FI90421B - Glyseroliasetaalin farmakologisesti käyttökelpoisten aminoasylaattien valmistusmenetelmä - Google Patents
Glyseroliasetaalin farmakologisesti käyttökelpoisten aminoasylaattien valmistusmenetelmä Download PDFInfo
- Publication number
- FI90421B FI90421B FI882705A FI882705A FI90421B FI 90421 B FI90421 B FI 90421B FI 882705 A FI882705 A FI 882705A FI 882705 A FI882705 A FI 882705A FI 90421 B FI90421 B FI 90421B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- formula
- paf
- dioxolane
- heptadecyl
- methyl
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
- C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
- C07D407/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
- C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
- C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/08—Bronchodilators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
- C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
Description
Glyseroliasetaalin farmakologisesti käyttökelpoisten aminoasy- laattien valmistusmenetelmä - Förfarande för framställning av farmakologiskt användbara aminoacylater av glycerolacetal 1 90421
Keksinnön kohteena on glyseroliasetaalin uusien aminoasylaat-tien valmistusmenetelmä. Esillä olevan keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetut yhdisteet ovat yleiskaavan I mukaisia glyseroliasetaalin aminoasylaatteja I 2 \ / 1
I C
CH — O'' ^2 I
I Θ ch2o co(ch2)p-n J x jossa on substituoitu fenyyliryhmä tai kaavan Cn^2m + 1 mukainen ryhmä, jolloin m on kokonaisluku 9-25, R2 on vetyatomi, fenyyliryhmä tai kaavan CnH2n + χ mukainen ryhmä, jolloin n on kokonaisluku 1-10, p on kokonaisluku 3-10, -N ) on pyndxum, 3-tiatsclinium, kinolinium ja isokinolinium, ja Xö tarkoittaa halogeeni-ioneja, kuten klooria, bromia tai jodia.
2 90421
Keksinnön mukaisesti saadut yhdisteet ovat mielenkiintoisia PAF:in vastaisina aineina (PAF, Platelets Activating Factor), jolloin niillä on vastaava aktiivisuus anti-anafylaktisina, antitromboottisina, verihiutaleiden kasautumista estävinä, keuhkoputken supistumista estävänä, normo-tensiivisinä ja anti-iskeemisinä aineina, immunodepressoreina. Lisäksi ne ovat aktiivisia esimerkiksi munuaisten immuunimuutoksia vastaan, erilaisia shokkeja vastaan, ihoallergioita vastaan ja endotok-siinin indusoimia suolistohaavaumia vastaan.
Keksinnön mukaisessa menetelmässä saatetaan reagoimaan pieni stökiömetrinen ylimäärä kaavan R^COR2 mukaista aldehydiä tai ketonia, joissa R^ ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä, glyserolin kanssa polaarittomassa liuottimessa p-tolueenisul-fonihapon läsnäollessa ja ref 1uksointiolosuhteissa, saatu 4-hydroksimetyy1i-1,3-dioksolaanijohdos saatetaan reagoimaan huoneen lämpötilassa kaavan ClCO(CH2)pX mukaisen »-halogeenisi kanoyyl iki or idin kanssa, jossa p ja X tarkoittavat samaa kuin edellä, orgaanisen emäksen, kuten trietyyliamiinin läsnäollessa ja saatu yhdiste, jonka kaava on E O R, X 1 o R2
OCO(CH2)p-X
saatetaan reagoimaan typpikierron alla 50 - 80°C:ssa kaavan ”0 mukaisen typpipitoisen heterosyklisen yhdisteen kanssa.
_* . Tätä menetelmää on havainnollistettu seuraavan reaktiokaavion avul1 a.
3 90421
Vaiheet E o R, x 1 O R- a w 2 O R.
N Et f X
+ Cl CO(CH_) X -La LO R. b 2 P CHClT7 f 2
J LoCO(CH2)p X
3 r—O R.
X e N' * 2 φ Θ
L-OCO (CH2) p “ X I
• · * · ·
Keksinnön mukaista menetelmää on havainnollistettu seuraa-vien esimerkkien avulla. Esimerkki 1 on esitetty kokonai-- suudessaan; seuraavissa esimerkeissä on annettu vain substi- *'·· tuenttien ja saatujen yhdisteiden tunnusmerkit (ellei toisin ole mainittu, TLC on suoritettu silikageelilevyillä).
4 90421 ESIMERKKI 1 2-heptadekyyli 2-metwli 4-/4 1 -(N-pyridinium)butvrvvlioksime-twli/-l. 3-dioksolaanikloridi © .
R1 “ C17H35 ' R2 * CHo ' “N\)a Pyridinyyli, X " C1' p " 3*
Vaihe a: 2-heptadekyyli 2-metwli- 4-hvdroksimetwli-l.3-_ dioksolaanin valmistaminen, a
Sopivaan reaktoriin kaadetiin 11,1 g (40 millimoolia) 2-nonadekanonia, 6 g - mikä on enemmän kuin stökiömetrinen määrä - kahdesti tislattua glyserolia ja 0,6 g p-tolueeni-sulfonihappoa liuotettuna 120 ml:aan kuivaa tolueenia. Reaktioseosta refluksoitiin sekoittaen 12 tuntia ja saatu vesi poistettiin Dean'in ja Stark'in laitteen avulla. Jäähdyttämisen jälkeen pestiin orgaaninen faasi 30 ml:11a kaliumhydroksidin 5-painoprosenttista vesiliuosta ja sen jälkeen kolme kertaa minimimäärällä vettä. Vedettömällä natriumsulfaatilla kuivaamisen jälkeen poistettiin liuotin alipaineessa. Jäännös puhdistettiin tämän jälkeen kromato-graafisesti silikageelipylväässä. Peräkkäin eluoituivat reagoimattoman ketonin jae (petrolieetteri:dietyylieetteri, 95:5 tilavuudesta laskettuna) ja sen jälkeen dioksolaani a (petrolieetteri/dietyylieeteri 85:15 til.). Dioksolaani on viskoosinen tuote, joka osittain on kiteytynyt.
Saanto: 11 g (78 %) RF: 0,18 (petrolieetteri/dietyylieetteri 70:30 til.) IR: 3500 cm-1 (OH) 1100 - 1060 cm'1 (C-0-).
5 90421
Vaihe b: 2-heptadekyyli-2-metwli-4- ( 4 1 -klooributvrvvlioksi-metyyli) 1,3-dioksolaani. b
Seos, joka sisälsi 6,4 g (18 millimoolia) edellä vaiheessa (a) kuvatulla tavalla valmistettua 2-heptadekyyli 2-metyyli- 4-hydroksimetyyli-l,3-dioksolaania ja 6 ml (45 millimoolia) trietyyliamiinia 15 mltssa kuivaa kloroformia, lisättiin tipottain 0°C:ssa liiCkseen, joka sisälsi 6,25 g (22 millimoolia) 4-klooributyryylikloridia 10 ml:ssa kuivaa kloroformia. Seosta sekoitettiin 12 tuntia huoneen lämpötilassa. Seokseeni isättiin 20 ml kloroformia, minkäjälkeen seos pestiin natriumhydroksidin IN vesiliuoksella ja sen jälkeen vedellä, kunnes pH oli 7. Poistamalla liuotin saatiin jäännös, joka kromatografoitiin silikageelipylväässä käyttämällä eluointlaineena petrolieetteri:dietyylieetteri-* seosta, aluksi 95:5, sen jälkeen 90:10 ja lopuksi 80:20 : til. Näin saatiin 7,6 g (saanto 82 %) öljymäistä tuotetta, joka kiteytyi; sulamispiste 39-40°C. Tämä tuote on kahden :\· cis- ja trans-isomeerin seos (näiden erottamienn on vaikeaa), .y. RF: 0,45 ja 0,37 (petrolieetetri/dietyylieetteri 80:20 til.) IR: 1740 cm'1 (C=0) 1180 - 1160 cm'1 (C-O-C .eetteri ja esteri) NMR 60 mHz, CDCl-j, (TMS.) δ: 0,9 (tripletti, 3H, ketjun CH3) 1,3 (mult. , 35.H, 32H + CH3) 2.1 (mult. , 2H, CO-CH2-CH2) 2.5 (tripletti, 2H CO-CH2) 3.6 (mult. , 4H, CH2-0 ja CH2Cl) 4.2 (mult. , 3H, CH2OCO ja CH-0) .
:.*'i Vaihe c: 2-heptadekyyli 2-metvvli 4-/41-(N-pyridinium)- butvrwlioksiemtwli/-l. 3-dioksolaanikloridi. I.
5 g edellisessä vaiheessa (b) saatua yhdistettä, joka oli liuotettu 30 ml:aan pyridiiniä, sekoitettiin 24 tuntia typen alla 80°C:ssa. Tämän jälkeen ylimääräinen pyridiini 6 90421 positettiin alipaineessa ja jäännös puhdistettiin kromato-graafisesti silikageelillä. Eluoiraalla kloroformilla (jotta saataisiin talteen reagoimaton lähtöaine) ja sen jälkeen kloroformi/metanolilla, ensin 90:10, sen jälkeen 80:20 til. saatiin 3,80 g otsikkoyhdistettä. Tämä tuote on kahden cis- ja trans-isomeerin seos (näiden erottaminen on vaikeaa), kokonaissaanto 40 % (tässä vaiheessa 65 %).
Sulamispiste: 84-85°C
Rf: 0,28 (CHCl3/MeOH 70:30, til.) IR (Nujol) 1740 cm-1 1630 cm 1 (pyridiini) 1200, 1180 cm"1 (C-O-C) NMR, 250 MHZ, CDC13 δ: 0,9 (tripletti, 3H, CHj) 1,2 (sing, suuri 30H) : 1,55 (mult., 2H, 2,35 (mult., 2H, CO CH2-CH2) : 2,6 (tripletti, 2H, CO CH2) 3.9 (mult., 1H, CH-O) 4 (mult., 2H, CH20 CO) 4,2-3,6 (2 mult., 2H, CH20) (kahden diastereoisomeerin)
5.10 (mult., 2H, CH2N
8 (mult., 2H, H„) ) P ) 8,4 (mult., 1H, Ηγ) j pyridinium 9,6 (dub., 2H ) a
Massaspektri: M - Cl m/z : 504 <ö) —(CH2)3—C02H : 166 7 90421 ESIMERKKI 2 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/41 (N-kinolinium)butyryylioksi-metyyli-1, 3-dioksolaanikloridi
Vaihe c: 5 g esimerkissä 1 (vaihe b) saatua yhdistettä liuotettiin seokseen, jossa oli 20 ml kinoliinia ja 20 ml dimetyylisulfoksidia, kuumennettiin 4 päivää typen alla 80°C:ssa. Kinoliini ja DMSO tislattiin pois alipaineessa ja jäännös kromatografoitiin silikageelipylväässä (eluoitiin peräkkäin kloroformilla ja sen jälkeen CHCl^/MeOH 95:5-seoksella). Haluttua tuotetta saatiin 2,5 g kahden diaste-reomeerin seoksena.
Rf: 0,58 (CHCWMeOH, 70:30) J _i IRv kinoliini 1650, 1630 ja 1600 cm Massaspektri: !:** m - ci m/2 . 554 — (CH2)3 — COgH : 216.
NMR kinolinium pyridiniumin asemesta.
δ ppm: 7,90 - 8,10 (4H, 8,70 (1H), 8,90 (1H), 10,90 (1HJ.
:A: ESIMERKKI 3 2-heptadekwli 2-metyyli 4-/4 1-(N-tiatsolinium)butyryyli-.*·. oksimetyyli/-!, 3-dioksolaanikloridi
Vaihe c: 850 mg esimerkissä (vaihe b) saatua tuotetta kuumennettiin 24 tuntia 80°C:ssa tiatsolin (4 ml) ja di-metyylisulfoksidin (6 ml) seoksessa. Seos haihdutettiin tyhjössä ja jäännös kromatografoitiin silikageelipylväässä, eluointiaineena CHCl^/MeOH 50:50, jolloin saatiin viskoosinen tuote.
8 90421
RfT 0,34 (CHCl3/MeOH 70:30) NMR tiatsoliniumin asemesta pyridinium δ ppm: 8,19 (d : 1H), 8,4 (d : 1H), 10,90 (sing. 1H)
Massaspektri: M - Cl; 510 m/z.
ESIMERKKI 4 2-heptadekyyli 4-/41 -(N-pyridiniuro) butyryylioksimetwli- 1.3- dioksolaanikloridi 0 R1 = ci7H35' R2 = H' = pyridinyyli, X = Cl, p = 3._ 2b Rf: 0,17 (petrolieetteri/dietyylieetteri 30:70 til.) 2b Rf; o,37 (petrolieetteri/dietyylieeetteri 70:30 til.) 1^ Rf: 0,16 (kloroformi/metanoli 70:30 til.) NMR CH^.-n asemesta kohdassa 1,4
_ -O
2 multiplettia, joiden keskus 4,9 ppm ^
Massaspektri: M - Cl: 490 m/z.
ESIMERKKI 5 2-heptadekyyli 4-/41 -(N-kinolinium)butvrwlioksimetyyli/- 1.3- dioksolaani-kloridi Θ R1 * c17H35 / *2 - H, . . , . .
Γ ) = kinolmium, χ » ci , p - 3.
Rf: 0,48 (kloroformi/metanoli 70:30 til.) ESIMERKKI 6 2-heptadekyyli 2-(n-propvvli) 4-/4 * -(N-pyridinium)butvrwli-oksimetwli/-!. 3-dioksolaanikloridi 0
Ri = C17H35' R2 = η'ΡΣ'οΡΥΥ11» “N= pyridinyyli, C = Cl, p = 3.
9 90421 2 c Rf: 0,23 (petrolieetteri/dietyylieetteri 70:30 til.) 2c Rf: 0,38 (petrolieetteri/dietyylieetteri 80:20 til.) I Rf: 0,20 (kloroformi/raetanoli 70:30 til.) v 1 NMR CH,:n asemesta kohdassa 1,4 c 3 -0 CH_ - y 2 1,55 (mult. 4H ) 1,2 (32H) 0,9 (tripletti, 6H, 2CH^)
Massaspektri: M - Cl: 532 m/z.
ESIMERKKI 7 2-heptadekwli 2-metwli 4-/51 -(N-pyridinium)pentanoyyli-oksimetyyli-1,3-dioksolaanikloridi ® R1 e c17h35 / r2 " ch3 · “ pyridinyyli, X - Cl, p - 4.
Rf: 0,23 (kloroformi/metanoli 70:30).
ESIMERKKI 8 2-(3,4,5-trimetoksifenyyli) 2-metwli 4-/4 * -(N-pyridinium)-butyryvlioksimetwli/-!, 3-dioksolaanikloridi 0CH3 Θ R1 = -ζ q ^-och3 t r2 » ch3 , “N\y " pyridinyyli, x * Cl, p-3, -^OCH3 2 d Rf: 0,32 (kloroformi/metanoli 98:2 til.) 2d Rf: 0,61 (kloroformi/metanoli 98:2 til.)
Id Rf: 0,34 (kloroformi/metanoli 60:4 til.) 10 90421 IR 1735 (C=0) 1610 (pyridiini) 1590 (bentseeni) 2740 (OCH3) NMR ketjun asemesta -0 1,5 ppm 3H' ”° ch3) R2: lie 3.7 (sing. , 9H, OCH-j) 6.8 (2H.arom.)
Massaspektri: M - Cl: 432 m/z.
ESIMERKKI 9 2-heptadekyyli 2-metwli 4-/61 -(N-pyridinium)heksanoyvlioksi-metyyli-1,3-dioksolaanibromidi
Rl - C17H35 , r3 CH3, pytidinyyli, x * Br' ** " vaihe b: 2-heptadekwli 2-metwli 4-(61 bromiheksanowli-oksimetyyli)-1,3-dioksolaanibromidi
Noudattamalla esimerkissä 1 kuvattua menettelyä ja käyttämmällä 6-bromi-heksanoyylikloridia saatiin haluttu tuote viskoosi-sena tuotteena (saanto 82 %).
Rf: 0,57 (petrolieetteri/eetteri 80:20).
vaihe c: Noudattamalla esimerkissä 1 kuvattua menettelyä saatiin haluttu tuote viskoosisena tuotteena (saanto 70 %).
RF: 0,36 (CHCL,/MEOH 70: 30) -1 3 IR 3450 CM (vesjääma) vCO 1740, vC-O-C 1180, pyridiini 1640 cm"1 NMR 500 MHZ CDC13, 6 (TMS) 0,85 (tripletti, 3H, CH3); 1,25 (sing, suuri 30H); 11 90421 -°y 1,35 (d 3H, -0ACh3 Z + E); 1,45 (mult., 2H, CH^); 2,1 (mult., 2H, COCH2CH2)=; 2,35 (mult., 2H, COCH2); 3,70 ja 4,35 (mult., 2H, CH20, Z + E); 4 (mult. 3H, CH2OCO ja H-C-0); Θ 5,05 (tnpletti, 2H, CH2N).
pyridinium 8,1 (tripletti, 2H, Ηβ); 8,6 (tripletti, 1H, Ηγ); 9,5 (d: 2H, Ha).
U.V. (etanoli) loge 3,65 λ 258,8 nm.
Massaspektri: M - Br τα/z . 532 <2* — (CH2)3 — C02H : 194.
ESIMERKKI 10 2-heptadekwli 2-metwli 4-/6 1-(N-kinolinium)heksanowli-oksimetwli) -1,3-dioksolaanibromidi
Rf.i 0,60 _.(CHCl^/MeOH 70:30) IR kinolinium 1650, 1630, 1600 cm-1 U.V. (etanoli) logc 4,53 λ 235,4 nm 2,18 λ 316,5 nm NMR kinolinium pyridiniumin asemesta.
Θ δ : 5,5 (2H, CH2N), 7,90 - 8,40 (5H), 9,10 (1H), 10,70 (1H, Ha).
12 90421
Massaspektri: M - Br m/z : 582 (CH2)3— C02H : 244; ESIMERKKI 11 2-heptadekyyli 2-metwli 4-/61 - (N-isokinolinium)heksanowli-oksimetvvll)-1,3-dioksolaanibromidi vaihe c: Kinoliinin asemesta käytetään isokinoliinia.
Rf: 0,55 (CHCl3/MeOH 73:30) IR isokinoliini 1650, 1610, 1590 cm NMR isokinolinium kinoliniumin asemesta.
e δ : 5,15 (tripletti, 2H, CH2N); 7,95 - 8,40 (4H); 8,80 (2H); 11,05 (1H).
Massaspektri: M - Br : 582 m/z.
ESIMERKKI 12 2-heptadekyyli 2-metwli 4-/11(N-pyridiniumundekanoyyli-oksimetyyli)-1,3-dioksolaanibromidi »1 = C17H35/ R2 - CH3, pyridinyyli, X - Br, p - 10.
vaihe b: 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-(111-bromiunde- kyylioksimetyyli)-1,3-dioksolaani
Haluttu tuote saatiin käyttämällä 1-bromiundekanoyyli-kloridia ja noudattamalla esimerkissä 1 kuvattua menettelyä. Sulamispiste: 52°C (saanto 60 %) 13 90421
Rf: 0,26 (petrolieetteri/eetteri 85:15). vaihe c
Sulamispiste: 92°C
Rf: 0,45 (CHCl3/MeOH 70:30)
Massaspektri: M - Br: 602 m/z.
ESIMERKKI 13 2-heptadekwli 2-(n-propwli) 4-/5' - (N-pvridinium)heksanowli-metwli-1,3-dioksolaanibromidi R1 = C!7H35' R2 = n-propyyli, = ΡΥ^^ΥΥ11» ; X = Br, p = 5.
O Rf: 0,44 (CHCl3/MeOH 70:30)
: Sulamispiste: 7 6°C
Massaspektri: M - Br : 560 m/z.
ESIMERKKI 14 2-nonyyli 2-metyYli 4-/61 -(N-pyridinium)heksanoyylioksimetvy-li)-1,3-dioksolaanibromidi *l - C9Kl9' "2 CH3' \) pyridlnyyli, X = Br, P = 5.
’. vaihe b
Rf: 0,50 (petrolieetteri/eetteri 80:20) vaihe c
Rf: 0,30 (CHCl3/MeOH 70:30)
Massaspektri: M - Br : 420 m/z.
i4 90 421
TOKSILOGIA
Keksinnön mukaisia yhdisteitä on akuutin LD^-arvon määrittämiseksi annettu hiirille. Kaikille keksinnön mukaisille yhdisteille LD50 oli yli 300 mg/kg (IP tai SC) ja 600 mg/kg (PO) .
FARMAKOLOGIA
Keksinnön mukaisten yhdisteiden farmaseuttinen mielenkiintoisuus on osoitettu seuraavilla farmaseuttisilla kokeilla: 1°) - Verihiutaleiden kasautumisen estyminen New Zealand-kaniineilla
Koe suoritettiin New Zealand-kaniinien plasman verihiutaleilla. Verinäytteet otettiin korvavaltimosta ja laitettiin sitraat-tipuskuriin (3,8 %; pH 7,4); verta sentrifugoitiin edelleen 15 minuuttia nopeudella 1200 kierr./min. Testattava näyte valmistettiin dimetyylisulfoksidiin ja kaadettiin sen jälkeen minuutiksi runsasverihiutaleisen plasman päälle, minkä jälkeen lisättiin 2,5 nM PAF. Määritys suoritettiin Cronolog Coultronics-laitteella, joka määrittää transmissioprosentin, joka vastaa piikin suurinta korkeutta ennen kasautumien hajautumista. Transmissioprosentin suhteen lasketaan inhibii-tion prosentuaalinen vaihtelu (kontrolli: puhdas DMS09.
Tämä menetelmä on kuvattu yksityiskohtaisesti julkaisussa: LABORATORY INVESTIGATIONS, Voi. 41, No. 3, s. 275, 1979, JEAN-PIERRE CAZENAVE, Dr.MED., JACQUES BENVENISTE, Dr. MED., AND J. FRASER MUSTARD, M.D., "Aggregation of rabbits Platelets by Platelet-Activating Factor Is Independent of the Release Reaction and the Arachidonate Pathway and Inhibited by Membrane-Active Drugs".
Tulokset osoittavat, että nämä yhdisteet inhiboivat kasau-tmista, joka on indusoitu lisäämällä 2,5 nM PAF. Eri yhdisteiden IC^Q-arvot voitiin laskea lineaarisen regressioanalyy- is 90421 sin avulla käyttämällä viittä testiä, joissa oli viisi kaniinia.
PAF:n indusoiman verihiutaleiden kasautumisen inhibiitio kaniinien runsashiutaleisessa plasmassa.
Esimerkki n:o IC50 (M)
No. 1.................. 2,2 . 10”6
No. 2.................. 1,2 . 10"6
No. 3.................. 2,15 . 10"5
No. 4.................. 7 . 10"6
No. 5.................. 3,1 . 10”6
No. 6.................. 3,04 . 10-6
No. 7.................. 5 . 10"6
No. 8.................. 1,13 . 10“5 : No. 9.................. 4,04 . 10"7
No. 10.................. 3,03 . 10"7
No. 12.................. 3,12 . 10“5 • No. 13.................. 1,73 . 10"6
No. 14.................. 1.46 . 10"6 • - i ie 90421
2 - SITOUTUMINEN MATERIAALIT JA MENETELMÄT
3 Käytetty synteettinen tritioitu / H/-PAF oli etanoliliuok-sena, jonka spesifinen aktiivisuus oli 59,5 ci/mmols. Leimaamaton PAF ja lyso-PAF liuennettiin etanoliliuokseen ja liuoksia säilytettiin -80°C:ssa. Yhdisteet liuennettiin dimetyylisulfoksidiin.
Verihiutaleiden membraanipreparaatit
Kaniinin kokoverta (6 tilavuusosaa) otettiin keskimmäisestä korvavaltimosta yhteen tilavuusosaan ACD-liuosta (sitruuna-happo 1,4 g, natriumsitraatti 2,5 g, dekstroosi 2 g per 100 ml vettä) ja sentrifugoitiin 15 minuuttia 150 g voimalla. Runsashiutaleinen plasma (PRP) poistettiin varovasti ja sitä sentrifugoitiin 15 minuuttia 1000 g voimalla. Sen jälkeen hiutalepelletti pestiin kolme kertaa: kaksi kertaa Tris-HCl-puskurissa, 10 mM, pH 7,4, jossa NaCl 150 mM,
MgCl2 5 mM, EDTA 2 mM, ja lopuksi samassa, mutta natriumia sisältämättömässä puskurissa.
Hiutalepelletti suspendoitiin uudelleen tähän jälkimmäiseen puskuriin, pakastettiin nopeasti nestemäisessä typessä ja sulatettiin hitaasti huoneen lämpötilassa vähintään kolme kertaa T. Y. Shen'in et ai. kuvaamalla tavalla. Lyysat-tuja verihiutaleita sentrifugoitiin 30 minuuttia 100000 g voimalla BECKAN model L8.55 ultrasentrifuugissa (roottori 50.2 Ti). Verihiutaleiden membraanihomogenaattia säilytettiin -80°C:ssa ja käytettiin kahden viikon sisällä ilman, että PAF-aseteetteri-sitouturaisessa tapahtuu huomattavia muutoksia.
Proteiinipitoisuus määritettiin Lowry-menetelmällä käyttämällä standardina naudanseerumialbumiinia.
i7 90421
Sitoutumismääritys 60 - 100 jig membraaniproteiineja lisättiin 1 ml lopputila-, vuuteen muoviputkiin, jotka sisälsivät 1 nM /^H/-PAF Tris- HCl 10 mM pH 7 puskurissa, joka sisälsi 0,025 % naudan-seerumialbumiinia, ja inkuboitiin yhdessä leimaamattoman PAF:n tai PAF-antagonistien kanssa tai ilman näitä. Inkuboin- ti tapahtui 1,5 tunnin aikana 0°C:ssa. Sitoutunut 3 3 / H/-PAF erotettiin vapaasta / H/-PAF:sta suodattamalla välittömästi Whatman GF/C lasikuitusuodattimien läpi tyhjössä (Brandel'in systeemi). Reaktioseos ja suodattimet pestiin kolme kertaa 5 ml:11a jääkylmää puskuria. Sen jälkeen suodattimet laitettiin polyetyleeniputkiin, jotka oli täytetty 10 ml:11a nesteskintillaationestettä, ja radioaktiivisuus mitattiin LKB β-laskimen alla 45 % tehokkuudella.
Epäspesifinen sitoutuminen määritettiin, kun mukana oli 10-6 leimaamatonta PAF. Spesifinen sitoutuminen laskettiin vähentämällä epäspesifinen sitoutuminen kokonaissitoutumi- 3 sesta. Spesifiseen / H/-PAF:n sitoutumiseen kohdistuva yhdisteiden inhibiitiovaikutus määritettiin seuraavan kaavan avulla inhibiitioprosenttina: 3 2 ( H-PAF, sitoutunut yhdis-) ( H-PAF. sitoutunut, (telden läsnäollessa >
Inhibiitio-% yht«"e,lsä)_ x 100 3 - H-PAF, spesifisesti sitoutunut
Esimerkki n:o IC50
No· 1................. 4,5 . 10”7
No· 9................. 3,5 . 10“e
No· 10................. 3,5 . 10”8
No. 14................. 6rl . 10“7 is 90421
3 - PAF:N INDUSOIMA BRONKOKONSTRIKTIO, LEUKOPENIA JA TROMBOSYTOPENIA MARSULLA
MATERIAALIT JA MENETELMÄT
Urosmarsut (400 - 500 g) anestetisoitiin uretaanilla (1,5 g/kg: IP) ennen henkitorven avaamista ja ventiloitiin hengi-tyspumpun avulla (UGO BASILE) (70 - 80 henkäystä minuutissa, 1 ml ilmaa/100 g/henkäys) spontaanin ilmarinnan estämiseksi. Laajenemisvastus mitattiin painemuuntimella (UGO BASILE) Konzett'n ja Rossler'in mukaisesti 10 cm H20 alkupainetta vastaan. Eläimet jaettiin ryhmiin ja käsiteltiin keksinnön mukaisilla yhdisteillä tai käsittelyä ei suoritettu (0,05, 0,1, 0,5, 1 ja 5 mg/kg). Tuotteet annettiin i.v. 1 tunti ennen PAF:lla haastamista.
Eläimet haastettiin intravenöösisti annetuilla eri PAF-annoksilla (30 - 100 n/kg) ja laajenemisvastuksen muutokset rekisteröitiin.
Verinäytteet otettiin ennen PAF:lla haastamista ja 1,5 ja 10 minuuttia sen jälkeen. 40 pl verta laimennettiin 10 ml:aan isotonia (Coultronics, Ranska); erytrosyytit lyysattiin Zapoglobin-tuotteella (Ranska), ennenkuin leukosyytit laskettiin coulter -laskimessa. Verihiutaleiden lukumäärän määrittämistä varten laimennettiin 40 ^ul verta 2 ml:aan isotonia ja sentrifugoitiin 30 minuuttia nopeudella 100 kierr./min., otettiin 100 pl supernatanttia ja laimennettiin edelleen 10 ml:aan isotonia ennen laskemista coul-ter-laskimessa.
i9 90421
Taulukko n:o 1; 2-heptadekyyli 2-metyyli-4-/6'-(N- pyridinium)heksanoyylioksimetyyli/-l,3-dioksolaani-bromidin vaikutus PAF:n indusoimaan bronkokonstriktioon.
Annos Prosentuaalinen Prosentuaa- ’ mg/kg IV n bronkokonstriktio linen vaihtelu _ ^^ * „ . ,,. - 8 79,8 +/“ 3/22
Kontrolli f ' ' 5 3 3.5 +/“ 1,53 - 95,6 ***
Esimerkin 1 4 19,1 +/- 10,51 - 76,1 *** 0,5 6 23,6 +/” 7.15 - 70,4 *** n:o 9 0,1 6 43,8 +/- 14,77 - 45,1 **
yhdiste o, 05 3 79^.0 +/~ 9,27 - 1^0 NS
Kaikkien taulukoiden selitykset: NS : ei merkitsevä * : P < 0,05 ** ·’ P < 0,01 *** : p < 0,001
Taulukko n:o 2: 2-heptadekyyli 2-metyyli-4-/61 -(N-pyridinium)- heksanoyylioksimetyyli/-l, 3-dioksolaanibroniidin vaikutukset PAF:n indusoimaan leukopeniaan.
20 90 421 :Leukosyy-ttien Prosentuaa-Annos n Aika. määrän prosenr. linen mg/kg IV *(mnj tuaalinen lasku vaihtelu 8 1 4 0^ 8 +/” 7,18 -
Kontrolli ’ 5 29,2 ♦/- 10,89 8 10 33,5 +/- 5,04 3 1 16f5 +/- 2,42 - 59,6 *
5 3 5 15,9 +/” 0,99 - 45,5 NS
3 10 18,7 +/“ 5,08 - 44,2 NS
4 1 3,5 +/“ 12,60 - 91,4 **
Esimerkin 1 4 5 2,9 +/- 10,51 -90,1* 4 10 1,0 V- 22,62 - 97,0 **
6 1 34,6 +/- 6,35 - 15,2 NS
n:o 9 ----------
0,5 6 5 19,0 +/- 6,42 - 34,9 NS
6 10 14,6 +/- 5,36 - 56,4 NS
6 1 41,8 +/- 6,50 + 2,5 NS
yhdiste --------
0,1 6 5 31,9 +/- 4,88 - 9,2 NS
6 10 33,5 +/“ 4,65 0,0 NS
3 1 45,3 +/" 5,70 + 11,0 NS
0,05 3 5 21,6 +/- 3,42 - 26,0 NS
3 10 14,2 +/“ 17,30 - 57,6 NS
Taulukko n:o 3: 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-pyridinium)- heksanoyylioksimetyyli/-l,3-dioksolaanibro- midin PAF; n indusoimaan trombosytopeniaan 21 90 421
Leukosyyttien Prosentuaali Annos Aika määrän pro- · -J
mg/Kg IV n (mn) sentuaalinen nen vaihte£u lasku 8 1 68,6 +/“ 6,79
Kontrolli _ 8 5 42 , 4 +/** 2,71 8 10 4 2,5 +/“ 3 , 14 3 1 4,2 +/“ 2,35 - 93,9 ***
Esimerkin 5 35 5,6 +/” 1,84 - 86,8 *** 3 10 1,1 +/- 1,15 - 97,4 *** 4 1 11,5 +/“ 6,21 - 83,2 *** 145 22,5 +/” 3,27 - 46,9 * n:° 9 4 10 21,0 +/- 3,87 - 50,6 * ' 6 1 19,3 +/” 10,19 - 71,9 *** t .mm m— - - 0.5 6 5 9,6 +/- 12,15 - 77,4 *** 6 10 10,9 +/- 9,94 - 74,4 *** yhdiste _J__1 30,1V- 13,72 -56,1**
0.1 6 5 34,7 +/” 3,60 - 18,2 NS
6 10 42,3 V- 4,79 - 0,5 NS
3 1 45,2 +/- 1,20 - 34,1 NS
0.05 3 5 43,0 +/" 4,80 + 1,4 NS
3 10 36,1 +/- 2,41 - 15,.1 NS
22 90 421
Taulukko nro 4: 2-heptadekyyli 2-metyyli-4-/6’—(N— kinolinium)heksnaoyylioksimetyyli/-l, 3-dioksolaanibromidin vaikutukset PAF:n indusoimaan konstriktioon
Annos Prosentuaalinen Prosentuaa- mg/kg IV n bronkokongtrik- linen tio vaihtelu 6 90,8 +/- 0,95
Kontrolli 1 5 8,1 +/- 2,91 - 91,1 ***
Esimerkin __ 0.5 5 25,1 +/- 6,53 - 72,4 *** n:o 10 _
0.1 5 80,4 +/" 13,78 - 11,.5 NS
yhdiste ___________
Taulukko n:o 5 2-heptadekwli 2-metyyli-4-/6 ' ~ (N-kinolinium) - heksanoyylioksimetyyli/-l,3-dioksolaanibromidin vaikutukset PAF:n indusoimaan leukopeniaan 23 90421
Anno ' Leukosyyttien- p^psentuaa,--
Annos Aika määrän-prosed .
m<?/kg IV n (nm) tuaaliriSh lSSku linen _ _ _v· ·'''**__vaihtelu 6 1 ; 41,4 +/~ 8*0 . ^
Kontrolli 6 5 28,7 +/- 6»9 > ** ' * __ 6 10 26;9 +/- 10»!
5 1 24,1 +/" 6/β " 41,0 NS
. . Esimerkin l 5 5 9^3 +/- 9^4 - 67,6 ** 5 10 8,9 +/“ 1312 - 66,9 ** n:o 10 51 17,0 +/- 12,9 - 58,9 * 015 5 5 9,0 +/- 11/8 - 68,6 **
yhdiste —__J__10 - 7,6 V- 17,5 4» 128,3 NS
5 1 38,8 +/“ 6,3 + 6,3 NS
M 5 5 38,9 +/- 5,7 + 35,5 NS
___ 5 10 41,2 +/- 6,5 + 53,2 NS
24 90 421
Taulukko n:o 6: 2-heptadekyyli 2-metyyli-4-/6'-(N-kinolinium)-heksanoyylioksimetyyli/-l,3-dioksolaani-bromidin vaikutukset PAF:n indusoimaan trombosytopeniaan ... Leukosyyttien Prosen-
Annos. „ l a. m^ärän prosen- tuaalinen"' n (mn; tuaalinen lasku vaihtelu"1' 6 1 65,3 +/“ 8,5
Kontroll: --- 6 5 49,1 +/" 4,8 6 10 48,5 +/“ 0,5 5 1 19,3 +/“ 1,4 - 58,3 ***
Esimerkin 1 5 5 22,1 +/— 2,5 - 55,0 ** 5 10 19,4 +/“ 3,6 - 60,0 ** 5 1 26,2 +/” 8,3 - 59,9 ** n:o 1Θ -- 0,5 5 5 29|8 +/“ 1,7 - 39,3 * 5 10 32,1 +/” 5,8 - 33,8 *
yhdiste 5 1 51,1 +/" 12,1 - 21f7 NS
0,1 5 5 49,1 +/“ 8,8 0 NS
5 10 45,0 +/- 9,7 - 7,2 NS
25 90 421
TULOKSET
2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-pyridinium)heksanoyyli- oksimetyyli/-l,3-dioksolaanibromidi (0,5, 1 ja 5 mg/kg i.v.) ja 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/61(N-kinolinium)heksanoyy- lioksimetyyli/-l,3-dioksolaanibromidi (0,5 ja I mg/kg i.v.) estävät PAF:n indusoiman bronkokonstriktion ja PAF:n indusoiman trombosytopenian marsussa.
4 - ANTIGEENIN INDUSOIMA BRONKOKONSTRIKTIO, LEUKOPENIA JA TROMBOSYTOPENIA HETEROLOGISELLA SEERUMILLA PASSIIVISESTI HERKSITETYISSÄ MARSUISSA
Ovalbumiinin intravenöösi injisointi marsuihin, jotka on passiivisesti herkistetty kaniinin anti-ovalbumiini-: antiseerumilla, aiheuttaa bronkokonstriktion, johon .···. liittyy leukopeniaa ja trombosytopeniaa. Tämä anafylaktinen reaktio näyttää johtuvan histamiinin vapautumisesta \ . ja arakidonihappo-metaboliittien (prostaglandiinit, ; tromoboksaani A2 ja leukotrienit) muodostumisesta.
Näiden autakoidien vapautuminen marsussa välittyy pääasial-'·'* lisesti IgG-luokan immunoglobuliinien kautta.
MENETELMÄ :V: - Eläimet:
Hartley-urosmarsut, Charles River (450 - 550 g) - Immunisointimenetelmä: 18 tuntia ennen antigeenillä haastamista injisoidaan intravenöösisti 0,5 ml/kg kaniinin anti-kovalbumiini-antiseerumin 1/2-laimennusta.
26 90421 - Reaktio saadaan seuraavilla:
Ovalbumiini, 0,75 mg/kg,
Antigeenin intravenöösi injisointi 1 ml/kg lopputilavuudessa, Välittäjäaine, 0,15 M NaCl.
- Yhdisteet annetaan oraalisesti 2,5 ml/kg 1 tunti ennen antigeenillä haastamista. Anestesia saadaan injisoi-malla intraperitoneaalisesti etyylikarbamaattia (1,5 g/kg) 10 ml/kg. Seuratut parametrit ja tulosten ilmoittaminen: a - Bronkokonstriktio
Antigeenin indusoima bronkokonstriktio mm:nä (A), Maksimaalinen bronkokonstriktio mm:nä (B)
Prosentuaalinen bronkokosntriktio lasketaan seuraavasti:
A x 100 B
Neutrofiilit ja verihiutaleet laskettiin 1 minuutti ennen haastamista ja sen jälkeen 1,5 ja 10 minuutin kuluttua. Muutokset ilmoitettiin prosentteina arvoista, jotka saatiin 1 minuutti ennen haastamista.
Käytetty laitteisto: - Ugo Basile, Comerio, Italia,
Jyrsijäiden ventilaattori ref. 7025 Bronkokospami-muunnin ref. 7020
Kaksikanava-piirturi "GEMINI" ref. 7070 27 90 421
- Coultronics, FRANCE Coulters Counter Z B I
Taulukko n:o 7; 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N— ....... pyridinium)heksanoyylioksimetyyli/- 1,J-dioksolaanibromidin vaikutukset antigeenin indusoimaan bronkokonstriktioon • Λ ‘ Prosentuaalinen Prosentuaa-
Annos „ .........
mg/kg IV n bronkokonstrik- lirien tio vaihtelu r 6 71,9 +/- H,2
Kon-troll:. _ -- _ — s=s=s=sass>sssBss=ss3SSSS8aB i li il a i i I..I .ts : Esimerkin
yhdiste 5 8 51,3 +/~ 14,2 « 28,7 NS
28 90 421
Taulukko n:o 8: 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6 * -(N- pyridinium) heksanoyylioksimetyyli/ - 1,3-dioksolaanibromidin vaikutukset antigeenin indusoimaan leukopeniaan
Annos Aika Leukosyyttien Pfosentuaa- - määrän prosen- linen ' mg/kg IV n (mn) tuaalinen lasku irthibiitio * 6 1 - 11,8 +/- 5,1 > **· ' ^
Kontrolli--- 6 5 39,6 +/- 9 f 5 6 10- 53,9 +/- 7.1 - - , ---- ·- ,:aa»aaasas i ji naa ί m uiiLAi ·ΒΒΒη·ΟΒΒ
Esimerkir 8 1 - 15,6 +/- 6.6 + 32.,0 NS
nro 9----— . . -------------- yhdiste 5 8 5 - 8,7 +/- 10,7 - 78,0 * 8 10 12,3 +/“ 14,1 - 77(.2 * 29 90421
Taulukko n:o 9; 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6-(N-pyridiniura)- heksanoyylioksimetyyli/-l,3-dioksolaanibro-midin vaikutukset antigeenin indusoimaan trombosytopeniaan ... Leukosyyttien Prosentuaali-
Annos ai a_ määrän prosen- nen inhibiitio rog/kg IV n (mn) tuaalinön lasku ·' 6 1-6,8 +/- 2,7
Kontrolli --- „ - 6 5 39,7 +/- 12,5 6 10 - 26,1 +/- 8,1
Esimerkin 8 1 +0,3 +/- 7.9 - 104,4 NS
n: o 9 “ yhdiste 5 8 5 - 3,5 +/— 3,1 — 91,2
8 10 15,7 +/- 6,2 - 39,.8 NS
: TULOKSET
J · 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-pyridinium)heksanoyylioksi- metyyli/-l,3-dioksolaanibromidi (5 mg/kg i.v.) vaikuttaa antigeenin indusoiman leukopenian ja trombosytopenian vastaisesti alentamatta merkittävästi antigeenin indusoimaa bronkokonstriktiota.
5 - VAIKUTUS PAF:N AIHEUTTAMAAN HYPOTENSIOON ANESTETI SOI DULLA .·!·! ROTALLA
MATERIAALIT JA MENETELMÄ:
Sprague Dawlev-urosrotat (Charles River Breeding station) (250 - 300 g) anestetisoitiin etyylikarbamaatilla annoksella 1,2 g/kg i.p.
PAF:n intravenöösi injisointi aiheuttaa annoksesta so 90 421 riippuvan hypotension. Hoitotoimenpiteinä selvitettiin 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-pyridinium)heksanoyyli-oksimetyyli/-l,3-dioksalaanibromidin ja 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-kinoliniumheksanoyylioksimetyyli/- 1,3-dioksalaanibromidin vaikutukset PAF:n indusoimaa hypotensiota vastaan. Hypotensio aiheutettiin injisoimalla intravenöösisti suoraan penislaskimoon yksi ainoa annos PAF (1 jug/kg) tilavuuden ollessa 0,1 ml/100 g. Lääkkeet annettiin hypotension ollessa maksimaalinen, so. 3 minuuttia PAF:n injisoinnin jälkeen.
- Mitatut parametrit ja tulosten ilmoittaminen:
Mitattiin systolinen ja diastolinen valtimopaine (mmHg). Arvot on ilmoitettu keskiarvona +/- SEM seuraavissa käyrissä.
- Mittauslaite:
Gould PgQ-muunnin valtimopaineen mittaamiseksi,
Braun-perfuusiolaite,
Gould 8000 S polygraafinen piirturi 3i 90421 h™ Hg PAP:n anto 120- ...........................^^
110- | ? X
:j : z' /' kontrolli 1' i s' '30- '1 :/ / systolinen valtimo-
;l Ί s PAINE/AIKA
1 \ Ί S 80- \ ';/
70- Y
Yhdisteiden anto I I I l I l n l i i—i—i—i—i—;—|—|—|—|—|—i1— ;—r 0 1 3 4 5 6 10 15 20 30 mm nun Hg PAF : n anto 80- t i Exio*'' ..........1 —,t~— 70- l \ : kontrolli
50- \ ; X
\ ) DIASTOLINEN
L / / VALTIMOPAINE/LAITE
Yhdisteiden anto 30- -1 1 1—I 1 1 1 1 I I 1 I I I 1 I I I I i i i
013456 10 15 10 M
mm 32 90421
6 - PAF:N INDUSOIMAN LIUSKATUMAISTEN LEUKOSYYTTIEN KASAUTUMISEN VASTAVAIKUTUS
Liuskatumaiset leukosyytit (PMN, polymorphonuclear leukocytes) saatiin A. W. Ford-Hutchinson'in et ai. kuvaamalla tavalla (Br - J. Pharmacol. 76, 367 - 371, 1982). Solususpensiot (< 90 % PMN-leukosyyttejä) valmistettiin peritoneaalisista tulehdusnesteistä sen jälkeen, kun 300 g painaviin Wistar-urosrottiin oli ruiskutettu i.p. 5 ml 12-prosenttista (paino/tilavuus) natriumkaseinaat- tia.
Sentrifugoinnin jälkeen solut pestiin Hanks'in liuoksella ja suspendoitiin uudelleen MEM/Hepes 30 mM alustaan 7 (PM = 7,4) konsentraatiossa 10 solua/ml. PMN-leukosyyttien kasautumisen vahvistamiseksi lisättiin sytokalasiini B (5 pg/ml) 10 minuuttia ennen kasautumisen laukaisemista.
Valon transmittanssi solususpension (400 ^il) läpi mitattiin kaksoissäde-kasautumismittarilla (Chronolog Corp. Coultronics).
Kontrollikyvetti on solususpensio, joka on laimennettu MEM-alustalla 20 % solumäärästä. Ero vastaa 100 % transmit-tanssia. PAF lisättäessä tapahtuva transmittanssin muutos rekisteröitiin jatkuvasti.
2 minuuttia ennen PAF:n lisäämistä lisättiin PMN-suspensioon lääkeaineet, jotka oli liuennettu MEM/Hepes-puskuriin (4 μΐ).
TULOKSET - 8 10 M PAF indusoi tämän PMN-suspension 55-70-prosenttisen kasautumisien.
2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-pyridinium)heksanoyyli-oksimetyyli/-l,3-diosolaanibromidia 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-kinolinium)heksanoyylioksimetyyli/-l, 3- 33 9D421 dioksolaanibromidi inhiboivat tämän kasautumisen annoksesta riippuvalla tavalla, jolloin vastaavat IC^-arvot ovat:
2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-pyridinium)heksanoyyli-oksimetyyli/-1,3-dioksolaanibromidi: 5 x 10~7 M
2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-kinolinium)heksanoyyli-oksimetyyli)-l,3-dioksolaanibromidi: 10~^ M
7 - INHIBIITIOVAIKUTUS PAF:N INDUSOIMAAN VAPAAN KALSIUMIN INTRASYTOSOLISEEN MOBILISAATIOON PESTYISSÄ KANIININ VERIHIUTALEISSA
Kaniinin korvavaltimosta otettua verta laitettiin sitruuna-happo/natriumsitraatti/dekstroosiin ja antikoagulanttiin ja pestyt verihiutaleet valmistettiin . Ardlie'n et ai. mukaisesti, Brit. J. Pharmacology, 19, 7-17, 1970. Tromboksaanin indusoiman kasautumisen välttämiseksi r " niitä inkuboitiin asetyylisalisyylisuolan (100 μΜ, 30 minuuttia) kanssa. Sen jälkeen ne kuormitettiin fluoresoivan kalsiumindikaattorivärin quin 2 kanssa inkuboimalla quin 2 aseto-metyyliesterin kanssa (15 jiM dimetyylisulfoksidissa, 20 minuuttia huoneen lämpötilassa), joka tunkeutuu solumembraanin läpi ja joka hydrolyysin jälkeen jää verihiutaleeseen. Lääkkeitä esi-inkuboitiin verihiutaleiden kanssa 15 minuuttia samanaikaisesti CP/CPK-seoksen kanssa, joka tuhoaa erittyneen ADP:n.
Fluoresenssi mitattiin sen jälkeen, kun verihiutaleiden • suspensioon oli lisätty PAF (viritys λ = 339 nm, emissio λ = 492 nm). Fluoresenssin intensiteetti on 2+ verrannollinen solun vapaan kalsiumin määrään /Ca /i, joka voidaan kvantitatisoida Tsien'in et ai. kuvaamalla tavalla;, J. Cell Biol., 94, 325 - 334, 1982.
34 9 0 4 21
TULOKSET
-9 2 x 10 M indusoima verihiutaleiden stimulaatio nosti 2+ /ca /i-pitoisuuden lepotilan arvosta noin 150 nM arvoon 400 - 600 nM.
2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-pyridinium)heksanoyylioksi-metyyli/-l,3-dioksolaanibromidi ja 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-kinolinium)heksanoyylioksimetyyli/- 1.3- dioksolaanibromidi estävät konsentraatiossa -7 2+ 5 x 10 - M täydellisesti PAF:n indusoiman /Ca /i:n “ 8 mobilisaation. Konsentraatiossa 5 x 10 M on PAF:n vaikutuksen inhibiitio vastaavasti 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-pyridniumheksanoyylioksimetyyli/- 1.3- dioksolaanibromidilla 44 % ja 2-heptadekyyli 2-metyyli 4-/6'-(N-kinolinium)heksanoyylioksimetyyli/- 1.3- dioksolaanibromidilla 75 %.
POSOLOGIA
Ihmisterapiassa ja oraalisesti annettaessa ovat päiväannokset 0,1 - 0,5 mg tableteissa tai kapseleissa, joissa on enteerinen päällyste; i.v.-tavassa vastaavat päiväannokset ovat 0,01 - 0,05 mg. Hoito kestää yleensä 2-6 viikkoa.
Claims (1)
- 35 90421 Patenttivaatimus Menetelmä valmistaa farmakologisesti käyttökelpoisia yleiskaavan I mukaisia glyseroliasetaalin aminoasylaatteja CH___0 R, 2 / N , CH — O R2 ± | Θ CH O CO(CH_) — N' ) X * p jossa R^ on substituoitu fenyyliryhmä tai kaavan C^jm + 1 mukainen ryhmä, jolloin m on kokonaisluku 9-25, R2 on vetyatomi, fenyyliryhmä tai kaavan CnH2n + χ mukainen ryhmä, jolloin n on kokonaisluku 1-10, p on kokonaisluku 3-10, ®-ss=r\ -N___) on pyridium, 3- tiatsolinium, kinolinium ja isokinolinium, ja xO tarkoittaa haiogeeni-ioneja, kuten klooria, bromia tai - jodia, tunnettu siitä, että kaavan RxCOR2, jossa R^ ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä, mukaista aldehydiä tai ketonia saatetaan reagoimaan pieni stökiömetrinen ylimäärä glyserolin kanssa polaarittomassa liuottimessa p-tolueenisul--;· fonihapon läsnäollessa ja refluksointiolosuhteissa, saatu 4- hydroksimetyyli-l,3-dioksolaanijohdos saatetaan reagoimaan huoneen lämpötilassa kaavan ClCO(CH2)pX, jossa p ja X tarkoittavat samaa kuin edellä mukaisen »-halogeenialkanoyylikloridin kanssa orgaanisen emäksen, kuten trietyleeniamiinin läsnäollessa ja saatu yhdiste, jonka kaava on 36 90421 _° R. X 1 _o r2 _OCO(CH2)p-X saatetaan reagoimaan typpikierron alla 50 - 80°C:ssa kaavan "O mukaisen typpipitoisen heterosyklisen yhdisteen kanssa. 37 90 421 Förfarande for framställning av farmakologiskt användbara glycerolacetals aminoacylater med formeln I CH_— 0 R. I / \ CH _ 0 R_ I I θ CH20 CO(CH )_N^ ) x P där R^ är en substituerad fenylgrupp eller en grupp med formeln CmH2m + varvid m är heltalet 9 - 25, R2 är en väteatom, fenylgrupp eller en grupp med formeln CnH2n + 1/ varvid n är heltalet 1 - 10, p är heltalet 3 - 10, · -N___) ar pyndium, 3-tiazolinium, kinolinium och isokinolnium, och X0 avser hai ogen joner, säsom klor, brom eller jod, k ä n -netecknat därav, att en aldehyd eller keton med formeln R1COR2, där R^ och R2 avser det samma som ovan, omsätts med ett litet stökiömetriskt överskott glycerol i ett opolärt 1ösningsmedel i närvaro av p-toluensulfonsyra och under refluxförhäl1anden, det erhällna 4-hydroximetyl-1,3-dioxolanderivatet omsätts vid rumstemperatur med en «-halo-.. . genalkanoylkloridi med formeln ClCO(CH2)pX, där p och X avser det samma som ovan, i närvaro av en organisk bas, säsom tri-etylenamin och den erhällna föreningen med formel 38 90 421 — O R, X 1 -O R2 _OCO(CH2)p-X omsätts under kvävecirkulation vid en temperatur under 50 - 80°C med en kvävehaltig heterocykl isk förening med forme 1 n N0
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8713745 | 1987-06-12 | ||
| GB878713745A GB8713745D0 (en) | 1987-06-12 | 1987-06-12 | Aminoacylates of glycerol |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI882705A0 FI882705A0 (fi) | 1988-06-08 |
| FI882705A FI882705A (fi) | 1988-12-13 |
| FI90421B true FI90421B (fi) | 1993-10-29 |
| FI90421C FI90421C (fi) | 1994-02-10 |
Family
ID=10618794
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI882705A FI90421C (fi) | 1987-06-12 | 1988-06-08 | Glyseroliasetaalin farmakologisesti käyttökelpoisten aminoasylaattien valmistusmenetelmä |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4921865A (fi) |
| JP (1) | JPH0615540B2 (fi) |
| KR (1) | KR960005153B1 (fi) |
| AR (1) | AR245121A1 (fi) |
| AT (1) | AT396236B (fi) |
| AU (1) | AU621298B2 (fi) |
| BE (1) | BE1000700A4 (fi) |
| CA (1) | CA1337297C (fi) |
| CH (1) | CH674516A5 (fi) |
| DE (1) | DE3819829C2 (fi) |
| DK (1) | DK319188A (fi) |
| DZ (1) | DZ1215A1 (fi) |
| ES (1) | ES2009283A6 (fi) |
| FI (1) | FI90421C (fi) |
| FR (2) | FR2616326B1 (fi) |
| GB (1) | GB8713745D0 (fi) |
| GR (1) | GR1000889B (fi) |
| HK (1) | HK77191A (fi) |
| IE (1) | IE61447B1 (fi) |
| IN (1) | IN172782B (fi) |
| IT (1) | IT1218067B (fi) |
| LU (1) | LU87235A1 (fi) |
| MA (1) | MA21298A1 (fi) |
| MY (1) | MY103577A (fi) |
| NL (1) | NL192521C (fi) |
| NO (1) | NO170632C (fi) |
| NZ (1) | NZ224936A (fi) |
| OA (1) | OA08879A (fi) |
| PT (1) | PT87689B (fi) |
| SE (1) | SE466450B (fi) |
| SG (1) | SG73191G (fi) |
| TN (1) | TNSN88057A1 (fi) |
| ZA (1) | ZA884024B (fi) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2556849B2 (ja) * | 1986-02-13 | 1996-11-27 | 三共株式会社 | グリセリン誘導体 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4035178A (en) * | 1976-08-31 | 1977-07-12 | Fmc Corporation | Herbicidal 1,3-dioxanes |
| IN146343B (fi) * | 1976-08-31 | 1979-05-05 | Fmc Corp | |
| US4375474A (en) * | 1982-02-11 | 1983-03-01 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Dioxalane containing imidazole compounds, compositions and use |
| GB8612940D0 (en) * | 1986-05-28 | 1986-07-02 | Dow Chemical Co | Derivative esters |
-
1987
- 1987-06-12 GB GB878713745A patent/GB8713745D0/en active Pending
-
1988
- 1988-06-02 GR GR880100363A patent/GR1000889B/el unknown
- 1988-06-03 IN IN494DE1988 patent/IN172782B/en unknown
- 1988-06-06 ZA ZA884024A patent/ZA884024B/xx unknown
- 1988-06-06 AR AR88311036A patent/AR245121A1/es active
- 1988-06-07 US US07/203,733 patent/US4921865A/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-06-08 FI FI882705A patent/FI90421C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-06-08 NZ NZ224936A patent/NZ224936A/xx unknown
- 1988-06-08 CH CH2183/88A patent/CH674516A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1988-06-09 MY MYPI88000627A patent/MY103577A/en unknown
- 1988-06-09 NL NL8801484A patent/NL192521C/nl not_active IP Right Cessation
- 1988-06-09 LU LU87235A patent/LU87235A1/fr unknown
- 1988-06-09 MA MA21541A patent/MA21298A1/fr unknown
- 1988-06-09 SE SE8802162A patent/SE466450B/sv not_active IP Right Cessation
- 1988-06-09 PT PT87689A patent/PT87689B/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-06-10 AU AU17562/88A patent/AU621298B2/en not_active Ceased
- 1988-06-10 NO NO882564A patent/NO170632C/no unknown
- 1988-06-10 FR FR888807740A patent/FR2616326B1/fr not_active Expired
- 1988-06-10 IE IE175288A patent/IE61447B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-06-10 IT IT20940/88A patent/IT1218067B/it active
- 1988-06-10 ES ES8801806A patent/ES2009283A6/es not_active Expired
- 1988-06-10 OA OA59371A patent/OA08879A/xx unknown
- 1988-06-10 CA CA000569215A patent/CA1337297C/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-06-10 FR FR888807739A patent/FR2616432B1/fr not_active Expired - Fee Related
- 1988-06-10 TN TNTNSN88057A patent/TNSN88057A1/fr unknown
- 1988-06-10 BE BE8800667A patent/BE1000700A4/fr not_active IP Right Cessation
- 1988-06-10 DE DE3819829A patent/DE3819829C2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-06-10 DK DK319188A patent/DK319188A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-06-11 DZ DZ880076A patent/DZ1215A1/fr active
- 1988-06-11 KR KR1019880007029A patent/KR960005153B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-06-13 AT AT0152988A patent/AT396236B/de not_active IP Right Cessation
- 1988-06-13 JP JP63143818A patent/JPH0615540B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-09-03 SG SG731/91A patent/SG73191G/en unknown
- 1991-10-03 HK HK771/91A patent/HK77191A/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4656190A (en) | Indene derivatives and their use as PAF-antagonists | |
| RU2062778C1 (ru) | Производные бензимидазола и способ их получения | |
| PL187024B1 (pl) | Związki aminofosfoniowe, zastosowanie oraz sposóbich wytwarzania | |
| JPS6140294A (ja) | ２‐置換‐１，３‐プロピリデンジホスホネート誘導体およびその製法ならびに該誘導体を含有する薬剤組成物 | |
| FI90421B (fi) | Glyseroliasetaalin farmakologisesti käyttökelpoisten aminoasylaattien valmistusmenetelmä | |
| US4845129A (en) | Diaryl substituted cyclopentane and cyclopentene derivatives | |
| EP0289365A2 (en) | Novel nitrogen-containing compound | |
| US5134151A (en) | 2-picolylamine derivatives | |
| US5070139A (en) | 2,4-disubstituted 1,3-dioxolanes | |
| GB2205833A (en) | Aminoacylates of glycerol acetal | |
| CA1085856A (en) | Pyrrolidine and piperidine prostaglandin analogues | |
| US4062973A (en) | Sulfur-containing derivatives of cyclohexylphenyl-ethane | |
| US4634710A (en) | Tricyclic imidazole derivatives | |
| US4156730A (en) | Pharmaceutically active compounds, preparation thereof, intermediates useful in such preparation and compositions containing the compounds | |
| JPH0588713B2 (fi) | ||
| US3770743A (en) | 1-(1,3-dioxolan-4-yl-alkyl)-piperazines and piperazine alkane diols | |
| US4608381A (en) | Antiinflammatory 2-(trifluoroethylsulfonyl)benzimidazoles | |
| US4870098A (en) | Antagonists of leukotriene D4 | |
| Stealey et al. | Antagonists of leukotriene D 4 | |
| US4259490A (en) | 2-(Substituted amino)benz[cd]indoles | |
| JPS59104378A (ja) | カルボスチリル誘導体 | |
| Deason et al. | Leukotriene LTD 4 and LTB 4 antagonists | |
| CZ397091A3 (cs) | Azaspiranové deriváty a farmaceutické prostředky sjejich obsahem | |
| WO1992004332A1 (en) | Imidazole derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions | |
| PT85319B (pt) | Processo para a preparacao de derivados de imidazo {2,1-a} isoquinolinas substituidas na posicao 5 por um grupo heterociclico ou arilo substituido |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: SOCIETE DE CONSEILS DE RECHERCHES ET D APPLICATION |