FI121708B - Substituoidut 1,3,4-oksadiatsolit - Google Patents

Description

SUBSTITUOIDUT 1,3,4-OKSADIATSOLIT Keksinnön ala

Keksintö liittyy 1,3,4-oksadiatsoli-yhdistei-5 siin, niiden käyttöön kasvainnekroosikertoimen OC alentamiseksi ja cAMP tasojen kohottamiseksi ja tulehdus-autoimmuuni- ja syöpäsairauksien hoitamiseksi nisäkkäässä, sekä näistä yhdisteistä muodostettuihin farmaseuttisiin koostumuksiin.

10

Keksinnön tausta

Kasvainnekroosikerroin a (TNFa) on sytokiini jota pääasiassa vapauttavat immuunisysteemin solut vastineena tietyille immunostimulaattoreille. Annos-15 teltuna ihmisille tai eläimille, se aiheuttaa tuleh dusta, kuumetta, kardiovaskulaarisia oireita, verenvuotoa, koagulaatiota, riutumista, ja akuutin faasin vasteita kuten akuuteissa infektioissa, tulehdussairauksissa, ja shokkitiloissa. Liiallista tai säännöste-20 lemätöntä TNF(X:n tuotantoa on todettu useissa sairaus tiloissa. Mukaan lukien endotoksemia ja/tai toksinen shokkisyndrooma [Tracey, et ai., Nature 330, 662-664 (1987) ja Hinshaw, et ai., Circ. Shock 30, 279-292 (1990)], reumaattinen niveltulehdus, tulehduksellinen 25 suolisairaus, riutuminen [Dezube, et ai., Lancet, 335 (8690), 662 (1990)], ja ihotuberkuloosi. TNFa konsent-raatioita yli 12,000 pg/ml on löydetty keuhkoaspiraa- ? toista aikuisten hengenahdistussyndrooma (ARDS) poti- o lailta [Millar, et ai., Lancet 2(8665), 712-714 c\i »7 30 (1989)]. Rekombinantti TNFa:n systemaattinen infuusio $2 johti ARCS:lie tyypillisiin muutoksiin [Ferrai- ^ Baliviera, et ai., Arch. Surg. 124(12), 1400-1405 (1989)].

(M

TNFa on ilmeisesti osallisena lukuisissa luun g 35 imeytymissairauksissa, mukaan lukien niveltulehdus.

^ Aktivoituina leukosyytit aiheuttavat luun imeytymistä.

TNFa ilmeisesti vaikuttaa tähän mekanismiin. [Bertoli- 2 ni, et al., Nature 319, 516-518 (1986) ja Johnson, et ai., Endocrinology 124 (3), 1424-1427 (1989)]. TNFCC:n on myös osoitettu stimuloivan luun imeytymistä ja estävän luun muodostumista in vitro ja in vivo, stimu-5 loimalla osteoklastin muodostusta ja aktivaatiota yhdistettynä osteoblastin toiminnan inhibitioon. Toinen huomiota herättävä linkki sairauteen on yhteys kasvaimen tai isäntäkudoksen TNFCC: n tuotoksen ja pahanlaatuisen hyperkalsemian välillä [Calci. Tissue Int. (US) 10 46(Suppl.), S3-10 (1990)]. Siirrännäisen hylkimisreak tioissa, on tavattu kohonneita seerumin TNFCC tasoja yhdessä akuutteja allogeenisia luuydinsiirrännäisiä seuraavien isojen komplikaatioiden kanssa, [Holler, et ai., Blood, 75(4), 1011-1016 (1990)].

15 TNFoc:n inhibiition sopivuus kliiniseen tera piaan on osoitettu TNF0C:n vasta-aineiden ja liukoisten TNFCC reseptorien terapeuttisella käytöllä. TNFoc:n blokkauksen monoklonaalisella TNF0C:n vasta-aineella on näytetty olevan hyödyllistä reumaattisessa niveltuleh-20 duksessa [Elliot, el ai., Int. J. Pharmac. 1995 17(2), 141-145] . Korkeat TNFCC tasot ovat yhteydessä Crohnin sairauteen [von Dullemen, et ai., Gastroenterology, 1995 109(1), 129-135] hoito liukoisella TNFOC reseptorilla tuotti kliinisiä etuja.

25 Serebraalinen malaria on letaali hyperakuutti neurologinen syndrooma johon liittyy kaikkein vakavim pia malariapotilailla ilmeneviä komplikaatioita ja ? korkeita TNFOC: n veriarvoja. Kohonneet seerumin TNFCC- o ^ arvot korreloivat suoraan sairauden ankaruuden ja

i J

C\J

Ύ 30 akuutin malarian omaavien potilaiden prognoosin kans- £2 sa, [Grau, et ai., N. Engl. J. Med. 320(24), 1586-1591 £ (1989)].

CL

TNFCC näyttelee osaa kroonisissa keuhkotuleh-

CVJ

dussairauksissa. Altistuminen silika-partikkeleille g 35 johtaa silikoosiin, progressiiviseen, fibroottisen re- aktion aiheuttamaan, hengityshäiriöön. TNFOC: n vasta-aineet blokkasivat täysin silikan indusoiman keuhko- 3 fibroosin hiirillä [Pignet, et ai. , Nature, 344, 245-247 (1990)]. Korkeita TNFOC tuotoksia (seerumissa ja eristetyissä makrofageissa) on osoitettu silika- ja asbesti-indusoidun fibroosin omaavilla koe-eläimillä 5 [Bissonnette, et ai., Inflammation 13(3), 329-339 (1989)]. Keuhkosarkoidoosipotilaiden keuhkorakkuloiden makrofagien on myös huomattu vapauttavan spontaanisti suuria määriä TNFCC: aa, verrattuna normaaleihin luovuttajiin [Baughman, et ai., J. Lab. Clin. Med. 115(1), 10 36-42 (1990)].

Kohonneita TNFCC tasoja ilmenee reper-fuusiovammoissa, tulehduksellisissa vasteissa jotka johtuvat reperfuusiosta, ja ovat pääasiallinen syy ve-rihukan jälkeisiin kudosvaurioihn [Vedder, et ai., 15 PNAS 87, 2643-2646 (1990)]. TNFCC myös muuttaa endote-liaalisten solujen ominaisuuksia, ja omaa erilaisia pro-koagulantteja ominaisuuksia, kuten kudoksen pro-koagulanttitekijän aktiivisuuden lisääminen, antiko-agulanttiproteiinin C ehkäiseminen, ja trombomodulii-20 nin vähentäminen [Sherry, et ai., J. Cell Biol. 107, 1269-1277 {1988}]. TNF0C:lla on tulehdusta edistäviä ominaisuuksia, jotka yhdessä sen aikaisen erityksen (tulehduksen alkuvaiheessa) kanssa tekevät siitä ilmeisen kudosvaurion säätelijän useissa tärkeissä häi-25 riötiloissa, mukaan lukien mutta ei rajoittuen, sydän-lihasinfarkti, halvaus ja verenkiertoshokki. TNFOC-indusoitu adheesiomolekyylien ekspressio, kuten solun-2 sisäisten adheesiomolekyylien (ICAM) tai endoteliaa- listen leukosyyttiadheesiomlekyylien (ELAM) endoteli-

CVJ

»7 30 aalisoluissa voi olla erityisen tärkeää [Munro, et ” ai., Am. J. Path. 135(1), 121-132 (1989)].

On raportoitu, että TNFOC on mahdollinen ret-

CL

roviruksen, mukaan lukien HIV-1, aktivaattori [Duh, et

<M

ai., Proc. Nat. Acad. Sei. 86, 5974-5978 (1989); Poli, g 35 et ai., Proc. Nat. Acad. Sei. 87, 782-785 (1990); Mon- ^ to, et ai., Blood 79, 2670 (1990); Clouse, et ai., J.

Immunol. 142, 431-438 (1989); Poll, et ai., AIDS Res.

4

Hum. Retrovirus, 191-197 (1992)]. HIV:ta on tunnistettu olevan ainakin kolmea eri tyyppiä (HIV-1, HIV-2, HIV-3). HIV infektion seurauksena T-solujen välittämä immuniteetti heikentyy ja infektoituneilla yksilöillä 5 ilmenee vakavia opportunistisia infektioita ja/tai epätavallisia neoplasmoja. HIV:n tunkeutuminen Τ'-lymfosyyttiin vaatii T-lymfosyytin aktivaation. Muut virukset, kuten HIV-1 ja HIV-2 infektoivat T-lymfosyytin T-solun aktivaation jälkeen. Tätä virus-10 proteiinin ekspressiota ja/tai replikaatiota säätelee tai ylläpitää tämä T-solun aktivaatio. Aktivoiduttuaan T-lymfosyytti infektoituu HIV:llä, lymfosyytin täytyy pysyä aktivoituneessa tilassa HIV-geenin replikoitumi-seksi ja/tai ekspressoitumiseksi. Sytokiinit, erityi-15 sesti TNFCC, näyttelevät osaa T-lymf osyytin aktivaation ylläpitämisessä, aktivoituneen T-solun ylläpitämässä HIV-proteiinin ekspressiossa ja/tai viruksen replikaa-tiossa. Täten, puuttuminen sytokiinin aktiivisuuteen, kuten sytokiinin tuotoksen, erityisesti TNFoc:n , vä-20 hentäminen tai estäminen HIV infektoituneessa yksilössä auttaa HIV infektion aiheuttamien T-lymfosyyttien ylläpidon rajoittamista.

Monosyytit, makrofagit, ja vastaavat solut, kuten kupffer- ja glialisolut sekaantuvat myös HIV in-25 fektion ylläpitämiseen. Nämä solut, kuten T-solut, ovat virusreplikaation kohteita ja virusreplikaation taso on riippuvainen solujen aktivaatioasteesta. [Ro- ? senberg, et ai., The Immunopathogenesis of HIV Infec- 0 ^ tion, Advances in Immunology, 57 (1989)]. Sytokiinien, C\| 30 kuten TNFCC: n on osoitettu aktrvoivan HIV replrkaatiota $2 monosyyteissa ja/tai makrofageissa [Poli, et ai., x Proc. Natl. Acad. Sei., 87, 782-784 (1990)], siten sy- O. ....

tokunin tuotoksen tar aktiivisuuden estämrnen tar va-

CVJ

hentäminen auttaa rajoittamaan HIV:n progressiota T- 01 35 soluissa. Lisätutkimukset ovat osittaneet TNF(X:n ylei- o seksi tekijäksi HIV aktivaatiossa in vitro ja ovat paljastaneet selkeän mekanismin solun sytoplasmasta 5 löydetyn tumaa säätelevän proteiinin kautta [Osborn, et ai., PNAS 86 2336-2340]. Tämä todiste tarkoittaa että TNFCcrn synteesin vähentäminen voi aiheuttaa anti-viraalisen efektin HIV infektioissa, vähentämällä 5 transkriptiota ja siten viruksen tuotosta.

HIV viruksen replikaatiota piilevässä AIDS:ssa T-solu- ja makrofagilinjoissa voidaan kiihdyttää TNFa:11a [Folks, et ai. PNAS 86, 2365-2368 (1989)]. Viruksen aktiivisuutta kiihdyttäväksi moleky-10 laariseksi mekanismiksi on ehdotettu TNF0C:n kykyä aktivoida sytoplasmasta löydetty geeniä säätelevä proteiini (transkriptiotekijä, NFKB), joka edistää HIV:n replikaatiota sitoutumalla virukselliseen säätelygee-niin (LTR) [Osborn, et ai., PNAS 86, 2336-2340 15 (1989)]. TNFCC ilmenee, AIDS: iin liittyvässä riutumisessa, kohonneina seerumin TNFa-arvoina ja korkeina TNFa:n spontaaneina tuotoksina potilaiden ääreisveren monosyyteissä [Wright, et ai., J. Immunol, 141(1), 99-104 (1988)] . TNFa on löydetty erilaisista rooleista 20 muissa virusinfektioissa, kuten sytomegaloviruksilla (CMV), influenssaviruksilla, adenoviruksilla, ja her-pesperheen viruksilla, edellä mainituista syistä.

Tumatekijä KB (NFKB), on pleiotrooppinen transkriptionaalinen aktivaattori {Lenardo, et ai., 25 Cell 1989, 58, 227-29). NFKB on löydetty transkriptio-naalisena aktivaattorina useissa sairauksissa ja tulehdustiloissa ja sen ajatellaan säätelevän syto- 0 ....

g knnitaso j a, mukaan lukien muttei rajoittuen TNFa ja ^ aktiivinen HIV transkriptio [Dbaibo, et ai., J. Biol.

7 30 Chem. 1993, 17762-66; Duh, et ai., Proc. Natl. Acad.

1 Sei. 1989, 86, 5974-78; Bachelerie, et ai., Nature g 1991, 350, 709-12; Boswas, et ai., J. Acquired Immune

Deficiency Syndrome 1993, 6, 778-786; Suzuki, et ai., 2 Biochem. And Biophys. Res. Comm. 1993, 193, 277-83; g 35 Suzuki, et al. , Biochem. And Biophys. Res Comm. 1992, ^ 189, 1709-15; Suzuki, et al., Biochem. Mol. Bio. Int.

1993, 31 (4), 693-700; Shakhov, et al., Proc. Natl.

6

Acad. Sei. USA 1990, 171, 35-47; ja Staal, et ai., Pros. Natl. Acad. Sei. USA 1990, 87, 9943-47], Siten olisi merkittävää estää NFkB:n aktivaatio, tuman, translatoituminen tai sitoutuminen säätelemään syto-5 kiini-geeni(e)n transkriptiota ja tällä tavoin ja muilla mekanismeilla estää useita sairaustiloja.

Adenosiini 3',5'-syklinen monofosfaatti (cAMP) toimii välittäjänä monissa solun tapahtumissa. Nämä solun tapahtumat voivat myötävaikuttaa tulehdus-10 tiloihin ja sairauksiin mukaan lukien astma, tulehdus, ja muut tilat {Lowe and Cheng, Drugs of the Future, 17(9), 799-807, 1992). On osoitettu että cAMP:n kohottaminen tulehdus-leukosyyteissä estää niiden aktivaatiota ja myöhempää tulehduksen välittäjien vapautumis-15 ta, mukaan lukien TNFOC ja NFKB. Kohonneet cAMP arvot johtavat myös hengitystien lihasten relaksaatioon.

CAMP:n pääasiallisessa inaktivaatiomekanis-missa cAMP:n hajottaa isoentsyymiryhmä, sykliset nukleotidi fosfodiesteraasit (PDE) [Beavo and Reitsnyder, 20 Trends in Pharm., 11, 150-155, 1990]. PDE:hen kuuluu kymmenen tunnettua jäsentä. On tunnettua että PDE tyypin IV (PDE 4) entsyymin inhibitio on erityisen tehokas sekä tulehduksellisen välittäjän vapauttamisen estämisessä, että hengitystien lihasten relaksaatiossa 25 [Verghese, et ai., Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 272(3), 1313-1320, 1995].

TNFa-tasojen laskeminen, ja/tai cAMP tasojen ^ nostaminen on siten tärkeä terapeuttinen strategia mo- nien tulehduksellisten, tarttuvien, immunologisten ja

CNJ

γ 30 pahanlaatuisten sairauksien hoitamisessa. Näihin mu- $2 kaan lukien muttei rajoittuen septinen shokki, sepsis, g endotoksinen shokki, hemodynaaminen shokki ja sepsis-

CL

syndrooma, jälki-iskeeminen reperfuusiovaurio, mala-

(N

ria, mykobakteeri-infektio, aivokalvontulehdus, pso-g 35 riasis ja muut ihosairaudet, kongestiivinen sydämen cm toimintahäiriö, fibroottiset sairaudet, riutuminen, siirrännäisen hylkiminen, syöpä, kasvaimen kasvu, epä- 7

toivottu angiogeneesi, autoimmuunisairaus, opportunistiset infektiot AIDS:ssa, reumaattinen niveltulehdus, reumaattinen spondyliitti, osteartriitti, muut art-riittisairaudet, tulehduksellinen suolisairaus, Croh-5 nin sairaus, haavainen paksusuolitulehdus, multippeli skleroosi, systemaattinen lupus erytrematoosi, ENL lepraisilla, säteilyvauriot, ja hyperhappiset keuhko-rakkulavauriot. Aiemmin yritykset TNFCC:n vaikutusten vähentämiseksi ovat vaihdelleet steroidien, kuten dek-10 sametasoni ja prednisoloni, käytöstä sekä polyklonaa-listen, että monoklonaalisten vasta-aineiden käyttöön [Beutler, et ai., Science 234, 470-474 (1985); WO

92/11383]

Angiogeneesi, uusien verisuonten kehittyminen 15 ja muodostuminen, näyttelee tärkeää osaa lukuisissa normaaleissa ja patologisissa fysiologisissa tapahtumissa. Angiogeneesi tapahtuu vasteena spesifisille signaaleille ja sisältää kompleksin prosessin, jota ilmentää vaskulaaristen endoteliaalisten solujen in-20 filtraatio basal laminaan vastineena angiogeenisille kasvusignaal(e)ille, endoteliaalisten solujen migraatio signaali(e)n lähdettä kohden, ja tätä seuraava ka-pillaarituubin proliferaatio ja muodostus. Veren virtaus muodostuneen kapillaarituubin lävitse alkaa kun 25 endoteliaaliset solut kohtaavat ja liittyvät jo ole massa olevaan kapillaariin. Angiogeneesiä tarvitaan kasvaimen kasvaessa tiettyä kokoa suuremmaksi.

? Ehkäisevät vaikutukset vallitsevat luonnolli- o ^ sesti esiintyvässä tasapainossa endogeenisten an-

CNJ

Tj- 30 giogeneesin stimulaattoreiden ja estäjien välillä $2 [Rastinejad, et ai., 1989, Cell 56:345-355]. Niissä x harvoissa tapauksissa jossa neovaskularisaatio tapah-

CL

tuu normaaleissa fysiologisissa tiloissa, kuten haavan

(M

parantuminen, elimen regeneraatio, embryonin kehittyisi 35 minen, ja naisen lisääntymisprosessit, angiogeneesiä

O

säädellään tarkasti paikallisesti ja ajallisesti. Pa- 8 tologisessa angiogeneesissä kuten kiinteän kasvaimen kasvussa, nämä säätelevät kontrollit pettävät.

Säätelemättömästä angiogeneesistä tulee patologinen ja se ylläpitää monien neoplastisten ja ei-5 neoplastisten sairauksien kehittymistä. Lukuisia vakavia sairauksia dominoi epänormaali neovaskularisaatio, mukaan lukien kiinteän kasvaimen kasvu ja etäpesäkeet, niveltulehdus, jotkin silmäsairaudet, ja psoriasis [Moses, et ai., 1991, Biotech. 9:630-634; Folkman, et 10 ai., 1995, N. Engl. J. Med., 333:1757-1763; Auerbach, et ai., 1985, J. Microvasc. Res. 29:401-411; Folkman, 1985, Advances in Cancer Research, eds. Klein and Weinhouse, Academic Press, New York, pp. 175-203; Patz, 1982, Am. J. Opthalmol. 94:715-743; ja Folkman, 15 et ai., 1983, Sience 221:719-725]. Lukuisissa patologisissa tiloissa angiogeneesi edesauttaa sairauden kehitystä. Esimerkiksi merkityksellinen datan mukaan kiinteiden kasvainten kasvu on riippuvainen angiogeneesistä [Folkman and Klagsbrun, 1987, Science 20 235:442-447].

Avaskulaarisuuden ylläpitäminen sarveiskalvon linssissä ja verkon ansaassa on elintärkeää näölle, kuten myös silmän fysiologialle. Esimerkiksi Waltman, et ai., 1978, Am. J. Ophthal 85:704-710 ja Gartner, et 25 ai., 1978, Surv. Ophthal. 22:291-312. Tällä hetkellä näiden sairauksien hoito, erityisesti neovaskularisaa- tion ilmettyä, on riittämätöntä, ja seurauksena on ° usein sokeus, o

Angiogeneesin inhibiittorilla voisi olla tär-c\i Ύ 30 keä terapeuttinen rooli, tämän prosessin osuuden ra- £2 joittamisessa, piilevien sairaustilojen kehityksessä, kuten myös tarjotessa arvokkaan välineen näiden saira- Q_ uksien etiologian tutkimisessa. Esimerkiksi agentit, C\l jotka estävät kasvaimen neovaskularisaatiota voivat g 35 näytellä tärkeää osaa etäpesäkkeiden ja kiinteän kas- ° vaimen kasvun estämisessä.

9

Angiogeneesin estämiseen on käytetty useita erilaisia yhdisteitä. Taylor, et ai. käytti protamii-nia angiogeneesin rajoittamiseen, [Taylor, et ai., Nature 297:307 (1982)]. Protamiinin toksisuus rajoittaa 5 sen terapeuttista käyttöä. Folkman, et ai. käytti he-pariinia ja steroideja angiogeneesin kontrollointiin. [Folkman, et ai., Science 221:719 (1983) ja U.S. Pat.

Nro:t 5,001,116 and 4,994,443]. Steroidit, kuten tet-rahydrokortisoli, joista puuttuu gluko- ja mineraali-10 sen kortisoidin aktiivisuus, ovat angiogeenisia inhi-biittoreita. Interferoni β on myös potentiaalinen pernan solujen indusoiman angiogeneesin inhibiittori [Sidky, et ai., Cancer Research 47:5155-5161 (1987)].

Ihmisen rekombinantti interferoni-cc: ta raportoitiin 15 käytetyn menestyksellisesti pulmonaarisessa heman- giomatoosissa, angiogeneesin indusoimassa sairaudessa [White, et ai., New England J. Med. 320:1197-1200 (1989) ] .

Muita angiogeneesin inhibitointiin käytettyjä 20 agentteja ovat askorbiinihapon eetterit ja vastaavat yhdisteet [Japanese Kokai Tokkyo Koho No. 58-131978]. Sulfatoitu polysakkaridi DS 4152 myös omaa angiogeneesin inhibiition [Japanese Kokai Tokkyo Koho No. 63-119500]. Sienestä lähtöisin oleva tuote, fumagilliini, 25 on potentiaalinen angiostaattinen agentti in vitro, yhdiste on toksinen in vivo, mutta synteettistä derivaattaansa, AGM 12470, on käytetty in vivo hoitamaan ? kollageeni II niveltulehdusta. Fumagilliini ja o- substituoituja fumagilliinin johdannaisia on esitetty *7 30 EPO julkaisuissa 0325199A2 ja 0357061A1.

$2 US patentissa 5,874,081, Parish esittää monoja klonaalisten vasta-aineiden estävän angiogeneesiä.

CL

W092/12717:ssa, Brem et ai. opettaa, että jotkin tet-c\i ^2 rasykliinit, erityisesti Minocycline, Chlortetracycli- g 35 ne, Demeclocycline ja Lymecycline ovat käyttökelpoisia ^ angiogeneesin inhibiittoreita. Brem et ai. esittää, että Minocycline estää angiogeneesiä hepariinin ja 10 kortisonin yhteiskäytön veroisesti [Cancer Research, 51, 672-675, Jan. 15, 1991]. Teicher, et ai. esittää, että kasvaimen kasvu vähenee ja etäpesäkkeiden määrä vähenee, kun anti-angiogeenista agenttia etäpesäkkeis-5 sä vähennetään, käytettäessä anti-angiogeenista agenttia Minocyline syövän kemoterapiassa tai säteilytera-piassa [Cancer Research, 52, 6702-6704, Dec. 1, 1992].

Makrofagi-indusoidun angiogeneesin tiedetään stimuloituvan TNFCC: 11a. Leibovich et ai. raportoi, et-10 tä TNFCC indusoi erittäin pieninä annoksina kapillaari-verisuonten muodostumista rotan sarveiskalvossa ja kehittyvissä kanan kohdun kalvon membraaneissa in vivo, ja ehdottaa että TNFCC olisi kandidaatti tulehduksellisen, haavan korjautumisen ja kasvaimen kasvun an-15 giogeneesin indusoimisessa [Nature, 329, 630-632 (1987) ] .

Kaikki ruumiin erilaiset solut voivat muuntua hyvä- tai pahanlaatuisiksi syöpäsoluiksi. Yleisimmin syöpä ilmenee keuhkoissa, minkä jälkeen tulee pak-20 susuoli/peräaukko, rinta, prostata, virtsarakko, haima ja munasarjat. Muita yleisiä syöpiä ovat leukemia, keskushermoston syövät, aivokasvain, melanooma, lym-fooma, punasoluleukemia, kohtusyöpä, luusyöpä, ja pää-ja niskasyöpä.

25 Syöpää hoidetaan yleisesti kolmella eri ta valla, tai näiden yhdistelmillä; kirurgisesti, säteilyllä, ja kemoterapialla. Kirurgiaan kuuluu sairastu-2 neiden kudosten poisto. Vaikka kirurgia on joskus te- ^ hokas tiettyihin paikkoihin pesiytyneiden kasvainten

CM

7 30 poistamisessa (esimerkiksi rinnasta, paksusuolesta ja $2 ihosta), leikkausta ei voida käyttää muihin kohtiin g pesiytyneiden syöpien hoidossa (esimerkiksi selkäran-

CL

ka), eikä levinneiden neoplastisten tilojen hoidossa

CM

(esimerkiksi leukemia). Kemoterapiaan kuuluu solujen g 35 replikaation tai metabolian häiritseminen. Kemoterapi- ^ aa käytetään useimmiten leukemian hoitoon, kuten myös rinta- keuhko- ja kivessyövän hoitoon.

11

Kemoterapeuttisiksi agenteiksi luetaan usein antineoplastiset agentit. Alkyyliaatioagenttien uskotaan toimivan alkyloimalla ja verkottamalla guaniinia ja muita mahdollisia emäksiä DNA:ssa, ehkäisten solun 5 jakautumisen. Tyypillsiä alkyyliaatioagentteja ovat sinappitypet, etyleeni-imiiniyhdisteet, alkyylisulfaa-tit, sisplatiini ja erilaiset nitrosoureat. Näiden yhdisteiden ongelmana on että ne eivät hyökkää vain pahanlaatuisiin soluihin, vaan myös muihin, luonnolli-10 sesti jakautuviin soluihin, kuten luuytimen, ihon, vatsan limakalvon ja sikiökudoksen. Antimetaboliitit ovat tyypillisesti reversiibeleitä tai irreversiibe-leitä entsyymin inhibiittoreita, tai yhdisteitä jotka muuten sekaantuvat nukleiinihappojen replikaatioon, 15 translaatioon, tai transkriptioon. Täten olisi toivottavaa löytää vähemmän toksisia yhdisteitä syövän hoitoon .

Matriisimetalloproteinaasin (MMP) inhibiitio on liitetty useisiin toimintoihin, mukaan lukien 20 TNFCtrn inhibiitio [Mohler, et ai., Nature, 370, 218- 220 (1994)] ja angiogeneesin inhibiitio. MMP:t ovat joukko erittyviä ja membraanin sitomia sinkki-endopeptidaaseja, jotka ovat avainasemassa sekä fysiologisessa että patologisessa kudoksen hajoamisessa 25 [Yu, et ai., Drugs & Aging, 1997, (3):229-244; Wojto- wicz-Praga, et ai., Int. New drugs, 16:61-75 (1997)].

Nämä entsyymit kykenevät hajottamaan solunulkoisen 2 matriisin komponentit, mukaan lukien säikeiset ja säi-

O

^ keettömät kollageenit, fibronektiini, laminiini ja

CM

*7 30 membraanin glykoproteiinit. Tavallisesti solun hajoa- $2 misen, matriisin synteesin ja matriisin hajoamisen g (jota sytokiinit kontrolloivat), kasvukertoimien ja Q_ solun ja matriisin välisten vuorovaikutusten kesken C\l <5 vallitsee herkkä tasapaino. Kuitenkin patologisissa g 35 tiloissa tämä tasapaino voi häiriintyä. Tiloihin ja ^ sairauksiin, joihin liittyy epätoivottuja MMP tasoja, kuuluu mutta ei rajoitu: kasvaimen etäpesäkkeiden in- 12 vaasio ja kasvu, angiogeneesi, reumaattinen niveltulehdus, osteoartriitti, osteopeniaasi, kuten osteoporoosi, periodontiitti, gingiviitti, Crohnin sairaus, tulehduksellinen suolisairaus, sarveiskalvon, orvaske-5 den tai vatsan haavaumat.

Lisääntynyttä MMP aktiivisuutta on havaittu useissa syövissä (Denis, et ai., Invest. New Drugs, 15: 175-185 (1987)]. Kuten TNF(X:n, myös MMP: n uskotaan vaikuttavan angiogeneesin ja kasvaimen etäpesäkkeiden 10 invasiivisiin prosesseihin.

Keksinnön yksityiskohtainen selostus

Esillä oleva keksintö perustuu huomioon, että tietyt luokat tässä tarkemmin kuvattuja ei-15 polypeptidiyhdisteitä alentavat TNF0C:n tasoja ja/tai estävät PDE:tä, erityisesti PDE 4:ää, ja/tai estävät angiogeneesiä ja/tai ovat käyttökelpoisia syövän, tulehduksellisten ja autoimmuunisairauksien hoidossa. Esimerkiksi yhdisteet, jotka selektiivisesti estäisi-20 vät erityisesti PDE 4:ää, estäisivät ainakin osittain tulehduksia ja ilmatien lihasten relaksaatiota, vähäisin ei-toivotuin sivuvaikutuksin, kuten kardiovasku-laarisin tai verihiutaleen vastaisin vaikutuksin. Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia fosfo-25 diesteraasin estämisessä, erityisesti PDE 4:n, ja näistä johtuvien sairaustilojen hoitamisessa.

Esitetyt yhdisteet voivat estää NFKB:n toi-2 minnan tumassa ja ovat siten käyttökelpoisia useiden ^ sairauksien hoidossa, mukaan lukien, mutta ei rajoit-

CM

7 30 tuen nivelreuma, reumaattinen nikamatulehus, luu- $2 niveltulehdus, muut reuman tapaiset tilat, septinen g shokki, sepsis, endotoksinen shokki, siirrännäisen Q.

hylkimistauti, hivuttava tauti, tulehduksellinen suo-

(M

lisairaus, Crohnin sairaus, paksusuolen haavauma, mul-g 35 tippeli skleroosi, systemaattinen punoittava ihotuber- ^ kuloosi, ENL lepraisilla, HIV, AIDS, ja opportunisti set infektiot AIDS:ssa. TNFCC ja NFKB tasoihin vaikut- 13 taa vastavuoroinen takaisinkytkentäsilmukka. Kuten yllä on kerrottu, keksinnön mukaiset yhdisteet vaikuttavat sekä TNF(X:n että NFKB:n tasoihin.

Erityisesti keksintö liittyy (a) Kaavan 1 mu-5 kaisiin olennaisesti kiraalisesti puhtaisiin (R) - tai olennaisesti kiraalisesti puhtaisiin (S)- 1,3,4- oksadiatsoli-yhdisteisiin, tai (R)- ja (S)—1,3,4— oksadiatsoli-yhdisteiden seoksiin: R5 R1 /"V-R6 vVijB- 1 JL ' 1 cr^x R4 10

Kaava I

jossa : *:llä merkitty hiiliatomi muodostaan kiraali-sen keskuksen; 15 Y on C=0, CH2,-S02 tai CH2C=0; X on vety tai 1-4 hiiliatomin alkyyli; kukin R1, R2, R3, ja R4, ovat toisistaan riippumatta, vety, halogeeni, trifluorometyyli, asetyyli, 1-8 hiiliatomin alkyyli, 1-4 hiiliatomin alkoksi, nit-20 ro, syaani, hydroksi, tert-butyyli, -CH2NR8R9, 0 (CH2)2NR8R9, tai - NR8R9; tai mikä tahansa vierekkäinen o pari Ri, R2, R3, R4:stä vierekkäisten hiiliatomien ja

CM

esitetyn f enyylirenkaan kanssa ovat naf tylideeni, ki-^ noliini, kinoksaliini, bentsimidatsoli, bentsodioksoli 25 tai 2-hydrobentsimidatsoli; X ..56 £ kumpikin R and R , ovat toisistaan riippumat- cm ta, vety, 1-4 hiiliatomin alkyyli, 1-6 hiiliatomin <35

alkoksi, syaani, bentsosykloalkoksi, korkeintaan 18 CM

o hiiliatomin sykloalkoksi, korkeintaan 18 hiiliatomin w 30 bisykloalkoksi, korkeintaan 18 hiiliatomin trisykloal- 14 koksi, tai korkeintaan 18 hiiliatomin sykloalyylial-koksi; kumpikin R8 ja R9 toisistaan riippumatta ovat vety, suora 1-8 hiiliatomin alkyyli, haarautunut 1-8 5 hiiliatomin alkyyli, fenyyli, bentsyyli, pyridyyli, pyridyylimetyyli, tai toinen R8 ja R9 on vety ja toinen on -COR10, tai - S02R10, tai R8 ja R9 ovat yhdessä tetrametyleeni, pentame-tyleeni, -CHNCHCH-, heksametyleeni, tai 10 CH2CH2X12CH2CH2- jossa X1 on -O-, -S-, tai -NH-; R10 on vety, 1-8 hiiliatomin alkyyli, sykloal-kyyli, korkeintaan 6 hiiliatomin sykloalkyylimetyyli, fenyyli, pyridyyli, bentsyyli, imidatsolyylimetyyli, 15 pyridyylimetyyli, NR11R12, CH2NR*R°, tai NR11R12 jossa R* and R°, ovat toisistaan riippumatta, vety, metyyli, etyyli, tai propyyli, ja jossa R11 ja R12 , ovat toisistaan riippumatta, vety, 1-8 hiiliatomin alkyyli, fenyyli, tai bentsyyli; 2 0 and (b) tai yhdisteen happoadditiosuolaan, joka sisältää protonoituvan typen.

Käytännön syistä edellä mainittuihin yhdisteisiin viitataan tästedes 1,3,4-oksadiatsoleina. Ter-25 millä alkyyli tarkoitetaan tässä yksivalenssista tyydyttynyttä tai tyydyttymätöntä, haarautunutta tai suoraa, syklistä, tai näiden sekoitusta, 1-8 hiiliatomia ? sisältävää hiilivetyketjua. Tällaisia alkyyliryhmään

O

kuuluvia ovat metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, cm p- 30 butyylr, isobutyyli, sek-butyyli, tert-butyyli, sykloni? pentyyli, ja syklopropyylimetyyli. Alkoksilla tarkoi- g tetaan alkyyliryhmää, joka liittyy muuhun molekyyliin O.

eetterihapella. Tällaisia alkoksiryhmään kuuluvia ovat

CM

^ metoksi, etoksi, propoksi, isopropoksi, butoksi, iso- g 35 butoksi, sek-butoksi, tert-butoksi, sykloheksyylime- ^ toksi ja syklopentyylimetoksi.

15

Sykloalkyylilla tarkoitetaan yksivalenssista syklistä hiilivetyketjua, joka voi olla tyydyttynyt tai tyydyttymätön. Ellei muutoin ilmaista, tällaiset ketjut voivat sisältää aina 18 hiiliatomia ja voivat 5 sisältää monosykloalkyylin, disykloalkyylin, polysyk-loalkyylin ja bentsosykloalkyylin. Monosykloalkyylilla tarkoitetaan ryhmää jossa on yksi rengas, polysykloal-kyylilla tarkoitetaan systeemiä jossa on kaksi tai useampia renkaita, joilla on yksi tai useampi yhteinen 10 hiili; kuten spiro, fuusioitu tai siltarakenne. Bent-sosykloalkyyli merkitsee monosykloalkyyliä joka on fuusioitu bentso-ryhmään. Monosykloalkyyleihin kuuluu syklopropyyli, syklobutyyli, syklopentyyli, syklohek-syyli, sykloheptyyli, syklooktyyli, syklononyyli, syk-15 lodekyyli, sykloundekyyli, syklododekyyli, syklotride-kyyli, syklotetradekyyli, syklopentadekyyli, syklohek-sadekyyli, sykloheptadekyyli, syklooktadekyyli. Poly-sykloalkyyleihin kuuluu dekahydronaftaleeni, spi-ro[4.5]dekyyli, bisyklo[2.2.1]heptyyli, bisyk- 20 lo[3.2.1]oktyyli, pinanyyli, norbornyyli, ja bisyk-lo[2.2.2]oktyyli. Bentsosykloalkyyleihin kuuluu tetra-hydronaftyyli, indalyyli, ja 1.2-bentsosyklo- heptanyyli. Sykloalkoksilla tarkoitetaan edellä mainittua sykloalkyyliryhmää, joka on mono- poly- tai 25 bentsosykloalkyyli, joka liittyy muuhun molekyyliin eetterihapella.

Edullisin ryhmä yhdisteitä ovat kaavan I mu- 2 kaiset yhdisteet joissa Y on C=0.

o ^ Edelleen edullinen ryhmä yhdisteitä ovat kaa-

(M

V 30 van I mukaiset yhdisteet joissa Y on CH2 $2 Edelleen edullinen ryhmä yhdisteitä ovat kaa- van I mukaiset yhdisteet joissa kukin R1, R2, R3, R4

CL

ovat toisistaan riippumatta vety, halogeeni, metyyli,

CM

^ etyyli, metoksi, etoksi, nitro, syaani, hydroksi, tai g 35 -NR8R9, jossa kumpikin R8 ja R9 ovat toisistaan riippu- ^ matta vety tai metyyli, tai toinen R8, R9:stä on vety 16 ja toinen on -COCH3, tai COR, jossa R on alkyyli, bentsyyli, pyridyyli, tai pyridyylimetyyli.

Edelleen edullinen ryhmä yhdisteitä ovat kaavan I mukaiset yhdisteet joissa yksi R1, R2, R3, R1:sta 5 on —NH2 tai CH3 ja loput ovat vetyjä.

Edelleen edullinen ryhmä yhdisteitä ovat kaavan I mukaiset yhdisteet joissa yksi R1, R2, R3, R1:sta on -NHCOCH3, NHSO2R10, tai NHCOR10, ja loput ovat 10 vetyjä.

Edelleen edullinen ryhmä yhdisteitä ovat kaavan I mukaiset yhdisteet joissa yksi R1, R2, R3, R1:sta on -N(CH3)2 ja loput ovat vetyjä.

Edelleen edullinen ryhmä yhdisteitä ovat kaa-15 van I mukaiset yhdisteet joissa yksi R1, R2, R3, R1:sta on metyyli tai etyyli ja loput ovat vetyjä.

Edelleen edullinen ryhmä yhdisteitä ovat kaavan I mukaiset yhdisteet joissa R5, R6 ovat toisistaan riippumatta ovat metoksi, etoksi, propoksi, syklopen-20 toksi tai sykloheksoksi.

Edelleen edullinen ryhmä yhdisteitä ovat kaavan I mukaiset yhdisteet joissa R5 on metoksi ja R6 on alkoksi, monosykloalkoksi, polysykloalkoksi, tai bent-sosykloalkoksi.

25 Edelleen edullinen ryhmä yhdisteitä ovat kaa van I mukaiset yhdisteet joissa R5 on metoksi ja R6 on etoksi tai syklopentoksi.

° Kaavan I mukaisia yhdisteitä käytetään päte- o ^ vien ammattilaisten valvonnan alaisena estämään epä-

CNJ

Y 30 toivottuja TNFCC:n ja PDE 4 :n vaikutuksia. Yhdisteitä $2 voidaan myös antaa syövän, angiogeneesin, tulehduksen, g ihotilojen jne. hoitoon. Yhdisteitä voidaan antaa Q_ oraalisesti, rektaalisti, tai ruuansulatuskanavan ul-

CM

kopuolelle, yksin tai yhdessä muiden terapeuttisten c\i 35 aineiden, mukaan lukien antibiootit, steroidit, jne.,

O

^ hoitoa tarvitsevalle nisäkkäälle. Termit PDE IV ja PDE

tarkoittavat samaa.

17

Yhdisteitä voidaan myös käyttää paikallisesti, paikallisten sairauksien hoitoon tai ehkäisyyn, mukaan lukien mutta ei rajoittuen atooppinen ihottuma, psoriasis, ihotuberkuloosi, virusinfektiot, kuten her-5 pesviruksen aiheuttamat tai viruksen aiheuttamat side-kalvotulehdukset, psoriasis, syöpä jne. PDE 4:n inhi-bitio on edullinen toteutusmuoto, mutta voidaan olettaa myös muiden fosfodiesteraasien inhibitioiden toimivan .

10 Yhdisteitä voidaan myös käyttää eläinlääke tieteellisessä hoidossa muille nisäkkäille kuin ihmisille, jotka tarvitsevat TNF(X:n estämistä tai inhibi-tiota tai PDE 4 inhibitiota. TNFCC:n välittämissä sairauksissa hoitamiseen terapeuttisesti tai ennaltaeh-15 käisevästi, eläimillä, joihin kuuluu edellä mainitut sairaustilat. Virusinfektioesimerkkeihin kuuluu kissan immuunipuutosvirus, hevosen tarttuva anemiavirus, vuohensukuisten niveltulehdusvirus, visnavirus ja maedi-virus, kuten myös muut lentivirukset.

20 Menetelmiä happojen (I) valmistamiseksi on kuvailtu US patentissa 5,605,914, jonka sisältö täten mukaan luetaan tähän hakemukseen. Oksadiatsolien (III) valmistus voidaan suorittaa kaksivaiheisesti tai yk-siastiaisesti. Hapon (I) reaktio karbonyylidi-25 imidatsolin (CDI), tai muun aktivaatioagentin kanssa, jota seuraa asyylihydratsidin (NH2NHCXO, jossa X on vety tai alkyyli) lisäys, tuottaa kaavan (II) mukaisen ? yhdisteen. Edulliset liuottimet tässä reaktiossa ("a") o ^ ovat aproottisia polaarisia liottimia joihin kuuluu c\j τρ 30 asetonitrnli (CH3CN) , tetrahydrofuraani (THF) , ja $2 etyyliasetaatti (EtOAc). Kaavan (II) mukaiset yhdiste teet voidaan tässä vaiheessa erottaa. Vaihtoehtoisesti

CL

kaavan (II) mukaista yhdistettä voidaan käyttää seu-

(M

^ raavaan reaktioon "b" ilman erotusta (suositeltava cm 35 liuotin on tällöin asetonitriili) . Reaktiossa "b" kaa-

O

van (II) mukaisen yhdisteen dehydraatio, dehydraa-tioreagenssilla, kuten fosforioksykloridilla (POCI3) 18 tai fosforipentoksidilla (P2O5) tuottaa kaavan (III) mukaisen yhdisteen. Reaktiossa "b" voidaan käyttää lämmitystä.

o-R5 /°-RSR e

_ /' R6 . R

2 r ? Cr° * v °

YpN-( ,? ' " YVVQ v R3jJy M r3>Y^y x R I OH I4 Tl R4 R H & (0 <"> O-R5 - R4 r (Hl)

O

Kun jonkin R1, R2, R3, R4, halutaan olevan 10 aminon lopullisessa 1,3,4-oksadiatsolissa, on usein suotavaa käyttää vastaavaa nitroyhdistettä (I) ja sitten pelkistää syntyvä nitroisoindolinoni aminoisoindo-linoniksi muodostumisen jälkeen. Vaihtoehtoisesti amino- ja muut mahdollisesti reagoivat ryhmät voidaan 0 15 muuntaa asianmukaisiksi suojaryhmiksi.

0 Tässä käytetyillä suojaryhmillä tarkoitetaan clj ryhmiä jotka eivät yleensä jää lopulliseen terapeutti- ' seen tuotteeseen, mutta jotka tarkoituksella lisätään jossain vaiheessa synteesiä, suojelemaan ryhmiä, jotka £ 20 muutoin voisivat muuntua kemiallisen manipuloinnin ai- (M kana. Tällaiset suojaryhmät poistetaan myöhemmässä O) vaiheessa synteesiä, ja täten yhdisteet joissa tällai-

CM

o siä suojaryhmiä on, ovat lähinnä kemiallisia välituot- ^ teitä (vaikkakin joillakin näistä derivaatoista on 25 biologisia ominaisuuksia). Niin muodoin suojaryhmän 19 täsmällinen rakenne ei ole tärkeä. Lukuisia suojaryh-mien muodostus- ja poistoreaktioita kuvaillaan useissa perusteoksissa, esimerkiksi, "Protective Groups in organic Chemistry", Plenum Press, London and New York, 5 1973; Greene, Th. W. "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, New York, 1981; "The Peptides", Vol. 1, Schröder and Lubke, Academic Press, London and New York, 1965; "Methoden der organischen Chemie", Houben-Weyl, 4th Edition, Vol. 15/1, Georg Thieme Ver-10 lag, Stuttgart 1974, jotka julkaisut täten liitetään tähän hakemukseen.

Kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä on kiraali-nen keskus ja ne voivat siten esiintyä optisina isomeereinä. Sekä näiden isomeerien rasemaatit että iso-15 meerit itse, kuten myös diastereomeerit, kun yhdis teessä on kaksi kiraalista keskusta, ovat esiteltävän keksinnön piirissä. Rasemaatteja voidaan käyttää sellaisenaan tai voidaan erottaa yksittäisiksi isomee-reikseen mekaanisesti vaikkapa kromatografiällä käyt-20 tämällä kiraalista absorptioainetta. Vaihtoehtoisesti voidaan valmistaa yksittäisiä isomeerejä kiraalisessa muodossa tai erottaa seoksesta kemiallisesti muodostamalla suoloja kiraalisella hapolla tai emäksellä, tai käyttämällä sellaisia yksittäisiä enantiomeereja kuten 25 10-kamferisulfonihappo, kamferihappo, a-bromikamferi- happo, metoksiasetaattihappo, tartaarihappo, diasetyy-litartaarihappo, omenahappo, pyrrolidoni-5- 2 karboksyyli-happo, ja vastaavia, ja sitten vapautta- ° ^ maila yksi tai kummatkin liuotetuista emäksistä, vaih- iy 30 toehtoisesti toistaen prosessia, jommankumman tai kum- $2 mankin tuottamiseksi puhtaana toisesta, eli optisen x puhtauden ollessa >95%.

Q_

Edullisiin esimerkkeihin kuuluu olennaisesti

(M

co kiraalisesti puhdas (R) -isomeeri, olennaisesti kiraa- g 35 lisesti puhdas (S)-isomeeri tai näiden seos, jossa isomeeri on 2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]isoidoliini-1,3-dioni, 20 2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]bentso[e]isoindoliini-1,3-dioni, 2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-4-metyyliisoindoliini-l,3-dioni, 5 2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol- 2-yyli)etyyli]-5-metyyliisoindoliini-l,3-dioni, 2-[1-(3-syklopentoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyylisoindoliini-l, 3-dioni, 10 2-[1-(3-syklopentoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4- oksadiatsol-2-yyli) etyyli]-4-metyyliisoindoliini-l,3-dioni, N-[2-[1-(3-syklopentoksi-4-metoksifenyyli) -2-(1,3, 4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-1,3-dioksoisoindoliin-4-15 yyli]asetamidi, N-[2[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-1,3-dioksoisoindoliin-4-yyli]-asetamidi, 5-(tert-butyyli)-2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-2 0 (1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]isoindoliini-1,3- dioni, 2-[1-(3,4-dimetoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]isoindoliini-1,3-dioni, 2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol- 25 2-yyli)etyyli]isoindolin-l-oni, 2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(5-metyyli(1,3,4- oksadiatsol-2-yyli)) etyyli]isoindolin-l-oni, o δ Da 2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-

CVJ

Ύ 30 2-yyli)etyyli]-3-pyrrolino[3,4-]kinoliini-1,3-dioni.

$2 Keksintö liittyy myös fysiologisesti kelvol- lisiin, ei-toksisiin, kaavan (I) mukaisten yhdisteiden

CL

happoadditiosuoloihin. Tällaisiin suoloihin kuuluu or-

(N

gaanisista ja epäorgaanisista hapoista muodostetut, g 35 kuten mutta ei rajoittuen: suolahappo, bromihappo, ^ fosforihappo, rikkihappo, metaanisulfonihappo, etikka- happo, tartaarihappo, maitohappo, sukkiinihappo, sit- 21 ruunahappo, omenahappo, maleiinihappo, 2,4- heksadienohapppo, 1-propeeni-l,2,3- trikarboksyylihappo, salisyylihappo, ftaalihappo, 2-naftaleenikarboksyylihappo, n-heptaanihappo ja vastaa-5 vat.

Oraalisiin annosmuotoihin kuuluu tabletit, kapselit, lääkerakeet ja samankaltaisesti muotoillut, puristetut farmaseuttiset muodot, sisältäen 1-100 mg lääkettä per yksikköannos. 20-100 mg/ml sisältäviä 10 mikstuuroita voidaan tuottaa ruuansulatuskanavan ulkopuoliseen annosteluun, johon kuuluu lihaksensisäinen, intratekaali, laskimon ja valtimon sisäiset annoste-lureitit. Rektaali annostelu voidaan suorittaa käyttämällä tavallisesta kantajasta, kuten kaakaovoista, 15 muodostettua peräpuikkoa. Farmaseuttisiin yhdisteisiin kuuluu siis yksi tai useampia keksinnön mukaisia yhdisteitä, sekä ainakin yksi farmaseuttisesti kelvollinen kantaja, laimennusaine tai kantoaine. Tällaisia seoksia valmistettaessa aktiiviset ainesosat yleensä 20 sekoitetaan tai liuotetaan kantoaineeseen, tai suljetaan kapselin tai pussin muotoiseen kantajaan. Kun kantoaine toimii liuottimena, se voi olla kiinteä, puolikiinteä, tai nestemäinen materiaali, toimien kantajana aktiiviselle ainesosalle. Siten seokset voivat 25 olla tabletin, pillerin, pulverin, eliksiirin, suspension, emulsion, liuoksen, siirapin, pehmeän tai kovan gelatiinikapselin, peräpuikon, steriilin injektoitavan 2 liuoksen ja steriilin pakatun pulverin muodossa. Sopi-

O

^ via kantoaineita ovat esimerkiksi laktoosi, dekstroo- ^7 30 si, sokeri, sorbitoli, mannitoli, tärkkelys, akasiaku- $2 mi, kalsiumsilikaatti, mikrokiteinen selluloosa, pölyjä vinyylipyrrolidinoni, polyvinyylipyrrolidoni, sellu-

CL

loosa, vesi, siirappi ja metyyliselluloosa, yhdisteet

(M

^ voivat lisäksi sisältää liukastusaineita, kuten talk- g 35 kia, magnesiumstearaattia, ja mineraaliöljyä, kostuen tusaineita, emulsoivia ja suspendoivia aineita, säi- 22 löntäaineita, kuten metyyli- ja propyylihydroksibent-soaatit, makeutusaineita ja aromiaineita.

Seokset muodostetaan edullisesti yksikköan-noksiksi, tarkoittaen fysikaalisesti diskreettejä yk-5 sikköjä jotka soveltuvat yksittäisiksi annoksiksi, tai ennaltamäärättyjä fraktioita yksikköannoksista annettaviksi yksittäis- tai moniannoksisena kuurina ihmisille ja muille nisäkkäille, jokaisen yksikön sisältäessä ennaltamäärätyn määrän aktiivista materiaalia, 10 laskettu tuottamaan haluttu terapeuttinen efekti yhdessä sopivan farmaseuttisen kantoaineen kanssa. Käyttämällä alalla tunnettuja menetelmiä, voidaan seokset muodostaa tarjoamaan välitön, jatkuva, tai viivästetty aktiivisen ainesosan vapautuminen, potilaalle annoste-15 lun jälkeen.

Seuraavien esimerkkien tarkoitus on selittää keksintöä, eikä niitä tule ymmärtää millään tavoin keksintöä rajoittaviksi, mikä keksintö on yksinomaisesti määritelty patenttivaatimuksissa.

20

Esimerkki 1 2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsoli-2-yyli)etyyli] isoindoliini-1,3-dioni 25 3-(1,3-dioksoisoindoliini-2-yyli)-3-(3- etoksi-4-metoksifenyyli)propaanihapon (3.0 g, 8.1 mmol) ja karbonyylidi-imidatsoliinin (1.45 g, 8.94 ° mmol) seosta tetrahydrofuraanissa (15 ml) sekoitettiin o huoneenlämmössä 2 tuntia. Liuokseen lisättiin metyyli-eli ...

7 30 hydratsnnia (644 mg, 10.7 mmol). Seosta sekoitettiin £2 18 tuntia. Muodostuva suspensio suodatettiin ja pes- tiin eetterillä. Erotettua kiinteää ainetta sekoitet-

CL

tiin etyyliasetaatin (40 ml) ja veden (10 ml) seokses-

OJ

sa tunnin ajan. Suspensio suodatettiin ja pestiin ve- (N 35 dellä ja eetterillä, tuottaen raakaa 3-(1,3- o ^ dioksoisoindolin-2-yyli)-N-karbonyyliamino-3-(3- etoksi-4-metoksifenyyli)propaaniamidia (1.3 g, 39% 23 saanto). 3-(1,3-dioksoisoindolin-2-yyli)-N- karbonyyliamino-3-(3-etoksi-4- metoksifenyyli)propaaniamidin (600 mg, 1.46 mmol) ja fosforioksykloridia (POCI3, 0.54 ml, 5.8 mmol) liuosta 5 asetonitriilissä (20 ml) refluksoitiin 2 tuntia. Tämä liuos kaadettiin veteen (10 ml). Vesifaasi uutettiin etyyliasetaatilla (2 X 50 ml) . Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin natriumbikarbonaatilla (50 ml, kyl.), suolaliuoksella (50 ml) and kuivattiin magnesiumsul-10 faatilla. Liottimen poisto ja kromatografia tuottivat öljyn. Öljy lietettiin eetteriin (10 ml). Muodostunut liete suodatettiin tuottaen 2-[ 1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-

yyli)etyyli]isoindoliini-1,3-dionia, valkoinen kiinteä 15 aine (250 mg, 43% saanto): sp, 132.0-134.0 C; 1H NMR

(CDCI3) ; δ 1.46 (t, J= 6.9 Hz, 3H, CH3) , 2.82 (dd, J = 6.0, 15.6 Hz, 1H, CHff) , 3.84 (s, 3H, CH3) , 4.11 (q, J = 7.0 Hz, 2H, CH2), 4.37 {dd, J =10.3, 15.7 Hz, 1H, CHH), 5.81 {dd, J= 6.0, 10.3 Hz, 1H, NCH) , 6.62 (d, J 20 = 7.9 Hz, 1H, Ar) , 7.13-7.17 (m, 2H, Ar) , 7.67-7.72 (m, 2H, Ar), 7.75-7.62 (m, 2H, Ar), 8.29 (s, 1 H, Ar) ; 13C NMR (CDCI3) δ 14.69, 27.70, 51.85, 55.90, 64.42, 111.32, 112.51, 120.32, 123.44, 130.14, 13163, 134.13, 148.39, 143.43, 153.03, 163.99, 167.93; las- 25 kettu C21H29N3O5: C, 64.12; H, 4.87; N, 10.68. Löydetty: C, 63.84; H, 4.90; N, 10.48.

° Esimerkki 2 0 2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4- C\j Ύ 30 oksadiatsol-2yyli)etyyli]bentso[e]isoindoliini-1,3- £2 dioni 1 2- [1- (3-Etoksi-4-metoksifenyyli) -2- (1,3, 4-

CL

oksadiatsol-2-yyli)etyyli]bentso[e]isoindoliini-1,3- C\] ^ dioni valmistettiin esimerkin 1 mukaisella menetelmäl- g 35 lä. Täten 3-(1,3-dioksobentso[e]isoindolin-2-yyli)-3- ° (3-etoksi-4-metoksifenyyli)propaanihapon (1.50 g, 3.58 mmol), karbonyylidi-imidatsoliinin (0.70 g, 4.3 mmol) 24 and metyylihydratsiinin (310 mg, 5.16 mmol) reaktio tetrahydrofuraanissa (20 ml) tuotti raakaa 3-(1,3-dioksobentso[e]isoindolin-2-yyli)-N-karbonyyliamino-3-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)propanamidia (1.0 g, 2.2 5 mmol), jota sitten käsiteltiin fosforioksykloridilla (POCI3, 0.4 ml, 4.3 mmol) asetonitriilissa (10 ml). Tuote oli keltainen kiinteä aine (135 mg, 8% kokonaissaanto) : sp, 139.0-141.5 °C; ΧΗ NMR (CDC13) δ 1.47 (t, J = 7.2 Hz, 3H, CH3) , 3.85 (s, 3H, CH3) , 3.87 {dd, J = 10 6.0, 15.6 Hz, 1H, CHH), 4.13 (q, J= 6.9 Hz, 2H, CH2) , 4.42 {dd, J =10.2, 15.6 Hz, 1H, CHH), 5.87 (t, J = 5.9, 10.4 Hz, 1H, NCH) , 6.84 (d, J= 8.7 Hz, 1H, Ar) , 7.18-7.27 (m, 2H, Ar), 7.64-7.75 (m, 2H, Ar), 7.81 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar) , 7.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H, Ar) , 15 8.14 (d, J = 8.2 Hz, 1H, Ar) , 8.29 (s, 1H, CH) , 8.90 {Cl, J= 7.5 Hz, 1H, Ar) ; 13C NMR (CDC13) δ 14.63, 27.79, 51.69, 55.84, 64.39, 111.34, 112.53, 118.41, 121.22, 124.83, 126.88, 127.93, 128.62, 128.74, 129.44, 130.31, 130.87, 135.06, 136.59, 148.37, 20 149.36, 152.95, 164.04, 168.51, 169.07; laskettu C25H21N3O5: C, 67.71; H, 4.77; N, 9.48. Löydetty: C, 67.80; H, 4.95; N, 9.20.

Esimerkki 3 25 2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyIi)-2-(1,3,4- oksadiatsol-2-yyli) etyyli]-4metyyliisoindoliini-l,3-dioni 2 2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-

O

^ oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-4-metyylisoindoliini-l, 3- c\] Y 30 dioni valmistettiin esimerkin 1 mukaisella menetelmäl- $2 lä. 3- (3-etoksi-4-metoksifenyyli)-3-(4-metyli-l, 3- dioksoisoindolin-2-yyli) propaanihapon (2.03 g, 5.29

CL

mmol), karbonyylidi-imidatsoliinin (1.03 g, 6.35 mmol)

(M

ja metyylihydratsiinin (420 mg, 6.99 mmol) reaktio g 35 tetrahydrofuraanissa (20 ml) tuotti raakaa N- ° karbonyyliamino-3-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-3-(4- metyyli-1,3-dioksoisoindolin-2-yyli)propaaniamidia 25 (610 mg, 1.43 mmol), jota sitten käsiteltiin fosfo-rioksykloridilla (0.4 ml, 4.3 mmol) asetonitriilissa (6 ml) . Tuote oli valkoinen kiinteä aine (311 mg, 14% kokonaissaanto): sp, 96.0-98.0 C; 1H NMR (CDCI3) δ 5 1.47 (t, J = 6.9 Hz, 3H, Cff3) , 2.67 (s, 3H, CH3) , 3.81 (dd, J = 6.0, 15.7 Hz, 1H, CHff}, 3.85 (s, 3H, C H3) , 4.12 (q, J = 6.9 Hz, 2H, CH2) , 4.37 (dd, J = 10.21 15.6 Hz, 1H, CH H), 5.81 (t, J = 6.0, 10.3 Hz, 1H, NCH) , 6.83 (d, J= 8.7 Hz, 1H, Ar) , 7.14-7.17 (m, 2H, 10 Ar) , 7.43 (d, J = 7.6 Hz, 1H, Ar) , 7.54 (t, J = 7.3

Hz, 1H, Ar), 7.63 (d, J = 7.1 Hz, 1H, Ar) , 8.30 (s, 1H, CH) ; 13C NMR {CDC13} δ 14.69, 17.52, 27.71, 51.62, 55.92, 64.46, 111.37, 112.63,. 120.33, 121.06, 128.31, 130.33, 132.07, 133.59, 136.55, 138.18, 148.39, 15 149.42, 153.02, 164.08, 168.04, 168.53/ Laskettu C22H21N3O5 + 0.2 H20: C, 64.29; H, 5.25; N, 10.22; H20, 0.90. Löydetty: C, 64.62; H, 5.30; N, 9.83/ H20, 0.71.

Esimerkki 4 20 2-[1-(3 -Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4- oksadiatso-2-yyli) etyyli]-5metyyliisoindoliini-l,3-dioni 2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyyliisoindoliini-l,3-25 dioni valmistettiin esimerkin 1 mukaisella menetelmällä. 3-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-3-(5-metyyli-l,3- dioksoisoindolin-2-yyli)propaanihapon (1.81 g, 4.72 ? mmol), karbonyylidi-imidatsoliinin (0.92 g, 5.7 mmol)

O

^ and metyylihydratsiinin (375 mg, 6.2 mmol) reaktio c\j 7 30 etyyliasetaatissa (20 ml) tuotti raakaa N- £2 karbonyyliamino-3-(3-etoksi-4-metoksifenyyli) -3-(5- metyyli-1,3-dioksoisoindolin-2-yyli)propaaniamiinia

CL

(0.93 g, 2.2 mmol), jota sitten käsiteltiin fosforiok-

CM

^ sikloridilla (0.4 ml, 4.3 mmol) asetonitriilissä (12 g 35 ml) . Tuote oli valkoinen kiinteä aine (371 mg, 19% ko- ^ konaissaanto) : sp, 122.0-124.0 °C; ΧΗ NMR (CDC13} δ 1.45 (t, J = 6.9 Hz, 3H, C H3) 2.48 (s, 3H, C H3}, 3.80 26 (dd, J = 6.0, 15.6 Hz, 1H, CRH), 3.84 (s, 3H, CH3) , 4.10 (q, J = 6.9 Hz, 2H, CH2) , 4.35 (dd, J = 10.3, 15.6 Hz, 1H, CRH), 5.79 (dd, J = 6.0, 10.2 Hz, 1H, NCff) , 6.82 (d, J= 8.1 Hz, 1H, Ar) , 7.12-7.17 (m, 2H, 5 Ar) , 7.47 (d, J = 7.5 Hz, IH, Ar) , 7.59 (s, 1H, Ar) , 7.68 (d, J = 7.6 Hz, 1H, Ar) , 8.28 (s, 1H, Ar) / 13C NMR (CDC13) δ 14.61, 21.86, 27.67, 51.71, 55.83, 64.36, 111.29, 112.49, 120.22, 123.27, 123.88, 128.97, 130.23, 131.95, 134.58, 145.39, 148.33, 10 149.34, 152.93, 163.97, 167.91, 168.04; Laskettu C22H21N3O5: C, 64.86; H, 5.20; N, 10.31. Löydetty: C, 64.77; H, 5.07; N, 10-30.

Esimerkki 5 15 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)- 2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5metyyliisoindo-liini-1,3-dioni 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-20 metyyliisoindoliini-1,3-dioni valmistettiin esimerkin 1 mukaisella menetelmällä. 1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-3-(5-metyyli-l,3-dioksoisoindolin-2-yyli)propaanihapon (2.33 g, 5.5 mmol), karbonyylidi-imidatsoliinin (1.07 g, 6.59 mmol) ja metyylihydrat-25 siinin (436 mg, 7.26 mmol) reaktio etyyliasetaatissa (20 ml) tuotti raakaa N-karbonyyliamino-3-(3-,syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-3-(5-metyyli-l,3-2 dioksoisoindolin-2-yyli)propaaniamidia (2.24 g, 4.8 ^ mmol), jota sitten käsiteltiin fosforioksikloridilla,

CM

V 30 (0.9 ml, 9.6 mmol) asetonitriilissä (10 ml). Tuote oli £2 valkoinen kiinteä aine (728 mg, 32% kokonaissaanto): £ sp, 184.0-186.5 °C; XH NMR (CDCI3) δ 1.55-2.00 (m, 8H,

C5H8), 2.48 (s, H, CH3) , 3.81 (s, 3H, CH3) , 3.82 (dd, J

CM

= 6.1, 15.7 Hz, 1H, CHH) , 4.36 (dd, J= 10.3, 5.7 Hz, § 35 1H, CHff) , 4.74-4.81 (m, 1 H, OCH), 5.79 (dd, J= 5.9, oj 10.3 Hz, 1H, NCff) , 6.80 (d, J= 8.4 Hz, 1H, Ar) , 7.10 {dd, J = 2.0, 8.3 Hz, 1H, Ar) , 7.18 (d, J = 2.0 Hz, 27 1H, Ar) , 7.47 (d, J = 7.5 Hz, 1H, Ar) , 7.59 (s, 1H,

Ar) , 7.67 (d, J = 7.6 Hz, 1H, Ar) , 8.28 (s, 1H, CH) ; 13C NMR (CDC13) δ 21.95, 24.09, 27.75, 32.77, 51.79, 56.00, 80.48, 111.73, 114.51, 120.16, 123.34, 123.95, 5 129.05, 130.22, 132.03, 134.65, 145.44, 147.75, 150.03, 153.00, 164.08, 167.98, 168.11; Laskettu C25H25N3O5 + 0.13 Et20: C, 67.05; H, 5.80; N, 9.19. Löydetty: C, 66.95; H, 5.88; N, 8.97. (HNMR osoitti että näyte sisälsi 0.13 ekvivalenttia eetteriä).

10

Esimerkki 6 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-4-metyyliisoindoliini-l,3-dioni 15 2-[1-(3-Syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)- 2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-4-- metyyliisoindoliini-l,3-dioni valmistettiin esimerkin 1 mukaisella menetelmällä. 3-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-3-(4-metyyli-l,3-dioksoisoindolin-2-20 yyli)propaanihapon (2.23 g, 5.27 mmol), karbonyylidi-imidatsoliinin (0.94 g, 5.8 mmol) ja metyylihydratsii-nin (382 mg, 6.36 mmol) reaktio etyyliasetaatissa (20 ml) tuotti raakaa N-karbonyyliamino-3-(3-- syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-3-(4-metyyli-l,3-25 dioksoisoindolin-2-yyli)propaaniamidia (1.71 g, 3.67 mmol), jota sitten käsiteltiin fosforioksikloridilla (0.8 ml, 8.6 mmol) asetonitriilissä (10 ml). Tuote oli ? valkoinen kiinteä aine (368 mg, 16% kokonaissaanto): ^ sp, 126.0-128.5 °C; 3Η NMR (CDC13) δ 1.21-1.99 (m, 8H, V 30 C5H8), 2.66 (s, 3H, CH3) , 3.81 (s, 3H, CH3) , 3.82 {dd, $2 J = 6.1, 15.8 Hz, 1 H, CND! }, 4.37 {dd, J = 10. 3, £ 15.6 Hz, 1 H, -NH}, 4.76-4.83 (m, I H, OCH), 5.80 {dd, J = 5.9, 10.3 Hz, 1H, NC H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H,

CM

<5 Ar) , 7.09-7.18 (m, 2H, Ar) , 7.43 (d, J = 7.6 Hz, 1H, g 35 Ar) , 7.54 (t, J = 7.4 Hz, 1H, Ar) , 7.62 (d, J = 7.1 ^ Hz, 1H, Ar) , 8.29 (s, 1H, CH) ; 13C NMR (CDC13) δ 17.45, 24.00, 27.67, 32.68, 51.57, 55.94, 80.44, 28 111.69, 114.55, 120.13, 120.98, 128.25, 130.22, 132.01, 133.50, 136.44, 138.08, 147.68, 149.99, 152.93, 164.04, 167.95, 168.56; Laskettu C25H25N3O5: C, 67.10; H, 5.63; N, 9.39. Löydetty: C, 67.14; H, 5.55; 5 N, 9.19.

Esimerkki 7 N-[2-[1-(3-Syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-10 1,3-dioksoisoindolin-4-yyli]asetamidi N-[2-[1-(3-Syklopentyylioksi-4-metoksifenyy-li)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-1,3-dioksoiso-indolin-4-yyli]asetamidi valmistettiin esimerkin 1 mukaisella menetelmällä. 3-[4-(asetyylilamino)-1,3-15 dioksoisoindolin-2-yyli]-3-(3-syklopentyylioksi-4- metoksifenyyli)-propaanihapon (2.0 g, 4.3 mmol), kar-bonyylidi-imidatsoliinin (0.77 g, 4.8 mmol) ja metyy-lihydratsiinin (314 mg, 4.7 mmol) reaktio etyyliasetaatissa (20 ml) tuotti raakaa 3-[4-(asetyyliamino)-20 1,3-dioksoisoindolin-2-yyli]-N-karbonyyliamino-3-(3- syklo-pentyylioksi-4-metoksifenyyli)propaaniamidia, jota käsiteltiin fosforioksikloridilla (1.0 ml, 10.7 mmol) asetonitriilissä (15 ml). Tuote oli keltainen kiinteä aine (555 mg, 28% kokonaissaanto): sp, 115.0-25 117.0 °C; ΧΗ NMR (CDC13) δ 1.62-1.97 (m, 8H, C5H8) , 2.27 (s, 3H, CH3), 3.76 {dd, J = 5.6, 15.9 Hz, 1H, CHH) , 3.83 (s, 3H, C H3), 4.40 (dd, J =10.7, 15.8 Hz, ° 1H, CHH), 4.76-4.82 {m, 1H, OC H), 5.78 (dd, J = 5.5,

O

^ 10.7 Hz, 1H, NCH) , 6.84 (d, J= 8.1 Hz, 1H, Ar) , 7.09- V 30 7.15 (m, 2H, Ar) , 7.47 (d, J = 7.21 Hz, 1H, Ar) , 7.65

$2 (t, J = 7.5 Hz, 1H, Ar) , 8.32 (s, 1H, CH) , 8.76 (d, J

X = 8.4 Hz, 1H, Ar) , 9.48 (s, 1H, NH) ; 13C NMR (CDCI3) δ 23.99, 24.85, 27.58, 32.68, 51.71, 55.95, 80.53,

(M

o? 111.75, 114.46, 115.10, 118.03, 119.88, 124.82, § 35 129.77, 130.95, 135.94, 137.48, 147.77, 150.21, ^ 152.99, 163.85, 167.36, 169.07, 167.71; Laskettu C26H26N0O6 + 0.1 heksaani: C, 64.01; H, 5.53; N, 11.22.- 29 Löydetty: C, 64.01; H, 5.58; N, 10.97. (HNMR osoitti, että näyte sisälsi 10% heksaania).

Esimerkki 8 5 N-[2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4- oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-1,3dioksoisoindolin-4-yyli]asetamidi 3-[4-(asetyyliamino)-1,3-diokso-isoindolin-2-yyli]-3-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)pro-paanihapon 10 (1.69 g, 3.96 mmol) ja karbonyylidi-imidatsoliini (0.71 g, 4.4 mmol) seosta asetonitriilissä (20 ml) sekoitettiin huoneenlämmössä 2 tuntia. Liuokseen lisättiin metyylihydratsiinia (289 mg, 4.81 mmol). Seosta sekoitettiin 18 tuntia. Muodostuneeseen liuokseen li-15 sättiin fosforioksikloridia (1.0 ml, 10.7 mmol), ja tätä seosta refluksoitiin 2 tuntia. Liuos kaadettiin veteen (10 ml). Vesifaasi uutettiin etyyliasetaatilla (2 X 50 ml) . Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella (50 ml, kyl.), suola-20 liuoksella (50 ml) ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla.

Kromatografiän jälkeinen liuottimen poisto tuotti öljyn. Öljyä lietettiin eetterissä (10 ml). Tämä liete suodatettiin tuottaen N-[2-[1-(3-etoksi-4- metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli) etyyli] -25 1,3-dioksoisoindolin-4-yyli] asetamidia, kiinteä valkoinen aine (478 mg, 27% saanto): sp, 141.0-143.0 °C; ΧΗ NMR (CDCls) δΐ.47 (t, J= 6.9 Hz, 3H, Cff3) , 2.26 (s, ° 3H, C H3) , 3.74 (dd, J = 5.8, 15.8 Hz, 1H, CH H), 3.85 ^ (s, 3H, CH3) , 4.11 (q, J= 7.1 Hz, 2H, CH2) , 4.38 (dd, V 30 J = 10.6, 15.8 Hz, 1H, CH H), 5.78 (dd, J = 5.6, 10.6 $2 Hz, 1H, NCff) , 6.83 (d, J = 8.9 Hz, 1H, Ar) , 7.11- jc 7.14 (m, 2H, Ar) , 7.45 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar) , 7.64

(d, J = 7.5 Hz, 1H, Ar) , 8.31 (s, 1H, Ar) , 8.75 (d, J

CM

® = 8.4. Hz, 1H, Ar) , 9.46 (br s, 1H, N H); 13C NMR

g 35 (CDCls) δ 14,70, 24.92, 27.60, 51.74, 55.92, 64.50, ^ 111.40, 112.47, 115.15, 118.11, 120.15, 124.91, 129.87, 130.99, 136.01, 137.55, 148.49, 149.59, 30 153.97, 163.88, 167.44, 169.14, 169.75; Laskettu C23H22N4O6: C, 61.33; H, 4.92; N, 12.44. Löydetty: C, 61.37; H, 4.88; N, 12.11.

5 Esimerkki 9 5-(tert-Butyyli)-2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2--yyli)etyyli]isoindoliini-1,3-dioni 5-(tert-Butyyli)-2-[1-(3-etoksi-4-metoksife-10 nyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]isoindoliini-1, 3-dioni valmistettiin kuten esimerkissä 8, 3 —[5 — (tert-butyyli)-1,3-dioksoisoindolin-2-yyli]-3-(3-etok-si-4-metoksifenyyli)propaanihaposta (2.0 g, 4.7 mmol), karbonyylidi-imidatsoliinista (0.81 g, 5.0 mmol), me-15 tyylihydratsiinista (0.35 9, 5.8 mmol), ja fosforiok- sikloridista (1.0 ml, 10.7 mmol) asetonitriilissä (20 ml) . Tuote oli valkoinen kiinteä aine (800 mg, 38% saanto): sp, 136.0-138.5 °C; ΧΗ NMR (CDC13) δ 1.35 (s, 9H, CH3) , 1.44 (t, J= 6.9 Hz, 3H, CH3) , 3.79 (dd, J =

20 5.9, 16.1 Hz, 1H, CHff), 3.84 (s, 3H, Cff3) , 4.11 (q, J

= 7.1 Hz, 2H, CH2) r 4.38 (dd, J = 10.3, 15.8 Hz, 1H,

CHff), 5.80 (dd, J= 5.9, 10.4 Hz, 1H, NCff) , 6.82 (d, J

= 8.2 Hz, 1H, Ar), 7.11-7.17 (m, 2H, Ar), 7.70 (br s, 2H, Ar) , 7.82 (br s, 1H, Ar) , 8.29 (s, 1H, Ar) ; 13C NMR 25 (CDCI3) δ 14.71, 27.73, 31.08, 35.72, 51.78, 55.92, 64.44, 111.36, 112.58, 120.31, 120.63, 123.26, 128.94, 130.33, 131.14, 131.84, 148.41, 149.42, 153.02, ? 158.82, 164.07, 168.25, 168.39; Laskettu C25H27N3O5 + o ™ 0.11 H20: C, 66.51; H, 6.08; N, 9.31; H20, 0.43. Löy- $7 30 detty: C, 66.42; H, 5.83; N, 9,18; H20, 0.43.

co x Esimerkki 10 2- [1- (3,4-Dimetoksifenyyli) -2- (1,3,4-oksa-

C\J

^ diatsol-2-yyli)etyyli]isoindoliini-1,3-dioni cvj 35 2-[1-(3, 4-Dimetoksifenyyli)-2-(1,3, 4-oksa- o ^ diatsol-2-yyli)etyyli]isoindoliini-1,3-dioni valmistettiin kuten esimerkissä 8, 3-(3,4-dimetok- 31

sifenyyli)-3-(1,3-dioksoisoindolin-2-yyli) propaanihaposta (2.0 g, 3.6 mmol), karbonyylidi-imidatsoliinista (1.0 g, 6.2 mmol), metyylihydratsiinista (0.41 g, 6.8 mmol), ja fosforioksykloridista (1.3 ml, 14 mmol) ase-5 tonitriilissä (20 ml). Tuote oli valkoinen kiinteä aine (730 mg, 34% saanto), sp, 83.0-85.0 °C; ΧΗ NMR

(CDCls) δ 3.82 (dd, J = 6.0, 16.0 Hz, 1H, CHH), 3.85 (s, 3H, CH3), 3.90 (s, 3H, CH3) , 4.39 (dd, J = 10.3, 15.7 Hz, 1H, CHH), 5.84 (dd, J = 6.0, 10.3 Hz, 1H, 10 NCH) , 6.81-6.85 (m, 1H, Ar) , 7.16-7.19 (m, 2H, Ar) , 7.68-7.73 (m, 2H, Ar), 7.77-7.83 (m, 2H, Ar), 8.30 {s, 1H, CH); i3C NMR (CDC13) δ 27.66, 51.76, 55.79, 55.89, 111.00, 111.07, 120.29, 123.3,8, 130.16, 131.55, 134.07, 149.03, 149.11, 152.96, 163.90, 167.86; Las- 15 kettu C20H17N3O6 + 0.3 Et20: C, 63.22; H, 5.20; N,

10.32. Löydetty: C, 63.40; H, 5.02; N, 10.46. NMR

osoitti, että näyte sisälsi 30% eetteriä).

Esimerkki 11 20 2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4- oksadiatsol-2-yyli)etyyli]isoindolin-l-noni 2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]isoindolin-l-noni valmistettiin kuten esimerkissä 1. 3-(3-etoksi-4-metoksifenyy- 25 li)-3-(l -oksoisoindolin-2-yyli)propaanihapon (1.50 g, 4.22 mmol), karbonyylidi-imidatsoliinin (0.80 g, 4.9 mmol) ja metyylihydratsiinin (310 mg, 5.16 mmol) reak- ^ tio tetrahydrofuraanissa (10 ml) tuotti raakaa N- o ^ karbonyyliamino-3-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-3-(1- ^ 30 oksoisoindolin-2-yyli)propaaniamidia (1.0 g, 2.2 £2 mmol), jota sitten käsiteltiin fosforipentoksidilla x (2.32 g, 18.3 mmol) kloroformissa (30 ml) huoneenläm- mössä 18 tuntia. Tuote oli valkoinen kiinteä aine (250

05 mg, 16% kokonaissaanto): sp, 143.5-144.5 °C; ΧΗ NMR

^ 35 (CDC13} ; δ 1.43 (t, J= 7.0 Hz, 3H, CH3) , 3.65 (dd, J = o

^ 6.1, 15.1 Hz, 1H, CHH), 3.85 (s, 3H, CH3) , 3.87 (dd, J

= 9.9, 15.0 Hz, 1H, CHH), 4.01-4.12 (m, 3H, NCH H, CH2) , 32 4.46 (d, J = 16.6 Hz, 1H, NCHff) , 5.99 (dd, J = 6. 1, 10.1 Hz, 1H, NCff) , 6.83-6.87 (m, 1H, Ar) , 6.94-7.01 (m, 2H, Ar), 7.34-7.52 (m, 3H, Ar) , 7.78 (d, J = 7.1

Hz, 1H, Ar), 8.34 (s, 1H, NCH) ; 13C NMR (CDC13) δ 5 14.60, 27.84, 46.19, 52.13, 55.86, 64.45, 111.32, 112.45, 118.98, 122.78, 123.72, 127.95, 129.95, 131.49, 131.98, 141.09, 148.66, 149.35, 153.31, 163.86, 168.25; Laskettu C21H21N3O4 + 0.06 CH2CI2: C, 65.79; H, 5.54; N, 10.93. Löydetty: C, 65.87; H, 5.67; 10 N, 10.89.

Esimerkki 12 2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(5-metyy-li(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)) etyyli]isoindoli-l-noni 15 2- [1- (3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(5- metyyli(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)) etyyli]isoindoli-l-noni valmistettiin esimerkin 1 mukaisella menetelmällä. 3-(3-etoksi-4metoksifenyyli)-3-(1-oksoisoindolin-2-yyli)propaanihapon (1.50 g, 4.22 mmol), karbo- 20 nyylidi-imidatsoliinin (0.76 g, 4.7 mmol) ja etyyli-hydratsiinin (381 mg, 5.16 mmol) reaktio tetrahydrofu-raanissa (15 ml) tuotti raakaa N-karbonyyliamino-3-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-3-(l-oksoisoindolin-2-yyli)propaaniamidia (1.22 g, 3.06 mmol), josta (650 25 mg, 1.47 mmol) käsiteltiin fosforipentoksidilla (2.0 g, 14 mmol) kloroformissa (30 ml) huoneenlämmössä 18 tuntia. Tuote oli valkoinen kiinteä aine (250 mg, 32% 2 kokonaissaanto): sp, 125.5-128.0 °C; 3H NCR (CDCI3) ; δ ™ 1.43 (t, J= 7.0 Hz, 3H, Cff3) , 2.46 (s, 3H, CH3) , 3.56 V 30 (dd, J = 6.3, 15.1 Hz, 1H, CHff) , 3.76 (dd, J = 10.0, $2 15.0 Hz, 1H, CHff), 3.86. (s, 3H, Cff3) , 4.02-4.11 (m, 3H, NCHff, Cff2) , 4.46 (d, J = 16.6 Hz, 1H, NCHff) , 5.97 (dd, J= 6.3, 9.9 Hz, 1H, NCH), 6.83-6.87 (m, 1H, Ar),

CM

<5 6.95-7.01 (m, 2H, Ar) , 7.35-7.53 (m, 3H, Ar) , 7.77- g 35 7.81 (m, 1H, Ar) ; 13C NMR (CDC13) Ö 10.89, 14.64, ° 28.04, 46.18, 52.08, 55.89, 64.47, 111.32, 112.51, 119.03, 122.81, 123.74, 127.95, 130.13, 131.48, 33 132.11, 141.17, 148.64, 149.31, 163.86, 164.23, 168.30/ Laskettu C22H23N3O4 + 0.28 EtOAc: C, 66.42; H, 6.08/ N, 10.05. Löydetty: C, 66.47; H, 5.98; N, 10.04. (1H NMR osoitti, että näyte sisälsi 28% etyyliasetaat-5 tia).

Esimerkki 13 2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-10 oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-3-pyrroliini[3,4-h]-kino-liini-1,3-dioni 2-[1-(3-Etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3, 4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-3-pyrroliini[3,4-h]-kinoliini-1,3-dioni valmistettiin esimerkin 1 mukai-15 sella menetelmällä. 3-(1,3-diokso(3-pyrroliini[3,4-h]kinolin-2-yyli))-3-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)pro-paanihapon (1.0 g, 2.4 mmol), CDI:n (0.46 g, 2.8 mmol) ja metyylihydratsiinin (0.20 g, 3.4 mmol) reaktio THF:ssa (10 ml) tuotti raakaa 3-(1,3-diokso(3- 20 pyrroliini[3,4-h]kinolin-2-yyli))-N-karbonyyliamino-3-(etoksi-4-metoksifenyyli)propaaniamidia (1.12 g), jota sitten käsiteltiin fosforioksykloridilla (0.8 ml, 8.6 mmol) asetonitriilissä (30 ml) . Tuote oli valkoinen kiinteä aine (350 mg, 33% kokonaissaanto): sp, 166-168 25 °C; ΧΗ NMR (CDCI3) δ 1.47 (t, J= 6.8 Hz, 3H, CH3) , 3.85 (dd, J = 5.9, 15.8 Hz, 1H, CH H), 3.85 (s, 3H, C ff3) , 4.13 (q, J = 6.9 Hz, 2H, CHz) , 4.48 (dd, J = 10.4, ° 15.8 Hz, 1H, CHH) , 5.91 (dd, J = 5.8, 10.4 Hz, 1H,

O

™ NCff) , 6.82-6.85 (m, 1H, Ar) , 7.21-7.25 (m, 2H, Ar) , V 30 7.58 (dd, J = 4.2, 8.4 Hz, 1H, Ar) , 7.94 (d, J = 8.0

” Hz, 1H, Ar), 8.19 (d, J= 8.2 Hz, 1H, Ar), 8.27 (dd, J

g = 1.7, 8.4 Hz, 1H, Ar) , 8.28 (s, 1H, CH) , 9.24 (dd, J

= 1.7, 4.2 Hz, 1H) ; 13C NMR (CDCI3) δ 14.63,

(M

27.60, 51.83, 55.85, 64.39, 111.29, 112.58, 119.52, § 35 120.43, 123.16, 126.81, 130.08, 132.14, 134.44, ^ 135.57, 136.68, 142.77, 148.34, 149.36, 152.97, 154.27, 163.99, 167.07, 167.80, Laskettu C24H20N4O5 + 5 34 0.05 CH2CI2: C, 64.38; H, 4.52; N, 12.49. Löydetty: C, 64.33; H, 4.58; N, 12.12. (H NMR osoitti, että näyte sisälsi ~5% CH2CI2) .

Esimerkki 14

Tabletteja, josta jokainen sisältää 50mg 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3, 4-10 oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyyliisoindoliini-l,3-dionia valmistetaan seuraavasti:

Ainekset (1000:een tablettiin) 15 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4- metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-me-tyyliisoindoliini-1,3-dionia 50,0 g laktoosia 50,7 g 20 vehnätärkkelystä 7,5 g polyetyleeniglykolia 6000 5,0 g talkkia 5,0 g magnesiumstearaattia 1,8 g demineralisoitua vettä q.s.

25 kiinteät aineet painettiin ensin 0,6 mm silmikkokoon siivilän lävitse. Aktiivinen ainesosa, lak-? toosi, talkki, magnesiumstearaatti ja puolet tärkke-

O

^ lyksestä sekoitettiin. Toinen puolikas tärkkelyksestä cm Ύ 30 liotettiin 40 ml vettä ja tämä liuos lisättiin poly- $2 etyleeniglykolin ja veden (100 ml) kiehuvaan liuok- jn seen. Syntynyt tahna lisättiin pölymäisiin aineisiin

CL

ja syntynyt mikstuura granuloitiin, lisäämällä vettä

CM

tarpeen vaatiessa. Granulaatti kuivattiin yön yli 35 g 35 °C, painettiin 1,2 mm silmikkokoon siivilän lävitse ja puristettiin noin halkaisijaltaan noin 6 mm kokoisiksi, kummaltakin puolelta koveriksi tableteiksi.

5 35

Esimerkki 15

Tabletteja, josta jokainen sisältää lOOmg 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-10 oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyyliisoindoliini-l,3- dionia voidaan valmistaa seuraavasti:

Ainekset (1000:een tablettiin) 15 2-[ 1-(3-syklopentyylioksi-4- metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-me-tyyliisoindoliini-1,3-dionia 100,0 g laktoosia 100,0 g 20 vehnätärkkelystä 47,0 g magnesiumstearaattia 3,0 g

Kiinteät aineet painettiin ensin 0,6 mm silmikkokoon siivilän lävitse. Aktiivinen ainesosa, lak-25 toosi, magnesiumstearaatti ja puolet tärkkelyksestä sekoitettiin. Toinen puolikas tärkkelyksestä liotettiin 40 ml vettä ja tämä liuos lisättiin 100 ml kiehu- 2 vaa vettä. Syntynyt tahna lisättiin pölymäisiin ainei- o ^ siin ja syntynyt mikstuura granuloitiin, lisäämällä c\j Y 30 vettä tarpeen vaatressa. Granulaattr kurvattrrn yön yli 35 °C, painettiin 1,2 mm silmikkokoon siivilän lä-^ vitse ja puristettiin noin halkaisijaltaan noin 6 mm

CL

kokoisiksi, kummaltakin puolelta koveriksi, tableteik-

(M

^ si.

ou 35 o ° Esimerkki 16 36

Pureskeltavia tabletteja, joista jokainen sisältää 75 mg 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyy-li)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyyli-isoindoliini-1,3-dionia voidaan valmistaa seuraavasti: 5

Ainekset (1000:een tablettiin) 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-10 oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-me- tyyliisoindoliini-1,3-dionia 75,0 g mannitolia 230,0 g laktoosia 150,0 g talkkia 21,0 g 15 glysiiniä 12,5 g steariinihappoa 10,0 g sakariinia 1,5 g 5% gelatiiniliuosta q.s.

kiinteät aineet painettiin ensin 0,25 mm sil-20 mikkokoon siivilän lävitse. Mannitoli ja laktoosi se koitettiin keskenään ja granuloitiin gelatiiniliuok-sella, painettiin 2 mm silmikkokoon siivilän lävitse, kuivattiin 50 °C:ssa ja painettiin uudelleen 1,7 mm silmikkokoon siivilän lävitse. 2-[l-(3- 25 syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3, 4-oksadiat- sol-2-yyli)etyyli]-5-metyyliisoindoliini-l,3-dioni, glysiini ja Sakariini sekoitettiin huolella, lisättiin ? mannitoli-laktoosi, granulaatti, steariinihappo, ja

O

^ talkki, ja sekoitettiin perusteellisesti ja puristet-

(M

Y 30 tiin halkaisijaltaan noin 10 mm:ksi, kummaltakin puo- $2 lelta koveriksi, toiselta puoleltaan katkaisuviivan x omaaviksi, tableteiksi.

CL

C\l

Esimerkki 17 cm 35 o ^ Tabletteja, josta jokainen sisältää lOmg 2- [1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3, 4- 37 oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyyliisoindoliini-l, 3-dionia voidaan valmistaa seuraavasti: 5

Ainekset (1000:een tablettiin) 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-10 oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyyliisoindoliini-l, 3-dionia 10,0 g laktoosia 328,5 g maissitärkkelystä 17,5 g polyetyleeniglykolia 6000 5,0 g 15 talkkia 25,0 g magnesiumstearaattia 4,0 g demineralisoitua vettä q.s.

kiinteät aineet painettiin ensin 0,6 mm sil-20 mikkokoon siivilän lävitse. Aktiivinen ainesosa, laktoosi, talkki, magnesiumstearaatti ja puolet tärkkelyksestä sekoitettiin. Toinen puolikas tärkkelyksestä liotettiin 65 ml vettä ja tämä liuos lisättiin poly-etyleeniglykolin ja veden (260 ml) kiehuvaan liuok-25 seen. Syntynyt tahna sekoitettiin pölymäisiin aineisiin ja syntynyt mikstuura granuloitiin, lisäämällä vettä tarpeen vaatiessa, granulaatti kuivattiin yön ? yli 35 °C painettiin 1,2 mm silmikkokoon siivilän lä- ^ vitse ja puristettiin noin halkaisijaltaan noin 10 mm

(M

7 30 kokoisiksi, kummaltakin puolelta koveriksi, toiselta puoleltaan katkaisuviivan omaaviksi, tableteiksi.

X

cc

CL

Esimerkki 18 C\l

Oi g 35 Kuivatäytettyjä gelatiinikapseleita, joista ^ jokainen sisältää lOOmg 2-[ 1-(3-syklopentyylioksi-4- metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5- 38 metyyliisoindoliini-l,3-dionia voidaan valmistaa seuraavasti : 5

Ainekset (1000:een tablettiin) 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-10 oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-me- tyyliisoindoliini-1,3-dionia 100,0 g mikrokiteistä selluloosaa 30,0 g natriumlauryylisulfaattia 2,0 g magnesiumstearaattia 8,0 g 15

Natriumlauryylisulfaatti siivilöitiin 2 — [ 1 — (3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3, 4-oksa-diatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyyliisoindoliini-l,3-dio-niin 0,2 mm silmikkokoon siivilän lävitse, ja nämä 20 kaksi komponenttia sekoitettiin 10 minuutin ajan. mik-rokiteinen selluloosa lisättiin 0,9 mm silmikkokoon siivilän lävitse ja jälleen seosta sekoitettiin 10 minuutin ajan. Lopuksi lisättiin magnesiumstearaatti 0,8 mm silmikkokoon siivilän lävitse ja 3 minuutin sekoi-25 tuksen jälkeen, seos lisättiin 140 mg annoksina koon 0 (pitkänomainen) kuivatäytettäviin gelatiinikapselei- hin. o δ

Esimerkki 19 V 30 $2 Kuivatäytettyjä gelatiinikapseleita, joista jokainen sisältää 100 mg 2-[ 1-(3-syklopentyylioksi-4- 0.

metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-

OJ

£2 metyyliisoindoliini-l,3-dionia voidaan valmistaa seu- c\j 35 raavasti: o o

(M

5 39

Ainekset (1000:een tablettiin) 2- [1- (3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-10 oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-me- tyyliisoindoliini-1,3-dionia 5,0 g mikrokiteistä selluloosaa 30,0 g natriumlauryylisulfaattia 2,0 g magnesiumstearaattia 8,0 g 15

Natriumlauryylisulfaatti siivilöitiin 2-[l-(3-syklo-pentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyyliisoindoliini-l,3-dioniin 0,2 mm silmikkokoon siivilän lävitse, ja nämä 20 kaksi komponenttia sekoitettiin 10 minuutin ajan. mik-rokiteinen selluloosa lisättiin 0,9 mm silmikkokoon siivilän lävitse ja jälleen seosta sekoitettiin 10 minuutin ajan. Lopuksi lisättiin magnesiumstearaatti 0,8 mm silmikkokoon siivilän lävitse ja 3 minuutin sekoi-25 tuksen jälkeen, seos lisättiin 140 mg annoksina koon 0 (pitkänomainen) kuivatäytettäviin gelatiinikapselei- hin. o δ

CM

CM

CO

X

cc

CL

CM

05

OM

O

O

CM

Claims (26)

40

1 COCH3, tai Q_ 8 9 (iii) toinen R ja R on vety ja toinen on - (M ® CONH2, tai g 35 (iv) toinen R8 ja R9 on vety ja toinen on - ^ COCH2NH2 tai -COCH2N (CH3) 2 42

1. Olennaisesti kiraalisesti puhdas (R) - tai olennaisesti kiraalisesti puhdas (S)- 1,3,4- oksadiatsoli-yhdiste, tai (R)- ja (S)-1,3,4-5 oksadiatsoli-yhdisteen seos, joka on valittu ryhmästä R4 joka koostuu 10 (a) kaavan yhdisteestä jossa : *:llä merkitty hiiliatomi muodostaa kiraali-sen keskuksen; Y on C=0, CH2,-S02 tai CH2C=0; 15. on vety tai 1-4 hiiliatomin alkyyli; kukin R1, R2, R3, ja R4, ovat toisistaan riippumatta, vety, halogeeni, trifluorometyyli, asetyyli, 1-8 hiiliatomin alkyyli, 1-4 hiiliatomin alkoksi, nitro, syaani, hydroksi, tert-butyyli, -CH2NR8R9, 20 (CH2)2NR8R9, tai - NR8R9; tai mikä tahansa vierekkäinen pari Ri, R2, R3, R^stä vierekkäisten hiiliatomien ja esitetyn fenyylirenkaan kanssa ovat naftylideeni, ki- noliini, kinoksaliini, bentsimidatsoli, bentsodioksoli o ^ tai 2-hydrobentsimidatsoli; ^ 25 kumpikin R5 and R6, ovat toisistaan riippumat- CM 7 ta, vety, 1-4 hiiliatomin alkyyli, 1-6 hiiliatomin $2 alkoksi, syaani, bentsosykloalkoksi, korkeintaan 18 g hiiliatomin sykloalkoksi, korkeintaan 18 hiiliatomin Q. bisykloalkoksi, korkeintaan 18 hiiliatomin trisykloal- (M 30 koksi, tai korkeintaan 18 hiiliatomin sykloalyylial- oj koksi; cm kumpikin R8 ja R9 toisistaan riippumatta ovat vety, suora 1-8 hiiliatomin alkyyli, haarautunut 1-8 41 hiiliatomin alkyyli, fenyyli, bentsyyli, pyridyyli, pyridyylimetyyli, tai toinen R8 ja R9 on vety ja toinen on -COR10, tai - S02R10, tai R ja R ovat yhdessä tetrametyleeni, pentame-5 tyleeni, -CHNCHCH-, heksametyleeni, tai CH2CH2X12CR2CH2- jossa X1 on -O-, -S-, tai -NH-; R10 on vety, 1-8 hiiliatomin alkyyli, sykloal-kyyli, korkeintaan 6 hiiliatomin sykloalkyylimetyyli, 10 fenyyli, pyridyyli, bentsyyli, imidatsolyylimetyyli, pyridyylimetyyli, NR11R12, CH2NR*R°, tai NR^R12 jossa R* and R°, ovat toisistaan riippumatta, vety, metyyli, etyyli, tai propyyli, ja jossa R11 ja R12 , ovat toisistaan riippumatta, 15 vety, 1-8 hiiliatomin alkyyli, fenyyli, tai bentsyyli; and (b) tai yhdisteen happoadditiosuola, joka sisältää protonoituvan typen.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- 20 oksadiatsoli-yhdiste, jossa Y on C=0

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- oksadiatsoli-yhdiste, jossa Y on CH2.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- oksadiatsoli-yhdiste tai suola, jossa kukin R1, R2, R3, 25 ja R4, ovat toisistaan riippumatta vety, halogeeni, metyyli, etyyli, metoksi, etoksi, nitro, syaani, hyd-roksi, tai -NR8R9, jossa ? (i) kumpikin R8 ja R9 ovat toisistaan 0 ^ riippumatta vety, metyyli tai 1-4 hii- CVJ Y 30 liatomm alkyyli, tai £2 (ii) toinen R8 ja R9 on vety ja toinen on -

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- oksadiatsoli-yhdiste, jossa yksi R1, R2, R3, ja R4, on -NH2 ja muut ovat vetyjä.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- 5 oksadiatsoli-yhdiste, jossa yksi R1, R2, R3, ja R4, on -NHCOCH3, NHSO2R10, tai NHCOR10 ja muut ovat vetyjä.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- oksadiatsoli-yhdiste, jossa yksi R1, R2, R3, ja R4, on metyyli tai etyyli ja muut ovat vetyjä.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- oksadiatsoli-yhdiste, jossa yksi R1, R2, R3, ja R4, on -N(CH3)2 tai hydroksi, ja muut ovat vetyjä.

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- oksadiatsoli-yhdiste, jossa Y on C=0, X on vety, ja R3 15 ja R4 ovat yhdessä bentso.

10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4-oksadiatsoli-yhdiste, jossa Y on C=0, X on vety, ja R3 ja R4 ovat yhdessä metyleenidioksi.

11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4-20 oksadiatsoli-yhdiste, jossa kumpikin R5 and R6, ovat toisistaan riippumatta, metoksi, etoksi, propoksi, isopropoksi, syklopentoksi, sykloheksoksi, tai bisyk-loalkoksi.

12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- 25 oksadiatsoli-yhdiste, jossa R5 on alkoksi ja R6, on, alkoksi, sykloalkoksi tai bisykloalkoksi.

13. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- 2 oksadiatsoli-yhdiste, jossa R5 on metoksi ja R6, on, o metoksi, etoksi, tai syklopentoksi. CNJ Y 30

14. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- $2 oksadiatsoli-yhdiste, jossa R5 on metoksi ja R6, on, g bisykloalkoksi, tai bentsoalkoksi. CL

15. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- (N & oksadiatsoli-yhdiste, jossa yhdiste valitaan olennai- c\i 35 sesti kiraalisesti puhtaasta (R)-isomeeristä, olennai- sesti kiraalisesti puhtaasta (S)-isomeeristä, tai näiden seoksesta, jossa isomeeri on 2-[ 1-(3-etoksi-4-- 43 metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2- yyli)etyyli]isoindoliini-1,3-dioni, 2-[l-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2- yyli)etyyli]bentso[e]isoindoliini-1,3-dioni, 2—[1— (3 — 5 etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2- yyli)etyyli]-4-metyyli-isoindoliini-l,3-dioni, 2- [1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3, 4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyyli-isoindoliini-l,3-dioni, 2- [1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-10 oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-5-metyyli-isoindoliini-l,3-dioni, 2-[1-(3-syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-4- metyyliisoindoliini-l,3-dioni, N-[2-[1- (3- syklopentyylioksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-15 oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-1,3-dioksoisoindolin-4- yyli]asetamidi, N-[2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-1,3- dioksoisoindolin-4-yyli]asetamidi, 5-(tert-butyyli)-2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3, 4-oksadiatsol-2-20 yyli)etyyli]isoindoliini-1,3-dioni, 2-[l-(3,4- dimetoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]isoindoliini-1,3-dioni, 2-[l-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2- yyli)etyyli]isoindolin-l-oni, 2-[1-(3-etoksi-4-- 25 metoksifenyyli)-2-(5-metyyli(1,3,4-oksadiatsol-2- yyli))etyyli]isoindolin-l-oni, tai 2-[1-(3-etoksi-4-metoksifenyyli)-2-(1,3,4-oksadiatsol-2-yyli)etyyli]-3-° pyrroliini[3,4-]kinoliini-l,3-dioni. O

16. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- 19^ 4 Y 30 oksadiatsoli-yhdiste, jossa kaksr R , R , R , ja R , $2 ovat vetyjä ja kaksi muuta eivät ole vetyjä,

17. Patenttivaatimuksen 15 mukainen 1,3,4- oksadiatsoli-yhdiste, jossa kaksi R1, R2, R3, ja R4, (M ovat toisistaan riippumatta 1-8 hiiliatomin kokoisia g 35 alkyyleja tai alkokseja.

^ 18. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- oksadiatsoli-yhdiste, joka yhdiste on olennaisesti ki- 44 raalisesti puhdas (R)-isomeeri, olennaisesti kiraali-sesti puhdas (S)-isomeeri tai näiden seos käytettäväksi ei-toivottujen TNFa-tasojen vähentämiseksi tai ehkäisemiseksi nisäkkäässä.

19. Farmaseuttinen koostumus, joka sisältää patenttivaatimuksen 1 mukaista 1,3,4-oksadiatsoli-yhdistettä, joka yhdiste on olennaisesti kiraalisesti puhdas (R)-isomeeri, olennaisesti kiraalisesti puhdas (S)-isomeeri, tai näiden seos, sopiva annettavaksi yh-10 dessä kantaja-aineen kanssa yksittäis- tai jatkuvana kuurina vähentämään tai estämään TNFOC tasoja nisäkkäässä .

20. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4-oksadiatsoli-yhdiste, joka yhdiste on olennaisesti ki- 15 raalisesti puhdas (R)-isomeeri, olennaisesti kiraali sesti puhdas (S)-isomeeri, tai näiden seos käytettäväksi tyypin 4 fosfodiesteraasin ehkäisemiseksi nisäkkäässä .

21. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, 20 joka yhdiste on olennaisesti kiraalisesti puhdas (R) - isomeeri, olennaisesti kiraalisesti puhdas (S)-isomeeri, tai näiden seos käytettäväksi tulehduksellisen tai autoimmuunisairauden hoitamiseksi nisäkkäässä, joka sairaus valitaan ryhmästä, johon kuuluu, mutta 25 joka ei rajoitu: niveltulehdus, reumaattinen niveltu lehdus, tulehduksellinen suolisairaus, Crohnin sairaus, sammaksen haavauma, riutuminen, multippeli skle-? roosi, siirrännäisen hylkimissairaus, astma, aikuisten O ^ hengitysahdistussyndrooma ja hankittu immuunikatosyn- c\j 7 30 drooma. $2

22. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tai yhdistelmä patenttivaatimuksen 1 mukaisia yhdis- CL teitä, joka yhdiste on olennaisesti kiraalisesti puh- CVJ das (R)-isomeeri, olennaisesti kiraalisesti puhdas g 35 (S)-isomeeri, tai näiden seos käytettäväksi syövän ^ hoitamiseksi nisäkkäässä. 45

23. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, joka yhdiste on olennaisesti kiraalisesti puhdas (R)-isomeeri, olennaisesti kiraalisesti puhdas (S)-isomeeri, tai näiden seos käytettäväksi epätoivotun 5 angiogeneesin hoitamiseksi nisäkkäässä.

24. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, joka on olennaisesti kiraalisesti puhdas (R)-isomeeri, olennaisesti kiraalisesti puhdas (S)-isomeeri tai näiden seos.

25. Farmaseuttinen koostumus, joka sisältää määrätyn määrän patenttivaatimuksen 1 mukaista 1,3,4-oksadiatsoli-yhdistettä, joka yhdiste on olennaisesti kiraalisesti puhdas (R)-isomeeri, olennaisesti kiraalisesti puhdas (S)-isomeeri, tai näiden seos, ja riit-15 tävä annettuna yhdessä kantaja-aineen kanssa, yksittäis- tai jatkuvana kuurina, vähentämään tai estämään epätoivottuja TNFCC:n tai matriisimetalloproteinaasin tasoja nisäkkäässä.

26. Patenttivaatimuksen 1 mukainen 1,3,4- 20 oksadiatsoli-yhdiste, tai suola, jossa Y on C=0 tai CH2; kukin R1, R2, R3, ja R4, ovat toisistaan riip pumatta, vety, halogeeni, trifluorometyyli, asetyyli, 1-8 hiiliatomin alkyyli, 1-4 hiiliatomin alkoksi, nit-25 ro, syaani, hydroksi, tert-butyyli, tai NR8R9; tai mikä tahansa vierekkäinen pari Ri, R2, R3, R4:stä vierekkäisten hiiliatomien ja esitetyn fenyyli-2 renkaan kanssa ovat kinoliini, kinoksaliini, 2-R13- O ^ bentsimidatsoli, bentsodioksoli tai 2- c\i Y 30 hydroksibentsimidatsoli, £2 jossa R13 on 1-10 hiiliatomin alkyyli, -NH2 g tai vety. CL (M O) ou o o (M 46