FI115825B - Menetelmä stabiloidun farmaseuttisen koostumuksen valmistamiseksi ja stabiloiva liuotin - Google Patents

Description

χ 115825

Menetelmä stabiloidun farmaseuttisen koostumuksen valmistamiseksi ja stabiloiva liuotin Tämä keksintö koskee liuotinjärjestelmää, joka so-5 veltuu farmaseuttista ainetta sisältävän stabiloidun in-jektiokonsentraatin valmistukseen. Erityisemmin keksintö koskee käsiteltyä liuotinjärjestelmää, jolla on alentunut karboksylaattianionipitoisuus, ja menetelmää farmaseuttisen koostumuksen stabiloimiseksi.

10 Tavallisesti farmaseuttiset koostumukset vaativat sopivaa liuotin- tai väliainejärjestelmää aktiivisen aineen dispergoimiseksi, jotta koostumusta voitaisiin antaa potilaalle. Liuottimen on tyypillisesti pystyttävä liuottamaan tai dispergoimaan terapeuttisesti tehokkaan määrän 15 aktiivista ainetta tehokkaan injektiokoostumuksen tuottamiseksi. Lisäksi liuotinjärjestelmän on oltava yhteensopivaa aktiivinen aineen kanssa ja oltava potilaalle ei-tok-sista.

Lukuisat farmaseuttiset aineet eivät ole riittävän 20 liukoisia mihinkään liuottimeen, jotta tulokseksi saatu koostumus olisi tehokasta. Liuottimen aktiivisen aineen liuottamisen rajoitusten haittojen voittamiseksi käytetään toisinaan kahden tai useamman liuottimen seoksia. Nämä li-·;· säliuotinjär jestelmät soveltuvat monien farmaseuttisten -· 25 aineiden liuottamiseen, joita ei muuten voida liuottaa tai dispergoida väliainejärjestelmään.

Yksi esimerkki lisäliuotinj är j estelmästä sisältää » » « poolisen liuottimen ja ionittoman liuottimen seosta, kuten . , polyetyleeniglykolin ja Cremophor EL:n seosta. Cremophor ;1_· 30 EL on risiiniöljyn ja etyleenioksidin kondensaatiotuotet- ta, jota myy yhtiö BASF. Eräs toinen sopiva lisäliuotin- * järjestelmä monille farmaseuttisille aineille on etanolin ja Cremophor EL:n 50:50-seos. Vaikka nämä lisäliuotinjär-jestelmät voivat olla tehokkaita useiden yhdisteiden t ! 1 ·’ 35 liuottamisessa, niillä on omat haittansa. Esimerkiksi 'it,·»

> I

115825 2 etanolin ja Cremophor'in lisäliuotinjärjestelmien tiedetään antavan infuusioliuoksilla laimennettaessa tulokseksi erillisten partikkelien muodostumista. Lisäksi joissain koostumuksissa muodostuu alkuperältään tuntemattomia kui-5 tuisia saostumia pitempiaikaisen varastoinnin aikana. Yleisesti uskotaan, että saostumat ovat joko liuottimessa tai liuotetussa aineessa olevien komponenttien hajoamissi-vutuotteita.

Julkaisussa W0 91/02 531, julkaistu 7. maaliskuuta 10 1991, Cremophor'in kuvataan kumoavan kasvainsolun monilää- keresistenssifenotyypin emäsolulinjan lääkeherkkyyttä muuttamatta. Cremophor'in kuvataan myös lisäävän hemato-poieettisua uudelleenmuodostuskapasiteettia ja/tai ylläpitävän hematopoieettista uudelleenmuodostuskapasiteettia 15 luuytimen häiriön jälkeen potilaan suojaamiseksi syövän säteilytys- ja/tai kemoterapiahoitojen aikana.

Eräs toinen esimerkki farmaseuttisesta koostumuksesta, joka sisältää lisäliuotinjärjestelmää, on Taxol, joka sisältää paklitakselia etanolin ja Cremophor EL:n 20 50:50-seoksessa. Marjakuusen (Pacific yew) kuoresta eris tettyä paklitakselia on käytetty syöpäpotilaiden hoitoon.

, . Vaikka etanolin ja Cremophor EL:n lisäliuotinjärjestelmä i t * on tehokas paklitakselin riittävien määrien liuottamisessa, tulokseksi saadun koostumuksen varastoinninkestävyys 25 on osoittautunut rajalliseksi. Pitempiaikaisen varastoin-nin aikana koostumuksen tehokkuus tai farmaseuttinen ak-···· tiivisuus voi vähentyä jopa 60 %.

*.· · On havaittu, että vaikka kaupallista laatua oleva

Cremophor EL etanolin kanssa lisäliuotinjärjestelmänä on Jtj : 30 tehokas farmaseuttisten aineiden liuottamisessa, se tuot- taa injektiokoostumuksia, jotka ovat pitemmillä aikavä-. leiliä epästabiileja. Erityisesti Taxolin farmaseuttisilla koostumuksilla lisäliuotinjärjestelmässä, jossa on tila-;‘ vuuden mukaan 50:50-suhteessa vedetöntä etyylialkoholia ja i · ; 35 kaupallista laatua olevaa Cremophor EL:ää, on tehokkuuden 3 1 1 5825 menetys yli 60 % sen jälkeen kun on varastoitu 12 viikon ajan 50 °C:ssa. Tehokkuuden menetyksen katsotaan johtuvan paklitakselin hajoamisesta varastoinnin aikana.

Viimeaikaiset pyrkimykset joidenkin farmaseuttisten 5 koostumusten varastoinninkestävän koostumuksen kehittämiseksi lisäliuotinjärjestelmissä eivät ole olleet täysin menestyksekkäitä. Siten alalla on jatkuvaa tarvetta lisä-liuotin järjestelmää kohtaan, jota voidaan käyttää stabiloitujen koostumusten valmistukseen, ja erityisesti stabi-10 loitujen injektiokoostumusten, jotka sisältävät farmaseuttista ainetta.

Keksintö koskee liuotinjärjestelmää, ja erityisesti lisäliuotinjärjestelmää, joka soveltuu stabiloitujen injektiokoostumusten valmistukseen, jotka sisältävät ainakin 15 yhtä farmaseuttista ainetta. Niinpä keksinnön ensisijaisena kohteena on aikaansaada menetelmä liuottimen valmistamiseksi, ja menetelmä stabiloitujen farmaseuttisten koostumusten valmistamiseksi, jotka sisältävät uutta liuotinta.

20 Keksinnön mukaisesta liuotinjärjestelmästä tuote tulla stabiloidulla farmaseuttisella koostumuksella on v. osoitettu olevan aikaisempia koostumuksia parempi varas- toinninkestävyys. Keksinnön mukainen lisäliuotinjärjestel-mä on erityisen sopivaa käytettäväksi farmaseuttisten yh-25 disteiden kanssa, joiden hajoamista karboksylaattianionit ’"l katalysoivat. Erityisen kiinnostavia ovat antineoplastiset *;;; aineet kuten paklitakseli, teniposidi, kamptotesiini ja ’·’ ' näiden johdannaiset.

Keksinnön mukainen liuotinjärjestelmä sisältää i.i · 30 ionitonta liuotusainetta. Tyypillisesti liuotinj ärjestelmä y,: sisältää liuotinta ja liuotusainetta. Keksinnön edullisis- ; ,·, sa muodoissa liuotusaineet ovat polyoksialkyleenimodifioi- ' tuja lipidejä ja alkyleenioksideja kuten polyetyleenigly- '!’ köli ja sen johdannaisia. Liuotusaine voi olla alkyleeni- 35 oksidin ja lipidin tai rasvahapon kondensaatiotuotetta.

4 11 E 825

Edullinen liuotinjärjestelmä sisältää polyoksietyloitua risiiniöljyä, kuten sellainen, jota myydään kauppanimellä Cremophor EL. Cremophor EL:ää käsitellään karboksylaatti-anionipitoisuuden alentamiseksi riittävän alhaiseen kon-5 sentraatioon minimoimaan farmaseuttisen aineen hajoamisen, jota karboksylaattianionit katalysoivat. Cremophor EL: n karboksylaattianionipitoisuus alennetaan joko saattamalla Cremophor EL:n kontaktiin alumiinioksidikerroksen kanssa karboksylaattianionien samoin kuin muiden epäpuhtauksien 10 erottamiseksi, tai lisäämällä happoa ja erityisesti mine-raalihappoa kuten HC1 tai HN03. Muissa suoritusmuodoissa liuotin käsitellään reaktantilla karboksylaattianionin vähentämiseksi tai karboksylaattianionin muuttamiseksi ei-reaktiiviseen muotoon.

15 Keksinnön edut saavutetaan myös tuottamalla stabi loitua farmaseuttista koostumusta, joka sisältää ainakin yhtä antineoplastista yhdistettä ja liuotinta, joka voi dispergoida antineoplastisen yhdisteen, joka liuotin sisältää liuottavan määrän polyoksietyloitua risiiniöljyä, 20 jonka karboksylaattianionipitoisuus on riittävän alhainen antineoplastisen yhdisteen karboksylaattianionikatalysoi-dun hajoamisen oleellisesti estämiseksi.

Keksinnön muut edut saavutetaan aikaansaamalla me-netelmän farmaseuttisen koostumuksen stabiloimiseksi, joka 25 sisältää farmaseuttista ainetta, joka on paklitakselia tai "·' teniposidia, ja liuotinta, joka sisältää etanolia ja .liuottavan määrän ainakin yhtä liuotusainetta, jossa mene-V * telmässä liuotinta käsitellään karboksylaattipitoisuuden alentamiseksi riittävän alhaiselle tasolle farmaseuttisen : : j 30 aineen karboksylaattianionikatalysoidun hajoamisen oleel- lisesti estämiseksi.

. \ Tällä keksinnöllä voitetaan aikaisempien injektio- koostumus- ja liuotinjärjestelmien haitat ja rajoitukset ;·’ samalla kun aikaansaadaan mukava ja tehokas menetelmä li- ' : 35 uotinjärjestelmän tuottamiseksi ja menetelmä injektioon . 115825

O

soveltuvien farmaseuttisten koostumusten stabiloimiseksi. Keksintö koskee ensisijassa liuotinjärjestelmää, joka soveltuu stabiloidun farmaseuttisen koostumuksen tuottamiseen, ja menetelmää farmaseuttisen koostumuksen tuottami-5 seksija stabiloimiseksi.

Yllättävällä tavalla on keksitty, että paklitakseli reagoi varastoinnin aikana etanolin kanssa väliaineessa, joka on etanolirCremophor EL 50:50-seosta (tilavuus/tila-vuus), ja että paklitakselin hajoamista katalysoivat väli-10 aineessa olevat karboksylaattianionit. Liuottimen karbok-sylaattikonsentraation alentamisen on keksitty tuottavan farmaseuttisessa koostumuksessa stabiloivan vaikutuksen. Alhaisempi karboksylaattikonsentraatio parantaa koostumuksen varastoinninkestävyyttä alentamalla farmaseuttisen 15 aineen hajoamisnopeutta ja vähentämällä hajoamissivutuot-teiden muodostumista.

Liuotinjärjestelmällä on riittävän alhainen epäpuh-tauspitoisuus stabiloivan vaikutuksen aikaansaamiseksi farmaseuttisissa koostumuksissa. Menetelmällä tuotettua, 20 tulokseksi saatua farmaseuttista koostumusta voidaan käyttää injektiokoostumusten valmistukseen laimentamalla farmaseuttisesti hyväksyttävällä väliaineella tai laimennus-’ aineella. Koostumus on riittävän stabiilia aktiivisen yh- disteen hajoamisen minimoimiseksi ja tehokkuuden menetyk-25 sen vähentämiseksi varastoinnin aikana. Laimennetussa ·· ; koostumuksessa ei muodostu saostumia, niin että farmaseut tisesti aktiivista ainetta voidaan varastoida helppokäyt-· töisessä muodossa.

Edullisissa suoritusmuodoissa farmaseuttinen koos-: ; : 30 tumus sisältää ainakin yhtä farmaseuttista yhdistettä, jolla on taipumus hajota varastoinnin aikana, jolloin kar-, boksylaattianionit katalysoivat hajoamisreaktiota. Edulli- ' silla farmaseuttisilla yhdisteillä on antineoplastista aktiivisuutta, kuten esimerkiksi paklitakselia, jota myy- 6 115825 dään kauppanimellä Taxol. Voidaan käyttää myös erilaisia Taxolin analogeja ja johdannaisia.

Taxol valmistetaan injektiokonsentraatiksi, joka sisältää 6 mg/ml paklitakselia etanolin ja polyoksietyloi-5 dun risiiniöljyn 50:50-seoksessa, tilavuuden mukaan. Po-lyoksietyloitua risiiniöljyä myydään kauppanimellä Cremop-hor EL. Paklitakseli on aktiivista komponenttia, joka on eristetty marjakuusien (Pacific yew) kuoresta. Hiljattain on keksitty, että pieniä paklitakselimääriä tuottaa myös 10 sieni, jota esiintyy marjakuusten kuoressa. Paklitakselil-la tiedetään olevan antineoplastista aktiivisuutta.

Eräs toinen keksinnön mukaiseen käyttöön sopiva yhdiste, jolla on antineoplastista aktiivisuutta, on teni-posidi. Teniposidi on podofyllotoksiinin puolisynteettinen 15 johdannainen, jonka kemiallinen nimi on 4'-demetyyliepio-dofyllotoksiini-9-(4,6-0-2-tenylideeni-6-D-glukopyranosi-di). Teniposidi ja sen analogit ovat saatavissa kaupallisista lähteistä, ja ne voidaan valmistaa menetelmällä, joka on kuvattu US-patenttijulkaisussa 3 524 844.

20 Eräs toinen sopiva farmaseuttinen aine on kamptote- siini, jonka kemiallinen nimi on 4-etyyli-hydroksi-lH-py-rano-[3',4':6,7]indolitsino[1,2-b]kinoliini-3,14(4H,12H)-dioni. Kamptotesiinia eristetään "Chinese tree"-puun run-kopuuaineesta, ja sillä on osoitettu olevan leukemianvas-*· 25 täistä ja kasvaimenvastaista aktiivisuutta.

“·! Erityisen kiinnostavat farmaseuttiset aineet ovat . sellaisia, joilla esiintyy varastoinnin aikana hajoamista ja aktiivisuuden menetystä. Keksinnön mukaista liuotinjär-jestelmää ja menetelmää käytetään erityisen edullisesti : :; : 30 farmaseuttisilla aineilla, jotka reagoivat liuottimen : kanssa tai ovat sen kanssa epästabiileja. Kiinnostavat ,farmaseuttiset aineet ovat erityisesti niitä, joissa on ’ ; esterisidos, jonka alkoholi voi katkaista karboksylaatti- anionien läsnä ollessa. Useat tunnetut farmaseuttiset ai-:’·': 35 neet muodostavat laimennettuina saostumia pitempien aiko- * 7 115825 jen kuluttua. Vaikka antineoplastiset aineet ovat erityisen kiinnostavia, ovat sopivia myös muut farmaseuttiset aineet, joissa tapahtuu hajoamista varastoinnin aikana. Vaihtoehtoisesti farmaseuttinen aine voi olla esimerkiksi 5 antifungaalista tai antibakteriaalista ainetta.

Paklitakselia valmistetaan tyypillisesti injektioon sovultuvaan väliaineeseen konsentraattina tai liuoksena, jonka konsentraatio on 6 mg/ml. Väliaine on tavallisesti etanolin ja Cremophor EL:n seosta suhteessa 50:50 tilavuu-10 den mukaan. Paklitakselin aktiivisuuden tiedetään alenevan varastoinnin aikana. Paklitakseli on kaavan I mukainen yhdiste, jonka HPLC osoittaa hajoavan kaavan II mukaiseksi bakkatiini III:ksi ja kaavan III mukaiseksi sivuketjun etyyliesteriksi.

CKA

\_/ VA/iV" 20 λ (I’ OH ! /\5 : °νχ 25 0 & 5 li chT% C-H? Λ-ΑνΗ !:i * ” ,n> CX> ϊ 35 0 /\^ * g 115825 \_// (III) ς / \ b OH 0CH2CH3

Edullisissa suoritusmuodoissa liuotin on ainakin yhden liuottimen ja liuotusaineen lisäliuotinseosta. Edullisia liuottimia ovat alkoholit kuten vedetön etanoli ja 10 farmaseuttisesti hyväksyttävät polyolit kuten polyetylee-niglykoli. Edullisissa suoritusmuodoissa liuotusaine on polyoksietyloitua risiiniöljyä, kuten se, jota yhtiö BASF myy kauppanimellä Cremophor EL. Edullisissa suoritusmuodoissa lisäliuotinjärjestelmät sisältävät noin 40 - 60 ti-15 lavuus-% polyoksietyloitua risiiniöljyä, jolloin loppuosa 100 %:iin on alkoholia tai polyolia. Keksinnön eräässä erityisen edullisessa suoritusmuodossa lisäliuotinjärjes-telmä sisältää vedetöntä etanolia ja Cremophor EL:ää suhteessa noin 50:50 tilavuuden mukaan.

20 Keksinnön mukainen lisäliuotinjärjestelmä sisältää edullisesti ionitonta surfaktanttia liuotusaineena, jol-loin Cremophor EL on edullisinta. Cremophor EL on konden-saatiotuotetta risiiniöljystä ja noin 20 - 40 moolista ja edullisesti 30 - 35 moolista etyleenioksidia/mol risiini-25 öljyä. Cremophor EL voidaan valmistaa menetelmällä, joka kuvataan US-patenttijulkaisussa 3 070 499. Cremophor EL ’ tunnetaan myös yleisnimillään polyoksietyleeniglyserolit- '·' ririsinoleaatti ja glyserolipolyetyleeniglykolirisino- leaatti. Voidaan käyttää myös Cremophor EL:n biologisia ja I 30 kemiallisia ekvivalentteja tai johdannaisia.

^ : Vaihtoehtoisissa suoritusmuodoissa ionitonta sur- ; faktanttia tai liuotusainetta voivat olla mm. muita ety- leenioksidimodifioituja lipidejä, hydroksyloituja taliöl-jyjä, polysorbaatti 80:aa, joka tunnetaan myös nimellä : ' : 35 Tween 80, polyetoksyloitua 12-hydroksisteariinihappoa, 9 115825 polyoksietyleenisorbitaanirasvahappoestereitä, polyety- leeniglykoliestereitä, polyetyleenirasvahappoestereitä, etyleenioksidin ja propyleenioksidin blokkikopolymeerejä, etyloituja rasva-alkoholieettereitä, ja oktyylifenoksipo-5 lyetoksietanoliyhdisteitä. Näitä ionittomia liuotusaineita voidaan tuottaa tekniikan tasolla hyvin tunnetuilla menetelmillä tai kaupallisilta toimittajilta. Liuotusaine voi olla muita alkyleenioksidien kondensaatiotuotteita, vaikka alkyleenioksidimodifioidut lipidit ovat yleensä edullisia. 10 Esimerkkejä sopivista liuotusaineista ovat PEG 400 ja PEG 40 risiiniöljy.

Liuottimen karboksylaattianionipitoisuutta voidaan alentaa useilla menetelmillä. Keksinnön eräässä ensimmäisessä suoritusmuodossa Cremophor EL tai muu liuotin aje-15 taan tavallisen alumiinioksidikromatografiakolonnin läpi.

Alumiinioksidi adsorboi karboksylaattianionit samoin kuin muita epäpuhtauksia liuottimen karboksylaattianionipitoi-suuden alentamiseksi.

Keksinnön eräässä vaihtoehtoisessa suoritusmuodossa 20 liuotin käsitellään lisäämällä stabiloivan määrän happoa karboksylaattianionipitoisuuden alentamiseksi riittävän alhaiselle tasolle farmaseuttisen yhdisteen katalysoidun i, hajoamisen estämiseksi oleellisesti. Happo voidaan lisätä liuottimeen ennen farmaseuttisen yhdisteen kanssa sekoit-25 tamista tai sen jälkeen. Yleensä käytetään mineraalihappo-ja kuten, esimerkiksi HC1, HBr, HF, HI, H2S04 ja HN03. Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää orgaanisia happoja kuten ’ etikkahappoa Orgaaniset hapot ovat yleensä vähemmän edul lisia, koska ne voivat aikaansaada karboksylaattianionien J j ; 30 lähteen happokäsittelyn stabiloivan vaikutuksen estäen.

Edullisesti happoa lisätään määrä, joka aikaansaa 5,6 x ; 10~6 - 8,4 x 10-6 g H+/ml liuotinta. Koostumuksen tehokas ’ stabilointi saavutetaan lisäämällä happoa aikaansaamaan i * ; noin 7,0 x 10~6 g H+/ml. Happoa lisätään karboksylaattianio- '! 35 nipitoisuuden alentamiseksi tasolle enintään noin 0,6 x 1 1 5825 10 10'6 grammaekvivalenttia karboksylaattianioneja/ml liuotinta .

Taxol-liuoksissa, jotka sisältävät 0,6 x 10'6 grammaekvivalenttia karboksylaattianioneja, on ollut 94 % jäl-5 jellä olevaa paklitakselia 28 päivää 50 °C:ssa varastoimisen jälkeen. 1,0 grammaekvivalenttia anioneja neutraloituu 1,0 grammalla H*:aa/ekvivalentti.

Liuottimeen lisättävän hapon määrä riippuu lisäli-uotinjärjestelmässä olevan ionittoman surfaktantin määräs-10 tä ja surfaktantin tyypistä. Ionittomat surfaktantit, jotka valmistukseen käytetystä menetelmästä johtuen sisältävät luonnostaan suurempia karboksylaattianioniepäpuhtauk-sien määriä, vaativat tyypillisesti suurempia happomääriä karboksylaattianionipitoisuuden alentamiseksi.

15 Muissa suoritusmuodoissa liuotin voidaan käsitellä muilla reagensseilla, jotka voivat alentaa liuoksen kar-boksylaattianionikonsentraatiota. Voidaan esimerkiksi muodostaa liukenemattomia karboksylaattien suoloja tai kar-boksylaattien johdannaisia. Yleensä karboksylaattianionit 20 poistetaan edullisesti käyttämällä reagenssia, joka ei muodosta koostumukseen saostumia. Vahvan mineraalihapon lisääminen on yleensä edullista, koska mineraalihapot ja tulokseksi saadut karboksyylihapot ovat ei-toksisia ja ! helposti liuottimeen liukoisia. Kun karboksylaattianionit 25 saatetaan reagoimaan tavalla, jolla muodostuu liukenema- ··· tonta sakkaa, se olisi erotettava koostumuksesta ennen koostumuksen antamista potilaalle.

· Seuraavat ei-rajoittavat esimerkit on tarkoitettu keksinnön edullisten suoritusmuotojen kuvaamiseksi. Ämmät-j : : 30 timies ymmärtää helposti, että stabiloivan vaikutuksen : : saavuttamiseksi voidaan toteuttaa keksinnön lukuisia suo- . ritusmuotoja.

Esimerkki 1 ’ Tässä esimerkissä analysoidaan Taxolin ja paklitak- ' : 35 selin ominaisuuksia etanolin ja Cremophor EL:n liuoksessa.

115825 11

Saatiin Taxolia, joka sisälsi 6 mg/ml paklitakselia Cremophor EL: n ja vedettömän etanolin 50:50-seoksessa, tilavuuden mukaan. Ensimmäinen ryhmä näytteistä 1-4 valmistettiin käyttämällä käsitellyn Cremophor EL:n eri eriä, 5 ja toinen ryhmä näytteistä 5-7 valmistettiin käyttämällä käsittelemättömän, kaupallista laatua olevan Cremophor EL:n eri eriä. Käsitelty Cremophor EL valmistettiin ajamalla 100 kg Cremophor EL:ää tavallisen kromatografiako-lonnin läpi, joka sisälsi 19,5 kg alumiinioksidia, jota 10 myydään kauppanimellä CAMAG. Jotta ymmärrettäisiin Taxolin epästabiilisuuden syy käsittelemättömässä Cremophor EL:ssä, kukin näyte analysoitiin tarkastamalla Karl-Fi-scher-kosteuden, kaliumionipitoisuuden, happoluvun ja pe-roksidiluvun. Näiden havaintojen tulokset esitetään tau-15 lukossa 1.

Taulukko 1

Cremophor Näyte KF Ka- Happo- Perok- EL-tyyppi nro Kosteus-% lium- luku sidi- taso luku (ppm) Käsitelty Näyte 10,2 <1 0,2 8 j. Näyte 2 0,3 2 0,3 8 ' Näyte 3 0,4 2 0,2 9 I Näyte 4 0,8 4 0,3 3 20 Käsitte- Näyte 5 2,7 463 3,4 18 , lemätön Näyte 6 2,6 482 1,6 n.d.

Näyte 7 2,6 n.d. 1,4 15 : n.d. = ei määritetty

Taulukossa 1 osoitetaan kosteuspitoisuuden, kalium-pitoisuuden, happoluvun ja peroksidiluvun johdonmukaisuus j 25 näytteiden 1-4 valmistukseen käytetyn Cremophor EL:n : : erien joukossa. Tiedot osoittavat edelleen kosteuden, ka- liumpitoisuuden, happolukujen ja peroksidilukujen korkeam- 115825 12 pien tasojen johdonmukaisuuden käsittelemättömällä Cremop-hor EL:llä.

Esimerkki 2 Tämä esimerkki suoritettiin Taxolin ja paklitakse-5 Iin epästabiilisuuden osoittamiseksi Cremophor EL:ää sisältävässä lisäliuotinjärjestelmässä, ja hajoamistuotteiden luonteen määrittämiseksi. Erityisesti tämä esimerkki suoritettiin sen määrittämiseksi, oliko esimerkissä 1 määritellyillä käsittelemättömän Cremophor EL:n korkeilla 10 kosteus-, kalium-, happoluku- ja peroksidilukutasoilla tekemistä Taxolin hajoamisnopeuden ja tehokkuudenmenetyk-sen kanssa.

Näytteet 8-21 valmistettiin liuottamalla 6 mg/ml paklitakselia käsitellyn Cremophor EL:n ja vedettömän eta-15 nolin 50:50-seokseen tilavuus/tilavuus. Näytteiden 8-21 Cremophor EL käsiteltiin edellä esimerkissä 1 kuvatulla tavalla. Näyte 22 valmistettiin kontrollinäytteeksi käsittelemättömästä Cremophor EL:stä 50:50-seokseen tilavuus/-tilavuus, jossa oli paklitakselia oli määrä 6 mg/ml. Kukin 20 näytteistä 8-20 sekoitettiin taulukoissa 2 ja 3 lueteltujen komponenttien kanssa. 3-ml erät testinäytteitä li-,V. sättiin 6-cm3 piilasipulloihin tyyppi I. Pullot suljettiin > r »

West 4455/45 teflonpintaisilla korkeilla, tiivistettiin, "! ja varastoitiin 4 viikon ajan 50 °C:ssa, ja sitten Taxol- 25 konsentraatio analysoitiin HPLC:llä. HPLC:n kontrollipara-metrit ovat seuraavat:

Kolonni Jones Cyano RP 5μ, 25 cm x 4,6 v · mm sisähalkaisija

Detektoriaallonpituus 227 nm

30 Liikkuva faasi 35 % asetonitriiliä: 65 % 20 mM

. ; asetaattipuskuria (pH 4)

Virtausnopeus 1,5 ml/min • Laimennusaine Liikkuva faasi ' *' Näytekonsentraatio 0,05 mg/ml • ; 35 Injektiotilavuus 20 μΐ j Retentioaika Taxol “10,5 min 115825 13

Kunkin näytteen pH-arvo merkittiin muistiin vedellä 1:10 laimentamisen jälkeen. Peroksidiluku (EP-menetelmä), happoluku (USP-menetelmä), kosteuspitoisuus ja kaliumtasot määritettiin taulukoissa 2 ja 3 esitetyllä tavalla.

5 Taulukko 2 I Näyte Lisätty % KF Alku- 28 päivää nro kompo- Kos- pH 50 °C:ssa nentti teus varastoinnin j älkeen_

% Taxo- pH* lia I

jäljel- I

_____lä__ Näyte 8b 4 % H202- 5,5 4,6 94,9 3,6 __liuosta____

10 Näyte 9C 10 % H202- 9,6 4,6 96,8 3,5 I

__liuosta_____I

Näyte 4 % vettä 5,8 5,0 94,5 4,2 |

10d______I

Näyte Etikka- 2,6 3,8 94,1 4,1 |

11* happo I

(1,5 Π

__mg/ml)_____I

15 Näyte Ei mitään 2,6 4,4 95,5 4,5 I

: : : 12f (kontrol- | ‘ I li) Il :* *1:10 injektiovedellä laimentamisen jälkeen.

bPeroksidiluku = 232.

20 cPeroksidiluku = 652. dPeroksidiluku = 14.

*Happoluku = 1,2.

: : fHappoluku = 0,5, Peroksidiluku = 4.

i4 1 1 5825

Taulukko 3

aSBSSSSS8BBBBBBBS^SSSS=S^BBSSSSa^BBBBBSBBS=SSB^SSBaSS=SSS^BSaSB

Näyte Lisätty K+-taso Alku- 28 päivää nro kompo- pH 50 °C:ssa nentti varastoinnin jälken_ % Taxo- pHa lia jäl- _____jellä__ 5 Näyte 13 CH3COOK 530 5,6 19,3 5,1 0,126 % __w/v_____ Näyte 14 KC1 551 6,0 98,8 4,7 0,10 % __w/v_____ Näyte 15 NaCl 4 6,3 96,8 4,9 0,125 % __w/v_____ Näyte 16 CH3COONH4 4 5,8 63,7 4,7 0,10 % __w/v_____ Näyte 17 CH3C00Na 5 6,1 5,8 5,5 0,104 % __w/v_____ 10 Näyte 18 CH3CH2COOK 468 5,4 15,2 5,1 0,144 % __w/v_____ Näyte 19 "linolel- 5 6,4 99,5 5,4 aidic"- : · happo (LA) __0,2 % w/v_____ Näyte 20 Edellisen 150 6,3 52,8 6,2 • - K-suola 0,228 % __w/v_____ : f Näyte 21 Ei mitään <2 4,4 95,5 4,5 (kontrol- _|_li)_____ 115825 15 Näyte Lisätty K+-taso Alku- 28 päivää nro kompo- pH 50 °C:ssa nentti varastoinnin jälken_ % Taxo- pHa lia jäl- _____jellä__ Näyte 22 Valmis- ‘240 4,6 86,5 4,8 tettu käyttäen ei-käsi-teltyä Cremophor EL: ää _==^== ====1B= al:10 injektiovedellä laimentamisen jälkeen.

Kuten taulukossa 2 osoitetaan, ei vetyperoksidin, 5 veden tai etikkahapon lisääminen vaikuta Taxolin stabii-lisuuteen vedettömän etanolin ja Cremophor EL:n 50:50-seoksen liuoksena, osoittaen siten, että Taxolin epästabiilisuus ei liity Cremophor EL:n peroksidilukuun, kosteuspitoisuuteen tai happolukuun. Jokaisella näytteistä 10 8-11 oli vastaava Taxolin tehokkuuden menetys lisätystä reagenssista riippumatta. Jokaisessa näytteistä 8-11 jäljellä olevan Taxolin %-osuus, joka merkitsi näytteissä * t .'<* jäljellä olevan paklitakselin määrää, oli alueella 94,1 - 96,8 % verrattuna kontrollinäytteen 12 lukuun 95,5 %.

15 Taulukon 3 näyte 13, joka sisälsi kaliumasetaattia, osoittautuu vähemmän stabiiliksi kuin kontrollinäyte 21, ’· joka ei sisältänyt lisättyä komponenttia. Näyte 14, joka j . sisälsi kaliumkloridia, osoittautuu kontrollinäytteen 21 kanssa verrattavaksi. Nämä tiedot viittaavat siihen, että 20 kaliumionien läsnäolo ei vaikuta Taxoliin, mutta sen sijaan karboksyylihappojen anioninen muoto vaikuttaa. Näyte 13, joika sisältää kaliumasetaattia, näyte 16, joka sisältää ammoniumasetaattia, näyte 17, joka sisältää natrium-: ; asetaattia, näyte 18, joka sisältää kaliumpropionaattia, 25 ja näyte 20, joka sisältää kaliumlinolelaidaattia, ovat vähemmän stabiileja kuin kontrollinäyte 22. Etikkahappoa 1 1 5825 16 sisältävän näytteen 11 ja "linolelaidic"-happoa sisältävän näytteen 19 stabiilisuus on verrattavissa kontrollinäyt-teen 22 stabiilisuuteen osoittaen, että karboksyylihapot ionisoitumattomassa muodossa olevat karboksyylihapot eivät 5 vaikuta Taxolin stabiilisuuteen. Käsittelemätöntä Cremop-hor EL:ää sisältävä näyte 22 osoittautuu myös olevan vähemmän stabiilia kuin käsiteltyä Cremophor EL:ää sisältävä kontrollinäyte 21. Jokaisen näytteen HPLC osoitti, että hajoamistuotteet ovat bakkatiini III:a ja taxolin sivuket-10 jun etyyliesteriä.

Esimerkki 3 Tässä esimerkissä osoitetaan käsittelemätöntä Cremophor EL:ää sisältäviin Taxol-näytteisiin lisättyjen happojen stabiloiva vaikutus. Tämän esimerkin näyttteet val-15 mistettiin Taxolista, joka sisälsi 6 mg/ml paklitakselia vedettömän etanolin ja käsittelemättömän, kaupallista laatua olevan Cremophor EL:n 50:50-seokseen tilavuus/tila-vuus. Kuten taulukossa 4 osoitetaan, näytteet 23 - 28 sekoitettiin HCl:n kanssa, näyte 29 sekoitettiin etikkahapon 20 kanssa, ja näyte 30 sekoitettiin typpihapon kanssa. Näyte 31 oli kontrollinäyte, joka ei sisältänyt lisättyä happoa.

,V, Näyte 32, joka sisälsi etikkahappoa, ja kontrollinäyte 33, f i * joka ei sisältänyt lisättyä happoa, valmistettiin myös käsittelemättömästä Cremophor EL:stä. Näytteet erotettiin t I · “ · 25 3-ml eriksi ja lisättiin 5-cm3 piilasipulloihin tyyppi I ja r i · *· : suljettiin Daikyo nro 713 fluoresiinipäällysteisillä kor keilla. Pulloja varastoitiin 56 päivää 50 °C:ssa, ja pak- '·,· · litakselin (Taxol) konsentraatio analysoitiin HPLC:llä.

HPLC-parametrit olivat seuraavat: ; : 30 Kolonni Jones Cyano RP 5μ, 25 cm x ; 4,6 mm sisähalkaisija

Detektorin aallonpituus 227 nm

• Liikkuva faasi 35 % asetonitriili:65 % 20 mM

asetaattipuskuri (pH 4) ί 35 Virtausnopeus 1,5 ml/min t i7 1 1 5825

Laimennusaine Liikkuva faasi Mäytekonsentraatio “0,05 mg/ml

Injektiotilavuus 20 μΐ

Retentioaika paklitakseli ~10,5 min 5 Taulukon 4 tiedot osoittavat, että hapon stabiloiva vaikutus kasvoi happomäärien kasvaessa. Nämä tulokset ovat johdonmukaiset lähtökohdan kanssa, että Taxolin hajoaminen johtuu karboksylaattianionien eikä hapon läsnäolosta. Edelleen tiedot osoittavat, että mineraalihapot kuten HC1 10 ja HN03 ovat parempia stabilointiaineita, yli 97 %:n Taxolista ollessa jäljellä 56 päivän kuluttua kun happoa lisätään tasoilla aikaansaamaan 5,6 x 10'6 - 8,4 x 10"6 g H+/ml. Mineraalihapoilla oli parempi stabiloiva vaikutus kuin etikkahapolla myös kun etikkahappoa lisättiin kor-15 keampi taso 70 x 10‘6 g H+/ml. Nämä tulokset johtuvat mine-raalihappojen happovahvuudesta verrattuna orgaanisiin happoihin karboksylaattianionien neutraloimisessa. Lisäksi etikkahappo karboksylaattianionien lähteenä voi myötävaikuttaa siihen, että jonkin verran paklitakselia hajoaa. 20 Näytteissä 26 ja 30 jäljellä olevan paklitakselin määrä yli 100 % johtuu mittausten analyyttisista vaihteluista.

' < · • r 1 115825 18

Taulukko 4

Taxol-in- Lisätty hap- Alku- 56 päivää jektio po (Lisätty pH 50 °C:ssa varas- 5 Näyte nro g H+/ml) toinnin jälkeen % pakli- pHc takselia ____jäljellä__ Näyte 23“ HC1 (3,5 x 5,1 62,8 4,5 __10~6)____ Näyte 24® HC1 (5,6 x 3,9 98,1 3,8 __1Q-6)____ Näyte 25a HC1 (6,3 x 3,8 97,9 3,8 10"6) — Näyte 26a HC1 (7,0 x 3,8 100,9 3,6 __10~6)____ 10 Näyte 27a HC1 (7,7 x 3,6 99,3 3,6 __10'6)____ Näyte 28a HC1 (8,4 x 3,6 99,1 3,6 __10'6)____ Näyte 29“ CH3COOH (7,0 4,4 69,5 4,5 __x ΙΟ'6)____ Näyte 30“ HN03 (7,0 x 3,7 100,4 3,8 __10'6)____ Näyte 31a Kontrolli 5,5 49,0 5,0 '* ·’ (ei lisätty ·;·__happoa)____ :· 15 Näyte 32b CH3C00H (70 x 3,7 87,8 3,7 __io~6)____ "‘J. Näyte 33b Kontrolli 6,3 22,6 5,5 (ei lisätty happoa) _ “Näissä liuoksissa käytettiin käsittelemätöntä Cremophor : EL:ää, BASF erä no. 98-2384.

20 : : bNäissä liuoksissa käytettiin käsittelemätöntä Cremophor EL:ää, BASF erä no. 14-1213.

‘ > t cl:10 injektiovedellä laimentamisen jälkeen.

25 Näytteet 34A, 34B, 35A, 35B, 36A ja 36B, jotka esi- ,* tetään taulukossa 5, valmistettiin eri Cremophor-eriä 115825 19 käyttämällä mineraalihappojen stabiloivan vaikutuksen johdonmukaisuuden osoittamiseksi. Kukin näyte valmistettiin sisältämään 6 mg/ml paklitakselia vedettömän etanolin ja käsittelemättömän Cremophor EL:n 50:50-seoksessa. Näytteet 5 34A, 35A ja 36A valmistettiin näytteiden 23 - 28 tavoin, ja ne sisälsivät HCl:ää määrän, joka aikaansaa 7,0 x 10-6 g H+/ml. Kontrollinäytteet 34B, 35B ja 36B eivät sisältäneet lisättyä happoa. Näytteitä säilytettiin suljetuissa pulloissa 56 päivän ajan 50 °C:ssa. Jäljellä oleva 10 paklitakselimäärä määritettiin HPLC:llä taulukossa 5 esitetyllä tavalla.

Taulukko 5 IErä nro - Lisätty Alku-pH 56 päivää |

käsittele- happo 50 °C:ssa varas- H

mätön toinnin jälkeen_ % pakli- pHa takselia ____jäljellä__ Näyte 34A HC1__4^0__98,4__3,9 Näyte 34B Kontrolli13__6^1__25,0__5,4 Näyte 35A HCL__3^_9__97,8__4,4 20 Näyte__Kontrolli__6^_3__22,6__5,5 Näyte 36A HC1__3^8__100,9__3,6 ' ;· Näyte 36B Kontrolli 5,5 49,0 5,5 al:10 injektiovedellä laimentamisen jälkeen.

;* 25 bKontrolliliuoksiin ei lisätty happoa.

Taulukon 5 tiedot osoittavat mineraalihappojen johdonmukaisen stabiloivan vaikutuksen, jolloin yli 97 % pak-: litakselia on jäljellä 56 päivän kuluttua verrattuna kont- rollinäytteissä jäljellä olevaan alle 50 %:iin.

30 Esimerkkien 2 ja 3 tiedot osoittavat alumiinioksi- ;,· · din kanssa kontaktiin saattamalla tai hapolla käsittele- : : mällä liuottimen karboksylaattipitoisuuden alentamiseksi :vt suoritetun Cremophor EL:n käsittelyn stabiloivan vaikutuk sen. Ammattimiehet ymmärtävät, että menetelmää karboksy- 115825 20 laattianionitason alentamiseksi voidaan käyttää muilla liuottimilla ja liuotusaineilla. Keksinnön edullisessa suoritusmuodossa kuvataan Taxol, jolla on osoitettu olevan parempi varastoinninkestävyys happojen stabiloivasta vai-5 kutuksesta ja karboksylaattianionipitoisuuden alentamisesta johtuen. Keksinnön muissa suoritusmuodoissa voidaan käyttää muita bioaktiivisia aineita, jotka ovat karboksy-laattianionin aiheuttamalle hajoamiselle herkkiä.

i ♦ I « * ·

Claims (23)

2i 1 1 5825

1. Liuotin, joka voi dispergoida tai liuottaa farmaseuttisen yhdisteen, joka on valittu paklitakselista, 5 kamptotesiinista tai näiden johdannaisista, joka liuotin sisältää alkyleenioksidin kondensaatiotuotetta, tunnettu siitä, että liuottimen karboksylaattianioni-pitoisuus on riittävän alhainen farmaseuttisen aineen hajoamisen oleellisesti estämiseksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen liuotin, tunnettu siitä, että liuottimen karboksylaatti-anionipitoisuus on enintään 0,6 x 10~6 grammaekvivalenttia karboksylaattianionia/ml.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen liuotin, 15 tunnettu siitä, että kondensaatiotuote on alkyleenioksidin ja lipidin kondensaatiotuotetta.

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen liuotin, tunnettu siitä, että kondensaatiotuote on polyok-sietyloitua risiiniöljyä.

5. Patenttivaatimuksen 3 mukainen liuotin, tunnettu siitä, että liuotin on polyetoksyloitua 12-hydroksisteariinihappoa.

'* 6. Patenttivaatimuksen 4 mukainen liuotin, ··· tunnettu siitä, että polyoksietyloitu lipidikon- ,25 densaatiotuote on tehty risiiniöljystä ja 20 - 40 moolista etyleenioksidia/mol risiiniöljyä.

7. Jonkin edeltävän patenttivaatimuksen mukainen liuotin, tunnettu siitä, että liuotin lisäksi kä-, , sittää alkoholia, erityisesti alkoholia, joka on valittu *· : 30 etanolista tai polyetyleeniglykolista.

*«* 8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen liuotin, tunnettu siitä, että se on etyylialkoholin ja po-lyoksietyloidun risiiniöljyn seos suhteessa noin 50:50 tilavuuden mukaan. 1 » 115825

9. Jonkin edeltävän patenttivaatimuksen mukainen liuotin, tunnettu siitä, että se sisältää tehokkaan määrän happoa ylläpitämään karboksylaattianionipitoi-suuden tasolla enintään noin 0,6 x 10”6 grammaekvivalent- 5 tia karboksylaattianionia/ml liuotinta.

10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen liuotin, tunnettu siitä, että happo on mineraalihappoa.

11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen liuotin, tunnettu siitä, että happo on valittu ryhmästä, 10 joka käsittää HCl:ää, HBr:ää, HI:tä, HF:ää, H2S04:ää, HN03:a tai etikkahappoa.

12. Menetelmä stabiloidun koostumuksen, joka käsittää vähintään yhtä farmaseuttista ainetta, joka on pak-litakselia, teniposidia, kamptotesiinia tai niiden johdan- 15 naisia, valmistamiseksi, tunnettu siitä, että se valmistetaan jonkin edeltävän patenttivaatimuksen mukaista liuotinta ja käsitellään liuotin karboksylaat-tianionipitoisuuden alentamiseksi, ja dispergoidaan farmaseuttinen yhdiste mainittuun 20 liuottimeen.

13. Patenttivaatimuksen 12 mukainen menetelmä, /·/- tunnettu siitä, että käsittelyvaiheessa liuotin ·;· saatetaan kontaktiin alumiinioksidin kanssa liuottimen ·· karboksylaattianionipitoisuuden alentamiseksi.

14. Patenttivaatimuksen 12 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käsittelyvaiheessa lisätään happoa määrä aikaansaamaan ainakin 5,6 x 10'6 g H+/ml liuo- t » · tinta.

15. Patenttivaatimuksen 14 mukainen menetelmä, : 30 tunnettu siitä, että käsittelyvaiheessa lisätään happoa määrä aikaansaamaan noin 5,6 x 10’6 - 8,4 x 10~6 g H+/ml • liuotinta.

16. Patenttivaatimuksen 15 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että happo on mineraalihappoa. 115825

17. Patenttivaatimuksen 16 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että happo on HClrää, HBr:ää, HF:ää, HI:tä, H2S04:aa, HN03:a tai etikkahappoa.

18. Menetelmä farmaseuttisen koostumuksen stabi-5 loimiseksi, joka sisältää farmaseuttista ainetta, joka on paklitakselia, teniposidia, kamptotesiiniä tai niiden johdannaisia, ja liuotinta, joka sisältää etanolia ja liuottavan määrän ainakin yhtä liuotusainetta, tunnettu siitä, että: 10 liuotinta käsitellään karboksylaattianionipitoi- suuden alentamiseksi riittävän alhaiselle tasolle farmaseuttisen aineen hajoamisen oleellisesti estämiseksi.

19. Patenttivaatimuksen 18 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että liuotusaine on polyoksiety- 15 loituja lipidejä, polyetoksyloitua 12- hydroksisteariinihappoa tai polyetyleeniglykolia.

20. Patenttivaatimuksen 18 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että liuotusaine on polyoksiety-loitua risiiniöljyä.

21. Patenttivaatimuksen 18 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että polyoksietyloitu risiiniöljy v on kondensaatiotuotetta risiiniöljystä ja noin 20 - 40 V moolista etyleenioksidia/mol risiiniöljyä.

·;· 22. Patenttivaatimuksen 18 mukainen menetelmä, 25 tunnettu siitä, että käsittelyvaiheessa liuotin sekoitetaan hapon kanssa, jota on määrä aikaansaamaan 5,6 x 10'6 - 8,4 x 10“6 g H+/ml farmaseuttista koostumusta. » » #

23. Patenttivaatimuksen 19 mukainen menetelmä, . , tunnettu siitä, että liuotin saatetaan käsittely- 30 vaiheessa kontaktiin alumiinioksidin kanssa karboksylaat- tipitoisuuden alentamiseksi farmaseuttisen aineen hajoami-: sen estämiseksi. • » » 115825