m, 2H), 1,65-1,53 (m, 4H), 1,22 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 387,2, [M + Na]+ 409,2.

Primjer 14

2-metil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)nikotinamid

[image]

Dobivanje primjera 14 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (15 mg, 0,054 mmol), 2-metilnikotinske kiseline (9 mg, 0,062 mmol), trietilamina (0,030 ml, 0,22 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (25 mg, 0,065 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (etil-acetat), također na analogan način, a zatim trituriranjem dietil-eterom, dobije se naslovni spoj (7 mg, 0,018 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 33 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,13 (s, 1H), 10,57 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 8,57 (m, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,90 (m, 1H), 7,84 (m, 1H), 7,68 (m, 2H), 7,61-7,50 (m, 4H), 7,34 (m, 1H), 2,60 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 396,2, [M + Na]+ 418,1.

Primjer 15

4,4,4-trifluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)butiramid

[image]

Dobivanje primjera 15 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (15 mg, 0,054 mmol), 4,4,4-trifluormaslačne kiseline (9 mg, 0,062 mmol), trietilamina (0,030 ml, 0,22 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (25 mg, 0,065 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (1:1 etil-acetat/heksan), također na analogan način, a zatim trituriranjem dietil-eterom, dobije se naslovni spoj (7 mg, 0,017 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 32 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,34 (s, 1H), 10,22 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,68-7,50 (m, 7H), 2,62 (m, 4H).

LCMS: [M + H]+ 401,1, [M + Na]+ 423,0.

Primjer 16

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid 4-metil-[1,2,3]tiadiazol-5-karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 16 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (15 mg, 0,054 mmol), 4-metil-[1,2,3]tiadiazol-5-karboksilne kiseline (8 mg, 0,062 mmol), trietilamina (0,030 ml, 0,22 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (25 mg, 0,065 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Nakon približno 18 sati doda se još 4-metil-[1,2,3]tiadiazol-5-karboksilne kiseline (1,0 mg, 0,006 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (2,0 mg, 0,006 mmol) kako bi se dovršilo reakciju. Kromatografijom na silikagelu, također na analogan način, a zatim trituriranjem dietil-eterom, dobije se naslovni spoj (7 mg, 0,017 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 32 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,21 (s, 1H), 10,85 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,69 (m, 2H), 7,61-7,51 (m, 4H), 2,85 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 403,1, [M + Na]+ 425,0.

Primjer 17

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilpropionamid

[image]

Dobivanje primjera 17 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (15 mg, 0,054 mmol), 2-fenilpropionske kiseline (9 mg, 0,062 mmol), trietilamina (0,030 ml, 0,22 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (25 mg, 0,065 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (1:1 etil-acetat/heksan), također na analogan način, a zatim trituriranjem dietil-eterom, dobije se naslovni spoj (7 mg, 0,017 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 32 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,08 (s, 1H), 10,33 (s, 1H), 10,21 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,64 (m, 3H), 7,59 (m, 2H), 7,55 (m, 2H), 7,43 (m, 2H), 7,37 (m, 2H), 7,32 (m, 1H), 3,31 (q, 1H), 1,45 (d, 3H).

LCMS: [M + H]+ 409,1, [M + Na]+ 431,1.

Primjer 18

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenoksiacetamid

[image]

Dobivanje primjera 18 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (15 mg, 0,054 mmol), fenoksioctena kiselina (9 mg, 0,062 mmol), trietilamina (0,030 ml, 0,22 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (25 mg, 0,065 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (1:1 etil-acetat/heksan, uz porast od 100 % etil-acetata), također na analogan način, a zatim trituriranjem dietil-eterom, dobije se naslovni spoj (4,5 mg, 0,011 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 20 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,13 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,73 (m, 1H), 7,66 (m, 2H), 7,57 (m, 2H), 7,51 (m, 2H), 7,31 (m, 2H), 7,03 (m, 3H), 4,71 (s., 2H).

LCMS: [M + H]+ 411,0, [M + Na]+ 433,1.

Primjer 19

tert-butilni ester metil-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil)metil] karbaminske kiseline

[image]

Dobivanje primjera 19 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (18 mg, 0,065 mmol), (tert-butoksikarbonilmetilamino)octene kiseline (12 mg, 0,065 mmol), trietilamina (0,012 ml, 0,085 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (27 mg, 0,072 mmol) in CH2Cl2 (0,5 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (10:9:1 heksan/CH2Cl2/metanol), također na analogan način, a zatim trituriranjem dietil-eterom, dobije se naslovni spoj (28 mg, 0,063 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 96 %.

1H-NMR (CDCl3): � 9,11 (br s, 1H), 8,38 (br s, 2H), 7,62-7,46 (m, 7 H), 7,43 (s, 1H), 4,02 (s, 2H), 3,03 (s, 3H), 1,50 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 448,1, [M + Na]+ 470, [M – H]– 446,1.

Primjer 20

2-metilamino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)metil]acetamid; spoj s trifluoroctenom kiselinom

[image]

naslovni spoj u Primjeru 19 (19 mg, 0,042 mmol) u CH2Cl2 (0,65 ml) obradi se trifluoroctenom kiselinom (0,45 ml), te ostavi miješati 30 minuta. Hlapive komponente ukloni se u vakuumu, doda se dietil-eter, te 3 × otpari kako bi se dobilo naslovni spoj (19 mg, 0,041 mmol) u obliku žutonarančastog praha, u prinosu od 98 %.

1H-NMR (d4-metanol): � 8,15 (s, djelomična izmjena), 7,68-7,52 (m, 8H), 4,00 (s, 2H), 2,80 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 348,2.

Primjer 21

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)butiramid

[image]

Dobivanje primjera 21 iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (hidroklorid) (22 mg, 0,080 mmol), n-maslačne kiseline (0,007 ml, 0,080 mmol), trietilamina (0,014 ml, 0,10 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (32 mg, 0,084 mmol) u CH2Cl2 (0,3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (10:9:1 heksan/CH2Cl2/metanol, a zatim 9:5:1 CH2Cl2/heksan/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (14 mg, 0,04 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 50 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,05 (s, 1H, izmjene), 10,22 (s, 1H, izmjene), 10,00 (s, 1H, izmjene), 8,15 (s, 1H), 7,39-7,71 (m, 7H), 2,30 (m, 2H)1, 1,67 (m, 2H)2, 0,95 (m, 3H)1.

1Postaje triplet prilikom dodavanja DCl.

2Postaje kvartet prilikom dodavanja DCl.

LCMS: [M + H]+ 347,1, [M + Na]+ 369,1.

Primjer 22

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)nikotinamid

[image]

Dobivanje primjera 22 iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (hidroklorid) (21 mg, 0,076 mmol), nikotinske kiseline (7 mg, 0,076 mmol), trietilamina (0,014 ml, 0,10 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (32 mg, 0,084 mmol) u CH2Cl2 (0,3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (9:1 CH2Cl2/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (20 mg, 0,052 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 69 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,18 (s, 1H, izmjene), 10,59 (s, 1H, izmjene), 10,38 (s, 1H, izmjene), 9,17(s, 1H), 8,80 (s, 1H, djelomično zasjenjen, uz fino cijepanje), 8,40-8,26 (m, 2H), 7,91 (s, 1H), 7,73-7,65 (m, 2H), 7,62-7,47 (m, 5H).

1H-NMR (d6-DMSO/DCl): � 9,44 (s, 1H), 9,10 (d, 1H, J = 5,0 Hz), 9,00 (d, 1H, J = 9,5), 8,32 (s, 1H), 8,15 (dd, 1H, J = 7,0, 7,5 Hz ), 7,92 (s, 1H), 7,73 (s, 1H, preklapanje), 7,68 (s, 1H, preklapanje), 7,64-7,50 (m, 4H).

LCMS: [M + H]+ 382,1, [M + Na]+ 404,1.

Primjer 23

2-metil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 23 iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (hidroklorid) (22 mg, 0,08 mmol), 2-metilbenzojeve kiseline (11 mg, 0,08 mmol), trietilamina (0,014 ml, 0,10 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (33 mg, 0,088 mmol) u CH2Cl2 (0,3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (8:5:2 CH2Cl2/heksan/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (23 mg, 0,058 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 73 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,11 (s, 1H, izmjene), 10,42 (s, 1H, izmjene), 10,34 (s, 1H, izmjene), 8,24 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,71-7,65 (m, 2H), 7,63-7,45 (m, 3H), 7,43-7,35 (m, 2H), 7,34-7,25 (m, 3H), 2,4 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 395,1, [M + Na]+ 417,0.

Primjer 24

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 24 iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (hidroklorid) (23 mg, 0,082 mmol), benzojeve kiseline (11 mg, 0,09 mmol), trietilamina (0,016 ml, 0,115 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (34 mg, 0,090 mmol) u CH2Cl2 (0,3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (10:9:1 heksan/CH2Cl2/metanol, a zatim 8:5:2 CH2Cl2/heksan/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (20 mg, 0,053 mmol) u obliku žutog praha, u 64 % prinosu od.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,13 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 10,35 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,03 (d, 2H, J = 8 Hz), 7,94 (s, 1H), 7,70 (s, 1H, preklapanje), 7,67 (s, 1H, preklapanje), 7,63-7,48 (m, 7H).

LCMS: [M + H]+ 381,1, [M + Na]+ 403,1.

Primjer 25

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilacetamid

[image]

Dobivanje primjera 25 iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (hidroklorid) (20 mg, 0,072 mmol), feniloctene kiseline (11 mg, 0,08 mmol), trietilamina (0,014 ml, 0,10 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (30 mg, 0,080 mmol) u CH2Cl2 (0,3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (8:5:2 CH2Cl2/heksan/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (27 mg, 0,068 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 95 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,08 (s, 1H, izmjene), 10,31 (s, 2H, izmjene), 8,18 (s, 1H), 7,72-7,62 (m, 3H), 7,60-7,45 (m, 4H), 7,41-7,21 (m, 5H), 3,68 (s, 2H).

LCMS: [M + H]+ 395,1, [M + Na]+ 417,1.

Primjer 26

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-piperazin-1-ilacetamid; sol ditrifluoroctene kiseline

[image]

U suspenziju naslovnog spoja iz Primjera 27 u diklormetanu (0,3 M, 0,6 ml) doda se trifluoroctena kiselina (0,3 M, 0,6 ml). Reakcijsku smjesu miješa se 30 minuta na 22 °C, te koncentrira pod sniženim tlakom. Krutinu se triturira diklormetanom (3,0 ml), prikupi filtriranjem, te ispere dietil-eterom (5,0 ml) kako bi se dobilo naslovni spoj (9,8 mg) u prinosu od 95 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 9,98 (s, 1H), 8,53 (bs, 2H), 8,16 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 7,66 (m, 2H), 7,69-7,48 (m, 7H), 3,32 (s, 2H), 3,20 (m, 4H), 2,82 (m, 4H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C22H23N6O2, 403,1882, opaženo 403,1902.

Primjer 27

tert-butilni ester 4-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil)metil]piperazin-1-karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 27 iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (0,025 g, 0,09 mmol), tert-butilnog estera 4-karboksimetilpiperazin-1-karboksilne kiseline (0,044 g, 0,18 mmol), trietilamina (0,05 ml, 0,4 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (38 mg, 0,1 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,05 M, 1,8 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (95:5 CH2Cl2/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (15 mg) u obliku žutog praha, u prinosu od 33 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,07 (s, 1H), 10,34 (s, 1H), 9,92 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,69-7,64 (m, 3H), 7,61-7,54 (m, 2H), 7,52-7,47 (m, 2H), 3,40 (m, 4H), 3,29 (m zaslonjen, 4H), 3,18 (s, 2H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C29H31N6O4, 503,2407, opaženo 503,2407.

tert-butilni ester 4-karboksimetilpiperazin-1-karboksilne kiseline kao polazni materijal dobije se na sljedeći način:

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera 4-metoksikarbonilmetilpiperazin-1-karboksilne kiseline 27(a)

Piperazin-1-iloctene kiseline etilni ester (2,84 g, 15,7 mmol), trietilamin (7,6 ml, 55,0 mmol) i di-tert-butil-dikarbonat (4,45 g, 20,4 mmol) miješa se 24 sata u CH2Cl2 (0,3 M, 55 ml) na 22 °C. Hlapive tvari ukloni se u vakuumu, a kromatografijom na silikagelu (60:40 etil-acetat/heksani) dobije se Međuprodukt 27(a) (4,01 g) u prinosu od 94 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 4,08 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 3,35-3,21 (m, 6H), 2,52-2,41 (m, 4H), 1,39 (s, 9H), 1,18 (t, 7,1 Hz).

13C-NMR (d6-DMSO): � 170,2, 154,2, 79,1, 60,2, 58,6, 52,0, 28,4, 14,5.

Korak 2 Dobivanje tert-butilnog estera 4-karboksimetilpiperazin-1-karboksilne kiseline 27(b)

Međuprodukt 27(a) (3,6 g, 13,2 mmol) i 5 % vodenu otopinu KOH (90 ml, 80,0 mmol) miješa se 2 sata u tetrahidrofuranu (30 ml, 0,44 M) na 22 °C. Hlapive tvari ukloni se u vakuumu, a obradom jako kiselom smolom Dowex-50� (WX8-200), uz eluiranje amonijevim hidroksidom (1,0 N), te obradom smolom Amberlite� CG-50 dobije se Međuprodukt 27(b) (1,2 g) u prinosu od 37 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 3,35-3,31 (m, 4H), 3,21 (s, 2H), 2,52-2,41 (m, 4H), 1,39 (s, 9H).

Primjer 28

2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Dobivanje primjera 28 iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (0,025 g, 0,09 mmol), cikloheksiloctene kiseline (0,015 g, 0,11 mmol), trietilamina (0,05 ml, 0,4 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (38 mg, 0,1 mmol) i N,N-dimetilformamid (0,05 M, 1,8 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (95:5 CH2Cl2/metanol) također na analogan način, te trituriranjem dietil-eterom dobije se naslovni spoj (13 mg) u obliku žutog praha, u prinosu od 36 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,03 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 9,99 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,68-7,45 (m, 7H), 2,20 (d, 2H, J = 7,0 Hz), 1,86-1,58 (m, 6H), 1,31-1,10 (m, 3H), 1,10-0,91 (m, 2H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C24H25N4O2, 401,1978, opaženo 401,1987.

Primjer 29

tert-butilni ester 4-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil)piperidin-1-karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 29 iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (hidroklorid) (22 mg, 0,07 mmol), mono-tert-butilnog estera piperidin-1,4-dikarboksilne kiseline (19 mg, 0,084 mmol), trietilamina (0,015 ml, 0,105 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (32 mg, 0,084 mmol) u CH2Cl2 (0,3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (8:5:2 CH2Cl2/heksan/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (24 mg, 0,049 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 70 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,12 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,70-7,64 (m, 3H), 7,62-7,54 (m, 2H), 7,53-7,49 (m, 2H), 4,01 (brd, 2H, J = 12,06 Hz), 2,86-2,72 (m, 2H), 1,81 (brd, 2H, J = 13,00 Hz), 1,58-1,44 (m, 2H), 1,42 (s, 9H), 1,40 (m, 1H, djelomično zasjenjen).

LCMS: [M – H]– 486,2.

Primjer 30

tert-butilni ester 4-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil)metil]piperidin-1-karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 30 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (22 mg, 0,07 mmol), tert-butilnog estera 4-karboksimetilpiperidin-1-karboksilne kiseline (20 mg, 0,084 mmol), trietilamina (0,015 ml, 0,105 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (32 mg, 0,084 mmol) u CH2Cl2 (0,3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (8:5:2 CH2Cl2/heksan/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (35 mg, 0,070 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 100 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,08 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,09 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,70-7,46 (m, 7H), 3,93 (br d, 2H, J = 12,24 Hz), 2,81-2,66 (m, 2H), 2,27 (d, 2H, J = 7,16 Hz), 1,96 (br s, 1H), 1,67 (brd, 2H, J = 13,94 Hz), 1,40 (s, 9H), 1,17-1,01 (m, 2H).

LCMS: [M + Na]+ 524,2, [M – H]– 500,1.

Primjer 31

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid piperidin-4-karboksilne kiseline; spoj s trifluoroctenom kiselinom

[image]

Dobivanje primjera 31 iz naslovnog spoja u Primjeru 29 (20 mg, 0,041 mmol) i 45 % TFA u CH2Cl2 (1 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 20. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (20 mg, 0,040 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 97 %.

1H-NMR (d4-metanol): � 8,03 (s, 1H), 7,56-7,31 (m, 7H), 3,43-3,32 (m, 2H), 3,01-2,90 (m, 2H), 2,61 (m, 1H), 2,04-1,78 (m, 4H).

LCMS: [M + H]+ 388,1.

Primjer 32

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-piperidin-4-ilacetamid; spoj s trifluoroctenom kiselinom

[image]

Dobivanje primjera 32 iz naslovnog spoja u Primjeru 30 (31 mg, 0,062 mmol) i 45 % TFA u CH2Cl2 (1 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 20. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (29 mg, 0,056 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 91 %.

1H-NMR (d4-metanol): � 8,20 (s, 1H), 7,70-7,50 (m, 7H), 3,50-3,40 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 3,10 (dd, 2H, J = 9,0, 9,2 Hz), 2,45 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 2,25 (br m, 1H), 2,0-2,11 (m, 2H), 1,68-1,45 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 402,2.

Primjer 33

tert-butil-(1S)-1-cikloheksil-2-okso-2-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amino] etilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 33 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (35 mg, 0,13 mmol), (2S)-[(tert-butoksikarbonil)amino](cikloheksil)etanske kiseline (39 mg, 0,15 mmol), trietilamina (0,073 ml, 0,52 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (58 mg, 0,15 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11, s tim što se nakon 24 sata doda još (2S)-[(tert-butoksikarbonil)amino](cikloheksil)etanske kiseline (17 mg, 0,065 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (25 mg, 0,065 mmol) kako bi se dovršilo reakciju. Kromatografijom na silikagelu (1:1 etil-acetat/heksan), također na analogan način, a zatim trituriranjem dietil-eterom, dobije se naslovni spoj (45 mg, 0,087 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 67 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,08 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,13 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,71-7,44 (m, 6H), 6,90 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 1,78-1,44 (m, 5H), 1,43-1,24 (m, 10H, sadrži singlet na 1,39), 1,23-1,02 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 514,1.

Primjer 34

(2S)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)etanamid-trifluoracetat

[image]

Dobivanje primjera 34 iz naslovnog spoja u Primjeru 33 (40 mg, 0,078 mmol) i 1:1 smjese TFA/CH2Cl2 (5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 20. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje smjesom metanol/dietil-eter, te se dobije naslovni spoj (10 mg, 0,019 mmol) u obliku narančastožutog praha, u prinosu od 24 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,19 (s, 1H), 10,60 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 8,25 (brs, 3H), 8,11 (s, 1H), 7,71-7,46 (m, 7H), 3,69 (m, 1H), 1,93-1,52 (m, 6H), 1,29-0,97 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 415,1.

Primjer 35

3-fluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 35 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (0,025 g, 0,09 mmol), 3-fluorbenzojeve kiseline (0,015 g, 0,11 mmol), trietilamina (0,05 ml, 0,4 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (38 mg, 0,1 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,05 M, 1,8 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (95:5 CH2Cl2/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (15 mg) u obliku žutog praha, u prinosu od 42 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,18 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 8,31 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 7,92 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,90-7,81 (m, 2H), 7,72-7,41 (m, 8H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C23H16N4O2F, 399,1257, opaženo 399,1257.

Primjer 36

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-fenilbutiramid

[image]

Dobivanje primjera 36 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (0,030 g, 0,11 mmol), 4-fenilmaslačne kiseline (0,027 g, 0,16 mmol), trietilamina (0,077 ml, 0,44 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (63 mg, 0,16 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,05 M, 2,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (95:5 CH2Cl2/metanol) dobije se naslovni spoj (15 mg) u obliku žutog praha, u prinosu od 33 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,06 (s, 1H), 10,35 (s, 1H), 10,06 (s, 1H), 8,18 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,69-7,46 (m, 7H), 7,33-7,16 (m, 5H), 2,64 (dd, 2H, J = 7,4, 7,0 Hz), 2,35 (m, 5H), 1,97-1,86 (m, 2H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C26H23N4O2, 423,1821, opaženo 423,1826.

[image]

Primjer 37

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid 1-metilpiperidin-4-karboksilne kiseline; sol 2,2,2-trifluoroctene kiseline

[image]

Dobivanje primjera 37 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (0,030 g, 0,11 mmol), 1-metilpiperidin-4-karboksilne kiseline (0,023g, 0,16 mmol), trietilamina (0,077 ml, 0,44 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (63 mg, 0,16 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,05 M, 2,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Pročišćavanjem HPLC-om dobije se naslovni spoj (23 mg) u obliku žutog praha, u prinosu od 41 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,10 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 10,23 (s, 1H), 9,17 (bs, 1H), 8,12 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,69-7,47 (m, 7H), 3,05-2,93 (m, 2H), 2,80 (d, 3H), 2,65-2,48 (buried m, 1H), 2,10-2,01 (m, 2H), 1,92-1,80 (m, 2H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C23H24N5O2, 402,1930, opaženo 402,1937.

Primjer 38

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamid

[image]

Dobivanje primjera 38 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (0,030 g, 0,11 mmol), 3-fenilpropionske kiseline (0,025 g, 0,16 mmol), trietilamina (0,077 ml, 0,44 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (63 mg, 0,16 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,05 M, 2,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (95:5 CH2Cl2/metanol) dobije se naslovni spoj (15 mg) u obliku žutog praha, u 34 % prinosu od.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 10,13 (s, 1H), 8,15 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,68-7,46 (m, 11H), 7,31 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,24 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 3,65 (s, 2H), 3,45 (s, 2H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C25H21N4O2, 409,1665, opaženo 409,1683.

Primjer 39

Metilni ester 6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje 4-brom-5-nitroizoftalne kiseline 39(a)

U četverogrlu tikvicu okruglog dna od 3 l, opremljenu mehaničkim miješalom, termometrom, lijevkom za dodavanje od 250 ml, te napunjenu koncentriranim H2SO4 (577 ml), doda se 4-bromizoftalna kiselina (75,0 g, 306 mmol). Bijelu suspenziju ohladi se do temperature ledene kupelji, te se polako doda nitracijski reagens (prethodno pripravljen opreznim dodavanjem H2SO4 (169 ml) u HNO3 (107 ml)), uz održavanje unutarnje temperature reakcijske smjese ispod 15 °C. Kada je dodavanje gotovo ledenu kupelj se ukloni, a suspenziju miješa preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon približno 14 sati tikvicu se stavi u ledenu kupelj, te se doda zdrobljeni led kako bi se ugasilo suvišni nitracijski reagens, uz održavanje unurtarnje temperature ispod 40 °C. Suspenziju krem boje se filtrira, a krutine prikupi filtriranjem, te ispere malim volumenom ledeno hladne vode. Krutinu se otopi u metanolu, a hlapive komponente otpari. Dobivenu krutinu preko noći se suši se u vakuumskoj peći na 60 °C kako bi se dobilo Međuprodukt 39(a) (79,6 g) u prinosu od 87 %.

1H-NMR (d4-metanol): � 8,47 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 8,39 (d, 1H, J = 1,8 Hz).

LCMS: [M – H] 289.

Korak 2 Dobivanje dimetil-4-brom-5-nitroizoftalata 39(b)

U otopinu Međuprodukta 39(a) (77,6 g, 267 mmol) u metanolu (500 ml) doda se koncentrirani H2SO4 (10 ml). Reakcijsku tikvicu grije se u uljnoj kupelji na refluksu uz miješanje približno 8 sati, kada analiza sustavom LC/MS ukazuje da je polazni materijal potrošen. Smjesu se ostavi da se ohladi do sobne temperature, te se u tikvici počinje kristalizirati bijela krutina. Nakon miješanja preko noći kristale se prikupi filtriranjem, te ispere vodom dok pH filtrata ne bude neutralan. Kristale (51,9 g) se osuši na Abderhaldenovom uređaj za sušenje preko refluksirajućeg acetona. Matični lug se koncentrira kako bi se dobilo drugi prinos (7,58 g), kojeg se pomiješa s prvim kako bi se dobilo Međuprodukt 39(b) (59,4 g) u prinosu od 70 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 8,62 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,93 (s, 3H).

Korak 3 Dobivanje dimetil-5-nitro-4-(feniletinil)izoftalata 39(c)

Tikvicu s 1,4-dioksanom (16 ml) propuše se dušikom. U obrocima se doda CuI (0,12 g, 0,628 mmol) i bis(benzonitril)diklorpaladij(II) (0,361 g, 0,942 mmol). Injekcijom se doda tri-tert-butilfosfin (7,83 ml, 1,88 mmol) u obliku 0,24 M otopine u 1,4-dioksanu. Otopina se ostavi miješati približno 5 minuta, a zatim se diizopropilamin (2,65 ml, 18,9 mmol) doda injekcijom. Međuprodukt 39(b) (5,00 g, 15,7 mmol) se doda u jednom obroku, a zatim fenilacetilen (2,08 ml, 18,9 mmol). Odmah nastaje talog. Reakcijsku smjesu was capped i stirred na sobnoj temperaturi preko noći. Smjesu se filtrira kroz diatomejsku zemlju, koju se zatim ispere etil-acetatom kako bi se prikupilo sav zadržani produkt. Filtrat pomiješan s ispircima se koncentrira, te otopi u minimalnij količini vrućeg etil-acetata. Doda se heksan kako bi se prekristaliziralo smeđe iglice, koje se prikupi filtriranjem, a zatim ispere heksanom. Iglice (4,5 g) se preko noći suši u vakuumskoj peći na 60 °C. Matični lug se koncentrira, te podvrgne kromatografiji na silikagelu (10-30 % etil-acetat/heksani) kako bi se dobilo još 1,2 g tamnosmeđe krutine, koju se pomiješa s prvom šaržom kako bi se dobilo Međuprodukt 39(c) (5,7 g) u prinosu od 53 %.

1H-NMR (CDCl3): � 8,73 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 8,65 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,61-7,64 (m, 2H), 7,37-7,46 (m, 3H), 4,03 (s, 3H), 4,00 (s, 3H).

LCMS: [M + H] 340.

Korak 4 Dobivanje dimetil-2-fenil-1H-indol-4,6-dikarboksilata 39(d)

Međuproduktu 39(c) (6,37 g, 18,8 mmol) doda se bezvodni metanol (120 ml). U dobiveni mulj doda se kositrov(II) klorid (35,6 g, 188 mmol), a reakcijsku tikvicu refluksira 55 sati. Metanol se ukloni pod sniženim tlakom, a dobiveni ostatak se suspendira u malom volumenu etil-acetata. Zatim se doda diklormetan, tako da se postignuta koncentracija bude približno 95 % diklormetan/5 % etil-acetat. Ovu suspenziju se zatim filtrira kroz kratak čep od silikagela. Filtrat se koncentrira, te 2 × pročisti flash-kromatografijom na silikagelu (5-40 % etil-acetat/diklormetan) kako bi se dobilo 3,1 g Međuprodukta 39(d) u prinosu od 53 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,35 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,98-8,00 (m, 2H), 7,47-7,60 (m, 4H), 3,99 (s, 3H), 3,93 (s, 3H).

LCMS: [M + H] 310.

Korak 5 Dobivanje dimetil-3-formil-2-fenil-1H-indol-4,6-dikarboksilata 39(e)

U otopinu Međuprodukta 39(d) (0,052 g, 0,17 mmol) u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (2 ml) na sobnoj temperaturi doda se POCl3 (0,2 ml, 2,1 mmol). Dobivenu ljubičastu otopinu miješa se 1 sat na sobnoj temperaturi. Smjesu se izlije u zasićenu vodenu otopinu natrijevog karbonata (15 ml), te ekstrahira etil-acetatom. Organski sloj osuši se preko natrijevog sulfata, koncentrira, te pročisti kromatografijom na silikagelu (33 % etil-acetat/heksani) kako bi se dobilo Međuprodukt 39(e) (0,0404 g) u prinosu od 71 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 13,00 (s, 1H), 9,95 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,85-7,75 (m, 2H), 7,70-7,55 (m, 3H), 3,90 (s, 3H), 3,86 (s, 3H).

LCMS: [M + H] 338, [M – H] 336.

Korak 6 Dobivanje naslovnog spoja: metilni ester 6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-karboksilne kiseline

U otopinu Međuprodukta 39(e) (1,39 g, 4,12 mmol) u bezvodnom metanolu (70 ml) doda se bezvodni hidrazin (0,19 ml, 6,18 mmol). Smjesu se refluksira preko noći. Nakon hlađenja žuti talog se prikupi filtriranjem, te ispere ledeno hladnim metanolom. Nakon sušenja u vakuumu na 60 °C preko noći naslovni spoj (1,06 g) se dobije u obliku jarkožute krutine, u prinosu od 72 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,58 (s, 1H), 10,54 (s, 1H), 8,13 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 8,07 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 7,77-7,67 (m, 2H), 7,65-7,54 (m, 3H), 7,52 (s, 1H), 3,88 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 320,3.

Primjer 40

3-fluor-2-metil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 40 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (0,030 g, 0,11 mmol), 3-fluor-2-metilbenzojeve kiseline (0,025 g, 0,16 mmol), trietilamina (0,077 ml, 0,44 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (63 mg, 0,16 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,05 M, 2,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (95:5 CH2Cl2/metanol) dobije se naslovni spoj (14 mg) u obliku žutog praha, u prinosu od 33 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,15 (s, 1H), 10,55 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 8,23 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,84 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 7,72-7,48 (m, 6H), 7,39-7,27 (m, 3H), 2,31 (s, 3H).

LCMS: [M – H]+ 411,0.

Primjer 41

2-fluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-trifluormetilbenzamid

[image]

Dobivanje primjera 41 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (0,1 g, 0,36 mmol), 2-fluor-3-trifluormetilbenzojeve kiseline (0,113 g, 0,54 mmol), trietilamina (0,2 ml, 1,45 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,207 g, 0,54 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,1 M, 3,6 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (95:5 CH2Cl2/metanol) dobije se naslovni spoj (0,147 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 87 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,20 (s, 1H), 10,81 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 8,24 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 8,05-7,93 (m, 2H), 7,79 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 7,72-7,67 (m, 2H), 7,62-7,49 (m, 5H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C24H15N4O2F4, 467,1131, opaženo 467,1119.

[image] Primjer 42

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-trifluormetilbenzamid

[image]

Dobivanje primjera 42 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (0,1 g, 0,36 mmol), 2-trifluormetilbenzojeve kiseline (0,103g, 0,54 mmol), trietilamina (0,2 ml, 1,45 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,207 g, 0,54 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,1 M, 3,6 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (95:5 CH2Cl2/metanol) dobije se naslovni spoj (0,075 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 46 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,14 (s, 1H), 10,71 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 8,17 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 7,89-7,66 (m, 7H), 7,62-7,49 (m, 4H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C24H16N4O2F3, 449,1225, opaženo 449,1223.

Primjer 43

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-trifluormetilbenzamid

[image]

Dobivanje primjera 43 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (0,03 g, 0,11 mmol), 3-trifluormetilbenzojeve kiseline (0,031 g, 0,16 mmol), trietilamina (0,078 ml, 0,43 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,062 g, 0,11 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,05 M, 2,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (95:5 CH2Cl2/metanol) dobije se naslovni spoj (0,030 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 61 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,20 (s, 1H), 10,62 (s, 1H), 10,42 (s, 1H), 8,39-8,30 (m, 3H), 7,98 (d, 1H, J = 7,4 Hz), 7,91 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 7,80 (dd, 1H, J = 7,7, 7,5 Hz), 7,69 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,62-7,48 (m, 4H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C24H16N4O2F3, 449,1225, opaženo 449,1229.

Primjer 44

3-klor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 44 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (0,03 g, 0,11 mmol), 3-klormetilbenzojeve kiseline (0,025 g, 0,16 mmol), trietilamina (0,078 ml, 0,43 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,062 g, 0,11 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,05 M, 2,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (95:5 CH2Cl2/metanol) dobije se naslovni spoj (0,015 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 33 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,18 (s, 1H), 10,50 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 8,32 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 8,09 (s, 1H), 7,98 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 7,91 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 7,72-7,65 (m, 3H), 7,62-7,47 (m, 5H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C23H16N4O2Cl, 415,0962, opaženo 415,0981.

Primjer 45

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; i

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1S,2S)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 45 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (30 mg, 0,11 mmol), ±-trans-2-fenil-1-ciklopropan karboksilne kiseline (26 mg, 0,16 mmol), trietilamina (0,076 ml, 0,55 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (62 mg, 0,16 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (1:1 etil-acetat/heksan), također na analogan način, a zatim trituriranjem smjesom etil-acetat/dietil-eter dobije se naslovni spoj (6,5 mg, 0,015 mmol) (smjesa trans-dijastereomera) u obliku žutog praha, u prinosu od 14 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,71-7,44 (m, 7H), 7,35-7,25 (m, 2H), 7,24-7,10 (m, 3H), 2,39 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,52 (m, 1H), 1,38 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 419,1.

Primjer 46

2-(3-klorfenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Dobivanje primjera 46 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (30 mg, 0,11 mmol), (3-klorfenil)octene kiseline (28 mg, 0,16 mmol), trietilamina (0,076 ml, 0,55 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (62 mg, 0,16 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (1:1 etil-acetat/heksan), također na analogan način, a zatim trituriranjem metanolom dobije se naslovni spoj (6,5 mg, 0,015 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 14 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,10 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 10,17 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,70 -7,18 (m, 11H), 3,69 (s, 1H),3,50(s, 1H).

LCMS: [M + H]+ 427,1.

Primjer 47

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-tien-2-ilbutanamid

[image]

Dobivanje primjera 47 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (30 mg, 0,11 mmol), 4-tien-2-ilbutanske kiseline (24 mg, 0,16 mmol), trietilamina (0,076 ml, 0,55 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (62 mg, 0,16 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (3 % metanol u CH2Cl2, uz porast do 6 % metanola u CH2Cl2), također na analogan način, a zatim trituriranjem metanolom dobije se naslovni spoj (6,5 mg, 0,015 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 14 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,07 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,09 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,69-7,61 (m, 3H), 7,60-7,53 (m, 2H), 7,52-7,45 (m, 2H), 7,33 (m, 1H), 6,96 (m, 1H), 6,89 (m, 1H), 2,86 (t, 2H, J = 7,53 Hz), 2,40 (t, 2H, J = 7,35 Hz), 2,02-1,89 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 427,1.

Primjer 48

1-acetil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)piperidin-4-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 48 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (30 mg, 0,11 mmol), 1-acetilpiperidin-4-karboksilne kiseline (28 mg, 0,16 mmol), trietilamina (0,076 ml, 0,55 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (62 mg, 0,16 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (3 % metanol u CH2Cl2, uz porast do 6 % metanola u CH2Cl2), također na analogan način, a zatim trituriranjem metanolom dobije se naslovni spoj (12 mg, 0,028 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 25 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,07 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 10,10, s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,72-7,43 (m, 7H), 4,41 (d, 1H, J = 15,07 Hz), 3,87 (d, 1H, J = 14,13 Hz), 3,07 (t, 1H, J = 12,81Hz), 2,65-2,53 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 2,02 (s, 3H), 1,76-1,90 (m, 2H), 1,70-1,37 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 430,1, [M + Na]+ 452,1.

Primjer 49

6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksilna kiselina; kalijeva sol

[image]

Naslovnom spoju u Primjeru 39 (3,0 g, 9,39 mmol) doda se DMSO (20 ml). U ovu polususpenziju doda se 2 N KOH (19 ml, 37,8 mmol). Otopina se oboji intenzivno crveno, te miješa približno 1,5 sata na sobnoj temperaturi. Reakcijsku smjesu čisti se preparativnim HPLC-om (5-60 % CH3CN/H2O) 60 minuta. Frakcije koje sadrže produkt se liofilizira kako bi se dobilo naslovni spoj (0,8 g) u obliku narančaste krutine, u prinosu od 25 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,21 (s, 1H), 10,12 (s, 1H), 8,16 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 8,01 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 7,73-7,65 (m, 2H), 7,62-7,46 (m, 3H), 7,44 (s, 1H).

LCMS: [M + H]+ 306,1.

Primjer 50

3-(2-metilfenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propanamid

[image]

Dobivanje primjera 50 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (30 mg, 0,11 mmol), 3-(2-metilfenil)propanske kiseline (27 mg, 0,16 mmol), trietilamina (0,076 ml, 0,55 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (62 mg, 0,16 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (3 % metanol u CH2Cl2, uz porast do 5 % metanola u CH2Cl2), također na analogan način, a zatim trituriranjem metanolm dobije se naslovni spoj (6 mg, 0,014 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 13 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,08 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 10,10 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,72-7,42 (m, 7H), 7,26-7,05 (m, 4H), 2,96-2,87 (m, 2H), 2,64-2,55 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 2,32 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 421,1.

Primjer 51

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-(1-tritil-1H-imidazol-4-il)propionamid

[image]

Dobivanje primjera 51 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (31 mg, 0,10 mmol), 3-(1-tritil-1H-imidazol-4-il)propionske kiseline (46 mg, 0,12 mmol), trietilamin (0,021 ml, 0,15 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (46 mg, 0,12 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (3 % trietilamin u 5:4:1 heksan/CH2Cl2/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (40 mg, 0,062 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 62 %.

1H-NMR (CDCl3/d4-metanol): � 8,21 (s, 1H), 7,65-7,25 (m, 15H, djelomično zasjenjen), 7,10-7,02 (m, 8H), 6,65 (s, 1H), 2,99-2,89 (m, 2H), 2,71-2,62 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 641,2.

Primjer 52

3-[1H-imidazol-4-il)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propionamid; spoj s trifluoroctenom kiselinom

[image]

Dobivanje primjera 52 iz naslovnog spoja u Primjeru 51 (32 mg, 0,050 mmol) i 45 % TFA u CH2Cl2 (1 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 20. (Uklanjanje tritilne skupine kao zaštite provodi se u istim uvjetima kao za uklanjanje tert-butoksikarbonila kao zaštite.) Izdvajanje, također na analogan način, dodatno uključuje prekristalizaciju iz smjese metanol/etil-acetat i dietil-etera kako bi se dobilo naslovni spoj (16 mg, 0,031 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 62 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 13,95 (br s, 1H), 12,10 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 10,20 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,70-7,63 (m, 3H), 7,62-7,47 (m, 5H), 7,38 (s, 1H), 3,02 -2,93 (m, 2H), 2,78-2,70 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 399,2.

Primjer 53

tert-butilni ester [(S)-1-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil)-3-fenilpropil]karbaminske kiseline

[image]

Dobivanje primjera 53 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (31 mg, 0,10 mmol), (S)-2-tert-butoksikarbonilamino-4-fenilmaslačne kiseline (34 mg, 0,12 mmol), trietilamina (0,021 ml, 0,15 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (46 mg, 0,12 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onim u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (5:4:1 heksan/CH2Cl2/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (40 mg, 0,074 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 74 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,11 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 10,17 (s, 1H), 8,40 (br s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,71-7,45 (m, 6H), 7,35-7,15 (m, 6H), 4,06 (m, 1H), 2,77-2,53 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 1,92 (m, 2H), 1,42 (s, 9 H).

LCMS: [M + H]+ 538,1, [M + Na]+ 560,2, [M – H]– 536,0.

Primjer 54

(2S)-2-amino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-fenilbutiramid; spoj s trifluoroctenom kiselinom

[image]

Dobivanje primjera 54 iz naslovnog spoja u Primjeru 53 (30 mg, 0,056 mmol) i 45 % TFA u CH2Cl2 (1 ml) provodi se analogno onim u Primjeru 20. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (26 mg, 0,047 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 84 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,22 (s, 1H), 10,71 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 8,38 (br s, 3H), 8,13 (s, 1H), 7,72-7,66 (m, 2H), 7,64-7,49 (m, 4H), 7,36-7,28 (m, 2H), 7,27-7,19 (m, 4H), 4,05 (brs, 1H), 2,77-2,65 (m, 2H), 2,21-2,09 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 438,2, [M + Na]+ 460,1, [M – H]– 436,1.

Primjer 55

N-metil-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

U otopinu naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,058 g, 0,17 mmol) u DMSO-u (4 ml) doda se trietilamin (0,069 ml, 0,5 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (0,084 g, 0,22 mmol). Nakon približno 5 minuta doda se 2,0 M metilamin u tetrahidrofuranu (0,5 ml, 0,25 mmol), a otopinu miješa 2 sata. Smjesu se pročisti preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % HOAc). Čiste frakcije se pomiješa i liofilizira kako bi se dobilo naslovni spoj (0,0036 g) u prinosu od 6,7 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,46 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,20-7,90(m, 2H), 7,85-7,35 (m, 6H), 2,79 (s, 3H).

LCMS:[M + H]+ 319,1.

Primjer 56

N-[2-(1H-imidazol-4-il)etin-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 56 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,0956 g, 0,28 mmol), 2-(1H-imidazol-4-il)etilamin-dihidroklorida (0,0618 g, 0,34 mmol), trietilamina (0,2 ml, 1,4 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,129 g, 0,34 mmol) u DMSO-u (6 ml) provodi se analogno onim u Primjeru 58. Preparativnim HPLC-om (10-80 % CH3CN/H2O), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0021 g) u prinosu od 18 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,48 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 8,77 (t, 1H, J = 5,7 Hz), 8,08 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,75-7,66(m, 2H), 7,64-7,54 (m, 5H), 7,51 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 3,55-3,45 (m, 2H), 2,84-2,73 (t, 2H, J = 7,2 Hz).

LCMS:[M + H]+ 399,1.

[image] Primjer 57

4-dimetilamino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)butiramid (hidrokloridna sol)

[image]

Dobivanje primjera 57 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (27 mg, 0,086 mmol), 4-dimetilaminomaslačne kiseline (hidroklorid) (17 mg, 0,104 mmol), trietilamina (0,036 ml, 0,258 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (40 mg, 0,104 mmol) u CH2Cl2 (0,3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (2 % trietilamin u 9:1 smjesi CH2Cl2/metanol) slobodne baze dobije se, nakon zakiseljavanja s HCl, naslovni spoj (18 mg, 0,042 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 49 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,10 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 10,21 (s, 1H), 9,60 (br s, 1H, HCl), 8,13 (s, 1H), 7,69-7,46 (m, 7H), 3,15-3,04 (m, 2H), 2,80 (s, 6H, uz fino cijepanje), 2,45 (t, 2H, djelomično zasjenjen), 2,02-1,90 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 390,2.

Primjer 58

6-okso-2-fenil-N-(2-piridin-2-iletil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

U otopinu naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,0548 g, 0,16 mmol) u DMSO-u (1,8 ml) doda se trietilamin (0,0268 ml, 0,192 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (0,0669 g, 0,176 mmol). Nakon približno 5 minuta doda se 2-piridin-2-iletilamin (0,0215 g, 0,176 mmol), a otopinu ostavi miješati preko noći. Produkt se pročisti preparativnim HPLC-om (5-35 % CH3CN/H2O). Čiste frakcije se pomiješa i liofilizira kako bi se dobilo naslovni spoj (0,013 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 20 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,37 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,51 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 8,01 (d, 2H, J = 11 Hz), 7,49-7,71 (m, 7H), 7,20-7,29 (m, 2H), 3,62 (d, 1H, J = 4,9 Hz), 3,02 (t, 1H, J = 6,4 Hz).

LCMS: [M + H] 410.

Primjer 59

tert-butil-(1R)-1-cikloheksil-2-okso-2-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amino] etilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 59 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (70 mg, 0,25 mmol), (2R)-[(tert-butoksikarbonil)amino](cikloheksil)etanske kiseline (98 mg, 0,38 mmol), trietilamina (0,139 ml, 1,0 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (144 mg, 0,38 mmol) u N,N-dimetilformamid (2,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11, s tim što se nakon 24 sata doda još (2R)-[(tert-butoksikarbonil)amino](cikloheksil)etanske kiseline (32 mg, 0,13 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (48 mg, 0,13 mmol) kako bi se dovršilo reakciju. Kromatografijom na silikagelu (1:1 etil-acetat/heksan), također na analogan način, a zatim trituriranjem dietil-eterom, dobije se naslovni spoj (90 mg, 0,17 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 70 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 11,43 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 10,14 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,70-7,64 (m, 3H), 7,61-7,54 (m, 2H), 7,53-7,46 (m, 2H), 3,96 (m, 1H), 1,79-1,49 (m, 6H), 1,41-1,29 (m, 14H, sadrži singlet na 1,38).

LCMS: [M + H]– 514,2.

Primjer 60

(2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)etanamid-trifluoracetat

[image]

Dobivanje primjera 60 iz naslovnog spoja u Primjeru 59 (90 mg, 0,17 mmol) i 1:1 smjese TFA/CH2Cl2 (5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 20. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje smjesom metanol/dietil-eter, čime se dobije naslovni spoj (70 mg, 0,013 mmol) u obliku narančastožutog praha, u prinosu od 78 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,22 (s, 1H), 10,63 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 8,22 (br s, 2H), 8,14 (s, 1H), 7,72-7,66 (m, 3H), 7,64-7,49 (m, 4H), 3,72 (m, 1H), 1,91-1,59 (m, 6H), 1,29-1,14 (m, 5H, djelomično zasjenjen dietil-eterom).

LCMS: [M + H]+ 416,2, [M + Na]+ 438,2.

Primjer 61

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 61 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (198 mg, 0,72 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (175 mg, 1,08 mmol; kako što je opisano u A. Thurkauf i suradnici: J. Med. Chem., 43, 3923-3932, (2000.)), trietilamina (0,401 ml, 2,88 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (411 mg, 1,08 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (3 % metanol u CH2Cl2), također na analogan način, a zatim prikupljanjem na friti, te ispiranjem dietil-eterom dobije se naslovni spoj (86 mg, 0,20 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 28 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 8,16 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 7,69-7,63 (m, 3H), 7,60-7,46 (m, 4H), 7,34-7,17 (m, 5H), 2,44-2,35 (m, 1H), 2,13-2,05 (m, 1H), 1,55-1,46 (m, 1H), 1,42-1,34 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 421,1.

Alternativni postupak dobivanja u Primjeru 61

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 2-fenil-6-[((1R,2R)-2-fenilciklopropankarbonil)amino]-1H-indol-4-

karboksilne kiseline 61(a)

Dobivanje iz Međuprodukta 7(a) (3,83 g, 12,64 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (2,27 mg, 13,97 mmol), trietilamina (3,52 ml, 25,28 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (5,31 g, 13,97 mmol) u CH2Cl2 (6,5 ml) i N,N-dimetilformamidu (6,5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3 dobije se sirovi produkt u obliku ulja u N,N-dimetilformamidu. Doda se dietil-eter (približno 500 ml) i CH2Cl2 (80 ml), a smjesu zatvori i snažno miješa preko noći, a zatim se ulje prevede u zelenkastosmeđu krutinu, koju se prikupi filtracijom, te ispere dietil-eterom, metanolom i vodom. Filtrat se otpari do ulja, te se doda voda kako bi se istaložilo drugu šaržu krutine, koju se također prikupi filtracijom, te također ispere metanolom i vodom. Obje šarže istaložene i isprane krutine se pomiješa kako bi se dobilo 4,18 g željenog produkta. Uz to, konačni filtrat se otpari, te podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton kako bi se dobilo još malo produkta (0,275 mg). Pomiješane šarže daju Međuprodukt 61(a) (4,46 g, 10,86 mmol) u obliku žućkastosmeđe krutine, u prinosu od 86 %.

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 3-formil-2-fenil-6-[((1R,2R)-2-fenilciklopropankarbonil)amino]-1H-indol-4-

karboksilne kiseline 61(b)

Međuprodukt 61 (a) (4,02 g, 9,79 mmol) otopi se u CH2Cl2 (80 ml), te obradi Vilsmeierovim reagensom (2,94 ml) na način sličan onom opisanom u Koraku 4 u Primjeru 3. Nakon približno 10 minuta miješanja na temperaturi ledene kupelji, a zatim 10 minuta na sobnoj temperaturi, volumen CH2Cl2 se smanji u vakuumu. Uz hlađenje u ledenoj kupelji i miješanje u reakcijsku smjesu se doda Na2CO3 (približno 1,2 g) u H2O (10 ml) u obliku paste. U još hladnu reakcijsku smjesu doda se još H2O (20 ml). Doda se metanol (približno 100 ml), a reakcijsku smjesu ostavi da se zagrije do sobne temperature uz daljnje miješanje, gdje se opaža polagano razvijanje plina. Nakon 4 sata smjesu se koncentrira u vakuumu, te se doda CH2Cl2 kao bi se podesilo sastav otapala do približno 4:1 smjese CH2Cl2/metanol. Istaloženi Na2CO3 se zatim ukloni filtriranjem, a filtrat se koncentrira u vakuumu, gdje uglavnom preostaje metanol kao otapalo. Doda se etil-acetat, a smjesu se zatim osuši (Na2SO4), te filtrira i otpari kako bi se dobilo žutu krutinu. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 4:1 smjesom heksan/aceton, uz porast do 1:1 smjese heksan/aceton) dobije se Međuprodukt 61 (b) (4,2 g, 9,64 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od približno 98 %.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid

(1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

Međuprodukt 61(b) (4,1 g, 9,41 mmol) octenu kiselinu (0,78 ml, 13,63 mmol) i H2NNH2·H2O (1,37 ml, 28,23 mmol) u bezvodnom metanolu (100 ml) refluksira se na način sličan onom opisanom u Primjeru 3, Korak 5. Dobiveni talog prikupi se filtriranjem, te ispere s minimalnom količinom metanola, čime se dobije naslovni spoj (3,5 g, 8,28 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 88 %.

Primjer 62

[image]

Dobivanje primjera 62 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (79 mg, 0,28 mmol), (1S,2S)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (60 mg, 0,37 mmol; kako što je opisano u A. Thurkauf i suradnici: J. Med. Chem., 43, 3923-3932, (2000.)), trietilamina (0,160 ml, 1,14 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (141 mg, 0,37 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (5 % metanol u CH2Cl2), također na analogan način, a zatim trituriranjem metanolom dobije se naslovni spoj (26 mg, 0,06 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 22 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,10 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,72-7,43 (m, 7H), 7,35-7,26 (m, 2H), 7,24-7,17 (m, 3H), 2,40 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,52 (m, 1H), 1,38 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 421,3, [M + Na]+ 423,2.

Primjer 63

6-okso-2-fenil-N-[2-(1H-tetrazol-5-il)etil]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 63 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,0989 g, 0,288 mmol), 2-(1H-tetrazol-5-il)etilamina (0,072 g, 0,317 mmol), trietilamina (0,0883 ml, 0,634 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,121 g, 0,317 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 58. Preparativnim HPLC-om (25-80 % CH3CN/H2O), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,002 g) u prinosu od 1,7 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,50 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 8,83 (t, 1H, J = 4,9 Hz), 8,05 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,70 (d, 2H, J = 7,6 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 3,64 (q, 2H, J = 6,1Hz), 3,14 (t, 2H, J = 6,8 Hz).

HRMS: izračunato za C20H17N8O2 401,1474 [M + H], opaženo 401,1476.

Primjer 64

N-[2-(4-morfolinil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 64 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,0991 g, 0,289 mmol), 2-morfolin-4-iletilamina (0,041 g, 0,317 mmol), trietilamina (0,0483 ml, 0,347 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,121 g, 0,317 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 58. Preparativnim HPLC-om (10-80 % CH3CN/H2O), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,018 g) u prinosu od 15 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,48 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 8,62 (t, 1H, J = 5,3 Hz), 8,07 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,70 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 3,57 (t, 4H, J = 4,3 Hz), 3,37-3,43 (m, 2H), 2,41 (brs, 6H).

HRMS: izračunato za C23H24N5O3 418,1879 [M + H], opaženo 418,1858.

Primjer 65

6-okso-N-[3-(2-okso-1-pirolidinil)propil]-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 65 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,109 g, 0,319 mmol), 1-(3-aminopropil)pirolidin-2-ona (0,05 g, 0,351 mmol), trietilamina (0,0534 ml, 0,383 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,133 g, 0,351 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 58. Preparativnim HPLC-om (10-80 % CH3CN/H2O), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,035 g) u prinosu od 26 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,54 (s, 1H), 10,51 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,70 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,53-7,62 (m, 4H), 3,23-3,37 (m, 6H), 2,21 (t, 2H, J = 7,9 Hz), 1,89-1,96 (m, 2H), 1,72 (t, 2H, J = 6,8Hz).

HRMS: izračunato za C24H24N5O3 430,1879 [M + H], opaženo 430,1899.

Primjer 66

2-etilsulfanil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)nikotinamid

[image]

Dobivanje primjera 66 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (30 mg, 0,096 mmol), 2-etilsulfanilnikotinske kiseline (22 mg, 0,12 mmol), trietilamin (0,020 ml, 0,14 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (46 mg, 0,12 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz prethodno ispiranje silikagela 3 % trietilaminom u etil-acetatu, uz eluiranje 3 % trietilaminom u 19:6:1 smjesi etil-acetat/heksan/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (7 mg, 0,016 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 17 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,15 (s, 1H), 10,60 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 8,59 (s, 1H, uz fino cijepanje), 8,22 (s, 1H), 7,95 (m, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,72-7,48 (m, 6H), 7,25 (m, 1H), 3,21-3,10 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 1,35-1,23 (m, 3H).

LCMS: [M + H]+ 442,3, [M + Na]+ 464,1.

Primjer 67

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; i

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1S,2S)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 67 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (slobodna baza) (21 mg, 0,105 mmol), ±-trans-2-fenil-1-ciklopropan karboksilne kiseline (20 mg, 0,126 mmol), trietilamina (0,044 ml, 0,315 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (48 mg, 0,126 mmol) u CH2Cl2 (0,3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (5:4:1 heksan/CH2Cl2/metanol, a zatim 9:1 CH2Cl2/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (20 mg, 0,058 mmol) (smjesa trans-dijastereomera) u obliku žutog praha, u prinosu od 55 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,72 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,25 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,56 (s, 1H, preklapanje), 7,55 (s, 1H, preklapanje), 7,46 (s, 1H), 7,37-7,13 (m, 5H), 2,39 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,51 (m, 1H), 1,39 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 345,4, [M + Na]+ 367,3.

Primjer 68

8-(3-klorbenzilamino)-2-fenil-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

[image]

Naslovnom spoju u Primjeru 7 (hidroklorid) (40 mg, 0,13 mmol) i trietilaminu (0,053 ml, 0,38 mmol) u N,N-dimetilformamidu (0,9 ml) ukapa se 1-brommetil-3-klorbenzen (0,17 ml, 0,13 mmol), uz miješanje. Nakon miješanja preko noći smjesu se kromatografira na silikagelu, uz eluiranje 2:1 smjesom heksan/etil-acetat kako bi se, nakon izdvajanja, dobilo naslovni spoj (36 mg, 0,090 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 71 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,59 (s, 1H, izmjene), 10,22 (s, 1H, izmjene), 7,60-7,27 (m, 10H), 7,08 (s, 1H), 6,60 (t, 1H, J = 4,9 Hz, izmjene), 6,45 (s, 1H), 4,36 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 401,3, 403,3.

[image]

Primjer 69

8-[bis(3-klorbenzil)amino1-2-fenil-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

[image]

Naslovni spoj (7 mg, 0,013 mmol) izdvoji se u obliku žutog praha, u prinosu od 10 %, kao nusprodukt u sintezi opisanoj u Primjeru 68.

1H-NMR (d4-metanol): � 7,51-7,31 (m, 6H), 7,25-7,10 (m, 9H), 6,64 (s, 1H), 4,64 (s, 4H).

LCMS: [M + H]+ 525,3.

Primjer 70

N-[2-(dimetilamino)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid-trifluoracetat

[image]

Dobivanje primjera 70 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,08 g, 0,23 mmol), N,N-dimetiletan-1,2-diamina (0,0247 g, 0,28 mmol), trietilamina (0,17 ml, 1,2 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,106 g, 0,28 mmol) u DMSO-u (6 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctena kiselina), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0076 g) u prinosu od 6,8 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,53 (s, 1H), 10,54 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,84 (t, 1H, J = 5,5 Hz), 8,12 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,75-7,67(m, 2H), 7,66-7,53 (m, 3H), 7,52 (s, 1H), 3,62 (m, 2H), 3,39 (m, 2H), 2,86 (s, 6H).

LCMS: [M + H]+ 376,1.

HRMS: C21H21N5O2·H: 376,1774, opaženo: 376,1785.

Primjer 71a

(S)-2-dimetilamino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamid (hidrokloridna sol)

[image]

Dobivanje iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (40 mg, 0,128 mmol), (S)-2-dimetilamino-3-fenilpropionske kiseline (30 mg, 0,154 mmol), trietilamina (0,071 ml, 0,512 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (59 mg, 0,154 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamid (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1,5 % trietilaminom u CH2Cl2, a zatim 1,5 % trietilaminom u 9:1 smjesi CH2Cl2/metanol), također na analogan način, dobije se slobodna baza naslovnog spoja (46 mg, 0,10 mmol) u 3 odvojene šarže, u kombiniranom prinosu od 80 %. Dvije šarže prenese se u Primjer 71 b odnosno 71c. Trećoj šarži (8 mg, 0,018 mmol) doda se tetrahidrofuran i 1,2 ekvivalenta HCl u dioksanu (iz 4 M matične otopine). Nakon otparavanja se trituriranjem dietil-eterom i 1:1 smjesom CH2Cl2/heksan dobije naslovni spoj (6 mg, 0,012 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 67 % za dobivanje soli.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,25 (s, 1H, izmjene), 10,76 (br s, 2H, izmjene), 10,42 (s, 1H, izmjene), 7,95 (s, 1H), 7,72-7,45 (m, 7H), 7,35-7,16 (m,5H), 4,28 (m, 1H), 3,05-2,90 (m, 6H).

LCMS (slobodna baza): [M + H]+ 452,3, [M + Na]+ 474,3.

Primjer 71b

(S)-2-dimetilamino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamid

[image]

Jednu šaržu slobodne baze, (S)-2-dimetilamino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamida (13 mg, 0,029 mmol) iz Primjera 71a, triturira se 1:1 smjesom dietil-eter/heksan kako bi se dobilo pročišćeni naslovni spoj (12 mg, 0,027 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 93 % za trituriranje.

Primjer 71c

(S)-2-dimetilamino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamid; spoj s (2R,3R)-2,3-dihidroksijantarnom kiselinom

[image]

Jednu šaržu slobodne baze, (S)-2-dimetilamino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamida (22 mg, 0,049 mmol) iz Primjera 71a, triturira se 1:1 smjesom dietil-eter/heksan, čime se dobije pročišćeni materijal (20 mg, 0,044 mmol). Jedan obrok (10 mg, 0,022 mmol) otopi se zatim u malo približno 1:1 smjese tetrahidrofuran/metanol, te obradi s l-vinskom kiselinom (3,3 mg, 0,022 mmol). Hlapive komponente dobivene bistre otopine uklonio se u struji argona. Dobivenom žutom ulju doda se dietil-eter i 1 kap metanola, čime se dobije fini žuti talog, kojeg se izdvoji odlijevanjem većeg dijela tekućine, te se uklanjanjem u visokom vakuumu preostalih hlapivih komponenti dobije naslovni spoj u obliku tartaratne soli (13 mg, 0,022 mmol), u kvantitativnom prinosu.

Primjer 72

N-(2-{4-[(metilamino)metil]fenil}-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid-trifluoracetat

[image]

Korak 1 Dobivanje metil-6-(acetilamino)-2-(3-{[{[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}(metil)amino]metil}fenil)-1H-

indol-4-karboksilata 72(a)

Uz miješanje, Međuproduktu 73(c) iz Primjera 73 (54 mg, 0,16 mmol) u CH2Cl2 (2,5 ml) doda se 2,4,6-trimetilpiridin (0,11 ml, 0,80 mmol), a zatim anhidrid metansulfonske kiseline (42 mg, 0,23 mmol). Nakon 3,5 sati doda se još anhidrida metansulfonske kiseline (7 mg, 0,04 mmol), a smjesu miješa još 1 sat, zatim se doda metilamin u tetrahidrofuranu (2,0 ml, 2,0 M), a reakcijsku smjesu miješa preko noći na sobnoj temperaturi. Nakon otparavanja hlapivih komponenti doda se CH2Cl2 (2,0 ml), trietilamin (0,064 ml, 0,46 mmol) i di-tert-butil-bikarbonat (50 mg, 0,23 mmol), a reakcijsku smjesu miješa 2,5 sati, te se nakon uklanjanja hlapivih komponenti sirovi produkt pročisti kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje 1:1 smjesom etil-acetat/heksan kako bi se dobilo Međuprodukt 72(a) (46 mg, 0,10 mmol) u prinosu od 64 %.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: N-(2-{4-[(metilamino)metil]fenil}-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]

diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid-trifluoracetat

Na način sličan onom opisanom u Primjeru 3, Korak 4, Međuprodukt 72(a) (45 mg, 0,10 mmol) u CH2Cl2 (1,5 ml) se obradi prethodno pomiješanim Vilsmeierovim reagensom, koji je POCl3 (0,021 ml, 0,23 mmol) i N,N-dimetilformamid (0,05 ml, 0,65 mmol). Nakon 2 sata doda se 2 N otopina natrijevog acetata u vodi, a sirovi 3-formilirani produkt izdvoji ekstrakcijom etil-acetatom. Nakon otparavanja hlapivih komponenti doda se metanol (1,5 ml), H2NNH2·H2O (0,015 ml, 0,31 mmol) i octena kiselina (0,010 ml, 0,17 mmol), a smjesu 45 minuta grije u uljnoj kupelji na 70 °C. pročišćavanje se provede kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje 3:2 smjesom etil-acetat/heksan. Zaštićeni međuprodukt, 1,1-dimetiletil-{4-[8-(acetilamino)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il]fenil}metil(metil)karbamat, obradi se 1:1 smjesom TFA/CH2Cl2 (5 ml), analogno kao u Primjeru 20. Izdvajanjem se dobije naslovni spoj (2 mg, 0,004 mmol), u prinosu od 4 %.

LCMS: [M + H]+ 362,3.

Primjer 73

N-[2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-2-fluor-3-trifluormetilbenzamid

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 2-(3-acetoksimetilfeniletinil)-3,5-bisacetilaminobenzojeve kiseline 73(b)

Smjesu (C6H5CN)2PdCl2 (0,8 g, 2 mmol), CuI (0,267 g, 1,4 mmol) i tri-tert-butilfosfana (1,05 ml, 4 mmol) u dioksanu (35 ml, 2,0 M) miješa se na 22 °C 15 minuta. Uzastopce se doda diizopropilamin (17,1 ml, 122 mmol), Međuprodukt 6(b) iz Primjera 6 (23 g, 69,9 mmol), 3-etinilbenzilni ester octene kiseline (17 g, 98,0 mmol) (vidjeti niže za dobivanje) i N,N-dimetilformamid (35 ml, 2,0 M). Reakcijsku smjesu miješa se 16 sati na 70 °C. Doda se etil-acetat (300 ml), a soli filtrira kroz diatomejsku zemlju. Otapalo se ukloni pod sniženim tlakom, a dobivenu krutinu triturira etil-acetatom (25 ml), diklormetanom (50 ml) i dietil-eterom (25 ml). Talog se prikupi filtriranjem, te ispere 5 % diklormetanom u dietil-eteru (100 ml) kako bi se, nakon sušenja, dobilo Međuprodukt 73(b) (25,7 g), u prinosu od 87 %, u obliku bijelog praha.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,35 (s, 1H), 9,54 (s, 1H), 8,21 (d, 1H, J = 2,1Hz), 8,08 (d, 1H, J = 2,1Hz), 7,58-7,38 (m, 4H), 5,12 (s, 2H), 3,90 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

LCMS: [M – H]+ 421,3.

Za Korak 1, spoj 73(a) (3-etinilbenzilni ester octene kiseline) dobije se na sljedeći način:

Korak 1a-1c

[image]

Korak 1a Dobivanje sirovog 3-trimetilsilaniletilnilbenzaldehida 73(a1)

3-brombenzaldehid (30 g, 162 mmol), etiniltrimetilsilan (30 ml, 211 mmol), trifenilfosfin (2,13 g, 8 mmol), paladijev(II) acetat (0,91 g, 4 mmol) i trietilamin (540 ml, 0,3 M) grije se 5 sati na 90 °C, nakon hlađenja do temperature okoliša, a smjesu filtrira. Filtrat se otpari, a ostatak podvrgne kromatografiji na silikagelu (heksan do 4:96 dietil-eter/heksan) kako bi se dobilo 3-trimetilsilaniletinilbenzaldehid 73(a1).

Korak 1b Dobivanje sirovog (3-etilnilfenil)metanola 73(a2)

3-trimetilsilaniletinilbenzaldehidu 73(a1) iz Koraka 1a u metanolu (540 ml, 0,3 M) doda se KF (18,8 g, 324 mmol), a dobivenu smjesu miješa 6 sati na 22 °C. Nakon hlađenja do 0 °C pažljivo se 30 minuta dodaje NaBH4 (6,13 g, 162 mmol). Pažljivo se doda zasićena vodena otopina NH4Cl, a hlapive tvari ukloni u vakuumu. Doda se etil-acetat (200 ml), a organsku fazu ispere vodom i zasićenom vodenom otopinom NaCl, osuši preko MgSO4, te filtrira. Hlapive tvari ukloni se u vakuumu kako bi se dobilo sirovi (3-etinilfenil)metanol 73(a2).

Korak 1c Dobivanje 3-etinilbenziloctene kiseline 73(a)

Sirovi (3-etinilfenil)metanol 73(a2) iz Koraka 1b, acetanhidrid (20 ml, 21 mmol), diizopropiletilamin (85 ml, 486 mmol) i 4-dimetilamino-piridin (0,3963,2 mmol) miješa se 30 minuta u CH2Cl2 (540 ml, 0,3 M). Pažljivo se doda zasićena vodena otopina NH4Cl (100 ml), a organsku fazu ispere slanom vodom, osuši preko MgSO4, te filtrira. Hlapive tvari ukloni se u vakuumu kako bi se kromatografijom na silikagelu (heksani do 12:88 dietil-eter/heksani), dobilo 3-etinilbenziloctenu kiselinu (a) (17,83 g), u prinosu od 63 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 7,32-7,01 (m, 4H), 4,85 (s, 2H), 4,01 (s, 1H), 1,89 (s, 3H).

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 6-acetilamino-2-(3-hidroksimetilfenil)-1H-indol-4-karboksilne kiseline 73(c)

Na način analogan onom u Koraku 4 u Primjeru 6, Međuprodukt 73(b) (24 g, 56,8 mmol) se ciklizira u Međuprodukt 73(c) (10,1 g), u prinosu od 52 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,89 (s, 1H), 10,16 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,89 (bs, 2H), 7,51 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,49 (dd, 1H, J = 7,7, 7,5 Hz), 7,33 (bs, 2H), 5,37 (dd, 1H, J = 5,8, 5,7 Hz), 4,64 (d, 2H, J = 5,65 Hz), 3,99 (s, 3H), 2,13 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 339,0.

Korak 3 Dobivanje 8-amino-2-(3-dimetilaminometilfenil)-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-ona 73(d)

U otopinu Međuprodukta 73(c) (1 g, 3 mmol) u diklormetanu (0,1 M, 30 ml) doda se 2,4,6-kolidin (1,56 ml, 12 mmol), a zatim (CH3SO2)2O (0,62 g, 3,6 mmol). Nakon 2 sata miješanja doda se dimetilamin (5,6 M otopina u etanolu, 2,6 ml, 15 mmol), a reakcijsku smjesu miješa 24 sata na 22 °C. Hlapive tvari ukloni se u vakuumu, a sirovu smjesu otopi u metanolu (15 ml). Pažljivo se doda bezvodna 4 M otopina HCl u dioksanu (15 ml, 60 mmol), te grije 2,5 sati na 90 °C. Nakon hlađenja na 22 °C hlapive tvari se ukloni u vakuumu, a sirovi metilni ester 6-amino-2-(3-dimetilaminometilfenil)-1H-indol-4-karboksilne kiseline formilira i ciklizira na način analogan onom u koracima 4 i 5 u Primjeru 3. Kromatografijom na silikagelu (90:10 do 75:25 CH2Cl2/2 M amonijak u izopropil-alkoholu) dobije se Međuprodukt 73(d) (0,3 g, 0,9 mmol), u prinosu od 30 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,54 (s, 1H), 10,15 (s, 1H), 7,55-7,32 (m, 5H), 6,98 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 6,65 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 5,2 (bs, 2H), 3,49 (b, 2H), 2,20 (bs, 6H).

LCMS: [M + H]+ 334,2.

Korak 4 Dobivanje naslovnog spoja: N-[2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]

diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-2-fluor-3-trifluormetilbenzamid

Dobivanje iz Međuprodukta 73(d) (0,11 g, 0,4 mmol), 2-fluor-3-trifluormetilbenzojeve kiseline (0,103 g, 0,6 mmol), trietilamina (0,183 ml, 1,6 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,188 g, 0,6 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,2 M, 1,7 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (90:10 to 80:20 CH2Cl2/2 M amonijak u izopropil-alkoholu) dobije se naslovni spoj (0,11 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 64 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,26 (s, 1H), 10,84 (s, 1H), 10,51 (s, 1H), 9,62 (b, 1H), 8,29 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 8,08-7,94 (m, 2H), 7,85-7,53 (m, 7H), 4,39 (s, 2H), 2,73 (s, 6H).

LCMS: [M + H]+ 524,2.

Primjer 74

Metil-1-[3-(metilamino)propil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksilat; trifluoracetat

[image]

U otopinu naslovnog spoja iz Primjera 39 (0,32 g, 1 mmol) u bezvodnom DMSO-u (10 ml) doda se NaH (60 % suspenzija u mineralnom ulju) (0,088 g, 2,2 mmol). Smjesu se ostavi miješati 5 minuta, a zatim se doda 1,2-dibrompropan (0,24 g, 1,2 mmol). Smjesu se ostavi miješati preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim se doda 2 M otopina metilamina u metanolu (4 ml, 8 mmol). Smjesu se podvrgne preparativnom HPLC-u (20-50 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline). Najčišće frakcije se pomiješa i liofilizira kako bi se dobilo naslovni spoj (0,0209 g) u prinosu od 4,1 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,61 (s, 1H), 8,39 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 8,22 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 7,70-7,55 (m, 5H), 7,07 (s, 1H), 4,41 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 3,92 (s, 3H), 2,80-2,60 (br, 2H), 2,43 (s, 3H), 1,95-1,75 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 391,2.

HRMS: C22H22N4O3·H: 391,1770, opaženo: 391,1768.

Primjer 75

6-okso-2-fenil-N-((1,2-trans)-2-fenilciklopropil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 75 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,34 g, 1 mmol), ±-(1,2-trans)-2-fenilciklopropilamin-hidroklorida (0,2 g, 1,2 mmol), trietilamina (0,28 ml, 2 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,46 g, 1,2 mmol) u DMSO-u (10 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0145 g) u prinosu od 3,5 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,46 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 8,88 (d, 1H, J = 4,4 Hz), 8,10 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 8,02 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 7,75-7,66(m, 2H), 7,64-7,53 (m, 3H), 7,51 (s, 1H), 7,32-7,25 (m, 2H), 7,23-7,10 (m, 3H), 3,08 (m, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,41 (m, 1H), 1,23 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 421,1.

Primjer 76

N-(2-hidroksi-2-feniletil)-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

U otopinu naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,105 g, 0,306 mmol) u DMSO-u (2 ml) doda se trietilamin (0,085 ml, 0,612 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (0,232 g, 0,612 mmol). Nakon približno 5 minuta doda se 2-amino-1-feniletanol (0,084 g, 0,612 mmol), a smjesu miješa preko noći. Smjesu se podvrgne preparativnom HPLC-u (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), a najčišće frakcije pomiješa i liofilizira kako bi se dobilo naslovni spoj (0,018 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 14 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,47 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 8,68 (t, 1H, J = 4,5 Hz), 8,09 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,71 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 7,24-7,41 (m, 5H), 4,80-4,84 (m, 1H), 3,46-3,54 (m, 2H).

HRMS: izračunato za C25H21N4O3 425,1614 [M + H], opaženo 425,1633.

Primjer 77

6-okso-2-fenil-N-[3-(trifluormetil)benzil]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 77 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,1 g, 0,291 mmol), 3-(trifluormetil)benzilamina (0,102 g, 0,582 mmol), trietilamina (0,081 ml, 0,582 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,221 g, 0,582 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,024 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 18 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,49 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 9,33 (t, 1H, J = 6,0 Hz), 8,14 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,52-7,72 (m, 10H), 4,58 (d, 3H, J = 5,7 Hz).

HRMS: izračunato za C25H18N4O2F3 463,1382 [M + H], opaženo 463,1391.

Primjer 78

6-okso-2-fenil-N-(1-feniletil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 78 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,103 g, 0,3 mmol), 1-feniletilamina (0,0727 g, 0,6 mmol), trietilamina (0,084 ml, 0,6 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,228 g, 0,6 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0081 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 6,6 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,44 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 9,03 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,14 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,71 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 7,41 (d, 2H, J = 7,6 Hz), 7,32 (t, 2H, J = 7,6 Hz), 7,22 (t, 1H, J = 7,2 Hz), 5,16-5,25 (m, 1H), 1,51 (d, 3H, J = 6,8 Hz).

HRMS: izračunato za C25H27N4O2 409,1665 [M + H], opaženo 409,1679.

Primjer 79

N-[1-(4-fluorfenil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 79 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,0979 g, 0,285 mmol), 1-(4-fluorfenil)etilamina (0,0793 g, 0,57 mmol), trietilamina (0,079 ml, 0,57 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,217 g, 0,57 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0043 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 3,5 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,44 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 9,03 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,13 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,71 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 7,42-7,47 (m, 2H), 7,12-7,18 (m, 2H), 5,15-5,24 (m, 1H), 1,50 (d, 3H, J = 7,2 Hz).

HRMS: izračunato za C25H20N4O2F 427,1570 [M + H], opaženo 427,1584.

Primjer 80

N-(2,3-dihidro-1H-inden-1-il]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 80 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,1 g, 0,291 mmol), 2,3-dihidro-1H-inden-1-ilamina (0,0775 g, 0,582 mmol), trietilamina (0,081 ml, 0,582 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,221 g, 0,582 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0045 g ) u obliku žutog praha, u prinosu od 3,7 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,45 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 9,01 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,15 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,71 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 7,18-7,28 (m, 4H), 5,56-5,64 (m, 1H), 2,79-3,06 (m, 2H), 1,98-2,46 (m, 2H).

HRMS: izračunato za C25H20N4O2F 427,1570 [M + H], opaženo 427,1584.

Primjer 81

6-okso-2-fenil-N-(1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 81 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,103 g, 0,3 mmol), 1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilamina (0,0883 g, 0,6 mmol), trietilamina (0,084 ml, 0,6 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,228 g, 0,6 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0136 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 10 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,44 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 9,01 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 8,15 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,71 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 7,10-7,23 (m, 4H), 5,23-5,30 (m, 1H), 2,75-2,81 (m, 2H), 1,96-2,01 (m, 2H), 1,74-1,90 (m, 2H).

HRMS: izračunato za C27H23N4O2 435,1821 [M + H], opaženo 435,1810.

Primjer 82

N-[1-metil-1-(4-metilfenil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 82 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,103 g, 0,3 mmol), 1-metil-1-(4-metilfenil)etilamina (0,0895 g, 0,6 mmol), trietilamina (0,084 ml, 0,6 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,228 g, 0,6 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0304 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 23 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,41 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,70 (d, 2H, J = 6,80 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 7,26 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,08 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 2,25 (s, 3H), 1,67 (s,6H).

HRMS: izračunato za C27H25N4O2 437,1978 [M + H], opaženo 437,1987.

Primjer 83a

[2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 83a iz Međuprodukta 73(d) u Primjeru 73 (0,11 g, 0,33 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (0,08 g, 0,5 mmol), trietilamina (0,183 ml, 1,32 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,188 g, 0,5 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,2 M, 1,7 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (90:10 to 80:20 CH2Cl2/2 M amonijak u izopropil-alkoholu) dobije se naslovni spoj (0,12 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 76 %.

Primjer 83b

[2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; HCl sol

[image]

Naslovni spoj u Primjeru 83a (0,075 g, 0,16 mmol) u diklormetanu (1,0 ml) obradi se s 4 M HCl u dioksanu (0,043 ml, 0,17 mmol). Nakon koncentriranja do suhog naslovni spoj (0,08 g) se dobije u kvantitativnom prinosu.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,19 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 10,02 (b, 1H), 8,20 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,84 (s, 1H), 7,76 (d, 1H, J = 7,4 Hz), 7,71-7,59 (m, 4H), 7,34-7,17 (m, 5H), 4,38 (d, 1H, J = 5,0 Hz), 2,78 (d, 6H, J = 4,6 Hz), 2,45-2,37 (m, 1H), 2,14-2,07 (m, 1H), 1,56-1,47 (m, 1H), 1,42-1,35 (m,1H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C29H29N5O2, 478,2243, opaženo 478,2261.

Primjer 84

N-(2-hidroksimetil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 3,5-bisacetilamino-2-(3-hidroksiprop-1-inil)benzojeve kiseline 84(a)

Međuprodukt 6(b) (10 g, 30,4 mmol) u Primjeru 6 i propargil-alkohol reagira na način analogan onom u Koraku 1 u Primjeru 73. Međuprodukt 84(a) (0,85 g) se dobije u prinosu od 9 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,29 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 5,34 (t, 1H, J = 5,84 Hz), 4,38 (d, 2H, J = 5,84 Hz), 3,83 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 3,5-bisacetilamino-2-[3-(tert-butildifenilsilaniloksi)prop-1-inil]

benzojeve kiseline 84(b)

Klor-tert-butildifenilsilan (1,3 g, 2 mmol), imidazol (0,54 g, 7,9 mmol) i Međuprodukt 84(a) (0,48 g, 1,6 mmol) miješa se u N,N-dimetilformamidu (0,2 M, 15 ml) 30 minuta na 22 °C. Doda se metanol, hlapive tvari ukloni u vakuumu, te se doda etil-acetat (50 ml). Organsku fazu ispere se 1 N vodenom otopinom HCl i slanom vodom, osuši preko MgSO4, filtrira, a hlapive tvari ukloni u vakuumu. Kromatografijom na silikagelu (80:20 etil-acetat/heksani) dobije se Međuprodukt 84(b) (0,5 g) u prinosu od 59 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,31 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 8,25 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 8,00 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,74-7,68 (m, 4H), 7,50-7,41 (m, 6H), 4,67 (s, 2H), 3,81 (s, 3H), 2,05 (s, 6H), 1,01 (s, 9H).

LCMS: [M – H]+ 541,1.

Korak 3 Dobivanje metilnog estera 6-acetilamino-2-(tert-butildifenilsilaniloksimetil)-1H-indol-4-karboksilne

kiseline 84(c)

Na način analogan onom u Koraku 5 u Primjeru 5, iz Međuprodukta 84(b) (0,46 g, 0,84 mmol) se dobije Međuprodukt 84(c) (0,24 g) u prinosu od 57 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,36 (s, 1H), 10,04 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,78 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,74-7,66 (m, 4H), 7,50-7,41 (m, 6H), 6,72 (s, 1H), 4,85 (s, 2H), 3,87 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 1,03 (s, 9H).

LCMS: [M – H]+ 499,1.

Korak 4 Dobivanje N-[2-(tert-butildifenilsilaniloksimetil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-il]acetamida 84(d)

Na način analogan onom u koracima 4 i 5 u Primjeru 3, Međuprodukt 84(c) (0,2 g, 0,4 mmol) se formilira i ciklizira kako bi se dobilo Međuprodukt 84(d) (0,14 g) u prinosu od 69 %.

LCMS: [M – H]+ 509,1.

Korak 5 Dobivanje naslovnog spoja: N-(2-hidroksimetil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-il)acetamid

U otopinu Međuprodukta 84(d) (0,085 g, 0,17 mmol) u tetrahidrofuranu (0,1 M, 1,6 ml) doda se 1 M otopina tetrabutilamonijevog fluorida u tetrahidrofuranu (0,184 ml, 0,18 mmol). Smjesu se miješa na 22 °C, a žutu krutinu prikupi filtriranjem, te ispere metanolom (5,0 ml) i dietil-eterom (5,0 ml) kako bi se dobilo naslovni spoj (0,029 g) u prinosu od 64 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,74 (s, 1H), 10,17 (s, 1H), 10,02 (s, 1H), 8,04 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 7,54 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 5,47 (dd, 1H, J = 5,5, 5,5 Hz), 4,68 (d, 2H, J = 5,4 Hz).

LCMS: [M + H]+ 273,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C13H13N4O3, 273,1001, opaženo 273,0988.

Primjer 85

3-{6-okso-8-[(1R,2R)-2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}benzilni ester octene kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 2-(3-hidroksimetilfenil)-6-[(1R,2R)-(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-1H-

indol-4-karboksilne kiseline 85(a)

Međuprodukt 73(c) iz Primjera 73 (1,8 g, 5 mmol) otopi se u metanolu (22 ml). Oprezno se doda 4 M HCl u dioksanu (22 ml, 75 mmol), a otopinu grije 1 sat na 90 °C. Nakon hlađenja do 22 °C hlapive tvari se ukloni u vakuumu kako bi se dobilo metilni ester 6-amino-2-(3-hidroksimetilfenil)-1H-indol-4-karboksilne kiseline, kojeg se zatim pomiješa s (1R,2R)-2-fenilciklopropankarboksilnom kiselinom (2 g, 12,5 mmol), trietilaminom (3,5 ml, 25 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevim heksafluorofosfatom (4,7 g, 12,5 mmol) u N,N-dimetilformamidu (0,2 M, 25 ml), te miješa 12 sati na 22 °C. Hlapive tvari se ukloni u vakuumu, a sirovu smjesu otopljenu u metanolu (25 ml, 0,2 M) 1 sat obrađuje s K2CO3 (1,38 g, 10 mmol) na 22 °C. Suvišni K2CO3 ukloni se filtriranjem, te se filtratu doda octena kiselina (2 kapi). Nakon otparavanja filtrata ostatak se podvrgne kromatografiji na silikagelu (90:10 do 100:0 etil-acetat/heksan), čime se dobije Međuprodukt 85(a) (1,1 g, 2,5 mmol) u prinosu od 50 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,83 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,75 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,43 (dd, 1H, J = 7,7, 7,5 Hz), 7,35-7,17 (m, 7H), 5,30 (dd, 1H, J = 5,8, 5,6 Hz), 4,59 (d, 2H, J = 5,4 Hz), 2,45-2,36 (m, 1H), 2,14-2,07 (m, 1H), 1,58-1,47 (m, 1H), 1,42-1,34 (m, 1H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C27H25N2O4, 441,1828, opaženo 441,1814.

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 2-(3-acetoksimetilfenil)-6-[(1R,2R)-(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-1H-

indol-4-karboksilne kiseline 85(b)

U suspenziju Međuprodukta 85(a) (1,1 g, 2,3 mmol) u etil-acetatu (22 ml, 0,1 M) doda se 4-(dimetilamino)piridin (0,28 g, 2,3 mmol) i acetanhidrid (0,47 g, 4,6 mmol). Smjesu se miješa 1 sat na 22 °C, a hlapive tvari ukloni u vakuumu. Kromatografijom na silikagelu (70:30 do 100:0 etil-acetat/heksani) dobije se Međuprodukt 85(b) (1,1 g, 2,3 mmol) u kvantitativnom prinosu.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,85 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,92-7,81 (m, 3H), 7,49 (dd, 1H, J = 7,7, 7,6 Hz), 7,37-7,13 (m, 7H), 5,15 (s, 2H), 3,92 (s, 3H), 2,45-2,36 (m, 1H), 2,14-2,07 (m, 1H), 1,58-1,47 (m, 1H), 1,42-1,34 (m, 1H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C29H27N2O5, 483,1920, opaženo 483,1945.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: 3-{6-okso-8-[((1R,2R)-2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-

[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}benzilni ester octene kiseline

Na način analogan onom u koracima 4 i 5 u Primjeru 3, Međuprodukt 85(b) (0,75 g, 1,56 mmol) se formilira i ciklizira. Pročišćavanjem kromatografijom na silikagelu (40:60 do 100:0 etil-acetat/heksani) dobije se naslovni spoj (0,505 g, 1,03 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 66 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,13 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 8,16 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,68-7,45 (m, 6H), 7,34-7,17 (m, 5H), 5,18 (s, 2H), 2,50-2,34 (m, 1H), 2,14-2,07 (m, 4H), 1,58-1,47 (m, 1H), 1,43-1,35 (m,1H).

HRMS: [M + H]+ izračunato za C29H25N4O4, 493,1876, opaženo 493,1882.

[image]

Primjer 86

[2-(3-hidroksimetilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropankarboksilna kiselina

[image]

Naslovni spoj u Primjeru 85 (0,288 g, 0,58 mmol) i K2CO3 (0,161 g, 1,17 mmol) miješa se u metanolu (0,2 M, 1,7 ml) i tetrahidrofuranu (0,2 M, 1,7 ml) 1,5 sati na 22 °C. Nakon što se otopinu filtrira i zakiseli s 2 kapi ledene octene kiseline hlapive tvari se ukloni u vakuumu. Kromatografijom na silikagelu (40:60 do 0:100 heksan/etil-acetat) dobije se naslovni spoj (0,26 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 95 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,11 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 8,15 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 7,64 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 7,61 (s, 1H), 7,55-7,17 (m, 9H), 5,35 (dd, 1H, J = 5,8, 5,6 Hz), 4,60 (d, 2H, J = 5,6 Hz), 2,45-2,36 (m, 1H), 2,14-2,07 (m, 1H), 1,58-1,47 (m, 1H), 1,42-1,34 (m, 1H).

LCMS:[M – H]+ 449,1.

[image]

Primjer 87

N-(2,4-difluorbenzil)-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 87 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,102 g, 0,297 mmol), 2,4-difluorbenzilamina (0,085 g, 0,594 mmol), trietilamina (0,083 ml, 0,594 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,226 g, 0,594 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0044 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 3,4 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,48 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 9,20 (t, 1H, J = 5,5 Hz), 8,13 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,71 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,52-7,62 (m, 4H), 7,40-7,47 (m, 1H), 7,16-7,25 (m, 1H), 7,03-7,10 (m, 1H), 4,49 (d, 2H, J = 5,3Hz).

HRMS izračunato za C24H17N4O2F2 431,1320 [M + H], opaženo 431,1324.

Primjer 88

tert-butilni ester 4-[2-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil)etil]piperidin-1-karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 88 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (44 mg, 0,141 mmol), tert-butilnog estera 4-(2-karboksietil)piperidin-1-karboksilne kiseline (43 mg, 0,169 mmol), trietilamin (0,059 ml, 0,423 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (64 mg, 0,169 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 8:5:2 smjesom CH2Cl2/heksan/metanol), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (62 mg, 0,120 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 85 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,15 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 10,06 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,70-7,46 (m, 7H), 3,96-3,87 (m, 2H), 2,75-2,63 (m, 2H), 2,42-2,34 (m, 2H), 1,72-1,55 (m, 5H), 1,40 (s, 9H), 1,06-0,98 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 416,3, [M + Na]+ 538,3.

Primjer 89

(E)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilakrilamid

[image]

Dobivanje primjera 89 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (40 mg, 0,128 mmol), (E)-3-fenilakrilne kiseline (23 mg, 0,154 mmol), trietilamina (0,054 ml, 0,384 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (59 mg, 0,154 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 2:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, nakon konačnog trituriranja metanolom, dobije se naslovni spoj (47 mg, 0,116 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 90 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,14 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,71-7,40 (m, 13H), 6,87 (d, 1H, J = 16,2 Hz).

LCMS: [M + H]+ 407,1, [M + Na]+ 429,0, [M – H]– 405,2.

[image]

Primjer 90

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (2E,4E)-heksa-2,4-dienske kiseline

[image]

Dobivanje primjera 90 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (41 mg, 0,131 mmol), (2E,4E)-heksa-2,4-dienske kiseline (18 mg, 0,157 mmol), trietilamina (0,055 ml, 0,393 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (60 mg, 0,157 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 2:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, nakon konačnog trituriranja metanolom, dobije se naslovni spoj (8 mg, 0,022 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 16 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,13 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,21 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,71-7,48 (m, 7H), 7,15 (m, 1H), 6,38-6,07 (m,3H), 1,84 (d, 3H, J = 5,8 Hz).

LCMS: [M + H]+ 371,1, [M + Na]+ 393,0.

Primjer 91

(2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid (hidroklorid)

[image]

Naslovni spoj u Primjeru 59 (210mg, 0,41 mmol) obradi se s 4 M HCl u dioksanu, te ostavi miješati čvrsto zatvoren u obliku mulja približno 4 sata, nakon čega se hlapive komponente otpari, doda se dietil-eter, te otpari nekoliko puta. Dobivene krutine otopi se u metanolu, istaloži dietil-eterom, te prikupi kako bi se dobilo naslovni spoj (161 mg, 0,36 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 87 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,27 (s, 1H), 10,83 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 8,36 (br s, 2H), 8,13 (s, 1H), 7,78-7,64 (m, 3H), 7,63-7,48 (m, 4H), 3,81 (brs, 1H), 1,91-1,58 (m, 6H), 1,31-1,00 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 416,1,[M + Na]+ 438,2.

[image]

Primjer 92

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-piperidin-4-il-propionamid; spoj s trifluoroctenom kiselinom

[image]

Dobivanje primjera 92 iz naslovnog spoja u Primjeru 88 (52 mg, 0,101 mmol) i 45 % TFA u CH2Cl2 (1 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 20. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (50 mg, 0,084 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 82 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,07 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,09 (s, 1H), 8,45 (br s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,70-7,44 (m, 7H), 3,31-3,20 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 2,93-2,76 (m, 2H), 2,41-2,31 (m, 2H), 1,91-1,76 (m, 2H), 1,64-1,49 (m, 3H), 1,38-1,19 (m, 2H).

[image]

Primjer 93

6-okso-2-fenil-N-[(1R)-1-feniletil]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 93 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,105 g, 0,306 mmol), (1R)-1-feniletilamina (0,0742 g, 0,612 mmol), trietilamina (0,085 ml, 0,612 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,233 g, 0,612 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0235 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 19 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,44 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 9,03 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,14 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,70 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 7,42 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,30-7,36 (m, 2H), 7,20-7,24 (m, 1H), 5,16-5,25 (m, 1H), 1,50 (d, 3H, J = 7,2 Hz).

HRMS: izračunato za C25H21N4O2 409,1665 [M + H], opaženo 409,1666.

Primjer 94

6-okso-2-fenil-N-[(1S)-1-feniletil]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 94 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,0976 g, 0,284 mmol), (1S)-1-feniletilamina (0,0688 g, 0,568 mmol), trietilamin (0,079 ml, 0,568 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,216 g, 0,568 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0197 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 17 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,44 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 9,04 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,14 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,70 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 7,42 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,30-7,36 (m, 2H), 7,20-7,24 (m, 1H), 5,16-5,25 (m, 1H), 1,50 (d, 3H, J = 7,2 Hz).

HRMS: izračunato za C25H21N4O2 409,1665 [M + H], opaženo 409,1666.

Primjer 95

N-[1-(4-klorfenil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 95 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,104 g, 0,303 mmol), 1-(4-klorfenil)etilamina (0,0943 g, 0,606 mmol), trietilamina (0,084 ml, 0,606 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,606 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0025 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 1,9 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,45 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 9,06 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,14 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,70 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 7,38-7,44 (m, 4H), 5,13-5,22 (m, 1H), 1,49 (d, 3H, J = 7,2Hz).

HRMS: izračunato za C25H20N4O2Cl 443,1275 [M + H], opaženo 443,1265.

Primjer 96

N-[1-(4-hidroksifenil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 96 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,104 g, 0,303 mmol), 1-(4-hidroksifenil)etilamina (0,0831 g, 0,606 mmol), trietilamina (0,084 ml, 0,606 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,606 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0205 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 16 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,42 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 9,21 (brs, 1H), 8,91 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,11 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,70 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,51-7,61 (m, 4H), 7,21 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 6,71 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 5,08-5,16 (m, 1H), 1,46 (d, 3H, J = 7,2 Hz).

HRMS: izračunato za C25H21N4O3 425,1614 [M + H], opaženo 425,1626.

Primjer 97

2,3-difluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 97 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (40 mg, 0,128 mmol), 2,3-difluorbenzojeve kiseline (24 mg, 0,154 mmol), trietilamina (0,054 ml, 0,384 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (59 mg, 0,154 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 2:1 smjesom heksan/aceton, uz porast do 1:1 smjese heksan/aceton), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (24 mg, 0,058 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 45 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,20 (s, 1H), 10,72 (s, 1H), 10,42 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,72-7,45 (m, 8H), 7,37 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 417,0, [M + Na]+ 439,1.

Primjer 98

2,3-dimetil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 98 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (42 mg, 0,134 mmol), 2,3-dimetilbenzojeve kiseline (24 mg, 0,161 mmol), trietilamina (0,056 ml, 0,402 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (61 mg, 0,161 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Smjesu se miješa u obliku gustog mulja, te se nakon 48 sati doda još 2,3-dimetilbenzojeve kiseline (12 mg, 0,08 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (30 mg, 0,08 mmol) kako bi se dovršilo reakciju. Smjesu se filtrira kako bi se prikupilo krutine koje se zatim ispere metanolom. Nakon sušenja krutina u visokom vakuumu naslovni spoj (32 mg, 0,078 mmol) se dobije u obliku žutog praha, u prinosu od 58 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,14 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,86 (m, 1H), 7,72-7,66 (m, 2H), 7,63-7,49 (m, 4H), 7,33-7,25 (m, 2H), 7,21 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 409,1, [M + Na]+ 431,1.

Primjer 99

3-fluor-2-metil-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 99 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (21 mg, 0,105 mmol), 3-fluor-2-metilbenzojeve kiseline (19 mg, 0,126 mmol), trietilamina (0,044 ml, 0,315 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (48 mg, 0,126 mmol) u CH2Cl2 (0,2 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Smjesu se miješa u obliku gustog mulja, te se nakon 24 sata doda još 3-fluor-2-metilbenzojeve kiseline (11 mg, 0,07 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (27 mg, 0,07 mmol) kako bi se dovršilo reakciju. Pročišćavanjem, također na analogan način, s tim što su potrebne dvije uzastopne kromatografije na silikagelu (obje uz eluiranje 2:1 smjesom heksan/aceton, uz porast do 1:1 smjese heksan/aceton) dobije se naslovni spoj (14 mg, 0,042 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 40 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,79 (s, 1H), 10,50 (s, 1H), 10,25 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,46-7,17 (m, 3H), 2,30 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 337,1, [M + Na]+ 359,1.

Primjer 100

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 6-[((1R,2R)-2-fenilciklopropankarbonil)amino]-1H-indol-4-karboksilne kiseline 100(a)

Dobivanje međuprodukta 100(a) iz Međuprodukta 2(b) iz Primjera 2 (111 mg, 0,49 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (119 mg, 0,73 mmol), trietilamina (0,273 ml, 1,96 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (278 mg, 0,73 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3 dobije se sirovi Međuprodukt 100(a) (222 mg) u obliku smećkasto-žute krutine, koju se prenese bez pročišćavanja.

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 3-formil-6-[((1R,2R)-2-fenilciklopropankarbonil)amino]-1H-indol-4- karboksilne kiseline 100(b)

Međuprodukt 100(a) (214 mg) otopi se u CH2Cl2 (3 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,2 ml), te obradi Vilsmeierovim reagensom (0,147 ml), na način sličan onom opisanom u Primjeru 3, Korak 4. Prilikom dodavanja odmah nastaje talog, tvoreći gusti mulj. Doda se još CH2Cl2 (5,0 ml) i N,N-dimetilformamida (0,2 ml) da se olakša miješanje. Također se doda još Vilsmeierovog reagensa (0,147 ml). Nakon približno 10 minuta doda se heksan, a krutine ostavi da se slegnu. Nakon odlijevanja supernatanta doda se još heksana, a trituriranje se ponovi, uz bacanje oba triturata. Preostalim krutinama doda se metanol (8 ml), te K2CO3 (750 mg, 5,43 mmol) i H2O (4 ml), a smjesu ostavi miješati. Nakon približno 30 minuta doda se etil-acetat, a agregat K2CO3/H2O ukloni odlijevanjem produkta u otopini. Otapala se zatim koncentrira, doda se još etil-acetata, a produkt podvrgne ekstrakciji kako bi se dobilo Međuprodukt 100(b) (117 mg, 0,32 mmol) u obliku smećkastog praha, u sirovom prinosu od približno 66 %, kombinirano za Korake 1 i 2.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-

fenilciklopropan karboksilne kiseline

Međuprodukt 100(b) (105 mg), octenu kiselinu (0,048 ml, 0,84 mmol) i H2NNH2·H2O (0,084 ml, 1,74 mmol) u bezvodnom metanolu (4,4 ml) refluksira se na način sličan onom opisanom u Primjeru 3, Korak 5. Sirovi produkt pročisti se na silikagelu, uz eluiranje 2:1, te 1:1 smjesom heksan/aceton kako bi se dobilo naslovni spoj (61 mg, 0,17 mmol) u prinosu od približno 57 % za posljednji korak.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,74 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,23 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,60-7,53 (m, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,35-7,26 (m, 2H), 7,24-7,15 (m, 3H), 2,38 (m, 1H), 2,08 (m, 1H), 1,50 (m, 1H), 1,36 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 345,2, [M + Na]+ 367,1.

[image]

Alternativni postupak dobivanja u Primjeru 100

Dobivanje primjera 100 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (3,0 g, 12,7 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (2,36 g, 14,6 mmol) (dobije se kao što je opisano u A. Thurkauf i suradnici: J. Med. Chem., 43, 3923-3932, (2000.)), trietilamina (8,8 ml, 63,4 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (5,3 g, 14,5 mmol) u N,N-dimetilformamida (30,0 ml, 0,4 M) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (5:50:45 metanol/etil-acetat/CH2Cl2), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (3,67 g, 10,7 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 84 %.

Primjer 101

N-[2-hidroksi-2-(3-hidroksifenil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 101 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,238 g, 0,693 mmol), 2-hidroksi-2-(3-hidroksifenil)etilamin-hidroklorida (0,264 g, 1,39 mmol), trietilamina (0,29 ml, 2,08 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N,'N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,528 g, 1,39 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0414 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 14 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,47 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 9,27 (brs, 1H), 8,68 (t, 1H, J = 5,7 Hz), 8,10 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,71 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,51-7,62 (m, 4H), 7,08-7,13 (m, 1H), 6,76-6,81 (m, 2H), 6,61-6,64 (m, 1H), 4,70-4,74 (m, 1H).

HRMS: izračunato za C25H21N4O4 441,1563 [M + H], opaženo 441,1543.

Primjer 102

Metil-6-okso-2-fenil-1,3,5,6-tetrahidro[1,2]oksazepino[6,5,4-cd]indol-8-karboksilat

[image]

Korak 1 Dobivanje 1-tert-butil-4,6-dimetil-3-formil-2-fenil-1H-indol-1,4,6-trikarboksilata 102(a)

U otopinu Međuprodukta 39(e) u Primjeru 39 (2,25 g, 6,7 mmol) i di-tert-butil-dikarbonata (11,68 g, 54 mmol) u 150 ml tetrahidrofurana doda se 60 % suspenzija NaH u mineralnom ulju (1,60 g, 40 mmol). Reakcijske smjese miješa se 1 sat na sobnoj temperaturi. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3, a zatim se kromatografijom na silikagelu dobije Međuprodukt 102(a) (1,97 g), u prinosu od 67 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 9,56 (s, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,70-7,50 (m, 5H), 3,93 (s, 3H), 3,83 (s,3H), 1,20 (s,9H).

Korak 2 Dobivanje 1-(tert-butoksikarbonil)-3-(hidroksimetil)-6-(metoksikarbonil)-2-fenil-1H-indol-4-

karboksilne kiseline 102(b)

Međuprodukt 102(a) (1,95 g) otopi se u metanolu (200 ml), te se doda NaBH4 (1,70 g), te miješa 15 minuta. Nakon uklanjanja otapala kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 102(b) (1,81 g) u prinosu od 92 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 8,97 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 8,10 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,35-7,55 (m, 5H), 4,61 (t, 1H, J = 5,1Hz), 4,41 (d, 2H, J = 5,0 Hz), 3,92 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 1,16 (s, 9H).

Korak 3 Dobivanje 1-tert-butil-4,6-dimetil-3-(klormetil)-2-fenil-1H-indol-1,4,6-trikarboksilata 102(c)

U otopinu Međuprodukta 102(b) (1,68 g, 3,8 mmol) i CCl4 (3,50 g, 23 mmol) u 20 ml diklormetana doda se F3P (2,42 g, 9,2 mmol). Reakcijsku smjesu miješa se 24 sata na sobnoj temperaturi. Reakcijsku smjesu se koncentrira, a ostatak pročisti kromatografijom na silikagelu kako bi se dobilo Međuprodukt 102(c) (1,53 g) u prinosu od 87 %.

Korak 4 Dobivanje 1-tert-butil-4,6-dimetil-3-{[(1,3-diokso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il)oksi]metil}-2-fenil-1H-

indol-1,4,6-trikarboksilata 102(d)

Smjesu Međuprodukta 102(c) (0,23 g, 0,5 mmol), N-hidroksiftalimida (0,24 g, 1,5 mmol) i Na2CO3 (0,32 g, 3 mmol) preko noći se miješa u bezvodnom DMSO-u (10 ml) na sobnoj temperaturi. Ekstrakcijom iz etil-acetata, a zatim se kromatografijom na silikagelu dobije Međuprodukt 102(d) (0,16 g) u prinosu od 55 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 9,02 (d, 1H, J = 1,1Hz), 8,31 (d, 1H, J = 1,1Hz), 7,75-7,82 (m, 2H), 7,64-7,71 (m, 2H), 7,39 (t, 1H, J = 7,6 Hz), 7,26 (t, 2H, J = 7,6), 7,18 (d, 2H, J = 7,8 Hz), 5,32 (s, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 1,11 (s, 9H).

Korak 5 Dobivanje naslovnog spoja: metil-6-okso-2-fenil-1,3,5,6-tetrahidro[1,2]oksazepino[6,5,4-cd]

indol-8-karboksilat

Smjesu Međuprodukta 102(d) (0,15 g, 0,26 mmol) i hidrazina (0,20 g, 6,3 mmol) u metanolu (15 ml) refluksira se 2 sata. Nakon otparavanja otapala ostatak se pomiješa s CH2Cl2 (15 ml) i trifluoroctenom kiselinom (7,5 ml), te miješa 2 sata. Nakon uklanjanja otapala ostatak se podvrgne preparativnom HPLC-u s reverznom fazom kako bi se dobilo naslovni spoj (34,8 mg) u prinosu od 42 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,20 (s, 1H), 11,23 (s, 1H), 8,30 (d, 1H, J = 1,2 Hz), 8,21 (d, 1H, J = 1,2 Hz), 7,40-7,75 (m, 5H), 5,44 (d, 1H, J = 14,7 Hz), 5,22 (d, 1H, J = 14,7 Hz), 3,92 (s, 3H).

LCMS: [M+ + 1]: 323,0

Primjer 103

N-(4-fluorbenzil)-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 103 iz naslovnog spoja iz Primjera 49 (0,108 g, 0,314 mmol), 4-fluorbenzilamina (0,079 g, 0,628 mmol), trietilamina (0,088 ml, 0,628 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,239 g, 0,628 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0121 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 9,3 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,47 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 9,23 (t, 1H, J = 5,9 Hz), 8,13 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,71 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,51-7,63 (m, 4H), 7,35-7,40 (m, 2H), 7,12-7,18 (m, 2H), 4,46 (d, 2H, J = 5,7Hz).

HRMS: izračunato za C24H18N4O2F 413,1414 [M + H], opaženo 413,1394.

Primjer 104

6-okso-2-fenil-N-(2,3,5-trifluorbenzil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 104 iz naslovnog spoja iz Primjera 49 (0,101 g, 0,294 mmol), 2,3,5-trifluorbenzilamina (0,0947 g, 0,588 mmol), trietilamina (0,082 ml, 0,588 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,224 g, 0,588 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,006 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 4,5 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,50 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 9,27 (t, 1H, J = 5,9 Hz), 8,13 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,71 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,52-7,62 (m, 4H), 7,40-7,48 (m, 1H), 7,05-7,08 (m, 1H), 4,56 (d, 2H, J = 4,9Hz).

HRMS: izračunato za C24H16N4O2F3 449,1225 [M + H], opaženo 449,1209.

Primjer 105

N-[3,5-bis(trifluormetil)benzil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 105 iz naslovnog spoja iz Primjera 49 (0,101 g, 0,294 mmol), 3,5-bis(trifluormetil)benzilamin (0,143 g, 0,588 mmol), trietilamin (0,082 ml, 0,588 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (0,224 g, 0,588 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,004 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 2,6 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,50 (s, 1H), 10,50 (s, 1H), 9,37 (t, 1H, J = 5,9 Hz), 8,14 (s, 1H), 8,05 (m, 3H), 8,00 (s, 1H), 7,71 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,52-7,62 (m, 4H), 4,67 (d, 2H, J = 5,7 Hz).

HRMS: izračunato za C26H17N4O2F6 531,1256 [M + H], opaženo 531,1272.

Primjer 106

N-[4-fluor-3-(trifluormetil)benzil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 106 iz naslovnog spoja iz Primjera 49 (0,105 g, 0,306 mmol), 4-fluor-3- (trifluormetil)benzilamina (0,118 g, 0,612 mmol), trietilamina (0,085 ml, 0,612 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,233 g, 0,612 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0205 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 14 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,49 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 9,30 (t, 1H, J = 5,9 Hz), 8,13 (s, 1H), 8,05 (m, 3H), 7,69-7,75 (m, 4H), 7,45-7,63 (m, 5H), 4,53 (d, 2H, J = 5,7 Hz).

HRMS: izračunato za C25H17N4O2F4 481,1287 [M + H], opaženo 481,1291.

Primjer 107

N-[(1-hidroksi-5,7-dimetil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 107 iz naslovnog spoja iz Primjera 49 (0,104 g, 0,303 mmol), 1-(aminometil)-5,7-dimetil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ola (0,124 g, 0,606 mmol), trietilamina (0,084 ml, 0,606 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,606 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline) također na analogan način dobije se naslovni spoj (0,0145 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 9,7 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,47 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 8,48-8,52 (m, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,70-7,73 (m, 2H), 7,52-7,62 (m, 4H), 7,25 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 3,66-3,73 (m, 2H), 2,55-2,63 (m, 2H), 2,22 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,81-1,98 (m, 4H).

HRMS: izračunato za C30H29N4O3 493,2240 [M + H], opaženo 493,2252.

Primjer 108

N-[(1R)-1-(1-Naftil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 108 iz naslovnog spoja iz Primjera 49 (0,105 g, 0,306 mmol), 1-(1-naftil)etilamina (0,105 g, 0,612 mmol), trietilamina (0,085 ml, 0,612 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,233 g, 0,612 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0161 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 12 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,44 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 9,14 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,17 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,87-7,90 (m, 4H), 7,69-7,72 (m, 2H), 7,46-7,63 (m, 7H), 5,34-5,140 (m, 1H), 1,61 (d, 3H, J = 6,8 Hz).

HRMS: izračunato za C29H23N4O2 459,1821 [M + H], opaženo 459,1795.

Primjer 109

Dietil-2-{[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)karbonil]amino}malonat

[image]

Dobivanje primjera 109 iz naslovnog spoja iz Primjera 49 (0,106 g, 0,309 mmol), dietil-2-aminomalonat-hidroklorida (0,131 g, 0,618 mmol), trietilamina (0,129 ml, 0,926 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,235 g, 0,618 mmol) u DMSO-u (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0064 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 4,5 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,53 (s, 1H), 10,50 (s, 1H), 9,55 (t, 1H, J = 7,6 Hz), 8,14 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,71-7,73 (m, 2H), 7,52-7,62 (m, 4H), 5,29-5,32 (m, 2H), 4,15-4,25 (m, 4H), 1,23 (t, 6H, J = 7,2 Hz).

HRMS: izračunato za C24H23N4O6 463,1618 [M + H], opaženo 463,1606.

Primjer 110

N-[(1R)-2-hidroksi-1-feniletil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 110 iz naslovnog spoja iz Primjera 49 (0,17 g, 0,5 mmol), (2R)-2-amino-2-feniletanol (0,0822 g, 0,6 mmol), trietilamin (0,14 ml, 1 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (0,23 g, 0,6 mmol) u DMSO-u (8 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,0351 g) u prinosu od 17 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,45 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 8,92 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,17 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,75-7,65 (m, 2H), 7,65-7,50 (m, 4H), 7,45-7,37 (m, 2H), 7,37-7,27 (m, 2H), 7,27-7,15 (m, 1H), 5,18-5,01 (m, 1H), 3,83-3,60 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 425,1.

[image] Primjer 111

[2-(3-ciklobutilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera (1R,2R)-2-{3-[(tert-butoksikarbonilciklobutilamino)metil]

fenil}-6-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-1H-indol-4-karboksilne kiseline 111(a)

U suspenziju Međuprodukta 85(a) iz Primjera 85 (0,260 g, 0,6 mmol) u diklormetanu (6,0 ml, 0,1 M) doda se 2,4,6-kolidin (0,312 ml, 2,4 mmol), a zatim (CH3SO2)2O (0,123 g, 0,7 mmol). Nakon 1 sata miješanja doda se ciklobutilamin (0,252 ml, 3,0 mmol), a reakcijsku smjesu miješa 24 sata na 22 °C. Hlapive tvari ukloni se u vakuumu, te se doda diklormetan (6,0 ml), trietilamin (3 mmol) i di-tert-butil-dikarbonat (1,2 mmol). Smjesu se miješa 12 sati na 22 °C, a hlapive tvari ukloni se u vakuumu. Kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 111 (a) (0,14 g, 0,24 mmol), u prinosu od 40 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,82 (s, 1H), 10,42 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,89 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 7,72 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,67 (s, 1H), 7,44 (dd, 1H, J = 7,7, 7,6 Hz), 7,36-7,08 (m, 7H), 4,51 (s, 2H), 3,91 (s, 3H), 2,45-2,37 (m, 1H), 2,14-1,95 (m, 5H), 1,62-1,22 (m, 14H).

Korak 2 Dobivanje tert-butilnog estera (1R,2R)ciklobutil-(3-{6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)

amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}benzil)karbaminske kiseline 111(b)

Na način analogan onom u koracima 4 i 5 u Primjeru 3, Međuprodukt 111 (a) (0,13 g, 0,22 mmol) se formilira i ciklizira. Kromatografijom na silikagelu Međuprodukt 111 (b) (0,107 g, 0,18 mmol) se dobije u obliku žutog praha, u prinosu od 81 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 8,16 (d, 1H, J = 1,2 Hz), 7,63 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 7,55-7,42 (m, 4H), 7,35-7,16 (m, 6H), 4,53 (s, 2H), 2,45-2,37 (m, 1H), 2,14-1,95 (m, 5H), 1,60-1,23 (m, 14H).

LCMS: [M – H]+ 602,2.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: [2-(3-ciklobutilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino

[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

Dobivanje iz Međuprodukta 111(b) (0,105 g, 0,17 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (1,7 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje smjesom CH2Cl2/dietil-eter, čime se dobije naslovni spoj (0,09 g, 0,17 mmol) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 96 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,20 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 9,32 (b, 1H), 8,18 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 7,83 (s, 1H), 7,75-7,58 (m, 5H), 7,35-7,15 (m, 5H), 4,13 (s, 2H), 3,80-3,50 (prikriveni m, 1H), 2,45-2,35 (m, 1H), 2,28-2,08 (m, 5H), 1,88-1,75 (m, 2H), 1,55-1,47 (m, 1H), 1,42-1,34 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 504,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C31H30N5O2, 504,2400, opaženo 504,2378.

Primjer 112

[6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilmetilfenil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera (1R,2R)-6-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-2-(3-pirolidin-1-il metilfenil)-1H-indol-4-karboksilne kiseline 112(a)

U suspenziju Međuprodukta 85(a) iz Primjera 85 (0,260 g, 0,6 mmol) u diklormetanu (6,0 ml, 0,1 M) doda se 2,4,6-kolidin (0,312 ml, 2,4 mmol), a zatim (CH3SO2)2O (0,123 g, 0,7 mmol). Nakon 1 sata miješanja doda se pirolidin (0,252 ml, 3,0 mmol), a reakcijsku smjesu miješa 24 sata na 22 °C. Hlapive tvari ukloni se u vakuumu, a sirovi Međuprodukt 112(a) prenese izravno u sljedeći korak.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: [6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilmetilfenil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino

Na način analogan onom u koracima 4 i 5 u Primjeru 3, Međuprodukt 112(a) (0,42g, 0,85 mmol) se formilira i ciklizira. Kromatografijom na silikagelu (90:10:0 do 70:20:10 CH2Cl2/2,0 M amonijak u smjesi izopropil-alkohol/metil-alkohol), te prevođenjem u HCl sol (4 M HCl u dioksanu) dobije se naslovni spoj (0,04 g, 0,18 mmol) u obliku žuto-narančastog praha, u prinosu od 9 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,20 (s, 1H), 10,55 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 10,43 (b, 1H), 8,19 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 8,13 (s, 1H), 7,76-7,62 (m, 5H), 7,34-7,16 (m, 5H), 4,45 (d, 2H, J = 5,5 Hz), 3,45-3,35 (m, 2H), 3,19-3,07 (m, 2H), 2,45-2,35 (m, 1H), 2,14-1,85 (m, 5H), 1,55-1,47 (m, 1H), 1,42-1,34 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 504,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C31H30N5O2, 504,2400, opaženo 504,2404.

Primjer 113

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-(1,2-trans)-2-[6-(trifluormetil)piridin-3-il] ciklopropankarboksamid-trifluoracetat

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 3-(6-trifluormetilpiridin-3-il)akrilne kiseline 113(a)

U otopinu trietil-fosfita u bezvodnom tetrahidrofuranu (25 ml) ohlađenu do 0 °C doda se 60 % suspenzija natrijevog hidrida u mineralnom ulju (472 mg, 19,7 mmol), u malim obrocima. Ovu smjesu ostavi se miješati 30 minuta na istoj niskoj temperaturi, zatim se kupelj za hlađenje ukloni, a smjesu ostavi da se zagrije do sobne temperature, u trajanju od 60 minuta. Smjesu se ponovno ohladi do 0 °C, te se ukapa otopina 6-trifluormetil-3-piridinkarbaldehida u bezvodnom tetrahidrofuranu (20 ml). Reakcijsku smjesu se ostavi da se polako, preko noći, zagrije do sobne temperature. Nakon 19 sati reakcijsku smjesu se ugasi vodom (100 ml), te ekstrahira etil-acetatom (3 × 50 ml). Pomiješane organske frakcije osuši se preko bezvodnog magnezijevog sulfata, te koncentrira do blijedozelenog ulja. Pročišćavanje se provodi flash-kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje 5:95, te 1:9 smjesom etil-acetat/heksan. Čiste frakcije se prikupi zajedno, te koncentrira kako bi se dobilo Međuprodukt 113(a) (1,68 g, 6,85 mmol) u obliku bijele krutine, u prinosu od 42 %.

Korak 2 Dobivanje (1,2-trans)-2-(6-trifluormetilpiridin-3-il)ciklopropan karboksilne kiseline 113(b)

Trimetilsulfoksonijev jodid (574 mg, 2,61 mmol) doda se u 60 % NaH u mineralnom ulju (63 mg, 2,61 mmol), a tikvica propuše dušikom. Metil-sulfoksid (10 ml) se polako dodaje 20 minuta, dok ne prestane razvijanje vodika. U ovu mutnu otopinu ukapa se Međuprodukt 113(a) (493 mg, 2,01 mmol) u metil-sulfoksidu (15 ml). Otopinu se ostavi miješati na sobnoj temperaturi preko noći. Nakon 26 sata se suvišni NaH polako ugasi vodom (100 ml). Doda se etil-eter (100 ml), a slojeve razdvoji. Vodeni sloj ekstrahira se svježim etil-eterom (3 × 50 ml). Pomiješane eterske slojeve ispere se slanom vodom, osuši preko bezvodnog magnezijevog sulfata, te koncentrira u vakuumu. Flash-kromatografijom sirovog ostatka na silikagelu, uz eluiranje 1:9, te 1:4 smjesom etil-acetat/heksan, dobije se dvije čiste frakcije, koje se pomiješa, te koncentrira pod sniženim tlakom kako bi se dobilo Međuprodukt 113(b) (275 mg, 1,06 mmol), u obliku bijelih pera, u prinosu od 53 %.

Korak 3 Dobivanje (1,2-trans)-2-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]ciklopropan karboksilne kiseline 113(c)

U otopinu Međuprodukta 113(b) (275 mg, 1,06 mmol) u 1:1 smjesi tetrahidrofuran/voda (4 ml) doda se litijev hidroksid monohidrat (133 mg, 3,18 mmol). Polususpenziju ostavi se miješati 2 dana na sobnoj temperaturi. Reakcijsku smjesu se zakiseli 2 M vodenom otopinom klorovodične kiseline (približno 2 ml). Reakcijsku smjesu se zatim koncentrira, te liofilizira kako bi se dobilo Međuprodukt 113(c) u obliku bijelog praha, koji sadrži litijev klorid, kojeg se izravno prenese bez daljnjeg pročišćavanja.

Korak 4 Dobivanje naslovnog spoja: N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-il)-2-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]ciklopropankarboksamid-trifluoracetat

U otopinu Međuprodukta 113(c) (85 mg, 0,368 mmol) u metil-sulfoksidu (2 ml) doda se trietilamin (0,056 ml, 0,405 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (154 mg, 0,405 mmol). Nakon približno 10 minuta doda se naslovni spoj u Primjeru 7 (0,102 g, 0,368 mmol). Reakcijsku smjesu se zatvori, te miješa preko noći na sobnoj temperaturi. Smjesu se podvrgne preparativnom HPLC-u (20-100 % acetonitril/voda, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline). Čiste frakcije se prikupi zajedno, te liofilizira kako bi se dobilo naslovni spoj (27 mg, 0,045 mmol) u obliku narančastog praha, u prinosu od 12 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,11 (b, 1H), 10,50 (b, 1H), 10,39 (b, 1H), 8,71 (b, 1H), 8,15 (b, 2H), 7,90-7,80 (m, 2H), 7,70-7,45 (m, 6H), 2,65-2,55 (m, 1H), 2,27-2,18 (m, 1H), 1,67-1,51 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 490,1.

Primjer 114

(2R)-2-amino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilacetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Dobivanje primjera 114 iz nečistog naslovnog spoja u Primjeru 117 (90 mg, 0,18 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (65 mg, 0,10 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 71 %, u dva koraka (uključujući Primjer 117).

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,26 (s, 1H, izmjene), 11,08 (s, 1H, izmjene), 10,42 (s, 1H, izmjene), 8,86 (brs, 3H, izmjene), 8,07 (s, 1H), 7,72-7,63 (m, 5H), 7,62-7,41 (m, 7H), 5,22 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 410,1, [M + Na]+ 432,0.

[image]

Primjer 115

(2R)-2-amino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamid (hidrokloridna sol)

[image]

Dobivanje primjera 115 iz naslovnog spoja u Primjeru 118 (71 mg, 0,136 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (20 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (66 mg, 0,12 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 87 %, u dva koraka (iz Primjera 118).

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,20 (s, 1H, izmjene), 10,66 (s, 1H, izmjene), 10,44 (s, 1H, izmjene), 8,39 (brs, 3H, izmjene), 8,05 (s, 1H), 7,73-7,46 (m, 7H), 7,39-7,22 (m, 5H), 4,19 (m, 1H), 3,21-3,06 (m, 2H, djelomično zasjenjen).

LCMS: [M + H]+ 424,1.

[image]

Primjer 116

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid 1-aminocikloheksankarboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Dobivanje primjera 116 iz naslovnog spoja u Primjeru 119 (311 mg, 0,062 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje smjesom CH2Cl2/heksan, čime se dobije naslovni spoj (29 mg, 0,053 mmol) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 85 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,29 (s, 1H, izmjene), 10,44 (s, 1H, izmjene), 10,28 (s, 1H, izmjene), 8,36 (brs, 3H, izmjene), 8,11 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,74-7,46 (m, 6H), 2,37-2,14 (m,2H), 1,96-1,35 (m,8H).

LCMS: [M + H]+ 402,2, [M + Na]+ 424,1.

[image]

Primjer 117

tert-butilni ester [(R)-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil)fenilmetil] karbaminske kiseline

[image]

Dobivanje primjera 117 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (44 mg, 0,141 mmol), (R)-tert-butoksikarbonilaminofeniloctene kiseline (42 mg, 0,169 mmol), trietilamina (0,059 ml, 0,423 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (64 mg, 0,169 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (102 mg) u obliku žutog praha, onečišćenog nepoznatom nečistoćom. Spoj je međuprodukt i prenese ga se bez daljnjeg pročišćavanja u Primjer 91.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,12 (s, 1H), 10,41 (s, 2H), 8,12 (s, 1H), 7,69-7,48 (m, 10H), 7,42-7,27 (m, 3H), 5,36 (d, 1H, J = 8,67 Hz), 1,41 (s, 9H).

LCMS: [M – H]– 508,1, [M + H]+ 510,2, [M + Na]+ 532,2.

Primjer 118

tert-butilni ester [(R)-1-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil)-2-fenil-etil] karbaminske kiseline

[image]

Dobivanje primjera 118 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (43 mg, 0,138 mmol), (R)-tert-butoksikarbonilamino-3-fenilpropionske kiseline (44 mg, 0,166 mmol), trietilamina (0,058 ml, 0,414 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (63 mg, 0,166 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (80 mg) u obliku žutog praha, onečišćenog nepoznatom nečistoćom. Spoj se bez daljnjeg pročišćavanja prenese u Primjer 115.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,12 (1H), 10,41 (s, 1H), 10,25 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,71-7,48 (m, 7H), 7,38-7,11 (m, 6H), 4,34 (br s, 1H), 3,02 (m, 1H), 2,87 (m, 1H, djelomično zasjenjen N,N-dimetilformamidnim singletom), 1,34 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 524,2, [M + Na]+ 546,2.

Primjer 119

tert-butilni ester [1-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil)cikloheksil] karbaminske kiseline

[image]

Dobivanje primjera 119 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (45 mg, 0,142 mmol), 1-tert-butoksikarbonilaminocikloheksankarboksilne kiseline (42 mg, 0,171 mmol), trietilamina (0,059 ml, 0,426 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (65 mg, 0,171 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (38 mg, 0,076 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 53 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,08 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 9,59 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,70-7,48 (m, 8H), 2,03-1,92 (m, 2H), 1,81-1,71 (m, 2H), 1,47 (m, 5H), 1,40-1,31 (m, 10H).

LCMS: [M + H]+ 502,1, [M + Na]+ 524,1.

Primjer 120

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (3E)-4-fenilbut-3-enske kiseline

[image]

Dobivanje primjera 120 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (44 mg, 0,141 mmol), (E)-4-fenilbut-3-enske kiseline (27 mg, 0,169 mmol), trietilamina (0,059 ml, 0,423 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (64 mg, 0,169 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kada se procjeni da je reakcija gotova, smjesu se filtrira kako bi se prikupilo krutine, koje se ispere metanolom. Nakon sušenja u vakuumu naslovni spoj (41 mg, 0,0,095 mmol) se dobije u obliku žutog praha, u prinosu od 68 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,10, (s, 1H, izmjene), 10,38 (s, 1H, izmjene), 10,22 (s, 1H, izmjene), 8,21 (s, 1H), 7,77-7,63 (m, 3H), 7,60-7,53 (m, 2H), 7,53-7,42 (m, 4H), 7,38-7,30 (m, 2H), 7,24 (m, 1H), 6,57 (d, 1H, J = 16,01 Hz), 6,45 (m, 1H).

1H-NMR (d6-DMSO/DCI): � 8,20 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,71-7,65 (m, 2H), 7,60-7,47 (m, 4H), 7,43-7,37 (m, 2H), 7,38-7,29 (m, 2H), 7,22 (m, 1H), 6,55 (d, 1H, J = 16,23 Hz), 6,44 (m, 1H), 3,33 (d, 2H, J = 9,09 Hz).

LCMS: [M + H]+ 421,1, [M + Na]+ 443,1.

[image]

Primjer 121

2-idan-2-il-N-[6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Dobivanje primjera 121 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (41 mg, 0,131 mmol), indan-2-iloctene kiseline (28 mg, 0,157 mmol), trietilamina (0,055 ml, 0,393 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (60 mg, 0,157 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kada se procjeni da je reakcija gotova, smjesu se filtrira kako bi se prikupilo krutine, koje se ispere metanolom. Nakon sušenja u vakuumu naslovni spoj (45 mg, 0,101 mmol) se dobije u obliku žutog praha, u prinosu od 77 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,08, (s, 1H, izmjene), 10,37 (s, 1H, izmjene), 10,11 (s, 1H, izmjene), 8,20 (s, 1H), 7,70-7,45 (m, 7H), 7,26-7,18 (m, 2H), 7,16-7,08 (m, 2H), 3,07 (dd, 2H, J = 7,72, 15,83 Hz), 2,87 (m, 1H), 2,65 (dd, 2H, J = 6,59, 15,26 Hz).

LCMS: [M + H]+ 435,2, [M + Na]+ 457,1.

[image]

Primjer 122

N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-(toluen-4-sulfonilamino)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 122 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (100 mg, 0,362 mmol), 2-(toluen-4-sulfonilamino)benzojeve kiseline (158 mg, 0,542 mmol), trietilamina (0,201 ml, 1,446 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (206 mg, 0,542 mmol) u N,N-dimetilformamidu (4,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kada se procjeni da je reakcija gotova, N,N-dimetilformamid se otpari, te se doda metanol. Smjesu se filtrira, a krutine prikupi, te ispere metanolom, diklormetanom i dietil-eterom. Nakon sušenja u vakuumu naslovni spoj (121 mg, 0,220 mmol) se dobije u obliku žutog praha, u prinosu od 61 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,19 (s, 1H), 10,63 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 10,42 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,85-7,78 (m, 2H), 7,74-7,67 (m, 2H), 7,64-7,56 (m, 4H), 7,56-7,42 (m, 4H), 7,29-7,20 (m, 3H), 2,27 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 550,1; [M – H]– 548,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C30H24N5O4S, 550,1549, opaženo 550,1551.

[image]

Primjer 123

Fenetilamid 6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 123 iz naslovnog spoja u Primjeru 49 (0,17 g, 0,5 mmol), fenetilamina (73 mg, 0,6 mmol), trietilamina (100 mg, 1,0 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,6 mmol) u DMSO-u (8 ml) provodi se analogno dobivanju u Primjeru 76. Preparativnim HPLC-om (20-100 % CH3CN/H2O, uz dodatak 0,1 % trifluoroctene kiseline), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (0,021 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 9 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,49 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 8,77 (t, 1H, H = 5,5 Hz), 8,07 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,10-7,80 (m, 11H), 3,48 (m, 2H), 2,86 (t, 2H, J = 7,5 Hz).

LCMS [M+ +1]: 409,1

Primjer 124

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-fluorfenil)ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 124 provodi se analogno dobivanju u Primjeru 113, s tim što se upotrebljava (1,2-trans)-2-(4'-fluorfenil)ciklopropankarboksilna kiselina umjesto (1,2-trans)-2-(6-trifluormetilpiridin-3-il) ciklopropan karboksilne kiseline u Koraku 4. (1,2-trans)-2-(4'-fluorfenil)ciklopropankarboksilnu kiselinu dobije se postupcima sličnim onima opisanim u koracima 1-3 u Primjeru 113, s tim što se upotrebljava 4-fluorbenzaldehid umjesto 6-trifluormetil-3-piridinkarbaldehida. Konačnim pročišćavanjem HPLC-om, također analognim onom u Primjeru 113, dobije se naslovni spoj (100 mg, 0,228 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 62 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,12 (b, 1H), 10,46 (b, 1H), 10,41 (b, 1H), 8,18 (b, 1H), 7,70-7,45 (m, 7H), 7,30-7,10 (m, 4H), 2,65-2,55 (m, 1H), 2,27-2,18 (m, 1H), 1,67-1,51 (m, 2H).

HRMS: C21H21N5O2·H: 439,1570; opaženo: 439,1584.

Primjer 125

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Dobivanje primjera 125 provodi se analogno dobivanju u Primjeru 113, s tim što se upotrebljava (1,2-trans)-2-piridin-3'-ilciklopropankarboksilna kiselina umjesto (1,2-trans)-2-(6-trifluormetilpiridin-3-il) ciklopropan karboksilne kiseline u Koraku 4. (1,2-trans)-2-piridin-3'-ilciklopropankarboksilnu kiselinu dobije se postupcima sličnim onima opisanim u koracima 1-3 u Primjeru 113, s tim što se upotrebljava piridin-3-karbaldehid umjesto 6-trifluormetil-3-piridinkarbaldehida. Konačnim pročišćavanjem HPLC-om, također analognim onom u Primjeru 113, dobije se naslovni spoj (230 mg, 0,381 mmol) u obliku narančastih pahuljastih krutina, u kvantitativnom prinosu.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,15 (s, 1H), 10,58 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,15 (b, 2H), 7,82-7,45 (m, 9H), 2,35-2,25 (m, 1H), 1,70-1,51 (m, 1H), 1,35-1,10 (m, 1H), 0,90-0,65 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 422,1.

Primjer 126

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-metoksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 126 provodi se analogno dobivanju u Primjeru 113, s tim što se upotrebljava (1,2-trans)-2-(3'-metoksifenil)ciklopropankarboksilna kiselina umjesto (1,2-trans)-2-(6-trifluormetilpiridin-3-il) ciklopropan karboksilne kiseline u Koraku 4. (1,2-trans)-2-(3'-metoksifenil)ciklopropankarboksilnu kiselinu dobije se postupcima sličnim onima opisanim u koracima 1-3 u Primjeru 113, s tim što se upotrebljava 3-metoksibenzaldehid umjesto 6-trifluormetil-3-piridinkarbaldehida. Konačnim pročišćavanjem HPLC-om, također analognim onom u Primjeru 113, dobije se naslovni spoj (132 mg, 0,293 mmol) u obliku blijedonarančastih krutina, u prinosu od 74 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,70-7,40 (m, 7H), 7,25-7,15 (m, 1H), 6,77 (b, 3H), 3,74 (s, 3H), 2,40-2,30 (m, 1H), 2,12-2,05 (m, 1H), 1,55-1,47 (m, 1H), 1,42-1,33 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 451,1.

Primjer 127

(R)-2-amino-2-cikloheksil-(6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera [(R)cikloheksil-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-ilkarbamoil)metil]karbaminske kiseline 127(a)

Dobivanje Međuprodukta 127(a) iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (105 mg, 0,445 mmol), (R)-tert-butoksikarbonilaminocikloheksiloctene kiseline (172 mg, 0,668 mmol), trietilamina (0,248 ml, 1,782 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (254 mg, 0,668 mmol) u N,N-dimetilformamidu (4,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/etil-acetat), također na analogan način, dobije se Međuprodukt 127(a) (110 mg, 0,250 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 56 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,71 (d, 1H, J = 2,26 Hz), 10,23 (s, 1H), 10,07 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,55 (d, 1H, J = 2,45 Hz), 7,46 (s, 1H), 6,86 (d, 1H, J = 8,85 Hz), 3,92 (dd, 1H, J = 8,10, 7,91 Hz), 1,77-1,46 (m, 6H), 1,37 (s, 9H), 1,24-0,93 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 440,1, [M + Na]+ 462,2; [M – H]– 438,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (R)-2-amino-2-cikloheksil-(6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-il)acetamid (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 127(a) (66,1 mg, 0,150 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (1,5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (52,0 mg, 0,138 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 92 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,86 (s, 1H), 10,69 (s, 1H), 10,31 (s, 1H), 8,29 (brs, 3H), 8,08 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 3,80-3,69 (m, 1H), 1,93-1,55 (m, 6H), 1,29-0,98 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 340,3, [M + Na]+ 362,3.

Primjer 128

2-idan-2-il-(6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Dobivanje primjera 128 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (slobodna baza) (88,7 mg, 0,443 mmol), indan-2-iloctene kiseline (117 mg, 0,665 mmol), trietilamina (0,247 ml, 1,774 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (253 mg, 0,665 mmol) u N,N-dimetilformamidu (4,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kada se procjeni da je reakcija gotova, N,N-dimetilformamid se otpari, te se doda metanol. Smjesu se filtrira kako bi se prikupilo krutine, koje se ispere metanolom, diklormetanom i dietil-eterom. Nakon sušenja u vakuumu naslovni spoj (115 mg, 0,321 mmol) se dobije u obliku žutog praha, u prinosu od 72 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,71 (s, 1H), 10,23 (s, 1H), 10,05 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,58(s, 1H), 7,55 (d, 1H, J = 2,26 Hz), 7,46 (s, 1H), 7,26-7,16 (m, 2H), 7,16-7,06 (m, 2H), 3,06 (dd, 2H, J = 7,54, 5,54 Hz), 2,92-2,79 (m, 1H), 2,65 (dd, 2H, J = 6,59, 6,78 Hz), 2,47 (d, 2H, J = 9,80 Hz).

LCMS: [M + H]+ 359,1, [M + Na]+ 381,0; [M – H]– 357,2.

Primjer 129

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 129 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (slobodna baza) (200 mg, 1,00 mmol), (1,2-trans)-2-piridin-3'-ilciklopropan karboksilne kiseline (vidjeti Primjer 125 za dobivanje; procijenjena čistoća od približno 75 %) (240 mg, približno 1,10 mmol), trietilamina (0,550 ml, 3,96 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (570 mg, 1,50 mmol) u N,N-dimetilformamidu (8,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 100:10:1 smjesom etil-acetat/metanol/ammonijev hidroksid), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (38 mg, 0,110 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 11 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,73 (d, 1H, J = 2,26 Hz), 10,41 (s, 1H), 10,23 (s, 1H), 8,50 (d, 1H, J = 1,88 Hz), 8,41 (dd, 1H, J = 3,20, 1,51 Hz), 8,11 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,61-7,48 (m, 3H), 7,45 (s, 1H), 7,32 (dd, 1H, J = 5,09, 3,20 Hz), 2,45-2,36 (m, 1H), 2,18-2,05 (m, 1H), 1,58-1,49 (m, 1H), 1,49-1,36 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 346,1; [M – H]– 344,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C19H16N5O2, 346,1304, opaženo 346,1316.

Primjer 130

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(1'-tritil-1H-imidazol-4'-il)ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 130 provodi se analogno dobivanju u Primjeru 113, s tim što se upotrebljava (1,2-trans)-2-(1'-tritil-1H-imidazol-4'-il)ciklopropankarboksilna kiselina umjesto (1,2-trans)-2-(6-trifluormetilpiridin-3-il)ciklopropan karboksilne kiseline u Koraku 4. (1,2-trans)-2-(1'-tritil-1H-imidazol-4'-il)ciklopropankarboksilnu kiselinu dobije se postupcima sličnim onima opisanim u koracima 1-3 u Primjeru 113, s tim što se upotrebljava 1-tritil-1H-imidazol-4-karbaldehid umjesto 6-trifluormetil-3-piridinkarbaldehida. Konačno pročišćavanje je trituriranje metanolom. Dobivene krutine izdvoji se filtriranjem, ispere hladnim metanolom, te osuši preko noći u vakuumu na sobnoj temperaturi kako bi se dobilo naslovni spoj (263 mg, 0,366 mmol) u obliku žutog praha, u kvantitativnom prinosu.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,70-7,30 (m, 18H), 7,25 (s, 1H), 7,15-7,05 (m, 6H), 6,87 (s, 1H), 2,35-2,24 (m, 1H), 2,20-2,13 (m, 1H), 1,38-1,23 (m,2H).

LCMS: [M + H]+ 653,3.

Primjer 131

(6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6-]indol-8-il)-3-(piridin-2-iloksi)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 131 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (25 mg, 0,125 mmol), 3-(piridin-2-iloksi)benzojeve kiseline (88 mg, 0,348 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0,19 ml, 1,04 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (159 mg, 0,42 mmol) u N,N-dimetilformamidu (3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje s 2 % metanol u CH2Cl2), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (20 mg, 0,05 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 40 %.

1H-NMR (d6-aceton): 8 7,92 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,55-7,52 (m, 4H), 7,39 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,32-7,24 (m, 2H), 7,15 (m, 1H), 6,95 (m, 1H), 6,93 (m, 1H), 6,77-6,73 (m, 5H), 6,88 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 398,1.

Primjer 132

N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-tiofen-2-ilbutiramid

[image]

Dobivanje primjera 132 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (slobodna baza) (200 mg, 1,00 mmol), 4-tiofen-2-ilmaslačne kiseline (187 mg, 1,10 mmol), trietilamina (0,550 ml, 3,96 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (570 mg, 1,50 mmol) u N,N-dimetilformamidu (8,0 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje etil-acetatom), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (72 mg, 0,204 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 20 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,70 (d, 1H, J = 2,07 Hz), 10,22 (s, 1H), 10,03 (s, 1H), 8,13 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,55 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,53 (d, 1H, J = 2,45 Hz), 7,45 (s, 1H), 7,31 (dd, 1H, J = 4,33, 0,94 Hz), 6,94 (dd, 1H, J = 3,39, 1,70 Hz), 6,86 (d, 1H, J = 2,83 Hz), 3,84 (t, 2H, J = 7,54 Hz), 2,37 (t, 2H, J = 7,35 Hz), 1,93 (tt, 2H, J = 7,54, 7,35 Hz).

LCMS: [M + H]+ 353,2, [M + Na]+ 375,2; [M – H]– 351,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C18H17N4O2S, 353,1072, opaženo 353,1056.

[image]

Primjer 133

(2R)-2-hidroksi-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-feniletanamid

[image]

Dobivanje primjera 133 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (46 mg, 0,147 mmol), (2R)-hidroksi(fenil)etanske kiseline (27 mg, 0,177 mmol), trietilamina (0,061 ml, 0,44 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (67 mg, 0,177 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 3:1:1 smjesom heksan/etil-acetat/etanol), također na analogan način, a zatim s dva uzastopna trituriranja (etil-acetat/dietil-eter, te metanol/dietil-eter) dobije se naslovni spoj (34 mg, 0,082 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 56 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,12, (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,16 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,70-7,64 (m, 2H), 7,61-7,45 (m, 6H), 7,42-7,26 (m, 3H), 6,35 (br s, 1H, djelomična izmjena), 5,13 (s, 1H).

LCMS: [M – H]– 409,2.

Primjer 134

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-2-ilciklopropan karboksilne kiseline (sol octene kiseline)

[image]

Dobivanje primjera 134 provodi se analogno dobivanju u Primjeru 113, s tim što se upotrebljava (1,2-trans)-2-piridin-2'-ilciklopropankarboksilna kiselina umjesto (1,2-trans)-2-(6-trifluormetilpiridin-3-il) ciklopropan karboksilne kiseline u Koraku 4. (1,2-trans)-2-piridin-2'-ilciklopropankarboksilnu kiselinu dobije se postupcima sličnim onima opisanim u koracima 1-3 u Primjeru 113, s tim što se upotrebljava piridin-2-karbaldehid umjesto 6-trifluormetil-3-piridinkarbaldehida. Konačnim pročišćavanjem HPLC-om, također na analogan način, s tim što se upotrebljava 0,1 % octena kiselina umjesto 0,1 % TFA, dobije se naslovni spoj (107 mg, 0,254 mmol) u obliku zelenkasto-žute krutine, u prinosu od 69 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,70-7,40 (m, 7H), 7,25-7,15 (m, 1H), 6,77 (b, 3H), 3,74 (s, 3H), 2,40-2,30 (m, 1H), 2,12-2,05 (m, 1H), 1,55-1,47 (m, 1H), 1,42-1,33 (m,1H).

LCMS: [M + H]+ 422,1.

Primjer 135

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(1H-imidazol-4-il) ciklopropan karboksilne kiseline (sol octene kiseline)

[image]

Dobivanje primjera 135 provodi se suspendiranjem naslovnog spoja u Primjeru 130 (260 mg, 0,398 mmol) u bezvodnom diklormetanu (5 ml), uz dodatak bezvodne trifluoroctene kiseline (5 ml) na sobnoj temperaturi. Nakon 30 minuta smjesu se koncentrira, te podvrgne preparativnom HPLC-u, na način analogan onom u Primjeru 134, kako bi se dobilo naslovni spoj (72 mg, 0,175 mmol) u obliku pahuljaste žute krutine, u prinosu od 44 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,97 (b, 1H), 7,70-7,45 (m, 7H), 7,13 (b, 1H), 2,40-2,30 (m, 1H), 2,12-2,04 (m, 1H), 1,45-1,33 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 422,1.

Primjer 136

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (2R)-piperidin-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (2R)-2-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il

karbamoil)piperidin-1-karboksilne kiseline 136(a)

Dobivanje Međuprodukta 136(a) iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (0,11 g, 0,4 mmol), 1-tert-butilnog estera (2R)-piperidin-1,2-dikarboksilne kiseline (0,143 g, 0,6 mmol), trietilamina (0,3 ml, 2 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,63 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,1 M, 5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 136(a) (0,21 g) u obliku žutog praha, u 88 % prinosu od.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 10,11 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,74-7,44 (m, 7H), 4,64-4,55 (m, 1H), 3,83 (d, 1H, J = 12,25 Hz), 3,35-3,20 (prikriveni m, 1H), 2,20-2,05 (m, 1H), 1,80-1,50 (m, 3H), 1,45-1,25 (bs, 11H).

LCMS: [M + H]+ 488,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid

(2R)-piperidin-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 136(a) (0,16 g, 0,33 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (1,6 ml, 6,6 mmol) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje smjesom CH2Cl2/dietil-eter, čime se dobije naslovni spoj (0,137 g) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 96 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,31 (s, 1H), 10,90 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 9,26 (b, 1H), 8,80-8,75 (m, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,76-7,46 (m, 7H), 3,95-3,81 (m, 1H), 3,35-3,25 (m, 1H), 3,10-2,92 (m, 1H), 2,36-2,26 (m, 1H), 1,76-1,51 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 388,1.

Primjer 137

(2S)-piperidin-2-karboksilne kiseline (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (2S)-2-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il karbamoil)piperidin-1-karboksilne kiseline137(a)

Dobivanje Međuprodukta 137(a) iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (0,138 g, 0,5 mmol), 1-tert-butilnog estera (2S)-piperidin-1,2-dikarboksilne kiseline (0,143 g, 0,6 mmol), trietilamina (0,3 ml, 2 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,63 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,1 M, 5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 137(a) (0,20 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 84 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 10,11 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,74-7,44 (m, 7H), 4,64-4,55 (m, 1H), 3,83 (d, 1H, J = 12,25 Hz), 3,35-3,20 (zasjenjeni m, 1H), 2,20-2,05 (m, 1H), 1,80-1,50 (m, 3H), 1,45-1,25 (bs, 11H).

LCMS: [M + H]+ 488,1.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (2S)-piperidin-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 137(a) (0,16 g, 0,33 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (1,6 ml, 6,6 mmol) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje smjesom CH2Cl2/dietil-eter, čime se dobije naslovni spoj (0,132 g) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 95 %.

LCMS: [M + H]+ 388,2.

Primjer 138

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (2S,4R)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (2S,4R)-4-hidroksi-2-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino [4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilne kiseline 138 (a)

Dobivanje Međuprodukta 138(a) iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (0,138 g, 0,5 mmol), 1-tert-butilnog estera (2S,4R)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (0,144 g, 0,6 mmol), trietilamin (0,3 ml, 2 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,63 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,1 M, 5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 138(a) (0,127 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 52 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,19 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 10,28 (s, 1H), 8,29 (s, 0,8H, glavni rotamer), 8,29 (s, 0,2H, sporedni rotamer), 7,75-7,51 (m, 7H), 4,50-4,35 (m, 2H), 3,60-3,30 (m, 3H), 2,30-2,17 (m, 1H), 2,10-1,90 (m, 1H), 1,48 (s, 2H, sporedni rotamer), 1,34 (s, 2H, glavni rotamer).

LCMS: [M + H]+ 490,1.

Korak 2 Naslovni spoj: (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid

(2S,4R)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 138(a) (0,105 g, 0,21 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (1 ml, 4,2 mmol) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje smjesom CH2Cl2/dietil-eter, čime se dobije naslovni spoj (0,065 g) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 71 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,33 (s, 1H), 10,93 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 10,10-9,95 (m, 1H), 8,90-8,45 (m, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,75-7,45 (m, 7H), 4,75-4,35 (bm, 3H), 3,45-3,30 (m, 1H), 3,20-3,10 (m, 1H), 2,50-2,35 (m, 1H), 2,10-1,95 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 390,1.

Primjer 139

(2S)-2-amino-3-cijano-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propionamid; sol octene kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (1S)-[2-cijano-1-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-ilkarbamoil)etil]karbaminske kiseline 139(a)

Dobivanje Međuprodukta 139(a) iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (0,138 g, 0,5 mmol), (2S)-2-tert-butoksikarbonilamino-3-cijanopropionske kiseline (0,134 g, 0,6 mmol), trietilamina (0,3 ml, 2 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,63 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,1 M, 5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 139(a) (0,094 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 40 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,15 (s, 1H), 10,42 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,75-7,48 (m, 8H), 4,55-4,40 (m, 1H), 3,02 (dd, 1H, J = 17,1, 4,9 Hz), 2,85 (dd, 1H, J = 17,0, 9,0 Hz), 1,43 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 473,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (2S)-2-amino-3-cijano-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino [4,5,6-cd]indol-8-il)propionamid; sol octene kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 139(a) (0,084 g, 0,18 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (0,9 ml, 3,6 mmol) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Preparativnim HPLC-om dobije se naslovni spoj (0,038 g) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 49 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,31 (s, 1H), 10,50 (s, 1H), 10,35 (bs, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,80-7,55 (m, 7H), 3,84 (dd, 1H, J = 7,0, 6,9 Hz), 2,99 (dd, 1H, J = 16,8, 5,7 Hz), 2,85 (dd, 1H, J = 16,6, 7,2 Hz), 2,73 (s, 6H).

LCMS: [M + H]+ 373,1.

Primjer 140

(2S)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-pirolidin-2-ilacetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (2S)-2-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-ilkarbamoil)metil]pirolidin-1-karboksilne kiseline 140(a)

Dobivanje Međuprodukta 140(a) iz naslovnog spoja iz Primjera 7 (0,138 g, 0,5 mmol), tert-butilnog estera (2S)-2-karboksimetil-pirolidin-1-karboksilne kiseline (0,143 g, 0,6 mmol), trietilamina (0,3 ml, 2 mmol) O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,63 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,1 M, 5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 140(a) (0,155 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 64 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 10,17 i 10,10 (2s, 1H, sporedni i glavni rotamer), 8,20 (s, 1H), 7,75-7,45 (m, 7H), 4,10 (s, 1H), 4,20-4,05 (m, 1H), 3,50-3,25 (m, 2H), 2,10-1,75 (m, 4H), 1,40 i 1,29 (2s, 9H, sporedni i glavni rotamer).

LCMS: [M – Boc + H]+ 388,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (2S)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-il)-2-pirolidin-2-ilacetamid (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 140(a) (0,1 g, 0,20 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (1 ml, 4,2 mmol) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje smjesom CH2Cl2/dietil-eter, čime se dobije naslovni spoj (0,055 g) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 63 %.

Glavni rotamer: 1H-NMR (d6-DMSO): � 12,23 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 9,25-9,10 (m, 1H), 8,95-8,80 (m, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,75-7,45 (m, 7H), 4,10 ( zasjenjeni m, 1H), 3,90-3,75 (m, 1H), 3,25-3,15 (m, 2H), 2,95-2,85 (m, 2H), 2,25-1,55 (m, 5H).

Sporedni rotamer: 1H-NMR (d6-DMSO): � 12,31 (s, 1H), 10,92 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 9,85-9,75 (m, 1H), 8,75-8,60 (m, 1H), 3,35-3,25 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 388,2.

Primjer 141

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (3R)-1,2,3,4-tetrahidroizokinolin-3-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (3R)-3-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-ilkarbamoil)-3,4-dihidro-1H-izokinolin-2-karboksilne kiseline 141 (a)

Dobivanje međuprodukta 141 (a) iz naslovnog spoja iz Primjera 2 (0,1 g, 0,5 mmol), 2-tert-butilnog estera (3R)-3,4-dihidro-1H-izokinolin-2,3-dikarboksilne kiseline (0,103 g, 0,6 mmol), trietilamina (0,3 ml, 2 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,63 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,1 M, 5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 141(a) (0,094 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 41 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,72 (bs, 1H), 10,25 (s, 1H), 10,14 (bs, 1H), 8,09 i 7,96 (2s, 1H, glavni i sporedni rotamer), 7,57 (s, 2H), 7,47 (s, 1H), 7,30-7,10 (m, 4H), 4,75-4,60 (m, 1H), 4,48-4,34 (m, 1H), 3,40-3,00 (m, 3H), 1,47 (s, 3H), 1,31 (s, 6H).

LCMS: [M – H]+ 458,3.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid

(3R)-1,2,3,4-tetrahidroizokinolin-3-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 141 (a) (0,094 g, 0,20 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (1 ml, 4,2 mmol) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje smjesom CH2Cl2/dietil-eter, čime se dobije naslovni spoj (0,051 g) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 63 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,98 (s, 1H), 11,08 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 9,93 (b, 1H), 9,64 (b, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,29 (s, 5H), 4,50-4,10 (zasjenjeni m, 3H), 3,53 (dd, 1H, J = 16,4, 4,0 Hz), 3,14 (dd, 1H, J = 16,8, 12,06 Hz).

LCMS: [M + H]+ 360,1.

Primjer 142

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (2S,4R)-4-benziloksipirolidin-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (2S,4R)-4-benziloksi-2-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-ilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilne kiseline 142(a)

Dobivanje međuprodukta 142(a) iz naslovnog spoja iz Primjera 2 (0,1 g, 0,5 mmol), 1-tert-butilnog estera (2S,4R)-4-benziloksipirolidin-1,2-dikarboksilne kiseline (0,103 g, 0,6 mmol), trietilamina (0,3 ml, 2 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,63 mmol) i N,N-dimetilformamida (0,1 M, 5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 142(a) (0,126 g) u obliku žutog praha, u prinosu od 50 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,76 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 10,18 (s, 1H), 8,18 i 8,10 (s, 1H, rotameri), 7,60 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,42-7,26 (m, 5H), 4,53 (s, 2H), 4,39-4,26 (m, 1H), 4,22 (bs, 1H), 3,54 (bs, 2H), 3,32 (s, 2H), 1,27 (s, 6H).

LCMS: [M – H]+ 502,2.

(2S,4R)-4-benziloksipirolidin-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 142(a) (0,106 g, 0,21 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (1 ml, 4,2 mmol) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje smjesom CH2Cl2/dietil-eter, čime se dobije naslovni spoj (0,085 g) u obliku narančasto-žutog praha, u 92 % prinosu od.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,96 (s, 1H), 10,94 (s, 1H), 10,33 (s, 1H), 10,12 (b, 1H), 8,89 (b, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,45-7,28 (m, 7H), 4,40 (b, 2H), 3,47 (b, 2H), 2,80-2,65 (m, 1H), 2,15-2,01 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 404,2.

Primjer 143

(2R)-2-amino-3-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 143 iz naslovnog spoja u Primjeru 150 (64 mg, 0,119 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje prevođenje u slobodnu bazu trietilaminom, a zatim kromatografiju na silikagelu, uz eluiranje 3:1:1 smjesom heksan/etil-acetat/etanol. Uz hlađenje u ledenoj kupelji pročišćenu slobodnu bazu u CH2Cl2 (5 ml) obradi se s 4 M HCl u dioksanu (0,1 ml). Nakon uklanjanja hlapivih komponenti naslovni spoj (32 mg, 0,067 mmol) se dobije u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 57 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,25 (s, 1H, izmjene), 10,71 (s, 1H, izmjene), 10,45 (s, 1H, izmjene), 9,44 (br s, 1H, izmjene), 8,45-8,31 (br m, 2H, izmjene), 8,08 (s, 1H), 7,76-7,45 (m, 7H), 7,09 (d, 2H, J = 8 Hz), 6,72 (d, 2H, J = 8 Hz), 4,13 (m, 1H), 3,19-2,97 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 440,0, [M – H]– 438,2.

Primjer 144

(S)-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6-]indol-8-il)amid

[image]

Dobivanje primjera 144 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (190 mg, 0,95 mmol), N-metilprolina (129 mg, 1,47 mmol), trietilamina (0,19 ml, 1,43 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (470 mg, 1,3 mmol) u N,N-dimetilformamidu (5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 10 % metanolom u CH2Cl2), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (100 mg, 0,32 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 34 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,83 (s, 1H), 10,33 (s, 1H), 9,96 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 3,20 (m, 1H), 3,03 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,23 (m, 1H), 1,91-1,88 (m, 3H).

[image] LCMS: [M + H]+ 312,1.

Primjer 145

(6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (2R)-5-oksopirolidin-2-karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 145 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (slobodna baza) (190 mg, 0,95 mmol), (R)-(+)-pirolidonkarboksilne kiseline (167 mg, 1,29 mmol), trietilamin (0,25 ml, 1,77 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (538 mg, 1,42 mmol) u N,N-dimetilformamidu (5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Smjesu se koncentrira, a ostatak triturira metanolom. Dobivene krutine se zatim prikupi filtriranjem, te ispere metanolom kako bi se dobilo naslovni spoj (220 mg, 0,57 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 60 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,79 (s, 1H), 10,27 (s, 1H), 10,20 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 4,21 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 2,24-2,16 (m, 2H), 2,03 (m, 1H).

[image] LCMS: [M + H]+ 312,2.

Primjer 146

N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-piperidin-4-ilakrilamid; sol octene kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera 4-[2-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-ilkarbamoil)-vinil]-piperidin-1-karboksilne kiseline 146(a)

Dobivanje međuprodukta 146(a) iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (slobodna baza) (49 mg, 0,245 mmol), tert-butilnog estera 4-(2-karboksivinil)piperidin-1-karboksilne kiseline (99 mg, 0,39 mmol), trietilamina (0,069 ml, 0,49 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (148 mg, 0,39 mmol) u N,N-dimetilformamidu (3 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 10 % metanolom u CH2Cl2), također na analogan način, dobije se Međuprodukt 146(a) (58 mg, 0,13 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 55 %.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-il)-3-piperidin-4-ilakrilamid; sol octene kiseline

Dobivanje naslovnog spoja Međuprodukta 146(a) (58 mg, 0,13 mmol) u CH2Cl2 (2 ml) i 4 M HCl u dioksanu (2 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Nakon koncentriranja ostatak se pročisti preparativnim HPLC-om (Peeke Scientific, HI-Q C18 s reverznom fazom 5u, 100A, 250 × 21,2 mm stupac), uz eluiranje s CH3CN i 0,1 % octenom kiselinom u vodi, pri brzini protoka od 20 ml/min, uz upotrebu gradijenta 5-95 % CH3CN, u trajanju od 40 minuta, kako bi se dobilo naslovni spoj (16 mg, 0,04 mmol) u obliku blijedožutog praha, u prinosu od 31 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,55 (s, 1H), 10,00 (s, 1H), 9,91 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,32 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,22 (s, 1H), 6,50 (m, 1H), 5,82 (m, 1H), 2,77-2,74 (m, 2H), 2,03 (m, 1H), 1,65-1,53 (m, 2H), 1,29-1,28 (m, 2H), 1,10-1,02 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 337.

Primjer 147

Metilni ester 8-tert-butoksikarbonilamino-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 6-tert-butoksikarbonilamino-1H-indol-4-karboksilne kiseline 147 (a)

Trietilamin (17,1 ml, 123 mmol) se polako doda Međuproduktu 2(b) iz Primjera 2 (hidroklorid) (27,5 g, 121 mmol), te ohladi do 0 °C u 400 ml bezvodnog CH3CN. Nakon 30 minuta doda se di-tert-butil-dikarbonat (26,76 g, 123 mmol) u bezvodnom CH3CN (50 ml), a smjesu se ostavi miješati na sobnoj temperaturi 24 sata, a zatim se hlapive komponente ukloni u vakuumu. Doda se etil-acetat (500 ml) i H2O (500 ml), a vodeni sloj ekstrahira etil-acetatom (4 × 120 ml). Pomiješane etil-acetatne ekstrakte ispere se s H2O (2 × 170 ml) i slanom vodom (100 ml), te ostavi da se osuše preko Na2SO4. Nakon filtriranja hlapive komponente se ukloni u vakuumu kako bi se dobilo Međuprodukt 147(a) (35,1 g, 121 mmol) u obliku smeđe krutine, u kvantitativnom prinosu.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,28 (s, 1H), 9,43 (s, 1H), 7,91 (br s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,42 (t, 1H, J = 2,73 Hz), 6,83 (t, 1H, J = 2,17 Hz), 3,89 (s, 3H), 1,50 (s, 9H).

LCMS: [M + Na]+ 313,1: [M – H]– 289,2.

[image]

Korak 2 Dobivanje metilnog estera 6-tert-butoksikarbonilamino-3-formil-1H-indol-4-karboksilne

kiseline 147(b)

Prethodno pomiješani Vilsmeierov reagens, koji je fosforni oksiklorid (33,67 ml, 3624 mmol) u N,N-dimetilformamidu (81,40 ml), ukapa se u Međuprodukt 147(a) (33,87 g, 116 mmol) na 0 °C, uz miješanje u bezvodnom CH2Cl2 (584 ml). Smjesu se miješa 1 sat na sobnoj temperaturi, ugasi 2,0 M vodenom otopinom natrijevog acetata (700 ml) na 0 °C, te neutralizira čvrstim Na2CO3. Nastaje krutina, a smjesu se razdjeli između etil-acetata (4000 ml) i H2O (2000 ml). Slojeve se razdvoji, a vodeni sloj ekstrahira etil-acetatom (4 × 500 ml). Organske slojeve se prikupi zajedno, ispere slanom vodom, osuši preko Na2SO4, filtrira, te koncentrira. Ostatku se doda metanol (3500 ml), a zatim K2CO3 (70 g). Smjesu se miješa 16 sati na sobnoj temperaturi, a zatim se hlapive komponente ukloni u vakuumu. Doda se etil-acetat (500 ml) i H2O (500 ml). Ukupnu smjesu se zatim filtrira, a netopive krutine prikupi i osuši u vakuumu kako bi se dobilo Međuprodukt 147(b) (14,35 g, 45,1 mmol) u obliku bijele krutine. Vodeni sloj se ponovno ekstrahira etil-acetatom (4 × 120 ml), a etil-acetatne ekstrakte prikupi zajedno, ispere s H2O (2 × 170 ml) i slanom vodom, te ostavi da se osuše preko Na2SO4. Nakon filtriranja hlapive komponente se ukloni u vakuumu kako bi se dobilo još Međuprodukta 147(b) (10,74 g, 33,8 mmol) u obliku bijele krutine. Ukupni prinos za ove dvije šarže je 68 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,28 (s, 1H), 10,09 (s, 1H), 9,60 (s, 1H), 8,23 (d, 1H, J = 3,01Hz), 7,96 (d, 1H, J = 1,32 Hz), 7,65 (d, 1H, J = 1,88 Hz), 3,84 (s, 3H), 1,50 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+319, [M + Na]+ 341,1: [M – H]– 317,1.

Korak 3 Dobivanje tert-butilnog estera (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)karbaminske

kiseline 147(c)

Međuproduktu 147(b) (25,1 g, 78,9 mmol) u bezvodnom metanolu (789 ml) doda se octena kiselina (7,89 ml). Suspenziju se miješa 10 minuta na sobnoj temperaturi, te se doda H2NNH2·H2O (21,43 ml, 395 mmol). Smjesu se miješa još 10 minuta na sobnoj temperaturi, 30 minuta grije na 70 °C, te ohladi do sobne temperature. Hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a preostalo ulje triturira metanolom i toluenom kako bi se dobilo Međuprodukt 147(c) (23,6 g, 78,9 mmol) u obliku žutog praha, u kvantitativnom prinosu.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,63 (s, 1H), 10,19 (s, 1H), 9,45 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,51 (d, 1H, J = 2,07 Hz), 7,44 (s, 1H), 1,49 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 301,1, [M + Na]+ 323,1: [M – H]– 299,1.

[image]

Korak 4 Dobivanje tert-butilnog estera (2-brom-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)

karbaminske kiseline 147(d)

Međuprodukt 147(c) (1,00 g, 3,33 mmol) otopi se u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (15 ml), te ohladi do –78 °C. N-bromsukcinimid (0,564 g, 3,17 mmol) u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (3,5 ml) ukapava se 2 minute. Reakcijsku smjesu se ostavi da se zagrije do sobne temperature, te miješa 1 sat. Zatim se u obrocima 30 minuta dodaje još N-bromsukcinimida (0,337 g, 2,00 mmol) u N,N-dimetilformamidu (približno 1,5 ml) da se završi reakciju. Reakcijsku smjesu izlije se u H2O (70 ml), te se istaloži tamna krutina. Krutinu se prikupi filtriranjem, te osuši u vakuumu kako bi se dobilo Međuprodukt 147(d) (0,95 g, 2,51 mmol) u obliku tamne krutine, u prinosu od 75 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,54 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 9,57 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,71 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,31 (s, 1H), 1,53 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 379,0, 381,0, [M + Na]+ 401,0, 403,0: [M – H]– 377,1, 379,1.

[image]

Korak 5 Dobivanje naslovnog spoja: metilni ester 8-tert-butoksikarbonilamino-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-co]indol-2-karboksilne kiseline

Međuprodukt 147(d) (0,200 g, 0,529 mmol), trietilamin (0,147 ml, 1,06 mmol) i bezvodni metanol (2 ml) u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (2 ml) propuše se s Ar. Doda se [1,1-bis(difenilfosfino)ferocen]dikloropaladij(II) (86,4 mg, 0,106 mmol), te se reakcijsku smjesu 5 minuta propuhuje s CO. Reakcijsku smjesu se zatim hermetički zatvori, te grije 16 sati na 85 °C. Smjesu se filtrira kroz tanak sloj diatomejske zemlje, a filtrat koncentrira u vakuumu. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom etil-acetat/heksan) dobije se naslovni spoj (66 mg, 0,184 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 35 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,42 (s, 1H), 10,80 (s, 1H), 9,69 (s, 1H), 8,14 (s, 1H) 7,91 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 3,92 (s, 3H), 1,49 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 359,1, [M + Na]+ 381,2: [M – H]– 357,0.

Primjer 148

1-amino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2,3-dihidro-1H-inden-1-karboksamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 148 iz naslovnog spoja iz Primjera 149 (52 mg, 0,097 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (5 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (46 mg, 0,097 mmol) u obliku žutog praha, u kvantitativnom prinosu.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,42 (s, 1H), 10,60 (s, 1H), 10,20 (s, 1H), 9,05-8,86 (m, 3H), 8,23 (s, 1H), 7,90-7,73 (m, 3H), 7,72-7,57 (m, 6H), 7,55-7,41 (m, 2H), 3,42 (m, 1H), 3,31 (m, 1H), 3,08 (m, 1H), 2,55 (m, 1H, djelomično zasjenjen).

LCMS: [M + H]+ 436,2, 419,2.

Primjer 149

1,1-dimetil-1-{[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amino]karbonil}-2,3-dihidro-1H-inden-1-ilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 149 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (52 mg, 0,17 mmol), 1-({[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}amino)-2,3-dihidro-1H-inden-1-karboksilne kiseline (72 mg, 0,26 mmol), trietilamina (0,071 ml, 0,51 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (99 mg, 0,26 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno onom u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (63 mg, 0,12 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 69 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,05 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 10,01 (m, 1H), 8,09 (m, 1H), 7,87-7,74 (m, 2H), 7,70-7,62 (m, 2H), 7,63-7,53 (m, 2H), 7,52-7,47 (m, 2H), 7,31-7,22 (m, 3H), 3,08-2,95 (m, 3H), 2,09 (m, 1H), 1,40 (m,9H).

LCMS: [M – H]– 534,0.

Primjer 150

1,1-dimetiletil-(1R)-1-[(4-hidroksifenil)metil]-2-okso-2-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amino]etilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 150 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (44 mg, 0,144 mmol), (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}amino)-3-(4-hidroksifenil)propanske kiseline (46 mg, 0,173 mmol), trietilamina (0,060 ml, 0,43 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (66 mg, 0,173 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (74 mg, 0,137 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 95 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,11 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 10,20 (s, 1H), 9,20 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,71-7,45 (m, 7H), 7,14 (d, 2H, J = 8,50 Hz), 6,68 (d, 2H, J = 8,40 Hz), 4,24 (m, 1H), 2,94 (m, 1H), 2,72 (m, 1H), 1,35 (8, 9H).

LCMS: [M – H]– 538,1.

Primjer 151

1,1-dimetiletil (1R)-1-[(4-hidroksifenil)metil]-2-okso-2-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)amino]etil(metil)karbamat

[image]

Dobivanje primjera 151 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (40 mg, 0,128 mmol), (2R)-2-[{[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}(metil)amino]-3-(4-hidroksifenil)propanske kiseline (57 mg, 0,192 mmol), trietilamina (0,054 ml, 0,384 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (73 mg, 0,192 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamida (0,4 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kako bi se dovršilo reakciju nakon 24 sata se doda još (2R)-2-[{[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}(metil)amino]-3-(4-hidroksifenil)propanske kiseline (14 mg, 0,047 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (18 mg, 0,047 mmol). Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (55 mg, 0,099 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 78 %.

1H-NMR (d6-DMSO) višestruko: � 12,10 (br s, 1H), 10,38 (br s, 1H), 9,20 (m, 1H), 8,13 (m, 1H), 7,72-7,63 (m, 3H), 7,61-7,43 (m, 4H), 7,09-7,00 (m, 2H), 6,72-6,62 (m, 2H), 4,82-4,60 (m, 1H), 3,19-3,08 (m, 1H), 2,93-2,85 (m, 1H), 2,80-2,62 (m, 3H), 1,37-1,21 (m, 9H).

LCMS: [M + H]+ 554,2, [M + Na]+ 576,2 [M – H]– 552,0.

Primjer 152

1,1-dimetiletil (1R)-1-[(4-fluorfenil)metil)-2-okso-2-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)amino]etilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 152 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (40 mg, 0,128 mmol), (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}amino)-3-(4-fluorfenil)propanske kiseline (54 mg, 0,192 mmol), trietilamina (0,054 ml, 0,384 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (73 mg, 0,192 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (61 mg, 0,113 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 88 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,12 (s, 1H), 10,42 (s, 1H), 10,25 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,71-7,46 (m, 7H), 7,42-7,34 (m, 2H), 7,21-7,09 (m, 3H), 4,41 (m, 1H), 3,03 (m, 1H), 2,85 (m 1H), 1,34 (s, 9H).

LCMS: [M – H]– 540,2.

Primjer 153

1,1-dimetiletil-(1R)-1-(4-hidroksifenil)-2-okso-2-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amino]etilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 153 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (42 mg, 0,134 mmol), (2R)-({[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}amino)(4-hidroksifenil)etanske kiseline (54 mg, 0,202 mmol), trietilamina (0,056 ml, 0,402 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (77 mg, 0,202 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kako bi se dovršilo reakciju nakon 24 sata se doda još (2R)-({[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}amino)(4-hidroksifenil)etanske kiseline (27 mg, 0,10 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (39 mg, 0,10 mmol). Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (48 mg, 0,091 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 68 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,11 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 10,30 (s, 1H), 9,46 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,71-7,48 (m, 7H), 7,33-7,27 (m, 2H), 6,80-6,69 (m, 2H), 5,22 (m, 1H), 1,41 (s, 1H).

LCMS: [M + H]+ 526,2.

Primjer 154

1,1-dimetiletil (1R)-1-(naftalen-2-ilmetil)-2-okso-2-[(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)amino]etilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 154 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (hidroklorid) (40 mg, 0,128 mmol), (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}amino)-3-naftalen-2-ilpropanske kiseline (58 mg, 0,192 mmol), trietilamina (0,054 ml, 0,384 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (73 mg, 0,192 mmol) u CH2Cl2 (0,4 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,4 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (69 mg, 0,120 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 94 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,12 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 10,31 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,90-7,81 (m, 4H), 7,71-7,66 (m, 3H), 7,62-7,56 (m, 3H), 7,54-7,46 (m, 4H), 7,23 (d, 1H, J = 8,1Hz), 4,46 (m, 1H), 3,23 (m, 1H), 3,02 (m, 1H), 1,30 (s, 9H).

LCMS: [M – H]– 572,2.

Primjer 155

1,1-dimetiletil-(1R)-1-[(4-hidroksifenil)metil]-2-okso-2-[(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amino]etilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 155 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (71 mg, 0,30 mmol), (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}amino)-3-(4-hidroksifenil)propanske kiseline (121 mg, 0,45 mmol), trietilamina (0,125 ml, 0,9 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (171 mg, 0,45 mmol) u CH2Cl2 (0,5 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Pročišćavanjem, također na analogan način (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), dobije se naslovni spoj (100 mg, 0,22 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 72 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,75 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 10,13 (s, 1H), 9,19 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,61-7,56 (m, 2H), 7,14 (d, 2H, J = 8,10 Hz), 7,04 (d, 1H, J = 8,48 Hz), 6,66 (d, 2H, J = 8,10 Hz), 4,22 (m, 1H), 3,08 (m, 1H), 2,87 (m, 1H), 1,34 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 464,2, [M + Na]+ 486,2.

Primjer 156

1,1-dimetiletil (1R)-1-[(4-hidroksifenil)metil]-2-okso-2-[(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amino]etil(metil)karbamat

[image]

Dobivanje primjera 156 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (74 mg, 0,31 mmol), (2R)-2-[{[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}(metil)amino]-3-(4-hidroksifenil)propanske kiseline (138 mg, 0,47 mmol), trietilamina (0,130 ml, 0,93 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (179 mg, 0,47 mmol) u CH2Cl2 (0,5 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Pročišćavanjem, također na analogan način (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), dobije se naslovni spoj (131 mg, 0,27 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 88 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,77 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 9,21 (s, 1H), 8,12 (m, 1H), 7,65 (d, 1H, J = 1,32 Hz), 7,58 (d, 1H), J = 2,26 Hz), 7,48 (s, 1H), 7,07 (d, 2H, J = 8,29 Hz), 6,73-6,64 (m, 2H), 4,75 (m, 1H), 3,12 (m, 1H), 2,86-2,65 (m, 4H, djelomično zasjenjen N,N-dimetilformamidom), 1,35-1,25 (m, 9H).

LCMS: [M + H]+ 478,3, [M + Na]+ 500,3.

Primjer 157

1,1-dimetiletil-(1R)-1-[(4-fluorfenil)metil]-2-okso-2-[(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) amino]etilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 157 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (80 mg, 0,34 mmol), (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}amino)-3-(4-fluorfenil)propanske kiseline (145 mg, 0,51 mmol), trietilamina (0,142 ml, 1,02 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (193 mg, 0,51 mmol) u CH2Cl2 (0,5 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Pročišćavanjem, također na analogan način (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), dobije se naslovni spoj (56 mg, 0,12 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 35 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,73 (s, 1H), 10,24 (s, 1H), 10,16 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,55 (s, 1H, s finim cijepanjem), 7,45 (s, 1H), (7,38-7,29 (m, 2H), 7,16-7,04 (m, 3H), 4,25 (m, 1H), 2,97 (m, 1H), 2,79 (m, 1H), 1,30 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 466,2, [M + Na]+ 488,3.

Primjer 158

1,1-dimetiletil-(1R)-1-(naftalen-2-ilmetil)-2-okso-2-[(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amino]etilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 158 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (76 mg, 0,32 mmol), (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}amino)-3-naftalen-2-ilpropanske kiseline (145 mg, 0,48 mmol), trietilamina (0,134 ml, 0,96 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (182 mg, 0,48 mmol) u CH2Cl2 (0,5 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Pročišćavanjem, također na analogan način (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), dobije se naslovni spoj (67 mg, 0,13 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 42 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,76 (brs, 1H), 10,27 (s, 1H), 10,27 (brs, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,90-7,79 (m, 4H), 7,62-7,42 (m, 5H), 7,21 (d, 1H, J = 7,73 Hz), 4,43 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 3,02 (m, 1H), 1,29 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 498,2, [M + Na]+ 520,2.

Primjer 159

1,1-dimetiletil-(1R)-2-okso-2-[(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amino]-1-{[(fenilmetil)oksi]metil}etilkarbamat

[image]

Dobivanje primjera 159 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (97 mg, 0,41 mmol), (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oksi]karbonil}amino)-3-[(fenilmetil)oksi]propanske kiseline (182 mg, 0,62 mmol), trietilamina (0,171 ml, 1,23 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (236 mg, 0,62 mmol) u CH2Cl2 (0,5 ml) i N,N-dimetilformamidu (0,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Pročišćavanjem, također na analogan način (uz eluiranje 1:1 smjesom heksan/aceton), dobije se naslovni spoj (40 mg, 0,083 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 20 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,78 (brs, 1H), 10,29 (s, 1H), 10,22 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,61 (s, 1H, s finim cijepanjem), 7,75 (s, 1H), 7,38-7,26 (m, 4H), 7,08 (d, 1H, J = 6,02 Hz), 4,54 (s, 2H), 4,42 (m, 1H), 3,74-3,63 (m, 2H), 1,42 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 478,3, [M + Na]+ 500,2.

Primjer 160

Metilni ester (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-2-karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje metilnog estera 8-amino-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol) 160(a)

Dobivanje međuprodukta 160(a) iz naslovnog spoja u Primjeru 147 (45,0 mg, 0,125 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (0,32 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije Međuprodukt 160(a) (36,9 mg, 0,125 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 99 %.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: metilni ester (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)

amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 160(a) (36,9 mg, 0,125 mmol), (1R,2R)-2-fenil-ciklopropan karboksilne kiseline (22,0 mg, 0,136 mmol), trietilamina (0,175 ml, 1,26 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (72,0 mg, 0,189 mmol) u N,N-dimetilformamida (2,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografija na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom etil-acetat/heksan), također na analogan način, uključuje daljnje trituriranje metanolom i eterom, te se dobije naslovni spoj (23 mg, 0,0572 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 46 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,53 (s, 1H), 10,83 (s, 1H), 10,58 (s, 1H), 8,23 (d, 1H, J = 1,51Hz), 8,15 (s, 1H), 7,76 (d, 1H, J = 1,51Hz), 7,37-7,25 (m, 2H), 7,25-7,14 (m, 3H), 3,93 (s, 3H), 2,45-2,35 (m, 1H), 2,15-2,05 (m, 1H), 1,58-1,47 (m, 1H), 1,45-1,33 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 403,3, [M + Na]+ 425,1; [M – H]– 401,0.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C22H19N4O4, 403,1406, opaženo 403,1413.

Primjer 161

tert-butilni ester (2-metilkarbamoil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)karbaminske kiseline

[image]

Dobivanje primjera 161 provodi se na način analogan onom u Koraku 5 u Primjeru 147, s tim što metilamin-hidroklorid zamjenjuje metanol. Zatim se CO propuhuje kroz smjesu Međuprodukta 147(d) iz Primjera 147 (200 mg, 0,529 mmol), trietilamina (0,29 ml, 2,11 mmol), metilamin-hidroklorida (71 mg, 1,06 mmol) i 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocendikloropaladija(II) (86 mg, 0,106 mmol). Doradu reakcijske smjese i kromatografiju na silikagelu (uz eluiranje 46:4:25 smjesom diklormetan/metanol/etil-acetat) također se provodi na analogan način, te se dobije naslovni spoj (55 mg, 0,154 mmol) u prinosu od 29 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,01 (s, 1H), 10,55 (s, 1H), 9,58 (s, 1H), 8,33-8,25 (m, 1H) 7,98 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,71 (d, 1H, J = 1,51Hz), 2,81 (d, 3H, J = 4,52 Hz), 1,48 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 358,3, [M + Na]+ 380,1; [M – H]– 356,1.

Primjer 162

tert-butilni ester [2-(2-hidroksietilkarbamoil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il] karbaminske kiseline

[image]

Dobivanje primjera 162 provodi se na način analogan onom u Koraku 5 u Primjeru 147, s tim što 2-aminoetanol zamjenjuje metanol, a kromatografija nije potrebna. Zatim se CO propuhuje kroz smjesu Međuprodukta 147(d) iz Primjera 147 (60 mg, 0,16 mmol), trietilamina (0,044 ml, 0,32 mmol), 2-aminoetanola (19 mg, 0,32 mmol) i 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocendikloropaladija(II) (26 mg, 0,032 mmol) u N,N-dimetilformamidu (3,0 ml). Nakon što je reakcija gotova, smjesu se filtrira kroz diatomejsku zemlju. Filtrat se koncentrira, te se doda metanol. Dobivene krutine prikupi se filtriranjem, te ispere metanolom, diklormetanom i dietil-eterom. Nakon sušenja u vakuumu naslovni spoj (24 mg, 0,062 mmol) se dobije u obliku žutog praha, u prinosu od 39 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,08 (s, 1H), 10,56 (s, 1H), 9,58 (s, 1H), 8,30 (t, 1H, J = 5,84 Hz) 8,06 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 4,80 (brs, 1H), 3,60-3,48 (m, 2H), 3,38 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 1,48 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 388,1, [M + Na]+ 410,1.

Primjer 163

(1,2-trans)-2-piperidin-4-ilciklopropan karboksilne kiseline (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)amid (sol octene kiseline)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera 4-((1,2-trans)-2-etoksikarbonilciklopropil)piperidin-1-karboksilne kiseline 163(a)

U smjesu NaH (303 mg, 7,57 mmol) i trimetilsulfoksonijevog jodida (1,67 g, 7,57 mmol) doda se dimetil-sulfoksid (10 ml). Nakon 30 minuta miješanja ukapa se otopina tert-butilnog estera 4-(2-etoksikarbonilvinil)piperidin-1-karboksilne kiseline u dimetil-sulfoksidu (5 ml). Nakon miješanja preko noći u smjesu se doda etil-acetat i voda. Vodeni sloj ekstrahira se nekoliko puta etil-acetatom. Pomiješane organske slojeve osuši se preko Na2SO4, filtrira, te koncentrira. Ostatak se pročisti kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje smjesom 10 % etil-acetat/heksan kako bi se dobilo Međuprodukt 163(a) (1,16 g, 67 %).

Korak 2 Dobivanje tert-butilnog estera 4-((1,2-trans)-2-karboksi-ciklopropil)piperidin-1-karboksilne

kiseline 163(b)

U smjesu Međuprodukta 163(a) (555 mg, 1,87 mmol) u 3:1 smjesi tetrahidrofuran/H2O (12 ml) doda se 1 M vodena otopina LiOH (5,61 ml). Dobivenu smjesu se miješa preko noći. Smjesu se zatim zakiseli s 1 M HCl do pH 1, te nekoliko puta ekstrahira etil-acetatom. Pomiješane organske slojeve se zatim ispere slanom vodom, te koncentrira kako bi se dobilo Međuprodukt 163(b) (515 mg, 1,87 mmol) u kvantitativnom prinosu, kojeg se prenese bez daljnjeg pročišćavanja.

Korak 3 Dobivanje tert-butilnog estera 4-[(1,2-trans)-2-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-ilkarbamoil)ciklopropil]piperidin-1-karboksilne kiseline 163(c)

Dobivanje Međuprodukta 163(c) iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (slobodna baza) (374 mg, 1,87 mmol), Međuprodukta 163(b) (500 mg, 1,87 mmol), trietilamina (0,31 ml, 2,24 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (782 mg, 2,06 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 40 % acetonom u heksanu), također na analogni način, dobije se Međuprodukt 163(c) u obliku žutog praha (649 mg, 1,44 mmol), u prinosu od 77 %.

Korak 4 Dobivanje naslovnog spoja: (6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid

(1,2-trans)-2-piperidin-4-ilciklopropan karboksilne kiseline (sol octene kiseline)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 163(c) (603 mg, 1,34 mmol) u CH2Cl2 (10 ml) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Nakon koncentriranja sirovi produkt se pročisti preparativnim HPLC-om, na način analogan kao u Primjeru 146, Korak 2, kako bi se dobilo naslovni spoj u obliku blijedožutog praha (37 mg, 0,09 mmol), u prinosu od 7 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,71 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 10,23 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,55 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,46 (s, 1H), 3,05-3,03 (m, 2H), 2,51 (m, 1H), 1,65-1,53 (m, 3H), 1,29-1,28 (m, 2H), 1,10 (m, 1H), 0,99 (m, 1H), 0,96 (m, 1H), 0,73 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 352.

Primjer 164

tert-butilni ester (6-okso-2-vinil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)karbaminske kiseline

[image]

U atmosferi argona se Međuprodukt 147(d) iz Primjera 147 (0,250 g, 0,661 mmol), tributilvinilkositar (0,420 g, 1,32 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladij(0) (38 mg, 0,033 mmol) u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (5 ml) grije 16 sati na 85 °C. Reakcijsku smjesu se filtrira kroz tanak sloj diatomejske zemlje, a filtrat koncentrira u vakuumu. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:4 smjesom etil-acetat/diklormetan) dobije se naslovni spoj (0,18 g, 0,552 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 84 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,80 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 9,51 (s, 1H), 7,72-7,62 (m, 3H), 7,05 (dd, 1H, J = 11,87, 6,59 Hz), 5,89 (d, 1H, J = 17,33 Hz), 5,43 (d, 1H, J = 11,11 Hz), 1,49 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 327,2, [M + Na]+ 349,1.

Primjer 165

tert-butilni ester [2-(2-dimetilaminoetilkarbamoil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il] karbaminske kiseline

[image]

Dobivanje primjera 165 provodi se na način analogan onim u Koraku 5 u Primjeru 147, s tim što metanol zamjenjuje N,N-dimetiletilendiamin. Zatim CO se propuhuje kroz smjesu Međuprodukta 147(d) iz Primjera 147 (1,5 g, 3,97 mmol), trietilamina (1,1 ml, 7,92 mmol), N,N-dimetiletilendiamina (0,7 g, 7,94 mmol) i 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocendikloropaladija(II) (0,65 g, 0,796 mmol) u N,N-dimetilformamidu (30,0 ml). Doradu reakcijske smjese i kromatografiju na silikagelu (uz eluiranje 46:4:25 smjesom diklormetan/metanol/etil-acetat) također se provodi na analogan način, čime se dobije naslovni spoj (1,25 g, 3,02 mmol), u prinosu od 76 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,55 (s, 1H), 9,59 (s, 1H), 8,25 (t, 1H, J = 5,65, 4,71Hz) 8,06 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 3,45-3,37 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 2,42 (t, 2H, J = 6,59, 6,41Hz), 2,20 (s,6H), 1,49 (s,9H).

LCMS: [M + H]+ 415,3, [M + Na]+ 437,1; [M –H]– 413,1.

Primjer 166

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (2R,3R)-2-fenilpirolidin-3-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje 1-tert-butilnog estera 2-fenilpirolidin-1,3-dikarboksilne kiseline 166(a)

U suspenziju (2R,3R)-3-fenilpirolidin-2-karboksilne kiseline (100 mg, 0,556 mmol) u dioksanu (2 ml) i H2O (2 ml) doda se trietilamin, a zatim di-tert-butil-dikarbonat (127 mg, 0,583 mmol). Dobivenu smjesu miješa se preko noći. Smjesu se zatim razdijeli između etil-acetata i 0,1 M HCl. Pomiješane organske slojeve osuši se preko bezvodnog Na2SO4, filtrira, te koncentrira kako bi se dobilo Međuprodukt 166(a) (162 mg, 0,56 mmol), u prinosu od 100 %, kojeg se prenese bez pročišćavanja.

Korak 2 Dobivanje tert-butilnog estera 3-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il

karbamoil)-2-fenilpirolidin-1-karboksilne kiseline 166(b)

Dobivanje međuprodukta 166(b) iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (300 mg, 1,0 mmol), Međuprodukta 166(a) (162 mg, 0,56 mmol), trietilamina (0,15 ml, 1,1 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (254 mg, 0,667 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 40 % acetonom u heksanu), također na analogan način, dobije se Međuprodukt 166(b) u obliku žutog praha (180 mg, 0,38 mmol), u prinosu od 68 %.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid

(2R,3R)-2-fenilpirolidin-3-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 166(b) (180 mg, 0,38 mmol) u CH2Cl2 (5 ml) i 4 M HCl u dioksanu (5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Krutine se prikupi filtriranjem, te ispere dietil-eterom kako bi se dobilo naslovni spoj u obliku blijedožutog praha (154 mg, 0,37 mmol), u prinosu od 99 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,03 (s, 1H), 10,72 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 10,20 (brs, 1H), 9,24 (brs, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,79 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,58-7,52 (m, 5H), 7,48 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 3,77 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 2,66 (m, 1H), 2,62 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 374,2.

Primjer 167

(2R)-3-(4-hidroksifenil)-2-(metilamino)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 167 iz naslovnog spoja u Primjeru 151 (47 mg, 0,085 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje pretvorbu u slobodnu bazu trietilaminom, te kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje 3:1:1 smjesom heksan/etil-acetat/etanol. Uz hlađenje u ledenoj kupelji, pročišćenu slobodnu bazu u CH2Cl2 (10 ml) se obradi s 4 M HCl u dioksanu (0,1 ml). Nakon uklanjanja hlapivih komponenti naslovni spoj (20 mg, 0,041 mmol) se dobije u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 48 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,21 (s, 1H), 10,70 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 9,44-9,06 (m, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,72-7,64 (m, 2H), 7,61-7,54 (m, 3H), 7,53-7,47 (m, 2H) 7,05 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 6,65 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 4,09 (m, 1H), 3,40-3,31 (m, 2H), 3,16 (dd, 1H, J = 6,07, 13,90 Hz), 3,07 (dd, 1H, J = 7,58, 13,89 Hz), 2,55 (s,3H).

LCMS: [M + H]+ 454,1, [M + Na]+ 476,1.

Primjer 168

(2R)-2-amino-3-(4-fluorfenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propanamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 168 iz naslovnog spoja u Primjeru 152 (49 mg, 0,091 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje pretvorbu u slobodnu bazu trietilaminom, te kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje 3:1:1 smjesom heksan/etil-acetat/etanol. Uz hlađenje u ledenoj kupelji, pročišćenu slobodnu bazu u CH2Cl2 (10 ml) se obradi s 4 M HCl u dioksanu (0,1 ml). Nakon uklanjanja hlapivih komponenti naslovni spoj (21 mg, 0,044 mmol) se dobije u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 49 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,26 (s, 1H), 10,83 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 8,48 (br s, 3H), 8,08 (s, 1H), 7,73-7,48 (m, 7H), 7,40-7,30 (m, 2H), 7,24-7,13 (m, 2H), 4,22 (m, 1H), 3,24 (m, 1H), 3,13 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 442,1, [M + Na]+ 464,1.

Primjer 169

Metilamid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje metilamida 8-amino-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol) 169(a)

Dobivanje međuprodukta 169(a) iz 161(a) u Primjeru 161 (55,0 mg, 0,154 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (0,77 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem, također na analogan način, dobije se Međuprodukt 169(a) (45,0 mg, 0,154 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 99 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,46 (s, 1H), 10,71 (s, 1H), 8,54 (m, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 2,81 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 258,1; [M –H]– 256,1.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: metilamid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)

amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 169(a) (45,0 mg, 0,154 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (59,4 mg, 0,231 mmol), trietilamina (0,086 ml, 0,616 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (87,8 mg, 0,231 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kada se procjeni da je reakcija gotova, N,N-dimetilformamid se otpari, te se doda metanol. Smjesu se filtrira kako bi se prikupilo krutine, koje se ispere metanolom i dietil-eterom. Nakon sušenja u vakuumu naslovni spoj (25,0 mg, 0,0623 mmol) se dobije u obliku žutog praha, u prinosu od 41 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,13 (s, 1H), 10,60 (s, 1H), 10,51 (s, 1H), 8,36 (d, 1H, J = 4,52 Hz), 8,17 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,37-7,25 (m, 2H), 7,25-7,14 (m, 3H), 2,83 (d, 3H, J = 4,52 Hz), 2,45-2,35 (m, 1H), 2,14-2,04 (m, 1H), 1,57-1,47 (m, 1H), 1,45-1,33 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 402,1, [M + Na]+ 424,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C22H20N5O3, 402,1566, opaženo 402,1551.

Primjer 170

(2-hidroksietil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino [4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje (2-hidroksietil)amida 8-amino-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol) 170(a)

Dobivanje međuprodukta 170(a) iz međuprodukt 162(a) u Primjeru 162 (80,0 mg, 0,206 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (1,10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem, također na analogan način, dobije se Međuprodukt 170(a) (66,7 mg, 0,206 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 99 %.

LCMS: [M + H]+ 288,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (2-hidroksietil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil) amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 170(a) (66,7 mg, 0,206 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (46,0 mg, 0,284 mmol), trietilamin (0,143 ml, 1,03 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (147 mg, 0,387 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Reakcijsku smjesu se koncentrira, te podvrgne preparativnom HPLC-u (HI-Q C18 s reverznom fazom 5 uM, 100 Ĺ, 150 × 20 stupac, uz eluiranje smjesom CH3CN/0,1 % octena kiselina u H2O, pri brzini protoka od 20 ml/min, uz upotrebu gradijenta 20-60 % CH3CN, u trajanju od 30 minuta) kako bi se dobilo naslovni spoj (15 mg, 0,0348 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 17 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,19 (s, 1H), 10,61 (s, 1H), 10,52 (s, 1H), 8,36 (t, 1H, J = 5,65 Hz), 8,18 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 8,09 (s, 1H), 7,70 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,35-7,26 (m, 2H), 7,25-7,16 (m, 3H), 4,82 (t, 1H, J = 5,46 Hz), 3,54 (dd, 2H, J = 5,84, 5,65 Hz), 3,43-3,32 (m, 2H), 2,45-2,35 (m, 1H), 2,14-2,04 (m, 1H), 1,57-1,47 (m, 1H), 1,44-1,33 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 432,0, [M + Na]+ 454,0.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C23H22N5O4, 432,1672, opaženo 432,1648.

Primjer 171

(2-dimetilaminoetil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje dihidroklorida (2-dimetilaminoetil)amida 8-amino-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino [4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline 171 (a)

Dobivanje međuprodukta 171(a) iz naslovnog spoja u Primjeru 165 (55,0 mg, 0,133 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (0,66 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem, također na analogan način, dobije se Međuprodukt 171 (a) (51,3 mg, 0,132 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 99 %.

LCMS: [M + H]+ 315,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (2-dimetilaminoetil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil) amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 171 (a) (51,3 mg, 0,132 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (24,0 mg, 0,148 mmol), trietilamina (0,074 ml, 0,535 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (76,0 mg, 0,200 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Reakcijsku smjesu se koncentrira, te podvrgne preparativnom HPLC-u (HI-Q C18 s reverznom fazom 5uM, 100 Ĺ, 150 × 20 stupac, uz eluiranje smjesom CH3CN/0,1 % octena kiselina u H2O, pri brzini protoka od 20 ml/min, uz upotrebu gradijenta 20-60 % CH3CN, u trajanju od 30 minuta) kako bi se dobilo naslovni spoj (15 mg, 0,0328 mmol) u obliku žuto-zelenog praha, u prinosu od 25 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,63 (s, 1H), 10,53 (s, 1H), 8,71 (brs, 1H), 8,20 (d, 1H, J = 1,13 Hz), 8,06 (s, 1H), 7,70 (d, 1H, J = 0,94 Hz), 7,37-7,26 (m, 2H), 7,26-7,15 (m, 3H), 3,70-3,60 (m, 2H), 3,22-3,11 (m, 2H), 2,76 (s, 6H), 2,42-2,32 (m, 1H), 2,16-2,04 (m, 1H), 1,58-1,46 (m, 1H), 1,46-1,33 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 459,1, [M + Na]+ 481,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C25H27N6O3, 459,2145, opaženo 459,2151.

Primjer 172

(1,2-trans)-2-(3-morfolin-4-ilmetilfenil)ciklopropan karboksilne kiseline (6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino [4,5,6]indol-8-il)amid

[image]

Korak 1 Dobivanje etilnog estera 3-(3-morfolin-4-ilmetilfenil)akrilne kiseline 172(a)

U otopinu 4-(3-jodbenzil)morfolina (3,44 g, 11,4 mmol) u N,N-dimetilformamidu (20 ml) doda se trietilamin (1,7 ml, 12,5 mmol), etil-akrilat (4,1 ml, 45,4 mmol), tri-o-tolilfosfin (346 mg, 1,14 mmol) i paladijev(II) acetat (127 mg, 0,57 mmol). Smjesu se preko noći grije na 80 °C. Nakon koncentriranja smjesu se kromatografira na silikagelu kako bi se dobilo Međuprodukt 172(a) u obliku bezbojnog ulja (2,37 g, 9,1 mmol), u prinosu od 80 %.

Korak 2 Dobivanje etilnog estera (1,2-trans)-2-(3-morfolin-4-ilmetilfenil)ciklopropankarboksilne

kiseline 172(b)

Dobivanje međuprodukta 172(b) iz Međuprodukta 172(a) (472 mg, 1,81 mmol), NaH (94 mg, 2,35 mmol) i trimetilsulfoksonijevog jodida (517 mg, 2,35 mmol) provodi se analogno onom u Koraku 1 u Primjeru 181. Nakon dorade ostatak se pročisti kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje smjesom 40 % etil-acetat/heksan, kako bi se dobilo Međuprodukt 172(b) u obliku bezbojnog ulja (175 mg, 0,64 mmol), u prinosu od 35 %.

(1,2-trans)-2-(3-morfolin-4-ilmetilfenil)ciklopropan karboksilne kiseline

U otopinu Međuprodukta 172(b) (175 mg, 0,64 mmol) u tetrahidrofuranu (2 ml) doda se 1 M vodena otopina LiOH (3,8 ml, 3,8 mmol). Dobivenu smjesu miješa se preko noći, te se smjesu zakiseli do pH 2, te ekstrahira etil-acetatom. Koncentriranjem organskog sloja dobije se sirova 2-(3-morfolin-4-ilmetilfenil)ciklopropankarboksilna kiselina, koju se pomiješa s naslovnim spojem iz Primjera 2 (227 mg, 0,756 mmol), trietilaminom (0,32 ml, 2,27 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevim heksafluorofosfatom (345 mg, 0,907 mmol) u N,N-dimetilformamidu (5 ml). Nakon miješanja preko noći hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a ostatak pročisti kromatografijom na silikagelu kako bi se dobilo naslovni spoj u obliku žute krutine (15 mg, 0,03 mmol), u prinosu od 5 %.

1H-NMR (CD3OD): � 8,30 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,61 (s, 2H), 7,51-7,28 (m, 4H), 3,84 (s, 4H), 3,66 (s, 2H), 2,61 (s, 4H), 2,45 (m, 1H), 2,21 (m, 1H), 1,76 (m, 1H), 1,53 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 444,2

Primjer 173

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-[3-(4-metilpiperazin-1-il)fenil] ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje etilnog estera 2-[3-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]ciklopropan karboksilne kiseline 173(a)

U otopinu Međuprodukta 202(a) u Primjeru 202 (165 mg, 0,616 mmol) u toluenu (4 ml) doda se 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil (34,5 mg, 0,055 mmol), 4-metilpiperazin (0,082 ml, 0,74 mmol), Cs2CO3 (281 mg, 0,862 mmol) i Pd(OAc)2 (8,3 mg, 0,037 mmol). Smjesu se refluksira preko noći. Smeđu smjesu se zatim filtrira, a filtarski kolač ispere etil-acetatom. Nakon koncentriranja filtrata ostatak se pročisti kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje smjesom 2-5 % MeOH/CH2Cl2, kako bi se dobilo Međuprodukt 173(a) u obliku bezbojnog ulja (111 mg, 0,39 mmol), u prinosu od 63 %.

(1,2-trans)-2-[3-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]ciklopropan karboksilne kiseline

Na način sličan onom opisanom za Korak 3 u Primjeru 172, Međuprodukt 173(a) se obradi 1 M vodenom otopinom LiOH kako bi se dobilo sirovu 2-[3-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]ciklopropankarboksilnu kiselinu. Sirovu 2-[3-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]ciklopropankarboksilnu kiselinu kondenzira se s naslovnim spojem iz Primjera 2 (71 mg, 0,3 mmol), također na način sličan onom opisanom za Korak 3 u Primjeru 172. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3 dobije se sirovi produkt, kojeg se pročisti kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje smjesom 3 % MeOH/CH2Cl2, kako bi se dobilo naslovni spoj (38 mg, 0,086 mmol), u prinosu od 22 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,70 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,23 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,13 (m, 1H), 6,79-6,74 (m, 2H), 6,58 (m, 1H), 3,22-3,12 (m, 4H), 2,51-2,47 (m, 4H), 2,33 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,08 (m, 1H), 1,46 (m, 1H), 1,36 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 443,2.

Primjer 174

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-morfolin-4-ilfenil) ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje etilnog estera 2-[3-morfolin-4-il)fenil]ciklopropan karboksilne kiseline 174(a)

Dobivanje međuprodukta 174(a) iz Međuprodukta 202(a) u Primjeru 202 (239 mg, 0,892 mmol), 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftila (50 mg, 0,081 mmol), morfolin (0,12 ml, 1,34 mmol), Cs2CO3 (407 mg, 1,25 mmol) i Pd(OAc)2 (12 mg, 0,054 mmol) u toluenu (5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 173. Nakon koncentriranja ostatak se pročisti kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje s 1-2 % MeOH/CH2Cl2 kako bi se dobilo Međuprodukt 174(a) u obliku bezbojnog ulja (84 mg, 0,31 mmol), u prinosu od 34 %.

(1,2-trans)-2-(3-morfolin-4-ilfenil)ciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja provodi se analogno onom u Koraku 3 u Primjeru 172, s tim što se upotrebljava Međuprodukt 174(a) umjesto Međuprodukta 172(b). Naslovni spoj se dobije u prinosu od 27 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,37 (d, 1H, J = 2,26 Hz), 10,24 (s, 1H), 8,24 (d, 1H, J = 1,88 Hz), 7,58 (d, 1H, J = 1,51Hz), 7,56 (d, 1H, J = 3,30 Hz), 7,47 (s, 1H), 7,15 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,79-6,77 (m, 2H), 6,61 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 3,74-3,72 (m, 4H), 2,23 (m, 1H), 2,07 (m, 1H), 1,46 (m, 1H), 1,38 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 430,2.

Primjer 175

(2R)-2-amino-2-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)etanamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 175 iz naslovnog spoja u Primjeru 153 (38 mg, 0,072 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje pretvorbu u slobodnu bazu trietilaminom, te kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje 3:1:1 smjesom heksan/etil-acetat/etanol. Uz hlađenje u ledenoj kupelji, pročišćenu slobodnu bazu u CH2Cl2 (10 ml) se obradi s 4 M HCl u dioksanu (0,1 ml). Nakon uklanjanja hlapivih komponenti naslovni spoj (20 mg, 0,043 mmol) se dobije u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 60 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,23 (s, 1H), 10,82 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 8,71 (br s, 3H), 8,10 (s, 1H), 7,75-7,65 (m, 3H), 7,63-7,49 (m, 4H), 7,43 (d, 2H, J = 8,47 Hz), 6,86 (d, 2H, J = 8,47 Hz), 5,02 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 426,2.

Primjer 176

(2R)-2-amino-3-naftalen-2-il-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propanamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 176 iz naslovnog spoja u Primjeru 154 (59 mg, 0,103 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem, također na analogan način dobije se naslovni spoj (52 mg, 0,102 mmol) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 99 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,24 (s, 1H), 10,82 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 8,43 (br s, 3H), 8,07 (s, 1H), 7,93-7,81 (m, 5H), 7,71-7,45 (m, 9H), 4,32 (br s, 1H), 3,44 (m, 1H, djelomično zasjenjen), 3,28 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 474,2, [M + Na]+ 496,3.

Primjer 177

(2R)-2-amino-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-[(fenilmetil)oksi]propanamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 177 iz naslovnog spoja u Primjeru 159 (35 mg, 0,072 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogni način, dobije naslovni spoj (30 mg, 0,072 mmol) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 100 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,89 (s, 1H), 10,75 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 8,45 (brs, 3H), 8,06 (s, 1H), 7,63 (s, 2H), 7,50 (s, 1H), 7,38-7,26 (m, 5H), 4,59 (dd, 2H, J = 12,25, 17,33 Hz), 4,24 (brs, 1H), 3,89 (d, 2H, J = 4,15 Hz, djelomično zasjenjen).

LCMS: [M + H]+ 378,2, [M + Na]+ 400,1.

Primjer 178

(2R)-2-amino-3-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propanamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 178 iz naslovnog spoja u Primjeru 155 (90 mg, 0,194 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogni način, dobije naslovni spoj (56 mg, 0,140 mmol) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 72 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,89 (s, 1H), 10,70 (s, 1H), 10,30 (s, 1H), 9,38 (brs, 1H), 8,34 (brs, 3H), 8,03 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,08 (d, 2H, J = 8,29 Hz), 6,70 (d, 2H, J = 8,29 Hz), 4,11 (brs, 1H), 2,93-3,15 (m, 2H).

LCMS:[M + Na]+ 386,5, [M – H]– 362,4.

Primjer 179

(2R)-2-amino-3-naftalen-2-il-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propanamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 179 iz naslovnog spoja u Primjeru 158 (57 mg, 0,115 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogni način, dobije naslovni spoj (48 mg, 0,111 mmol) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 97 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,88 (s, 1H), 10,82 (s, 1H), 10,30 (s, 1H), 8,43 (br s, 3H), 8,04 (s, 1H), 7,93-7,78 (m, 4H), 7,64-7,57 (m, 2H), 7,54-7,45 (m, 4H), 4,32 (br s, 1H), 3,22-3,46 (m, 2H, djelomično zasjenjen).

LCMS: [M + H]+ 398,5, [M + Na]+ 420,4.

Primjer 180

2-(1,1'-bifenil-4-il)-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Dobivanje primjera 180 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (75 mg, 0,38 mmol), 1,1'-bifenil-4-iloctene kiseline (93 mg, 0,44 mmol), trietilamina (0,16 ml, 1,15 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfat (167 mg, 0,44mmol) u CH2Cl2 (1,0 ml) i N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografiju na silikagelu provede se 2 ×, uz eluiranje oba puta 1:1 smjesom heksan/aceton, najčišće frakcije se prikupi zajedno, otpari, a dobivene krutine triturira metanolom kako bi se dobilo naslovni spoj (5 mg, 0,012mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 3 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,74 (s, 1H), 10,35 (s, 1H), 10,25 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,69-7,54 (m, 6H), 7,51-7,33 (m, 6H), 3,69 (s, 2H).

LCMS: [M + H]+ 395,4, [M + Na]+ 417,4.

Primjer 181

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil) ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje etilnog estera (1,2-trans)-2-(4-metoksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline 181 (a)

U smjesu NaH (200 mg, 5,0 mmol) i trimetilsulfoksonijevog jodida (1,1 g, 5,0 mmol) doda se DMSO (10 ml). Nakon 30 minuta miješanja ukapa se otopina etilnog estera 3-(4-metoksifenil)akrilne kiseline (400 mg, 1,92 mmol) u DMSO-u (5 ml). Nakon miješanja preko noći smjesu se razdijeli između etil-acetata i vode. Vodeni sloj se ponovno ekstrahira etil-acetatom, a pomiješane organske slojeve osuši preko Na2SO4, te koncentrira. Pročišćavanjem kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje 10 % etil-acetatom u heksanu dobije se Međuprodukt 181 (a) (318 mg, 1,44 mmol), u prinosu od 72 %.

Korak 2 Dobivanje etilnog estera (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline 181 (b)

U miješanu otopinu Međuprodukta 181 (a) (318 mg, 1,45 mmol) u CH2Cl2 (8 ml) na –78 °C doda se 1 M BBr3 u CH2Cl2 (1,7 ml). Dobivenu smjesu se zatim zagrije do 23 °C, te miješa 30 minuta. Smjesu se ugasi zasićenom vodenom otopinom NaHCO3, te ekstrahira s CH2Cl2. Organski sloj se osuši preko bezvodnog Na2SO4, filtrira, koncentrira, te podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje 15 % etil-acetatom u heksanu kako bi se dobilo Međuprodukt 181(b) u obliku bezbojnog ulja (75 mg, 0,364 mmol), u prinosu od 25 %.

Korak 3 Dobivanje (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline 181(c)

U miješanu otopinu Međuprodukta 181(b) (75 mg, 0,36 mmol) u tetrahidrofuranu (2,5 ml) doda se 1 M vodena otopina LiOH (2,5 ml). Dobivenu smjesu miješa se 12 sati na 23 °C. Smjesu se zatim s 1 M HCl zakiseli do pH 1, te ekstrahira etil-acetatom. Organski sloj se zatim ispere slanom vodom, te koncentrira kako bi se dobilo Međuprodukt 181(c) (63 mg, 0,35 mmol), u prinosu od 97 %, kojeg se prenese bez daljnjeg pročišćavanja.

Korak 4 Dobivanje naslovnog spoja: (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid

(1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (66 mg, 0,278 mmol), Međuprodukta 181(c) (62 mg, 0,348 mmol), trietilamina (0,073 ml, 0,52 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (159 mg, 0,42 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 2 % metanolom u CH2Cl2), također na analogni način, dobije se naslovni spoj (20 mg, 0,056 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 16 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 9,26 (br s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,65-7,67 (m, 2H), 7,58 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,00 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,70 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 2,33 (m, 1H), 1,98 (m, 1H), 1,43 (m, 1H), 1,24 (m, 1H).

LCMS:[M + H]+ 361,3.

Primjer 182

(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil) ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 182 iz naslovnog spoja u Primjeru 7 (35 mg, 0,127 mmol), Međuprodukt 181(c) u Primjeru 181 (66 mg, 0,372 mmol), trietilamina (0,062 ml, 0,45 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (156 mg, 0,41 mmol) u N,N-dimetilformamidu (3 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 2 % metanolom u CH2Cl2), također na analogni način, dobije se naslovni spoj (32 mg, 0,073 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 20 %.

1H-NMR (d4-metanol): � 8,04 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,91 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 6,62 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 2,31 (m, 1H), 1,87 (m, 1H), 1,43 (m, 1H), 1,24 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 437,4.

Primjer 183

tert-butilni ester (2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)karbaminske kiseline

[image]

U otopinu naslovnog spoja u Primjeru 164 (0,65 g, 1,99 mmol) u 1:10 smjesi N,N-dimetilformamid/metanol (11 ml) doda se paladij (10 % na aktiviranom ugljiku) (0,23 g, 0,198 mmol). Reakcijsku smjesu se propuše s H2, te miješa 5 sati na sobnoj temperaturi u atmosferi H2 (101,3 kPa (1 atm)). Paladij se otfiltrira, a hlapive komponente ukloni u vakuumu. Dobiveni ostatak otopi se u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac od silikagela, te eluira 1,2:1 smjesom diklormetan/etil-acetat kako bi se dobilo naslovni spoj (0,45 g, 1,37 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 69 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,54 (s, 1H), 10,05 (s, 1H), 9,37 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 2,80 (dd, 2H, J = 7,35, 7,54 Hz), 1,48 (s, 9H), 1,23 (t, 3H, J = 7,54 Hz).

LCMS: [M + H]+ 329,5, [M + Na]+ 351,5; [M – H]– 327,4.

Primjer 184

tert-butilni ester 4-(8-tert-butoksikarbonilamino-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridin-1-karboksilne kiseline

[image]

U atmosferi argona se u smjesu Međuprodukta 147(d) u Primjeru 147 (100 mg, 0,265 mmol), tert-butilnog estera 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridin-1-karboksilne kiseline (122 mg, 0,395 mmol) i [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]diklorpaladija(II) (10,8 mg, 0,013 mmol) u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (5 ml) doda 2,0 M vodena otopina Na2CO3 (0,66 ml). Smjesu se grije 16 sati na 80 °C. Reakcijsku smjesu filtrira se kroz tanak sloj diatomejske zemlje, a hlapive komponente ukloni u vakuumu. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom etil-acetat/heksan) dobije se naslovni spoj (120 mg, 0,249 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 94 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,62 (s, 1H), 10,22 (s, 1H), 9,46 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,65 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,49 (s, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,06 (s, 2H), 3,56 (t, 2H, J = 5,65, 4,90 Hz), 3,31 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 1,49 (s, 9H), 1,44 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 482,5, [M + Na]+ 504,5; [M – H]– 480,5.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C25H32N5O5, 482,2403, opaženo 482,2417.

tert-butilni ester 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridin-1-karboksilne kiseline kao polazni materijal dobije se kao u P.R. Eastwood: Tetrahedron Letters, 41 (19), 3705-3708, (2000.) iz 1-tert-butoksikarbonil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-ilnog estera trifluormetansulfonske kiseline, kojeg se pak dobije postupkom opisanim u J.C. Barrow i suradnici: J. Med. Chem., 43 (14), 2703-2718, (2000.).

Primjer 185

8-amino-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

[image]

Dobivanje primjera 185 iz naslovnog spoja u Primjeru 184 (20 mg, 0,042 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (0,1 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (14,7 mg, 0,042 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 99 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,20 (brs, 1H), 10,46 (s, 1H), 9,14 (s, 3H), 7,57 (s, 1H), 7,36 (s, 2H), 6,22 (s, 1H), 3,83 (s, 2H), 3,36 (s, 2H), 2,74 (s, 2H).

LCMS: [M + Na]+ 304,3; [M – H]– 280,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C15H16N5O, 282,1355, opaženo 282,1349.

Primjer 186

(2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje 8-amino-2-etil-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-ona (hidrokloridna sol) 186(a)

Dobivanje međuprodukta 186(a) iz naslovnog spoja u Primjeru 183 (120 mg, 0,366 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (0,92 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije Međuprodukt 186(a) (95,5 mg, 0,366 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 99 %.

LCMS: [M + H]+ 229,1.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)

amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta186(a) (95,5 mg, 0,366 mmol), (1R,2R)-2- fenilciklopropan karboksilne kiseline (65,0 mg, 0,401 mmol), trietilamina (0,510 ml, 3,66 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (210 mg, 0,552 mmol) u N,N-dimetilformamidu (4,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Hlapive komponente ukloni se u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac od silikagela, te eluira 1,2:1 smjesom diklormetan/etil-acetat kako bi se dobilo naslovni spoj (80 mg, 0,215 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 59 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,63 (s, 1H), 10,31 (s, 1H), 10,09 (s, 1H), 8,00 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,52 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,45 (s, 1H), 7,34-7,24 (m, 2H), 7,24-7,13 (m, 3H), 2,81 (q, 2H, J = 7,54 Hz), 2,41-2,31 (m, 1H), 2,11-2,00 (m, 1H), 1,53-1,43 (m, 1H), 1,40-1,29 (m, 1H), 1,23 (t, 3H, J = 7,54 Hz).

LCMS: [M + H]+ 373,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C22H21N4O2, 371,1665, opaženo 373,1672.

Primjer 187

tert-butilni ester (2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)karbaminske kiseline

[image]

N-klorsukcinimid (0,47 g, 3,52 mmol) doda se u otopinu Međuprodukta 147(c) u Primjeru 147 (1,00 g, 3,33 mmol) u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (10 ml) i bezvodnom kloroformu (6,5 ml). Reakcijsku smjesu grije se 3 sata na 50 °C, a zatim se hlapive komponente ukloni u vakuumu. Dobiveni ostatak otopi se u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac od silikagela, te eluira 23:2:50 smjesom diklormetan/metanol/etil-acetat kako bi se dobilo naslovni spoj (1 g, 2,99 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 90 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,52 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 9,51 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 1,47 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 335,1, [M + Na]+ 357,0; [M – H]– 333,0.

Primjer 188

(2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-3-il ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 188 iz Međuprodukta 186(a) u Primjeru 186 (90 mg, 0,341 mmol), sirove (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline (vidjeti Primjer 125 za procijenjenu čistoću u dobivanju od približno 75 %) (79,5 mg, približno 0,341 mmol), trietilamina (0,237 ml, 1,73 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (194 mg, 0,510 mmol) u N,N-dimetilformamidu (4,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Hlapive komponente ukloni se u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 50:3 smjesom diklormetan/metanol kako bi se dobilo naslovni spoj (75 mg, 0,201 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 59 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,65 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 10,11 (s, 1H), 8,51 (d, 1H, J = 1,88 Hz), 8,42 (dd, 1H, J = 1,32, 1,32 Hz), 8,01 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,57 (dt, 1H, J = 7,91, 1,88 Hz), 7,53 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,47 (s, 1H), 7,33 (dd, 1H, J = 4,90, 4,71Hz), 2,82 (q, 2H, J = 7,54 Hz), 2,47-2,38 (m, 1H), 2,17-2,08 (m, 1H), 1,58-1,49 (m, 1H), 1,49-1,39 (m, 1H), 1,24 (t, 3H, J = 7,54 Hz).

LCMS: [M + H]+ 374,2, [M + Na]+ 396,0; [M – H]– 372,0.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C21H20N5O2, 374,1617, opaženo 374,1620.

Primjer 189

(R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (R)-[cikloheksil-(2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-ilkarbamoil)metil]karbaminske kiseline 189(a)

Dobivanje međuprodukta 189(a) iz Međuprodukta 186(a) u Primjeru 186 (90 mg, 0,341 mmol), (R)-tert-butoksikarbonilaminocikloheksiloctene kiseline (88 mg, 0,342 mmol), trietilamina (0,237 ml, 1,73 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (194 mg, 0,510 mmol) u N,N-dimetilformamidu (4,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Hlapive komponente ukloni se u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 1,2:1 smjesom diklormetan:etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 189(a) (146 mg, 0,313 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 91 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,64 (s, 1H), 10,12 (s, 1H), 10,02 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 6,87 (d, 1H, J = 7,72 Hz), 3,92 (t, 1H, J = 8,48 Hz), 2,82 (q, 2H, J = 7,54 Hz), 1,78-1,46 (m, 6H), 1,38 (s, 9H), 1,24 (t, 3H, J = 7,54 Hz), 1,19-0,94 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 468,2, [M + Na]+ 490,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino [4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 189(a) (136 mg, 0,291 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (1,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogni način, dobije naslovni spoj (75 mg, 0,186 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 64 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,81 (s, 1H), 10,66 (s, 1H), 10,19 (s, 1H), 8,42-8,20 (m, 3H), 7,98 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 3,82-3,66 (m, 1H), 2,84 (q, 2H, J = 7,54 Hz), 1,94-1,53 (m, 6H), 1,30- 0,98 (m, 8H).

LCMS: [M + H]+ 368,1, [M + Na]+ 390,2; [M – H]– 366,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C20H26N5O2, 368,2087, opaženo 368,2084.

Primjer 190

(2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje 8-amino-2-klor-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-ona (hidrokloridna sol) 190(a)

Dobivanje međuprodukta 190(a) iz naslovni spoj u Primjeru 187 (0,83 g, 2,48 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (6,2 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogni način, dobije Međuprodukt 190(a) (0,66 g, 2,44 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 98 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,87 (s, 1H), 10,57 (s, 1H), 7,38 (s, 2H), 7,27 (s, 1H).

LCMS: [M – H]– 233,1.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

Međuprodukt 190(a) (120 mg, 0,443 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropankarboksilnu kiselinu (86,0 mg, 0,531 mmol), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorid (102 mg, 0,534 mmol) i 4-dimetilaminopiridin (65 mg, 0,533 mmol) miješa se u N,N-dimetilformamidu (7,0 ml) 16 sati na sobnoj temperaturi, zatim se hlapive komponente ukloni u vakuumu. Dobiveni ostatak otopi se u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 1,2:1 smjesom diklormetan:etil-acetat kako bi se dobilo naslovni spoj (75 mg, 2,99 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 45 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,65 (s, 1H), 10,46 (s, 2H), 8,09 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,34- 7,25 (m, 2H), 7,25-7,12 (m, 3H), 2,44-2,30 (m, 1H), 2,13-2,01 (m, 1H), 1,57-1,44 (m, 1H), 1,44- 1,31 (m, 1H).

LCMS: [M – H]– 377,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C20H16N4O2Cl, 379,0962, opaženo 379,0941.

Primjer 191

(2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-3-il ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 191 iz Međuprodukta 190(a) u Primjeru 190 (120 mg, 0,443 mmol), sirove 2-piridin-3-il ciklopropan karboksilne kiseline (procijenjena čistoća od približno 75 %) (124 mg, približno 0,532 mmol), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorida (102 mg, 0,534 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (65 mg, 0,533 mmol) u N,N-dimetilformamidu (7,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 190, Korak 2. Kada se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 50:3 smjesom diklormetan/metanol kako bi se dobilo naslovni spoj (80 mg, 0,210 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 48 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,65 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,42 (d, 1H, J = 3,20 Hz), 8,09 (d, 1H, J = 1,13 Hz), 7,63 (d, 1H, J = 1,32 Hz), 7,57 (d, 1H, J = 7,91Hz), 7,40-7,28 (m, 2H), 2,47-2,37 (m, 1H), 2,19-2,06 (m, 1H), 1,60-1,50 (m, 1H), 1,50-1,40 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 380,0, [M + Na]+ 402,1; [M – H]– 378,0.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C19H15N5O2Cl, 380,0914, opaženo 380,0922.

Primjer 192

N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-N'-(fenilmetil)urea

[image]

Naslovnom spoju u Primjeru 2 (45 mg, 0,19 mmol) i N,N-disukcinimidil-karbonatu (49 mg, 0,19 mmol) doda se N,N-dimetilformamid (0,5ml) i trietilamin (0,084 ml, 0,60 mmol). Nakon 3-5 minuta doda se benzilamin (0,046 ml, 0,20 mmol), a reakcijsku smjesu miješa približno 1 sat. Doda se smjesa metilen-klorid/metanol (4:1), a dobivene krutine ukloni trituriranjem. Triturat se prebaci na čep od silikagela, te otpari. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira smjesom heksan/aceton (1:1), a najčišće frakcije se prikupi zajedno. Nakon uklanjanja otapala naslovni spoj (16 mg, 0,048 mmol) se dobije u obliku smeđeg praha, u prinosu od 25 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,61 (s, 1H, izmjene), 10,19 (s, 1H, izmjene), 8,75 (s, 1H, izmjene), 7,93 (s, 1H), 7,49 (m, 1H), 7,40-7,30 (m, 7H), 6,55 (m, 1H, izmjene), 4,31 (d, 2H, J = 5,84 Hz).

LCMS: [M + H]+ 334,2, [M + Na]+ 356,3.

Primjer 193

(2R)-3-(4-hidroksifenil)-2-(metilamino)-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 193 iz naslovni spoj u Primjeru 156 (121 mg, 0,25 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogni način, dobije naslovni spoj (74 mg, 0,18 mmol) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 72 %.

1H-NMR (d6-DMSO): glavna komponenta/konformer: � 11,89 (s, 1H, izmjene), 10,73 (s, 1H, izmjene), 10,31 (s, 1H, izmjene), 9,36 (brs, 2H, izmjene), 9,11 (brs, 1H, izmjene), 7,99 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,06 (d, 2H, J = 8,48 Hz), 6,69 (d, 2H, J = 8,48 Hz), 4,11 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 3,08 (m, 1H), 2,55 (s, 3H, djelomično zasjenjen).

LCMS: [M + H]+ 378,0, [M + Na]+ 400,1.

Primjer 194

(2R)-2-amino-3-(4-fluorfenil)-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propanamid-hidroklorid

[image]

Dobivanje primjera 194 iz naslovni spoj u Primjeru 157 (48 mg, 0,10 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (10 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem, također na analogni način dobije se naslovni spoj (34 mg, 0,08 mmol) u obliku narančasto-žutog praha, u prinosu od 80 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,88 (s, 1H, izmjene), 10,72 (s, 1H, izmjene), 10,32 (s, 1H, izmjene), 8,37 (br s, 4H, izmjene), 8,04 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,38-7,29 (m, 2H), 7,22-7,14 (m, 2H), 4,19 (m, 1H), 3,26-3,03 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 366,0, [M + Na]+ 388,1.

Primjer 195

N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-iloksi) acetamid

[image]

Na način analogan onom u Primjeru 19, u miješanu suspenziju 8-amino-1,5-dihidro-6H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-6-on-hidroklorida u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (9 ml) doda se bromoctena kiselina (168 mg. 1,2 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (553 mg, 1,4 mmol) i trietilamin. Reakcijsku smjesu miješa se 16 sati na sobnoj temperaturi. Hlapive komponente se otpari, te se ostatku doda voda. Istaložene narančaste krutine prikupi se filtriranjem, te ispere vodom i etil-acetatom. Nakon sušenja naslovni spoj (158 mg) se dobije u obliku narančastog praha, u prinosu od 35 %.

1H-NMR (DMSO-d6): � 5,28 (1H, s), 7,47 (1H, s), 7,58 (3H, m), 8,09 (1H, d, J = 1,77 Hz), 8,63 (1H, dd, J = 8,59 Hz), 8,83 (1H, dd, J = 4,55 Hz), 10,27 (1H, s), 10,52 (1H, s), 11,77 (1H, s).

LCMS: [M + H]+ 377.

Primjer 196

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-metoksifenil) ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje etilnog estera (1,2-trans)-2-(3-metoksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline 196(a)

Dobivanje međuprodukta 196(a) iz NaH (1,04 g, 26 mmol), trimetilsulfoksonijevog jodida (5,72 g, 26 mmol) i etilnog estera 3-(metoksifenil)akrilne kiseline (4,12 g, 20 mmol) u DMSO-u (30 ml) provodi se analogno kao u Koraku 2 u Primjeru 113 kako bi se dobilo Međuprodukt 196(a) (1,89 g, 8,6 mmol), u prinosu od 43 %.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6-]indol-8-il)amid

(1,2-trans)-2-(3-metoksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja provodi se analogno kao u Koraku 3 u Primjeru 172, s tim što se upotrebljava Međuprodukt 196(a) umjesto Međuprodukta 172(b). Naslovni spoj dobije se u prinosu od 9 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,85 (d, 1H, J = 2,26 Hz), 10,37 (s, 1H), 10,23 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,57 (dd, 1H, J = 3,20, 1,51 Hz), 7,46 (s, 2H), 7,20 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,77-6,74 (m, 3H), 3,75 (s, 3H), 2,36 (m, 1H), 2,08 (m, 1H), 1,48 (m, 1H), 1,38 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 375,1.

Primjer 197

4-acetilamino-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid

[image]

Dobivanje primjera 197 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (124 mg, 0,525 mmol), 4-acetilaminobenzojeve kiseline (113 mg, 0,631 mmol), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorida (120 mg, 0,628 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (77 mg, 0,631 mmol) u N,N-dimetilformamidu (7,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 190, Korak 2. Kad se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se otpari, te se doda metanol. Smjesu se filtrira kako bi se prikupilo krutine, koje se zatim ispere metanolom, diklormetanom i dietil-eterom. Nakon sušenja dobije se naslovni spoj (32 mg, 0,0886 mmol) u obliku žutog praha, u 17 prinosu od %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,79 (d, 1H, J = 2,64 Hz), 10,25 (s, 1H), 10,23 (s, 2H), 8,27 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,96 (d, 2H, J = 8,67 Hz), 7,85 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,70 (d, 2H, J = 8,67 Hz), 7,58 (d, 1H, J = 2,64 Hz), 7,48 (s, 1H), 2,09 (s, 3H).

LCMS: [M – H]– 360,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C19H16N5O3, 362,1253, opaženo 362,1280.

Primjer 198

(R)-2-amino-N-(2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-cikloheksilacetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera [(2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il karbamoil)cikloheksilmetil]karbaminske kiseline 198(a)

Dobivanje međuprodukta 198(a) iz Međuprodukta 190(a) u Primjeru 190 (100 mg, 0,369 mmol), (R)-tert-butoksikarbonilaminocikloheksiloctene kiseline (114 mg, 0,443 mmol), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorida (85 mg, 0,445 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (54 mg, 0,443 mmol) u N,N-dimetilformamidu (7,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 190, Korak 2. Kad se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 1,2:1 smjesom diklormetan/etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 198(a) (80 mg, 0,169 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 46 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,64 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 10,16 (s, 1H), 8,06 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,66 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,36 (s, 1H), 6,91 (d, 1H, J = 9,04 Hz), 3,92 (dd, 1H, J = 8,29, 7,91 Hz), 1,78-1,46 (m, 6H), 1,38 (s, 9H), 1,21-0,92 (m, 5H).

LCMS: [M – H]– 472,1.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (R)-2-amino-N-(2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)-2-cikloheksilacetamid (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 198(a) (75 mg, 0,159 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (0,8 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (65 mg, 0,159 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 99 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,81 (s, 1H), 10,77 (s, 1H), 10,53 (s, 1H), 8,30 (brs, 3H), 8,03 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,39 (s, 1H), 3,73 (m, 1H), 1,93-1,55 (m, 6H), 1,27-1,01 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 374,0; [M – H]– 372,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C18H21N5O2Cl, 374,1384, opaženo 374,1369.

Primjer 199

2-(3,4-dihidro-1H-izokinolin-2-il)-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Korak 1 Dobivanje etilnog estera (3,4-dihidro-1H-izokinolin-2-il)octene kiseline 199(a)

U otopinu 1,2,3,4-tetrahidroizokinolina (2,664 g, 20 mmol) i etil-bromacetata (3,647 g, 22 mmol) u N,N-dimetilformamidu (23 ml) doda se Cs2CO3 (7,168 g, 22 mmol) u atmosferi N2. Smjesu se miješa 4 sata na sobnoj temperaturi. Otapalo se ukloni pod sniženim tlakom, a preostali ostatak podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje smjesom etil-acetat/heksani (33:66) kako bi se dobilo Međuprodukt 199(a) (3,39 g, 15,5 mmol) u obliku žutog ulja, u prinosu od 77 %.

1H-NMR (CDCl3): � 7,13-7,09 (m, 3H), 6,99 (t, 1H), 4,22 (q, 2H), 3,84 (s, 2H), 3,44 (s, 2H), 2,94 (s, 4H), 1,29 (t, 3H).

LCMS: [M + H]+ 220,3.

Korak 2 Dobivanje (3,4-dihidro-1H-izokinolin-2-il)octene kiseline 199(b)

U suspenziju Međuprodukta 199(a) (1,643 g, 7,5 mmol) u metanolu (20 ml) doda se 2,5 N NaOH (7,8 ml). Otopinu reakcijske smjese grije se na 48 °C, te miješa preko noći. Uz hlađenje, pH se dodavanjem 1 M HCl podesi do 8. Hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobivenu smjesu suspendira u metanolu. Nakon filtriranja kako bi se uklonilo netopive krutine filtrat se otpari kako bi se dobilo Međuprodukt 199(b) (1,4 g, 7,3 mmol) u obliku bijele pjene, u prinosu od 98 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 7,13-7,09 (m, 3H), 7,02 (t, 1H), 3,76 (s, 2H), 3,27 (s, 2H), 2,88-2,82 (m, 4H).

LCMS: [M + H]+ 192,2.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: 2-(3,4-dihidro-1H-izokinolin-2-il)-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

Dobivanje naslovnog spoja iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (185 mg, 0,79 mmol), Međuprodukta 199(b) (150 mg, 0,79 mmol), trietilamina (0,274 ml, 1,98 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (330 mg, 0,879 mmol) i N,N-dimetilformamida (3 ml) provodi se analogno kao u 11. Nakon otparavanja hlapivih komponenti dobiveni ostatak se triturira s malo N,N-dimetilformamida i vode kako bi se dobilo naslovni spoj (123,5 mg, 0,331 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 42 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,73 (s, 1H), 10,22 (s, 1H), 9,97 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,12-7,04 (m, 4H), 3,72 (s, 2H), 2,88-2,80 (m, 6H).

LCMS: [M + H]+ 374,4.

Primjer 200

2-(1,3-dihidroizoindol-2-il)-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Korak 1 Dobivanje etilnog estera (1,3-dihidroizoindol-2-il)octene kiseline 200(a)

U otopinu izoindolina (1,788 g, 15 mmol) i etil-bromacetata (2,756 g, 16,5 mmol) u N,N-dimetilformamidu (20 ml) doda se Cs2CO3 (5,376 g, 16,5 mmol) u atmosferi N2. Smjesu se miješa 4 sata na sobnoj temperaturi. Otapalo se ukloni pod sniženim tlakom, a dobivenu smjesu podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje 33:66 smjesom etil-acetat:heksan kako bi se dobilo Međuprodukt 200(a) (1,14 g, 5,56 mmol) u obliku žutog ulja, u prinosu od 37 %.

1H-NMR (CDCl3): � 7,20 (s, 4H), 4,22 (q, 6H), 3,66 (s, 2H), 1,29 (t, 3H).

LCMS: [M + H]+ 206,3.

Korak 2 Dobivanje (1,3-dihidroizoindol-2-il)octene kiseline 200(b)

U suspenziju Međuprodukta 200(a) (1,14 g, 5,56 mmol) u metanolu (20 ml) doda se 2,5 N NaOH (5,78 ml). Otopinu reakcijske smjese grije se na 48 °C, te miješa preko noći. Uz hlađenje, pH se dodavanjem 1 M HCl podesi do 8. Hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobivenu smjesu suspendira u metanolu. Nakon filtriranja kako bi se uklonilo netopive krutine, filtrat se otpari kako bi se dobilo Međuprodukt 200(b) (531 mg, 3 mmol) u obliku blijede krutine, u prinosu od 54 %.

LCMS: [M + H]+ 178,2.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: 2-(1,3-dihidroizoindol-2-il)-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino [4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

Dobivanje naslovnog spoja iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (118 mg, 0,5 mmol), Međuprodukt 200(b) (88,5 mg, 0,5 mmol), trietilamina (0,274 ml, 1,98 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (209 mg, 0,55 mmol) i N,N-dimetilformamida (5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Nakon otparavanja hlapivih komponenti dobiveni ostatak se triturira s malo N,N-dimetilformamida i vode kako bi se dobilo naslovni spoj (121 mg, 0,337 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 67 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,73 (s, 1H), 10,21 (s, 1H), 10,02 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,22 (d, 4H), 4,07 (s, 4H), 3,56 (s, 2H).

LCMS: [M + H]+ 360,4.

Primjer 201

tert-butilni ester (2-morfolin-4-il-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)karbaminske kiseline

[image]

Trietilamin (0,039 ml, 0,28 mmol), naslovni spoj u Primjeru 187 (46 mg, 0,14 mmol), morfolin (96 mg, 1,1 mmol) i n-butanol (5 ml) miješa se preko noći u tikvici s kondenzatorom na 120 °C. Smjesu se ostavi stajati na sobnoj temperaturi još 2 dana. Hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobivenu smjesu podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje 95:5 smjesom diklormetan/metanol kako bi se dobilo naslovni spoj (12,5 mg, 0,032 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 23 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 9,53 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,06 (s, 2H), 3,74 (s, 8H), 1,48 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 386,4.

Primjer 202

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-bromfenil) ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje etilnog estera (1,2-trans)-2-(3-bromfenil)ciklopropan karboksilne kiseline 202(a)

U smjesu NaH (186 mg, 4,65 mmol) i trimetilsulfoksonijevog jodida (1,02 g, 4,65 mmol) doda se DMSO (5 ml). Nakon minuta 30 miješanja ukapa se otopina etilnog estera trans-3-(bromfenil)akrilne kiseline (933 mg, 3,57 mmol) u DMSO-u (2 ml). Nakon miješanja preko noći smjesu se razdijeli između etil-acetata i vode. Vodeni sloj ekstrahira se etil-acetatom. Pomiješane organske slojeve osuši se preko Na2SO4, filtrira, te Koncentrira. Ostatak se podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje smjesom 10 % etil-acetat/heksanom, kako bi se dobilo Međuprodukt 202(a) u obliku bezbojnog ulja (408 mg, 1,52 mmol), u prinosu od 43 %.

(1,2-trans)-2-(3-bromfenil)ciklopropan karboksilne kiseline

U miješanu otopinu Međuprodukta 202(a) (505 mg, 2,25 mmol) u MeOH (10 ml) doda se vodena otopina 10 M LiOH (10 ml). Smjesu se miješa 12 sati na 23 °C, zakiseli s 1 M HCl do pH 1, te ekstrahira etil-acetatom. Pomiješane organske slojeve se zatim ispere slanom vodom, te koncentrira kako bi se dobilo sirovu (2,3-trans)-3-(3'-bromfenil)ciklopropankarboksilnu kiselinu (632 mg), koju se pomiješa s naslovnim spojem u Primjeru 2 (111 mg, 0,49 mmol), trietilaminom (0,273 ml, 1,96 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevim heksafluorofosfatom (278 mg, 0,73 mmol) u N,N-dimetilformamidu (4 ml), na način analogan onom u Primjeru 11. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3, te kromatografijom na silikagelu dobije se naslovni spoj (100 mg, 0,24 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 11 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,85 (d, 1H, J = 2,26 Hz), 10,50 (s, 1H), 10,35 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,67 (d, 1H, J = 4,0 Hz), 7,58 (s, 1H), 7,53-7,51 (m, 2H), 7,40-7,33 (m, 2H), 2,53 (m, 1H), 2,23 (m, 1H), 1,62 (m, 1H), 1,54 (m, 1H).

Primjer 203

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje etilni ester 2-(3-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline 203(a)

U miješanu otopinu Međuprodukta 196(a) u Primjeru 196 (1,56 g, 7,12 mmol) u CH2Cl2 na –78 °C doda se 1,0 M BBr3 u CH2Cl2 (8,56 ml, 8,56 mmol). Smjesu se grije do sobne temperature, te miješa 1 sat. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3, te kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 203(a) u obliku blijedosmeđe krutine (795 mg, 3,86 mmol), u prinosu od 54 %.

(1,2-trans)-2-(3-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline

U otopinu Međuprodukta 203(a) (271 mg, 1,32 mmol) u tetrahidrofuranu (2 ml) se doda vodena otopina 1 M LiOH (6 ml, 6 mmol). Smjesu se miješa preko noći. Nakon zakiseljavanja do pH 2 smjesu se ekstrahira etil-acetatom. Koncentriranjem organskog sloja dobije se sirova 3-(3-hidroksifenil)ciklopropankarboksilna kiselina (235 mg), gdje se dio (155 mg, 0,57 mmol) pomiješa s naslovnim spojem u Primjeru 2 (137 mg, 0,58 mmol), trietilaminom (0,24 ml, 1,72 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevim heksafluorofosfatom (331 mg, 0,87 mmol) u N,N-dimetilformamidu (3 ml), na način analogan onom u Primjeru 11. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3, te kromatografijom na silikagelu dobije se naslovni spoj (10 mg, 0,028 mmol) u obliku smećkasto-žute krutine, u prinosu od 5 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,35 (s, 1H), 10,27 (s, 1H), 9,35 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,67 (dd, 1H, J = 3,20, 1,51 Hz), 7,55 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,15 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,77-6,74 (m, 3H), 2,32 (m, 1H), 2,09 (m, 1H), 1,45 (m, 1H), 1,38 (m, 1H).

LCMS: [M – H]+ 359,1

Primjer 204

2-(3,4-dihidroizokinolin-2(1H)-il)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Na način analogan onom u Primjeru 11 u miješanu otopinu 8-amino-1,5-dihidro-6H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-6-ona u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (6 ml) doda se 3,4-dihidroizokinolin-2(1H)-iloctena kiselina (62 mg, 0,33 mmol), a zatim trietilamin (0,14 ml, 0,98 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (372 mg, 0,98 mmol). Reakcijsku smjesu miješa se na sobnoj temperaturi 17 sati. Nakon koncentriranja doda se voda, a istaloženu krutinu prikupi filtriranjem. Preparativnim HPLC-om dobije se naslovni spoj (50 mg) u obliku žutog praha, u prinosu od 34 %.

1H-NMR (metanol-d4): � 3,25 (2H, m), 3,72 (2H, bs), 4,27 (2H, s), 4,58 (2H, s), 7,22 (1H, d, J = 7,58 Hz), 7,32 (3H, m), 7,52 (4H, m), 7,63 (3H, m), 8,13 (1H, d, J = 1,52 Hz).

LCMS: [M + H]+ 450,1.

Primjer 205

(2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Naslovni spoj u Primjeru 191 (20 mg, 0,053 mmol) prevede se u HCl sol u bezvodnom CH2Cl2 (2 ml) s 4,0 M HCl u dioksanu (0,026 ml). Smjesu se miješa 1 sat na sobnoj temperaturi. Krutinu se prikupi filtriranjem, te ispere s CH2Cl2 i dietil-eterom. Nakon sušenja dobije se naslovni spoj (20,4 mg, 0,049 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 93 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,70 (s, 1H), 10,59 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,72 (d, 1H, J = 5,84 Hz), 8,25 (d, 1H, J = 8,29 Hz), 8,07 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,91 (dd, 1H, J = 5,27, 5,27 Hz), 7,63 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,35 (s, 1H), 2,75-2,59 (m, 1H), 2,33-2,21 (m, 1H), 1,67-1,56 (m, 2H).

Primjer 206

(2-brom-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje 8-amino-2-brom-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-ona (hidrokloridna sol) 206(a)

Dobivanje međuprodukta 206(a) iz Međuprodukta 147(d) u Primjeru 147 (2 g, 5,29 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (26,4 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije Međuprodukt 206(a) (1,59 g, 5,04 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 96 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 13,13 (s, 1H), 10,67 (s, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,35 (s, 1H).

LCMS: [M + H]+ 279,0, 281,1, [M + Na]+ 401,0, 403,0; [M – H]– 277,0, 279,0.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (2-brom-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid

(1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 206(a) (120 mg, 0,380 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (74,0 mg, 0,457 mmol), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorida (88 mg, 0,461 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (56 mg, 0,459 mmol) u N,N-dimetilformamidu (15,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 190, Korak 2. Kad se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 1,2:1 smjesom diklormetan/etil-acetat kako bi se dobilo naslovni spoj (52,4 mg, 0,124 mmol) u obliku žute krutine u, prinosu od 33 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,59 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 8,08 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,60 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,33-7,24 (m, 3H), 7,24-7,13 (m, 3H), 2,42-2,32 (m, 1H), 2,11-2,00 (m, 1H), 1,54-1,42 (m, 1H), 1,42-1,30 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 423,0, 425,0, [M + Na]+ 445,0, 447,0; [M – H]– 421,0, 423,0.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C20H16N4O2Br, 423,0457, opaženo 423,0471.

Primjer 207

N-metil-N-(2-metilprop-2-enil)-N'-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)urea

[image]

Na sličan način kao što je opisano u Primjeru 192 naslovni spoj u Primjeru 2 (25 mg, 0,11 mmol) i N,N-disukcinimidil-karbonat (27 mg, 0,11 mmol) miješa se zajedno u N,N-dimetilformamidu (1 ml), uz dodavanje N,N-diizopropiletilamina (0,024 ml, 0,21 mmol). Nakon 3 minute miješanja doda se N-2-dimetilprop-2-en-1-amin (0,046 ml, 0,21 mmol), čime se dobije sirovi produkt. Kationsku izmjenjivačku polistirensku hvatačku smolu (Argonaut Technologies�, MP-TsOH) doda se izravno u smjesu. Nakon 2 sata miješanja smolu se ukloni filtriranjem, te 2 × ispere N,N-dimetilformamidom (1 ml). Pomiješane N,N-dimetilformamidne otopine se zatim obradi anionskom izmjenjivačkom polistirenskom hvatačkom smolom (Argonaut Technologies�, MP-karbonat), te miješa 2 sata. Ovu smolu također se ukloni filtriranjem, te 2 × ispere N,N-dimetilformamidom (1 ml). Pomiješane N,N-dimetilformamidne otopine se zatim koncentrira u vakuumu, te podvrgne preparativnom RPHPLC-u (Peeke Scientific HI-Q, C18 s reverznom fazom, 5 uM, 100 Ĺ, 150 × 20 mm stupac), uz eluiranje 0,1 % octenom kiselinom u CH3CN i 0,1 % octenom kiselinom u H2O, pri brzini protoka os 20 ml/min, uz upotrebu gradijenta 30-70 % 0,1 % octene kiseline u CH3CN, u trajanju od 30 minuta. Frakcije koje se procjeni čistima se prikupi, a hlapive komponente ukloni u vakuumu. Nakon konačnog trituriranja etil-acetatom dobije se naslovni spoj (6 mg, 0,019 mmol) u obliku smeđeg praha, u prinosu od 18 %.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 7,90 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 4,98 (s, 1H), 4,90 (s, 1H), 3,95 (s, 2H), 3,03 (s, 3H), 1,77 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 312,2, [M + Na]+ 334,1.

Primjer 208

N-metil-N'-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-N-(fenilmetil)urea

[image]

Dobivanje primjera 208 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (48 mg, 0,20 mmol), N,N-disukcinimidil-karbonata (52 mg, 0,20 mmol), trietilamina (0,084 ml, 0,60 mmol) i N-metil-1-fenilmetanamina (0,052 ml, 0,40 mmol) u N,N-dimetilformamidu (0,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 192. Pročišćavanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (8 mg, 0,023 mmol), u obliku smeđeg praha, u prinosu od 12 %.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 7,88 (s, 1H), 7,46-7,23 (m, 8H), 4,64 (s, 2H, zasjenjen), 3,03 (s, 3H).

LCMS: [M + H]+ 348,4, [M + Na]+ 370,4.

Primjer 209

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(2'-metoksifenil) ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje etilnog estera (1,2-trans)-2-(2'-metoksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline 209(a)

Dobivanje međuprodukta 209(a) iz NaH (1,04 g, 26 mmol) i trimetilsulfoksonijev jodid (5,72 g, 26 mmol), 2-(metoksifenil)akrilne kiseline etilni ester (4,12 g, 20 mmol) u dimetilsulfoksidu (30 ml) provodi se analogno kao u Koraku 2 u Primjeru 113. Dobije se Međuprodukt 209(a) (1,89 g, 8,6 mmol) u prinosu od 43 %.

(1,2-trans)-2-(2'-metoksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja provodi se analogno kao u Koraku 3 u Primjeru 172, s tim što se upotrebljava Međuprodukt 209(a) umjesto Međuprodukta 172(b). Dobije se naslovni spoj u prinosu od 10 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,74 (d, 1H, J = 2,26 Hz), 10,35 (s, 1H), 10,24 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,57 (dd, 1H, J = 3,20, 1,51 Hz), 7,46 (s, 2H), 7,20 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,77-6,74 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 2,36 (m, 1H), 2,02 (m, 1H), 1,44 (m, 1H), 1,34 (m, 1H).

LCMS: [M – H]+ 373,1.

Primjer 210

N-cikloheksil-N-metil-N'-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)urea

[image]

Dobivanje primjera 210 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (25 mg, 0,11 mmol), N,N'-disukcinimidil-karbonata (27 mg, 0,11 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0,024 ml, 0,21 mmol) i N-cikloheksil-N-metilamina (0,028 ml, 0,021 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 207. Pročišćavanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (7 mg, 0,021 mmol) u obliku žutog praha u 19 % prinosu od.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 7,90 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 4,09 (m, 1H), 2,92 (s, 3H), 1,91-1,80 (m, 2H), 1,79-1,65 (m, 3H), 1,56-1,37 (m, 4H), 1,14 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 340,2, [M + Na]+ 362,1.

Primjer 211

N-cikloheksil-N-etil-N'-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)urea

[image]

Dobivanje primjera 211 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (25 mg, 0,11 mmol), N,N'-disukcinimidil-karbonata (27 mg, 0,11 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0,024 ml, 0,21 mmol) i N-cikloheksil-N-metilamina (0,032 ml, 0,021 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 207. Pročišćavanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (7 mg, 0,020 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 20 %.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 7,94 (s, 1H), 7,40 (s, 1H, zasjenjen), 7,30 (s, 1H, djelomično zasjenjen), 7,26 (s, 1H), 4,05 (m, 1H, djelomično zasjenjen), 3,36 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 1,90-1,74 (m,4H), 1,71 (m, 1H), 1,58-1,33 (m, 4H), 1,26 (t, 3H, J = 7,16 Hz), 1,14 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 354,2, [M + Na]+ 376,1.

Primjer 212

N,N-dietil-N'-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)urea

[image]

Dobivanje primjera 212 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (25 mg, 0,11 mmol), N,N'-disukcinimidil-karbonata (27 mg, 0,11 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0,024 ml, 0,21 mmol) i N,N-dietilamina (0,022 ml, 0,021 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 207. Pročišćavanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (5 mg, 0,016 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 15 %.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 7,91 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 3,42 (q, 4H, J = 7,16 Hz), 1,24 (t, 6H, J = 7,16 Hz).

LCMS: [M + H]+ 300,2, [M + Na]+ 322,1.

Primjer 213

N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)piperidin-1-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 213 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (25 mg, 0,11 mmol), N,N'-disukcinimidil-karbonata (27 mg, 0,11 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0,024 ml, 0,21 mmol) i piperidina (0,021 ml, 0,021 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 207. Pročišćavanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (7 mg, 0,022 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 20 %.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 7,77 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,43 (s, 1H, djelomično zasjenjen), 7,32 (s, 1H), 3,57-3,47 (m, 4H), 1,76-1,56 (m, 6H).

LCMS: [M + H]+ 312,1, [M + Na]+ 334,1.

Primjer 214

N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-(fenilmetil)piperidin-1-karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 214 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (25 mg, 0,11 mmol), N,N'-disukcinimidil-karbonata (27 mg, 0,11 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0,024 ml, 0,21 mmol) i 4-(fenilmetil)piperidina (0,037 ml, 0,021 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 207. Pročišćavanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (7 mg, 0,017 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 16 %.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 7,88 (s, 1H), 7,44-7,39 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 7,34-7,12 (m, 6H), 4,16 (d, 2H, J = 13,75 Hz), 2,91-2,78 (m, 2H), 2,62-2,57 (m, 2H), 1,80-1,69 (m, 3H), 1,36-1,14 (m,2H).

LCMS: [M + H]+ 402,2, [M + Na]+ 424,1.

Primjer 215

N-etil-N'-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-N-(fenilmetil)urea

[image]

Dobivanje primjera 215 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (25 mg, 0,11 mmol), N,N'-disukcinimidil-karbonata (27 mg, 0,11 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0,024 ml, 0,21 mmol) i N-(fenilmetil)etanamina (0,032 ml, 0,021 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 207. Pročišćavanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (7 mg, 0,019 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 18 %.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 7,94 (s, 1H), 7,46-7,21 (m, 8H, djelomično zasjenjen), 4,63 (s, 2H), 3,51-3,34 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 1,28-1,19 (m, 3H).

LCMS: [M + H]+ 362,1, [M + Na]+ 384,0.

Primjer 216

N-butil-N-metil-N'-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)urea

[image]

Dobivanje primjera 216 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (25 mg, 0,11 mmol), N,N'-disukcinimidil-karbonata (27 mg, 0,11 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0,024 ml, 0,21 mmol) i N-etil-N-propilamina (0,025 ml, 0,021 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 207. Pročišćavanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (4 mg, 0,013 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 12 %.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 7,92 (s, 1H), 7,41 (s, 1H, djelomično zasjenjen), 7,29 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 3,04 (s, 3H), 1,66-1,55 (m, 2H), 1,45-1,21 (m, 4H), 0,97 (t, 3H, J = 7,35 Hz).

LCMS: [M + H]+ 314,1, [M + Na]+ 336,2.

Primjer 217

N-metil-N'-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-N-propilurea

[image]

Dobivanje primjera 217 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (25 mg, 0,11 mmol), N,N'-disukcinimidil-karbonata (27 mg, 0,11 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0,024 ml, 0,21 mmol) i N-etil-N-propilamina (0,022 ml, 0,021 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 207. Pročišćavanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (4 mg, 0,013 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 12 %.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 7,87 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 3,05 (s, 3H), 1,72-1,58 (m, 2H), 1,37-1,21 (m, 2H), 0,96 (t, 3H, J = 7,25 Hz) LCMS: [M + H]+ 300,2, [M + Na]+ 322,1.

Primjer 218

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-[3-(2-dimetilaminoetoksi)fenil] ciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje (1,2-trans)-2-[3-(2-dimetilaminoetoksi)fenil]ciklopropan karboksilne kiseline 218(a)

U miješanu otopinu Međuprodukta 203(a) u Primjeru 203 (125 mg, 0,607 mmol), 2-dimetiletanola (81 mg, 0,91 mmol) i trifenilfosfina (239 mg, 0,91 mmol) u CH2Cl2 doda se diizopropil-azodikarboksilat (184 mg, 0,91 mmol). Smjesu se miješa 4 sata na sobnoj temperaturi, koncentrira, te podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje smjesom 20-30 % etil-acetat/heksan, kako bi se dobilo Međuprodukt 218(a) u obliku bezbojnog ulja (101 mg, 0,36 mmol), u prinosu od 60 %.

(1,2-trans)-2-[3-(2-dimetilaminoetoksi)fenil]ciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja provodi se analogno kao u Koraku 3 u Primjeru 172, s tim što se upotrebljava Međuprodukt 218(a) umjesto Međuprodukta 172(b). Naslovni spoj dobije se, u prinosu od 13 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,56 (d, 1H, J = 2,26 Hz), 10,20 (s, 1H), 10,06 (s, 1H), 7,95 (d, 1H, J = 1,88 Hz), 7,38 (dd, 1H, J = 3,20, 1,51 Hz), 7,29 (s, 1H), 7,04 (t, 1H, J = 8,0 Hz), 6,62-6,58 (m, 3H), 6,36 (s, 1H), 3,96-3,94 (m, 2H), 3,12-3,10 (m, 2H), 2,29 (m, 1H), 1,91 (m, 1H), 1,31 (m, 1H), 1,20 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 432,2.

Primjer 219

(R)-2-amino-2-cikloheksil-N-[6-okso-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il]acetamid-dihidroklorid

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (R)-4-[8-(2-tert-butoksikarbonilamino-2-cikloheksilacetilamino)

-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il]-3,6-dihidro-2H-piridin-1-karboksilne

kiseline 219(a)

Dobivanje međuprodukta 219(a) iz Međuprodukta 220(a) u Primjeru 220 (100 mg, 0,262 mmol), (R)-tert-butoksikarbonilaminocikloheksiloctene kiseline (74,3 mg, 0,289 mmol), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorida (55 mg, 0,288 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (35,2 mg, 0,288 mmol) u N,N-dimetilformamidu (6,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 190, Korak 2. Kada se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac od silikagela, te eluira 1:1 smjesom diklormetan:etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 219(a) (143 mg, 0,231 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 88 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,70 (s, 1H), 10,27 (s, 1H), 10,09 (s, 1H), 8,06 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,59 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,88 (d, 1H, J = 8,10 Hz), 6,17 (s, 1H), 4,06 (br s, 2H), 3,92 (dd, 1H, J = 8,48, 7,72 Hz), 3,55 (t, 2H, J = 5,65, 5,27 Hz), 3,32 (m, 2H, zasjenjen), 1,76-1,46 (m, 6H), 1,43 (s, 9H), 1,37 (s, 9H), 1,19-0,94 (m, 5H).

LCMS: [M – H]– 619,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (R)-2-amino-2-cikloheksil-N-[6-okso-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-5,6- dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]acetamid-dihidroklorid

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 219(a) (143 mg, 0,231 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (2,3 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (100 mg, 0,203 mmol) u obliku crvenog praha, u prinosu od 88 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,18 (s, 1H), 10,87 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 9,32 (brs, 2H), 8,35 (brs, 3H), 8,07 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,55 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 6,19 (s, 1H), 3,87-3,74 (m, 3H), 3,41-3,26 (m, 2H), 2,81-2,69 (m, 2H), 1,90-1,55 (m, 6H), 1,28-0,97 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 421,1, [M + Na]+ 443,1; [M – H]– 419,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C23H29N6O2, 421,2352, opaženo 421,2338.

Primjer 220

[6-okso-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera 4-(8-amino-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridin-1-karboksilne kiseline 220(a)

Na način analogan onom u Primjeru 184, 2,0 M vodena otopina Na2CO3 (0,66 ml) doda se u smjesu Međuprodukta 206(a) u Primjeru 206 (1 g, 3,17 mmol), tert-butilnog estera 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,2]dioksaborolan-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridin-1-karboksilne kiseline (1,18 g, 3,82 mmol) i [1,1'- bis(difenilfosfino)ferrocene]diklorpaladija(II) (0,13 g, 0,159 mmol) u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (50 ml), a reakcijsku smjesu se grije 16 sati na 80 °C. Kada se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se ukloni u vakuumu. Doda se etil-acetat (50 ml), metanol (5 ml) i H2O (500 ml), a vodeni sloj ekstrahira etil-acetatom (3 × 20 ml). Pomiješane etil-acetatne ekstrakte ispere se s H2O (2 × 50 ml) i slanom vodom (50 ml), te ostavi da se osuši preko Na2SO4. Nakon filtriranja hlapive komponente se ukloni u vakuumu, te se ostatku doda CH2Cl2. Dobivena krutinu prikupi se filtriranjem, te ispere s CH2Cl2 i dietil-eterom kako bi se dobilo Međuprodukt 220(a) (1 g, 2,62 mmol) u obliku crvene krutine, u prinosu od 82 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,15 (s, 1H), 10,04 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 6,92 (d, 1H, J = 1,88 Hz), 6,56 (d, 1H, J = 1,88 Hz), 6,05 (brs, 1H), 5,17 (s, 2H), 4,03 (s, 2H), 3,53 (t, 2H, J = 5,65, 5,27 Hz), 3,36 (m, 2H, djelomično zasjenjen), 1,42 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 382,1, [M + Na]+ 404,3; [M – H]– 380,1.

Korak 2 Dobivanje tert-butilnog estera (1R,2R)-4-{6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro- 1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}-3,6-dihidro-2H-piridin-1-karboksilne kiseline 220(b)

Dobivanje međuprodukta 220(b) iz Međuprodukta 220(a) (100 mg, 0,262 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (47,0 mg, 0,290 mmol), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorida (55 mg, 0,288 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (35,2 mg, 0,288 mmol) u N,N-dimetilformamidu (6,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 190, Korak 2. Kada se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac od silikagela, te eluira 1:1 smjesom diklormetan:etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 220(b) (130 mg, 0,248 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 94 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,71 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 8,07 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,57 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,50 (s, 1H), 7,33-7,25 (m, 2H), 7,23-7,15 (m, 3H), 6,16 (s, 1H), 4,08-4,04 (m, 2H), 3,55 (t, 2H, J = 5,65, 5,27 Hz), 3,35 (m, 2H, zasjenjen), 2,41-2,33 (m, 1H), 2,11-2,02 (m, 1H), 1,53-1,46 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 1,40-1,30 (m, 1H).

LCMS: [M – H]– 524,1.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: [6-okso-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino [4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 220(b) (130 mg, 0,248 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (1,24 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (107 mg, 0,232 mmol) u obliku crvenog praha, u prinosu od 94 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,97 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 10,33 (s, 1H), 9,31-9,10 (br s, 2H), 8,11 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,61 (d, 2H, J = 1,70 Hz), 7,53 (s, 1H), 7,34-7,24 (m, 2H), 7,24-7,12 (m, 3H), 6,17 (s, 1H), 3,87-3,72 (m, 2H), 3,40-3,25 (m, 2H), 2,80-2,66 (m, 2H), 2,42-2,31 (m, 1H), 2,15-2,04 (m, 1H), 1,55-1,42 (m, 1H), 1,42-1,29 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 426,0, [M + Na]+ 448,1; [M – H]– 424,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C25H24N5O2, 426,1930, opaženo 426,1924.

Primjer 221

Dihidroklorid [6-okso-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amida (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (1,2-trans)-4-{6-okso-8-[(2-piridin-3-ilciklopropankarbonil)amino]-5,6- dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}-3,6-dihidro-2H-piridin-1-karboksilne kiseline 221 (a)

Dobivanje međuprodukta 221 (a) iz Međuprodukta 220(a) u Primjeru 220 (100 mg, 0,262 mmol), sirove 2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline (čistića procjenjena na približno 75 %) (67,3 mg, približno 0,289 mmol), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorida (55 mg, 0,288 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (35,2 mg, 0,288 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 190, Korak 2. Kada se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac od silikagela, te eluira s 20:1 diklormetan:metanol kako bi se dobilo Međuprodukt 221 (a) (107,6 mg, 0,204 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 78 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,72 (s, 1H), 10,42 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,40 (d, 1H, J = 4,71 Hz), 8,07 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,55 (d, 1H, J = 7,91 Hz), 7,50 (s, 1H), 7,32 (dd, 1H, J = 4,71, 3,77 Hz), 6,16 (s, 1H), 4,05 (br s, 2H), 3,55 (t, 2H, J = 4,52, 4,71 Hz), 3,35 (m, 2H, zasjenjen), 2,46-2,37 (m, 1H), 2,16-2,06 (m, 1H), 1,57-1,48 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 1,48-1,38(m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 527,2; [M – H]– 525,0.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: dihidroklorid [6-okso-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-5,6-dihidro-1H- [1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amida (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 221(a) (100 mg, 0,190 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (0,95 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (95 mg, 0,190 mmol) u obliku crvenog praha, u prinosu od 99 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,05 (s, 1H), 10,66 (s, 1H), 10,34 (s, 1H), 9,29 (brs, 2H), 8,89 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 8,74 (d, 1H, J = 5,27 Hz), 8,32 (d, 1H, J = 8,48 Hz), 8,10 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,94 (dd, 1H, J = 6,03, 5,65 Hz), 7,65 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,53 (s, 1H), 6,17 (s, 1H), 3,85-3,74 (m, 2H), 3,38-3,25 (m, 2H), 2,80-2,70 (m, 2H), 2,70-2,59 (m, 1H), 2,40-2,29 (m, 1H), 1,69-1,55 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 427,1, [M + Na]+ 449,1; [M – H]– 425,0.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C24H23N6O2, 427,1882, opaženo 427,1895.

Primjer 222

(6-okso-2-piperidin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol)-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilni ester 4-(8-amino-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il) piperidin-1-karboksilne kiseline 222(a)

Na način analogan onom u Primjeru 183, paladij (10 % na aktiviranom ugljiku) (0,186 g) doda se u otopinu Međuprodukta 220(a) u Primjeru 220 (0,61 g, 1,60 mmol) u 9:1 smjesi metanol:N,N-dimetilformamid (50 ml). Reakcijsku smjesu propuše se s H2, te 6,5 sati miješa na sobnoj temperaturi u atmosferi H2 (101,3 kPa (1 atm.)). Smjesu se filtrira, a filtrat otpari. Dobiveni ostatak otopi se u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac od silikagela, te eluira 50:3 smjesom diklormetan:metanol kako bi se dobilo Međuprodukt 222(a) (0,18 g, 0,470 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 29 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,03 (s, 1H), 9,88 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,54 (s, 1H), 5,04 (br s, 2H), 4,16-3,99 (m, 3H), 2,95-2,67 (m, 2H), 1,73-1,54 (m, 4H), 1,42 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 384,1, [M + Na]+ 406,2; [M – H]– 382,1.

Korak 2 Dobivanje tert-butilnog estera (1R,2R)-4-{6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro- 1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}piperidin-1-karboksilne kiseline 222(b)

Dobivanje međuprodukta 222(b) iz Međuprodukta 222(a) (60 mg, 0,157 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (27,9 mg, 0,172 mmol), trietilamina (0,086 ml, 0,617 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (71,5 mg, 0,188 mmol) u N,N-dimetilformamidu (5,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Hlapive komponente ukloni se u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac od silikagela, te eluira 1:1 smjesom diklormetan:etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 222(b) (104 mg) u obliku žute krutine onečišćene N,N-dimetilformamidom, koju se prenese izravno u idući korak.

1H-NMR (dg-DMSO): � 11,57 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 10,12 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,55 (d, 1H, J = 1,32 Hz), 7,54 (s, 1H), 7,33-7,25 (m, 2H), 7,22-7,15 (m, 3H), 4,19-4,00 (m, 3H), 2,92-2,77 (m, 2H), 2,41-2,30 (m, 1H), 2,12-2,00 (m, 1H), 1,80-1,56 (m, 4H), 1,53-1,45 (m, 1H), 1,42 (s, 9H), 1,38-1,29 (m,1H).

LCMS: [M + H]+ 528,2, [M + Na]+ 550,1; [M – H]– 526,1.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: (6-okso-2-piperidin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 222(b) (100 mg) i 4,0 M HCl u dioksanu (1 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (65,3 mg, 0,141 mmol) u obliku žutog praha, u kombiniranom prinosu od 90 % za Korake 2 i 3.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,82 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 10,18 (s, 1H), 9,16-9,00 (m, 1H), 8,93-8,73 (m, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,58 (s, 2H), 7,34-7,23 (m, 2H), 7,23-7,09 (m, 3H), 3,46-3,26 (m, 3H), 3,10-2,90 (m, 2H), 2,41-2,29 (m, 1H), 2,15-2,03 (m, 1H), 2,03-1,85 (m, 4H), 1,53-1,40 (m, 1H), 1,40-1,27 (m,1H).

LCMS: [M + H]+ 428,1, [M + Na]+ 450,2; [M – H]– 426,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C25H26N5O2, 428,2087, opaženo 428,2086.

Primjer 223

(R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-piperidin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) acetamid-dihidroklorid

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (R)-4-[8-(2-tert-butoksikarbonilamino-2-cikloheksilacetilamino)-6-okso- 5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il]piperidin-1-karboksilne kiseline 223(a)

Dobivanje međuprodukta 223(a) iz Međuprodukta 222(a) u Primjeru 222 (60 mg, 0,157 mmol), (R)-tert-butoksikarbonilaminocikloheksiloctene kiseline (44,3 mg, 0,172 mmol), trietilamina (0,086 ml, 0,617 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (71,5 mg, 0,188 mmol) u N,N-dimetilformamidu (8,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Hlapive komponente ukloni se u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac od silikagela, te eluira 1:1 smjesom diklormetan:etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 223(a) (107 mg) u obliku žute krutine, onečišćene N,N-dimetilformamidom, koju se prebaci izravno u idući korak.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,57 (s, 1H), 10,14 (s, 1H), 10,03 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 6,85 (d, 1H, J = 8,48 Hz), 4,15-3,99 (m, 2H), 3,99-3,85 (m, 1H), 2,92-2,76 (m, 2H), 1,78-1,45 (m, 10H), 1,42 (s, 9H), 1,37 (s, 9H), 1,22-0,97 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 623,2, [M + Na]+ 645,2; [M – H]– 621,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-piperidin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid-dihidroklorid

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 223(a) (100 mg, 0,161 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (1,6 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (63,2 mg, 0,128 mmol) u obliku žutog praha, u kombiniranom prinosu od 82 % za Korake 1 i 2.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,98 (s, 1H), 10,82 (s, 1H), 10,24 (s, 1H), 9,21-9,06 (m, 1H), 9,06-8,87 (m, 1H), 8,35 (s, 3H), 8,04 (s, 1H), 7,64 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,60(s, 1H), 3,47-3,28 (m, 4H), 3,10-3,29 (m, 2H), 2,10-1,86 (m, 4H), 1,86-1,52 (m, 6H), 1,28-0,94 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 423,2, [M + Na]+ 445,1; [M – H]– 421,3.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C23H31N6O2, 423,2508, opaženo 423,2492.

Primjer 224

Dihidroklorid (6-okso-2-piperidin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amida (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera 4-{6-okso-8-[(1,2-trans)-(2-piridin-3-ilciklopropankarbonil)amino]-5,6- dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}piperidin-1-karboksilne kiseline 224(a)

Dobivanje međuprodukta 224(a) iz Međuprodukta 222(a) u Primjeru 222 (60 mg, 0,157 mmol), (1,2-trans)-2-piridin-3'-ilciklopropan karboksilne kiseline (40,2 mg, 75 %, 0,172 mmol), trietilamina (0,086 ml, 0,617 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (71,5 mg, 0,188 mmol) u N,N-dimetilformamidu (8,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Hlapive komponente ukloni se u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac od silikagela, te eluira s 25:1 diklormetan: metanol kako bi se dobilo Međuprodukt 224(a) (59,2 mg, 0,112 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 72 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,59 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 10,14 (s, 1H), 8,65 (d, 1H, J = 2,07 Hz), 8,53 (dd, 1H, J = 4,99, 1,41 Hz), 7,98 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,84 (d, 1H, J = 7,91 Hz), 7,59-7,53 (m, 3H), 4,16-4,02 (m, 3H), 2,95-2,74 (m, 2H), 2,22-2,13 (m, 1H), 1,78-1,45 (m, 7H), 1,42 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 529,1; [M – H]– 527,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: dihidroklorid (6-okso-2-piperidin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino [4,5,6-cd]indol-8-il)amida (1,2-trans)-(2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 224(a) (50 mg, 0,095 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (0,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (47,4 mg, 0,095 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 99 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,87 (s, 1H), 10,59 (s, 1H), 10,20 (s, 1H), 9,18-9,00 (m, 2H), 8,89 (brs, 2H), 8,72 (d, 1H, J = 5,09 Hz), 8,33 (d, 1H, J = 8,10 Hz), 8,07 (s, 1H), 7,96 (dd, 1H, J = 8,10, 7,72 Hz), 7,60 (d, 2H, J = 5,09 Hz), 3,47-3,29 (m, 3H), 3,11-2,84 (m, 2H), 2,75-2,61 (m, 1H), 2,40-2,29 (m, 1H), 2,09-1,84 (m, 4H), 1,70-1,54 (m, 2H).

LCMS: [M + H]+ 429,2, [M + Na]+ 451,1; [M – H]– 427,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C24H25N6O2, 429,2039, opaženo 429,2021.

Primjer 225

(1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butil-6-okso-2-piridin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il

karbamata 225(a)

Smjesu Međuprodukta 147(d) u Primjeru 147 (0,50 g, 1,3 mmol), 4-piridilboronske kiseline (0,25 g, 2,0 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]diklorpaladija(II) (106 mg, 0,13 mmol) i 3,0 M vodene otopine natrijevog karbonata (3,3 ml) u N,N-dimetilformamidu (20 ml) miješa se 4 sata na 100 °C. Hlapive komponente ukloni se u vakuumu, a ostatak podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje smjesom CH2Cl2/metanol (95:5, uz porast do 90:10). Međuprodukt 225(a) (0,41 g) dobije se u prinosu od 82 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,22 (s, 1H), 10,52 (s, 1H), 9,60 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 7,85 (d, 1H, J = 1,7 Hz), 7,75 (d, 1H, J = 1,7 Hz), 7,60-7,72 (m, 3H), 1,51 (s, 9H).

LCMS [M+ + 1]: 378,1

Korak 2 Dobivanje 8-amino-2-piridin-4-il-1,5-dihidro-6H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on-hidroklorida 225(b)

U smjesu Međuprodukta 225(a) (0,38 g, 1,0 mmol) u CH2Cl2 (30 ml) doda se 1 M HCl u dietil-eteru (20 ml). Smjesu se zatim miješa 2 sata na sobnoj temperaturi. Hlapive tvari ukloni se u vakuumu kako bi se dobilo Međuprodukt 225(b), kojeg se prebaci izravno u idući korak, bez daljnjeg pročišćavanja.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: (1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid

Otopinu Međuprodukta 225(b) (približno 0,5 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (113 mg, 0,7 mmol), trietilamina (0,4 ml) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (0,23 g, 0,6 mmol) u 10 ml N,N-dimetilformamida miješa se 3 sata na sobnoj temperaturi. Smjesu se podvrgne preparativnom HPLC-u kako bi se dobilo naslovni spoj (107 mg, 0,25 mmol), u prinosu od 25 % za Korake 2 i 3.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,25 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 10,44 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,48-7,91 (m, 4H), 7,20-7,46 (m, 2H), 6,96-7,20 (m, 3H), 2,26-2,40 (m, 1H), 1,94-2,13 (m, 1H) 1,39-1,60 (m, 1H), 1,22-1,39 (m, 1H).

HRMS: izračunato za C25H19N5O2 422,1617 [M + H], opaženo 422,1626.

Primjer 226

N-(6-okso-2-piridin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)(1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 226 iz Međuprodukta 147(d) u Primjeru 147 (200 mg, 0,529 mmol) provodi se analogno dobivanju u Primjeru 225 u tri koraka, s tim što se (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiselina upotrebljava umjesto (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline u Koraku 3. Izdvajanjem se, također na analogan način, dobije naslovni spoj (54 mg) u obliku žutog praha, u ukupnom prinosu od 25 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,26 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,30-8,43 (d, 1H, J = 4,7 Hz), 8,16 (s, 1H), 7,57-7,88 (m, 4H), 7,45-7,57 (m, 1H), 7,19-7,41 (m, 1H), 2,32-2,42 (m, 1H), 2,01-2,20 (m, 1H), 1,46-1,65 (m, 1H), 1,32-1,46 (m, 1H).

HRMS: izračunato za C24H18N6O2 423,1569 [M + H], opaženo 423,1598.

Primjer 227

tert-butilni ester (2,9-diklor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)karbaminske kiseline

[image]

U otopinu Međuprodukta 147(c) u Primjeru 147 (1,5 g, 5 mmol) u CHCl3 (10 ml) i N,N-dimetilformamidu (15 ml), doda se N-klorsukcinimid (701 mg, 5,25 mmol). Smjesu se grije do 60 °C, te miješa 3 sata. Zatim se doda kloroform, N,N-dimetilformamid i voda. Nakon ekstrakcije kloroformom organski sloj se osuši preko Na2SO4, te filtrira. Otparavanjem hlapivih komponenti dobije se intenzivno smeđi ostatak, kojem se doda metanol. Filtriranjem i prikupljanjem krutina dobije se naslovni spoj (648 mg) u obliku intenzivno smeđe krutine, čiju se čistoću NMR-om i HPLC-om procjenjuje na približno 70 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 13,15 (s, 1H), 10,62 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 1,47 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 370,2.

Primjer 228

Dihidroklorid (2-dimetilaminoetil)amida (R)-8-(2-amino-2-cikloheksilacetilamino)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (R)-{cikloheksil-[2-(2-dimetilaminoetilkarbamoil)-6-okso-5,6-dihidro- 1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-ilkarbamoil]metil}karbaminske kiseline 228(a)

Dobivanje međuprodukta 228(a) iz Međuprodukta 171 (a) iz Primjera 171 (200 mg, 0,571 mmol), (R)-tert-butoksikarbonilaminocikloheksiloctene kiseline (147 mg, 0,571 mmol), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorida (131 mg, 0,686 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (84 mg, 0,688 mmol) u N,N-dimetilformamidu (8,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 190, Korak 2. Kada se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 40:3:0,3 smjesom diklormetan/metanol/amonijev hidroksid kako bi se dobilo Međuprodukt 228(a) (77 mg, 0,139 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 24 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,65 (s, 1H), 10,66 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 9,83 (brs, 1H), 8,98 (brs, 1H), 8,16 (s, 2H), 7,76 (s, 1H), 6,93 (d, 1H, J = 9,23 Hz), 4,18-4,03 (m, 1H), 4,01-3,85 (m, 1H), 3,71-3,56 (m, 2H), 2,83 (s, 6H), 1,78-1,45 (m, 6H), 1,37 (s, 9H), 1,21-0,93 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 554,2, [M + Na]+ 576,1; [M – H]– 552,2.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: dihidroklorid (2-dimetilaminoetil)amida (R)-8-(2-amino-2-cikloheksil acetilamino)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 228(a) (75 mg, 0,136 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (1,36 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem, također na analogan način, dobije se naslovni spoj (71,3 mg, 0,136 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 99 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,95 (s, 1H), 10,98 (s, 1H), 10,70 (s, 1H), 10,08 (brs, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,37 (s, 3H), 8,21 (s, 1H), 8,13 (d, 1H, J = 1,32 Hz), 7,79 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 3,85-3,74 (m, 1H), 3,65 (d, 2H, J = 5,84 Hz), 3,30 (d, 2H, J = 6,41 Hz), 2,83 (d, 6H, J = 4,71 Hz), 1,93-1,52 (m, 6H), 1,29-0,97 (m, 5H).

LCMS: [M + H]+ 454,2, [M + Na]+ 476,1; [M – H]– 462,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C23H32N7O3, 454,2567, opaženo 454,2574.

Primjer 229

N-(cikloheksilmetil)-N'-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)urea

[image]

Dobivanje primjera 229 iz naslovnog spoja u Primjeru 2 (25 mg, 0,11 mmol), N,N-disukcinimidil-karbonata (27 mg, 0,11 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0,024 ml, 0,21 mmol) i 1-cikloheksilmetanamina (0,028 ml, 0,021 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 207. Pročišćavanjem, također na analogan način, se dobije naslovni spoj (4 mg, 0,009 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 8 %.

1H-NMR (CDCl3/metanol-d4): � 8,02 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 3,06 (d, 2H, J = 5,84 Hz), 1,82-1,71 (m, 5H), 1,34-1,18 (m, 5H), 0,97 (m, 1H).

LCMS: [M – H]– 338,1, [M + Na]+ 362,1.

Primjer 230

(1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (2-morfolin-4-ilmetil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid; spoj s octenom kiselinom

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (2-formil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-il)karbaminske kiseline 230(a)

U otopinu naslovnog spoja u Primjeru 164 (48 mg, 0,146 mmol) u 1:1 smjesi tetrahidrofuran/H2O (4 ml) doda se K2CO3 (30 mg, 0,219 mmol), K2OsO2(OH)4 (7 mg) i K3Fe(CN)6 (72 mg, 0,219 mmol). Smjesu se miješa 2 sata na sobnoj temperaturi, zatim se doda voda i etil-acetat. Nakon ekstrahiranja organski sloj se osuši, filtrira, te koncentrira. Ostatak se otopi u 1:1 smjesi tetrahidrofuran/H2O (2 ml), te se doda natrijev perjodat (156 mg, 50,73 mmol). Smjesu se miješa 30 minuta na sobnoj temperaturi, zatim se doda voda i etil-acetat. Nakon ekstrahiranja organski sloj se osuši, filtrira, te koncentrira. Kromatografijom ostatka na silikagelu, uz eluiranje 30 % etil-acetatom u heksanu dobije se Međuprodukt 230(a) u obliku blijedožute krutine (11 mg, 0,034 mmol), u prinosu od 22 %.

Korak 2 Dobivanje tert-butilnog estera (2-morfolin-4-ilmetil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)karbaminske kiseline 230(b)

U otopinu morfolina (0,32 ml, 3,64 mmol) i molekulskih sita u prahu veličine čestica 4 Ĺ (1,0 g) u tetrahidrofuranu (5 ml) doda se 4 M HCl u dioksanu (0,91 ml; 3,64 mmol). Nakon 10 minuta ukapa se otopina Međuprodukta 230(a) (199 mg, 0,607 mmol) u tetrahidrofuranu (2 ml), a zatim se doda NaBH(OAc)3 (254 mg, 1,2 mmol). Dobivenu suspenziju miješa se 24 sata na sobnoj temperaturi. Smjesu se ugasi zasićenom vodenom otopinom natrijevog bikarbonata, te filtrira kroz diatomejsku zemlju, koju se zatim ispere etil-acetatom. Filtratu se doda još etil-acetata, a vodeni sloj se ekstrahira. Pomiješane organske slojeve osuši se preko Na2SO4, filtrira, te koncentrira. Ostatak se podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje smjesom 5 % MeOH/etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 230(b) u obliku blijedožutog praha (173 mg, 0,43 mmol), u prinosu od 71 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,71 (s, 1H), 10.,21 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,62 (s, 2H), 3,74 (s, 2H), 3,63-3,61 (m, 4H), 2,43-2,41 (m, 4H), 1,52 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 400.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: (2-morfolin-4-ilmetil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; spoj s octenom kiselinom

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 230(b) (173 mg, 0,433 mmol) u CH2Cl2 (2 ml) i 4 M HCl u dioksanu (2 ml) provodi se analogno dobivanju u Primjeru 91. Nakon koncentriranja ostatak se otopi u N,N-dimetilformamidu (5 ml). Doda se (1R,2R)-2-fenilciklopropankarboksilna kiselina (84 mg, 0,52 mmol), trietilamin (0,18 ml, 1,3 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (247 mg, 0,65 mmol). Nakon 12 sati smjesu se koncentrira, te podvrgne preparativnom HPLC-u na način analogan onom u Primjeru 146, Korak 2. Naslovni spoj (59 mg, 0,13 mmol) dobije se u obliku blijedožutog praha, u prinosu od 31 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,84 (s, 1H), 10,42 (s, 1H), 10,28 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,39-7,24 (m, 5H), 3,78 (s, 2H), 3,68-3,64 (m, 4H), 2,49-2,47 (m, 4H), 2,14 (m, 1H), 1,56 (m, 1H), 1,42 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 444,1.

Primjer 231

N-(6-okso-2-piridin-3-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-(1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 231 iz Međuprodukta 147(d) u Primjeru 147 provodi se analogno dobivanju u Primjeru 225 u tri koraka, s tim što se upotrebljava 3-piridilboronska kiselina umjesto 4-piridilboronske kiseline u Koraku 1, a (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropankarboksilna kiselina se upotrebljava umjesto (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline u Koraku 3. Izdvajanjem, također na analogan način, dobije se naslovni spoj (69 mg) u obliku žutog praha, u ukupnom prinosu od 33 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,19 (s, 1H), 10,30-10,50 (m, 2H), 8,81 (m, 1H), 8,60 (m, 1H), 8,46 (m, 1H), 8,36 (m, 1H), 8,13 (m, 1H), 7,93-8,08 (m, 1H), 7,37-7,69 (m, 4H), 7,27 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 2,08 (m, 1H), 1,28-1,60 (m, 2H).

HRMS: izračunato za C22H18N6O2 423,1569 [M + H], opaženo 423,1590.

Primjer 232

(1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-3-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid

[image]

Dobivanje primjera 232 iz Međuprodukta 147(d) u Primjeru 147 provodi se analogno dobivanju u Primjeru 225 u tri koraka, s tim što se upotrebljava 3-piridilboronska kiselina umjesto 4-piridilboronske kiseline u Koraku 1. Izdvajanjem, također na analogan način, dobije se naslovni spoj (18 mg) u obliku žutog praha, u ukupnom prinosu od 8 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,18 (s, 1H), 10,28-10,54 (m, 2H), 8,81 (m, 1H), 8,60 (m, 1H), 8,13 (m, 1H), 7,95-8,08 (m, 1H), 7,57-7,70 (m, 1H), 7,49-7,57 (m, 1H), 7,38-7,48 (m, 1H), 7,01-7,34 (m, 3H) 4,05 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,46 (m, 1H), 1,32 (m, 1H).

HRMS: izračunato za C25H19N5O2 422,1617 [M + H], opaženo 422,1598.

Primjer 233

(1R,2R)-2-fenilciklopropankarboksilna kiselina [2-(3-dimetilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera [2-(3-dimetilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]karbaminske kiseline 233(a)

U otopinu Međuprodukta 147(d) iz Primjera 147 (300 mg, 0,794 mmol) u N,N-dimetilformamidu (3 ml) i dioksanu (12 ml) doda se dimetilprop-2-inilamin (198 mg, 2,38 mmol), diklorbis(trifenilfosfin)paladij(II) (27,6 mg, 0,039 mmol), bakreni(I) jodid (7,8 mg, 0,041 mmol) i N,N,N,N-tetrametilgvanidin (912 mg, 7,93 mmol), u atmosferi argona. Reakcijsku smjesu grije se 4 sata na 90 °C, zatim se hlapive komponente ukloni u vakuumu. Dobiveni ostatak otopi se u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 20:1:0,1 smjesom diklormetan/metanol/amonijev hidroksid kako bi se dobilo Međuprodukt 233(a) (130 mg, 0,341 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 43 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,09 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 9,54 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,65 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,40 (s, 1H), 3,61 (s, 2H), 2,27 (s, 6H), 1,47 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 382,1, [M + Na]+ 404,1; [M – H]– 380,1.

Korak 2 Dobivanje 8-amino-2-(3-dimetilaminoprop-1-inil)-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-6-on-dihidroklorida 233(b)

Dobivanje međuprodukta 233(b) iz Međuprodukta 233(a) (126 mg, 0,331 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (1,68 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, dobije se Međuprodukt 233(b) (117 mg, 0,331 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 99 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,56 (brs, 1H), 10,68 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 4,46 (s, 2H), 2,88 (s, 6H).

LCMS: [M + Na]+ 304,1; [M – H]– 280,1.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: [2-(3-dimetilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 233(b) (110 mg, 0,312 mmol), (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (55 mg, 0,339 mmol), trietilamina (0,189 ml, 1,36 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (155 mg, 0,408 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 40:3:0,3 smjesom diklormetan/metanol/amonijev hidroksid kako bi se dobilo naslovni spoj (100 mg, 0,235 mmol) u obliku žuto-smeđe krutine, u prinosu od 76 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,24 (s, 1H), 10,53 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 8,10 (d, 1H, J = 1,32 Hz), 7,62 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,45 (s, 1H), 7,33-7,25 (m, 2H), 7,23-7,15 (m, 3H), 3,84 (s, 2H), 2,44 (s, 6H), 2,42-2,32 (m, 1H), 2,12-2,02 (m, 1H), 1,55-1,45 (m, 1H), 1,42-1,32 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 426,0, [M + Na]+ 448,1; [M – H]– 424,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C25H24N5O2, 426,1930, opaženo 426,1911.

Primjer 234

[2-(4-metilpiperazin-1-karbonil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (sol s octenom kiselinom)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera [2-(4-metilpiperazin-1-karbonil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]karbaminske kiseline; spoj s octenom kiselinom 234(a)

Dobivanje međuprodukta 234(a) iz Međuprodukta 147(d) u Primjeru 147 (453 mg, 1,2 mmol), N-metilpiperazina (0,66 ml, 6 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladija(0) (105 mg, 0,09 mmol) u N,N-dimetilformamidu (7 ml) provodi se analogno dobivanju u Primjeru 161, s tim što se kao katalizator upotrebljava tetrakis(trifenilfosfin)paladij(0), umjesto bis(difenilfosfino)ferocendikloropaladija(II). Nakon koncentriranja ostatak se podvrgne preparativnom HPLC-u (Peeke Scientific, HI-Q C18 stupac s reverznom fazom 5u, 100 Ĺ, 250 × 21,2 mm), uz eluiranje s CH3CN i 0,1 % octenom kiselinom u vodi, pri brzini protoka od 20 ml/min, uz upotrebu gradijenta 5-95 % CH3CN u trajanju od 40 minuta kako bi se dobilo Međuprodukt 234(a) (254 mg, 0,6 mmol) u obliku blijedozelenog praha, u prinosu od 50 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,06 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 9,52 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 3,49-3,48 (m, 4H), 2,29-2,28 (m, 4H), 2,20 (s, 3H), 1,42 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 426,1

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: [2-(4-metilpiperazin-1-karbonil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino [4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (sol s octenom kiselinom)

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 234(a) (445 mg, 1,06 mmol) u CH2Cl2 (5 ml) i 4 M HCl u dioksanu (5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Nakon koncentriranja ostatak se otopi u N,N-dimetilformamidu (5 ml). Zatim se uzastopce doda (1R,2R)-2-fenilciklopropankarboksilna kiselina (162 mg, 1,0 mmol), trietilamin (0,42 ml, 3 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (456 mg, 1,2 mmol). Nakon 12 sati smjesu se koncentrira. Sirovi produkt pročisti se preparativnim HPLC-om, na način analogan onom u Primjeru 146, Korak 2, kako bi se dobilo naslovni spoj u obliku blijedožutog praha (74 mg, 0,16 mmol), u prinosu od 15 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,25 (s, 1H), 10,59(s, 1H), 10,51 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,34-7,19 (m, 5H), 3,63 (brs, 4H), 2,56 (s, 3H), 2,40-2,30 (m, 4H), 2,11 (m, 1H), 1,56 (m, 1H), 1,42 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 444,1.

Primjer 235

[2-(3-dimetilaminopropil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Na način analogan onom u Primjeru 183 u otopinu naslovnog spoja u Primjeru 233 (20 mg, 0,047 mmol) u metanolu (3 ml) doda se 10 % paladij na aktiviranom ugljiku (20 mg). Reakcijsku smjesu propuše se s H2, te 1 sat miješa na sobnoj temperaturi u atmosferi H2 (101,3 kPa (1 atm)). Reakcijsku smjesu prebaci se na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 20:1:0,1 smjesom diklormetan/metanol/amonijev hidroksid kako bi se dobilo naslovni spoj (8 mg, 0,0186 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 40 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,70 (s, 1H), 10,34 (s, 1H), 10,17 (s, 1H), 8,04 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,52 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,48 (s, 1H), 7,33-7,25 (m, 2H), 7,23-7,14 (m, 3H), 2,98-2,81 (m, 4H), 2,66 (brs, 6H), 2,41-2,31 (m, 1H), 2,11-2,02 (m, 1H), 2,01-1,87 (m, 2H), 1,53-1,43 (m, 1H), 1,41-1,31 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 430,1, [M + Na]+ 452,1; [M – H]– 428,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C25H28N5O2, 430,2243, opaženo 430,2240.

Primjer 236

[2-(3-dimetilaminopropenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

U smjesu naslovnog spoja iz Primjera 233 (45 mg, 0,106 mmol), Lindlarovog katalizatora (45 mg) i kinolina (4,1 mg, 0,032 mmol) doda se bezvodni metanol (3 ml). Reakcijsku smjesu propuše se s H2, te 2,5 sati miješa na sobnoj temperaturi u atmosferi H2 (101,3 kPa (1 atm)). Reakcijsku smjesu prebaci se na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 20:1:0,1 smjesom diklormetan/metanol/amonijev hidroksid kako bi se dobilo naslovni spoj (30 g, 0,070 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 66 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 13,07 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 8,11 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,57 (s, 1H), 7,54 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,33-7,25 (m, 2H), 7,23-7,14 (m, 3H), 6,88 (d, 1H, J = 12,25 Hz), 5,91 (dt, 1H, J = 12,06, 6,22), 3,16 (d, 2H, J = 5,65 Hz), 2,42-2,33 (m, 1H), 2,28 (s, 6H), 2,12-2,03 (m, 1H), 1,53-1,44 (m, 1H), 1,41-1,31 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 428,1, [M + Na]+ 450,0; [M – H]– 426,0.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C25H26N5O2, 428,2087, opaženo 428,2082.

Primjer 237

[2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (1R,2R)-metil-(3-{6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6- dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}prop-2-inil)karbaminske kiseline 237(b)

Međuprodukt 237(a) dobije se miješanjem metilprop-2-inilamina (0,5 g, 7,23 mmol), di-tert-butil-dikarbonata (1,74 g, 7,97 mmol) i 2,6-dimetilpiridina (0,088 g, 0,72 mmol) u bezvodnom acetonitrilu (10 ml) na sobnoj temperaturi 16 sati. Otapalo se otpari, ostatak podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje s etil-acetatom kako bi se dobilo Međuprodukt 237(a) (1 g, 5,91 mmol) u obliku bezbojnog ulja, u prinosu od 82 %. Na način analogan onom u Primjeru 233, Korak 1, se u otopinu naslovnog spoja iz Primjera 206 (55 mg, 0,13 mmol) u N,N-dimetilformamidu (0,5 ml) i dioksanu (2 ml) doda međuprodukt 237(a) (66 mg, 0,39 mmol), diklorbis(trifenilfosfin)paladij(II) (4,6 mg, 0,0066 mmol), bakreni(I) jodid (1,2 mg, 0,0063 mmol) i N,N,N,N-tetrametilgvanidin (150 mg, 1,30 mmol) u atmosferi argona. Reakcijsku smjesu grije se 3 sata na 90 °C, zatim se hlapive komponente ukloni u vakuumu. Dobiveni ostatak otopi se u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 3:2 smjesom diklormetan/etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 237(b) (20 mg, 0,039 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 30 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,22 (s, 1H), 10,51 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 8,08 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,61 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,41 (s, 1H), 7,33-7,25 (m, 2H), 7,22-7,15 (m, 3H), 4,37 (s, 2H), 2,90 (s, 3H), 2,41-2,33 (m, 1H), 2,11-2,02 (m, 1H), 1,54-1,45 (m, 1H), 1,42 (s, 9H), 1,39-1,32 (m, 1H).

LCMS: [M – H]– 510,0.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: [2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 237(b) (20 mg, 0,039 mmol) i 4,0 M HCl u dioksanu (0,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem, također na analogan način, dobije se naslovni spoj (17 mg, 0,038 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 97 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,37 (s, 1H), 10,59 (s, 1H), 10,55 (s, 1H), 9,30 (br s, 2H), 8,14 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,36-7,24 (m, 2H), 7,24-7,12 (m, 3H), 4,27 (s, 2H), 2,66 (s, 3H), 2,41-2,29 (m, 1H, djelomično zaslonjen), 2,17-2,03 (m, 1H), 1,56-1,44 (m, 1H), 1,43-1,31 (m, 1H).

LCMS: [M – H]– 410,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C24H22N5O2, 412,1774, opaženo 412,1768.

Primjer 238

Dihidroklorid [2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amida (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje (2-brom-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amida

(1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline 238(a)

Dobivanje međuprodukta 238(a) iz Međuprodukta 206(a) u Primjeru 206 (120 mg, 0,38 mmol), (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline (106 mg, približno 0,487 mmol, čistoća približno 75 %), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorida (88 mg, 0,461 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (56 mg, 0,459 mmol) u N,N-dimetilformamidu (15,0 ml) provodi se analogno dobivanju u Primjeru 190, Korak 2. Kada se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se ukloni u vakuumu, dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 50:3 smjesom diklormetan/metanol kako bi se dobilo Međuprodukt 238(a) (90 mg, 0,212 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 56 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,60 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 8,50 (d, 1H, J = 1,88 Hz), 8,40 (dd, 1H, J = 4,62, 1,41 Hz), 8,08 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,60 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,56 (dt, 1H, J = 7,96, 1,86 Hz), 7,32 (dd, 1H, J = 7,91, 4,90 Hz), 7,27 (s, 1H), 2,45-2,37 (m, 1H), 2,16-2,06 (m, 1H), 1,57-1,49 (m, 1H), 1,49-1,40 (m, 1H).

LCMS: [M – H]– 422,0, 424,0.

Korak 2 Dobivanje tert-butilnog estera metil-(3-{6-okso-8-[(2-piridin-3-ilciklopropankarbonil)amino]-5,6- dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}prop-2-inil)karbaminske kiseline 238(b)

U atmosferi argona na način analogan onom u Primjeru 233, Korak 1, u otopinu Međuprodukta 238(a) (45 mg, 0,106 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1 ml) i dioksanu (2 ml) se doda Međuprodukt 237(a) u Primjeru 237 (54 mg, 0,32 mmol), diklorbis(trifenilfosfin)paladij(II) (3,7 mg, 0,0053 mmol), bakreni(I) jodid (1,0 mg, 0,0053 mmol) i N,N,N,N-tetrametilgvanidin (122 mg, 1,06 mmol). Reakcijsku smjesu grije se 2 sata na 90 °C, zatim se hlapive komponente ukloni u vakuumu. Dobiveni ostatak otopi se u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 20:1:0,1 smjesom diklormetan/metanol/amonijev hidroksid kako bi se dobilo Međuprodukt 238(b) (20 mg, 0,039 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 37 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,23 (s, 1H), 10,52 (s, 1H), 10,50 (s, 1H), 8,45 (br s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,56 (d, 1H, J = 7,91 Hz), 7,41 (s, 1H), 7,35 (br s, 1H), 4,37 (s, 2H), 2,90 (s, 3H), 2,45-2,38 (m, 1H, djelomično zaslonjen), 2,16-2,07 (m, 1H), 1,59-1,49 (m, 1H), 1,50-1,44 (m, 1H, djelomično zaslonjen), 1,42 (s, 9H).

LCMS: [M + H]+ 513,2, [M + Na]+ 535,1; [M – H]– 511,1.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: dihidroklorid [2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 238(b) (20 mg, 0,039 mmol) i 4 M HCl u dioksanu (0,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanjem, također na analogan način, dobije se naslovni spoj (16 mg, 0,033 mmol) u obliku tamnocrvene krutine, u prinosu od 85 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,46 (s, 1H), 10,77 (s, 1H), 10,59 (s, 1H), 9,46 (br s, 2H), 8,90 (s, 1H), 8,76 (d, 1H, J = 3,77 Hz), 8,34 (d, 1H, J = 7,35 Hz), 8,11 (s, 1H), 8,03-7,90 (m, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 4,25 (s, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,49 (m, 1H, zaslonjen), 2,41-2,29 (m, 1H, djelomično zaslonjen), 1,73-1,55 (m, 2H).

LCMS: [M – H]– 411,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C23H21N6O2, 413,1726, opaženo 413,1753.

Primjer 239

(2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-[2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il]acetamid-dihidroklorid

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (R)-[(2-brom-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-ilkarbamoil)cikloheksilmetil]karbaminske kiseline 239(a)

Dobivanje međuprodukta 239(a) iz Međuprodukta 206(a) u Primjeru 206 (120 mg, 0,38 mmol), (R)-tert-butoksikarbonilaminocikloheksiloctene kiseline (120 mg, 0,466 mmol), (3-dimetilaminopropil)etilkarbodiimid-hidroklorida (87 mg, 0,455 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (56 mg, 0,459 mmol) u N,N-dimetilformamidu (7,0 ml) provodi se analogno dobivanju u Primjeru 190, Korak 2. Kada se procjeni da je reakcija gotova, hlapive komponente se ukloni u vakuumu, a dobiveni ostatak otopi u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira s 1,2:1 diklormetan/etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 239(a) (60 mg, 0,116 mmol) u obliku žute krutine, u prinosu od 30 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,59 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 10,14 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 6,90 (d, 1H, J = 8,85 Hz), 3,91 (t, 1H, J = 8,29 Hz), 1,76-1,44 (m, 6H), 1,37 (s, 9H), 1,20-0,93 (m, 5H).

LCMS: [M – H]– 518,0, 516,0.

Korak 2 Dobivanje tert-butilnog estera (R)-{3-[8-(2-tert-butoksikarbonilamino-2-cikloheksilacetilamino)-6- okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il]prop-2-inil}metilkarbaminske kiseline 239(b)

U otopinu Međuprodukta 239(a) (66 mg, 0,127 mmol) u N,N-dimetilformamidu (0,5 ml) i dioksanu (2 ml) se na način analogan onom u Primjeru 233, Korak 1, doda Međuprodukt 237(a) u Primjeru 237 (65 mg, 0,38 mmol), diklorbis(trifenilfosfin)paladij(II) (4,5 mg, 0,0064 mmol), bakreni(I) jodid (1,2 mg, 0,0063 mmol) i N,N,N,N-tetrametilgvanidin (146 mg, 1,27 mmol) u atmosferi argona. Reakcijsku smjesu grije se 3 sata na 90 °C, zatim se hlapive komponente ukloni u vakuumu. Dobiveni ostatak otopi se u metanolu, te prebaci na čep od silikagela. Čep se zatim stavi na stupac silikagela, te eluira 4:1 smjesom diklormetan/etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 239(b) (10 mg) u obliku žute krutine, onečišćene nepoznatom nečistoćom.

LCMS: [M + H]+ 607,2, [M + Na]+ 629,3; [M – H]– 605,2.

Korak 3 Dobivanje naslovnog spoja: (2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-[2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6- dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]acetamid-dihidroklorid

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 239(b) (10 mg) i 4 M HCl u dioksanu (0,5 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Izdvajanje, također na analogan način, uključuje daljnju trituraciju s CH2Cl2, čime se uklanja nečistoća unijeta iz Koraka 2. Naslovni spoj (6 mg, 0,013 mmol) dobije se u obliku žutog praha u kombiniranom prinosu od 11 %, za Korake 2 i 3.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,52 (s, 1H), 10,90 (s, 1H), 10,66 (s, 1H), 9,37 (brs, 2H), 8,33 (brs, 3H), 8,08 (s, 1H), 7,73 (d, 1H, J = 0,9 Hz), 7,61 (s, 1H), 4,27 (s, 2H), 3,84-3,74 (m, 1H), 2,67 (s, 3H), 1,90-1,54 (m, 6H), 1,27-0,97 (m, 5H).

LCMS: [M + Na]+ 429,2; [M – H]– 405,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C22H27N6O2, 407,2195, opaženo 407,2209.

Primjer 240

(1,2-trans)-N-[1-(2-hidroksietil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-2-fenilciklopropan karboksamid

[image]

Korak 1 Dobivanje metil-6-{[(2-fenilciklopropil)karbonil]amino}-1H-indol-4-karboksilata 240(a)

Dobivanje međuprodukta 240(a) iz Međuprodukta 2(b) u Primjeru 2 (2,27 g, 10 mmol), (1,2-trans)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (1,79 g, 11 mmol), trietilamina (3,0 g, 30 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (4,18 g, 11 mmol) u N,N-dimetilformamidu (20 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Ekstrakcijom iz etil-acetata, a zatim pročišćavanjem na stupcu silikagela, uz eluiranje smjesom CH2Cl2/etil-acetat dobije se Međuprodukt 240(a) (2,47 g), u prinosu od 74 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,39 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,10-

7,40 (m, 5H), 6,86 (s, 1H), 3,89 (s, 3H), 2,33-2,48 (m, 1H), 2,04-2,21, (m, 1H), 1,46-1,63 (m, 1H), 1,29-1,45 (m, 1H).

LCMS [M + H]: 335,1.

Korak 2 Dobivanje metil-1-(2-metoksi-2-oksoetil)-6-{[(2-fenilciklopropil)karbonil]amino}-1H-indol-4-

karboksilata 240(b)

Međuprodukt 240(a) (2,40 g, 7,2 mmol), metil-bromacetat (1,32 g, 8,6 mmol) i K2CO3 (2,0 g, 14,4 mmol) pomiješa se u N,N-dimetilformamidu (25 ml), te miješa 3 sata na 80 °C. Nakon filtriranja filtrat se otpari, a ostatak podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje smjesom CH2Cl2/etil-acetat kako bi se dobilo Međuprodukt 240(b) (2,31 g), u prinosu od 79 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,50 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,10-7,38 (m, 5H), 6,90 (m, 1H), 5,16 (s, 2H), 3,91 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 2,30-2,44 (m, 1H), 2,03-2,21 (m, 1H), 1,44-1,58 (m, 1H), 1,30-1,43 (m, 1H).

LCMS [M + H]: 407,1.

Korak 3 Dobivanje metil-1-(2-hidroksietil)-6-{[(2-fenilciklopropil)karbonil]amino}-1H-indol-4-karboksilata 240(c)

Međuproduktu 240(b) (2,0 g, 49 mmol) u 1:1 smjesi etanol/tetrahidrofuran (80 ml) doda se NaBH4 (2,0 g, 53 mmol). Smjesu se miješa preko noći na sobnoj temperaturi. Pročišćavanjem kromatografijom na silikagelu dobije se Međuprodukt 240(c) (0,85 g), u prinosu od 46 %.

1H-NMR (d6-DMSO): 8. 10,45 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,89 (d, 1H, J = 1,7 Hz), 7,49 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,15-7,35 (m, 5H), 6,87 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 4,95 (t, 1H. J = 5,2 Hz), 4,20 (t, 2H, J = 5,7 Hz), 3,91 (s, 3H), 3,60-3,80 (m, 2H), 2,33-2,46 (m, 1H), 2,05-2,18 (m, 1H), 1,43-1,65 (m, 1H), 1,30-1,43 (m,1H).

LCMS [M + H]: 379,1.

Korak 4 Dobivanje naslovnog spoja: (1,2-trans)-N-[1-(2-hidroksietil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-2-fenilciklopropan karboksamid

Uz miješanje se u smjesu POCl3 (0,6 ml) i N,N-dimetilformamida (5 ml) na 0 °C doda Međuprodukt 240(c) u N,N-dimetilformamidu (7 ml). Nakon 1 sata reakcijsku smjesu se ugasi vodom, te ekstrahira etil-acetatom. Organsku fazu se osuši s Na2SO4, te filtrira. Nakon otparavanja hlapivih komponenti ostatak se pomiješa s metanolom (50 ml) uz dodatak hidrazina (1 ml), te refluksira 5 sati. Nakon što se smjesa ohladi do temperature okoliša dobiveni žuti talog prikupi se filtracijom, te ispere metanolom kako bi se dobilo naslovni spoj (0,37 g), u prinosu od 43 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,41 (s, 1H), d10,25 (s, 1H), 8,12 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 7,55 (s, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,10-7,33 (m, 5H), 4,12 (t, 2H, J = 5,1 Hz), 3,67 (t, 2H, J = 5,2 Hz), 2,29-2,40 (m, 1H), 1,99-2,10 (m, 1H), 1,41-1,52 (m, 1H), 1,28-1,39 (m, 1H).

HRMS: izračunato za C22H21N5O3 389,1614 [M + H], opaženo 389,1627.

Primjer 241

(2-hidroksimetil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2-cd]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (2-hidroksimetil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]

indol-8-il)karbaminske kiseline 241(a)

Otopinu međuprodukta 230(a) u Primjeru 230 (26 mg, 0,079 mmol) u metanolu (2 ml) obrađuje se s NaBH4 (6 mg, 0,16 mmol) na 0 °C u trajanju od 15 minuta. Otopinu se ugasi zasićenom vodenom otopinom NH4Cl, te razrijedi etil-acetatom. Nakon ekstrahiranja organsku fazu se ispere slanom vodom, osuši (Na2SO4), filtrira, te koncentrira. Kromatografijom ostatka na silikagelu (3:1 etil-acetat/heksan) dobije se međuprodukt 241 (a) (13 mg), u prinosu od 50 %.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (2-hidroksimetil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2-cd]diazepino[4,5,6]indol-8-il) amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

U suspenziju Međuprodukta 241 (a) (76 mg, 0,23 mmol) u CH2Cl2 (2 ml) doda se 4 M HCl u dioksanu (2 ml, 8 mmol). Nakon 2 sata miješanja na sobnoj temperaturi smjesu se koncentrira, a ostatak otopi u N,N-dimetilformamidu (2 ml). Zatim se doda (1R,2R)-2-fenilciklopropankarboksilna kiselina (33,6 mg, 0,21 mmol), trietilamin (0,1 ml, 0,69 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (131 mg, 0,345 mmol). Nakon 2 sata miješanja na sobnoj temperaturi smjesu se koncentrira, a ostatak podvrgne preparativnom HPLC-u na način analogan onom u Primjeru 146, Korak 2. Naslovni spoj dobije se u obliku blijedožutog praha (9 mg, 0,024 mmol), u prinosu od 10 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,79 (s, 1H), 10,36 (s, 1H), 10,19 (s, 1H), 8,05 (d, 1H, J = 1,88 Hz), 7,57 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,32-7,19 (m, 5H), 5,70 (t, 1H, J = 4,0 Hz), 4,70 (d, 2H, J = 5,4 Hz), 2,35 (m, 1H), 2,07 (m, 1H), 1,50 (m, 1H), 1,36 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 375,2

Primjer 242

{1-[2-(1,3-diokso-1,3-dihidroizoindol-2-il)etil]-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il}amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Naslovni spoj iz Primjera 100 (130 mg, 0,38 mmol), 2-(2'-brometil)izoindol-1,3-dion (0,48 g, 1,9 mmol) i K2CO3 (0,28 g, 2,0 mmol) miješa se 20 sati u N,N-dimetilformamidu (6 ml) na 80 °C. Nakon otparavanja hlapivih komponenti ostatak se podvrgne kromatografiji na silikagelu, uz eluiranje smjesom CH2Cl2/MeOH kako bi se dobilo naslovni spoj (130 mg), u prinosu od 67 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,33 (s, 1H), 10,31 (s, 1H), 8,07-8,15 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,72-7,85 (m, 4H), 7,58 (s, 1H), 7,46-7,53 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,40 (s, 1H), 7,27-7,37 (m, 2H), 7,12-7,27 (m, 3H), 4,41 (t, 2H, J = 4,7 Hz), 3,95 (t, 2H, J = 4,9 Hz), 2,31-2,42 (m, 1H), 1,96-2,07 (m, 1H), 1,43-1,55 (m,1H), 1,30-1,42 (m, 1H).

HRMS: izračunato za C30H24N5O4 518,1828 [M + H], opaženo 518,1852.

Primjer 243

(2-dimetilaminometil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 Dobivanje tert-butilnog estera (2,2-dimetilaminometil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)karbaminske kiseline 243(a)

Dobivanje međuprodukta 243(a) iz Međuprodukta 230(a) iz Primjera 230 (707 mg, 2,16 mmol), 2 M dimetilamina u tetrahidrofuranu (5,4 ml, 10,8 mmol), 4 M HCl u dioksanu (10,8 ml; 10,8 mmol) i NaBH(OAc)3 (2,29 g, 10,8 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) s molekulskim sitima u prahu veličine čestica 4 Ĺ (400 mg) provodi se analogno kao u Primjeru 230, Korak 2. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 2 % metanolom u CH2Cl2), također na analogan način, dobije se Međuprodukt 243(a), blijedožuti prah (112 mg, 0,31 mmol), u prinosu od 15 %.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: (2-dimetilaminometil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

Dobivanje naslovnog spoja iz Međuprodukta 243(a) (112 mg, 0,31 mmol) provodi se analogno kao u Koraku 3 u Primjeru 230. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 2 % metanolom u etil-acetatu), također na analogan način, dobije se naslovni spoj (113 mg, 0,28 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 90 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,84 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 10,28 (s, 1H), 8,75 (d, J = 4 Hz, 1H), 8,53 (d, J = 4 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,32-7,18 (m, 3H), 3,31 (s, 2H), 2,49 (s, 6H), 2,33 (m, 4H), 2,09 (m, 1H), 1,50 (m, 1H), 1,36 (m, 1H).

LCMS: [M – H]– 400.

Primjer 244

[1-(2-aminoetil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; spoj s octenom kiselinom

[image]

Naslovni spoj iz Primjera 242 (92 mg, 0,18 mmol) i hidrazin (0,2 ml) refluksira se zajedno u etanolu (14 ml) 3 sata. Nakon otparavanja hlapivih komponenti ostatak se podvrgne preparativnom HPLC-u, čime se dobije naslovni spoj (71,4 mg) u obliku soli s octenom kiselinom, u prinosu od 89 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,44 (s, 1H), 10,27 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,26-7,34 (m, 2H), 7,12-7,23 (m, 3H), 3,99-4,13 (m, 2H), 2,88 (m, 2H), 2,33-2,42 (m, 1H), 2,02-2,12 (m, 1H), 1,43-1,55 (m, 1H), 1,30-1,41 (m, 1H).

HRMS: izračunato za C22H22N5O2 388,1774 [M + H], opaženo 388,1797.

Primjer 245

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid 2-naftalen-1-iletansulfonske kiseline

[image]

U atmosferi dušika se naslovni spoj iz Primjera 2 (260 mg, 1,1 mmol), 2-(1-naftil)etansulfonil-klorid (300 mg, 1,18 mmol) i trietilamin (0,68 ml, 4,89 mmol) refluksira u tetrahidrofuranu (5 ml) 12 sati. Hlapive komponente se otpari, a kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 2 % metanolom u CH2Cl2) ostatka dobije se naslovni spoj (61 mg, 0,15 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 13 %.

1H-NMR (DMSO): � 11,58 (s, 1H), 10,13 (s, 1H), 9,85 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,56 (dd, J

= 8,0, 4,0 Hz, 1H), 7,43-7,17 (m, 8H), 7,06 (m, 1H), 3,22-3,15 (m, 4H).

LCMS: [M + H]+ 417,0.

Primjer 246

[2-(3-morfolin-4-ilprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 246 iz Međuprodukta 147(d) u Primjeru 147 (300 mg, 0,794 mmol) provodi se u tri koraka, na način sličan onom opisanom za dobivanje u Primjeru 233, s tim što se upotrebljava 4-prop-2-inilmorfolin umjesto dimetilprop-2-inilamina u Koraku 1. 4-Prop-2-inilmorfolin dobije se refluksiranjem 3-brompropina, morfolina i K2CO3 u tetrahidrofuranu, u trajanju od 1 sat. Naslovni spoj (34 mg, 0,073 mmol) dobije se u obliku žutog praha, u ukupnom prinosu od 18 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,21 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,33-7,24 (m, 2H), 7,23-7,13 (m, 3H), 3,66 (s, 2H), 3,62 (br s, 4H), 2,54 (br s, 4H), 2,42-2,33 (m, 1H), 2,11-2,02 (m, 1H), 1,54-1,44 (m, 1H), 1,42-1,32 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 468,2, [M + Na]+ 490,1; [M – H]– 466,1.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C27H26N5O3, 468,2036, opaženo 468,2049.

Primjer 247

[6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilprop-1-inil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 247 iz Međuprodukta 147(d) u Primjeru 147 (300 mg, 0,794 mmol) provodi se u tri koraka, na način sličan onom opisanom za dobivanje u Primjeru 233, s tim što se upotrebljava 1-prop-2-inilpirolidin umjesto dimetilprop-2-inilamina u Koraku 1. 1-Prop-2-inilpirolidin se dobije miješanjem 3-brompropina, pirolidina i trietilamina na sobnoj temperaturi u tetrahidrofuranu 2 sata. Naslovni spoj (80 mg, 0,177 mmol) dobije se u obliku žutog praha, u ukupnom prinosu od 36 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,18 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 10,45 (s, 1H), 8,07 (d, 1H, J = 1,77 Hz), 7,61 (d, 1H, J = 1,52 Hz), 7,39 (s, 1H), 7,32-7,25 (m, 2H), 7,23-7,14 (m, 3H), 3,75 (s, 2H), 2,60 (brs, 4H), 2,41-2,33 (m, 1H), 2,10-2,03 (m, 1H), 1,73 (brs, 4H), 1,52-1,46 (m, 1H), 1,40-1,33 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 452,1, [M + Na]+ 474,1; [M – H]– 450,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C27H26N5O2, 452,2087, opaženo 452,2102.

Primjer 248

[1-(2-aminoetil)-2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 248 provodi se u dva koraka. Prvi korak provodi se na način istovjetan onom opisanom za dobivanje u Primjeru 242, s tim što se upotrebljava naslovni spoj iz Primjera 190 umjesto naslovnog spoja iz Primjera 100. Tako se dobije međuprodukt zaštićen ftaloilom. Drugi korak je uklanjanje ftaloilne zaštite, a uvjeti su istovjetni onima opisanim u Primjeru 244. Pročišćavanjem analognim onom opisanom u Primjeru 244 dobije se naslovni spoj (0,054 g) u obliku žutog praha, u ukupnom prinosu od 49 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 10,56 (s, 1H), 10,53 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,00-8,18 (br d, 2H), 7,57 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,19-7,29 (m, 2H), 7,05-7,18 (m, 3H), 4,39 (t, 2H, J = 6,6 Hz), 3,06 (t, 2H, J = 6,5 Hz), 2,28-2,37 (m, 1H), 2,00-2,13(m, 1H), 1,39-1,51 (m, 1H), 1,26-1,38 (m, 1H).

HRMS: izračunato za C22H22N5O2 422,1384 [M + H], opaženo 422,1403.

Primjer 249

(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid 1,2,3,4-tetrahidronaftalen-2-karboksilne kiseline

[image]

Dobivanje primjera 249 iz naslovnog spoja iz Primjera 2 (slobodna baza) (100 mg, 0,500 mmol), 1,2,3,4-tetrahidronaftalen-2-karboksilne kiseline (100 mg, 0,567 mmol), trietilamina (0,278 ml, 2,00 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (285 mg, 0,750 mmol) u N,N-dimetilformamidu (4,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje etil-acetatom), također na analogni način, dobije se naslovni spoj (87 mg, 0,243 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 48 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,73 (d, 1H, J = 2,26 Hz), 10,23 (s, 1H), 10,11 (s, 1H), 8,16 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,60 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 7,55 (d, 1H, J = 2,64 Hz), 7,46 (s, 1H), 7,14-7,06 (m, 4H), 2,97-2,88 (m, 2H), 2,86-2,70 (m, 3H), 2,14-2,02 (m, 1H), 1,86-1,68 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 359,1, [M + Na]+ 381,0; [M – H]– 357,2.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C21H19N4O2, 359,1481, opaženo 359,1484.

[image] Primjer 250

2-(4-klorfenilsulfanil)-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Dobivanje primjera 250 iz naslovnog spoja iz Primjera 2 (slobodna baza) (100 mg, 0,500 mmol), (4-klorfenilsulfanil)octene kiseline (110 mg, 0,543 mmol), trietilamina (0,278 ml, 2,00 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (285 mg, 0,750 mmol) u N,N-dimetilformamidu (4,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kada se procijeni da je reakcija gotova, N,N-dimetilformamid se otpari, a metanol doda. Smjesu se filtrira kako bi se prikupilo krutine, koje se zatim ispere metanolom, diklormetanom i dietil-eterom. Nakon sušenja u vakuumu, naslovni spoj (115 mg, 0,321 mmol) se dobije u obliku žutog praha, u prinosu od 72 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,73 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 10,35 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 8,06 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,56 (d, 1H, J = 2,64 Hz), 7,52 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,48-7,34 (m, 5H), 3,86 (s, 2H).

LCMS: [M – H]– 383,0.

HRMS: [M + H]+ izračunato za C18H14ClN4O2S, 385,0526, opaženo 385,0538.

[image]

Primjer 251

2-(4-klorfenil)-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid

[image]

Dobivanje primjera 251 iz naslovnog spoja iz Primjera 2 (106 mg, 0,448 mmol), (4-klorfenil)octene kiseline (85,0 mg, 0,498 mmol), trietilamina (0,313 ml, 2,25 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijevog heksafluorofosfata (257 mg, 0,676 mmol) u N,N-dimetilformamidu (4,0 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 11. Kromatografijom na silikagelu (uz eluiranje 1:1 smjesom etil-acetat/heksan), također na analogni način, dobije se naslovni spoj (130 mg, 0,369 mmol) u obliku žutog praha, u prinosu od 82 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,73 (d, 1H, J = 1,70 Hz), 10,31 (s, 1H), 10,24 (s, 1H), 8,10 (d, 1H, J = 1,51 Hz), 7,57-7,53 (m, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,37 (ddd, 4H, J = 8,67, 8,67, 2,64 Hz), 3,64 (s, 2H).

LCMS: [M + H]+ 353,2; [M – H]– 351,2.

[image]

Primjer 252

8-(4-dimetilaminopirimidin-2-ilamino)-1,5-dihidro-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-6-on

[image]

Korak 1 2-klor-4-dimetilaminopirimidin 252(a)

U otopinu 2,4-diklorpiridina (2,24 g, 15 mmol) u etanolu (45 ml) doda se trietilamin (2,1 ml, 15 mmol), a zatim dimetilamin (7,5 ml, 1,0 M u THF). Dobivenu smjesu miješa se 2 sata na 23 °C. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3 dobije se sirovi produkt, kojeg se pročisti kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje smjesom 30 % etil-acetat/heksan kako bi se dobilo Međuprodukt 252(a) (1,4 g, 8,2 mmol), u prinosu od 55 %.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: 8-(4-dimetilaminopirimidin-2-ilamino)-1,5-dihidro-[1,2] diazepino[4,5,6]indol-6-on

Smjesu Međuprodukta 252(a) (212 mg, 1,35 mmol), naslovnog spoja iz Primjera 2 (slobodna baza) (320 mg, 1,6 mmol), K2CO3 (560 mg, 4,05 mmol) u N,N-dimetilformamidu (5 ml) grije se 4 sata na 100 °C. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3 dobije se sirovi produkt, kojeg se triturira metanolom. Smjesu se prikupi filtracijom, te ispere metanolom kako bi se dobilo naslovni spoj u obliku žute krutine (83 mg, 0,26 mmol), u prinosu od 19 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 11,63 (s, 1H), 10,12 (s, 1H), 9,15 (s, 1H),8,15(d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,94 (d, 1H, J = 6,1 Hz), 7,92 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 7,46 (d, 1H, J = 2,5 Hz), 7,43 (s, 1H), 6,11 (d, 1H, J = 6,1 Hz), 3,08 (s, 6H).

LCMS: [M + H]+ 322,3.

Primjer 253

[2-(1H-imidazol-2-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline

[image]

Korak 1 tert-butilni ester [2-(1H-imidazol-2-il)-6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6-]indol-8-il] karbaminske kiseline 253(a)

U otopinu Međuprodukta 230(a) u Primjeru 230 (274 mg, 0,835 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) i etanolu (1 ml) doda se 15 N amonijev hidroksid (0,5 ml), a zatim 40 %-tni glikol u vodi (0,5 ml). Dobivenu smjesu miješa se na 23 °C preko noći. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3 dobije se sirovi produkt, kojeg se pročisti kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje smjesom 50 % etil-acetat/heksan kako bi se dobilo međuprodukt 253(a) (75 mg, 0,2 mmol), u prinosu od 24 %.

Korak 2 Dobivanje naslovnog spoja: [2-(1H-imidazol-2-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6]

indol-8-il]amid 2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; spoj s octenom kiselinom

Uklanjanje zaštite s Međuprodukta 253(a) (41 mg, 0,11 mmol) u CH2Cl2 (2 ml) pomoću 4 M HCl u dioksanu (2 ml) provodi se analogno kao u Primjeru 91. Nakon koncentriranja ostatak se otopi u N,N-dimetilformamidu (5 ml). Uzastopce se dodaju (1R,2R)-2-fenilciklopropankarboksilna kiselina (35,6 mg, 0,22 mmol), trietilamin (0,046 ml, 0,33 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijev heksafluorofosfat (51 mg, 0,13 mmol). Nakon 12 sati smjesu se koncentrira. Sirovi produkt pročisti se preparativnim HPLC-om, na način analogan onom u Primjeru 146, Korak 2, kako bi se dobilo naslovni spoj u obliku blijedožutog praha (7 mg, 0,017 mmol), u prinosu od 15 %.

1H-NMR (d6-DMSO): � 12,27 (s, 1H), 11,79 (s, 1H), 10,25 (s, 1H), 10,21 (s, 1H), 7,93 (d, 1H, J = 1,7 Hz), 7,90 (s, 1H), 7,45 (d, 1H, J = 1,7 Hz), 7,20 (s, 1H), 7,13-6,99 (m, 5H), 2,19 (m, 1H), 1,89 (m, 1H), 1,31 (m, 1H), 1,18 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 409.

Primjer 254

(2-cijano-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; spoj s HOAc solju

[image]

Korak 1 (2-formil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid 2-fenilciklopropan karboksilne kiseline 254(a)

Dobivanje polaznog materijala, (6-okso-2-vinil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amida 2-fenilciklopropan karboksilne kiseline, provodi se uklanjanjem zaštite s naslovnog spoja iz Primjera 164 na način analogan onom u Primjeru 91, te kondenzacijom s amidom, na način analogan onom u Primjeru 61. (6-okso-2-vinil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid 2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (542 mg, 1,46 mmol) se zatim obradi s K3Fe(CN)6 (483 mg, 1,46 mmol) i NaIO4 (1,25 g, 5,84 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) i vodi (2 ml), analogno kao u Primjeru 230, Korak 1. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3 dobije se sirovi produkt, kojeg se pročisti kromatografijom na silikagelu, uz eluiranje smjesom 50 % etil-acetat/heksan kako bi se dobilo međuprodukt 254(a) (384 mg, 1,17 mmol), u prinosu od 71 %.

Korak 2 Naslovni spoj: (2-cijano-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid 2-fenil ciklopropan karboksilne kiseline; spoj s HOAc solju

Smjesu Međuprodukta 254(a) (103 mg, 0,276 mmol), NH2OH·HCl (38 mg, 0,55 mmol) i trietilamina (0,15 ml, 1,1 mmol) u etanolu (2 ml) miješa se 1 sat na 23 °C. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3 dobije se sirovi produkt, kojeg se otopi u tetrahidrofuranu (2 ml) i trietilaminu (0,077 ml, 0,55 mmol). Zatim se ukapa anhidrid trifluoroctene kiseline (0,046 ml, 0,33 ml). Dobivenu smjesu miješa se preko noći. Ekstrakcijom iz etil-acetata i zasićene vodene otopine NaHCO3 dobije se sirovi produkt, kojeg se pročisti preparativnim HPLC-om, na način analogan onom u Primjeru 146, Korak 2, kako bi se dobilo naslovni spoj (5 mg, 0,014 mmol), u prinosu od 5 %.

1H-NMR (d6-DMSO): 9,05 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,24-7,12 (m, 5H),2,19(m, 1H), 1,89 (m, 1H), 1,52 (m, 1H), 1,11 (m, 1H).

LCMS: [M + H]+ 369,1.

Drugi spojevi koje se dobije iz odgovarajućih polaznih materijala uključuju sljedeće:

Primjer 255

(2R)-2-amino-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-fenilbutiramid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 256

(2R)-2-amino-2-indan-2-il-N-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]acetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 257

(2R)-2-amino-N-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-4-fenilbutiramid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 258

(2R)-2-amino-2-indan-2-il-N-(6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 259

[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (2R)-2-amino-3-etilheptanske kiseline (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 260

(2R)-2-amino-N-(2-brom-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-fenilbutiramid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 261

(2R)-2-amino-2-indan-2-il-N-[2-(6-metilpiridin-3-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]acetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 262

(2R)-2-amino-N-(2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-fenilbutiramid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 263

(1S,2R)-1-amino-2-fenilciklopropankarboksilna kiselina [2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 264

(2R)-2-amino-3-(4-fluorfenoksi)-N-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il]propionamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 265

(2R)-2-amino-N-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-3-fenoksipropionamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 266

(2R)-2-amino-N-(2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-indan-2-ilacetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 267

(2R)-2-amino-N-[2-(1-metil-1H-imidazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-4-fenilbutiramid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 268

(2R)-2-amino-N-[2-(6-metilpiridin-3-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-4-fenilbutiramid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 269

(2R)-2-amino-N-[2-(3-metilizoksazol-5-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-4-fenilbutiramid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 270

(2R)-2-amino-2-indan-2-il-N-[2-(3-metilizoksazol-5-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]acetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 271

2-benzilamino-N-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-acetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 272

(2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-[2-(1-metil-1H-imidazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il]acetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 273

(2R)-2-amino-2-indan-2-il-N-[2-(1-metil-1H-imidazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)acetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 274

(2R)-2-amino-2-(4-fluorfenil)-N-[2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-8-il)acetamid (hidrokloridna sol)

[image]

Primjer 275

Kombinacijska ispitivanja in vitro

Stanice raka može se inkubirati s antineoplastičnim sredstvom, bilo samim, ili u kombinaciji s inhibitorom CHK-1 formule 1. Podatke o staničnom rastu iz kombinacijskog ispitivanja (antineoplastično sredstvo zajedno s fiksnom koncentracijom ispitivanog spoja) može se usporediti s odgovarajućim podacima, dobivenim iz ispitivanja s pojedinačnim sredstvom (antineoplastično sredstvo bez ispitivanog spoja). Koncentraciju antineoplastičnog sredstva koja dovodi do 50 %-ne inhibicije staničnog rasta (IC50) može se odrediti kako za liječenje pojedinačnim sredstvom, tako i za kombinacijsko liječenje. Vrijednosti IC50 može se izračunati pomoću linearnog dijela semilogaritamskog grafičkog prikaza ovisnosti postotka inhibicije staničnog rasta o koncentraciji antineoplastičnog sredstva. Odnos između IC50 za samo antineoplastično sredstvo i IC50 za antineoplastično sredstvo u kombinaciji s ispitivanim spojem predstavlja Potencijacijski faktor 50 (PF50). PF50 može se upotrijebiti za mjerenje djelotvornosti kombinacijskog liječenja. Kombinacijsko liječenje antineoplastičnim sredstvom i ispitivanim spojevima formule I može dati vrijednosti PF50 u rasponu od 2-8 za stanice raka.

Vijabnost i proliferaciju stanica raka može se procijeniti u ispitivanju s redukcijom tetrazolijskih soli (MTT ispitivanje). Kod vijabilnih stanica ovim se kolorimetrijskim ispitivanjem može mjeriti redukciju tetrazolijske komponente u netopivi formazanski produkt u mitohondrijima. Isto tako, ovo se ispitivanje može upotrijebiti za određivanje je li mitohondrijska funkcija narušena ili nije, primjerice u metaboličkim zbivanjima koja dovode do apoptoze ili nekroze. Kancerozne stanične linije može se uzgajati na pločama s 96 jažica, a može ih se nasaditi u odgovarajućem mediju u volumenu od 100 µl po jažici. Ploče se može inkubirati 4 sata prije dodavanja ispitivanih spojeva. Na dnu ploče s 96 jažica stanice se može obraditi rastućim koncentracijama antineoplastičnog sredstva. Na vrhu ploče stanice se može obraditi rastućim koncentracijama antineoplastičnog sredstva u kombinaciji s fiksnom koncentracijom ispitivanog spoja. Stanice se može inkubirati na 37 °C (5 % CO2) 4-6 dana (ovisno o staničnom tipu). Na kraju inkubacije tetrazolijsku se komponentu može dodati do konačne koncentracije od 0,2 mg/ml, a stanice se može inkubirati 4 sata na 37 °C. Nakon centrifugiranja ploča i uklanjanja medija formazansku se apsorbanciju (formazan otopljen u dimetil-sulfoksidu) može mjeriti na 540 nm.

Antineoplastična sredstva mogu uključivati cisplatin, hidroksiureu, gemcitibin, karboplatin, 7-etil-10-hidroksikamptotecin (SN-38), te citozin-�-d-arabinozid.

Stanice raka mogu se odnositi na sljedeće:

[image]

Primjer 276

Modeli tumora in vivo

Kako bi se procijenilo sposobnost inhibitora CHK-1 formule I da pojačaju smanjenje volumena tumora u kombinaciji s gemcitibinom kod miševa, može se pomoću tumorskih staničnih linija HT-29, MV522 ili Colo205 načiniti modele ksenogeno presađenih tumora.

Miševe se može slučajno raspodijeliti (12 miševa po skupini) u skupine za liječenje, te upotrijebiti kada tumori dosegnu volumen od 150-200 mm3. Miševima se može davati intraperitonealne (i.p.) injekcije, koje sadrže sam vehikulum, sam gemcitibin ili gemcitibin u kombinaciji s ispitivanim spojem formule I. Volumene tumora može se mjeriti u vremenskom rasponu od 2-25 dana. Kontrola može biti i.p. injekcija vehikuluma u odgovarajućim intervalima. Paralelna kontrola može biti i.p. injekcija samog gemcitibina u koncentraciji od 15-240 mg/kg, u odgovarajućim intervalima. Liječenje može biti i.p. injekcija gemcitibina (5-240 mg/kg), u odgovarajućim intervalima, u kombinaciji s i.p. injekcijom ispitivanog spoja formule I (1-100 mg/kg), u odgovarajućim intervalima. Na kraju ispitivanja može se mjeriti volumen tumora (mm3). Povećano kašnjenje tumorskog rasta može se opaziti kod miševa liječenih gemcitibinom u kombinaciji s ispitivanim spojem formule I, u usporedbi s liječenjem samim gemcitibinom.

Iako ovaj izum ilustriraju reference na specifične i poželjne izvedbe, stručnjaci u ovom području tehnike će shvatiti da su moguće varijacije i modifikacije kod rutinskog eksperimentiranja i u praksi prema ovom izumu. Prema tome, ovaj izum se ne ograničuje na prethodni opis, nego ga definiraju pridodani Patentni zahtjevi i njihovi ekvivalenti.

Claims

1. Spoj formule: [image] , naznačen time što: X je =O ili =S; A je =CR1- ili =N-; skupina -Y-Z- ima formulu -O-CH2- ili -N=CH-; R1 je: (a) (C1-C8)alkil; (b) -C(=O)-R5; (c) -C(=O)-NR6R7; ili (d) R35 ili R36, (C2-C8)alkenil ili (C2-C8)alkinil {gdje je svaki od navedenih (C2-C8)alkenila ili (C2-C8)alkinila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine F, Cl, OH, -NH2, R40 i R42}; R2 je: (a) H, OH ili (C1-C8)alkil; (b) -C(=O)-R8; (c) -(C=S)-R9 ili -(C=S)-NR10R11; ili (d) R38 ili R39; R3 je: (a) (C1-C8)alkil; (b) -C(=O)-R12; (c) -C(=O)-NR13R14; (d) -NR15-C(=O)-R16; (e) -NR17-SO2R18; (f) -NR19-SOn-NR20R21 {gdje n je 1 ili 2}; (g) -NR22-(C=S)-R23 ili -NR22-(C=S)-NR23R24; (h) R36, (C2-C8)alkenil ili (C2-C8)alkinil {gdje je svaki od navedenih R3 (C2-C8)alkenila ili (C2-C8)alkinila nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, R40, R41 i R42}; (i) R37, -NH2, -NH((C2-C8)alkenil), -NH((C2-C8)alkinil), -N((C1-C8)alkil)((C2-C8)alkenil) ili -N((C1-C8) alkil)((C2-C8)alkinil) {gdje je svaki od navedenih R26 (C2-C8)alkenil ili (C2-C8)alkinil, nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine R40, R41 i R42}; ili (j) R38; R4 se bira iz skupine koju čine H, F, Br, Cl i (C1-C8)alkil; R5 se bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil, (C1-C8)alkil-O- i R36; svaki R6 i R7 se neovisno bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil i R36; R8 se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, (C2-C8)alkenil, (C2-C8)alkinil, -NH2, R36 i R37; svaki od R9, R10 i R11 se neovisno bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil i R36; R12 se bira iz skupine koju čine H, OH, (C1-C8)alkil, (C1-C8)alkil-O- i R36; R13 je H ili (C1-C8)alkil; R14 se bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil, -CH2-(C=O)-O-(C1-C8)alkil i R36; R15 je H ili (C1-C8)alkil; R16 se bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil, (C2-C8)alkenil, (C2-C8)alkinil, -NH2, R36 i R37; gdje je svaki od navedeni R15 i R16 (C2-C8)alkenil ili (C2-C8)alkinil, nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine R40, R41 i R42; R17 se bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil i R36; R18 je (C1-C8)alkil ili R36; R19, R20, i R21 se neovisno bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil i R36; R22, R23 i R24 se neovisno bira iz skupine koju čine H, (C1-C8)alkil i R36; R25 je H ili (C1-C8)alkil; R26 se bira iz skupine koju čine -C(=O)-O-C(CH3)3, (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril; ili se R25 i R26 može izborno uzeti zajedno s dušikom na koji su vezani kako bi tvorili 5- do 8- člani heteroarilni ili heterociklilni prsten; R27 se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril; R28 se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril; R29 je H ili (C1-C8)alkil; R30 je (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril ili (C1-C10)heteroaril; ili se R29 i R30 može izborno uzeti zajedno s dušikom na koji su vezani kako bi tvorili 5- do 8- člani heteroarilni ili heterociklilni prsten; R31 je H ili (C1-C8)alkil; R32 se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril; ili se R31 i R32 može izborno uzeti zajedno s dušikom na koji su vezani kako bi tvorili 5- do 8- člani heteroarilni ili heterociklilni prsten; R33 je (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril ili (C1-C10)heteroaril; R34 je (C1-C8)alkil, (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril ili (C1-C10)heteroaril; svaki R35 se neovisno bira iz skupine koju čine H, F, Cl, Br, I, CN, OH, NO2, -NH2, -NH-C(=O)-O-C(CH3)3 i CF3; svaki R36 se neovisno bira iz skupine koju čine (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril; svaki R37 se neovisno bira iz skupine koju čine: (c) -NR25R26; i (d) R27-O-; R38 je R28-SOn-; gdje n je 0, 1 ili 2, kada je -SOn- vezan na R28 preko R28 atoma ugljika, ili gdje n je 1 ili 2, kada je -SOn- vezan na R28 preko R28 atoma dušika u prstenu; R39 je R29R30N-SOn-; gdje n je 1 ili 2; gdje je svaki od navedenih (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje u bilo kojem od navedenih R1(a)-(d), R2(a)-(d), R3(a)-(j), R4, R37, R38 ili R39, nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C2-C8)alkenil, R40, R41 i R42; gdje je svaki od navedenih (C3-C10)cikloalkila, (C2-C10)heterociklila, (C6-C10)arila ili (C1-C10)heteroarila, gdje god se pojavljuje u navedeni R36, R37, R38 ili R39, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz R40; R40 se bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, R41, R42 i R43; svaki R41 se neovisno bira iz skupine koju čine F, Cl, Br, I, CN, OH, NO2, -NH2, -NH-C(=O)-O-C(CH3)3, COOH, -C(=O)(C1-C8)alkil, -C(=O)-O-(C1-C8)alkil, -NH-SO2-(C1-C8)alkil, -NH-SO2-(C6-C10)aril i CF3; svaki R42 se neovisno bira iz skupine koju čine (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril; svaki R43 se neovisno bira iz skupine koju čine: (c) -NR31R32; (d) R33-O-; i (c) R34-SOn-; gdje n je 0, 1 ili 2, kada je -SOn- vezan na R34 preko R34 atom ugljika, ili gdje n je 1 ili 2, kada je -SOn- vezan na R34 preko R34 atom dušika u prstenu; gdje je svaki od navedenih (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje u bilo kojem od R40, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine R44 i R45; gdje je svaki od navedenih (C3-C10)cikloalkila, (C2-C10)heterociklila, (C6-C10)arila ili (C1-C10)heteroarila, gdje god se pojavljuje u bilo kojem od navedenih R42 ili R43, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine R47 bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, R44 i R45; svaki R44 se neovisno bira iz skupine koju čine F, Cl, Br, I, CN, OH, NO2, -NH2, -CF3, -C(=NH)-NH2, C(=NH)-NH-OH, -C(=NH)-NH-O-(C1-C8)alkil, -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-NH2, -(C=O)-NH(C1-C8)alkil, -(C=O)-N<[(C1-C8)alkil]2, -NH-(C=O)-(C1-C8)alkil, R37 i R38; svaki R45 se neovisno bira iz skupine koju čine (C3-C10)cikloalkil, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril; gdje je svaki od navedenih (C1-C8)alkila, gdje god se pojavljuje u bilo kojem od navedenih R44 ili R45, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine R46 i R47; gdje je svaki od navedenih (C3-C10)cikloalkila, (C2-C10)heterociklila, (C6-C10)arila ili (C1-C10)heteroarila, gdje god se pojavljuje u bilo kojem od navedenih R43 ili R44, neovisno nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, R46 i R47; svaki R46 se neovisno bira iz skupine koju čine F, Cl, Br, I, CN, OH, NO2, -C(=NH)-NH2, -C(=NH)-NH-OH, -C(=NH)-NH-O-(C1-C8)alkil, -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-NH2, -(C=O)-NH(C1-C8)alkil, -(C=O)-N<[(C1-C8)alkil]2, -NH-(C=O)-(C1-C8)alkil, -C(=NH)-NH2, -C(=NH)-NH-OH, -C(=NH)-NH-O-(C1-C8)alkil, -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -O-(C=O)-(C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8)alkil, (C=O)-NH2, -(C=O)-NH(C1-C8)alkil, -(C=O)-N>[(C1-C8)alkil]2, -NH-(C=O)-(C1-C8)alkil, R37 i R38; i svaki R47 se neovisno bira iz skupine koju čine (C3-C10)cikloalkil; (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10) heteroaril; ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol.

2. Spoj prema patentnom zahtjevu 1, naznačen time što R3 je -NR15-C(=O)-R16; gdje R16 je(C3-C10)cikloalkil, nesupstituiran ili supstituiran s 1 ili 2 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, F, Cl, CN, OH, NH2, CF3, (C2-C10)heterociklil, (C6-C10)aril i (C1-C10)heteroaril; gdje je navedeni (C6-C10)aril kao supstituent nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, F, Cl, Br, CN, OH i CF3; te gdje je navedeni (C2-C10)heterociklil kao supstituent nesupstituiran ili supstituiran s 1 ili 2 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine (C1-C8)alkil, -(C=O)-(C1-C8) alkil, -(C=O)-O-(C1-C8)alkil, -S-(C1-C8)alkil, F, Br, OH i CF3.

3. Spoj prema patentnom zahtjevu 1, naznačen time što R2 je H ili (C1-C8)alkil, nesupstituiran ili supstituiran s 1 do 4 supstituenta, koje se neovisno bira iz skupine koju čine OH, -NH2, (C1-C8)alkil-NH-, [(C1-C8) alkil]2>N-, (C2-C10)heterociklil i (C1-C10)heteroaril.

4. Spoj prema patentnom zahtjevu 1, naznačen time što X je =O.

5. Spoj prema patentnom zahtjevu 1, naznačen time što skupina -Y-Z- ima formulu -N=CH-.

6. Spoj prema patentnom zahtjevu 1, naznačen time što se bira iz skupine koju čine: N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilacetamid; 2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid; N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-fenilbutiramid; N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamid; 3-fluor-2-metil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid; 2-fluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-trifluormetilbenzamid; N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-trifluormetilbenzamid; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; 2-(3-klorfenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid; N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-tien-2-ilbutanamid; 1-acetil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)piperidin-4-karboksamid; 3-(2-metilfenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propanamid; (2S)-2-amino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-fenilbutiramid, spoj s trifluoroctenom kiselinom; (2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)etanamid-trifluoracetat; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; 2-etilsulfanil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)nikotinamid; (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; N-[2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-2-fluor-3-trifluormetilbenzamid; 6-okso-2-fenil-N-(2-fenilciklopropil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid; N-[1-(4-fluorfenil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid; [2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol); 3-{6-okso-8-[((1R,2R)-2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}benzilni ester octene kiseline; [2-(3-hidroksimetilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid (hidrokloridna sol); N-[1-(4-hidroksifenil)etil]-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid; 2,3-difluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid; (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; N-(4-fluorbenzil)-6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid; [2-(3-ciklobutilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol); [6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilmetilfenil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol); N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-(1,2-trans)-2-[6-(trifluormetil)piridin-3-il]ciklopropankarboksamid-trifluoracetat; (2R)-2-amino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilacetamid (hidrokloridna sol); (2R)-2-amino-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-fenilpropionamid (hidrokloridna sol); (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (3E)-4-fenilbut-3-enske kiseline; 2-indan-2-il-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-fluorfenil) ciklopropan karboksilne kiseline; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol); (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-metoksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline; 2-indan-2-il-(6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid; (2R)-2-hidroksi-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-feniletanamid; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-2-ilciklopropan karboksilne kiseline, spoj s octenom kiselinom; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(1H-imidazol-4-il) ciklopropan karboksilne kiseline, spoj s octenom kiselinom; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (2R)-piperidin-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol); (2S)-2-amino-3-cijano-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)propionamid, spoj s octenom kiselinom; (2R)-2-amino-3-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid (hidrokloridna sol); metilni ester (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-2-karboksilne kiseline; (2R)-3-(4-hidroksifenil)-2-(metilamino)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid (hidrokloridna sol); (2R)-2-amino-3-(4-fluorfenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid (hidrokloridna sol); metilamid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-2-karboksilne kiseline; (2-hidroksietil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline; (2-dimetilaminoetil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline; (2R)-2-amino-2-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) etanamid (hidrokloridna sol); (6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline; (2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-bromfenil)ciklopropan karboksilne kiseline; (6-okso-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(3-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline; 2-(3,4-dihidroizokinolin-2(1H)-il)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) acetamid; (2-brom-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [6-okso-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol); (1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid; N-(6-okso-2-piridin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-(1,2-trans)-2-piridin-3-il ciklopropankarboksamid; N-(6-okso-2-piridin-3-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-(1,2-trans)-2-piridin-3-il ciklopropankarboksamid; (1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-3-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid; [2-(3-dimetilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(3-dimetilaminopropil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(3-dimetilaminopropenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline (hidrokloridna sol); [2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1,2-trans)-2-piridin-3-ilciklopropan karboksilne kiseline (dihidrokloridna sol); (2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-[2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]acetamid (dihidrokloridna sol); (1,2-trans)-N-[1-(2-hidroksietil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-2-fenilciklopropan karboksamid; (2-dimetilaminometil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [1-(2-aminoetil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(3-morfolin-4-ilprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilprop-1-inil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; i [1-(2-aminoetil)-2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(1H-imidazol-2-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (2-cijano-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; i (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline [2-(1H-imidazol-2-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol ili solvat.

7. Spoj prema patentnom zahtjevu 1, naznačen time što se bira iz skupine koju čine: 3-fluor-2-metil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)benzamid; 2-fluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-trifluormetilbenzamid; N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-tien-2-ilbutanamid; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; 3-{6-okso-8-[((1R,2R)-2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-2-il}benzilni ester octene kiseline; [2-(3-hidroksimetilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid; (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(3-ciklobutilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilmetilfenil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; 2-indan-2-il-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-fluorfenil) ciklopropan karboksilne kiseline; (2R)-2-amino-3-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid; metilni ester (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-2-karboksilne kiseline; metilamid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd] indol-2-karboksilne kiseline; (2-hidroksietil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline; (2-hidroksietil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline; (2R)-2-amino-2-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) etanamid; (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline; (2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; 2-(3,4-dihidroizokinolin-2(1H)-il)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) acetamid; 2-(3,4-dihidroizokinolin-2(1H)-il)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) acetamid; [6-okso-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-4-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid; (1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-3-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid; [2-(3-dimetilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(3-dimetilaminopropenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-[2-(3-metilaminoprop-1-inil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]acetamid; (2-hidroksimetil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2-cd]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [6-okso-2-(3-pirolidin-1-ilprop-1-inil)-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; [2-(1H-imidazol-2-il)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (2-cijano-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; i (2R)-2-amino-2-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) etanamid-hidroklorid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol ili solvat.

8. Spoj prema patentnom zahtjevu 1, naznačen time što se bira iz skupine koju čine: 2-fluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-trifluormetilbenzamid; N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-tien-2-ilbutanamid; [2-(3-hidroksimetilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid (hidroklorid); 6-okso-2-fenil-N-[(1R)-1-feniletil]-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-karboksamid; (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (2R)-2-hidroksi-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-feniletanamid; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-piridin-2-ilciklopropan karboksilne kiseline (sol octene kiseline); (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(1H-imidazol-4-il) ciklopropan karboksilne kiseline (sol octene kiseline); (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (2R)-piperidin-2-karboksilne kiseline (hidrokloridna sol); (2R)-2-amino-3-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) propanamid-hidroklorid; (2-dimetilaminoetil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline; (2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (1R,2R)-N-(6-okso-2-piridin-3-il-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-fenilciklopropan karboksamid; i [1-(2-aminoetil)-2-klor-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol ili solvat.

9. Spoj prema patentnom zahtjevu 1, naznačen time što se bira iz skupine koju čine: 2-fluor-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-3-trifluormetilbenzamid; N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-2-trifluormetilbenzamid; N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)-4-tien-2-ilbutanamid; N-[2-(3-dimetilaminometilfenil)-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il]-2-fluor-3-trifluormetilbenzamid; (2R)-2-amino-2-cikloheksil-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamid (hidroklorid); (6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; (2-dimetilaminoetil)amid (1R,2R)-6-okso-8-[(2-fenilciklopropankarbonil)amino]-5,6-dihidro-1H-[1,2] diazepino[4,5,6-cd]indol-2-karboksilne kiseline; (2R)-2-amino-2-(4-hidroksifenil)-N-(6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il) etanamid-hidroklorid; (6-okso-2-fenil-5,6-dihidro-1-[1,2]diazepino[4,5,6]indol-8-il)amid (1,2-trans)-2-(4-hidroksifenil)ciklopropan karboksilne kiseline; i (2-etil-6-okso-5,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)amid (1R,2R)-2-fenilciklopropan karboksilne kiseline; ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol ili solvat.

10. Farmaceutski pripravak, naznačen time što se sastoji od: (a) djelotvorne količine sredstva za inhibiciju CHK-1, koje je spoj prema patentnom zahtjevu 1; ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol; (b) djelotvorne količine antineoplastičnog sredstva ili terapijskog ozračivanja; i (c) farmaceutski prihvatljive podloge za navedeno sredstva za inhibiciju CHK-1.

11. Pripravak, naznačen time što sadrži spoj prema patentnom zahtjevu 1, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu sol ili solvat, i antineoplastično sredstvo, kao kombinirani pripravak za istodobnu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu u liječenju novotvorine.

12. Upotreba antineoplastičnog sredstva ili terapijskog ozračivanja s antineoplastičnim učinkom u kombinaciji sa spojem prema patentnom zahtjevu 1, ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli ili solvatom, naznačene time što je gore nabrojano namijenjeno liječenju novotvorine kod sisavca.

13. Upotreba spoja prema patentnom zahtjevu 1, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, naznačena time što je navedeni spoj namijenjen liječenju stanja koje se može liječiti inhibicijom proteinskih kinaza kod sisavca, uključujući čovjeka.