DE69402022T2

DE69402022T2 - Stabilisierte Arzneimittel und stabilisierendes Lösungsmittel

Info

Publication number: DE69402022T2
Application number: DE69402022T
Authority: DE
Inventors: Shreerham Narahari Agharkar; Thomas Cavanak; Uday S Gogate
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1993-09-29
Filing date: 1994-09-27
Publication date: 1997-07-17
Anticipated expiration: 2014-09-28
Also published as: BE1007987A5; PL176826B1; CN1107367A; ZA947482B; HK96797A; DK0645145T3; PL305240A1; NO308447B1; RU94037231A; FI944448A0; EP0645145A2; EP0645145B1; NZ264526A; NO943583L; ITRM940621A1; KR100515631B1; ITRM940621A0; HUT68687A; BR1100361A; AU686651B2

Description

Gebiet der Erfindung

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Lösemittelsystem, das geeignet ist zur Herstellung eines stabilisierten Injektionskonzentrats, das einen pharmazeutischen Wirkstoff enthält. Insbesondere ist die Erfindung gerichtet auf ein stabilisiertes Injektionskonzentrat unter Verwendung eines behandelten Lösemittelsystems mit einem reduzierten Gehalt an Carboxylatanion und ein Verfahren zum Stabilisieren einer pharmazeutischen Zusammensetzung.

Hintergrund der Erfindung

Pharmazeutische Zusammensetzungen erfordern üblicherweise ein geeignetes Lösemittel oder Trägersystem, um den aktiven Wirkstoff zu dispergieren und zu ermöglichen, daß die Zusammensetzung einem Patienten verabreicht werden kann. Das Lösungsmittel muß typischerweise fähig sein, eine therapeutisch wirksame Menge des Wirkstoffes zu lösen oder zu dispergieren, um eine wirksame Injektionszusammensetzung zu erzeugen. Außerdem muß das Lösemittelsystem mit dem Wirkstoff verträglich sein und es muß für den Patienten nicht toxisch sein.
Zahlreiche pharmazeutische Stoffe sind in einem Lösemittel nicht ausreichend löslich, um zu ermöglichen, daß die erhaltene Zusammensetzung wirksam ist. Um die Nachteile und Einschränkungen des Lösemittels zum Solubilisieren des Wirkstoffes zu überwinden, werden manchmal Mischungen von zwei oder mehr Lösemitteln verwendet. Diese Lösemittelmischsysteme (Cosolventsysteme) sind geeignet, viele pharmazeutische Stoffe zu solubilisieren, die auf andere Weise nicht in einem Trägersystem solubilisiert oder dispergiert werden können.
Ein Beispiel für ein Cosolventsystem umfaßt eine Mischung eines polaren Lösemitteis und eines nichtionischen Lösemittels, wie eine Mischung aus einem Polyethylenglykol und Cremophor EL. Cremophor EL ist ein Kondensationsprodukt aus Castoröl und Ethylenoxid, das von der BASF vertrieben wird. Ein weiteres für viele pharmazeutische Stoffe geeignetes Cosolventsystem ist eine 50 : 50 Mischung aus Ethanol und Cremophor EL. Obwohl diese Cosolventsysteme zur Solubilisierung vieler Verbindungen wirksam sein können, sind sie nicht ohne Nachteile. Beispielsweise ist bekannt, daß Cosolvents aus Ethanol und Cremophor dazu führen, das sich bei Verdünnung mit Infusionslösungen Partikel bilden. Außerdem bilden sich bei manchen Zusammensetzungen bei Lagerung über lange Zeiträume faserige Ausfällungen unbekannter Zusammensetzung. Es wird allgemein angenommen, daß die Ausfällungen Zerfallsnebenprodukte entweder der Verbindungen im Lösemittel oder des solubilisierten Stoffes sind.
In W091/02531, veröffentlicht am 7. März 1991, ist offenbart, daß Cremophor den Phänotyp der mehrfachen Wirkstoffresistenz einer Tumorzelle umkehrt, ohne die Wirkstoffempfindlichkeit der Abstammungszellinie zu verändern. Es wird auch offenbart, daß Cremophor die Fähigkeit zur Rekonstituierung der Blutbildung erhöht und/oder die Fähigkeit zur Rekonstituierung der Blutbildung nach Störung des Knochenmarks erhält, um einen Patienten bei Krebsbehandlung durch Bestrahlung und/oder Chemotherapie zu schützen.
Ein weiteres Beispiel einer pharmazeutischen Zusammensetzung mit einem Cosolventsytem ist Taxol, das Paditaxel in einer Mischung aus 50 : 50 Ethanol und Cremophor EL enthält. Paditaxel, das aus der Rinde der pazifischen Eibe isoliert ist, wird zur Behandlung von Krebspatienten verwendet. Obwohl des Cosolventsystem aus Ethanol und Cremophor EL zur Solubilisierung ausreichender Mengen des Paditaxel wirksam ist, wurde gezeigt, daß die erhaltene Zusammensetzung nur eine begrenzte Standzeit aufweist. Bei Lagerung über längere Zeit kann die Wirksamkeit oder pharmazeutische Aktivität der Zusammensetzung um bis zu 60 % sinken.
Es wurde gefunden, daß handelsübliches Cremophor EL mit Ethanol als Cosolvent, obwohl sie zur Solubilisierung pharmazeutischer Stoffe wirksam sind, Injektionszusammensetzungen ergibt, die über längere Zeiträume Instabilität zeigen. Insbesondere zeigen pharmazeutische Zusammensetzungen von Taxol in einem Cosolvent von 50 : 50 (Vol.) wasserfreiem Ethylalkohol und handelsüblichem Cremophor EL einen Verlust der Wirksamkeit von mehr als 60 % nach einer Lagerung über 12 Wochen bei 50ºC. Der Verlust der Wirksamkeit wird dem Abbau des Paclitaxels während der Lagerung zugeschrieben.
Frühere Versuche, eine lagerstabile Zusammensetzung einiger pharmazeutischer Zusammensetzungen in verschiedenen Cosolventsystemen zu entwickeln, waren nicht ganz erfolgreich. Daher besteht in der Fachwelt weiterhin ein Bedarf für ein Cosolventsystem, das geeignet ist zur Verwendung zur Herstellung stabilisierter Zusammensetzungen und insbesondere stabilisierter Injektionszusammensetzungen, die einen pharmazeutischen Wirkstoff enthalten.
WO-A-94/12030, die im Hinblick auf die Artikel 54(3) und (4) EPÜ als Stand der Technik betrachtet wird, offenbart Zusammensetzungen umfassend Paditaxel, polyethoxyliertes Castoröl und Ethanol, die durch Zugabe einer Säure auf einen pH von weniger als 8,1 eingestellt sind.

Zusammenfassung der Erfindung

Die Erfindung ist auf ein Lösemittelsystem und insbesondere ein Colsolventsystem gerichtet, das geeignet ist zur Herstellung stabilisierter Injektionszusammensetzungen, die mindestens einen pharmazeutischen Wirkstoff enthalten. Dementsprechend ist ein primäres Ziel der Erfindung, ein Verfahren zur Herstellung stabilisierter pharmazeutischer Zusammensetzungen mit dem neuen Lösemittelsystem zur verfügung zu stellen.
Es wurde gezeigt, daß die aus dem erfindungsgemäßen Lösemittelsystem hergestellte stabilisierte pharmazeutische Zusammensetzung eine längere Standzeit als frühere Zusammensetzungen aufweist. Das erfindungsgemäße Gosolventsystem ist besonders geeignet zur Verwendung mit pharmazeutischen Verbindungen, die Zerfall zeigen, der durch Carboxylatanionen katalysiert wird. Von Interesse sind die antineoplastischen Wirkstoffe Paditaxel, Camptothecin und Derivate davon.
Die stabilisierte Zusammensetzung gemäß der Erfindung umfaßt mindestens eine pharmazeutische Verbindung ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Paditaxel, Camptothecin und Derivaten davon; und
ein Lösemittel, das fähig ist, die pharmazeutische Verbindung zu dispergieren oder zu solubilisieren, wobei das Lösemittel eine wirksame Menge eines nichtionischen Solubilisierungsmittels enthält mit einem Gehalt an Carboxylatanion, der ausreichend niedrig ist, daß ein katalysierter Abbau der pharmazeutischen Verbindung verhindert ist,
vorausgesetzt, daß Verbindungen, die Paditaxel, polyethoxyliertes Castoröl und Ethanol enthalten, eingestellt auf einen pH von weniger als 8,1 durch Zugabe einer anderen Säure als HBr, HF und HI ausgeschlossen sind.
Das erfindungsgemäße Lösemittelsystem umfaßt ein nichtionisches Solubilisierungsmittel. Das Lösemittelsystem umfaßt typischerweise ein Lösemittel und ein Solubilisierungsmittel. In bevorzugten Ausführungsformen der Erfindung sind die Solubilisierungsmittel polyoxyalkylenmodifizierte Lipide und Alkylenoxide wie Polyethylenglykol und Derivate davon. Das Solubilisierungsmittel kann ein Kondensationsprodukt eines Alkylenoxids und eines Lipids oder einer Fettsäure sein. Das bevorzugte Lösemittelsystem umfaßt ein polyoxyethyliertes Castoröl wie es unter dem Handelsnamen Cremophor EL verkauft wird. Das Gremophor EL wird behandelt, um den Gehalt an Carboxylatanion auf eine ausreichend niedrige Konzentration zu reduzieren, so daß der Abbau des pharmazeutischen Stoffes, der durch die Carboxylatanionen katalysiert wird, minimiert wird. Der Gehalt an Carboxylatanion im Cremophor EL wird entweder durch in Kontakt bringen des Cremophor EL mit einem Aluminiumoxidbett verringert, wobei die Carboxylatanionen zusammen mit anderen Verunreinigungen abgetrennt werden, oder durch Zugabe einer Säure und insbesondere einer Mineralsäure wie HCl oder HNO&sub3;. In weiteren Ausführungsformen wird das Lösemittel mit einem Reaktionsmittel behandelt, um das Carboxylatanion zu reduzieren oder das carboxylatanion in eine nicht reaktive Form zu überführen.
Weitere Vorteile der Erfindung werden erreicht durch zur Verfügung stellen eines Verfahrens zum Stabilisieren einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die einen pharmazeutischen Wirkstoff ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Paditaxel, Camptothecin und Derivaten davon enthält,
und ein Lösemittel das Ethanol und eine solubilisierende Menge mindestens eines Solubilisierungsmittels enthält, wie es in Anspruch 1 definiert ist, wobei das Verfahren Behandeln des Lösemittels zum Reduzieren des carboxylatgehalts auf einen ausreichend geringen Wert umfaßt, so daß ein durch Carboxylatanion katalysierter Abbau des pharmazeutischen Stoffes im wesentlichen verhindert wird.

Ausführliche Beschreibung der Erfindung

Die Nachteile und Einschränkungen der früheren Injektionszusammensetzungs- und Lösemittelsysteme werden durch die vorliegende Erfindung überwunden, indem ein zweckmäßiges und effizientes Verfahren zum Stabilisieren für Injektionen geeigneter pharmazeutischer Zusammensetzungen zur Verfügung gestellt wird.
Es wurde überraschend gefunden, daß Paditaxel während der Lagerung mit Ethanol reagiert und daß die Zersetzung von Paclitaxel durch die carboxylatanionen im Lösemittel katalysiert wird. Es wurde gefunden, daß eine Verringerung der Carboxylatkonzentration des Lösemittels eine stabilisierende Wirkung in der pharmazeutischen Zusammensetzung erzeugt. Die geringere carboxylatkonzentration verlängert die Standzeit der Zusammensetzung, indem sie das Ausmaß der Zersetzung des pharmazeutischen Stoffes reduziert und die Bildung von" Zersetzungsnebenprodukten reduziert.
Das Lösemittelsystem weist einen ausreichend geringen Gehalt an Verunreinigungen auf, um eine stabilisierende Wirkung in pharmazeutischen Zusammensetzungen zu ergeben. Die nach dem Verfahren erhaltene pharmazeutische Zusammensetzung kann verwendet werden, um durch Verdünnen mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger oder Verdünnungsmittel Injektionszusammensetzungen herzustellen. Die Zusammensetzung ist ausreichend stabil, so daß der Abbau des Wirkstoffs minimiert ist und der Verlust der Wirksamkeit während der Lagerung reduziert ist. Die verdünnte Zusammensetzung zeigt keine Bildung von Ausfällungsprodukten, so daß der pharmazeutisch wirksame Stoff in gebrauchsfertiger Form gelagert werden kann.
Die pharmazeutische Zusammensetzung umfaßt mindestens eine pharmazeutische Verbindung mit einer Neigung zum Abbau während der Lagerung, wo die Zersetzungsreaktion durch Carboxylatanionen katalysiert wird. Die pharmazeutischen Verbindungen besitzen eine antineoplastische Wirkung wie beispielsweise Paditaxel, das unter dem Handelsnamen Taxol verkauft wird. Die verschiedenen Analogen und Derivate von Taxol können auch verwendet werden.
Taxol wird als Injektionskonzentrat hergestellt, das 6 mg/ml Paditaxel in einem Volumenverhältnis von 50 : 50 Ethanol und polyoxyethyliertem Castoröl enthält. Das polyoxyethylierte Gastoröl wird unter dem Handelsnamen Gremophor EL verkauft. Paditaxel ist ein wirksame Verbindung, die aus der Rinde von pazifischen Eiben isoliert wird. Vor kurzem wurde gefunden, daß Paditaxel in geringen Mengen von einem Pilz hergestellt wird, der in der Rinde von Eiben gefunden wird. Es ist bekannt, daß Paditaxel eine antineoplastische Aktivität besitzt.
Ein anderer geeigneter pharmazeutischer Stoff ist Camptothecm mit dem chemischen Namen 4-Ethylhydroxy-lH-pyrano[3',4':6,7]indolizinol[,2-b]chinolin-3,14(4H,12h)dion. Camptothecin wird aus dem Stammholz des Chinabaums isoliert und es wurde gezeigt, daß es Antileukämie- und Antitumoraktivität aufweist.
Die pharmazeutischen Stoffe Paclitaxel und Camptothecin zeigen Abbau und Verlust der Wirksamkeit während der Lagerung. Das Lösemittelsystem und das Verfahren gemäß der Erfindung sind besonders vorteilhaft zur Verwendung mit diesen pharmazeutischen Stoffen, die mit dem Lösemittel reagieren oder darin instabil sind. Die interessierenden pharmazeutischen Stoffe besitzen insbesondere eine Esterbindung, die von einem Alkohol in Gegenwart von Carboxylatanionen gespalten werden kann.
Paditaxel wird typischerweise als Konzentrat oder Lösung in einem für die Injektion geeigneten Vehikel in einer Menge von 6 mg/ml hergestellt. Das Vehikel ist üblicherweise eine Mischung aus Ethanol und Cremophor EL in einem Volumenverhältnis von 50 : 50. Es ist bekannt, daß während der Lagerung die Aktivität von Paditaxel abnimmt. Paditaxel besitzt die Formel 1, wobei HPLC ihren Abbau in Baccatin III der Formel II und die Ethylesterseitenkette der Formel III zeigt.
Das Lösemittel ist eine cosolventmischung aus mindestens einem Lösemittel und einem nichtionischen Solubilisierungsmittel. Die bevorzugten Lösemittel umfassen die Alkohole wie dehydratisiertes Ethanol und die pharmazeutisch akzeptablen Polyole wie Polyethylenglykol. Das Solubilisierungsmittel in bevorzugten Ausführungsformen ist ein polyoxyethyliertes Castoröl wie das, das unter dem Handelsnamen Cremophor EL von der BASF vertrieben wird. In bevorzugten Ausführungsformen enthält das Cosolvent ungefähr 40 bis 60 Vol.-% des polyoxyethylierten Castoröls, wobei der Rest ein Alkohol oder Polyol ist. In einer besonders bevorzugten Ausführungsform der Erfindung umfaßt das Cosolvent ungefähr 50 : 50 Volumen-% dehydratisiertes Ethanol und Cremophor EL.
Das erfindungsgemäße Cosolvent umfaßt bevorzugt ein nichtionisches Tensid als Solubilisierungsmittel, wobei Cremophor EL besonders bevorzugt ist. Cremophor EL ist ein Kondensationsprodukt aus Castoröl und ungefähr 20 bis 40 Mol und bevorzugt 30 bis 35 Mol Ethylenoxid pro Mol Castoröl. Cremophor EL kann nach dem im US-Patent Nr. 3.070,499 offenbarten Verfahren hergestellt werden. Cremophor EL ist unter den Namen Polyoxyethylenglyceroltriricinoleat und Glycerinpolyethylenglykolricinoleat bekannt. Es können auch die biologischen und chemischen Äquivalente oder Derivate von Cremophor EL verwendet werden.
In alternativen Ausführungsformen kann das nichtionische Tensid oder Solubilisierungsmittel andere ethylenoxidmodifizierte Lipide, hydroxylierte Talgöle, Polysorbat 80, auch als Tween 80 bekannt, polyethoxylierte 12-Hydroxystearinsäure, Polyoxyethylensorbitanfettsäureester, Polyethylenglykolester, Polyethylenfettsäureester, Blockcopolymere von Ethylenoxid und Propylenoxid, ethylierte Fettalkoholether und Octylphenoxypolyethoxyethanolverbindungen enthalten. Diese nichtionischen Solubilisierungsmittel können nach im Stand der Technik bekannten Verfahren oder vom Handel erhalten werden. Das Solubilisierungsmittel kann andere Kondensationsprodukte von Alkylenoxiden enthalten, obwohl die mit Alkylenoxid modifizierten Lipide allgemein bevorzugt sind. Beispiele geeigneter Solubilisierungsmittel sind Castoröl PEG 400 und PEG 40.
Der Gehalt an Carboxylatanion im Lösemittel kann nach einer Reihe von Methoden verringert werden. In einer ersten Ausführungsform der Erfindung wird Cremophor EL oder ein anderes Lösemittel durch eine Standard-Chromatographiesäule mit Aluminiumoxid geschickt. Das Aluminiumoxid adsorbiert die Carboxylatanionen sowie andere Verunreinigungen, um den Carboxylataniongehalt des Lösemittels zu reduzieren.
In einer alternativen Ausführungsform der Erfindung wird das Lösemittel durch den Zusatz einer Säure in einer stabilisierenden Menge behandelt, um den Carboxylataniongehalt auf eine ausreichend niedrige Höhe zu reduzieren, um einen kata lysierten Abbau der pharmazeutischen Verbindung im wesentlichen zu verhindern, vorausgesetzt, daß das Verfahren die Zugabe einer anderen Säure als HBR, HF und HI ausschließt, um den pH einer Zusammensetzung umfassend Paditaxel, polyethoxyliertes Castoröl und Ethanol unter 8,1 zu senken. Die Säure kann dem Lösemittel vor oder nach dem Zumischen der pharmazeutischen Verbindung zugegeben werden. Im allgemeinen werden Mineralsäuren wie beispielsweise HCL, HBR, HF, HI, H&sub2;SO&sub4; und HNO&sub3; verwendet. Alternativ können organische Säuren wie Essigsäure verwendet werden. Die organischen Säuren sind im allgemeinen weniger bevorzugt, da sie ein Quelle von Carboxylatanionen darstellen können, was die stabilisierende Wirkung der Säurebehandlung behindert. Die Säure wird bevorzugt in Mengen zugegeben, so daß 5,6 x 10&supmin;&sup6; bis 8,4 x 10&supmin;&sup6; Gramm H&spplus; pro ml Lösemittel erreicht werden. Eine wirksame Stabilisierung der Zusammensetzung wird durch die Zugabe der Säure erreicht, so daß 7,0 x 10&supmin;&sup6; Gramm H&spplus; pro ml erreicht werden. Die Säure wird zugegeben, um den Carboxylataniongehalt auf weniger als oder gleich ungefähr 0,6 x 10&supmin;&sup6; Grammäquivalente Carboxylatanion pro ml Lösemittel zu senken.
Taxollösungen mit 0,6 x 10&supmin;&sup6; Grammäquivalenten Carboxylatanion zeigten nach einer Lagerung über 28 Tage bei 50 ºC einen Restgehalt an Paditaxel von 94 %. 1,0 Grammäquivalente Anionen werden durch 1,0 Grammäquivalente H&spplus; pro Äquivalent neutralisiert.
Die dem Lösemittel zugegebene Menge an Säure hängt von der Menge des nichtionischen oberflächenaktiven Stoffes im Cosolventsystem und der Art des oberflächenaktiven Stoffes ab. Die nichtionischen Tenside, die durch ihr Herstellungsverfahren größere Mengen von Carboxylatanionverunreinigungen enthalten, erfordern typischerweise größere Mengen an Säure, um den Carboxylataniongehalt zu senken.
In weiteren Ausführungsformen kann das-Lösemittel mit anderen Reaktanten behandelt werden, die fähig sind, die Carboxylatanionkonzentration in der Lösung zu verringern. Es können beispielsweise unlösliche Salze der Carboxylate oder Derivate von Carboxylaten gebildet werden. Es ist allgemein bevorzugt, Carboxylatanionen unter Verwendung eines Reaktionsmittels zu entfernen, das keine Ausfällungsprodukte in der Zusammensetzung bildet. Die Zugabe einer starken Mineralsäure ist allgemein bevorzugt, da die Mineralsäuren und die erhaltenen Carbonsäuren nicht toxisch sind und leicht im Lösemittel solubilisiert werden. Wenn die Carboxylatanionen in einer Weise umgesetzt werden, die ein unlösliches Präzipitat bildet, sollte die Ausfällung von der Zusammensetzung abgetrennt werden, bevor die Zusammensetzung an einen Patienten verabreicht wird.
Die folgenden Beispiele sollen die bevorzugten Ausführungsformen der Erfindung darstellen. Ein Fachmann wird leicht erkennen, daß zahlreiche Ausführungsformen der Erfindung ausgeführt werden können, um den Stabilisierungseffekt zu erreichen.

Beispiel 1

Dieses Beispiel analysiert die Eigenschaften von Taxol und Paditaxel in einer Lösung aus Ethanol und Cremophor EL. Das Taxol wurde erhalten mit 6. mg/ml Paditaxel in einer Mischung von 50 : 50 (Volumen) aus Cremophor EL und dehydratisiertem Ethanol. Eine erste Gruppe von Proben 1 - 4 wurden unter Verwendung verschiedener Chargen von behandeltem Cremophor EL hergestellt und eine zweite Gruppe von Proben 5 - 7 wurde unter Verwendung verschiedener Chargen von unbehandeltem handelsüblichem Cremophor EL hergestellt. Das behandelte Cremophor EL wurde hergestellt, indem 100 kg des Cremophor EL durch eine Standard-Chromatographiesäule mit 19,5 kg Aluminiumoxid, das unter dem Handelsnamen CAMAG verkauft wird, geschickt werden. Um die Ursache für die Instabilität des Taxol in unbehandeltem Cremophor EL zu verstehen, wurde jede Probe durch Messung der Karl-Fischer-Feuchtigkeit, des Kahumionengehalts, der Säurezahl und des Peroxidgehalts analysiert. Die Ergebnisse dieser Messungen sind in Tabelle 1 dargestellt. Tabelle 1
n.b. = nicht bestimmt
Die Daten in Tabelle 1 zeigen die übereinstimmung des Feuchtigkeitsgehaltes, des Kahumgehaltes, der Säurezahl und der Peroxidzahl zwischen den Chargen von behandeltem Cremophor EL, das zur Herstellung der Proben 1 - 4 verwendet wurde. Die Daten zeigen ferner übereinstimmend höhere Werte für Feuchtigkeit, Kahumgehalt, Säurezahl und Peroxidzahl bei dem unbehandelten Cremophor EL.

Beispiel 2

Dieses Beispiel wurde durchgeführt, um die Instabilität von Taxol und Paditaxel in einem Cosolvent mit Cremophor EL zu zeigen, und um die Art der Abbauprodukte zu bestimmen. Dieses Beispiel wurde insbesondere durchgeführt, um zu bestimmen, ob höhere Werte bei Feuchtigkeit, Kalium, Säurezahl und Peroxidzahl des unbehandelten Cremophor EL wie sie in Beispiel 1 bestimmt wurden, mit der Abbaurate und dem Verlust an Wirksamkeit bei Taxol in Zusammenhang stehen.
Die Proben 8 - 21 wurden durch Auflösen von 6 mg/ml Pachtaxel in 50 : 50 (V/V) einer Mischung aus behandeltem Cremophor EL und dehydratisiertem Ethanol hergestellt. Das Cremophor EL der Proben 8 - 21 wurde wie oben bei Beispiel 1 diskutiert behandelt. Probe 22 wurde als Kontrolle aus unbehandeltem Cremophor EL in einer Mischung aus 50 : 50 (V/V) mit Paditaxel in einer Menge von 6 mg/ml hergestellt. Jede der Proben 8 - 20 wurde mit den in den Tabellen 2 und 3 aufgeführten Komponenten gemischt. Probenmengen von drei ml der Testproben wurden in Flintglasphiolen des Typs I von 6 cm³ eingebracht. Die Phiolen wurden mit West 4455/45-Stopfen mit Teflonfläche verschlossen, versiegelt und vier Wochen bei 50 ºC gelagert und dann durch HPLC auf die Taxolkonzentration analysiert. Die Kontrollparameter des HPLC sind folgende:
Säule Jones Cyano RP 5 µ, 25 cm x 4,6 mm ID
Detektorwellenlänge 227 nm
Mobile Phase 35 % Acetonitril : 65 % 20 mM Äcetatpuffer (pH 4)
Strömungsrate 1,5 mL/min
Verdünnungsmittel mobile Phase
Probenkonzentration 0,05 mg/mL
Injektionsvolumen 20 Mikroliter
Retentionszeit Taxol 10,5 min.
Der pH-Wert für jede der Proben wurden nach verdünnung mit Wasser im Verhältnis 1 : 10 festgehalten. Peroxidzahl (EP- Verfahren), Säurezahl (USP-Verfahren), Feuchtigkeitsgehalt und Kahumwerte wurden wie in den Tabellen 2 und 3 gezeigt bestimmt. Tabelle 2
a nach Verdünnung 1 : 10 mit Wasser zur Injektion
b Peroxidzahl = 232
c Peroxidzahl = 652
d Peroxidzahl = 14
e Säurezahl = 1,2
f Säurezahl = 0,5, Peroxidzahl = 4 Tabelle 3
a nach Verdünnung mit Wasser 1 : 10 zur Injektion Prozentangaben sind auf Gew.-/Vol. bezogen (% G/V)
Wie in Tabelle 2 gezeigt ist, wird die Stabilität von Taxol als Lösung in einer Mischung von 50 : 50 dehydratisiertem Ethanol und Cremophor EL durch den Zusatz von Wasserstoffperoxid,. Wasser oder Essigsäure nicht beeinflußt, wodurch demonstriert ist, daß die Instabilität von Taxol nicht mit der Peroxidzahl, dem Feuchtigkeitsgehalt oder dem Säurewert von Cremophor EL in Zusammenhang steht. Jede der Proben 8 - 11 zeigte einen vergleichbaren Verlust der Taxolwirksamkeit ungeachtet des zugesetzten Reagens. In jeder der Proben 8 - 11 betrugen die Prozentwerte des restlichen Taxol, die die Menge an Paditaxel in den Proben angibt, im Bereich von 94,1 % bis 96,8% im Vergleich zu 95,5 % der Kontrollprobe 12.
Probe 13 in Tabelle 3, die Kaliumacetat enthält, zeigt sich weniger stabil als die Kontrollprobe 21, die keine zusätzliche Komponente enthält. Bei Probe 14, die Kaliumchlorid enthält, wird gezeigt, daß sie mit der Kontrollprobe 21 vergleichbar ist. Diese Daten legen nahe, daß die Stabilität des Taxol durch die Gegenwart von Kaliumionen nicht beeinflußt wird, sondern eher durch die anionische Form der Carbonsäure nachteilig beeinflußt wird. Die Kaliumacetat enthaltende Probe 13, die Ammoniumacetat enthaltende Probe 16, die Natriumacetat enthaltende Probe 17, die Kaliumpropionat enthaltende Probe 18 und die Kahumlinolelaidat enthaltende Probe 20 sind alle weniger stabil als die Kontrollprobe 22. Die Stabilität der Essigsäure enthaltenden Probe 11 und der Linolelaidinsäure enthaltenden Probe 19 ist vergleichbar mit der Kontroliprobe 22, was darauf hinweist, daß die Carbonsäuren in nichtionisierter Form die Taxolstabilität nicht beeinflussen. Es wird auch gezeigt, daß die unbehandeltes Cremophor EL enthaltende Probe 22 weniger stabil ist als die Kontrollprobe 21, die behandeltes Cremophor EL enthält. Ein HPLC von jeder Probe zeigte, das die Abbauprodukte Baccatin III und der Ethylester der Taxolseitenkette sind.

Beispiel 3

Dieses Beispiel ist keine Ausführungsform der Erfindung, enthält jedoch Informationen, die auf die Erfindung anwendbar sind.
Dieses Beispiel zeigt die stabilisierende Wirkung von Säuren, die den Taxolproben zugesetzt werden, die unbehandeltes Cremophor EL enthalten. Die Proben in diesem Beispiel wurden aus Taxol hergestellt, das 6 mg/ml Paditaxel in einer Mischung von 50 : 50 (Vol./Vol.) aus dehydratisiertem Alkohol und unbehandeltem handelsüblichem Cremophor EL enthält. Wie in Tabelle 4 angegeben ist, wurden die Proben 23 - 28 mit HCL gemischt, Probe 29 wurde mit Essigsäure gemischt und Probe 30 wurde mit Salpetersäure gemischt. Probe 31 war die Kontrollprobe, die keinen Säurezusatz enthielt. Die Essigsäure enthaltende Probe 32 und die Kontrollprobe 33 ohne Säurezusatz wurden auch mit unbehandeltem Cremophor EL hergestellt. Die Proben wurden in 3 ml Probenmengen geteilt und in Flintgiasphiolen vom Typ 1 mit 5 cm³ eingebracht und mit fluoresceinbeschichteten Verschlüssen Daikyo #713 verschlossen. Die Phiolen wurden bei 50ºC 56 Tage lang gelagert und durch HPLC auf die Paditaxelkonzentration (Taxol) analysiert. Die HPLC- Parameter sind folgende:
Säule Jones Cyano RP 5 µ, 25 cm x 4,6 mm ID
Detektorwellenlänge 227 nm
Mobile Phase 35 % Acetonitril : 65 % 20 mM Acetatpuffer (pH 4)
Strömungsrate 1,5 mL/min
Verdünnungsmittel mobile Phase
Probenkonzentration 0,05 mg/mL
Injektionsvolumen 20 Mikroliter
Retentionszeit Paditaxel 10,5 min.
Die Daten in Tabelle 4 zeigen, daß die stabilisierende Wirkung der Säure mit zunehmenden Mengen an Säure zunimmt. Diese Ergebnisse stimmen mit der Premise überein, daß der Abbau von Taxol eher durch die Anwesenheit von Carboxylatanionen als durch die Säure bedingt ist. Die Daten zeigen ferner, daß die Mineralsäuren wie HCl und HNO&sub3; bessere Stabilisierungsmittel sind, bei denen mehr als 97 % des Taxol nach 56 Tagen verbleiben, wenn die Säure in Mengen zugegeben ist, die 5,6 x 10&supmin;&sup6; bis 8,4 x 10&supmin;&sup6; Gramm H&spplus; pro ml ergeben. Die Mineralsäuren zeigten eine größere Stabilisierungswirkung als Essigsäure, selbst wenn die Essigsäure in einer höheren Dosierung von 70 x 10&supmin;&sup6; Gramm H&spplus; pro ml zugesetzt ist. Diese Ergebnisse sind bedingt durch die Säurestärke der Mineralsäuren im Vergleich zu den organischen Säuren bei der Neutralisierung der Carboxylatanionen. Außerdem kann die Essigsäure als Quelle von Carboxylatanionen zu einem gewissen Abbau des Paclitaxels beitragen. Daß in den Proben 26 und 30 die verbleibende Menge an Paditaxel größer ist als 100 %, ist durch analytische Schwankungen in den Messungen bedingt. Tabelle 4
a unbehandeltes Cremophor EL, BASF Charge Nr. 98-2384 wurde in diesen Lösungen verwendet
b unbehandeltes Cremophor EL, BASF Charge Nr. 14-1213 wurde in diesen Lösungen verwendet
c nach Verdünnung mit Wasser 1 : 10 zur Injektion
Die Proben 34A, 34B, 35A, 35B, 36A und 36B wie sie in Tabelle 5 gezeigt sind wurden unter Verwendung verschiedener Chargen von Cremophor hergestellt, um die übereinstimmung der Stabilisierungswirkung von Mineralsäuren zu zeigen. Jede Probe wurde so hergestellt, daß sie 6 mg/ml Paditaxel in einer Mischung 50 50 aus dehydratisiertem Ethanol und unbehandeltem Cremophor EL enthält. Die Proben 34A, 35A und 36A wurden auf dieselbe Weise wie die Proben 23 - 28 hergestellt, und so daß sie HCL in einer Menge enthalten, die 7,0 x 10&supmin;&sup6; H&spplus; pro ml ergibt. Die Kontrollproben 348, 358 und 368 enthielten keinen Säurezusatz. Die Proben wurden 56 Tage bei 50ºC in geschlossenen Behältern gelagert. Die verbleibende Menge an Paditaxel wurde durch HPLC bestimmt wie es in Tabelle 5 gezeigt ist. Tabelle 5
a nach Verdünnung mit Wasser 1 10 zur Injektion
b bei den Kontrollösungen wurde keine Säure zugesetzt
Die Daten von Tabelle 5 zeigen die übereinstimmende Stabilisierungswirkung von Mineralsäuren, wobei mehr als 97 % des Paclitaxels nach 56 Tagen verbleiben im Vergleich zu weniger als 50 %, die in den Kontrollproben verbleiben.
Die Daten der Beispiele 2 und 3 zeigen die stabilisierende Wirkung der Behandlung von Cremophor EL durch in Kontakt bringen mit Aluminiumoxid oder Behandlung mit einer Säure, um den Carboxylatgehalt im Lösemittel zu reduzieren. Es ist für die Fachleute ersichtlich, daß das Verfahren zur Reduzierung der Carboxylationenwerte mit anderen Lösemitteln und Solubilisierungsmitteln angewendet werden kann. Es wurde gezeigt, daß Taxol durch die stabilisierende Wirkung der Säuren und die Reduktion des Carboxylatanionengehaltes eine erhöhte Lagerbeständigkeit aufweist.

Claims

1. Stabilisierte Zusammensetzung umfassend mindestens eine pharmazeutische Verbindung ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Paditaxel, Camptothecin und Derivaten davon; und

ein Lösemittel, das fähig ist, die pharmazeutische Verbindung zu dispergieren oder zu solubilisieren, wobei das Lösemittel eine wirksame Menge eines nichtionischen Solubilisierungsmittels enthält mit einem Gehalt an Carboxylatanion, der ausreichend niedrig ist, daß ein katalysierter Abbau der pharmazeutischen Verbindung verhindert ist,

vorausgesetzt, daß Verbindungen, die Paditaxel, polyethoxyliertes Castoröl und Ethanol enthalten, eingestellt auf einen pH von weniger als 8,1 durch Zugabe einer anderen Säure als HBr, HF und HI ausgeschlossen sind.

2. Stabilisierte Zusammensetzung umfassend mindestens eine pharmazeutische Verbindung ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Paditaxel, Camptothecin und Derivaten davon; und

worin vor dem Dispergieren der pharmazeutischen Verbindung in dem Lösemittel, das Lösemittel behandelt wurde, um den Gehalt an Carboxylatanion zu reduzieren, wobei die Behandlung in Kontakt bringen des Lösemittels mit Aluminiumoxid umfaßt.

3. zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, worin das Lösemittel einen Gehalt an Carboxylatanion aufweist von ungefähr 0,6 x 10&supmin;&sup6; Grammäquivalenten Carboxylatanion pro ml Lösemittel.

4. Zusammensetzung nach Anspruch 1, 2 oder 3, worin das Lösemittel ein Kondensationsprodukt von Alkylenoxid und einem Lipid umfaßt, insbesondere polyoxyethyliertes Castoröl oder polyoxyethylierte 12-Hydroxystearinsäure.

5. zusammensetzung nach Anspruch 4, worin das polyoxyethylierte Lipidkondensationsprodukt hergestellt ist aus Castoröl und 20 bis 40 Mol Ethylenoxid pro Mol Castoröl.

6. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, worin das Lösemittel ferner einen Alkohol umfaßt, insbesondere einen Alkohol ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Ethanol und Polyethylenglykol.

7. zusammensetzung nach Anspruch 6, worin das Lösemittel eine Mischung aus Ethylalkohol und polyoxyethyliertem Castoröl in einem Volumenverhältnis von ungefähr 50 : 50 ist.

8. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, worin das Lösemittel eine wirksame Menge einer Säure enthält, so daß ein Gehalt an Carboxylatanion von weniger als oder gleich ungefähr 0,6 x 10&supmin;&sup6; Grammäquivalenten Carboxylatanion pro ml Lösemittel eingehalten ist.

9. Zusammensetzung nach Anspruch 8, worin die Säure eine Mineralsäure ist, insbesondere eine Säure ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus HCL, HBr, HF, HI, H&sub2;SO&sub4; und HNO³ oder Essigsäure.

10. Verfahren zur Herstellung der stabilisierten Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, umfassend die Schritte:

Herstellen des Lösemitteis und Behandeln des Lösemitteis, um den Carboxylatgehalt zu reduzieren, und Dispergieren der pharmazeutischen Verbindung in dem Lösemittel

11. Verfahren nach Anspruch 10, worin der Behandlungsschritt in Kontakt bringen des Lösemitteis mit Aluminiumoxid umfaßt, so daß der Gehalt des Lösemitteis an Carboxylatanion reduziert wird.

12. Verfahren nach Anspruch 10, worin der Behandlungsschritt Zugabe einer Säure in einer Menge umfaßt, so daß mindestens 5,6 x 10&supmin;&sup6;, insbesondere ungefähr 5,6 x 10&supmin;&sup6; bis 8,4 x 10&supmin;&sup6; Gramm H&spplus; pro ml des Lösemittel erreicht werden.

13. Verfahren nach Anspruch 12, worin die Säure eine Mineralsäure ist, insbesondere eine Säure ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus HCL, HBr, HF, HI, H&sub2;SO&sub4; und HNO&sub3; oder Essigsäure.