NL192521C - Glycerolderivaten die een ammoniumgroep bevatten met werking tegen de bloedplaatjes activerende factor en farmaceutische preparaten die dergelijke derivaten bevatten. - Google Patents
Glycerolderivaten die een ammoniumgroep bevatten met werking tegen de bloedplaatjes activerende factor en farmaceutische preparaten die dergelijke derivaten bevatten. Download PDFInfo
- Publication number
- NL192521C NL192521C NL8801484A NL8801484A NL192521C NL 192521 C NL192521 C NL 192521C NL 8801484 A NL8801484 A NL 8801484A NL 8801484 A NL8801484 A NL 8801484A NL 192521 C NL192521 C NL 192521C
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- formula
- group
- paf
- heptadecyl
- methyl
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
- C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
- C07D407/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
- C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
- C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/08—Bronchodilators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
- C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
Description
1 192521
Glycerolderivaten die een ammoniumgroep bevatten met werking tegen de bloedplaatjes activerende tactor en farmaceutische preparaten die dergelijke derivaten bevatten
De onderhavige uitvinding heeft betrekking op glycerolderivaten met werking tegen de bloedplaatjes 5 activerende factor waarin op de glycerolzuurstofatomen substituenten aanwezig zijn waarvan er één een cyclische ammoniumgroep bevat.
Dergelijke glycerolderivaten zijn bekend uit de Europese octrooiaanvrage 0.138.559. Deze literatuurplaats beschrijft fosfatidylcholinederivaten die als anti-tumoimiddel even weikzaam zijn als bekende fosfatidylcholi-nederivaten met anti-tumorwerking, maar die minder giftig zijn.
10 Deze verbindingen: ketoalkylfosfolipiden, hebben ook een fungicide werking. De, eventueel cyclische, ammoniumgroep van deze verbindingen is door de groep -(CH^-OPiO) (O')- gebonden aan de glyceroyl-rest. Voor bepaalde verbindingen van de Europese octrooiaanvrage 0.138.559 wordt een werking tegen de bloedplaatjes activerende factor vermeld. De ketoalkylgroep in die verbindingen werd (zie: tabel 3) essentieel geacht voor de goede remming op bloedplaatjesaggregatie.
15 Er zijn nieuwe glycerolacetalen die een cyclische ammoniumgroep bevatten gevonden die werkzaam zijn als middel tegen de bloedplaatjes activerende factor.
doordat zij de algemene formule 1 van het formuleblad hebben waarin R, een gesubstitueerde fenylgtoep of een groep met de formule CmH2m+1, waarin m een geheel getal van 9 tot 25 is, voorstelt, R2 een waterstof· 20 atoom, een fenylgroep of een groep met de formule CnH2n*i, waarin n een geheel getal van 1 tot 10 is, voorstelt, p een geheel getal van 3 tot 10 is, de groep met formule 5 een pyridinium 3-thiazolinium, chinolinium, isochinolinium, imidazolinium en pyrazinium voorstelt, en X0 het anion van een farmaceutisch aanvaardbaar anorganisch of anorganisch zuur, een halogeenion zoals chloor, broom, jood of het anion van benzoêzuur, azijnzuur, methaansulfonzuur of wijnsteenzuur voorstelt, in de vorm van de gescheiden 25 isomeren of een mengsel daarvan.
De verbindingen volgens de uitvinding zijn werkzaam tegen de bloedplaatjes activerende factor en zijn dienovereenkomstig werkzaam als middel tegen anafylaxie, tegen thrombose, tegen aggregatie van bloedplaatjes, tegen vernauwing van bronchi, als middel voor het verkrijgen van normale bloeddruk en als middel tegen ischemie, als immunodepressiva; zij zijn ook werkzaam tegen immuunverandering van de nier, 30 tegen verschillende shocks, tegen huidallergieén en ingewandszweren, bijvoorbeeld veroorzaakt door endotoxine.
De verbindingen met formule 1 kunnen worden bereid volgens een werkwijze waarbij men een geringe stoechiometrische overmaat van een aldehyde of keton met de formule R1COR2, waarin R, en R2 de hierboven gedefinieerde betekenis hebben, laat reageren met glycerol in een niet-polair oplosmiddel, in 35 aanwezigheid van p-tolueensulfonzuur en onder refluxomstandigheden, het verkregen 4-hydroxymethyt 1,3*dioxolaanderivaat met formule 2 bij kamertemperatuur laat reageren met een ω-halogeenaikanoyl· chloride met de formule CICO(CH2)pX, waarin p en X de hierboven gedefinieerde betekenis hebben, in aanwezigheid van een organische base zoals triethylamine, en de verkregen verbinding met de formule 3 laat reageren, bij 50-80°C onder stikstofstroom, met een stikstof bevattende heterocyclische veibinding met 40 de formule 4. De verbindingen met formule 1 werden verkregen als een niet-gescheiden mengsel van diastereoisomeren, maar deze kunnen met gebruikelijke methoden worden gescheiden.
Deze werkwijze wordt toegelicht in reactieschema A.
De uitvinding voorziet tevens in een farmaceutisch preparaat dat een verbinding met de algemene formule 1 zoals hierboven gedefinieerd, gemengd met een farmaceutisch aanvaardbaar verdunningsmiddel 45 of drager, omvat.
De uitvinding wordt toegelicht aan de hand van de volgende voorbeelden. Voorbeeld I is volledig uitgewerkt; in de voorbeelden daarna worden slechts de betekenissen van de substituenten en de eigenschappen van de verkregen verbindingen gegeven. (Tenzij anders is aangegeven, woidt TLC op silicagelplaten uitgevoerd en zijn de genoemde verhoudingen vol/vol verhoudingen).
50
Voorbeeld t 2-heptadecyl-2-methyl-4-[4'-(N-pyridinio)-butyryloxymethyl]-1,3-dioxolaanchlori(ie formule 1 met: R1 = C17H35, R2 = CH3, groep met formule 5 = pyridinyl, X = Cl, p = 3.
192521 2
Stap a: Bereiding van 2-heptadecyl-2-methyl-4-hydroxymethyl-1,3-dioxolaan in een geschikt reactievat werd gegoten: 11,1 g (40 mmoi) 2-nonadecanon, 6g - een stoechiometrische overmaat - tweemaal gedestilleerde glycerol en 0,6 g p-tolueensulfonzuur, opgelost in 120 ml droge tolueen. Het reactiemengsel werd 12 uur onder roeren en onder terugvloeikoeling verhit, en het gevormde 5 water werd met een Dean-Stark-apparaat verwijderd. Na afkoelen werd de organische fase uitgewassen met 30 ml 5 gew.% kaliumhydroxyde-oplossing in water en vervolgens driemaal met de minimale hoeveelheid water. Na drogen over watervrij natriumsulfaat werd het oplosmiddel onder verminderde druk verwijderd. Het residu werd vervolgens gezuiverd door chromatografie op een silicagelkolom. Achtereenvolgens werd de fractie van het onomgezette keton (petroleumether:diethylether, volumeverhouding 95:5) en daarna 10 de titelverbinding (petroleumether/diethylether in volumeverhouding 85:15) geêlueerd. Het dioxoiaan is een viskeus product, dat gedeeltelijk kristalliseerde. Opbrengst 11 g (78%)
Rf: 0,18 (petroleumether/diethylether in volumeverhouding 70:30) IR 3500 cm'1 (OH) 1100 - 1060 cm'1(C-0-).
15
Stap b: 2-heptadecyl‘2-me1hyl-4-(4'-chloorbutyryloxy-methyl)-1,3-dioxolaan ---- Een mengsel van 6,4 g -(18-mmol) 2-heptadecyl-2-methyt-4-hydroxymethyl-1,3-diöxolaan, bereid zoals beschreven in stap (a) hierboven, en 6 ml (45 mmol) triethylamine in 15 mi droge chloroform werd bij 0eC toegedruppeld aan een oplossing van 6,25 g (22 mmol) 4-chloorbutyrylchbride in 10 ml droge chloroform. 20 Het mengsel werd 12 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na toevoegen van 20 ml chloroform werd het mengsel uitgewassen met 1N natriumhydroxyde-oplossing in water en vervolgens met water tot de pH 7 was. Na verwijdering van het oplosmiddel bleef een residu achter dat werd gechromatografeerd op een silicagelkolom met petroleumether: diethylether als loopvloeistof, in een volumeverhouding van achtereenvolgens 95:5,90:10 en tenslotte 80:20. Aldus werd 7,6 g (opbrengst 82%) verkregen van een olieachtig 25 product dat kristalliseerde; smeltpunt 39-40°C. Dit product is een mengsel van de twee cis- en trans-isomeren (scheiding daarvan is niet gemakkelijk).
Rf: 0,45 en 0,37 (petroleumether/diethylether in volumeverhouding 80:20) IR 1740 cm'1 (C=0) 1180-1160 cm'1 (C-O-C ether en ester) 30 NMR 60 MHz, CDCIg, (TMS.) 5: 0,9 (triplet, 3H, CHa van de keten) 1,3 (mult., 35H, 32H + CH3) 2.1 (mult., 2H, CO-CH,-CH,) 2,5 (triplet, 2H, CO-CH,) 35 3,6 (mult., 4H, CH2-0 en CH2CI) 4.2 (mult., 3H, CH2OCO en CH-O).
Stap c: 2-heptadecyl-2-methyl-4-[4'-(N-pyridinio)-butyryloxymethyl]-1,3<iioxo}aanchloride 5 g van de in de voorgaande stap (b) verkregen verbinding, opgelost in 30 ml pyridine, werd 24 uur onder 40 stikstof bij 80°C geroerd. De overmaat pyridine werd vervolgens onder verminderde druk verwijderd en het residu werd gezuiverd door chromatografie op silicagel. Door elutie met chloroform (voor het verkrijgen van onomgezette uitgangsstof) en vervolgens met chloroform/methanol in een volumeverhouding van 90:10 en daarna 80:20, werd 3,80 g van het titelproduct verkregen. Dit product is een mengsel van de twee cis- en trans-isomeren (scheiding daarvan is niet gemakkelijk), totale opbrengst 40% (65% voor deze stap).
45 Smeltpunt 84-65°C.
Rf: 0,28 (CHCIg/MeOH in volumeverhouding 70:30) IR (nujol) 1740 cm'1 1630 cm"1 (pyridine) 1200,1180 cm'1 (C-O-C) 50 NMR, 250 MHZ, CDCI3 δ: 0,9 (triplet, 3H, CH3) 1,2 (sing, groot 30H)
‘°X
1,4 (doublet, 3H, -0^ CH3) (de 2 CH3 van de tweede diastereoisomeren) 55 -0 CH2-
1,55 (mult., 2H,-0)X
2,35 (mult., 2H, CO CHo-CH,) 3 192521 2,6 (triplet, 2H, CO CH^ 3,9 (mult., 1H, CH-σ) 4 (mult., 2H, CHzO CO) 4,2-3,6 (2 mult., 2H, CH20) (van de twee diastereoisomeren) 5 5,10 (mult., 2H, CH2fy 8 (mult., 2H, Hp) pyridinium 8,4 (mult., 1 Η, Ηγ) 9,6 (doub., 2HJ Massaspectrum: 10 M-CI m/z verbinding met formule 6:166
Voorbeeld II
2-heptadecyl’2-methyl-4-[4 (N-chinoliniobutyryloxymethyl]-1,3-dioxolaanchloride 15 Stap c: 5g van de in voorbeeld I (stap b) verkregen verbinding werd opgelost in een mengsel van 20 ml chinoline en 20 ml DMSO, en 4 dagen onder stikstof op 80°C verhit. Chinoline en DMSO werden onder verminderde druk gedestilleerd en het residu werd op een silicagelkolom gechromatografeerd (eluens achtereenvolgens CHCI3, daarna CHCl3/MeOH 95:5). 2,5g van het gewenste product werd verkregen als een mengsel van de twee diastereoisomeren.
20 Rf: 0,58 (CHCIg/MeOH, 70:30) IR υ chinoline 1650,1630 en 1600 cm’1 Massaspectrum: M-CI m/z: 554 verbinding met formule 7:216.
25 NMR chinolinium in plaats van pyridinium.
8 ppm: 7,90-8,10 (4H), 8,70 (1H), 8,90 (1H), 10,90 (1Ηα).
---------- VoörbeeTdW
2-heptadecyl-2-methyl-4-[4’-(N-thiazolinio)‘butyryloxymethyl]-1,3-dioxolaanchloride 30 Stap c: 850 mg van het in voorbeeld I (stap b) verkregen product in een mengsel van thiazool (4 ml) en DMSO (6 ml) werd 24 uur op 80°C verhit. Het reactiemengsel werd onder vacuüm ingedampt en het residu werd op een silicagelkolom gechromatografeerd met CHCIs/MeOH 50:50 als elutiemiddel, waardoor een viskeus product werd verkregen.
Rf: 0,34 (CHCIg/MeOH 70:30) 35 NMR thiazolinium in plaats van pyridinium.
6 ppm : 8,19 (d:1H), 8,4 (d:1H), 10,90 (sing. 1H)
Massaspectrum: M-CI: 510 m/z
Voorbeeld IV
40 2-heptadecyl-4-[4'-(N-pyridinio)-butyryloxymethyl]-1,3-dioxolaanchloride R1 = C^Hps, R2 = H, groep met formule 5=pyridinyl, X = Cl, p = 3.
2 b Rf: 0,17 (petroleumether/diethylether in volumeverhouding 30:70) 3 b Rf: 0,37 (petroleumether/diethylether in volumeverhouding 70:30) 1b Rf: 0,16 (chloroform/methanol in volumeverhouding 70:30) 45 -°y 1b NMR in plaats van CH3 bij 1,4 (-0 x CH3) -0 2 multipletten rond 4,9 ppm (-0*H)
Massaspectrum: M - Cl: 490 m/z
50 Voorbeeld V
2-heptadecyl-4-[4'-(N-chinolinio)-butyryloxymethyl]-1,3-dioxolaanchloride R, = C17H35, Rz = H, groep met formule 5 = chinolinium, X = Cl, p = 3.
Rf: 0,48 (chloroform/methanol in de volumeverhouding 70:30).
192521 4
Voorbeeld VI
2-heptadecyl-2-(n-propyl)-4-[4'-(N-pyridinio)-butyryloxymethyl]-1,3-dioxolaanchloride R, = C17H35, R2 =n-propyl, groep met formule 5=pyridinyl, X = Cl, p = 3.
2 c Rf: 0,23 (petroleumether/diethylether in volumeverhouding 70:30) 5 3 c Rf: 0,38 (petroleumether/diethylether in volumeverhouding 80:20) 1C Rf: 0,20 (chloroform/methanol in volumeverhouding 70:30) 1C NMR in plaats van CH3 bij 1,4 -0 CH2-1,55 (mult. 4H -O * CH2.) 10 1,2 (32H) 0,9 (triplet, 6H, 2CH3)
Massaspectrum: M - Cl: 532 m/z.
Voorbeeld VII
15 2-heptadecyl-2-methyl-4-[5-(N-pyridinio)-pentanoyl-oxymethyl]-1,3-dioxolaanchloride R, = C17H35, R2 = CH3, groep met formule 5 = pyridinyl, X = Cl, p = 4.
----------Rf: 0,23 (chloroform/methanol 70:30).-------------- ---------------------------------------------
Voorbeeld Vilt 20 2-(3, 4, 5-trimethoxyfenyl)-2-methyl-4-[4'-(N-pyridinio)-butyryloxymethyl]-1,3-dioxolaanchloride R1 = groep met de formule 8, R2 = CH3, groep met formule 5 = pyridinyl, X = Cl, p = 3.
2 d Rf: 0,32 (chloroform/methanol in volumeverhouding 98:2) 3 d Rf: 0,61 (chloroform/methanol in volumeveihouding 98:2) 1d Rf: 0,34 (chloroform/methanol in volumeverhouding 60:40) 25 IR 1735 (C = O) 1610 (pyridine) 1590 (benzeen) 2740 (OCH3) 1d NMR in plaats van de keten R1 30 -0 1,5 ppm (m, 3H, -0 * CH 3) voor R2 3.7 (sing., 9H, OCH3) 6.8 (2H arom.)
Massaspectrum: M - Cl: 432 m/z.
35
Voorbeeld IX
2-heptadecyl-2-methyl-4-[&-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide R, = R2 = G-^, groep met formule 5 = pyridinyl, X = Br, p = 5.
40 Stap b: 2-heptadecyl-2-methyl-4-(6'-broomhexanoyloxymethyt)· 1,3-dioxolaanbromide
Volgens de methode zoals beschreven in voorbeeld I en onder toepassing van 6-broomhexanoylchloride werd het gewenste product als een viskeus product verkregen (opbrengst 82%).
Rf: 0,57 (petroleumether/ether 80:20).
Stap c: Volgens de in vooibeeld I beschreven methode werd het gewenste product als een viskeus product 45 verkregen (opbrengst 70%).
Rf: 0,36 (CHCIg/MeOH 70:30) IR 3450 cm'1 (achtergebleven water) I>co1740, t)c.o.c1180, ^^1640 cm'1 NMR 500 MH2 CDCI3, 5 CTMS) 50 0,85 (triplet, 3H, CH3); 1,25 (sing, groot 30H); •0 1,35 (d 3H, -0 yCH3, Z + E); 1,45 (mult., 2H, CHag); 2,1 (mult., 2H, COCH,CH,); 2,35 (mult., 2H, COCH2); 3,70 en 4,35 (mult., 2H, CH20, Z + E); 4 (mult., 3H, CH2OCO en H-C-0);e 55 5,05 (triplet, 2H, CH2N).
pyridinium 8,1 (triplet, 2H, Ηβ); 8,6 (triplet, 1H, Hy); 9,5 (d:2H, Ha).
5 192521 U.V. (Ethanol) log « 3,65 λ258,8 nm.
Massaspectrum: M - Br m/z : 532 Verbinding met formule 9 :194.
5
Voorbeeld X
2-heptadecyl-2-methyl-4-[ff-(N-chinolinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide Rf: 0,60 (CHClg/MeOH 70:30) IR chinolinium 1650, 1630,1600 cm*1 10 U.V. (Ethanol) log e 4,53 λ 235,4 nm 2,18 λ 316,5 nm NMR chinoliniurryn plaats van pyridinium.
5 : 5,5 (2H, CH2N), 7,90-6,40 (5H), 9,10 (1H), 1070 (1H, Ha).
Massaspectrum: 15 M-Br m/z :582
Verbinding met formule 10 : 244;
Voorbeeld XI
2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-isochinolinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide 20 Stap c: Isochinoline wordt gebruikt in plaats van chinoline.
Rf: 0,55 (CHCLj/MeOH 70:30) IR isochinoline 1650, 1610, 1590 cm'1.
NMR isochinolinium in pjgats van chinolinium.
5 : 5,15 (triplet, 2H, CH2N); 7,95-8,40 (4H); 8,80 (2H); 11,05 (1H).
25 Massaspectrum: M-Br: 582 m/z.
Voorbeeld XII
2-heptadecyl-2-methyl-4-[ 11'-(N-pyridinioundecanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide Rt = C17H3s, R2 = CH3, groep met formule 5 = pyridinyl, X = Br, p = 10.
30
Stap b: 2-heptadecyl-2-methyl-4-(1 V-broomundecanoyloxymethyl)-1,3-dioxolaan.
Volgens de in voorbeeld I beschreven methode en onder toepassing van 1 l-broomundecanoylchloride werd het gewenste product verkregen.
Smeltpunt: 52eC (opbrengst 60%) 35 Rf: 0,26 (petroleumether/ether 85:15).
Stap c
---------- Smeltpunt 92°C
Rf: 0,45 (CHCIa/MeOH 70:30)
Massaspectrum: M-Br 602 m/z.
40
Voorbeeld XIII
2-heptadecyl-2-(n-propyl-4-l&-(N-pyridinio)-hexanoylmethyl]-1,3-dioxolaanbromide Rt = C17H35, R2 = n-propyl, groep met formule 5 = pyridinyl, X = Br, p = 5.
Rf: 0,44 CHCIa/MeOH 70:30)
45 Smeltpunt: 76°C
Massaspectrum: M-Br 560 m/z.
Voorbeeld XIV
2-nonyi-2-methyl-4-[&-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide 50 Rn = CeH19, R2 = CH3, groep met formule 5 = pyridinyl, X = Br, p = 5.
Stap b
Rf: 0,50 (petroleumether/ether 80:20)
Stap c
Rf: 0,30 (CHCIa/MeOH 70:30) 55 massaspectrum: M-Br 420 m/z.
192521 6
Toxicologie
De verbindingen volgens de uitvinding zijn toegediend aan muizen ter bepaling van de acute LDS0. Voor alle verbindingen volgens de uitvinding bedroeg de LD^ meer dan 300 mg/kg (IP of SC) en 600 mg/kg (PO).
5 Farmacologie
Een bewijs van het farmaceutische belang van de verbindingen volgens de uitvinding is geleverd door de volgende farmaceutische proeven: 1 - Remming van de bloedplaatjesaggregaüe bij Nieuwzeelandse konijnen 10 De proef werd uitgevoerd op bloedplaatjes met plasma van Nieuwzeelandse konijnen. Bloedmonsters werden genomen uit de arteria auricularis en in een citraatbuffer (3,8%; pH 7,4) gebracht; het bloed werd verder 15 minuten bij 1200 omwentelingen per minuut gecentrifugeerd. De proefverbinding werd bereid in DMSO, daarna gedurende 1 minuut op bloedplaatjes-rijk plasma gegoten, waarna een dosis van 2,5 nM PAF werd toegevoegd. De bepaling wordt uitgevoerd op een Cronolog Coultronics apparaat dat het 15 transmissiepercentage bepaalt dat overeenkomt met de maximale hoogte van de piek vóór de des-aggregatie. Het percentage variatie van de remming met betrekking tot het transmissiepercentage wordt --------berekencMcontrole^zuiver DMSO).----------------------
Deze methode werd in detail beschreven in Laboratory Investigations, Vol. 41, No. 3, p. 275,1979,
Jean-Pierre Cazenave, Dr. Med., Jacques Benveniste, Dr. Med., en J. Fraser Mustard, M.D.,”Aggregation of 20 Rabbits Platelets by Platelet-Activating Factor Is Independent of the Release Reaction and the Arachidonate Pathway and Inhibited by Membrane-Active Dmg".
De resultaten laten zien dat de verbindingen de door 2,5 nM PAF teweeggebrachte aggregatie remmen.
Vijf proeven die uitgevoerd werden met 5 verschillende konijnen maakten het mogelijk de ICso van de verschillende verbindingen te berekenen onder toepassing van de lineaire regressietest.
25
Remming van de door PAF teweeggebrachte bloedplaatjesaggregatie in bloedplaatjes-rijk plasma van konijnen
Voorbeeld nr. IC^ PRP (M) 30 No. I 2,2 . 10 ®
No. II 1,2 . 10 ®
No. Ill 2,15 . 10'5
No. IV 7 .10 ®
No. V 3,1 . 10'® 35 No. VI 3,04 . 10 ®
No. VII 5 . 10 ®
No. VIII 1,13 . ισ5 _ ..... _ ____________________________________________
No jx 4,04 . 10'7
No. X 3,03 . 10'7 40 No. XII 3,12 . 10-5
No. XIII 1,73 . 10®
No. XIV 1,46 . 10-® 2 - Binding 45 Materiaal en Methode
Het gebruikte synthetische getritieerde ['3H]-PAF was aanwezig in ethanoloplossing met een specifieke activiteit van 59,5 ci/mmol. Niet gelabeld PAF en lyso-PAF werden gesolubiliseerd in ethanoloplossing en bewaard bij -80°C. De verbindingen werden gesolubiliseerd in DMSO.
50 Bloedplaatjesmembraan-preparaten
Volledig konijnebloed (6 volumina) werd afgenomen uit de centrale oorslagader en gebracht in 1 volume ACD-oplossing (citroenzuur 1,4 g, natriumcitraat 2,5 g, dextrose 2 g per 100 ml HzO) en 15 minuten gecentrifugeerd bij 150 g. Het bloedplaatjes-rijke plasma (PRP) werd voorzichtig verwijderd en 15 minuten bij 1000 g gecentrifugeerd. De bloedplaatjespellet werd vervolgens driemaal uitgewassen: tweemaal in 55 Tris-HCI-buffer 10 mM, pH 7,4 welke NaCI 150 mM, MgCI2 5 mM, EDTA 2 mM bevatte, en de laatste maal in dezelfde maar natriumvrije buffer.
De bloedplaatjespellet werd opnieuw gesuspendeerd in deze laatste buffer, en ten minste driemaal snel 7 192521 bevroren in vloeibare stikstof en langzaam ontdooid bij kamertemperatuur, zoals beschreven door T.Y. Shen c.s.. De gelyseeide bloedplaatjes werden 30 minuten gecentrifugeerd bij 100.000 g (in een Beekman model L8.55 ultracentrifuge (rotor 50,2 Ti)). Het bloedplaatjesmembraan-homogenaat werd bij -80°C bewaard en binnen twee weken gebruikt zonder merkbare veranderingen in de PAF-acether bindingseigenschappen.
5 Het proteïnegehalte werd bepaald met de Lowry-methode met behulp van runderserumalbumine als standaard.
Bindingsproef 60 tot 100pg membaanproteïnen werden toegevoegd tot een eindvolume van 1 ml in plastic buizen die 1 10 nM f^Hj-PAF in Tris-HC110 mM pH 7 buffer met 0,025% runderserumalbumine bevatten, en geïncubeerd met of zonder niet-gelabeld PAF of PAF-antagonisten. De incubatie werd uitgevoerd bij 0°C gedurende 1 uur en 30 minuten. Het gebonden ("^Hj-PAF werd gescheiden van het vrije [^Hj-PAF door onmiddellijke filtratie via Whatman GF/C glasvezelfilters onder vacuüm (Brandel-systeem). Het reactiemengsel en de filters werden driemaal gewassen met 5 ml ijskoude buffer. De filters werden vervolgens in polyetheenflesjes 15 gebracht welke gevuld waren met 10 ml scintillatievloeistof, en de radioactiviteit werd gemeten door een LKB β-teller met een rendement van 45%.
__________ ____De niet-specifieke binding werd bepaald in aanwezigheid van 10*e M niet-gelabeld PAF. De specifieke binding werd berekend door de niet-specifieke binding af te trekken van de totale binding. De remming door ~ verbindingen van de specifieke [^Hj-PAF binding werd bepaald als het percentage remming met behulp van 20 de vergelijking: .. . . . . 3l, /1H-PAF gebonden in aanwezigheid\ (totaal gebonden H-PAF) -1 Van verbindingen ) % remming -.—-—3|, _>P.--x 100
specifiek gebonden dH-PAF
25 Voorbeeld No. IC^
No. I 4,5 . 10'7
No. IX 3,5 .10*®
No. X 3,5 . 10 ®
No. XIV 6,1 . 10'7 30 3 - Door PAF in guinese biggetjes teweeggebrachte bronchoconstrictie, leukopenie en trombocytopenie.
Materialen en methoden
Mannelijke guinese biggetjes (400-500g) werden geanesthetiseerd met urethaan (1,5 g/kg : IP) voordat tracheotomie werd uitgevoerd en ze werden beademd met een ademhalingspomp (Ugo Basile) (70-80 35 ademhalingen/rninuut, 1 ml lucht/100g/ademhaling). Om een eind te maken aan de spontane ademhaling werd een pneumothorax uitgevoerd. De weerstand tegen uitzetting werd gemeten met een drukoverdrager (Ugo Basile) tegen een begindruk van 10 cm H20 volgens Konzett en Rossler. De dieren werden verdeeld in groepen en al dan niet behandeld met de verbindingen volgens de uitvinding (0,05, 0,1,0,5,1 en 5 mg/kg). De producten werden intraveneus (iv) toegediend 1 uur voor de prikkeling met PAF.
40 De dieren werden geprikkeld met verschillende doses PAF (30-100 n/kg) welke iv werden toegediend, en de variaties in de weerstand tegen uitzetting werden genoteerd.
Bloedmonsters werden verzameld voorafgaand aan en 1,5 en 10 minuten na de prikkeling met PAF. 40 μΙ bloed werd verdund in 10 ml Isoton (Coultronics, Frankrijk); die erythrocyten werden gelyseerd met Zapoglobine (Frankrijk) voordat de leukocyten werden geteld in een coulterteller. Ter bepaling van het 45 aantal bloedplaatjes werd 40 μΙ bloed verdund in 2 ml Isoton en gecentrifugeerd gedurende 30 seconden met 100 omwentelingen per minuut; 100 μΙ van het supernatant werd verzameld en verder verdund in 10 ml Isoton voordat in een coulterteller werd geteld.
192521 8
TABEL A
Effecten van 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(Ni3yridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide op door PAF opgewekte bronchoconstrictie 5 Doses n Percentage Percentage mg/kg i.v. bronchoconstrictie variatie
Controle - 8 79,8 +/- 3,22
Verbinding van 5 3 3,5 +/-1,53 -95,6*** 10 1 4 19,1+/-10,51 -76,1***
Voorbeeld No. IX 0,5 6 23,6+/-7,15 -70,4*** 0,1 6 43,8+/-14,77 -45,1**
0,05 3 79,0+/-9,27 -1,0 NS
15 Legenda voor alle tabellen: NS: niet significant *: p < 0,05 ---------------«:p<ö((n ..... ....... ..........
*** : p < 0,001 20
TABEL B
Effecten van 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxdaanbromide op door PAF opgewekte leukopenie 5 Doses n Tijd Procentuele afname van Percen- mg/kg (mn) het aantal leukocyten tage i.v. variatie 8 1 40,8+/-7,18
Controle - 8 5 29,2+/-10,89 30 8 10 33,5+/-5,04 3 1 16,5+/-2,42 -59,6*
5 3 5 15,9+/-0,99 -45,5 NS
3 10 18,7+/-5,08 -44,2 NS
3o __ 4 1 3,5+/-12,60 -91,4** 1 4 5 2,9+/-10,51 -90,1* 4 10 1,0+/-22,62 -97,0** — —
Verbinding van 6 1 34,6+/-6,35 -15,2 NS
voorbeeld No. IX 0,5 6 5 19,.0 +/- 6,42 -34,9 NS
6 10 14,6+/-5,36 -56,4 NS
6 1 41,8+/-6,50 +2,5 NS
4 0,1 6 5 31,9+/-4,88 -9,2 NS
6 10 33,5+/-4,65 0,0 NS 1
1 45,3+/-5,70 +11,0 NS
^ 0,05 3 5 21,6+/-3,42 -26,0 NS
3 10 14,2+/-17,30 -57,6 NS
9 192521
TABEL C
Effecten van 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide op door PAF opgewekte trombocytopenie 5 Doses n Tijd Procentuele afname van Percen- mg/kg (mn) het aantal leukocyten tage i.v. variatie 8 1 68,6 +/- 6,79 10 Controle 8 5 42,4+/-2,71 8 10 42,5+/-3,14 3 1 4,2+/-2,35 -93,9*** 5 3 5 5,6+/-1,84 -86,8*** 15 3 10 1,1 +/-1,15 -97,4*** 4 1 11,5+/-6,21 -83,2*** 1 4 5 22,5 +/- 3,27 -46,9* 4 10 21,0+/-3,87 -50,6* 20 - 6 1 19,3+/-10,19 -71,9***
Veibinding van 0,5 6 5 9,6+/-12,15 -77,4*** voorbeeld No. IX 6 10 10,9+/-9,94 -74,4*** 25 6 1 30,1 +/-13,72 -56,1 **
0,1 6 5 34,7+/-3,60 -18,2 NS
6 10 42,3+/-4,79 0,5 NS
3 1 45,2+/-1,20 -34,1 NS
30 0,05 3 5 43,0+/-4,80 + 1,4 NS
3 10 36,1 +/-2,41 -15,1 NS
TABEL D
Effecten van 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-chinolink>)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide op door 35 PAF opgewekte bronchoconstrictie.
Doses n Percentage bronchocon- Percentage mg/kg i.v. strictie variatie 40 Controle — 6 90,8 +/— 0,95 —
Veibinding 1 5 8,1+/-2,91 -91,1*** van 0,5 5 25,1 +/-6,53 -72,4***
voorbeeld No. X 0,1 5 80,4+/-13,78 -11,5 NS
45 ,____ 192521 10
TABEL E
Effecten van 2-heptadecyl-2-methyl-4'[6'-(N-chinolinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxdaanbnomide op door PAF opgewekte leukopenia 5 Doses n Tijd Procentuele afname van Percen- mg/kg (mn) het aantal leukocyten tage i.v. variatie 6 1 41,4+/-8,0 10 Controle - 6 5 28,7 +/- 6,9 6 10 26,9+/-10,1
5 1 24,1+/-6,8 -41,0 NS
1 5 5 9,3+/-9,4 -67,6** 15 5 10 8,9+/-13,2 -66,9** --Verbinding van---5-1---------17,0 +/- 12,9---~58,9*-------------- voorbeeld No. X 0,5 5 5 9,0+/-11,8 -68,6**
5 10 -7,6+/-17,5 +128,3 NS
20 -
5 1 38,8+/-6,3 +6,3 NS
0. 1 5 5 38,9+/-5,7 +35,5 NS
5 10 41,2+/-6,5 +53,2 NS
25 TABEL F
Effecten van 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-chinolinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxdaanbromide op door PAF opgewekte trombocytopenie
Doses n Tijd Procentuele afname van Percen- 20 mg/kg (mn) het aantal leukocyten tage 1. v. variatie 6 1 65,3 +/- 8,5
Controle - 6 5 49,1 +/- 4,8 - 35 6 10 48,5+/-0,5 5 1 19,3+/-1,4 -58,3*** 1 5 5 22,1 +/- 2,5 -55,0 ** 5 10 19,4+/-3,6 -60,0** 40 _
Verbinding van 5 1 26,2+/-6,3 -59,9** voorbeeld No.x 0,5 5 5 29,8+/-1,7 -39,3* 5 10 32,1 +/- 5,8 -33,8*
45 5 1 51,1+/-12,1 -21,7 NS
0,1 5 5 49,1 +/- 8,8 0 NS
5 10 45,0+/-9,7 -7,2 NS
50 Resultaten 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxdaanbromide (0,5,1 en 5 mg/kg i.v.) en 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-chinolinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide (0,5 en 1 mg/kg i.v.) remmen de door PAF opgewekte bronchoconstrictie en de door PAF opgewekte trombocytopenie bij guinese biggetjes.
11 192521 4 - Door antigeen opgewekte bronchoconstrictie, leukopenie en trombocytopenie bij guinese biggetjes welke passief gesensibiliseerd waren met heteroloog serum
Intraveneuze injectie van ovalbumine aan guinese biggetjes, welke passief gesensibiliseerd waren met konijne-anti-ovalbumine antiserum, induceert een bronchoconstrictie, verbonden met een leukopenie en een 5 trombocytopenie. Deze anafylactische reactie lijkt veroorzaakt te worden door het vrijkomen van histamine en de vorming van arachidonzuurmetabolieten (prostaglandines, tromboxan Ag en leukotriênen). Bij het guinese biggetje wordt het vrijkomen van deze autacoiden voornamelijk gemedieerd via immunoglobulinen van de IgQ-klasse.
10 Methode: - Dieren:
Hartley mannelijke Guinese biggetjes, Charles River (450-550 g) - Immunisetiemethode:
Intraveneuze injectie 18 uur voor de prikkeling met het antigeen van 0,5 ml/kg van een tweemaal 15 verdund konijne-anti-ovalbumine antiserum.
- Prikkeling wordt verkregen door _Ovalbumine. 0.75 mg/kq,__________________ intraveneuze injectie van het antigeen in een eindvdume van 1 ml/kg, drager, 0,15 M NaCI.
20 Verbindingen worden toegediend via de orale route in een volume van 2,5 ml/kg, 1 uur voor de prikkeling met het antigeen. Na anestesie door intraperitoneale injectie van ethylcarbamaat (1,5 g/kg) in een volume van 10 ml/kg. Onderzochte parameters en weergave van de gegevens: a - Bronchoconstrictie
Door antigeen opgewekte bronchoconstrictie in mm (A); maximale bronchoconstrictie in mm (B) 25 Het percentage bronchoconstrictie wordt als volgt berekend:
A x 100 B
Het aantal neutrofielen en bloedplaatjes werd geteld 1 minuut vóór en 1,5 en 10 minuten na de prikkeling. 30 De veranderingen werden uitgedrukt in percentages, berekend ten opzichte van de waarden welke 1 minuut voor de prikkeling werden verkregen.
De volgende uitrusting werd gebruikt:
Ugo Basils, Comerio ITALIË, . Knaagdier beademingstoestel ref. 7025 35 . Bronchospam overdrager ref. 7020
. Twee-kanaal recorder "GEMINI" ref. 7070 - Coultronics, FRANKRIJK . Coulters teller Z B I
40 TABEL G
Effecten van 2-heptadecyl-2-methyi-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide op door antigeen opgewekte bronchoconstrictie.
Dosis n Percentage bronchocon- Percentage 45 mg/kg i.v. strictie variatie
Controle - 6 71,9+/-14,2
Verbinding van 5 8 51,3+/-14,2 -28,7 NS
50 voorbeeld No. X
192521 12 TABEL Η
Effecten van 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dfoxolaanbromide op door antigeen opgewekte leukopenie.
5 Dosis n Tijd Procentuele afname van Percen- mg/kg (mn) het aantal leukocyten tage i.v. remming 6 1 -11,8+/-5,1 10 Controle - 6 5 -39,6+/-9,5 6 10 -53,9+/-7,1
Verbinding 8 1 -15,6+/-6,6 +32,0 NS
van 5 8 5 -8,7+/-10,7 -78,0* 15 voorbeeld IX 8 10 -12,3+/-14,1 -77,2*
-------------TABEL I
Effecten van 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide op door antigeen opgewekte trombocytopenie 20 _
Dosis n Tijd Procentuele afname van Percen- mg/kg (mn) het aantal leukocyten tage i.v. remming 25 6 1 -6,8+/-2,7
Controle - 6 5 -39,7+/-12,5 6 10 -26,1+/-8,1
Verbinding 8 1 +0,3+/-7,9 -104,4 NS
30 van 5 8 5 -3,5+/-3,1 -91,2**
Voorbeeld 8 10 -15,7+/-6,2 -39,8 NS
No. IX
35 Resultaten 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide (5 mg/kg IV) antagoni-seert de door antigeen opgewekte leukopenie en trombocytopenie zonder de door antigeen opgewekte bronchoconstrictie in belangrijke mate te verminderen.
40 5 - Werking op de door PAF opgewekte hypotensie bij de geanesthetiseerde rat Materialen en methode
Mannelijke Sprague Dawley ratten (Charles River Breeding Station) (250-300 g) werden geanesthe-tiseerd met ethylcarbamaat in een dosis van 1,2 g/kg IP.
Intraveneuze injectie van PAF veroorzaakt een dosis-afhankelijke hypotensie. De effecten van 45 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide en 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-chinoliniohexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide tegen door PAF opgewekte hypotensie werden onderzocht in curatieve behandelingen. De hypotensie werd opgewekt door één enkele dosis PAF (1 pg/kg) in een intraveneuze injectie, direct in de penisader, in een volume van 0,1 ml/100g. Bij de maximale hypotensie, 3 minuten na de injectie met PAF, werden de geneesmiddelen toegediend.
50 Gemeten parameters en weergave van de resultaten:
De systolische en diastolische arteriële drukken (mmHg) werden gemeten. De waarden werden uitgedrukt als een gemiddelde +/- SEM in de figuren 1 en 2.
Meetinstrument:
Gould Pgo overdrager voor het meten van de arteriële druk, 55 Braun perfusor,
Gould 8000 S polygrafische recorder.
13 192521 6 - Antagonisme van de door PAF opgewekte aggregatie van polymorfkemige leukocyten Polymorfkemige leukocyten (PMNs) werden verkregen zoals beschreven door A.W. Ford-Hutchinson c.s. (Br.J. Pharmacol. 76, 367-371,1982). Celsuspensies (< 90% PMNs) werden bereid uit peritoneale exudaten welke verkregen waren na een 5 ml IP injectie van natriumcaseinaat 12% (gew/vol) aan 5 mannetjes Wistar-ratten met een lichaamsgewicht van 300g.
Na centrifugering werden de cellen gewassen met Hanks en opnieuw gesuspendeerd in MEM/Hepes 30 mM medium (PM = 7,4) in een concentratie van 107 cellen/ml. Cytochalasine B (5 pg/ml) werd 10 minuten voor het starten van de aggregatie toegevoegd om de PMNs-aggregatie te versterken. De lichttransmissie door de celsuspensie (400 pl) werd gemeten onder magnetisch roeren van 900 opm met een dubbelstraal-10 aggregometer (Chronolog Corp. Coultronics).
De controlecuvet bevat de celsuspensie, verdund tot 20% van het aantal cellen met MEM, en het verschil vertegenwoordigt 100% transmissie. De verandering in de transmissie, die optreedt wanneer PAF wordt toegevoegd, werd continu opgenomen.
De in MEM/Hepes gesolubiliseerde geneesmiddelen (4 μΙ) werden 2 minuten voor de toevoeging van 15 PAF toegevoegd aan de PMNs-suspensie.
Resultaten PAF 10'8 M veroorzaakte 55 tof 70% aggregatievan deze PMNs-suspensie.
2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide en 2-heptadecyl-2-20 methyl-4-[6'-(N-chinolinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide remmen deze aggregatie dosis-afhankelijk met een IC^ van respectievelijk:
2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide: 5 x 10'7M 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-chinolinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide: 10^M
25 7- Remming van de door PAF opgewekte intracytosolische mobilisering van vrij calcium in gewassen bloedplaatjes van konijnen
Bloed werd afgenomen uit de arteria auricularis van het konijn op citroenzuur/natriumdtraat/dextrose en anti-coagulatiemiddel, en de gewassen bloedplaatjes werden bereid volgens Ardlie c.s., Brit. J. Pharmacology, 19, 7-17,1970. Zij werden geïncubeerd met acetylsalicylzout (100 μΜ, 30 minuten) ter vermijding van 30 door tromboxaan opgewekte aggregatie. Zij werden vervolgens beladen met de fluorescerende calcium-indicator kleurstof chin 2 door incubatie met chin 2-acetomethylester (15 μΜ in DMSO, 20 minuten bij kamertemperatuur) welke in de celmembraan doordringt en na hydrolyse in het bloedplaatje vast zit. De geneesmiddelen werden 15 minuten met de bloedplaatjes gepreincubeerd tegelijk met CP/CPK-mengsel dat uitgescheiden ADP neutraliseert.
35 De fluorescentiemeting werd vervolgens uitgevoerd (excitatie λ = 339 nm, emissie λ = 492 nm) na toevoeging van PAF aan de bloedplaatjes-suspensie. De fluorescentieintensiteit is evenredig met het cytosolische vrije calciumgehalte [Ca2+]i dat kan worden gekwantificeerd zoals beschreven door Tsien & al;, J. Cell Biol., 94, 325-334, 1982.
40 Resultaten
De door 2 x 10 8M PAF opgewekte stimulering van de bloedplaatjes verhoogde het [Ca2+]i-gehalte van 150 nM in rusttoestand tot 400-600 nM.
2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide en 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-chinolinio)-hexanoyloxymethyl]-1,3-dioxolaanbromide in een concentratie van 5 x 10'7 M 45 remmen volledig de door PAF opgewekte [Ca2"']i mobilisatie. Bij een concentratie van 5 x 10'8 M is de remming van het PAF-effect respectievelijk 44% voor 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-pyridiniohexanoyloxy-methyl]-1, 3-dioxoiaanbromide en 75% voor 2-heptadecyl-2-methyl-4-[6'-(N-chinolinio)-hexanoyloxymethylj- 1,3-dioxolaanbromide.
50 Posologie
In de humane therapie bedraagt de dagelijkse dosis bij orale toediening 0,1 tot 0,5 mg in tabletten of capsules met een mantelbekleding; de overeenkomstige dagelijkse dosis bij i.v.-toediening bedraagt 0,01-0,05 mg. De behandeling duurt in het algemeen 2 tot 6 weken.
Claims (2)
1. Glycerolderivaat met werking tegen de bloedplasjes activerende factor waarin op de glycerolzuurstof-atomen substituenten aanwezig zijn waarvan er één een cyclische ammoniumgroep bevat, met het 5 kenmerk, dat het de algemene formule 1 heeft waarin R, een gesubstitueerde fenylgroep of een groep met de formule CmH2rn+1, waarin m een geheel getal van Θ tot 25 is, voorstelt, R2 een waterstofatoom, een fenylgroep of een groep met de formule CnH2n+i. waarin n een geheel getal van 1 tot 10 is, voorstelt, 10. een geheel getal van 3 tot 10 is, de groep met formule 5 een pyridinium, 3-thiazolinium, chinolinium, isochinolinium, imidazolinium en pyrazinium voorstelt, en X° het anion van een farmaceutisch aanvaardbaar anorganisch of organisch zuur, een halogeenion zoals chloor, broom, jood of het anion van benzoëzuur, azijnzuur, methaansulfonzuur of wijnsteenzuur 15 voorstelt, in de vorm van de gescheiden isomeren of van een mengsel daarvan.
2. Farmaceutisch preparaat met werking tegen de bloedplaatjes activerende factor, met het kenmerk, dat _________het als werkzaam bestanddeel ten minste één verbindingjvolgens condusieJ en^een geschikt vetdunnings- middel of een geschikte drager bevat. Hierbij 2 bladen tekening
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB878713745A GB8713745D0 (en) | 1987-06-12 | 1987-06-12 | Aminoacylates of glycerol |
| GB8713745 | 1987-06-12 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL8801484A NL8801484A (nl) | 1989-01-02 |
| NL192521B NL192521B (nl) | 1997-05-01 |
| NL192521C true NL192521C (nl) | 1997-09-02 |
Family
ID=10618794
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL8801484A NL192521C (nl) | 1987-06-12 | 1988-06-09 | Glycerolderivaten die een ammoniumgroep bevatten met werking tegen de bloedplaatjes activerende factor en farmaceutische preparaten die dergelijke derivaten bevatten. |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4921865A (nl) |
| JP (1) | JPH0615540B2 (nl) |
| KR (1) | KR960005153B1 (nl) |
| AR (1) | AR245121A1 (nl) |
| AT (1) | AT396236B (nl) |
| AU (1) | AU621298B2 (nl) |
| BE (1) | BE1000700A4 (nl) |
| CA (1) | CA1337297C (nl) |
| CH (1) | CH674516A5 (nl) |
| DE (1) | DE3819829C2 (nl) |
| DK (1) | DK319188A (nl) |
| DZ (1) | DZ1215A1 (nl) |
| ES (1) | ES2009283A6 (nl) |
| FI (1) | FI90421C (nl) |
| FR (2) | FR2616326B1 (nl) |
| GB (1) | GB8713745D0 (nl) |
| GR (1) | GR1000889B (nl) |
| HK (1) | HK77191A (nl) |
| IE (1) | IE61447B1 (nl) |
| IN (1) | IN172782B (nl) |
| IT (1) | IT1218067B (nl) |
| LU (1) | LU87235A1 (nl) |
| MA (1) | MA21298A1 (nl) |
| MY (1) | MY103577A (nl) |
| NL (1) | NL192521C (nl) |
| NO (1) | NO170632C (nl) |
| NZ (1) | NZ224936A (nl) |
| OA (1) | OA08879A (nl) |
| PT (1) | PT87689B (nl) |
| SE (1) | SE466450B (nl) |
| SG (1) | SG73191G (nl) |
| TN (1) | TNSN88057A1 (nl) |
| ZA (1) | ZA884024B (nl) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2556849B2 (ja) * | 1986-02-13 | 1996-11-27 | 三共株式会社 | グリセリン誘導体 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4035178A (en) * | 1976-08-31 | 1977-07-12 | Fmc Corporation | Herbicidal 1,3-dioxanes |
| IN146343B (nl) * | 1976-08-31 | 1979-05-05 | Fmc Corp | |
| US4375474A (en) * | 1982-02-11 | 1983-03-01 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Dioxalane containing imidazole compounds, compositions and use |
| GB8612940D0 (en) * | 1986-05-28 | 1986-07-02 | Dow Chemical Co | Derivative esters |
-
1987
- 1987-06-12 GB GB878713745A patent/GB8713745D0/en active Pending
-
1988
- 1988-06-02 GR GR880100363A patent/GR1000889B/el unknown
- 1988-06-03 IN IN494DE1988 patent/IN172782B/en unknown
- 1988-06-06 ZA ZA884024A patent/ZA884024B/xx unknown
- 1988-06-06 AR AR88311036A patent/AR245121A1/es active
- 1988-06-07 US US07/203,733 patent/US4921865A/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-06-08 FI FI882705A patent/FI90421C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-06-08 CH CH2183/88A patent/CH674516A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1988-06-08 NZ NZ224936A patent/NZ224936A/xx unknown
- 1988-06-09 LU LU87235A patent/LU87235A1/fr unknown
- 1988-06-09 MY MYPI88000627A patent/MY103577A/en unknown
- 1988-06-09 PT PT87689A patent/PT87689B/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-06-09 NL NL8801484A patent/NL192521C/nl not_active IP Right Cessation
- 1988-06-09 MA MA21541A patent/MA21298A1/fr unknown
- 1988-06-09 SE SE8802162A patent/SE466450B/sv not_active IP Right Cessation
- 1988-06-10 IT IT20940/88A patent/IT1218067B/it active
- 1988-06-10 DE DE3819829A patent/DE3819829C2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-06-10 DK DK319188A patent/DK319188A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-06-10 OA OA59371A patent/OA08879A/xx unknown
- 1988-06-10 TN TNTNSN88057A patent/TNSN88057A1/fr unknown
- 1988-06-10 NO NO882564A patent/NO170632C/no unknown
- 1988-06-10 IE IE175288A patent/IE61447B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-06-10 AU AU17562/88A patent/AU621298B2/en not_active Ceased
- 1988-06-10 FR FR888807740A patent/FR2616326B1/fr not_active Expired
- 1988-06-10 BE BE8800667A patent/BE1000700A4/fr not_active IP Right Cessation
- 1988-06-10 CA CA000569215A patent/CA1337297C/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-06-10 ES ES8801806A patent/ES2009283A6/es not_active Expired
- 1988-06-10 FR FR888807739A patent/FR2616432B1/fr not_active Expired - Fee Related
- 1988-06-11 DZ DZ880076A patent/DZ1215A1/fr active
- 1988-06-11 KR KR1019880007029A patent/KR960005153B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-06-13 AT AT0152988A patent/AT396236B/de not_active IP Right Cessation
- 1988-06-13 JP JP63143818A patent/JPH0615540B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-09-03 SG SG731/91A patent/SG73191G/en unknown
- 1991-10-03 HK HK771/91A patent/HK77191A/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1297102C (en) | Phospholipid derivatives, their production and use | |
| US4910206A (en) | 5-hetero-or aryl-substituted-imidazo(2,1-a)isoquinolines and their use as PAF receptor antagonists | |
| US4845129A (en) | Diaryl substituted cyclopentane and cyclopentene derivatives | |
| NL192521C (nl) | Glycerolderivaten die een ammoniumgroep bevatten met werking tegen de bloedplaatjes activerende factor en farmaceutische preparaten die dergelijke derivaten bevatten. | |
| EP0178261A2 (en) | Substituted 2-furanyl or 5-oxo-2-furanyl-alkoxy phosphoryl alkyl cyclimmonium salts | |
| US4992428A (en) | 5-aryl-substituted-2,3-dihydro-imidazo[1,2-a]furo- and thieno pyridines | |
| US5134151A (en) | 2-picolylamine derivatives | |
| CA1261844A (en) | 3-(n-alkylcarbamoyloxy)-2-alkyloxypropyl-2- substituted ethyl phosphate compounds | |
| US5070139A (en) | 2,4-disubstituted 1,3-dioxolanes | |
| KR960005152B1 (ko) | 신규 5-(ω-암모니아실옥시메틸렌)테트라히드로푸란 및 테트라 히드로티오펜 | |
| JPH05194524A (ja) | 血栓症および血管痙攣症の治療に有用な７−オキサビシクロヘプチル置換複素環式アミドプロスタグランジン類縁体 | |
| CA1085856A (en) | Pyrrolidine and piperidine prostaglandin analogues | |
| GB2205833A (en) | Aminoacylates of glycerol acetal | |
| US5124334A (en) | Benzylalcohol phospholipase A2 inhibitors | |
| JPH0588713B2 (nl) | ||
| EP0127930A2 (en) | Aminocyclopentane esters and their preparation and pharmaceutical formulation | |
| DE60023703T2 (de) | Vorprodukte von bis-quaternären ammoniumsalzen und deren verwendung als prodrugs mit anti-parasitärer wirkung | |
| US4201864A (en) | Oxy-alkylamino acids and esters | |
| JP2721178B2 (ja) | フェノール誘導体 | |
| US4177283A (en) | Aromatic prostaglandin analogues | |
| US5141932A (en) | 5-Aryl-substituted-2,3-dihydro-imidazo(1,2-a)furo- and thieno pyridines | |
| EP0100527A1 (de) | 4H-1,4-Benzothiazine zur Verwendung als Arzneimittel | |
| JPH03106872A (ja) | １―置換フェニル―４―ピリジルフタラジン誘導体 | |
| JPH0687745A (ja) | 血小板活性化因子拮抗剤 | |
| JPH06500789A (ja) | イミダゾール誘導体、それらの製造方法および医薬組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BA | A request for search or an international-type search has been filed | ||
| BB | A search report has been drawn up | ||
| BC | A request for examination has been filed | ||
| V1 | Lapsed because of non-payment of the annual fee |
Effective date: 19990101 |