FI65622C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara penicilliner - Google Patents

Description

65622

Menetelmä uusien terapeuttisesti käytettävien penisilliinien valmistamiseksi

Jakamalla erotettu hakemuksesta 762464 5 Tämä keksintö koskee menetelmää yhdisteiden valmistamiseksi, joiden kaava on (X) n /+\ 10 A-N N-C-NH—CH—CONH \ ^ (I) ° *3 -----COOR^ (R^)m u jossa R^· on vetyatomi, suolan muodostava kationi tai esterin 15 muodostava ryhmä, joka on metoksimetyyli, pivaloyylioksi- metyyli, ftalidyyli, /3-piperidinoetyyli tai /3-morfolino- etyyli, n on 1 tai 2, X on happiatomi, joka on liittynyt hiiliatomiin piperatsiinirenkaan 2- ja/tai 3-asemassa, m on 2 0 tai 1, R on metyyliryhmä, A on C^^-^kyyl^ykroä, joka 20 voi olla substituoitu kloorilla tai asetoksilla, tai allyyli-, C5_g-sykloalkyyli-, fenyyli-, bentsyyli- tai C^_^-alkaani-sulfonyyliryhmä ja R^ on fenyyli-, hydroksifenyyli-, syklo-heksadienyyli- tai tienyyliryhmä.

Kaavan I mukaisilla penisilliineillä on laaja bakteerin-25 vastainen spektri Gram-positiivisia ja Gram-negatiivisia bakteereita vastaan, ja ne ovat suhteellisen tehokkaita terapeuttisina lääkkeinä ihmisen ja eläinten tarttuvia tauteja vastaan.

Kaavan I mukaisilla puolisynteettisillä penisilliineillä 30 on tehokas bakteerinvastainen vaikutus Gram-negatiivisiin bakteereihin, erikoisesti bakteereihin Pseudomonas aeruginosa ja Klebsiella pneumoniae sekä Proteus-lajeihin ja ne vastustavat bakteerien tuottamaa β-laktamaasia,

Kaavan I mukaiset yhdisteet sisältävät uuden 6-(amino-35 asyyliamino)penisillaanihapon asyyliryhmän aminoon liitetyn ryhmän, jonka kaava on 65622 (X) n /+\ A-N N-Ο Χ I / " 5 (R2)m 2 jossa A, X, R , m ja n tarkoittavat samaa kuin edellä.

Kaavan I mukaisia penisilliinejä voidaan valmistaa siten, että 10 a) yhdiste, jonka kaava on

°-R5 _ r«H

R -C=N -p NQ

CH3 (II) 15 N XXXOR6 4 jossa R on bentsyyli-, fenoksimetyyli- tai amino- ja karboksi- suojattu £-amino- ^-karboksibutyyliryhmä, R"3 on C. .-alkyyli- 6 ryhmä ja R on karboksyylin suojaryhmä, saatetaan reagoimaan 20 kaavan (X) n /+Λ A-N N-C-NH-CH-COOH (III) \ I / " '3 O R·3 25 (R2)m mukaisen yhdisteen reaktiivisen karboksyylijohdannaisen 2 3 kanssa, jossa kaavassa R,R,A,X,mjan tarkoittavat samaa kuin edellä, ja b) vaiheesta a) saatu yhdiste hydrolysoidaan, ja 30 1) kun R^ ei ole sama kuin esterin muodostava ryhmä R'L, saatua hydrolyysituotetta käsitellään sinänsä tunnetulla tavalla ryhmän R^ poistamiseksi, ja 2) kun R® on sama kuin esterin muodostava ryhmä R^, saatua hydrolyysituotetta käsitellään haluttaessa sinänsä tunnetulla 35 tavalla ryhmän R^ poistamiseksi; ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R^ on 3 65622 vety, muutetaan sinänsä tunnetulla tavalla suolaksi.

Kaavan (II) mukaista lähtöainetta voidaan esimerkiksi valmistaa siten, että yhdiste, jonka kaava on 5 / CH3

r7_nh_/SV

I -CH. (IV) A—N-k 6 cr cooRb jossa R7 tarkoittaa asyyliryhmää ja R6:lla on edellä esitetty 10 merkitys, muutetaan iminohalogenointireaktiolla vastaavaksi iminohalogenidiyhdisteeksi, joka iminoeetteröintireaktiolla muutetaan vastaavaksi iminoeetteriyhdisteeksi.

Kaava (III) käsittää sekä optisesti aktiivisia yhdisteitä että raseemisia seoksia.

15 Kaavoissa (II) ja (IV) karboksyylin suojaryhmä R® voi olla mikä tahansa aikaisemmin penisilliinin tai kefalosporiinin kaltaisten yhdisteiden yhteydessä käytetty. Käytännössä karboksyylin suojaryhmä on 1) esterin muodostava ryhmä, joka voidaan poistaa kata-20 lyyttisesti pelkistämällä, kemiallisesti pelkistämällä tai käsittelemällä lievissä olosuhteissa, esim. aralkyyliryhmä, kuten bentsyyli, 4-nitrobentsyyli, difenyylimetyyli, trityyli ja 3,5—di-(tert,-butyyli)-4-hydroksibentsyyli; alkyyliryhmä, kuten tert.-butyyli, trikloorietyyli; fenyylikarbonyylialkyyli-25 ryhmä, kuten fenasyyli; alkoksialkyyliryhmä, kuten metoksi- metyyli; ja substituoimattomat tai alkyylisubstituoidut sykliset aminoalkyyliryhmät, kuten piperidinoetyyli, 4-metyyli-piperidinoetyyli, morfolinoetyyli ja pyrrolidinoetyyli; 2) esterin muodostavat ryhmät, jotka voidaan helposti 30 poistaa entsymaattisesti, esim. asyylioksialkyyliryhmät, kuten pivaloyylioksimetyyli; ja ftalidyyliryhmä? 3) piitä, fosforia tai rikkiä sisältävät ryhmät, jotka voidaan helposti poistaa käsittelemällä vedellä tai alkoholilla, kuten (CH^J-jSi-,

35 A-°X

(ch3)2s< , C12P-, j-, / 65622 4

C2H5°N

C2H5° 5 Kohdissa (1), (2) ja (3) mainitut karboksyylin suoja- ryhmät ovat pelkästään tyypillisiä esimerkkejä ja muita on esitetty US^patenttijulkaisuissa 3 499 909, 3 573 296 ja 3 641 018 ja DE-hakemusjulkaisuissa 2 301 014, 2 253 287 ja g 2 337 105. Esterin muodostavat ryhmät R voivat olla samoja 10 kuin ne, jotka on esitetty R1:n kohdalla.

Suolan muodostava kationi R^ kaavassa I on sellainen, jota tähän asti on käytetty penisilliini- ja kefalosporiini-yhdisteiden yhteydessä, ja edullisia ovat ne kationit, jotka pystyvät muodostamaan myrkyttömiä suoloja. Suolat käsittävät 15 alkalimetallisuolat, kuten natriumsuola ja kaliumsuola; maa-alkalimetallisuolat, kuten kalsiumsuola ja magnesiumsuola. Yllämainittujen kationien lisäksi voidaan käyttää kationeja, jotka pystyvät muodostamaan suoloja muiden typpeä sisältävien orgaanisten emästen kanssa, kuten trimetyyliamiini, trietyyli-20 amiini, tributyyliamiini, pyridiini, dimetyylianiliini, N-metyylipiperidiini, N-metyylimorfOliini, dietyyliamiini, disykloheksyyliamiini jne.

Amino- ja karboksisuojattu ^-amino- ^-karboksibutyyli-ryhmä R4 kaavassa II voi olla esimerkiksi ^-N-etoksikarbonyyli-25 amino-cf-bentshydryylioksikarbonyylibutyyli, ^-N-etoksikarbo-nyyliamino- ^-trimetyylisilyylioksikarbonyylibutyyli, <f-N-fenyylikarbamoyyliamino-^-bentshydryylioksikarbonyylibutyyli tai ^-N-fenyylikarbamoyyliamino-cT-trimetyylisilyylioksi-karbonyylibutyyli.

30 Kaavan (III) mukainen yhdiste voidaan valmistaa BE-pa- tenttijulkaisussa 828 692 kuvatulla menetelmällä.

Kaavan (III) mukaisen karboksyylihapon reaktiivinen johdannainen on esim. happohalogenidi, happoanhydridi, happo-seka-anhydridi orgaanisen tai epäorgaanisen hapon kanssa, 35 aktiivinen happoamidi tai aktiivinen esteri. Käytännössä reaktiivinen johdannainen on esim, happokloridi, happoatsidi, 5 65622 happosyanidi, happoseka-anhydridi alifaattisen karboksyylihapon, aromaattisen karboksyylihapon, alkyylikarboksyylihapon, aralkyylikarboksyylihapon, dialkyylifosforihapon, difenyyli-fosforihapon, metaanisulfonihapon tai p-tolueenisulfonihapon 5 kanssa, happoamidi imidatsolin, 4~substituoidun imidatsolin, dimetyylipyratsolin, triatsolin, tetratsolin tai sakkariinin kanssa, syaanimetyyliesteri, substituoitu fenyyliesteri tai substituoitu fenyylitioesteri.

Edelleen kaavan (III) mukaisen karboksyylihapon reak-10 tiivisena johdannaisena voidaan käyttää johdannaista, joka muodostuu saattamalla kaavan (III) mukainen yhdiste reagoimaan aktivointiaineen kuten Ν,Ν'-disykloheksyylikarbodi-imidin, N-sykloheksyyli-N'-morfolinoetyylikarbodi-imidin, N,N'-dietyyli-karbodi-imidin, Ν,Ν'-karbonyyli-di-(2-metyyli-imidatsolin), 15 dimetyyliklooriformiminiumkloridin, dimetyylietoksiformiminium-kloridin, fosforihapon trialkyyliesterin, fosfori-oksikloridin, fosforitrikloridin, tionyylikloridin, oksalyylikloridin kanssa.

Seuraava reaktiokaavio kuvaa kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistusta kaavan IV mukaisesta lähtöaineesta.

6 65622

k S

•p 2 35 s.S 5

»H (O -H

M Sf a S

«-»§ S|« s ,¾ κ o 9 ti M 6 o u o 3 3 s ä y / jj λ; £7 £ to r? —* \ I Z ™ -¾ A>· < — ä § ϋ _ o o rr m | (0 K n 2 •H U— Ci ϋ

C I

Φ K

<D 2 in i O 0=0

Ή I B

ie c 2^ ϋ _ » S=£ ^s. % °

° γ S V S

e K K ro (O

^ -H O—« <D

> I

•H K -r| •d 25

^ 0=0 -H

G G | g O

Φ <U £ 2 X M

WC S N fvj >,

•H X=£=- -4- (¾ W

O ~ *2 ^2Τ - £ -H »3 < ^ rti "irt -i-* H *Ö ^ o rt -* H -β ζ ω «oho •H U Φ '-•o Ή Ij

.ti -H

Φ C ij > c

H O -H

O G :0 vo vi vo «>, H1 «S p; „ „ ^ ° roroo -tJ roroo

JV° 9 OM KKO -U a; x O

υχ1/° 3·§ )^υ § °£/u K § 5 w c V) UJ c d \ ·η \

Vz B S l2 e V*25

Ao > > Λ “ ^ R

O H --> -—> ° K w ? _, in 2 — $ ^ 11 S pj u ? °·-ο o o-o

K PJ K PS

7 65622

Iminohalogenointireaktio, joka on kaavan (IV) mukaisen yhdisteen reaktio iminohalogenoivan aineen kanssa, suoritetaan vastaavan iminohalogeeniyhdisteen muodostamiseksi. Iminohalo-genoivina aineina käytetään usein esim. fosforitrikloridia, 5 fosforipentakloridia, fosforitribromidia, fosforipentabromidia, fosforioksikloridia, tionyylikloridia ja fosgeenia. Tämä reaktio suoritetaan liuottimessa tai liuottimissa. Liuottimina käytetään usein esim. metyleenikloridia, kloroformia, bentsee-niä, dikloorietaania, trikloorietaania ja tetrakloorietaania.

10 Edelleen voidaan käyttää muita inerttejä liuottimia, kuten tetrahydrofuraania, dioksaania, dimetoksietaania, jne. Imino-halogenointireaktio-olosuhteet eivät ole erikoisen kriittisiä, vaikka reaktio tavallisesti suoritetaan jäähdyttäen reaktio-seosta, 15 Näin saadun iminohalogeeniyhdisteen annetaan reagoida iminoeetteröintiaineen kanssa vastaavan iminoeetteriyhdisteen muodostamiseksi (iminoeetteröintireaktio). Iminoeetteröivä 5 5 aine on kaavan R -OM mukainen, jossa R on C1_4~alkyyliryhmä ja M tarkoittaa vetyatomia tai alkalimetalliatomia. Imino-20 eetteröintialne voi olla esim. alkoholi, kuten metyylialkoholi, etyylialkoholi, propyylialkoholi, isopropyylialkoholi, butyyli-alkoholi, isobutyylialkoholi tai tert.-butyylialkoholi tai tällaisen alkoholin alkoholaatti alkalimetallin kanssa. Imino-eetteröintireaktio-olosuhteet eivät ole erikoisen kriittisiä, 25 vaikka reaktio yleensä suoritetaan jäähdyttäen tai lämmittäen reaktioseosta. Iminoeetteröintireaktioseos voidaan väkevöidä haihduttamalla alennetussa paineessa iminohalogenoivan aineen ja iminoeetteröivän aineen poistamiseksi, tai reaktioseosta voidaan käyttää suoraan seuraavassa reaktiossa.

30 Asylointireaktio, joka on kaavan (II) mukaisen yhdis teen reaktio kaavan (III) mukaisen karboksyylihapon reaktiivisen johdannaisen kanssa, suoritetaan yleensä jäähdyttäen tai lämmittäen reaktioseosta. Asylointireaktio voidaan suorittaa liuottimen, kuten dimetyyliformamidin läsnäollessa. Kuitenkaan 35 asylointireaktio-olosuhteet eivät ole erikoisen kriittiset.

Kukin iminohalogenointireaktio, iminoeetteröintireaktio 8 65622 ja asylointireaktio voidaan suorittaa, kuten tunnettua, orgaanisen emäksen tai emästen, kuten Μ,Μ-dimetyylianiliinin, pyri-diinin, kinoliinin, pikoliinin, lutidiinin, trialkyyliamiinin tai dialkyylibentsyyliamiinin läsnäollessa.

5 Näin saatu reaktiotuote hydrolysoidaan esimerkiksi kaatamalla reaktioseos veteen, Karboksyylin suojaryhmä voidaan myös hydrolysoida samanaikaisesti riippuen suojaryhmän laadusta. Jos jäljelle jäänyt karboksyylin suojaryhmä on sama kuin esterin muodostava ryhmä r\ voidaan se haluttaessa pois-10 taa. Reaktio karboksyylin suojaryhmän poistamiseksi vaihtelee suojaryhmän laadusta riippuen ja reaktio suoritetaan sinänsä tunnetulla tavalla, kuten katalyyttisesti pelkistämällä, kemiallisesti pelkistämällä tai käsittelemällä lievissä olosuhteissa. Erikoisesti R^:n ollessa fenasyyli- tai bentshydryyliryhmä 15 suojaryhmä voidaan helposti poistaa käsittelemällä natrium- bentseenitiolaatilla dimetyyliformamidissa tai tetrahydrofuraanissa tai trifluorietikkahapolla anisolissa.

Näin saatu penisilliini eristetään tavallisin menetelmin.

Kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa R"1 on myrkyttömän 20 suolan muodostava kationi, saadaan helposti sinänsä tunnetulla tavalla yleisen kaavan (I) mukaisesta yhdisteestä, jossa R1 on vetyatomi tai esterin muodostava ryhmä.

Kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä ei ole vain laajaa bakteerinvastaista spektriä Gram-positiivisten ja Gram-negatii-25 visten bakteerien suhteen, vaan niillä on myös erittäin hyvä bakteerinvastainen vaikutus bakteereihin Pseudomonas aeruginosa ja Klebsiella pneumoniae sekä Proteus-lajeihin. Edelleen nämä yhdisteet ovat melko tehokkaita terapeuttisia lääkkeitä ihmisen ja eläinten tartuntatauteja vastaan.

30 Eräiden tämän kaavan I mukaisten yhdisteiden aktiivisuus osoitettiin seuraavilla kokeilla.

(1) Yhdisteiden pienin, eräitä standardikantoja inhiboiva väkevyys (MIC) on esitetty taulukossa 1.

Pienin inhiboiva väkevyys (MIC) määritettiin maljamene-35 telmällä, joka on esitetty julkaisussa "Chemotherapy” (Japan), Voi. 16, (1968), ss. 98-99. Elatusalustana käytettiin sydän- 4 infuusioagaria (pH 7,4). Jokaiseen maljaan siirrostettiin 10 g solua (10 solua/ml).

9 65622 fr on m t—

W C— T- K

tn -h » « » „ ^ Jm f— O T- o CO ψ-

¢) cd PJ O V I

-p K O OJ ^

O -H o"> y\ O

£ s 3 rt rt <u *o fH rt rt e ^ «Λ '11° o § ~ <y rt rt Λ Λ dc /N Λ « m rt rt C tn I h

l'l°. g K ° B B

«fc&4C\j W w o? rt · /v Λ rt m rt

•H

-0 i2 o te *H M fr— fr— κ_ k. .

ÖR ^ ζ ζ £ •ö Ή r- r— Λ o H 1/ v Γ,

w O S V

H rt

Pt

On

I O O CM »H

>5 CO (0 H *C ί ί t*— fr— (V) k_ .

„ 9 o rt ia ITN il: K fr O rt O Jm ·> « „ “i m P O C T- fo ** ^ W rt rt W v f° ^ - Ή s e * s — ^ 3 e S rt «h rt _ 3 ·«* S tn s;

’Jj M CO S ° oo CO O

S P h tC tC O H K tC O

,5 Ή o o o tn o Ö o B s -a g 3 H I h i -h I 'e .H S 01 1 p to1 h -I * s s Y-* J Y-*

11 11 .5” l 1 U

I ä fn o “ g ° co oo o ooooo ro K o £ ?5 i W n '0 4® 1« äU * x? i s § s feco § s

9. ™ «o k o ro aP

G -S o -u o-co te G

& <§ Φ e * *" --—--—---- υ rt

P

tn o ·- '•o e TTIo-itvuo)!

«S

10 k 65622 V " S? w UN f..

m vo" ^

M M

V

X? rn ir\ ^ *5 w ^ o ®t -S! - vo"

UN vo VJ

UV UV

UV “i CM CM

UN » ,ν, * »

CM CM UN ίϋ VO VO

•“ CM

< R. K s; * ~ u v *— m ^ r- 4$ V v* V V s/ CÖ

•O

»H

0 1 5 Ej 5 R- <0 V r— f y; ^ Η V v* '-Z \/ «i _ *5

0Π fO O

W w o oJ <ri o o o ^ 5 \/ / ,5 ..f0 <ΓΌ m on o «s m uT‘aTo P o o o <n g o O S Y—f \/ / W W O ro ro o

Vs VV «M r~i s? f S 5 8 U Q v- vj G p th u H p fi tf \Sv k ° o 8 /—v & ° —4 xb S~® i® .1;° t© !©

? “V °£ ώ "V D

S S j [OJ & o <M m .rt- IA Ό 65622 -if t— t t— ►— • ·> UN UN UN ^ o o ** * ·» * r~ r· r· „

>T >f *4 -J

tn *n JO JO t— t—

»- «- cm 0J UN UN

* * . _ " » · on oo ό vo T- v 3 I rt I *o

UN UN UN UN

CVJ CM UN OJ C\J

» « * · vo vo JO cvj vo vo 'm t— t— t- ►—

S’” r- UN UN UN UN

H « * · * ·» ·> a $ ° O *“ *“ *- i- ' ΐβ V V N >/ -A >/ •o

H

O

^ ^ c— f— [—

'Ά J* UN UN UN UN

δ - - * - λ ·> £-1 O O 1- «— r— r-

V N Ni V

d ¢3

CO (T , O

d ö W w Ο β» » g O Ö o fe; CO no O \/ / CO CO o 5 W W O o Y-—{ W ft O (d CO § CJOO s w o / O O o S >_y1 CO χ W “>£/ “J /-/ *<>8 Bg8 <i y- f I “jv y-f JA ti i/i Po V4 ΐί \®jy © u m> o h 1 0 « p \u; 0 XJ n / X J yy n »w °nr ^ 0 r-r* I 1 υ 0 0 0 tri CM CM O ft I 0 S On 8 V Xn, 3»

«P S of* foj S

CJ — ο ο u 00 ON 0 1-1 CM to

H H

12 65622 p s j.

Λ O O " " t— 00 v ° ' o to o\ s_ - t- ^t· £r ·> » · «A —- ro o o 1 tr» o u r; ir\ « 3

ν' CM CM M

«- P

d ei"3 tr\ ir\ trv °i ^ °i o? £ Ό <H 1> vo" ^ °i

VO

te o

Pi

P

a) ••13 .

T- »- fc1 lO

m «1 m ^ -tr HO O O 1 " J'

O V V ^ V V

3 d tt

0\ V

** ^ ° o O o” o" v< V V v g

5 d M MO

► r°4po to (O O o o 8 tri « o o u O o VL/

«ΊχΓ§ /f /R 21 d R

V/ >i V . V1 »"»ri sT§

γΐ Γ4 u R V

t41 l·® l·© -I® ft R

f®VS Mv ys i ivv§ 1 ^ JgP Uj . O-U |^Ββ I ^ 11 Vo «, s s x—' ys oVs-V — -V L° ° y il < S S" tf D V? 5 _[ tP_ L S” ^ -f ° rf |f 5 10 VO N1 oo Q\

H H H H H H

13 65622 t— Ον o\ σν m ^ ^ K ^ ^ ^ O O o oo " ·

V

IA IA

IA CJ ir\ * # Λ ** IA JA W (Λ CVJ VO CM OJ CVi

IA IA

IA OJ CVI IA IA ' IA OJ *“ ,/1 “ 1 » » VO VD 04 λ.

OJ VO ia *- i-

— OJ

cd

O

M ^ ±) v\ fc.

oj σ\ σ\ Ov ^J- ^ Sv •of- t— t~- _T „ «.

« o o o ,_ o o o si· v v

0 AS

g

Eh Ov Ov Ov .

Ον Ον O” *“! f- K

-f f- ** * “ .

Λ Λ Λ O O O j O O o y

V

© ΐ O O

rv_y te O te OJ

O o O te V> o O OI o · °— 04 O te OJ <a te oi o te aj g o te ro ro o o S m ^T*o — mo ro „ o o te; te o ro ro o ro ro o te?5o ft· *· w ö w w :ςί ti ti ti ti tr. ti ti k> f-® h h N) k> p * f) *ivb & :ö ä te te"0 r,r Ö S Ö υ o o o ° si a s a s 14 65622 (2) Pienin sairaaloista eristettyjä bakteereja inhiboiva väkevyys (MIC) on esitetty taulukoissa 2.

MIC määritettiin samoin kuin edellisessä kohdassa (1).

15 65622 m o o ooooooooo 1 m o ooooooooo

Cl, CM CMCMCNCMOMCMCMCMOM

/·\,\ λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ in m mmmmmmmmm >ΓΤ - o CM CMOMOMCMCMOMCM»

1 CM CM 'ft-^ftftft-CM

pH rH rH νοοίοονοοοίβι—I

co in r» co σι σι ρ~ σι r" en h cm m h r- r- m r'· m I ^ ^ *h w ^ v ^

Ph CO ID ι-H CO O O r—I O i-H

tn o co cor^cor^r-cor^C'C' 3 cm p' h HinHinmrHininm <DI ^ ft ftftftftftftftftft

S-l Ch O CO COrHCOr—IrHCOrHrHrH

3 3 m m ιηιηιηιηιηιηιηιηιη

co rH ft CM CM ft ft ft CM CM CM CM CM

3 I CM ft ft CM CM CM ftftftftft O pH Ή id VDr-li—ΐΉίοιοιονοο υ o υ o

rH 00 VO m COCOCOCOCOCOCOC~CO

£>· in CM rHrHrHrHrHrHrHinrH

X! <D ft ft ftftftftftftftftft

Q, CO rH ID COCOCOCOCOCOCOi—ICO

3 -P to Ή to s

CM

0

X

^ io vomcococococococococo

3 ΟΊ in CM rHiHrHrHrHrHr-I rH rH

rH LfN ^ *«» 3 00 rH ID C0C0C0C0C0C0C0C0C0 3

Eh to 2 co co m cocom tn mmm

rH rH CM r—Ir—ICMmCMmCMCMCM

ΓΝ ft ft ftftftftftftftftft

00 co ID COCOlDCMtOCMVOlDlD

rH rH

to 2 oo m m cocococococococ'co

00 CM CM rHrHr-HrHrHr-HrHmrH

m ft ft ft ftftftftftftftft

OO ID VD COCOCOCOCOCOCOrHCO

CO

2

ON ON 00 ON ON ON ON ON ON

h r*“ fHf^r^r^r^r^r^^^r

VO ·» ^ ^ V « ^ W V K

00 o o rooooooooo

V V V

to -rl -rl s C CCM'DC'OO^m'DC'

Ή ·Η Ή rH rH rH

C -H -H o •H rH I—I ··

•rl rH rH C

I rH I -H I -rl 0) EH g in E » u : z t = = s =

P 3 -H 3 C 3 C -P

Μ ·Η 0) ·Η 3 ·Η φ UI

•Η U -H U ja P Λ -H

Ό +1 Q, -P M UH Ό J3 3 S 3 3 3 3 X! >h 3 3 !3 Z tn tn TXXO.I3.UO>! 65622 16 m m r- en σ. οί ot σο m m (\icmltit—

I CM CM VOVDrHmOOOOO

►>h rH r-H N/ en o o ooooooooo

I O O OOOOOOOLDO

CM CN (N OI N N N (N M rH

A A A s\ Λ s\ s\ m un ro lo ro ro r> en Γ"·

CM (N CN iDLOrHCNr-Hr—iLnr^LO

| *► *► S*»VS*»*>SSS

ώ uo vo CMCMcovorooOrHOH

i—I »H

•H

O lo uo uo ro ro ro r-* σ\ σ* e*· O H (N CM CNHiHLOHinr>r^un I *»

fO & UO VO VOCOrOCNrOrHOOrH

•H r~H

x: υ

•H rH

S-l rH o o o o o o o o o o tl u o o o ooooooo

Xj en (N CN CN OI OI N O) M N OI

o Λ -Λ a A A Ά -n Α Λ y\ (Λ 2 ον ω ο

CM

O m tn m

M to O OOOOOOmCMCM

M o omoommcM-*·

2 en CM CM rH CM VO VO

-H A A

p 2: <0 o

En cm un men en r-ι θ'- <r> r-* m cm m mcMiHmr-immr^m - - •t*’**»».*'»*.

en vo cm CMvoencMenrHiHOrH

i—li—I i—I

2

O

m en m mm en σο σο ση σο en ι-h cm CMCMn'rHr^r^r^^rr^ TJI - K «'»•.•.•.t·.* en en vo vovoi-ienooooo

V

2

O

H m m menmenr'-r-'mr·' co cm cm mcMrHCMr-immiHm

- «. ^ ^ ^ V ^ S » V V

en vo vo CMvocnvoenHrHcnH

i-H

2

O

*H -H

C CcMvoococTimvor^

•H Ή -H rH rH rH

C -H -HO

-H rH I—I ·· •H rH r-H d

I rH | H t -H

<u EH sm Sen o 4->3-H3d3d-u = = = = = - = tn -h en ·η <u -rt oj tn

•ri n -h Sh Xl Sh Λ -H

13 -MCX-PSh -PrH Ό x: «s töro tödx: >ι?;ϋ7;Λ:ζΐη>ι ‘ TT i?7jTu7^ 17 65622 m in m m (N (N ΓΜ oo ** »· ** ro o o ooiomioiommo o m m m <n (n oi m

3 CM

O A

m un m cn cn m ^3* *»« V *k o o oocnovovolocnlo <n o m inmrHin cn h cn

(N

3 Λ

O

(0 m ro m m in cn m m cn m cn m O m « s ^ s ^ ^ »

C m o o ommcNmmiNiocN

•H rH O in in (N rH rH rH

Ö1 IN

3 3 A

Sh O

<D

Π3 m n m r- mm in >h m on m en oo **. ***-*«>

(0 as o o miNCNinvomcNiocN

C (N O m ON rH i—I (N rH rH

O CN

6 3 Λ

O O

Ό P mmm 03 m * * *· en so o o oommrNCNmiNm

Λ m O O omoNfNrHrHONrHON

CN CN CN rH

m Λ l 3

ON O

O mmm M rH on m rH <n m m m

Ai 0\ ^ v ^ ^ ^ <

P o o o ommcNmiocNCNiN

«H fH O O m ON rH rH rH rH

P CN rH

10 3 A

EH O

m m m m m H CN CN CN rH m rH ^ ^ ^

<N O to LOtOrOvOV£>VX)rOfNLO

CN O CN CM CM rH CN

CM

3 ^ O m m m m m «n cn rH cn m cn m « »k % ^ ^

cn o o omcommmcNiocN

oo o o m CN rH rH

CN rH

3 Λ

O

m mm

CN m rH rH

SO * « k r.

Γ" o o ooiocNmmmmo m ommm rH cn cn m

CN

3 A

O

m m m ..

o o o oomocNinoom

Ή o o omcNmrHCNmmcN

CN CN H

3 Λ Λ

U

•H ·Η C ccNior^oocTvmior·'

"H -H Ή rH i—I rH

C -H -HO

H rH rH ·· •H r—I i—1 p I rH | -H I -rl dl EH P 111 En 0) : = = r = = = +j 3 -h 3 e 3 e -p W -H in -H <13 ·Η φ in

rl Sh -H Sh Λ M Λ -H

TO HJOr-PSH H-1 rH Ό

X-1 C0S (0(0 (0 P X

>I izS 2J< 21» >1

TXXOJC^UOX

18 65622 in m m r» o> r-> r- (N in rH «n m m rH ^ ^ ^ ^ ^

0) <T\ m o omiocNcoiorHOH

tO CM O O <N rH

•H Z CN CN

CO Λ A

O

O in m r* cn

Co m m cn in p-t in rH

p tn ^ ^ ^ k ^ ^ co o oiNCNiniocNroHtn

(0 m m o h h n rH

rH CM

HZ A

O) o

•H

to Λ

<D

h H in in X CO -

O O O OOOOOOinCMCN

Ν’ o o omoomocMrHH

CM CM CN iH CM rH

S A a A

0 r- in m H . *r ^

H· HO O OOOOOOinCMCN

1 ** o o oinoomincMHH

CN CM CM CM H H

Z A Λ Λ o o

X

r* ________ 2 h in m 3 *· -

cd Ν' O O OOOOCNCMinOO

EHtOiooominorHHCMinin W CO CN CM H H

O A

•H

tr m 3 M n o o oomocNinooo <Ui o o oocMinH-cNininm

fÖ CO CN CM rH H

tn Λ to G in in 0 - g cm o o oocNtncNinmoo 01 o o ornHCNHCNCNinm

Ό CO CM CM rH

3 A

0) tn m m & ** *

H Ο O OOOOCNCMinOO

1 o o ominoHHCNtnm

CO <N CM rH CM

A

H

C

•H I I

•H H rH

rH ·Η H

rH 0) tn •h c C cNion-ooomior··

MO <0 H rH rH

•H Λ Λ 0 CU Vh H ··

E (0 3 C

δ x tn o g g g o tn Ή *H -H ·Η H tnsssssss

•H (H P C Sh C H

ro .p -P -H -P H Ό

.G to to H (0 H .G

>H Z Z H Z H >H

TXTOJ^UOM

19 65622 Ή μ co η Γ" ld m m (Τι 3 1/1 «H ID mtNLn-HtNr^rJ-rJi g CO * » l m cn miHiomnioooo

•H i-3 -H CM -H VV

X! 03

& ϊ>1 P

(0

rH VO

r-t en (1) rH O O ooooooooo C cn o o ooooooomtn

0 CN CN CN CN CN CN CN CN CN

G i-3 A A. A A S\ A

rH 03

(0 CO

•H<n ιο m ιηιηΓ'ΐηΓ-'Γ'Γ-Γ^οο

χ; rH m cn cNCHincNtnininmrH

p. vo - - ·><»·»»* *-*>»*

^ rH VO ID VO Γ-H ID i—I r—( i—I Ή CO

-M J

co Π3

rH

rH

<υ<η co co (-'Cor^cocTir-criCTir'' C vo r' rH LnrHunrHr-mr^r^in O >H *" - — -

g CN O co rH CO rH CO O rH O O rH

I—I

CCJ P3 m co co i

CN

<Tv r-' cocomr'for'CTir^ O -h co m m uorHiHCNinrHinn-m v i-i m *. *. *.**·*-.**.*.*

ΛίφιΗ h CN CNCOCOlOfHCOrHOH

3 β -H rH rH

rH X 3 Cl CO

(0 rH 1-3 EH m m m

(0 m CN CN

rH rH " i—i cn o oinoomoinioio

O rH O O CN O O CN m CN

p H CN CN rH CN

-rl A A A

x: 03 CO I-) cn m -H co m cn 0) CN * »

CrH o o omooooincNio

CrH O O OCNinOininCNiH

O CN CN CN «H

C/1 03 A A A

^0 (0

rH

rHinm incomfocor'CTicTi (U in cn in cNHCNrHrHinr-r'· O' C* ^ «·

•H Ή VO CN OVOCOVOCOCOrHOO

XI rH rH o

03 CN

03 Λ

•3 -H

β

•H I I

•H rH rH

rH ·Η "H

rH CO 10 •h e G cNvor^cocTitnior'

CO 03 0) rH rH rH

•H Λ XI O

Or P rH

| (0 3 β Φ | | | 0}

CO Ή Ή -H ·Η Ή CO - E E E S E S

•H p p β p β -H

t3 X» -H -P -H Ό X! (0 CO Ή (0 -H x; >H 13 Z H 33 Ή 3h 65622 20 LO LO ΓΟ <Tl H m tn rvj γί h r·* 3 «· *»·»*«.

(U ooo<NLnc\ivovomo

tn O O O rH (N i—I

-3 (N (N «N

-3 AA

d) 3 10

•H

M ιΟΜ'ί^'^’ίτΓ'ί'ί^

Cn ήοοοοοοοοο

^ V” VVn/Vn/n/VV

3 VO >

<N

o tn

Ai 3 Λί Φ 3 -3 Ή O 3 3 3 04

EH

H

•h r-' σν m m (0 ' ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ > tjl Γ-ΙΟΟΟΟΟΟΟΟΟ ^ n/ -J yj v V v ε tn

•H

r—t r-- σν ον 3 Λ - - ' - ^ -

3 <—IOOOOOOOOO

3 v V V V v >J V

•H

E

H -H

C C H ·Η **H C -H -H H i—I i—( H i—1 i—t ιΗ ·Η Ή in tn tn HCCvor^cooviovot·"

ϋ) 0) <D (—I i—| rH

H xi Λ 0 Cp 3 rH ··

E 3 3 C

3 Ai tn ω I g I ω tn -H -H -H tn = e = = = r

•H 3 3 3 -H

T3 4J -P 3 3 x: 3 3 3 x i* Z SS Z ΪΗ

nTolqTuÖM

21 65622 (3) Sietokyky Pseudomonas aeruginosa GN 238-kannan tuottaman j0-laktamaasin suhteen;

Yhdisteiden sietokyky ^3-laktamaasin suhteen määritettiin seuraavalla tavalla, 5 ^3-laktamaasi valmistettiin Pseudomonas aeruginosa GN 238-kannasta, Tätä mikro-organismia viljeltiin 6 tuntia ravistelulaitteessa 37°C;ssa 500 ml:n Erlenmeyer-pulloissa, joissa oli 100 ml kasvualustaa, joka sisälsi 2 g hiivauutetta, 10 g polypeptonia, 2 g glukoosia, 7 g dinatriumvetyfosfaattia, 10 2 g kaliumdivetyfosfaattia, 1,2 g ammoniumsulfaattia ja 0,4 g magnesiumsulfaattia litrassa. Solut sentrifugoitiin talteen (5 000 r/min, 10 min) ja pestiin kolme kertaa 0,1 M fosfaatti-puskurilla (pH 7,0), Tämän jälkeen solut rikottiin äänen avulla (20 kHz, 20 min) ja sentrifugoitiin 60 minuuttia kier-15 rosluvulla 15 000 r/min. Erottuneen entsyymipitoisen nesteen avulla määritettiin yhdisteiden sietokyky /3-laktamaasin suhteen käyttämällä jodometristä mittausmenetelmää. Saadut tulokset on esitetty taulukossa 3. Taulukon 3 luvut ovat suhteellisia sietoarvoja, jotka on laskettu antamalla kontrollina käyte-20 tylle kaliumpenisilliini G;lie arvo 100.

Taulukko 3 y%-laktamaasi-sietokykyjen vertailu

Yhdiste Suhteellinen sietoarvo _{%)_ 25 ! Kaliumpenisilliini G 100

Natriumampisilliini 115

Natriumkarbensilliini 116

Na tr iumsulbens Uliini_ 50_

Yhdiste n:o 6 14 30 " 7 15 8 15 9 15 " 15 16 " 16 12 35 " 17 1 22 65622

Taulukoista 1-2 ilmenee, että tämän keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on laajempi bakteerinvastainen spektri ja paljon paremmat bakteerinvastaiset ominaisuudet sekä Pseudomonas aeruginosan, Klebsiella pneumoniaen, Proteus-5 lajien että useiden lääkkeitäsietävien bakteerien suhteen kuin kontrolleina käytetyillä ampisilliineilla so. yhdisteillä, joilla on aminoryhmä asyyliryhmän oC-asemassa. Taulukosta 3 ilmenee, että uudet yhdisteet sietävät /3-laktamaasia paljon paremmin kuin kontrolleina käytetyt lääkkeet.

10 Nämä penisilliinit ovat yleensä vain vähän myrkyllisiä.

Esimerkiksi 6-^D(-)-<Λ-(4-metyyli-2,3-diokso-l-piperatsino-karbonyyliamino)fenyyliasetamido7penisillaanihapon ja 6-/D(-)- oC~ (4-etyyli-2,3-diokso-l-piperatsinokarbonyyliamino)-fenyyliasetamido/penisillaanihapon LD5Q-arvo (hiirillä, joiden 15 paino on 19-1 g) on yli 5 g/kg.

Tämän keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä voidaan antaa ihmisille ja eläimille, kunhan ne ensin saatetaan fysiologiseen muotoon kuten tableteiksi, kapseleiksi, siirapeiksi, ruiskeiksi tms., joita tavallisesti käytetään penisil-20 liinin kaltaisten lääkkeiden yhteydessä.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistusta on alla kuvattu esimerkein.

Kun esimerkeissä valmistuksessa käytetään kaavan (III) mukaisen yhdisteen D(-)-isomeerin reaktiivista johdannaista, 25 on saatu tuote D(-)-isomeerinä.

Esimerkki 1 1) 2,9 g 6-(fenyyliasetamido)penisillaanihapon tri-fenyylimetyyliesteriä ja 2,06 ml Ν,Ν-dimetyylianiliinia liuotettiin 30 ml:aan metyleenikloridia ja 1,15 g fosforipenta- 30 kloridia lisättiin tähän liuokseen -25°C:ssa. Seoksen annettiin reagoida välillä -30°C - -20°C 1,5 tunnin ajan, minkä jälkeen lisättiin 20 ml metyylialkoholia tipoittain pitäen lämpötilan välillä -30°C - -20°C. Reaktioseoksen annettiin edelleen reagoida samassa lämpötilassa 2,5 tunnin ajan, minkä 35 jälkeen lisättiin 3,43 ml Ν,Ν-dimetyylianiliinia.

2) 1,76 g D(-)-o^-(4-etyyli-2,3-diokso-l-piperatsino-karbonyyliamino)fenyylietikkahappoa ja 0,76 ml N,N-dimetyyli- 23 65622 aniliinia liuotettiin -liuotinseokseen, jonka muodosti 8 ml metyleenikloridia ja‘4 ml dimetyyliformamidia. Liuosta jäähdytettiin välille -10°C - -5°C, minkä jälkeen lisättiin 0,65 g etyylikloorikarbonaattia tipoittain ja liuosta sekoitettiin 5 samassa lämpötilassa 30 minuutin ajan. Reaktioseos jäähdytettiin -25°C:een ja lisättiin kohdassa a) saatuun reaktioseokseen.

c) Saadun seoksen annettiin reagoida -25°C:ssa 2 tunnin ajan ja sitten siitä poistettiin liuotin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös liuotettiin liuotinseokseen, 10 joka muodostui 30 ml:sta vettä ja 50 ml:sta etyyliasetaattia.

Liuoksen pH säädettiin arvoon 1,0 lisäämällä laimeaa kloorivety-happoa jäillä jäähdyttäen ja liuosta sekoitettiin 15 minuutin ajan, Orgaaninen kerros erotettiin vesikerroksesta, minkä jälkeen lisättiin 20 ml vettä ja pH säädettiin arvoon 7,0 lisää-15 mällä natriumvetykarbonaattia jäillä jäähdyttäen. Saatu vesi-kerros erotettiin orgaanisesta kerroksesta, minkä jälkeen lisättiin 20 ml etyyliasetaattia ja pH säädettiin arvoon 2,0 lisäämällä laimeaa kloorivetyhappoa sekoittaen. Seosta sekoitettiin edelleen 15-20°C:ssa 3 tunnin ajan kiteiden saosta-20 miseksi, jotka otettiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 1,2 g 6-/5 (-)- o(-(4-etyyli-2,3-diokso-l-piperatsinokarbonyyli-amino)-fenyyliasetamido/penisillaanihapon monohydraattia, sp. (haj.) 154-156°C, saanto 45 %.

IR(KBr) cm *:'>) C-0 1775 (laktaami) , 1735 (-COOH) , 25 1705, 1680, 1665 (-CON^) NMR((CD3)2SÖ) Ajossa: 0,20 (111, d) , 0,76 (lii, d) , 2,29 .

(SH, s), 4,32 (1H, d), 4,53 (1H, q), 4,64 (1H, d) , 5,00 (3JI, br) , 5,83 • 30 'IH» «) f 6,13 (2H, bs) , 6,49 (211, bs) , 6,62 (2H, q) , 8,44 (311, s), 8,58 (3H,s), 8,91 (3H, t).

Samalla tavalla kuin edellä saatiin taulukossa 4 esitetyt kaavan (I) mukaiset yhdisteet.

24 6 5 6 2 2 0

Taulukko 4 D(-)- K V N N-CONHCHCONH-] CH3 [OJ o ncooh

sp. (haj.) 134°C

D(-)-

0 O

Λ_ f \ Q ρττ CH^-N N-CONHCHCONH-,- ^ (T)\

ILJJ O COOH

sp. (haj.) 156° - 157°C

D(-)- 0 ,0 y—\ , CK3-N N-CONHCHCONH τ- w Λ Cch5

[J O COOH

sp.(haj.) 84° - 87°C

D(-)-

0 O

CH3-N N-CONHCHCONH-]-r^SV;CH3 ^ J=,

I SO COOH

i ~ j sp- (ha3-> 185°c i_ 25 6 5 6 2 2

Esimerkki 2 1) a) 2,26 g 6-(fenyyliasetamido)penisillaanihapon fenasyyliesteriä ja 2,06 ml Ν,Ν-dimetyylianiliinia liuotettiin 30 ml:aan metyleenikloridia ja 1,15 g fosforipentakloridia 5 lisättiin tähän liuokseen 25°C;ssa. Seoksen annettiin reagoida -30 - -20°C:ssa 1,5 tunnin ajan, minkä jälkeen lisättiin 20 ml metyylialkoholia lämpötilan ollessa -30° - -20°C. Reaktioseok-sen annettiin edelleen reagoida samassa lämpötilassa 3 tunnin ajan, minkä jälkeen 3,43 ml Ν,Ν-dimetyylianiliinia lisättiin.

10 b) 1,76 g D-(-)-o(-(4-etyyli-2,3-dioksd>-l-piperatsino-karbonyyli- amino)fenyylietikkahappoa ja 0,76 ml N,N-dimetyylianiliinia liuotettiin liuotinseokseen, jossa oli 8 ml metyleenikloridia ja 4 ml dimetyyliformamidia. Liuos jäähdytettiin välille -15° --10°C, minkä jälkeen lisättiin 0,65 g etyylikloorikarbonaattia 15 tipoittain ja liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa 40 minuutin ajan, Kun reaktioseos oli jäähdytetty -25°C:een, se lisättiin kohdassa a) saatuun reaktioseokseen.

c) Saadun seoksen annettiin reagoida -25°C:ssa 3 tunnin ajan ja sitten liuotin poistettiin haihduttamalla alennetussa 20 paineessa. Jäännös liuotettiin liuotinseokseen, jossa oli 20 ml vettä ja 40 ml etyyliasetaattia. Orgaaninen kerros erotettiin vesikerroksesta, pestiin kyllästetyllä natriumkloridin Vesiliuoksella, laimealla kloorivetyhapolla ja natriumvety-karbonaatin 5 %:sella vesiliuoksella ja kuivattiin sitten 25 vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Etyyliasetaatti poistettiin haihduttamalla alennetussa paineessa ja jäännökseen lisättiin 50 ml dietyylieetteriä. Näin saatu valkea jauhe suodatettiin ja pestiin dietyylieetterillä, jolloin saatiin 2,29 g 6-/D(-)- OI-(4-etyyli-2,3-diokso-l-piperatsinokarbo-30 nyyliamino)fenyyliasetamido^penisillaanihapon fenasyyliesteriä, saanto 72 %.

IR (KBr) cm-1:V C=0 1775 (laktaami), 1760 (esteri), 1710-1665 (-CONCL , ~<2> 35 ,-- 26 65622 2) 2 g edellä saatua 6-/D(-)-<*-(4-etyyli-2,3-diokso-l-piperatsino-karbonyyliamino)fenyyliasetamido/penisillaanihapon fenasyyliesteriä liuotettiin 30 ml;aan tetrahydrofuraania ja 0,42 g natriumbentseenitiolaattia lisättiin tähän liuokseen 5 15-20°C:ssa, Seosta sekoitettiin 1 tunnin ajan kiteitten saostamiseksi, jotka kerättiin suodattamalla ja suodos väke-voitiin haihduttamalla alennetussa paineessa toisen kidesaannon saamiseksi. Ensimmäiset kiteet ja toiset kiteet yhdistettiin ja liuotettiin 10 ml;aan vettä. Liuokseen lisättiin 15 ml 10 etyyliasetaattia ja seoksen pH säädettiin sitten arvoon 2,0 lisäämällä laimeaa kloorivetyhappoa sekoittaen 18-20°C;ssa. Liuosta sekoitettiin edelleen 18-20°C:ssa 5 tunnin ajan kiteiden saostamiseksi, jotka otettiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 1,47 g 6-/D(-)-σς-(4-etyyli-2,3-diokso-l-piperat-15 sino-karbonyyliamino)fenyyliasetamido7penisillaanihapon mono-hydraattia,, saanto 87 %. Tämä yhdiste oli IR:n, NMR;n ja sulamispisteen perusteella identtinen esimerkissä 1 saadun yhdisteen kanssa.

Edellä esitetyt menetelmävaiheet (1) ja (2) toistettiin, 20 paitsi että 6-(fenyyliasetamido)penisillaanihapon fenasyyli-esteri, jota käytettiin vaiheessa (1), korvattiin 6-(butyr-amido)-penisillaanihapon fenasyyliesterillä, jolloin saatiin 6-/5(-)-cA-(4-etyyli-2,3-diokso-l-piperatsinokarbonyyliamino)-fenyyliasetamidg7-penisillaanihapon monohydraatti, saanto 65 %. 25 3) 1,0 g edellä saatua 6-/5(-)-c<-(4-etyyli-2,3-diokso- 1-piperatsinokarbonyyliamino)fenyyliasetamido7penisillaani-hapon monohydraattia liuotettiin 20 ml:aan asetonia. Liuokseen lisättiin 5 ml asetoniliuosta, joka sisälsi 0,33 g natrium-2-etyyliheksanoaattia valkoisten kiteitten saostamiseksi.

30 Saostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, pestiin riittävällä määrällä etyyliasetaattia, dietyylieetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin 1,02 g 6-/p(-)- (4-etyyli-2,3-diokso-l-piperatsinokarbonyyliamino)fenyyliasetamido7penisillaanihapon natriumsuolaa, sp. 183-185°C (haj.), saanto 98 %.

35 IR(KBr) cnf^Nj C=0 1765 (laktaami), 1720-1670 (-CONC ) , 1600 (-COO~) 27 6 5 6 2 2 NMR((CD3)2SO + Ώ^Ό) jossa: 2,62 (5H) , 4,31 (1H), 4,50 (1H) , 4,70 (1H), 6,05 (1H), 6,35-6,65 (6H), 8,49 (3H), 8,60 (3H), 8,91 5 (3Η), Käyttäen 6-(fenyyliasetamido)penisillaanihapon fenasyyli-esteriä ja taulukossa 5 esitettyjä kaavan (III) mukaisia yhdisteitä toistettiin edellä esitetyt menetelmävaiheet (1), (2) ja (3), jolloin saatiin taulukossa 5 esitetyt kaavan I mukaiset 10 yhdisteet. Kunkin yhdisteen rakenne varmistettiin IR:llä ja NMR:llä. Kaikki yhdisteet olivat D(-)-isomeerejä.

28 6 5 62 2 ► ^ ιλ n Ö Ä W o O O o & £ g - o o o ^-5¾ s ·ΓΤ * K ! s V-f g ° s.

s —I s | / \ °° e .,Γ\, s SYrSS s g | ° g g\=v * I I#! «Λ ·; S O i2 ^

rt \ C\J

3 T,3 , «,

^ 'f -n —' O

oj C\J ._

·" s 5 e . I

I s' s· »f λ 3 O m rH ---- __ 3 - ---— rt tn

K

i s !© TJ o o

* w /p\ V

s &λΡ> v^i -s S 1,3

3 I I

E °v^x cv

c T ) S

*-l ^ w L cv OJ k»-» s s g rt 'f* t<^

Λ Π W

y. o o 29 65622 cvi

x x 8 & S

oou >o g£§ Y—/ ί> o o .

co f v V-/ yi i «Π » _i ΐ Vi V o3 I o p o 00 —V £ I 8 « o § 0 > ^ V) aq />Λ i o «(O/ o £ rp\ o° 9 §w s £-<0/ ε

p 9 CM 3 '- CM

Ä I O

ä rai i - °V ~ χ) ~ 9 <>» A .y 3? w »0 iff I Ϊ i £ fi 15 (Q) S' J 8· 1·© ly-.

1 Ϊ® Λ § °v n tS* V λ,

^_I I

30 65622 ctf ss . (<Λ o

g W K O

ΙΛ. (Λ 6 V ° kko VL/ O O O / f rt W “ I ^ K>o βΓ] V* SS 8 V5^ ^ ^ ^ )^V ^ U * r·s yi - s 1 i-© s k f

Sk^> " gw * | ° s , o l S “f-, s &© s 1 Tl °kr s « <kk t·? V\ ~ ~ % ~ I) ~ 1/1 ^ 'rt 8 V ° k 'rt 2 k 6 ok o ^ 3 o o ^ k 3 tT ά .p · k -1 o w O* £' W « ω

3 ° ω O O

rt _ H --—— -----— -

W

o § §Vq) . V) p T ) “V s O !a K™ °y^\

Jy I J

δ s

S ' § S

X fr fr k

« * S S

31 65622 & S « sffg ϊ' 'Γ' ο 3 οο8 <5 ώ 8 ggg

Ö "ϊί »X

k * k» in *

§0ιΛ gOin pc: O

te s te i te! y * o ·* n

V o° Ί o° o O

. :o e X) s te "s 3 k k £ 5 5 6 .* k? Λ Xf ~ k - k W* -X ^ ¥ te1 ’n? O li r\ £ r* ,c Ci w o c:

o «Γ* ~ · XX

M * · W £· JT* n, ^ υ o, «> ►*$ tn 3 tn ^ Ή — ——_ 3 ' ---- (0

H

i© ie i© :p » :i

W ,2» «M

0 Λ « 1 ? ί g 1 s f 32 65622 Λ 5¾ .

ΙΛ ΙΛ O rt δ O S ω ρ ^ g V--/ ^ ο ο ο ’ ι ° κ w o o yv τ s y-/ s vi *

K o »? 1 I

1 ° °o V* £ «Λ, s

5/n^ ^ 4- s s I

g \Q/ 0 | ° o' ä-/o) “ °r*> 0 l oXJ s T ) 2 Γνί 'V N ° v

·* o ~ C\J

£ M V y -n W *r-> rt ri S o « <υ o rt ” V £ /N 5 .? 5 : ^ * ® * i * -:---- ,¾ ——-------- 3

r—I

3 3

H

« 1® ι l^§> T) I® »r“i ° I vS k? h .<y :? ίοΊ ώ u ^ Ö 33 65622 _ ν» cd m Vi cd 5¾ vo P t".

KV kv O m kv O

W Ä O $ W K O

ϋ « ϋ δ tntng o r<«« .>v i s s 8 g VV ^ » 1 ? vv s n s

K g Vt V l-L I

I ° , Ko 7 1 ° s.

s/ö\ s 8 ° l<o>s «" 9 Γ2^ I^s P 5

•z. I '"-I I

2 O ö; Ö O ^ ^ Γ j »s ~ n ~ °V I T1 V °S·} 1 ,y f * J 5* ΚΛ ^ *~K\ | ^ fe » s s* O ‘ -----.-_____ rd

En I*® !<§>§ i<^ o % \ry 7 :o v :o A °S; " M A Vrv ^ ύ g 34 65622 cd ^

K vo ΡΜΛ O VO KKO O o O

fi I

ti i

P O H

lm o

O tO

9 _ l k I o « o -ti I * CM E? m K ?·

O O

o S

M K J

yA O Oi ^ U «

rH

3 ----—- (0

En

K

m o

o to ^ I K

xr

CM

κ o to ►r* ►m

O

35 65622

Esimerkki 3 a) 3,72 g 6-(fenyyliasetamido)penisillaanihapon kalium-suolaa suspendoitiin 30 ml:aan metyleenikloridia ja 0,25 ml Ν,Ν-dimetyylianiliinia lisättiin tähän suspensioon. Seokseen 5 lisättiin 1,52 ml trimetyylisilyylikloridia 10-15°C:ssa ja seoksen annettiin reagoida 30 minuutin ajan. Kun reaktioseos oli jäähdytetty —50°C:seen, 4f12 ml Ν,Ν-dimetyylianiliinia ja 2,3 g fosforipentakloridia lisättiin. Saadun seoksen annettiin reagoida -45 - -40°C:ssa 1,5 tunnin ajan, minkä jälkeen 10 lisättiin 13,7 ml isobutyylialkoholia. Reaktioseoksen annettiin edelleen reagoida -45 - -40°C:ssa 3 tunnin ajan, minkä jälkeen 6,86 ml Ν,Ν-dimetyylianiliinia lisättiin.

b) 3,52 g D (—) - o<.- (4-etyyli-2,3-diokso-l-piperatsino-karbonyyliamino)fenyylietikkahappoa ja 1,21 g trietyyliamiinia 15 liuotettiin liuotinseokseen, jossa oli 20 ml metyleenikloridia ja 10 ml dimetyyliformamidia. Liuokseen lisättiin tipoittain 1,3 g etyylikloorikarbonaattia -15 - -10°C:ssa ja seosta sekoitettiin samassa lämpötilassa 30 minuutin ajan. Kun reaktioseos oli jäähdytetty -40°C:een, se lisättiin kohdassa a) 20 saatuun reaktioseokseen.

c) Saadun seoksen annettiin reagoida -40 - -30°C:ssa 2 tunnin ajan ja -15°C:ssa yli yön, ja sitten liuotin poistettiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös käsiteltiin samalla tavalla kuin esimerkissä 1, jolloin saatiin 1,72 g 25 6-/5(-)-Crt-(4-etyyli-2,3-diokso-l-piperatsinokarbonyyliamino)- fenyyliasetamido/penisillaanihapon monohydraattia, saanto 32 %. Tämä yhdiste oli IR:n, NMR:n ja sulamispisteen perusteella identtinen esimerkissä 1 saadun yhdisteen kanssa.

Edellä esitetty menettely toistettiin, paitsi, että 30 1,52 ml trimetyylisilyylikloridia korvattiin 0,82 mlslla fosforitrikloridia, jolloin saatiin 2,1 g 6-i5(-)-^-(4-etyyli- 2,3-diokso-l-piperatsino-karbonyyliamino) -fenyyliasetamid<27-penisillaanihapon monohydraattia, saanto 39 %.

Esimerkki 4 35 Käyttäen (4-metyyli-2,3-diokso-l-piperatsinokarbonyyli- amino) -fenyylietikkahappoa ja taulukossa 6 esitettyjä kaavan (IV) 65622 36 mukaisia yhdisteitä toistettiin esimerkissä 2—(1) kuvattu menetelmä, jolloin saatiin taulukossa 6 esitetyt kaavan I mukaiset yhdisteet. Kunkin yhdisteen rakenne varmistettiin IR:llä ja NMR:llä.

37 6 5 6 2 2

η-----“- _ " fO

fO

W

υ S' 8 8 § ►Η ·“*-« ο ►*·« ΙΛ ΙΛΟ ,Λ

W « ο 4p S

ου o S δ o i “R .» γί .» ; Ö ? U 3 g g . ° o t« O 1 -H o T-l «o ! |<s>3 S . * t yS ί Λ ° » 5 I 0^55^ 5 J- S' ά i k · «ci w X W « *-< O « o w IX) ' ' -—-—--

O

λ: ro x ^ 3 to

d M

S S

e·* JT' o o ° o g <υ ►£* cm fj >M ►r» (rt _ O g 3 w tT8 .g'.K'g

•g, v “ « o S S

I ti $

K R

M g O g O

e g ö S g % 5 ö g II & 11 38 65622 °V S1 ή ' S" & ►Λ c\j tn:

&Γ S? O tTpr.O fp fp O

V,0/ BöS sgi »ff ou o /f o h § n § h % w O ’ i 1 l \ ^ ö g o g ° o S^>s m9 ms o o ό o ϋ * g i Τί t yS t °τ*ί ~ t ~ ° *Τ' ~ Λ ° T 5 I cX&J § Ό ‘ 4Γ1 i 'Τ' · ~ ««O s* n δ g· o --------—-____

X

ä © g o °< k > o- 6 g W1

ooo Ö o S

y-{ yy y^( V» “CI wy-[ rl rt.

^ ° ^ ° F O

O o ft O o ° cv SL, o

tr: CU

tT\ ►£« C_) r x ► *· g____g__ g 39 65622

Esimerkki 5

Toistettiin esimerkki 1, mutta korvattiin 6-(fenyyli-asetamido)-penisillaanihapon trifenyylimetyyliestri seuraa-villa kaavan IV mukaisilla yhdisteillä, jolloin saatiin 5 6^D (-) -^-(4-etyyli~2r S-f-diokso-^l-piperatsinokarbonyyliamino) - fenyyliasetamidq7penisillaanihapon monohydraatti.

Taulukko 7

Kaavan IV mukainen yhdiste - - Lopputuotteen saanto (%) 6-(fenoks iasetamido)penisillaani^ 10 hapon trifenyylimetyyliesteri 43 6- (£ -N-etoksikarbonyyliamino- -karboksivaleramido) penisillaanihapon ditrifenyylimetyyliesteri 45 15 6-( (f -N-fenyylikarbamoyyliamino- <£ -karboksivaleramido) penisillaanihapon ditrifenyylimetyyliesteri 40

Claims (2)

1. 40 65 62 2 Patenttivaatimus: Menetelmä uusien terapeuttisesti käytettävien penisilliinien valmistamiseksi, joiden kaava on 5 (X)n /-K - /”3 A-N N-C-NH-CH-CONH—-iT, Ψ 5 R3 JU-C 3 10 (R2)m 0 C00r1 jossa R^ on vetyatomi, suolan muodostava kationi tai esterin muodostava ryhmä, joka on metoksimetyyli, pivaloyylioksimetyyli, ftalidyyli, /3-piperidinoetyyli tai /J-morfolinoetyyli, n on 1 15 tai 2, X on happiatomi, joka on liittynyt hiiliatomiin pi- peratsiinirenkaan 2- ja/tai 3-asemassa, m on 0 tai 1, R on metyyliryhmä, A on C^^-alkyyliryhmä, joka voi olla substi- tuoitu kloorilla tai asetoksilla, tai allyyli-, C^_g-syklo- alkyyli-, fenyyli-, bentsyyli- tai C, ,-alkaanisulfonyyli-3 20 ryhmä ja R on fenyyli-, hydroksifenyyli-, sykloheksadienyy-li- tai tienyyliryhmä, tunnettu siitä, että a) yhdiste, jonka kaava on O-R5 CH, ° COOR6 4 jossa R on bentsyyli-, fenoksimetyyli- tai amino- ja karbok- sisuojattu cf -amino-«£-karboksibutyyliryhmä, R^ on C, ,-alkyy- 6 **· 30 liryhmä ja R on karboksyylin suojaryhmä, saatetaan reagoimaan kaavan 65622 (Χ)η Λ Α-Ν N-C-NH-CH-COOH (III) H7 "o R3 5 <R2)m mukaisen yhdisteen reaktiivisen karboksyylijohdannaisen kanssa, 2 3 jossa kaavassa R , R , A, X, m ja n tarkoittavat samaa kuin edellä, ja 10 b) vaiheesta (a) saatu yhdiste hydrolysoidaan, ja 1. kun R® ei ole sama kuin esterin muodostavia ryhmä R1, saatua hydrolyysituotetta käsitellään sinänsä tunnetulla tavalla ryhmän R^ poistamiseksi, tai 2. kun R6 on sama kuin esterin muodostava ryhmä R1, saatua 15 hydrolyysituotetta käsitellään haluttaessa sinänsä tunnetulla tavalla ryhmän R^ poistamiseksi; ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R^- on vety, muutetaan sinänsä tunnetulla tavalla suolaksi. 65622 Förfarande för framställning av nya terapeutiskt användbara penicilliner med formeln (X) n
2. 5 A (R2 )m COOR1 10 väri R1 är en väteatom, en saltbildande katjon eller en ester-bildande grupp, som är metoximetyl, pivaloyloximetyl, ftalidyl, fi, -piperidinoetyl eller /5 -morfolinoetyl, n är 1 eller 2, X är en syreatom, som är bunden tili en kolatom i piperazinringens 2 ställning 2 och/eller 3, m är 0 eller 1, R är en metylgrupp, A är 15 en C^_^2-alkylgrupp, som kan vara substituerad med klor eller acetoxi, eller en allyl-, C^g-cykloalkyl-, fenyl-, bensyl- eller C^_^-alkansulfonylgrupp och RJ är en fenyl-, hydroxifenyl-, cyklo-hexadienyl- eller tienylgrupp, kännetecknat därav, att a) en förening med formeln 20 °-rS «. R^-C=N- J [ jKpH3 (II) COOR6 4 25 väri R är en bensyl-, fenoximetyl- eller amino- och karboxi- c skyddad £-amino- ί-karboxibutylgrupp, R är en C^_^-alkylgrupp och R6 är en karboxylskyddsgrupp, omsätts med ett reaktiv karboxyl-derivat av en förening med formeln (X)n Λ a-ν' N-C-NH-CH-COOH (III) M-7 o k3 (R2)m 2 3 35 väri RÄ, r , a, X, m och n betecknar samma som ovan, och