ES2473581T3 - Compuestos, composiciones y métodos para el tratamiento de amiloidosis y sinucleinopat�as tales como la enfermedad de Alzheimer, la diabetes de tipo 2 y la enfermedad de Parkinson - Google Patents

Compuestos, composiciones y métodos para el tratamiento de amiloidosis y sinucleinopat�as tales como la enfermedad de Alzheimer, la diabetes de tipo 2 y la enfermedad de Parkinson Download PDF

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Gerardo M. Castillo
Virginia J. Sanders
Thomas P. Lake
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David S. Larsen
Rex T. Weavers
Stephen D. Lorimer
David L. Coffen
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Abstract

Un compuesto de la fórmula: **Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la que: R es un grupo alquileno C6-C10, en el que hay: i) opcionalmente 1 o 2 dobles enlaces no adyacentes; ii) 1 a 3 grupos metileno no adyacentes están reemplazados por NR', O o S, en la que R' es H, acilo C2-4 o alquilo C1-3, y iii) 2 grupos metileno están reemplazados por un grupo carbolino o hidroximetileno.

Description

Compuestos, composiciones y métodos para el tratamiento de amiloidosis y sinucleinopat�as tales como la enfermedad de Alzheimer, la diabetes de tipo 2 y la enfermedad de Parkinson 5
Campo técnico
Esta invención se refiere a: compuestos de bis-dihidroxifenilo novedosos y sus sales farmac�uticamente aceptables, composiciones farmacéuticas que los contienen y su uso en el tratamiento de amiloidosis, especialmente amiloidosis Aβ, tal como las observadas en la enfermedad de Alzheimer, amiloidosis IAPP, tal como la observada en la diabetes de tipo 2, y sinucleinopat�as, tales como las observadas en la enfermedad de Parkinson, y a la fabricación de medicamentos para dicho tratamiento.
Antecedentes de la invención
15 La enfermedad de Alzheimer se caracteriza por la acumulación de un p�ptido de 39-43 amino�cidos denominado la proteína β-amiloidea o Aβ, en forma fibrilar, que se presenta como placas de amiloide extracelular y como amiloide dentro de las paredes de los vasos sanguíneos del cerebro. Se cree que la deposición de amiloide Aβ fibrilar en la enfermedad de Alzheimer es perjudicial para el paciente y que eventualmente provoca toxicidad y la muerte de células neuronales, sellos característicos de la enfermedad de Alzheimer. Las pruebas acumuladas implican a amiloide y, más específicamente, a la formación, la deposición, la acumulación y/o la persistencia de fibrillas de Aβ como un factor causante de la patog�nesis de la enfermedad de Alzheimer principal. Además, aparte de la enfermedad de Alzheimer, una serie de otras amiloidosis implican la formación, la deposición, la acumulación y la persistencia de fibrillas de Aβ, incluidas el síndrome de Down, trastornos que implican angiopat�a congof�lica, tales
25 como, pero sin limitación, hemorragia cerebral hereditaria de tipo holandés, miositosis por cuerpos de inclusión, demencia pugil�stica, angiopat�a β-amiloidea cerebral, demencia asociada con parálisis supranuclear progresiva, demencia asociada con la degeneración basal cortical y deterioro cognitivo leve.
La enfermedad de Parkinson es otro trastorno humano caracterizado por la formación, la deposición, la acumulación y/o la persistencia de depósitos de proteínas fibrilares anómalos que muestran muchas de las características de los amiloides. En la enfermedad de Parkinson se cree que las acumulaciones de cuerpos de Lewy citopl�smicos que consisten en filamentos de α-sinucle�na/NAC (un componente no Aβ) son importantes en la patog�nesis y como dianas terapéuticas. Se considera que los nuevos agentes o compuestos capaces de inhibir la formación, la deposición, la acumulación y/o la persistencia de la α-sinucle�na y/o el NAC, o que rompan las fibrillas de α
35 sinucle�na/NAC preformadas (o porciones de las mismas), son productos terapéuticos potenciales para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson y sinucleinopat�as relacionadas. El NAC es un fragmento de 35 amino�cidos de la α-sinucle�na que tiene la capacidad para formar fibrillas de tipo amiloideo in vitro o como se observa en el cerebro de pacientes con la enfermedad de Parkinson. El fragmento NAC de la α-sinucle�na es una diana terapéutica relativamente importante, ya que se cree que esta porción de la α-sinucle�na es crucial para la formación de cuerpos de Lewy, como se observa en todos los pacientes con enfermedad de Parkinson, sinucleinopat�as y trastornos relacionados.
Una diversidad de otras enfermedades humanas también muestran deposición de amiloide y habitualmente implican a órganos sist�micos (es decir, órganos o tejidos que se encuentran fuera del sistema nervioso central), provocando
45 la acumulación de amiloide la disfunción o el fallo de órganos. Estas amiloidosis (que se abordan a continuación) que provocan una acumulación significativa de amiloide en una serie de órganos y tejidos diferentes se conocen como amiloidosis sist�micas. En otras amiloidosis pueden verse afectados órganos individuales tales como el páncreas en el 90 % de los pacientes con diabetes de tipo 2. En este tipo de amiloidosis, se cree que se destruyen las células beta en los islotes de Langerhans del páncreas por la acumulación de depósitos de amiloide fibrilar que consisten principalmente en una proteína conocida como polip�ptido amiloideo de los islotes (IAPP). Se cree que la inhibición o la reducción de esta formación, deposición, acumulación y persistencia de fibrillas de amiloides IAPP conducir� a nuevos tratamiento eficaces contra la diabetes de tipo 2. Para la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson y la amiloidosis "sist�mica" no existen actualmente curas ni tratamientos eficaces, y el paciente muere habitualmente en un periodo de 3 a 10 años desde la aparición de la enfermedad.
55 Las amiloidosis se clasifican según el tipo de proteína amiloidea presente, as� como según la enfermedad subyaciente. Las amiloidosis tienen una serie de características comunes que incluyen cada amiloide que consiste en un tipo único de proteína amiloidea. Las amiloidosis incluyen, pero sin limitación, los amiloides asociados con la enfermedad de Alzheimer, el síndrome de Down, la hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, la demencia pugil�stica, la miositosis por cuerpos de inclusión (Askanas y col., Ann. Neurol., 43:521-560, 1993) y el deterioro cognitivo leve (en que el amiloide específico se denomina proteína beta-amiloide o Aβ), el amiloide asociado con inflamación crónica, diversas formas de tumores malignos y la fiebre mediterránea familiar (en la que el amiloide específico se denomina amiloide AA o amiloidosis asociada a la inflamación), el amiloide asociado con mieloma múltiple y otras discrasias de linfocitos B (en las que el amiloide específico se denomina amiloide AL),
65 el amiloide asociado con la diabetes de tipo 2 (en el que la proteína amiloide se denomina amilina o polip�ptido
amiloideo de los islotes o IAPP), el amiloide asociado con las enfermedad pri�nicas, incluida la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, el síndrome de Gerstmann-Straussler, el kuru y la tembladera animal (en las que el amiloide específico se denomina amiloide PrP), el amiloide asociado con hemodi�lisis a largo plazo y el síndrome del túnel carpiano (en el que el amiloide específico se denomina amiloide de α2-microglobulina), el amiloide asociado con la 5 amiloidosis cardíaca senil y la polineuropat�a amiloid�tica familiar (en la que el amiloide específico se denomina transtiretina o prealb�mina) y el amiloide asociado con tumores endocrinos tales como el carcinoma medular de la tiroides (en el que el amiloide específico se denomina variantes de procalcitonina). Además, la proteína α-sinucle�na que forma fibrillas de tipo amiloide y es positiva al rojo Congo y a la tioflavina S (tintes específicos usados para detectar los depósitos fibrilares de amiloide) se encuentra como parte de los cuerpos de Lewy en el cerebro de 10 pacientes con enfermedad de Parkinson, enfermedad de los cuerpos de Lewy (Lewy en Handbuch der Neurologie,
M. Lewandowski, ed., Springer, Berlín, páginas 920-933, 1912; Pollanen y col., J. Neuropath. Exp. Neurol., 52:183191, 1993; Spillantini y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95:6469-6473, 1998; Arai y col., Neurosci. Lett., 259:83-86, 1999), la atrofia multisist�mica (Wakabayashi y col., Acta Neuropath., 96:445-452, 1998), la demencia con cuerpos de Lewy y la variante de cuerpos de Lewy de la enfermedad de Alzheimer. Para los fines de la presente divulgación,
15 la enfermedad de Parkinson, debido al hecho de que las fibrillas se desarrollan en el cerebro de pacientes con esta enfermedad (que son positivas al rojo Congo y a la tioflavina S y que contienen una estructura secundaria predominante de lámina beta plegada), se considera ahora como una enfermedad que también presenta las características de una enfermedad de tipo amiloide.
20 Se sabe que las amiloidosis sist�micas, que incluyen, como ejemplos, el amiloide asociado con la inflamación crónica, diversas formas de tumores malinos y la fiebre mediterránea familiar (es decir, el amiloide AA o la amiloidosis asociada con la inflamación) (Benson y Cohen, Arth. Rheum., 22:36-42, 1979; Kamei y col., Acta Path. Jpn., 32:123-133, 1982; McAdam y col., Lancet, 2:572-573, 1975; Metaxas, Kidney Int., 20:676-685, 1981) y el amiloide asociado con mieloma múltiple y otras discrasias de linfocitos B (es decir, el amiloide AL) (Harada y col., J.
25 Histochem. Cytochem., 19:1-15, 1971), implican la deposición de amiloide en una diversidad de órganos y tejidos diferentes que, en general, se encuentran fuera del sistema nervioso central. La deposición de amiloides en estas enfermedades puede producirse, por ejemplo, en el hígado, el corazón, el bazo, el sistema gastrointestinal, el ri��n, la piel y/o los pulmones (Johnson y col., N. Engl. J. Med., 321:513-518, 1989). Para la mayor parte de estas amiloidosis no existen curas ni tratamientos eficaces aparentes y las consecuencias de la deposición de amiloide
30 pueden ser perjudiciales para el paciente. Por ejemplo, la deposición de amiloide en el ri��n puede provocar una insuficiencia renal, mientras que la deposición de amiloide en el corazón puede provocar una insuficiencia cardiaca. Para estos pacientes, la acumulación de amiloide en órganos sist�micos es causante, en último término, de la muerte, en general en 3-5 años. Otras amiloidosis pueden afectar a un único órgano o tejido, como se observa con los depósitos de amiloide Aβ encontrados en el cerebro de pacientes con enfermedad de Alzheimer y síndrome de
35 Down; los depósitos de amiloide PrP en el cerebro de pacientes con la enfermedad de Creutzfledt-Jakob, el síndrome de Gerstmann-Straussler y el kuru; los depósitos de amiloide de los islotes (IAPP) encontrados en los islotes de Langerhans en el páncreas del 90 % de los pacientes con diabetes de tipo 2 (Jonson y col., N. Engl. J. Med., 321:513-518, 1989; Lab. Invest., 66:522 535, 1992); los depósitos de amiloide de α2-microglobulina en el nervio medio que son causantes del síndrome de túnel carpiano, como se observa en pacientes sometidos a
40 hemodi�lisis a largo plazo (Geyjo y col., Biochem. Biophys. Res. Comm., 129:701-706, 1985; Kidney Int., 30:385390, 1986); el amiloide de prealb�mina/transtiretina observado en el corazón de pacientes con amiloidosis cardíaca senil; y el amiloide de prealb�mina/transtiretina observado en los nervios periféricos de pacientes que tienen polineuropat�a amiloid�tica familiar (Skinner y Cohen, Biochem. Biophys. Res. Comm., 99:1326-1332, 1981; Saraiva y col., J. Lab. Clin. Med., 102:590-603, 1983; J. Clin. Invest., 74:104-119, 1984; Tawara y col., J. Lab. Clin. Med.,
45 98:811-822, 1989).
La enfermedad de Alzheimer también representa una carga económica considerable para la sociedad. Un estudio reciente ha estimado que el coste de atender a un único paciente con enfermedad de Alzheimer con deterioros cognitivos graves en casa o en una residencia es superior a 47.000 dólares anuales (A Guide to Understanding
50 Alzheimer's Disease and Related Disorders). Para una enfermedad que puede durar de 2 a 20 años, el coste general de la enfermedad de Alzheimer para las familias y para la sociedad es enorme. La carga económica anual de la enfermedad de Alzheimer en EEUU, en términos de gastos en cuidados sanitarios y pérdidas de salarios de los pacientes y de sus cuidadores se estima que es de 80 a 100 mil millones de dólares (2003 Progress Report on Alzheimer's Disease).
55 El clorhidrato de tacrina ("Cognex"), el primer fármaco aprobado por la FDA para la enfermedad de Alzheimer, es un inhibidor de la acetilcolinesterasa (Cutler y Sramek, N. Engl. J. Med. 328:808 810, 1993). No obstante, este fármaco ha mostrado un éxito limitado en el logro de una mejora cognitiva en pacientes con la enfermedad de Alzheimer e, inicialmente, tuvo efectos secundarios importantes tales como toxicidad hepática. El segundo fármaco aprobado por
60 la FDA, donepezilo ("Aricept"), que es también un inhibidor de la acetilcolinestarasa, es más eficaz que la tacrina, demostrando una ligera mejora cognitiva en pacientes con la enfermedad de Alzheimer (Barner and Gray, Ann. Pharmacotherapy 32:70-77, 1998; Rogers y Friedhoff, Eur. Neuropsych. 8:67-75, 1998), pero no se cree que sea una cura. Por lo tanto, est� claro que existe la necesidad de tratamientos más eficaces para pacientes con la enfermedad de Alzheimer.
65 Amiloide como diana terapéutica para la enfermedad de Alzheimer
La enfermedad de Alzheimer se caracteriza por la deposición y la acumulación de un p�ptido de 39-43 amino�cidos denominado proteína beta-amiloide, Aβ o β/A4 (Glenner y Wong, Biochem. Biophys. Res. Comm., 120:885-890, 1984; Masters y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82:4245-4249, 1985; Husby y col., Bull. WHO, 71:105-108, 1993).
5 La Aβ se deriva, mediante la escisión con proteasas de proteínas precursoras más grandes denominadas proteínas precursoras de β-amiloide (APP), de las que existen varias variantes empalmadas alternativamente. Las formas más abundantes de APP incluyen proteínas que consisten en 695, 751 y 770 amino�cidos (Tanzi y col., Nature, 31:528530, 1988).
10 El p�ptido Aβ pequeño es un componente principal que forma los depósitos de amiloide de "placas" en el cerebro de pacientes con enfermedad de Alzheimer. Además, la enfermedad de Alzheimer se caracteriza por la presencia de numerosas "madejas" neurofibrilares, que consisten en filamentos helicoidales apareados que se acumulan de una forma anormal en el citoplasma de las neuronas (Grundke-Iqbal y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83:4913-4917, 1986; Kosik y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83:4044-4048, 1986; Lee y col., Science, 251:675-678, 1991). Por lo
15 tanto, la característica patológica de la enfermedad de Alzheimer es la presencia de "placas" y "madejas", estando el amiloide depositado en el núcleo central de las placas. El otro tipo de lesión principal encontrada en cerebros con la enfermedad de Alzheimer es la acumulación de amiloide en las paredes de los vasos sanguíneos, tanto dentro del par�nquima cerebral como en las paredes de los vasos men�ngeos que se encuentran fuera del cerebro. Los depósitos de amiloide localizados en las paredes de los vasos sanguíneos se denominan amiloide cerebrovascular o
20 angiopat�a congof�lica (Mandybur, J. Neuropath. Exp. Neurol., 45:79-90, 1986; Pardridge y col., J. Neurochem., 49:1394-1401, 1987).
Durante muchos años ha habido un debate científico continuo sobre la importancia del "amiloide" en la enfermedad de Alzheimer y sobre si las "placas" y las "madejas" características de esta enfermedad eran una causa o 25 simplemente una consecuencia de la enfermedad. Ahora, en los últimos años, los estudios indican que el amiloide es, en efecto, un factor causante de la enfermedad de Alzheimer y no debería considerarse un mero espectador inocente. Se ha demostrado que la proteína Aβ del Alzheimer en cultivos celulares provoca la degeneración de las células nerviosas en periodos de tiempo cortos (Pike y col., Br. Res., 563:311-314, 1991; J. Neurochem., 64:253265, 1995). Los estudios sugieren que es la estructura fibrilar (que consiste en una estructura secundaria 30 predominante de lámina β plegada), característica de todos los amiloides, la que es responsable de los efectos neurot�xicos. También se ha descubierto que la Aβ es neurot�xica en cultivos de cortes de hipocampo (Harrigan y col., Neurobiol. Aging, 16:779-789, 1995) e induce la muerte de células nerviosas en ratones transg�nicos (Games y col., Nature, 373:523-527, 1995; Hsiao y col., Science, 274:99-102, 1996). La inyección de la Aβ del Alzheimer en el cerebro de rata también provoca deterioro en la memoria y disfunción neuronal (Flood y col., Proc. Natl. Acad. Sci.
35 USA, 88:3363-3366, 1991; Br. Res., 663:271-276, 1994).
Probablemente, la prueba más convincente de que el amiloide Aβ est� directamente implicado en la patog�nesis de la enfermedad de Alzheimer procede de los estudios genéticos. Se ha descubierto que la producción de Aβ puede ser el resultado de mutaciones en el gen que codifica su precursor, la proteína precursora de β-amiloide (Van 40 Broeckhoven y col., Science, 248:1120-1122, 1990; Murrell y col., Science, 254:97-99, 1991; Haass y col., Nature Med., 1:1291-1296, 1995). La identificación de mutaciones en el gen de la proteína precursora de beta-amiloide que provoca la aparición temprana de la enfermedad de Alzheimer familiar es el argumento más potente para creer que el amiloide es fundamentales en el proceso patogen�tico que subyace a esta enfermedad. Se han descubierto cuatro mutaciones que provocan la enfermedad, de las que se ha informado, que demuestran la importancia de Aβ
45 para provocar la enfermedad de Alzheimer familar (publicado en Hardy, Nature Genet., 1:233-234, 1992). Todos estos estudios sugieren que proporcionar un fármaco para reducir, eliminar o prevenir la formación, la deposición, la acumulación y/o la persistencia de Aβ fibrilar en el cerebro de pacientes humanos servir� como un tratamiento terapéutico eficaz.
50 Enfermedad de Parkinson y sinucleinopat�as
La enfermedad de Parkinson es un trastorno neurodegenerativo que se caracteriza patol�gicamente por la presencia de cuerpos de Lewy intracitopl�smicos (Lewy en Handbuch der Neurologie, M. Lewandowski, ed., Springer, Berlín, páginas 920-933, 1912; Pollanen y col., J. Neuropath. Exp. Neurol., 52:183-191, 1993), siendo los componentes 55 principales de los mismos filamentos que consisten en α-sinucle�na (Spillantini y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95:6469-6473, 1998; Arai y col., Neurosci. Lett. 259:83-86, 1999), una proteína de 140 amino�cidos (Ueda y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:11282-11286, 1993). Se han descrito dos mutaciones dominantes en una αsinucle�na que son causantes de la enfermedad de Parkinson familiar de aparición temprana, lo que sugiere que los cuerpos de Lewy contribuyen mecánicamente a la degeneración de neuronas en la enfermedad de Parkinson y en 60 trastornos relacionados (Polymeropoulos y col., Science, 276:2045-2047, 1997; Kruger y col., Nature Genet., 18:106108, 1998). Recientemente, estudios in vitro han demostrado que una α-sinucle�na recombinante puede, de hecho, formar fibrillas de tipo cuerpos de Lewy (Conway y col., Nature Med., 4:1318-1320, 1998; Hashimoto y col., Brain Res., 799:301-306, 1998; Nahri y col., J. Biol. Chem., 274:9843-9846, 1999). De la forma más importante, ambas mutaciones de α-sinucle�na ligadas a la enfermedad de Parkinson aceleran este proceso de agregación, 65 demostrando que estos estudios in vitro pueden tener relevancia para la patog�nesis de la enfermedad de
Parkinson. La agregación de alfa-sinucle�na y formación de fibrillas cumple los criterios de un proceso de polimerizaci�n dependiente de la nucleaci�n (Wood y col., J. Biol. Chem., 274:19509-19512, 1999). A este respecto, la formación de fibrillas de α-sinucle�na se parece al de las fibrillas de proteína β-amiloidea (Aβ) de la enfermedad de Alzheimer. La proteína recombinante de la alfa-sinucle�na y el componente no-Aβ (conocido como NAC), que es un
5 fragmento pept�dico de 35 amino�cidos de la α-sinucle�na, tienen ambos la capacidad de formar fibrillas cuando se incuban a 37 �C y son positivos con tintes de amiloide tales como el rojo Congo (que muestra una birrefringencia roja/verde cuando se observa bajo luz polarizada) y la tioflavina S (que muestra fluorescencia positiva) (Hashimoto y col., Brain Res., 799:301-306, 1998; Ueda y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:11282-11286, 1993).
10 Las sinucle�nas son una familia de proteínas neuronales presin�pticas pequeñas compuestas de α-, β- y γsinucle�nas, de la que solo los agregados de α-sinucle�na se han asociado con diversas enfermedades neurol�gicas (Ian y col., Clinical Neurosc. Res., 1:445-455, 2001; Trojanowski y Lee, Neurotoxicology, 23:457-460, 2002). El papel de las sinucle�nas (y, en particular de la alfa-sinucle�na) en la etiolog�a de una serie de enfermedades neurodegenerativas y/o amiloidosis se ha desarrollado a partir de varias observaciones. Desde el punto de vista
15 patológico, la sinucle�na se ha identificado como un componente principal de los cuerpos de Lewy, las inclusiones características de la enfermedad de Parkinson, y un fragmento de la misma se aisl� a partir de placas de amiloide de otra enfermedad neurol�gica diferente, la enfermedad de Alzheimer. Desde el punto de vista bioquímico, se ha demostrado que la α-sinucle�na recombinante forma fibrillas de tipo amiloide que recapitulan las características ultraestructurales de la alfa-sinucle�na aislada de pacientes con demencia con cuerpos de Lewy, enfermedad de
20 Parkinson y atrofia multisist�mica. Además, la identificación de mutaciones dentro del gen de la sinucle�na, aunque en casos raros de la enfermedad de Parkinson familiar, demostr� una conexión inequívoca entre la patología de la sinucle�na y enfermedades neurodegenerativas. La implicación habitual de la α-sinucle�na en un espectro de enfermedades tales como la enfermedad de Parkinson, la demencia con cuerpos de Lewy, la atrofia multisist�mica y la variante de cuerpos de Lewy de la enfermedad de Alzheimer ha llevado a clasificar estas enfermedades dentro del
25 término general de "sinucleinopat�as".
Las fibrillas de α-sinucle�na de la enfermedad de Parkinson, como las fibrillas de Aβ de la enfermedad de Alzheimer, también consisten predominantemente en una estructura de lámina β plegada. Por lo tanto, también se prev� que los compuestos que se ha hallado que inhiben la formación de fibrillas de amiloide Aβ en la enfermedad de
30 Alzheimer sean eficaces para la inhibición de la formación de fibrillas de α-sinucle�na/NAC, como se muestra en los ejemplos de la presente invención. Por lo tanto, estos compuestos también servirían como productos terapéuticos para la enfermedad de Parkinson y otras sinucleinopat�as, además de ser eficaces como productos terapéuticos para la enfermedad de Alzheimer, la diabetes de tipo 2 y otros trastornos de amiloides.
35 El descubrimiento y la identificación de nuevos compuestos o agentes como productos terapéuticos potenciales para detener la formación, la deposición, la acumulación y/o la persistencia de amiloides que tienen lugar en la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson, la diabetes de tipo II y otras amiloidosis se intenta con gran vehemencia.
40 El documento WO 02/42429 divulga métodos para el aislamiento de compuestos que poseen actividad inhibitoria del amiloide a partir de materia vegetal del género Uncaria, y el uso de estos compuestos para tratar una amiloidosis o una enfermedad relacionada con la a-sinucle�na. El documento EP 0 324 521 divulga compuestos de la fórmula:
45 para su uso en el tratamiento de enfermedades hematopoy�ticas en un ser vivo de sangre caliente.
Sumario de la invención
En un primer aspecto, la presente invención se refiere a compuestos de la fórmula:
o sales farmac�uticamente aceptables de los mismos, en la que: R es un grupo alquileno C6-C10, en que hay:
i) opcionalmente 1 o 2 dobles enlaces no adyacentes;
ii) de 1 a 3 grupos metileno no adyacentes estan reemplazados por NR', 0 o 5, en la que R' es H, acilo (2-4 o alquilo (1-3; y
iii) 2 grupos metileno estan reemplazados por un grupo carbonilo o hidroximetileno
Preferentemente, el compuesto se selecciona entre:
En un segundo aspecto, esta invención se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto del primer aspecto de esta invención y un excipiente farmac�uticamente aceptable, y composiciones farmacéuticas
10 que comprenden un excipiente farmac�uticamente aceptable y, como único ingrediente activo, un compuesto del primer aspecto de la invención.
En un tercer aspecto, los compuestos del primer aspecto son para su uso en el tratamiento de una amiloidosis o una sinucleinopat�a en un mamífero, especialmente un ser humano, mediante la administración de una cantidad
15 terapéuticamente eficaz de un compuesto del primer aspecto de esta invención, por ejemplo, como una composición farmacéutica.
En un cuarto aspecto, esta invención se refiere al uso de un compuesto del primer aspecto de esta invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una amiloidosis o una sinucleinopat�a.
20 En un quinto aspecto, los compuestos del primer aspecto son para su uso en el tratamiento de la formación, la deposición, la acumulación o la persistencia de las fibrillas de amiloide o las fibrillas de sinucle�na.
En un sexto aspecto, esta invención se refiere a un método in vitro para tratar la formación, la deposición, la
5 acumulación o la persistencia de las fibrillas de amiloide o las fibrillas de sinucle�na tales como A�, IAPP, otros amiloides y fibrilog�nesis de NAC o a-sinucle�na. El método incluye el paso de administrar al ambiente in vitro una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de esta invención.
Breve descripción de los dibujos
La figura 1 es cuatro espectros de dicro�smo circular que muestran ejemplos de la ruptura de las fibrillas de Aβ de la enfermedad de Alzheimer mediante los compuestos 4, 12, 51 y 61.
La figura 2 es un espectro de dicro�smo circular que muestra ejemplos de la ruptura de las fibrillas de Aβ de la 15 enfermedad de Alzheimer mediante el compuesto 78.
La figura 3 es tres espectros de dicro�smo circular que muestran ejemplos de la ruptura de las fibrillas de Aβ de la enfermedad de Alzheimer (de un modo dependiente de la dosis) mediante los compuestos 12, 51 y 61.
Descripci�n detallada de la invención
Definiciones
En la presente solicitud, los términos siguientes tendrán los significados siguientes, sin considerar si los términos se 25 usan de otra forma en otro sitio de la literatura o de otro modo en la técnica conocida.
"Análogos de metilendioxi" se refiere a compuestos en los que cada uno de los pares de restos hidroxilo adyacentes de los grupos hidroxiarilo se han reemplazado por grupos metilendioxi. Los compuestos de metilendioxi se ilustran y se denominan compuestos N� 1B a N� 86B o DC-0001B a DC-0086B. Los grupos metilendioxi también son grupos protectores de intermedios convenientes para los restos dihidroxilo y, por lo tanto, se cree que estos compuestos divulgados también sirven como prof�rmacos eficaces. Los análogos de metilendioxi N� 1B a N� 80B se ilustran en el ejemplo 30.
"ésteres farmac�uticamente aceptables" se refiere a compuestos en los que los restos hidroxilo de los grupos
35 dihidroxiarilo de los compuestos est�n esterificados con un ácido o ácidos, dando como resultado un poli(éster) farmac�utiamente aceptable. Los compuestos se muestran en el ejemplo 31 como acetilados, y estos compuestos acetilados se ilustran y se denominan compuestos N� 1C a N� 86C o DC-0001C a DC-0086C;
Se espera que los grupos éster sirvan como grupos protectores de intermedios para los restos hidroxilo y, por lo tanto, se espera que los ésteres farmac�uticamente aceptables sirvan como prof�rmacos para sus compuestos de bis- y tris-hidrixiarilo subyacentes.
Se muestran las estructuras químicas de cada uno de los compuestos de la presente invención. Las denominaciones de los compuestos son diversas denominaciones de la IUPAC [denominaciones derivadas según el
45 sistema aceptado por la IUPAC (Unión Internacional de Química Pura y Aplicada) establecido por la coalición de la Comisión de Nomenclatura de Química Orgánica y la Comisión de Química Orgánica Física, tal como pueden encontrarse en el sitio de Internet http://www.chem.qmul.ac.uk/iupac], denominaciones derivadas de las denominaciones de la IUPAC mediante la adición o la sustitución (por ejemplo, usando "3,4-metilendioxifenilo" derivado de "fenilo" en vez de "benzo[1,3]dioxol-5-ilo") y denominaciones derivadas de las denominaciones de reactantes (por ejemplo, usando "3,4-dihidroxanilida del ácido 3,4-dihidroxibenzoico" en vez de "N-(3,4-dihidroxifenil)-3,4-dihidroxibenzamida"). No obstante, las denominaciones usadas se equiparan explícitamente a estructuras químicas y se cree que se entienden fácilmente por parte de un experto en la técnica.
"Mamífero" incluye tanto mamíferos humanos como no humanos, tales como animales de compa��a (gatos, perros y
55 similares), animales de laboratorio (tales como ratones, ratas, cobayas y similares) y animales de granja (ganado vacuno, caballos, ovejas, cabras, cerdos y similares).
"Excipiente farmac�uticamente aceptable" significa un excipiente que es convencionalmente útil para preparar una composición farmacéutica que, en general, es segura, no tóxica y deseable, e incluye excipientes que son aceptables para uso veterinario o para uso farmacéutico humano. Estos excipientes pueden ser sólidos, líquidos, semis�lidos o, en el caso de una composición en aerosol, gaseosos.
"Sal farmac�uticamente aceptable" significa una sal que sea farmac�uticamente aceptable y que tenga las propiedades farmacol�gicas deseadas. Dichas sales incluyen sales que pueden formarse cuando los protones 65 ácidos de los compuestos sean capaces de reaccionar con bases inorgánicas u orgánicas. Las sales inorgánicas adecuadas incluyen las formadas con los metales alcalinos, por ejemplo sodio y potasio, magnesio, calcio y
aluminio. Las sales orgánicas adecuadas incluyen las formadas con bases orgánicas tales como bases de amina, por ejemplo etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina, N-metilglucamina y similares. Dichas sales también incluyen sales de adición de ácidos formadas con ácidos inorgánicos (por ejemplo, ácidos clorhídrico y bromh�drico) y ácidos orgánicos (por ejemplo, ácido acético, ácido cítrico, ácido maleico y los ácidos alcano- y
5 areno-sulf�nicos tales como ácido metanosulf�nico y ácido bencenosulf�nico). Cuando hay presencia de dos grupos ácidos, una sal farmac�uticamente aceptable puede ser una sal sencilla mono�cida o una sal doble; y de modo similar cuando hay presencia de más de dos grupos ácidos, algunos o todos de dichos grupos pueden estar salificados.
Una "cantidad terapéuticamente eficaz" significa, en general, la cantidad que cuando se administra a un sujeto o a un animal para tratar una enfermedad, es suficiente para afectar al grado de tratamiento deseado para la enfermedad. Una "cantidad terapéuticamente eficaz" o una "dosificación terapéuticamente eficaz" inhibe, reduce, rompe o disgrega la formación, la deposición, la acumulación y/o la persistencia de fibrillas de amiloide o de sinucle�na, o trata una enfermedad asociada a estas afecciones, tal como una amiloidosis o una sinucleinopat�a, en 15 al menos el 20 %, más preferentemente en al menos el 40 %, incluso más preferentemente en al menos el 60% y aún más preferentemente en al menos el 80 %, con respecto a un sujeto sin tratar. Las cantidades eficaces de un compuesto de la presente invención o composición del mismo para el tratamiento de un sujeto mamífero son de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 1000 mg/kg de peso corporal del sujeto/día, tal como de aproximadamente 1 a aproximadamente 100 mg/kg/día, especialmente de aproximadamente 10 a aproximadamente 100 mg/kg/día. Se cree que un amplio intervalo de dosificaciones de la composición descrita son seguras y eficaces.
"Tratar" o "tratamiento" de una enfermedad incluye prevenir que tenga lugar la enfermedad en un mamífero que puede estar predispuesto a la enfermedad, pero que aún no padece o presenta síntomas de la enfermedad (tratamiento preventivo), inhibir la enfermedad (ralentizar o detener su desarrollo), proporcionar alivio frente a los
25 síntomas o efectos secundarios de la enfermedad (incluido el tratamiento paliativo) y aliviar la enfermedad (causar la regresión de la enfermedad), tal como la ruptura de fibrillas de amiloide o sinucle�na preformadas. Un tratamiento preventivo de este tipo puede ser el uso de los compuestos divulgados para el tratamiento de deterioro cognitivo leve (MCI).
El "NAC" (componente no Aβ) es a fragmento pept�dico de 35 amino�cidos de α-sinucle�na, que como la αsinucle�na, tiene la capacidad de formar fibrillas similares a amiloide a 37 �C, y es positiva con tintes de amiolides tales como rojo Congo (que muestra una birrefrigencia roja/verde cuando se observa bajo luz polarizada) y tioflavina S (que muestra fluorescencia positiva) (Hashimoto y col, Brain Res. 799:301-306, 1998; Ueda y col., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:11282-11286,1993). Se cree que la inhibición de la formación, la deposición, la acumulación, la
35 agregación y/o la persistencia de fibrillas de NAC es un tratamiento eficaz para una serie de enfermedades que implican α-sinucle�na, tales como la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de los cuerpos de Lewy y la atrofia multisist�mica.
"Fibrilog�nesis" se refiere a la formación, la deposición, la acumulación y/o la persistencia de fibrillas, filamentos, inclusiones, depósitos de amiloide, as� como fibrillas, filamentos, inclusiones, depósitos o similares de sinucle�na (que habitualmente implica a la α-sinucle�na) y/o NAC.
"Inhibición de la fibrilog�nesis" se refiere a la inhibición de la formación, la deposición, la acumulación y/o la persistencia de dichas fibrillas de amiloide o depósitos similares de fibrillas de sinucle�na.
45 "La ruptura de fibrillas o fibrilog�nesis" se refiere a la ruptura de fibrillas de amiloide o sinucle�na preformadas que est�n presentes en una estructura secundaria predominante de lámina β plegada. Dicha ruptura mediante compuestos de la invención puede implicar una reducción o desensamblaje significativo de fibrillas de amiolide o sinucle�na tal como se evalúa mediante diversos métodos tales como espectroscopia de dicro�smo circular, fluorometr�a de tioflavina T, unión a rojo Congo, SDS-PAGE/inmunotransferencia Western, como se demuestra mediante los ejemplos presentados en la presente solicitud.
"Un agente farmacéutico" o "agente farmacol�gico" o "composición farmacéutica " se refiere a un compuesto o combinacion de compuestos que se usan para el tratamiento, preferentemente en una forma pura o casi pura. En la
55 memoria descriptiva, los agentes farmacéuticos o farmacol�gicos incluyen los compuestos de la presente invención. Los compuestos est�n purificados de forma deseable al 80 % de homogeneidad y, preferentemente, al 90 % de homogeneidad. Se cree que los compuestos y composiciones purificadas al 99,9 % de homogeneidad son ventajosos. Como prueba o confirmación, un compuesto homogéneo adecuado en HPLC rendiría, lo que los expertos en la técnica identificarían como una única banda de pico agudo.
Compuestos de la invención
Los compuestos de la presente invención son:
65 Compuestos de la fórmula:
o una sal farmac�uticamente aceptable de los mismos, en la que:
5 R es un grupo alquileno C6-C10, en el que hay: i) opcionalmente 1 o 2 enlaces dobles no adyacentes; ii) 1 a 3 grupos metileno no adyacentes est�n reemplazados por NR', O o S, en la que R’ es H, acilo C2-4 o alquilo C13 y iii) 2 grupos metileno est�n reemplazados por un grupo carbonilo o hidroximetileno.
10 Compuestos de la invención particularmente preferidos incluyen:
15 Síntesis de los compuestos de la invención
Los compuestos de la presente invención pueden prepararse mediante métodos conocidos, en general, por el experto en la técnica, con respecto al conocimiento y la divulgación de la presente solicitud, incluidos los ejemplos 1
24. 20
Los materiales de partida y reactivos usados en la preparación de estos compuestos o bien est�n disponibles de proveedores comerciales tales como Aldrich Chemical Company (Milwaukee, WI), Bachem (Torrance, CA), Sigma (St Louis, MO) or Lancaster Synthesis Inc. (Windham, NH) o bien se preparan mediante métodos bien conocidos por el experto en la técnica, siguiendo procedimientos descritos en referencias tales como Fieser and Fieser's Reagents
5 for Organic Synthesis, vol. 1-17, John Wiley and Sons, Nueva York, NY, 1991; Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, vol. 1-5 y supl., Elsevier Science Publishers, 1989; Organic Reactions, vol.1-40, John Wiley and Sons, Nueva York, NY, 1991; Marzo J.: Advanced Organic Chemistry, 4� ed., John Wiley and Sons, Nueva York, NY; y Larock: Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Nueva York, 1989.
En la mayor parte de los casos, se introducen grupos protectores de los grupos hidroxilo y finalmente se retiran. Grupos protectores adecuados se describen por Greene y col., Protective Groups in Organic Synthesis, segunda edición, John Wiley and Sons, Nueva York, 1991. Un grupo protector preferente es el grupo metilendioxi, como se observa en muchos de los Ejemplos 1-23, y una amplia diversidad de compuestos de metilendioxifenilo (tales como 3,4-metilendioxiacetofenona, 3,4-metilendioxianilina, 3,4-metilendioxibenzaldeh�do, ácido 3,4-metilendioxibenzoico,
15 3,4-metilendioxibenzonitrilo, ácido 3,4-metilendioxibenzoico, cloruro de 3,4-metilendioxibenzo�lo, ácido 3,4metilendioxicin�mico, 3,4-metilendioxinitrobenceno, 3,4-metilendioxifenol, ácido 3,4-metilendioxifenilac�tico, 3,4metilendioxifenilacetonitrilo, isocianato de 3,4-metilendioxifenilo, bromuro de 3,4-metilendioxifenilmagnesio y 3,4metilendioxifenilmetanol) est�n disponibles comercialmente. También pueden usarse otros grupos protectores, tales como los grupos bencilo y metoximetilo.
Pueden prepararse otros materiales de partida o intermedios cercanos mediante la elaboración de los materiales enumerados anteriormente, por ejemplo, mediante métodos bien conocidos por un experto en la técnica.
Los materiales de partida, intermedios y compuestos de la presente invención pueden aislarse y purificarse usando
25 técnicas convencionales, incluidas precipitación, filtración, destilación, cristalización, cromatograf�a y similares. Los compuestos pueden caracterizarse usando métodos convencionales, incluidas constantes físicas y métodos espectroscópicos.
Farmacolog�a y utilidad
Los compuestos de la presente invención actúan inhibiendo o previniendo la formación de fibrillas de amiloide, inhibiendo y previniendo el crecimiento de fibrillas de amiloide y/o causando el desensamblaje, la ruptura y/o la disgregaci�n de fibrillas de amiloide preformadas y depósitos de proteínas amiloideas. Su actividad puede medirse in vitro mediante métodos tales como los tratados en los Ejemplos 25-27, mientras que su actividad in vivo contra la
35 amiloidosis puede medirse en modelos de animales, tales como los modelos de ratones transg�nicos APP que imitan muchas de las características neuropatol�gicas de la enfermedad de Alzheimer en seres humanos.
“Enfermedades que implican amoloide” o “amiloidosis” adecuadas para el tratamiento con los compuestos de la presente invención son enfermedades asociadas con la formación, la deposición, la acumulación o la persistencia de fibrillas de amiloide, especialmente las fibrillas de una proteína de amiloide seleccionada del grupo de amiloide Aβ, amiloide AA, amiloide AL, amiloide IAPP, amiloide PrP, amiloide de α2-microglobulina, transtiretina, prealb�mina y procalcitonina, especialmente amiloide Aβ y amiloide IAPP. Dichas enfermedades adecuadas incluyen enfermedad de Alzheimer, síndrome de Down, demencia pugil�stica, atrofia multisist�mica, miositosis por cuerpos de inclusión, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, enfermedad de Nieman-Pick de tipo C, angiopat�a
45 cerebral β-amiloidea, demencia asociada con degeneración basal cortical, la amiloidosis de la diabetes de tipo 2, la amiloidosis de inflamación crónica, la amiloidosis de tumor maligno y fiebre mediterránea familiar, la amiloidosis de mieloma múltiple y discrasias de linfocitos B, la amiloidosis de las enfermedades pri�nicas, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, síndrome de Gerstmann-Straussler, kuru, tembladera, la amiloidosis asociada con el síndrome del túnel carpiano, amiloidosis cardiaca senil, polineuropat�a amiloid�tica familiar y la amiloidosis asociada con tumores endocrinos, especialmente la enfermedad de Alzheimer y la diabetes de tipo 2.
Los compuestos también actúan inhibidiendo o previniendo la formación de fibrillas de α-sinucle�na/NAC, inhibiendo
o previniendo el crecimiento de fibrillas de α-sinucle�na/NAC y/o provocando el desensamblaje, la ruptura y/o la disgregaci�n de fibrillas de α-sinucle�na/NAC preformadas y depósitos de proteínas asociadas con α
55 sinucle�na/NAC. Su actividad puede medirse in vitro mediante métodos similares a los abordados en los Ejemplos 24-26, o in vivo en modelos de animales tales como los modelos de ratón transg�nico de α-sinucle�na que imitan algunas de las características neuropatol�gicas de la enfermedad de Parkinson y en seres humanos.
"Enfermedades que implican la sinucle�na" o "sinucleinopat�as" adecuadas para el tratamiento con los compuestos de la presente invención son enfermedades asociadas con la formación, la deposición, la acumulación o la persistencia de fibrillas de sinucle�na, especialmente fibrillas de α-sinucle�na. Dichas enfermedades adecuadas incluyen la enfermedad de Parkinson, enfermedad de Parkinson familiar, enfermedad de cuerpos de Lewy, la variante de cuerpos de Lewy de la enfermedad de Alzheimer, demencia con cuerpos de Lewy, atrofia multisist�mica y complejo parkinsonismo-demencia de Guam.
65 La relación terapéutica de un compuesto puede determinarse, por ejemplo, comparando la dosis que proporciona una actividad contra las fibrillas (antiamiloide o anti-α-sinucle�na/NAC) en un modelo adecuado in vivo en una especia animal adecuada tal como el ratón, con la dosis que da una pérdida de peso significativa (u otros efectos secundarios observables) en el ensayo en especies animales.
5 Composiciones farmacéuticas y administración
En general, los compuestos de la invención se administrarán en cantidades terapéuticamente eficaces mediante cualquiera de las maneras habituales conocidas en la técnica, bien solos o bien en combinación con al menos otro compuesto de la presente invención y/o al menos otro agente terapéutico convencional contra la enfermedad que se esta tratando. Una cantidad terapéuticamente eficaz puede variar ampliamente dependiendo de la enfermedad, su gravedad, la edad y la salud relativa del animal que se est� tratando, la potencia del compuesto o de los compuestos y otros factores. Como agentes antifibrillas, las cantidades terapéuticamente eficaces de los compuestos de la presente invención pueden variar de 0,1-1000 mg/kg de peso corporal/día, tal como de 1-100 mg/kg/día; por
15 ejemplo, 10-100 mg/kg/día. Un experto en la técnica ser� capaz, de forma convencional, y sin demasiada experimentación, teniendo en cuenta su experiencia y la presente divulgación, de determinar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto para el tratamiento de una enfermedad que implique amiloide tal como una amiloidosis o formación de fibrillas de α-sinucle�na/NAC.
Las composiciones preferentes contendrán un compuesto de la presente invención que sea al menos sustancialmente puro. En general, "puro" significa con una pureza superior al 95 %, y "sustancialmente puro" significa un compuesto sintetizado de modo que el compuesto, tanto fabricado como disponible, con respecto a una dosificación terapéutica, tiene solo las impurezas que no pueden eliminarse fácilmente de forma razonable mediante procesos de purificación convencionales.
25 En general, los compuestos de la presente invención se administran como composiciones farmacéuticas por una de las vías siguientes: oral, típica, sist�mica (por ejemplo, transd�rmica, intranasal, o por supositorio) o parenteral (por ejemplo inyección intramuscular, subcutánea o intravenosa). Las composiciones pueden tomar la forma de comprimidos, píldoras, cápsulas, semis�lidos, polvos, formulaciones de liberación mantenida, soluciones, suspensiones, elixires, aerosoles o cualquier otra composición adecuada; y comprenden al menos un compuesto de la presente invención en combinación con al menos un excipiente farmac�uticamente aceptable. Los excipientes adecuados son bien conocidos por los expertos, y los mismos y los métodos de formulación de las composiciones, pueden encontrarse en referencias estándar como Remington: The Science and Practice of Pharmacy, A. Gennaro, ed., 20th edition, Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA.. Los vehículos líquidos adecuados, especialmente
35 para soluciones inyectables, incluyen agua, solución salina acuosa, solución de dextrosa acuosa y glicoles.
En particular, el compuesto o los compuestos (de forma óptima se administra solo un compuesto de este tipo en cualquier forma de dosificación particular) se pueden administrar por vía oral, por ejemplo, como comprimidos, trociscos, pastillas masticables, suspensión acuosa u oleosa, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas duras o blandas, jarabes o elixires. Las composiciones destinadas al uso oral se pueden preparar según cualquier método conocido en la técnica de la fabricación de composiciones farmacéuticas y dichas composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste en edulcorantes, saborizantes, colorantes y conservantes para proporcionar preparaciones farmac�uticamente elegantes y agradables al gusto.
45 Los comprimidos contienen el compuesto en mezcla con excipientes farmac�uticamente aceptables, no tóxicos, que son adecuados para la fabricación de comprimidos. Esos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio; agentes de granulación y disgregantes, por ejemplo, almidón de maíz o ácido alg�nico; aglutinantes, por ejemplo, almidón de maíz, gelatina o goma acacia y lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio o ácido esteárico o talco. Los comprimidos pueden no recubrirse o pueden recubrirse usando técnicas conocidas para retardar su disgregaci�n y su absorción en el tubo digestivo y proporcionar, de este modo, una acción mantenida durante un período más prolongado. Por ejemplo, puede usarse un material de retardo temporal tal como monoestearato de glicerina o diestearato de glicerina. Las formulaciones para uso oral también pueden estar presentes como cápsulas de gelatina dura en las que se mezcla el principio activo con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato
55 de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blanda en las que el principio activo se mezcla con agua o un medio oleoso, por ejemplo aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.
Las suspensiones acuosas contienen el compuesto en mezcla con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Dichos excipientes son agentes de suspensión, por ejemplo, carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto y goma acacia; los dispersantes o humectantes pueden ser fosf�tidos de origen natural, por ejemplo, lecitina, o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos, por ejemplo estearato de polioxietileno, o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alif�ticos de cadena larga, por ejemplo, heptadecaetilenoxicetanol o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos como hexitol, 65 como monooleato de polioxietileno-sorbitol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales de ácidos grasos y un anh�drido de hexitol, por ejemplo, monooleato de polietileno-sorbit�n. Las suspensiones
acuosas también pueden contener uno o más conservantes, por ejemplo, p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno
o más colorantes, uno o más saborizantes, o uno o más edulcorantes como sacarosa o sacarina.
Las suspensiones oleosas se pueden formular suspendiendo el compuesto en un aceite vegetal, por ejemplo aceite
5 de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco, o en un aceite mineral como parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un espesante, por ejemplo cera de abejas, parafina dura o alcohol cet�lico. Se pueden añadir edulcorantes, tales como los indicados a continuación, y saborizantes para proporcionar una preparación oral agradable al gusto. Estas composiciones se pueden conservar añadiendo un antioxidante como ácido asc�rbico. Los polvos y los gránulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua, proporcionan al principio activo en mezcla con un dispersante o humectante, un agente de suspensión y uno o más conservantes. Los dispersantes o humectantes y los agentes de suspensión adecuados est�n ejemplificados por los descritos ya anteriormente. También pueden estar presentes otros excipientes, por ejemplo edulcorantes, saborizantes y agentes.
15 Los compuestos de la invención pueden estar en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, por ejemplo aceite de oliva o aceite de cacahuete, o un aceite mineral, por ejemplo parafina líquida, o mezcla de los mismos. Los emulsionantes adecuados pueden ser gomas de origen natural, por ejemplo goma acacia o goma tragacanto, fosf�tidos de origen natural, por ejemplo soja, lecitina y ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anh�dridos de hexitol, por ejemplo monooleato de sorbit�n, y productos de condensación de dichos ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo monooleato de polioxietileno-sorbit�n. La emulsión también puede contener edulcorantes y saborizantes. Los jarabes y elixires se pueden formular con edulcorantes, por ejemplo, glicerina, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones también pueden contener un emoliente, un conservante y saborizantes y colorantes.
25 Los compuestos de la invención también se pueden administrar mediante inyección o infusión, bien por vía subcutánea o bien intravenosa, o intramuscular o intraesternal o intranasal, o mediante técnicas de infusión en forma de inyectable estéril o suspensión oleaginosa. Los compuestos también pueden estar en forma de suspensiones acuosas u oleaginosas inyectables estériles. Esas suspensiones se pueden formular según la técnica conocida usando dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados que se han descrito anteriormente. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente no tóxico parenteralmente aceptable, por ejemplo, como una solución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden usar se encuentran agua, solución de Ringer y solución isot�nica de cloruro de sodio. Además, convencionalmente se usan aceites fijos, estériles, como disolvente o medio de suspensión. Para este propósito se pueden usar convencionalmente todos los aceites fijos blandos, incluidos mono
35 o diglic�ridos sintéticos. Además, se usan ácidos grasos, como el ácido oleico, en la preparación de inyectables. Los regímenes de dosificación pueden ajustarse para proporcionar una respuesta terapéutica óptima. Por ejemplo, se pueden administrar diariamente varias dosis divididas o la dosis se puede reducir proporcionalmente en función de las exigencias de la situación terapéutica.
Es especialmente ventajoso formular los compuestos en una forma farmacéutica unidad para facilitar la administración y la uniformidad de dosis. Forma farmacéutica unidad, tal como se usa en el presente documento, se refiere a unidades físicamente diferenciadas adecuadas como dosis unitarias para los sujetos que se van a tratar, conteniendo cada una una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto y al menos un excipientes farmacéutico. Un producto farmacéutico comprender� una forma farmacéutica unidad dentro de un envase que est� etiquetado o
45 est� acompañado por una etiqueta que indica el método de tratamiento pretendido, tal como el tratamiento de una amiloidosis, por ejemplo una amiloidosis tal como la enfermedad de Alzheimer o una enfermedad asociada a la formación de fibrillas de α-sinucle�na/NAC tal como la enfermedad de Parkinson.
Formulaciones de liberación mantenida
La invención también incluye la utilización de formulaciones de liberación mantenida para suministrar los compuestos de la presente invención a la diana deseada (es decir, el cerebro u órganos sist�micos) a niveles en circulación elevados (entre 10-9 y 10-4 M) son también divulgados. En una realización preferente para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer o de Parkinson, los niveles en circulación de los compuestos se mantienen hasta
55 una concentración 10-7 M. Los niveles est�n bien en circulación en el paciente de forma sist�mica o bien, en una realización preferente, est�n presentes en el tejido cerebral, y en las realizaciones más preferentes, est�n ubicados en los depósitos de fibrillas de amiloide o de α-sinucle�na en el cerebro u otros tejidos.
Se entiende que los niveles de compuestos de mantienen durante un determinado periodo de tiempo como se desee y pueden determinarse fácilmente por un experto en la técnica usando la divulgación y los compuestos de la invención. En una realización preferente, la invención incluye una característica única de administración que comprende una formulación de liberación mantenida de modo que se mantenga un nivel constante de compuesto terapéutico entre 10-8 y 10-6 M entre 48 y 96 horas en el suero.
65 Dichas formulaciones de liberación mantenida y/o prolongada pueden fabricarse con medios de liberación mantenida de dispositivos de administración que son bien conocidos por los expertos en la técnica, tales como los descritos en las patentes de Estados Unidos N� 3.845.770; 3.916.899; 3.536.809; 3. 598.123; 4.008.719; 4.710.384; 5.674.533; 5.059.595; 5.591.767; 5.120.548; 5.073.543; 5.639.476; 5.354.556 y 5.733.566.
Estas composiciones farmacéuticas pueden usarse para proporcionar una liberación lenta o mantenida de uno o
5 más de los compuestos activos usando, por ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa, otras matrices polim�ricas, geles, membranas permeables, sistemas osm�ticos, recubrimientos de varias capas, micropart�culas, liposomas, microesferas y similares. Las formulaciones de liberación mantenida conocidas por los expertos en la técnica, incluidas las descritas en el presente documento, pueden seleccionarse fácilmente para usar con las composiciones farmacéuticas de la invención. De este modo, est�n abarcadas por la presente invención formas de dosificación unidad individuales para la administración por vía oral tales como, pero sin limitación, comprimidos, cápsulas, cápsulas de gelatina, comprimidos oblongos, polvos y similares, que est�n adaptadas para una liberación mantenida.
En una realización preferente, la formulación de liberación mantenida contiene compuestos activos tales como, pero
15 sin limitación, celulosa microcristalina, maltodextrina, etilcelulosa y estearato de magnesio. Tal como se ha descrito anteriormente, todos los métodos conocidos de encapsulaci�n que son compatibles con las propiedades de los compuestos divulgados est�n abarcadas por la presente invención. La formulación de liberación mantenida se encapsula mediante partículas o gránulos de recubrimiento de la composición farmacéutica de la invención con espesor variable de pol�meros de solubilizaci�n lenta o mediante microencapsulaci�n. En una realización preferente, la formulación de liberación mantenida es encapsulada con un material de recubrimiento de espesor variable (por ejemplo, aproximadamente 1 micrómetro a 200 micrómetros) que permite la disolución de la composición farmacéutica de aproximadamente 48 horas a aproximadamente 72 horas después de la administración a un mamífero. En otra realización, el material de recubrimiento es un aditivo aprobado para uso alimentario.
25 En otra realización, la formulación de liberación mantenida es un dispositivo de disolución de matriz que se prepara prensando el fármaco con un vehículo polim�rico de disolución lenta dando un comprimido. En una realización preferente, las partículas recubiertas tienen un intervalo de tamaño de entre aproximadamente 0,1 a aproximadamente 300 micrómetros, como se divulga en las patentes de Estados Unidos N� 4.710.384 y 5.354.556.
Cada una de las partículas est� en forma de una micromatriz, con el ingrediente activo distribuido uniformemente a través del pol�mero.
Se divulgan formulaciones de liberación mantenida, tales como las descritas en la patente de Estados Unidos N� 4.710.384, que tienen un porcentaje de plastificante en el recubrimiento para permitir una flexibilidad suficiente para 35 prevenir la rotura sustancial durante el prensado. La cantidad específica de plastificante varía dependiendo de la naturaleza del recubrimiento y del plastificante particular usado. La cantidad puede determinarse fácilmente analizando las características de liberación de los comprimidos formados. Si el medicamento se libera de forma demasiado rápida, se usa más plastificante. Las características de liberación también son función del espesor del recubrimiento. Cuando se usan cantidades sustanciales de plastificante, la capacidad de liberación mantenida del recubrimiento disminuye. De este modo, el espesor del recubrimiento puede aumentarse ligeramente para obtener un aumento de la cantidad de plastificante. El general, el plastificante, en dicha realización, estar� presente en una cantidad de aproximadamente el 15 al 30 % del material de liberación mantenida en el recubrimiento, preferentemente del 20 al 25 %, y la cantidad de recubrimiento ser� del 10 al 25 % del peso del material activo, preferentemente del 15 al 20 %. Puede incorporarse al recubrimiento cualquier plastificante farmac�uticamente
45 aceptable convencional.
Los compuestos de la invención pueden formularse como una formulación de liberación mantenida y/o programada. Todos los productos farmacéuticos de liberación mantenida tienen el objetivo común de mejorar la terapia farmacol�gica con respecto a la lograda por sus homólogos de liberación no mantenida. De forma ideal, el uso de una preparación de liberación mantenida diseñada de forma óptima en un tratamiento m�dico se caracteriza por usar un mínimo de sustancia farmacol�gica para curar o controlar la afección. Las ventajas de las formulaciones de liberación mantenida pueden incluir: 1) actividad prolongada de la composición, 2) frecuencia de dosificación reducida y 3) mayor cumplimiento por parte del paciente. Además, las formulaciones de liberación mantenida pueden usarse para influir en el momento de aparición de la actividad o en otras características, tales como niveles
55 en sangre de la composición, y pueden influir, de este modo, en la aparición de efectos secundarios.
Las formulaciones de liberación mantenida de la invención est�n diseñadas para liberar inicialmente una cantidad de composición terapéutica que produzca abruptamente el efecto terapéutico deseado y para liberar gradualmente y en continuo otras cantidades de composiciones para mantener este nivel de efecto terapéutico durante un periodo de tiempo prolongado. Con el fin de mantener este nivel constante de fármaco en el organismo, la composición farmacéutica debe liberarse de la forma de dosificación a una velocidad que reemplace la composición que se metaboliza o se excreta del organismo.
La liberación mantenida de un ingrediente activo puede estimularse mediante diversos inductores, por ejemplo pH,
65 temperatura, enzimas, agua u otras condiciones fisiológicas o compuestos. La expresión "componente de liberación mantenida" en el contexto de la presente invención se define en el presente documento como un compuesto o compuestos, que incluye, pero sin limitación, pol�meros, matrices polim�ricas, geles, membranas permeables, liposomas, microesferas o similares, o una combinación de los mismos, que facilita la liberación mantenida del ingrediente activo.
5 Si el complejo es soluble en agua, puede formularse en un tampón apropiado, por ejemplo solución salina tamponada con fosfatos u otras soluciones fisiológicamente compatibles. Alternativamente, si el complejo resultante tiene poca solubilidad en disolventes acuosos, entonces puede formularse con un tensioactivo no iónico tal como Tween o polietilenglicol. De este modo, los compuestos y sus disolventes fisiológicos pueden formularse para administración por inhalaci�n o insuflaci�n (bien a través de la boca o de la nariz) o para administración por vía oral, bucal, parenteral o rectal, por ejemplo.
Las preparaciones para administración por vía oral pueden formularse adecuadamente para proporcionar la liberación controlada del compuesto activo. En una realización preferente, los compuestos de la presente invención se formulan como polvos de liberación controlada de micropart�culas discretas que pueden formularse fácilmente en
15 forma líquida. El polvo de liberación mantenida comprende partículas que contienen un ingrediente activo y, opcionalmente, un excipiente con un menos un pol�mero no tóxico.
El polvo puede dispersarse o suspenderse en un vehículo liquido y mantendr� sus características de liberación mantenida durante un periodo de tiempo útil. Estas dispersiones o suspensiones tienen tanto estabilidad química como estabilidad en términos de velocidad de disolución. El polvo puede contener un excipiente que comprende un pol�mero, que puede ser soluble, insoluble, permeable, impermeable o biodegradable. Los pol�meros pueden ser pol�meros o copol�meros. El pol�mero puede ser un pol�mero natural o sintético. Los pol�meros naturales incluyen polip�ptidos (por ejemplo, ze�na), polisac�ridos (por ejemplo, celulosa) y ácido alg�nico. Los pol�meros representativos incluyen los descritos, pero sin limitación, los descritos en la columna 3, líneas 33-45 de la patente
25 de Estados Unidos N� 5.354.556. Los pol�meros particularmente adecuados incluyen los descritos, pero sin limitación, en la columna 3, línea 46-columna 4, línea 8 de la patente de Estados Unidos N� 5.354.556.
Los compuestos de liberación mantenida de la invención pueden formularse para la administración por vía parenteral, por ejemplo, mediante inyecciones intramusculares o implantes para tejidos subcutáneos y diversas cavidades corporales y dispositivos de uso transd�rmico. En una realización, las inyecciones intramusculares se formulan como suspensiones acuosas o en aceite. En una suspensión acuosa, el efecto de liberación mantenida se debe, en parte, a una reducción en la solubilidad del compuesto activo después de la complejaci�n o una disminución de la velocidad de disolución. Se realiza un enfoque similar con suspensiones y soluciones en aceite, en las que la velocidad de un compuesto activo se determina repartiendo el compuesto activo fuera del aceite en el
35 medio acuoso circundante. Solo son adecuados los compuestos activos que son solubles en aceite y tienen las características de reparto deseadas. Los aceites que pueden usarse para inyección intramuscular incluyen, pero sin limitación, aceite de sésamo, de oliva, de cacahuete, de maíz, de almendra, de soja, de semilla de algodón y de ricino.
Una forma muy desarrollada de administración del fármaco que imparte una liberación mantenida durante periodos de tiempo que varían de días a años es implantar un dispositivo pol�mero que porta el fármaco subcut�neamente o en diversas cavidades corporales. El material polim�rico usado en un implante, que debe ser biocompatible y no tóxico, incluye, pero sin limitación, hidrogeles, siliconas, polietilenos, copol�meros de etileno-acetato de vinilo o pol�meros biodegradables.
Ejemplos
Procedimientos experimentales generales
Todos los disolventes se destilaron antes de su uso y después se eliminaron mediante evaporación giratoria a temperaturas de hasta 35 �C. Se us� un gel de sílice funcionalizado con octadecilo (C18) para la cromatograf�a ultrarrápida de fase inversa (RP) y se us� para la cromatograf�a ultrarrápida en gel de sílice el gel de sílice de Merck 60, 200-400 de malla, 40-63 μm. La cromatograf�a en capa fina (TLC) se llev� a cabo usando gel de sílice en laminas de plástico DC 60 F254, visualizado en primer lugar con una lámpara UV y después sumergiéndolo en una
55 solución de vainillina (vainillina al 1 %, H2SO4 al 1 % en etanol) y calent�ndolo. Las rotaciones ópticas se midieron en un polar�metro de Perkin-Elmer 241. Los espectros de masas se registraron en un instrumento Kratos MS-80. Los espectros de RMN, a 25 �C, se registraron a 500 o 300 MHz para 1H y 125 o 75 MHz para 13C en espectrómetros Varian INOVA-500 o VXR-300. Los desplazamientos químicos se dan en ppm en la escala delta referenciada a los picos de disolventes CHCl3 a 7,25 y CDCl3 a 77,0 ppm, (CH3)2CO a 2,15 y (CD3)2CO a 30,5 ppm, o CH3OD a 3,30 y CD3OD a 39,0 ppm.
Condiciones de HPLC
El equipo de HPLC analítica consistió en un automuestreador Waters 717, bomba 600 y controlador y un detector
65 UV 2487 controlado por el programa inform�tico Omega. Las muestras se analizaron usando una columna semipreparativa RP-18 (Phenomenex Prodigy 5 mm C18 100A, 250 x 4,6 mm) con una columna de guardia (cartucho Phenomenex SecurityGuard que contiene una columna C18 ODS 4 x 3 mm, 5 mm) adaptada a 30 �C. Las muestras (5 ml) se analizaron usando un caudal de fase móvil de 5,0 ml/min, con detección UV a 280 nm.
M�todo 1:
Tiempo (minutos)
CH3CN H2O que contiene TFA al 0,1 %
0
11 89
20
11 89
30
100 0
31
11 89
40
11 89
M�todo 2:
Tiempo (minutos)
CH3CN/H2O (95:5) que contiene TFA al 0,1 % H2O que contiene TFA al 0,1 %
0
11 89
20
11 89
30
100 0
31
11 89
40
11 89
10 Ejemplo comparativo 1: 3,4,3',4'-Tetrahidroxibenzo�na (Compuesto 1; DC-0001) Bis(3,4-metilendioxi)benzo�na (compuesto 1B; DC-0001B)
15 Una solución de piperonal (5 g) en etanol (6,5 ml) se trat� con una solución de cianuro de potasio (0,5 g) en agua (5 ml), después se sometió a reflujo durante 5 h. El precipitado resultante se separ� por filtración, se lav� con agua y después se cristaliz� a partir de etanol, dando DC-0001B (2,24 g, 45 %) como un sólido cristalino blancuzco.
RMN de 1H (CDCl3) 7,52 (1H, dd, J 2, 8Hz), 7,39 (1H, d, J 2Hz), 6,73 - 6,82 (4H, m), 6,02 (2H, s), 5,91 (2H, m), 5,76 20 (1H, d, J 6Hz) y 4,51 (1H, d, J 6Hz).
m/z 287 ((M - CH)-, 100 %).
Bis(3,4-metilendioxi)bencilo
Una mezcla de acetato de cobre (20 mg), nitrato de amonio (660 mg) y DC-0001B (2 g) en ácido acético ac. (80 %, 10 ml) se sometió a reflujo conjuntamente durante 90 minutos. La mezcla se enfri�, después se vertió en agua (100 30 ml) y el producto se extrajo en acetato de etilo (2 x 100 ml), se secó y se evapor� al vaci� dando una goma amarilla. La trituración a partir de etanol dio bis(3,4-metilendioxi)bencilo (1,35 g, 68 %) como un sólido amarillo pálido.
RMN de 1H 7,48 (2H, dd, J 2, 8Hz) 7,47 (2H, d, J 2Hz), 6,86 (2H, d, J 8Hz) y 6,08 (4H, s).
3,4,3',4'-Tetrahidroxibencilo
5 A una solución agitada de bis(3,4-metilendioxi)bencilo (500 mg) en CH2Cl2 seco (50 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (1,6 ml), después se continu� agitando durante otras 3,5 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (100 ml), después el disolvente se evapor� al vaci� hasta un volumen de 1 ml; esta adición y evaporación se repitió dos veces. El producto se purificó mediante cromatograf�a en columna sobre gel de sílice, dando la eluci�n con dietil�ter en diclorometano 3,4,3',4'-tetrahidroxibencilo (217 mg, 47 %) como un polvo amarillo.
10 RMN de 1H 9,35 (2H, s ancho), 8,80 (2H, s ancho), 7,48 (2H, d, J 2Hz), 7,34 (2H, dd, J 2, 8Hz) y 7,02 (2H, d, J 8Hz). m/z 273 ((M-H)+, 100 %).
HPLC (método 2) 31,3 minutos.
15 3,4,3',4'-Tetrahidroxibenzo�na (Compuesto 1; DC-0001)
Una solución del tetrahidroxibencilo (200 mg) en metanol (20 ml) con hidróxido de paladio en carbono (20 %, 10 mg) se agit� en atmósfera de hidrógeno durante 5 minutos. La mezcla se filtr� a través de celite y los disolventes se
20 eliminaron al vacío dando una goma naranja. La separación mediante cromatograf�a sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 20 % en diclorometano dio DC-0001 como una goma blancuzca (55 mg, 27 %). La recristalizaci�n a partir de metanol/diclorometano dio DC-0001 puro como un polvo blancuzco (27 mg, 13 %).
RMN de 1H ((CD3)2CO) 7,41 (1H, d, J 2Hz), 7,35 (1H, dd, J 2, 8Hz), 6,75 (1H, d, J 8Hz), 6,73 (1H, d, J 2Hz), 6,69 25 (1H, d, J 8Hz), 6,64 (1H, dd, J 2, 8Hz), 5,69 (1H, d ancho) y 4,60 (1H, d ancho).
RMN de 13C ((CD3)2CO) 198,22, 151,41, 145,77, 145,68, 145,43, 132,79, 127,07, 123,92, 120,52, 116,69, 116,20, 115,59, 115,36 y 75,97. m/z 275 ((M-H)+, 100 %).
30 HPLC (método 1) 7,1 minutos.
Ejemplo comparativo 2: 3,4,3',4'-Tetrahidroxidifenilmetano (Compuesto 3; DC-0003)
Bis(3,4-metilendioxifenil)metanol
A una solución de piperonal (0,75 g) en solución en diclorometano (25 ml) se a�adi� gota a gota bromuro de 3,4(metilendioxi)fenilmagnesio (5 ml, solución 1 M en tolueno/THF). La mezcla se agit� a temperatura ambiente durante
40 la noche, después se vertió en agua, se extrajo con diclorometano, se secó y se evapor� al vacío dando el alcohol bruto como una goma marrón. La purificación mediante cromatograf�a en columna sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo en CH2Cl2 (10 al 20 %) dio el alcohol puro como una goma blanca (1,18 g, 87 %).
RMN de 1H (CDCl3) 6,7-6,8 (6H, m), 5,93 (4H, s), 5,66 (1H, s ancho) y 2,18 (s ancho). 45 Bis(3,4-metilendioxifenil)metano (compuesto 3B; DC-0003B)
Una solución del alcohol (2,61 g) en metanol (25 ml)/tetrahidrofurano (30 ml) se agit� con Pd(OH)2/C (al 20 %, 100 mg) en atmósfera de hidrógeno durante 12 horas. La mezcla se filtr� a través de celite, después los disolventes se 50 eliminaron al vacío dando una goma marrón (2,4 g). La cristalización a partir de acetona dio DC-0003B como cristales blancos (1,14 g, 44 %).
RMN de 1H (CDCl3) 6,6-6,8 (6H, m), 5,90 (4H, s) y 3,79 (2H, s).
55 3,4,3',4'-Tetrahidroxidifenilmetano (Compuesto 3; DC-0003) A una solución agitada de DC-0003B (0,214 mg) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,4 ml), después se continu� agitando durante otras 3,5 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml; esto se repitió después 2 veces más. El producto se purificó mediante cromatograf�a en columna sobre gel de sílice, dando
5 la eluci�n con acetato de etilo DC-0003 (48 %) como un sólido blancuzco.
RMN de 1H ((CD3)2CO) 7,73 (2H, s), 7,66 (2H, s), 6,74 (2H, d, J 8Hz), 6,67 (2H, d, J 2Hz), 6,56 (2H, dd, J 2, 8Hz) y 3,70 (2H, s).
10 RMN de 13C ((CD3)2CO) 146,51, 144,80, 135,34, 121,59, 117,45, 116,64 y 41,90. m/z 232 (M+, 100 %).
HPLC (método 1) 31,1 minutos.
Ejemplo comparativo 3: 1,2-bis(3,4-dihidroxifenil)etano (compuesto 4; DC-0004) 15
1,2-bis(3,4-dihidroxifenil)etano (compuesto 4; DC-0004)
20 Una solución del tetrahidroxibencilo (véase el Ejemplo 1) (70 mg) en metanol (10 ml) con hidróxido de paladio en carbono (al 20 %, 10 mg) se agit� en atmósfera de hidrógeno durante 2 minutos. La mezcla se filtr� a través de celite y los disolventes se eliminaron al vacío dando una goma naranja. La separación mediante cromatograf�a sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 20 % en diclorometano dio DC-0004 como una goma blancuzca (43 g, 68 %).
25 RMN de 1H ((CD3)2CO) 7,73 (4H, s ancho), 6,80 (2H, d, J 8Hz), 6,79 (2H, d, J 2Hz), 6,62 (2H, dd, J 2, 8Hz) y 2,79 (4H, s). m/z 245 ((M-H)+, 100 %).
HPLC (método 2) 31,7 minutos.
30 Ejemplo comparativo 4: 4,6-bis(3,4-dihidroxifenil)-3-ciano-2-metilpiridina (compuesto 8; DC-0008)
4,6-bis(3,4-metilendioxifenil)-3-ciano-2-metilpiridina (compuesto 8B; DC-0008B) A una solución de la chalcona (véase más adelante) (300 mg, 1,0 mmol) y 3-aminocrotonitrilo (82 mg, 1,2 mmol) en acetonitrilo seco se a�adi� terc-but�xido de potasio (560 mg) y la mezcla se agit� durante 18 h. La mezcla se vertió
5 después en agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó y se evapor� al vacío. La recristalizaci�n a partir de diclorometano/éter dio DC-0008B (152 mg, 42 %) como un polvo blancuzco. RMN de 1H (CDCl3) 7,60 (2H, m), 7,52 (1H, s), 7,10 (2H, m), 6,93 (2H, m), 6,07 (2H, s), 6,05 (2H, s) y 2,87 (3H, s).
10 m/z 359 ((M+1)+, 100 %). 4,6-bis(3,4-dihidroxifenil)-3-ciano-2-metilpiridina (compuesto 8; DC-0008) A una solución agitada de DC-0008B (0,10 g) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi�
15 lentamente tribromuro de boro (0,2 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml; esto se repitió después 2 veces más. El producto se recristaliz� a partir de metanol/acetone dando DC-0008 puro como cristales amarillos pequeños (64 mg, 69 %).
20 RMN de 1H ((CD3)2CO) 8,19 (1H, s), 7,86 (1H, d, J 2Hz), 7,75 (1H, dd, J 2, 8Hz), 7,58 (1H, d, J 2Hz), 7,45 (1H, dd, J 2, 8 Hz), 7,16 (1H, d, J 8Hz), 7,13 (1H, d, J 8Hz) y 2,73 (3H, s). m/z 335 ((M+1)+, 100 %). 25 HPLC (método 2) 31,8 minutos. Bis(3,4-metilendioxi)chalcona (compuesto 6B; DC-0006B)
30 Una mezcla de piperonal (460 mg) y 3,4-metilendioxiacetofenona (500 mg) en etanol (20 ml) se trat� con solución 1 M de NaOH (4 ml), después la mezcla se agit� durante la noche. El sólido cristalino amarillo pálido se separ� por filtración, se lav� con agua, después con etanol acuoso frío y se secó dando bis(3,4-metilendioxi)chalcona pura DC0006B (476 mg, 53 %).
35 RMN de 1H (CDCl3) 7,72 (1H, d, J 16Hz), 7,64 (1H, dd, J 2, 8Hz), 7,52 (1H, d, J 2Hz), 7,33 (1H, d, J 16Hz), 7,16 (1H, d, J 2Hz), 7,12 (1H, dd, J 2, 8Hz), 6,89 (1H, d, J 8Hz), 6,84 (1H, d, J 8Hz), 6,06 (2H, s) y 6,03 (2H, s).
m/z 297 ((M+1)+, 100 %). 40 Ejemplo comparativo 5: 1,4-bis(3,4-dihidroxibencil)piperazina (compuesto 9; DC-0009)
M�todo 1 - mediante compuestos protegidos con metilendioxi
1,4-bis-(3,4-metilendioxibencil)piperazina (DC-0009B) A una solución de piperazina (207 mg) en DMF seca (5 ml) en atmósfera de nitrógeno se a�adi� hidruro de sodio (al
80 % p/p en aceite, 250 mg), seguido por cloruro de 3,4-metilendioxibencilo (0,90 g) y la mezcla se agit� a temperatura ambiente durante la noche. Se a�adi� lentamente NaOH (50 ml, 1 M), después solución saturada de NaCl (50 ml) y el producto se extrajo con diclorometano (2 x 100 ml). La capa orgánica se lav� con agua (2 x 100 ml), se secó y se evapor� al vacío dando un sólido blanco. La cromatograf�a en columna eluyendo con proporciones
5 crecientes de éter en diclorometano dio DC-0009B puro (0,68 g, 80 %) como un polvo blanco.
RMN de 1H (CDCl3) 6,85 (2H, s), 6,70 (4H, s), 5,94 (4H, s), 3,42 (4H, s) y 2,45 (8H, a ancho). m/z 355 ((M+1)+, 100 %).
10 1,4-bis-(3,4-dihidroxibencil)piperazina (DC-0009)
A una solución agitada de DC-0009B (200 mg) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,6 ml), después se continu� agitando durante otras 30 minutos. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml y esta adición
15 y evaporación se repitió dos veces. La purificación mediante cromatograf�a en columna sobre gel de sílice eluyendo con metanol al 20 % en cloroforma dio una fracción que contenía producto bruto DC-0009 (51 mg, 27 %) como un polvo blanco.
RMN de 1H ((CD3)2CO) 6,88 2H, d, J 2Hz), 6,78 (2H, d, J 8Hz), 6,67 (2H, dd, J 2, 8Hz), 3,36 (4H, s) y 2,50 (8H, s 20 ancho).
RMN de 13C ((CD3)2CO) 146,50, 145,85, 131,17, 122,15, 117,78, 116,44, 63,72 y 54,23. m/z 331 ((M+H)+, 100 %)
HPLC (método 2) 3,79, 3,22 minutos para las formas monoprotonadas y diprotonadas.
25 Método 2 - mediante compuestos protegidos con metoxi
30 Cluroro de 3,4-dimetoxibencilo
Se disolvió alcohol 3,4-dimetoxibenc�lico (20 g, 119 mmol) en tolueno (60 ml) y se enfri� a 0 �C. Se a�adi� gota a gota cloruro de tionilo (7,48 g, 61,4 mmol) a la solución enfriada del alcohol durante un periodo de 30 minutos y la reacción se mantuvo a 0 �C durante 30 minutos adicionales. La reacción se inactiv� vertiéndola en una mezcla de
35 hielo/agua (100 ml) y la fase orgánica se separ�. La fase acusa se extrajo después en tolueno (2 x 20 ml) y la solución de tolueno combinada se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El tolueno se elimin� a presión reducida proporcionando un aceite que solidific� en reposo, con un rendimiento de 21 g. El material se caracterizó como una única mancha mediante cromatograf�a de capa fina (TLC).
40 1,4-Bis(3,4-dimetoxibencil)piperazina
Se combin� cloruro de 3,4-dimetoxibencilo (10 g, 53,6 mmol) con piperazina (2,3 g, 26,8 mmol) en DMF anhidra (30 ml) y se calentó con agitaci�n en atmósfera de nitrógeno durante 8 horas a 95-100 �C. La mezcla de reacción enfriada se diluyó con agua (100 ml) y se acidific� hasta pH 1 con ácido clorhídrico concentrado. El precipitado
45 blanco se recogió por filtración y se lav� con agua (50 ml). El sólido se resuspendi� en agua (50 ml) y el pH se ajust� a > 9 mediante la adición gota a gota de hidróxido de sodio (NaOH al 50 % en agua). El sólido blanco resultante se recogió por filtración y se secó al vacío a 50 �C, proporcionando 10 g.
1,4-bis-(3,4-dihidroxibencil)piperazina (DC-0009)
Se combin� 1,4-bis(3,4-dimetoxibencil)piperazina (5 g, 12,95 mmol) con ácido bromh�drico (50 ml de solución al 48 % p/p en agua) y la solución se calentó lentamente en un periodo de 1 hora a 145 �C. La reacción se mantuv� a 145 �C durante 12 h, momento en el que la TLC revel� la desaparición del material de partida. La solución enfriada se 5 diluyó con agua (200 ml), se neutralizó cuidadosamente con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y se a�adi� acetato de etilo (100 ml). La mezcla de disolventes acuosos bruta se filtr� a través de celite y se separ� la capa de acetato de etilo. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 ml) y los extractos combinados se lavaron con agua (50 ml) y se secaron (Na2SO4). El disolvente se elimin� a presión reducida y el residuo se recristaliz� a partir de tolueno y metiletilcetona proporcionando el producto DC-0009, 100 mg (98 % de pureza por
10 análisis HPLC).
Ejemplo comparativo 6: N,N'-bis(3,4-dihidroxibencil)-trans-1,2-diaminociclohexano (compuesto 12; DC-0012)
15 N,N'-bis(3,4-metilendioxibencil)-trans-1,2-diaminociclohexano (compuesto 12B; DC-0012B)
A una solución de piperonal (0,8 g, 5,3 mmol) y 1,2-diaminociclohexano (0,296 g, 2,6 mmol) en metanol seco (25 ml) se a�adi� cianoborohidruro de sodio (0,38 g, 6 mmol) y la mezcla se agit� durante 48 h. La mezcla se filtr� y los
20 disolventes se eliminaron al vacío dando el producto bruto. La cristalización a partir de metanol dio DC-0012B como un sólido cristalino blancuzco (0,298 g, 30 %). RMN de 1H (CDCl3) 6,83 (2H, s), 6,75 (4H, s), 5,94 (4H, m), 3,80 (2H, d, J 13Hz), 3,56 (2H, d, J 13Hz), 2,22 (2H, m), 2,18 (2H, m), 1,74 (4H, m), 1,22 (2H, m) y 1,02 (2H, m).
N,N'-bis(3,4-dihidroxibencil)-trans-1,2-diaminociclohexano (compuesto 12; DC-0012)
25 A una solución agitada de DC-0012B (0,25 g) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,31 ml), después se continu� agitando durante otras 4 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (100 ml) y el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml; esta adición y evaporación se repitió después dos veces más y después se a�adi� agua (2 ml) y el producto se liofilizó, dando DC
30 0012 como un sólido marrón pálido (150 mg, 64 %).
RMN de 1H (D2O) 6,88 (2H, s ancho), 6,84 (2H, d, J 8Hz), 6,76 (2H, d ancho, J 8Hz), 4,20 (2H, d, J 13 Hz), 3,98 (2H, d, J 13 Hz), 3,41 (2H, s ancho), 2,24 (2H, s ancho),1,74 (2H, s ancho), 1,63 (2H, s ancho) y 1,40 (2H, s ancho). m/z 359 ((M+1)+, 100 %).
35 HPLC (método 2) 8,2 minutos.
Ejemplo comparativo 7: 2,4-bis(3,4-dihidroxibencil)-3-tropinona (compuesto 19; DC-0019)
Una mezcla de tropinona (418 mg, 3 mmol) y 3,4-metilendioxibenzaldeh�do (900 mg, 6 mmol) en etanol (20 ml) se trat� con solución 1 M de NaOH (4 ml) y después la mezcla se agit� durante la noche. El sólido cristalino amarillo se 5 separ� por filtración, se lav� con agua, después con etanol acuoso frío y se secó dando DC-0019P (938 mg, 77 %).
RMN de 1H (CDCl3) 7,73 (2H, s), 6,88 (6H, m), 6,02 (4H, s), 4,39 (2H, m), 2,60 (2H, m), 2,31 (3H, s) y 1,98 (2H, c, J 8Hz).
10 m/z 404 ((M+1)+, 100 %).
2,4-bis(3,4-metilendioxibencil)-3-tropinona (compuesto 19B; DC-0019B)
Una mezcla de DC-0019P (500 mg, 1,24 mmol) y Pd/C al 10 % (100 mg) en acetato de etilo (50 ml) se agit� durante 15 la noche en atmósfera de hidrógeno. La mezcla se filtr� a través de Celite y se evapor� al vacío. La cristalización del residuo a partir de diclorometano/éter dio DC-0019B puro (366 mg, 72 %) como un sólido cristalino blanco.
RMN de 1H (CDCl3) 6,69 (2H, d, J 8Hz), 6,61 (2H, d, J 2Hz), 6,58 (2H, dd, J 2, 8Hz), 5,90 (4H, s), 3,17 (4H, m), 2,86 (2H, m), 2,36 (3H, s), 2,24 (2H, dd, J 8, 12Hz), 1,83 (2H, m) y 1,60 (2H, c, J 8Hz). 20 m/z 408 ((M+1)+, 100 %).
2,4-bis(3,4-dihidroxibencil)-3-tropinona (compuesto 19; DC-0019)
25 A una solución agitada de DC-0019B (0,10 g) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,2 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml; esto se repitió 2 veces más. El producto se cristaliz� a partir de metanol, dando DC-0019 puro (42 mg, 45 %) como un sólido blanco.
30 RMN de 1H (D2O) 6,75 (2H, d, J 8Hz), 6,68 (2H, d, J 2Hz), 6,59 (2H, dd, J 2, 8Hz), 3,84 (2H, s ancho), 3,31 (4H, s), 3,07 (2H, dd, 6, 14Hz), 2,82 (3H, s), 2,37 (dd, J 8, 14Hz) y 2,05 (2H, d 8Hz). m/z 384 ((M+1)+, 100 %).
HPLC (método 2) 30,9 minutos.
35 Ejemplo comparativo 8: 3,4-dihidroxibencilamida del ácido α-(3,4-dihidroxibenzamido)-3,4-dihidroxicin�mico (compuesto 21; DC-0021)
2-(3,4-metilendioxifenil)-4-(3,4-metilendioxibencilamino)metilen-4H-oxazol-5-ona (DC-0021P)
5 DC-0021P también se denomina DC-0022B y est� disponible comercialmente. Se prepar� a partir del ácido (3,4metilendioxibenzoil)aminoac�tico [ácido 3,4-metilendioxihip�rico] (preparado mediante el método de Acheson y col.,
J. Chem. Soc. Abstracts, 1960:3457-3461, a partir del ácido 3,4-metilendioxibenzoico), mediante reacción con piperonaladeh�do usando el método descrito por Van der Eycken y col., Tet. Lett., 30(29):3873-3876, 1989.
10 RMN de 1H (CDCl3) 8,09 (1H, d, J 2Hz), 7,75 (1H, dd, J 2, 8Hz), 7,62 (1H, d, J 2Hz), 7,45 (1H, dd, J2, 8Hz), 7,12 (1H, s), 6,94 (1H ,d, J 8Hz), 6,90 (1H, d, J 8Hz), 6,11(2H, s) y 6,08 (2H, s).
m/z = 338 (M+H)+.
15 3,4-metilendioxibencilamida del ácido α-(3,4-metilendioxibenzamido)-3,4-metilendioxicin�mico (compuesto 21B; DC0021B)
Una mezcla de DC-0021P (250 mg, 0,74 mmol) y 3,4-metilendioxibencilamina (0,112 g, 0,74 mmol) en ácido acético (glacial, 3 ml) se calento conjuntamente a reflujo durante 30 minutos. La reacción se inactiv� con acetato de etilo, se
20 lav� con bicarbonato de sodio, se secó y se evapor� al vacío dando el producto bruto. La purificación mediante cromatograf�a en columna, eluyendo con hexano/acetato de etilo (50/50), seguida por recristalizaci�n a partir de etanol/agua dio DC-0021B puro (218 mg, 60 %).
RMN de 1H ((CD3)2CO) 9,09 (1H, s ancho), 8,06 (1H, t ancho, J 7Hz), 7,70 (1H, dd, J 2, 8Hz), 7,56 (1H, d, J 2Hz), 25 7,37 (1H, s), 7,16 (1H, d, J 2Hz), 7,08 (1H, dd, J 2, 8Hz), 7,00 (1H, d, J 8Hz), 6,94 (1H, d, J 2Hz), 6,86 (1H, d, J 8 Hz), 6,84 (1H, dd, J2, 8Hz), 6,77 (1H, d, J 8Hz), 6,14 (2H, s), 6,02 (2H, s), 5,98 (2H, s) y 4,43 (2H, d, J 7Hz).
m/z 489 ((M+1)+, 100 %).
30 3,4-dihidroxibencilamida del ácido α-(3,4-dihidroxibenzamido)-3,4-dihidroxicin�mico (compuesto 21; DC-0021)
A una solución agitada de DC-0021B (85 mg) en CH2Cl2 seco (20 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,2 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml; esto se
35 repitió 2 veces más. La purificación mediante cromatograf�a en columna sobre gel de sílice con metanol al 20 % en cloroformo dio DC-0021 puro (42 mg, 53 %).
RMN de 1H ((CD3)2CO) 7,75 (1H, d, J 2Hz), 7,63 (1H, dd, J 2, 8Hz), 7,50 (1H, s), 7,34 (1H, d, J 2Hz), 7,12 (1H, dd, J 2, 8 Hz), 7,00-7,04 (2H, m), 6,91 (1H, d, J 8Hz), 6,80 - 6,85 (2H, m) y 4,68 (2H, s). m/z 451 ((M+1)+, 100 %). 40 HPLC (método 2) 27,1 minutos.
Ejemplo comparativo 9: 1,4-bis(3,4-dihidroxibenzoil)piperazina (compuesto 23; DC-0023)
1,4-bis(3,4-metilendioxibenzoil)piperazina (compuesto 23B; DC-0023B)
5 Una suspensión de ácido piperon�lico (0,5 g) en cloruro de tionilo (15 ml) se sometió a reflujo durante 1 h en atmósfera de nitrógeno, cuando se hubo formado una solución transparente. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el cloruro de ácido como un sólido blanco. El sólido se disolvió en diclorometano seco (7 ml) y se a�adi� gota a gota a una solución agitada de piperazina (0,13 g) en diclorometano seco (20 ml) que contenía piridina (0,5 ml). La mezcla se sometió a reflujo durante 30 minutos, se diluyó con más diclorometano (50 ml), después se lav� con HCl
10 acuoso (1 M, 50 ml) seguido por NaOH acuoso (1 M, 50 ml), se secó y se evapor� al vacío dando el producto bruto. La cristalización a partir de metanol/agua dio DC-0023B como un sólido blanco (532 mg, 92 %). RMN de 1H (CDCl3) 6,80-6,96 (6H, m), 6,00 (4H, s) y 3,62 (8H, s ancho).
1,4-bis(3,4-dihidroxibenxoil)piperazina (compuesto 23; DC-0023)
15 A una solución agitada de DC-0023B (0,20 g) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,4 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml; esto se repitió 2 veces más. El producto se cristaliz� a partir de metanol/diclorometano, dando DC-0023 puro (141 mg, 75 %)
20 como un sólido blanco.
RMN de 1H (CD3OD) 6,88 (2H, s), 6,81 (4H, s) y 3,66 (8H, s).
m/z 357 ((M-H)+, 100 %).
25 Ejemplo comparativo 10: N,N'-bis(3,4-dihidroxibenzoil)-trans-1,2-diaminociclohexano (compuesto 26; DC-0026)
30 N,N'-bis(3,4-metilendioxibenzoil)-trans-1,2-diaminociclohexano (compuesto 26B; DC-0026B)
Una suspensión de ácido piperon�lico (0,5 g) en cloruro de tionilo (15 ml) se sometió a reflujo durante 1 h en atmósfera de nitrógeno, cuando se hubo formado una solución transparente. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el cloruro de ácido como un sólido blanco. El sólido se disolvió en diclorometano seco (7 ml) y se a�adi� gota
35 a gota a una solución agitada de trans-1,2-diaminociclohexano (0,17 g) en diclorometano seco (20 ml) que contenía piridina (0,5 ml). La mezcla se sometió a reflujo durante 30 minutos, se diluyó con más diclorometano (50 ml), después se lav� con HCl acuoso (1 M, 50 ml) seguido por NaOH acuoso (1 M, 50 ml), se secó y se evapor� al vacío dando el producto bruto. La cristalización a partir de metanol/agua dio DC-0026B como un sólido blanco (544 mg, 94 %).
40 RMN de 1H (CDCl3) 7,27 (2H, m), 6,77 (2H, d,J 8Hz), 6,67 (2H, s ancho), 5,98 (4H, s), 3,92 (2H, s ancho), 2,20 (2H, d ancho), 1,80 (2H, s ancho) y 1,38 (4H, m ancho).
N,N'-bis(3,4-dihidroxibenzoil)-trans-1,2-diaminociclohexano (compuesto 26; DC-0026)
A una solución agitada de DC-0026B (0,20 g) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,4 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi�
5 cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vaci� hasta un volumen de 1 ml; esta adición y evaporación se repitió dos veces. El producto se cristaliz� a partir de metanol/diclorometano, dando DC-0026 puro (161 mg, 86 %) como un sólido blanco.
RMN de 1H (CD3OD) 7,18 (2H, s), 7,11 (2H, d,J 8Hz), 6,73 (2H, d,J 8Hz), 3,89 (2H, m), 2,06 (2H, m), 1,83 (2H, m) y 10 1,44 (2H, m).
m/z 385 ((M-H)+, 100 %).
HPLC (método 1) 30,9 minutos. 15 Ejemplo comparativo 11: 3,4-dihidroxianilida del ácido 3,4-dihidroxibenzoico (compuesto 51; DC-0051)
M�todo 1 - mediante compuestos protegidos con metilendioxi
3,4-metilendioxianilida del ácido 3,4-metilendioxibenzoico (compuesto 51; DC-0051B)
A una solución de ácido piperon�lico (500 mg, 3 mmol) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno se a�adi�
25 cloruro de oxalilo (573 mg, 4,5 mmol) con tres gotas de DMF seca y la mezcla se agit� durante 1 hora. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el cloruro de ácido como un sólido blanco. A una solución de cloruro de ácido en CH2Cl2 seco (50 ml) en atmósfera de nitrógeno, enfriada a 0 �C, se a�adi� gota a gota una solución hecha de 3,4-(metilendioxi)anilina (498 mg, 30,1 mmol) y piridina (0,5 ml) en CH2Cl2 (5 ml). La mezcla de reacción se agit� durante 30 minutos a temperatura ambiente, después se diluyó mediante la adición de CH2Cl2 (100 ml), se lav� con
30 HCl acuoso (50 ml, 10 %) y solución de bicarbonato de sodio (50 ml), después se secó. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el producto bruto como un material cristalino marrón. La recristalizaci�n a partir de etanol acuoso dio DC-0051B como cristales plateados pequeños (0,516 g, 60 %).
RMN de 1H (CDCl3) 7,60 (1H, s ancho), 7,35 (3H, m), 6,88 (2H, m), 6,78 (1H, d,J 9Hz), 6,06 (2H, s) y 5,98 (2H, s). 35 3,4-dihidroxianilida del ácido 3,4-dihidroxibenzoico (compuesto 51; DC-0051)
A una solución de DC-0051B (100 mg) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno se a�adi� BBr3 (0,2 ml) y la mezcla se agit� durante 6 horas. Después de agitar, se a�adi� cuidadosamente HCl 3 M (25 ml) a la mezcla de
40 reacción. El producto se extrajo en EtOAc (200 ml), se secó y se evapor� al vacío dando el producto bruto. La purificación mediante cromatograf�a en columna (Sílice: hexano/EtOAc 30:70) dio DC-0051 como un sólido blancuzco (71 mg, 77 %).
RMN de 1H (CD3OD) 7,60 (1H, s ancho), 7,38 (1H, d,J 2Hz), 7,33 (1H, dd,J 2, 8 Hz), 7,21 (1H, d,J 2Hz), 6,89 (1H, 45 dd,J 2, 8Hz), 6,86 (1H, d,J 8Hz) y 6,76 (1H, d,J 8Hz).
m/z 262 ((M+1)+, 100 %).
HPLC (método 2) 15,1 minutos. 50 Método 2 - mediante compuestos protegidos con benciloxi y metoximetoxi
Cluroro de 3,4-dibenciloxbenzo�lo
5 Se combin� ácido 3,4-dibenciloxibenzoico (3,1 g. 9,3 mmol) con piridina (5 gotas, catalítica) y cloruro de tionilo (15 ml, 205 mmol). La solución se calentó a reflujo durante 4 h, se enfri� y el exceso de cloruro de tionilo se elimin� a presión reducida. El producto bruto se disolvió en benceno (50 ml) y se destil� el disolvente por arrastre de vapor al vacío. El cloruro de benzo�lo (rendimiento teórico de 3,4 g) se disolvió después en diclorometano y se us� directamente en la etapa siguiente.
10 3,4-di(metoximetoxi)anilida del ácido 3,4-dibenciloxibenzoico
Se disolvió 3,4-di(metoximetoxi)anilina (0,484 g, 2,2 mmol) en diclorometano (5 ml) y piridina (3 ml) y se enfri� a -5 �C, con agitaci�n en atmósfera de nitrógeno. Se a�adi� gota a gota una solución de cloruro de 3,415 dibenciloxibenzo�lo en diclorometano (0,8 g, 2,2 mmol de cloruro de ácido) en un periodo de 30 minutos. La reacción se dej� en agitaci�n a 0 �C durante 30 minutos, después se calentó a temperatura ambiente en un periodo de 30 minutos. La reacción se diluyó con diclorometano (100 ml), se lav� con ácido cítrico acuoso (3 x 300 ml de una solución al 2 % p/v), hidróxido de sodio acuoso (2 x 35 ml de una solución al 2 % p/v) y se secó (Na2SO4). La eliminación del disolvente a presión reducida proporcion� un sólido, 0,97 g. El producto bruto se tritur� con metanol
20 calente (10 ml) y se filtr� proporcionando el producto deseado, 0,5 g.
3,4-di(metoximetoxi)anilida del ácido 3,4-dihidroxibenzoico
Se combin� 3,4-di(metoximetoxi)benzanilida del ácido 3,4-dibenciloxibenzoico (0,2 g, 0,4 mmol) con etanol (10 ml) y
25 paladio sobre carbón (40 mg de Pd al 10 %/C). La reacción se calentó a reflujo con agitaci�n en atmósfera de nitrógeno y se a�adi� formiato de amonio (0,8 g, 12,7 mmol) en porciones en un periodo de 15 min y después se mantuvo a reflujo durante dos horas. La solución de reacción enfriada se filtr� para eliminar el catalizador y se concentr� a presión reducida, proporcionando el producto bruto, 0,13 g.
30 3,4-dihidroxianilida del ácido 3,4-dihidroxibenzoico (compuesto 51; DC-0051)
Se combin� 3,4-di(metoximetoxi)benzanilida del ácido 3,4-dihidroxibenzoico (0,17 g, 0,49 mmol) con una solución al 25 % de cloruro de hidrógeno en alcohol isoprop�lico (15 ml) y agua (1 ml). La reacción se agit� a temperatura ambiente durante 1 h y el disolvente se elimin� a presión reducida. La trituración con dietil�ter (5 ml) proporcion�
35 DC-0051 como un sólido que se secó al vacío a 30 �C, proporcionando 60 mg.
Ejemplo comparativo 12: 3,4-dihidroxibencilamida del ácido 3,4-dihidroxibenzoico (compuesto 52; DC-0052)
3,4-metilendioxibencilamida del ácido 3,4-metilendioxibenzoico (compuesto 52B; DC-0052B)
5 Una suspensión de ácido piperon�lico (0,5 g) en cloruro de tionilo (15 ml) se sometió a reflujo durante 1 h en atmósfera de nitrógeno, cuando se hubo formado una solución transparente. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el cloruro de ácido como un sólido blanco. El sólido se disolvió en diclorometano seco (7 ml) y se a�adi� gota a gota a una solución agitada de piperonilamina (0,45 g) en diclorometano seco (20 ml) que contenía piridina (0,5 ml). La mezcla se sometió a reflujo durante 30 minutos, se diluyó con más diclorometano (50 ml), después se lav�
10 con HCl acuoso (1 M, 50 ml) seguido por NaOH acuoso (1 M, 50 ml), se secó y se evapor� al vacío dando el producto bruto. La cristalización a partir de metanol/agua dio DC-0052B como un sólido blanco (733 mg, 79 %). RMN de 1H (CDCl3) 7,27 (2H, m), 6,79 (4H, m), 6,01 (2H, s), 5,94 (2H, s) y 4,51 (2H, d,J 5Hz).
3,4-dihidroxibencilamida del ácido 3,4-dihidroxibenzoico (compuesto 52; DC-0052)
15 A una solución agitada de DC-0052B (0,20 g) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,4 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml; esto se repitió 2 veces más. El producto se cristaliz� a partir de metanol/diclorometano, dando DC-0052 puro (65 mg, 35 %)
20 como un sólido blanco.
RMN de 1H (CD3OD) 7,29 (2H, s), 7,22 (2H, d,J 8Hz), 6,78 (4H, m), 6,67 (4H, m) y 4,38 (4H, d,J 5Hz).
m/z 274 ((M-H)+, 100 %).
25 HPLC (método 1) 10,4 minutos.
Ejemplo comparativo 13: 3,4-dihidroxianilida del ácido (3-3,4-dihidroxifenil)propi�nico (compuesto 57; DC-0057)
3,4-metilendioxianilida del ácido 3-(3,4-metilendioxifenil)propi�nico (compuesto 57B; DC-0057B)
A una solución de ácido 3,4-(metilendioxi)dihidrocin�mico (0,4 g) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno
35 se a�adi� cloruro de oxalilo (0,5 ml) con tres gotas de DMF seca y la mezcla se agit� durante 1 hora. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el cloruro de ácido como un sólido amarillo. A una solución de cloruro de ácido en CH2Cl2 seco (50 ml) en atmósfera de nitrógeno, enfriada a 0 �C, se a�adi� gota a gota una solución de 3,4(metilendioxi)anilina (0,35 g) y piridina (0,2 ml) en CH2Cl2 (5 ml). La mezcla de reacción se agit� durante 30 minutos a temperatura ambiente, se diluyó con CH2Cl2 (100 ml), se lav� con HCl acuoso (100 ml, 10 %) y solución de bicarbonato de sodio (100 ml), después se secó y se evapor� al vacío, dando DC-0057B como un polvo marrón oscuro (0,549 g, 85 %).
RMN de 1H (CDCl3) 7,15 (1H, d,J 2Hz), 6,86 (1H, s ancho), 6,60 - 6,75 (5H, m), 5,93 (2H, s), 5,92 (2H, s), 2,95 (2H, 5 t,J 4Hz) y 2,57 (2H, t,J 4Hz).
3,4-dihidroxianilida del ácido (3-3,4-dihidroxifenil)propi�nico (compuesto 57; DC-0057)
A una solución agitada de DC-0057B (0,20 g) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi�
10 lentamente tribromuro de boro (0,4 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml; esto se repitió 2 veces más, dando DC-0057 como un sólido marrón (143 mg, 77 %).
RMN de 1H (CD3)2CO) 7,31 (1H, s), 6,98 (3H, m), 6,84 (1H, d,J 8Hz), 6,78 (1H, dd,J 2,8Hz), 3,24 (2H, m) y 3,16 (2H, 15 m).
m/z 370, 368 (M+HBr)+, 288 ((M -H)+,100 %)
HPLC (método 2) 20,6 minutos. 20 Ejemplo comparativo 14: 3,4-dihidroxibencilamida del ácido 3-(3,4-dihidroxifenil)propi�nico (compuesto 58; DC-0058)
25 3,4-metilendioxibencilamida del ácido 3-(3,4-metilendioxifenil)propi�nico (compuesto 58B; DC-0058B)
A una solución de ácido 3,4-metilendioxidihidrocin�mico (0,4 g) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno se a�adi� cloruro de oxalilo (0,5 ml) con tres gotas de DMF seca y la mezcla se agit� durante 1 hora. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el cloruro de ácido como un sólido amarillo. A una solución de cloruro de ácido en CH2Cl2
30 seco (50 ml) en atmósfera de nitrógeno, enfriada a 0 �C, se a�adi� gota a gota una solución de 3,4(metilendioxi)bencilamiina (0,35 g) y piridina (0,2 ml) en CH2Cl2 (5 ml). La mezcla de reacción se agit� durante 30 minutos a temperatura ambiente, se diluyó con CH2Cl2 (100 ml), se lav� con HCl acuoso (100 ml, 10 %) y solución de bicarbonato de sodio (100 ml), después se secó y se evapor� al vacío, dando DC-0058B como un polvo blancuzco (0,536 g, 80 %).
35 3,4-dihidroxibencilamida del ácido 3-(3,4-dihidroxifenil)propi�nico (compuesto 58; DC-0058)
A una solución agitada de DC-0058B (0,20 g) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,4 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi�
40 cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml; esto se repitió 2 veces más, dando DC-0058 como un sólido marrón (143 mg, 77 %).
RMN de 1H ((CD3)2CO) 9,62 (1H, s ancho), 6,95 (1H, d,J 2Hz), 6,91 (1H, d,J 2Hz), 6,88 (1H, d,J 8Hz), 6,83 (1H, d,J 8Hz), 6,67 (2H, m), 6,35 (4H, s ancho) 4,47 (2H, s) y 3,00 (4H, m).
45 m/z 302 ((M-H)+, 100 %).
HPLC (método 2) 19,4 minutos.
50 Ejemplo comparativo 15: 3,4-dihidroxibencilamida del ácido 3,4-dihidroxicin�mico (compuesto 61; DC-0061)
3,4-metilendioxibencilamida del ácido 3,4-metilendioxicin�mico (compuesto 61B; DC-0061B)
5 A una solución de ácido 3,4-metilendioxicin�mico (0,5 g, 2,6 mmol) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno se a�adi� cloruro de oxalilo (0,33 g, 2,6 mmol) con tres gotas de DMF seca y la mezcla se agit� durante 1 hora. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el cloruro de ácido como un sólido amarillo. A una solución de cloruro de ácido en CH2Cl2 seco (50 ml) en atmósfera de nitrógeno, enfriada a 0 �C, se a�adi� gota a gota una solución de 3,4-(metilendioxi)bencilamina (0,393 g, 2,6 mmol) y piridina (0,205 g, 2,6 mmol) en CH2Cl2 (5 ml). La
10 mezcla de reacción se agit� durante 30 minutos a temperatura ambiente, se diluyó con CH2Cl2 (100 ml), se lav� con HCl acuoso (100 ml, 10 %) y solución de bicarbonato de sodio (100 ml), después se secó y se evapor� al vacío, dando DC-0061B como un polvo amarillo apagado (0,523 g, 62 %).
RMN de 1H (CDCl3) 7,58 (1H, d,J 16Hz), 6,98 (2H, m), 6,70 - 6,84 (4H, m), 6,22 (1H, d,J 16 Hz), 6,00 (2H, s), 5,96 15 (2H, s) y 4,47 (2H, d,J 6Hz).
m/z 326 ((M+1)+, 100 %).
3,4-dihidroxibencilamida del ácido 3,4-dihidroxicin�mico (compuesto 61; DC-0061)
20 A una solución agitada de DC-0061B (0,3 g, 0,94 mmol) disuelto en CH2Cl2 seco (25 ml) se a�adi� lentamente tribromuro de boro (1,16 g, 4,6 mmol), después se continu� agitando durante otras 12 horas. Se a�adi� cuidadosamente HCl diluido (25 ml), después 200 ml de agua y el producto se extrajo en acetato de etilo (2 x 100 ml), se secó y se evapor� al vacío dando el producto bruto. La purificación mediante cromatograf�a en columna
25 eluyendo con hexano/acetato de etilo (1:4) dio DC-0061 como un sólido blancuzco (36 mg, 13 %).
RMN de 1H ((CD3)2CO) 7,54 (1H, d,J 16Hz), 7,12 (1H, d,J 2Hz), 6,96 (1H, dd,J 2, 8Hz), 6,85 - 6,94 (2H, m), 6,80 (1H, d,J 8Hz), 6,70 (1H, dd,J 2,8Hz), 6,58 (1H, d, J 16 Hz) y 4,41 (2H, s).
30 m/z 300 ((M-1)+, 100 %).
HPLC (método 2) 30,0 minutos.
Ejemplo comparativo 16: bis(3,4-dihidroxianilida) del ácido ox�lico (compuesto 63; DC-0063) 35 Método 1 - mediante compuestos protegidos con metilendioxi
40 Bis(3,4-metilenoxianilida) del ácido ox�lico (compuesto 63B; DC-0063B)
A una solución de cloruro de oxalilo (165 mg, 1,3 mmol) en CH2Cl2 seco (50 ml) en atmósfera de nitrógeno, enfriada a 0 �C, se a�adi� gota a gota una solución de 3,4-(metilendioxi)anilina (400 mg, 2,92 mmol) y piridina (230 mg, 2,92 mmol) en CH2Cl2 seco (5 ml). La mezcla de reacción se agit� durante otros 30 min a temperatura ambiente, después 45 se lav� con HCl acuoso diluido (50 ml). La capa orgánica se separ�, se secó y se evapor� al vacío dando DC-0063B
como un polvo gris (0,351 g, 82 %).
RMN de 1H (CD3OD) 10,78 (2H, s), 7,53 (2H, d,J 2Hz), 7,39 (2H, dd,J 2,8Hz), 6,96 (2H, d,J 8Hz) y 6,06 (4H, s).
5 Bis(3,4-dihidroxianilida) del ácido ox�lico (compuesto 63; DC-0063)
A una solución agitada de DC-0063B (0,3 g, 0,91 mmol) disuelto en CH2Cl2 seco (25 ml) se a�adi� lentamente tribromuro de boro (1,14 g, 4,7 mmol), después se continu� agitando durante otras 4 horas. Se a�adi� cuidadosamente HCl diluido (25 ml), después agua (200 ml) y el producto se extrajo en acetato de etilo (2 x 200 ml),
10 se secó y se evapor� al vacío dando el producto bruto. El producto bruto se disolvió en acetona (25 ml) y se filtr�. La acetona se evapor� al vacío dando DC-0063 como un sólido blancuzco (171 mg, 62 %).
RMN de 1H ((CD3)2CO) 9,72 (2H, s ancho), 8,05 (2H, s ancho), 7,89 (2H, s ancho), 7,52 (2H, d, J 2Hz)), 7,20 (2H, dd, J 2, 8Hz) y 6,83 (2H, d,J 8Hz). 15 m/z 303 ((M-1)+, 100 %).
HPLC (método 2) 29,1 minutos.
20 Método 2 - mediante compuestos protegidos con metoximetoxi
3,4-di(metoximetoxi)anilida del ácido ox�lico
25 Se disolvió 3,4-di(metoximetoxi)anilina (1,5 g, 7 mmol) en diclorometano (50 ml) y se enfri� a 0 �C, con agitaci�n en atmósfera de nitrógeno. Se a�adi� piridina (3,75 ml, 46 mmol) seguida por la adición gota a gota de cloruro de oxalilo (0,4 g, 3,5 mmol) en diclorometano (5 ml) en un periodo de 20 minutos. La reacción se agit� durante 10 min adicionales y se dej� calentar a temperatura ambiente. La suspensión se filtr�. El residuo se lav� con hexano (5 ml)
30 para eliminar el exceso de piridina. El producto bruto se tritur� con metanol (5 ml) y se filtr� proporcionando la anilida protegida pura, 420 mg.
bis(3,4-dihidroxianilida) del ácido ox�lico
35 Se combin� 3,4-di(metoximetoxi)anilida del ácido ox�lico (0,17 g, 0,36 mmol) con una solución al 25 % de cloruro de hidrógeno en alcohol isoprop�lico (1,7 ml). La reacción se agit� a temperatura ambiente durante la noche y el disolvente se elimin� a presión reducida. La trituración con dietil�ter (5 ml) proporcion� DC-0063, 60 mg.
Ejemplo 17: bis(3,4-dihidroxianilida) del ácido succ�nico (compuesto 66; DC-0066) 40 Método 1 - mediante compuestos protegidos con metilendioxi
Bis(3,4-metilenoxianilida) del ácido succ�nico (compuesto 66B; DC-0066B)
5 A una suspensión de ácido succ�nico (200 mg, 1,7 mmol) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno se a�adi� cloruro de oxalilo (645 mg, 5,08 mmol) con tres gotas de DMF seca y la mezcla se agit� durante 1 hora. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el cloruro de ácido como un sólido amarillento. A una solución agitada de 3,4-(metilendioxi)anilina (582 mg, 4,25 mmol) y piridina (400 mg, 5,08 mmol) en CH2Cl2 seco (50 ml) en atmósfera de nitrógeno a 0 �C se a�adi� gota a gota una solución del cloruro de ácido en CH2Cl2 seco (25 ml) y se agit� durante
10 otras 2 horas. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el producto bruto. El material bruto se resuspendi� en EtOAc (250 ml), después se lav� con HCl acuoso diluido (2 x 150 ml), bicarbonato de sodio saturado (2 x 150 ml) y agua (1 x 150 ml). El EtOAc se elimin� después mediante evaporación giratoria. El producto se dispuso sobre papel de filtro y se lav� con agua y se dej� secar dando DC-0066B como un sólido blanco (514 mg, 78 %).
15 RMN de 1H (CD3OD) 9,97 (2H, s), 7,34 (2H, d,J 2Hz), 6,99 (2H, dd,J 2,8Hz), 6,86 (2H, d,J 8Hz), 6,00 (4H, s) y 2,63 (4H, s).
bis(3,4-dihidroxianilida) del ácido succ�nico (compuesto 66; DC-0066)
20 A una solución agitada de DC-0066B (0,3 g, 0,78 mmol) disuelto en CH2Cl2 seco (25 ml) se a�adi� lentamente BBR3 (0,978 g, 3,9 mmol), después se continu� agitando durante otras 4 horas. Se a�adi� cuidadosamente HCl diluido (25 ml), después 200 ml de agua y el producto se extrajo en acetato de etilo (2 x 100 ml), se secó y se evapor� al vacío dando DC-0066 como un sólido blancuzco (97 mg, 35 %).
25 RMN de 1H ((CD3)2CO) 8,88 (2H, s ancho), 7,83 (2H, s ancho), 7,57 (2H, s ancho), 7,34 (2H, d, J 2Hz)), 6,90 (2H, dd, J 2, 8Hz), 6,71 (2H, d,J 8Hz) y 2,65 (4H, s).
m/z 331 ((M-1)+, 100 %).
30 HPLC (método 2) 10,6 minutos.
M�todo 2 - mediante compuestos protegidos con metoximetoxi
3,4-Di(metoximetoxi)anilida del ácido succ�nico
Se disolvió 3,4-di(metoximetoxi)anilina (1 g, 4,7 mmol) en diclorometano (25 ml) y se enfri� a 0 �C, con agitaci�n en atmósfera de nitrógeno. Se a�adi� piridina (1 ml, 12 mmol) seguida por la adición gota a gota de cloruro de succinilo (0,35 g, 2,3 mmol) en diclorometano (10 ml) en un periodo de 20 minutos. La reacción se agit� durante otras 2 horas y se dej� calentar a temperatura ambiente. La suspension se filtr� y el sólido blanco se recogió, se lav� con hexano (10 ml) y después metanol (4 ml) proporcionando la anilida, 350 mg.
5 Bis(3,4-dihidroxianilida) del ácido succ�nico (compuesto 66; DC-0066)
Se combin� bis(3,9-di(metoximetoxi)anilida) del ácido succ�nico (0,15 g, 0,3 mmol) con una solución al 25 % de cloruro de hidrógeno en alcohol isoprop�lico (1,5 ml) y agua (1,5 ml). La reacción se agit� a temperatura ambiente durante 3 h y el disolvente se elimin� a presión reducida. La trituración con dietil�ter proporcion� DC-0066 como un
10 sólido, que se secó al vacío a 30 �C, proporcionando 60 mg.
Ejemplo 18: bis(3,4-dihidroxibencilamida) del ácido succ�nico (compuesto 67; DC-0067)
M�todo 1 - mediante compuestos protegidos con metilendioxi 15
bis(3,4-metilenoxibencilamida) del ácido succ�nico (compuesto 67B; DC-0067B)
20 A una solución de ácido succ�nico (200 mg, 1,7 mmol) en CH2Cl2 seco (25 ml) en atmósfera de nitrógeno se a�adi� cloruro de oxalilo (645 mg, 5,1 mmol) con tres gotas de DMF seca y la mezcla se agit� durante 1 hora. Los disolventes se eliminaron al vacío dando el cloruro de ácido como un sólido amarillo. A una solución de cloruro de ácido en CH2Cl2 seco (50 ml) en atmósfera de nitrógeno, enfriada a 0 �C, se a�adi� gota a gota una solución de 3,4metilendioxibencilamina (634 mg, 4,2 mmol) y piridina (0,33 ml) en CH2Cl2 (50 ml). La mezcla de reacción se agit�
25 durante otras 2 horas a temperatura ambiente, después los disolventes se eliminaron al vacío dando el producto bruto. El material bruto se resuspendi� en EtOAc (250 ml), después se lav� con HCl acuoso diluido (2 x 150 ml), bicarbonato de sodio saturado (2 x 150 ml) y agua (1 x 150 ml). El EtOAc se evapor� al vacío. La recristalizaci�n a partir de etanol y agua dio DC-0067B como cristales en copos blancos (275 mg, 42 %).
30 RMN de 1H (DMSO-d6) 8,31 (2H, t,J 6Hz), 6,85 (4H, m), 6,74 (2H, dd, J 2, 8Hz), 6,01 (4H, s), 4,19 (4H, d,J 6Hz) y 2,42 (4H, s).
Bis(3,4-dihidroxibencilamida) del ácido succ�nico (compuesto 67; DC-0067)
35 A una solución agitada de DC-0067B (0,25 g, 0,65 mmol) disuelto en CH2Cl2 seco (25 ml) se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,81 g, 0,31 mmol), después se continu� agitando durante otras 4 horas. Se a�adi� cuidadosamente HCl diluido (25 ml), después salmuera (125 ml) y el producto se extrajo en acetato de etilo (2 x 100 ml), se secó y se evapor� al vacío dando DC-0067 como un sólido blancuzco (180 mg, 77 %).
40 RMN de 1H ((CD3)2CO) 7,90 (2H, s ancho), 7,74 (2H, s ancho), 7,42 (2H, s ancho), 6,79 (2H, d, J 2Hz), 6,77 (2H, d,J 8 Hz), 6,62 (2H, dd,J 2, 8Hz), 4,22 (4H, d,J 7 Hz) y 2,53 (4H, s).
m/z 359 ((M-1)+, 100 %).
45 HPLC (método 2) 12,3 minutos.
M�todo 2 - mediante compuestos protegidos con benciloxi
Bis(3,4-dihidroxibencilamida) del ácido succ�nico
5 Se disolvió 3,4-dibenciloxibencilamina (1,1 g, 3,45 mmol) en piridina anhidra (8 ml) y se enfri� a 0 �C con agitaci�n en atmósfera de nitrógeno. A esta solución se a�adi� gota a gota cloruro de succinilo (0,23 g, 1,42 mmol) en un periodo de 30 minutos como una solución en diclorometano (50 ml), manteniendo mientras la mezcla de reacción a 0 �C. La reacción se dej� calentar a temperatura ambiente y se agit� durante 45 minutos adicionales. La reacción se vertió en hielo triturado (70 g) y la capa de diclorometano se separ�. El extracto orgánico se lav� con ácido
10 clorhídrico acuoso diluido (2 x 20 ml de solución 0,1 M), agua (20 ml) y se secó (Na2SO4). La eliminación del disolvente a presión reducida proporcion� un sólido bruto que se tritur� con metanol (5 ml) proporcionando después de la filtración la diamina protegida, con un rendimiento de 300 mg.
Bis(3,4-dihidroxibencilamida) del ácido succ�nico (compuesto 67; DC-0067)
15 Se disolvió bis(3,4-dibenciloxibencilamida) del ácido succ�nico (300 mg, 0,42 mmol) en THF (50 ml) en un bote a presión y se calentó a 35 �C para asegurar la disolución del sólido. Se a�adi� paladio sobre carbono (50 mg Pd al 10 %/C) y el recipiente se presuriz� con hidrógeno (a 3 atm (304 kPa)). La reacción se agit� durante 1 hora a temperatura ambiente, después de lo cual la TLC revel� que la reacción se había completado. Se retir� el
20 catalizador por filtración y el disolvente se elimin� a presión reducida, proporcionando DC-0067 como un sólido bruto (20 mg). El material se recristaliz� a partir de tolueno y metanol, proporcionando DC-0067.
Ejemplo comparativo 19: Bis(3,4-dihidroxibencil)amina (compuesto 73; DC-00073)
Bis(3,4-dimetoxibencil)amina
A una solución de 3,4-dimetoxibenzaldeh�do (1 g, 6 mmol) en metanol anhidro (10 ml) se a�adi� 3,430 dimetoxibencilamina (1 g, 5,9 mmol) y la solución se agit� en atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente durante 3 horas. El metanol se elimin� a presión reducida, proporcionando la imina bruta, 1,9 g. La imina se disolvió
en THF (10 ml) y ácido acético (4 ml) y se a�adi� cianoborohidruro de sodio (0,38 g, 6 mmol) en porciones en un periodo de 30 minutos. La solución se agit� durante 30 minutos adicionales a temperatura ambiente y los disolventes se eliminaron a presión reducida. El residuo se neutralizó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y el producto sólido bruto se aisl� por filtración y se secó al vacío a 50 �C durante la noche, con un rendimiento de 0,6 g.
5 Bis(3,4-dihidroxibencil)amina (compuesto 73; DC-00073)
La bis(3,4-dimetoxibencil)amina (0,6 g) se combin� con ácido bromh�drico (6 ml de solución al 48 % p/p en agua) y se calentó lentamente con agitaci�n a 145 �C en un periodo de 1 h. La reacción se mantuvo a 145 �C durante 12 h,
10 se dej� enfriar a temperatura ambiente y se vertió en agua (25 ml). La mezcla de reacción se neutralizó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y se extrajo con acetato de etilo (25 ml). La capa orgánica se lav� en agua (2 x 25 ml), se secó (Na2SO4) y el disolvente se elimin� a presión reducida, proporcionando DC-0073 como un sólido, 160 mg.
15 Ejemplo comparativo 20: Tris(3,4-dihidroxibencil)amina (compuesto 75; DC-00075)
Tris(3,4-metilendioxibencil)amina (compuesto 75B; DC-00075B)
20 A una solución agitada de piperonal (0,9 g, 6 mmol) y acetato de amonio (0,15 g, 2 mmol) en acetonitrilo (25 ml) se a�adi� cianoborohidruro de sodio (0,44 g, 7 mmol) y la mezcla se agit� durante 4 días. El disolvente se elimin� al vacío, después se disolvió el residuo en diclorometano (100 ml) y se lav� con bicarbonato de sodio sat., se secó y el disolvente se elimin� al vacío dando una goma marrón. La purificación mediante cromatograf�a en columna sobre gel
25 de sílice eluyendo con diclorometano al 50 % en hexano dio el DC-0075B puro (135 mg, 5 %).
RMN de 1H (CDCl3) 6,91 (3H, m), 6,73 - 6,80 (6H, m), 5,94 (6H, s) y 3,42 (2H, m)
m/z 420 ((M+1)+, 100 %). 30 Tris(3,4-dihidroxibencil)amina (compuesto 75; DC-00075)
A una solución agitada de DC-0075B (135 mg) en CH2Cl2 seco (20 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,2 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi�
35 cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vaci� hasta un volumen de 1 ml; esta adición y evaporación se repitió dos veces más. La purificación mediante cromatograf�a en columna sobre gel de sílice eluyendo con metanol al 20 % en cloroformo dio DC-0075 (72 mg, 58 %) puro en su mayor parte como una goma marrón p�lida. La HPLC preparativa dio después el DC-0075 puro como una goma blanca (26 mg, 21 %).
40 RMN de 1H (CD3OD) 6,82- 6,86 (2H, m), 6,74 (1H, dd,J 2,8Hz) y 4,07 (2H, s).
m/z 384 ((M+1)+, 100 %).
HPLC (método 2) 12,3 minutos. 45 Ejemplo comparativo 21: 1,3-bis(3,4-dihidroxifenil)urea (compuesto 76; DC-0076)
1,3-bis(3,4-metilendioxifenil)urea (compuesto 76B; DC-0076B)
5 Una solución de 3,4-metilendioxianilina (0,35 g) e isocianato de 3,4-metilendioxifenilo (0,4 g) en benceno (25 ml) se sometió a reflujo durante 1 hora. El precipitado formado se filtr�, se lav� con benceno, después se secó dando DC0076B puro (0,697 g, 95 %) como un sólido marrón pálido. RMN de 1H (CDCl3/(CD3)2CO) 7,35 (2H, s ancho), 6,93 (2H, s), 6,45 (4H, s) y 5,67 (4H, s).
10 1,3-bis(3,4-dihidroxifenil)urea (compuesto 76; DC-0076)
A una solución agitada de DC-0076B (150 mg) en CH2Cl2 seco (20 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,2 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vaci� hasta un volumen de 1 ml y esta adición
15 y evaporación se repitió dos veces. La purificación mediante cromatograf�a en columna sobre gel de sílice eluyendo con metanol al 20 % en cloroformo dio DC-0076 (113 mg, 82 %) puro como un sólido marrón p�lida.
RMN de 1H (D2O/(CD3)2CO) 7,09 (2H, d,J 2Hz), 6,76 (2H, d,J 8Hz) y 6,70 (2H, dd,J 2, 8Hz).
20 m/z 551 ((2M-H)+, 100 %), 275 ((M -H)+, 85 %).
HPLC (método 2) 5,8 minutos.
Ejemplo comparativo 22: (1-3,4-dihidroxifenil)-3-(3,4-dihidroxibencil)urea (DC-0077) 25
(1-3,4-metilendioxifenil)-3-(3,4-metilendioxibencil)urea (DC-0077b)
30 Una solución de 3,4-metilendioxibencilamina (0,37 g) e isocianato de 3,4-metilendioxifenilo (0,4 g) en benceno (25 ml) se sometió a reflujo durante 1 hora. El precipitado formado se filtr�, se lav� con benceno, después se secó dando DC-0077B puro (0,78 g, 98 %) como un sólido marrón pálido.
RMN de 1H (CDCl3) 8,42 (1H, s, NH), 7,21 (1H, d, J 2Hz), 6,88 (2H, m), 6,79 (2H, m), 6,71 (1H, dd, J 2, 8Hz), 6,49 35 (1H, t,J 6Hz, NH), 6,01 (2H, s), 5,97 (2H, s) y 4,21 (2H, d,J 6Hz).
m/z 315 ((M+1)+, 100 %).
(1-3,4-dihidroxifenil)-3-(3,4-dihidroxibencil)urea (DC-0077)
40 A una solución agitada de DC-0077B (200 mg) en CH2Cl2 seco (50 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,4 ml), después se continu� agitando durante otras 3 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vacío hasta un volumen de 1 ml; esto se repitió 2 veces más. La purificación mediante cromatograf�a en columna sobre gel de sílice eluyendo con metanol al 20 % en cloroformo dio una fracción que contenía producto bruto. La HPLC preparativa dio DC-0077 puro (19 mg, 11 %) como un sólido marrón oscuro.
5 RMN de 1H (D2O) 6,55 - 6,80 (6H, m) y 4,12 (2H, s).
m/z 290 (M)+, 100 %).
HPLC (método 2) 12,7 minutos.
10 Ejemplo comparativo 23: (1-3,4-dihidroxifenil)-3-(3,4-dihidroxifenetil)urea (compuestos 78; DC-0078)
15 (1-3,4-metilendioxifenil)-3-(3,4-metilendioxifentil)urea (compuesto 78B; DC-0078B)
Una solución de 3,4-metilendioxifeniletilamina (0,25 g, 1,5 mmol) e isocianato de 3,4-metilendioxifenilo (0,25 g, 1,5 mmol)) en benceno (25 ml) se sometió a reflujo durante 1 hora. El precipitado formado se filtr�, se lav� con benceno, después se secó dando DC-0078B puro (0,43 g, 85 %) como un sólido marrón pálido. RMN de 1H (CDCl3) 7,83 (1H,
20 s ancho), 7,31 (1H, d,J 2Hz), 6,72 - 6,82 (5H, m), 5,99 (2H, s), 5,95 (2H, s), 5,68 (1H, t ancho,J 7Hz), 3,44 (2H, c,J 7Hz) y 2,74 (2H, t,J 7Hz). m/z 327 ((M+1)+, 100 %).
(1-3,4-dihidroxifenil)-3-(3,4-dihidroxifenetil)urea (compuestos 78; DC-0078)
25 A una solución agitada de DC-0078B (105 mg) en CH2Cl2 seco (20 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,2 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vaci� hasta un volumen de 1 ml; esta adición y evaporación se repitió dos veces más. La purificación mediante cromatograf�a en columna sobre gel de sílice eluyendo con metanol al 20 % en cloroformo dio DC-0078 puro (78 mg, 80 %) como un sólido marrón pálido.
30 RMN de 1H ((CD3)2CO) 6,97 (2H, m), 6,86 - 6,89 (3H, m), 6,68 (1H, dd, J 2, 8Hz), 3,66 (2H, t, J 7Hz) y 2,87 (2H, t, J 7Hz).
m/z 303 ((M+1)+, 100 %).
35 HPLC (método 2) 33,7 minutos.
Ejemplo comparativo 24: Dibenzo[c,f][2,7]naftiridina-2,3,10,11-tetraol (compuesto 85; DC-0085).
2,3,10,11-Tetrametoxidibenzo[c,f][2,7]naftiridina (DC-0085P)
5 El DC-0085P se prepar� tal como se describe por Upton y col., J. Pharm. Pharmacol., 50(5):475-482, 1998. Se hizo reaccionar veratrol con ácido ver�trico dando la benzofenona protegida, que se nitr� dando el compuesto de dinitro, y este se redujo dando la amina mediante tratamiento con estaño en ácido clorhídrico y ácido acético. La diamina se aisl� y, después, se condens� con bis(dimetilacetal) de malonaldeh�do dando DC-0085P.
10 Dibenzo[c,f][2,7]naftiridina-2,3,10,11-tetraol (DC-0085)
A una solución agitada de DC-0085B (100 mg) en CH2Cl2 seco (20 ml) en atmósfera de nitrógeno, se a�adi� lentamente tribromuro de boro (0,2 ml), después se continu� agitando durante otras 2 horas. Se a�adi� cuidadosamente metanol (50 ml), después el disolvente se evapor� al vaci� hasta un volumen de 1 ml y esta adición
15 y evaporación se repitió dos veces. La purificación mediante cristalización a partir de metanol/cloroformo dio DC0085 (36 mg, 38 %) como un sólido cristalino naranja.
RMN de 1H (CD3OD) 9,63 (2H, s), 8,63 (2H, s) y 7,64 (2H, s).
20 m/z 296 (M)+, 100 %).
HPLC (método 1) 24,3 minutos.
Ejemplo 25: Los compuestos de la presente invención son potentes disruptores de las fibrillas de Aβ 1-42 de 25 Alzheimer
Se ha hallado que los compuestos y los compuestos comparativos preparados en los Ejemplos anteriores eran en su mayor parte disruptores/inhibidores potentes de las fibrillas de proteína β-amiloidea (Aβ). En una serie de estudios se analizó la eficacia de los compuestos para provocar el desensamblaje/la ruptura de fibrillas de amiloides
30 preformadas de la enfermedad de Alzheimer (es decir, que consisten en fibrillas Aβ 1-42).
Parte A: datos de la fluorometr�a de tioflavina T
En un estudio, se us� fluorometr�a de tioflavina T para determinar los efectos de los compuestos y de EDTA (como
35 control negativo). En este ensayo la tioflavina T se une específicamente a amiloide fibrilar, y esta unión produce una potenciación de la fluorescencia a 485 nm que es directamente proporcional a la cantidad de fibrillas de amiloide formadas. Cuanto mayor sea la fluorescencia, mayor ser� la cantidad de fibrillas de amiloide formada (Naki y col, Lab. Invest. 65:104-110, 1991; Levine III, Protein Sci. 2:404-410, 1993; Amyloid: Int. J. Exp. Clin. Invest. 2:1-6, 1995).
40 En este estudio, se incubaron 25 μM de Aβ 1-42 prefibrilada (Bachem Inc) a 37 �C durante 3 días bien solo o bien en presencia de uno de los compuestos o de EDTA (con una relación en peso de Aβ:compuesto de ensayo de 1:1, 1:0,1, 1:0,01 o 1:0,001). Después de 3 dias de coincubaci�n, se transfirieron 50 μl de cada mezcla de incubaci�n a una placa de microvaloraci�n de 96 pocillos que contenía 150 μl de agua destilada y 50 μl de una solución de tioflavina T (es decir, tioflavina T 500 mM en tampón de fosfato 250 m, pH 6,8). La fluorescencia se leyó a 485 nm (444 nm de longitud de onda de excitación) usando un fluor�metro de placas ELISA después de la sustracción con el tampón solo o con el compuesto solo, como blanco.
5 Los resultados de las incubaciones de 3 días se presentan a continuación. Por ejemplo, mientras que el EDTA no produjo una inhibición significativa de las fibrillas de Aβ 1-42 en todas las concentraciones analizadas, todos los compuestos produjeron en alguna medida una ruptura/un desensamblaje dependiente de la dosis de las fibrillas de Aβ 1-42 preformadas. Los compuestos más exitosos en la ruptura de fibrillas de Aβ 1-42 preformadas parecen ser
10 los compuestos N� 3, 4, 21, 51, 73 y 78. Por ejemplo, el compuesto N� 4 produjo una inhibición significativa (p<0,01) del 97,4 � 0,40 % cuando se us� con una relación p/p Aβ:compuesto de ensayo de 1:0,1 y una ruptura del 69,4 � 1,17 % cuando se us� con una relación p/p de Aβ:compuesto de 1:0,01. En las mismas condiciones (es decir, relación p/p Aβ:compuesto de ensayo de 1:0,1), el compuesto N� 3 produjo una ruptura del 57,8 � 6,36 %, el compuesto N� 21 produjo una ruptura del 81,0 � 1,31 %, el compuesto N� 51 produjo una ruptura del 94,9 � 0,24 %,
15 el compuesto N� 73 produjo una ruptura del 70,9 � 3,04 % y el compuesto N� 78 produjo una ruptura del 89,7 � 1,8 %. Este estudio indica que los compuestos de la presente invención son disruptores/inhibidores potentes de fibrillas de tipo Aβ de la enfermedad de Alzheimer y habitualmente ejercen sus efectos de un modo dependiente de la dosis
Tabla 1: Datos de la fluorometr�a de tioflavina T-Ruptura de las fibrillas de Alzheimer Aβ 1-42
% de inhibición de A (resultado D.T.) para una relación p/p de A :compuesto de ensayo dada
Compuesto de ensayo N�
1:1 1:0,1 1:0,01 1:0,001
EDTA (control)
11,3 � 9,67 0,0 � 7,12 0,0 � 4,88 0,0 � 3,01
1*
97,3 � 0,23 64,8 � 1,98 19,2 � 4,31 0,0 � 3,07
3*
99,5 � 0,10 57,8 � 6,36 53,1 � 1,67 5,5 � 1,99
4*
98,5 � 0,77 97,4 � 0,40 69,4 � 1,17 26,8 � 4,80
8*
70,8 � 2,57 65,5 � 0,17 24,7 � 3,51 4,9 � 2,27
9*
95,1 � 0,13 34,9 � 1,69 20 � 10,75 10,6 � 0,93
12*
99,7 � 0,17 82,0 � 1,13 10,8 � 21,9 0,0 � 34,9
19*
99,1 � 0,56 91,1 � 0,66 46,2 � 2,98 10,8 � 1,38
21*
98,6 � 0,54 81,0 � 1,31 48,2 � 8,29 8,9 � 2,13
23*
46,7 � 4,62 26,2 � 4,37 16,5 � 4,02 0,0 � 3,72
26*
37,8 � 5,50 11,7 � 3,67 0,0 � 2,19 0,0 � 3,24
51*
99,4 � 0,05 94,9 � 0,24 55,3 � 5,23 29,0 � 25,2
52*
93,7 � 0,41 53,6 � 2,42 12,1 � 0,78 0,0 � 6,67
57*
88,4 � 2,73 60,2 � 3,12 19,0 � 6,33 17,7 � 7,43
58*
94,8 � 1,67 76,0 � 2,57 33,2 � 5,16 20,5 � 6,27
61*
100,0 � 0,41 80,1 � 4,76 16,9 � 1,39 26,0 � 7,51
63*
85,3 � 0,91 23,6 � 25,75 57,5 � 10,64 1,6 � 9,47
66
100,0 � 0,68 78,3 � 4,17 42,0 � 2,36 27,1 � 3,51
67
98,3 � 2,19 50,9 � 8,32 34,0 � 14,07 13,7 � 6,05
73*
99,4 � 0,42 70,9 � 3,04 28,7 � 10,27 0,0 � 29,43
75*
99,0 � 0,63 84,4 � 0,94 31,6 � 4,74 17,0 � 4,20
76*
99,3 � 1,35 86,5 � 1,18 40,9 � 3,76 12,2 � 5,98
78*
100 � 0,78 89,7 � 1,18 57,8 � 4,63 22,4 � 5,63
20 *= compuesto comparativo Parte B: Datos de SDS-PAGE/inmunotransferencia Western
La ruptura de Aβ 1-42, incluso en su forma monom�rica, se confirm� mediante un estudio que implica el uso de métodos SDS-PAGE y de inmunotransferencia Western (no se muestran). En este último estudio, se incubaron muestras por triplicado de Aβ 1-42 prefibrilada (25 μM) a 37 �C durante 3 días, solo o en presencia de los compuestos o de EDTA. Después se filtraron cinco microgramos de cada muestra a través de un filtro de 0,2 μm. 5 Después, la proteína recuperada del filtrado se cargó y se analizó en una SDS-PAGE con tris-tricina al 10-20 %, se transfirió a nitrocelulosa y se detecto usando un anticuerpo Aβ (clon 6E10; Senetek). En este estudio, se detect� Aβ 1-42 como una banda de ∼4 kilodalton (es decir, Aβ monom�rico) después de su incubaci�n, solo o en presencia de EDTA, a los 3 días. Por ejemplo, no se detectaron mon�meros de Aβ 1-42 después de la incubaci�n de Aβ 1-42 con los compuestos 4, 19, 21, 51, 58, 66, 75, 76 y 78, lo que sugiere que estos compuestos eran capaces de producir la
10 desaparición de Aβ 1-42 monom�rico. Este estudio confirm� que estos compuestos también eran capaces de producir una ruptura/eliminación de Aβ 1-42 monom�rico.
Parte C: Datos de union a rojo Congo
15 En el ensayo de union a rojo Congo se cuantifica la capacidad de un compuesto de ensayo para alterar la unión de amiloide (en este caso, Aβ) a rojo Congo. En este ensayo, se incubaron Aβ 1-42 y compuestos de ensayo durante 3 días y después se filtr� al vacío a través de un filtro de 0,2 μm. Después se cuantific� la cantidad de Aβ 1-42 retenida en el filtro después de la tinción del filtro con rojo Congo. Después de un lavado apropiado del filtro, cualquier reducción del color del rojo Congo en el filtro en presencia del compuesto de ensayo (en comparación con
20 la tinción con rojo Congo de la proteína amiloidea en ausencia del compuesto de ensayo) fue indicativa de la capacidad del compuesto de ensayo para disminuir/alterar la cantidad de Aβ agregado y congof�lico.
En un estudio, se determin� la capacidad de fibrillas Aβ para unirse al rojo Congo en ausencia o presencia de cantidades crecientes de los compuestos o de EDTA (a relaciones en peso de Aβ:compuestos de ensayo de 1:1, 25 1:0,1, 1:0,01 o 1:0,001). Los resultados de las incubaciones de 3 días se presentan en la Tabla 2, a continuación. Mientras que el EDTA no produjo una inhibición significativa de la unión de fibrillas de Aβ 1-42 al rojo Congo en todas las concentraciones analizadas, los compuestos produjeron una inhibición dependiente de la dosis de la unión de Aβ a rojo Congo. Por ejemplo, el compuesto N� 4 produjo una inhibición significativa (p<0,01) de 73,0 � 0,90 % de unión a rojo Congo de las fibrillas Aβ 1-42 cuando se us� una relación p/p de Aβ:compuesto de ensayo de 1:1, y una 30 inhibición significativa (p<0,01) de 46,8 � 1,28% de unión a rojo Congo de las fibrillas Aβ 1-42 cuando se us� una relación p/p de Aβ:compuesto de ensayo de 1:01, y una inhibición significativa (p<0,01) de 16,4 � 2,02 % de unión a rojo Congo de las fibrillas Aβ 1-42 cuando se us� una relación p/p de Aβ:compuesto de ensayo de 1:0,01. En otro ejemplo, el compuesto análogo sintético N� 3 produjo una inhibición significativa (p<0,01) de 91,6 � 5,19 % de unión a rojo Congo de las fibrillas Aβ 1-42 cuando se us� una relación p/p de Aβ:compuesto de ensayo de 1:1, y una
35 inhibición significativa (p<0,01) de 35,7 � 3,29 % de unión a rojo Congo de las fibrillas Aβ 1-42 cuando se us� una relación p/p de Aβ:compuesto de ensayo de 1:0,01. Este estudio también indica que los compuestos de la presente invención son inhibidores potentes de la unión de fibrillas Aβ a rojo Congo y habitualmente ejercen sus efectos de un modo dependiente de la dosis
40 Tabla 2: Datos de union a rojo Congo *= compuesto comparativo
% de inhibición de A (resultado D.T.) para una relación p/p de A :compuesto de ensayo dada
Compuesto de ensayo N�
1:1 1:0,1 1:0,01 1:0,001
EDTA (control)
1,1 � 7,02 3,6 � 8,68 0,0 � 3,91 7,91 � 3,61
1*
42,4 � 1,58 8,0 � 1,80 3,9 � 0,66 0,0 � 3,54
3*
91,6 � 5,19 35,7 � 3,29 7,4 � 1,51 1,7 � 4,21
4*
73,0 � 0,90 46,8 � 1,28 16,4 � 2,02 2,3 � 1,80
8*
17,7 � 1,86 9,7 � 0,69 1,1 � 0,96 0,0 � 3,55
9*
46,8 � 1,50 10,9 � 2,18 0,0 � 2,15 3,1 � 3,66
12*
63,0 � 1,63 20,8 � 2,22 17,9 � 7,33 4,1 � 6,60
19*
48,1 � 2,00 22,4 � 2,19 7,4 � 2,20 0,0 � 1,01
21*
66,2 � 1,26 33,9 � 1,02 9,3 � 5,68 3,6 � 0,58
23*
10,7 � 2,84 2,9 � 0,43 0,0 � 0,72 12,3 � 6,57
26*
4,5 � 2,03 0,0 � 1,35 6,1 � 4,26 0,0 � 2,64
51*
78,6 � 1,49 46,7 � 1,29 20,5 � 11,48 6,0 � 11,47
52*
35,4 � 1,28 12,7 � 2,35 0,0 � 1,29 0,0 � 3,68
57*
44,8 � 0,77 14,2 � 1,56 0,1 � 2,09 0,0 � 4,73
58*
52,2 � 2,65 21,1 � 3,67 6,6 � 3,49 2,5 � 4,22
61*
48,9 � 4,69 24,6 � 10,85 2,0 � 2,89 0,0 � 4,06
63*
32,5 � 5,66 8,5 � 8,01 20,1 � 10,35 0,0 � 1,93
66
55,9 � 6,83 27,7 � 11,26 7,7 � 0,19 0,6 � 6,61
67
31,5 � 11,25 13,8 � 11,25 8,2 � 7,08 0,0 � 4,98
73*
53,4 � 1,84 22,6 � 3,51 0,6 � 5,04 0,0 � 15,17
75*
59,2 � 3,23 12,8 � 0,59 6,8 � 2,55 2,4 � 2,95
76*
66,6 � 0,68 27,8, � 7,71 4,1 � 2,23 0,3 � 5,1
78*
71,1 � 1,09 39,9 � 3,94 15,4 � 1,39 3,5 � 1,33
Parte D - Datos de espectroscop�a de dicro�smo circular
5 La espectroscop�a de dicro�smo circular (CD) es un método que puede usarse para determinar los efectos de los compuestos de ensayo para romper la conformación de estructura secundaria de fibrillas de amiloide. En un estudio, tal como se describe en este ejemplo, se us� la espectroscop�a de dicro�smo circular para determinar los efectos de diferentes compuestos de la invención sobre la conformación de lámina β de fibrillas de Aβ 1-42. Para este estudio, se disolvió, en primer lugar, Aβ 1-42 (Bachem Inc., Torrance, CA) en una solución de NaOH 2 mM, manteniendo el
10 pH de estas soluciones por encima de 10. Se fabricaron p�ptidos Aβ 1-42 (a una concentración 25 μM) en ausencia
o presencia de compuestos de ensayo, en NaF 150 mM, tampón de fosfato 50 mM, pH 7,4, con trifluoroetanol al 10 %. Después se incub� Aβ 1-42 a 37 �C en ausencia o presencia de diferentes compuestos con relaciones p/p de Aβ:compuesto de ensayo de 1:0,1, 1:1 y 1:10. Después de 3 días de incubaci�n, se registraron los espectros CD en un espectropolar�metro Jasco 810 (Easton, MD). Todos los espectros CD se registraron con células de cuarzo de 15 0,05 cm. Se realizó un seguimiento de las pistas de longitud de onda de 190-260 nm con incrementos de 0,5 nm con una anchura de banda de 5 nm, a una velocidad del seguimiento de 10 nm/minuto, un tiempo de respuesta de 32 segundos y una separación de datos de 0,5 nm. Todo el sistema se equilibr� y se continu� purgando con nitrógeno a 10 ml/minuto. Para el procesamiento de datos, se sustrajo el promedio de 5 replicados de espectros de "compuesto de ensayo" del promedio de 5 replicados de espectros de "Aβ 1-42 + compuesto de ensayo" para determinar los
20 efectos de cada compuesto de ensayo sobre la ruptura de fibrillas Aβ 1-42. La elipticidad en grados se convirtió en MRE ([Q]; elipticidad de residuo molar) usando la fórmula [Q] = 100•Q•RMW/d•c; en la que Q es la elipticidad en grados; RMW es el peso molecular promedio del residuo (∼107 daltons para Aβ 1-42); d es la longitud del trayecto en cm (es decir, 0,05 cm); y c es la concentración en mg/ml (es decir, 0,1 mg/ml).
25 La figura 1 muestra algunos de los espectros CD generados en este estudio. Aβ 1-42 solo en tampón TFE PBS al 10 % mostr� habitualmente los espectros CD t�picos de una proteína amiloidea con una estructura de lámina β significativa, como se demostr� por medio de los mínimos observados a 218 nm. No obstante, en presencia de compuestos de ensayo (tales como los compuestos N� 4, 12, 51 y 61 mostrados en la figura 1) fue evidente una marcada ruptura de la estructura en lámina β en fibrillas Aβ 1-42 (con un aumento significativo en enrollado aleatorio
30 o hélice α) como se muesra mediante la nivelación de los mínimos observados a 218 nm (en comparación con Aβ 142 solo). Esto se observ� habitualmente tanto a 3 días (como se observa en la Figura 1) como a 7 días (no se muestra) después de la coincubaci�n de fibrillas Aβ 1-42 con los compuestos.
La figura 2 muestra el efecto del compuesto N� 78 sobre la ruptura de fibrillas Aβ 1-42. Como se muestra en la
35 figura, Aβ 1-42 solo mostr� los espectros CD t�picos de una estructura en lámina β predominante con unos mínimos marcados observados a 218 nm. No obstante, en presencia del compuesto N� 78 a 3 días, hay una disminución marcada en los mínimos observados habitualmente a 218 nm (con Aβ 1-42 solo), lo que es indicativo de una ruptura de la estructura en lámina β de fibrillas Aβ 1-42.
40 La figura 3 muestra los efectos dependientes de la dosis de los compuestos N� 12, 51 y 61 sobre la ruptura de la estructura de lámina β de fibrillas Aβ 1-42. Como ejemplo, concentraciones crecientes de los compuestos de ensayo N� 12, 51 y 61 (en relaciones p/p de Aβ:compuestos de ensayo de 1:0,1, 1:1 y 1:10) produjeron una ruptura general de la estructura de lámina β como se demuestra mediante la disminución dependiente de la dosis en los mínimos observada a 218 nm (en comparación con los mínimos a 218 nm observados con Aβ 1-42 solo). El compuesto N� 51
45 fue particularmente eficaz cuando se us� con una relación p/p de Aβ:compuesto de ensayo de 1:10 y se mostr� la ruptura completa de la estructura en lámina β de fibrillas Aβ 1-42 tal como se muestra mediante la nivelación de los mínimos observados a 218 nm (en comparación con Aβ 1-42 solo) (Fig. 3).
Los estudios CD demuestran que los compuestos de la presente invención tienen la capacidad de romper/desensamblar la estructura en lamina β característica de fibrillas de Aβ de Alzheimer. Los resultados de los
5 estudios también confirman los ejemplos previos usando ensayos de tipo fluorometr�a de tioflavina T, SDSPAGE/ECL y de unión a rojo Congo, que los compuestos de la presente invención son agentes antiamiloide potentes.
Ejemplo 26: Los compuestos de la presente invención son disruptores potentes de fibrillas IAPP de diabetes de tipo 10 2
Se hall� que los compuestos preparados en los Ejemplos y los Ejemplos comparativos de síntesis son disruptores/inhibidores potentes de fibrillas IAPP de diabetes de tipo 2. En una serie de estudios, se analizó la eficacia de los compuestos para producir un desensamblaje/una ruptura de fibrillas de IAPP preformadas de
15 diabetes de tipo 2.
Parte A: datos de la fluorometr�a de tioflavina T
En un estudio, se us� fluorometr�a de tioflavina T para determinar los efectos de los compuestos y de EDTA (como
20 control negativo). En este ensayo la tioflavina T se une específicamente al amiloide fibrilar, y esta unión produce una potenciación de la fluorescencia a 485 nm que es directamente proporcional a la cantidad de fibrillas de IAPP presentes. Cuanto mayor sea la fluorescencia, mayor ser� la cantidad de fibrillas de IAPP presentes (Naki y col, Lab. Invest. 65:104-110, 1991; Levine III, Protein Sci. 2:404-410, 1993; Amyloid: Int. J. Exp. Clin. Invest. 2:1-6, 1995).
25 En este estudio, se incubaron 25 μM de IAPP prefibrilado (Bachem Inc) a 37 �C durante 3 días bien solo o bien en presencia de uno de los compuestos o de EDTA (con relaciones en peso de IAPP:compuesto de ensayo de 1:1, 1:0,1, 1:0,01 o 1:0,001). Después de 3 dias de coincubaci�n, se transfirieron 50 μl de cada mezcla de incubaci�n a una placa de microvaloraci�n de 96 pocillos que contenía 150 μl de agua destilada y 50 μl de una solución de tioflavina T (es decir, tioflavina T 500 mM en tampón de fosfato 250 m, pH 6,8). La fluorescencia se leyó a 485 nm
30 (444 nm de longitud de onda de excitación) usando un fluor�metro de placa ELISA después de la sustracción con el tampón solo o con el compuesto solo, como blanco.
Los resultados se muestran en la tabla 3 siguiente. Por ejemplo, mientras que el EDTA no produjo una inhibición significativa de las fibrillas de IAPP en todas las concentraciones analizadas, todos los compuestos produjeron en 35 diversas medidas una ruptura/un desensamblaje dependiente de la dosis de las fibrillas de IAPP preformadas. Los compuestos más exitosos en la ruptura de fibrillas de IAPP parecen ser los compuestos N� 3, 4, 23, 63 y 78. Por ejemplo, el compuesto N� 3 produjo una inhibición significativa (p<0,01) del 97,7 � 0,19 % cuando se us� en una relación p/p IAPP:compuesto de ensayo de 1:0,1 y una ruptura del 79,9 � 1,47 % cuando se uso a una relación p/p de IAPP:compuesto de 1:0,01. En las mismas condiciones (es decir, relación p/p IAPP:compuesto de ensayo de
40 1:0,1), el compuesto N� 4 produjo una ruptura del 96,0 � 1,00 %, el compuesto N� 23 produjo una ruptura del 67,2 � 18,35 %, el compuesto N� 63 produjo una ruptura del 84,2 � 1,16 %, el compuesto N� 78 produjo una ruptura del 92,4 � 0,27 % y el compuesto N� 26 produjo una ruptura del 45,9 � 17,73 %. Este estudio indicó que los compuestos de la presente invención también son disruptores/inhibidores potentes de fibrillas de IAPP de diabetes de tipo 2 y habitualmente ejercen sus efectos de un modo dependiente de la dosis
45 Tabla 3: Datos de trifluorometr�a de tioflavina T - ruptura de fibrillas de IAPP de diabetes de tipo 2 *= compuesto comparativo
% de inhibición de IAPP (resultado D.T.) para una relación p/p de IAPP:compuesto de ensayo dada
Compuesto de ensayo N�
1:1 1:0,1 1:0,01 1:0,001
EDTA (control)
4,4 � 9,23 0,1 � 2,59 0,0 � 5,23 4,2 � 1,05
1*
99,0 � 0,11 93,0 � 1,27 57,3 � 0,16 6,4 � 4,40
3*
100 � 0,20 97,7 � 0,19 79,9 � 1,47 30,7 � 6,71
4*
99,7 � 0,23 96,0 � 0,10 63,2 � 2,09 17,3 � 4,07
8*
72,8 � 1,77 67,8 � 1,74 29,6 � 5,97 11,4 � 12,78
12*
99,9 � 0,19 86,0 � 0,76 37,5 � 0,76 13,0 � 10,34
19*
100,0 � 0,24 94,0 � 0,10 51,7 � 2,98 16,7 � 10,20
21*
98,5 � 0,06 85,4 � 0,86 25,8 � 3,61 5,4 � 15,41
23*
85,2 � 0,55 67,2 � 18,35 44,3 � 32,47 27,3 � 45,38
26*
52,5 � 2,44 45,9 � 17,73 24,6 � 6,77 3,7 � 4,67
51*
99,9 � 0,11 96,6 � 1,00 56,6 � 1,69 11,8 � 6,45
52*
97,9 � 0,19 86,9 � 3,09 49,2 � 4,47 16,0 � 8,42
57*
94,1 � 0,46 73,2 � 1,19 37,3 � 0,78 1,9 � 5,24
58*
98,1 � 1,04 87,6 � 1,16 48,8 � 2,05 8,9 � 6,87
61*
96,8 � 0,47 83,6 � 1,27 35,4 � 5,68 0,5 � 6,33
63*
94,9 � 0,65 84,2 � 1,16 56,2 � 8,77 19,0 � 0,30
66
98,5 � 0,06 94,0 � 2,88 47,6 � 8,16 11,1 � 5,28
67
98,6 � 0,22 81,4 � 6,96 34,8 � 1,87 16,1 � 12,40
75*
100 � 0,35 90,0 � 0,27 43,9 � 5,34 6,0 � 6,46
76*
99,6 � 1,01 87,5 � 1,89 41,5 � 6,67 9,0 � 0,32
78*
99,5 � 0,26 92,4 � 0,27 58,3 � 1,20 15,3 � 4,73
Parte B: Datos de union a rojo Congo
5 En el ensayo de union a rojo Congo se cuantifica la capacidad de un compuesto de ensayo para alterar la unión de amiloide (en este caso, IAPP) a rojo Congo. En este ensayo, se incubaron IAPP y compuestos de ensayo durante 3 días y después se filtr� al vacío a través de un filtro de 0,2 μm. Después se cuantific� la cantidad de IAPP retenida en el filtro después de la tinción del filtro con rojo Congo. Después de un lavado apropiado del filtro, cualquier reducción del color del rojo Congo en el filtro en presencia del compuesto de ensayo (en comparación con la tinción
10 con rojo Congo de la proteína amiloide en ausencia del compuesto de ensayo) fue indicativa de la capacidad del compuesto de ensayo para disminuir/alterar la cantidad de IAPP agregado y congof�lico.
En el estudio, se determin� la capacidad de fibrillas de IAPP para unirse al rojo Congo en ausencia o presencia de cantidades crecientes de los compuestos o de EDTA (a relaciones en peso de IAPP:compuestos de ensayo de 1:1, 15 1:0,1, 1:0,01 o 1:0,001). Los resultados de las incubaciones de 3 días se presentan en la Tabla 4, a continuación. Mientras que el EDTA no produjo una inhibición significativa de la unión de fibrillas de IAPP al rojo Congo en todas las concentraciones analizadas, los compuestos produjeron habitualmente una inhibición dependiente de la dosis de la unión de IAPP a rojo Congo. Por ejemplo, el compuesto N� 3 produjo una inhibición significativa (p<0,01) del 55,5 � 2,68 % de unión a rojo Congo de las fibrillas de IAPP cuando se us� una relación p/p de IAPP:compuesto de 20 ensayo de 1:1, y una inhibición significativa (p<0,01) del 37,9 � 3,10 % de unión a rojo Congo de las fibrillas de IAPP cuando se us� una relación p/p de IAPP:compuesto de ensayo de 1:0,1. El compuesto N� 4 produjo una inhibición significativa (p<0,01) del 68,9 � 1,22 % de unión a rojo Congo de las fibrillas de IAPP cuando se us� una relación p/p de IAPP:compuesto de ensayo de 1:1, y una inhibición del 25,4 � 4,68 % de unión a rojo Congo cuando se us� una relación p/p de NAC:compuesto de ensayo de 1:0,01. Este estudio indicó que los compuestos de la presente
25 invención son también inhibidores potentes de la unión de fibrillas IAPP de diabetes de tipo 2 a rojo Congo y habitualmente ejercen sus efectos de un modo dependiente de la dosis
Tabla 4: Datos de union de rojo Congo *= compuesto comparativo
% de inhibición de IAPP (resultado D.T.) para una relación p/p de IAPP:compuesto de ensayo dada
Compuesto de ensayo N�
1:1 1:0,1 1:0,01 1:0,001
EDTA (control)
0,0 � 3,69 0,0 � 1,91 3,6 � 2,83 6,6 � 2,27
1*
40,7 � 2,49 10,6 � 3,40 18,6 � 4,05 6,4 � 2,07
3*
55,5 � 2,68 37,9 � 3,10 16,3 � 1,13 11,1 � 5,26
4*
68,9 � 1,22 25,4 � 4,68 9,0 � 0,51 0,0 � 1,05
8*
0,0 � 2,84 0,0 � 2,94 7,2 � 2,27 0,0 � 6,46
12*
39,8 � 0,26 8,3 � 0,85 6,9 � 2,45 0,0 � 2,40
19*
49,3 � 3,97 21,0 � 3,70 6,0 � 0,78 2,9 � 4,40
21*
35,9 � 0,21 10,4 � 3,53 5,1 � 4,53 0,0 � 2,10
23*
5,5 � 2,33 4,5 � 4,12 9,3 � 1,40 5,1 � 2,45
26*
0,0 � 1,21 7,5 � 2,83 5,3 � 6,14 10,8 � 2,63
51*
55,6 � 1,48 27,5 � 3,49 3,6 � 2,59 1,6 � 1,01
52*
31,3 � 0,27 11,5 � 1,21 11,0 � 3,27 10,2 � 0,52
57*
15,7 � 3,77 8,9 � 3,90 8,5 � 3,19 4,5 � 0,64
58*
24,5 � 0,57 0,7 � 6,21 4,6 � 2,35 0,0 � 1,93
61*
23,7 � 0,39 0,0 � 7,07 4,0 � 1,78 0,0 � 3,87
63*
15,4 � 1,34 4,5 � 1,62 11,7 � 2,26 0,0 � 2,25
66
41,4 � 3,84 15,7 � 2,53 5,7 � 4,23 4,8 � 1,86
67
26,3 � 2,76 5,5 � 2,52 10,6 � 1,29 0,0 � 3,45
75*
49,0 � 1,17 7,4 � 0,70 11,3 � 2,24 2,9 � 0,69
76*
53,9 � 5,44 16,5 � 2,60 14,2 � 2,25 3,4 � 1,07
78*
56,3 � 5,32 16,7 � 6,80 19,9 � 2,12 6,6 � 3,04
Ejemplo 27: Los compuestos de la presente invención son disruptores potentes de fibrillas NAC de la enfermedad de Parkinson
5 Se hall� que los compuestos de la presente invención y los conpuestos comparativos analizados también son disruptores/inhibidores potentes de fibrillas NAC de la enfermedad de Parkinson. El NAC es un fragmento de 35 amino�cidos de α-sinucle�na que se ha demostrado que forma fibrillas de tipo amiloideo cuando se incuba a 37 �C durante unos pocos días. Es el fragmento amiloidog�nico de la α-sinucle�na y se postula que tiene un papel
10 importante en la patog�nesis de la enfermedad de Parkinson y otras sinucleinopat�as. En una serie de estudios, se analizó la eficacia de los compuestos para producir un desensamblaje/una ruptura de fibrillas de NAC de la enfermedad de Parkinson.
Parte A: datos de la fluorometr�a de tioflavina T
15 En un estudio, se us� fluorometr�a de tioflavina T para determinar los efectos de los compuestos N� 1, 3, 23, 26, 52, 63, 66, 67 y de EDTA (como control negativo). En este ensayo, la tioflavina T se une específicamente a las fibrillas de NAC, y esta unión produce una potenciación de la fluorescencia a 485 nm que es directamente proporcional a la cantidad de fibrillas de NAC presentes. Cuanto mayor sea la fluorescencia, mayor ser� la cantidad de fibrillas de
20 NAC presentes (Naki y col, Lab. Invest. 65:104-110, 1991; Levine III, Protein Sci. 2:404-410, 1993; Amyloid: Int. J. Exp. Clin. Invest. 2:1-6, 1995).
En este estudio, se incubaron 25 μM de NAC prefibrilado (Bachem Inc) a 37 �C durante 3 días bien solo o bien en presencia de uno de los compuestos análogos sintéticos de dihidroxi N� 1, 3, 23, 26, 52, 63, 66, 67 o de EDTA (con
25 relaciones en peso de NAC:compuesto de ensayo de 1:1, 1:0,1, 1:0,01 o 1:0,001). Después de 3 dias de coincubaci�n, se transfirieron 50 μl de cada mezcla de incubaci�n a una placa de microvaoraci�n de 96 pocillos que contenía 150 μl de agua destilada y 50 μl de una solución de tioflavina T (es decir, tioflavina T 500 mM en tampón de fosfato 250 m, pH 6,8). La fluorescencia se leyó a 485 nm (444 nm de longitud de onda de excitación) usando un fluor�metro de placas ELISA después de la sustracción con el tampón solo o con el compuesto solo, como blanco.
30 Los resultados de las incubaciones de 3 días se presentan en la Tabla 5, a continuación. Por ejemplo, mientras que el EDTA no produjo una inhibición significativa de las fibrillas NAC en todas las concentraciones analizadas, los compuestos 1, 3, 52, 63, 66 Y 67 produjeron en diversas medidas una ruptura/un desensamblaje dependiente de la dosis de las fibrillas de NAC preformadas. Por ejemplo, el compuesto N� 3 produjo una inhibición significativa
35 (p<0,01) del 91,0 � 1,99 % cuando se us� con una relación NAC:compuesto de ensayo de 1:0,1, y una ruptura del 93,9 � 0,77 % cuando se us� con una relación p/p de NAC:compuesto de 1:0,01. En las mismas condiciones (es decir, relación p/p NAC:compuesto de ensayo de 1:0,1), el compuesto N� 1 produjo una ruptura del 99,5 � 0,53 %, el compuesto N� 26 produjo una ruptura del 61,3 � 6,52 %, el compuesto N� 52 produjo una ruptura del 89,2 � 1,49 %, el compuesto N� 66 produjo una ruptura del 82,5 � 5,37 % y el compuesto N� 67 produjo una ruptura del 50,0 � 7,03
40 %. Este estudio indica que los compuestos de la presente invención son disruptores/inhibidores potentes de fibrillas de NAC de la enfermedad de Parkinson y habitualmente ejercen sus efectos de un modo dependiente de la dosis
Tabla 5: Datos de fluorometr�a de tioflavina T - Ruptura de fibrillas de NAC de la enfermedad de Parkinson *= compuesto comparativo
% de inhibición de NAC (resultado D.T.) para una relación p/p de NAC:compuesto de ensayo dada
Compuesto de ensayo N�
1:1 1:0,1 1:0,01 1:0,001
EDTA (control)
20,0 � 11,8 0,0 � 5,87 0,0 � 10,87 0,0 � 11,6
1*
100,0 � 1,00 99,5 � 0,53 68,2 � 2,55 0,0 � 7,14
3*
98,0 � 1,78 91,0 � 1,99 93,9 � 0,77 67,3 � 6,37
23*
58,0 � 8,43 53,3 � 12,02 35,6 � 9,73 0,0 � 26,42
26*
70,4 � 3,22 61,3 � 6,52 56,8 � 4,60 0,0 � 16,88
52*
99,7 � 1,93 89,2 � 1,49 79,6 � 6,43 13,8 � 10,49
63*
45,6 � 31,03 34,5 � 17,15 33,0 � 1,69 17,3 � 12,57
66
98,9 � 0,65 82,5 � 5,37 43,4 � 3,45 30,5 � 9,55
67
97,4 � 1,19 50,0 � 7,03 30,6 � 5,75 11,9 � 15,98
Parte B: Datos de union de rojo Congo
5 En el ensayo de union de Congo se cuantifica la capacidad de un compuesto de ensayo para alterar la unión de amiloide (en este caso, NAC) a rojo Congo. En este ensayo, se incubaron NAC y compuestos de ensayo durante 3 días y después se filtr� al vacío a través de un filtro de 0,2 μm. Después se cuantific� la cantidad de NAC retenida en el filtro después de la tinción del filtro con rojo Congo. Después de un lavado apropiado del filtro, cualquier reducción del color del rojo Congo en el filtro en presencia del compuesto de ensayo (en comparación con la tinción
10 con rojo Congo de la proteína amiloidea en ausencia del compuesto de ensayo) fue indicativa de la capacidad del compuesto de ensayo para disminuir/alterar la cantidad de NAC agregado y congof�lico.
En un estudio, se determin� la capacidad de fibrillas de NAC para unirse al rojo Congo en ausencia o presencia de cantidades crecientes de los compuestos N� 1, 3, 23, 26, 63, 66, 67 o de EDTA (con relaciones en peso de 15 NAC:compuestos de ensayo de 1:1, 1:0,1, 1:0,01 o 1:0,001). Los resultados de las incubaciones de 3 días se presentan en la Tabla 6. Mientras que el EDTA no produjo una inhibición significativa de la unión de fibrillas de NAC al rojo Congo en todas las concentraciones analizadas, los compuestos produjeron una inhibición dependiente de la dosis de la unión de NAC a rojo Congo tal como se muestra en la Tabla 6 siguiente. Por ejemplo, el compuesto N� 3 produjo una inhibición significativa (p<0,01) del 94,4 � 2,48 % de unión a rojo Congo de las fibrillas NAC cuando se 20 us� una relación p/p de NAC:compuesto de ensayo de 1:1, y una inhibición significativa (p<0,01) del 83,2 � 2,48 % de unión a rojo Congo de las fibrillas NAC cuando se us� una relación p/p de NAC:compuesto de ensayo de 1:0,1. Por ejemplo, el compuesto N� 1 produjo una inhibición del 75,4 � 2,96 % de unión a rojo Congo de las fibrillas NAC cuando se us� una relación p/p de NAC:compuesto de ensayo de 1:1, y una inhibición del 75,9 � 2,48 % de unión a rojo Congo de las fibrillas NAC cuando se us� una relación p/p de NAC:compuesto de ensayo de 1:0,1. En otro
25 ejemplo, el compuesto análogo sintético N� 67 produjo una inhibición significativa (p<0,01) del 81,2 � 2,87 % de unión a rojo Congo de las fibrillas NAC cuando se us� una relación p/p de NAC:compuesto de ensayo de 1:1, y una inhibición significativa (p<0,01) del 47,7 � 8,20 % de unión a rojo Congo cuando se us� una relación p/p de NAC:compuesto de ensayo de 1:0,01. En otro ejemplo, el compuesto N� 26 produjo una inhibición significativa del 34,4 � 10,19 % de unión a rojo Congo cuando se us� en una relación de NAC:compuesto de ensayo de 1:1, y una
30 inhibición del 36,7 % � 5,59 % de unión al rojo Congo cuando se us� una relación de NAC:compuesto de ensayo de 1:0,1. Este estudio también indicó que los compuestos de la presente invención son también inhibidores potentes de la unión de fibrillas de tipo NAC de la enfermedad de Parkinson a rojo Congo y habitualmente ejercen sus efectos de un modo dependiente de la dosis
35 Tabla 6: Datos de unión a rojo Congo - Ruptura de fibrillas de NAC de la enfermedad de Parkinson
% de inhibición de NAC (resultado D.T.) para una relación p/p de NAC:compuesto de ensayo dada
Compuesto de ensayo N�
1:1 1:0,1 1:0,01 1:0,001
EDTA (control)
0,2 � 7,33 0,0 � 38,26 0,0 � 22,0 0,0 � 20,57
1
75,4 � 2,96 75,9 � 2,58 40,7 � 4,23 0,0 � 11:39
3
94,4 � 2,48 83,2 � 3,57 81,7 � 2,82 65,2 � 5,40
23
41,0 � 8,54 30,3 � 12,06 25,6 � 5,37 0,0 � 9,00
26
34,4 � 10,19 36,7 � 5,59 36,4 � 0,67 0,0 � 27,34
52
73,8 � 3,15 71,2 � 7,17 78,9 � 4,76 0,0 � 24,43
63
54,5 � 7,56 9,3 � 10,5 34,0 � 3,66 0,0 � 30,84
66
81,1 � 1,74 72,4 � 1,79 51,0 � 9,50 19,5 � 37,59
67
81,2 � 2,87 47,7 � 8,20 39,2 � 10,25 15,5 � 41,42
Ejemplo 28: Otros compuestos de bis-dihidroxifenilo de la invención
5 Además de los 24 compuestos descritos en detalle en los Ejemplos 1 - 24, este Ejemplo describe otros compuestos de bis-(dihidroxifenilo) que también sirven como disruptores/inhibidores potentes de fibrillas de amiloides en la enfermedad de Alzheimer (es decir, Aβ), diabetes de tipo 2 (es decir, IAPP), otras enfermedades de amilioides, as� como en la enfermedad de Parkinson (es decir, α-sinucle�na/NAC) y otras enfermedades de fibrillas de sinucle�na.
10 Estos compuestos son los compuestos N� 24, 64, 65, 68, 69, 70, 71 y 72. Estos se denominan también respectivamente DC-0024, DC-0064, DC-0065, DC-0068, DC-0069, DC-0070, DC-0071 y DC-0072, respectivamente.
bis-(3,4-dihidroxibencil(-)amida) del ácido ox�lico
experto en la técnica no tendr� dificultad, teniendo en cuenta que su experiencia y la presente divulgación, en preparar los compuestos ilustrados anteriormente o los compuestos de la fórmula dada en la reivindicación 1.
Ejemplo comparativo 29: Análogos de metilendioxi
5 Una estrategia para el suministro de compuestos de dihidroxiarilo de la presente invención para mejorar y/o provocar un metabolismo y características de biodisponibilidad más favorables implica la protección de los grupos hidroxiarilo de los compuestos de hidroxiarilo con grupos metilendioxi. Esta estrategia se ejemplifica en las 80 estructuras que se muestran a continuación
10 Los análogos de metilendioxi representan estructuras protectoras de hidroxilo intermedias que se preparan para completar la síntesis de los compuestos de dihidroxiarilo descritos en la invención. Estos compuestos de anillo cerrado también tienden a ser más estables e hidrófobos (insolubles en agua) y es menos probable que se alteren o se degraden por la oxidación que podría tener lugar si estuvieran presentes grupos hidroxilo. Además, estos
15 compuestos producen buenos prof�rmacos especialmente para suministrar al cerebro debido a su naturaleza hidrófoba. Los compuestos hidrófobos que sean solubles en lípidos tienden a ser compuestos atractivos para suministrar al cerebro ya que habitualmente son capaces de penetrar en la barrera hematoencef�lica.
Los análogos de metilendioxi est�n generalmente disponibles como intermedios en la síntesis de los compuestos de
20 hidroxiarilo correspondientes, como puede observarse a partir de las síntesis ilustradas en los Ejemplos 1-23. Se espera que estos compuestos sean eficaces en su capacidad para producir una ruptura/un desensamblaje y la inhibición de fibrillas de amilioide y sinucle�na, una vez se escindan las estructuras de metilendioxi para proporcionar grupos hidroxilo. La conversión de los grupos hidroxilo dando derivados de metilendioxi también producen prof�rmacos que se cree que mejoran la toxicidad (es decir, son menos tóxicos), metabolismo (ya que ser� menos
25 probable que los grupos OH se alteren por mutilación, glucuronidaci�n y sulfataci�n) y biodisponibilidad. En este concepto de prof�rmaco, se cree que la conversión de prof�rmaco tiene lugar en el plasma (después de su protección a través del intestino) y más cercano a su tejido diana apropiado (órganos sist�micos y/o cerebro). Se cree que las enzimas en la sangre y tejidos apropiados son capaces de escindir el grupo de metilendioxi en estos análogos para proporcionar las estructuras de hidroxilo para lograr la eficacia observada contra las enfermedades
30 descritas anteriormente en la solicitud tal como la enfermedad de Alzheimer, diabetes de tipo 2, enfermedad de Parkinson y otras amiloidosis y sinucleinopat�as.
bis(3,4-metilendioxi)benzo�na bis(3,4-metilendioxi)desoxibenzo�na
1,1-bis(3,4-metilendioxifenil)metano 1,2-bis(3,4-metilendioxifenil)etano
40 1,3-bis(3,4-metilendioxifenil)propano bis(3,4-metilendioxifenil)chalcona
3,5-bis(3,4-metilendioxifenil)- 4,6-bis(3,4-metilendioxifenil)- 1-metil-2-pirazolina 3-ciano-2-metilpiridina
1,4-bis(3,4-metilendioxibencil)piperazina N,N’-bis(3,4-metilendioxibencil)-N,N’-dimetil-etilendiamina
2,5-bis(3,4-metilendioxibencil)-2,5- N,N’-bis(3,4-metilendioxibencil)-trans- 10 diaza[2,2, 1 ]-bicicloheptano 1,2-diaminociclohexano
N,N’-bis(3,4-metilendioxibencil)-trans-
N,N’-bis(3,4-metilendioxibencil)-cis-
1,4-diaminociclohexano
1,3-bis-(aminometilciclohexano
15
3,4-metilendioxibencilamida 3,4-metilendioxifenetilamida de N-(3,4-metiendioxibencil)prolina del ácido 2-(3,4-metilendioxibencil)isoquinolina-3-carbox�lico
2,6-bis(3,4-metilendioxibencil) 3,5-bis(3,4-metilendioxibencil)- 1-metil-4- ciclohexanona piperidinona
2,4-bis(3,4-metilendioxibencil)-3- Tris-(3,4-metilendioxifenil)metano tropinona
3,4-metilendioxibencilamida 4-(3,4-metilendioxibencilaminometilen) del ácido α-(3,4-metilendioxibenzamido)- -2-(3,4-metilendioxifenil)oxazolin-5-ona 3,4-metilendioxi(-)cin�mico
1,4-bis(3,4-metilendioxibenzoil)- N,N’-bis(3,4-metilendioxibencil)- piperazina N,N’-dimetil(-)etilendiamina
15 2,5-bis(3,4-metilendioxibenzoil)-2,5- N,N’-bis(3,4-metilendioxibenzoil)-trans- diaza[2,2,1]-bicicloheptano diaminociclohexano
N,N’-bis(3,4-metilendioxibenzoil)-cis- 3,6-bis(3,4-metilendioxibencil)20 1 3-bis(aminometil)ciclohexano 2,5-dicetopiperazina
3,6-bis(3,4-metilendioxibencilideno)
3,4-metilendioxianilida de N-(3,4-
1,4-dimetil-2,5-dicetopiperazina
metilendioxifenilacetil)-prolina
25
2,3-bi(3,4-metilendioxifenil)-butano 1,3-bis(3,4-metilendioxibencil)-benceno
1,4-bis(3,4-metilendioxibencil)-benceno 2,6-bis(3,4-metilendioxibencil)piridina
2,5-bis(3,4-metilendioxibencil)-tiofeno 2,3-bis(3,4-metilendioxibencil)-tiofeno
1,2-bis(3,4-metilendioxifenil)-ciclohexano 1,4-bis(3,4-metilendioxifenil)-ciclohexano
3,7-bis(3,4-metilendioxifenil)- 2,3-bis(3,4-metilendioxifenil)- 15 bicyclo[3,3,O](-)octano 1,7,7-trimetil-biciclo [2,2,1]heptano
1,2-bis(3,4-metilendioxifenoxi)-etano 1,3-bis(3,4-metilendioxifenoxi)propano
trans-1,2-bis(3,4-metilendioxifenoxi)- N-(3,4-metilendioxibencil)-3-(3,4- (-)ciclopentano metilendioxi(-)fenoxi)-2-hidroxipropilamina 3,4-metilendioxianilida del ácido 3,4-metilendioxibencilamida del ácido 3,4-metilendioxifenoxi-acético 3,4-metilendioxifenoxi-acético
3,4-metilendioxifenetilamida del ácido p-((3,4-metilendioxifenoxi)anilida del ácido 3,4-metilendioxifenoxi-acético 3,4-metilendioxibenzoico
10 o-((3,4-metilendioxifenoxi)anilida del ácido 2,6-bis(3,4-metilendioxifenoxi)-piridina 3,4-metilendioxibenzoico
3,4-metilendioxianilida del ácido 3,4-metilendioxibencilamida del ácido 15 3,4-metilendioxibenzoico 3,4-metilendioxibenzoico
3,4-metilendioxifenetilamida del ácido
3,4-metilendioxianilida del ácido
3,4-metilendioxibenzoico
3,4-metilendioxifenilac�tico
20
3,4-metilendioxibencilamida del ácido 3,4-metilendioxifenetilamida del ácido 3,4-metilendioxifenilac�tico 3,4-metilendioxifenilac�tico
3,4-metilendioxianilida del ácido 3,4-metilendioxibencilamida del ácido 3-(3,4-metilendioxifenil)-propi�nico 3-(3,4-metilendioxifenil)-propi�nico
3,4-metilendioxifenetilamida del ácido 3,4-metilendioxianilida del ácido 3-(3,4-metilendioxifenil)-propi�nico 3,4-metilendioxicin�mico
10 3,4-metilendioxibencilamida del ácido 3,4-metilendioxifenetilamida del ácido 3,4-metilendioxicin�mico 3,4-metilendioxicin�mico
bis(3,4-metilendioxianilida) del ácido bis(3,4-metilendioxibencilamida) del ácido ox�lico 15 ox�lico
bis(3,4-metilendioxifenetilamida) del ácido bis(3,4-metilendioxianilida) del ácido succ�nico ox�lico
bis(3,4-metilendioxibencilamida) del ácido bis(3,4-metilendioxifenetilamida) del ácido succ�nico succ�nico
bis(3,4-metilendioxianilida) del ácido bis(3,4-metilendioxibencilamida) del ácido maleico maleico
bis(3,4-metilendioxianilida) del ácido bis(3,4-metilendioxibencilamida) del ácido fum�rico fum�rico
10 bis-(3,4-metilendioxibencil)- N-(3,4-metilendioxibencil)- amina 3,4-metilendioxifenetilamina
tris-(3,4-metilendioxibencil)- 1,3-bis-(3,4-metilendioxifenil)-urea 15 amina
1-(3,4-metilendioxifenil)-3-
1-(3,4-metilendioxifenil)-3-
(3 ,4-metilendioxibencil)urea
(3,4-metilendioxifenetil)urea
20
3-deoxi-3-(3,4-metilendioxibencil)-
3-deoxi-3-(3,4-metilendioxifenetil)-
aminoepicatequina
aminoepicatequina
25
Ejemplo comparativo 30: Compuestos acilados
Otra estrategia potencial para la administración de los compuestos de bis-dihidroxifenilo de la presente invención para mejorar y/o producir un metabolismo y características de biodisponibilidad más favorables, implica métodos de
5 protección de los grupos hidroxilo como sus ésteres farmac�uticamente aceptables. Los grupos éster que reemplazan los grupos hidroxilo también tienden a producir compuestos más estables, y que es menos probable que se alteren o se degraden por la oxidación de los grupos hidroxilo.
Se presenta más adelante la tabla de compuestos siguiente ilustra los ésteres de acetilo de los 80 compuestos de
10 hidroxiarilo de los Ejemplos 1 - 23 y 28, en la que los grupos OH est�n reemplazados por grupos acetilo. La ilustración de ésteres de acetilo en el presente documento es meramente un ejemplo de la clase de ésteres farmac�uticamente aceptable que son parte de los compuestos de la presente invención y pueden prepararse mediante métodos análogos.
15 Se espera que estos compuestos sean eficaces en su capacidad para tratar amiloidosis y sinucleinopat�as una vez se escindan los enlaces éster (mediante enzimas en el plasma o en el tejido cerebral) y los grupos hidroxilo se regeneren. El reemplazo de los grupos hidroxilo por grupos éster producir� prof�rmacos que se cree que mejoran la toxicidad (es decir, son menos tóxicos), metabolismo (ya que ser� menos probable que los grupos OH se alteren por mutilación, glucuronidaci�n y sulfataci�n) y biodisponibilidad. En este concepto de prof�rmaco, se cree que la
20 conversión del prof�rmaco tiene lugar en el plasma (después de su protección a través del intestino) y cercano a su tejido diana apropiado (órganos sist�micos para el tratamiento de amiloidosis sist�micas y/o cerebro para el tratamiento de Alzheimer, Parkinson, diabetes de tipo 2 y otros amiloides Aβ y sinucleinopat�as. Se cree que las enzimas de la sangre y los tejidos apropiados son capaces de escindir los enlaces éster de estos ésteres farmac�uticamente aceptables para proporcionar las estructuras de dihidroxilo importantes para la eficacia
25 observada contra la enfermedad de Alzheimer, otras amiloidosis (tales como fibrillas IAPP en diabetes de tipo 2) y fibrillas de α-sinucle�na/NAC, tal como en la enfermedad de Parkinson y otras sinucleinopat�as.
Los ésteres farmac�uticamente aceptables de los compuestos N� 1 a N� 86 se preparan mediante métodos bien conocidos por los expertos en la técnica, tales como mediante reacción de los compuestos de dihidroxiarilo con
30 ácidos farmac�uticamente aceptables, especialmente en forma activada (tal como los haluros de acilo) y/o en presencia de reactivos que facilitan la esterificaci�n (tal como un catalizador ácido) y/o en condiciones que favorecen la esterificaci�n (tal como realizando la reacción en condiciones en las que el agua formada en la esterificaci�n se elimina, por ejemplo por destilación). Los métodos de esterificaci�n de grupos hidroxilo fen�licos son bien conocidos por un experto en la técnica.
35 Los ácidos adecuados para la formación de ésteres farmac�uticamente aceptables son los ácidos alcanoicos C2-6 (ácido acético, ácido propi�nico y similares), ácido benzoico, ácidos arilalcanoicos (ácido fenilac�tico y similiares); aunque muchos otros ácidos son adecuadas para la formulación de ésteres farmac�uticamente aceptables y un experto en la técnica no tendr� dificultad en la elección de un ácido adecuado.
bis(3,4-diacetoxi)benzo�na bis(3,4-diacetoxi)desoxibenzo�na
45 1,1-bis(3,4-diacetoxifenil)metano 1,2-bis(3,4-diacetoxifenil)etano
1,3-bis(3,4-diacetoxifenil)propano bis(3,4-diacetoxifenil)chalcona 1,4-bis(3,4-diacetoxibencil)piperazina N,N’-bis(3,4-diacetoxibencil)-N,N’-dimetil-etilendiamina
3,5-bis(3,4-diacetoxifenil)
4,6-bis(3,4-diacetoxifenil)-
1-metil-2-pirazolina
3-ciano-2-metilpiridina
5
10 2,5-bis(3,4-diacetoxibencil)-2,5- N,N’-bis(3,4-diacetoxibencil)-trans- diaza[2,2, 1 ]-bicicloheptano 1,2-diaminociclohexano
N,N’-bis(3,4-diacetoxibencil)-trans- N,N’-bis(3,4-diacetoxibencil)-cis- 15 1,4-diaminociclohexano 1,3-bis-(aminometilciclohexano
3,4-diacetoxibencilamida
3,4-diacetoxifenetilamida
de N-(3,4-metiendioxibencil)prolina
del ácido 2-(3,4-diacetoxibencil)isoquinolina-3-carbox�lico
20
2,6-bis(3,4-diacetoxibencil) 3,5-bis(3,4-diacetoxibencil)- 1-metil-4- ciclohexanona piperidinona
2,4-bis(3,4-diacetoxibencil)-3- Tris-(3,4-diacetoxifenil)metano tropinona
3,4-diacetoxibencilamida 4-(3,4-diacetoxibencilaminometilen) del ácido α-(3,4-diacetoxibenzamido)- -2-(3,4-diacetoxifenil)oxazolin-5-ona 3,4-diacetoxi(-)cin�mico
1,4-bis(3,4-diacetoxibenzoil)- N,N’-bis(3,4-diacetoxibencil)- piperazina N,N’-dimetil(-)etilendiamina
15 2,5-bis(3,4-diacetoxibenzoil)-2,5- N,N’-bis(3,4-diacetoxibenzoil)-trans- diaza[2,2,1]-bicicloheptano diaminociclohexano
N,N’-bis(3,4-diacetoxibenzoil)-cis- 3,6-bis(3,4-diacetoxibencil)- 20 1 3-bis(aminometil)ciclohexano 2,5-dicetopiperazina
3,6-bis(3,4-diacetoxibencilideno)- 3,4-diacetoxianilida de N-(3,41,4-dimetil-2,5-dicetopiperazina diacetoxifenilacetil)-prolina
2,3-bi(3,4-diacetoxifenil)-butano 1,3-bis(3,4-diacetoxibencil)-benceno
1,4-bis(3,4-diacetoxibencil)-benceno 2,6-bis(3,4-diacetoxibencil)piridina
2,5-bis(3,4-diacetoxibencil)-tiofeno 2,3-bis(3,4-diacetoxibencil)-tiofeno
1,2-bis(3,4-diacetoxifenil)-ciclohexano 1,4-bis(3,4-diacetoxifenil)-ciclohexano
15 3,7-bis(3,4-diacetoxifenil)- 2,3-bis(3,4-diacetoxifenil)- bicyclo[3,3,O](-)octane 1,7,7-trimetil-biciclo [2,2,1]heptano
1,2-bis(3,4-diacetoxifenoxi)-etano 1,3-bis(3,4-diacetoxifenoxi)propano
trans-1,2-bis(3,4-diacetoxifenoxi)- N-(3,4-diacetoxibencil)-3-(3,4(-)ciclopentano diacetoxi(-)fenoxi)-2-hidroxipropilamina
3,4-diacetoxianilida del ácido 3,4-diacetoxibencilamida del ácido 3,4-diacetoxifenoxi-acético 3,4-diacetoxifenoxi-acético
3,4-diacetoxifenetilamida del ácido p-((3,4-diacetoxifenoxi)anilida del ácido 10 3,4-diacetoxifenoxi-acético 3,4-diacetoxibenzoico
o-((3,4-diacetoxifenoxi)anilida del ácido 2,6-bis(3,4-diacetoxifenoxi)-piridina 3,4-diacetoxibenzoico
3,4-diacetoxianilida del ácido 3,4-diacetoxibencilamida del ácido 3,4-diacetoxibenzoico 3,4-diacetoxibenzoico
3,4-diacetoxifenetilamida del ácido 3,4-diacetoxianilida del ácido 3,4-diacetoxibenzoico 3,4-diacetoxifenilac�tico
3,4-diacetoxibencilamida del ácido 3,4-diacetoxifenetilamida del ácido 3,4-diacetoxifenilac�tico 3,4-diacetoxifenilac�tico
3,4-diacetoxianilida del ácido 3,4-diacetoxibencilamida del ácido 3-(3,4-diacetoxifenil)-propi�nico 3-(3,4-diacetoxifenil)-propi�nico
3,4-diacetoxifenetilamida del ácido 3,4-diacetoxianilida del ácido 10 3-(3,4-diacetoxifenil)-propi�nico 3,4-diacetoxicin�mico
3,4-diacetoxibencilamida del ácido
3,4-diacetoxifenetilamida del ácido
3,4-diacetoxicin�mico
3,4-diacetoxicin�mico
15
bis(3,4-diacetoxianilida) del ácido bis(3,4-diacetoxibencilamida) del ácido ox�lico ox�lico
bis(3,4-diacetoxifenetilamida) del ácido bis(3,4-diacetoxianilida) del ácido succ�nico ox�lico
25 bis(3,4-diacetoxibencilamida) del ácido bis(3,4-diacetoxifenetilamida) del ácido succ�nico succ�nico
bis(3,4-diacetoxianilida) del ácido bis(3,4-diacetoxibencilamida) del ácido maleico maleico
bis(3,4-diacetoxianilida) del ácido bis(3,4-diacetoxibencilamida) del ácido fum�rico fum�rico
10 bis-(3,4-diacetoxibencil)- N-(3,4-diacetoxibencil)- amina 3,4-diacetoxifenetilamina
tris-(3,4-diacetoxibencil)- 1,3-bis-(3,4-diacetoxifenil)-urea 15 amina
1-(3,4-diacetoxifenil)-3-
1-(3,4-diacetoxifenil)-3-
(3 ,4-diacetoxibencil)urea
(3,4-diacetoxifenetil)urea
20
3-deoxi-3-(3,4-diacetoxibencil)- 3-deoxi-3-(3,4-diacetoxifenetil)- aminoepicatequina aminoepicatequina
Ejemplo 32: Composiciones de compuestos de la presente invención
Los compuestos de la presente invención, tal como se ha mencionado previamente, se administran de forma deseable en forma de composiciones farmacéuticas. Las composiciones farmacéuticas y el método para 5 prepararlas, son bien conocidos por el experto en la técnica y se describen en tratados tales como Remington: The Science and Practice of Pharmacy, A. Gennaro, ed., 20� edición, Lippincott, Williams & Wilkins, Filadelfia, PA.
Las composiciones representativas son las siguientes:
10 Formulación de comprimido de uso oral
Una formulación de comprimido de uso oral de un compuesto de la presente invención se prepara como sigue:
% p/p
Compuesto de la presente invención 10,0
Estearato de magnesio 0,5
Almid�n 2,0
Hidroxipropilmetilcelulosa 1,0
Celulosa microcristalina 86,5
15 Los ingredientes se mezclan hasta homogeneidad, después se granulan con la ayuda de agua y los granulados se secan. Después el granulado se prensa dando comprimidos que se dimensionan para dar una dosis adecuada del compuesto. El comprimido se recubre opcionalmente aplicando una suspensión de un agente formador de película (por ejemplo hidroxipropilmetilcelulosa), pigmento (por ejemplo di�xido de titanio) y plastificante (por ejemplo ftalato de dietilo), y se seca la película por evaporación del disolvente. La capa de película puede comprender, por ejemplo,
20 el 2-6 % del peso del comprimido.
Formulaci�n de cápsula de uso oral
El granulado de la sección anterior de este Ejemplo se introduce en cápsulas de gelatina duras de un tamaño 25 adecuado para la dosis deseada. Se forman bandas en la cápsula para el sellado, si se desea.
Formulaci�n de gel blando
La formulación de un gel blando se prepara como sigue: 30 % p/p
Compuesto de la presente invención 20,0
Polietilenglicol 400 80,0
El compuesto se disuelve o se dispersa en el polietilenglicol y se añade un agente espesante si se requiere. Después se introduce una cantidad de la formulación suficiente para proporcionar la dosis deseada del compuesto en geles blandos.
35 Formulación de uso parenteral
La formulación de uso parenteral se prepara como sigue:
% p/p
Compuesto de la presente invención 1,0
Soluci�n salina normal 99,0 40 El compuesto se disuelve en la solución salina y la solución resultante se esteriliza y se introduce en viales, ampollas y jeringas prellenadas, según sea apropiado.
Formulaci�n de uso oral de liberación controlada
45 Puede prepararse una formulación de liberación mantenida mediante el método de la patente de Estados Unidos N� 4.710.384, como sigue:
Un kg de un compuesto de la presente invención se recubre en un recubridor de polvo de Uni-Glatt modificado con etilcelulosa Dow Type 10. La solución de pulverización es una solución al 8 % de la etilcelulosa en acetona al 90 % y etanol al 10 %. Se añade aceite de ricino como plastificante en una cantidad igual al 20 % de la etilcelulosa 5 presente. Las condiciones de pulverización son las siguientes: 1) velocidad, 1 litro/hora; 2) aleta, 10-15 %; 3) temperatura de entrada, 50 �C, 4) temperatura de salida, 30 �C, 5) porcentaje de recubrimiento, 17 %. El compuesto recubierto se tamiza para dar tamaños de partícula de entre 74 y 210 micrómetros. Se tiene cuidado para asegurar una buena mezcla de partículas de diferentes tamaños dentro de ese intervalo. Se mezclan cuatrocientos mg de las partículas recubiertas con 100 mg de almidón y la mezcla se comprime en una prensa de mano a 1,5 toneladas para
10 producir un comprimido de liberación controlada de 500 mg.

Claims (14)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto de la fórmula:
    o una sal farmac�uticamente aceptable del mismo en la que:
    R es un grupo alquileno C6-C10, en el que hay:
    10 i) opcionalmente 1 o 2 dobles enlaces no adyacentes; ii) 1 a 3 grupos metileno no adyacentes est�n reemplazados por NR’, O o S, en la que R’ es H, acilo C2-4 o alquilo C1-3, y iii) 2 grupos metileno est�n reemplazados por un grupo carbolino o hidroximetileno.
  2. 2. El compuesto de la reivindicación 1, seleccionado entre:
    20 o una sal farmac�uticamente aceptable de los mismos.
  3. 3. Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 y un excipiente farmac�uticamente aceptable.
    25 4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o la reivindicación 2, para su uso en el tratamiento de la formación, la deposición, la acumulación o la persistencia de fibrillas de amiloide o las fibrillas de sinucle�na.
  4. 5.
    Un método in vitro para tratar la formación, la deposición, la acumulación o la persistencia de las fibrillas de amiloide o las fibrillas de sinucle�na, que comprende tratar las fibrillas con una cantidad eficaz de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2.
  5. 6.
    El compuesto de la reivindicación 4 o el método de la reivindicación 5, en el que las fibrillas de amiloide son fibrillas de amiloide Aβ o fibrillas de amiloide IAPP.
  6. 7.
    El compuesto de la reivindicación 4 o el método de la reivindicación 5, en el que las fibrillas de sinucle�na son fibrillas de α-sinucle�na.
  7. 8.
    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, para su uso en el tratamiento de una amiloidosis o una sinucleinopat�a en un mamífero que padece la misma.
  8. 9.
    El compuesto de la reivindicación 8, en el que la amiloidosis es una enfermedad asociada con la formación, la deposición, la acumulación o la persistencia de una proteína amiloidea seleccionada del grupo que consiste en amiloide Aβ, amiloide AA, amiloide AL, amiloide IAPP, amiloide PrP, amiloide de β2-microglobulina, transtiretina, prealb�mina y procalcitonina.
  9. 10.
    El compuesto de la reivindicación 8, en la que la amiloidosis se selecciona del grupo de enfermedades que consiste en enfermedad de Alzheimer, síndrome de Down, demencia pugil�stica, atrofia multisist�mica, miositosis por cuerpos de inclusión, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandés, enfermedad de Nieman-Pick de tipo C, angiopat�a cerebral β-amiloidea, demencia asociada con degeneración basal cortical, la amiloidosis de la diabetes de tipo 2, la amiloidosis de inflamación crónica, la amiloidosis de tumor maligno y fiebre mediterránea familiar, la amiloidosis de mieloma múltiple y discrasias de linfocitos B, la amiloidosis de las enfermedades pri�nicas, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, síndrome de Gerstmann-Straussler, kuru, tembladera, la amiloidosis asociada con el síndrome del túnel carpiano, amiloidosis cardiaca senil, polineuropat�a amiloid�tica familiar y la amiloidosis asociada con tumores endocrinos.
  10. 11.
    El compuesto de la reivindicación 8, en el que la sinucleinopat�a es una enfermedad asociada con la formación, la deposición, la acumulación o la persistencia de fibrillas de sinucle�na, preferentemente fibrillas de α-sinucle�na.
  11. 12.
    El compuesto de la reivindicación 8, en el que la sinucleinopat�a se selecciona del grupo de enfermedades que consiste en la enfermedad de Parkinson, enfermedad de Parkinson familiar, enfermedad de cuerpos de Lewy, la variante de cuerpos de Lewy de la enfermedad de Alzheimer, demencia con cuerpos de Lewy, atrofia multisist�mica y complejo parkinsonismo-demencia de Guam.
  12. 13.
    El compuesto de la reivindicación 8, en el que el mamífero es un ser humano.
  13. 14.
    El compuesto de la reivindicación 8, que es para la administración en una cantidad de entre 0,1 mg/kg/día y 1000 mg/kg/día, preferentemente entre 1 mg/kg/día y 100 mg/kg/día, más preferentemente entre 10 mg/kg/día y 100 mg/kg/día.
  14. 15.
    El uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 en la fabricación de un medicamento para tratar:
    a) la formación, la deposición, la acumulación o la persistencia de fibrillas de amiloide o fibrillas de sinucle�na, o b) una amiloidosis o una sinucleinopat�a en un mamífero que padece la misma,
    preferentemente en el que a) est� modificado por las características de las reivindicaciones 6 o 7 o en el que b) est� modificado por las características de cualquiera de las reivindicaciones 9 a 14.
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Families Citing this family (83)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070208087A1 (en) 2001-11-02 2007-09-06 Sanders Virginia J Compounds, compositions and methods for the treatment of inflammatory diseases
US20140005240A1 (en) * 2002-05-31 2014-01-02 Alan D. Snow Compounds and compositions for use as modulators of tau aggregation and alleviation of tauopathies
US20130137775A1 (en) * 2002-05-31 2013-05-30 Alan D. Snow Compositions and methods for the treatment of systemic aa amyloid diseases
US20070276034A1 (en) * 2002-05-31 2007-11-29 Luke Esposito Compounds, compositions and methods for the treatment of synucleinopathies
US8227643B2 (en) * 2002-05-31 2012-07-24 Proteotech, Inc. Sirtuin 1 and the treatment of neurodegenerative diseases
US20110104055A1 (en) * 2002-05-31 2011-05-05 Alan Snow Substituted n-aryl benzamides and related compounds for treatment of amyloid diseases and synucleinopathies
US8829198B2 (en) * 2007-10-31 2014-09-09 Proteotech Inc Compounds, compositions and methods for the treatment of beta-amyloid diseases and synucleinopathies
US7601876B2 (en) * 2002-05-31 2009-10-13 Proteotech, Inc. Compounds, compositions and methods for the treatment of amyloid diseases such as systemic AA amyloidosis
PT1511710E (pt) * 2002-05-31 2014-02-26 Proteotech Inc Compostos, composições e métodos para o tratamento de doenças da amiloide e sinucleínopatias tais como doença de alzheimer, diabetes do tipo 2, e doença de parkinson
JP2006512306A (ja) * 2002-08-29 2006-04-13 テンプル・ユニバーシティ−オブ・ザ・コモンウェルス・システム・オブ・ハイアー・エデュケイション アリール及びヘテロアリールプロペンアミド、それらの誘導体並びにそれらの治療用途
RU2333203C2 (ru) 2002-12-25 2008-09-10 Дайити Фармасьютикал Ко., Лтд. Диаминовые производные
JP4630267B2 (ja) * 2002-12-25 2011-02-09 第一三共株式会社 ジアミン誘導体
US8916598B2 (en) 2003-05-30 2014-12-23 Proteotech Inc Compounds, compositions, and methods for the treatment of β-amyloid diseases and synucleinopathies
US20090227647A1 (en) * 2008-03-05 2009-09-10 Thomas Lake Compounds, Compositions and Methods for the Treatment of Islet Amyloid Polypeptide (IAPP) Accumulation in Diabetes
US20100331380A1 (en) * 2009-06-29 2010-12-30 Esposito Luke A Compounds, Compositions, and Methods for the Treatment of Beta-Amyloid Diseases and Synucleinopathies
RU2381213C2 (ru) * 2004-05-12 2010-02-10 Протеотек, Инк. Замещенные n-арилбензамиды и родственные соединения для лечения амилоидных заболеваний и синуклеинопатии
EP1757591A4 (en) * 2004-05-26 2010-05-05 Eisai R&D Man Co Ltd ZIMTSÄUREAMIDVERBINDUNG
GB0415181D0 (en) 2004-07-06 2004-08-11 School Of Pharmacy The Univers Compounds for use in the treatment of infection
DE102004041496A1 (de) * 2004-08-27 2006-03-02 Symrise Gmbh & Co. Kg Hydroxybenzoesäureamide und deren Verwendung zur Maskierung von bitterem Geschmack
WO2006034003A2 (en) * 2004-09-17 2006-03-30 Whitehead Institute For Biomedical Research Compounds, compositions and methods of inhibiting a-synuclein toxicity
JPWO2006046575A1 (ja) * 2004-10-26 2008-05-22 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 シンナミド化合物の非晶質体
FR2892923B1 (fr) * 2005-11-08 2009-01-16 Engelhard Lyon Sa Utilisatiion des derives de l'acide para-coumarique ou para- hydroxycinnamique dans des compositions cosmetiques ou dermatologiques.
EP3006424A1 (en) * 2005-11-11 2016-04-13 The Scripps Research Institute Histone deacetylase inhibitors as therapeutics for neurological diseases
US20090270623A1 (en) * 2005-11-18 2009-10-29 Naoyuki Shimomura Process for production of cinnamide derivative
JPWO2007058304A1 (ja) * 2005-11-18 2009-05-07 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 シンナミド化合物の塩またはそれらの溶媒和物
TWI370130B (en) * 2005-11-24 2012-08-11 Eisai R&D Man Co Ltd Two cyclic cinnamide compound
NZ568050A (en) * 2005-11-24 2010-09-30 Eisai R&D Man Co Ltd Morpholine type cinnamide compound
AU2006324167A1 (en) 2005-12-13 2007-06-21 Wyeth Dibenzonaphthyridine derivatives and methods of use thereof
JP2009084155A (ja) * 2006-01-16 2009-04-23 Kanazawa Univ レビー小体病治療薬及びレビー小体病予防薬
TWI378091B (en) 2006-03-09 2012-12-01 Eisai R&D Man Co Ltd Multi-cyclic cinnamide derivatives
SA07280403B1 (ar) * 2006-07-28 2010-12-01 إيساي أر أند دي منجمنت كو. ليمتد ملح رباعي لمركب سيناميد
US8058309B2 (en) * 2006-12-04 2011-11-15 Novotyr Therapeutics Ltd. Protein kinase modulators and therapeutic uses thereof
US20120083528A1 (en) * 2006-12-04 2012-04-05 Novotyr Therapeutics Ltd. Novel protein kinase modulators and therapeutic uses thereof
TW200848054A (en) * 2007-02-28 2008-12-16 Eisai R&D Man Co Ltd Two cyclic oxomorpholine derivatives
WO2008140111A1 (ja) * 2007-05-16 2008-11-20 Eisai R & D Management Co., Ltd. シンナミド誘導体のワンポット製造方法
WO2009026658A1 (en) * 2007-08-29 2009-03-05 The University Of Sydney Ppar agonists
US7935815B2 (en) * 2007-08-31 2011-05-03 Eisai R&D Management Co., Ltd. Imidazoyl pyridine compounds and salts thereof
AU2008292390B2 (en) 2007-08-31 2013-04-04 Eisai R & D Management Co., Ltd. Polycyclic compound
GB0719559D0 (en) * 2007-10-05 2007-11-14 Senexis Ltd Compounds
EP2239265A1 (en) * 2008-01-28 2010-10-13 Eisai R&D Management Co., Ltd. Crystalline cinnamide compounds or salts thereof
US20110027725A1 (en) * 2008-04-04 2011-02-03 Kiyoharu Tsutsumi Polyol compound for photoresist
ES2537529T3 (es) * 2008-06-05 2015-06-09 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Novedosos moduladores de la señalización de proteínas cinasas
PT2307381T (pt) * 2008-06-09 2021-03-15 Univ Muenchen Ludwig Maximilians Novas drogas para inibir a agregação de proteínas envolvidas em doenças relacionadas com a agregação de proteínas e/ou doenças neurodegenerativas
WO2010043631A1 (en) * 2008-10-17 2010-04-22 Universite Libre De Bruxelles Di-vanilloyl and tri-vanilloyl derivatives for use in anti-cancer therapy
WO2011061744A2 (en) 2009-11-19 2011-05-26 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem, Ltd. Novel arylated camphenes, processes for their preparation and uses thereof
WO2011119869A1 (en) * 2010-03-24 2011-09-29 Medical University Of South Carolina Compositions and methods for the treatment of degenerative diseases
WO2011118812A1 (ja) * 2010-03-26 2011-09-29 国立大学法人北海道大学 神経変性疾患治療薬
EP2566333A4 (en) 2010-05-07 2014-04-02 Univ Leland Stanford Junior IDENTIFICATION OF STABILIZERS OF MULTIMEDER PROTEINS
SG185515A1 (en) * 2010-05-13 2012-12-28 Amgen Inc Nitrogen heterocyclic compounds useful as pde10 inhibitors
KR101164869B1 (ko) * 2010-06-16 2012-07-19 한국해양연구원 페놀계 화합물, 그 제조방법 및 이를 포함하는 항균 조성물
EP2428503B1 (de) * 2010-09-10 2014-12-10 Justus-Liebig-Universität Gießen Synthese von tripodalen Catecholderivaten mit einem flexiblen Grundgerüst zur Funktionalisierung von Oberflächen
WO2012068405A2 (en) 2010-11-17 2012-05-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of alpha synuclein expression
US20120251448A1 (en) * 2011-03-03 2012-10-04 Hefti Franz F Compounds for Use in the Detection of Neurodegenerative Diseases
WO2012118935A1 (en) * 2011-03-03 2012-09-07 Proteotech Inc Compounds for the treatment of neurodegenerative diseases
JP2012246224A (ja) * 2011-05-25 2012-12-13 Suntory Holdings Ltd 抗認知症および学習記憶改善剤
US9169255B2 (en) 2011-10-27 2015-10-27 Proteo Tech Inc. Caffeinated compounds and compositions for treatment of amyloid diseases and synucleinopathies
WO2013078413A1 (en) * 2011-11-22 2013-05-30 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Modulators of lipid storage
WO2013106328A1 (en) * 2012-01-09 2013-07-18 Envivo Pharmaceuticals, Inc. Tetrasubstituted benzenes for treatment of early onset alzheimer's disease
WO2013128927A1 (ja) * 2012-02-29 2013-09-06 国立大学法人東京医科歯科大学 新規アンドロゲン受容体アンタゴニスト
GB201208775D0 (en) 2012-05-18 2012-07-04 Uni I Oslo Chemical compounds
JP6291158B2 (ja) * 2012-11-21 2018-03-14 サントリーホールディングス株式会社 抗認知症および学習記憶改善剤
MX2015012559A (es) * 2013-03-15 2016-07-18 Techfields Pharma Co Ltd Novedosos fármacos de alta penetración y sus composiciones para el tratamiento de enfermedades de parkinson.
KR101467673B1 (ko) 2013-03-26 2014-12-04 계명대학교 산학협력단 신규한 페놀산 유도체 및 이의 항산화제로서의 용도
WO2014162320A2 (en) * 2013-04-04 2014-10-09 Sphaera Pharma Pvt. Ltd. Novel analogues of epicatechin and related polyphenols
CN104276973B (zh) * 2013-07-05 2017-05-10 中国科学院大连化学物理研究所 一种羟基肉桂酸胺类生物碱及其制备和应用
WO2015008206A1 (en) 2013-07-14 2015-01-22 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem, Ltd. Igf-1r signaling pathway inhibitors useful in the treatment of neurodegenerative diseases
WO2016013030A2 (en) 2014-07-23 2016-01-28 Sphaera Pharma Pvt. Ltd. Hydroxysteroid compounds, their intermediates, process of preparation, composition and uses thereof
EP3253733B1 (en) 2015-02-05 2020-04-29 TyrNovo Ltd. Combinations of irs/stat3 dual modulators and anti-cancer agents for treating cancer
GB2541910B (en) 2015-09-03 2021-10-27 Thermographic Measurements Ltd Thermochromic composition
BR112018004249A2 (pt) * 2015-09-04 2018-12-04 Shin Poong Pharmaceutical Co., Ltd. composto, e, composição para prevenção ou tratamento de doenças trombóticas.
US10300155B2 (en) 2015-12-31 2019-05-28 Washington University Alpha-synuclein ligands
AU2017244139A1 (en) * 2016-03-31 2018-09-13 Merck Patent Gmbh Compounds for the inhibition of cyclophilins and uses thereof
JP7067745B2 (ja) 2016-06-21 2022-05-16 スフェラ ファーマ ピーブイティー リミテッド （＋）－エピカテキン及びその類似体の有用性
WO2018119395A1 (en) * 2016-12-23 2018-06-28 Aquinnah Pharmaceuticals, Inc. Compouns, compositions and methods of use
NZ755597A (en) 2017-02-17 2023-06-30 Eidos Therapeutics Inc Processes for preparing ag-10, its intermediates, and salts thereof
CN109400573B (zh) * 2017-08-17 2023-04-11 中国人民解放军第二军医大学 苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯类化合物、制备方法及其应用
JP6987104B2 (ja) * 2017-12-28 2021-12-22 テックフィールズ ファーマ カンパニー リミテッド パ−キンソン病治療用の新規高透過薬物及びその組成物
CN111836624A (zh) 2018-01-12 2020-10-27 百时美施贵宝公司 靶向α-突触核蛋白的反义寡核苷酸及其用途
JP2021518381A (ja) 2018-03-23 2021-08-02 エイドス セラピューティクス，インコーポレイティド Ａｇ１０を使用するｔｔｒアミロイドーシスの治療方法
US11260047B2 (en) 2018-08-17 2022-03-01 Eidos Therapeutics, Inc. Formulations of AG10
CA3129243A1 (en) * 2019-02-07 2020-08-13 Alsatech, Inc. Polyvalent derivatives of emoxypine
CA3148602A1 (en) * 2019-08-02 2021-02-11 Acelot, Inc. Small molecule drugs and related methods for treatment of diseases related to tdp-43, alpha-synuclein, huntingtin's protein and tau protein oligomer formation
CN112830884B (zh) * 2019-11-22 2024-06-14 深圳市高盈医药科技开发有限公司 一种丹参素衍生物及其制备方法及其医药用途

Family Cites Families (91)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US197692A (en) * 1877-11-27 Improvement in car-axles
US111309A (en) * 1871-01-31 Improvement in hat-supporters and ventilators combined
US47032A (en) * 1865-03-28 Improvement in buck-saw frames
US168753A (en) * 1875-10-11 Improvement in hemmer attachments for sewing-machines
US86067A (en) * 1869-01-19 Improvement in piston steam-valves
US151506A (en) * 1874-06-02 Improvement in friction-gearings
US150948A (en) * 1874-05-19 Improvement in carving-tools
US17998A (en) * 1857-08-11 sturtevant
US153734A (en) * 1874-08-04 Improvement in weather-strips
US13648A (en) * 1855-10-09 Variable exhaust of locomotive-engines
US119934A (en) * 1871-10-17 Improvement in cotton-presses
US2769817A (en) 1951-06-07 1956-11-06 Nat Drug Co Therapeutic substituted chalcones
US3536809A (en) 1969-02-17 1970-10-27 Alza Corp Medication method
US3598123A (en) 1969-04-01 1971-08-10 Alza Corp Bandage for administering drugs
US3803120A (en) * 1971-09-28 1974-04-09 Hoffmann La Roche Di-and tripeptides of 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-alanine
US3845770A (en) 1972-06-05 1974-11-05 Alza Corp Osmatic dispensing device for releasing beneficial agent
US3916899A (en) 1973-04-25 1975-11-04 Alza Corp Osmotic dispensing device with maximum and minimum sizes for the passageway
FR2302745A1 (fr) * 1975-03-07 1976-10-01 Screen Esters heterosidiques d'acide cafeique, leurs procedes de preparation e
US4008719A (en) 1976-02-02 1977-02-22 Alza Corporation Osmotic system having laminar arrangement for programming delivery of active agent
IE58110B1 (en) 1984-10-30 1993-07-14 Elan Corp Plc Controlled release powder and process for its preparation
US4710384A (en) 1986-07-28 1987-12-01 Avner Rotman Sustained release tablets made from microcapsules
JP2587842B2 (ja) 1987-12-09 1997-03-05 株式会社ニチレイ 神経疾患治療・予防剤
EP0324521A3 (en) * 1988-01-11 1991-11-27 Duphar International Research B.V Method of treating haematologic diseases and pharmaceutical compositions to be used therefor
US5166180A (en) 1988-01-11 1992-11-24 Duphar International Research B.V. Method of treating hematologic diseases and pharmaceutical composition to be used therefor
US5061629A (en) 1988-01-26 1991-10-29 Hoffman-La Roche Inc. Production of 2-hydroxy substituted arylalkanoic acids and esters by enzymatic hydrolysis
JPH01291242A (ja) * 1988-05-18 1989-11-22 Tosoh Corp 新規感光剤含有ポジ型フォトレジスト組成物
DE3822449A1 (de) 1988-07-02 1990-01-04 Henkel Kgaa Oxidationshaarfaerbemittel mit neuen kupplern
US5073543A (en) 1988-07-21 1991-12-17 G. D. Searle & Co. Controlled release formulations of trophic factors in ganglioside-lipsome vehicle
IT1229203B (it) 1989-03-22 1991-07-25 Bioresearch Spa Impiego di acido 5 metiltetraidrofolico, di acido 5 formiltetraidrofolico e dei loro sali farmaceuticamente accettabili per la preparazione di composizioni farmaceutiche in forma a rilascio controllato attive nella terapia dei disturbi mentali organici e composizioni farmaceutiche relative.
US5120548A (en) 1989-11-07 1992-06-09 Merck & Co., Inc. Swelling modulated polymeric drug delivery device
US5733566A (en) 1990-05-15 1998-03-31 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Ii Controlled release of antiparasitic agents in animals
US5478579A (en) 1991-02-06 1995-12-26 Biodyn Medical Research, Inc. Method for treatment of osteoporosis
EP0515128A1 (en) 1991-05-23 1992-11-25 Konica Corporation Silver halide color photographic light-sensitive material
GB2264707A (en) 1991-06-18 1993-09-08 Roger Michael Marchbanks Acridine derivatives for treating alzheimer's disease
US5580578A (en) 1992-01-27 1996-12-03 Euro-Celtique, S.A. Controlled release formulations coated with aqueous dispersions of acrylic polymers
US5958883A (en) 1992-09-23 1999-09-28 Board Of Regents Of The University Of Washington Office Of Technology Animal models of human amyloidoses
US5591767A (en) 1993-01-25 1997-01-07 Pharmetrix Corporation Liquid reservoir transdermal patch for the administration of ketorolac
US5643562A (en) 1993-03-29 1997-07-01 Queen's University Of Kingston Method for treating amyloidosis
US5840294A (en) 1993-03-29 1998-11-24 Queen's University At Kingston Method for treating amyloidosis
US5552415A (en) 1993-12-21 1996-09-03 Eli Lilly And Company Method of inhibiting Alzheimer's Disease
IT1270594B (it) 1994-07-07 1997-05-07 Recordati Chem Pharm Composizione farmaceutica a rilascio controllato di moguisteina in sospensione liquida
US5610185A (en) * 1995-02-17 1997-03-11 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method for the treatment of hyperproliferative epithelial skin diseases by topical application of hydroxylated aromatic protein cross-linking compounds
EP0937137A4 (en) 1996-06-06 2002-10-23 Univ Washington PERLECAN EXPRESSIVE TRANSGENIC ANIMALS AND METHOD FOR IDENTIFYING COMPOUNDS FOR TREATING AMYLOIDOSIS
US6432636B1 (en) 1996-08-26 2002-08-13 University Of Washington Diagnostic applications of perlecan domain I splice variants
FR2753098B1 (fr) 1996-09-06 1998-11-27 Sod Conseils Rech Applic Composition pharmaceutique comprenant au moins un inhibiteur de no synthase et au moins un piegeur des formes reactives de l'oxygene
US5703129A (en) 1996-09-30 1997-12-30 Bristol-Myers Squibb Company 5-amino-6-cyclohexyl-4-hydroxy-hexanamide derivatives as inhibitors of β-amyloid protein production
ES2215220T3 (es) 1996-10-07 2004-10-01 MERCK &amp; CO., INC. Derivados de sordarina.
US6933280B2 (en) 1996-10-08 2005-08-23 Gerardo Castillo Peptides for the treatment of Alzheimer's disease and other beta-amyloid protein fibrillogenesis disorders
CA2268029C (en) 1996-10-08 2008-11-25 University Of Washington Therapeutic and diagnostic applications of laminin and laminin-derived protein fragments
JPH10175852A (ja) 1996-10-15 1998-06-30 Dokutaazu Kosumeteikusu:Kk 津液改善剤及びそれを含有する経口投与用組成物
JPH10175854A (ja) 1996-10-18 1998-06-30 Dokutaazu Kosumeteikusu:Kk 津液改善用皮膚外用剤
US6635632B1 (en) * 1996-12-23 2003-10-21 Athena Neurosciences, Inc. Cycloalkyl, lactam, lactone and related compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
GB9702310D0 (en) 1997-02-05 1997-03-26 Univ Hertfordshire Invention
JPH10245342A (ja) 1997-03-03 1998-09-14 Mitsui Norin Kk β−アミロイド蛋白の神経細胞毒性低減剤
WO1998039653A1 (en) 1997-03-06 1998-09-11 University Of Washington Methods for producing pure perlecan and other heparan sulfate proteoglycans
CA2289531C (en) 1997-05-15 2009-09-29 University Of Washington Composition and methods for treating alzheimer's disease and other amyloidoses
US6346280B1 (en) 1997-05-15 2002-02-12 University Of Washington Composition and methods for inhibiting the formation of brain amyloid deposits
US6264994B1 (en) 1997-05-15 2001-07-24 University Of Washington Compositions for treating alzheimer's disease and other amyloidoses
US20030017998A1 (en) 1997-05-16 2003-01-23 Snow Alan D. Proanthocyanidins for the treatment of amyloid and alpha-synuclein diseases
CA2301725C (en) 1997-08-28 2008-11-18 University Of Washington Specific saccharide compositions and methods for treating alzheimer's disease and other amyloidoses
US6432639B1 (en) * 1997-09-10 2002-08-13 Dna Sciences Laboratories, Inc. Isolated CYP3A4 nucleic acid molecules and detection methods
AU3083899A (en) 1998-03-13 1999-09-27 University Of Washington (in vitro) formation of congophilic maltese-cross amyloid plaques to identify anti-plaque therapeutics for the treatment of alzheimer's and prion diseases
EP1077695A2 (en) 1998-05-22 2001-02-28 Avanir Pharmaceuticals COMPOUNDS HAVING IgE AFFECTING PROPERTIES
US6767898B2 (en) 1998-08-28 2004-07-27 University Of Washington Methods for using specific saccharides for treating alzheimer's disease and other amyloidoses
WO2000012102A1 (en) 1998-08-31 2000-03-09 Proteotech, Inc. Blended compositions for treatment of alzheimer's disease and other amyloidoses
US6255498B1 (en) * 1998-10-16 2001-07-03 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Method for synthesizing diaryl-substituted heterocyclic compounds, including tetrahydrofurans
WO2000057707A1 (en) 1999-03-15 2000-10-05 Proteotech, Inc. Methods of treating alzheimer's disease and other amyloidoses using hypericum perforatum and derivatives thereof
AU3888100A (en) 1999-03-15 2000-10-04 Proteotech, Inc. Therapeutic and diagnostic applications of p400: a newly discovered beta-amyloidbinding protein present in human biological fluids
WO2000055167A1 (fr) * 1999-03-17 2000-09-21 Shionogi & Co., Ltd. Derives de 2-pyridinethiol et reactifs permettant la mesure de l'activite de la nag contenant ceux-ci
US6562836B1 (en) * 1999-05-24 2003-05-13 Queen's University Of Kingston Methods and compounds for inhibiting amyloid deposits
WO2001021160A2 (en) 1999-09-23 2001-03-29 Axxima Pharmaceuticals Aktiengesellschaft Carboxymide and aniline derivatives as selective inhibitors of pathogens
US20010047032A1 (en) 1999-12-30 2001-11-29 Castillo Gerardo M. Polyhydroxylated aromatic compounds for the treatment of amyloidosis and alpha-synuclein fibril diseases
JP2003519192A (ja) 1999-12-30 2003-06-17 プロテオテック・インコーポレーテッド アルツハイマー病におけるアミロイド症および他のアミロイド症の治療のためのカテキンおよび緑茶抽出物
JP2003520854A (ja) 2000-01-27 2003-07-08 サイトビア インコーポレイテッド カスパーゼのアクチベーターおよびアポトーシスのインデューサーとしての置換ニコチンアミドおよび類似物およびそれらの使用
AU2001230026A1 (en) 2000-02-04 2001-08-14 Novo-Nordisk A/S 2,4-diaminothiazole derivatives
US7205008B2 (en) 2000-03-15 2007-04-17 Proteotech, Inc. Methods of treating Alzheimer's disease and other amyloidoses using Hypericum perforatum and derivatives thereof
JP2001341424A (ja) 2000-05-31 2001-12-11 Asahi Kasei Corp ウレアウレタン化合物顕色剤用増感剤
DE10030891A1 (de) * 2000-06-23 2002-01-03 Haarmann & Reimer Gmbh 3,4-Dihydroxybenzyl-substituierte Kohlensäurederivate und ihre Verwendung als Antioxidantien in kosmetischen und pharmazeutischen Präparaten
US6472436B1 (en) * 2000-07-17 2002-10-29 The Salk Institute For Biological Studies Methods for protecting cells from amyloid toxicity and for inhibiting amyloid protein production
AU2002239765A1 (en) 2000-11-03 2002-06-03 Proteotech, Inc. Antibody pti-hs7 for treatment of alzheimer's disease and other amyloidoses and parkinson's disease
AU3976402A (en) 2000-11-03 2002-06-03 Proteotech Inc Methods of isolating amyloid-inhibiting compounds and use of compounds isolated from uncaria tomentosa and related plants
WO2002042329A2 (en) 2000-11-21 2002-05-30 Diadexus, Inc. Compositions and methods relating to prostate specific genes and proteins
US20020128208A1 (en) 2000-12-15 2002-09-12 Snyder James P. Nonpeptide agonists and antagonists of vasopressin receptors
US20020151506A1 (en) 2000-12-29 2002-10-17 Castillo Gerardo M. Catechins for the treatment of fibrillogenesis in Alzheimer's disease, Parkinson's disease, systemic AA amyloidosis, and other amyloid disorders
SE0100374D0 (sv) 2001-02-07 2001-02-07 Pharmacia Ab Novel compositions of potassium channel openers and protein kinase c inhibitors and use thereof
WO2002076381A2 (en) 2001-03-15 2002-10-03 Proteotech, Inc. Proanthocyanidins for the treatment of amyloid and alpha-synuclein diseases
ATE517617T1 (de) 2001-12-10 2011-08-15 Yansheng Dr Du Behandlung von parkinson erkrankung mit kape
PT1511710E (pt) * 2002-05-31 2014-02-26 Proteotech Inc Compostos, composições e métodos para o tratamento de doenças da amiloide e sinucleínopatias tais como doença de alzheimer, diabetes do tipo 2, e doença de parkinson
US7601876B2 (en) * 2002-05-31 2009-10-13 Proteotech, Inc. Compounds, compositions and methods for the treatment of amyloid diseases such as systemic AA amyloidosis
US20070276034A1 (en) * 2002-05-31 2007-11-29 Luke Esposito Compounds, compositions and methods for the treatment of synucleinopathies
AU2003249244A1 (en) 2002-07-15 2004-02-02 Combinatorx, Incorporated Methods for the treatment of neoplasms

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