ES2616705T3

ES2616705T3 - Compuesto de anillos espiro que contiene nitrógeno y uso medicinal del mismo

Info

Publication number: ES2616705T3
Application number: ES10804531.1T
Authority: ES
Inventors: Satoru Noji; Makoto Shiozaki; Tomoya Miura; Yoshinori Hara; Hiroshi Yamanaka; Katsuya Maeda; Akimi Hori; Masafumi Inoue; Yasunori Hase
Original assignee: Japan Tobacco Inc
Current assignee: Japan Tobacco Inc
Priority date: 2009-07-31
Filing date: 2010-07-30
Publication date: 2017-06-14
Anticipated expiration: 2030-07-30
Also published as: NZ597994A; JP2023138641A; IL217048A0; ZA201200689B; CY1118747T1; US20230023377A1; KR20120051649A; JP2021183653A; EP2460806A1; SG176918A1; RS55913B1; MY163495A; CN102510865B; RU2630694C2; SI2460806T1; US20140187534A1; AU2010278066A1; JP2020033384A; PE20121276A1; CA2767899A1

Abstract

Un compuesto de la siguiente fórmula general [I]: **Fórmula** en la que Ra es igual o diferente y cada uno es: (1) alquilo C1-6 o (2) un átomo de halógeno, n1 es un número entero seleccionado de 0 a 4, Rb es igual o diferente y cada uno es: (1) alquilo C1-6 o (2) un átomo de halógeno, n2 es un número entero seleccionado de 0 a 4, m1 es un número entero seleccionado de 0 a 3, m2 es un número entero seleccionado de 1 a 4, Xa>=Xb es: (1) CH>=CH, (2) N>=CH o (3) CH>=N, X es: (1) un átomo de nitrógeno o (2) C-Rd en el que Rd es un átomo de hidrógeno o un átomo de halógeno, Rc es un grupo seleccionado entre los siguientes (1) a (6): (1) un átomo de hidrógeno, (2) alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con de 1 a 5 sustituyentes iguales o diferentes seleccionados entre el siguiente Grupo A, (3) -C(>=O)-Rc1, (4) -C(>=O)-O-Rc2, (5) -C(>=O)-NRc3Rc4 en el que Rc1, Rc2, Rc3 y Rc4 son iguales o diferentes y cada uno es: (i) un átomo de hidrógeno o (ii) alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con de 1 a 5 sustituyentes iguales o diferentes seleccionados entre el siguiente Grupo A o 4 0 (6) un grupo de fórmula: **Fórmula** en la que Ya es un grupo seleccionado entre los siguientes (i) a (iii): (i) alquileno C1-6, (ii) -C(>=O)- o (iii) -C(>=O)-O-, el Anillo T es: (i) arilo C6-10, (ii) cicloalquilo C3-10 o (iii) monoheterociclilo saturado en donde el monoheterociclilo saturado comprende de 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre un átomo de nitrógeno, un átomo de oxígeno o un átomo de azufre, así como átomos de carbono y el número de átomos constituyentes en el anillo es de 3 a 7, Rc5 es igual o diferente y cada uno es: (i) ciano o (ii) nitro, p es un número entero seleccionado de 0 a 4, el Grupo A es el grupo que consiste en: (a) hidroxilo, (b) alcoxi C1-6, (c) ciano, (d) alcoxicarbonilo C1-6, (e) alquilcarboniloxi C1-6 y (f) alqueniloxi C2-6 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

Description

Compuesto de anillos espiro que contiene nitrógeno y uso medicinal del mismo

5 Campo técnico

La presente invención se refiere a un compuesto de anillos espiro que contiene nitrógeno nuevo y a un uso farmacéutico del mismo. En concreto, la presente invención se refiere a un inhibidor de la Janus quinasa 3, denominada en lo sucesivo en el presente documento como JAK3, un compuesto para la prevención o el tratamiento

10 del rechazo del trasplante de órganos, la reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante, la enfermedad autoinmunitaria y la enfermedad alérgica y un uso farmacéutico del mismo.

La presente invención también se refiere a un inhibidor de la Janus quinasa 2, denominada en lo sucesivo en el presente documento como JAK2, un compuesto para la prevención o el tratamiento de las enfermedades

15 mieloproliferativas crónicas y un uso farmacéutico del mismo.

Técnica anterior

JAK3 es un miembro de la familia Janus que pertenece a las proteína quinasas. Aunque otros miembros de esta familia 20 se expresan en diversos tejidos, JAK3 se expresa solo en células hematopoyéticas.

Esta expresión limitada está implicada en un importante papel de JAK3 por una asociación no covalente de JAK3 con cadenas γ comunes a múltiples receptores relacionados que incluyen los de IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 e IL-21, en la transducción de señales mediada por receptor.

25 Los niveles de proteína JAK3 reducidos de forma significativa o los defectos génicos en las cadenas γ comunes, se encuentran en la población de pacientes de inmunodeficiencia combinada grave, denominada en lo sucesivo en el presente documento IDCG. Eso indica que se produce una inmunosupresión por el bloqueo de la ruta de señalización mediada por JAK3.

30 Se ha informado que, en experimentos con animales, JAK3 desempeña un papel importante en la madurez de linfocitos NK, linfocitos B y linfocitos T y se necesita esencialmente para el mantenimiento de las funciones de los linfocitos T.

35 También se ha informado que CP-690.550 ((3R,4R)-3-[4-metil-3-[N-metil-N-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4-il)amino]piperidin-1-il]-3-oxopropionitrilo), un inhibidor de JAK3, mejora la artritis reumatoide y la psoriasis y muestra efectos de supresión del rechazo en un modelo de trasplante renal de simio y efectos de supresión de la inflamación de las vías respiratorias en un modelo de asma de ratón.

40 A la vista de los conocimientos anteriores, se cree que para la prevención o el tratamiento del rechazo del trasplante de órganos, la reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante, la enfermedad autoinmunitaria y la enfermedad alérgica, es útil la regulación de la actividad inmunitaria mediante inhibidores de JAK3.

Por otro lado, se ha señalado que la inhibición de JAK2 es útil para pacientes que padecen enfermedades

45 mieloproliferativas crónicas. Las enfermedades mieloproliferativas crónicas incluyen policitemia vera, mielofibrosis primaria, trombocitemia esencial, leucemia mielógena crónica, leucemia mielomonocítica crónica, leucemia eosinofílica crónica, leucemia neutrofílica crónica, mastocitosis sistémica.

Se cree que las enfermedades mieloproliferativas crónicas pueden estar provocadas por mutaciones celulares

50 adquiridas en las células madre hematopoyéticas y se ha informado que una gran mayoría de los pacientes de policitemia vera, así como una cantidad significativa de pacientes de mielofibrosis primaria y de trombocitemia esencial, tienen mutaciones de JAK2 con ganancia de función. También se ha informado que la inhibición de la JAK2V617F quinasa por inhibidores de bajo peso molecular provoca una inhibición de la proliferación de las células hematopoyéticas.

55 A la vista de los conocimientos anteriores, se cree que la regulación de la proliferación de las células hematopoyéticas por los inhibidores de JAK2 es útil para la prevención o el tratamiento de las enfermedades mieloproliferativas crónicas.

60 Se conocen cuatro tipos de miembros de la familia Janus quinasa, denominada en lo sucesivo en el presente documento como JAK, incluyendo Janus quinasa 1, denominada en lo sucesivo en el presente documento como JAK1, JAK2, JAK3 y tirosina quinasa 2, denominada en lo sucesivo en el presente documento como Tyk2 y se cree que, de forma similar a un inhibidor de JAK3, un inhibidor de JAK1 y un inhibidor de Tyk2 también son útiles para la prevención

o el tratamiento de diversas enfermedades. 65

Divulgación de la invención Problemas a resolver mediante la invención

5 De acuerdo con estudios extensos con el fin de desarrollar un agente terapéutico o preventivo nuevo alternativo al convencional, para el rechazo del trasplante de órganos, la reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante, la enfermedad autoinmunitaria y la enfermedad alérgica, los inventores han encontrado compuestos de anillos espiro que contienen nitrógeno nuevos con efecto inhibidor de JAK3 y lograron la presente invención.

10 Los presentes inventores también han encontrado compuestos de anillos espiro que contienen nitrógeno nuevos con efecto inhibidor de JAK2 y lograron la presente invención.

Medios de resolver los problemas

15 Específicamente, la presente invención es como se indica a continuación.

[1] Un compuesto de la siguiente fórmula general [I]:

20: en la que Ra es igual o diferente y cada uno es:

25: (1) alquilo C16, o (2) un átomo de halógeno, n1 es un número entero seleccionado de 0 a 4, Rb es igual o diferente y cada uno es:

30: (1) alquilo C16, o (2) un átomo de halógeno, n2 es un número entero seleccionado de 0 a 4, m1 es un número entero seleccionado de 0 a 3, m2 es un número entero seleccionado de 1 a 4, Xa=Xb es:

35: (1) CH=CH, (2) N=CH, o (3) CH=N, X es:

40: (1) un átomo de nitrógeno, o (2) C-Rd en el que Rd es un átomo de hidrógeno o un átomo de halógeno, Rc es un grupo seleccionado entre los siguientes (1) a (6):

45: (1) un átomo de hidrógeno, (2) alquilo C16 opcionalmente sustituido con de 1 a 5 sustituyentes seleccionados entre el siguiente Grupo A, (3) -C(=O)-Rc1 , (4) -C(=O)-O-Rc2 , (5) -C(=O)-NRc3Rc4 en el que Rc1, Rc2, Rc3 y Rc4 son iguales o diferentes y cada uno es: iguales o diferentes

(i): un átomo de hidrógeno, o

(ii): alquilo C16 opcionalmente sustituido con de 1 a 5 sustituyentes iguales o diferentes seleccionados entre el siguiente Grupo A, o

(6) un grupo de fórmula:

en elqueYa es un grupo seleccionado entre los siguientes (i) a (iii):

10 (i) alquileno C16,

(ii) -C(=O)-, o

(iii) -C(=O)-O-, El Anillo T es:

15 (i) arilo C610,

(ii) cicloalquilo C310,o

(iii) monoheterociclilo saturado en el que el monoheterociclilo saturado comprende de 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre un átomo de nitrógeno, un átomo de oxígeno o un átomo de azufre, así como átomos de carbono y el número de átomos constituyentes en el anillo es

20 de3a7, Rc5 es igual o diferente y cada uno es:

(i): ciano, o

(ii): nitro,

25 p es un número entero seleccionado de 0 a 4, El Grupo A es el grupo que consiste en:

(a) hidroxilo,

(b) alcoxi C16, 30 (c) ciano,

(d): alcoxicarbonilo C16,

(e): alquilcarboniloxi C16 y

(f): alqueniloxi C26 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del

mismo. 35

[2] El compuesto de [1], en el que, en la fórmula general [I], n1 es un número entero seleccionado de 0 a 2, n2 es un número entero seleccionado de 0 a 2, m1 es un número entero seleccionado de 0 a 3, m2 es un número entero seleccionado de 1 a 3,

40 Xes:

(1): un átomo de nitrógeno, o

(2): C-Rd enel que Rd es un átomo de halógeno,

45 Rc es un grupo seleccionado entre los siguientes (1) a (6):

(1): un átomo de hidrógeno,

(2): alquilo C16 sustituido con un sustituyente seleccionado entre el siguiente Grupo A,

(3) -C(=O)-Rc1 , 50 (4) -C(=O)-O-Rc2 ,

(5) -C(=O)-NRc3Rc4 en el que Rc1 es alquilo C16 opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado entre el siguiente Grupo A,

55 Rc2 es alquilo C16,

Rc3 es alquilo C16 opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado entre el siguiente Grupo A, Rc4 es

(i): un átomo de hidrógeno, o

(ii): alquilo C16,o

(6) un grupo de fórmula:

en elqueYa es un grupo seleccionado entre los siguientes (i) a (iii):

10 (i) alquileno C16,

(ii) -C(=O)-, o

(iii) -C(=O)-O-, El Anillo T es:

15 (i) fenilo,

(ii) cicloalquilo C36,o

(iii) pirrolidinilo, Rc5

es

20 (i) ciano, o

(ii) nitro, p es un número entero seleccionado de 0 o 1,

El Grupo A es el grupo que consiste en: 25

(a): hidroxilo,

(b): alcoxi C16,

(c): ciano,

(d) alcoxicarbonilo C16, 30 (e) alquilcarboniloxi C16,y

(f) alqueniloxi C26 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[3] El compuesto de uno cualquiera de [1] o [2], en el que m1 es un número entero de 0 o 1 y m2 es un número entero de 1 o 2 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

35 [4] El compuesto de [3], en el que una combinación de (m1,m2) es (1,2), que es un compuesto de la fórmula general [II]:

en la que cada símbolo tiene el mismo significado que se ha definido en [1] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[5] El compuesto de [3], en el que una combinación de (m1,m2) es (0,2), que es un compuesto de la fórmula general [III]:

[6] El compuesto de [3], en el que una combinación de (ml,m2) es (0,1), que es un compuesto de la fórmula general [IV]:

en la que cada símbolo tiene el mismo significado que se ha definido en [1] o una sal farmacéuticamente aceptable 10 del mismo o un solvato del mismo.

[7] El compuesto de uno cualquiera de [1] o [2], en el que una combinación de (m1,m2) se selecciona entre (0,3), (2,1), (2,2) o (3,2) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[8] El compuesto de uno cualquiera de [1] a [7], en el que Xa=Xb es CH=CH y X es un átomo de nitrógeno o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

15 [9] El compuesto de uno cualquiera de [1] o [2], en el que una combinación de (n1,n2) es (0,0) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[10] El compuesto de uno cualquiera de [1] o [2], en el que una combinación de (n1,n2) es (1,0) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[11] El compuesto de uno cualquiera de [1] o [2], en el que una combinación de (n1,n2) es (0,1) o una sal 20 farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[12] El compuesto de uno cualquiera de [1] o [2], en el que una combinación de (n1,n2) es (2,0) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[13] El compuesto de uno cualquiera de [1] o [2], en el que una combinación de (n1,n2) es (0,2) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

25 [14] El compuesto de uno cualquiera de [10] o [12], en el que Ra es metilo o un átomo de flúor o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[15] El compuesto de uno cualquiera de [1] a [14], en el que Rc es -C(=O)-Rc1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[16] El compuesto de [15], en el que Rc1 es alquilo C16 sustituido con un grupo hidroxilo o ciano o una sal 30 farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[17] El compuesto de uno cualquiera de [1] a [14], en el que Rc es -C(=O)-NRc3Rc4 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[18] El compuesto de [17], en el que Rc3 es alquilo C16 sustituido con un grupo ciano y Rc4 es hidrógeno o una sal

farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[19] El compuesto de [1] seleccionado entre la siguiente fórmula química estructural:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[20] El compuesto de [1] seleccionado entre la siguiente fórmula química estructural:

5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[21] Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

[22] Un inhibidor de Janus quinasa, que comprende el compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal

farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo. 10 [23] El inhibidor de la Janus quinasa de [22], en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 3.

[24] El inhibidor de la Janus quinasa de [22], en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 2.

[25] Un agente terapéutico o preventivo para una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en rechazo del trasplante de órganos, reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante, enfermedad autoinmunitaria, enfermedad alérgica y enfermedad mieloproliferativa crónica, que comprende el compuesto de uno cualquiera de

15 [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[26] Un agente terapéutico o preventivo para la artritis reumatoide, que comprende el compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[27] Un agente terapéutico o preventivo para la psoriasis, que comprende el compuesto de uno cualquiera de [1] a

[20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[28] Un compuesto para su uso en la inhibición de la Janus quinasa, que comprende administrar a un mamífero una

cantidad farmacéuticamente eficaz del compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente 5 aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[29] El compuesto de [28], en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 3.

[30] El compuesto de [28], en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 2.

[31] Un compuesto para su uso en el tratamiento o la prevención de una enfermedad seleccionada del grupo consistente en rechazo del trasplante de órganos, reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante,

10 enfermedad autoinmunitaria, enfermedades alérgicas y enfermedad mieloproliferativa crónica, que comprende administrar a un mamífero una cantidad farmacéuticamente eficaz del compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[32] Un compuesto para su uso en el tratamiento o la prevención de la artritis reumatoide, que comprende

administrar a un mamífero una cantidad farmacéuticamente eficaz del compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o 15 una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[33] Un compuesto para uso en el tratamiento o la prevención de la psoriasis, que comprende administrar a un mamífero una cantidad farmacéuticamente eficaz del compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

[34] Uso del compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un 20 solvato del mismo, en la fabricación de un inhibidor de la Janus quinasa.

[35] El uso de [34], en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 3.

[36] El uso de [34], en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 2.

[37] Uso del compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de una enfermedad

25 seleccionada del grupo que consistente en rechazo del trasplante de órganos, reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante, enfermedad autoinmunitaria, enfermedades alérgicas y enfermedad mieloproliferativa crónica.

[38] Uso del compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un

solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la artritis 30 reumatoide.

[39] Uso del compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la psoriasis.

[40] Un kit comercial, que comprende (a) una composición farmacéutica que comprende el como principio activo el compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del

35 mismo; y (b) un prospecto de envase del fármaco de la composición farmacéutica que indica que la composición farmacéutica puede utilizarse o debería utilizarse para el tratamiento o la prevención de la artritis reumatoide o la psoriasis.

[41] Un embalaje comercial, que comprende (a) una composición farmacéutica que comprende como el principio activo el compuesto de uno cualquiera de [1] a [20] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato

40 del mismo; y (b) un prospecto de envase del fármaco de la composición farmacéutica que indica que la composición farmacéutica puede utilizarse o debería utilizarse para el tratamiento o la prevención de la artritis reumatoide o la psoriasis.

Efecto de la invención

45 El compuesto de anillos espiro que contiene nitrógeno de la invención, de la presente solicitud, es eficaz como un agente terapéutico o preventivo para el rechazo del trasplante de órganos, la reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante, la enfermedad autoinmunitaria y la enfermedad alérgica, etc., debido a su efecto de inhibición de la actividad de JAK3.

50 Además, el compuesto de anillos espiro que contiene nitrógeno de la invención, de la presente solicitud, es eficaz como un agente terapéutico o preventivo para las enfermedades mieloproliferativas crónicas debido a su efecto de inhibición de la actividad de JAK2.

55 Mejor modo para realizar la invención

Los términos y las frases usados en el presente documento se definen de la siguiente manera.

La expresión "opcionalmente sustituido" incluye casos en los que las posiciones sustituibles están sustituidas y no 60 están sustituidas (sin sustituir) en el grupo objeto. El término "sin sustituir" se refiere un caso tal en el que todas las posiciones sustituibles están sustituidas con un átomo de hidrógeno en el grupo objeto.

Por ejemplo, "alquilo C16 opcionalmente sustituido con de 1 a 5 sustituyentes iguales o diferentes seleccionados entre el Grupo A" incluye casos en los que las posiciones sustituibles de alquilo C16 están sustituidas con 1 a 5 sustituyentes 65 iguales o diferentes seleccionados entre el Grupo A y no sustituidos (sin sustituir).

La expresión "átomo de halógeno " incluye un átomo de flúor, un átomo de cloro, un átomo de bromo o un átomo de yodo, preferiblemente un átomo de flúor o un átomo de cloro.

La expresión "alquilo C16" se refiere un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada C16, por ejemplo metilo,

5 etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, tercbutilo, pentilo, isopentilo, neopentilo, 1-etilpropilo, hexilo, isohexilo, 1,1-dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 3,3-dimetilbutilo, 2-etilbutilo, preferiblemente metilo, etilo, propilo, isopropilo, etc.

La expresión "alquenilo C26" se refiere un hidrocarburo insaturado de cadena lineal o ramificada C26 que contiene uno

10 o más dobles enlaces, por ejemplo vinilo, 1-metilvinilo, 1-propenilo, alilo, metilpropenilo (incluyendo 1-metil-1-propenilo, 2-metil-1-propenilo, etc.), 1-butenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, metilbutenilo (incluyendo 1-metil-1-butenilo, 2-metil-1-butenilo, 3-metil-1-butenilo, etc.), pentenilo, metilpentenilo, hexenilo, preferiblemente vinilo, 1-metilvinilo, 1-propenilo, metilpropenilo, etc.

15 La expresión "alquileno C16" se refiere a un grupo divalente derivado de un alquilo C16 de cadena lineal como se ha definido anteriormente, por ejemplo metileno, etileno, trimetileno, tetrametileno, pentametileno, hexametileno, preferiblemente metileno, etileno, etc.

La expresión "arilo C610" se refiere un hidrocarburo aromático C610, por ejemplo fenilo, 1-naftilo, 2-naftilo, 20 preferiblemente fenilo.

La expresión "cicloalquilo C310" se refiere un hidrocarburo monocíclico saturado C310, por ejemplo ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, preferiblemente cicloalquilo C36 (incluyendo ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, etc.).

25 La expresión "monoheterociclilo saturado" en el que el monoheterociclilo saturado comprende de 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre un átomo de nitrógeno, un átomo de oxígeno o un átomo de azufre, así como átomos de carbono y el número de átomos constituyentes en el anillo es de 3 a 7 incluye oxiranilo, tiolanilo, aziridinilo, azetidinilo, oxetanilo, pirrolidinilo, pirrolidino (incluyendo 1-pirrolidinilo), tetrahidrofuranoílo, tetrahidrotienilo, oxazolinilo, oxazolidinilo,

30 isoxazolinilo, isoxazolidinilo, tiazolinilo, tiazolidinilo, isotiazolinilo, isotiazolidinilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, piperidinilo, piperidino (incluyendo 1-piperidinilo), morfolinilo, morfolino (incluyendo 4-morfolinilo), tiomorfolinilo, tiomorfolino (incluyendo 4-tiomorfolinilo), piperazinilo, piperazino (incluyendo 1-piperazinilo), hexahidro-1,3-oxazinilo, homomorfolina, homopiperazina, etc.

35 La expresión "alcoxi C16" se refiere un alcoxi de cadena lineal o ramificada C16, particularmente metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, s-butoxi, t-butoxi, pentiloxi, isopentiloxi, 2-metilbutoxi, neopentiloxi, 1-etilpropoxi, hexiloxi, etc.

La expresión "alcoxicarbonilo C16" se refiere a un grupo en el que un alcoxi de cadena lineal o ramificada C16 se une a

40 carbonilo, particularmente metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, propoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo, butoxicarbonilo, isobutoxicarbonilo, s-butoxicarbonilo, t-butoxicarbonilo, pentiloxicarbonilo, isopentiloxicarbonilo, 2-metilbutoxicarbonilo, neopentiloxicarbonilo, 1-etilpropoxicarbonilo, hexiloxicarbonilo, 4-metilpentiloxicarbonilo, etc.

La expresión "alquilcarboniloxi C16" se refiere a un grupo en el que un "grupo en el que el alquilo C16 se une a un 45 carbonilo" se une a un oxi, particularmente acetiloxi, propioniloxi, butiriloxi, isobutiriloxi, etc.

La expresión "alqueniloxi C26" se refiere a un grupo en el que el "alquenilo C26" se une a un oxi, particularmente aliloxi, 1-buteniloxi, etc.

50 A continuación se ilustran realizaciones preferibles para cada grupo en un compuesto de la fórmula general [I], que también se denomina como compuesto de la presente invención más adelante en el presente documento.

Las realizaciones preferibles de Ra incluyen:

55 (1) metilo, o

(2) un átomo de flúor, etc.

Las realizaciones preferibles de n1 incluyen un número entero de 0, 1 o 2.

60 Las realizaciones preferibles de Rb incluyen:

(1): metilo, o

(2): un átomo de flúor, etc.

65 Las realizaciones preferibles de n2 incluyen un número entero de 0, 1 o 2.

Las realizaciones preferibles de m1 incluyen un número entero seleccionado entre 0 a 3.

Las realizaciones preferibles de m2 incluyen un número entero de 1, 2 o 3.

5 Una combinación de (m1,m2) incluye (0,1), (0,2), (0,3), (1,1), (1,2), (2,1), (2,2) o (3,2).

Preferiblemente, Ra y Rb pueden estar sustituidos en átomos de carbono, constituyendo cada uno un espirociclo de fórmula general [I] excepto para un espiro carbono y átomos de carbono que no están sustituidos con Ra oRb están saturados con átomos de hidrógeno. En caso de que n1 sea 2 o superior, Ra puede ser cada uno igual o diferente y

10 está sustituido en la misma posición o en posiciones diferentes. Además, en case de que n2 sea 2 o superior, Rb pueden ser cada uno iguales o diferentes y están sustituidos en la misma posición o en posiciones diferentes.

Xa=Xb es:

15 (1) CH=CH,

(2): N=CH, o

(3): CH=N,

preferiblemente (1) CH=CH. 20 Las realizaciones preferibles de X son:

(1): un átomo de nitrógeno, o

(2): C-Cl,

25 más preferiblemente (1) átomo de nitrógeno.

Las realizaciones preferibles de Rc incluyen un átomo de hidrógeno, cianoetilo, acetilo, bencilo, cianometilcarbonilo, propeniloxietilcarbonilo, 2-propanilcarbonilo, etilcarbonilo, metoxicarbonilo, (S)-hidroxietilcarbonilo, 30 hidroximetilcarbonilo, 1-hidroxietilcarbonilo, acetoximetilcarbonilo, (S)-acetoxietilcarbonilo, metoximetilcarbonilo, metoxietilcarbonilo, (S)-metoxietilcarbonilo, (R)-metoxietilcarbonilo, 3-cianopirrolidinilcarbonilo, 3-cianofenilcarbonilo, 4-cianofenilcarbonilo, metoxicarboniletilcarbonilo, p-nitrofenoxicarbonilo, 1-cianometilciclopropanilcarbonilo, t-butoxicarbonilo, N-etilcarbamoílo, N-cianometilcarbamoílo, N-cianoetilcarbamoílo, N,N-metilcianometilcarbamoílo, N,N-metilcianoetilcarbamoílo, N-propanilcarbamoílo, preferiblemente cianometilcarbonilo, hidroximetilcarbonilo o

35 cianoetilcarbamoílo.

Las realizaciones preferidas de un compuesto de la fórmula general [I] incluyen compuestos de las siguientes fórmulas:

Un compuesto de fórmula general [II] incluye preferiblemente un compuesto de la fórmula general [II-A], [II-B] o [II-C].

Un compuesto de fórmula general [III] incluye preferiblemente un compuesto de la fórmula general [III-A], [III-B] o [III-C].

Un compuesto de fórmula general [IV] incluye preferiblemente un compuesto de la fórmula general [IV-A], [IV-B] o [IV-C].

Otra realización preferible de un compuesto de la fórmula general [I] incluye compuestos de la siguiente fórmula:

Otra realización preferente de un compuesto de fórmula general [I] tiene efectos inhibidores de JAK1 y/o JAK2 y/o Tyk2, así como efecto inhibidor de JAK3. Más preferentemente, un compuesto de fórmula general [I] tiene todos los 5 efectos inhibidores de JAK1, JAK2, JAK3 y Tyk2.

La "sal farmacéuticamente aceptable" de un compuesto de la fórmula general [I], que también se denomina el compuesto de la presente invención en lo sucesivo en el presente documento, puede ser cualquiera de las sales no tóxicas del compuesto de la presente invención e incluye una sal con un ácido inorgánico, un ácido orgánico, una base

10 inorgánica, una base orgánica, un aminoácido, etc.

La sal con un ácido inorgánico incluye una sal con ácido clorhídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido bromhídrico, etc.

15 La sal con un ácido orgánico incluye una sal con ácido oxálico, ácido maleico, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido láctico, ácido málico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido glucónico, ácido ascórbico, ácido metanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido p-toluenosulfónico, etc.

La sal con una base inorgánica incluye sal de sodio, sal de potasio, sal de calcio, sal de magnesio, sal de amonio, etc.

20 La sal con una base orgánica incluye una sal con metilamina, dietilamina, trimetilamina, trietilamina, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, etilendiamina, tris(hidroximetil)metilamina, diciclohexilamina, N,N’-dibenciletilendiamina, guanidina, piridina, picolina, colina, cinconina, meglumina, etc.

25 La sal con un aminoácido incluye una sal con lisina, arginina, ácido aspártico, ácido glutámico, etc.

De acuerdo con métodos conocidos, cada sal puede obtenerse haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula general [I] con una base inorgánica, una base orgánica, un ácido inorgánico, un ácido orgánico o un aminoácido.

30 El "solvato" se refiere a un material en el que las moléculas de disolvente se coordinan con un compuesto de la fórmula general [I] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, e incluye hidrato. Un solvato preferible es un solvato farmacéuticamente aceptable, incluyendo 1 hidrato, 1/2 hidrato o 2 hidrato de un compuesto de la fórmula general [I], 1 hidrato de sal de sodio de un compuesto de la fórmula general [I], 1 metanolato, 1 etanolato o 1 acetonitrilato de un compuesto de la fórmula general [I], 2/3 etanolato de 2 clorhidrato de un compuesto de la fórmula general [I], etc. Un

35 solvato más preferido es 1 hidrato de un compuesto de la fórmula general [I]. De acuerdo con métodos conocidos, puede obtenerse un solvato de los mismos.

Un compuesto de fórmula general [I] también existe en forma de diversos "isómeros". Por ejemplo, un isómero geométrico de los mismos incluye isómeros E y Z. En caso de que exista cualquier átomo de carbono asimétrico, en

40 estereoisómero basado en tales átomos de carbono incluye enantiómeros y diastereómeros. En caso de que exista cualquier eje quiral, existe un estereoisómero basado en tales ejes. Un tautómero puede existir como puede ser el caso. Por lo tanto, el alcance de la presente invención abarca todos estos isómeros y una mezcla de los mismos.

Un compuesto de fórmula general [I] también puede marcarse mediante isótopos (por ejemplo, 3H, 14C, 35S, etc.).

45 Un compuesto preferible de fórmula general [I] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo es un compuesto sustancialmente purificado de fórmula general [I] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo. Uno más preferible es un compuesto de la fórmula general [I] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo que se purifica con una pureza del 80 % o superior.

Se desvela que un profármaco de un compuesto de la fórmula general [I] también puede ser un fármaco útil, en el que el término "profármaco" se refiere a un derivado del compuesto de la presente invención, en el que los sitios de modificación para la formación del profármaco se seleccionan entre el grupo que consiste en hidroxilo, carboxilo y amino,

5 en el que el grupo modificado para hidroxilo se selecciona entre el grupo que consiste en acetilo, propionilo, isobutirilo, pivaloílo, palmitoilo, benzoílo, 4-metilbenzoílo, dimetilcarbamoílo, dimetilaminometilcarbonilo, sulfo, alanilo, fumarilo y 2-carboxietilcarbonilo o 3-carboxibenzoílo salificado con sodio, en el que el grupo modificado para carboxilo se selecciona entre el grupo que consiste en metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, tercbutilo, pivaloiloximetilo, carboximetilo, dimetilaminometilo, 1-(acetiloxi)etilo, 1-(etoxicarboniloxi)etilo, 1-(isopropiloxicarboniloxi)etilo, 1-(ciclohexiloxicarboniloxi)etilo, (5-metil-2-oxo-1,3-dioxol-4-il)metilo, bencilo, fenilo, o-tolilo, morfolinoetilo, N,N-dietilcarbamoilmetilo y ftalidilo y en el que el grupo modificado para amino se selecciona entre el grupo que consiste en tercbutilo, docosanoílo, pivaloilmetiloxi, alanilo, hexilcarbamoílo, pentilcarbamoílo, 3-metiltio-1-(acetilamino)propilcarbonilo, 1-sulfo-1-(3-etoxi-4-hidroxifenil)metilo, (5-metil-2-oxo-1,3-dioxol-4-il)metilo, (5-metil-2-oxo-1,3-dioxol-4-

15 il)metoxicarbonilo, tetrahidrofuranoilo y pirrolidilinetilo.

La “composición farmacéutica” incluye una preparación oral tal como un comprimido, cápsula, gránulo, polvo, pastilla para chupar, jarabe, emulsión, suspensión o una preparación parenteral, tal como una preparación externa, supositorio, inyección, gotas, fármaco nasal, fármaco pulmonar.

La composición farmacéutica de la presente invención también puede prepararse mezclando de forma apropiada un compuesto de fórmula general [I] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, con al menos uno o más tipos de vehículos farmacéuticamente aceptables en cantidades apropiadas, de acuerdo con métodos conocidos en el campo de la preparación de medicinas. El contenido de un compuesto de fórmula general [I]

25 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, en la composición farmacéutica, depende de sus formas farmacéuticas, de las cantidades de dosificación, etc., y, por ejemplo, es del 0,1 al 100 % en peso de la composición.

El “vehículo farmacéuticamente aceptable” incluye diversos vehículos orgánicos o inorgánicos convencionales para materiales farmacéuticos, por ejemplo excipiente, disgregante, aglutinante, fluidizador, lubricante para preparaciones sólidas o medio disolvente, agente de solubilización, agente de suspensión, agente de tonicidad, tampón, lenitivos para preparaciones líquidas. Adicionalmente, si se necesita puede utilizarse un aditivo incluyendo un agente conservante, un agente antioxidante, un colorante, un agente edulcorante.

35 El “excipiente” incluye lactosa, sacarosa, D-manitol, D-sorbitol, almidón de maíz, dextrina, celulosa microcristalina, celulosa cristalina, carmelosa, carmelosa de calcio, carboximetil almidón de sodio, hidroxipropilcelulosa de baja sustitución, goma arábiga, etc.

El “disgregante” incluye carmelosa, carmelosa de calcio, carmelosa de sodio, carboximetil almidón de sodio, croscarmelosa de sodio, crospovidona, hidroxipropilcelulosa de baja sustitución, hidroxipropilmetilcelulosa, celulosa cristalina, etc.

El “aglutinante” incluye hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, povidona, celulosa cristalina, sacarosa, dextrina, almidón, gelatina, carmelosa de sodio, goma arábiga, etc.

45 El “fluidizador” incluye celulosa microcristalina, estearato de magnesio, etc.

El “lubricante” incluye estearato de magnesio, estearato de calcio, talco, etc.

El “medio disolvente” incluye agua purificada, etanol, propilenglicol, macrogol, aceite de sésamo, aceite de maíz, aceite de oliva, etc.

El “agente de solubilización” incluye propilenglicol, D-manitol, benzoato de bencilo, etanol, trietanolamina, carbonato de sodio, citrato de sodio, etc.

55 El “agente de suspensión” incluye cloruro de benzalconio, carmelosa, hidroxipropilcelulosa, propilenglicol, povidona, metilcelulosa, monoestearato de glicerilo, etc.

El “agente de tonicidad” incluye glucosa, D-sorbitol, cloruro de sodio, D-manitol, etc.

El “tampón” incluye fosfato de sodio hidrógeno, acetato de sodio, carbonato de sodio, citrato de sodio, etc.

El “linitivo” incluye alcohol bencílico, etc.

65 El “agente conservante” incluye paraoxibenzoato de etilo, clorobutanol, alcohol bencílico, deshidroacetato de sodio, ácido sórbico, etc.

El “agente antioxidante” incluye sulfito de sodio, ácido ascórbico, etc.

El “colorante” incluye colorante alimentario (por ejemplo, Rojo Alimentario n.º 2 o 3, Amarillo Alimentario n.º 4 o 5, etc.), β-caroteno, etc. 5 El “agente edulcorante” incluye sacarina de sodio, glicirricinato dipotásico, aspartamo, etc.

La composición farmacéutica de la presente invención puede administrarse por vía oral o parenteral (por ejemplo, por vía local, vía rectal, vía intravenosa, etc.) a un mamífero que no sean seres humanos (por ejemplo, ratones, ratas, 10 hámsteres, cobayas, conejos, gatos, perros, cerdos, vacas, caballos, ovejas, monos, etc.), así como a seres humanos. Una dosis de dicha composición farmacéutica depende de los sujetos de administración, las enfermedades, afecciones, formas farmacéuticas, vías de administración y la dosis en el caso de la administración por vía oral a pacientes adultos (peso corporal: aproximadamente 60 kg) que padecen rechazo del trasplante de órgano, reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante, enfermedad autoinmunitaria o enfermedad alérgica, etc., está

15 habitualmente en el intervalo desde aproximadamente 1 mg hasta 1 g por día, comprendiendo el presente compuesto como principio activo. La dosis puede administrarse en una sola vez o en varias dosis divididas.

El compuesto de fórmula general [I] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, puede utilizarse como el principio activo de un agente terapéutico o preventivo para las siguientes enfermedades, debido a su

20 actividad inhibidora de JAK3:

(a): rechazo del trasplante de órganos o reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante;

(b): enfermedades autoinmunitarias incluyendo artritis reumatoide, psoriasis, artritis psoriásica, esclerosis múltiple,

colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, lupus eritematoso sistémico, diabetes de tipo I, miastenia gravis, 25 enfermedad de Castleman, artritis idiopática juvenil, ojo seco; y

(c) enfermedades alérgicas incluyendo asma, dermatitis atópica, rinitis.

Preferentemente, puede utilizarse como el principio activo de un agente terapéutico o preventivo para la artritis reumatoide o la psoriasis, un compuesto de fórmula general [I] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un

30 solvato del mismo.

Además, puede utilizarse como el principio activo de un agente terapéutico o preventivo para enfermedades mieloproliferativas crónicas incluyendo policitemia vera, mielofibrosis primaria, trombocitemia esencial, etc., debido a su actividad inhibidora de JAK2, un compuesto de fórmula general [I] o una sal farmacéuticamente aceptable del

35 mismo o un solvato del mismo.

La frase “inhibidora de JAK” se refiere a las funciones inhibidoras de JAK hasta hacer desaparecer o reducir su actividad y a la inhibición de cualquier función de la familia JAK. Una “inhibidora de JAK” preferente es una “inhibidora de JAK humana”.

40 Un “inhibidor de JAK” preferente es un “inhibidor JAK humana”.

La frase “inhibidora de JAK3” se refiere a las funciones inhibidoras de JAK3 hasta hacer desaparecer o reducir su actividad. Por ejemplo, se refiere a las funciones de inhibición de JAK3 en las condiciones de los ejemplos de ensayo

45 como se describe a continuación en el presente documento. Una “inhibidora de JAK3” preferente es una “inhibidora de JAK3 humana”.

Un “inhibidor de JAK3” preferente es un “inhibidor de JAK3 humana”.

50 La frase “inhibidora de JAK2” se refiere a las funciones inhibidoras de JAK2 hasta hacer desaparecer o reducir su actividad. Por ejemplo, se refiere a las funciones de inhibición de JAK2 en las condiciones de los ejemplos de ensayo como se describe a continuación en el presente documento. Una “inhibidora de JAK2” preferente es una “inhibidora de JAK2 humana”.

55 Un “inhibidor de JAK2” preferente es un “inhibidor de JAK2 humana”.

Como un ejemplo, un método para preparar compuestos para trabajar la presente invención se ilustra de la siguiente manera y el método para preparar el compuesto de la presente invención no está destinado a limitarse al mismo.

60 A menos que se especifique lo contrario, pueden realizarse métodos de preparación eficaces introduciendo cualquiera de los grupos protectores en cualquiera de los grupos funcionales, si se necesita y después desproteger tales grupos en una etapa posterior; tratar cualquiera de los grupos funcionales en las formas de sus precursores en cada etapa y convertir tales precursores en los grupos funcionales deseables correspondientes en una etapa adecuada; o intercambiar cada orden de proceso y etapa.

En cada etapa, cada postratamiento de reacción puede realizarse de manera convencional y un proceso de aislamiento y purificación puede seleccionarse opcionalmente entre el método convencional, incluyendo cristalización, recristalización, destilación, separación, cromatografía sobre gel de sílice, HPLC preparativa o una combinación de los mismos. La temperatura ambiente se refiere a de 1 ºC a 40 ºC.

[Método de Preparación General 1]: Método de Preparación General del Compuesto [I]

[Vb]

10 [En el esquema anterior, PN es un grupo protector de amina, preferiblemente tercbutoxicarbonilo, bencilo, p-metoxibencilo, benciloxicarbonilo; Q es N (átomo de nitrógeno) sustituido con un grupo protector o NH; Hal es un átomo de halógeno; Ra,Rb, n1, n2, Xa,Xb, X, m1, m2 y Rc tienen los mismos significados que se han definido en la fórmula [I] anterior.]

15 (Etapa 1)

El compuesto [Va] puede hacerse reaccionar con el compuesto [Vb] en un disolvente en presencia de una base para dar el compuesto [Vc].

20 El disolvente usado en la reacción incluye un disolvente de éster, tal como acetato de etilo; un disolvente de cetona, tal como acetona; un disolvente de amida, tal como N,N-dimetilformamida; un disolvente de alcohol, tal como etanol; un disolvente de éter, tal como dioxano; un disolvente de hidrocarburo, tal como tolueno; un disolvente de hidrocarburo halogenado, tal como cloroformo; agua y puede usarse solo o en una combinación de 2 o más de ellos. Un disolvente

25 preferible en la reacción es agua.

La base usada en la reacción incluye trietilamina, N,N-diisopropiletilamina, piridina, 4-dimetilaminopridina, N-metilmorfolina, hidróxido de litio, hidróxido sódico, hidróxido potásico, carbonato sódico, carbonato potásico, bicarbonato sódico, preferiblemente carbonato potásico.

30 La temperatura de reacción es normalmente de temperatura ambiente a 110 ºC, preferiblemente de aproximadamente de 80 ºC a110ºC.

El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente 30 minutos a 3 días, preferiblemente de 35 aproximadamente de 3 horas a 1 día.

(Etapa 2)

El compuesto [Vd] puede obtenerse retirando PN del compuesto [Vc] de manera convencional de reacción de 40 desprotección de amina. La reacción de desprotección puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores seleccionados.

Por ejemplo, el compuesto [Vc] en el que PN es tercbutoxicarbonilo puede tratarse en un solo disolvente o un disolvente mixto de cloroformo, dioxano, acetato de etilo, etanol, metanol, agua, etc. con un ácido, incluyendo ácido 45 clorhídrico, ácido trifluoroacético.

Por ejemplo, el compuesto [Vc] en el que PN es bencilo o benciloxicarbonilo puede hidrogenarse en un solo disolvente

o en un disolvente mixto de cloroformo, tetrahidrofurano, dioxano, acetato de etilo, etanol, metanol, etc. en presencia

de un catalizador que incluye paladio carbono, hidróxido de paladio. 50

(Etapa 3)

El compuesto [Vd] puede ser Rc introducido en un disolvente para dar el compuesto [I].

5 Por ejemplo, el compuesto [Vd] puede hacerse reaccionar con 1-cianoacetil-3,5-dimetilpirazol en un disolvente, en presencia de una base, para dar el compuesto [I] en el que Rc es cianoacetilo. El disolvente usado en la reacción incluye un disolvente de éster, tal como acetato de etilo; un disolvente de cetona, tal como acetona; un disolvente de amida, tal como N,N-dimetilformamida; un disolvente de alcohol, tal como etanol; un disolvente de éter, tal como dioxano; un disolvente de hidrocarburo, tal como tolueno; un disolvente de hidrocarburo halogenado, tal como

10 cloroformo y puede usarse solo o en una combinación de 2 o más de ellos. Un disolvente preferible en la reacción es dioxano. La base usada en la reacción incluye trietilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, N-metilmorfolina, N,N-diisopropiletilamina, preferiblemente N,N-diisopropiletilamina. La temperatura de reacción es normalmente de temperatura ambiente a 110 ºC, preferiblemente de aproximadamente 80 ºC a 110 ºC. El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente 30 minutos a 1 día, preferiblemente de aproximadamente de 2 a 4 horas.

15 Por ejemplo, el compuesto [Vd] puede hacerse reaccionar con un compuesto de ácido carboxílico en una reacción de amidación convencional en un disolvente en presencia de un agente de condensación y una base para dar el compuesto [I] en el que Rc es acilo. El disolvente usado en la reacción incluye un disolvente de amida, tal como N,N-dimetilformamida; un disolvente de hidrocarburo halogenado, tal como cloroformo y puede usarse solo o en una

20 combinación de 2 o más de ellos. Un disolvente preferible en la reacción es un disolvente de éter, tal como tetrahidrofurano o dioxano. El agente de condensación usado en la reacción incluye carbodiimida soluble en agua (por ejemplo, clorhidrato de 1-etil-3-(3’-dimetilaminopropil)carbodiimida), N,N’-diciclohexilcarbodiimida, difenilfosforilazida, carbonildiimidazol. A la mezcla de reacción puede añadirse 1-hidroxi-1H-benzotriazol, 4-dimetilaminopiridina, si se necesita. Un agente de condensación preferible en la reacción es carbonildiimidazol.

25 En la reacción de amidación anterior, el compuesto de ácido carboxílico también puede preconvertirse en un cloruro de ácido correspondiente o un anhídrido de ácido mixto y después hacerse reaccionar con el compuesto [Vd] para dar el compuesto [I].

30 Por ejemplo, el compuesto [Vd] puede hacerse reaccionar con acrilonitrilo en presencia de una base, incluyendo trietilamina, piridina, N,N-diisopropiletilamina, 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno en un disolvente de amida incluyendo N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida o acetonitrilo para dar el compuesto [I] en el que Rc es propilnitrilo.

35 Por ejemplo, el compuesto [Vd] puede hacerse reaccionar con alquilo cloroformiato, etc. mediante una síntesis convencional de carbamato para dar el compuesto [I] en el que Rc es alcoxicarbonilo.

Por ejemplo, el compuesto [Vd] puede hacerse reaccionar con alquilo isocianato, etc. mediante una síntesis convencional de urea para dar el compuesto [I] en el que Rc es alquilaminocarbonilo.

40 En la síntesis de urea anterior, el compuesto de alquilamina también puede hacerse reaccionar con cloroformiato de 4-nitrofenilo para dar 4-nitrofenil éster del ácido alquilcarbámico que puede hacerse reaccionar secuencialmente con el compuesto [Vd] para dar el compuesto [I].

45 Una desprotección de amina convencional en el compuesto [Vd] en el que N de Q está sustituido con un grupo protector puede realizarse opcionalmente después o antes de introducir Rc. La desprotección puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores seleccionados.

Por ejemplo, la desprotección en la que un grupo protector es p-toluenosulfonilo puede realizarse mediante tratamiento

50 con un álcali, incluyendo hidróxido sódico, hidróxido potásico, carbonato de cesio, en un solo disolvente o en un disolvente mixto de un disolvente de éter, tal como tetrahidrofurano o dioxano; un disolvente de alcohol, tal como etanol o metanol; agua, etc.

Por ejemplo, la desprotección en la que a grupo protector es p-metoxibencilo puede realizarse mediante tratamiento

55 con un ácido, tal como ácido clorhídrico, ácido trifluoroacético, en un solo disolvente o en un disolvente mixto de un disolvente de éter, tal como anisol; un disolvente de hidrocarburo halogenado, tal como cloroformo; un disolvente de éster, tal como acetato de etilo; un disolvente de éter, tal como dioxano; un disolvente de alcohol, tal como etanol o metanol; agua, etc.

60 Como un ejemplo, algunos métodos sintéticos del compuesto [Va] en Método de Preparación General 1 se ilustran en los siguientes Métodos de Preparación Generales 2 a 4.

En los siguientes Métodos de Preparación Generales 2 a 4, los compuestos [VIi] y [VIIo] corresponden al compuesto [Va].

[Método de Preparación General 2]

5 [En el esquema anterior, PN1,PN2 y PN3 son un grupo protector de amina, preferiblemente tercbutoxicarbonilo, bencilo, benciloxicarbonilo; Y es hidroxilo o un grupo saliente, incluyendo un átomo de cloro, un átomo de bromo, un átomo de yodo, mesiloxi, tosiloxi; m1’ es 0 o 1; los átomos de carbono con * pueden estar sustituidos con Ra de manera que sean químicamente aceptables; Ra,Rb, n1, n2 y m2 tienen los mismos significados que se han definido en la fórmula [I] anterior.]

10 (Etapa 1a)

El compuesto [VIa] puede esterificarse convencionalmente con el compuesto [VIb] en un disolvente para dar el compuesto [VIc]. Por ejemplo, el compuesto [VIa] puede hacerse reaccionar con los compuestos [VIb] en los que Y es

15 hidroxilo, en un disolvente en presencia de un agente de condensación y una base.

El disolvente usado en la reacción incluye un disolvente de amida, tal como N,N-dimetilformamida; un disolvente de éter, tal como tetrahidrofurano; un disolvente de hidrocarburo halogenado, tal como cloroformo y puede usarse solo o en una combinación de 2 o más de ellos. Un disolvente preferible en la reacción es un disolvente de hidrocarburo

20 halogenado, tal como cloroformo.

Un agente de condensación preferible usado en la reacción es carbodiimida soluble en agua (por ejemplo, clorhidrato de 1-etil-3-(3’-dimetil-aminopropil)carbodiimida), etc.

25 Una base preferible usada en la reacción es una base orgánica, tal como 4-dimetilaminopiridina, etc.

Una temperatura de reacción preferible es temperatura ambiente.

El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente de 30 minutos a 1 día, preferiblemente de 30 aproximadamente 2 a 6 horas.

Por ejemplo, el compuesto [VIa] también puede hacerse reaccionar con el compuesto [VIb] en el que Y es un grupo saliente, en un disolvente, en presencia de una base.

El grupo saliente incluye un átomo de cloro, un átomo de bromo, un átomo de yodo, mesiloxi y tosiloxi, preferiblemente 5 un átomo de bromo.

El disolvente usado en la reacción incluye un disolvente de amida, tal como N,N-dimetilformamida; un disolvente de éter, tal como dioxano; un disolvente de hidrocarburo, tal como tolueno y puede usarse solo o en una combinación de 2 o más de ellos. Un disolvente preferible en la reacción es N,N-dimetilformamida.

La base usada en la reacción incluye una base inorgánica, tal como carbonato sódico, carbonato potásico, fosfato sódico, fosfato potásico, bicarbonato sódico, preferiblemente carbonato potásico.

La temperatura de reacción es normalmente de temperatura ambiente a 120 ºC, preferiblemente de temperatura 15 ambiente a 60 ºC.

El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente de 30 minutos a 1 día, preferiblemente de aproximadamente 2 a 6 horas.

(Etapa 2a)

El compuesto [VIc] puede tratarse mediante un reordenamiento de Claisen convencional en un disolvente, en presencia de una base para dar el compuesto [VId].

25 Un disolvente preferible usado en la reacción es tetrahidrofurano.

La base usada en la reacción incluye una base, tal como diisopropilamida de litio, hexametil disilazida de litio, hexametil disilazida de potasio, hexametil disilazida de sodio, hidruro sódico, tercbutóxido potásico, preferiblemente hexametil disilazida de litio.

Una temperatura de reacción preferible es de aproximadamente -80 ºC a 0 ºC.

El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente de 30 minutos a 1 día, preferiblemente de aproximadamente 2 a 4 horas.

35 (Etapa 3a)

El resto de ácido carboxílico del compuesto [VId] puede convertirse en un carbamato en un disolvente para dar el compuesto [VIe]. La conversión incluye un reordenamiento de Curtius convencional.

Un reactivo preferible usado en la reacción es difenilfosforilazida.

El disolvente usado en la reacción incluye un disolvente de amida, tal como N,N-dimetilformamida; un disolvente de alcohol, tal como alcohol bencílico; un disolvente de éter, tal como dioxano; un disolvente de hidrocarburo, tal como

45 tolueno y puede usarse solo o en una combinación de 2 o más de ellos. Un disolvente preferible en la reacción es una solución mixta de tolueno y alcohol bencílico.

Una base preferible usada en la reacción es trietilamina.

La temperatura de reacción es normalmente de temperatura ambiente a 110 ºC, preferiblemente de aproximadamente 80 ºC a 110 ºC.

El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente 30 minutos a 2 días, preferiblemente de aproximadamente 2 horas a 1 día.

55 Puede usarse un aditivo, incluyendo 4-dimetilaminopiridina, si se necesita.

(Etapa 4a)

El resto de olefina del compuesto [VIe] puede convertirse en hidroxilo para dar el compuesto [VIf]. La conversión se ilustra en la siguiente Etapa 4a-1 o 2, como un ejemplo.

(Etapa 4a-1)

65 El compuesto [VIe] puede tratarse en un disolvente mediante una oxidación de ozono, seguido de una reducción para dar el compuesto [VIf]. La oxidación de ozono puede realizarse de acuerdo con un método convencional.

Un disolvente preferible usado en la oxidación de ozono es una solución mixta de cloroformo y metanol.

La temperatura de reacción en la oxidación de ozono es normalmente de aproximadamente -100 ºC a 0 ºC, preferiblemente de aproximadamente -80 ºC a -60 ºC.

5 El tiempo de reacción en la oxidación de ozono es normalmente de aproximadamente 5 minutos a 6 horas, preferiblemente de aproximadamente 15 minutos a 3 horas.

Un reactivo preferible usado en la reducción es borohidruro sódico.

10 La temperatura de reacción en la reducción es normalmente de aproximadamente -100 ºC a temperatura ambiente, preferiblemente de aproximadamente -20 ºC a 0 ºC.

El tiempo de reacción en la reducción es normalmente de aproximadamente 30 minutos a 6 horas, preferiblemente de 15 aproximadamente 1 a 3 horas.

(Etapa 4a-2)

El compuesto [VIe] puede tratarse en un disolvente mediante una hidroboración, seguido de una oxidación para dar el 20 compuesto [VIf].

El reactivo usado en la hidroboración incluye un complejo borano-piridina, un complejo borano-sulfuro de dimetilo, 9-borabiciclo[3.3.1]nonano o una solución de un complejo borano-tetrahidrofurano en tetrahidrofurano, preferiblemente una solución de complejo borano-tetrahidrofurano en tetrahidrofurano.

25 Un disolvente preferible usado en la hidroboración es tetrahidrofurano.

La temperatura de reacción en la hidroboración es normalmente de aproximadamente -20 ºC a temperatura ambiente, preferiblemente 0 ºC. 30 Un tiempo de reacción preferible en la hidroboración es de aproximadamente 1 a 4 horas.

El reactivo usado en la oxidación incluye peróxido de hidrógeno o peroxoborato sódico monohidrato, preferiblemente peroxoborato sódico monohidrato.

35 La temperatura de reacción en la oxidación es normalmente de aproximadamente 0 ºC a temperatura ambiente, preferiblemente temperatura ambiente.

Un tiempo de reacción preferible en la oxidación es de aproximadamente 1 hora a 1 día. 40 (Etapa 5a)

PN2

entre PN1 y PN2 puede retirarse selectivamente del compuesto [VIf] mediante una desprotección de amina convencional de una manera similar a la anterior Etapa 2 del Método de Preparación General 1 para dar el compuesto 45 [VIg]. La desprotección puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores

seleccionados.

(Etapa 6a)

50 El compuesto [VIg] puede tratarse en un disolvente mediante una ciclación, seguido de una introducción de PN3 para dar el compuesto [VIh]. La ciclación puede realizarse introduciendo un grupo saliente en el hidroxilo del compuesto [VIg] en un disolvente en presencia de una base. Como un ejemplo, la Etapa 6a-1 o 2 se ilustra de la siguiente manera.

(Etapa 6a-1)

55 El compuesto [VIg] puede hacerse reaccionar con tetrabromuro de carbono y trifenilfosfina (o como alternativa cloruro de metanosulfonilo en lugar de los dos reactivos) en un disolvente en presencia de una base para conseguir una introducción de un grupo saliente y una ciclación en una etapa.

60 Un disolvente preferible usado en la reacción es diclorometano.

Una base preferible usada en la reacción es trietilamina.

Una temperatura de reacción preferible es de 0 ºC a temperatura ambiente. 65

El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente 10 minutos a 24 horas, preferiblemente de aproximadamente 30 minutos a 12 horas.

(Etapa 6a-2) 5 La introducción de un grupo saliente y la ciclación pueden dividirse en dos etapas.

Un reactivo preferible usado en la introducción de un grupo saliente es cloruro de metanosulfonilo.

10 Un disolvente preferible usado en la introducción de un grupo saliente es cloroformo.

Una base preferible usada en la introducción de un grupo saliente es trietilamina.

La temperatura de reacción de la introducción de un grupo saliente es normalmente de aproximadamente 0 ºC a 15 temperatura ambiente, preferiblemente 0 ºC.

Un tiempo de reacción preferible de la introducción de un grupo saliente es aproximadamente de 30 minutos a 2 horas.

Un disolvente preferible usado en la ciclación es N,N-dimetilformamida. 20 Una base preferible usada en la ciclación es hidruro sódico.

La temperatura de reacción de la ciclación es normalmente de aproximadamente 0 ºC a temperatura ambiente, preferiblemente 0 ºC. 25 Un tiempo de reacción preferible de la ciclación es de aproximadamente 10 minutos a 2 horas.

PN3

El compuesto ciclado puede ser introducido mediante una protección de amina convencional para dar el compuesto [VIh]. La protección de amina puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos 30 protectores seleccionados.

PN3

Por ejemplo, un compuesto en el que es benciloxicarbonilo puede obtenerse mediante tratamiento con cloroformiato de bencilo en un disolvente de hidrocarburo halogenado, tal como cloroformo, diclorometano en presencia de una base orgánica, tal como trietilamina.

35 La Etapa 5a puede abreviarse y después, puedes realizarse Etapa 6a-2.

(Etapa 7a)

PN1

40 entre PN1 y PN3 puede retirarse selectivamente del compuesto [VIh] mediante una desprotección de amina convencional de una manera similar a la anterior Etapa 2 del Método de Preparación General 1 para dar el compuesto [VIi]. La desprotección puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores seleccionados.

Tanto el compuesto [Va], [Vc], [Vd] o [I] en el Método de Preparación General 1 o los compuestos [VId] a [VIi] en el 45 Método de Preparación General 2 pueden resolverse ópticamente para dar un compuesto ópticamente activo.

La resolución óptica incluye un método en el que el compuesto [VId] racémico y un compuesto de amina ópticamente activo se mezclan en un disolvente, seguido de cristalización en forma de una sal diastereomérica individual. La sal diastereomérica resultante puede desalarse de manera convencional para dar el compuesto [VId] ópticamente activo.

50 El isómero (+) o (-) del compuesto [VId] puede prepararse adoptando un compuesto de amina ópticamente activo adecuado.

El compuesto de amina ópticamente activo incluye (S)-(-)-2-amino-3-fenilpropan-1-ol, (R)-(+)-2-amino-3-fenilpropan-1-ol, (S)-(-)-1-(1-naftil)etilamina, (R)-(+)-]-(1-naftil)etilamina, (S)-(+)-2-amino-2-fenil-etanol, 55 (R)-(-)-2-amino-2-fenil-etanol.

El disolvente incluye un disolvente de cetona, tal como acetona, metil etil cetona, metil isobutil cetona; un disolvente de éster, tal como acetato de metilo, acetato de etilo, acetato de isopropilo, acetato de isobutilo; un disolvente de éter, tal como isopropil éter, 1,2-dimetoxietano; un disolvente de alcohol, tal como metanol, etanol, isopropanol; agua y puede

60 usarse solo o en una combinación de 2 o más de ellos. Un disolvente preferible incluye acetato de isopropilo, isopropanol o 1,2-dimetoxietano.

Además, puede realizarse opcionalmente un método convencional para potenciar la pureza óptica. Por ejemplo, puede repetirse una recristalización. 65

Un método alternativo para la resolución óptica incluye un método en el que el compuesto [I] racémico se trata mediante una columna de fase estacionaria quiral para separar el compuesto [I] ópticamente activo deseable de otro isómero del mismo.

[Método de Preparación General 3]

PN4 PN5 PN6 PN7

[En el esquema anterior, , , y son un grupo protector de amina, preferiblemente bencilo, tercbutoxicarbonilo o benciloxicarbonilo; PC1 es un grupo protector de ácido carboxílico, preferiblemente éster

5 tercbutílico, éster metílico o éster etílico; Hal es un átomo de halógeno; m1’ es 0 o 1; los átomos de carbono con * pueden estar sustituidos con Ra de manera que sean químicamente aceptables; los átomos de carbono con # pueden estar sustituidos con Rb de manera que sean químicamente aceptables; Ra,Rb, n1, n2 y m2 tienen los mismos significados que se han definido en la fórmula [I] anterior.]

10 (Etapa 1b)

El compuesto [Vila] puede ser PN4 introducido mediante una protección de amina convencional para dar el compuesto [VIIb]. La protección de amina puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores seleccionados.

15 Por ejemplo, en case de que PN4 sea bencilo, la protección puede realizarse mediante hidrogenación con benzaldehído en un disolvente de alcohol, tal como metanol, etanol en presencia de un catalizador de paladio, tal como paladio sobre carbono.

20 (Etapa 2b)

El compuesto [VIIb] puede hacerse reaccionar con el compuesto [Vllc] en un disolvente, en presencia de una base para dar el compuesto [VIId].

25 Un disolvente preferible usado en la reacción es N,N-dimetilformamida.

Una base preferible usada en la reacción es carbonato potásico.

La temperatura de reacción es normalmente de temperatura ambiente a 120 ºC, preferiblemente de temperatura ambiente a 60 ºC.

El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente 30 minutos a 2 días, preferiblemente de 5 aproximadamente 6 horas a 1 día.

(Etapa 3b)

El compuesto [VIId] puede halogenarse en un disolvente de manera convencional, seguido de un reordenamiento para 10 dar el compuesto [VIIe].

Un reactivo preferible usado en la halogenación es cloruro de tionilo.

Un disolvente preferible usado en la halogenación es cloroformo. 15 Una temperatura de reacción preferible de la halogenación es de temperatura ambiente a 60 ºC.

El tiempo de reacción de la halogenación es normalmente de aproximadamente de 30 minutos a 1 día, preferiblemente de aproximadamente 1 a 6 horas.

20 El reordenamiento se ilustra en la siguiente Etapa 3b2. Específicamente, el compuesto [VIIe2] obtenido en la halogenación puede reordenarse en un disolvente para dar el compuesto [VIIe3].

25 Un disolvente preferible usado en el reordenamiento es N,N-dimetilformamida.

Una temperatura de reacción preferible del reordenamiento es de aproximadamente 60 ºC a 100 ºC.

30 Un tiempo de reacción preferible del reordenamiento es de aproximadamente 30 minutos a 3 días.

(Etapa 4b)

El compuesto [VIIe] puede ciclarse intramolecularmente en un disolvente, en presencia de una base para dar el 35 compuesto [VIIf].

Una base preferible usada en la reacción es hexametil disilazida de litio.

Un disolvente preferible usado en la reacción es una solución mixta de tetrahidrofurano y hexametil fosforamida.

40 La temperatura de reacción es normalmente de aproximadamente -100 ºC a 0 ºC, preferiblemente de aproximadamente -80 ºC a 0 ºC.

El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente 30 minutos a 6 horas, preferiblemente de 45 aproximadamente 1 a 2 horas.

(Etapa 5b)

PN4 del compuesto [VIIf] puede convertirse en PN5 para dar el compuesto [VIIg].

50 La retirada de PN4 puede realizarse mediante una desprotección de amina convencional de una manera similar a la Etapa 2 del Método de Preparación General 1 anterior. La desprotección puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores seleccionados.

La introducción de PN5 puede realizarse mediante una protección de amina convencional de una manera similar a la Etapa 1b del Método de Preparación General 3 anterior. La protección de amina puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores seleccionados.

5 Por ejemplo, en caso de que PN4 del compuesto [VIIf] sea bencilo y PN5 del compuesto [VIIg] sea tercbutoxicarbonilo, PN4 PN5

puede convertirse en en una etapa mediante hidrogenación del compuesto [VIIf] con dicarbonato de di-tercbutilo en un disolvente mixto de tetrahidrofurano y metanol, en presencia de un catalizador, tal como paladio sobre carbono o hidróxido de paladio.

10 (Etapa 6b)

El compuesto [VIIg] puede hacerse reaccionar con el compuesto [VIIh] en un disolvente, en presencia de una base para dar el compuesto [VIIi].

15 Una base preferible usada en la reacción es hexametil disilazida de litio.

Un disolvente preferible usado en la reacción es tetrahidrofurano.

La temperatura de reacción es normalmente de aproximadamente -80 ºC a temperatura ambiente, preferiblemente de 20 aproximadamente -80 ºC a 0 ºC.

El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente 30 minutos a 3 horas, preferiblemente de aproximadamente 30 minutos a 1 hora.

25 (Etapa 7b)

El resto de olefina del compuesto [VIIi] puede escindirse oxidativamente en un disolvente para dar el compuesto [VIIj].

La escisión oxidativa incluye una oxidación de ozono mediante un tratamiento reductor. 30 Un disolvente preferible usado en la reacción es una solución mixta de cloroformo y metanol.

La temperatura de reacción es normalmente de aproximadamente -100 ºC a 0 ºC, preferiblemente de aproximadamente -80 ºC a 0 ºC.

35 El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente 5 minutos a 6 horas, preferiblemente de aproximadamente 30 minutos a 2 horas.

El reactivo usado como agente reductor incluye sulfuro de dimetilo o trifenilfosfina, preferiblemente trifenilfosfina. 40 (Etapa 8b)

El compuesto [VIIj] puede aminarse reductoramente en un disolvente para dar el compuesto [VIIk].

45 Una amina preferible usada en la reacción es bencilamina.

Un disolvente preferible usado en la reacción es tetrahidrofurano.

Una temperatura de reacción preferible es temperatura ambiente. 50 Un tiempo de reacción preferible es de aproximadamente 12 horas a 1 día.

Un reactivo preferible usado como agente reductor es triacetoxiborohidruro sódico.

55 (Etapa 9b)

El compuesto [VIIk] puede tratarse mediante retirada simultánea de PC1 y PN5 en una desprotección de ácido carboxílico convencional y desprotección de amina para dar el compuesto [VIII]. La desprotección puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores seleccionados.

60 Por ejemplo, el compuesto [VIIk] en el que PC1 es éster tercbutílico y PN5 es tercbutoxicarbonilo puede tratarse en un solo disolvente o un disolvente mixto de anisol, cloroformo, acetato de etilo, dioxano, agua, etc. mediante un ácido, tal como ácido clorhídrico, ácido trifluoroacético.

(Etapa 10b)

El compuesto [VIII] puede ciclarse intramolecularmente en un disolvente para dar el compuesto [VIIm]. La ciclación incluye una amidación convencional en presencia de un agente de condensación y una base.

5 Un agente de condensación preferible usado en la reacción es hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronio.

Una base preferible usada en la reacción es diisopropiletilamina. 10 Un disolvente preferible usado en la reacción es cloroformo.

Una temperatura de reacción preferible es temperatura ambiente.

15 El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente de 30 minutos a 1 día, preferiblemente de aproximadamente 1 a 6 horas.

Como una ciclación alternativa, el compuesto [VIIk] en el que PC1 es éster etílico o éster metílico puede ser PN5 retirado selectivamente mediante una desprotección de amina convencional, quedando PC1, seguido de una ciclación con una 20 solución acuosa 2 M de hidróxido sódico en un disolvente de alcohol, tal como etanol a temperatura ambiente para dar el compuesto [VIIm].

(Etapa 11b)

25 El resto de amida del compuesto [VIIm] puede reducirse a una amina en un disolvente, seguido de una introducción de PN7 mediante una protección de amina convencional para dar el compuesto [VIIn].

Un agente de reducción preferible usado en la reducción es una mezcla de hidruro de litio y aluminio y ácido sulfúrico concentrado. Un uso preferible de ácido sulfúrico concentrado es de 0,5 moles con respecto a 1 mol de hidruro de litio 30 y aluminio.

Un disolvente preferible usado en la reducción es tetrahidrofurano.

La temperatura de reacción de la reducción es normalmente de aproximadamente 0 ºC a temperatura ambiente, 35 preferiblemente 0 ºC.

El tiempo de reacción de la reducción es normalmente de aproximadamente 30 minutos a 3 horas, preferiblemente de aproximadamente 1 a 2 horas.

40 La protección de amina puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores seleccionados de una manera similar a la Etapa 1b del Método de Preparación General 3 anterior. Por ejemplo, en caso de que PN7 sea tercbutoxicarbonilo, el compuesto [VIIm] puede hacerse reaccionar con dicarbonato de di-tercbutilo en tetrahidrofurano.

45 (Etapa 12b)

PN6

entre PN6 y PN7 del compuesto [VIIn] puede retirarse selectivamente mediante una desprotección de amina convencional de una manera similar a la Etapa 2 del Método de Preparación General 1 anterior para dar el compuesto [VIIo]. La desprotección puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores

50 seleccionados.

[Método de Preparación General 4]

5 [En el esquema anterior, PN8 es un grupo protector de amina, preferiblemente tercbutoxicarbonilo; PC2 es un grupo protector de ácido carboxílico, preferiblemente éster tercbutílico; Hal es un átomo de halógeno; m2’ es 1 o 2; los átomos de carbono de * pueden estar opcionalmente sustituidos con Ra de manera que sean químicamente aceptables; los átomos de carbono de # pueden estar opcionalmente sustituidos con Rb de manera que sean químicamente aceptables; Ra,Rb, n1, n2 y m1 tienen los mismos significados que se han definido en la fórmula [I]

10 anterior.]

(Etapa 1c)

El compuesto [VIIla] puede hacerse reaccionar con tricloroetanal en un disolvente para dar el compuesto [VIIIb]. 15 Un disolvente preferible usado en la reacción es acetonitrilo.

Una temperatura de reacción preferible es temperatura ambiente.

20 El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente 30 minutos a 3 días, preferiblemente de aproximadamente 6 horas a 1 día.

(Etapa 2c)

25 El compuesto [VIIIb] puede hacerse reaccionar con el compuesto [VII Ic] en un disolvente en presencia de una base para dar el compuesto [VIIId].

Un disolvente preferible usado en la reacción es tetrahidrofurano.

30 Una base preferible usada en la reacción es diisopropilamida de litio.

La temperatura de reacción es normalmente de aproximadamente -80 ºC a temperatura ambiente, preferiblemente de aproximadamente -80 ºC a 0 ºC. El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente de 30 minutos a 1 día, preferiblemente de 5 aproximadamente 1 a 3 horas.

(Etapa 3c) El compuesto [VII Id] puede tratarse mediante solvólisis en una condición ácida en un disolvente de alcohol para dar el compuesto [VIIIe].

Un disolvente preferible usado en la reacción es metanol. Un ácido preferible usado en la reacción es ácido sulfúrico concentrado. Un uso preferible de ácido sulfúrico

15 concentrado es de 0,1 a 3 moles con respecto a 1 mol del compuesto [VII Id]. Una temperatura de reacción preferible es de temperatura ambiente a 65 ºC. El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente 30 minutos a 3 días, preferiblemente de

aproximadamente 6 horas a 1 día. (Etapa 4c) El compuesto [VIIIe] puede ser PN8 introducido mediante una protección de amina convencional de una manera similar

25 a la Etapa 1b del Método de Preparación General 3 anterior para dar el compuesto [VIIIf]. La protección de amina puede realizarse por métodos conocidos dependiendo de los grupos protectores seleccionados. Por ejemplo, en caso de que PN8 sea tercbutoxicarbonilo, el compuesto [VIIIe] puede hacerse reaccionar con dicarbonato de di-tercbutilo en tetrahidrofurano.

(Etapa 5c) El compuesto [VIIIf] puede tratarse en un disolvente mediante una hidroboración, seguido de una oxidación para dar el compuesto [VIIIg] de una manera similar a la Etapa 4a-2 del Método de Preparación General 2.

35 (Etapa 6c) El compuesto [VIIIg] puede oxidarse en un disolvente para dar el compuesto [VIIIh]. El reactivo usado en la reacción incluye complejo de trióxido de azufre-piridina o peryodinano de Dess-Martin,

preferiblemente peryodinano de Dess-Martin. Un disolvente preferible usado en la reacción es cloroformo. Una temperatura de reacción preferible es de aproximadamente 0 ºC a temperatura ambiente.

45 El tiempo de reacción es normalmente de aproximadamente de 30 minutos a 1 día, preferiblemente de aproximadamente 2 a 6 horas.

Pueden añadirse opcionalmente bases, incluyendo bicarbonato sódico, como aditivo. El compuesto [VIIIh] resultante puede hacerse reaccionar de una manera similar a la Etapa 8b del Método de Preparación General 3 o posterior para dar un compuesto de amina correspondiente al compuesto [VIIo].

Ejemplos

55 A continuación, las preparaciones de los compuestos de la presente invención se ilustran específicamente mediante Ejemplos. Sin embargo, la presente invención no está destinada a limitarse a los mismos.

En los ejemplos, se abrevian las estereoquímicas en las estructuras químicas de los compuestos.

Los aparatos de medición y condiciones usadas e los Ejemplos son de la siguiente manera. Condición de análisis de HPLC 1 Método de preparación para la solución A: Se disolvió dihidrogenofosfato sódico dihidrato (23,4 g) en agua (3000 ml) para ajustarse a pH 2,1 usando ácido fosfórico (10,2 ml).

65 Instrumento de medición: Sistema High Performance Liquid Chromatograph Prominence de HPLC SHIMADZU CORPORATION

Columna: DAICEL CHIRALPAK AD-3R, 4,6 mmφ X 150 mm Temperatura de columna: 40 ºC Fase móvil: (solución A) tampón fosfato (sódico) 100 mM (pH 2,1), (solución B) metanol Solución A: Solución B = 30:70 (envío constante de 20 minutos). Tasas de envío de soluciones: 0,5 ml/min Detección: UV (220 nm)

[Preparación 1]: Síntesis del Compuesto 1

(1) 1-tercButil éster de 3-((E)-but-2-enil)éster del ácido piperidin-1,3-dicarboxílico

15 A una solución de ácido 1-(tercbutoxicarbonil)-3-piperidincarboxílico (50,0 g) y 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)-carbodiimida (45,8 g) en cloroformo (500 ml) se le añadió 4-dimetilaminopiridina (29,3 g) y la mezcla se agitó durante 50 minutos. A la mezcla se le añadió (E)-but-2-en-1-ol (22,1 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas. A la mezcla de reacción se le añadió una solución acuosa al 10 % de bisulfato potásico (500 ml) y la

20 mezcla se extrajo con cloroformo. La capa orgánica separada se lavó secuencialmente con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (400 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico (350 ml). La capa acuosa separada se extrajo de nuevo con cloroformo (300 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 7/1) para dar el compuesto del título (57,1 g).

25 RMN 1H (CDCl3) δ: 5,84-5,73 (1H, m), 5,62-5,52 (1H, m), 4,51 (2H, d, J = 6,4 Hz), 4,37-4,00 (1H, m), 3,95-3,88 (1H, m), 3,19-2,87 (1H, m), 2,84-2,76 (1H, m), 2,48-2,40 (1H, m), 2,08-2,01 (1H, m), 1,74-1,66 (5H, m), 1,63-1,55 (1H, m), 1,46 (9H, s).

(2) 1-tercButil éster del ácido 3-(1-metil-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico

5 A una solución de 1-tercbutil éster de 3-((E)-but-2-enil)éster del ácido piperidin-1,3-dicarboxílico (105,7 g) en tetrahidrofurano (1000 ml) enfriada a -68 ºC se le añadió hexametil disilazida de litio (solución 1,1 M en tetrahidrofurano, 411 ml). La mezcla de reacción se calentó a 0 ºC durante 20 minutos, se agitó a la misma temperatura durante 30 minutos más y después se enfrió de nuevo a -68 ºC. A la mezcla se le añadió cloruro de trimetilsililo (56,6 ml). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente durante 2 horas y se agitó a la misma

10 temperatura durante 2 horas más. Después de refrigeración con hielo, a la mezcla se le añadieron secuencialmente agua (1000 ml) y una solución acuosa 2 M de hidróxido sódico (136 ml) y la mezcla se lavó con n-hexano (1000 ml). La capa acuosa separada se acidificó con una solución acuosa 2 M de ácido clorhídrico y después se extrajo con acetato de etilo (800 ml). La capa orgánica se lavó secuencialmente con agua (700 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico (400 ml) y la capa acuosa separada se extrajo de nuevo con acetato de etilo (600 ml). La capa orgánica

15 combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se lavó de la suspensión con una solución de n-hexano/acetato de etilo (6/1, 700 ml) para dar el compuesto del título (59,8 g). El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo resultante se lavó de nuevo de la suspensión con una solución de n-hexano/acetato de etilo (4/1,200 ml) para dar un sólido (14,4 g). El sólido se lavó de nuevo de la suspensión con una solución de n-hexano/acetato de etilo (5/1, 100 ml) para dar el compuesto del título (11,9 g). El material resultante se

20 combinó para dar el compuesto del título (71,7 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 5,80-5,71 (1H, m), 5,09-5,07 (1H, m), 5,06-5,03 (1H, m), 4,32-4,20 (1H, m), 3,90-3,83 (1H, m), 2,87-2,74 (2H, m), 2,39-2,31 (1H, m), 2,19-2,11 (1H, m), 1,64-1,55 (2H, m), 1,51-1,44 (1H, m), 1,45 (9H, s), 1,07 (3H, d, J = 7,1 Hz).

25 (3) Compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico

(3)-(1) Cristal de siembra de una sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1-metil-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico con (R)-(-)-2-amino-2-fenil-etanol

5 Se mezclaron para su disolución 1-tercbutil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico (2,0 g), acetato de isopropilo (10 ml) e isopropanol (10 ml). A la mezcla se le añadió (R)-(-)-2-amino-2-fenil-etanol (484 mg) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla de suspensión se filtró y el sólido resultante se lavó con acetato de isopropilo (6 ml) y se secó a presión reducida para dar el compuesto del título (735 mg).

10 (3)-(2) Sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico con (R)-(-)-2-amino-2-fenil-etanol

Se mezclaron para su disolución 1-tercbutil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico (106,6 g),

15 (R)-(-)-2-amino-2-fenil-etanol (31,0 g), acetato de isopropilo (480 ml) e isopropanol (480 ml) a temperatura ambiente. A la solución de mezcla se le añadió el cristal de siembra obtenido en (3)-(1) y la mezcla se agitó durante 16 horas. La mezcla de suspensión se filtró para dar el compuesto del título (47,0 g). Un análisis del sólido resultante mediante la Condición de análisis de HPLC 1 mostró que un isómero con tiempos de retención más cortos era un producto principal.

20 Un isómero con tiempos de retención más cortos (tiempo de retención 6,48 minutos)

Un isómero con tiempos de retención más largos (tiempo de retención 10,70 minutos)

25 (3)-(3) Compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico recuperado del filtrado de (3)-(2)

El filtrado de (3)-(2) se concentró a presión reducida y el residuo resultante se mezcló con acetato de etilo (500 ml) y agua (500 ml). La mezcla se acidificó mediante la adición de bisulfato potásico. La capa orgánica separada se lavó con

30 una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se concentró a presión reducida. Al residuo se le añadió isopropanol y la mezcla se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (75,0 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 5,80-5,71 (1H, m), 5,09-5,07 (1H, m), 5,06-5,03 (1H, m), 4,32-4,20 (1H, m), 3,90-3,83 (1H, m), 2,87-2,74 (2H, m), 2,39-2,31 (1H, m), 2,19-2,11 (1H, m), 1,64-1,55 (2H, m), 1,51-1,44 (1H, m), 1,45 (9H, s), 1,07 (3H, d, J = 7,1 Hz).

(4) Sal de un compuesto ópticamente activo de 1-terc-butil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico con (S)-(+)-2-amino-2-fenil-etanol

40 El residuo resultante (75,0 g) obtenido en (3)-(3), (S)-(+)-2-amino-2-fenil-etanol (31,0 g), acetato de isopropilo (335 ml) e isopropanol (306 ml) se mezclaron para su disolución a temperatura ambiente. A una solución mixta se le añadió el cristal de siembra obtenido en (3)-(1) y la mezcla se agitó durante 17,5 horas. La mezcla de suspensión se filtró y el sólido resultante se lavó con acetato de isopropilo (150 ml) para dar el compuesto del título (54,2 g). Un análisis del

45 sólido mediante la Condición de análisis de HPLC 1 mostró que un isómero con tiempos de retención más largos era un producto principal.

Un isómero con tiempos de retención más cortos (tiempo de retención 6,48 minutos) Un isómero con tiempos de retención más largos (tiempo de retención 10,70 minutos)

(5) Compuesto ópticamente activo de 1-terc-butil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico

A un compuesto ópticamente activo de 1-terc-butil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico y sal de

10 (S)-(+)-2-amino-2-fenil-etanol (52,7 g) se le añadieron para su mezcla acetato de etilo (264 ml) y agua (264 ml) y la mezcla se acidificó mediante la adición de bisulfato potásico. La capa orgánica separada se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (36,0 g). El producto en bruto se usó parcialmente en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (CDCl3) δ: 5,80-5,71 (1H, m), 5,09-5,07 (1H, m), 5,06-5,03 (1H, m), 4,32-4,20 (1H, m), 3,90-3,83 (1H, m),

15 2,87-2,74 (2H, m), 2,39-2,31 (1H, m), 2,19-2,11 (1H, m), 1,64-1,55 (2H, m), 1,51-1,44 (1H, m), 1,45 (9H, s), 1,07 (3H, d, J = 7,1 Hz).

(6) Compuesto ópticamente activo de éster terc-butílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1-metilalil)piperidin

1-carboxílico 20

A una solución a reflujo de un compuesto ópticamente activo de 1- tercbutil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico (9,0 g) y trietilamina (8,9 ml) en tolueno (90 ml) se le añadió gota a gota 25 difenilfosforilazida (8,9 ml) en 25 minutos. La mezcla de reacción se agitó durante 2,5 horas a la misma temperatura y después se le añadieron alcohol bencílico (10 ml) y 4-dimetilaminopiridina (771 mg). La mezcla se agitó durante 33 horas con reflujo, seguido de enfriamiento a temperatura ambiente y se acidificó mediante la adición de una solución acuosa al 10 % de bisulfato potásico. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y la capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por

30 cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetona = 20/1). Las fracciones que no pudieron aislarse o purificarse se concentraron a presión reducida y el residuo resultante se purificó de nuevo por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetona = 20/1). Las fracciones purificadas se combinaron para concentrarse a presión reducida para dar el compuesto del título (11,0 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,37-7,29 (5H, m), 5,80-5,70 (1H, m), 5,36-5,17 (0,5H, m), 5,12-4,99 (4H, m), 4,96-4,74 (0,5H, m),

35 4,08-3,92 (2H, m), 2,98-2,33 (4H, m), 1,64-1,38 (4H, m), 1,44 (9H, s), 1,03 (3H, d, J = 7,0 Hz).

(7) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(2-hidroxi-1-metiletil)- piperidin-1-carboxílico

5 Una solución de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1-metilalil)piperidin-1-carboxílico (25,5 g) en cloroformo/metanol (250 ml/250 ml) enfriado a -78 ºC se le fluyó aire de ozono durante 30 minutos. A la mezcla de reacción se le añadió borohidruro sódico (7,5 g) en pequeños lotes y la mezcla se calentó a temperatura ambiente. A la mezcla se le añadió una solución acuosa al 5 %

10 de bicarbonato sódico (250 ml) y la mezcla se extrajo con cloroformo (125 ml). La capa acuosa separada se extrajo de nuevo con cloroformo (125 ml). La capa orgánica combinada se lavó secuencialmente con una solución acuosa mixta de bicarbonato sódico/tiosulfato sódico (12,5 g/25,0 g, 275 ml), agua (125 ml) y una solución acuosa al 10 % de cloruro sódico (125 ml), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 1/0 a 2/3) para dar el

15 compuesto del título (21,9 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,37-7,29 (5H, m), 5,54-5,15 (1H, m), 5,06 (1H, d, J = 12,4 Hz), 5,02 (1H, d, J = 12,4 Hz), 4,03-3,93 (1H, m), 3,84-3,64 (3H, m), 3,27-2,84 (2H, m), 2,16-1,86 (2H, m), 1,66-1,59 (2H, m), 1,52-1,45 (1H, m), 1,44 (9H, s), 1,04 (3H, d, J = 7,1 Hz).

20 (8) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-amino-3-(2-hidroxi-1-metiletil)piperidin- 1-carboxílico

25 A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(2-hidroxi-1-metiletil)piperidin-1-carboxílico (21,0 g) en metanol (400 ml) se le añadió paladio al 10 % sobre carbono (2,1 g) y la mezcla se hidrogenó a temperatura ambiente a una presión corriente durante 90 minutos. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (13,8 g).

30 RMN 1H (CDCl3) δ: 3,96-3,87 (1H, m), 3,86-3,77 (1H, m), 3,74-3,65 (1H, m), 3,63-3,58 (1H, m), 3,09-2,91 (1H, m), 2,87-2,77 (1H, m), 1,70-1,43 (5H, m), 1,46 (9H, s), 0,96 (3H, d, J = 6,9 Hz).

(9) Compuesto ópticamente activo de 6-tercbutil éster de 1-bencilo éster del ácido 3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1,6-dicarboxílico

5 A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-amino-3-(2-hidroxi-1-metiletil)piperidin-1-carboxílico (12,9 g), trifenilfosfina (20,3 g) y trietilamina (21,6 ml) en diclorometano (400 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió tetrabromuro de carbono (25,9 g) en pequeños lotes. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y la mezcla se enfrió a 4 ºC. Después, se le añadieron

10 trietilamina (10,8 ml) y cloroformiato de bencilo (10,3 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 40 minutos. A la mezcla se le añadió una solución acuosa al 5 % de bicarbonato sódico (125 ml) y la mezcla se extrajo con cloroformo (125 ml). La capa acuosa separada se extrajo de nuevo con cloroformo (125 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (125 ml), una solución acuosa al 10 % de cloruro sódico (125 ml), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna

15 sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 1/0 a 7/3) para dar el compuesto del título (12,4 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,39-7,29 (5H, m), 5,17-5,00 (2H, m), 4,32-3,81 (3H, m), 3,48-3,02 (2H, m), 2,80-2,41 (2H, m), 2,24-2,14 (1H, m), 2,11-2,04 (0,5H, m), 1,97-1,88 (0,5H, m), 1,70-1,39 (2H, m), 1,57 (9H, s), 1,18 (3H, d, J = 7,1 Hz).

(10) Compuesto ópticamente activo de 1-bencilo éster del ácido 3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico

A una solución de un compuesto ópticamente activo de 6-tercbutil éster de 1-bencil éster del ácido 3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1,6-dicarboxílico (5,54 g) en cloroformo (83 ml) enfriada a 4 ºC se le añadió una solución de ácido trifluoroacético/cloroformo (28 ml/55 ml) y la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó 25 durante 2 horas más. La mezcla de reacción se enfrió a 4 ºC y se le añadió una solución acuosa 4 M de hidróxido sódico (90 ml). La mezcla se basificó para que fuera de pH 9 a 10 y se extrajo dos veces con cloroformo/metanol (4/1, 60 ml x 2). La capa orgánica combinada se lavó secuencialmente con una solución acuosa al 5 % de bicarbonato sódico, una solución acuosa al 10 % de cloruro sódico, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente:

30 cloroformo/metanol/amoniaco acuoso al 28 % = 90/10/1) para dar el compuesto del título (2,20 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,40-7,29 (5H, m), 5,18-5,03 (2H, m), 4,02-3,94 (1H, m), 3,41-3,26 (1,5H, m), 3,15-3,08 (0,5H, m), 2,97-2,72 (2,5H, m), 2,51-2,34 (1,5H, m), 2,24-2,13 (0,5H, m), 2,06-1,58 (3,5H, m), 1,53-1,35 (1H, m), 1,30-1,15 (3H, m).

(11) Compuesto ópticamente activo de éster bencílico del ácido 3-metil-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico

5 Un compuesto ópticamente activo de 1-bencil éster del ácido 3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico (2,20 g) se mezcló con 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1,17 g), carbonato potásico (3,17 g) y agua (12 ml) y la mezcla se agitó durante 4 horas con reflujo. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se extrajo dos veces con cloroformo. La capa orgánica combinada se lavó con agua, una solución acuosa al 10 % de cloruro sódico, se secó sobre sulfato

10 de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetato de etilo = 1/0 a 1/3, seguido de cloroformo/metanol = 95/5) para dar el compuesto del título (2,84 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 10,40-10,30 (1H, m), 8,32 (1H, s), 7,40-7,30 (5H, m), 7,11-7,08 (1H, m), 6,57-6,51 (1H, m), 5,17-5,07 (2H, m), 5,04-4,89 (1H, m), 4,72-4,61 (1H, m), 4,14-4,07 (1H, m), 3,74-3,68 (0,5H, m), 3,57-3,51 (0,5H, m),

15 3,39-3,32 (1H, m), 3,15-2,96 (1H, m), 2,57-2,47 (1H, m), 2,44-2,32 (0,5H, m), 2,23-2,08 (1,5H, m), 1,92-1,80 (1H, m), 1,72-1,59 (1H, m), 1,14-1,06 (3H, m).

(12) Compuesto ópticamente activo de 4-(3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]non-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina

A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster bencílico del ácido 3-metil-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico (2,84 g) en metanol/tetrahidrofurano (14 ml/14 ml) se le añadió paladio al 10 % sobre carbono (568 mg) y la mezcla se hidrogenó a una presión de 4 atmósferas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida. El

25 residuo resultante se lavó de la suspensión con tolueno/tetrahidrofurano (95/5, 9 ml) para dar el compuesto del título (1,74 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 10,63 (1H, s a), 8,32 (1H, s), 7,08 (1H, d, J = 3,5 Hz), 6,54 (1H, d, J = 3,5 Hz), 4,45 (1H, d, J = 13,0 Hz), 4,21-4,14 (1H, m), 3,85-3,79 (1H, m), 3,57 (1H, d, J = 13,0 Hz), 3,55-3,47 (1H, m), 3,08-3,01 (1H, m), 2,48-2,38 (1H, m), 2,03 (1H, s a), 1,98-1,88 (1H, m), 1,84-1,68 (3H, m), 1,19(3H, d, J = 7,3 Hz).

(13) Compuesto ópticamente activo de 3-[3-metil-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,5]non-1-il]- 3-oxopropionitrilo

5 Un compuesto ópticamente activo de 4-(3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]non-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1,8 g) se mezcló con 1-cianoacetil-3,5-dimetilpirazol (2,3 g), N,N-diisopropiletilamina (2,4 ml) y 1,4-dioxano (18 ml) y la mezcla se agitó a 100 ºC durante 3 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. Después, se le añadieron agua y una solución acuosa saturada de cloruro sódico y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa acuosa separada se

10 extrajo con cloroformo y la capa orgánica combinada se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetato de etilo = 1/1, seguido de cloroformo/metanol = 20/1 a 10/1). El residuo resultante se purificó de nuevo por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetona = 10/1 a 1/1). El residuo resultante se purificó de nuevo por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/metanol = 20/1 a 10/1) para dar el compuesto del título (1,8 g).

15 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,71 (1H, s a), 8,12 (1H, s), 7,20 (1H, dd, J = 3,5, 2,4 Hz), 6,65 (1H, dd, J = 3,6, 1,9 Hz), 4,93-4,88 (1H, m), 4,64-4,58 (1H, m), 4,24-4,18 (1H, m), 3,67 (2H, s), 3,61 (1H, d, J = 12,8 Hz), 3,46-3,41 (1H, m), 3,03-2,95 (1H, m), 2,42-2,35 (1H, m), 2,34-2,25 (1H, m), 2,15-2,08 (1H, m), 1,83-1,77 (1H, m), 1,57-1,43 (1H, m), 1,01 (3H, d, J = 7,1 Hz). [α]D = +168,10° (25 ºC, c = 1,05, metanol)

20 [Preparación 2]: Síntesis del Compuesto 2

(1) 1-terc-butil éster de 3-((Z)-but-2-enil)éster del ácido piperidin-1,3-dicarboxílico

A una solución de ácido 1-(t-butoxicarbonil)-3-piperidinacarboxílico (60,0 g) y 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)-carbodiimida (55,2 g) en cloroformo (600 ml) se le añadió 4-dimetilaminopiridina (35,2 g) y la mezcla se agitó durante 70 minutos. A la mezcla se le añadió (Z)-but-2-en-1-ol (26,8 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 14 horas. A la mezcla de reacción se le añadieron agua (300 ml) y una solución acuosa 5 saturada de cloruro sódico (100 ml) y la mezcla se extrajo con cloroformo. La capa orgánica separada se concentró a presión reducida y al residuo resultante se le añadieron acetato de etilo y n-hexano. La mezcla se lavó secuencialmente tres veces con una solución acuosa al 3,5 % de bisulfato potásico y dos veces con una solución acuosa saturada de cloruro sódico. A la capa orgánica separada se le añadió gel de sílice (200 ml) y la mezcla se agitó y se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo resultante se purificó por

10 cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 9/1) para dar el compuesto del título (68,3 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 5,74-5,65 (1H, m), 5,55-5,47 (1H, m), 4,61 (2H, d, J = 6,8 Hz), 4,05-3,75 (1H, m), 3,70-3,53 (1H, m), 2,96-2,86 (2H, m), 2,46-2,39 (1H, m), 1,92-1,84 (1H, m), 1,69-1,51 (6H, m), 1,39 (9H, s).

15 (2) 1-tercButil éster del ácido 3-(1-metil-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico

A una solución de 1-terc-butil éster de 3-((Z)-but-2-enil)éster del ácido piperidin-1,3-dicarboxílico (68,3 g) en

20 tetrahidrofurano (700 ml) enfriada a -74 ºC se le añadió hexametildisilazida de litio (solución 1,6 M en tetrahidrofurano, 166 ml). La mezcla de reacción se calentó a 0 ºC en 35 minutos, se agitó a la misma temperatura durante 25 minutos más y se enfrió de nuevo a -74 ºC. A la mezcla se le añadió cloruro de trimetilsililo (39,6 ml). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente durante 70 minutos y se agitó a la misma temperatura durante 4 horas más. A la mezcla se le añadieron secuencialmente agua (600 ml), una solución acuosa 2 M de hidróxido sódico (70 ml) y la

25 mezcla se lavó con n-hexano (600 ml). La capa acuosa separada se acidificó con una solución acuosa 2 M de ácido clorhídrico, seguido de extracción tres veces con acetato de etilo (300 ml, 200 ml, 150 ml). La capa orgánica combinada se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se lavó de la suspensión con una solución de n-hexano/acetato de etilo (10/1) para dar el compuesto del título (42,5 g).

30 RMN 1H (CDCl3) δ: 5,83-5,72 (1H, m), 5,09-5,06 (1H, m), 5,05-5,02 (1H, m), 4,33-3,90 (1H, m), 3,73-3,63 (1H, m), 3,31-2,73 (2H, m), 2,43-2,34 (1H, m), 2,07-1,97 (1H, m), 1,64-1,56 (2H, m), 1,54-1,42 (1H, m), 1,45 (9H, s), 1,05 (3H, d, J = 7,3 Hz).

(3) Sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1-metil-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico y 35 (S)-(+)- 2-amino-2-fenil-etanol

A una solución de 1-terc-butil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico (3,00 g) en 1,2-dimetoxietano

40 (30 ml) se le añadió (S)-(+)-2-amino-2-fenil-etanol (800 mg) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de suspensión se filtró para dar un sólido (1,8 g). Al sólido se le añadió 1,2-dimetoxietano (45 ml) y la mezcla se disolvió a 80 ºC. La mezcla se lavó de la suspensión a temperatura ambiente durante 4 horas para dar el compuesto del título (1,46 g). Un análisis mediante la Condición de análisis de HPLC 1 mostró que un isómero con tiempos de retención más largos era un producto principal.

45 Un isómero con tiempos de retención más cortos (tiempo de retención 6,73 minutos)

Un isómero con tiempos de retención más largos (tiempo de retención 13,70 minutos)

(4) Compuesto ópticamente activo de 1-terc-butil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico

A una sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1-metil-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico y (S)-(+)-2-amino-2-fenil-etanol (1,5 g) se le añadieron acetato de etilo (15 ml) y agua (15 ml) y la mezcla se acidificó mediante la adición de bisulfato potásico (567 mg). La capa acuosa separada se extrajo con acetato de etilo dos veces

10 y la capa orgánica combinada se lavó con una solución acuosa al 10 % de bisulfato potásico dos veces y una vez con agua, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (1,02 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 5,83-5,72 (1H, m), 5,09-5,06 (1H, m), 5,05-5,02 (1H, m), 4,33-3,90 (1H, m), 3,73-3,63 (1H, m), 3,31-2,73 (2H, m), 2,43-2,34 (1H, m), 2,07-1,97 (1H, m), 1,64-1,56 (2H, m), 1,54-1,42 (1H, m), 1,45 (9H, s), 1,05 (3H, d,

15 J=7,3Hz).

(5) Compuesto ópticamente activo de éster terc-butílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1-metilalil)piperidin- 1-carboxílico

A una solución de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1-metilalil)piperidin-1,3-dicarboxílico (1,02 g) y trietilamina (967 µl) en tolueno (10 ml) calentada a 90 ºC se le añadió gota a gota difenilfosforilazida (1,1 ml). La mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura durante 1 hora y 25 después se le añadieron alcohol bencílico (718 µl) y 4-dimetilaminopiridina (127 mg). La mezcla se agitó con reflujo durante una noche, después se enfrió a temperatura ambiente y se le añadieron agua y acetato de etilo. La capa acuosa separada se extrajo con acetato de etilo dos veces y la capa orgánica combinada se lavó dos veces con agua y una vez con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice

30 (eluyente: cloroformo/acetona = 50/1). El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 20/1 a 4/1) para dar el compuesto del título (845 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,39-7,28 (5H, m), 6,91-6,72 (1H, m), 5,88-5,76 (1H, m), 5,18-4,84 (4H, m), 4,41-4,26 (1H, m), 3,88-3,61 (1H, m), 3,07-2,54 (2H, m), 1,99-1,43 (3H, m), 1,35 (10H, s), 0,92-0,85 (3H, m).

(6) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(2-hidroxi-1metiletil)piperidin-1-carboxílico

5 Una solución de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1-metilalil)piperidin-1-carboxílico (815 mg) en cloroformo/metanol (6,6 ml/6,6 ml) enfriada a -78 ºC se le fluyó aire de ozono durante 30 minutos. A la mezcla de reacción se le añadió borohidruro sódico (318 mg) en pequeños lotes y después la mezcla se calentó a temperatura ambiente durante 40 minutos. A la mezcla

10 se le añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y la mezcla se extrajo dos veces con cloroformo. La capa orgánica combinada se lavó con una solución acuosa de bicarbonato sódico, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 3/2 a 0/1) para dar el compuesto del título (406 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,39-7,27 (5H, m), 6,74-6,55 (1H, m), 5,17-4,83 (2H, m), 4,53-4,41 (1H, m), 4,32-3,93 (2H, m),

15 3,76-3,47 (2H, m), 3,26-3,00 (2H, m), 2,95-2,68 (1H, m), 2,30-2,00 (1H, m), 1,83-1,66 (1H, m), 1,64-1,44 (2H, m), 1,36 (9H, s), 0,92-0,77 (3H, m).

(7) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-amino-3-(2-hidroxi-1-metiletil)piperidin-

1-carboxílico 20

A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(2-hidroxi-1-metiletil)piperidin-1-carboxílico (374 mg) en metanol (6 ml) se le añadió

25 paladio al 10 % sobre carbono (38 mg) y la mezcla se hidrogenó a temperatura ambiente a una presión corriente durante 14 horas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (269 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 4,83 (1H, s a), 3,51-2,74 (4H, m), 1,79-1,25 (7H, m), 1,38 (9H, s), 0,92 (3H, d, J = 6,9 Hz).

30 (8) Compuesto ópticamente activo de 6-terc-butil éster de 1-bencil éster del ácido 3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]nonano1,6-dicarboxílico

35 A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-amino-3-(2-hidroxi-1-metiletil)piperidin-1-carboxílico (258 mg), trifenilfosfina (472 mg) y trietilamina (502 µl) en

diclorometano (7,7 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió tetrabromuro de carbono (596 mg). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 horas y se enfrió a 4 ºC. Después, se le añadieron trietilamina (279 µl) y cloroformiato de bencilo (267 µl) y la mezcla se agitó durante 40 minutos. A la mezcla se le añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica separada se lavó secuencialmente con una solución acuosa saturada de

5 bicarbonato sódico y una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 20/1 a 2/1) para dar el compuesto del título (85 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,40-7,29 (5H, m), 5,07-4,98 (2H, m), 4,20-4,11 (1H, m), 3,99-3,83 (2H, m), 3,39-3,20 (1H, m), 3,13-2,83 (1H, m), 2,58-2,45 (1H, m), 2,44-2,32 (1H, m), 2,16-2,07 (0,5H, m), 2,01-1,82 (1,5H, m), 1,68-1,58 (1H, m),

10 1,39 (9H, s), 1,37-1,28 (1H, m), 1,14-1,03 (3H, m).

(9) Compuesto ópticamente activo de 1-bencilo éster del ácido 3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico

15 A una solución de un compuesto ópticamente activo de 6-tercbutil éster de 1-bencil éster del ácido 3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1,6-dicarboxílico (78 mg) en cloroformo (2 ml) enfriada a 4 ºC se le añadió ácido trifluoroacético (0,4 ml) y la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora más. La mezcla de reacción se basificó mediante la adición de una solución acuosa 1 M de hidróxido sódico y se extrajo con cloroformo.

20 La capa orgánica separada se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (108 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,42-7,31 (5,0H, m), 5,20-4,99 (2,0H, m), 4,05-3,88 (1,0H, m), 3,64-3,55 (1,0H, m), 3,43-3,37 (0,5H, m), 3,35-3,26 (0,5H, m), 3,22-2,89 (3,0H, m), 2,39-2,29 (1,0H, m), 2,22-2,13 (0,5H, m), 2,07-1,49 (4,0H, m), 1,29-1,22 (0,5H, m), 1,15 (1,5H, d, J = 6,9 Hz), 1,01-0,91 (0,5H, m).

(10) Compuesto ópticamente activo de éster bencílico del ácido 3-metil-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico

30 Un compuesto ópticamente activo de 1-bencil éster del ácido 3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico (108 mg) se mezcló con 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (32 mg), carbonato potásico (86 mg) y agua (2,1 ml) y se agitó durante una noche con reflujo. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se extrajo con cloroformo. La capa orgánica separada se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y

35 se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 2/1 a 0/1, seguido de cloroformo/metanol = 9/1) para dar el compuesto del título (48 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,69 (1,0H, s a), 8,15 (1,0H, s), 7,41-7,27 (5,0H, m), 7,18 (1,0H, dd, J = 3,4, 2,6 Hz), 6,64-6,59 (1,0H, m), 5,09-4,92 (3,5H, m), 4,63-4,55 (1,0H, m), 4,01-3,85 (1,0H, m), 3,45-3,39 (0,5H, m), 3,35-3,27 (0,5H, m),

40 3,25-3,20 (0,5H, m), 2,99-2,84 (1,0H, m), 2,46-2,38 (1,0H, m), 2,35-2,25 (0,5H, m), 2,20-2,10 (0,5H, m), 2,03-1,95 (1,0H, m), 1,88-1,79 (1,0H, m), 1,66-1,52 (1,0H, m), 0,93 (3,0H, d, J = 6,9 Hz).

(11) Compuesto ópticamente activo de 4-(3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]non-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina

5 A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster bencílico del ácido 3-metil-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico (46 mg) en metanol/tetrahidrofurano (1,8 ml/1,8 ml) se le añadió paladio al 10 % sobre carbono (15 mg) y la mezcla se hidrogenó a una presión de 4 atmósferas durante 14 horas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (27 mg).

10 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,73 (1H, s a), 8,17 (1H, s), 7,21 (1H, dd, J = 3,3, 2,0 Hz), 6,64-6,61 (1H, m), 4,35 (0,5H, s a), 4,09 (0,5H, s a), 4,03 (1H, d, J = 13,5 Hz), 3,97 (1H, d, J = 13,2 Hz), 3,83-3,70 (2H, m), 3,47-3,40 (1H, m), 3,23-3,18 (1H, m), 2,48-2,43 (1H, m), 1,97-1,83 (2H, m), 1,77-1,57 (2H, m), 1,04 (3H, d, J = 7,3 Hz).

(12) Compuesto ópticamente activo de 3-[3-metil-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,5]non- 15 1-il]-3-oxopropionitrilo

Un compuesto ópticamente activo de 4-(3-metil-1,6-diazaespiro[3,5]non-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (25 mg) se

20 mezcló con 1-cianoacetil-3,5-dimetilpirazol (32 mg) y 1,4-dioxano (750 µl) y la mezcla se agitó a 100 ºC durante 3,5 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. A la misma se le añadieron agua y una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa acuosa separada se extrajo cinco veces con acetato de etilo y la capa orgánica combinada se lavó con agua y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía de capa fina sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/metanol = 9/1). El

25 residuo resultante se purificó de nuevo mediante cromatografía de capa fina sobre gel de sílice (eluyente: acetato de etilo/metanol = 93/7). El sólido resultante (8,0 mg) se lavó de la suspensión con una solución de n-hexano/acetato de etilo para dar el compuesto del título (6,7 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,70 (1H, s a), 8,14 (1H, s), 7,19 (1H, dd, J = 3,5, 2,4 Hz), 6,64 (1H, dd, J = 3,6, 1,9 Hz), 5,03-4,96 (1H, m), 4,66-4,59 (1H, m), 4,11-4,06 (1H, m), 3,70 (1H, d, J = 18,7 Hz), 3,65 (1H, d, J = 18,7 Hz), 3,60-3,55

30 (1H, m), 3,45 (1H, d, J = 13,0 Hz), 2,97-2,89 (1H, m), 2,46-2,41 (1H, m), 2,40-2,34 (1H, m), 2,00-1,94 (1H, m), 1,88-1,80 (1H, m), 1,64-1,51 (1H, m), 0,91 (3H, d, J = 7,1 Hz). [α]D = +202,79° (25 ºC, c = 1,04, metanol)

[Preparación 3]: Síntesis del Compuesto 3

(1) 1-tercbutil éster de 3-alil éster del ácido piperidin-1,3-dicarboxílico

A una solución de ácido 1-(tercbutoxicarbonil)-3-piperidinacarboxílico (50,0 g) en N,N-dimetilformamida (500 ml) se le

10 añadieron carbonato potásico (60,3 g) y bromuro de alilo (28,3 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. A la mezcla de reacción se le añadió agua (600 ml) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (600 ml). La capa orgánica se lavó secuencialmente con agua (600 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico (400 ml). La capa acuosa separada se extrajo de nuevo con acetato de etilo (300 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. A una solución del residuo

15 resultante en n-hexano/acetato de etilo (4/1, 400 ml) se le añadió gel de sílice (70 g) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (62,5 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 5,97-5,85 (1H, m), 5,36-5,20 (2H, m), 4,63-4,55 (2H, m), 4,34-4,01 (1H, m), 3,97-3,86 (1H, m), 3,16-2,88 (1H, m), 2,86-2,77 (1H, m), 2,53-2,43 (1H, m), 2,11-2,02 (1H, m), 1,75-1,57 (2H, m), 1,52-1,39 (1H, m), 1,46 (9H, s).

(2) 1-tercButil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico

25 A una solución de 1-tercbutil éster de 3-alil éster del ácido piperidin-1,3-dicarboxílico (62,5 g) en tetrahidrofurano (625 ml) enfriada a -72 ºC se le añadió hexametil disilazida de litio (solución 1,6 M en tetrahidrofurano, 160 ml). La mezcla se agitó a la misma temperatura durante 30 minutos y después la mezcla de reacción se calentó a 0 ºC en 12 minutos y se enfrió de nuevo a -67 ºC. A la mezcla se le añadió cloruro de trimetilsililo (35,2 ml). La mezcla de reacción se calentó a 2,5 ºC durante 1 hora y se agitó a la misma temperatura durante 2 horas más. A la mezcla s ele añadieron

30 secuencialmente metanol (250 ml) y una solución acuosa 1 M de hidróxido sódico (250 ml) y la mezcla se lavó con n-hexano (940 ml). La capa acuosa separada se lavó de nuevo con n-hexano (250 ml). La capa acuosa separada se acidificó con ácido clorhídrico acuoso 1 M y después se extrajo con acetato de etilo (800 ml). La capa orgánica se lavó secuencialmente con agua (800 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico (400 ml) y la capa acuosa

separada se extrajo de nuevo con acetato de etilo (500 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se lavó de la suspensión con n-hexano/acetato de etilo (10/1, 660 ml) para dar el compuesto del título (53,4 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 5,81-5,69 (1H, m), 5,14-5,06 (2H, m), 3,93-3,78 (1H, m), 3,54-3,45 (1H, m), 3,29-3,14 (2H, m), 2,43-2,34 (1H, m), 2,29-2,21 (1H, m), 2,07-1,98 (1H, m), 1,65-1,49 (3H, m), 1,45 (9H, s).

(3) Compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico

10 (3)-(1) Cristal de siembra de una sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico con (S)-(-)-2-amino-3-fenil-1-propanol

Se mezcló 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico (3,0 g) con acetato de isopropilo (30 ml) y la

15 mezcla se calentó a 80 ºC para su disolución. A la mezcla se le añadió (S)-(-)-2-amino-3-fenil-1-propanol (1,01 g) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 21 horas. La mezcla de suspensión se filtró y el sólido resultante se lavó con acetato de isopropilo (8 ml) y se secó a presión reducida para dar el compuesto del título (1,5 g). El filtrado se concentró a presión reducida y se usó en (4)-(1).

20 (3)-(2) Sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico con (S)-(-)-2-amino-3-fenil-1-propanol

25 A una solución de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico (73,3 g) en acetato de isopropilo (733 ml) calentada a 80 ºC se le añadió (S)-(-)-2-amino-3-fenil-1-propanol (24,7 g). La solución mixta se enfrió a temperatura ambiente. Después, se le añadió el cristal de siembra obtenido en (3)-(1) y la mezcla se agitó durante una noche. La mezcla de suspensión se filtró y el sólido resultante se lavó con acetato de isopropilo (210 ml) para dar el compuesto del título (37,4 g). Un análisis mediante la Condición de análisis de HPLC 1 mostró que un isómero con tiempos de

30 retención más cortos era un producto principal.

Un isómero con tiempos de retención más cortos (tiempo de retención 6,01 minutos)

Un isómero con tiempos de retención más largos (tiempo de retención 8,94 minutos)

(3)-(3) Compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico del filtrado de (3)-(2)

El filtrado de (3)-(2) se combinó con la solución de lavado. A la misma se le añadió una solución acuosa de bisulfato

5 potásico (22,2 g/365 ml) y la mezcla se agitó. La capa orgánica separada se lavó secuencialmente con una solución acuosa al 10 % de bisulfato potásico, agua y una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (49 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 5,81-5,69 (1H, m), 5,14-5,06 (2H, m), 3,93-3,78 (1H, m), 3,54-3,45 (1H, m), 3,29-3,14 (2H, m), 2,43-2,34 (1H, m), 2,29-2,21 (1H, m), 2,07-1,98 (1H, m), 1,65-1,49 (3H, m), 1,45 (9H, s).

(4) Sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico con (R)-(+)-2-amino-3-fenil-1-propanol

15 (4)-(1) Cristal de siembra de una sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico con (R)-(+)-2-amino-3-fenil-1-propanol

Al residuo (2,74 g) obtenido del filtrado de (3)-(1) se le añadieron acetato de etilo (14 ml) y agua (14 ml) y la mezcla se enfrió a 0 ºC. Después, se le añadió bisulfato potásico (494 mg). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 30 minutos y después se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó secuencialmente con una solución acuosa al 10 % de bisulfato potásico, agua (dos veces) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante (1,94 g) se mezcló con acetato de isopropilo (20 ml) y la mezcla se calentó a 80 ºC para su disolución. A la mezcla se le añadió (R)-(+)-2amino-3-fenil-1-propanol (925 mg) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 19,5 horas. La mezcla de

25 suspensión se filtró y el sólido resultante se secó a presión reducida para dar el compuesto del título (1,85 g).

(4)-(2) Sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico con (R)-(+)-2-amino-3-fenil-1-propanol

30 El residuo (49 g) obtenido en (3)-(3) y acetato de isopropilo (490 ml) se combinaron y la mezcla se calentó a 80 ºC para su disolución. A la mezcla se le añadió (R)-(+)-2-amino-3-fenil-1-propanol (23,7 g) y la mezcla se enfrió a temperatura ambiente. Después, se le añadió el cristal de siembra obtenido en (4)-(1) y la mezcla se agitó durante una noche. La mezcla de suspensión se filtró y se lavó con acetato de isopropilo (150 ml) para dar el compuesto del título (52 g). Un análisis mediante la Condición de análisis de HPLC 1 mostró que un isómero con tiempos de retención más largos era

35 un producto principal.

Un isómero con tiempos de retención más largos (tiempo de retención 8,94 minutos) 40

(5) Compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico

A una sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico con (R)-(+)-2-amino-3-fenil-1-propanol (52 g) obtenido en (4)-(2) se le añadieron acetato de etilo (260 ml) y una solución acuosa de bisulfato potásico (20,2 g/260 ml) y la mezcla se agitó. La capa orgánica separada se lavó secuencialmente con una solución acuosa al 10 % de bisulfato potásico, agua y una solución acuosa saturada de cloruro sódico. La

5 capa acuosa separada se extrajo de nuevo con acetato de etilo (130 ml) y se lavó secuencialmente con agua y una solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica combinada se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (32,2 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 5,81-5,69 (1H, m), 5,14-5,06 (2H, m), 3,93-3,78 (1H, m), 3,54-3,45 (1H, m), 3,29-3,14 (2H, m), 2,43-2,34 (1H, m), 2,29-2,21 (1H, m), 2,07-1,98 (1H, m), 1,65-1,49 (3H, m), 1,45 (9H, s).

(6) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-alil-3-benciloxicarbonilaminopiperidin-1-carboxílico

15 A una solución de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-alilpiperidin-1,3-dicarboxílico (32,2 g) y trietilamina (33,2 ml) en tolueno (320 ml) calentada a 80 ºC se le añadió gota a gota difenilfosforilazida (33,4 ml) en 50 minutos. La mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura durante 2 horas y se enfrió a temperatura ambiente. A la mezcla se le añadieron alcohol bencílico (24,6 ml) y 4-dimetilaminopiridina (2,9 g). La mezcla se agitó a 100 ºC durante 21 horas y se enfrió a temperatura ambiente. Después, se le añadieron etanol

20 (200 ml) y agua (200 ml) y la mezcla se extrajo con n-hexano (200 ml). La capa orgánica separada se lavó secuencialmente con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (200 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico (150 ml) y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 1/0 a 6/1) para dar el compuesto del título (39,4 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,39-7,27 (5H, m), 6,90-6,68 (1H, m), 5,75-5,63 (1H, m), 5,13-4,85 (4H, m), 4,07-3,94 (0,5H, m),

25 3,63-3,47 (1H, m), 3,39-3,12 (1H, m), 3,11-2,88 (1,5H, m), 2,79-2,54 (1H, m), 2,28-2,01 (1H, m), 1,79-1,66 (1H, m), 1,63-1,45 (3H, m), 1,36 (9H, s).

(7) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(2-hidroxietil)piperidin

1-carboxílico 30

Una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-alil-3-benciloxicarbonilaminopiperidin-1-carboxílico (39,4 g) en cloroformo/metanol (493 ml/493 ml) enfriada a -78 ºC 35 se le fluyó aire de ozono durante 1 hora. A la mezcla de reacción se le añadió borohidruro sódico (19,9 g) en pequeños lotes y la mezcla se calentó a 4 ºC en 50 minutos. A la mezcla se le añadieron una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (200 ml) y agua (400 ml) y la mezcla se extrajo con cloroformo (200 ml). La capa acuosa separada se extrajo de nuevo con cloroformo (300 ml) y la capa orgánica combinada se concentró a presión reducida. El residuo resultante se lavó de la suspensión con una solución de n-hexano/acetato de etilo (1/1,394 ml) para dar un sólido 40 (23,5 g). El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo resultante se lavó de nuevo de la suspensión con una solución de n-hexano/acetato de etilo (1/1) para dar un sólido (2,4 g). Después, el filtrado se concentró a presión

reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 1/1 a 0/1) para dar un sólido (1,5 g). Los sólidos se combinaron para dar el compuesto del título (27,4 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,39-7,26 (5H, m), 6,90-6,62 (1H, m), 5,12-4,87 (2H, m), 4,36 (1H, t, J = 4,9 Hz), 4,00-2,96 (6H, m), 2,15-1,72 (2H, m), 1,72-1,46 (2H, m), 1,46-1,17 (2H, m), 1,36 (9H, s).

(8) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-amino-3-(2-hidroxietil)piperidin-1-carboxílico

10 A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(2-hidroxietil)piperidin-1-carboxílico (27,2 g) en metanol (544 ml) se le añadió paladio al 10 % sobre carbono (2,7 g) y la mezcla se hidrogenó a una presión corriente durante 5 horas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (17,2 g).

15 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 3,58-3,53 (2H, m), 3,43-2,85 (5H, m), 1,63-1,24 (6H, m), 1,39 (9H, s).

(9) Compuesto ópticamente activo de 6-terc-butil éster de 1-bencil éster del ácido 1,6-diazaespiro[3,5]-nonano- 1,6-dicarboxílico

A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster terc-butílico del ácido 3-amino-3-(2-hidroxietil)piperidin-1-carboxílico (6,46 g), trifenilfosfina (12,5 g) y trietilamina (13,3 ml) en diclorometano (226 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió tetrabromuro de carbono (15,8 g). La mezcla de reacción se agitó a temperatura

25 ambiente durante 40 minutos y se enfrió de nuevo a 0 ºC. Después, se le añadieron trietilamina (5,5 ml) y cloroformiato de bencilo (4,9 ml) y la mezcla se agitó durante 3,5 horas a temperatura ambiente. A la mezcla se le añadió agua (200 ml) y la mezcla se extrajo con cloroformo (100 ml). La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 5/1) para dar el compuesto del título (5,35 g).

30 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,40-7,29 (5H, m), 5,07-4,98 (2H, m), 4,10-3,96 (1H, m), 3,91-3,69 (3H, m), 2,64-2,53 (1H, m), 2,13-1,83 (4H, m), 1,66-1,54 (1H, m), 1,43-1,27 (2H, m), 1,39 (9H, s).

(10) Compuesto ópticamente activo de éster bencílico del ácido 1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico

5 A una solución de un compuesto ópticamente activo de 6-terc-butil éster de 1-bencil éster del ácido 1,6-diazaespiro[3,5]-nonano-1,6-dicarboxílico (5,35 g) en cloroformo (134 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió ácido trifluoroacético (27 ml) y la mezcla se agitó durante 30 minutos, se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 30 minutos más. La mezcla de reacción se enfrió a 0 ºC y se le añadió una solución acuosa 4 M de hidróxido sódico (91 ml). La capa acuosa se extrajo dos veces con cloroformo (100 ml, 50 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con

10 una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/metanol = 20/1 a 4/1) para dar el compuesto del título (2,37 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,41-7,28 (5H, m), 5,09-4,96 (2H, m), 3,83-3,76 (1H, m), 3,73-3,66 (1H, m), 2,94-2,69 (3H, m), 2,38-2,15 (2H, m), 2,12-1,77 (4H, m), 1,58-1,45 (1H, m), 1,38-1,26 (1H, m).

(11) Compuesto ópticamente activo de éster bencílico del ácido 6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico

20 Un compuesto ópticamente activo de éster bencílico del ácido 1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico (2,37 g) se mezcló con 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1,4 g), carbonato potásico (3,8 g) y agua (71 ml) y se calentó a 100 ºC para su agitación durante 3 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. Después, se le añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se lavó de la suspensión con una solución de n-hexano/acetato

25 de etilo (1/1) para dar el compuesto del título (2,55 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,72 (1H, s), 8,13 (1H, s), 7,41-7,28 (5H, m), 7,19 (1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,64-6,60 (1H, m), 5,13-5,02 (2H, m), 4,96-4,89 (1H, m), 4,64-4,56 (1H, m), 3,98-3,70 (2H, m), 3,46-3,28 (1H, m), 3,01-2,82 (1H, m), 2,31-2,22 (0,5H, m), 2,16-2,06 (0,5H, m), 2,03-1,90 (3H, m), 1,83-1,75 (1H, m), 1,61-1,47 (1H, m).

30 (12) Compuesto ópticamente activo de 4-(1,6-diazaespiro[3,5]non-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina

A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster bencílico del ácido 6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico (2,55 g) en metanol/tetrahidrofurano (51 ml/51 ml) se le añadió paladio al 20 % sobre carbono (510 mg) y la mezcla se hidrogenó a una presión de 4 atmósferas durante 5 horas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida. El

5 residuo resultante se lavó de la suspensión con éter diisopropílico (30 ml) para dar el compuesto del título (1,55 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,68 (1H, s a), 8,12 (1H, s), 7,18 (1H, d, J = 2,6 Hz), 6,61 (1H, d, J = 3,2 Hz), 4,18 (1H, d, J = 12,8 Hz), 4,00-3,93 (1H, m), 3,59 (1H, d, J = 12,8 Hz), 3,54-3,47 (1H, m), 3,42-3,16 (3H, m), 2,03-1,82 (3H, m), 1,72-1,62 (2H, m), 1,57-1,46 (1H, m).

10 (13) Compuesto ópticamente activo de 3-oxo-3-[6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,5]non- 1-il]-propionitrilo

15 Un compuesto ópticamente activo de 4-(1,6-diazaespiro[3,5]non-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1,55 g) se mezcló con 1-cianoacetil-3,5-dimetilpirazol (1,56 g), N,N-diisopropiletilamina (1,66 ml) y 1,4-dioxano (31 ml) y la mezcla se calentó a 100 ºC para su agitación durante 2 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. Después, se le añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se concentró a presión reducida. El residuo

20 resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: acetato de etilo/metanol = 20/1 a 9/1) para dar el compuesto del título (1,50 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,73 (1H, s a), 8,13 (1H, s), 7,22-7,18 (1H, m), 6,67-6,63 (1H, m), 4,96 (1H, d, J = 12,6 Hz), 4,68-4,60 (1H, m), 4,11-4,03 (1H, m), 4,01-3,93 (1H, m), 3,71 (2H, s), 3,53 (1H, d, J = 12,6 Hz), 2,98-2,88 (1H, m), 2,40-2,30 (1H, m), 2,03-1,90 (3H, m), 1,83-1,75 (1H, m), 1,59-1,45 (1H, m).

25 [α]D = +210,00° (25 ºC, c = 1,01, metanol).

[Preparación 4]: Síntesis del Compuesto 4

(1) 3-(3,3-Difluoroalil)éster de 1-tercbutil éster del ácido pirrolidin-1,3-dicarboxílico

5 A una solución de 1-tercbutil éster del ácido pirrolidin-1,3-dicarboxílico (3,40 g) en N,N-dimetilformamida (34 ml) se le añadieron carbonato potásico (4,37 g) y 3-bromo-3,3-difluoropropeno (1,93 ml) y la mezcla se agitó a 60 ºC durante 6 horas. A la mezcla de reacción se le añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 5/1) para dar el compuesto del título (3,73 g). RMN

10 1H (CDCl3) δ: 4,64-4,48 (3H, m), 3,67-3,42 (3H, m), 3,41-3,29 (1H, m), 3,10-2,98 (1H, m), 2,18-2,04 (2H, m), 1,46 (9H, s).

(2) 1-tercButil éster del ácido 3-(1,1-difluoroalil)pirrolidin-1,3-dicarboxílico

A una solución de 3-(3,3-difluoroalil)éster de 1-tercbutil éster del ácido pirrolidin-1,3-dicarboxílico (3,73 g) en tetrahidrofurano (37 ml) enfriada a -78 ºC se le añadió hexametil disilazida de litio (solución 1,0 M en tetrahidrofurano, 14 ml). La mezcla de reacción se calentó a 0 ºC en 4 minutos, se agitó a la misma temperatura durante 14 minutos más 20 y después se enfrió de nuevo a -78 ºC. A la mezcla se le añadió cloruro de trimetilsililo (2,0 ml). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó a la misma temperatura durante 3 horas más. La mezcla se basificó mediante la adición de agua, seguido de una solución acuosa 2 M de hidróxido sódico a pH 8 a 9 y se lavó con n-hexano/éter dietílico (4/3). A la capa orgánica separada se le añadió n-hexano y la mezcla se extrajo con una solución acuosa 2 M de hidróxido sódico. La capa acuosa combinada se lavó 7 veces con n-hexano/éter dietílico (4/3),

25 se acidificó con una solución acuosa al 10 % de ácido cítrico y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se concentró a presión reducida y el residuo resultante se lavó de la suspensión con una solución de n-hexano/acetato de etilo (5/1) para dar el compuesto del título (2,00 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 13,47 (1H, s a), 6,23-6,09 (1H, m), 5,71-5,64 (1H, m), 5,63-5,58 (1H, m), 3,79-3,72 (1H, m), 3,47-3,28 (2H, m), 3,26-3,15 (1H, m), 2,36-2,25 (1H, m), 2,21-2,06 (1H, m), 1,39 (9H, s).

(3) Compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1,1-difluoroalil)pirrolidin-1,3-dicarboxílico

5 Un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1,1-difluoroalil)pirrolidin-1,3-dicarboxílico (1,5 g), (S)-(-)-1-(1-naftil)etilamina (826 µl) y acetato de isopropilo (15 ml) se combinaron y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 21 horas. La mezcla de suspensión se filtró para retirar un sólido. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo resultante se mezcló con acetato de etilo (20 ml) y una solución acuosa al 10 % de bisulfato potásico (20 ml). La mezcla se agitó a 0 ºC durante 1 hora. La capa orgánica separada se lavó secuencialmente con

10 agua y una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (869 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 13,47 (1H, s a), 6,23-6,09 (1H, m), 5,71-5,64 (1H, m), 5,63-5,58 (1H, m), 3,79-3,72 (1H, m), 3,47-3,28 (2H, m), 3,26-3,15 (1H, m), 2,36-2,25 (1H, m), 2,21-2,06 (1H, m), 1,39 (9H, s).

15 (4) Sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1,1-difluoroalil)pirrolidin-1,3-dicarboxílico con (R)-(+)-1-(1-naftil)etilamina

20 El residuo (869 mg) obtenido en (3) se mezcló con (R)-(+)-1-(1-naftil)etilamina (263 µl) y acetato de isopropilo (13 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de suspensión se filtró y el sólido resultante se lavó con acetato de isopropilo (3 ml) para dar el compuesto del título (754 mg). El análisis del sólido mediante la Condición de análisis de HPLC 1 mostró que un isómero con tiempos de retención más largos era un producto principal.

25 Un isómero con tiempos de retención más cortos (tiempo de retención 5,32 minutos)

Un isómero con tiempos de retención más largos (tiempo de retención 7,01 minutos)

(5) Compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1,1-difluoroalil)pirrolidin-1,3-dicarboxílico

5 Una sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del 3-(1,1-difluoroalil)pirrolidin-1,3-dicarboxílico con (R)-(+)-1-(1-naftlril)etilamina (741 mg) se mezcló con acetato de etilo (7,4 ml) y agua (3,7 ml) y la mezcla se acidificó mediante la adición de bisulfato potásico (261 mg). La capa orgánica separada se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (457 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 13,47 (1H, s a), 6,23-6,09 (1H, m), 5,71-5,64 (1H, m), 5,63-5,58 (1H, m), 3,79-3,72 (1H, m),

10 3,47-3,28 (2H, m), 3,26-3,15 (1H, m), 2,36-2,25 (1H, m), 2,21-2,06 (1H, m), 1,39 (9H, s).

(6) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1,1-difluoroalil)pirrolidin- 1-carboxílico

A una solución de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1,1-difluoroalil)pirrolidin-1,3-dicarboxílico (10,6 g) y trietilamina (10,2 ml) en tolueno (106 ml) calentada a 100 ºC se le añadió gota a gota difenilfosforilazida (10,2 ml). La mezcla de reacción se agitó a 100 ºC durante 50 minutos y 20 después se le añadieron alcohol bencílico (5,6 ml) y 4-dimetilaminopiridina (0,89 g). La mezcla se agitó a 100 ºC durante 16,5 horas y después se enfrió a temperatura ambiente. Después, se le añadió una solución acuosa al 5 % de bisulfato potásico y la mezcla se extrajo con tolueno. La capa orgánica se lavó secuencialmente con una solución acuosa 1 M de hidróxido sódico y una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de

25 sílice (eluyente: n-hexano/cloroformo/acetato de etilo = 5/4/1 a 4/4/1) para dar el compuesto del título (15,5 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,40-7,30 (5,0H, m), 6,04-5,89 (1,0H, m), 5,76-5,68 (1,0H, m), 5,56-5,49 (1,0H, m), 5,07 (2,0H, s), 4,90-4,83 (1,0H, m), 3,85-3,79 (0,5H, m), 3,74-3,40 (3,5H, m), 2,90-2,76 (0,5H, m), 2,63-2,49 (0,5H, m), 2,27-2,18 (1,0H, m), 1,46 (9,0H, s).

30 (7) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1,1-difluoro-2hidroxietil)pirrolidin-1-carboxílico

Una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1,1-difluoroalil)pirrolidin-1-carboxílico (15,5 g) en cloroformo/metanol (154 ml/154 ml) enfriada a -78 ºC se le fluyó aire de ozono durante 30 minutos. A la mezcla de reacción se le añadió borohidruro sódico (4,14 g) en pequeños lotes y después la mezcla se calentó a 0 ºC y se agitó a la misma temperatura durante 4 horas 5 más. A la mezcla se le añadieron una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y una solución acuosa saturada de cloruro sódico y la mezcla se extrajo con cloroformo. La capa acuosa separada se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 3/1). Las fracciones que no pudieron separarse y aislarse se concentraron a presión reducida y el residuo resultante se purificó de nuevo

10 por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/cloroformo/acetato de etilo = 5/4/1). Las fracciones purificadas se combinaron y se concentraron a presión reducida para dar el compuesto del título (12,8 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,42-7,32 (5,0H, m), 5,15-5,07 (2,0H, m), 5,04-4,93 (1,0H, m), 4,02-3,49 (6,0H, m), 3,43-3,30 (1,0H, m), 2,67-2,57 (0,4H, m), 2,45-2,28 (1,6H, m), 1,46 (9,0H, s).

15 (8) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1,1-difluoro-2metanosulfoniloxietil)pirrolidin-1-carboxílico

20 A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1,1-difluoro-2-hidroxietil)pirrolidin-1-carboxílico (471 mg) y trietilamina (328 µl) en cloroformo (4,7 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió cloruro de metanosulfonilo (118 µl) y la mezcla se agitó durante 50 minutos. A la mezcla se le añadió una solución acuosa al 5 % de bisulfato potásico y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó secuencialmente con una solución acuosa 1 M de hidróxido sódico y una solución

25 acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (565 mg). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,41-7,33 (5H, m), 5,10 (2H, s), 4,94-4,86 (1H, m), 4,57-4,48 (2H, m), 3,92-3,84 (0,5H, m), 3,80-3,52 (2,5H, m), 3,47-3,33 (1H, m), 3,09 (3H, s), 2,83-2,74 (0,5H, m), 2,61-2,52 (0,5H, m), 2,31-2,21 (1H, m), 1,47 (9H, s).

(9) Compuesto ópticamente activo de 6-terc-butil éster de 1-bencil éster del ácido 3,3-difluoro-1,6-diazaespiro[3,4]- octano-1,6-dicarboxílico

35 A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3(1,1-difluoro-2-metanosulfoniloxietil)pirrolidin-1-carboxílico (565 mg) en N,N-dimetilformamida (17 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió hidruro sódico (71 mg, con aceite mineral al 40 %) y la mezcla se agitó a la misma temperatura durante 1 hora. A la mezcla de reacción se le añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó

40 con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (397 mg).

RMN 1H (CDCl3) δ: 7,41-7,31 (5H, m), 5,25-5,06 (2H, m), 4,27-4,17 (2H, m), 3,96-3,82 (1H, m), 3,79-3,49 (2H, m), 3,41-3,27 (1H, m), 2,65-2,41 (0,5H, m), 2,38-2,17 (1,5H, m), 1,50-1,44 (9H, m).

(10) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3,3-difluoro-1,6-diazaespiro[3,4]octano-6-carboxílico

A una solución de un compuesto ópticamente activo de 6-tercbutil éster de 1-bencil éster del ácido

10 3,3-difluoro-1,6-diazaespiro[3,4]octano-1,6-dicarboxílico (397 mg) en metanol/tetrahidrofurano (3,2 ml/3,2 ml) se le añadió paladio al 10 % sobre carbono (79 mg) y la mezcla se hidrogenó a temperatura ambiente a una presión corriente durante 14 horas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetona = 4/1 a 2/1). Las fracciones que no pudieron separarse y aislarse se concentraron a presión reducida y el residuo resultante se purificó

15 de nuevo por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetona = 2/1 a 1/1). Las fracciones purificadas se combinaron y se concentraron a presión reducida para dar el compuesto del título (211 mg). RMN 1H (CDCl3) δ: 3,96-3,74 (3H, m), 3,55-3,37 (2H, m), 3,35-3,25 (1H, m), 2,45-2,35 (1H, m), 2,00-1,88 (1H, m), 1,73-1,56 (1H, m), 1,46 (9H, s).

20 (11) 2 Clorhidrato de 3,3-difluoro-1,6-diazaespiro[3,4]octano

A un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido

25 3,3-difluoro-1,6-diazaespiro[3,4]octano-6-carboxílico (211 mg) se le añadieron ácido clorhídrico 4 M-1,4-dioxano (2,1 ml) y ácido clorhídrico 2 M-metanol (2,1 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. A la mezcla de reacción se le añadió acetato de etilo y la mezcla se filtró para dar el compuesto del título (163 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 9,80-9,42 (2H, m), 4,58-3,83 (7H, m), 3,47-3,33 (2H, m), 2,82-2,72 (1H, m).

(12) Compuesto ópticamente activo de 4-(3,3-difluoro-1,6-diazaespiro[3,4]oct-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina

5 Un compuesto ópticamente activo de 2 clorhidrato de 3,3-difluoro-1,6-diazaespiro[3,4]octano (163 mg) se mezcló con 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (113 mg), carbonato potásico (509 mg) y agua (2,8 ml) y la mezcla se agitó durante 16,5 horas con reflujo. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. Se le añadió agua y la mezcla se filtró para dar un sólido (126 mg). El filtrado se extrajo 4 veces con acetato de etilo/metanol y dos veces con cloroformo/metanol. La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante

10 se combinó con el sólido y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/metanol = 92/8 a 85/15) para dar el compuesto del título (170 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,63 (1H, s a), 8,10 (1H, s), 7,14 (1H, dd, J = 3,6, 2,4 Hz), 6,57 (1H, dd, J = 3,6, 2,0 Hz), 4,15 (1H, d, J = 11,7 Hz), 3,92-3,65 (5H, m), 3,35-3,22 (1H, m), 2,47-2,39 (1H, m), 2,17-2,07 (1H, m).

15 (13) Compuesto ópticamente activo de 3-[3,3-difluoro-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,4]oct1-il]-3-oxo- propionitrilo

20 Un compuesto ópticamente activo de 4-(3,3-difluoro-1,6-diazaespiro[3,4]oct-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (170 mg) se mezcló con 1-cianoacetil-3,5-dimetilpirazol (209 mg), N,N-diisopropiletilamina (117 µl) y 1,4-dioxano (3,4 ml) y la mezcla se agitó a 100 ºC durante 75 minutos. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. Se le añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa acuosa separada se extrajo de nuevo con acetato de etilo dos veces. La capa orgánica combinada se lavó con una solución acuosa saturada de

25 cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetato de etilo = 2/1, seguido de cloroformo/metanol = 92/8 a 3/1). La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo resultante se lavó de la suspensión con un disolvente mixto de n-heptano/etanol (3/1) para dar el compuesto del título (177 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,68 (1H, s a), 8,11 (1H, s), 7,17-7,14 (1H, m), 6,58 (1H, dd, J = 3,3, 1,8 Hz), 4,66-4,58 (2H, m),

30 4,24-4,13 (2H, m), 4,12-4,02 (1H, m), 3,89-3,78 (3H, m), 2,68-2,58 (1H, m), 2,56-2,45 (1H, m). [α]D = +46,67° (25 ºC, c = 0,54, metanol).

[Preparación 5]: Síntesis del Compuesto 5

(1) 3-(3,3-Difluoro-alil)éster de 1-tercbutil éster del ácido piperidin-1,3-dicarboxílico

A una solución de 1-tercbutil éster del ácido piperidin-1,3-dicarboxílico (30,0 g) en N,N-dimetilformamida (300 ml) se

10 le añadieron carbonato potásico (36,2 g) y 3-bromo-3,3-difluoropropeno (16 ml) y la mezcla se agitó a 60 ºC durante 4,5 horas. A la mezcla de reacción se le añadió agua y la mezcla se extrajo con una solución de n-hexano/acetato de etilo (1/1). La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 10/1) para dar el compuesto del título (33,5 g).

15 RMN 1H (CDCl3) δ: 4,62-4,46 (3H, m), 4,34-3,98 (1H, m), 3,95-3,80 (1H, m), 3,18-2,89 (1H, m), 2,87-2,77 (1H, m), 2,50-2,40 (1H, m), 2,08-1,98 (1H, m), 1,75-1,55 (2H, m), 1,52-1,41 (1H, m), 1,46 (9H, s).

(2) 1-tercButil éster del ácido 3-(1,1-difluoro-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico

A una solución de 3-(3,3-difluoro-alil)éster de 1-tercbutil éster del ácido piperidin-1,3-dicarboxílico (28,5 g) en tetrahidrofurano (285 ml) enfriada a -78 ºC se le añadió hexametil disilazida de litio (solución 1,1 M en tetrahidrofurano, 110 ml). La mezcla de reacción se calentó a -2 ºC en 6 minutos, se agitó a la misma temperatura durante 15 minutos 25 más y después se enfrió de nuevo a -78 ºC. A la mezcla se le añadió cloruro de trimetilsililo (19 ml). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó a la misma temperatura durante 30 minutos más. La mezcla se basificó mediante la adición de agua (300 ml), seguido de una solución acuosa 2 M de hidróxido sódico (60 ml) y se lavó con n-hexano (450 ml). La capa orgánica separada se extrajo 3 veces con una solución acuosa 2 M de hidróxido sódico. La capa acuosa combinada se acidificó con una solución acuosa al 10 % de ácido cítrico y se extrajo con 30 acetato de etilo. La capa orgánica se concentró a presión reducida y el residuo resultante se lavó de la suspensión con

una solución de n-hexano/acetato de etilo (5/1) para dar el compuesto del título (23,9 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 6,05-5,89 (1H, m), 5,72-5,65 (1H, m), 5,56-5,52 (1H, m), 4,67 (1H, d, J = 13,7 Hz), 4,12-4,02 (1H, m), 3,46 (1H, s a), 2,92 (1H, d, J = 13,7 Hz), 2,70-2,61 (1H, m), 2,37-2,30 (1H, m), 1,71-1,54 (3H, m), 1,45 (9H, s).

(3) Compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1,1-difluoro-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico

Un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1,1-difluoro-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico (26,9 g),

10 (R)-(-)-2-amino-2-fenil-etanol (6,6 g) e isopropanol (270 ml) se mezclaron y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de suspensión se filtró para retirar un sólido. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo resultante se mezcló con acetato de etilo (97 ml) y una solución acuosa al 25 % de bisulfato potásico (97 ml) y la mezcla se agitó durante 25 minutos. La capa orgánica separada se lavó secuencialmente con una solución acuosa al 5 % de bisulfato potásico y una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico

15 anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (16,2 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 6,05-5,89 (1H, m), 5,72-5,65 (1H, m), 5,56-5,52 (1H, m), 4,67 (1H, d, J = 13,7 Hz), 4,12-4,02 (1H, m), 3,46 (1H, s a), 2,92 (1H, d, J = 13,7 Hz), 2,70-2,61 (1H, m), 2,37-2,30 (1H, m), 1,71-1,54 (3H, m), 1,45 (9H, s).

(4) Sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 20 3-(1,1-difluoro-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico con (S) -(+)-2-amino-2-fenil-etanol

El residuo (16,2 g) obtenido en (3) se mezcló con (S)-(+)-2-amino-2-fenil-etanol (6,6 g) e isopropanol (162 ml) y la

25 mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. La mezcla de suspensión se filtró y el sólido resultante se lavó con isopropanol (80 ml) para dar un sólido (17,8 g). El sólido se mezcló con isopropanol (305 ml) y se agitó a 105 ºC durante 20 minutos y a temperatura ambiente durante 19 horas. La mezcla de suspensión se filtró y el sólido resultante se lavó con isopropanol (90 ml) para dar el compuesto del título (16,0 g). Un análisis mediante la Condición de análisis de HPLC 1 mostró que un isómero con tiempos de retención más largos era un producto principal.

30 Un isómero con tiempos de retención más cortos (tiempo de retención 5,41 minutos)

Un isómero con tiempos de retención más largos (tiempo de retención 12,47 minutos)

(5) Compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1,1-difluoro-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico

A una sal de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1,1-difluoro-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico con (S)-(+)-2-amino-2-fenil-etanol (17,8 g) se le añadieron acetato de etilo (89 ml) y una solución acuosa al 25 % de bisulfato potásico (89 ml) y la mezcla se agitó durante 15 minutos. La

10 capa orgánica separada se lavó secuencialmente con una solución acuosa al 5 % de bisulfato potásico (89 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (12,3 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 6,05-5,89 (1H, m), 5,72-5,65 (1H, m), 5,56-5,52 (1H, m), 4,67 (1H, d, J = 13,7 Hz), 4,12-4,02 (1H, m), 3,46 (1H, s a), 2,92 (1H, d, J = 13,7 Hz), 2,70-2,61 (1H, m), 2,37-2,30 (1H, m), 1,71-1,54 (3H, m), 1,45 (9H, s).

(6) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino3-(1,1-difluoro-alil)-piperidin-1-carboxílico

20 A una solución de un compuesto ópticamente activo de 1-tercbutil éster del ácido 3-(1,1-difluoro-alil)-piperidin-1,3-dicarboxílico (12,3 g) y trietilamina (11,2 ml) en tolueno (123 ml) calentada a 100 ºC se le añadió gota a gota difenilfosforilazida (11,2 ml). La mezcla de reacción se agitó a 100 ºC durante 25 minutos y después se le añadieron alcohol bencílico (6,2 ml) y 4-dimetilaminopiridina (0,98 g). La mezcla se agitó a 100 ºC

25 durante una noche y después se enfrió a temperatura ambiente y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 9/1 a 85/15) para dar el compuesto del título (15,1 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,38-7,28 (5H, m), 6,07-5,92 (1H, m), 5,71-5,62 (1H, m), 5,53-5,48 (1H, m), 5,36 (0,5H, s a), 5,09-4,97 (2H, m), 4,89 (0,5H, s a), 4,28-3,98 (2H, m), 3,16-2,61 (3H, m), 1,64-1,52 (3H, m), 1,49-1,36 (9H, m).

(7) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino- 3-(1,1-difluoro-2-hidroxi-etil)-piperidin-1-carboxílico

5 Una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1,1-difluoro-alil)-piperidin-1-carboxílico (15,1 g) en cloroformo/metanol (150 ml/150 ml) enfriada a -78 ºC se le fluyó aire de ozono durante 30 minutos. A la mezcla de reacción se le añadió borohidruro sódico (4,2 g) en pequeños lotes y después la mezcla se calentó a 0 ºC y se agitó a la misma temperatura durante 50 minutos

10 más. A la mezcla se le añadieron una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y una solución acuosa saturada de cloruro sódico y la mezcla se extrajo con cloroformo. La capa acuosa separada se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 3/1 a 2/1) para dar el compuesto del título (13,6 g).

15 RMN 1H (CDCl3) δ: 7,38-7,29 (5H, m), 5,78 (1H, s a), 5,15-4,99 (2H, m), 4,42-3,97 (2H, m), 3,95-3,75 (2H, m), 3,55-3,44 (1H, m), 3,15-2,60 (3H, m), 1,79-1,67 (1H, m), 1,55-1,50 (1H, m), 1,42 (9H, s).

(8) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1,1-difluoro

2-metanosulfoniloxi-etil)-piperidin-1-carboxílico 20

A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1,1-difluoro-2-hidroxietil)-piperidin-1-carboxílico (13,6 g) y trietilamina (11,4 ml) en

25 cloroformo (136 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió cloruro de metanosulfonilo (7,8 ml) y la mezcla se agitó durante 50 minutos. A la mezcla se le añadió una solución acuosa al 5 % de bisulfato potásico y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica separada se lavó secuencialmente dos veces con una solución acuosa 4 M de hidróxido sódico y una vez con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (17,1 g).

30 RMN 1H (CDCl3) δ: 7,39-7,29 (5H, m), 5,65 (1H, s a), 5,15-4,97 (2H, m), 4,65-4,51 (2H, m), 4,39-3,98 (2H, m), 3,15-2,62 (3H, m), 3,07 (3H, s), 1,70-1,53 (3H, m), 1,43 (9H, s).

(9) Compuesto ópticamente activo de 6-terc-butil éster de 1-bencil éster del ácido 3,3-difluoro-1,6-diaza- espiro[3,5]nonano-1,6-dicarboxílico

5 A una suspensión de hidruro sódico (1,7 g, con aceite mineral al 40 %) en N,N-dimetilformamida (428 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-benciloxicarbonilamino-3-(1,1-difluoro-2-metanosulfoniloxi-etil)-piperidin-1-carboxílico (17,1 g) en N,N-dimetilformamida (86 ml) y la mezcla se agitó a la misma temperatura durante 15 minutos. A la mezcla de reacción

10 se le añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica separada se lavó secuencialmente con agua y una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 5/1) para dar el compuesto del título (12,6 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,41-7,30 (5H, m), 5,21-5,02 (2H, m), 4,56-4,31 (1H, m), 4,25-4,14 (2H, m), 4,13-3,89 (1H, m),

15 3,41-2,98 (1H, m), 2,80-2,41 (1H, m), 2,33-2,12 (1H, m), 2,03-1,87 (1H, m), 1,80-1,67 (1H, m), 1,65-1,52 (2H, m), 1,45 (9H, s).

(10) Compuesto ópticamente activo de 1 clorhidrato de éster bencílico del ácido 3,3-difluoro-1,6

diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico 20

A un compuesto ópticamente activo de 6-terc-butil éster de 1-bencil éster del ácido 3,3-difluoro-1,6-diaza-espiro[3,5]nonano-1,6-dicarboxílico (12,6 g) se le añadió ácido clorhídrico 4 M-1,4-dioxano

25 (126 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se concentró a presión reducida y se le añadió tolueno. La mezcla se concentró de nuevo a presión reducida para dar el compuesto del título (11,2 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 11,56 (1H, s a), 8,65 (1H, s a), 7,43-7,32 (5H, m), 5,13 (2H, s), 4,43-4,20 (2H, m), 3,82-3,72 (1H, m), 3,54-3,35 (2H, m), 3,28-3,14 (1H, m), 2,34-1,91 (4H, m).

(11) Compuesto ópticamente activo de éster bencílico del ácido 3,3-difluoro-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin4-il)-1,6-diaza-espiro[3,5]nonano-1-carboxílico

5 Un compuesto ópticamente activo de 1 clorhidrato del éster bencílico del ácido 3,3-difluoro-1,6-diaza- espiro[3,5]nonano-1-carboxílico (11,2 g) se mezcló con 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (4,2 g), carbonato potásico (18,7 g) y agua (104 ml) y la mezcla se agitó durante 16,5 horas con reflujo. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se le añadieron acetato de etilo y agua. La mezcla se filtró y el filtrado se separó y la capa orgánica

10 resultante se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetona = 3/1). El residuo resultante se purificó de nuevo por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetona = 2/1) para dar el compuesto del título (12,0 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 10,22 (1H, s a), 8,37 (1H, s), 7,42-7,31 (5H, m), 7,10 (1H, dd, J = 3,3, 2,2 Hz), 6,56-6,51 (1H, m),

15 5,25-5,06 (3H, m), 4,77-4,62 (1H, m), 4,34-4,18 (2H, m), 3,75-3,43 (1H, m), 3,14-2,94 (1H, m), 2,52-2,38 (0,5H, m), 2,36-2,27 (1H, m), 2,23-2,11 (0,5H, m), 2,04-1,91 (1H, m), 1,90-1,77 (1H, m).

(12) Compuesto ópticamente activo de 4-(3,3-difluoro-1,6-diaza-espiro[3,5]non-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina

A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster bencílico del ácido 3,3-difluoro-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,5]nonano-1-carboxílico (12,0 g) en metanol/tetrahidrofurano (120 ml/120 ml) se le añadió paladio al 10 % sobre carbono (2,4 g) y la mezcla se hidrogenó

25 a temperatura ambiente a una presión de 4 atmósferas durante 21 horas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó de la suspensión mediante un disolvente mixto de n-hexano/acetato de etilo (2/1) para dar el compuesto del título (6,6 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 10,04 (1H, s a), 8,32 (1H, s), 7,10 (1H, d, J = 3,5 Hz), 6,53 (1H, d, J = 3,7 Hz), 4,60 (1H, d, J = 13,7 Hz), 4,20-4,13 (1H, m), 4,08-3,97 (1H, m), 3,92-3,81 (1H, m), 3,76 (1H, d, J = 13,7 Hz), 3,64-3,55 (1H, m),

30 2,08-1,78 (5H, m).

(13) Compuesto ópticamente activo de 3-[3,3-difluoro-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)- 1,6-diaza-espiro[3,5]non-1-il]-3-oxo-propionitrilo

5 Un compuesto ópticamente activo de 4-(3,3-difluoro-1,6-diaza-espiro[3,5]non-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (6,6 g) se mezcló con 1-cianoacetil-3,5-dimetilpirazol (7,7 g), N,N-diisopropiletilamina (4,3 ml) y 1,4-dioxano (132 ml) y la mezcla se agitó a 100 ºC durante 2 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. Después, se le añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa acuosa separada se extrajo adicionalmente 5 veces con acetato de

10 etilo. La capa orgánica combinada se lavó secuencialmente con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetona = 3/2 a 2/3). Al residuo resultante se le añadió n-heptano y la mezcla se concentró a presión reducida. Al residuo resultante se le añadió éter dietílico y la mezcla se lavó de la suspensión y se filtró para dar un

15 sólido (7,5 g). El filtrado se concentró a presión reducida. Al residuo resultante se le añadió éter dietílico y la mezcla se lavó de la suspensión para dar un sólido (0,2 g). El sólido combinado se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/metanol = 97/3 a 9/1). Al sólido resultante se le añadió etanol y la mezcla se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (7,1 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,74 (1H, s a), 8,15 (1H, s), 7,22-7,19 (1H, m), 6,65-6,62 (1H, m), 5,13-5,07 (1H, m), 4,69-4,46

20 (3H, m), 3,83 (1H, d, J = 18,8 Hz), 3,77 (1H, d, J = 19,2 Hz), 3,61-3,55 (1H, m), 2,99-2,91 (1H, m), 2,39-2,29 (1H, m), 2,26-2,19 (1H, m), 1,99-1,91 (1H, m), 1,63-1,48 (1H, m). [α]D = +139,52° (25 ºC, c = 1,04, metanol).

[Preparación 6]: Síntesis del Compuesto 6 25

(1): Compuesto ópticamente activo de 2-bencilaminopropan-1-ol

A una solución de (S)-(+)-2-aminopropan-1-ol (50,0 g) y benzaldehído (74 ml) en etanol (500 ml) se le añadió paladio al 5 % sobre carbono (5,0 g) y la mezcla se hidrogenó a temperatura ambiente a una presión corriente durante 8 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (111,2 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,34-7,27 (4H, m), 7,23-7,18 (1H, m), 4,53-4,47 (1H, m), 3,76 (1H, d, J = 13,5 Hz), 3,66 (1H, d, J = 13,5 Hz), 3,29-3,24 (2H, m), 2,65-2,55 (1H, m), 1,99 (1H, s a), 0,93 (3H, d, J = 6,4 Hz).

(2): Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido [bencil-(2-hidroxi-1-metiletil)-amino]acético

A una mezcla de un compuesto ópticamente activo de 2-bencilaminopropan-1-ol (111,2 g), carbonato potásico (111,6 g) y N,N-dimetilformamida (556 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió gota a gota éster tercbutílico del ácido bromoacético (109 ml) durante 20 minutos y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 19,5 horas. La mezcla 15 se acidificó mediante la adición de una solución acuosa 2 M de ácido clorhídrico y una solución acuosa 6 M de ácido clorhídrico a pH 2 y se lavó con tolueno (1000 ml). La capa orgánica separada se extrajo con una solución acuosa 0,1 M de ácido clorhídrico (300 ml). La capa acuosa combinada se ajustó a pH 10 mediante una solución acuosa 4 M de hidróxido sódico y se extrajo con acetato de etilo (700 ml). La capa orgánica se lavó secuencialmente con agua (900 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico (500 ml). La capa acuosa separada se extrajo de nuevo con

20 acetato de etilo (400 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (160,0 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,37-7,26 (4H, m), 7,24-7,19 (1H, m), 4,26 (1H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz), 3,76 (1H, d, J = 14,1 Hz), 3,68 (1H, d, J = 13,9 Hz), 3,45-3,39 (1H, m), 3,29-3,20 (1H, m), 3,24 (1H, d, J = 17,2 Hz), 3,13 (1H, d, J = 17,0 Hz), 2,84-2,74 (1H, m), 1,37 (9H, s), 0,96 (3H, d, J = 6,8 Hz).

(3) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido [bencil-(2-cloropropil)-amino]acético

(3)-(1) Compuesto ópticamente activo de éster terc-butílico del ácido [bencil-(2-cloro-1-metiletil)-amino]acético

A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido [bencil-(2-hidroxi-1-metiletil)-amino]acético (160,0 g) en cloroformo (640 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió gota a gota

35 cloruro de tionilo (50,0 ml) y la mezcla se agitó a 60 ºC durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0 ºC. Después, se le añadieron una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (1000 ml) y cloroformo (100 ml) y la mezcla se agitó. La capa orgánica separada se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico (500 ml) y la capa acuosa se extrajo de nuevo con cloroformo (450 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (172,9 g).

40 RMN 1H (CDCl3) δ: 7,40-7,22 (5H, m), 4,05-3,97 (0,4H, m), 3,93-3,81 (2H, m), 3,70-3,65 (0,6H, m), 3,44-3,38 (0,6H, m), 3,29 (0,8H, s), 3,27 (1,2H, d, J = 2,4 Hz), 3,24-3,15 (0,6H, m), 3,05-2,99 (0,4H, m), 2,94-2,88 (0,4H, m), 1,50 (1,2H, d,

J = 6,4 Hz), 1,48 (3,6H, s), 1,45 (5,4H, s), 1,23 (1,8H, d, J = 6,8 Hz). (3)-(2) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido [bencil-(2-cloropropil)-amino]acético

Un compuesto ópticamente activo de éster terc-butílico del ácido [bencil-(2-cloro-1-metiletil)-amino]acético (172,9 g) se disolvió en N,N-dimetilformamida (520 ml) y se agitó a 80 ºC durante 140 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a 0 ºC. Después, se le añadió agua (1200 ml) y la mezcla se extrajo con n-hexano/acetato de etilo (2/1, 1000 ml). La

10 capa orgánica se lavó secuencialmente con agua (700 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico (400 ml) y la capa acuosa separada se extrajo de nuevo con n-hexano/acetato de etilo (2/1,600 ml). La capa orgánica combinada se concentró a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 50/1 a 40/1) para dar el compuesto del título (127,0 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,37-7,29 (4H, m), 7,28-7,23 (1H, m), 4,05-3,97 (1H, m), 3,91 (1H, d, J = 13,5 Hz), 3,86 (1H, d, J =

15 13,7 Hz), 3,29 (2H, s), 3,03 (1H, dd, J = 13,9, 6,6 Hz), 2,91 (1H, dd, J = 13,9, 6,8 Hz), 1,50 (3H, d, J = 6,4 Hz), 1,48 (9H, s).

(4) Compuesto ópticamente activo de 1-bencil-3-metilazetidin-2-carboxílico éster tercbutílico del ácido

A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido [bencil-(2-cloropropil)-amino]acético (60,0 g) y hexametil fosforamida (36,0 ml) en tetrahidrofurano (360 ml) enfriada a -72 ºC se le añadió gota a gota hexametil disilazida de litio (solución 1,0 M en tetrahidrofurano, 242 ml) en 18 minutos 25 y la mezcla se calentó a 0 ºC en 80 minutos. A la mezcla de reacción se le añadieron secuencialmente una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (300 ml) y agua (400 ml) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (500 ml). La capa orgánica se lavó secuencialmente con agua (700 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico (500 ml) y la capa acuosa separada se extrajo de nuevo con acetato de etilo (300 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en

30 columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 50/1 a 4/1) para dar el compuesto del título (50,9 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,34-7,21 (5H, m), 3,75 (1H, d, J = 12,6 Hz), 3,70-3,67 (1H, m), 3,58 (1H, d, J = 12,6 Hz), 3,05-3,01 (1H, m), 2,99-2,95 (1H, m), 2,70-2,59 (1H, m), 1,41 (9H, s), 1,24 (3H, d, J = 7,1 Hz).

(5) Compuesto ópticamente activo de di-tercbutil éster del ácido 3-metilazetidin-1,2-dicarboxílico 35

A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 1-bencil-3-metilazetidin-2-carboxílico (43,5 g) y dicarbonato de di-tercbutilo (38,2 g) en tetrahidrofurano/metanol

40 (130 ml/130 ml) se le añadió hidróxido de paladio al 20 % sobre carbono (3,5 g) y la mezcla se hidrogenó a una presión de 4 atmósferas durante 2 horas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (48,0 g).

RMN 1H (DMSO-D6) δ: 4,44 (1H, d, J = 8,8 Hz), 3,99-3,77 (1H, m), 3,45-3,37 (1H, m), 3,00-2,88 (1H, m), 1,45 (9H, s), 1,40-1,30 (9H, m), 1,02 (3H, d, J = 7,2 Hz).

(6) Compuesto ópticamente activo de di-tercbutil éster del ácido 3-metil-2-(3-metil-but-2-enil)-azetidin-1,2-dicarboxílico

A una solución de un compuesto ópticamente activo de di-tercbutil éster del ácido 3-metilazetidin-1,2-dicarboxílico

10 (48,0 g) y 1-bromo-3-metil-2-buteno (25,4 ml) en tetrahidrofurano (380 ml) enfriada a -69 ºC se le añadió hexametil disilazida de litio (solución 1,0 M en tetrahidrofurano, 200 ml). La mezcla de reacción se calentó a -20 ºC en 40 minutos y se agitó a la misma temperatura durante 20 minutos más. A la mezcla de reacción se le añadieron secuencialmente una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (200 ml) y agua (300 ml) y la mezcla se extrajo con n-hexano/acetato de etilo (1/1,500 ml). La capa orgánica separada se lavó secuencialmente con agua (200 ml) y una

15 solución acuosa saturada de cloruro sódico (200 ml), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 15/1 a 8/1) para dar el compuesto del título (44,5 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 5,29-5,21 (1H, m), 3,77-3,72 (1H, m), 3,49-3,44 (1H, m), 2,73-2,52 (3H, m), 1,76-1,74 (3H, m), 1,66-1,65 (3H, m), 1,51 (9H, s), 1,43 (9H, s), 1,05 (3H, d, J = 7,3 Hz).

(7) Compuesto ópticamente activo de di-tercbutil éster del ácido 3-metil-2-(2-oxoetil)azetidin-1,2-dicarboxílico

25 Una solución de un compuesto ópticamente activo de di-tercbutil éster del ácido 3-metil-2-(3-metil-but-2-enil)-azetidin-1,2-dicarboxílico (44,5 g) en cloroformo/metanol (310 ml/310 ml) enfriada a -70 ºC se le fluyó aire de ozono durante 1 hora. A la mezcla de reacción se le añadió una solución de trifenilfosfina (44,7 g) en cloroformo (45 ml) en pequeños lotes y la mezcla se calentó a temperatura ambiente. A la mezcla se le añadieron una solución acuosa saturada de tiosulfato sódico (200 ml) y agua (300 ml) y la mezcla se extrajo con

30 cloroformo (500 ml). La capa orgánica separada se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (95,0 g), que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (DMSO-D6) δ: 9,65 (1H, t, J = 2,6 Hz), 3,79-3,74 (1H, m), 3,45-3,40 (1H, m), 2,99-2,80 (3H, m), 1,46 (9H, s), 1,34 (9H, s), 1,06 (3H, d, J = 7,2 Hz).

(8) Compuesto ópticamente activo de di-tercbutil éster del ácido 2-(2-bencilaminoetil)-3-metilazetidin-1,2-dicarboxílico

A una solución del residuo (95,0 g) obtenido en (7) en tetrahidrofurano (300 ml) se le añadió bencilamina (34 ml) a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante 2 horas. La mezcla se enfrió a 0 ºC. Después, se le añadió triacetoxiborohidruro sódico (83,3 g) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas. A la mezcla de reacción se le añadió agua (300 ml) y la mezcla se extrajo con n-hexano/acetato de etilo (1/3, 600 ml). La capa 5 orgánica separada se lavó con agua (300 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico (200 ml) y después se extrajo dos veces con una solución acuosa al 5 % de ácido cítrico (300 ml, 200 ml) y 3 veces con una solución acuosa al 10 % de ácido cítrico (250 ml x 3). La capa acuosa combinada se basificó con una solución acuosa 4 M de hidróxido sódico a pH 10 y se extrajo con cloroformo (300 ml). La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico (200 ml), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida para dar el

10 compuesto del título (46,9 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,34-7,26 (4H, m), 7,22-7,17 (1H, m), 3,74-3,65 (2H, m), 3,61 (1H, t, J = 7,8 Hz), 3,28 (1H, t, J = 7,5 Hz), 2,76-2,66 (2H, m), 2,57-2,45 (1H, m), 2,15 (1H, s a), 2,05-1,89 (2H, m), 1,42 (9H, s), 1,27 (9H, s), 0,96 (3H, d, J = 7,1 Hz).

15 (9) Compuesto ópticamente activo de 2 clorhidrato del ácido 2-(2-bencilaminoetil)-3-metilazetidin-2-dicarboxílico

[Fórmula química 104]

20 Un compuesto ópticamente activo de di-tercbutil éster del ácido 2-(2-bencilaminoetil)-3-metilazetidin-1,2-dicarboxílico (46,5 g) se mezcló con ácido clorhídrico 4 M-1,4-dioxano (230 ml) y agua (4,1 ml) y la mezcla se agitó a 80 ºC durante 2 horas. La mezcla se concentró a presión reducida, se destiló azeotrópicamente con tolueno y después se lavó de la suspensión con n-hexano/acetato de etilo (1/1,440 ml) para dar el compuesto del título (30,1 g).

25 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 10,24 (1H, s a), 9,64 (2H, s a), 8,90 (1H, s a), 7,58-7,53 (2H, m), 7,47-7,41 (3H, m), 4,21-4,10 (2H, m), 4,02-3,94 (1H, m), 3,46-3,37 (1H, m), 3,20-3,10 (1H, m), 2,99-2,85 (2H, m), 2,69-2,54 (2H, m), 1,10 (3H, d, J = 7,2 Hz).

(10) Compuesto ópticamente activo de 6-bencil-3-metil-1,6-diazaespiro[3,4]octan-5-ona 30

A una solución de un compuesto ópticamente activo de 2 clorhidrato del ácido 2-(2-bencilaminoetil)-3-metilazetidin-2-dicarboxílico (29,1 g) y N,N-diisopropiletilamina (65 ml) en cloroformo (290 ml) 35 se le añadió hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronio (41,3 g) a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante 4 horas. A la mezcla de reacción se le añadieron una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (200 ml) y agua (100 ml) y la mezcla se extrajo con cloroformo (200 ml). La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente:

40 cloroformo/metanol = 20/1 a 10/1) para dar el compuesto del título (21,3 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,38-7,31 (2H, m), 7,30-7,22 (3H, m), 4,52 (1H, d, J = 14,8 Hz), 4,29 (1H, d, J = 14,8 Hz), 3,35-3,27 (2H, m), 3,22-3,17 (1H, m), 3,05 (2H, dd, J = 9,5, 4,0 Hz), 2,77-2,66 (1H, m), 2,16-2,10 (1H, m), 1,96-1,87 (1H, m), 0,94 (3H, d, J = 7,1 Hz).

45 (11) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 6-bencil-3-metil-1,6-diazaespiro[3,4]octano1-carboxílico

5 A una suspensión de hidruro de litio y aluminio (6,8 g) en tetrahidrofurano (300 ml) se le añadió lentamente gota a gota ácido sulfúrico concentrado (4,8 ml) en refrigeración con hielo y la mezcla se agitó durante 30 minutos. A la mezcla se le añadió gota a gota una solución de un compuesto ópticamente activo de 6-bencil-3-metil-1,6-diazaespiro[3,4]octan-5-ona (21,3 g) en tetrahidrofurano (100 ml) y la mezcla se agitó a la misma

10 temperatura durante 45 minutos más. A la mezcla de reacción se le añadieron secuencialmente agua (7,0 ml), una solución acuosa 4 M de hidróxido sódico (7,0 ml) y agua (14,0 ml) y la mezcla se agitó directamente durante 30 minutos. A la mezcla se le añadieron sulfato de magnesio anhidro y acetato de etilo (100 ml) y la mezcla se agitó y después se filtró a través de Celite. Al filtrado se le añadió dicarbonato de di-tercbutilo (23,4 g) a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante 3 horas. La mezcla se concentró a presión reducida hasta que se redujo a la

15 mitad y se lavó dos veces con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (200 ml x 2). A la capa orgánica separada se le añadió n-hexano (200 ml) y la mezcla se extrajo 5 veces con una solución acuosa al 10 % de ácido cítrico. La capa acuosa separada se basificó con una solución acuosa 4 M de hidróxido sódico y se extrajo con cloroformo. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico (200 ml), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en

20 columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/metanol = 40/1 a 20/1) para dar el compuesto del título (15,6 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,34-7,27 (4H, m), 7,26-7,21 (1H, m), 3,84-3,69 (1H, m), 3,62-3,47 (2H, m), 3,19-3,05 (1H, m), 3,02-2,92 (1H, m), 2,76-2,69 (1H, m), 2,47-2,24 (4H, m), 1,95-1,77 (1H, m), 1,36 (9H, s), 1,03 (3H, d, J = 7,0 Hz).

(12) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-metil-1,6-diazaespiro[3,4]octano-1-carboxílico 25

A una solución de un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 6-bencil-3-metil-1,6-diazaespiro[3,4]octano-1-carboxílico (10,0 g) en tetrahidrofurano/metanol (50 ml/50 ml) se le

30 añadió hidróxido de paladio al 20 % sobre carbono (2,0 g) y la mezcla se hidrogenó a una presión de 4 atmósferas durante 24 horas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (7,3 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 3,88-3,71 (1H, m), 3,44-3,06 (2H, m), 3,02-2,64 (4H, m), 2,55-2,38 (1H, m), 2,31-2,15 (1H, m), 1,81-1,72 (1H, m), 1,37 (9H, s), 1,07 (3H, d, J = 7,0 Hz).

35 (13) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido del 3-metil-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,4]octano-1-carboxílico

5 Un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-metil-1,6-diazaespiro[3,4]octano-1-carboxílico (6,9 g) se mezcló con 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (4,3 g), carbonato potásico (7,7 g) y agua (65 ml) y se agitó durante 4 horas con reflujo. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se le añadió agua (60 ml). La mezcla se extrajo con cloroformo/metanol (10/1, 120 ml). La capa orgánica se lavó secuencialmente con agua, una solución

10 acuosa saturada de cloruro de amonio y una solución acuosa saturada de cloruro sódico y se secó sobre sulfato sódico anhidro. A la mezcla se le añadió gel de sílice (4 g) y la mezcla se agitó durante 10 minutos, se filtró a través de Celite y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetato de etilo = 1/1, seguido de cloroformo/metanol = 50/1 a 20/1) para dar el compuesto del título (10,0 g).

15 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,59 (1H, s a), 8,09 (1H, s), 7,12-7,09 (1H, m), 6,64-6,59 (1H, m), 4,09-3,66 (5H, m), 3,39-3,21 (1H, m), 2,64-2,44 (2H, m), 2,27-2,06 (1 H, m), 1,36 (3H, s), 1,21 (6H, s), 1,11 (3H, d, J = 6,5 Hz).

(14) Compuesto ópticamente activo de 2 clorhidrato de 4-(3-metil-1,6-diazaespiro[3,4]oct-6-il)-

7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina 20

Un compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 3-metil-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,4]octano-1-carboxílico (9,5 g) se mezcló con ácido

25 clorhídrico 4 M-1,4-dioxano (50 ml), cloroformo (50 ml) y metanol (100 ml) y la mezcla se agitó a 60 ºC durante 30 minutos. La mezcla se concentró a presión reducida y se destiló azeotrópicamente con tolueno para dar el compuesto del título (9,3 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 12,91 (1H, s a), 9,97-9,64 (2H, m), 8,45-8,35 (1H, m), 7,58-7,47 (1H, m), 7,04-6,92 (1H, m), 4,99-4,65 (1H, m), 4,32-3,21 (7H, m), 3,04-2,90 (1H, m), 2,46-2,31 (1H, m), 1,27 (3H, d, J = 6,0 Hz).

30 (15) Compuesto ópticamente activo de 3-[3-metil-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6- diazaespiro[3,4]oct-1-il]-3-oxopropionitrilo

5 Un compuesto ópticamente activo de 2 clorhidrato de 4-(3-metil-1,6-diazaespiro[3,4]oct-6-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (8,8 g) se mezcló con 1-cianoacetil-3,5-dimetilpirazol (6,8 g), N,N-diisopropiletilamina (20 ml) y 1,4- dioxano (100 ml) y la mezcla se agitó a 100 ºC durante 1 hora. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se le añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico. La mezcla se extrajo con cloroformo/metanol (10/1). La capa orgánica

10 separada se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/metanol = 30/1 a 9/1) y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se lavó de la suspensión con n-heptano/etanol (2/1,90 ml) para dar un sólido (7,3 g). El sólido se lavó de la suspensión de nuevo con n-heptano/etanol (5/1,90 ml) para dar el Cristal 1 del compuesto del título (6,1 g).

15 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,60 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,11 (1H, dd, J = 3,5, 2,4 Hz), 6,58 (1H, dd, J = 3,4, 1,9 Hz), 4,18-4,14 (1H, m), 4,09-3,93 (3H, m), 3,84-3,73 (1H, m), 3,71 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,66 (1H, d, J = 18,7 Hz), 3,58 (1H, dd, J = 8,2, 6,0 Hz), 2,70-2,58 (2H, m), 2,24-2,12 (1H, m), 1,12 (3H, d, J = 7,1 Hz). [α]D = +47,09° (25 ºC, c = 0,55, metanol)

20 Al Cristal 1 resultante (2,6 g) se le añadió 1-butanol (39 ml) y la mezcla se calentó a 100 ºC y se agitó. Después de la disolución completa de los sólidos, la solución se enfrió a temperatura ambiente a 10 ºC por 30 minutos y se agitó adicionalmente a temperatura ambiente durante una noche. Los cristales generados se filtraron, se lavaron con 1-butanol (6,2 ml) y se secaron a presión reducida para dar el Cristal 2 del compuesto del título (2,1 g).

25 [Preparación 7]: Síntesis del Compuesto 7

(1) Compuesto ópticamente activo de 3-triclorometiltetrahidropirrolo[1,2-c]oxazol-1-ona

A una solución de D-prolina (100,0 g) en acetonitrilo (400 ml) se le añadió gota a gota cloral (169 ml) a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante 18 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. Al residuo resultante se le añadió agua y la mezcla se extrajo con cloroformo. La capa orgánica separada se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se lavó de la suspensión con

5 n-hexano/acetato de etilo (20/1,900 ml) para dar el compuesto del título (159,7 g). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 5,83 (1H, s), 4,10 (1H, dd, J = 9,0, 4,2 Hz), 3,34-3,27 (1H, m), 3,20-3,13 (1H, m), 2,19-2,07 (1H, m), 1,98-1,90 (1H, m), 1,83-1,73 (1H, m), 1,67-1,55 (1H, m).

(2) Compuesto ópticamente activo de 7a-alil-3-triclorometiltetrahidropirrolo[1,2-c]oxazol-1-ona 10

A una solución de diisopropilamina (60 ml) en tetrahidrofurano (160 ml) se le añadió gota a gota n-butillitio (solución 2,64 M en hexano, 161 ml) durante 20 minutos en refrigeración con hielo y la mezcla se agitó directamente durante 40 15 minutos. A la mezcla enfriada a -68 ºC se le añadió gota a gota una solución de 3-triclorometiltetrahidropirrolo[1,2-c]oxazol-1-ona (80,0 g) en tetrahidrofurano (640 ml) durante 30 minutos y la mezcla se agitó directamente durante 20 minutos. A la mezcla se le añadió bromuro de alilo (57 ml) y la mezcla se agitó directamente durante 1 hora. A la mezcla de reacción se le añadió una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (1000 ml) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (800 ml). La capa orgánica separada se lavó con agua (800 ml) y

20 una solución acuosa saturada de cloruro sódico (500 ml). La capa acuosa separada se extrajo dos veces con acetato de etilo (400 ml, 500 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (86,1 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 5,96-5,84 (1H, m), 5,22-5,21 (1H, m), 5,20-5,16 (1H, m), 5,00-4,98 (1H, m), 3,26-3,15 (2H, m), 2,67-2,53 (2H, m), 2,19-2,11 (1H, m), 2,08-1,98 (1H, m), 1,95-1,85 (1H, m), 1,72-1,61 (1H, m).

(3) Compuesto ópticamente activo de 2-metil éster de 1-tercbutil éster del ácido 2-alilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

30 A una solución de 7a-alil-3-triclorometiltetrahidropirrolo[1,2-c]oxazol-1-ona (86,1 g) en metanol (430 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió gota a gota ácido sulfúrico concentrado (43 ml) y después la mezcla se agitó durante 13,5 horas con reflujo. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró a presión reducida. Después, al residuo resultante se le añadió acetato de etilo (500 ml) y la mezcla se extrajo con agua (500 ml). La capa orgánica separada se extrajo de nuevo con agua (300 ml). La capa acuosa combinada se neutralizó con una solución acuosa 4 M de hidróxido

35 sódico a pH 7,5. A la mezcla se le añadió bicarbonato sódico (55 g), seguido de una solución de dicarbonato de di-tercbutilo (85,7 g) en tetrahidrofurano (430 ml) a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante una noche. A la mezcla se le añadió acetato de etilo (800 ml) y la mezcla se extrajo. La capa orgánica separada se lavó secuencialmente con agua (1000 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico (500 ml). La capa acuosa separada se extrajo de nuevo con acetato de etilo (400 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico

40 anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 30/1 a 10/1) para dar el compuesto del título (61,2 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 5,82-5,70 (1,0H, m), 5,16-5,14 (1,0H, m), 5,13-5,09 (1,0H, m), 3,73-3,66 (0,7H, m), 3,72 (3,0H, s), 3,63-3,56 (0,3H, m), 3,42-3,31 (1,0H, m), 3,14-3,07 (0,3H, m), 2,96-2,89 (0,7H, m), 2,65-2,57 (1,0H, m), 2,17-1,98 (2,0H, m), 1,94-1,75 (2,0H, m), 1,46 (3,0H, s), 1,43 (6,0H, s).

(4) Compuesto ópticamente activo de 2-metil éster de 1-tercbutil éster del ácido 2-(3-hidroxipropil)pirrolidin- 1,2-dicarboxílico

5 A una solución de 2-metil éster de 1-tercbutil éster del ácido 2-alilpirrolidin-1,2-dicarboxílico (25,0 g) en tetrahidrofurano (125 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió gota a gota una complejo de borano-tetrahidrofurano (solución 1,0 M en tetrahidrofurano, 105 ml) durante 30 minutos y la mezcla se agitó a la misma temperatura durante 2,5 horas. A la mezcla de reacción se le añadió gota a gota más cantidad de complejo de borano-tetrahidrofurano (solución 1,0 M

10 en tetrahidrofurano, 11 ml) y la mezcla se agitó a la misma temperatura durante 50 minutos. A la mezcla de reacción se le añadió gota a gota agua (180 ml) durante 30 minutos y se le añadió en pequeños lotes 1 hidrato de peroxoborato sódico (12,0 g). La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante una noche y después se le añadió agua (500 ml). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (600 ml). La capa orgánica separada se lavó con una solución acuosa al 20 % de tiosulfato sódico (600 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa acuosa

15 separada se extrajo dos veces con acetato de etilo (300 ml, 200 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 2/1 a 1/1) para dar el compuesto del título (17,4 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 3,77-3,59 (2H, m), 3,71 (3H, s), 3,47-3,36 (1H, m), 2,37-1,76 (7H, m), 1,68-1,50 (3H, m), 1,45 (4H, s), 1,41 (5H, s).

(5) Compuesto ópticamente activo de 2-metil éster de 1-tercbutil éster del ácido 2-(3-oxopropil)pirrolidin-1,2-dicarboxílico

25 A una suspensión de 2-metil éster de 1-tercbutil éster del ácido 2-(3-hidroxipropil)pirrolidin-1,2-dicarboxílico (17,4 g) y bicarbonato sódico (12,7 g) en cloroformo (175 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió peryodinano de Dess-Martin (28,3 g). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 1,5 horas. A la mezcla de reacción se le añadió más cantidad de peryodinano de Dess-Martin (1,0 g) y la mezcla se agitó durante 50 minutos. A la mezcla de reacción enfriada a 0 ºC se le añadió más cantidad de peryodinano de Dess-Martin (15 g) y la mezcla se agitó durante

30 2 horas. A la mezcla se le añadieron tiosulfato sódico al 20 % (250 ml) y una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (250 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos. La mezcla se extrajo dos veces con cloroformo (200 ml x 2) y la capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 4/1 a 3/2) para dar el compuesto del título (5,68 g).

35 RMN 1H (CDCl3) δ: 9,78-9,76 (0,5H, m), 9,70-9,68 (0,5H, m), 3,76-3,69 (3,5H, m), 3,61-3,52 (0,5H, m), 3,44-3,32 (1,0H, m), 2,68-2,40 (3,0H, m), 2,29-2,06 (2,0H, m), 2,03-1,76 (3,0H, m), 1,44 (4,0H, s), 1,41 (5,0H, s).

(6) Compuesto ópticamente activo de 2-metil éster de 1-tercbutil éster del ácido 2-(3-bencilaminopropil)pirrolidin-1,2-dicarboxílico

5 A una solución de 2-metil éster de 1-tercbutil éster del ácido 2-(3-oxopropil)pirrolidin-1,2-dicarboxílico (5,68 g) en tetrahidrofurano (57 ml) se le añadió bencilamina (6,53 ml) a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante 1 hora. La mezcla se enfrió a 0 ºC y se le añadió triacetoxiborohidruro sódico (5,07 g). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12,5 horas. A la mezcla de reacción se le añadieron agua (12 ml) y una solución acuosa saturada de

10 cloruro de amonio (200 ml) y la mezcla se extrajo 4 veces con n-hexano/acetato de etilo (1/2, 210 ml x 2, 120 ml x 2). A la capa orgánica combinada se le añadió n-hexano (150 ml) y la mezcla se extrajo 3 veces con una solución acuosa al 10 % de bisulfato potásico (180 ml x 3). La capa acuosa combinada se neutralizó con una solución acuosa 4 M de hidróxido sódico a pH 7 a 8 y se le añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (100 ml). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (200 ml). La capa acuosa separada se extrajo dos veces con acetato de etilo (200 ml x 2) y

15 la capa orgánica combinada se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico (200 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (7,69 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,27-7,35 (5H, m), 3,80 (2H, s), 3,65-3,75 (0,7H, m), 3,69 (3H, s), 3,55-3,65 (0,5H, m), 3,31-3,45 (1H, m), 2,60-2,71 (2H, m), 2,25-2,35 (0,2H, m), 2,10-2,21 (0,5H, m), 2,04 (1,0H, s), 1,97-2,11 (2,4H, m), 1,74-1,93 (3,0H, m), 1,45-1,65 (1,7H, m), 1,44 (3,5H, s), 1,38 (5,5H, s)

(7) Compuesto ópticamente activo de éster metílico del ácido 2-(3-bencilaminopropil)pirrolidin-2-carboxílico

25 A una solución de 2-metil éster de 1-tercbutil éster del ácido 2-(3-bencilaminopropil)pirrolidin-1,2-dicarboxílico (7,69 g) en cloroformo (38 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió ácido clorhídrico 4 M-acetato de etilo (18 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. A la mezcla se le añadió más cantidad de ácido clorhídrico 4 M-acetato de etilo (20 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 50 minutos. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y después se le añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (150 ml). La mezcla se extrajo 4

30 veces con cloroformo (100 ml x 2, 75 ml x 2). La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (7,49 g). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,35-7,22 (5H, m), 3,77 (2H, s), 3,71 (3H, s), 3,02-2,92 (2H, m), 2,65-2,58 (2H, m), 2,21-2,13 (1H, m), 1,92-1,50 (8H, m), 1,43-1,31 (1H, m).

(8) Compuesto ópticamente activo de 7-bencil-1,7-diazaespiro[4,5]decan-6-ona

5 Una solución de éster metílico del ácido 2-(3-bencilaminopropil)pirrolidin-2-carboxílico (133 mg) en xileno (1,5 ml) se agitó a 130 ºC durante una noche. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/metanol = 10/1) para dar el compuesto del título (90 mg). RMN 1H (CDCl3) δ: 7,35-7,21 (5H, m), 4,68 (1H, d, J = 14,6 Hz), 4,48 (1H, d, J = 14,6 Hz), 3,31-3,18 (3H, m), 2,90-2,83 (1H, m), 2,12-2,04 (1H, m), 1,99-1,80 (7H, m), 1,78-1,70 (1H, m).

(9) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 7-bencil-6-oxo-1,7diazaespiro[4,5]decano-1-carboxílico

15 A una suspensión de hidruro de litio y aluminio (45 mg) en tetrahidrofurano (1,5 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió ácido sulfúrico concentrado (31 µl) y la mezcla se agitó durante 50 minutos. A la mezcla se le añadió gota a gota una solución de 7-bencil-1,7-diazaespiro[4,5]decan-6-ona (90 mg) en tetrahidrofurano (0,5 ml) a 0 ºC y la mezcla se agitó a la misma temperatura durante 40 minutos. A la mezcla de reacción se le añadieron secuencialmente agua (45 µl), una

20 solución acuosa 4 M de hidróxido sódico (45 µl) y agua (45 µl) y la mezcla se agitó durante 30 minutos. A la mezcla se le añadieron acetato de etilo y sulfato de magnesio anhidro y la mezcla se filtró a través de Celite. Al filtrado se le añadió dicarbonato de di-tercbutilo (112 mg) a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante 100 minutos. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 10/1 a 5/1) para dar el compuesto del título (76 mg).

25 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 7,36-7,28 (4H, m), 7,25-7,20 (1H, m), 3,72-3,67 (2H, m), 3,62 (2H, s), 3,58 (1H, s), 3,56-3,45 (1H, m), 3,31-3,22 (1H, m), 2,55-2,47 (1H, m), 2,17-1,90 (3H, m), 1,83-1,72 (3H, m), 1,54-1,41 (1H, m), 1,37 (3H, s), 1,33-1,23 (1H, m), 1,29 (6H, s).

(10) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 1,7-diazaespiro[4,5]decano-1-carboxílico 30

A una solución de éster tercbutílico del ácido 7-bencil-6-oxo-1,7-diazaespiro[4,5]decano-1-carboxílico (76 mg) en tetrahidrofurano/metanol (1 ml/1 ml) se le añadió hidróxido de paladio al 20 % sobre carbono (15 mg) y la mezcla se 35 hidrogenó a una presión de 4 atmósferas. La mezcla se filtró a través de Celite en una atmósfera de nitrógeno y el

filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (51 mg). RMN 1H (CDCl3) δ: 3,57-3,31 (3H, m), 3,00-2,87 (1H, m), 2,78-2,39 (3H, m), 2,17-2,07 (1H, m), 1,93-1,78 (1H, m), 1,76-1,62 (3H, m), 1,53-1,42 (12H, m).

5 (11) Compuesto ópticamente activo de éster tercbutílico del ácido 7-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,7-diazaespiro[4,5]decano-1-carboxílico

10 Se mezcló éster tercbutílico del ácido 1,7-diazaespiro[4,5]decano-1-carboxílico (51 mg) con 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (36 mg), carbonato potásico (59 mg) y agua (1 ml) y la mezcla se agitó durante 1,5 horas con reflujo. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se le añadió agua. La mezcla se extrajo con cloroformo. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de

15 sílice (eluyente: n-hexano/acetato de etilo = 1/1, seguido de cloroformo/metanol = 20/1) para dar el compuesto del título (60 mg). RMN 1H (CDCl3) δ: 10,58-10,90 (1H, m), 8,30 (1H, s a), 7,07 (1H, s a), 6,48-6,56 (1H, m), 4,66-4,87 (1H, m), 4,52-4,62 (1H, m), 3,82-3,95 (0,6H, m), 3,50-3,75 (1,4H, m), 3,31-3,50 (1H, m), 3,04-3,20 (0,6H, m), 2,85-3,04 (1H, m), 2,58-2,74 (0,4H, m), 1,98-2,14 (1H, m), 1,40-1,90 (6H, m), 1,54 (3,6H, s), 1,48 (5,4H, s)

(12) Compuesto ópticamente activo de 4-(1,7-diazaespiro[4,5]dec-7-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina

25 A una solución de éster tercbutílico del ácido 7-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,7diazaespiro[4,5]decano-1-carboxílico (60 mg) en cloroformo (1,0 ml) se le añadieron ácido clorhídrico 4 M-acetato de etilo (1,5 ml) y ácido clorhídrico 2 M-metanol (0,5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y después se destiló azeotrópicamente con tolueno. El residuo se neutralizó mediante la adición de una solución acuosa 4 M de hidróxido sódico y se le añadió una solución acuosa

30 saturada de cloruro sódico. La mezcla se extrajo con cloroformo. El disolvente orgánico separado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (30 mg). RMN 1H (CDCl3) δ: 9,26 (1H, s a), 8,28 (1H, s), 7,04 (1H, d, J = 3,7 Hz), 6,52 (1H, d, J = 3,7 Hz), 3,92-3,86 (2H, m), 3,81 (1H, d, J = 13,0 Hz), 3,72 (1H, d, J = 13,0 Hz), 3,10-3,00 (2H, m), 1,94-1,80 (3H, m), 1,78-1,70 (5H, m), 1,55-1,47 (1H, m).

35 (13) Compuesto ópticamente activo de 3-oxo-3-[7-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,7-diazaespiro- [4,5]dec-1-il)propionitrilo

5 Se mezcló 4-(1,7-diazaespiro[4,5]dec-7-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (30 mg) con 1-cianoacetil-3,5-dimetilpirazol (38 mg), N,N-diisopropiletilamina (42 µl) y 1,4-dioxano (1 ml) y la mezcla se agitó a 110 ºC durante 75 minutos. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y después se le añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico. La mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró

10 a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: cloroformo/acetato de etilo = 1/2, seguido de cloroformo/metanol = 25/1 a 20/1) para dar el compuesto del título (32 mg). RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,69 (1H, s a), 8,09 (1H, s), 7,19-7,15 (1H, m), 6,59-6,55 (1H, m), 4,74-4,66 (1H, m), 4,55-4,47 (1H, m), 3,95 (2H, s), 3,86-3,78 (1H, m), 3,57-3,48 (1H, m), 3,45-3,37 (1H, m), 2,99-2,82 (2H, m), 1,89-1,68 (4H, m),

15 1,66-1,56 (2H, m), 1,55-1,47 (1H, m). [α]D = +185,58° (25 ºC, c = 1,04, metanol).

[Preparación 8]

20 Un compuesto ópticamente activo de 3-[3-metil-6-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1,6-diazaespiro[3,4]oct-1-il]-3-oxopropionitrilo (Compuesto 6) se trató de acuerdo con un método convencional para dar 1 hidrato del mismo. RMN 1H (DMSO-D6) δ:11,60 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,11 (1H, s), 6,58 (1H, s), 4,16 (1H, dd, J = 8,2, 8,2 Hz), 4,11-3,61 (6H, m), 3,57 (1H, dd, J = 7,65, 6,26 Hz), 2,70-2,57 (2H, m), 2,24-2,10 (1H, m), 1,11 (3H, d, J = 6,9 Hz).

25 Las siguientes Tablas 1 a 3 muestran fórmulas estructurales y datos espectrales de RMN 1H data de los Compuesto 1 a 95 preparados de acuerdo con las preparaciones anteriores. Los espectros de RMN 1H se midieron en CDCl3 o DMSO-d6 usando tetrametilsilano como patrón interno y todos los valores de δ se muestran en ppm. A menos que se especifique lo contrario, se usó una espectroscopia de RMN de 400 MHz para la medición.

30 Los símbolos en la Tabla tienen los siguientes significados.

s: singlete

d: doblete 35 t: triplete

q: cuadruplete dd: doblete doble ddd: doble doblete doble s a: singlete ancho

40 m: multiplete

J: constante de acoplamiento

[Tabla 1-1] [Tabla 1-2]

N.º: Fórmula Estructural Comentarios Datos de RMN

1: Compuesto 1 (Sustancia ópticamente activa) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,71 (1H, s a), 8,12 (1H, s), 7,20 (1H, dd, J = 3,5, 2,4 Hz), 6,65 (1H, dd, J = 3,6, 1,9 Hz), 4,93-4,88 (1H, m), 4,64-4,58 (1H, m), 4,24-4,18 (1H, m), 3,67 (2H, s), 3,61 (1H, d, J = 12,8 Hz), 3,46-3,41 (1H, m), 3,03-2,95 (1H, m), 2,42-2,35 (1H, m), 2,34-2,25 (1H, m), 2,15-2,08 (1H, m), 1,83-1,77 (1H, m), 1,57-1,43 (1H, m), 1,01 (3H, d, J = 7,1 Hz).

2: Compuesto 2 (Sustancia ópticamente activa) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11 (1H, s a), 8,14 (1H, s), 7,19 (1H, dd, J = 3,5, 2,4 Hz), 6,64 (1H, dd, J = 3,6, 1,9 Hz), 5,03-4,96 (1H, m), 4,66-4,59 (1H, m), 4,11-4,06 (1H, m), 3,70 (1H, d, J = 18,7 Hz), 3,65 (1H, d, J = 18,7 Hz), 3,60-3,55 (1H, m), 3,45 (1H, d, J = 13,0 Hz), 2,97-2,89 (1H, m), 2,46-2,41 (1H, m), 2,40-2,34 (1H, m), 2,00-1,94 (1H, m), 1,88-1,80 (1H, m), 1,64-1,51 (1H, m), 0,91 (3H, d, J = 7,1 Hz).

3: Compuesto 3 (Sustancia ópticamente activa) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,73 (1H, s a), 8,13 (1H, s), 7,22-7,18 (1H, m), 6,67-6,63 (1H, m), 4,96 (1H, d, J = 12,6 Hz), 4,68-4,60 (1H, m), 4,11-4,03 (1H, m), 4,01-3,93 (1H, m), 3,71 (2H, s), 3,53 (1H, d, J = 12,6 Hz), 2,98-2,88 (1H, m), 2,40-2,30 (1H, m), 2,03-1,90 (3H, m), 1,83-1,75 (1H, m), 1,59-1,45 (1H, m).

4: Compuesto 4 (Sustancia ópticamente activa) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,68 (1H, s a), 8,11 (1H, s), 7,17-7,14 (1H, m), 6,58 (1H, dd, J = 3,3, 1,8 Hz), 4,66-4,58 (2H, m), 4,24-4,13 (2H, m), 4,12-4,02 (1H, m), 3,89-3,78 (3H, m), 2,68-2,58 (1H, m), 2,56-2,45 (1H, m).

5: Compuesto 5 (Sustancia ópticamente activa) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,74 (1H, s a), 8,15 (1H, s), 7,22-7,19 (1H, m), 6,65-6,62 (1H, m), 5,13-5,07 (1H, m), 4,69-4,46 (3H, m), 3,83 (1H, d, J = 18,8 Hz), 3,77 (1H, d, J = 19,2 Hz), 3,61-3,55 (1H, m), 2,99-2,91 (1H, m), 2,39-2,29 (1H, m), 2,26-2,19 (1H, m), 1,99-1,91 (1H, m), 1,63-1,48 (1H, m).

6: Compuesto 6 (Sustancia ópticamente activa) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,60 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,11 (1H, dd, J = 3,5, 2,4 Hz), 6,58 (1H, dd, J = 3,4, 1,9 Hz), 4,18-4,14 (1H, m), 4,09-3,93 (3H, m), 3,84-3,73 (1H, m), 3,71 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,66 (1H, d, J = 18,7 Hz), 3,58 (1H, dd, J = 8,2, 6,0 Hz), 2,70-2,58 (2H, m), 2,24-2,12 (1H, m), 1,12 (3H, d, J = 7,1 Hz).

7: Compuesto 7 (Sustancia ópticamente activa) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,69 (1H, s a), 8,09 (1H, s), 7,19-7,15 (1H, m), 6,59-6,55 (1H, m), 4,74-4,66 (1H, m), 4,55-4,47 (1H, m), 3,95 (2H, s), 3,86-3,78 (1H, m), 3,57-3,48 (1H, m), 3,45-3,37 (1H, m), 2,99-2,82 (2H, m), 1,89-1,68 (4H, m), 1,66-1,56 (2H, m), 1,55-1,47 (1H, m).

8: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ :11,66-11,52 (1,0H, m), 8,28 (0,1H, s), 8,10 (0,3H, s), 8,08-8,05 (0,6H, m), 7,15-7,06 (1,0H, m), 6,63-6,51 (1,0H, m), 4,49-4,16 (0,5H, m), 4,06-3,74 (2,0H, m), 3,66-2,72 (9,5H, m), 2,44-2,32 (0,5H, m), 2,15-1,65 (6,5H, m).

[Tabla 1-3] [Tabla 1-4] [Tabla 1-5] [Tabla 1-6] [Tabla 1-7]

9: Enantiómero del Compuesto 4 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,68 (1H, s a), 8,11 (1H, s), 7,17-7,15 (1H, m), 6,58 (1H, dd, J = 3,2, 1,7 Hz), 4,65-4,59 (2H, m), 4,22-4,15 (2H, m), 4,13-4,01 (2H, m), 3,86 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,80 (1H, d, J = 19,2 Hz), 2,69-2,58 (1H, m), 2,56-2,45 (1H, m).

10: Enantiómero del Compuesto 6 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,60 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,11 (1H, dd, J = 3,2, 2,5 Hz), 6,58 (1H, dd, J = 3,4,1,9 Hz), 4,18-4,14 (1H, m), 4,09-3,93 (3H, m), 3,86-3,74 (1H, m), 3,71 (1H, d, J = 18,7 Hz), 3,66 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,58 (1H, dd, J = 8,2, 6,0 Hz), 2,69-2,58 (2H, m), 2,24-2,12 (1H, m), 1,12 (3H, d, J = 7,1 Hz).

11: Enantiómero del Compuesto 2 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11 (1H, s a), 8,14 (1H, s), 7,19 (1H, dd, J = 3,5, 2,4 Hz), 6,64 (1H, dd, J = 3,7, 2,0 Hz), 5,02-4,97 (1H, m), 4,66-4,59 (1H, m), 4,11-4,06 (1H, m), 3,70 (1H, d, J = 18,7 Hz), 3,65 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,60-3,56 (1H, m), 3,45 (1H, d, J = 13,0 Hz), 2,98-2,89 (1H, m), 2,46-2,41 (1H, m), 2,39-2,34 (1H, m), 2,00-1,94 (1H, m), 1,87-1,81 (1H, m), 1,64-1,51 (1H, m), 0,91 (3H, d, J = 7,1 Hz).

12: Enantiómero del Compuesto 1 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,71 (1H, s a), 8,13 (1H, s), 7,20 (1H, dd, J = 3,5, 2,4 Hz), 6,65 (1H, dd, J = 3,5, 1,8 Hz), 4,93-4,88 (1H, m), 4,64-4,58 (1H, m), 4,24-4,18 (1H, m), 3,68 (2H, s), 3,61 (1H, d, J = 12,8 Hz), 3,45-3,41 (1H, m), 3,04-2,95 (1H, m), 2,42-2,35 (1H, m), 2,34-2,25 (1H, m), 2,15-2,08 (1H, m), 2,34-2,25 (1H, m), 2,15-2,08 (1H, m), 1,85-1,76 (1H, m), 1,57-1,43 (1H, m), 1,01 (3H, d, J = 7,1 Hz).

13: Diastereómero del RMN 1H (DMSO-D6) δ :11,56 (1H, s a), 8,07 (1H, s),

Compuesto 34: 7,12-7,08 (1H, m), 6,50-6,46 (1H, m), 4,84 (1H, c, J

(Sustancia: = 6,5 Hz), 4,05-3,98 (1H, m), 3,92 (2H, s), 3,82-3,74

ópticamente activa): (1H, m), 3,51-3,44 (2H, m), 2,68-2,59 (1H, m),

2,20-2,13 (1H, m), 1,97-1,90 (1H, m), 1,89-1,79 (3H,

m), 1,26 (3H, d, J = 6,5 Hz).

14: Diastereómero del RMN 1H (DMSO-D6) δ :11 .71(1H, s a), 8,13-8,09

Compuesto 20: (1H, m), 7,21-7,16 (1H, m), 6,67-6,63 (1H, m),

(Racemato): 4,91-4,84 (1H, m), 4,69-4,61 (1H, m), 4,51-4,44 (1H,

m), 3,77 (1H, d, J = 18,6 Hz), 3,69 (1H, d, J =

18,6 Hz), 3,65 (1H, d, J = 15,3 Hz), 2,94-2,85 (1H,

m), 2,38-2,29 (1H, m), 2,22-2,16 (1H, m), 1,97-1,91

(1H, m), 1,79-1,71 (1H, m), 1,58-1,48 (2H, m), 1,34

(3H, d, J = 6,3 Hz).

15: Racemato del Compuesto 1 1 H RMN (CDCl3) δ: 9,35 (1H, s a), 8,30 (1H, s), 7,07 (1H, dd, J = 3,6, 2,3 Hz), 6,53 (1H, dd, J = 3,6, 1,9 Hz), 5,09-5,03 (1H, m), 4,65-4,59 (1H, m), 4,35-4,30 (1H, m), 3,81-3,76 (1H, m), 3,60-3,55 (1H, m), 3,21-3,13 (1H, m), 3,21 (2H, s), 2,74-2,65 (1H, m), 2,59-2,49 (1H, m), 2,23-2,17 (1H, m), 1,93-1,86 (1H, m), 1,72-1,60 (1H, m), 1,13 (3H, d, J = 7,1 Hz).

16: Diastereómero individual (Racemato) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,73 (1H, s a), 8,12 (1H, s), 7,22-7,19 (1H, m), 6,65-6,62 (1H, m), 4,99-4,92 (1H, m), 4,64-4,57 (1H, m), 4,09-4,01 (1H, m), 4,00-3,92 (1H, m), 3,69 (2H, s), 3,49-3,44 (1H, m), 2,60-2,52 (1H, m), 2,08-1,90 (4H, m), 1,75-1,65 (1H, m), 0,98 (3H, d, J = 6,5 Hz).

17: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ :11,61 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,12 (1H, dd, J = 3,3, 2,4 Hz), 6,57 (1H, dd, J = 3,5, 1,8 Hz), 4,29-4,20 (1H, m), 4,08-3,74 (5H, m), 3,70 (2H, s), 2,69-2,58 (1H, m), 2,43-2,36 (1H, m), 2,35-2,27 (1H, m), 2,23-2,14 (1H, m).

18: Diastereómero individual (Racemato) RMN 1H (CDCl3) δ: 10,33 (1H, s a), 8,31 (1H, s), 7,09 (1H, dd, J = 3,5, 2,0 Hz), 6,53-6,49 (1H, m), 5,08-4,99 (1H, m), 4,97-4,88 (1H, m), 4,29-4,21 (1H, m), 4,18-4,11 (1H, m), 3,88-3,81 (1H, m), 3,25 (2H, s), 2,88-2,79 (1H, m), 2,44-2,36 (1H, m), 2,10-2,02 (1H, m), 1,92-1,79 (2H, m), 1,78-1,71 (1H, m), 1,42 (3H, d, J = 7,1 Hz).

19: Diastereómero del Compuesto 6 (Racemato) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,57 (1H, s a), 8,07 (1H, s), 7,11 (1H, dd, J = 3,6, 2,4 Hz), 6,57 (1R, dd, J = 3,4, 1,8 Hz), 4,31-4,22 (1H, m), 4,18-4,13 (1H, m), 4,09-3,94 (1H, m), 3,91-3,73 (2H, m), 3,67 (2H, s), 3,59-3,53 (1H, m), 2,80-2,71 (1H, m), 2,45-2,36 (1H, m), 2,30-2,19 (1H, m), 1,15 (3H, d, J = 6,9 Hz).

20: Diastereómero del Compuesto 14 (Racemato) RMN 1H (CDC13) δ: 9,04 (1H, s a), 8,32 (1H, s), 7,09-7,06 (1H, m), 6,56-6,53 (1H, m), 5,10-5,05 (1H, m), 4,72-4,66 (1H, m), 4,53-4,47 (1H, m), 3,78-3,73 (1H, m), 3,30 (1H, d, J = 17,2 Hz), 3,25 (1H, d, J = 17,6 Hz), 3,12-3,04 (1H, m), 2,77-2,69 (1H, m), 2,23-2,17 (1H, m), 1,95-1,85 (3H, m), 1,59 (4H, d, J = 6,3 Hz).

21: Racemato del RMN 1H (DMSO-D6) δ :11,59 (1H, s a), 8,07 (1H, s), 7,11

Compuesto 6: (1H, dd, J = 3,2, 2,6 Hz), 6,5 (1H, dd, J = 3,4, 1,7 Hz),

4,18-4,12 (1H, m), 4,08-3,92 (3H, m), 3,84-3,72 (1H, m),

3,70 (1H, d, J = 18,8 Hz), 3,65 (1H, d, J = 18,8 Hz), 3,59-3,54

(1H, m), 2,68-2,58 (2H, m), 2,22-2,11 (1H, m), 1,11 (3H, d, J

= 7,2 Hz).

22: Enantiómero del 1 H RMN (DMSO-D6) δ: 11,69 (1H, s a), 8,09 (1H, s), 7,17

Compuesto 7: (1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,57 (1H, dd, J = 3,5, 1,9 Hz),

4,73-4,66 (1H, m), 4,55-4,48 (1H, m), 3,95 (2H, s), 3,85-3,78

(1H, m), 3,56-3,49 (1H, m), 3,45-3,37 (1H, m), 2,98-2,82

(2H, m), 1,89-1,69 (4H, m), 1,65-1,56 (2H, m), 1,55-1,48

(1H, m).

23: Racemato del Compuesto 2 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,70 (1H, s a), 8,14 (1H, s), 7,18 (1H, dd, J = 3,7, 2,6 Hz), 6,64 (1H, dd, J = 3,7, 1,9 Hz), 5,02-4,96 (1H, m), 4,65-4,59 (1H, m), 4,11-4,05 (1H, m), 3,70 (1H, d, J = 18,8 Hz), 3,65 (1H, d, J = 18,8 Hz), 3,59-3,54 (1H, m), 3,46-3,42 (1H, m), 2,97-2,88 (1H, m), 2,47-2,33 (2H, m), 2,00-1,93 (1H, m), 1,87-1,79 (1H, m), 1,63-1,50 (1H, m), 0,90 (3H, d, J = 7,2 Hz).

24: Diastereómero individual (Racemato) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,59 (1H, s a), 8,09 (1H, s), 7,12 (1H, dd, J = 3,2, 2,6 Hz), 6,52 (1H, dd, J = 3,5, 1,9 Hz), 4,45 (1H, c, J = 6,4 Hz), 4,08-3,99 (3H, m), 3,81 (1 H, d, J = 18,8 Hz), 3,81-3,71 (1H, m), 3,75 (1H, d, J = 18,8 Hz), 3,01-2,92 (1H, m), 2,31-2,24 (1H, m), 2,20-2,12 (1H, m), 2,09-2,01 (1H, m), 1,33 (3H, d, J = 6,3 Hz).

25: Enantiómero del RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,72 (1H, s a), 8,13 (1H, s), 7,20 (1H,

Compuesto 3: dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,64 (1H, dd, J = 3,6, 1,9 Hz), 4,96 (1H, d,

J = 12,6 Hz), 4,68-4,59 (1H, m), 4,11-4,04 (1H, m), 4,00-3,93

(1H, m), 3,71 (2H, s), 3,53 (1H, d, J = 12,6 Hz), 2,98-2,90 (1H,

m), 2,39-2,30 (1H, m), 2,01-1,93 (3H, m), 1,82-1,75 (1H, m),

1,59-1,46 (1H, m).

26: Racemato del Compuesto 4 RMN 1H (DMSO-D6) δ :11,67 (1H, s a), 8,11 (1H, s), 7,16 (1 H, dd, J = 3,3, 2,4 Hz), 6,58 (1H, dd, J = 3,5, 2,0 Hz), 4,65-4,57 (2H, m), 4,23-4,14 (2H, m), 4,12-4,01 (1H, m), 3,89-3,78 (1H, m), 3,85 (1H, d, J = 19,2 Hz), 3,79 (1H, d, J = 19,0 Hz), 2,66-2,58 (1H, m), 2,56-2,46 (1H, m).

27: Enantiómero del Compuesto 5 RMN 1H (DMSO-D6) δ :11,74 (1H, s a), 8,15 (1H, s), 7,22-7,19 (1H, m), 6,65-6,62 (1H, m), 5,13-5,07 (1H, m), 4,70-4,46 (3H, m), 3,83 (1H, d, J = 18,8 Hz), 3,77 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,61-3,54 (1H, m), 2,99-2,90 (1H, m), 2,39-2,29 (1H, m), 2,26-2,19 (1H, m), 1,99-1,90 (1H, m), 1,64-1,48 (1H, m).

28: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,70 (1H, s a), 8,15 (1H, s), 7,19 (1H, dd, J = 3,6, 2,5 Hz), 6,65 (1H, dd, J = 3,6, 1,9 Hz), 5,11-5,03 (1H, m), 4,60-4,52 (1H, m), 3,78 (1H, d, J = 7,9 Hz), 3,70 (1H, d, J = 18,7 Hz), 3,65 (1H, d, J = 18,7 Hz), 3,52 (1H, d, J = 7,9 Hz), 3,50-3,46 (1H, m), 3,07-2,99 (1H, m), 2,34-2,25 (1H, m), 2,23-2,18 (1H, m), 1,91-1,83 (1H, m), 1,57-1,44 (1H, m), 1,23 (3H, s), 0,99 (3H, s).

[Tabla 1-8] [Tabla 1-9] [Tabla 1-10] [Tabla 1-11] [Tabla 1-12]

29: Racemato RMN 1H (CDC13) δ: 9,43 (1H, s a), 8,28 (1H, s), 7,04 (1H, dd, J = 3,5, 2,1 Hz), 6,52 (1H, dd, J = 3,6, 1,5 Hz), 5,99-5,89 (1H, m), 5,33-5,27 (1H, m), 5,23-5,18 (1H, m), 4,75-4,68 (1H, m), 4,62-4,55 (1H, m), 4,14-4,08 (1H, m), 4,05-4,01 (2H, m), 3,81-3,76 (2H, m), 3,68-3,61 (1H, m), 3,56-3,48 (1H, m), 3,21-3,11 (2H, m), 2,66-2,54 (2H, m), 2,12-2,04 (1H, m), 1,95-1,85 (2H, m), 1,83-1,65 (3H, m), 1,58-1,51 (1H, m).

30: Enantiómero del RMN 1H (CDCl3) δ: 9,54 (1H, s a), 8,29 (1H, s),

Compuesto 36. La: 7,06 (1H, dd, J = 3,6, 1,7 Hz), 6,54-6,50 (1H, m),

configuración del: 4,71-4,64 (2H, m), 4,30-4,23 (1H, m), 4,06-4,00

carbono α de carbonilo: (1H, m), 3,74 (1H, s a), 3,57-3,51 (2H, m),

es S (derivada de: 3,29-3,21 (1H, m), 3,19-3,10 (1H, m), 2,11-2,04

reactivos).: (1H, m), 1,98-1,72 (5H, m), 1,62-1,56 (1H, m),

1,38 (3H, d, J = 6,5 Hz).

31: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11 (1H, s a), 8,15 (1H, s),

7,23 (1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,66 (1H, dd, J =

3,5, 1,9 Hz), 4,83-4,76 (1H, m), 4,73-4,61 (2H, m),

4,11 (1H, d, J = 19,0 Hz), 4,00 (1H, d, J =

19,2 Hz), 3,64-3,50 (2H, m), 3,28-3,18 (1H, m),

2,35-2,26 (2H, m), 2,11-2,02 (1H, m), 1,93-1,83

(1H, m), 1,79-1,71 (2H, m).

32: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,73 (1H, s), 8,13 (1H,

s), 7,19-7,16 (1H, m), 6,64-6,60 (1H, m),

4,52-3,96 (4H, m), 4,14 (1H, d, J = 19,0 Hz), 4,00

(1H, d, J = 19,2 Hz), 3,61-3,54 (2H, m), 2,46-2,42

(1H, m), 2,11-2,01 (1H, m), 1,99-1,91 (1H, m),

1,87-1,76 (1H, m).

33: Diastereómero del Compuesto 42 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,60 (1H, s a),

(Sustancia ópticamente activa): 8,10 (1H, s), 7,13-7,11 (1H, m),

6,45-6,43 (1H, m), 4,44-4,31 (2H, m),

4,00 (2H, s), 3,68-3,59 (1H, m),

3,52-3,39 (2H, m), 2,87-2,80 (1H, m),

1,99-1,90 (1H, m), 1,83-1,73 (4H, m),

1,36 (3H, d, J = 6,0 Hz).

34: Diastereómero del Compuesto 13 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,59 (1H, s a),

(Sustancia ópticamente activa): 8,08 (1H, s), 7,13-7,10 (1H, m),

6,57-6,52 (1H, m), 4,24-4,16 (1H, m),

4,08 (1H, d, J = 19,0 Hz), 4,00 (1H, d, J

= 19,0 Hz), 3,79-3,67 (2H, m), 3,59-3,53

(1H, m), 3,52-3,44 (1H, m), 1,91-1,65

(6H, m), 1,23 (3H, d, J = 6,7 Hz).

35: Diastereómero del Compuesto 36 RMN 1H (CDCl3) δ: 9,88 (1H, s a), 8,30

(Sustancia ópticamente activa). La: (1H, s), 7,09-7,05 (1H, m), 6,54-6,51

configuración del carbono α de: (1H, m), 4,79-4,72 (1H, m), 4,63 (1H, d,

carbonilo es S (derivada de: J = 12,3 Hz), 4,33 (1H, dt, J = 6,6,

reactivos). Polaridad más alta en: 6,6 Hz), 4,10 (1H, d, J = 12,5 Hz), 3,88

TLC (cloroformo/metanol = 10/1): (1H, s a), 3,72-3,65 (1H, m), 3,46-3,38

que el Compuesto 36.: (1H, m), 3,24-3,16 (1H, m), 3,14-3,06

(1H, m), 2,21-2,14 (1H, m), 2,03-1,52

(6H, m), 1,34 (3H, d, J = 6,5 Hz).

36: Diastereómero del Compuesto 35, RMN 1H (CDCl3) δ: 10 (1H, s a), 8,30

Enantiómero del Compuesto 30. La: (1H, s), 7,10-7,06 (1H, m), 6,54-6,50

configuración del carbono α de: (1H, m), 4,73-4,64 (2H, m), 4,27 (1H, dt,

carbonilo es R (derivada de: J = 6,5, 6,5 Hz), 4,07-4,01 (1H, m), 3,77

reactivos). Polaridad más baja en: (1H, s a), 3,60-3,51 (2H, m), 3,30-3,21

TLC (cloroformo/metanol = 10/1): (1H, m), 3,19-3,10 (1H, m), 2,12-2,04

que el Compuesto 35.: (1H, m), 1,98-1,57 (6H, m), 1,38 (3H, d,

J = 6,5 Hz).

37: Racemato del Compuesto 5 RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,73 (1H, s a), 8,15 (1H, s), 7,21 (1H, dd, J = 3,4, 2,6 Hz), 6,64 (1H, dd, J = 3,6, 2,0 Hz), 5,14-5,07 (1H, m), 4,70-4,46 (3H, m), 3,83 (1H, d, J = 18,9 Hz), 3,77 (1H, d, J = 18,9 Hz), 3,62-3,56 (1H, m), 3,00-2,91 (1H, m), 2,40-2,29 (1H, m), 2,27-2,20 (1H, m), 1,99-1,91 (1H, m), 1,63-1,49 (1H, m).

38: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) 5:11,56 (1H, s a), 8,06 (1H, s), 7,11-7,08 (1H, m), 6,55 (1H, dd, J = 3,5, 1,9 Hz), 4,18-4,07 (2H, m), 3,97-3,85 (2H, m), 3,71 (2H, s), 3,65 (2H, s), 2,43-2,22 (2H, m), 1,24 (3H, s), 1,20 (3H, s).

39: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ:10,34 (1H, s a), 8,29 (1H, s), 7,06 (1H, d, J = 3,5 Hz), 6,52 (1H, d, J = 3,7 Hz), 4,76-4,68 (1H, m), 4,59 (1H, d, J = 13,0 Hz), 4,11 (1H, d, J = 12,8 Hz), 3,75-3,70 (2H, m), 3,66-3,60 (1H, m), 3,54-3,47 (1H, m), 3,39 (3H, s), 3,22-3,12 (2H, m), 2,64-2,51 (2H, m), 2,12-2,04 (1H, m), 1,96-1,61 (5H, m), 1,59-1,52 (1H, m).

40: Diastereómero individual (Sustancia ópticamente activa) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,73 (1H, s a), 8,14 (1H, s), 7,17 (1H, dd, J = 3,5, 2,3 Hz), 6,61 (1H, dd, J = 3,5, 1,6 Hz), 4,47-4,37 (1H, m), 4,30-4,24 (1H, m), 4,22-4,05 (2H, m), 4,12 (1H, d, J = 19,2 Hz), 4,04 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,65-3,60 (1H, m), 3,54-3,48 (1H, m), 2,70-2,64 (1H, m), 2,08-1,97 (1H, m), 1,71-1,63 (1H, m), 1,08 (3H, d, J = 7,0 Hz)..

41: Racemato 1H RMN(DMSO-D6) δ :11,57 (1H, s a), 8,07 (1H, s),

7,09 (1H, dd, J = 3,5, 2,4 Hz), 6,56 (1H, dd, J = 3,5,

2,0 Hz), 4,01-3,81 (4H, m), 3,96 (1H, d, J =

18,7 Hz), 3,90 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,48-3,42 (2H,

m), 2,46-2,37 (1H, m), 2,16-2,06 (1H, m), 1,77-1,69

(2H, m), 1,03 (3H, s), 0,98 (3H, s).

42: Diastereómero del RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,57 (1H, s a), 8,08 (1H,

Compuesto 33: s), 7,11-7,09 (1H, m), 6,50 (1H, dd, J = 3,5, 1,6 Hz),

(Sustancia: 4,73-4,65 (1H, m), 4,29-4,23 (1H, m), 3,94 (2H, s),

ópticamente activa): 3,72-3,66 (1H, m), 3,51-3,44 (1H, m), 3,43-3,36

(1H, m), 3,23-3,15 (1H, m), 2,28-2,21 (1H, m),

2,13-2,05 (1H, m), 1,94-1,86 (2H, m), 1,60-1,54

(1H, m), 1,31 (3H, d, J = 6,5 Hz).

43: Mezcla RMN 1H (CDCl3) δ: 10,97-10,54 (1H, m), 8,30 (1H,

diastereomérica. La: s), 7,11-7,08 (1H, m), 6,51 (1H, d, J = 3,2 Hz),

configuración de la: 4,80-4,59 (2H, m), 4,36-4,24 (1H, m), 4,12-4,01

posición α del: (1H, m), 3,89 (1H, s a), 3,71-3,65 (0,5H, m),

carbonilo de la amida: 3,58-3,51 (1H, m), 3,45-3,37 (0,5H, m), 3,29-3,05

es S.: (2H, m), 2,21-2,14 (0,5H, m), 2,11-2,04 (0,5H, m),

2,02-1,70 (5H, m), 1,66-1,53 (1H, m), 1,39-1,32

(3H, m).

44: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ: 10,67-10,25 (1H, m), 8,30 (1H,

s), 7,11-7,07 (1H, m), 6,52 (1H, d, J = 3,2 Hz),

4,78-4,71 (1H, m), 4,70-4,64 (1H, m), 4,09 (1H, d, J

= 15,3 Hz), 4,04- 3,98 (1H, m), 4,03 (1H, d, J =

15,3 Hz), 3,67 (1H, s a), 3,50-3,42 (1H, m),

3,41-3,32 (1H, m), 3,26-3,17 (1H, m), 3,17-3,08

(1H, m), 2,18-2,10 (1H, m), 2,04- 1,58 (6H, m).

45: Mezcla diastereomérica. La RMN 1H (CDCl3) δ: 10,62 (1H, s a), 8,30

configuración de la posición α: (1H, s), 7,08 (1H, d, J = 3,5 Hz), 6,54-6,50

del carbonilo de la amida es S: (1H, m), 4,75-4,57 (2H, m), 4,20-4,12 (1H,

(derivada de ácido (S)-(-)-2: m), 4,05-3,99 (1H, m), 3,85-3,78 (0,5H, m),

metoxipropiónico).: 3,67-3,62 (1H, m), 3,54-3,46 (0,5H, m),

3,37-3,35 (3H, m), 3,27-3,12 (2H, m),

2,13-2,04 (1H, m), 1,99-1,49 (6H, m),

1,41-1,36 (3H, m).

46: Mezcla diastereomérica. La RMN 1H (CDCl3) δ: 10,98 (1H, s a), 8,30

configuración de la posición α: (1H, s), 7,09 (1H, d, J = 3,5 Hz), 6,53-6,50

del carbonilo de la amida es R: (1H, m), 4,74-4,58 (2H, m), 4,20-4,12 (1H,

(derivada de ácido (R)-(+)-2-: m), 4,05-3,99 (1H, m), 3,85-3,78 (0,5H, m),

metoxipropiónico).: 3,68-3,62 (1H, m), 3,53-3,46 (0,5H, m),

3,37-3,35 (3H, m), 3,27-3,14 (2H, m),

2,13-2,04 (1H, m), 1,99-1,48 (6H, m),

1,40-1,36 (3H, m).

47: Mezcla diastereomérica. La RMN 1H (DMSO-D6) δ :11,67 (1H, s a),

configuración de la posición α: 8,11 (0,5H, s), 8,10 (0,5H, s), 7,18-7,16 (1H,

del carbonilo de la amida es S: m), 6,58 (0,5H, dd, J = 3,5, 1,8 Hz), 6,51

(derivada de cloruro de: (0,5H, dd, J = 3,7, 1,8 Hz), 5,10-5,03 (1H,

(S)-(-)-2-acetoxipropionilo).: m), 4,70-4,60 (1H, m), 4,52-4,45 (1H, m),

3,88-3,79 (1H, m), 3,77-3,70 (0,5H, m),

3,61-3,51 (1H, m), 3,49-3,41 (0,5H, m),

3,01-2,82 (2H, m), 2,05 (1,5H, s), 2,04

(1,5H, s), 1,91-1,72 (4H, m), 1,66-1,56 (2H,

m), 1,50-1,43 (1H, m), 1,35 (1,5H, d, J =

6,8 Hz), 1,31 (1,5H, d, J = 6,8 Hz).

48: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ:11,67 (1H, s a), 8,08

(1H, s), 7,15 (1H, dd, J = 3,5, 2,3 Hz), 6,56

(1H, dd, J = 3,6, 1,7 Hz), 4,72-4,66 (1H, m),

4,48 (1H, d, J = 12,5 Hz), 3,98 (1H, d, J =

14,6 Hz), 3,94 (1H, d, J = 14. Hz), 3,89 (1H,

d, J = 13,0 Hz), 3,53-3,46 (1H, m),

3,39-3,34 (1H, m), 3,30 (3H, s), 2,99-2,89

(2H, m), 1,85-1,66 (4H, m), 1,62-1,52 (2H,

m), 1,51-1,45 (1H, m).

[Tabla 1-13] [Tabla 1-14] [Tabla 1-15] [Tabla 1-16]

49: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,13 (1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,54 (1H, dd, J = 3,6, 1,7 Hz), 5,97 (1H, t, J = 5,6 Hz), 4,72-4,64 (1H, m), 4,40 (1H, d, J = 12,5 Hz), 3,87 (1H, d, J = 12,5 Hz), 3,39-3,29 (1H, m), 3,28-3,21 (1H, m), 3,07-3,00 (2H, m), 2,96-2,84 (2H, m), 1,83-1,65 (4H, m), 1,62-1,47 (2H, m), 1,44-1,37 (1H, m), 1,02 (3H, t, J = 7,1 Hz).

50: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ: 10,68 (1H, s a), 8,28 (1H, s), 7,07 (1H, d, J = 3,2 Hz), 6,51 (1H, d, J = 3,7 Hz), 4,75-4,68 (1H, m), 4,67-4,61 (1H, m), 4,64 (1H, d, J = 14,6 Hz), 4,60 (1H, d, J = 14,8 Hz), 4,06-4,01 (1H, m), 3,58-3,51 (1H, m), 3,49-3,42 (1H, m), 3,21-3,07 (2H, m), 2,21 (3H, s), 2,13-2,05 (1H, m), 2,03-1,81 (3H, m), 1,79-1,55 (3H, m).

51: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ: 9,34 (1H, s a), 8,28 (1H, s), 7,00-6,97 (1H, m), 6,58-6,54 (1H, m), 4,19-3,95 (2H, m), 3,84-3,45 (6H, m), 3,24-3,08 (2H, m), 2,28-2,14 (2H, m), 2,07-1,90 (5H, m), 1,85-1,61 (2H, m).

52: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,68 (1H, s a), 8,10 (1H, s), 7,16 (1H, dd, J = 3,5,2,6 Hz), 6,82 (1H, t, J = 5,6 Hz), 6,59 (1H, dd, J = 3,7, 1,9 Hz), 4,75-4,67 (1H, m), 4,51-4,45 (1H, m), 4,03 (2H, d, J = 5,8 Hz), 3,86-3,81 (1H, m), 3,44-3,37 (1H, m), 3,32-3,25 (1H, m), 2,97-2,85 (2H, m), 1,88-1,69 (4H, m), 1,66-1,52 (2H, m), 1,52-1,45 (1H, m).

53: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ: 10,30-10,10 (1H, m), 8,33 (1H, s), 7,06 (1H, d, J =2,8 Hz), 6,60 (1H, d, J = 3,0 Hz), 4,10-4,03 (1H, 8,10 (1H, m), 3,87-3,62 (3H, m), 2,53 (2H, t, J = 6,7 Hz), 2,22-2,08 (1H, m), 1,99-1,85 (6H, m)

54: Diastereómero individual (Sustancia ópticamente activa) RMN 1H (DMSO-D6) δ: 12,75 (1H, s a), 8,32 (1H, s), 7,49-7,45 (1H, m), 6,98-6,93 (1H, m), 4,26-3,78 (5H, m), 3,97 (2H, s), 3,58-3,23 (2H, m), 2,83-2,73 (1H, m), 2,28-2,20 (1H, m), 2,17-1,96 (2H, m), 1,70-1,49 (1H, m), 1,02 (3H, d, J = 6,7 Hz).

55: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,70 (1H, s a), 8,14 (1H, s), 7,18 (1H, dd, J = 3,5, 2,3 Hz), 6,63 (1H, dd, J = 3,5, 1,9 Hz), 4,22-4,01 (5H, m), 3,96-3,82 (1H, m), 3,72-3,60 (2H, m), 2,86-2,77 (1H, m), 2,72-2,51 (2H, m), 2,41-2,30 (1H, m).

56: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,67 (1H, s a), 8,11 (1H, s), 7,17 (1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,61 (1H, dd, J = 3,7, 1,9 Hz), 4,90-4,84 (1H, m), 4,63-4,56 (1H, m), 4,06 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,99 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,94-3,88 (1H, m), 3,67-3,60 (1H, m), 3,56-3,49 (1H, m), 3,16-3,08 (1H, m), 2,81-2,71 (1H, m), 2,48-2,37 (2H, m), 2,00-1,90 (2H, m), 1,85-1,72 (1H, m).

57: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,59 (1H, s a), 8,08 (1H, s),

7,13-7,10 (1H, m), 6,55 (1H, dd, J = 3,2, 1,6 Hz),

4,33-4,28 (1H, m), 4,08 (2H, s), 3,97-3,54 (3H, m),

3,48-3,29 (2H, m), 2,61-2,53 (1H, m), 2,30-2,06 (1H, m),

1,82-1,47 (6H, m).

58: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,67 (1H, s a), 8,10 (1H, s), 7,16

(1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,56 (1H, dd, J = 3,6, 1,7 Hz),

6,46 (1H, t, J = 5,6 Hz), 4,74-4,67 (1H, m), 4,45 (1H, d, J =

12,5 Hz), 3,87 (1H, d, J = 12,8 Hz), 3,43-3,36 (1H, m),

3,30-3,24 (3H, m), 2,96-2,87 (2H, m), 2,66 (2H, t, J =

6,6 Hz), 1,87-1,68 (4H, m), 1,65-1,51 (2H, m), 1,49-1,42

(1H, m).

59: Racemato del RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,71 (1H, s a), 8,13 (1H, s), 7,20

Compuesto 3: (1H, dd, J = 3,5, 2,4 Hz), 6,64 (1H, dd, J = 3,6, 1,9 Hz),

4,96 (1H, d, J = 12,6 Hz), 4,67-4,60 (1H, m), 4,11-4,04

(1H, m), 4,00-3,93 (1H, m), 3,70 (2H, s), 3,53 (1H, d, J =

12,6 Hz), 2,98-2,90 (1H, m), 2,39-2,31 (1H, m), 2,01-1,93

(3H, m), 1,83-1,75 (1H, m), 1,58-1,46 (1H, m).

60: Diastereómero RMN 1H (DMSO-D6) δ:11,67 (1H, s a), 8,12 (1H, s), 7,16

individual: (1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,61 (1H, dd, J = 3,7, 1,9 Hz),

(Sustancia: 4,60 (1H, d, J = 13,2 Hz), 4,38-4,30 (1H, m), 3,98 (1H, d, J

ópticamente: = 18,8 Hz), 3,92 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,75 (1H, d, J =

activa): 13,2 Hz), 3,54-3,47 (1H, m), 3,46-3,35 (1H, m), 3,28-3,20

(1H, m), 2,54-2,46 (1H, m), 2,18-2,07 (2H, m), 2,01-1,92

(1H, m), 1,87-1,76 (1H, m), 1,66-1,58 (1H, m), 1,56-1,47

(1H, m), 0,82 (3H, d, J = 7,0 Hz).

61: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ: 10,99-10,59 (1H, m), 8,31 (1H, s), 7,08-7,01 (1H, m), 6,55 (1H, d, J = 3,0 Hz), 4,63-4,03 (2H, m), 3,84-3,44 (4H, m), 3,70 (3H, s), 3,31-3,12 (0,7H, m), 3,00-2,81 (0,3H, m), 2,16-1,71 (5H, m).

62: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,56 (1H, s a), 8,07 (1H, s), 7,09 (1H, dd, J = 3,2, 2. Hz), 6,92 (1H, t, J = 5,7 Hz), 6,55 (1H, dd, J = 3,2, 1,9 Hz), 4,37-4,12 (1H, m), 4,05-3,93 (1H, m), 4,02 (2H, d, J = 5,6 Hz), 3,79-3,49 (2H, m), 3,40-3,27 (2H, m), 3,07-2,94 (1H, m), 1,98-1,83 (4H, m), 1,76-1,67 (1H, m).

63: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ: 9,13 (1H, s a), 8,29 (1H, s), 7,00-6,97 (1H, m), 6,58-6,54 (1H, m), 4,18-4,09 (1H, m), 4,06-3,93 (2H, m), 3,88-3,72 (1H, m), 3,68-3,61 (1H, m), 3,59-3,53 (2H, m), 3,22-3,09 (1H, m), 2,98 (3H, s), 2,07-1,92 (5H, m), 1,87-1,69(1H, m).

64: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ: 9,33-9,10 (1H, m), 8,32 (1H, s), 7,79 (1H, s), 7,76-7,70 (2H, m), 7,58-7,52 (1H, m), 7,03-7,00 (1H, m), 6,61-6,57 (1H, m), 4,75-4,55 (1H, m), 4,27-4,18 (1H, m), 3,97-3,81 (1H, m), 3,79-3,72 (1H, m), 3,57-3,40 (3H, m), 2,23-2,15 (1H, m), 2,12-2,03 (1H, m), 1,98-1,85 (3H, m).

[Tabla 1-17] [Tabla 1-18] [Tabla 1-19] [Tabla 1-20] [Tabla 1-21]

65: Racemato RMN 1H (CDC13) δ: 9,44 (1H, s a), 8,32 (1H, s), 7,73 (2H, d, J = 8,3 Hz), 7,58 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,02 (1H, dd, J = 3,6, 2,2 Hz), 6,59 (1H, dd, J = 3,2, 1,9 Hz), 4,75-4,52 (1H, m), 4,29-4,17 (1H, m), 3,97-3,82 (1H, m), 3,78-3,73 (1H, m), 3,53-3,41 (3H, m), 2,22-2,15 (1H, m), 2,11-2,03 (1H, m), 1,97-1,87 (3H, m).

66: Diastereómero RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,60 (1H, s a), 8,08 (1H, s),

individual(Sustancia: 7,11 (1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,58 (1H, dd, J = 3,5,

ópticamente activa): 1,9 Hz), 3,99 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,98-3,78 (4H, m),

3,92 (1H, d, J = 19,2 Hz), 3,54-3,47 (1H, m),

3,44-3,38 (1H, m), 3,05-2,95 (1H, m), 2,21-2,11 (1H,

m), 1,98-1,87 (2H, m), 1,63-1,52 (1H, m), 0,93 (3H, d,

J = 6,7 Hz).

67: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,55 (1H, s a), 8,05 (1H, s),

7,08 (1H, dd, J = 3,2, 2,6 Hz), 6,58-6,51 (2H, m),

4,35-4,16 (1H, m), 4,00-3,92 (1H, m), 3,72-3,50 (2H,

m), 3,39-3,27 (2H, m), 3,26-3,21 (2H, m), 3,08-2,95

(1H, m), 2,62 (2H, t, J = 6,6 Hz), 1,94-1,82 (4H, m),

1,71-1,63 (1H, m).

68: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,55 (1H, s), 8,06 (1H, s),

7,08 (1H, dd, J = 3,4, 2,4 Hz), 6,55-6,52 (1H, m), 6,10

(1H, t, J = 5,6 Hz), 4,37-4,15 (1H, m), 4,01-3,90 (1H,

m), 3,69-3,55 (1H, m), 3,54-3,49 (1H, m), 3,37-3,28

(2H, m), 3,09-3,01 (1H, m), 2,99-2,93 (2H, m),

1,93-1,80 (4H, m), 1,68-1,62 (1H, m), 1,46-1,37 (2H,

m), 0,83 (3H, t, J = 7,4 Hz).

69: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,58 (1H, s a), 8,06 (1H, s), 7,10-7,07 (1H, m), 6,55-6,49 (1H, m), 4,39-4,10 (1H, m), 4,04-3,92 (1H, m), 3,83-3,62 (1H, m), 3,62-3,49 (3H, m), 3,56 (3H, s), 3,07-2,91 (1H, m), 2,60-2,53 (2H, m), 2,51-2,45 (2H, m), 1,99-1,93 (2H, m), 1,91-1,82 (2H, m), 1,75-1,65 (1H, m).

70: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ: 10 (1H, s a), 8,29 (1H, s), 7,02 (1H, d, J = 3,7 Hz), 6,52 (1H, d, J = 3,5 Hz), 4,64 (2H, s), 4,55-4,39 (1H, m), 4,18-4,07 (1H, m), 3,85-3,74 (1H, m), 3,72-3,64 (1H, m), 3,59-3,48 (2H, m), 3,37-3,26 (1H, m), 2,19 (3H, s), 2,14-1,91 (4H, m), 1,83-1,72 (1H, m).

71: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,58 (1H, s a), 8,27 (2H, d, J = 9,0 Hz), 8,07 (1H, s), 7,46 (2H, d, J = 9,3 Hz), 7,12-7,09 (1H, m), 6,60-6. 5 (1H, m), 4,29-4,15 (1H, m), 4,05-3,95 (1H, m), 3,78-3,65 (4H, m), 2,98-2,82 (1H, m), 2,15-2,03 (2H, m), 1,97-1,86 (3H, m).

72: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,57 (1H, s a), 8,07 (1H, s), 7,10-7,08 (1H, m), 6,56-6,52 (1H, m), 4,46 (1H, t, J = 5,6 Hz), 4,39-4,21 (1H, m) 4,06-3,96 (3H, m), 3,74-3,55 (2H, m), 3,45-3,39 (2H, m), 3,09-2,97 (1H, m), 1,97-1,92 (2H, m), 1,90-1,84 (2H, m), 1,78-1,71 (1H, m).

73: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11 (1H, s a), 8,06 (1H, s), 7,10 (1H, dd, J = 3,4, 2,4 Hz), 6,57 (1H, dd, J = 3,5, 2,1 Hz), 4,30-4,09 (1H, m), 4,04-3,94 (1H, m), 3,92-3,82 (2H, m), 3,77-3,52 (2H, m), 2,97-2,84 (1H, m), 2,07-1,92 (4H, m), 1,85-1,76 (1H, m), 1,63-1,49 (4H, m).

74: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ :11 (1H, s), 8,09 (1H, s), 7,15 (1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,64 (1H, dd, J = 3,6, 2,0 Hz), 4,53 (1H, d, J = 13,2 Hz), 4,38-4,29 (1H, m), 4,18 (1H, d, J = 13,0 Hz), 4,02 (2H, s), 3,35-3,31 (3H, m), 2,63-2,55 (1H, m), 1,88-1,77 (2H, m), 1,74-1,50 (6H, m), 1,47-1,34 (3H, m).

75: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,59 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,13 (1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,57 (1H, dd, J = 3,6, 1,7 Hz), 3,90-3,83 (1H, m), 3,70-3,62 (1H, m), 3,69 (1H, d, J = 12,8 Hz), 3,53 (1H, d, J = 12,8 Hz), 2,67-2,57 (1H, m), 2,54-2,45 (1H, m), 1,76-1,63 (2H, m), 1,60-1,36 (10H, m).

76: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,67 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,18-7,14 (1H, m), 6,69-6,63 (1H, m), 4,53-4,45 (1H, m), 4,33-4,24 (1H, m), 4,14-4,07 (1H, m), 3,45-3,25 (3H, m), 2,52-2,39 (1H, m), 1,85-1,47 (11H, m), 1,40 (9H, s).

77: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,60 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,13-7,10 (1H, m), 6,57-6,51 (1H, m), 4,32-4,26 (1H, m), 4,07 (2H, s), 4,00-3,50 (3H, m), 3,48-3,32 (2H, m), 2,60-2,52 (1H, m), 2,30-2,08 (1H, m), 1,82-1,44 (6H, m).

78: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,59 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,13-7,11 (1H, m), 6,55-6,52 (1H, m), 4,39-4,33 (1H, m), 3,92-3,74 (2H, m), 3,64-3,51 (2H, m), 3,42-3,36 (1H, m), 2,65-2,56 (1H, m), 2,24-1,97 (1H, m), 2,06 (3H, s), 1,87-1,73 (1H, m), 1,71-1,56 (4H, m), 1,52-1,40 (1H, m).

79: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,53 (1H, s a), 8,05 (1H, s), 7,08 (1H, d, J = 3,5 Hz), 6,55 (1H, t, J = 4,4 Hz), 3,91-3,67 (3H, m), 3,61-3,40 (1H, m), 2,76-2,62 (2H, m), 2,04-1,91 (2H, m), 1,88-1,79 (1H, m), 1,64-1,46 (4H, m), 1,45-1,37 (2H, m).

80: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,58 (1H, s a), 8,07 (1H, s), 7,12-7,10 (1H, m), 6,55 (1H, dd, J = 3,2, 1,9 Hz), 4,31-4,21 (1H, m), 4,00-3,47 (4H, m), 3,33-3,22 (1H, m), 2,59-2,44 (1H, m), 2,24-2,04 (1H, m), 1,82-1,71 (1H, m), 1,69-1,56 (3H, m), 1,53-1,45 (1H, m), 1,45-1,36 (1H, m), 1,42 (9H, s).

81: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 12,02 (1H, s a), 8,17 (1H, s), 7,27-7,23 (1H, m), 6,75-6,69 (1H, m), 4,57-4,35 (3H, m), 3,46-3,33 (3H, m), 2,78-2,68 (1H, m), 2,02 (3H, s), 1,87-1,78 (1H, m), 1,75-1,40 (8H, m).

82: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,68 (1H, s a), 8,10 (1H, s), 7,17 (1H, dd, J = 3,5, 2,6 Hz), 6,59 (1H, dd, J = 3,7, 1,9 Hz), 4,64-4,59 (1H, m), 4,51-4,44 (1H, m), 4,26-4,21 (1H, m), 4,07 (1H, d, J = 18,8 Hz), 4,01 (1H, d, J = 18,6 Hz), 3,31-3,13 (2H, m), 2,77-2,67 (1H, m), 1,86-1,37 (10H, m).

83: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ:11,65 (1H, s a), 8,09 (1H, s), 7,15 (1H, dd, J = 3,4, 2,5 Hz), 6,57 (1H, dd, J = 3,6, 1,9 Hz), 4,73-4,65 (1H, m), 4,47 (1H, d, J = 12,1 Hz), 3,90 (1H, d, J = 12,4 Hz), 3,62-3,54 (1H, m), 3,48-3,41 (1H, m), 3,00-2,88 (2H, m), 1,97 (3H, s), 1,88-1,67 (4H, m), 1,65-1,53 (2H, m), 1,50-1,43 (1H, m).

84: Racemato del Compuesto 7 RMN 1H (DMSO-D6) δ:11,64 (1H, s a), 8,10 (1H, s), 7,16 (1H, dd, J = 3,4, 2,6 Hz), 6,57 (1H, dd, J = 3,6, 1,6 Hz), 4,73-4,66 (1H, m), 4,52 (1H, d, J = 12,5 Hz), 3,93 (2H, s), 3,83 (1H, d, J = 12,9 Hz), 3,58-3,51 (1H, m), 3,46-3,39 (1H, m), 2,99-2,84 (2H, m), 1,90-1,70 (4H, m), 1,67-1,57 (2H, m), 1,56-1,49 (1H, m).

[Tabla 1-22] [Tabla 1-23] [Tabla 2]

85: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ: 9,05 (1H, s a), 8,27 (1H, s), 6,96 (1H, d, J = 3,7 Hz), 6,55 (1H, d, J = 3,5 Hz), 4,19-4,10 (1H, m), 3,90-3,75 (1H, m), 3,70-3,56 (3H, m), 3,39-3,28 (1H, m), 2,70-2,60 (1H, m), 2,12-2,03 (1H, m), 1,99-1,91 (4H, m), 1,79-1,69 (1H, m), 1,16-1,08 (6H, m).

86: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,56 (1H, s a), 8,07 (1H, s), 7,10-7,07 (1H, m), 6,56-6,51 (1H, m), 4,36-4,22 (1H, m), 4,04-3,94 (1H, m), 3,72-3,59 (1H, m), 3,56-3,49 (3H, m), 3,11-2,97 (1H, m), 2,29 (2H, c, J = 7,5 Hz), 1,97-1,93 (2H, m), 1,90-1,82 (2H, m), 1,74-1,66 (1H, m), 0,97 (3H, t, J = 7,4 Hz).

87: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,58 (1H, s a), 8,07 (1H, s), 7,11-7,08 (1H, m), 6,57-6,52 (1H, m), 4,38-4,24 (1H, m), 4,03-3,94 (1H, m), 3,75-3,60 (1H, m), 3,59-3,48 (3H, m), 3,13-2,99 (1H, m), 1,99 (3H, s), 1,98-1,93 (2H, m), 1,90-1,82 (2H, m), 1,74-1,66 (1H, m).

88: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,59 (1H, s a), 8,08 (1H, s), 7,10 (1H, dd, J = 3,4, 2,4 Hz), 6,56-6,52 (1H, m), 4,36-4,17 (1H, m), 4,10-3,94 (1H, m), 3,99 (2H, s), 3,76-3,19 (4H, m), 3,05-2,92 (1H, m), 2,01-1,94 (2H, m), 1,93-1,83 (2H, m), 1,81-1,72 (1H, m).

89: Racemato RMN 1H (CDCl3) δ: 11,52 (1H, s), 8,05 (1H, s), 7,08 (1H, dd, J = 3,2, 1,9 Hz), 6,55 (1H, d, J = 2,3 Hz), 3,87-3,71 (2H, m), 3,67-3,53 (2H, m), 2,91-2,81 (2H, m), 2,31 (1H, s a), 1,99-1,84 (2H, m), 1,81-1,63 (4H, m).

90: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 11,56 (1H, s a), 8,07 (1H, s), 7,35-7,27 (4H, m), 7,22-7,18 (1H, m), 7,11-7,09 (1H, m), 6,62-6,58 (1H, m), 4,04-3,91 (1H, m), 3,80-3,56 (5H, m), 2,68-2,55 (2H, m), 2,29-2,19 (1H, m), 1,91-1,71 (5H, m).

N.º: Fórmula Estructural Comentarios Datos de RMN

91: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 13,60 (1H, s a), 8,24 (1H, s), 8,17 (1H, s), 4,02-3,98 (1H, m), 3,93 (2H, s), 3,81-3,75 (1H, m), 3,51-3,38 (2H, m), 3,27-3,05 (2H, m), 2,94-2,84 (1H, m), 2,37-2,28 (1H, m), 1,85-1,69 (5H, m), 1,57-1,50 (1H, m).

92: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 13,32 (1H, s a), 8,18 (1H, s), 8,01 (1H, s), 4,66-4,62 (1H, m), 4,09-4,00 (2H, m), 3,99 (2H, s), 3,60-3,56 (1H, m), 3,53-3,42 (2H, m), 3,06-2,97 (1H, m), 2,03-1,81 (4H, m), 1,77-1,71 (1H, m).

93: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 13,32 (1H, s a), 8,13 (1H, d, J = 1,4 Hz), 8,02 (1H, s), 4,39 (1H, d, J = 10,9 Hz), 4,28 (1H, d, J = 10,7 Hz), 4,09 (2H, s), 4,08-4,01 (1H, m), 3,88-3,82 (1H, m), 3,50-3,43 (1H, m), 3,38-3,27 (1H, m), 2,61-2,54 (1H, m), 2,16-2,06 (1H, m), 1,84-1,45 (6H, m).

[Tabla 3]

N.º: Fórmula Estructural Comentarios Datos de RMN

94: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 13,02 (1H, s a), 8,17 (1H, s), 8,11 (1H, s), 5,72-4,95 (1H, m), 4,05 (1H, d, J = 19,2 Hz), 3,94 (1H, d, J = 19,0 Hz), 3,89-3,78 (1H, m), 3,60-3,52 (1H, m), 3,46-3,39 (1H, m), 2,97-2,73 (2H, m), 1,94-1,84 (2H, m), 1,82-1,49 (6H, m).

95: Racemato RMN 1H (DMSO-D6) δ: 12,92 (1H, s a), 8,17 (1H, s), 8,07 (1H, s), 4,95-4,78 (1H, m), 4,34-4,09 (1H, m), 4,06 (2H, s), 3,99-3,67 (1H, m), 3,60-3,50 (1H, m), 3,43-3,28 (2H, m), 2,58-2,41 (1H, m), 2,30-2,11 (1H, m), 1,81-1,48 (6H, m).

La siguiente Tabla 4 muestra estructuras químicas de compuestos de los que se han especificado las configuraciones absolutas entre los compuestos ópticamente activos anteriores.

[Tabla 4]

N.º: Fórmula Estructural N.º Fórmula Estructural

3: 9

4: 25

[Ensayo 1]

5 Los efectos inhibidores de la actividad de JAK3 de los compuestos de ensayo se evaluaron mediante las siguientes reacciones quinasa.

En las reacciones quinasa, se utilizaron proteínas de fusión (dominio quinasa de hJAK3 (aa781-extremo) fusionado a una etiqueta de 6His) que se coexpresaron en células Sf21 y se purificaron mediante agarosa Ni2+/NTA. Las

10 reacciones quinasa se iniciaron por la adición de las siguientes soluciones de (a) a (c), a placas blancas de media área de 96 pocillos (placas, Coming Incorporated 3642).

(a) Sustrato de TK-biotina (cisbio) 5 µmol/l diluido mediante tampón quinasa (ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinaetanosulfónico (pH 7,0) 50 mmol/l), azida de sodio al 0,02 %, vanadato de sodio 0,1

15 mmol/l, cloruro de magnesio 5 mmol/l, ditiotreitol 1 mmol/l, seroalbúmina bovina al 0,01 %), ATP 25 µmol/l, solución de tampón Enzimático de Complemento (cisbio) 250 nmol/l: 10 µl/pocillo

(b): Solución de artículo de ensayo preparada utilizando tampón quinasa que contenía dimetilsulfóxido al 5 %: 10 µl/pocillo

(c): Enzima hJAK3 33 ng/ml diluida mediante tampón quinasa: 30 µl/pocillo.

20 Se dispuso como un pocillo para el blanco un pocillo en el cual no se añadió ATP.

Las placas se dejaron reposar a temperatura ambiente durante 10 minutos a partir de las reacciones iniciales.

25 Se añadieron a las placas 50 µl/pocillo de un tampón para la detección que contenía anticuerpo para TK-Criptato (5 ensayos/50 µl) y reactivo de adición de estreptavidina-XL665 (62,5 nmol/l (ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinaetanosulfónico 50 mmol/l (pH 7,0), EDTA 20 mM, fluoruro de potasio 800 mmol/l, seroalbúmina bovina al 0,1 %).

30 Una hora después de la adición del tampón para la detección, se midieron las cuentas de fluorescencia de cada pocillo mediante un lector de microplacas de fluorescencia. En concreto, se midieron las cuentas de fluorescencia en 620 nm excitada en 337 nm y las cuentas de fluorescencia en 665 nm excitada por fluorescencia en 620 nm.

La proporción de cada pocillo se calculó a partir de las cuentas de fluorescencia medidas (cuentas de fluorescencia en 35 665 nm/cuentas de fluorescencia en 620 nm x 10000).

Los datos se obtuvieron restando la proporción promedio de un pocillo para el blanco de la proporción de cada pocillo. Los valores de CI50 de los artículos de ensayo se calcularon a partir del % de los valores de control de 2 dosis antes, así como después del 50 % en el 100 % como % de un valor de control de disolvente. También se calculó la inhibición % de ya sea 0,1 µmol/l o 1 µmol/l (100- % de los valores de control).

[Ensayo 2]

5 Los efectos inhibidores de la actividad de JAK2 de los compuestos de ensayo se evaluaron mediante las siguientes reacciones quinasa.

En las reacciones quinasa, se utilizaron proteínas fusionadas (dominio quinasa de hJAK3 (aa808-extremo) fusionado a

10 una etiqueta de 6His) que se coexpresaron en células Sf21 y se purificaron mediante agarosa Ni2+/NTA. Las reacciones quinasa se iniciaron por la adición de las siguientes soluciones de (a) a (c), a placas blancas de media área de 96 pocillos (placas, Coming Incorporated 3642).

(a) Sustrato de TK-biotina (cisbio) 5 µmol/l diluido mediante tampón quinasa (ácido

15 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinaetanosulfónico (pH 7,0) 50 mmol/l), azida de sodio al 0,02 %, vanadato de sodio 0,1 mmol/l, cloruro de magnesio 5 mmol/l, ditiotreitol 1 mmol/l, seroalbúmina bovina al 0,01 %), ATP 100 µmol/l, solución de tampón Enzimático de Complemento (cisbio) 250 nmol/l: 10 µl/pocillo

(b) Solución de artículo de ensayo preparada utilizando tampón quinasa que contiene dimetilsulfóxido al 5%:

10 µl/pocillo 20 (c) Enzima hJAK2 7 ng/ml diluida mediante tampón quinasa: 30 µl/pocillo.

Se dispuso un pocillo en el cual no se añadió ATP como un pocillo para el blanco.

25 Se añadieron a las placas 50 µl/pocillo de un tampón para la detección que contenía anticuerpo para TK-Criptato (5 ensayos/50 µl) y reactivo de adición de estreptavidina-XL665 (62,5 nmol/l) (ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinaetanosulfónico (pH 7,0) 50 mmol/l, EDTA 20 mM, fluoruro de potasio 800 mmol/l, seroalbúmina bovina al 0,1 %).

30 Una hora después de la adición del tampón para la detección, se midieron las cuentas de fluorescencia de cada pocillo mediante un lector de microplacas de fluorescencia. En concreto, se midieron las cuentas de fluorescencia en 620 nm excitada en 337 nm y las cuentas de fluorescencia en 665 nm excitada mediante fluorescencia en 620 nm.

35 La proporción de cada pocillo se calculó a partir de las cuentas de fluorescencia medidas (cuentas de fluorescencia en 665 nm/cuentas de fluorescencia en 620 nm x 10000).

Los datos se obtuvieron restando la proporción promedio de un pocillo para el blanco de la proporción de cada pocillo. Los valores de CI50 de los artículos de ensayo se calcularon a partir del % de los valores de control de 2 dosis antes, 40 así como después del 50 % en el 100 % como el % de un valor de control de un control de disolvente.

Las siguientes Tablas 5 a 7 muestran los datos de inhibición de la actividad de JAK3 o los datos de inhibición % de los Compuestos 1 a 95.

45 [Tabla 5-1]

N.º de Compuesto: CI50 de JAK3 (uM) Inhibición %

1: 0,0034

2: 0,0047

3: 0,010

4: 0,0051

5: 0,0040

6: 0,0071

7: 0,0058

8: 0,73

9: 24 (0,1 uM)

10: 28 (0,1 uM)

11: 38 (0,1 uM)

12: 46 (0,1 uM)

13: 26 (1 uM)

14: 0,041

15: 0,0071

16: 0,058

17: 0,087

18: 0,41

19: 0,40

20: 0,10

[Tabla 5-2]

21: 0,021

22: 30 (1 uM)

23: 0,014

24: 0,13

25: 0,23

26: 0,012

27: 0,088

28: 0,13

29: 0,047

30: 0,58

31: 0,046

32: 0,49

33: 0,48

34: 0,036

35: 0,53

36: 0,15

37: 0,0033

38: 0,15

39: 0,12

40: 0,14

41: 0,090

[Tabla 5-3] [Tabla 5-4]

42: 0,10

43: 0,040

44: 0,067

45: 0,27

46: 0,27

47: 0,11

48: 0,17

49: 0,092

50: 0,23

51: 41 (1 uM)

52: 0,010

53: 0,056

54: 0,0059

55: 0,0066

56: 0,0068

57: 0,037

58: 0,031

59: 0,038

60: 0,014

61: 0,65

62: 0,13

63: 0,24

64: 0,18

65: 0,19

66: 0,011

67: 0,24

68: 0,28

69: 0,32

70: 0,30

71: 0,25

72: 0,15

73: 0,073

74: 0,18

75: 1 (1 uM)

76: 0,76

77: 0,048

78: 0,15

79: 38 (1uM)

80: 0,10

81: 0,46

82: 0,013

83: 0,25

[Tabla 5-5]

84: 0,014

85: 0,57

86: 0,45

87: 39 (1uM)

88: 0,032

89: 8,6

90: 0,55

[Tabla 6]

N.º de Compuesto: CI50 de JAK3 (uM) Inhibición %

91: 42 (1 uM)

92: 0,33

93: 0,11

[Tabla 7]

N.º de Compuesto: CI50 de JAK3 (uM) Inhibición %

94: 0,35

La siguiente Tabla 8 muestra los datos de inhibición de la actividad de JAK2 o los datos de inhibición % de los Compuestos 1 a 7.

[Tabla 8]

N.º de Compuesto: CI50 de JAK2 (uM) Inhibición %

1: 0,0010

2: 0,0017

3: 0,0022

4: 0,0017

5: 0,0019

6: 0,0021

7: 0,0047

[Formulaciones]

Los ejemplos de formulación de la presente invención incluyen las siguientes formulaciones. Sin embargo, no se 10 pretende que la presente invención se limite a ellas.

Formulación 1 (Preparación de Cápsula) 1) Compuesto 1 30 mg 2) Celulosa microcristalina 10 mg 3) Lactosa 19 mg

4) Estearato de magnesio 1 mg

1), 2), 3) y 4) se mezclan para rellenar una cápsula de gelatina

Formulación 2 (Preparación de Comprimido)

1) Compuesto 1 10 g

2) Lactosa 50 g

3) Almidón de maíz 15 g

4) Carmelosa de calcio 44 g

5) Estearato de magnesio 1 g

15 La cantidad completa de 1), 2) y 3) y 30 g de 4) se combinan con agua, se secan al vacío y después se granula. Los gránulos resultantes se mezclan con 14 g de 4) y 1 g de 5) y se comprimen mediante una máquina de comprimidos. A continuación, se obtienen 1000 comprimidos en los que está contenido el Compuesto 1 (10 mg) en cada comprimido.

20 Aplicabilidad industrial

La presente invención es útil para el tratamiento o la prevención de:

(a) rechazo del trasplante de órganos, reacción del injerto frente al hospedador tras el trasplante;

25 (b) enfermedades autoinmunitarias incluyendo artritis reumatoide, psoriasis, artritis psoriásica, esclerosis múltiple, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, lupus eritematoso sistémico, diabetes de tipo I, miastenia gravis, enfermedad de Castleman, artritis idiopática juvenil, ojo seco; y

(c) enfermedades alérgicas incluyendo asma, dermatitis atópica, rinitis, etc. La presente invención también es útil

para el tratamiento o la prevención de enfermedades mieloproliferativas crónicas incluyendo policitemia vera, 30 mielofibrosis primaria, trombocitemia esencial, etc.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de la siguiente fórmula general [I]:

5 en laqueRa es igual o diferente y cada uno es:

(1)

alquilo C16 o

(2)

un átomo de halógeno,

10 n1 es un número entero seleccionado de 0 a 4, Rb es igual o diferente y cada uno es:

(1)

alquilo C16 o

(2)

un átomo de halógeno,

15 n2 es un número entero seleccionado de 0 a 4, m1 es un número entero seleccionado de 0 a 3, m2 es un número entero seleccionado de 1 a 4, Xa=Xb es:

20 (1) CH=CH,

(2)

N=CH o

(3)

CH=N, X es:

25 (1) un átomo de nitrógeno o

(2) C-Rd enel que Rd es un átomo de hidrógeno o un átomo de halógeno, Rc es un grupo seleccionado entre los siguientes (1) a (6):

(1) un átomo de hidrógeno,

30 (2) alquilo C16 opcionalmente sustituido con de 1 a 5 sustituyentes iguales o diferentes seleccionados entre el siguiente Grupo A,

(3)

-C(=O)-Rc1 ,

(4)

-C(=O)-O-Rc2 ,

(5) -C(=O)-NRc3Rc4 35 enelqueRc1,Rc2,Rc3 y Rc4 son iguales o diferentes y cada uno es:

(i)

un átomo de hidrógeno o

(ii)

alquilo C16 opcionalmente sustituido con de 1 a 5 sustituyentes iguales o diferentes

seleccionados entre el siguiente Grupo A o 40

(6) un grupo de fórmula:

en laqueYa es un grupo seleccionado entre los siguientes (i) a (iii):

(i)

alquileno C16,

(ii)

-C(=O)- o

(iii) -C(=O)-O-,

el Anillo T es:

5 (i) arilo C610,

(ii) cicloalquilo C310 o

(iii) monoheterociclilo saturado en donde el monoheterociclilo saturado comprende de 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre un átomo de nitrógeno, un átomo de oxígeno o un átomo de azufre, así como átomos de carbono y el número de átomos constituyentes en el anillo es de 3 a7,

Rc5 es igual o diferente y cada uno es:

(i) ciano o

15 (ii) nitro, p es un número entero seleccionado de 0 a 4, el Grupo A es el grupo que consiste en:

(a)

hidroxilo,

(b)

alcoxi C16,

(c)

ciano,

(d)

alcoxicarbonilo C16,

(e)

alquilcarboniloxi C16 y

(f) alqueniloxi C26 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del 25 mismo.
2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que, en la fórmula general [I], n1 es un número entero seleccionado de 0 a 2, n2 es un número entero seleccionado de 0 a 2, m1 es un número entero seleccionado de 0 a 3, m2 es un número entero seleccionado de 1 a 3, X es:

(1) un átomo de nitrógeno o

35 (2) C-Rd donde Rd es un átomo de halógeno, Rc es un grupo seleccionado entre los siguientes (1) a (6):

(1)

un átomo de hidrógeno,

(2)

alquilo C16 sustituido con un sustituyente seleccionado entre el siguiente Grupo A,

(3)

-C(=O)-Rc1 ,

(4)

-C(=O)-O-Rc2 ,

(5)

-C(=O)-NRc3Rc4 en el que Rc1 es alquilo C16 opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado entre el siguiente Grupo A,

45 Rc2 es alquilo C16, Rc3 es alquilo C16 opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado entre el siguiente Grupo A, R4 es

(i)

un átomo de hidrógeno o

(ii)

alquilo C16 o

(6) un grupo de fórmula:

en laqueYa es un grupo seleccionado entre los siguientes (i) a (iii):

(i)

alquileno C16,

(ii)

-C(=O)- o

(iii) -C(=O)-O-, el Anillo T es:

(i)

fenilo,

(ii)

cicloalquilo C36 o

(iii) pirrolidinilo,

Rc5

5 es

(i)

ciano o

(ii)

nitro,

p es un número entero seleccionado de 0 o 1, 10 el Grupo A es el grupo que consiste en:

(a)

hidroxilo,

(b)

alcoxi C16,

(c) ciano, 15 (d) alcoxicarbonilo C16,

(e)

alquilcarboniloxi C16 y

(f)

alqueniloxi C26 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
3. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en el que m1 es un número entero de 0 20 o 1 y m2 es un número entero de 1 o 2 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
4. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que una combinación de (m1,m2) es (1,2), que es un compuesto de la fórmula general [II]:

en la que cada símbolo tiene el mismo significado que se ha definido en la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

30 5. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que una combinación de (m1,m2) es (0,2), que es un compuesto de la fórmula general [III]:

35 en la que cada símbolo tiene el mismo significado que se ha definido en la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
6. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que una combinación de (m1,m2) es (0,1), que es un compuesto de la fórmula general [IV]:

en la que cada símbolo tiene el mismo significado que se ha definido en la reivindicación 1 o una sal 5 farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
7. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en el que una combinación de (m1,m2) se selecciona entre (0,3), (2,1), (2,2) o (3,2) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

10 8. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que Xa=Xb es CH=CH y X es un átomo de nitrógeno o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
9. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en el que una combinación de (n1,n2) es

(0,0) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo. 15
10. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en el que una combinación de (n1,n2) es (1,0) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
11. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en el que una combinación de (n1,n2) 20 es (0,1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
12. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en el que una combinación de (n1,n2) es (2,0) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

25 13. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en el que una combinación de (n1,n2) es (0,2) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
14. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10 o 12, en el que Ra es metilo o un átomo de

flúor o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo. 30
15. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, en el que Rc es -C(=O)-Rc1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
16. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 15, en el que Rc1 es alquilo C16 sustituido con un grupo hidroxilo o 35 ciano o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
17. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, en el que Rc es -C(=O)-NRc3Rc4 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

40 18. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 17, en el que Rc3 es alquilo C16 sustituido con un grupo ciano y Rc4 es hidrógeno o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
19. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado entre las siguientes fórmulas químicas estructurales:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
20. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado entre las siguientes fórmulas químicas estructurales:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo. 10 21. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
22. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
23. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
24. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
25. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
26. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
27. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

10 28. Una composición farmacéutica, que comprende el compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
29. Un inhibidor de Janus quinasa, que comprende el compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo. 15
30.

El inhibidor de Janus quinasa según la reivindicación 29, en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 3.
31.

El inhibidor de Janus quinasa según la reivindicación 29, en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 2.

20 32. Un agente terapéutico o preventivo para su uso en el tratamiento de una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en rechazo del trasplante de órganos, reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante, enfermedad autoinmunitaria, enfermedad alérgica y enfermedad mieloproliferativa crónica, que comprende el compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
33. Un agente terapéutico o preventivo para su uso en el tratamiento de la artritis reumatoide, que comprende el compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.

30 34. Un agente terapéutico o preventivo para su uso en el tratamiento de la psoriasis, que comprende el compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
35. Un agente terapéutico o preventivo para su uso en el tratamiento del ojo seco, que comprende el compuesto según

35 una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo.
36. Un agente terapéutico o preventivo para su uso en el tratamiento de la dermatitis atópica, que comprende el

compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un 40 solvato del mismo.
37. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, para su uso en la inhibición de Janus quinasa.

45 38. El compuesto para su uso según la reivindicación 37, en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 3.
39.

El compuesto para su uso según la reivindicación 37, en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 2.
40.

Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en rechazo del trasplante de órganos, reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante, enfermedad autoinmunitaria, enfermedades alérgicas y enfermedad mieloproliferativa crónica.
41.

Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de la artritis reumatoide.
42.

Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de la psoriasis.
43.

Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención del ojo seco.
44.

Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de la dermatitis atópica.
45.

Uso del compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, en la fabricación de un inhibidor de Janus quinasa.
46.

El uso según la reivindicación 45, en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 3.
47.

El uso según la reivindicación 45, en el que la Janus quinasa es Janus quinasa 2.
48.

Uso del compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en rechazo del trasplante de órganos, reacción del injerto contra el hospedador tras el trasplante, enfermedad autoinmunitaria, enfermedades alérgicas y enfermedad mieloproliferativa crónica.
49.

Uso del compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la artritis reumatoide.
50.

Uso del compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la psoriasis.
51.

Uso del compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención del ojo seco.
52.

Uso del compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la dermatitis atópica.