FI63760C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara penicilliner - Google Patents

Description

f- r i KUULUTUSjULKAisu , 7 .

^§8Ta ^ 11^ UTLÄGG NINCSSKRIFT 6 3760

• C (45) r 1 J

^ T ^ (51) Ky.lk?/lw.a.3 c 07 D 499/64 SUOMI —FINLAND (21) — *ttntt»eici»tn| T513i+0 (22) Hakemltplivt — AMOknlngadif 07-05.75 (Fl) (23) Alkupilvi'— GUtighratf·! 0)7· 05- 75 (41) Tullut luikituksi — Bllvk off«Mll( 10.11.75

Pktanttl- ]a r«kitt«rlh»Mitua (44) Nlhttvtk*lp«non |t kuuL|ulk*toun pvm.— _ , -

Patent- och refi«tarftyral*an AraMun utlagd och utl.tkr)ftwi pubUcurad 29. Oh. Ö3 (32)(33)(31) Pyydetty «tuolkuui —Begin! printout 09.05.7Π 13.05.7Π, 31.05.7H, 13.08.7H, 26.09.7H, 13.12.7H, 27.03.75 Japani-Japan(jP) 50663/7Π, 5225Π/7Π, 60787/7H, 91996/7H, 10995Π/7Π, 1H2H99/7H, 37207/75 (71) Toyama Chemical Co., Ltd., 1-18, Kayabacho, Nihonbashi, Chuo-ku,

Tokyo, Japajii-Japan(JP) (72) Isamu Saikava, Toyama-shi, Shuntaro Takano, Toyama-shi, Chosaku Yoshida, Takaoka-shi, Okuta Takashima, Toyama-shi, Kaishu Momonoi, Shinminato-shi, Seietsu Kuroda, Toyama-shi, Miwako Komatsu, Toy-ama-ken, Takashi Yasuda, Toyama-ken, Yutaka Kodama, Toyama-shi, J apan i-Japan(JP) (7Π) Oy Kolster Ab (5Π) Menetelmä uusien terapeuttisesti käytettävien penisilliinien valmistamiseksi - Förfarande för framställning av nya terapeutiskt använd-bara penicilliner Tämä keksintö koskee menetelmää uusien penisilliinien valmistamiseksi, joiden kaava on , .

(XL

Il n / \ /CH, A-N N-C-NH-CH-CONH-i-< 3 /τ') \ /π 1 o CH« V *w \ I / 0 R3 3 I h-N-k 1 (r2) 6' ^COOR1 jossa R1 on vetyatomi, suolan muodostava kationi tai ftalidyyli-, metoksimetyyli-, pivaloyylioksimetyyli-, yS-piperidinoetyyli- tai ^-morfolinoetyyliryhmä, n on 1 tai 2, X on happiatomi, joka on liittynyt hiiliatomiin piperatsiinirenkaan asemassa 2 ja/tai 3, m on 0 tai 1, R on metyyliryhmä, A on C^^-alkyyliryhmä, joka mahdollisesti on substituoitu kloorilla tai asetoksilla tai allyyli-, Cc 3 5~6 sykloalkyyli-, fenyyli-, bentsyyli- tai C.^-alkaanisulfonyyliryhmä ja R on fenyyli-, hydroksifenyyli-, sykloheksadienyyli- tai tienyyliryhmä.

63760

Kaavan I mukaisilla yhdisteillä on laaja, gram-positiivisten ja gram-nega-tiivisten bakteerienvastainen spektri, ja niiden tehokas bakteerinvastainen vaikutus kohdistuu erityisesti bakteereihin Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae sekä Proteus-lajeihin, Uudet yhdisteet kestävät lisäksi erittäin hyvin bakteerien tuottaman /3-laktamaasin vaikutusta, ja niillä on tehokas bakteerinvastainen vaikutus myös sellaisiin kliinisiin bakteereihin, jotka nykyisin ovat ajankohtaisia sairaalaoloissa, Tästä syystä nämä uudet yhdisteet ovat tehokkaita hoidettaessa edellä mainittujen mikro-organismien ihmisille ja eläimille aiheuttamia tarttuvia tauteja.

On tunnettua, että sellaisilla 6-asyyliaminopenisillaanihapoilla ja T-asyy-liaminokefalosporaanihapoilla, joissa on aminoryhmä asyyliryhmän oCrasemassa, on voimakas bakteerinvastainen vaikutus sekä gram-positiivisiin että gram-negatiivi-siin bakteereihin. Näillä edellä mainituilla tunnetuilla yhdisteillä on kuitenkin se haittapuoli, että niillä ei ole tehokasta bakteerinvastaista vaikutusta vakavia tartuntatauteja aiheuttaviin bakteereihin Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae eikä Proteus-lajeihin eikä myöskään useihin sellaisiin bakteereihin, joita nykyisin eristetään sairaaloista, Lisäksi niillä on taipumus hydrolysoitua ^-laktamaasin vaikutuksesta, jota monet lääkkeitä sietävät bakteerit tuottavat.

Tarkoituksenaan saada aikaan penisilliinejä, joilla ei ole edellä mainittuja haittoja, tämän keksinnön tekijät havaitsivat laajojen tutkimusten tuloksena, että kaavan (i) mukaiset uudet yhdisteet, jotka valmistetaan liittämällä ryhmä A-N N-C- W δ (i2) m jossa A, X, R , n ja m merkitsevät samaa kuin edellä, penisilliinien asyyli-ryhmässä olevaan aminoryhmään, täyttävät riittävässä määrin mainitun tavoitteen ja ovat hoitovaikutuksiltaan erinomaisia, 3 63760

Suolanmuodostajakationit ovat niitä, joita penisilliinin ja kefalosporii-nin tyyppisten yhdisteiden yhteydessä on tähänkin asti käytetty, mutta suositeltavia ovat kuitenkin sellaiset kationit, jotka muodostavat myrkkyvaikutuksettomia suoloja. Sopivia suoloja ovat mm. alkalimetallisuolat kuten natriumsuola, kalium-suola jne, alkalisten maametallien suolat kuten kalsiumsuola, magnesiumsuola jne, ammoniumsuola sekä suolat typpipitoisten orgaanisten emästen kuten prokaiinin, dibentsyyliamiinin, N-bentsyyli-^-fenetyyliamiinin, 1-efenamiinin, N,N-dibentsyy-lietyleenidiamiinin jne kanssa. Edellä mainittujen kationien lisäksi voidaan käyttää sellaisia kationeja, jotka kykenevät muodostamaan suolan muiden typpipitoisten orgaanisten emästen kuten trimetyyliamiinin, trietyyliamiinin, tribu-tyyliamiinin, pyridiinin, dimetyylianiliinin, N-metyylipiperidiinin, N-metyyli-morfoliinin, dietyyliamiinin, disykloheksyyliamiinin jne kanssa.

Edellä mainitut kaavan (i) mukaiset uudet yhdisteet esiintyvät optisina isomeereinä, ja niinpä niiden kaikki D-isomeerit, L-isomeerit ja raseemiset seokset kuuluvat keksinnön mukaisen menetelmän piiriin.

Edullisia kaavan (i) mukaisia yhdisteitä ovat kaavan (la) mukaiset yhdisteet ja etenkin kaavan (Ib) mukaiset yhdisteet ja erityisesti niiden myrkyttömät suolat VY s c„ A-N N-C-NH-CH-CONH —-Y ''Νς' 3 (la) V S P I CH3 0<*— n —v 1

(R2) COOR

m y-< / \ CHc-N N-C-NH-CH-CONH—-f (ib) 2 5 N_/ S I I h3

N ^ C00H

12 3 . .

joissa R , R , S , A ja m merkitsevät samaa kuin edellä.

63760

Kaavan (i) mukaiset uudet yhdisteet valmistetaan joko menetelmällä (1) tai menetelmällä (2).

Menetelmä (1):

Menetelmä, jossa yhdiste, jonka kaava on u S CH.

R -NH-CH-CONH-i-f P I CH3 (II) $ N \ C00R1a saatetaan reagoimaan kaavan (X)n A-N N-C-OH (III) v+v s (r2) Ώ1 mukaisen yhdisteen reaktiivisen karboksyylijohdannaisen kanssa, minkä jälkeen, 1a · haluttaessa suojaryhmä R lohkaistaan.

Menetelmä (2):

Menetelmä, jossa yhdiste, jonka kaava on UV) QT N ^C00R1a saatetaan reagoimaan kaavan (x)_

II

/\ A-N N-C-NH-CH-C-OH (V)

\_l_/ S PS

(R2) m mukaisen yhdisteen tai sen reaktiivisen karboksyylijohdannaisen kanssa, minkä jäl- 1 a keen, haluttaessa suojaryhmä R lohkaistaan.

23

Edellä esitetyissä kaavoissa (II)-(V) R , R, A, X, n ja m tarkoittavat 1a samaa kuin edellä. R on vetyatomi, suolanmuodostajakationi tai suojaryhmä. Suoja-ryhmä voi olla mikä tahansa niistä, joita tähänkin asti on käytetty penisilliini-tyyppisten yhdisteiden yhteydessä. Tarkemmin sanottuna sopivia suojaryhmiä ovat 63760 mm. (1) sellaiset esteriryhmät, jotka voidaan poistaa katalyyttisellä pelkistyksellä, kemiallisella pelkistyksellä tai hydrolyysillä lievissä olosuhteissa, esim. aryylisulfonyylialkyyliryhmät kuten tolueenisulfonyylietyyli jne, substituoidut tai substituoimattomat aralkyyliryhmät kuten bentsyyli, 1-nitrobentsyyli , difenyyli-metyyli , trityyli , 3,5~di(tert.-butyyli)-l-hydroksibentsyyli jne, substituoidut tai substituoimattomat alkyyliryhmät kuten tert,-butyyli, trikloorietyyli jne, fenasyyliryhmä, alkoksialkyyliryhmät kuten metoksimetyyli jne ja substituoimattomat tai alkyylillä substituoidut sykliset aminoalkyyliryhmät kuten piperidinoetyy-li, 1-metyylipiperidinoetyyli, morfolinoetyyli, pyrrolidinoetyyli jne, (2) sellaiset esteriryhmät, jotka elimistön entsyymit voivat helposti poistaa, esim. asyylioksialkyyliryhmät kuten pivaloyylioksimetyyli jne, ftalidiryhmä ja inda-nyyliryhmä, (3) piitä, fosforia tai tinaa sisältävät ryhmät, jotka ovat helposti vesikäsittelyllä tai alkoholikäsittelyllä poistettavissa, kuten (CH^)_Si-, Γ'-Ρ. C2H5°^p- (C,H ) Sn- tms.

LO/ ’ C2H50/ ’ 4 y J

Kohdissa (1), (2) ja (3) mainitut suojaryhmät ovat vain tyyppiesimerkkejä, ja lisää esimerkkiryhmiä, joita voidaan käyttää tässä keksinnössä, löytyy US- patenttijulkaisuista 3 ^99 909, 3 573 296 ja 3 (iki 018 ja DOS-julkaisuista 2 301 01U, 2 253 28? ja 2 337 105. Suolanmuodostajakationit ovat niitä, jotka 1 h .... . . ..

edellä on mainittu R :n kohdalla. R on vetyatomi tai piitä tai fosforia sisältävä 1 a ryhmä, jolloin nämä ryhmät ovat samoja kuin R :n kohdalla edellä on esitetty.

Yhdisteenä (il) voidaan käyttää D-isomeeriä, L-isomeeriä tai raseemista seosta.

Kaavan (III) mukaisen yhdisteen reaktiivisena karboksyylijohdannaisena voidaan käyttää sellaista reaktiivista karboksyylihappojohdannaista, jota tavallisesti käytetään happoamidisynteesissä. Reaktiivisia johdannaisia ovat esim. happo-halogenidit, happoatsidit, happosyanidit, sekahappoanhydridit, aktiiviset esterit, aktiiviset amidit jne. Erittäin sopivia ovat esim. happohalogenidit kuten happo-kloridit, happobromidit jne ja aktiiviset esterit kuten syanometyyliesteri, tri-kloorimetyyliesteri jne.

Kaavan (lii) mukaisen yhdisteen reaktiivinen karboksyylijohdannainen voidaan valmistaa helposti saattamalla esim. alla kirjallisuusviitteissä mainitulla menetelmällä syntetisoitu oksopiperatsiini, jonka kaava on <*>„ A\ A-N NH (VI) v+y <E\ 6 63760 jossa A, X, R , m ja n ovat aikaisemmin määriteltyjä, reagoimaan fosgeenin, kloo-rimuurahaishapon trikloorimetyyliesterin tms. kanssa.

Kirjallisuusviitteet: V.G. Granik, Khim-Farm. Zh., l(M, 16-19 (196j) (venäjäksi);

Samuel R. Aspinall, J. Am. Chem, Soc., 62, 1202-1+ (19I+Q);

Kuniyoshi Masuzawa, Pharm. Bull (Japan), 38, 2078-2081 (1966);

Arthur P. Phillips, Ger. 1135^72, Aug. 30 (1962); J. L. Riehsomer, J. Org. Chem., 15, 68-73 (1950);

Jongkees, Rec. trav. Chim., 27, 305;

Patric T. Izzo, J. Am. Chem. Soc., 81 , 1+668-1+670 (1959); ja B. H. Chase & A. M. Downes, J. Chem. Soc., 387I+-3877 (1953).

Taulukossa 1 on esimerkkejä kaavan (VI) mukaisista yhdisteistä.

Taulukko 1 (X)n AN NH (VI) (R2) m

Yhdiste Sp. (uudelleenkitey- IR

_____tysliuotin)_(cm~1)_____ y_¢,° $c=o 1680 CH3S02I^_NH 167-168°C (EtOH) 32oo __________PSO-N 1310. 1lU0 _pc=o 1650-1630 CH^(CHg)^CHg-N^ ^NH oljymäinen aine ^NH 3270 i)nh 3250 CH3(CH2)2CH2~N^_^NH oljymäinen aine Pc=0 165O-1630 /-^0 ... > CH_ (CH-)CH--N NH oljymäinen aine Pc=0 1650-1620 3 2 2 2 \_y

CH

0 p NH 3270 /—f pc=o 1650-1630 CH_(CHc)^CH0-N NH oljymäinen aine hydrokloridi 3 2 6 2 \_J ,><>0 1660 __ '_ PNH 3200. 3080_ 0.^ Pc=o 1620 CHgN_NH kp. 10U°C/ 1+ mmHg pNH 3275 (.1*+' uu'

Taulukko 1 (jatkoa) 63760 ·_ — " " CH_CH_-N NH oljymamen aine v C=0 1610 i * \ / _^NH 32$0_ -y \?C=0 1610

CH3(CH2)2CH2-N^_öljymäinen aine >,NH 325Q

°γ-Λ ^0=0 1610 (CH3)2CH-N_NH öljymäinen aine y^NH 3^+00-3200 o ^c=o 1620 / s / ^ .... ύNH 3270 CH3( CH2 )3CH2~N_IJH öljymäinen aine chI ~~ö i>c=o 1620 3\ '—^ CHCH CH -N NH öljymäinen aine ΨNH 3270 CH N-f /—<ζ° 1^0=0 1620

CH3(CH2)l4CH2-N_NH öljymäinen aine ^NH

—\ CH_(CH2),-CH -N NH öljymäinen aine κ*0=0 1620 3 ^ d N-/_t^NH 3270_ y~\ . ^ =0 1620

CH3(CH2)6CH2-i^_NH öljymäinen aine pNH 327Q

~~ ^ v+c=o 1620 CH3(CH2)10CH2-N_NH öljymäinen aine pNR 32γ() o +>c=o 1620 "τγλ y \ ..,. ... . ^nh 3300 H )— k NH oljymamen aine MJ \_/ 0^_^H3 ^=0 1630 CH3(CH2)2CH2-N_NH öljymäinen aine ^NH 3300

Va . l>c =0 1630 CH3(CH2)2CH2-N NH öljymäinen aine ^ 3300 /- _^3_ 0 PC=0 1630 y—\ pnh 3200

ClL^CH^JjjCH^-N NIJ öljymäinen aine _^li__ (jatkuu) 63760

Taulukko 1 (jatkoa) 8 _ 0 V>C=0 1630 /OV-C H2_N NH 157-15&°C (| 1>NH 3300 ' / N /_ Ό ^_ )>—v Pc=o 1650

CH2=CHCH2~N_^NH öljymäinen aine ^ 33QO

V-^° ^ =0 1695, 1660 CH^-N NH 158°C (IPA) i>NH 3220 ^V>C =0 1730-1650 CH3COOCH2CH2-N_NH öljymäinen aine ^,NH 3300.3200 °)>—0 y)C=0 1680, 165Ο “VVVJ® '2k°c ([ > m 3250 _^0'_ CH CH CH -N ^m 98-100°C (f" ^ ) 1)0=0 l68°’ l65° 5 d d \-f kQ^ V>NH 3200, 3100 °^—<^° Pc=o 1695, 1670 CH3(CH2)2CH2-N_HH 111-113°C (CCl^) ^ 321*0, 3150 0}—<f .0 |λ>0 1650 (CH3)2CH-VJ*H 166-167°C (Γ Λ) ^ 3300.3200 __Nr_ °$>—Pc=o 1700, 1660 CH3(CH2)3CH2-i^JH 10it-l06°C (IPE) »NH 3200, 3100 ö 5 , . iMi n . **> 1700, 1660 CH^CH^CH^N_NH 111-115°C (IPE) PNH 3200, 3100 Ö Ö ~ , , M; Pc=o 1700, 1660 CH.(CH ) CH0~N NH 112-115 C (IPE) . „„Λη 3 252 y_f ' pNH 3200, 3100 . . VT pc=o 1700, 1660 CH3(CHg)gCH2-ll_m 116-120 c (IPE) _m 3g;!5i 3100

Pc=o 1680, 1655 0 _,0 136-137°C (asetoni) PNH 3200, 3100

ch2=chch2-n_V

(j atkuu) 9

Taulukko 1 (j atkoa) 63760 /-v n P C=0 1690, 161*5 (O_202-20·. C (IPA)_^ V^° o 1>C=0 1700-1650 C1CH2CVNwNH 128-129 C (^°H) PM 3200-3100 Ö Ö ~ ' ~~

Pc=o 1660 CH3CH2-N 12^-128 C <Ac0Et) ^NH 3200, 3080 ^CH3 -1° Ο . °\ P C=0 1660 CVNmNH H6-147C(Q) Pnh 3200>3100 CH3

IPA = (CH3)2CH0H IPE = (ChT3)2CH0CH(CH3)2 AcOEt = CH3C00CH2CH3 EtOH = CH3CH20H

Yleisen kaavan (V) mukainen yhdiste voidaan helposti valmistaa siten, että saatetaan esimerkiksi kaavan H N-CH-COOH (VII)

d '3 R

mukaisen aminohapon (D-isomeeri, L-isomeeri tai raseeminen seos) alkalimetalli-, . . . 3 maa-alkalimetalli- tai typpipitoinen emassuola, jossa kaavassa R :11a on edellä esitetty merkitys, reagoimaan yleisen kaavan (lii) mukaisen yhdisteen reaktiivisen karboksyylijohdannaisen kanssa reaktiolle inertissä liuottimessa happoasito-van reagenssin läsnäollessa,

Yleisen kaavan (V) mukaisen yhdisteen karboksyyliryhmän reaktiivisena johdannaisena käytetään sellaista reaktiivista karboksyylihappojohdannaista, jota yleensä käytetään happoamidisynteesissä. Näitä reaktiivisia johdannaisia ovat mm. happohalogenidit, happoanhydridit, orgaanisten tai epäorgaanisten happojen seka-anhydridit7 aktiiviset happoamidit, happosyanidit, aktiiviset esterit jne. Erittäin sopivia ovat happokloridit, happojen seka-anhydridit ja aktiiviset happo-amidit. Esimerkiksi happojen seka-anhydridejä ovat substituoitujen etikkahappojen, 10 63760 alkyylikarboksyylihappojen, aryylikarboksyylihappojen ja aralkyylikarboksyyli-happojen seka-anhydridit, aktiivisia estereitä ovat syanometyyliesterit, substi-tuoidut fenyyliesterit, substituoidut bentsyyliesterit, substituoidut tienyyli-esterit jne ja aktiivisia happoamideja ovat N-asyylisakkariinit, N-asyyli-imidat-solit, N-asyylibentsoyyliamidit, N,N-disykloheksyyli-N-asyylivirtsa-aineet, N-asyylisulfonamidit jne.

Seuraavassa selostetaan menetelmien (1), ja (2) käytännön suoritus.

Menetelmät (1) ja (2) voidaan toteuttaa oleellisilta osiltaan samoissa olosuhteissa. Niinpä kaavan (il) tai (IV) mukainen yhdiste liuotetaan tai suspen-doidaan vähintään yhteen esimerkiksi seuraavissa inerteistä liuottimista: vesi, asetoni, tetrahydrofuraani, dioksaani, asetonitriili, dimetyyliformamidi, metanoli, etanoli, metoksietanoli, dietyylieetteri , isopropyylieetteri , bentseeni , tolueeni , metyleenikloridi, kloroformi, etyyliasetaatti, metyyli-isobutyyliketoni tms.

Näin saatu liuos tai suspensio saatetaan reaktioon kaavan (lii) mukaisen yhdisteen reaktiivisen johdannaisen kanssa tai kaavan (V) mukaisen yhdisteen kanssa tai kaavan (V) mukaisen yhdisteen karboksyyliryhmän reaktiivisen johdannaisen kanssa emäksen läsnä- tai poissaollessa -60 - +80°C:ssa, mieluimmin -40 - +30°C:ssa. Reaktioaika on tavallisesti 5 minuuttia - 5 tuntia. Emäksiksi edellä mainittuiin reaktioon sopivat mm. alkalihydroksidit, alkalivetykarbonaatit, alkalikarbonaatit, alkaliasetaatit jne, tertiääriset amiinit kuten trimetyyliamiini, trietyyliamiini, tributyyliamiini, pyridiini, N-metyylipiperidiini, N-metyylimorfoliini, lutidiini, trimetyylipyridiini jne ja sekundaariset amiinit kuten disykloheksyyliemiini, dietyyliamiini jne. Kun kaavan (V) mukaista yhdistettä käytetään menetelmässä (2) vapaan hapon tai suolan muodossa, voidaan menetelmän (2) reaktiota tehostaa lisäämällä vettäsitovaa kondensointireagenssia kuten N,N-disykloheksyylikarbodi-imidiä, N-sykloheksyyli-N’-morfolinoetyylikarbodi-imidiä, N,N'-dietyylikarbodi-imidiä, N,N’-karbonyylidi(2-metyyli-imidatsolia), fosforihapokkeen trialkyyli-esteriä, fosforihapon etyyliesteriä, fosforioksikloridia, fosforitrikloridia, 2-kloori-1,3,2-dioksafosfolaania tai oksatsolyylikloridia. Kaavan (V) mukaisen yhdisteen suolat ovat mm. alkalimetallisuoloja, alkalisten maametallien suoloja, ammoniumsuoloja sekä orgaanisten emästen kuten trimetyyliamiinin, disykloheksyyli-amiinin tms, kanssa muodostettuja suoloja,

Menetelmissä 1 ja 2 käytettävät reaktio-olosuhteet eivät rajoitu edellä mainittuihin, vaan niitä voidaan muunnella reaktioreagenssien mukaan.

Kaavan (I) mukaiset myrkyttömät suolat, joissa R^ on suolanmuodostajakatio-ni, saadaan helposti tavanomaisilla menetelmillä kaavan (i) mukaisista yhdisteistä, joissa R^ on vety tai suojaryhmä.

11 63760

] Q

Suojaryhmän R poistaminen suoritetaan sinänsä tunnetulla tavalla.

Eräiden tämän keksinnön mukaisten tyypillisten yhdisteiden herkkyys osoitetaan seuraavilla kokeilla, (1) Yhdisteiden pienin, eräitä standardikantoja inhiboiva väkevyys (MIC) on esitetty taulukossa 2,

Pienin inhiboiva väkevyys (MIC) määritettiin maljamenetelmällä, joka on esitetty julkaisussa "Chemotherapy” (Japan), Voi, 16, (1968), ss. 98-99. Elatus-alustana käytettiin sydäninfuusioagaria (pH 7,b), Jokaiseen maljaan siirrostettiin 10 solua (10 solua/ml).

12 63760

f— On ro I

tn la c— '— la I

en ·Η λ λ λ m 3 Jh t— o «- O m r- <D 3 cvi o v

P bC O CM

O I—i OO A rj ρ 3 o

* > M

P

3 (β id 3 r—I CÖ H -h ia a Φ C * «

•h O o O O CM CM

en S irs O O <— »—

P 3 OJ CM

H ö Λ W Pj tn CÖ CÖ

3 en O O

§ ö O Ή a bC O o O O ir\ un

33,· O la la CM CM

D P Ph cm

e0 0)· A

Ph CÖ H

CÖ

rC »"D

O W

•HM f— b— £·*- C'—

S LA LA LA LA LA

φ Λ Λ r\ λ Λ £h *H r- r- T— i— 1— 0 r-Η V/ O s7 tn o xx W o

Pe σ\ 1 o

0 CM I—I

>j en en a 3 3 t— t— on f- C—

ft O O) A LA e— LA LA

OeÖO^H*· Λ — A Λ Λί P O 3 t- r- co — ^ en o cö v <4 ^

H -H

2 ö “S -h

Eh .h

- ' I—I

* N *H M

•H C CÖ ·Η CÖ ö -h a tn a -H -h oo oo o o m co o •h ·η h a a o a a a o

3 ( I H O CO O en O O O

3 3 g 3 I

id ! -a I s » 1 g “ ! t -H 3 P P 5 Vs 3 P Ph P !m 3 3 3

3 Ö 3 3 a en P

a < aa ·— 3 ^ 3 —l -5 ^ 3 3 a o a o a a m o a a co en o cncoo ro a o a o a a o a a cd auo o o ,—v 1 -n n 'n -i^> i^>

P \ i \ 1 \ O O

>h V a N— a —B o ov a

-lD tL R -<D V

a a3 a 3 cm o a o a o a o en o u o o ro en ro o cm ao ao oo a aa u -o o -en a o o - a I i o (O) (O) (O) Ö ^ 0) <υ •P . r- w o Kontrolli •H * · a ö a i3 637 6 0 f— t— la f- la

LA LA C\i LA CM

fs 9% 9> *> **

r- τ- VO T- MO

^ ^ "/ s

M

-P

cd

O

r- m la t— —' la >- cm la K «\ r Λ 00 VO <- o

v IA

V

LA LA

Λ Λ

LA LA O CM CM

CM CM LA ^ t·— ro t~- c—

LA LA i— LA LA

is λ rv rv *> "αΓ V· SS 00 V v

O

Λί

-P

cd •O)

CM

O t— t— t-—· t—* t*—

^4 LA LA LA LA LA

f\ rt λ rv λ H 3 ν’ V V v p cd

EH

cd cd cd

B B k! S

ro coo oo co O K ro ro o κ k o tn tn o ro coo kko o o o o o o kko o o o .n n “ Ή n

Vs Vs v* Vf KKO o o o te te 1—11 r\ y~( KO KO κ o w ω te te I^g) l^o) \i o o o -Τ’ o v>

o o .-.O 0 O K Ou KO

o td σ ό I-® KKK KB '-' O O O o o ^-=t ^_CM ^_CM ^_M0 o

CM CM CM CM S N

K K K K

3 3 3 3 b^

CO CO CO CO CO

KKK KK

o o o o o

CM CO Pt LA VO

u 63760 en en oo oo on ft H It ^ oo oo oo » ·.

oo ro 3 3 Λ!

-P

a) Ό

LA LA

.. OJ <M

ITS Ο Λ Λ

OJ LA LA VD VO

OJ

LA LA A

A A A

OJ OJ OJ (A A

*- »- OJ OJ

C— h- f— 00 (--

LA LA LA '— A

A A A A A

>— *— «— ΓΟ r—

a! V V V V

o Λ

aJ

•<~3

OJ

O 0— t— 00 (—

M A A r— LA A

,*)C * Λ #* «t A

H V V V v 3

EH

as _ a

a! oo oo O

& Cd K O

00 00 O O O O aS

M M O \ / / a o o o as as V—/ oo ooo \/ / β Ö / cd Ed o

y- OO 00 o 00 00 O rX O .O O

/ Ed Ed O M S O °? 1 \J__/ W OOO OOO \ J- /—f v- ^ -fi Ί Cl

Li V» Vs rl I

i _l o —i ι^δ> H i ° iHo) i i g^s> f® X |^2>

X" ro ,Ο "< O

CVJ i J ° EC —' OAJ

-— J3 ^ O CVJ se CVJ O CVJ OJ Ed o cc sd —' oi o o oo ^

oo EC00 O SeP Γθ I

g_«_~^^__ e— oo σν o-- 00 15 63760 r-ooooont'—

Λ r- *“ «“ A

(V) * Λ * * m on oo *-

V

' § Λί -Ρ cö Ό 00 00 A Α ^

ΙΑ *- r- OJ CVJ

Α Λ Λ * " C\J 00 00 νο νο

A A A

A A *

A OJ OJ A OJ

OjT-r-OJr- t— t— t—· t— t—

A A A A A

A A A A A

”oi v vi V

o

-P

CÖ •r^

CVJ

o 0- 00 t— c— C*-

M A r- A A A

2 fl A A A A

-H >f cd

EH

bJ

a) S

B CÖ Bj CO on O

cd (O „ O m„a 3 SC K o

B Κ„ηΟ 03 -Τ’ O 00 <00 O U O

OO m Ο ΟΚΟ OKO 03 03 O \/ / W Μ00 O / v ^ O OOO V—( V ^ A it.

a P· ΐϊ ΐϊ -¾ u h> I® l·® I® K —' / o o o /Z.

A SJ J.J JJ -Q

oj oj aj 03

A J 03 03 03 O

O^zz OOO o w CVJ irv vo *- o cvj oj cvj cvj 03 03 03 03 03 o o o o o cvj co on m co 03 03 03 03 03 o o o o o

Cvj 00 _=J- LTV VO

63760 ι6 in Γ— OJ in f— * " in -=1- -VJ- VO t“ ^ Λ ft Ä

sj o o O

^ v 3 s

M

-P

a) •o C— in 00 C— 00 in in oj <— tn *— ** ft ft ft ft λ oj >- vo on «- a-, \l in in in in in in oj oj oj oj oj * ** Λ n «v

OJ VO VO VO VO VO

t~— c-— t— 2 LA A A T- τ- Τ Ο *> #» ft* n «* n -¾ »- *- *- o o o

Oj V V V V v v •H)

CM

0 PC- c— t— fj m m in a- £3 ft* Λ ft* ft* fti ftv £ z, - - o o o a3 a

tö on^o aJ

λ a a -Τ’ o a a oo mo oft u o ci mo id a a o .// oo oo o a a o a as qoo V_/ a a o o o o oo roo a Λ/ / / o p / \z / a a o ro mo /—f ' y / Ö Ή Ep V- p γί -l Vr Va r-L0 1 —1

g U 1 app S

i-® Iva» p r®-jp l^o>

0 ”Λ .l®£> - f „D

1 o^a ^ y P o oj o PP ~P ] a™ g fa 1 o ?^a/ o ^ no I-1 oo o oo oo oo a a a a a o o o o o —- p- iö " “ 1 3\ δ ^ cii ^

>- r- — CM CM CM

17 63760 o- t- f- ^ 00 LA LA LA LA — _** V V >1 ^ 9 3

X

•P

cö LA IA t— t~ 00 ^ “-3 CM CM LA LA - - - CO VO ΑΊ ro

Lf\ LT\ LTN

LA CM CM CM IA

in CM VO VO VD C\J

CM "

t— t— r— c— FV

LA IA LA LA -3- la ·, ·> - " * cd r- *— --. ^ .

O -y >J · Ά >/ V 'Λ M Λ -P cd •*“3

CVJ

S e— tt— r— ^ 3 LA LA LA LA J- la 3 „ « «, *> ·" *· H «- <- O »-

lv N x v "< N

EH

cd a

ro (VI O

B m O cd o o ° a cd . / / m ro o a Y—f aw o <d omo rt / i o p o a k ►v' o a m I V—y w°^o °S ° K00 ^8

Vs <Π svs/s rl 44 I

v® y~( “i ' y~i *"«"§ 1 ra | Vara H/° /“ K*0 Vs I Vs /f I/-, g ° μ r° 4 v-

ΙΛ°> Iva § ° 1/-,1° U

«JL 1^4/ §/q\ t® gy5> s f J O g g V4/ O S g 4l/ g yCT\

“T IJ V-, D vM" IV

r °f v c 4 4 CD M ffi o Cr^' ä s" tf © g s" e" 00-3· LA VO t— °0

CM CM CM CM CM CM

18 63760 t—

-=T LT\ LfN j$· ON

Λ ** λ n #> £»— O O «— T— o * V v v o ^ 3 Λ

•P

_ Λ σ\ t— t~- ,r*3 t -Zt LA LA ---

" » " « LA

Ο Ο r* t— LA Λ

V ν' CM CM

LA LA LA LA

LA CM OJ CM CM LA

" ·>·>·> ·. CM

CM VO VO VO MO *

T- VO

t— c- oo ''Z *- «- la la _q· «- CD Ä ·» ·* Λ η Λ ooo T- »- o m ^ v -y v v v cd •o

CM

O

S On t— t— 3 t— CM LA LA Jr n Λ ** λ λ n

3 ° ° r «- O O

£ v V V V

od

as B

cd cd S ro m O

S 65 ca O W te O

oo ooo oo oo o oom o auo W te O te te O te o U \ / / OOO O.O O 0 7/ V / AY ]Ff Af « £ W 1 v l oi I \ — S ro m o

\ 1 \ V_ s= iz 00 (Y, O te « O

)-¾ V» —s I W « O OÖO

ti U u R H A

m k) te N Π k

O O O O Ό O

O O O O o s te o /—\ J? K> .p k i^J^’ « W te tC g N_/ o O O O O Tl

—T° ^5 kA k° o o I

CM CM CM CM 'VK05

M W K te ] JM

o o o o i J te o oo oo oo oo O oo oo te te te te te te O O O O o o ON O r- OJ 00 -3“ 0J CO 00 ΓΟ ΟΊ ΟΊ 19 63760 C1— t— On t— t—

LA LA t-— -3- LA LA

****** t- 1“ O O 1- t- v V ~ d -j d LA Z2

IA LA CM -3- IA LA

Λ Λ * Λ A Λ

CVJ CM VO O OJ OJ

^ ^

LA

LA LA CM LA

ft ft It ft

CM CM VO CM LA LA

r“ T— CM CM

On t— On on ϊ·—

^ t— LA C— b- LA

* * λ ft ft f» Ο Ο 1- O O O t- £i "< V Ni ^ ai •o cu o AS £— ON σ\ e—

3 -Π U"\ t-- ,Η t- IA

r-->4 ft * ft η ft » 3 0 »- O O O «-

v V ^ >i VJ

00 « o 00 /-v /s~\\ °cm on ro <s> © «-„4 Ϊ" s K < f >2/ 8 l °— OJ ,/ ° ffi m m o w oj (^o HI W O O \ _ HI οηΛ 1 o „ mo O O O rn Ο N— S O HI g o m o \/ 7 HI ,/° o I m m o a .° o Y # 1Y p. W Ö U, p· U, 1® ti„ .

I sVrjN I γΥ 1 s-/o) r® Jr m°L) m.i® ° gv. 1 O g Y° Og 11

„D V jj S jj "V

m m m m m m

« HI HI « HI HI

o o o o o o LA VO C— co ON o

m m m m m -H

20 6 3 7 6 0

On On On On ro oo c— t*— c*·— t— ''— ^ r> Λ * λ * o o o o on m o, t- ^2 t-— lcn lcn CM 3 * * Λ Λ "tj

LP» O LTN ^ OJ VO ."L

oj c\j —; IT\ ltn C\J LTV OJ LT\ LTN LT\ Λ Λ Λ Π Λ Λ

MO CM VO CM CM CM

ON i—

-ti -ti -ti -ti f— UA

η λ #» ·> λ * ο ο ο ο ο >- g ^ N V -Ni Λ!

Ρ CÖ • '"D

OJ

O On On On On f— ν t— fr— C"·— -J- t— ltn *V #. Λ Λ Λ Λ ·» 3 O o o o o >- H >J -ti N/ 3

aJ

Eh O C)

CM CM

ti iti

O O O

CM CM

jti -o ffi m ro o I ] ro co o *h iti ti o I J ti ti o cm o o o v a ^ o to o UCM Λ"/ g /f ^ O g S ” I 8 1 ti g S 8 ro cp o \ o \— a a u \ / / ti ti O Ä 0000O POCOO V--/ o o o I itiitiO iti iti O / !

/-f U uXy° Wo yr vL

\ S ° “ I g co 1 2 i lgo> i !-<§> a H> l~V g w H g w roo g iti O tti0^,O iti O /-v g °rBN g VS"l § δ-<ΓΛ il·® P m »v ι-o =i^

O O O O O <y N

Λ o vo o vo f-, o 1

XD i X) ϊ p "V

u oo couro co υ ro ro iti ti iti ti ti ti o o o o o o

CM (O -ti I/O VO

2 -ti -ti -ti -ti -ti ti- 21 63760 ro oo r*" τ—~ i« n 00 00

A LA

CM CM

A A

#> r>

OI CM

r— t—

CÖ A A

O λ Αί -O —

-P V/ V

ti

•“D

CM

O

^ C- C—

HA A

Λ Λ cd <- «-

EH V V

cd

S

ro ro O cd KKO

~-,3 O O O

A ffi g \/ / ή ϋ vl )~s

—I

t K o —V s o o , I π sJTl s-O I " K «r o u • I. n

jD “V

^ 00 00

W M

O O

C— CO

H H" 63760 (2) Pienin sairaaloista eristettyjä "bakteereja inhiboiva väkevyys (MIC) on esitetty taulukoissa 3* MIC määritettiin samoin kuin edellisessä kohdassa (1).

63760 23

AOOOOOOOOOOOOOOO I ΙΑΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟ (in OJOJCMOJ’-’-OJOJOjOJOJCMWOJ

/\ Λ ΛΛ.Λ.Λ.Α.Λ.Α.Λ.

ΙΛΙΑΙΛΙΛΜΙΛΙΛΙΑΙΑΙΛΙΛΙΛ

LALAOJCNJCNJCNJr-CNJCNJCVJOJCMCNJCNJLA

I CNJCNJNONONONOPONOVONONONONONOCNJ

C-l, - «- “ po ia on p— po on c— σ\ h o\ t-

PO *— OJ P— LA '— LA p— LA p— LA

I 4s«s «sr\rvnAn#Nfi^

Pt, rove O’-poO’-Ot-o»-

OnPOPOP-P-ONONPOP-P-P-POP-P-P-

h'-'— IA1A[— (-<— IPIALA'-IAIAIA

OJ

I OPOPOi-'-OOPO’-’-’-PO’-'-’-m fe 2 o

Ο ΙΑ ΙΛ LA PO LA LA LA LA LA LA

a3 LA CNJ CM LA LA C\1 <— LAIACNJCNJCMCMCMOJ

γΛΛΛΚΛΡιΛΛΛΛΛΛΛΛ

M I CMNOVOOJCNJNOPOCMCMNOVONONOVONO

0 P>4 T- r- »- o ϋ o o o rH co νο lapopopopop-popooopopopop— po [»,.^-ΙΟίνΐ'-τ-ι-.-Ι/Νι-.-,-,-ι-,-υ-Ν*- <— ,β NO ·Λ·>·>»*“·>·'·>·«*··>"·· I p-oo^-nopopopopo^-popopopopopO'— po po cd

o co S

H NONOLAPOPOPO POP-POPOOOP-POPOPOPO

3 ONLACNJt-,-.-t-LA.-t-,-lAt--<-'-*- 05 la·'·'·'·'·'·'·'''*''*···'·'·'·'

EH aO'-NOPOPOPOPO'-POPOPOt-POPOPOrO

PO PO IA PO PO PO PO C— LA LA PO LA IA tA

.-.-CNJ·— t-'-'— LACMLACVI'-LACMCNJCNJ

f- Λ^ΛΛΛήΛΛΛΛΛΛΛΛΛ ao po vo po po po po >— vo cm no po cm no no no

CO A LA PO PO PO PO t— PO PO PO p— PO PO p— PO

COtVINr-i-r-r-LAi-i-i-IAr-r-lAi-LA *·,*****»-*»* «^ *> ·> aovovopoporopoi-popopot-popo'-po

On OnpoonOn On On on On On On 1--3- p— «- ρ- p- -a· -=f t— — t— t— t-— c— -=r

NO

COOOPOOOOOOOOOOOOO "·* >/ >/ V/ V" •Η ·Η β c •Η ·Η ·Η β Ή ·Η •Η γ—f t—i

•H rH rH

r—1 *H

H 0) COCMCOlALTsCOOvO’— C\J <7\ O OJ

•h β β --^^ajwajwnro <D co a> <u

+5 ·Η rO ,Q O

CO ft ^ H ·· •h S cd β ä ϋ 3 ^ w ^ •H *H -H tn - E Γ Ό-ΡΟ» Ό td cd <fl j3 & b a >h *

Kontrolli 63760 2k ΙΛ ΙΛ ΙΛ (η f- Π Λ σ\ ο\ 0\ <3\ ιλ ia w oj cm <— la la -— t— c-— t— t- c-— ^ ^ΛΛΙ>»1#ΙΛΛί»ΛΛΛΛ|Ν(\ i cmcmvomom£>oocm--oooooooo

^ - - V

mooooooooooooooo I OOOOOlAOOOOOOOLAO td CM CM CM -- CM CM OJ CM CM CM CM CM 1-

Λ A K A A A A A N

ia ia la ro roiAooo-oot·— O\o-

t\l W (\1 ΙΛ (\l ΙΛ 1- --CMi-LAr-LAC— LA

I Λ Λ Λ Λ A fi AAAAAAAA

WVOUJtMUJPJOlAOUJM'-rO'-O'--~ 1- OJ

LA LA LA ΓΟ 00 E~- 00 00 f- C-- O ON C— ’-OIWOJ'-'-lAlA'-lA'-lAlAf-t-lA •H I --------------- H!*JVOCOMOOOOO--CMOOCMOO----O0’- Ο -~ -- ο cd Η -C ίο -- •Η MQ Ο Ο Ο ΟΟΟΟΟΟΟΟΟ G 00 Ο Ο Ο ΟΟΟΟΟΟΟΟΟ

, <L) CM W (Μ WCMCMOJWWWWW

? £ g Λ Λ Λ Αα,Α A A a Α ,ν. Λ

οο m „ W

Μ ΙΛ A

-M LA ΙΟ (Μ CM

r~H VO ·* Λ «%

Ρ -d- OOLAOCMOOOOIAOLAMOVO

(j 00 OOCMLA--LAOOLACMIACM

2 CM CM -- CM

cd a . Λ

Eh g A A

CM ΙΛ OO LA E— 00 00CA0-C~-O>C—

ΙΛ ΟΙ ΙΛ 1Λ c ΟΙ ΙΛ (-lA--t-IAIAt-CA

^J· A A A Λ A A ΑΑΑΑΑΑΑΑ OO CO CM CM 00 MO -— LAOOCMOOO-— -— Ό-— -— — cm ι- ιζ; o LA OO LA LA 00 LA C— (Ο 0\ 0\ Λ Oc On 00--CMCM--CMLA1AC-— --C—C—f— t— -3- t— h3- --------------- ooooomooomd'-cM’-oooooooo a ^ v o -— LA LA LA LA OO 00 LA 00 C— t—- C— 00 C—

CO CM CM LA CM CM -— CM -— LA LA LA <— LA

-3· — — — — — — -------- OO MO MO CM MD VO 00 LA 00 VO 00-- -- -- 0O -- a ^ ™ o

*H Ή G G Ή *rH *H

G -H -H

•H rH f—I

(D -pH (—{ rH

-P r—i -rH -H

Mr—1 M M CM OO LA LA 00 ON O ’— CM ON O CM

•H -H G G -—-—-— CMCMCMCMOOOO

-G M <D CU

Mm -H ,G pG O

►h Pl G H ·* a 3 g g

•H -rH -rH CO

G G G -H — ϊγϊμϊϊμμΓϊ -P -P P -Ö

cd cd ai .G

a a a x

Kontrolli 25 63760

IA IA LA IA

on IA OJ (M CM OJ

qQ ft Λ Λ Λ Λ

roooooOLACMiOMOtAMDMOMOLALAO

ΟιλιλιλιαΛτ-ιλ cm w cm ia

S CM

Ο Λ

1Λ ΙΛ IA

LA LA CM CM CM LA

-f. * Λ ft Λ ft Λ

_3-OOOOOCMLAOCMOMD VO VO IA CM IA CMOLALALAIA'-CMILA'—, LTV CM'— CM

CM

S A

o Λ

LA ro m LAN LA

LA LT\ CM LA '-^ CM LA CM LA

CO *> " MDOOOLALACMCMLAMDCMOOCOMDCMMDCM '-OLALACMCM'-'-CM «- «- >-

CM

g K

m LA on CO LA

t— IA LA T- LA LA LA OJ t— >— LA CM LA

qq *\ rt rt rt rt ^ r< λ λ λ λ λ

DmOOLACMCMOOCMCMCMLAMDOOOOCMMDCM CM O IA CM ^ 1 ' ' CM »- ^

CM

g * cd co

O LA IA LA LA LA LA

Pj MD Λ r> rt r rt r-tLAOOOOOCMOOlALACMCUCMILACMLA MCMOOOLALA'-LALACMCM'-'-’-CmI'-CM 3 CM CM — ^ S /t « o ^ cd ω

cd LA 00 OO LO

CJ i— IA IA CM Lf\ t— — CM LCN LA LA

q 0»^ n rv rtrtrvrtrtr»rtri BOOOOLALACMCMLAMDCMOOOOMDCMCMCM O'-OOLACMCM'-’-CM >- rö CM i—

3 S K

0> O ^ en P4 00 00 LA LA 00 LA 00

| LA’-CMCM'-CM'^IA

00"- " t, Λ Λ ·> t Λ ·> cmolalaoialacmooomdmooomdoocmla

O CMOCMCMLACMCM'— LA --CM

M CM

3 S Λ 3 C5 Λ

f-I

O LA IA LA CO 00 LA LA

(d CM LA CM CM ’— »—CM LA CM LA

^ -j rt rv rtrtrvrtrtr\r»rt

CM O O O O LA MD CM LA VO MO 00 00 VO CM CD CM

COOOLALACM '-CM >- »- CM *- g Λ LA 00 LA 00 LA CM LA »— CM '-i MD ·* " “ “ " ·>

t— OOOOOLACMOMOCM CO MD 00 LA LA O

00 O LA LA LA LA CM '— LA r- CM CM LA

CM

S XL

o ^

LA LA LA

00 "

OOOOOOLAOOLAOCMCMLAOOLA i— O O O LA LA CM O LA CM LA '— CM LA LA CM

CM CM ^ »- g * *

»H »H

C Ö •H ·Η *H

β «H *H •H rH fH •H i—I i—( i—I »H *H (H CO CO

»H β β C\J OnLTNCOLTNCOONO *— CV] OnO cm cnDD T-r-^-oJOJOJOJOnrO

•H pQ 0 P< U r-\ ·· <U S td 2 C -P cd to M gj g g Φ fd-H-H-HtoE - r r = r - = r = r r

Λ S* t-l -H

-P -P -P T3 cd cd cd X! aas tM

Kontrolli 26 63760 la m c*— la t— o\ t—

LA LA (XjlAi-lAWlAhlA

#« r> **A*«t«S*#t r-LAOOOJLAOJOLAVOC\100i-\0<— o »- ^OJOO'-CJ’-IACM <-

C\J OJ

4> Ο * A cd ♦ H

Ö o a o la on la on on t— on p LA C\i LA LA C\J LA r- LA i“

QJ 00 * A A A #H «S A A

G oo o ovocMmoLACMiAvorocMon'-ο''ι ft LA Ο T- o cm *- cm r- ls CM t-

«3 ΰ A

r-I

H

Φ

•H

cn «- ,ο co la la φ Ο Λ Λ I i-H-G’OOCi^O^COOOOOLAOLACMCM OO W OOOCMLACMOOOOLACMOCM"-··- S CM CM CM CM >- >- CM r-

0 ^ A A a A

•j t“ P r- ΙΛ ΙΛ

Cj t— ·> ·>

H -d-OOOLAOLAOOOOOLAOLACMCM

OOOCMLACMOOOOLACMLACM’-'— S3 CM CM CM CVI »- *- *-

°V A A Λ A

ΙΛ ΙΑ ΙΛ fi ft Λ OOOOOLAOOOOCMCMCMLAOO -3-OOOlAlACMLAlALAO'-*-'— CM ΙΑ 1Λ I CM CM «- <- aJ ω ^ ω O la G «

•H OOOOOOOOLAOCMLALAOOO

bCCOOOOOOLALAOCMLA'-CMCMLALAlA p I CM CM «- ft- «- <-

h CO A

a>

aJ

LA LA LA

tn *. *. λ

CÖ OOOOOLAOOCMLACMCMLALAOO

äCMOOOLALACMLALA^CMft-t-CMCMLALA O I CM CM «-

g CO A

"G

P LA LA LA LA

(1) A AAA

03 OOOOOCMOOOOCMCMCMLAOO

il Γ- O O O LA LA lALALAOft-T-<— CMLALA

I CM CM CM

“ A

•H *H

G G

•H ·Η «H

G ·Η -H

•H i—1 r—I

•H i—I (H

H ·Η ·Η

H CO WCMOOLACOLAOOCAO'-CMa\OCM

•H G G ^-t-T-CMCMCMCMCOCO

to a> <u •h ,Q ,a o <U ft G H ··

-P S G P G

m ffl ^ ai ^ rG ·Η·Η·Η"ίηε = = = εΓ = Ε = = = = R G G G -rl -P -P -P T3

<d cd cd ,G

S 13 S tH

Kontrolli

6 3 7 6 O

il

•H

G

0 rooco Ov 1^ IA M 0\ ΙΛ 0\ A A t“lAlAWIA"-t-C\|[-44 • H CO ·> « ----------- .G γοομαο--*-νο<μοοονοοοο O- ι-G CM «— n

>5 CO

P

VO G m

H--00000000000000 HCMOOOOOOOOOOOOAA O CMCMCMCMCM-~CMCMCM--CMCM

O CO ^ Λ Λ y\ Λ ti en

•H

XJ C\ VO LAlAlAlAfOhlAt-ONhhh^ dr- la (\J CM CM CM *“ IA OJ LA t— LA LA IA r- S VO *"*«*«»»"'*"*** -pj *-VOVOVOVOOOi“VO*-Oi-*“<-00

»-G

G CO H H O G

O On CO on t— (O on t— C— on On On C— On On t—

g| NO C— »- IA T— T- LA IA T- f— t— A t— t— A

Gojoon'-ononr-r-moo’-oo»- co

H

CO

A ON

Ithooc— t— moNonAt— onooc— onc—

CO Geo AAAAr- C— 1- CV1 At— «- A f- A

Φ -------------- o G’--~ojoj'-moonNO--oon--o-- 3 o co 3 H h>

H <G

G

G G

Eh H

HA A AA

(LI >- A CM CM CM

b£ CM - ** — -

• H 1— O O CM A* NO O O LA A O LA NO NO

G-- O O — CM O O CM CM A CM

CO CM CM --CM

CO Λ A - ^ Λ

CM LA A

•H OO A CM A CM

<D CM * * λ λ

£ O O O CM LA VO O O O IA O LA CM VO

flt-OOO-r-CM A O A CM A CM

O CM CM CM r-

CO CO Λ y\ A

G ^

»H

r—i 0)

6C A

• HAA CO A t— CO A CO t— on t— 0\ ON

Xl CM A r-CMA^-CMt-A^-At— t— CA " ***********

t— VO CM O CO VO i~ CO VO CO ^ CO OO

r- O

CO CM

^ A

•H »H

G G

•H ·Η »H

G »H »H

•H r—j H

•H i—I (—I

rH ·Η »H

H CQ COCMOOACOOnOi-CMCTnOCM

•H G G CMCMCMCMCOCO

CO <D 0)

• H ,Ο X O

ft h H ··

g ti G G

ti w -p i i i ^ ω ·η ·η ·η to

•H in in in *H

T3 -P -P -P Ό

rG ti ti ti *G

>h sa; a s; >-«

Kontrolli 28

* 6 3 7 6 O

•H

Sh la LA LA la CO On <L> CM ia ΙΛ ΙΛ CM C\l (\1 »- f- tjJ A A A CL * *t «\ «\ *1

-P OOONOCNJCLJLACNJNONONOCOO

P O O O I- !- C\l r

CU OJ CVi OJ

U Λ Λ m •h co VO Sh CA CO -4 00 -4-4-4-4-4-4-4-4 1 as ------------- m bc *-ooocooooooooo 0 ^ V >1 H co 2 3 a! ω Eh -p o

Sh

Oh -H

-h e— vo co o\ On On SA 4 4 LA *- 44 (-4 4 C— C— -4 -4 bC *-ΟΟ*-Γ0ΟΟΟΟΟΟΟΟ £ V N/ >/ V » -ν' Ή a en

•Hb- ON VO CO ON

H lACOf— LA*— -4t“-4-4-4-4-4-4 • H **ΑΑ«ΗΑΑ*«Ν#Ί«\#\* O» *-00*-0000000000 ^ v N/ NjVVVV'^

•H

a

•H -H

e e

»H »H »H

C ·Η »H *H r-H rH

*H rH H

rH Ή »H

H M WIALACOOnO^WOnOCU

•HÖC ^-’-r-CMCV!CMCMOnon

CO (D <U

•H ,Ο .O O P< ^ H

I | g a "en -h -h -h "tn •H ShShSh-H444 444EE4

Ό -P -P -P -O

Ä cd cd aj o! >h S S3 a ϊπ

Kontrolli 29 63760 (3) Sietokyky Pseudomonas aeruginosa GN 238-kannan tuottaman Alaktamaa-sin suhteen:

Yhdisteiden /3-laktamaasin sietokyky määritettiin seuraavalla tavalla.

/^laitamaasi valmistettiin Pseudomonas aeruginosa GN-238-kannasta. Tätä mikro-organismia kasvatettiin 6 tuntia ravistelulaitteessa 3T°C:ssa 500 ml:n Erlenmeyer-pulloissa, joissa oli 100 ml kasvualustaa, joka sisälsi 2 g hiivauutetta, 10 g polypeptonia, 2 g glukoosia, 7 g dinatriumvetyfosfaattia, 2 g kaliumdivety-fosfaattia, 1,2 g ammoniumsulfaattia ja 0,1+ g magnesiumsulfaattia litrassa. Solut sentrifugoitiin talteen (5 000 r/min, 10 min) ja pestiin kolme kertaa 0,1 M fosfaattipuskurilla (pH 7,0). Tämän jälkeen solut rikottiin äänen avulla (20 kHz, 20 min) ja sentrifugoitiin 60 minuuttia kierrosluvulla 15 000 r/min. Erottuneen entsyymipitoisen nesteen avulla määritettiin yhdisteiden Alaktamaasin sietokyky käyttämällä jodometristä mittausmenetelmää. Saadut tulokset on esitetty taulukossa 1+. Taulukon 1+ luvut ovat suhteellisia sietoarvoja, jotka on laskettu antamalla kontrollina käytetylle kaliumpenisilliini G:lle arvo 100.

Taulukko 1+

Alaktamaasin sietokykyjen vertailu

Yhdiste Suhteellinen sietoarvo _:_m_

Kaliumpensilliini G 100

•H

h Natriumampisilliini 115 o £ Natriumkarbensilliini 116 c

Natriumsulbensilliini_50__

Yhdiste n:o 15 3

" 18 1U

" 19 15 "20 15 " 21 15 "22 15 " 29 16 " 30 12 " 32 1

Taulukoista 2-3 ilmenee, että tämän keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on laajempi bakteerinvastainen spektri ja paljon paremmat bakteerin-vastaiset ominaisuudet sekä Pseudomonas aeruginosan, Klebsiella pneumoniaen, Proteus-lajien että useiden lääkkeitäsietävien bakteerien suhteen kuin kontrol- 30 6 3 7 6 0 leina käytetyillä ampisilliineilla so, yhdisteillä, joilla on aminoryhmä asyyli-ryhmän o<-asemassa, Taulukosta 1+ ilmenee, että uudet yhdisteet sietävät /$-lak-tamaasia paljon paremmin kuin kontrolleina käytetyt lääkkeet, Nämä penisilliinit ovat yleensä vain vähän myrkyllisiä. Esimerkiksi 6-^5(-)- oir(U-metyyli-2,3-diokso-l-piperatsinokarbonyyliamino)fenyyliasetamido7~ peni s lilaani hapon ja 6-^(-}-o<-(it-etyyli-2,3-diokso-l—piperatsinokarbonyyliaminoj-fenyyliasetamidojpenisillaanihapon LD,_0-arvo (hiirillä, joiden paino on 19- 1 g) on yli 5 g/kg,

Kaavan (I) mukaiset uudet yhdisteet voidaan antaa vapaina happoina, myrk-kyvaikutuksettomina suoloina tai fysiologisesti hyväksyttävinä estereinä. M(yös yhdisteet, jotka ovat fysiologisesti kelpaamattomien estereiden muodossa, voidaan ottaa käyttöön, kunhan ne ensin saatetaan vapaiden happojen tai myrkkyvaikutukset-tomien suolojen muotoon soveltamalla tällä alalla tavallisessa käytössä olevia menetelmiä, Tämän keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä voidaan antaa ihmisille ja eläimille, kunhan ne ensin saatetaan fysiologiseen muotoon kuten tableteiksi, kapseleiksi, siirapeiksi, ruiskeiksi tms,, joita tavallisesti käytetään penisilliini tyyppisten lääkkeiden yhteydessä,

Uusien yhdisteiden valmistusmenetelmiä kuvataan seuraavassa esimerkkien avulla,

Esimerkki 1 (1) Seokseen, jossa oli 1,78 g 1-metaanisulfonyyli-3-oksopiperatsiinia, 2,17 g trietyyliamiinia ja 20 ml vedetöntä dioksaania, lisättiin liuos, jossa oli 3,71 g trimetyylikloorisilaania 10 ml:ssa vedetöntä dioksaania. Kun saatua seosta refluksoitiin 7 tuntia ja jäähdytettiin, erottui trietyyliamiinihydrokloridisakka, joka poistettiin suodattamalla, Suodos tiputettiin 10°C:ssa liuokseen, jossa oli 1,0 g fosgeenia 30 ml:ssa vedetöntä metyleenikloridia. Saadun seoksen lämpötila nostettiin, ja reaktion annettiin jatkua huoneen lämpötilassa 30 minuuttia. Tämän jälkeen fosgeeniylimäärä ja liuotinylimäärä tislattiin pois alipaineessa, ja saatiin 3,5 g vaaleanruskeata, öljymäistä lt-metaanisulfonyyli-2-okso-l-piperatsino-karbonyylikloridia, IR (filmi) cm"1:\)^,_Q 1790, 1700, "^gQ 1320, llUo, (2) Suspension, jossa oli 1,5 g 6-/d(-)-o^-aminofenyyliasetamidq7penisil-laanihappoa 20 ml:ssa tetrahydrofuraania, jossa oli 20 tilavuus-# vettä, pH säädettiin arvoon 8,0-8,5 lisäämällä hitaasti trietyyliamiinia, ja tämän jälkeen suspensio jäähdytettiin 0°C:een, Näin käsiteltyyn suspensioon tiputettiin tässä lämpötilassa 30 minuutin aikana liuos, jossa oli 2,0 mg edellä mainittua k-metaani-sulfonyyli-2-okso-1-piperatsinokarbonyylikloridia 20 ml:ssa tetrahydrofuraania.

Tänä aikana suspension pH pidettiin arvossa 7,5-8,0 lisäämällä hitaasti trietyyli- 31 63760 amiinia. Sitten seoksen lämpötila kohotettiin 5^30^:seen, ja reaktion annettiin jatkua tässä lämpötilassa tunnin ajan, ja samalla huolehdittiin trietyyliamiini-lisäyksillä, että pH pysyi arvossa 7^5^8,0, Tämän jälkeen tetrahydrofuraani tislattiin pois alipaineessa, ja jäännös liuotettiin seokseen, jossa oli 50 ml etyyliasetaattia ja 25 ml vettä, Saatua seosta jäähdytettiin jäällä, samalla kun sen pH säädettiin arvoon 1,0 lisäämällä laimeata suolahappoa, ja tämän jälkeen orgaaninen kerros erotettiin talteen, Vesikerros uutettiin vielä 20 ml:lla etyyliasetaattia, ja orgaaniset kerrokset yhdistettiin, Yhdistetty orgaaninen kerros pestiin vedellä, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja jäähdytettiin jäällä. Kun tähän orgaaniseen kerrokseen kaadettiin liuos, jossa oli 570 mg 2-etyyliheksaanihapon natriumsuolaa 25 ml:ssa etyyliasetaattia, erottui valkoisia kiteitä. Kun nämä kiteet suodatettiin talteen, pestiin etyyliasetaatilla ja kuivattiin, saatiin 2,U7 g 6-/δ(-)"oh-(U-metaanisulfonyyli-2-okso-l-piperatsinokarbonyyliamino)fenyyli-asetamidojpenisillaanihapon natriumsuolaa, sp, 130°C (hajoaa), saanto 80 %.

Edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että U-metaanisulfonyyli-2-okso-1-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin taulukossa 5 mainituilla, kaavan (III) mukaisten yhdisteiden reaktiivisilla johdannaisilla, ja näin saatiin taulukossa 5 esitetyt vastaavat lopputuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IR:n ja NMR;n avulla, 32 63760 §

M

. -P

oJ <Ö B cö t-j CO ro O B - pe W O ro 00 o o o o se se o

Ή °>Y

V L V1 p *A N— B Vä.

Pt I On

* o —V> O

SC O -p Sp ° -p

B e B C

0 aJ o 3 <S O /-\ cö O /—v cö i i® ; s® ; s' o o o o ft o j- o <- S4 oi. t" o vo

J Ό 1 O I

1 i

OJ OJ

M 3 se ai O ci O cö -3- O OJ o ,ry •-s CM CÖ CM CÖ se se se se 0 — I o lev I 00 · I 00 „ se ft se ft o po ω p o cq

Ai 3 3 cd

En

C

CD

Q)

-P

CO

•H

'd e

Ä <D

*>> ö »H i—I

•HO O

β cö O O

<D ö O O

3 s o I oi

l! Ό O

1 I

' · ö CM CM

h <u w se

H S O O

H -H -d- CM

•H CM CM

G -h se se CÖ -P o o CÖ a3 OO 00 cö o se se

BP O O

63760 cd cd

en en O en en O

M CC O M M O

O O O O O O

/f /f \ V- a r— m tss. iss.

—il 5 -L 5

Vi O O O

M υ -p K -P

s a s e o cd o cd o /-v cd o /-\ cd r© :· i-® :· o o o o 0 m o o -s- o i K on o i m tir i o i

1 I

—- CNJ —' CXJ --- cd K cd M cd o o cd o cd λ; oj o vo o -P y~- <r~3 <1-3 cd oj cd c\j cd

"-3 K M M M

v_, I O —- I o —

LTN I ΓΟ [ PO

— K ft — K ft o Q O CQ Q o ω

M

3 3 cd

Eh r—i ft o o

O en O

OM O

OIO OI

0 o

1 I

OI OJ

M M

o o

OJ NO

OJ OJ

M M

o o oo en

M M

o o 3^

6 3 7 6 O

Esimerkki 2 (1) Liuokseen, jossa oli 6,k g 1-formyyli-3-oksopiperatsiinia 10 ml:ssa vedetöntä dimetyyliformamidia, lisättiin samalla jään avulla jäähdyttäen 2,7 g natriumhydridiä (puhtausaste 53 %), ja reaktion annettiin tapahtua huoneen lämpötilassa tunnin ajan, Tämän jälkeen seokseen lisättiin 7,1 g metyylijodidia, ja reaktiota jatkettiin 10 tuntia. Kun dimetyyliformamidi tämän jälkeen tislattiin pois alipaineessa, saatiin 1-formyyli-1+-metyyli-3-oksopiperatsiinia. Tämä piperat-siini liuotettiin 70 ml:aan asetonin 50 % vesiliuosta, jossa oli 2,2 g natrium-hydroksidia, ja saadun liuoksen annettiin reagoida 3 tuntia huoneen lämpötilassa.

Kun liuotin tämän jälkeen poistettiin alipaineessa ja jäännös kaadettiin asetoniin erottui sakka. Sakka poistettiin suodattamalla, ja asetoni tislattiin pois suodok-sesta alipaineessa. Kun jäännös vielä tislattiin alipaineessa, saatiin 5,2 g 1-metyyli-2-okso-piperatsiinia, kp. 10i+°C/532 Pa, saanto 91 %· (2) Liuokseen, jossa oli 1,9 g fosgeenia 20 mlrssa vedetöntä dioksaania, tiputettiin 10°C:ssa liuos, jossa oli 2,0 g 1-metyyli-2-okso-piperatsiinia ja 1,95 g trietyyliamiinia 20 mlrssa vedetöntä dioksaania, ja tämän jälkeen erottui trietyyliamiinihydrokloridi-kiteitä reaktion tapahtuessa. Kun erottuneet kiteet poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin kuiviin, saatiin 3,0 g vaaleankeltaista öljymäistä 1+-metyyli-3_okso-1-piperatsinokarbonyylikloridia.

IR (filmi) cm“1: μ 1710, 1030 (3) Suspension, jossa oli 1+,0 g 6-/t)(-)-oC-aminofenyyliasetamidq7penisillasuii- happoa 1+0 mlrssa tetrahydrofuraania, jossa oli 20 tilavuus-yi vettä, pH säädettiin trietyyliamiinilisäyksillä arvoon 8,0-8,5, ja sen jälkeen suspensio jäähdytettiin 0°Creen. Näin käsiteltyyn suspensioon tiputettiin liuos, jossa oli 2,2 g edellä mainittua l+-metyyli-3-okso-1-piperatsinokarbonyylikloridia 10 mlrssa tetrahydrofuraania. Suspension pH pidettiin koko ajan trietyyliamiinilisäyksin arvossa 7,5-8,5· Tämän jälkeen seoksen annettiin reagoida mainitussa lämpötilassa 30 minuuttia, ja sitten lämpötila nostettiin 10-15°Creen, jossa reaktion annettiin jatkua 90 minuuttia, ja samalla huolehdittiin trietyyliamiinilisäyksin siitä, että pH pysyi arvossa 7,5-8,0. Tämän jälkeen tetrahydrofuraani tislattiin pois alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 30 mlraan vettä. Näin saatu liuos pestiin etyyliasetaatilla, ja vesikerros otettiin talteen. Kun vesikerros jäähdytettiin jäällä, ja sen pH säädettiin laimealla suolahapolla arvoon 1,5, erottui valkoisia kiteitä. Erottuneet kiteet suodatettiin talteen, pestiin monta kertaa pienellä määrällä vettä, kuivattiin ja liuotettiin 100 mlraan asetonia. Kun tähän liuokseen lisättiin 1,9 g 2-etyyliheksaanihapon natriumsuolaa, erottui valkoisia kiteitä, ja kun 35 63760 ne suodatettiin talteen, saatiin 5,U g 6-β)(-)-e0-(U-metyyli-3-okso-1-piperatsino-karbonyyliamino)fenyyliasetamido7penisillaanihapon natriumsuolaa, sp. 195°C (hajoaa), saanto 92 %.

IR (KBr) cm"1: μC=Q 1760 (laktaami), 1600-1660 (-CON jl , -C00 NMR /(CD3)2SO + D207 tarvot: 2,62 (SH), U,U8 (1H), U,56 (2H), 5,97 (3H), 6,63-6,39 (UH), 7,13 (3H), 8,U6 (3H), 8,55 (3H).

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että U-metyyli-3-okso-1-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin taulukossa 6 mainituilla, kaavan (lii) mulkaisten yhdisteiden reaktiivisilla johdannaisilla, saatiin taulukossa 6 esitetyt vastaavat lopputuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IR:n ja NMR:n avulla.

36 3 63760

_j X

QJ jji ^ a a a * Q s •'-s u w o mono ^ \P V _ cg cc o y—/ . «J o u u co [ δ °° °°° V—/

\_ sT nT 8 o S 8 J I

I wt y~i

O' CO I

0\ CO \ —^ o V-» " ra —i «

K Ο -P VO | t— CG O VO

δ S CJ\ 1 oo B CT\ O Cd -ft o o /-v td ο _ Ό o u /-v o HÖ) :- go § I I B-® § 5 '-C O a (do /— \ o) B \-f cd O O O ra CG / S~^\ to O co « v & *_/^Λ - ΙλΟ/ - 7 § f Ί vi g \^7 v 8 % f Ί °o -p A ____J o o oi o J J o

g CM O CM CM o^f· W

Q M™ «5 "cd J "<d CG™ "«d >3 o <d cd c>&' cd o d CM O I _ J 0^1 O 00 o ->-3 ^-B^ -(-3 tri ·<-3 ^ -Γ-3 CM cdOI cdCJ cd cm cd CG Ä CM ä CM ,G CG Ä JI^O — CG — I — I o —.

I 00 · I 00 · I CG · I "~oo CO —-K O. — SS ft— O ft — CG ft

QO CO O O CO P — CO Q o CO

o r—t :

EH

G

(U

ω

-P

ra

•H

Tl e ä a;

>> G H H

H O o

β aJ O O

a> β o o

MCI H I

•H « ,SV Ο , Β V.

11 IS § v f) a o .av cP'-b e OJ - ΓΊ 'cm m g s r ί ^bJ g

Qica/ cg —g1

•H CM ^ I O CM

G ·Η CG CM CM w ä -P O CG ^ o > jd —' O 00 — cd ra oo oo CG oo

cd <1> CG CG O CG

CG G O O — o —I - - I II I- "*" 11 "-· ' » ..... ** 37 63760 s 3 Λί -Ρ Λ .% a οο ro o m .

a a O <§ d aj o o o o e k W »"S^S 65 8 f»T|

<J >Y >Y TY

y— a co I CQ . to I Y-s Vs V a I ** ^

O [ 1L

| o o K, Si ^ o h®i l·®! k>l \®l ' ω οο p o o o O(no

r '"i « « V fr V o V a T

L) $ Υί t Γγ ° rv 7 ^ Un, 'J ¥Ν Λ W ^ w ^

a? a rt o §u Su S

P O rt cm 5* m cm ‘S’ s, . 3 . « 3 a JS a 5 JL, JL3 — i o 3 i cj> 3 I K · f 00 , t po I on

VO — o rL

0«— woo woo £ o o

pH

3 ti

H

rH

O

Ro H H

V 9 O O

± 00 P O O po a 9 o 9 a P “I") χ γ r"j“

O T CM CM

►To aa

iC v_3 O O

P CM CM CM

°ηι T CM CM

_P * aa co 3 3 3 * T 00 oo 3 R aa '—o o o 38 63760 cd Β on onS M aa g o o u H' “ w.

V- ® o u i w ° § B cd O to

Ko>« o o

Ο τι I

- B. O

„iJ : —' ° I cd cd cm cd OKO Μ Ο ·ο -p I cd cd Λ 3 t (O) ~ 10 a ^ St

O

iH

cd

EH

r—I

o

O

O

Λ

CM

K

O

39 63760

Esimerkki 3 (1) Liuokseen, jossa oli 0,5 g fosgeenia 10 ml:ssa vedetöntä dioksaania, tiputettiin 10°C:ssa 10 ml vedetöntä dioksaania, jossa oli 0,56 g l-allyyli-2-oksopiperatsiinia ja 0,5 g trietyyliamiinia, minkä jälkeen tapahtuneessa reaktiossa erottui trietyyliamiinihydrokloridia valkoisina kiteinä. Kun erottuneet kiteet suodatettiin pois ja suodos väkevöitiin kuiviin, saatiin 800 mg vaaleankeltaista, öljymäistä U-allyyli-3-okso-1-piperatsinokarbonyylikloridia.

IR (filmi) cm 1: \) c_^ 1720, 16**0 (2) Suspension, jossa oli 1,1+ g 6-/p(-)-ck-aminofenyyliasetanrido/penisil-laanihappoa tetrahydrofuraanissa, jossa oli 20 tilavuus-^ vettä, pH säädettiin arvoon 8,0-8,5 sekoittamalla siihen vähitellen trietyyliamiinia, ja tämän jälkeen suspensio jäähdytettiin 0°C:seen, Tähän suspensioon tiputettiin 10 ml tetrahydro-furaaniliuosta, jossa oli 800 mg edellä mainittua l+-allyyli-3*S)kso-l-piperatsino-karbonyylikloridia. Tiputuksen aikana suspension pH pidettiin arvossa 7»5-8,5 lisäämällä vähitellen trietyyliamiinia, Sitten seoksen annettiin reagoida 30 minuuttia mainitussa lämpötilassa, ja sen jälkeen lämpötila nostettiin 10-15°C:een, jossa reaktion annettiin tapahtua vielä 90 minuuttia, ja koko ajan huolehdittiin trietyyliamiinilisäyksin siitä, että pH pysyi arvossa 7»5~8,0. Tämän jälkeen tetrahydrofuraani tislattiin pois alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 20 ml:aan vettä, Saatu liuos pestiin etyyliasetaatilla, ja vesikerros erotettiin talteen.

Kun vesikerros jäähdytettiin jäällä, ja sen pH säädettiin laimealla suolahapolla arvoon 1,5, erottui valkoisia kiteitä. Kun erottuneet kiteet suodatettiin talteen, pestiin vedellä ja kuivattiin, saatiin 1,8 g 6-^-(-)~o(-(l+-allyyli-3-okso-1-piperatsinokarbonyyliamino)fenyyliasetamido7penisillaanihappoa, sp, 92°C (hajoaa), saanto 90 %, IR (KBr) cm"1 1760 (lakt aarni), 1720-1620 (-C00H, -C0N O·

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että U-allyyli-3~okso-l-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin taulukossa 7 mainituilla, kaavan (III) mukaisten yhdisteiden reaktiivisilla johdannaisilla, saatiin taulukossa 7 esitetyt vastaavat lopputuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IR:n ja NMR:n avulla, 63760

Uo W 3 too 3 www cow o m mo m o roo woo p m w O row O cow O o , / cd w oo woo woo y-—f r-3

r~i y~( y~i \ I

ml ω I co I Is V- S3 ^ a V" s c— w ^ p w p· w°oo a vd g g a σ\ a ον ο σ\ . !-© = B-® f |-®ί Ϊ-® i p is '—' o a \—/ « a '—> n) o «s OO OO co o to o to

3 0 0 0 o I

p I co I " I ·>

! .Ο 1 & I /J ! Q I

w I I u I CM

CM'-'CM'-'-CM^-W '—^

W oJ W td W cd o aJ

0 edo a) O at o cd P O u~\ O VO O >- o .r-3 -- · r"3 -r-3 CM 3 CM td CM Cd CM (d , K ww wwww w JI^O — I O ^-IO I O —- ico * i to »ico *ico '-'W ft'-'® (¾ ^ W p< w

t- « o CO Q O CO Q O CO Q O CO

o -¾ I-"*

pH

3 (d

E-C

C

<I)

CD

P

to

•H

ti d

® CD

>> C H H H O

•HO O O O

3 cd O O O O

o ö o o o I

II Jb Λ ώ .o

1 I I CM

—- Ö CM CM CM ®

M (D W W W O

w c o o o o Μ ·Η P ir\ VO r-

•H CM CM CM CM

g ή w w w w ffl P o o o o cd al co to co '""co «Jaw w w w w 3 o o o o ία 63 76 0

ηΟ W p-iaTO

gS8 «Π \_ c~-

T— S3 CO

o rA s

W ° aJ

S3 m 1-® s o

α I

·— I

5 f Ί 3 d ·π> •»-o O I (Ö : t (ή 3 o ^ *-' ft

^ Q CO

*—t 2 CÖ

Eh

I—I O

o o Λ ώ k2 63760

Esimerkki fr (1) Seokseen, jossa oli 8 g oksaalihapon dietyyliesteriä 8 ml:ssa etanolia, tiputettiin huoneenlämpötilassa U,U g N-etyylietyleenidiamiinia. Näin saadun seoksen annettiin reagoida 3 tuntia, ja sen jälkeen etanoli poistettiin kuumentamalla. Kun jäännös uudelleenkiteytettiin 10 ml:sta dioksaania, saatiin 5,U g 1-etyyli-2,3-dioksopiperatsiinia, sp. 12U°C, saanto 76,0 %.

(2) Suspensioon, jossa oli 0,71 g edellä mainittua 1-etyyli-2,3-dioksopi-peratsiinia 15 ml:ssa vedetöntä dioksaania, sekoitettiin 0,70 g trimetyylisilyyli-kloridia ja 0,83 ml trietyyliamiinia, Kun seosta sekoitettiin 20 tuntia huoneen lämpötilassa, erottui trietyyliamiinihydrokloridia. Tämä hydrokloridi suodatettiin pois, ja suodos tiputettiin 5~10°C:ssa liuokseen, jossa oli 0,70 g fosgeenia 10 ml:ssa vedetöntä tetrahydrofuraania. Kun seoksen annettiin reagoida 5-10°C:ssa 30 minuuttia ja huoneen lämpötilassa 2 tuntia, ja liuotin poistettiin alipaineessa, saatiin 1,0 g U-etyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridia vaaleankeltaisina kiteinä.

IR (KBr) cm'1: ^c=0 178θ,ΐ66θ (3) Suspension, jossa oli 1,75 g 6-/t>(-)-oi-aminofenyyliasetamidq7penisil-laanihappoa 50 ml:ssa tetrahydrofuraania, jossa oli 20 tilavuus-/? vettä, pH säädettiin arvoon 8,0-8,5 sekoittamalla siihen trietyyliamiinia siten, että syntyi liuos. Liuos jäähdytettiin 0-5°C:een, ja sen jälkeen siihen tiputettiin liuos, jossa oli 1,0 g edellä mainittua U-etyyli-2,3~diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridia 7 mlrssa vedetöntä tetrahydrofuraania. Tänä aikana reaktioliuoksen pH pidettiin arvossa 7,5-8,0 lisäämällä vähitellen trietyyliamiinia. Saadun seoksen annettiin reagoida tässä lämpötilassa 30 minuuttia ja sen jälkeen 5-10°C:ssa tunnin ajan, ja liuoksen pH pidettiin koko ajan arvossa 7,5-8,0. Reaktion tapahduttua tetrahydrofuraani tislattiin pois alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 20 ml:aan vettä ja pestiin kahdesti 20 ml :11a etyyliasetaattia. Vesikerrokseen lisättiin vielä 50 ml etyyliasetaattia, ja syntyneen seoksen pH säädettiin laimean suolahapon avulla arvoon 1,5 samanaikaisesti jäällä jäähdyttäen. Sitten etyyliasetaatti-kerros erotettiin talteen, pestiin riittävästi vedellä ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Kun näin käsiteltyyn kerrokseen tiputettiin liuos, jossa 011 0,83 g natrium-2-etyyliheksanoaattia 10 mlrssa etyyliasetaattia, erottui valkoisia kiteitä. Kun erottuneet kiteet suodatettiin talteen, pestiin ensin riittävästi etyyliasetaatilla ja sitten dietyylietyylieetterillä ja kuivattiin, saatiin 2,k g 6-^T)(-)-</-(U-etyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)fenyyliasetamido7-penisillaanihapon natriumsuolaa, sp. 183~185°C (hajoaa), saanto 89 %· 1,3 63760 IR (KBr) cm-1: p 3765 (laktaami), 3720-3670 (-CON C ), 1600 (-C00®) NMR ^(CD )g SO + D207 T-arvot: 2,62 (5H), 4,31 (1H), 4,50 (1H), 4,70 (1H), 6,05 (1H), 6,35-6,65 (6h), 8,49 (3H), 8,60 (3H), 8,91 (3H).

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että 4-etyyli-2,3_diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin taulukossa 8 mainituilla, kaavan (lii) mukaisten yhdisteiden reaktiivisilla johdannaisilla, saatiin taulukossa 8 esitetyt vastaavat lopputuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IR:n ja NMR:n avulla.

It It 63760 a 1 on o ,® cow o a} woo aj

on ono —/ on rn O

8S8 gg 8 *i V» y-(

Sg 8 V1 “\ 1 yH w. r* ~ H ^ If ω I -=r I no w ° c- to

V k Hs °° § 00 -A

« I I g 5 8 /7Λ ° « ° 3 i 1 S 8 „ § |λΡ> § I s ft \q a5 S3 /s~\\ <e S V-/ 03 O /-V ej 3 = W &KO> ω 8 M S-/n\ " ft z - s \ / ·> I ·> w\ V-> / ft o O O O O Ö \-/ o 3 1/0)¾ °A °° tj °s o ? °s ; X ) ; z °rBn ; 9 d ^ S3 S3 a) J J as O I aJ ° I sJ o ci ctf

EA O 00 O CM O ° I O

J I S’ S S’ CM S’ O S’ -5. I ¢8 £· I o -5-1 ^ <£ ^ I —' O ^ -—- ro

oo , on -ion · i on -IW

Λ Λ.® Pa* ft — o ft

O 1° CO P O CQ P O CQ P CO

3 o- I—i 3 CÖ eh a

CD

a;

-P

w 3 a Λ a>

!>* ft P

•H O

ft aj o

Oft H O

to g o O I p •si 8 Vs> 8

|o °v*N 1 J o V

» § n ° / νβΊ

p <U 9 S3 A J

p ft o L ° I o Cr~

p -H ^rv SB v. CM CM I

'—S» τι w — w

H O CM O

g-H J J CM S3 CM

3 -P Jos8 ^ W O ^ S> i ° I O on aj aj on on on S3

d <U S3 W S3 O

W ft o o o —- >5 63760

P

P

ms -ΰ ms O cd ® woo ~~ B cd /?

o./ p on jJ’1 o cd „B

V-—/ m « o B on J^o / | o y o mono w rt o m n7 / W a o o Po

Vr 0 ** °>Y s Λί I—k ·* Vt o y* ό V" ~ B 0- -^ Ö C I «3

o o cd t cd —K

o /-v O W cd ^ cd 'o 9

* / s-\\ p g « _, o M g -S

W \0/ § O /-c *> B "O _ cd s N-/ cd « A->\ o o o o t-v cd 0 ? ” Ia2> 8 Ι7δ\ s |-<ö> :

'V o o I B \-f I O O

I lt\ o i oo O ctn o o I I I— wB>. ON O OO o 1 “ 0<V i f Ί - v*. z r3Ni ~ § e1 S S I J s s <»J <M O C\J O O ^ I o P * -r-D w ‘Hl -g> W . ’J?

- B & S .^,ίτ^Ι * , S S

Λ 8 ^ Λ V ^ ^ [OJ — w oo i m · i cvj · i · i o · '— w Ph —' W Ph··— CM —'H Pc

O Q O CO Q O CO Q CO O O CO

M

3

rH

P

cd

H

H

O

O

O H

OIO H

O O ö

OHO OI O O

ΓΊ o ? >S

** °V 0IJ

CU OJ J J ° I

W « CU

O O W

o tn >v. o o o cu o II Π * m CU u o

M W y. J H

O O o U6 63760 ai a) aio 53 onw o on aio woo W M O O , /

O O O 15¾ yC-/ *A

y~f £ / £

V. 5 Vs S

l at v at

-^ CO CO

O O

*Tj #> Λ

53 O B O

o _ o o o th® t 1^) t O t- O ~ t- O 00 r- o »T1 T- I « o 1 n s ry s ry % ai ^ l ai ° I ai •m OJ Ä CO Λ — i w -— i m

—'O '-'O

oo i on · i -—' CÖ Oj '—^ pj o q o ω q o

Ai 3

i—I

3 ai

En

I—I

o o 0 on h 1 m o o l # n

O I

on on

« K

o o 47 63760

Esimerkki 5

Suspension, jossa oli 1,4 g 6-/i)(-)-e<-aininofenyyliasetamidq7penisillaani-happoa 30 ml:ssa tetrahydrofuraania, jossa oli 20 tilavuus-# vettä, pH säädettiin arvoon 8,0-8,5 sekoittamalla siihen trietyyliamiinia niin, että syntyi liuos.

Liuos jäähdytettiin 0-5°C:een, ja siihen tiputettiin liuos, jossa oli 1,2 g 4-n-pentyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridia 10 mlcssa tetrahydrofuraania. Tänä aikana reaktioliuoksen pH pidettiin arvossa 7,5-8,5 lisäämällä vähitellen trietyyliamiinia. Sitten näin saadun seoksen annettiin reagoida edellä mainitussa lämpötilassa 30 minuuttia ja sen jälkeen 10-15°C:ssa 90 minuuttia, ja koko ajan huolehdittiin siitä, että pH pysyi arvossa 7>5“8,5· Reaktion päätyttyä tetrahydro-furaani tislattiin pois alipaineessa, ja jäännös liuotettiin veteen ja pestiin sen jälkeen kahdesti 20 ml:11a etyyliasetaattia. Vesikerrokseen lisättiin vielä 30 ml etyyliasetaattia, ja saadun seoksen pH säädettiin laimealla suolahapolla arvoon 1,5 samanaikaisesti jäällä jäähdyttäen. Tämän jälkeen etyyliasetaattikerros erotettiin talteen, pestiin riittävästi vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja liuotin poistettiin alipainetislauksella. Kun jäännös kiteytettiin lisäämällä di-isopropyylieetteriä, saatiin 1,8 g kiteistä 6-^5(-)-o£-(4-n-pentyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)fenyyliasetamido7penisillaanihappoa, sp. 96°C (hajoaa), saanto 80,5 IR (KBr) cm"1; ^c=0 1770 (laktaami), 1720-1660 (-C0N' , -C00H) NMR ^CD3)2S0 + D207 Τ'-arvot: 2,62 (5H), 4,31 (1H), 4,51-4,69 (2H), 6,04 (1H), 6,20-6,90 (6h), 8,50 (3H), 8,60 (3H), 8,75 (6h), 8,90 (3H).

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että 4-n-pentyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin taulukossa 9 mainituilla, kaavan (III) mukaisten yhdisteiden reaktiivisilla johdannaisilla, saatiin taulukossa 9 esitetyt vastaavat lopputuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IR:n avulla.

¢3760 kö td K oo o td ooooo ro td o oo^o td td o td u o td *o aff °^γ opr

oQ^ I C/\__ W

. tei tel tei -p o cfj O cö O cö O O O cq u tn d i «< i _ i -p <VdN o * o a te °s I I) o“ ,3 o^fV - o ^ <* c>Y O' CM ^ CM CM ^ td 3 td 3 td cö o cd o cd o td

-d- o ir\ o KO O

·<-3 Ό -Γ-3 CM CÖ CM Cd CM cd , K Ä td A td a O —' I O W | o —'

CT\ ! PO · I PO · I PO

-—-td ft >— td ft ^ td ft o qo co q o cö ο ο co

X

%

H

3 cö E-» c Φ <1)

•P «Λ • H

Ti G XJ Φ

G rH (—I t“H

«H O O o

G tö O O O

Φ G O O O

II °rS °rS °rS

S o^s·^ o^vts/

' ö CM CM CM

hd K td td mc o c_> o M ·Ρ -a- LTO md

•H CM CM CM

ö ·η td td td 3 -p CD o o cd ’ä po ro ro 3 <d td td td td Sh O O o 1+9 63760

Esimerkki 6

Kun esimerkissä 5 kuvattu menettely toistettiin siten, että otettiin 1,7 g 6-/D(-)-oC-amino-p-hydroksifenyyliasetamido7penisillaanihapon trietyyliamiinisuolaa ja 0,7 g l+-metyyli-2 ,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridia, saatiin 1,2 g 6-/ϊ)( - )-ot-( h-metyyli-2, 3-diokso-1 -piperatsinokarbonyyliamino )-p-hydroksifenyyli-asetamido7penisillaanihapon natriumsuolaa, sp. 170-172°C (hajoaa), saanto 75 !· IR (KBr) cm~1: ^ C_Q 1760 (laktaami), 1T10-1660 (-C0nO, 1600 (-C00®) NMR /TCD )2CÖ7 T-arvot: 2,8-3,3 (1+H), 1+,1+5 (1H), 1+,65 (2H), 6,05 (1H) , 6,2 (1+H), 6,97 (3H), 8,1+8 (3H), 8,6θ (3H) 6-/D (-) -oCr- (U-etyyli -2,3-diokso-1 -piperatsinokarbonyyliamino) -p-hydroks i f e-nyyliasetamido7penisillaanihapon natriumsuolaa, sp. 175°C (hajoaa), saanto 72 %, saatiin samalla tavalla kuin edellä, mutta käyttämällä l+-etyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridia ja -)-c<-amino-p-hydroksifenyyliasetaraidq7peni- sillaanihapon trietyyliamiinisuolaa.

Esimerkki 7

Liuokseen, jossa oli 0,8 g ö-Zbi-J-ot-aminofenyyliasetamidoypenisillaani-hapon ftalidiesteriä 10 mlrssa tetrahydrofuraania, lisättiin 0,25 ml trietyyli-amiinia. Saatuun seokseen tiputettiin 0,32 g l+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsino-karbonyylikloridia samanaikaisesti jäällä jäähdyttäen, ja seoksen annettiin reagoida 2 tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktion päätyttyä liuotin tislattiin pois alipaineessa, Jäännös liuotettiin liuotinseokseen, jossa oli 20 ml etyyliasetaattia ja 20 ml vettä, ja syntyneen liuoksen pH säädettiin laimealla suolahapolla arvoon 2. Orgaaninen kerros erotettiin talteen, pestiin ensin vedellä, sitten natrium-vetykarbonaatin 2 % vesiliuoksella ja vielä kerran vedellä, kuivattiin magnesium-sulfaatilla ja väkevöitiin 2 ml:aan. Kun konsentraattiin lisättiin 20 ml di-isopropyylieetteriä, erottui kiteitä, ja kun kiteet kerättiin talteen, saatiin 0,95 g kiteistä 6-^ti(-)-o£-(l+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino )-fenyyliasetamidojpenisillaanihapon ftalidiesteriä, sp. 157_160°C (hajoaa), saanto 90,0 %.

IR (KBr) cm"1: c=0 1780 (laktaami)> 1715 (esteri), 1680 (-C0N <) NMR /(CD3)2C0 + D20j tarvot: 2,12 (1+H), 2,1+0 (1H), 2,58 (5H), 1+,25-1+,60 (3H), 5,1*5 (1H), 5,85-6,1+2 (1+H), 6,90 (3H), 8,50 (6H).

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että l+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin taulukossa 10 mainituilla, kaavan (lii) mukaisten yhdisteiden reaktiivisilla johdannaisilla, saatiin taulukossa 10 esitetyt vastaavat lopputuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IR:n ja NMR:n avulla.

50 63760

if A

o w o on on o V—/ on ono a a O / a a O o o u m ο α o \/ / \ v / « y—f ** V-s ^ /7) ° a/ I oj j co

Vs o Vf o -o § -4 § § § ΐ *-i " S “ δ-Ζολ " P S3 * O _ ·> a \V_/ / -PS; o o /-\ o a \-' u p o _ o a / r~\ \ o o o ft O /-\ O o—( ( ) > O O LT\ 5 %<θ) - -

pi a \Λ_> / I o I T l I

a '—' co o co on o o I cm I J t- V - Ys - Όψ 'g 1 J 'd a™ d d o d 1 _ J O I O CM o ry^-a^ ,rn> a Ό ' .r3 ^ i d υ d on cd CM a cm a a a o I a — I ^ -— I o u ^ on . ^ I on · I a · I on a p 6 ωΡ'— m1 "p o co -¾

H

P

cd

Eh β

V

<U

a cn

•H

a a a <u

r*> β I—I

H O

β Cd O

Φ β o w g H O' •H eri Ο

β a h o V N

ä a . u u I

P o o o' I J

s-a o °^aχ o^a-a HI °ή oU s* — > a·^ a --

•H ^ I O CM

§*H CM CM a a a --- o ί> x o on —- d d on a on cd ω a o a a β o — o 63760 51

Esimerkki 8

Liuoksen, jossa oli 0,86 g 6-/i)(-)-o£-aminofenyyliasetamido7penisillaani-hapon metoksimetyyliesterin hydrokloridia 15 mltssa tetrahydrofuraania, jossa oli 20 tilavuus-^ vettä, pH säädettiin trietyyliamiinilla 0-5°C:ssa arvoon 8,0-8,5- Tähän liuokseen tiputettiin 10 minuutin aikana liuos, jossa oli 0,38 g U-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridia 10 ml:ssa tetrahydrofuraania. Tänä aikana reaktioliuoksen pH pidettiin trietyyliamiinilisäysten avulla arvossa 7,5-8,0. Näin saadun seoksen annettiin reagoida 30 minuuttia, ja tänä aikana sen pH pidettiin arvossa 7,5-8,0. Reaktion päätyttyä tetrahydrofuraani tislattiin pois alipaineessa. Jäännös liuotettiin liuotinseokseen, jossa oli 50 ml vettä ja 50 ml etyyliasetaattia, ja näin syntyneen liuoksen pH säädettiin laimealla suolahapolla arvoon 1,5 samanaikaisesti jäällä jäähdyttäen. Kun orgaaninen kerros erotettiin talteen, pestiin vedellä, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja liuotin tislattiin pois alipaineessa, syntyi kiteitä. Kun kiteet pestiin di-etyylieetterillä, saatiin 0,9 g 6-/i>(-)-«(-(U-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsino-karbonyyliaminc)fenyyliasetamidqjpenisillaanihapon metoksimetyyliesteriä, sp. 111—115°C (hajoaa), saanto 82,5 %· IR (KBr)cm-1: y?c 1?80 (laktaami), 17»+0 (esteri), 1700-1660 (-C0N «O NMR {(CD3)2CQ7 tarvot: 0,15 (1H), 2,0 (1H), 2,67 (5H), U,3-U,5 (3H), »+,75 (2H), 5,7 (1H), 6,55 (UH), 6,97 (3H), 7,25 (3H), 8,8»+ (3H), 8,60 (3H).

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että t-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin taulukossa 11 mainituilla, kaavan (lii) mukaisten yhdisteiden reaktiivisilla johdannaisilla, saatiin taulukossa 11 esitetyt vastaavat lopputuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IR:n ja NMR:n avulla.

52 63760 m af* « o o °

Hm CM

cm on ®

«ÄO

jr* o o fvv00 8 ?5 f'0 -0° H cm a g o

r-ί f/i H

*r*rg v ΡΓ y*

UvZ7 ~ Is ra I « « / | CM -6¾ \__. ^ a r' « a H I O -k o CM -^ a- V-a 00 w ° 00 00 a0c~ o a o _,. o s o -p o _ -P V. -P o .p 5 -4 | «-/τΛ I a ° § 8 /7Λ § § ib s 8λΟ/ s § s &KO) ^ +j a s '-' o /-v s \-f o. O A \ o o o o—(f))o o o S H,~\0 / °- °° § °- °vk ^ g vr/ ?ΤΊ 7 8 ? Y Ί r

° 00 J J CO „ I 00 A J O

V 00 o f ^ °V»M O' oT ^

Hx^a. — CM — I 1 — CM — i 3 o § § g g J l O CM O o | o MD o aa -1-3 - - •’-z a ,r~3 — -i-j υ I rt CM Οβο ce CM 0} , JM a a a , cm a a a ia ·—- i o —- i >— i o ^ ·- — u —on — ·— - i on · i on -ia · i on '-'a pfv_^s ft—o p< ^ a λ

^O QO CO Q O CO O — CO Q O M

iH

§ tn e Φ

<D

-p tn

»H

T3 G Ä <D

r*» G lH H

• HO o

Gro O O

Φ G O O

W G I H o I

•H <d 0.yg. o Uv\/Äs.

il 8 n Y

B-o o ^ — a o ^ cm Tl cm MSTi « i J a ne o o

pl ·Η -i J CM O | MO

— > o^-aa — a —

•Hl CM O CM

o -h r j a cm a rt a a o — o t' M e j -—- on ’—' rt rt en en a on rt <u a a o a a u o o o 63760

Esimerkki 9

Kun otettiin 1,5 g 6-^(-)-<^aminofenyyliasetamido7penisillaanihapon tri-metyyliasetyylioksometyyliesteriä ja 0,6 g l+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsino-karbonyylikloridia, ja meneteltiin samoin kuin esimerkissä 8, saatiin (^-metyyli-2,3~diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)fenyyliasetamidq7penisillaani-hapon trimetyyliasetyylioksimetyyliesteriä, sp. 108-111°C (hajoaa), saanto 75 %· IR (KBr) cm"1: ^α=0 1780 (laktaami), 1750 (esteri), 1710-1660 (-C0N<.)

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että U-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin taulukossa 12 mainituilla, kaavan (III) mukaisten yhdisteiden reaktiivisilla johdannaisilla, saatiin taulukossa 12 esitetyt vastaavat lopputuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IR:n ja NMR:n avulla.

6 3 7 6 0 5b on

W

O

on o —' o

on O

« O

O OJ

—' a u o u ono o on a o 0 woo 6 Ή X-/ ** *«.

V1 - A ^ a a

1 O a O

-P O -P

<L> ___k Ö O /-V G

-P f cd a /s-~\\ O CÖO 10 cj —<( f ) ) cd G W ω a \W / cn -P O 53 \->

G O /--\ ·> O

p. a / r~\\ o o u p o—i( ( ) ) o o I o

o a / CO LA

pi g V—/ ch y c—

o -=r 1 J OJ

σ\ ίο 1 I

^ Ol ^ Y > cd a a! id o cd

1 J Ο MO O

T-j .ro

Oi cd cm cd CM Λ K £i OJ W I o ^ I on · i on O — W p ^ w p

M Q O CO O O CO

3

r—I

G

cö

H

G

<U

0)

-P

ω

»H

τ3 g ,G <D

>s G H

•H O

G cö O

Φ G O

H S °v S .

cd Ό rH T ^

33 8 i J

B -m O cr^aa o 1 1

— G 0V- av. OJ

M <11 Tl a i—i g I I o

H -H 1 J MO

•H I OJ

g ·μ cm a g -p a o > a O —' il Ό on g o a k a o co o 6 37 6 0 55

Esimerkki 10

Kun otettiin 0,81 g 6-/£>(-)-°<--aminofenyyliasetamidq7penisillaanihapon ^-piperidinoetyyliesterin hydrokloridia ja 0,3 g ^-metyyli-2,3-diokso-1-piperat-sinokarbonyylikloridia, ja meneteltiin samoin kuin esimerkissä 8, saatiin 0,75 g 6-/1)( - j-otr- (k -me tyyli -2,3-diokso-1 -piperatsinokarbonyyliamino) f enyyliasetamidq7~ penisillaanihapon /3-piperidinoetyyliesteriä, sp. 166-169°C (hajoaa), saanto j8 %.

IR (KBr) cm_1: ^ 1780 (laktaami), 17^0 (esteri), 1710-1670 (-C0N ^ ) NMR (CDC13) T-arvot: 2,7 (5H), h ,3~k,6(3H), 5,7 (1H), 5,75 (2H), 6,0 (2H), 6,h (2H), 6,9 (3H), 7,^5 (2H), 7,6 (Uh), 8,5 (12H).

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että ^-metyyli^ ,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin 1+-n-oktyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokar-bonyylikloridilla, saatiin 6-/D(-)-«6-(l+-n-oktyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokajrbo-nyyliamino)fenyyliasetamido.7penisillaanihapon /3-piperidinoetyyliesteriä, sp. 110-115°C (hajoaa), saanto 73,58 %.

Esimerkki 11

Kun otettiin 0,93 g 6-/f)(-)-ot-aminofenyyliasetamidq7penisillaanihapon A-morfolinoetyyliesterin hydrokloridia ja 0,39 g ^-metyyli-2,3-diokso-1-piperat-sinokarbonyylikloridia, ja meneteltiin samoin kuin esimerkissä 8, saatiin 0,8 g 6-/S(-)-«A-(I4-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino) fenyyliasetamido7-penisillaanihapon /3-morfolinoetyyliesteriä, sp. 150-153°C (hajoaa), saanto 73 %* IR (KBr) cm"1: ^ 1780 (laktaami), 17^0 (esteri), 17TO-1680 (-C0N £ ) NMR (CDC1 ) T-arvot: 2,55 (5H), U ,3-U ,55 (3H), 5,6 (1H), 5,7 (3H), 6,0 (2H), 6,3 (2H), 7,k (2H), 7,5 (hH), 8,5 (6h).

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että U-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin ^-n-oktyyli-2,3-diokso-1-piperatsino-karbonyylikloridilla, saatiin 6-/b( - )-w€-U-n-oktyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino )fenyyliasetamido/penisillaanihapon ^-morfolinoetyyliesteriä, sp. 103~105°C (hajoaa), saanto 70 %.

Esimerkki 12 (1) Liuokseen, jossa oli 7,8 g D(-)-<*-fenyyliglysiinin natriumsuolaa 50 ml.-ssa vettä, lisättiin 50 ml etyyliasetaattia ja 5,05 g trietyyliamiinia. Näin saatuun seokseen lisättiin vähin erin 15 minuutin aikana 0-5°C:ssa 9,5 g H-metyy-li-2,3~diokso-1-piperatsinokar'bonyylikloridia, ja sen jälkeen seoksen annettiin reagoida 30 minuuttia 5-15°C:ssa, Kun vesikerros reaktion päätyttyä erotettiin talteen, pestiin dietyylieetterillä ja pH säädettiin laimealla suolahapolla arvoon 1,5, erottui kiteitä. Kun kiteet suodatettiin talteen, pestiin vedellä ja kuivat- 56 6 37 6 0 tiin, saatiin 1*+,1 g Di-J-iK-^-metyyli^ji-diokso-l-piperatsinokarbonyyliamino)-fenyylietikkahappoa, sp. 13Ö—1U1°C (hajoaa), saanto 8? %. Kun uudelleenkiteytet-tiin vesipitoisesta etanolista, saatiin valkoisia kiteitä, sp. ll+o-ll+2°C (hajoaa).

Alkuaineanalyysi (C^H^N^O^.HgO):

Laskettu {%): C 52,01 H 5,30 N 13,00 Löydetty {%): C 52,21+ H 5,32 N 12,8? IR (KBr) cm”1: \>C_Q 1710, 1700, 1660.

(2) Kun liuokseen, jossa oli 10 g edellä mainittua D(-)-ot-(l+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)fenyylietikkahappoa 200 ml:ssa asetonia, tiputettiin sekoittaen liuos, jossa oli 5,2 g 2-etyyliheksaanihapon natriumsuolaa 50 ml:ssa asetonia, erottui kiteitä. Kun erottuneet kiteet suodatettiin talteen ja pestiin asetonilla, saatiin 9,6 g D(-)-ot-(l+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsino-karbonyyliamino)fenyylietikkahapon natriumsuolaa, sp. 165°C (hajoaa), saanto 95 %· (3) Suspensioon, jossa oli 8,8 g edellä mainittua D(-)-06-( 1+ -metyyli-2 ,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)fenyylietikkahapon natriumsuolaa 80 ml:ssa metyleenikloridia, lisättiin 20 mg N-metyylimorfoliinia. Näin saatuun seokseen tiputettiin 5 minuutin aikana -20 - -15°C:ssa liuos, jossa oli 3,1 g etyylikloori-karbonaattia 20 ml:ssa metyleenikloridia, ja seoksen annettiin reagoida tässä lämpötilassa tunnin ajan. Tähän reaktioliuokseen tiputettiin 10 minuutin aikana -1+0 - ~30°C:ssa liuos, jossa oli 9,1+ g 6-aminopenisillaanihapon trietyyliamiinisuo-laa 1+0 ml:ssa metyleenikloridia, ja näin saadun seoksen annettiin reagoida tunnin ajan -1+0 - -20°C:ssa. Reaktion tapahduttua liuoksen lämpötila nostettiin tunnin aikana vähin erin 0°C:een, ja sen jälkeen seos uutettiin 100 ml:11a vettä. Vesi-kerros erotettiin talteen, metyleenikerros uutettiin vielä 50 ml :11a vettä ja vesikerrokset yhdistettiin. Kun yhdistetyn vesikerroksen pH säädettiin laimealla suolahapolla arvoon 2 samanaikaisesti jäällä jäähdyttäen, erottui kiteitä. Erottuneet kiteet suodatettiin talteen, pestiin riittävästi vedellä, kuivattiin ja liuotettiin 200 ml:aan asetonia. Kun tähän liuokseen tiputettiin 10 minuutin aikana liuos, jossa oli i+ g 2-etyyliheksaanihapon natriumsuolaa i+0 ml:ssa asetonia, erottui kiteitä. Kun kiteet suodatettiin talteen, pestiin asetonilla ja kuivattiin saatiin 11,U g 6-/T)(-)-o<c-(l+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)fenyy-liasetamido_7penisillaanihapon natriumsuolaa, sp. 170°C (hajoaa), saanto 80,8 %.

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että D(-)-o*-(i+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)fenyylietikkahappo korvattiin taulukossa 13 mainituilla, kaavan (V) mukaisilla yhdisteillä, saatiin taulukossa 13 esitetyt vastaavat loj;putuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IR:n ja NMR:n avulla.

63760 57 ο β ΓΟΟ οο W Ο

d WOO

a ow / d 00 00 Ο γ f Ε3 W W O / ϋν7 X~ V"

X-f \ I

V1 V r κ ΓΓ U i ° I j—I I ° § /7Λ I § ° o 1 _/=λ §A/ pv o o o —< ( ) > o P, O /-V UO W V'-' / o 3 s-/n^ ? § w o g YrV Λ o V o I Ί 0 v T ί ^ - VSvi p d w™ d ai ° I d o d 1 J O CM O (M o ·Π) W -n> "*0 -r? I eö o d CM d CM W cm ww w; 1 w — I W —' I o ^ — O ^ o ' OO I ΓΟ · I OO · I 00 W pH— W Ρί-^W Ph

QO CO Q O CO P O CP

O W

3 r—1 2 CÖ en w φ o .2 8 1 Jf\ I § §-/o> p2/

S oAq\ o N 7 0 V

.s o V Y >

I o v T*'] oJ-J

> λ J CM CM

— ,-00^ κ Π\ι ° ί o v-P' C CM - CM '0 3 ί w I w —

> —- O O I CO

ο; ί οο I co - w

ci — W —· W Ω O

WOO Ω O

58 6 3760

Esimerkki 13 (1) Lluokseen, jossa oli 2,28 g D(-)-c(-amino-1,U-sykloheksadienyylietikka-happoa 15 ml:ssa 1N NaOH, lisättiin 20 ml etyyliasetaattia ja 2,1 ml trietyyli-amiinia, ja tämä seos jäähdytettiin 0°C:een. Tähän seokseen lisättiin vähitellen 10 minuutin aikana 1,69 g U-metyyli-2,3~diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridia. Seoksen annettiin reagoida 30 minuuttia samanaikaisesti jäällä jäähdyttäen, ja sen jälkeen vesikerros erotettiin talteen. Vesikerrokseen lisättiin 20 ml etyyliasetaattia. Tämän seoksen pH säädettiin 2N suolahapolla arvoon 2 samanaikaisesti jäällä jäähdyttäen, ja etyyliasetaattikerros erotettiin talteen. Kun orgaanista kerrosta pestiin riittävästi vedellä, kuivattiin vedettömällä magnesium-sulfaatilla, poistettiin liuotin alipainetislauksella ja lisättiin isopropyyli-alkoholia, erottui kiteitä. Kun erottuneet kiteet suodatettiin talteen, saatiin 2,5 g 0( - )-<*-( U-metyyli-2,3-diokso-1 -piponats.i nokarbonyyliamino )-1 ,^-syklohekca-<1 ienyylietikkahappoa valkoisina kiteinä, sp. 1 h(D— 1 Uti°C (hajoaa), saanto 'fU %.

IR (KBr) cm"1: ^ 3300, jQ=Q 1715, 1660 NMH (dg-DMSO) Tearvot: 0,57 (1H, d), U,26 (1H, s), k ,36 (2H, s), 5,29 (1H, d), 6,07-6,18 (2H, m), 6,38-6,1+9 (2H, m), 7,05 (3H, s), 7,35 (UH, s).

(2) Suspensioon, jossa oli 0,1+5 g edellä mainittua D(-)-oC-(l+-metyyli-2,3_ diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)-1,l+-sykloheksadienyylietikkahappoa 15 ml:ssa vedetöntä metyleenikloridia, sekoitettiin 0,2k ml N-metyylimorfoliinia niin, että syntyi liuos. Liuos jäähdytettiin -10°C:een, ja siihen tiputettiin liuos, jossa 011 3 ml vedetöntä metyleenikloridia ja 0,2k g etyylikloorikarbonaattia, ja tämän seoksen annettiin reagoida 90 minuuttia mainitussa lämpötilassa. Tämän jälkeen reaktioliuos jäähdytettiin -20°C:een, ja siihen tiputettiin vähitellen liuos, jossa oli 0,70 g 6-aminopenisillaanihapon trietyyliamiinisuolaa ja 0,31 ml tri-'-'tyyliamiinia 5 ml:ssa metyleenikloridia. Tämän seoksen annettiin reagoida -20°C:ssa 1 tunti, -20-0°C:ssa 1 tunti ja 0-5°C:ssa 1 tunti. Tämän jälkeen liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös liuotettiin 10 ml:aan vettä ja pestiin 10 ml :11a etyyliasetaattia. Vesikerros yhdistettiin 15 ml:aan etyyliasetaattia, ja pH säädettiin 2N suolahapolla arvoon 2,0 samanaikaisesti jäällä jäähdyttäen. Kun etyyliasetaattikerros erotettiin talteen, pestiin vedellä, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja liuotin tislattiin pois alipaineessa, saatiin 0,7U g 6-/T)(- )-«<.-(U-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)-1,U-sykloheksa-ilienyy]Lasetamido/penisillaanihappoa valkoisina kiteinä, sp. 8U-87°C (hajoaa), saari Lo 87 %· 59 63760 IR (KBr) cm 1: ^c=0 1780 (laktaami), Ί730-1660 (-C00H, -CON <1.) NMR (dg-DMSO) T-arvot; 0,55 (1H, d), 0,95 (1H, d) , 1+,22 (1H, s), 1+,35 (2H, s).

1+,1+1-1+,61 (2H, s), 1+,92 ( 1H, d), 5,75 (1H, s), 6,05 (2H, bs), 6,1+0 (2H, bs), 7,03 (3H, s), 7,35 (1*H, s), 8,1+0 (3H, s), 8,52 (3H, s).

Kun tämä tuote neutraloitiin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella pH 7,Oraan ja sen jälkeen suodatettiin ja kylmäkuivattiin, saatiin tuotteen natrium-suola.

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että D(-)-ot-( 1+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)-1,l+-sykloheksadienyylietikkahappo korvattiin taulukossa 11+ mainituilla, kaavan (V) mukaisilla yhdisteillä, saatiin taulukossa 11+ esitetyt lopputuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IRrn ja NMRrn avulla.

6o 63760 π) a

00 O

nj’o tö ano a ο υ .

cd en ro o y-—i „a a a o / oo o o p / rn rotu o \Γ/ h//u n Vs yi J.

ω I —1\ a o _I a ö 8 >λ-λ 5 Ι"Λ § S-^Λ p< a a // \ u a '—" o ft o o~r /) o o o

o o y-—c tn \ // o o UO

a k // \ a V—/ oo „ i t- O —V /) O O - °.ixE!x -

a \ // o o i T ^ I

X——z j- i ό\ I I cvj o CO cya. t t 0y;r"a S 'i i·'· a a "rt a™ Ίβ cd o i cd o cd ° ™ ° cm o a ·ό> a "-a ·ι-3 oi cd o cd cm cd , w a . cm aa a ia i a — i o ^ o — o ^ — I 00 · I 00 I 00 ara Pn^—a o< ^ a 1¾ -aoo co p o co p o co o

M

s 1—I 3 cd tn a o ω o a a o n—v w o a // \ SS 0 f,—\ a \ // S 8 g_f\ § O-/

= =JT~\ i V-y 0 V

<u o-/7 λ o °^,a.

•S gvi 0 v r -¾ o v T Ί °^*r ~ τ Ί ° r s £ cAa-1

0 I O CM

C p CM a cd 1 a ia 10 — o ^ £ I Ό I O0 I ro cd —-a -—-a - a a q r_> Po po 61 . , 63760

Esimerkki 14 (1) Liuokseen, jossa oli 2,2 g DL-o£-amino-2-tienyylietikkahappoa ih ml:ssa 1N natriumhydroksidiliuosta, lisättiin 0°C:ssa 2,2 g trietyyliamiinia. Tähän liuokseen lisättiin vielä mainitussa lämpötilassa vähitellen 3,6 g t+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridia. Sitten seoksen annettiin reagoida 0°C:ssa 30 minuuttia ja sen jälkeen huoneen lämpötilassa 30 minuuttia. Kun liuoksen pH reaktion päätyttyä säädettiin laimealla suolahapolla arvoon 1,0, erottui kiteitä. Kun kiteet suodatettiin talteen, pestiin vedellä ja kuivattiin, saatiin 3,5 g LL-ot- (l+-metyyli-2,3-diokso-1 -piperatsinokarbonyyliamino)-2-tienyylietikkahappoa, sp. 2ll+-215°C (hajoaa), saanto 80,5 %, IR (KBr) cm-1: p 1710, 1680-1660.

(2) Kun liuokseen, jossa oli 3,5 g edellä mainittua DL-ofc-(l+-metyyli-2,3~ diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)-2-tienyylietikkahappoa 100 mlrssa asetonia, tiputettiin liuos, jossa oli 1,86 g 2-etyyliheksaanihapon natriumsuolaa 50 ml:ssa asetonia, erottui kiteitä. Kun kiteet suodatettiin talteen ja pestiin asetonilla, saatiin 3,5 g DL-ots-(l+~metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)-2-tienyyli-etikkahapon natriumsuolaa, sp. 1T5-176°C (hajoaa).

(3) Suspensioon, jossa oli 3,3 g edellä mainittua DL-ofc-(l+-metyyli-2,3~ diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)-2-tienyylietikkahapon natriumsuolaa 50 mlrssa metyleenikloridia, lisättiin 30 mg N-metyylimorfoliinia, ja näin saatu seos jäähdytettiin -20 - -15°C:een. Tähän seokseen tiputettiin 5 minuutin aikana liuos, jossa oli 1,3 g etyylikloorikarbonaattia 20 mlrssa metyleenikloridia, ja seosta sekoitettiin tässä lämpötilassa 90 minuuttia. Tämän jälkeen seokseen tiputettiin 20 minuutin aikana -50 - -l+0°C:ssa liuos, jossa oli 3,3 g 6-aminopenisillaanihapon trietyyliamiinisuolaa 50 mlrssa metyleenikloridia, ja näin saatua seosta sekoitettiin -1+0 - -30°C:ssa 30 minuuttia, -30 - -20°C:ssa 30 minuuttia ja -20-0°C:ssa 30 minuuttia. Reaktion päätyttyä liuotin tislattiin pois alipaineessa, ja jäännös liuotettiin veteen. Kun tämän vesiliuoksen pH säädettiin laimealla suolahapolla arvoon 2,0 samanaikaisesti jäällä jäähdyttäen, erottui kiteitä. Kun kiteet suodatettiin talteen, pestiin riittävästi vedellä ja kuivattiin, saatiin 1+, 1 g 6—οζ-(l+-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)-2-tienyyliasetamido7penisil-laanihappoa, sp, 185°C (hajoaa), saanto 80,5 %> IR (nujoli) cm-1r ^c=0 1780 (laktaami), 1715 (-C00H), 1685-1675 (-C0N ) NMR /TCD3)2C07 T-arvotr 0,5 (1H),1,8 (1H), 2,6 (1H), 2,85*3,05 (2H), U,0 (1H) , 1+,2-1+,5 (2H), 5,7 (IH), 5,8-6,0 (2H), 6,2-6,1+ (2H), 6,95 (3H), 8,1+ (3H), 8,1+5 (3H).

62 63760

Kun näin saatu tuote neutraloitiin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella pH 7,0:aan ja sen jälkeen suodatettiin ja kylmäkuivattiin, saatiin tuotteen nat-riumsuola.

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että DL-«t-(k-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)-2-tienyylietikkahapon natriumsuola korvattiin taulukossa 15 mainituilla, kaavan (V) mukaisilla yhdisteillä, saatiin taulukossa 15 esitetyt vastaavat lopputuotteet. Lopputuotteiden rakenne varmistettiin IR:n ja NMR:n avulla.

63 7 6 0 6 3

Cd

S

m on O

cd w w o S o o p cd oo oo o \/ / s w k o y~~ { oo ooo o o o / o S S y_/ \ s// /1, V 3

Π 8 I

I Vs ___k

Vs i Γ o

u I Iq O

s —t g yi ] 5 «O S n--n δΤ\ο^ P s « I | O g P, O O—li VO o o

P- o [Τ' ~il K CQ «DU OJ

o XI I s t- o · f- p u-AL J u o <- <- o o 'Tl 1

§ £ qA ^ 1 J V

0 - r - cl·*?' . s. ' j J ^ 0J '—' "S N cd '/''S^ cd w ^ ] cd ° I cd u cd

Ilo cm o oj o O^· SV -o) ® ·ό> - ·[? 1 cd o cd oj cd oj Λ OJ Λ 'S3 Λ s w s - o ^ LO U O '— 1— i oo · I oo · I oo PI S P< PJ W ft PJ W ft

O Ω O WOO HQQO C/D

M Mi P rH

P

cd

EH

cd s o

<D cd O

o so r--ri

en O S

•h cd o .——. o—lU J

SS S Γ Λ sv * 8 Γ-a g-%/ 8 § O Jk Jj O (γ3κ .s v Ύ Ί lv °TS"| ο^*τ ‘ oV g" >11 oj oj — S > K ^

O I U OJ

C OJ OJ K

cd S « O

> o o cd I oo I oo I oo

cd ύ K PJ W PJ S

S Q O Q O Ω O

6k 63760

Esimerkki 15

Suspensioon, jossa oli 0,9 g 6-/Ö(-)-0<.-aminofenyyliasetamido7penisillaani-happoa 30 ml:ssa vedetöntä etyyliasetaattia, lisättiin 5~10°C:ssa 0,55 g trietyyli-amiinia ja 0,6 g trimetyylisilyylikloridia, Kun tämän seoksen annettiin reagoida 3 tuntia 15~20°C:ssa, syntyi trimetyylisilyloitua 6-/b( -)- CX.-aminofenyyliasetamido_7-penisillaanihappoa, Tähän happoon lisättiin 1 g ^etyyli^jS-diokso-l-piperatsino-karbonyylikloridia, ja seoksen annettiin reagoida 2 tuntia 15-20°C:ssa. Kun reaktiossa erottunut trietyyliamiinihydrokloridi suodatettiin pois, ja suodokseen lisättiin 0,1» g n-butanolia, erottui kiteitä. Kun kiteet suodatettiin talteen, saatiin 1,25 g 6-/D(-)-o<.-( l»-etyyli-2 ,3-diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)fenyy-liasetamidq7penislilaanihappoa valkoisina kiteinä. Nämä kiteet liuotettiin 30 ml:aan tetrahydrofuraania, ja kun tähän liuokseen tiputettiin liuos, jossa oli 0,38 g 2-etyyliheksaanihapon natriumsuolaa 10 ml:ssa tetrahydrofuraania, erottui valkoisia kiteitä, Kun kiteet suodatettiin talteen, pestiin riittävästi tetrahydro-furaanilla ja kuivattiin, saatiin 1,25 g 6-/D(-)-o<-(U-etyyli-2,3-diokso-1-piperat-sinokarbonyyliamino)fenyyliasetamidq7penisillaanihapon natriumsuola, sp, 183_185°C (hajoaa), saanto 90 %.

Käyttämällä edellä kuvattua menetelmää, mutta korvaamalla trimetyylisilyyli-kloridi alla mainituilla yhdisteillä, saatiin 6-/D(-)-iX.-(l»-etyyli-2,3-äiokso-l-piperatsinokarbonyyliamino)-fenyyliasetamido7penisillaanihapon natriumsuola.

Yhdiste Lopputuotteen saanto (CH30)3SiCl 80 % (C2H20)2PC1 75 % -0 \ PCI 82 %

«H

r~\ { PCI 80 % \-o'

Esimerkki 16

Suspensioon, jossa oli U g 6-/D(-)-o(.-aminofenyyliasetamido7penisillaanihapon trihydraattia 1»0 ml:ssa vettä, lisättiin 20 ml etyyliasetaattia, ja tämä seos jäähdytettiin 2°C:een, Tämän jälkeen seokseen lisättiin 1,37 g kaliumkarbonaattia ja sekoitettiin 2 minuuttia 2-3°C:ssa. Sitten seokseen lisättiin tässä lämpötilassa 10 minuutin aikana 1,89 g ^-metyyli^^-diokso-l-piperatsinokarbonyylikloridia, ja saadun seoksen annettiin reagoida tässä lämpötilassa 15 minuuttia. Reaktion pää- 65 63760 tyttyä suodatettiin vähäinen liukenematon aine pois, ja suodos kaadettiin 80 ml:aan etyyliasetaattia. Kun tähän seokseen tiputettiin 5 minuutin aikana 20-22°C:ssa 5 ml 2N HC1 ja reaktiota sekoitettiin tässä lämpötilassa 5 tuntia, erottui kiteitä.

Kun kiteet suodatettiin talteen, pestiin ensin kahdesti 1* ml:11a vettä ja sitten kahdesti 1* ml:lla isopropanolia ja kuivattiin, saatiin,l+,0 g (-)-oC-(li-metyyli- 2,3-diokso- 1 -'piper at s inokarbonyyli amino) f enyyli as etamido^peni sillaanihapon di -hydraattia, sp, 156^157°C (hajoaa), saanto 75,1* %· IR (KBr) cm"1: 1775, 17^0, 1695, 1^70 NMR (dg-DMSO) T-arvot: 0,18 (1H, d), 0,77 (1H, d), 2,66 (5H, s), 1*,30 (1H, d), 1» ,1*0 (3H, hr), U,U8 (1H, g), U,65 (1H, d), 5,00 (1H, s), 6,12 (2H, bs), 6,1*5 (2H, bs), 7,06 (3H, s), 8,1*8 (3H, s).

Kun edellä kuvattu menettely toistettiin siten, että l*-metyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridi korvattiin l*-etyyli-2,3-diokso-1-piperatsinokarbo-nyylikloridilla, saatiin ö-^Di-J-ot^U-etyyli-^jS-diokso-l-piperatsinokarbonyyli-amino)fenyyliasetamido7penisillaanihapoh monohydraattia, sp. 15^~156°C (hajoaa), saanto 8kt8 %.

IR (KBr) cm"1: ^C=Q 1775, 1735, 1705, 1680, 1665 NMR (dg-DMSO) T-arvot: 0,20 (1H, d), 0,76 (1H, d), 2,69 (5H, s), 1*,32 (1H, d), lt,53 (1H, g), 1*,61* (1H, d), 5,00 (3H, br), 5,83 (1H, s), 6.13 (2H, bs), 6,1*9 (2H, bs), 6,62 (2H, g), 8,1*1» (3H, s), 8.58 (3H, s), 8,91 (3H, t).

Kun näin saatu monohydraatti neutraloitiin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, suodatettiin ja kylmäkuivattiin, saatiin 6-/i>(-)-°*-(l*-etyyli-2,3-diokso-1 -piperatsinokarbonyyli amino)fenyyliasetamidq7penisillaanihapon natriiunsuola.

Kun lisäksi annettiin liuoksen, jossa oli 2 g edellä mainittua 6-/ρ(-)-<-(l*-metyyli-2,3~diokso-1 -piperatsinokarbonyyliamino )fenyyliasetamido7penisillaani-. hapon dihydraattia 10 ml:ssa nitrometaania, seisoa yön yli, erottui kiteitä, jotka suodatettiin talteen, saatiin 2 g 6-Z£>(-)-oC-(l*-metyyli-2,3-diokso-]-piperatsino-karbonyyliamino)fenyyliasetamido7penisillaanihapon nitrometaaniadditiotuotteen monohydraattia, sp. 128-130°C (hajoaa), saanto 92,2 %.

Alkuaineanalyysi (C22H25N507S*CH3N02‘H20^

Laskettu {%): C 1*7,1*2 H 5,19 N lU,1*3 Löydetty {%): C 1*7,9** H 5,13 N 1U,53 IR (KBr) cm"1: ^Q=Q 1770, 1735, 1700, 168Ο NMR (dg-DMS0) T-arvot: 0,22 (lH,d), 0,80 (1H, d), 2,69 (5H, s), 3,30 (3H, br), 1*,30 (lit, d), 1* ,1*6-1» JO (211), 5,67 (311, s), 5,81 (lii, s), 6.13 (2H, bs), 6,1*6 (2H, bs), 7,07 (3H, s), 8,1*5 (3H, s), 8.58 (3H, s).

6 3 7 6 0 66

Esimerkki 17

Suspensioon, jossa oli 1,6 g D(-)- Λ-aminobentsyylipenisilliinin trihydraat-tia 20 ml:ssa vettä, lisättiin 2-3°C:ssa 0,5^ g kaliumkarbonaattia, ja saatua seosta sekoitettiin 3 minuuttia, Seokseen lisättiin 10 minuutin aikana tässä lämpötilassa vähitellen 0,8] g ^ 'etyyli "2,3-diokso-1-piperatsinokarbonyylikloridia, ja seoksen annettiin reagoida 15 minuuttia, Reaktion tapahduttua suodatettiin vähäinen kiinteä aine pois, ja suodos kaadettiin 10 ml:aan metyyli-n-propyyliketo-nia. Kun tähän seokseen tiputettiin 2 minuutin aikana 15~20°C:ssa 1,98 ml 2N HC1, ja seosta sekoitettiin tässä lämpötilassa tunnin ajan, erottui kiteitä. Kun kiteet suodatettiin talteen, pestiin ensin kahdesti vedellä ja sitten kahdesti metyyli-n-propyyliketonilla ja kuivattiin, saatiin 1,7 g D(-)-c*.-(U-etyyli-2,3~diokso-1-piperatsinokarbonyyliamino)bentsyylipenisilliinin monohydraattia, sp, 152-15U°C (hajoaa), saanto 80,2 %,

Kun tämä tuote neutraloitiin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, suodatettiin ja kylmäkuivattiin, saatiin tuotteen natriumsuola.

Claims (3)

67 63760 1. Menetelmä uusien terapeuttisesti käytettävien penisilliinien valmistamiseksi , joiden kaava on <χ) A-N N-C-NH-CH-CONH-i-f ΓΝη» (τι \ / >» »o oH-, VlJ N -kcOOR (R2) m jossa R^ on vetyatomi, suolan muodostava kationi tai ftalidyyli-, metoksimetyyli-, pivaloyylioksimetyyli-, yS-piperidinoetyyli- tai y#-morfolinoetyyliryhmä, n on 1 tai 2, X on happiatomi, joka on liittynyt hiiliatomiin piperatsiinirenkaan 2 2- ja/tai 3-asemassa, m on 0 tai 1, R on metyyli ryhmä, A on C.|_.|2~alkyyli ryhmä, joka voi olla substituoitu kloorilla tai asetoksilla, tai allyyli-, C^_g-syklo-alkyyli-, fenyyli-, bentsyyli- tai C^^-alkaanisulfonyyliryhmä ja R3 on fenyyli-, hydroksifenyyli-, sykloheksadienyyli- tai tienyyliryhmä, tunnettu siitä, että (a) saatetaan yhdiste, jonka kaava on S CH R -Nll-CH-CONH R3 I ' 3 la (II) - N--'"-COOR 1 a jossa R on vetyatomi, suolan muodostava kationi tai penisilliinien yhteydessä . U . ..... . . ... ... tunnettu suojaryhma, R on vetyatomi tai piitä tai fosforia sisältävä ryhmä ja 3 ... R :11a on edellä esitetty merkitys, reagoimaan kaavan (x>„ A-N N-C-OH (III) W o (R2) m mukaisen yhdisteen reaktiivisen karboksyylijohdannaisen kanssa, jossa kaavassa 2 A, X, R , n ja m merkitsevät samaa kuin edellä, tai (b) saatetaan yhdiste, jonka kaava on k /SX/CH3 ί—<iv> (V N ^COOR1a 68 6 3 7 60 . rJa U jossa R ja R merkitsevät samaa kuin edellä, reagoimaan kaavan U) I n A A-N N-C-NH-CH-C-OH (V) v+y s *3'o (r2) m mukaisen yhdisteen tai sen reaktiivisen karboksyylijohdannaisen kanssa, jossa 2 3 kaavassa A, R , R , X, n ja m merkitsevät samaa kuin edellä; • » Ί £L minkä jälkeen, haluttaessa suojaryhmä R poistetaan. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että 3 . .. .... R on fenyyliryhma, n on 2, m on 0, X:t ovat liittyneet piperatsunirenkaan hn- liatomeihin 2 ja 3, A on etyyliryhmä ja on vetyatomi tai myrkyttömän suolan muodostava kationi. 69 63760

1. Förfarande för framställning av nya terapeutiskt användbara penicilliner med formeIn (X>n / " \ S CH A-N N-C-NH-CH-COM-t-^ /T, v; h3 Π-Ρ, (r2} (f^COOR m väri är en väteatom, en saltbildande katjon eller en ftalidyl-, metoximetyl-, pivaloyloximetyl-, /S-piperidinoetyl- eller /^-morfolinoetylgrupp, n är 1 eller

2, X är en syreatom, som är bunden tili en kolatom i piperazinringens ställning 2 2 och/eller 3, m är 0 eller 1, R är en metylgrupp, A är C^^-alkylgrupp, som kari vara substituerad med klor eller acetoxi ; eller en allyl-, C g-cykloalkyl-, 3 . fenyl-, bensyl- eller ^-alkansulfonylgrupp och R är en fenyl-, hydroxifenyl-, cyklohexadienyl- eller tienylgrupp, kännetecknat därav, att man (a) omsätter en förening med formeln Λκη-ch-coito-,-f" (II) o ^ ' N ^ COOR1a 1 8r väri R är en väteatom, en saltbildande katjon eller en pä penicillinomrädet känd skyddsgrupp, R^ är en väteatom eller en grupp innehallande kisel eller fosfor och

3 R har ovan angivna betydelse, med ett reaktivt karboxyldenvat av en förening med formeln || ;n^ A-N N-C-OH (III) v+y s (B2) m o väri A, X, R , n och m betecknar samma som ovan, eller (b) omsätter en förening med formeln )| CH,, R -Nil ___.....3 I Cll^ (IV) Jr-- N · ^COOR1 a