ES2905546T3

ES2905546T3 - Métodos para la preparación de ácido desoxicólico e intermedios útiles en la preparación de ácido desoxicólico

Info

Publication number: ES2905546T3
Application number: ES17727606T
Authority: ES
Inventors: Bonde-Larsen Antonio Lorente; Sierra Ignacio Herraiz; Sainz Yolanda Fernandez; Fuente José Luis Barredo; Encabo Alfonso Perez; Hernandez José Angel Turiel
Original assignee: Crystal Pharma SA
Current assignee: Curia Spain SA
Priority date: 2016-06-06
Filing date: 2017-06-06
Publication date: 2022-04-11
Anticipated expiration: 2037-06-06
Also published as: KR20190020731A; WO2017211820A1; JP2019517571A; KR102527103B1; EP3464315A1; US20180305395A1; US11117925B2; EP3464315B1; JP7050008B2

Abstract

El proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que comprende los siguientes pasos: i) proporcionar un compuesto de fórmula general SM-a: **(Ver fórmula)** ii) reducir el compuesto de fórmula general SM-a para obtener un intermedio de fórmula general Int A1: **(Ver fórmula)** iii) convertir el intermedio de la fórmula general Int A1 en un intermedio de la fórmula general Int A2: **(Ver fórmula)** iv) reducir el intermedio de fórmula general Int A2 en un intermedio de fórmula general Int A3: **(Ver fórmula)** v) oxidar el intermedio de fórmula general Int A3 en un intermedio de fórmula general Int A5: **(Ver fórmula)** vi) reducir el intermedio de fórmula general Int A5 en un intermedio de fórmula general Int A6: **(Ver fórmula)** vii) reducir el intermedio de fórmula general Int A6 en un intermedio de fórmula general Int A7: **(Ver fórmula)** viii) reducir el compuesto de fórmula general Int A7 en un intermedio de fórmula general Int A8: **(Ver fórmula)** o alargar la cadena carbonada del intermedio de fórmula general Int A7 en un intermedio de fórmula general Int B2: **(Ver fórmula)** donde R2 es un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado, ix) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int A8 o convertir el intermedio de fórmula general Int B2 para obtener ácido desoxicólico (DCA): **(Ver fórmula)** x) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R2 es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado; R3 es H, R2 o un grupo de protección de alcohol.

Description

DESCRIPCIÓN

Métodos para la preparación de ácido desoxicólico e intermedios útiles en la preparación de ácido desoxicólico

Campo de la invención

La presente invención se refiere a procesos nuevos y mejorados para la preparación de ácido desoxicólico (DCA por sus siglas en inglés) y sus sales farmacéuticamente aceptables, así como a nuevos intermedios útiles para la preparación de DCA y sus sales farmacéuticamente aceptables.

Antecedentes de la invención

El ácido desoxicólico (DCA) es un compuesto farmacológico conocido. El DCA tiene el número CAS [83-44-3], y también se conoce como desoxicolato, ácido colanoico y 3a, 12p-dihidroxi-5p-colanato. El DCA puro es un polvo cristalino de color blanco a blanquecino. El DCA es uno de los ácidos biliares secundarios, los cuales son subproductos metabólicos de las bacterias intestinales.

Desde su descubrimiento, el DCA se ha utilizado en varios campos de la medicina humana. En el cuerpo humano, el DCA se utiliza en la emulsificación de grasas para su absorción en el intestino. Además, cuando se inyecta en la grasa submentoniana, el DCA ayuda a destruir las células grasas. En los Estados Unidos, el DCA ha sido aprobado por la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA por sus siglas en inglés) para reducir la grasa moderada a severa debajo del mentón y se comercializa con la marca comercial Kybella®. Kybella® es producido por Kythera Biopharmaceuticals.

Las Solicitudes de Patente recientes que describen las propiedades reductoras de grasa de los DCA incluyen los documentos WO 2005/117900, WO 2005/112942, US 2005/0261258, US 2005/0267080, US 2006/127468 y US 2006/0154906.

Las preparaciones farmacéuticas que contienen ácidos biliares están disponibles comercialmente a costes bastante bajos, porque los ácidos biliares están fácilmente disponibles en cadáveres de animales, tales como vacas y ovejas.

Sin embargo, los ácidos biliares obtenidos de fuentes animales pueden contener patógenos, como priones, u otros agentes nocivos, como toxinas.

Los ácidos biliares de origen animal se purifican típicamente para excluir las impurezas. En la práctica, tales composiciones purificadas contienen una mezcla de ácidos biliares. Por ejemplo, las composiciones comercialmente disponibles de DCA de origen animal contienen algo de ácido quenodoxicólico y ácido cólico.

Por consiguiente, los ácidos biliares, incluido el DCA, obtenidos de forma sintética o de fuentes vegetales, han ganado recientemente un interés creciente, ya que de este modo se pueden eliminar los problemas mencionados anteriormente asociados con los ácidos biliares de origen animal.

Por tanto, existe una necesidad de rutas sintéticas novedosas y eficientes para preparar ácidos biliares, incluido el DCA, donde los compuestos de partida son esteroides, esteroles o fitoesteroles fermentados de origen vegetal.

Se conoce la preparación de DCA a partir de fitoesteroles obtenidos por fermentación de una cepa de Mycobacterium. Por ejemplo, los documentos WO 2008/157635 y WO 2013/044119 describen la síntesis de DCA a partir de 9-hidroxi-4-androsteno-3,17-diona:

Sin embargo, este proceso implica al menos 11 pasos mas purificaciones adicionales. Además, la cadena carbonada (en la posición 17) se genera sin una estereoquímica definida. En consecuencia, el rendimiento global es bajo, lo que hace que el proceso sea menos atractivo desde un punto de vista industrial.

Los documentos WO 2008/157635 y WO 2012/047495 enseñan la preparación de DCA a partir de cortisona e hidrocortisona. Sin embargo, estos procesos implican numerosos pasos individuales y, además, la cortisona y la hidrocortisona son materias primas bastante caras.

Como se entenderá a partir de la revisión anterior, todavía existe la necesidad de proporcionar rutas sintéticas para preparar DCA con buen rendimiento y alta pureza y donde el compuesto de partida sea de origen vegetal. Además, todavía existe la necesidad de proporcionar rutas sintéticas para preparar DCA a partir de compuestos de partida de origen vegetal, que sean más simples que los descritos en la técnica anterior.

Breve descripción de la invención

En un primer aspecto la presente invención se refiere a un proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que comprende los siguientes pasos:

i) proporcionar un compuesto de fórmula general SM-a:

ii) reducir el compuesto de fórmula general SM-a para obtener un intermedio de fórmula general Int A1:

iii) convertir el intermedio de la fórmula general Int A1 en un intermedio de la fórmula general Int A2:

iv) Reducir el intermedio de fórmula general Int A2 en un intermedio de fórmula general Int A3: v) oxidar el intermedio de fórmula general Int A3 en un intermedio de fórmula general Int A5:

vi) reducir el intermedio de fórmula general Int A5 en un intermedio de fórmula general Int A6:

vii) reducir el intermedio de fórmula general Int A6 en un intermedio de fórmula general Int A7:

viii) reducir el compuesto de fórmula general Int A7 en un intermedio de fórmula general Int A8:

o alargar la cadena carbonada del intermedio de fórmula general Int A7 en un intermedio de fórmula general Int B2:

donde R²es un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado,

ix) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int A8 o convertir el intermedio de fórmula general Int B2 para obtener ácido desoxicólico (DCA):

x) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

donde

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol.

En un primer ejemplo, la presente divulgación se refiere a un proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que no forma parte de la invención actualmente reivindicada, que comprende los siguientes pasos:

I) proporcionar un compuesto de fórmula general SM:

ii) reducir el compuesto de fórmula general SM para obtener un intermedio de fórmula general INT 1:

III) convertir el intermedio de la fórmula general INT 1 en un intermedio de la fórmula general INT 2:

IVa) reducir el intermedio de fórmula general INT 2 en un intermedio de fórmula general INT 3:

seguido de la conversión del intermedio de fórmula general INT 3 en un intermedio de fórmula general INT B:

VI) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde Ri es COOR², CH²OH, CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X o CH²-CH²-CHO;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

R³ya sea P o R²; y

X es un átomo de halógeno.

En un ejemplo relativo a este proceso no reivindicado, se lleva a cabo el paso IVa) y no se lleva a cabo el paso IVb). En otro ejemplo de este proceso no reivindicado, se lleva a cabo el paso IVb) y no se lleva a cabo el paso IVa).

En otro aspecto, la presente invención se refiere a un proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que comprende los siguientes pasos:

i) proporcionar un compuesto de fórmula general Int A3:

ii) oxidar el intermedio de fórmula general Int A3 en un intermedio de fórmula general Int A5:

iii) reducir el intermedio de fórmula general Int A5 en un intermedio de fórmula general Int A6:

iv) reducir el intermedio de fórmula general Int A6 en un intermedio de fórmula general Int A7: v) reducir el compuesto de fórmula general Int A7 en un intermedio de fórmula general Int A8:

donde R²es un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado,

vi) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int A8 o convertir el intermedio de fórmula general Int B2 para obtener ácido desoxicólico (DCA):

vii) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

donde

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección contra el alcohol.

Otro ejemplo de la presente divulgación, que no forma parte de la invención actualmente reivindicada, se refiere a un proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que comprende los siguientes pasos:

I) proporcionar un compuesto de fórmula general INT 3:

II) convertir el intermedio de la fórmula general INT 3 en un intermedio de la fórmula general INT B:

III) convertir el intermedio de fórmula general INT B en ácido desoxicólico (DCA):

IV) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde

R¹es COOR², CH²OH, CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X o CH²-CH²-CHO; R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección contra el alcohol;

R³ya sea P o R²; y

X es un átomo de halógeno.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general I

donde

Ri es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X; R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol con la condición de que P no sea Ac o Pv; X es un átomo de halógeno;

___ _ es un enlace C-C o un enlace C=C;

i f U W es =0 o ■■«cuín OR³, donde R³es P o R²;

OR⁴es OH o R⁴es el carbono C3 en el anillo A; y

con la condición de que la fórmula I no sea

Donde R es H o Me

Donde R es H o Me

En otro ejemplo más, que no forma parte de la invención actualmente reivindicada, la presente divulgación se refiere al uso de un compuesto de fórmula general I

donde

R¹es COOR², CH²OH, CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X o CH²-CH²-CHO;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

X es un átomo de halógeno;

------------es un enlace C-C o un enlace C=C;

es = O o ■ OR³donde R³es P o R²; y

OR⁴es OH o R⁴es el carbono C3 en el anillo A;

para la preparación de un compuesto de fórmula general II o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo

donde

Ri es OH, NHCH²CH²SO³H o NHCH²COOH;

R²y R³es H u OH.

Descripción detallada de el invento

Definiciones

En el presente contexto, el compuesto de fórmula general I debe entenderse como un compuesto de fórmula la o Ib como se muestra a continuación.

En el presente contexto, el término "grupo alquilo C1-C6" pretende significar una cadena carbonada saturada lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. Ejemplos específicos de un grupo alquilo C1-C6 son metilo, etilo, npropilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, terc-butilo, n-pentilo, isopentilo, n-hexilo e iso-hexilo. Los ejemplos preferidos incluyen metilo, etilo, n-propilo e isopropilo, en particular metilo y etilo. Lo más preferiblemente, el grupo alquilo C1-C6 es metilo.

En este documento, el término "alcanol C1-C6" significa un alcohol saturado lineal o ramificado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. Los ejemplos específicos de un alcanol C1-C6 son metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, terc-butanol, n-pentanol, isopentanol, n-hexanol e iso-hexanol. Los ejemplos preferidos incluyen metanol, etanol, n-propanol e isopropanol, en particular metanol y etanol. Lo más preferiblemente, el alcanol C1-C6 es metanol.

El término "grupo saliente" pretende significar un fragmento molecular que es capaz de apartarse de una molécula con un par de electrones en la escisión del enlace heterolítico. Los ejemplos específicos de grupos salientes incluyen haluros, tales como cloruro, bromuro y yoduro, y ésteres de sulfonato, tales como tosilato. En una realización preferida de la invención, el grupo saliente es bromuro.

Cuando se usa en el presente documento, el término "grupo de protección de alcohol" significa una molécula que puede modificar y, por tanto, enmascarar temporalmente la química característica de un grupo de alcohol. Ejemplos específicos de grupos de protección de alcohol incluyen trimetilsilil éter (TMS), trietilsilil éter (TES), triisopropilsilil éter (TIPS), tercbutildimetilsilil éter (TBS, TBDMS), terc-butildifenilsilil éter (TBDPS), acetil (Ac) COCH³), benzoílo (Bz), bencil éter (Bn), 4-metoxibencil éter (PMB), naftilmetil éter (Nap), metoximetil acetal (MOM), 2-metoxietoximetil éter (MEM), etoxietil acetal (EE), metoxipropil acetal ( MOP), benciloximetil acetal (BOM), tetrahidropiranil acetal (THP), 2,2,2-tricloroetil carbonato (Troc), metil éter, dimetoxitritilo (DMT), metoxitritilo (MMT), metiltiometil éter, pivaloilo (Piv), tetrahidropiranilo (THP), trifenilmetilo (tritilo, Tr) y tosilo (Ts). En una realización preferida de la invención, el grupo de protección de alcohol es Ac, TBDMS y Ts, en particular Ac.

En el presente contexto, "Ac" significa acetilo (COCH3).

Una "sal farmacéuticamente aceptable" significa que la sal no es tóxica y es adecuada para ser administrada a un mamífero, en particular a un ser humano. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales con una base, por ejemplo, sales con una base inorgánica, como una sal de sodio, una sal de potasio, una sal de calcio, una sal de magnesio y similares, o sales con una base orgánica, como una sal de piperidina, una sal de morfolina, una sal de pirrolidona, una sal de arginina, una sal de lisina y similares. En una realización preferida de la invención, la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de sodio.

Las rutas sintéticas al DCA

Los presentes inventores han proporcionado nuevas rutas sintéticas para DCA, que pueden describirse mediante el siguiente esquema de reacción general:

en donde R¹y R³son como se definieron previamente.

Los pasos individuales del proceso se describen con más detalle a continuación.

Ruta sintética A

En una realización preferida de la invención, el proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, comprende los siguientes pasos:

i) proporcionar un compuesto de fórmula general SM-a:

iv) reducir el intermedio de fórmula general Int A2 en un intermedio de fórmula general Int A3:

v) oxidar el intermedio de fórmula general Int A3 en un intermedio de fórmula general Int A5:

ix) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int A8 para obtener ácido desoxicólico (DCA):

donde

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol.

Paso i)

El compuesto de partida, intermedio SM-a, puede obtenerse de (o prepararse fácilmente a partir de compuestos obtenidos a partir de) productos de fermentación de Mycobacterium fortuitum en presencia de una fuente de carbono apropiada. Por ejemplo, el documento US 4,029,549 muestra la producción de ácido 9a-OH BN, alcohol 9a-OH BN y éster metílico de 9a-OH BN mediante la fermentación del microorganismo Mycobacterium fortuitum NRRL B-8119 en presencia de ya sea sitosterol (ejemplo 2) o colesterol, estigmasterol o campesterol (ejemplo 3). La purificación y aislamiento del ácido 9a-OH BN se describe en el ejemplo 5 del documento US 4,029,549.

En consecuencia, los pasos i) a vii) descritos en la "Ruta sintética A" pueden ir precedidos por un paso que comprende cultivar un microorganismo productor de ácido 9a-OH BN en un medio nutritivo acuoso en condiciones aeróbicas en presencia de un fuente de carbono. Esto se aplica mutatis mutandis a las otras rutas sintéticas descritas en el presente documento, que incluyen la "ruta sintética C", la "ruta sintética D", la "ruta sintética E" y la "ruta sintética F".

El microorganismo productor de ácido 9a-OH BN puede seleccionarse del grupo que consiste en Arthrobacter, Bacillus, Brevibacterium, Corynebacterium, Microbacterium, Nocardia, Proaminobacter, Serratia, Streptomyces y Mycobacterium. En una realización preferida de la invención, el microorganismo productor de ácido 9a-OH BN es Mycobacterium, en particular Mycobacterium fortuitum. En la realización más preferida de la invención, el microorganismo productor de ácido 9a-OH BN es Mycobacterium fortuitum NRRL B-8119.

La fuente de carbono puede ser un esteroide, tal como colesterol, estigmasterol, campesterol y sitosterol, preferiblemente sitosterol.

Como se entenderá, el ácido 9a-OH BN, el alcohol 9a-OH BN y el éster metílico de 9a-OH BN pueden, si es necesario, convertirse fácilmente en compuestos de fórmula general SM-a mediante métodos estándar conocidos por el experto en química orgánica.

Paso ii)

El paso ii) implica reducir el compuesto de fórmula general SM-a para obtener un intermedio de fórmula general Int A1. La reacción se lleva a cabo típicamente mediante hidrogenación de SM-a en presencia de paladio sobre carbón vegetal (Pd / C) a una temperatura de 50-90 °C, preferiblemente alrededor de 70 °C, durante 1-24 horas, preferiblemente 8-16 horas. También se pueden emplear otros catalizadores de metales de transición, tales como Ni o Rh.

Si R³es H, la reacción se lleva a cabo preferiblemente en un disolvente aprótico polar, como N-metilpirrolidona, tetrahidrofurano (THF), acetato de etilo (EtoAc), acetona, dimetilformamida (DMF), acetonitrilo o dimetilsulfóxido ( DMSO). En una realización preferida, el disolvente aprótico polar es DMF.

Si R³es un grupo alquilo C1-C6, la reacción se lleva a cabo en el alcohol correspondiente, es decir, el disolvente es un alcanol C1-C6. En una realización preferida de la invención, R³es metilo y el disolvente es metanol.

Paso iii)

El paso iii) implica convertir el intermedio de fórmula general Int A1 para obtener un intermedio de fórmula general Int A2. El experto en la materia conocerá los agentes oxidantes adecuados, y los ejemplos incluyen óxido de cromo (CrO3) y ácidos fuertes, como HI, HBr, HCIO⁴, HCl, HCIO³, H²SO⁴, HNO³, preferiblemente HCl o H²SO⁴, en particular H²SO⁴. La reacción se lleva a cabo típicamente en un disolvente no polar, como diclorometano (DCM), a una temperatura entre 0 y 90 °C.

Paso iv)

El paso iv) implica reducir el intermedio de fórmula general Int A2 para obtener un intermedio de fórmula general Int A3. El experto en la materia conocerá los agentes reductores adecuados capaces de reducir una cetona a un alcohol secundario. Preferiblemente, el agente reductor es un hidruro metálico, tal como LiAlH⁴, NaBH4, LiBH4 o LiAIH (OtBu)3, en particular LiAIH(OtBu)3.

La reacción se lleva a cabo típicamente en un disolvente aprótico polar, como N-metilpirrolidona, tetrahidrofurano (THF), acetato de etilo (EtOAc), acetona, dimetilformamida (DMF), acetonitrilo o dimetilsulfóxido (DMSO), en particular THF, a una temperatura entre 0 y 20 °C.

Paso v)

El paso v) implica oxidar el intermedio de fórmula general Int A3 para obtener un intermedio de fórmula general Int A5. La persona experta conocerá los agentes oxidantes adecuados para realizar una oxidación alílica, y un ejemplo preferido incluye óxido de cromo (CrO3). Otros agentes oxidantes adecuados incluyen hidroperóxido de terc-butilo (t-BuO²H), NaOCl, SeO², clorocromato de piridinio (PCC), BiCb y V²O⁵. La reacción se lleva a cabo típicamente en un disolvente polar, como AcOH, a una temperatura entre 0 y 90 °C.

Paso vi)

El paso ii) implica reducir el intermedio de fórmula general Int A5 para obtener un intermedio de fórmula general Int A6. La reacción se lleva a cabo típicamente mediante hidrogenación de Int A5 en presencia de paladio sobre carbón vegetal (Pd / C) a una temperatura de 50-90 °C, preferiblemente alrededor de 70 °C, durante 1-24 horas, preferiblemente 8-16 horas. También se pueden emplear otros catalizadores de metales de transición, tales como Ni o Rh.

La reacción se lleva a cabo preferiblemente en un disolvente aprótico polar, tal como N-metilpirrolidona, tetrahidrofurano (THF), acetato de etilo (EtOAc), acetona, dimetilformamida (DMF), acetonitrilo o dimetilsulfóxido (DMSO). En una realización preferida, el disolvente aprótico polar es EtOAc.

Paso viii)

El paso viii) implica reducir el intermedio de fórmula general Int A7 para obtener un intermedio de fórmula general Int A8. La persona experta conocerá agentes reductores adecuados capaces de reducir un ácido carboxílico o un éster del mismo a un alcohol primario. Preferiblemente, el agente reductor es un hidruro metálico, tal como LiAlH4, NaBH4, LiBH4 o Li-AlH (OtBu)3, en particular LiAl H⁴.

La reacción se lleva a cabo típicamente en un disolvente aprótico polar, como N-metilpirrolidona, tetrahidrofurano (THF), acetato de etilo (EtOAc), acetona, dimetilformamida (DMF), acetonitrilo o dimetilsulfóxido (DMSO), en particular THF, a una temperatura entre 0 y 50 °C.

Debe observarse que es posible alargar la cadena carbonada del intermedio de fórmula general Int A7 directamente para obtener un intermedio de fórmula general Int B2 de una manera similar a la descrita en el paso ix) infra. Esto puede realizarse mediante una "reacción de Reformatsky", es decir, haciendo reaccionar Int A7 con Br-CH²-COOR²en presencia de Zn en un disolvente adecuado.

Paso ix)

El paso ix) implica alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int A8 para obtener DCA. Son posibles diferentes rutas sintéticas para alargar la cadena carbonada de Int A8 para obtener DCA:

Una ruta posible para alargar la cadena carbonada de Int A8 para obtener DCA comprende los pasos ix-a) y ix-b): ix-a) halogenación del compuesto de fórmula general Int A8 para obtener un intermedio de fórmula general Int A9:

donde X es halógeno, preferiblemente Cl, Br o I, en particular Br,

acilar opcionalmente Int A9 con un ácido dicarboxílico o un derivado de ácido dicarboxílico para obtener Int A9a.

La acilación del alcohol en Int A9 se puede lograr de varias formas. Por ejemplo, Int A9 puede hacerse reaccionar con un haluro de acilo, un anhídrido, un éster o condensarse con un ácido carboxílico libre. El Int A9 alternativo se puede acoplar con el ácido carboxílico usando como reactivo de acoplamiento adecuado conocido en la técnica tal como DCC, DiC, EDACHCl, HATU, TBTU, BOP, PyBOP. El acoplamiento se puede realizar en presencia de base.

ix-b) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int A9 para obtener DCA:

La halogenación de alcoholes primarios es bien conocida por el experto en química orgánica y puede conseguirse de diversas formas. Por ejemplo, el compuesto de fórmula general Int A8 puede tratarse con HX, donde X es Cl, Br o I, preferiblemente HBr. Alternativamente, el compuesto de fórmula general Int A8 puede tratarse con CX⁴y trifenilfosfina (PPh3), donde X es Cl, Br o I, preferiblemente Br. En una realización preferida de la invención, Int A9 se obtiene tratando Int A8 con CBr4 y PPh3.

El alargamiento de la cadena carbonada de Int A9 para obtener DCA se puede llevar a cabo usando la denominada "síntesis de éster malónico" (véase Morrison y Boyd, Organic Chemistry, 5a edición, 1987, págs. 1060-1063). En una realización de la invención, Int A9 se trata con un éster de malonato, preferiblemente malonato de dietilo, en presencia de una base, preferiblemente NaH, y posteriormente se acidifica para obtener DCA.

Otra posible ruta para alargar la cadena carbonada de Int A8 para obtener DCA comprende los pasos ix-c) a ix-e):

ix-c) oxidar el compuesto de fórmula general Int A8 para obtener un intermedio de la fórmula general fórmula Int B1: ix-d) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int B1 para obtener un intermedio de fórmula general Int B2:

donde R²es un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado,

ix-e) convertir el compuesto de fórmula general Int B2 en DCA.

Con respecto al paso ix-c), la oxidación de alcoholes primarios en aldehídos es bien conocida por el experto en química orgánica y se puede lograr de varias formas. Por ejemplo, mediante reactivos a base de cromo, como el reactivo de Collins, PDC o PCC, o mediante TEMPO catalítico en presencia de NaOCI.

Alargar la cadena carbonada de Int B1 a Int B2 (paso ix-d)) se puede llevar a cabo usando la denominada "reacción de Wittig" (véase Morrison y Boyd, Organic Chemistry, 5a edición, 1987, págs. 920-921). Alternativamente, el paso de alargamiento de carbono se puede realizar mediante "olefinación de Horner-Emmons", mediante "olefinación de Peterson" o mediante una "reacción de Reformatsky", es decir, haciendo reaccionar Int B1 con Br-CH²-COOR²en presencia de Zn en un disolvente adecuado.

La conversión de Int B2 en DCA (paso ix-e)) se puede realizar mediante hidrogenación de Int B2 seguida de hidrólisis alcalina, o viceversa.

Paso x)

El paso opcional x) implica convertir DCA en una sal farmacéuticamente aceptable de DCA.

Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales con una base, por ejemplo, sales con una base inorgánica, como una sal de sodio, una sal de potasio, una sal de calcio, una sal de magnesio y similares, o sales con una base orgánica, como una sal de piperidina, una sal de morfolina, una sal de pirrolidona, una sal de arginina, una sal de lisina y similares. En una realización preferida de la invención, la sal farmacéuticamente aceptable es la sal de sodio. En una realización preferida de la invención, la sal sódica de DCA se obtiene haciendo reaccionar DCA con NaOH. Ruta sintética A '

En otra realización preferida de la invención, el proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, comprende los siguientes pasos:

i) proporcionar un compuesto de fórmula general

iv) reducir el intermedio de fórmula general Int A6 en un intermedio de fórmula general Int A7:

v) reducir el compuesto de fórmula general Int A7 en un intermedio de fórmula general Int A8:

vi) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int A8 para obtener ácido desoxicólico (DCA):

donde

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol.

Los pasos ii) a vii) anteriores corresponden exactamente a los pasos v) a x) discutidos en relación con la "Ruta sintética A". Los comentarios previstos para los pasos v) a x) en relación con la "'Ruta sintética A"', por lo tanto, se aplican mutatis mutandis a los pasos ii) a vii) de la "Ruta sintética A".

Ruta sintética C

En otro ejemplo interesante de la divulgación, que no forma parte de la invención actualmente reivindicada, el proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, comprende las siguientes pasos:

i) proporcionar un compuesto de fórmula general SM-a:

iv) oxidar el intermedio de fórmula general Int 2A en un intermedio de fórmula general Int C1:

v) reducir el intermedio de fórmula general Int C1 en un intermedio de fórmula general Int C4:

vi) reducir el compuesto de fórmula general Int C4 en un intermedio de fórmula general Int A8:

vii) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int A8 para obtener ácido desoxicólico (DCA):

viii) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

donde

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol.

donde

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado.

Ruta sintética D

En otro ejemplo interesante más de la divulgación, que no forma parte de la invención actualmente reivindicada, el proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, comprende las siguientes pasos:

i) proporcionar un compuesto de fórmula general SM-a:

ii) reducir el compuesto de fórmula general SM-a para obtener un intermedio de fórmula general Int A1: iii) convertir el intermedio de la fórmula general A1 en un intermedio de la fórmula general D1:

iv) oxidar el intermedio de fórmula general Int D1 en un intermedio de fórmula general Int D2:

v) reducir el intermedio de fórmula general Int D2 en un intermedio de fórmula general Int D3:

vi) oxidar el intermedio de fórmula general Int D3 en un intermedio de fórmula general Int D5: vii) reducir el intermedio de fórmula general Int D5 en un intermedio de fórmula general Int D6:

vüi) reducir el intermedio de fórmula general Int D6 en un intermedio de fórmula general Int D7:

ix) hidrolizar el compuesto de fórmula general Int D7 en un intermedio de fórmula general Int D9:

x) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int D9 para obtener un ácido desoxicólico (DCA):

xi) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol;

y X es un átomo de halógeno.

Ruta sintética D'

i) proporcionar un compuesto de fórmula general Int D3:

ii) oxidar el intermedio de fórmula general Int D3 en un intermedio de fórmula general Int D5:

iii) reducir el intermedio de fórmula general Int D5 en un intermedio de fórmula general Int D6:

iv) reducir el intermedio de fórmula general Int D6 en un intermedio de fórmula general Int D7:

v) hidrolizar el compuesto de fórmula general Int D7 en un intermedio de fórmula general Int D9:

vi) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int D9 para obtener un ácido desoxicólico (DCA):

donde

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol;

y X es un átomo de halógeno.

Ruta sintética E

i) proporcionar un compuesto de fórmula general SM-a:

ii) reducir el compuesto de fórmula general SM-a para obtener un intermedio de fórmula general SM-b:

iii) proteger el grupo alcohol en la posición 22 para obtener un intermedio de fórmula general Int E1:

iv) convertir el compuesto de fórmula general Int E1 para obtener un intermedio de fórmula general Int E2:

v) deshidratar el intermedio de fórmula general Int E2 en un intermedio de fórmula general Int E3:

vi) reducir el intermedio de fórmula general Int E3 en un intermedio de fórmula general Int E5:

vii) oxidar el intermedio de fórmula general Int E5 en un intermedio de fórmula general Int E6:

viii) reducir el intermedio de fórmula general Int E6 en un intermedio de fórmula general Int E7:

ix) reducir el intermedio de fórmula general Int E7 en un intermedio de fórmula general Int E9

x) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int E9 para obtener un ácido desoxicólico (DCA):

x) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol; y

P es un grupo de protección de alcohol.

Ruta sintética E'

i) proporcionar un compuesto de fórmula general Int E3:

ii) reducir el intermedio de fórmula general Int E3 en un intermedio de fórmula general Int E5:

iii) oxidar el intermedio de fórmula general Int E5 en un intermedio de fórmula general Int E6:

iv) reducir el intermedio de fórmula general Int E6 en un intermedio de fórmula general Int E7:

v) reducir el intermedio de fórmula general Int E7 en un intermedio de fórmula general Int E9

vi) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int E9 para obtener un ácido desoxicólico (DCA):

vii) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol; y

P es un grupo de protección de alcohol.

Ruta sintética F

i) proporcionar un compuesto de fórmula general SM-a:

iv) convertir el compuesto de fórmula general Int E1 en un intermedio de fórmula general Int F2:

v) reducir el intermedio de fórmula general Int F2 en un intermedio de fórmula general Int E3:

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol; y

P es un grupo de protección de alcohol.

Los compuestos intermedios

El compuesto de partida - el intermedio de la fórmula general SM

En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general SM

donde

R¹es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

R²es un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado con la condición de que R²no sea CH³;

P es un grupo de protección de alcohol y

X es un átomo de halógeno.

En una realización preferida de la invención, Ri es COOR²o CH²X donde R²se selecciona del grupo que consiste en etilo, n-propilo e isopropilo, en particular etilo, y X se selecciona del grupo que consiste en Cl, Br y I, en particular Br. Por consiguiente, en una realización particularmente interesante de la invención, Ri es COOC²H⁵, y en otra realización particularmente interesante de la invención, R²es CH²Br.

Estos compuestos pueden obtenerse (o prepararse fácilmente a partir de compuestos obtenidos a partir de) productos de fermentación de Mycobacterium fortuitum en presencia de una fuente de carbono apropiada.

Por ejemplo, el documento US 4,029,549 muestra la producción de ácido 9a-OH BN, alcohol 9a-OH BN y éster metílico de 9a-OH BN mediante la fermentación del microorganismo Mycobacterium fortuitum NRRL B-8119 en presencia de ya sea sitosterol (ejemplo 2) o colesterol, estigmasterol o campesterol (ejemplo 3). La purificación y aislamiento del ácido 9a-OH BN se describe en el ejemplo 5 del documento US 4,029,549.

Por consiguiente, las pasos I) a VI) descritas en el presente documento pueden ir precedidas por un paso que comprende cultivar un microorganismo productor de ácido 9a-OH BN en un medio nutritivo acuoso en condiciones aeróbicas en presencia de un fuente de carbono.

El microorganismo productor de ácido 9a-OP BN puede seleccionarse del grupo que consiste en Arthrobacter, Bacillus, Brevibacterium, Corynebacterium, Microbacterium, Nocardia, Proaminobacter, Serratia, Streptomyces y Mycobacterium. En una realización preferida de la invención, el microorganismo productor de ácido 9a-OH BN es Mycobacterium, en particular Mycobacterium fortuitum. En la realización más preferida de la invención, el microorganismo productor de ácido 9a-OH BN es Mycobacterium fortuitum NRRL B-8119.

Como se entenderá, el ácido 9a-OH BN, el alcohol 9a-OH BN y el éster metílico de 9a-OH BN pueden, si es necesario, convertirse fácilmente en compuestos de fórmula general SM mediante métodos estándar conocidos por el experto en química orgánica.

El intermedio de la fórmula general INT 1

En otro aspecto más, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general INT 1

donde

R¹es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

R³ya sea P o R²; y

X es un átomo de halógeno.

En una realización preferida de la invención, R¹es COOR², CH²X o CH²OP donde R²es H o se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, n-propilo e isopropilo, en particular H o metilo, y X es seleccionados del grupo que consiste en Cl, Br e I, en particular Br.

En una realización más preferida de la invención, R¹es COOR², CH²X o CH²OP donde R²es H o metilo y X es Br. En una realización aún más preferida de la invención, R¹es COOR²donde R²es H o se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, n-propilo e isopropilo, en particular H o metilo, y X se selecciona del grupo que consiste en Cl, Br e I, en particular Br.

Por consiguiente, en una realización particularmente interesante de la invención, R¹es COOH o COOCH³y R³es H o CH³CO. Los ejemplos específicos incluyen realizaciones donde R¹es COOH y R³es H, donde R¹es COOCH³y R³es H, donde R¹es COOH y R³es CH³CO, y donde R¹es COOCH³y R³es CH³CO.

En otra realización muy preferida de la invención, R¹es CH²X y R³es H o CH³CO, y X se selecciona del grupo que consiste en Cl, Br e I, en particular Br. Los ejemplos específicos incluyen realizaciones en las que R¹es CH²Br y R³es H, y donde R¹es CH²Br y R³es CH³CO.

En una realización aún más preferida de la invención, R¹es CH²OP y R³es H o CH³CO, donde P se selecciona del grupo que consiste en trimetilsililéter (TMS), trietilsililéter (TES), triisopropilsililéter (TIPS), terc-butildimetilsilil éter (TBS, TBDm S), terc-butildifenilsilil éter (TBDPS), acetil (Ac, COCH³), benzoil (Bz), bencil éter (Bn), 4-metoxibencil éter (PMB), 2-naftilmetil éter (Nap), metoximetil acetal (MOM), 2-metoxietoxi-metil éter (MEM), etoxietil acetal (EE), metoxipropil acetal (MOP), benciloximetil acetal (BOM), tetrahidropiranil acetal (THP), carbonato de 2,2,2 -tricloroetilo (Troc), metiléter, dimetoxitritilo (DMT), metoxitritilo (MMT), metiltiometiléter, pivaloílo (Piv), tetrahidropiranilo (THP), trifenilmetilo (tritilo, Tr) y tosilo (Ts), en particular Ac, TBDMS y Ts. Por tanto, realizaciones específicas incluyen ejemplos en los que R¹es CH²OAC y R³es H, donde R¹es CH²OAC y R³es CH³CO, donde R¹es CH²OTBDMS y R³es H, donde R¹es CH²OTBDMS y R³es CH³CO, donde R¹es CH²OTs y R³es H , y donde R¹es CH²OTs y R³es CH³CO.

Los compuestos de fórmula general INT 1 pueden prepararse fácilmente mediante la reducción de compuestos de fórmula general SM mediante métodos bien conocidos por el experto en química orgánica, como se describe en el presente documento.

El intermedio de la fórmula general INT 2

En otro aspecto más, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general INT 2

donde

R¹es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol; y

X es un átomo de halógeno.

En una realización preferida de la invención, R¹es COOR², CH²X o o CH²OP donde R²es H o se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, n-propilo e isopropilo, en particular metilo, y X es seleccionados del grupo que consiste en Cl, Br e I, en particular Br.

En una realización más preferida de la invención, Ri es COOR², CH²X o CH²OP donde R²es metilo y X es Br.

Por consiguiente, en una realización particularmente interesante de la invención, Ri es COOCH³. En otra realización particularmente interesante de la invención, Ri es CH²Br.

En otra realización muy preferida de la invención, Ri es CH²OP, donde P se selecciona del grupo que consiste en trimetilsilil éter (TMS), trietilsilil éter (TES), triisopropilsilil éter (TIPS), terc-butildimetilsilil éter (TBS, TBDMS), trecbutildifenilsilil éter (TBDPS), acetilo (Ac, COCH³), benzoil (Bz), bencil éter (Bn), 4-metoxibencil éter (PMB), 2-naftilmetil éter (Nap), metoximetil acetal (MOM), 2-metoxietoxi-metil éter (MEM), etoxietil acetal (EE), metoxipropil acetal (MOP), benciloximetil acetal (BOM), tetrahidropiranil acetal (THP), 2,2,2-tricloro-etil carbonato (Troc) , metil éter, dimetoxitritilo (DMT), metoxitritilo (MMT), metiltiometil éter, pivaloílo (Piv), tetrahidropiranilo (THP), trifenilmetilo (tritilo, Tr) y tosilo (Ts), en particular Ac, TBDMS y Ts. Por tanto, las realizaciones específicas incluyen ejemplos en los que Ri es CH²OAc, donde Ri es CH²OTBDMS y donde Ri es CH²OTs. Los compuestos de fórmula general INT 2 pueden prepararse fácilmente mediante la oxidación de compuestos de fórmula general INT mediante métodos bien conocidos por el experto en química orgánica, como se describe en el presente documento.

El intermedio de la fórmula general INT 3

En un aspecto incluso adicional, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general INT 3

donde

R¹es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

R³es P o R²; y

X es un átomo de halógeno.

En una realización preferida de la invención, Ri es COOR², CH²X o CH²OP donde R²se selecciona del grupo que consiste en etilo, n-propilo e isopropilo, en particular etilo, y X se selecciona del grupo que consiste en Cl, Br e I, en particular Br.

En una realización interesante de la invención, Ri es COOCH³y R³es H.

En otra realización interesante de la invención, Ri es CH²X, donde X se selecciona del grupo que consiste en Cl, Br e I, y R³es H o Ac. Son ejemplos particulares donde X es Br y R³es H, y donde X es Br y R³es Ac. En otra realización interesante de la invención, Ri es CH²OP y R³es H o CH³CO, donde P se selecciona del grupo que consiste en trimetilsililéter (TMS), trietilsililéter (TES), triisopropilsililéter (TIPS), terc-butildimetilsilil éter (t Bs , TBDMS), tercbutildifenilsilil éter (t Bd PS), acetil (Ac, COCH³), benzoil (Bz), bencil éter (Bn), 4-metoxibencil éter (Pm B), 2-naftilmetil éter (Nap), metoximetil acetal (MOM), 2-metoxietoxi-metil éter (MEM), etoxietil acetal (EE), metoxipropil acetal (MOP), benciloximetil acetal (BOM), tetrahidropiranil acetal (THP), carbonato de 2,2,2 -tricloroetilo (Troc), metiléter, dimetoxitritilo (DMT), metoxitritilo (MMT), metiltiometiléter, pivaloílo (Piv), tetrahidropiranilo (THP), trifenilmetilo (tritilo, Tr) y tosilo (Ts), en particular Ac, TBDMS y Ts. Por tanto, realizaciones específicas incluyen ejemplos en los que Ri es CH²OAC y R³es H, donde Ri es CH²OAC y R³es CH³CO, donde Ri es CH²OTBDMS y R³es H, donde Ri es CH²OTBDMS y R³es CH³CO, donde Ri es CH²OTs y R³es H , y donde Ri es CH²OTs y R³es CH³CO.

Los compuestos de fórmula general INT 3 pueden prepararse fácilmente mediante la reducción de compuestos de fórmula general INT 2 mediante métodos bien conocidos por el experto en química orgánica, como se describe en el presente documento.

Como se entenderá, los intermedios descritos en el presente documento pueden usarse para la preparación de DCA y sus sales farmacéuticamente aceptables. Dado que las rutas sintéticas descritas en este documento permiten la introducción de un grupo -OH en la posición 12, se contempla que los mismos intermedios también serán adecuados para preparar otros ácidos biliares, que incluyen un grupo -OH en la posición 7. Los ejemplos específicos de tales sales biliares incluyen ácido cólico, ácido glicocólico, ácido taurocólico o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

De los siguientes ejemplos, los ejemplos 1, 2 y 4-35 se relacionan con los pasos del proceso que se especifican en las reivindicaciones de proceso o que, aunque no se identifican específicamente como pasos del proceso en las presentes reivindicaciones, podrían sin embargo incorporarse en la totalidad de los protocolos de síntesis de los mismos. El ejemplo 3 está presente con fines comparativos.

Ejemplos

Ejemplo 1

Se suspendieron 40 g de compuesto SM1 (106,80 mmol) en 150 ml de DMF, luego se añadieron 2,77 g de Pd / C seco al 10%. La mezcla de reacción se agitó a 70 °C y se hidrogenó (354637,5 Pa, 3,5 atm) durante la noche. La mezcla se separó por filtración a través de Celite®. Luego, la mezcla se vertió sobre agua formando un precipitado. El precipitado se filtró como un sólido blanco, se lavó con agua y se secó al vacío, produciendo así 39,3 g del compuesto A1.

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 53,56 (s, 3 H); 2,30 (m, 1 H); 1,10 (d, 3 H); 0,87 (s, 3 H); 0,62 (s, 3 H).

Ejemplo 2

Se suspendieron 20 g del compuesto SM1 (53,40 mmol) en 150 ml de MeOH, luego se añadieron 1,4 g de Pd / C seco al 10%. La mezcla de reacción se agitó a 70 °C y se hidrogenó (101325 Pa, 1 atm) durante la noche. Se añadió 1,0 g de p-TsOH (10% molar, 5,3 mmol) y se agitó durante 8 h. La mezcla se filtró a través de Celite®. El disolvente se evaporó al vacío. El sólido se recristalizó en 60 ml de EtOH. El sólido se separó por filtración y se secó al vacío, produciendo 18,8 g del compuesto A1.1.

Ejemplo 3

Se mezclaron LiA liH (1,88 g, 49,63 mmol, 1,3 eq.) y THF (20 ml) en una atmosfera inerte. Se anadio gota a gota una mezcla de A1.1 (14,0 g) y 40 ml de THF. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. Después, la mezcla se enfrió a 0-5 °C y se inactivo mediante la adición gota a gota de una solución acuosa de Na2SO4 • I ⁰H²O (16,20 g) y THF (50 ml). Se filtró el precipitado y se evaporó el disolvente a presión reducida. El sólido se recristalizó en 150 ml de EtOH. El sólido se separó por filtración y se secó al vacío, produciendo así 10,15 g de D1.

Ejemplo 4

Se disolvieron 39,3 g de A1 (104,37 mmol) en DCM (100 ml) y se agitó a temperatura ambiente. Se anadió ácido sulfúrico (9,29 g, 0,9 eqv) a 10 °C, luego la mezcla se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se trató lavando con agua y NaHCO3 y se separó la capa orgánica. La capa orgánica se concentró seguido de cromatografía en columna para producir 28,8 g de A2. RMN 1H (400 MHz, CDCla): 55,50 (s, 1 H); 3,57 (s, 3 H); 1,15 (d, 3 H); 1,09 (s, 3 H); 0,59 (s, 3 H).

Ejemplo 5

Se disolvieron 28,6 g de A2 (79,87 mmol) y se agitó en THF (100 ml) bajo atmósfera inerte. La solución se enfrió a 0-5 °C y se añadió lentamente LiAlH (OtBu)³(22,34 g, 1,1 eqv) (reacción exotérmica). La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. La mezcla se enfrió a 0-5 °C y se hidrolizó lentamente con una solución de HCl 1M. La fase acuosa se extrajo con EtOAc y la fase orgánica se lavó con una solución de NaHCO3. El disolvente se evaporó a presión reducida, produciendo 27,62 g de A3. RMN 1H (400 MHz, CDCb): 50,59 (s, 3H); 1,05 (s, 3H); 1,18 (d, 3H); 2,43 (m, 2H); 3,65 (s, 3H); 3,65 (m, 1H); 5,32 (dd, 1H).

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 55,29 (s, 1 H); 3,57 (s, 3 H); 3,39 (m, 1 H); 1,11 (d, 3 H); 1,01 (s, 3 H); 0,55 (s, 3 H).

Ejemplo 6

Se disolvieron 27,62 g (76,61 mmol) (10 g) de A3 en DCM (70 ml) a temperatura ambiente. Luego, se añadieron trietilamina 50 ml (6,66 eqv), anhídrido acético 8,85 g (3,33 eq) y DMAP (3,40 g), manteniendo la temperatura por debajo de 10 °C. La mezcla se agitó hasta que se completó la reacción. La fase orgánica se concentró bajo presión reducida y el sólido se suspendió en 60 mL de d Cm y luego se lavó con una solución de HCl 1M. El disolvente se evaporó bajo presión reducida produciendo así 32,29 g de A4. RMN 1H (400 MHz, CDCla): 50,58 (s, 3 H); 1,04 (s, 3 H); 1,16 (d, 3 H); 1,99 (s, 3 H); 2,41 (m, 2 H); 3,63 (s, 3 H); 4,71 (m, 1 H); 5,31 (dd, 1 H).

RMN 1H (400 MHz, CDCls): 55,31 (s, 1 H); 3,60 (s, 3 H); 2,00 (m, 3 H); 1,17 (d, 3 H); 0,59 (s, 3 H).

Ejemplo 7

Se suspendieron 27 g del compuesto A4 (64,5 mmol) en 300 ml de AcOH y luego se añadió CrO3 anhidro (27,73 g, 4,30 eqv). La suspensión se calentó a 60 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 0,5 h hasta que se completó la reacción. Luego, la mezcla se vertió sobre 250 mL de agua y se formó un precipitado. La fase orgánica se lavó con agua. La operación se repitió dos veces más. La fase orgánica se concentró hasta obtener un residuo aceitoso. El residuo se purificó sobre gel de sílice produciendo 13,05 g de A5 puro.

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 50,84 (s, 3 H); 1,17 (s, 3 H); 1,30 (d, 3 H); 1,98 (s, 3 H); 3,63 (s, 3 H); 4,72 (m, 1 H); 5,72 (s, 1 H).

Ejemplo 8

Se disolvieron 11 g de A5 (28,31 mmol) en 65 ml de AcOEt seguido de la adición de 2,75 g de Pd seco / C al 10% (25% en peso). La mezcla de reacción se agitó a 70 °C y se hidrogenó (415432,5 Pa, 4,1 atm) durante la noche. La mezcla se filtró a través de Celite® y el disolvente se evaporó al vacío, produciendo así 11,02 g de A6 (un sólido blanco). RMN 1H (400 MHz, CDCla): 50,97 (s, 3 H); 1,00 (s, 3 H); 1,15 (d, 3 H); 2,00 (s, 3 H); 2,46 (m, 2 H); 3,63 (s, 3 H); 4,68 (m, 1 H).

Ejemplo 9

Se disolvieron 11,02 g de A6 (26,30 mmol) y se agitó en THF (40 ml) bajo una atmósfera inerte. La solución se enfrió a 0 5 °C. Se añadió gota a gota LiAlH (OtBu)3 (1,5 eqv, 10,0 g, 39,45 mmol) (reacción exotérmica). La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. La mezcla se enfrió a 0-5 °C y luego se inactivó añadiendo una solución acuosa de HCl 1M. La fase acuosa se extrajo con EtOAc y la fase orgánica se lavó con una solución de NaHCO3. El disolvente se evaporó bajo presión reducida produciendo así 11,16 g de A7. RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 50,66 (s, 3 H); 0,89 (s, 3 H); 1,20 (d, 3 H); 2,00 (s, 3 H); 3,62 (s, 3 H); 3,92 (m, 1 H); 4,72 (m, 1 H).

Ejemplo 10

Se disolvieron 3,00 g (7,13 mmol) de A7 y se agitó en una mezcla de THF (30 ml) y MeOH (30 ml) bajo una atmósfera inerte a temperatura ambiente. Se añadió LiOH (4 M, 30 ml). La solución se calentó a 60 °C. La mezcla se agitó hasta que se completó la reacción (6 h). La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. El disolvente se evaporó y se inactivó añadiendo una solución acuosa de HCl 2N hasta pH ácido. El precipitado se separó por filtración en forma de un sólido amarillo pálido, se lavó con agua y EtOAc, y luego se secó al vacío produciendo 2,53 g de A7A.

Ejemplo 11

Se disolvieron 0,3 g de A7 (0,71 mmol) y se agitó en THF seco (7 ml) bajo una atmósfera inerte. La solución se enfrió a 0-5 °C. Se añadió gota a gota LiAlH4 (0,06 g, 1,49 mmol) (reacción exotérmica). La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. La mezcla se enfrió a 0-5 °C y se inactivó mediante la adición de Na2SO4 • ^{1 0}H²O. El precipitado se filtró y se lavó con THF. El disolvente se evaporó a presión reducida y el sólido obtenido se lavó con EtOAc, produciendo así 0,198 g de A8.

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 83,95 (t, J = 2,8 Hz, 1 H), 3,56 (dd, J = 10,5, 3,4 Hz, 1 H), 3,50 (td, J = 11,1, 5,5 Hz, 1 H), 3,21 (dd, J = 10,5, 7,7 Hz, 1 H), 1,95 - 1,70 (m, 6 H), 1,66 - 1,22 (m, 16 H), 1,19 - 1,10 (m, 2 H), 1,07 (d, J = 6,6 Hz, 3 H), 1,02 - 0,94 (m, 1 H), 0,92 (s, 3 H), 0,72 (s, 3 H).

Ejemplo 12

Se disolvieron 0,025 g de A8 (0,078 mmol) y se agitó en DCM (2 ml). Se añadió CBr4 (2,4 eqv, 0,062 g, 0,09 mmol) y trifenilfosfina (PPh3, 2,5 eqv, 0,051 g, 2,5 mmol). La solución se calentó a reflujo. La mezcla se agitó hasta que se completó la reacción. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. El residuo se purificó sobre gel de sílice produciendo 0,05 g de A9.

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 83.93 (t, J = 2.8 Hz, 1H), 3.63 - 3.52 (m, 1H), 3.48 (dt, J = 5.9, 2.9 Hz, 1H), 3.29 (dd, J = 9.7, 6.5 Hz, 1H), 1,90 - 1,15 (m, 23 H), 1,11 (d, J = 6,5 Hz, 3 H), 0,94 (ddd, J = 12,6, 9,9, 2,5 Hz, 1 H), 0,87 (s, 3 H), 0,67 (s, 3 H) .

Ejemplo 13

Se disolvieron 0,5 g de NaH al 60% (12,5 mmol) y se agitó en DMF seco (10 ml) en una atmósfera inerte. Se añadió gota a gota malonato de dietilo (2,0 g, 12,48 mmol) disuelto en 3,0 ml de DMF. La solución se calentó y se agitó hasta que la mezcla se volvió transparente. La mezcla se enfrió a 40 °C. Se añadió A9 (5,12 g, 12,4 mmol) disuelto en 3,0 ml de DMF. La solución se calentó a 60 °C. La mezcla se inactivó mediante la adición de agua (15 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc. El disolvente se evaporó a presión reducida y el residuo se suspendió en una solución acuosa de KOH 2,8 M (10,0 ml). La solución se calentó a reflujo. Se añadió agua (10 ml) y el disolvente orgánico se evaporó a presión reducida. La fase acuosa se acidificó añadiendo HCl 2 N y se extrajo con EtOAc. El disolvente se evaporó a presión reducida y el residuo se suspendió en una mezcla de dioxano (5 ml) y HCl 12 N (10 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante 24 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas se mezclaron y se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó sobre gel de sílice produciendo así 3,1 g de DCA.

Ejemplo 14

Se disolvieron 0,42 g de B2.1 (0,92 mmol) y se agitó en THF (8 ml). Se añadió agua (8 ml) y se agitó a temperatura ambiente. Se añadió una solución de LiOH 4M (2,0 ml). La mezcla se calentó a 50 °C y se agitó durante la noche. La mezcla se vertió sobre agua. La fase acuosa se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se lavó con una solución acuosa de HCl 2N. La fase acuosa se extrajo con EtOAc y las capas orgánicas combinadas se evaporaron a presión reducida, produciendo así 0,38 g de DCA. RMN 1H (400 MHz, CDCla): 83,94 (t, J = 2,7 Hz, 1 H), 3,58 - 3,45 (m, 1 H), 2,41 - 2,11 (m, 2 H), 1,99 - 1,71 (m, 7 H), 1,67 - 1,04 (m, 19 H), 0 , 99 (d, J = 6,4 Hz, 3 H), 0,92 (s, 3 H), 0,70 (s, 3 H).

Ejemplo 15

Se disolvieron 10,5 g de A6 (24,0 mmol) y se agitaron en THF (137 ml) bajo atmósfera inerte. La solución se enfrió a -40 °C. Se añadió gota a gota LiAl (OtBu)3H (1,1 eq, 6,6 g, 26,0 mmol) (reacción exotérmica). La mezcla se agitó a -20 °C hasta que se completó la reacción. El disolvente se evaporó a presión reducida y luego la mezcla se enfrió a 0/5 °C. El sólido se separó por filtración, se lavó con agua y se secó, proporcionando 10,55 g del compuesto A7.

Ejemplo 16

Se disolvieron 1,6 g de NaH al 60% (39,5 mmol) y se agitaron en DMF seco (0,5 ml) en atmósfera inerte. Se añadió gota a gota malonato de dietilo (6,2 ml, 4,02 mmol) disuelto en 0,5 ml de DMF. Se añadió gota a gota una suspensión del intermedio esteroide (6,1 g, 9,8 mmol) en 1,0 ml de DMF. La solución se calentó y se agitó a 60 °C. La mezcla se inactivó añadiendo agua (15 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc. El disolvente se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice.

Ejemplo 17

Se suspendió A11 (1,8 g, 4,12 mmol) en 108 ml de xiileno. La suspensión se calentó a reflujo. La mezcla se enfrió lentamente a 20/25 °C. Se añadieron agua (54 ml) y EtOAc (270 ml). La fase acuosa se enfrió a 10 °C y se acidificó añadiendo HCl 2N. La mezcla se agitó y el sólido se separó por filtración, se lavó con agua y se secó, proporcionando 1,04 g de ácido desoxicólico.

Ejemplo 18

Se disolvieron 4,00 g de A5 (9,6 mmol) y se agitó en MeOH (150 ml) bajo una atmósfera inerte a temperatura ambiente. Se añadió NaOH al 20% (40 ml, 22 mmoles). La solución se calentó a reflujo. La mezcla se agitó hasta que se completó la reacción (3 h). La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. El disolvente se evaporó y se inactivó añadiendo una solución acuosa de HCl 6N hasta pH ácido. El precipitado se separó por filtración como un sólido, se lavó con agua y EtOH y luego se secó al vacío produciendo 3,4 g (95%) de A5.1.1

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 = 0,57 (s, 3H); 0,81 (s, 3 H); 1,09 (d, J = 6 Hz, 3 H); 3,71 (m, 1 H).

Ejemplo 19

Se disolvieron 3,0 g de A7 (7,14 mmol) y se agito en THF (75 ml) bajo atmosfera inerte. La solución se enfrio a 0-5 °C y se añadió lentamente LiAlH⁴(1,1 g, 28,6 mmol) (reacción exotérmica). La mezcla se agitó a temperatura ambiente y luego se calentó a reflujo hasta que se completó la reacción. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se hidrolizó lentamente con una solución de agua (1,1 ml), NaOH (20%) 1,1 ml y agua (3,3 ml). El sólido blanco obtenido se separó por filtración y se lavó con THF (150 ml). La fase orgánica se secó con sulfato de magnesio anhidro. El disolvente se evaporó a presión reducida, produciendo 2,3 g (92%) de A⁸.

Ejemplo 20

Se suspendieron 0,2 g de compuesto A⁸(0,57 mmol) en una mezcla de DCM (6,0 ml) y ACN (6,0 ml) en atmósfera inerte y luego reactivo de periodinano de Dess-Martin (0,24 g, 0,57 mmol) y se añadió 4-óxido de 4-metilmorfolina (11 mg, 0,07 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. Luego, se añadió una solución de Na²S²O³(1 M, 50 mL). La fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 50 ml) y luego se lavó con salmuera. La fase orgánica se concentró hasta que se obtuvo un sólido, produciendo 0,25 g de A⁸.1.

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 59,7 (d, 1 H); 9,5 (d, 1 H); 3,6 (m, 1 H); 3,4 (sa, 1 H); 2,3 (qd, J = 9 Hz, 1 H).

Ejemplo 21

Se disolvieron 2,00 g de A7 (4,76 mmol) y se agitó en MeOH (100 ml) en atmósfera inerte a temperatura ambiente. Se añadió NaOH al 20% (20 ml). La solución se calentó a 80 °C. La mezcla se agitó hasta que se completó la reacción (3 h). La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. El disolvente se evaporó y la mezcla se inactivó añadiendo una solución acuosa de HCl ⁶N hasta pH ácido. El precipitado se separó por filtración como un sólido, se lavó con agua y MeOH y luego se secó al vacío produciendo 1,4 g (80%) de intermedio ácido.

Se disolvieron 9,0 g de compuesto ácido intermedio (25 mmol), DCC (6,2 g, 30 mmol), DMAP (3,7 g, 30 mmol) e hidrocloruro de N, O-dimetilhidroxilamina (4,9 g, 50 mmol) en DCM ( 250 ml) bajo atmósfera inerte. Se añadió Et³N (10 ml) y la suspensión se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. Luego, la fase orgánica se lavó con salmuera. La fase orgánica se concentró hasta obtener un sólido. El sólido se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt / Heptano), produciendo 5,9 g de A8.2.

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 53,9 (sa, 1H); 3,66 (s, 3 H); 3,61 (m, 1 H); 3,15 (s, 3 H); 2,4 (q, J = 9 Hz, 1 H).

Ejemplo 22

Se disolvieron 2,5 g de A8.2 (6,14 mmol) y se agitó en THF (25 ml) bajo atmósfera inerte. La solución se enfrió a 0-5 °C y se añadió lentamente (reacción exotérmica) a una solución de LiAlH4 (0,36 g, 9,2 mmol) en THF (75 ml). La mezcla se agitó a 0-5 °C hasta que se completó la reacción. La mezcla se hidrolizó lentamente con una solución de agua (0,25 ml), NaOH (20%) 0,25 ml y agua (0,75 ml). El sólido blanco obtenido se separó por filtración y se lavó con THF (100 ml). La fase orgánica se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna (AcOEt / Heptano), rendimiento 85% de A8.2.

Ejemplo 23

Se suspendieron 0,26 g de Zn (4,1 mmol) en THF bajo atmósfera inerte. Se añadió trimetilclorosilano (0,1 mmol). La suspensión se agitó en calentamiento de reflujo durante 1 hora. A continuación, se añadió una solución de 0,2 g de A8.1 (0,57 mmol) y 0,3 ml de bromoacetato de etilo (2,85 mmol) en THF (20 ml). La mezcla se agitó en calentamiento de reflujo hasta que se completó la reacción. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. El disolvente se evaporó y la mezcla se inactivó añadiendo una solución acuosa saturada de NH4Cl (50 ml). Se añadió EtOAc (75 ml). La fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de NaCl. La fase orgánica se concentró y el sólido se purificó mediante cromatografía en columna (EtOAc / Heptano).

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 54,35 (dt, J = 9 Hz, J = 3 Hz, 1H); 4,55 (q, J = 7,5 Hz, 2 H); 3,35 (m, 1H); 2,7 (dd, J = 17 Hz, J = 9 Hz, 1H); 2,75 (dd, J = 17 Hz, J = 3 Hz, 1H).

Ejemplo 24

Se disolvieron 0,41 g de EtONa (0,60 mmol) y se agitó en EtOH (2 ml) bajo una atmósfera inerte y se enfrió a 0 °C. Se añadió a la mezcla malonato de dietilo (0,97 g, 0,60 mmol). La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se añadió A9 (0,20 g, 0,48 mmol). La solución se calentó a 90 °C. La mezcla se inactivó mediante la adición de agua (5 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó sobre gel de sílice produciendo de ese modo 0,12 g de A10.

Ejemplo 25

Se disolvieron 0,15 g de NaH al 60% (3,87 mmol) y se agitó en DMF (2 ml) bajo una atmósfera inerte y se enfrió a 0 °C. Se añadió a la mezcla malonato de dietilo (0,59 ml, 3,87 mmol). La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se añadió A9 (0,40 g, 0,96 mmol). La solución se calentó a 60 °C. La mezcla se vertió en una solución de NaCl al 20% (30 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó sobre gel de sílice produciendo de ese modo 0,76 g de A10.

Ejemplo 26

Se disolvieron 5,86 g de NaH al 60% (146,4 mmol) y se agitó en DMF seco (75 ml) bajo una atmósfera inerte enfriada a 0 °C. Se añadió gota a gota malonato de dietilo (23,4 g, 146,4 mmol). La solución se agitó hasta que la mezcla se volvió transparente. Se añadió A9 (15,13 g, 36,6 mmol) disuelto en 75,0 ml de DMF. La solución se calentó a 60 °C. La mezcla se inactivó con una solución de NaCl al 20% (1200 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc. El disolvente se concentró a presión reducida y la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se agitó hasta que precipitó un sólido. El sólido se separó por filtración y se secó, produciendo 25,3 g de A11.

RMN 1H (400 MHz, CDCla): 53.95-3.93 (m, 1H), 3.57 - 3.46 (m, 1H), 3.39 (dd, J = 11.1, 3.5 Hz, 1H), 2.12 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 1.96 - 1.04 (m , 25 H), 1,00 (d, J = 7,5 Hz, 3 H), 0,91 (s, 3 H), 0,68 (s, 3 H).

Ejemplo 27

Se suspendió A11 (3,0 g, 0,76 mmol) en 90,0 ml de NaCl al 20%. La suspensión se calentó a reflujo durante 60 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. El sólido se separó por filtración y se secó, proporcionando 2,48 g de DCA.

Ejemplo 28

Se suspendió A11 (0,3 g, 0,076 mmol) en 9,0 ml de una solución de NaH2PO3 acuoso (pH 4,55). La suspensión se calentó a reflujo durante 70 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. El sólido se separó por filtración y se secó, proporcionando 0,22 g de DCA.

Ejemplo 29

Se suspendió A11 (0,3 g, 0,076 mmol) en 9,0 ml de agua en un recipiente a presión y se cerró. La suspensión se calentó a reflujo durante 80 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. El sólido se separó por filtración y se secó, proporcionando 0,23 g de DCA.

Ejemplo 30

Se disolvieron 0,05 g de A8 (0,14 mmol) y se agitó en ACN (1 ml), la mezcla se enfrió a 0 °C. Se añadió gota a gota una solución de PPh3Br2 (0,105 g, 0,24 mmol) en ACN (1 ml). La mezcla se agitó hasta que se completó la reacción. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. El residuo se purificó sobre gel de sílice produciendo 0,04 g de A9.

Ejemplo 31

Se disolvieron 0,05 g de A8 (0,14 mmol) y se agitó en DCM (2 ml), bajo una atmósfera inerte y se enfrió a -40 °C. Se añadieron gota a gota 0,4 ml de una solución de TPP (0,077 g, 1,75 eq) en DCM (8 ml). Se añadieron gota a gota 0,4 ml de una solución de Br²(0,04 g, 1,75 eq) en DCM (8 ml). La mezcla se agitó hasta que se completó la reacción. Se dejó que la mezcla alcanzara la temperatura ambiente. El residuo se purificó sobre gel de sílice produciendo 0,05 g de A9.

Ejemplo 32

Se disolvieron 0,05 g de A8 (0,14 mmol) y se agitó en ACN (1 ml) y se enfrió a 0 °C. Se añadió gota a gota una solución de PPh3Br2 (0,105 g, 0,24 mmol) en ACN (1 ml). La mezcla se agitó hasta que se completó la reacción. La mezcla se calentó a temperatura ambiente. El residuo se purificó sobre gel de sílice produciendo 0,04 g de A9.

Ejemplo 33

Se disolvieron 5,0 g de A10 (10,15 mmol) en EtOH (25 ml) y se agitó a temperatura ambiente. Se añadió NaOH 4 M (40 ml) y se agitó la mezcla. El disolvente orgánico se concentró a presión reducida. Se añadió gota a gota agua (30 ml) y se obtuvo un sólido. La fase acuosa se lavó con DCM (150 ml). La fase acuosa se acidificó con HCl 2 N (hasta pH 1). La mezcla se agitó a temperatura ambiente y se obtuvo un sólido. El sólido se separó por filtración y se secó, produciendo 3,5 g de A11.

Ejemplo 34

Se disolvieron 5,0 g de A10 (10,15 mmol) en EtOH (25 ml) y se agitó a temperatura ambiente. Se añadió LiOH 4 M (40 ml) y la mezcla se agitó a 40 °C hasta que se completó la reacción. El disolvente orgánico se concentró a presión reducida. Se añadió agua (500 ml) y DCM (150 ml). La fase acuosa se separó y se acidificó con HCl 2 N (hasta pH 1). La mezcla se agitó a temperatura ambiente y se obtuvo un sólido. El sólido se separó por filtración y se secó, produciendo 4,3 g de A11.

Ejemplo 35

Se disolvieron 0,05 g de A8 (0,14 mmol) y se agitó en DCM (1 ml), la mezcla se enfrió a 0 °C. Se añadieron TsCl (0,05 g, 0,28 mmol) y DMAP (0,03 g, 0,28 mmol). La suspensión se agitó hasta que se completó la reacción. Se dejó que la mezcla alcanzara la temperatura ambiente. El residuo se purificó sobre gel de sílice produciendo 0,04 g de A9.2.

Realizaciones de la invención

De las siguientes formas de realización, las de realizaciones A, K, L, M, N, AM y AN no forman parte de la presente invención reivindicada. La realización S es sólo una parte de la invención actualmente reivindicada en la medida en que depende de las realizaciones O-R. Las realizaciones T, T1, U-Z y AA-AL son solo realizaciones de la presente invención en la medida en que coincidan con los compuestos definidos en las reivindicaciones 10-13.

A. Un proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que comprende los siguientes pasos:

I) proporcionar un compuesto de fórmula general SM:

seguido de la conversión del intermedio de la fórmula general INT 3 en un intermedio de la fórmula general INT B:

o

IVb) convertir el intermedio de fórmula general INT 2 en un intermedio de fórmula general INT B:

V) convertir el intermedio de fórmula general INT B en ácido desoxicólico (DCA):

VI) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R¹es COOR², CH²OH, CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X o CH²-CH²-CHO; R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

R³ya sea P o R²; y

X es un átomo de halógeno.

B. El proceso de acuerdo con la realización A, que comprende los siguientes pasos:

i) proporcionar un compuesto de fórmula general SM-a:

Ni) convertir el intermedio de la fórmula general Int A1 en un intermedio de la fórmula general Int A2:

x) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado; R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol.

C. El proceso de acuerdo con la realización A o B, donde R²se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, n-propilo e isopropilo.

D. El proceso de acuerdo con la realización C, donde R²es metilo o etilo.

E. El proceso de acuerdo con la realización D, donde R²es metilo.

F. El proceso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, donde R³se selecciona del grupo que consiste en trimetilsilil éter (TMS), trietilsilil éter (TES), triisopropilsilil éter (TIPS), terc-butildimetilsilil éter (TBS, t Bd MS), trec-butildifenilsilil éter (TBDPS), acetilo (Ac, COCH³), benzoil (Bz), bencil éter (Bn), 4-metoxibencil éter (PMB), 2-naftilmetil éter (Nap), metoximetil acetal (MOM), 2-metoxietoxi-metil éter (MEM), etoxietil acetal (EE), metoxipropil acetal (MOP), benciloximetil acetal (BOM), tetrahidropiranil acetal (THP), 2,2,2-tricloro-etil carbonato (Troc) , metil éter, dimetoxitritilo (DMT), metoxitritilo (MMT), metiltiometil éter, pivaloílo (Piv), tetrahidropiranilo (THP), trifenilmetilo (tritilo, Tr) y tosilo (Ts), en particular Ac, TBDMS y Ts.

G. El proceso de acuerdo con la realización F, donde R³se selecciona del grupo que consiste en Ac, TBDMS y Ts. H. El proceso de acuerdo con la realización G, donde R³es Ac.

I. El proceso de acuerdo con la realización A o B, donde R²es metilo y R³es Ac.

J. El proceso de acuerdo con la realización J, donde R³es R²y R²es como se define en cualquiera de las realizaciones B-D.

K. Un proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que comprende los siguientes pasos:

I) proporcionar un compuesto de fórmula general INT 3:

IV) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R¹es COOR², CH²OH, CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X o CH²-CH²-CHO;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

R³ya sea P o R²; y

X es un átomo de halógeno.

L. El proceso de acuerdo con la realización K, donde INT 3 se proporciona a partir de INT 2 como se define en el paso IVa) de la realización A.

M. El proceso de acuerdo con la realización L, donde INT 2 se proporciona a partir de INT 1 como se define en el paso III) de la realización A.

N. El proceso de acuerdo con la realización M, donde INT 1 se obtiene a partir de SM como se define en el paso II) de la realización A.

O. El proceso de acuerdo con la realización K, que comprende los siguientes pasos:

i) proporcionar un compuesto de fórmula general Int A3:

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol.

P. El proceso de acuerdo con la realización O, donde INT A3 se proporciona a partir de INT A2 como se define en el paso iv) de la realización B.

Q. El proceso de acuerdo con la realización P, donde INT A2 se proporciona a partir de INT A1 como se define en el paso iii) de la realización B.

R. El proceso de acuerdo con la realización Q, donde INT A1 se proporciona a partir de SM-a como se define en el paso ii) de la realización B.

S. El proceso de acuerdo con cualquiera de las realizaciones K-R, donde R²y R³se definen en cualquiera de las realizaciones B-J.

T. Un compuesto de fórmula general I

donde

Ri es COOR², CH²OH, CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X o CH²-CH²-CHO; R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado; P es un grupo de protección de alcohol;

X es un átomo de halógeno;

_______es un enlace C-C o un enlace C=C;

v A A A /'e s =0 o ......... OR³, donde R³es P o R²;

OR⁴es OH o R⁴es el carbono C3 en el anillo A; y

con la condición de que la fórmula I no sea

T1. El compuesto de la realización T, donde

Ri es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

P es un grupo de protección de alcohol con la condición de que P no sea Ac o Pv;

con la condición de que la fórmula I no sea

donde R es H o Me

donde R es H o Me

U. El compuesto de acuerdo con la realización T o T1 que tiene la fórmula general SM

donde

R¹es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

P es un grupo de protección de alcohol con la condición de que P no sea Ac; y

X es un átomo de halógeno.

V. El compuesto de acuerdo con la realización T o T1 que tiene la fórmula general INT 1

donde

P es un grupo de protección de alcohol;

R³es P o R²; y

X es un átomo de halógeno.

W. El compuesto de acuerdo con la realización T o T1 que tiene la fórmula general INT 2

donde

Ri es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol; y

X es un átomo de halógeno.

X. El compuesto de acuerdo con la realización T o T1 que tiene la fórmula general INT 3

donde

R¹es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

R³es P o R²; y

X es un átomo de halógeno.

Y. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones U-X, donde R¹es COOR², CH²OP o CH²X, donde R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

R³es P o R²; y X es un átomo de halógeno.

Z. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones U-Y, donde R²se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, n-propilo e isopropilo.

AA. El compuesto de acuerdo con la realización Z, donde R²es metilo o etilo.

AB. El compuesto de acuerdo con la realización AA, donde R²es metilo.

AC. El compuesto de acuerdo con la realización AA, donde R²es etilo.

AD. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones U-Y, donde R²es H.

AE. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones U-Y, donde X se selecciona del grupo que consiste en Cl, Br e I.

AF. El compuesto de acuerdo con la realización AE, donde X es Br.

AG. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones U-Y, donde P se selecciona del grupo que consiste en trimetilsilil éter (TMS), trietilsilil éter (TES), triisopropilsilil éter (TIPS), terc-butildimetilsilil éter (TBS, TBDMS), trecbutildifenilsilil éter (TBDPS), acetilo (Ac, COCH³), benzoil (Bz), bencil éter (Bn), 4-metoxibencil éter (PMB), 2-naftilmetil éter (Nap), metoximetil acetal (MOM), 2-metoxietoxi-metil éter (MEM), etoxietil acetal (EE), metoxipropil acetal (MOP), benciloximetil acetal (BOM), tetrahidropiranil acetal (THP), 2,2,2-tricloro-etil carbonato (Troc) , metil éter, dimetoxitritilo (DMT), metoxitritilo (MMT), metiltiometil éter, pivaloílo (Piv), tetrahidropiranilo (THP), trifenilmetilo (tritilo, Tr) y tosilo (Ts), en particular Ac, TBDMS y Ts.

AH. El compuesto de acuerdo con la realización AG, donde P se selecciona del grupo que consiste en Ac, TBDMS y Ts. AI. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones U-AH, donde R³es H.

AJ. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones U-AH, donde R³es R²y R²es como se define en cualquiera de las realizaciones Z-AC.

AK. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones U-AH, donde R³es P, y P es como se define en la realización Ag o AH.

AL. El compuesto de acuerdo con la realización AK, donde R³es Ac.

AM. Uso de un compuesto de fórmula general I

donde

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

X es un átomo de halógeno;

_______es un enlace C-C o un enlace C=C;

lA A A / 'e s = O o ........ OR³donde R³es P o R²; y OR⁴es OH o R⁴es el carbono C3 en el anillo A;

para la preparación de ácido desoxicólico (DCA), ácido cólico, ácido glicocólico, ácido taurocólico o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

AN. Uso de acuerdo con la realización AM, donde el compuesto de fórmula general I es como se define en cualquiera de las realizaciones U-AL.

Claims

REIVINDICACIONES

1. El proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que comprende los siguientes pasos:

i) proporcionar un compuesto de fórmula general SM-a:

vii) reducir el intermedio de fórmula general Int A6 en un intermedio de fórmula general Int A7: viii) reducir el compuesto de fórmula general Int A7 en un intermedio de fórmula general Int A8:

donde R²es un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado,

x) convertir opcionalmente ácido desoxicólico en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

R³es H, R²o un grupo de protección de alcohol.

2. El proceso de acuerdo con la reivindicación 1, donde R²se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, npropilo e isopropilo.

3. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde R³se selecciona del grupo que consiste en trimetilsilil éter (TMS), trietilsilil éter (TES), triisopropilsilil éter (TIPS), terc-butildimetilsilil éter (TBS, t Bd MS), trec-butildifenilsilil éter (TBDPS), acetilo (Ac, COCH³), benzoil (Bz), bencil éter (Bn), 4-metoxibencil éter (PMB), 2-naftilmetil éter (Nap), metoximetil acetal (MOM), 2-metoxietoxi-metil éter (MEM), etoxietil acetal (EE), metoxipropil acetal (MOP), benciloximetil acetal (BOM), tetrahidropiranil acetal (THP), 2,2,2-tricloro-etil carbonato (Troc) , metil éter, dimetoxitritilo (DMT), metoxitritilo (MMT), metiltiometil éter, pivaloílo (Piv), tetrahidropiranilo (THP), trifenilmetilo (tritilo, Tr) y tosilo (Ts), en particular Ac, TBDMS y Ts.

4. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el intermedio de fórmula general Int A1 se convierte en el intermedio de fórmula general Int A2 mediante oxidación usando agentes oxidantes como CrO3, o usando un ácido fuerte como HI, HBr, HClO4, HCl, HClO3, H²SO⁴y HNO³.

5. Un proceso para la preparación de ácido desoxicólico (DCA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que comprende los siguientes pasos:

i) proporcionar un compuesto de fórmula general Int A3:

donde R²es un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado,

R³es H, R²o un grupo de protección contra el alcohol.

6. El proceso de acuerdo con la reivindicación 5, donde R²y R³son como se definen en la reivindicación 2 o 3.

7. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el alargamiento de la cadena carbonada del intermedio de fórmula general Int A8 comprende los siguientes pasos:

ix-a) halogenar el compuesto de fórmula general Int A8 para obtener un intermedio de fórmula general

Int A9:

donde X es halógeno;

ix-b) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int A9 para obtener DCA.

8. El proceso de acuerdo con la reivindicación 7, donde el alargamiento de la cadena carbonada del intermedio de fórmula general Int A9 a DCA comprende pasos adicionales de tratar Int A9 con un éster de malonato en presencia de una base y posteriormente acidificar para obtener DCA.

9. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, donde el alargamiento de la cadena carbonada del intermedio de fórmula general Int A8 comprende los siguientes pasos:

ix-c) oxidar el compuesto de fórmula general Int A8 para obtener un intermedio de fórmula general Int B1:

ix-d) alargar la cadena carbonada del compuesto de fórmula general Int B1 para obtener un intermedio de fórmula general Int B2:

donde R²es un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado,

ix-e) convertir el compuesto de fórmula general Int B2 en DCA.

10. Un compuesto de fórmula general I

donde

R¹es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

X es un átomo de halógeno;

_______es un enlace C-C o un enlace C=C;

^{% f X f \ f X P e}s =0 o ■•«■uní OR³, donde R³es P o R²;

OR⁴es OH o R⁴es el carbono C3 en el anillo A; y

con la condición de que la fórmula I no sea

donde R es H o Me

donde R es H o Me

11. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 10 que tiene la fórmula general SM

donde

Ri es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X; R²es un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado con la condición de que R²no sea CH³; P es un grupo de protección de alcohol; y

X es un átomo de halógeno.

12. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 10 que tiene la fórmula general INT 1

donde

R¹es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

R3 es P o R²; y

X es un átomo de halógeno.

13. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 10 que tiene la fórmula general INT 2

donde

R¹es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

R²un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol; y

X es un átomo de halógeno.

14. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 10 que tiene la fórmula general INT 3

donde

Ri es COOR², CH²OP, CH²X, CH²CHO, CH²-CH²-OH, CH²-CH²OP o CH²-CH²X;

R²es H o un grupo alquilo C1-C6 lineal o ramificado;

P es un grupo de protección de alcohol;

R³es P o R²; y

X es un átomo de halógeno.

15. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 11-14, donde P se selecciona del grupo que consiste en trimetilsilil éter (TMS), trietilsilil éter (TES), triisopropilsilil éter (TIPS), terc-butildimetilsilil éter (TBS, t Bd MS), terc-butildifenilsilil éter (TBDPS), benzoílo (Bz), bencil éter (Bn), 4-metoxibencil éter (PMB), 2-naftilmetil éter (Nap), metoximetil acetal (MOM), 2-metoxietoxi-metil éter (MEM), etoxietil acetal (EE), metoxipropil acetal (MOP), benciloximetil acetal (BOM), tetrahidropiranil acetal (THP), 2,2,2-tricloro-etil carbonato (Troc), metil éter, dimetoxitritilo (DMT), metoxitritilo (MMT), metiltiometil éter, tetrahidropiranilo (THP), trifenilmetilo (tritilo, Tr) y tosilo (Ts).