ES2414533T3 - Derivados Piridin-2-ilo como agentes inmunomoduladores - Google Patents

Abstract

Un compuesto de Fórmula (I), **Fórmula** en la que A representa **Fórmula** en las que los asteriscos indican el enlace que está unido al grupo piridina de Fórmula (I); R1 representa metilo, etilo o metoxi; R2 representa hidrógeno; y R3 representa alquilo C2-5 o alcoxi C1-4; o R1 representa alquilo C2-5 o alcoxi C1-4; R2 representa hidrógeno; y R3 representa metilo o etilo; o R1 representa metilo, etilo, o metoxi; R2 representa alquilo C3-5; y R3 representa hidrógeno;R4 representa hidrógeno; R5 representa hidrógeno, alquilo C1-3 o metoxi.

Description

Derivados Piridin-2-ilo como agentes inmunomoduladores

Campo de la Invención

La presente invención se refiere a agonistas del receptor S1P1/EDG1 de Fórmula (I) y su uso como ingredientes activos en la preparación de composiciones farmacéuticas. La invención se refiere también a los aspectos relacionados que incluyen procedimientos para la preparación de los compuestos, composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la Fórmula (I), y su uso como compuestos que mejoran la función vascular y como agentes inmunomoduladores, tanto solos como en combinación con otros compuestos activos o terapias.

Antecedentes de la Invención

El sistema inmunitario humano está diseñado para defender al cuerpo humano contra microorganismos extraños y sustancias que causan infección o enfermedad. Mecanismos reguladores complejos aseguran que la respuesta inmunitaria se dirija contra las sustancias u organismos intrusos y no contra el huésped. En algunos casos, estos mecanismos de control están desregulados y pueden desarrollar respuestas autoinmunitarias. Una consecuencia de una respuesta inflamatoria no controlada es daños orgánicos, celulares, tisulares o en articulaciones, graves. Con los actuales tratamientos, la totalidad del sistema inmunitario es usualmente suprimido y la capacidad del cuerpo para reaccionar a las infecciones está también severamente comprometida. Los fármacos típicos en esta clase incluyen azatioprina, clorambucil, ciclofosfamida, ciclosporina o metotrexato. Los corticosteroides que reducen la inflamación y suprimen la respuesta inmunitaria, pueden causar efectos secundarios cuando se usan en un tratamiento a largo plazo. Los fármacos anti-inflamatorios no esteroidales (AINE) pueden reducir el dolor y la inflamación, sin embargo, exhiben considerables efectos secundarios. Los tratamientos alternativos incluyen agentes que activan o bloquean la señalización de citocina.

Los compuestos oralmente activos con propiedades inmunomoduladoras, que no comprometen la respuesta inmunítaria y con reducción de los efectos secundarios pueden mejorar significativamente los actuales tratamientos de enfermedad inflamatoria descontrolada.

En el campo del transplante de órganos, la respuesta inmunitaria del huésped debe suprimirse para evitar el rechazo del órgano. Los receptores de transplante de órganos pueden experimentar algún rechazo aún cuando estén tomando fármacos inmunosupresores. El rechazo ocurre más frecuentemente en las primeras pocas semanas después del transplante, pero los episodios de rechazo pueden ocurrir también meses, o aún años después del transplante. Comúnmente se usan combinaciones de hasta tres o cuatro medicaciones para proporcionar la protección máxima contra el rechazo, al mismo tiempo que se minimizan los efectos secundarios. Los fármacos estándares actuales usados para el tratamiento del rechazo del transplante de órganos interfieren con las distintas vías intracelulares en la activación de leucocitos de tipo T o de tipo B. Ejemplos de tales fármacos son ciclosporina, daclizumab, basiliximab, everolimus o FK506, que interfieren con la liberación o señalización de citocina; azatioprina

o leflunomida, que inhiben la síntesis de nucleótidos; o 15-desoxiespergualina, un inhibidor de la diferenciación de leucocitos.

Los efectos beneficiosos de las amplias terapias inmunosupresoras se refieren a sus efectos; sin embargo, la inmunosupresión generalizada que producen estos fármacos disminuye la defensa del sistema inmunitario contra la infección y tumores malignos. Además, los fármacos inmunosupresores convencionales son usualmente usados a altas dosis y pueden causar o acelerar el daño orgánico.

En los documentos WO-A-2005/058848 y WO-A-2005/032465, se desvelan derivados de piridin-2-ilo como inmunomoduladores.

Descripción Detallada de la Invención

La presente invención proporciona nuevos compuestos de Fórmula (I) que son agonistas para el receptor S1P1/EDG1 acoplado a proteína G y tienen un efecto inmunomodulador poderoso y de larga duración que se logra reduciendo el número de linfocitos T-/ B-circulantes e infiltrados, sin afectar su maduración, memoria o expansión. La reducción de linfocitos T-/B-circulantes como resultado del agonismo S1P1/EDG1, posiblemente en combinación con la mejora observada en la funcion de la capa celular endotelial asociada con la activación de S1P1/EDG1, hace que tales compuestos sean útiles para el tratamiento de enfermedades inflamatorias descontroladas y para mejorar la funcionalidad vascular.

Los compuestos de la presente invención pueden utilizarse solos o en combinación con fármacos convencionales que inhibien la activación de células T, para proporcionar una nueva terapia inmunomoduladora con una tendencia reducida para infecciones, cuando se compara con una terapia inmunosupresora convencional. Además, los compuestos de la presente invención pueden usarse en combinación con dosis reducidas de terapias inmunosupresoras tradicionales, para proporcionar, por un lado una actividad inmunomoduladora eficaz, mientras que por otro lado se reduce el daño terminal en el órgano con dosis más altas de fármacos inmunosupresores convencionales. La observación de la mejora de la función de la capa celular endotelial asociada con la activación

de S1P1/EDG1 proporciona beneficios adicionales de compuestos que mejoran la función vascular.

La secuencia nucleotídica y la secuencia de amino ácido para el receptor S1P1/EDG1 humano se conocen en la materia y están publicadas en, por ejemplo, Hla, T., y Maciag, T. J. Biol Chem. 265 (1990), 9308-9313; documento WO 91/15583 publicado el 17 de Octubre de 1991; documento WO 99/46277 publicado el 16 de Septiembre de 1999. La potencia y eficacia de los compuestos de Fórmula (I) se verifican usando un ensayo GTPγS para determinar los valores CE50 y mediante la medición de los linfocitos circulantes en la rata después de administración oral, respectivamente (véase en los Ejemplos).

i) La invención se refiere a compuestos piridina de la Fórmula (I).

Fórmula (I)

en la que A representa

en las que los asteriscos indican el enlace que está unido al grupo piridina de Fórmula (I); R1 representa metilo, etilo o metoxi; R2 representa hidrógeno; y R3 representa alquilo C2-5 o alcoxi C1-4; o R1 representa alquilo C2-5 o alcoxi C1-4; R2 representa hidrógeno; y R3 representa metilo o etilo; o R1 representa metilo, etilo, o metoxi; R2 representa alquilo C3-5;y R3 representa hidrógeno; R4 representa hidrógeno o metoxi; R5 representa hidrógeno, alquilo C1-3, o metoxi; R6 representa -CH2-(CH2)n-CONR61R62, 1-(3-carboxi-azetidinil)-3-propionilo, 1-(2-carboxi-pirrolidinil)-3-propionilo, 1(3-carboxi-pirrolidinil)-3-propionilo, hidroxi, hidroxi-alcoxi C2-4, di-(hidroxi-alquilo C1-2)-alcoxi C1-2, 2,3-dihidroxi-propoxi, -OCH2-(CH2)n-NR61R62, 2-[(ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-etoxi, 2-[(éster de alquilo C1-5 de ácido azetidin-3carboxílico)-1-il]-etoxi, 2-[(ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]-etoxi, 2-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-3carboxílico)-1-il]-etoxi, -OCH2-CH(OH)-CH2-NR61R62, 3-[(ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-2-hidroxipropoxi, 3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-2-hidroxipropoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]propoxi, 2-hidroxi-3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]-propoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin2-carboxílico)-1-il]-propoxi, 2-hidroxi-3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-2-carboxílico)-1-il]-propoxi, -OCH2(CH2)n-NHSO2R63, -OCH2-CH(OH)-CH2-NHSO2R63, -OCH2-(CH2)n-NHCOR64 u -OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR64;

R61

representa hidrógeno, metilo, etilo, 2-hidroxietilo, carboximetilo, 1-(alquilcarboxi C1-5)metilo, 2-carboxietilo, 2(alquilcarboxi C1-5)etilo, 2-aminoetilo o 2-metilamino-etilo; R62 representa hidrógeno o metilo; R63 representa alquilo C1-3, metilamino, etilamino o dimetilamino; R64 representa hidroximetilo, 2-hidroxietilo, aminometilo, metilaminometilo, 2-aminoetilo o 2-metilamino-etilo; n representa el número entero 1 o 2; y R7 representa hidrógeno, metilo o cloro.

Los términos generales usados anteriormente o más adelante en el presente documento tienen preferentemente, dentro de la presente divulgación, los siguientes significados, a menos que se indique lo contrario:

El término "alquilo Cx-y" (siendo cada uno de x e y un número entero) se refiere a una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada con x a y átomos de carbono. Por lo tanto, la expresión alquilo C1-5, solo o en combinación con otros grupos, se refiere a grupos saturados de cadena lineal o ramificada con uno a cinco átomos de carbono. Son ejemplos de grupos alquilo C1-5, metilo, etilo, n-propilo, n-butilo, iso-butilo, n-pentilo, 3-pentilo e iso-pentilo. Son ejemplos preferidos de grupos alquilo C1-3, metilo y etilo. Son ejemplos preferidos de grupos alquilo C2-5 etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo, iso-butilo, n-pentilo, 3-pentilo e iso-pentilo. Son ejemplos preferidos de grupos

alquilo C2-4 etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo e iso-butilo.

El término "alcoxi Cx-y" (siendo cada uno de x e y un número entero) se refiere a un grupo alquil-O-en el que el grupo alquilo se refiere a una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada con x a y átomos de carbono. Por ejemplo, un grupo alcoxi C1-4 contiene de uno a cuatro átomos de carbono e incluye metoxi, etoxi, n-propoxi, iso-propoxi, nbutoxi, iso-butoxi, sec-butoxi y terc-butoxi. Son ejemplos preferidos de grupos alcoxi C1-4, etoxi, propoxi, iso-propoxi, e iso-butoxi. Son ejemplos preferidos de grupos alcoxi C2-4, etoxi, n-propoxi e iso-propoxi. Son ejemplos de grupos alcoxi C1-3, metoxi, etoxi, n-propoxi e iso-propoxi.

ii) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con la realización i), en los que A representa

en las que los asteriscos indican el enlace que está unido al grupo piridina de Fórmula (I).

iii) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con la realización i), en los que A representa

en la que el asterisco indican el enlace que está unido al grupo piridina de Fórmula (I).

iv) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a iii), en los que R1 representa metilo o metoxi, R2 representa hidrógeno y R3 representa alquilo C2-4 o alcoxi C1-3.

v) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a iii), en los que R1 representa metilo, R2 representa hidrógeno y R3 representa alquilo C2-4 o alcoxi C1-3.

vi) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con unacualquiera de las realizaciones i) a iii), en los que R1 representa alquilo C2-4 o alcoxi C1-3, R2 representa hidrógeno y R3 representa metilo.

vii) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a iii), en los que R1 representa alquilo C2-4, R2 representa hidrógeno y R3 representa metilo.

viii) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a iii), en los que R1 representa metilo, R2 representa alquilo C4 y R3 representa hidrógeno.

ix) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a viii), en los que al menos uno de R4 , R5 y R7 representa un grupo distinto de hidrógeno.

x) Otra realización particular de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a viii), en los que R4 representa metoxi, y R5 y R7 representan hidrógeno.

xi) Otra realización particular de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a viii), en los que R4 representa hidrógeno, R5 representa alquilo C1-3 o metoxi y R7 representa metilo

o cloro.

xii) Otra realización particular de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a viii), en los que R4 representa hidrógeno, R5 representa alquilo C1-2 o metoxi y R7 representa metilo

o cloro.

xiii) Otra realización particular de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a viii), en los que R4 representa hidrógeno, R5 representa etilo o metoxi, y R7 representa metilo o cloro.

xiv) Otra realización particular de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a viii), en los que R4 representa hidrógeno, R5 representa etilo y R7 representa metilo.

xv) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a xiv), en los que R6 representa -CH2-(CH2)n-CONR61R62, 1-(3-carboxi-azetidinil)-3-propionilo, 1-(2carboxi-pirrolidinil)-3-propionilo, 1-(3-carboxi-pirrolidinil)-3-propionilo, di-(hidroxi-alquilo C1-2)-alcoxi C1-2, 2,3-dihidroxipropoxi, -OCH2-(CH2)n-NR61R62, 2-[(ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-etoxi, 2-[(éster de alquilo C1-5 de ácido azetidin3-carboxílico)-1-il]-etoxi, 2-[(ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]-etoxi, 2-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-3carboxílico)-1-il]-etoxi, -OCH2-CH(OH)-CH2-NR61R62, 3-[(ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-2-hidroxipropoxi, 3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-2-hidroxipropoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]propoxi, 2-hidroxi-3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]-propoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin2-carboxílico)-1-il]-propoxi, 2-hidroxi-3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-2-carboxílico)-1-il]-propoxi o -OCH2CH(OH)-CH2-NHCOR64.

xvi) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a xiv), en los que R6 representa -CH2-(CH2)n-CONR61R62, 1-(3-carboxi-azetidinil)-3-propionilo, 1-(2carboxi-pirrolidinil)-3-propionilo, 1-(3-carboxi-pirrolidinil)-3-propionilo, 2,3-dihidroxi-propoxi, -OCH2-CH(OH)-CH2-

NR61R62

, 3-[(ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-2-hidroxipropoxi, 3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido azetidin-3carboxílico)-1-il]-2-hidroxipropoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]-propoxi, 2-hidroxi-3-[(éster de alquilo C1-05 de ácido pirrolidin-3-carboxílico C1-5)-1-il]-propoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin-2-carboxílico)-1-il]propoxi, 2-hidroxi-3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-2-carboxílico)-1-il]-propoxi o -OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR64.

xvii) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a xiv), en los que R6 representa 2,3-dihidroxi-propoxi, 3-[(ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-2hidroxipropoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]-propoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin-2-carboxílico)-1il]-propoxi o -OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR64.

xviii) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a xiv), en los que R6 representa 2,3-dihidroxi-propoxi o -OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR64.

xix) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a xiv), en los que R6 representa -OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR64.

xx) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a xvi), en los que R61 representa metilo, 2-hidroxietilo, carboximetilo, 2-aminoetilo o 2-metilaminoetilo.

xxi) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a xvi) y xx), en los que R62 representa hidrógeno.

xxii) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a xiv) y xx) a xxi), en los que R63 representa metilo.

xxiii) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a xxii), en los que R64 representa hidroximetilo.

xxiv) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones i) a xvi) y xx) a xxiii), en los que n representa el número entero 1.

xxv) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con la realización i), en los que A representa

donde los asteriscos indican el enlace que está unido al grupo piridina de Fórmula (I); R1 representa metilo, o metoxi; R2 representa hidrógeno; y R3 representa alquilo C4; o R1 representa alquilo C4; R2 representa hidrógeno; y R3 representa metilo; o R1 representa metilo; R2 representa alquilo C4;y R3 representa hidrógeno; R4 representa hidrógeno; R5 representa metilo o etilo; R6 representa -CH2-(CH2)n-CONR61R62, hidroxi, 2,3-dihidroxi-propoxi, -OCH2-CH(OH)-CH2-NR61R62 o -OCH2CH(OH)-CH2-NHCOR64; R61 representa hidrógeno, metilo, 2-hidroxietilo, carboximetilo, 2-carboxietilo o 2-aminoetilo; R62 representa hidrógeno;

R64 representa hidroximetilo; n representa el número entero 1; y R7 representa metilo.

xxvi) Otra realización de la invención se refiere a derivados piridina de acuerdo con la realización i), donde

donde los asteriscos indican el enlace que está unido al grupo piridina de Fórmula (I); R1 representa metilo o metoxi; R2 representa hidrógeno; y R3 representa alquilo C2-5, tal como isobutilo o 1-etilpropilo; o

10 R1 representa alquilo C2-5, tal como isobutilo; R2 representa hidrógeno; y R3 representa metilo; o R1 representa metilo; R2 representa alquilo C3-5, tal como isobutilo; y R3 representa hidrógeno; R4 representa hidrógeno; R5 representa hidrógeno, alquilo C1-3 (tal como metilo, etilo o n-propilo) o metoxi; R6 representa -CH2-(CH2)n-CONR61R62, hidroxi, hidroxi-alcoxi C2-4 (tal como 2-hidroxi-etoxi), di-(hidroxi-alquilo C1-2)

15 alcoxi C1-2 (tal como di-(hidroximetilo)-metoxi o 3-hidroxi-2-hidroximetil-propoxi), 2,3-dihidroxi-propoxi, -OCH2-(CH2)n-NR61R62, 2-[(ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-etoxi, -OCH2-CH(OH)-CH2-NR61R62, -OCH2-(CH2)n-NHSO2R63, -OCH2CH(OH)-CH2-NHSO2R63, -OCH2-(CH2)n-NHCOR64 u -OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR64;

R61

representa hidrógeno, metilo, 2-hidroxietilo, 2-carboxietilo, 2-(alquilcarboxi C1-5)etilo (tal como 2(metilcarboxi)etilo) o 2-aminoetilo;

20 R62 representa hidrógeno o metilo; R63 representa alquilo C1-3 (tal como etilo) o dimetilamino; R64 representa hidroximetilo o metilaminometilo; n representa el número entero 1; y R7 representa hidrógeno, metilo o cloro.

25 Los compuestos de Fórmula (I) pueden contener uno o más centros estereogénicos o asimétricos, tal como uno o más átomos de carbono asimétricos. Por tanto, los compuestos de Fórmula (I) pueden estar presentes en forma de mezclas de estereoisómeros o, preferentemente, como estereoisómeros puros. Las mezclas de estereoisómeros pueden separarse de manera conocida por un experto en la materia.

Cuando se usa la forma plural para compuestos, sales, composiciones farmacéuticas, enfermedades y similares, se 30 entiende que se refiere también a un solo compuesto, sal o similar.

Cualquier referencia, anteriormente o más adelante en el presente documento, a un compuesto Fórmula (I) se entiende que hace referencia también a sales, especialmente, sales farmacéuticamente aceptables, de un compuesto de Fórmula (I), según sea adecuado y conveniente.

La expresión "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a sales de adición de bases y/o ácidos orgánicas o 35 inorgánicas no tóxicas. Puede hacerse referencia a "Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm. (1986), 33, 201

217.

Se seleccionan ejemplos de compuestos de piridina de acuerdo con la Fórmula (I) entre:

N-((S)-3-{2-etil-4-[5-(6-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2-hidroxiacetamida;

40 N-((S)-3-{2-etil-4-[5-(4-isobutil-6-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2-hidroxiacetamida; 2-hidroxi-N-((R)-2-hidroxi-3-{4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-2,6-dimetil-fenoxi}-propil)acetamida; 2-hidroxi-N-((S)-2-hidroxi-3-{4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-2,6-dimetil-fenoxi}-propil)

45 acetamida; N-((S)-3-{2-etil-4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2-hidroxiacetamida; (S)-3-{4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,3,4]oxadiazol-2-il]-2,6-dimetil-fenoxi}-propan-1,2-diol; (R)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-propan-1,2-diol;

50 (S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-propan-1,2-diol; N-((S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2-hidroxiacetamida; 3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-N-(2-hidroxi-etil)-propionamida; y Acido 3-(3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-propionilamino)-propiónico.

Ejemplos adicionales de compuestos piridina de acuerdo con la Fórmula (I) están seleccionados de:

2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etilamina; Acido 3-(2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etilamino)-propiónico; N-(2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etil)-2-hidroxi-acetamida; 2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-propan-1,3-diol; (S)-1-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-3-(2-hidroxi-etilamino)-propan2-ol; ((S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-amida del ácido etanosulfónico; Acido 3-((S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxipropilamino)-propiónico; (S)-3-(2-etil-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metil-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-propan-1,2-diol; N-[(S)-3-(2-etil-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metil-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2hidroxi-acetamida. (S)-3-(2-Etil-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-propan-1,2-diol; (S)-3-(2-cloro-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-propan-1,2-diol; N-[(S)-3-(2-etil-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2hidroxi-acetamida; N-[(S)-3-(4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-2,6-dimetil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2hidroxi-acetamida; N-[(S)-3-(2-cloro-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2hidroxi-acetamida; N-[(S)-3-(4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-2-metoxi-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]2-hidroxi-acetamida; y N-((2S)-3-{2-etil-4-[3-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-5-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2-hidroxiacetamida.

Los compuestos de Fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables pueden usarse como medicamentos, por ejemplo, en la forma de composiciones farmacéuticas para administración entérica o parenteral, y son adecuados para disminuir el número de linfocitos circulantes y para la prevención y/o tratamiento de enfermedades o trastornos asociados con un sistema inmunitario activado.

La producción de composiciones farmacéuticas puede realizarse de una manera que será familiar para cualquier experto en la materia (véase por ejemplo, Remington, The Science y Practice of Pharmacy, 21ª Edición (2005), Parte 5, "Pharmaceutical Manufacturing" [publicado por Lippincott Williams & Wilkins]) poniendo los compuestos descritos de Fórmula (I) o sus sales farmacéuticamente aceptables, opcionalmente en combinación con otras sustancias terapéuticamente valiosas, en una forma de administración galenica junto con materiales portadores sólidos o líquidos farmacéuticamente aceptables, inertes, no tóxicos adecuados y, si se desea, coadyuvantes farmacéuticamente habituales.

Las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de Fórmula (I) son útiles para la prevención y/o tratamiento de enfermedades o trastornos asociados con un sistema inmunitario activado.

Las enfermedades o trastornos asociados con un sistema inmunitario activado y que son prevenidos/tratados con los compuestos de Fórmula (I) están por ejemplo seleccionados del grupo que consiste en rechazo de transplante de órganos, tejidos o células; enfermedad de injerto versus huésped ocasionado por transplante; síndromes autoinmunitarios que incluyen artritis reumatoide; lupus eritematoso sistémico; síndrome antifosfolipídico; tiroiditis de Hashimoto; tiroiditis linfocítica; esclerosis múltiple, miastenia gravis; diabetes de tipo I; uveitis; epiescleritis; escleritis; enfermedad de Kawasaki, uveo-retinitis; uveitis posterior; uveitis asociada con enfermedad de Behcet; síndrome de uveomeningitis; encefalomielitis alérgica; vasculopatía de aloinjerto crónica; enfermedades autoinmunitarias postinfecciosas que incluyen fiebre reumática, y glomerulonefritis post-infecciosa, enfermedades de la piel hiperproliferativas e inflamatorias; psoriasis; artritis psoriática; dermatitis atópica; miopatia; miositis; osteomielitis; dermatitis por contacto; dermatitis eczematosa; dermatitits seborreica; lichen planus; pénfigo; pénfigoide vesicular; epidermolisis vesicular; urticaria; angioederma; vasculitis; eritema; eosinofilia cutánea; acné; escleroderma; alopecia areata; queratoconjuntivitis; conjuntivitis estacional; queratitis; queratitis herpética; distrofia epitelial corneal; leucoma corneal; pénfigo ocular; úlcera de Mooren; queratitis ulcerativa; escleritis; oftalmopatía de Graves; síndrome de VogtKoyanagi-Harada; sarcoidosis; alérgias al pólen; enfermedad obstructiva reversible de las vías respiratorias; asma bronquial, asma alérgico, asma intrínseco, asma extrínseco; bisinosis, asma crónico o inveterado; asma tardío e hiper-respuesta de las vías respiratorias; bronquiolitis, bronquitis; endometriosis; orquitis; úlceras gástricas, enfermedades isquémicas del intestino; enfermedades inflamatorias del intestino; enterocolitis necrotizante; lesiones intestinales asociadas con quemaduras térmicas; enfermedad celíaca; proctitis; gastroenteritis eosinofílica; mastocitosis; enfermedad de Crohn; colitis ulcerativa; daño vascular causado por enfermedades isquémicas y trombosis; ateroesclerosis; corazón graso; miocarditis; infarto cardíaco; síndrome de aortitis; caquexia debido a enfermedades virales; trombosis vascular; migraña; rinitis; eczema; nefritis intersticial; nefropatía inducida por IgA; síndrome de Goodpasture; síndrome urémico hemolítico; nefropatía diabética; glomeruloesclerosis; glomerulonefritis; nefritis tubulointersticial; cistitis intersticial; miositis múltiple; síndrome de Guillain-Barré; enfermedad de Meniere;

polineuritis; neuritis múltiple; mielitis; mononeuritis; radiculopatia; hipertiroidismo; enfermedad de Basedow; tirotoxicosis; aplasia pura de glóbulos rojos; anemia aplásica; anemia hipoplástica; púrpura trombocitopenica idiopática; anemia hemolítica autoimmunitaria; trombocitopenia autoinmunitaria; agranulocitosis; anemia perniciosa; anemia megaloblástica; aneritroplasia; osteoporosis; pulmón fibrótico; neumonía intersticial idiopática; dermatomiositis; leucoderma vulgaris; ichthiosis vulgaris; sensibilidad fotoalérgica; linfoma cutáneo de células T; linfoma, poliarteritis nodosa; corea de Huntington; corea de Sydenham; miocardosis; miocarditis; escleroderma; glaucoma de Wegener'; síndrome de Sjogren; adiposis; fascitis eosinofílica; lesiones de las encias, periodoncio, hueso alveolar, substantia ossea dentis; alopecia de patrón masculino o alopecia señil; distrofia muscular; pioderma; síndrome de Sezary; hipofisitis; insuficiencia adrenérgica crónica; enfermedad de Addison; lesiones de órganos por reperfusión de isquemia que ocurre por preservación; shock por endotoxina; colitis pseudomembranosa; colitis causada por fármaco o radiación; insuficiencia renal isquémica aguda; insuficiencia renal crónica; cáncer de pulmón; tumores de origen linfoide; leucemias linfocíticas agudas o crónicas; linfoma, enfisema pulmonar; catarata; siderosis; retinitis pigmentosa; degeneración macular señil; cicatrización vitrea; quemadura por álcali corneal; dermatitis eritematosa; dermatitis vesicular, dermatitis cementosa; gingivitis; periodontitis; septisemia; pancreatitis; enfermedad arterial periférica; carcinogénesis; tumores cancerígenos masizos; metastasis de carcinoma; hipobaropatia; hepatitis autoimmunitaria; cirrosis biliar primaria; colangitis esclerosante; resección parcial del hígado; necrosis aguda del hígado; cirrosis; cirrosis alcohólica; falla hepática; falla hepática fulminante; falla hepática de comienzo lento; y falla del hígado "aguda-o-crónica".

Las enfermedades o trastornos preferidos que deben tratarse y/o prevenirse con los compuestos de Fórmula (I) se seleccionan entre grupo que consiste en rechazo de órganos transplantados, tales como riñón, hígado, corazón, pulmón, páncreas, córnea y piel; enfermedad de injerto frente a huésped ocasionado por transplante de células madre; síndromes autoinmunitarios que incluyen artritis reumatoide, esclerosis múltiple, enfermedad inflamatoria del intestino tales como enfermedad de Crohn y colitis ulcerativa, psoriasis, artritis psoriática, tiroiditis tal como tiroiditis de Hashimoto, uveo-retinitis; enfermedades atópicas tales como rinitis, conjuntivitis, dermatitis; asma; diabetes de tipo I, enfermedades autoinmunitarias post-infecciosas que incluyen fiebre reumática y glomerulonefritis postinfecciosa; cánceres sólidos y metástasis tumoral.

Las enfermedades o trastornos particularmente preferidos que deben tratarse y/o prevenirse con los compuestos de Fórmula (I) se selccionan entre el grupo que consiste en rechazo al transplante de órganos seleccionados entre riñón, hígado, corazón y pulmón; enfermedad de injerto versus huésped ocasionada por transplante de células madre; síndromes autoinmunitarios seleccionados de artritis reumatoide, esclerosis múltiple, psoriasis, artritis psoriática, enfermedad de Crohn, y tiroiditis de Hashimoto; y dermatitis atópica. Preferiblemente, muchas de las enfermedades o trastornos que deben tratarse y/o prevenirse con los compuestos de Fórmula (I) están seleccionados de esclerosis múltiple y psoriasis.

La presente invención divulga también un procedimiento para la prevención o tratamiento de una enfermedad o trastorno mencionado en el presente documento, que comprende administrar a un sujeto una cantidad farmacéuticamente activa de un compuesto de Fórmula (I).

Además, los compuestos de Fórmula (I) son también útiles, en combinación con uno o varios agentes inmunomoduladores, para la prevención y/o tratamiento de las enfermedades y trastornos mencionados en el presente documento. De acuerdo con una realización preferida de la invención, los agentes se selccionan entre el grupo que consiste en inmunosupresores, corticoesteroides, fármacos citotóxicos AINE, inhibidores de la adhesión molecular, citocinas, inhibidores de citocinas, agonistas del receptor citocina y receptores recombinantes de citocina.

La presente invención se refiere también al uso de un compuesto de Fórmula (I) para la preparación de una composición farmacéutica, opcionalmente para su uso en combinación con uno o varios agentes inmunomoduladores, para la prevención o tratamiento de las enfermedades y trastornos mencionados en el presente documento.

Los compuestos de Fórmula (I) pueden fabricarse mediante los procedimientos dados a continuación, mediante los procedimientos dados en los Ejemplos o mediante procedimientos análogos. Las condiciones de reacción óptimas pueden variar con los reactivos o disolventes particulares usados, pero dichas condiciones pueden determinarse por un experto en la materia mediante procedimientos de optimización rutinarios.

Los compuestos de Fórmula (I) de la presente invención pueden prepararse de acuerdo con la secuencia general de reacciones indicada a continuación. Solo se describen unas pocas de las posibilidades sintéticas que conducen a los compuestos de Fórmula (I).

Estructura 1

Los compuestos de Fórmula (I) que respresentan un derivado 5-piridin-2-il-[1,2,4]oxadiazol, se preparan haciendo reaccionar un compuesto de Estructura 1 en un disolvente, tal como xileno, tolueno, benceno, piridina, DMF, THF, 5 dioxano, DME, diclorometano, ácido acético, ácido trifluoracético, etc..., a temperatura ambiente o a temperaturas elevadas, en presencia o ausencia de auxiliares, tales como ácidos (por ejemplo, TFA, ácido acético HCl, etc.), bases (por ejemplo, NaH, NaOAc, Na2CO3, K2CO3, NEt3, etc.), sales de tetraalquilamonio o agentes deliminación de agua (por ejemplo, cloruro de oxalilo, anhídrido de ácido carboxílico, POCl3, PCl5, P4O10, tamices moleculares, reactivo de Burgess, etc.) (Bibl.: por ejemplo, A. R. Gangloff, J. Litvak, E. J. Shelton, D. Sperandio, V. R. Wang, K. D.

10 Rice, Tetrahedron Lett. 42 (2001), 1441-1443; T. Suzuki, K. Iwaoka, N. Imanishi, Y. Nagakura, K. Miyta, H. Nakahara, M. Ohta, T. Mase, Chem. Pharm. Bull. 47 (1999), 120-122; R. F. Poulain, A. L. Tartar, B. P. Déprez, Tetrahedron Lett. 42 (2001), 1495-1498; R. M. Srivastava, F. J. S. Oliveira, D. S. Machado, R. M. Souto-Maior, Synthetic Commun. 29 (1999), 1437-1450; E. O. John, J. M. Shreeve, Inorganic Chemistry 27 (1988), 3100-3104; B. Kaboudin, K. Navaee, Heterocycles 60 (2003), 2287-2292).

Estructura 2 Estructura 3

Los compuestos de Estructura 1 pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de Estructura 2 con un compuesto de Estructura 3, en un disolvente, tal como DMF, THF, DCM, etc.., en presencia o ausencia de uno o más agentes de acoplamiento, tales como TBTU, DCC, EDC, HBTU, CDI, etc.., y en presencia o ausencia de una

20 base, tal como NEt3, DIPEA, NaH, K2CO3, etc.., (Bibl.: por ejemplo, A. Hamze, J.-F. Hernandez, P. Fulcrand, J. Martinez, J. Org. Chem. 68 (2003) 7316-7321; y la bibliografía citada anteriormente).

Estructura 4 Estructura 5

Los compuestos de Fórmula (I) que representan un derivado de 3-piridin-2-il-[1,2,4]oxadiazol, se preparan de

25 manera análoga (Bibl.: por ejemplo, C. T. Brain, J. M. Paul, Y. Loong, P. J. Oakley, Tetrahedron Lett. 40 (1999) 3275-3278) haciendo reaccionar un compuesto de Estructura 4 con un compuesto de Estructura 5 y posterior ciclización del intermedio éster de hidroxiamidina.

Estructura 6 Estructura 7

Los compuestos de Estructura 3 y 4 pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de Estructura 6 y 7, respectivamente, con hidroxilamina o una de sus sales, en un disolvente, tal como MeOH, EtOH, piridina, etc. en presencia o ausencia de una base, tal como Na2CO3, K2CO3, terc-butilato potásico, NEt3, etc. (Bibl.: por ejemplo, E. Meyer, A. C. Joussef, H. Gallardo, Synthesis 2003, 899-905; WO 2004/035538 (Merck & Co., Inc., Estados Unidos)).

Dependiendo de la naturaleza de las funcionalidades presentes en los residuos R4 a R7 en las Estructuras 3, 5 y 7, estas funcionalidades pueden requerir protección temporal. Los grupos protectores adecuados se conocen por un experto en la materia e incluyen, por ejemplo, un grupo bencilo o trialquilsililo para proteger un alcohol, un cetal para proteger un diol, etc. Estos grupos protectores pueden emplearse de acuerdo con metodología convencional (por ejemplo, T. W. Greene, P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3ª Edición, Wiley New York, 1991; P.

J. Kocienski, Protecting Groups, Thieme Stuttgart, 1994). Alternativamente, los residuos deseados R4 a R7, en particular R6, pueden también introducirse en etapas posteriores que siguen al acoplamiento de los compuestos piridina de Estructura 2 o 4 con los derivados fenilo de Estructura 3 o 5, respectivamente, usando un precursor adecuado de un compuesto de Estructura 3 o 5. Los compuestos de fenilo de Estructura 3 y 5 o sus precursores están disponibles en el mercado o se preparan de acuerdo con procedimientos conocidos por un experto en la materia.

Estructura 8 Estructura 9

Los compuestos de Fórmula (I) que representan un derivado de 2-piridin-2-il-[1,3,4]oxadiazol, se preparan de manera similar haciendo reaccionar un compuesto de Estructura 2 con hidrazina (usando un reactivo de acoplamiento, tal como TBTU, DCC, EDC, HBTU, PyBOP, CDI, etc.) para formar un compuesto de Estructura 8 que después se acopla con un compuesto de Estructura 5 para proporcionar un compuesto de Estructura 9. Un compuesto de Estructura 9 también puede prepararse siguiendo el orden de reacción inverso, es decir, acoplando en primer lugar un compuesto de Estructura 5 con hidrazina, seguido de reacción del intermedio de hidrazida correspondiente con un compuesto de Estructura 2. La deshidratación de un compuesto de Estructura 9 para formar el derivado de 2-piridin-2-il-[1,3,4]oxadiazol deseado se realiza mediante el tratamiento de un compuesto de Estructura 9 con un reactivo, tal como POCl3; CCl4 y CBr4 en combinación con PPh3; P2O5; reactivo de Burgess; etc.., en un disolvente, tal como tolueno, MeCN, dioxano, THF, CHCl3, etc.., a temperaturas entre 20 y 120 ºC, en presencia o ausencia de irradiación por microondas. (Bibl.: por ejemplo, M. A. Garcia, S. Martin-Santamaria, M. Cacho, F. Moreno de la Llave, M. Julian, A. Martinez, B. De Pascual-Teresa, A. Ramos, J. Med. Chem. 48 (2005) 4068-4075; C. T. Brain, J. M. Paul, Y. Loong, P. J. Oakley, Tetrahedron Lett. 40 (1999) 3275-3278). Alternativamente, los enlaces entre el anillo piridina o fenilo y el anillo de oxadiazol central también pueden formarse mediante aplicación de reacciones de acoplamiento cruzado catalizadas por paladio.

Los procedimientos que realizan la transformación de un compuesto de Estructura 2 o 5 en un compuesto de Estructura 6 o 7, respectivamente, o a la inversa, son conocidas para un experto en la materia.

Los compuestos de Estructura 2, en la que R1 representa metilo, etilo o metoxi, R2 representa hidrógeno y R3 representa alquilo C2-5 (Estructura 13), pueden prepararse siguiendo el esquema de reacción indicado a continuación:

5 El ácido picolínico de Estructura 13 puede prepararse mediante tratamiento de un compuesto de Estructura 10 (disponible en el mercado o preparado de manera análoga a los procedimientos de la bibliografía, por ejemplo, T. Kaminski, P. Gros, Y. Fort, Eur. J. Org. Chem. 19 (2003) 3855-3860; U. Ziener, E. Breuning, J.-M. Lehn, E. Wegelius,

K. Rissanen, G. Baum, D. Fenske, G. Vaughan, Chemistry-A European Journal 6 (2000) 4132-4139; R.-A. Fallahpour, Synthesis 2000 1665-1667; B. G. Szczepankiewicz, y col. J. Med. Chem. 49 (2006) 3563-3580) con 10 2,4,6-trivinil-ciclotriboroxano en condiciones de Suzuki para formar un compuesto de Estructura 11, que se oxida y esterifica para dar el ácido picolínico de Estructura 12 (R representa, por ejemplo, metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo, etc). La oxidación, seguida de eterificación de un compuesto disponible en el mercado de Estructura 14, puede también proporcionar acceso a un compuesto de Estructura 12. Después, el compuesto de Estructura 12 se somete a condiciones de acoplamiento cruzado de Suzuki usando el 2,4,6-trialquenil-ciclotriboroxano adecuado (preparado

15 de acuerdo con F. Kerins, D. F. O'Shea, J. Org. Chem. 67 (2002) 4968-4971), se hidrogena y saponifica, o se trata con el reactivo alquil-Zn-en condiciones de Negishi (Bibl.: por ejemplo, H. Matsushita, E. Negishi, J. Org. Chem. 47 (1982) 4161-4165) antes de la saponificación para proporcionar el compuesto deseado de Estructura 13.

Los compuestos de Estructura 2, en los que R1 representa metilo, etilo o metoxi, R2 representa hidrógeno y R3 representa alcoxi C1-4 (Estructura 17), pueden prepararse siguiendo el esquema de reacción que se describe a

20 continuación:

Un compuesto de Estructura 10 se trata con el alcohol adecuado en presencia de una base, preferentemente sal sódica o potásica del alcohol, a temperaturas entre 0 y 80 ºC (Bibl.: por ejemplo, C. Burstein, C. W. Lehmann, F. Glorius, Tetrahedron 61 (2005), 6207-6217; T. Nguyen, M. A. Wicki, V. Snieckus, J. Org. Chem. 69 (2004), 78167821) para proporcionar un compuesto de Estructura 15. La reacción de Suzuki de un compuesto de Estructura 15 con 2,4,6-trivinil-ciclotriboroxano proporciona acceso a un compuesto de Estructura 16, que después puede oxidarse, por ejemplo, con KMnO4 en acetona, para proporcionar el compuesto deseado de Estructura 17.

Los compuestos de Estructura 2, en los que R1 representa alquilo C2-5, R2 representa hidrógeno y R3 representa metilo o etilo (Estructura 22), pueden prepararse siguiendo el esquema de reacción que se describe a continuación:

Por tanto, un compuesto de Estructura 18 (disponible en el mercado o preparado de acuerdo con los procedimientos de la bibliografía, por ejemplo, J. P. Simeone y col., Bioorg. Med. Chem. Letters 12 (2002), 3329-3332; D. L. Comins,

N. B. Mantlo, J. Org. Chem. 50 (1985), 4410-4411) se trata con (NH4)2S2O8 en una mezcla de metanol, agua y H2SO4, a temperaturas elevadas (Minisci reaction Bibl.: por ejemplo, R. B. Katz, J. Mistry, M. B. Mitchell, Synth. 5 Commun. 19 (1989) 317-325; M. A. A. Biyouki, R. A. J. Smith, J. J. Bedford, J. P. Leader, Synth. Commun. 28 (1998) 3817-3825), para formar un compuesto de Estructura 19. Este compuesto puede oxidarse para dar un compuesto de Estructura 20 usando por ejemplo, KMnO4 en acetona. Mediante tratamiento de un compuesto de Estructura 20 con un alcohol, tal como metanol, etanol, isopropanol, en presencia de un ácido, tal como H2SO4 o HCl, puede producirse el compuesto correspondiente de Estructura 21 (R representa por ejemplo, metilo, etilo o isopropilo).

10 Después, el compuesto de Estructura 21 se somete a condiciones de acoplamiento cruzado de Suzuki usando el 2,4,6-trialquenil-ciclotriboroxano adecuado, se hidrogena y saponifica, o se trata con el reactivo alquilo-Zn adecuado en condiciones de Negishi antes de la saponificación para proporcionar el compuesto deseado de Estructura 22.

Los compuestos de Estructura 2, en los que R1 representa alcoxi C1-4, R2 representa hidrógeno y R3 representa metilo o etilo (Estructura 26), pueden prepararse siguiendo el esquema de reacción que se describe a continuación:

Por tanto, un compuesto de Estructura 23 (por ejemplo, preparado de acuerdo con los procedimientos de la bibliografía proporcionados en B. G. Szczepankiewicz y col., J. Med. Chem. 49 (2006) 3563-3580; M. Inouye, M. Waki, H. Abe, J. Am. Chem. Soc. 126 (2004), 2022-2027) se hace reaccionar con 2,4,6-trivinilciclotriboroxano para proporcionar un compuesto de Estructura 24. La oxidación usando, por ejemplo, KMnO4 en acetona, de un

20 compuesto de Estructura 24, seguido de esterificación, proporciona un compuesto de Estructura 25 (R = metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo, etc.). Después, el compuesto de Estructura 25 se somete a condiciones de acoplamiento cruzado de Suzuki usando de nuevo 2,4,6-trivinil-ciclotriboroxano, se hidrogena y saponifica, o se trata con un reactivo de metil-o etil-Zn-en condiciones de Negishi antes de saponificación para proporcionar el compuesto deseado de Estructura 26.

25 Los compuestos de Estructura 2, en los que R1 representa metilo o etilo, R2 representa alquilo C3-5 y R3 representa hidrógeno (Estructura 31), pueden prepararse siguiendo el esquema de reacción que se describe a continuación:

Por lo tanto, un compuesto de Estructura 27 (disponible en el mercado o preparado de manera análoga a los procedimientos de la bibliografía, por ejemplo. P. Pierrat, P. Gros, Y. Fort, Synlett 2004, 2319-2322) se hace reaccionar con 2,4,6-trivinil-ciclotriboroxano en condiciones de de Suzuki para formar un compuesto de Estructura

5 28, que se oxida y esterifica para dar un compuesto de Estructura 29 (en la que R es alquilo C1-4). La reacción de Suzuki con el 2,4,6-trialquenil-ciclotriboroxano, hidrogenación y saponificación o reacción de Negishi con el reactivo alquil-Zn adecuado, seguido de saponificación de un compuesto de Estructura 30, proporciona los compuestos de Estructura 31.

Los compuestos de Estructura 2, en los que R1 representa metoxi, R2 representa alquilo C3-5 y R3 representa 10 hidrógeno (Estructura 32), pueden prepararse siguiendo el esquema de reacción que se indica a continuación:

Aplicando la secuencia de reacción de esterificación, reacción de Suzuki, hidrogenación, saponificación o esterificación, reacción de Negishi y saponificación, un compuesto disponible en el mercado de Estructura 32 puede transformarse en un compuesto de Estructura 33. Los compuestos de Estructura 32 pueden prepararse, por

15 ejemplo, haciendo reaccionar ácido 4,5-dicloro-picolínico con agua, en presencia de un ácido (Bibl.: por ejemplo, J. Prakt. Chem.; 27 (1883), 293) para sar ácido 4-cloro-5-hidroxi-picolínico. Después, este compuesto puede alquilarse de manera análoga a los procedimientos de la bibliografía (T. Vermonden; D. Branowska; A. T. M. Marcelis; E. J. R. Sudholter; Tetrahedron 59 (2003), 5039-5045) para dar éster metílico del ácido 4-cloro-5-metoxi picolínico que puede hidrolizarse en condiciones de ácidas o básicas para obtener el compuesto de Estructura 32.

20 Siempre que los compuesto de Fórmula (I) se obtienen en forma de mezclas de enantiómeros, los enantiómeros

pueden separarse usando procedimientos conocidos por un experto en la materia; por ejemplo, mediante formación y separación de sales diaestereoméricas o mediante HPLC sobre una fase estacionaria quiral, tal como una columna Regis Whelk-O1(R,R) (10 !m), una columna Daicel ChiralCel OD-H (5-10 !m), una columna Daicel ChiralPak IA (10 !m) o AD-H (5 !m). Las condiciones típicas de HPLC quiral son una mezcla isocrática del eluyente A (EtOH, en presencia o ausencia de una amina, tal como trietilamina o dietilamina) y eluyente B (hexano), a un caudal de 0,8 a 150 ml/min.

Parte experimental

Los ejemplos siguientes ilustran la invención pero no limitan de ninguna manera el ámbito de la misma.

Todas las temperaturas se indican en ºC. Los compuestos se caracterizaron por RMN 1H (300 MHz) o RMN 13C (75 MHz) (Varian Oxford; los desplazamientos químicos se dan en ppm en relación al disolvente usado; multiplicidades: s = singlete, d = doblete, t = triplete, p = pentuplete, hex = hexuplete, hept = heptete, m = multiplete, a = ancho, las constantes de acoplamiento se dan en Hz); mediante CL-EM (Finnigan Navigator con Bomba Binaria HP 1100 y columna DAD: 4,6 x 50 mm, Zorbax SB-AQ, 5 !m, 120 A, gradiente: MeCN al 5-95% en agua, 1 min, con 0,04% de ácido trifluoroacético, flujo: 4,5 ml/min), tR se da en min, (tiempos de retención marcados con * o como CL-EM* se refieren a CL que funciona en condiciones de básicas, es decir, eluyendo con un gradiente de MeCN en agua que contiene 13 mM de hidróxido de amonio, por otra parte condiciones idénticas; tiempos de retención o CL-EM marcados con ** se refieren a CL que funciona en las siguientes condiciones: columna: Zorbax Extended C18, 1,8 !M, 4,6 x 20 mm, gradiente: MeCN al 5-95% en agua, 1 min, con TFA al 0,04%, flujo: 4,5 ml/min); mediante TLC (placas TLC de Merck, gel de Sílice 60 F254); o mediante punto de fusión. Los compuestos se purificaron mediante HPLC preparativa (columna: X-terra RP18, 50 x 19 mm, gradiente 5 !m: MeCN al 10-95% en agua que contenía 0,5 % de ácido fórmico) o mediante MPLC (Bomba Labomatic MD-80-100, Dector Lineal UVIS-201, columna: 350 x 18 mm, Labogel-RP-18-5s-100, gradiente: de MeOH al 10% en agua a MeOH al 100%).

Abreviaturas (según se usan anterior y posteriormente en el presente documento):

ac. acuoso BOC terc-butoxicarbonilo BSA albúmina de suero bovino Bu butilo reactivo de Burgess hidróxido de metoxicarbonilsulfamoil trietilamonio CC cromatografía en columna CDI carbonil diimidazol DCC diciclohexil carbodiimida DCM diclorometano DEAD diazodicarboxilato de dietilo DIPEA Base de Hüning, dietilisopropilamina DME 1,2-dimetoxietano DMF dimetilformamida DMSO sulfóxido de dimetilo dppf 1,1'-bis(difenilfosfino-κP)ferroceno DPPP 1,3-bis-(difenilfosfino)-propano EA acetato de etilo EDC N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida Et etilo EtOH etanol FC cromatografía ultrarrápida h hora (horas) HBTU hexafluorfosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio HOBt 1-hidroxi-benzotriazol HPLC cromatografía líquida de alto rendimiento HV condiciones de alto vacío CL-EM cromatografía líquida -espectrometría de masas Bibl. bibliografía MeCN acetonitrilo Me metilo MeOH metanol min minuto (minutos) MPLC cromatografía líquida de media presión NaOAc acetato sódico NEt3 trietilamina OAc acetato org. orgánico Ph fenilo

PyBOP hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris-pirrolidin-fosfonio prep. preparativa ta temperatura ambiente sat. saturado S1P 1-fosfato de esfingosina TBME terc-butil metil éter TBTU tetrafluorborato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,2,3,3-tetrametiluronio TFA ácido trifluoracético THF tetrahidrofurano TLC cromatografía de capa fina tR tiempo de retención

Ácido 5-Isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (clorhidrato)

a) A una solución de 2,5-dibromo-4-picolina (9,00 g, 35,9 mmol) en DME (96 ml), se le añadió un complejo 2,4,6trivinil-ciclotriboroxano piridina (8,63 g, 35,9 mmol) y una solución acuosa 2 N de K2CO3 (36 ml). La mezcla se desgasificó y se puso en una atmósfera de argón antes de añadir Pd(PPh3)4 (746 mg, 0,646 mmol). La mezcla se agitó a 80 ºC durante 15 h, antes de enfriarse a temperatura ambiente, se diluyó con éter dietílico (50 ml), se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (2 x 30 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 9:1 de heptano:EA para proporcionar 5-bromo-4-metil-2-vinil-piridina (7,04 g) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 0,75 min; [M+1]+ = 198,22; RMN 1H (CDCl3): ∀ 2,41 (s, 3 H), 5,50 (d, J = 10,8 Hz, 1 H), 6,21 (d, J = 17,3 Hz, 1 H), 6,74 (dd, J= 17,3, 10,8 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 8,59 (s, 1 H).

b) A una solución de 5-bromo-4-metil-2-vinil-piridina (7,04 g, 35,5 mmol) en acetona (280 ml) y agua (280 ml), se le añadió KMnO4 (28,81 g, 71,1 mmol). La mezcla oscura se agitó a temperatura ambiente durante 3 días antes de filtrarse sobre un lecho de filtro de vidrio. El filtrado incoloro se evaporó, proporcionando ácido 5-bromo-4metil-piridin-2-carboxílico (10,9 g, en forma de sal potásica) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 0,64 min, [M+1]+ = 215,90.

c) A una suspensión del ácido 5-bromo-4-metil-piridin-2-carboxílico en bruto (10,9 g, aproximadamente 35,5 mmol) en etanol (120 ml), se le añadió H2SO4 (0,5 ml). La mezcla se agitó a 70 ºC durante 18 h. El pH de la solución transparente se ajustó a pH 9 añadiendo de una solución ac. sat. de NaHCO3 y la mezcla se extrajo con éter dietílico (3 x 300 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron, proporcionando éster etílico de ácido 5-bromo-4-metil-piridin-2-carboxílico (8,20 g) en forma de un aceite de color verde; CL-EM: tR = 0,87 min, [M+1]+ = 243,91.

d) A una solución de éster etílico de ácido 5-bromo-4-metil-piridin-2-carboxílico (4,03 g, 16,5 mmol) en DME (43 ml), se le añadió un complejo 2,4,6-tri-(2-metil-propenil)-cicloboroxano piridina (5,36 g, 16,5 mmol), seguido de una solución acuosa de K2CO3 (16 ml). La mezcla se desgasificó y se puso en una atmósfera de argón antes de añadir Pd(PPh3)4 (343 mg, 0,297 mmol). La mezcla se agitó a 80 ºC durante 6 h antes de enfriar a temperatura ambiente, se diluyó con éter dietílico (50 ml), se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (3 x 30 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 7:3 de heptano:EA para proporcionar éster etílico de ácido 4-metil-5-(2-metil-propenil)-piridin-2carboxílico (1,33 g) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 0,87 min, [M+1]+ = 220,08.

e) A una solución de éster etílico de ácido 4-metil-5-(2-metil-propenil)-piridin-2-carboxílico (1,33 g, 6,06 mmol) en THF (10 ml) y etanol (10 ml), se le añadió cuidadosamente Pd/C (300 mg, Pd al 10%). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 15 horas en una atmósfera de 0,2 MPa (2 bar) de H2. El catalizador se retiró por filtración y el filtrado se concentró y se secó, proporcionando éster etílico de ácido 5-isobutil-4-metil-piridin-2carboxílico (1,27 g) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 0,86 min, [M+1]+ = 222,10.

f) Una solución de éster etílico de ácido 5-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (1,27 g, 5,76 mmol) en HCl ac. 6 N (110 ml) se agitó a 65 ºC durante 48 h antes de evaporar el disolvente al vacío. El residuo restante se suspendió en DCM y se filtró. El material sólido se lavó con más cantidad de DCM y se secó a HV, proporcionando clorhidrato del ácido 5-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (1,05 g) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 0,59 min; [M+1]+ = 194,28; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 0,90 (d, J = 6,3 Hz, 6 H), 1,85-1,96 (m, 1 H), 2,69 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 8,18 (s, 1 H), 8,58 (s, 1 H), 11,80 (s a, 1 H).

Ácido 6-Isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (clorhidrato)

a) Una solución de n-BuLi (21,1 ml, 33,8 mmol, 1,6 M) en THF se enfrió a -78 ºC antes de añadir gota a gota una solución de 2,6-dicloropiridina (5,0 g, 33,8 mmol) en THF (36 ml) durante un período de 20 min. La mezcla de reacción se agitó a -78 ºC durante 30 min y después se añadió yodometano (4,79 g, 33,8 mmol). La mezcla se agitó durante 30 minutos antes de desactivarla con una solución acuosa saturada de NH4Cl a -78 ºC. La mezcla se extrajo con éter dietílico, los extractos orgánicos se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 19:1 de heptano:EA para

proporcionar 2,6-dicloro-4-metil-piridina (2,34 g) en forma de un aceite incoloro que contenía el regioisómero 2,6dicloro-3-metil-piridina; CL-EM: tR = 0,89 min, [M+1]+ = 161,97.

b) A una solución de 2,6-dicloro-4-metil-piridina (2,34 g, 14,4 mmol) y complejo 2,4,6-trivinil-ciclotriboroxano (1,75 g, 7,26 mmol) en DME (27 ml), se le añadió una solución acuosa 2 M de K2CO3 (10 ml). La mezcla se desgasificó y se puso en una atmósfera de argón antes de añadir Pd(PPh3)4 (300 mg, 0,26 mmol). La mezcla se agitó a 80 ºC durante 3 h antes de enfriar a temperatura ambiente, se diluyó con éter dietílico y se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3. Los extractos orgánicos se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 9:1 de heptano:EA. El producto obtenido de esta forma se disolvió en EA, se lavó repetidamente con una solución acuosa al 5% de ácido cítrico, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó, proporcionando 6-cloro-4-metil-2-vinil-piridina (1,24 g) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 0,90 min, [M+1]+ = 154,03.

c) A una solución de 6-cloro-4-metil-2-vinil-piridina (1,24 g, 8,06 mmol) en agua (50 ml) y acetona (50 ml), se le añadió KMnO4 (6,53 g, 41,3 mmol). La mezcla oscura se calentó (40 ºC) y se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas antes de filtrar sobre un filtro de vidrio sinterizado. El disolvente del filtrado incoloro se evaporó, proporcionando la sal potásica del ácido 6-cloro-4-metil-piridin-2-carboxílico en bruto (3,2 g) en forma de un sólido incoloro; CL-EM: tR = 67 min, [M+1]+ = 171,99. El material se suspendió en etanol (150 ml) y se añadió H2SO4 (2 ml) hasta formar una solución transparente. La mezcla se calentó a 70 ºC durante 18 h. La mezcla se diluyó cuidadosamente con una solución acuosa saturada de NaHCO3 hasta un pH de 9. La mezcla se extrajo tres veces con EA. Los extractos orgánicos combinados se secarcon sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 3:2 e heptano:EA para proporcionar 6-cloro-4-metil-piridin-2-carboxilato de etilo (500 mg) en forma de un aceite de color amarillo pálido; CL-EM: tR = 0,87 min; [M+1]+ = 200,04; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,45 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 2,45 (s, 3 H), 4,48 (c, J = 6,8 Hz, 2 H), 7,35 (s, 1 H), 7,89 (s, 1 H).

d) A una solución de 6-cloro-4-metil-piridin-2-carboxilato de etilo (500 mg, 2,51 mmol) y un complejo 2,4,6-tris-(2metil-propenil)-ciclotriboroxano piridina (814 mg, 2,51 mmol) en DME (32 ml), se le añadió una solución ac. 2 M de K2CO3 (12 ml). La mezcla se desgasificó y se puso en una atmósfera de argón antes de añadir Pd(PPh3)4 (52 mg, 0,045 mmol). La mezcla se agitó a 80 ºC durante 6 h antes de enfriar a temperatura ambiente, se diluyó con éter dietílico (50 ml) y se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (2 x 30 ml). El extracto orgánico se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 9:1 de heptano:EA para proporcionar éster etílico de ácido 4-metil-6-(2-metil-propenil)-piridin-2carboxílico (176 mg) en forma de un aceite de color amarillo; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,45 (t, J = 7,0 Hz, 3 H), 1,97 (s, 3 H), 2,12 (s, 3 H), 2,42 (s, 3 H), 4,46 (c, J = 7,0 Hz, 2 H), 6,41 (s, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,75 (s, 1 H).

e) A una solución de éster etílico de ácido 4-metil-6-(2-metil-propenil)-piridin-2-carboxílico (175 mg, 0,80 mmol) en THF (5 ml) y etanol (5 ml), se le añadió Pd/C (50 mg, Pd al 10%). La mezcla se agitó a 50 ºC durante 15 h en una atmósfera de 0,1 MPa (1 bar) de H2. El catalizador se filtró sobre celite y el disolvente del filtrado se evaporó, proporcionando éster etílico de ácido 6-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (174 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 0,84 min, [M+1]+ = 222,48.

f) Una solución de éster etílico de ácido 6-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (174 mg, 0,78 mmol) en HCl ac. 6 N (20 ml) se agitó a 65 ºC durante 18 h. El disolvente se evaporó y el residuo restante se secó a HV, proporcionando clorhidrato del ácido 6-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico en forma de un aceite de color verde; CL-EM: tR = 0,58 min, [M+1]+ = 194,09.

Ácido 6-(1-etil-propil)-4-metil-piridin-2-carboxílico

a) Se preparó 6-cloro-4-metil-piridin-2-carboxilato de metilo de manera análoga a 6-cloro-4-metil-piridin-2carboxilato de etilo; CL-EM**: tR = 0,49 min, [M+1]+ = 186,25; RMN 1H (CDCl3): ∀ 2,46 (s, 3 H), 4,02 (s, 3 H), 7,37 (s, 1 H), 7,92 (s, 1 H).

b) Se trató 6-cloro-4-metil-piridin-2-carboxilato de metilo (500 mg, 2,69 mmol) con zincbromuro de 1-etil-propilo y se saponificó, como se ha descrito para ácido 6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-carboxílico, para proporcionar el compuesto del título (220 mg) en forma de un aceite de color amarillo pálido; CL-EM**: tR = 0,37 min, [M+1]+ = 208,29; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,80 (t, J = 7,3 Hz, 6 H), 1,69-1,81 (m, 4 H), 2,48 (s, 3 H), 2,58-2,67 (m, 1 H), 7,21 (s, 1 H), 7,91 (s, 1 H).

Ácido 4-Isobutil-6-metil-piridin-2-carboxílico (clorhidrato)

a) A una solución de 4-bromo-2-metil-piridina (5,70 g, 32,14 mmol) en metanol (100 ml) se le añadió H2SO4 (0,3 ml). La mezcla se calentó a reflujo antes de añadir cuidadosamente una solución de peroxidisulfato de amonio (7,33 g, 32,14 mmol) en agua (53 ml). La mezcla se agitó a reflujo durante 2 horas antes de añadir dos porciones más de una solución acuosa saturada de peroxidisulfato de amonio (2 x 7,33 g). Se continuó agitando a reflujo durante 3 h. El metanol se retiró a presión reducida y la solución restante se diluyó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 y se extrajo con EA. El extracto orgánico se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El

producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 3:7 de heptano:EA para proporcionar (4-bromo-6-metil-piridin-2-il)-metanol (1,31 g) en forma de un sólido amarillo pálido; CL-EM: tR = 0,31 min; [M+1]+ = 201,96; RMN 1H (CDCl3): ∀ 2,55 (s, 3 H), 3,59 (s a, 1 H), 4,72 (s a, 2 H), 7,28 (s, 2 H).

b) A una solución de (4-bromo-6-metil-piridin-2-il)-metanol (1,31 g, 6,48 mmol) en acetona (150 ml), se le añadió KMnO4 (2,61 g, 16,5 mmol). La mezcla se agitó a 40 ºC durante 2 h antes de filtrar en un embudo de vidrio sinterizado. El filtrado se evaporó a sequedad y el sólido restante se lavó con agua y se secó a HV, proporcionando sal potásica del ácido 4-bromo-6-metil-piridin-2-carboxílico (1,91 g) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 0,45 min, [M+1]+ = 217,89.

c) A una suspensión de sal potásica del ácido 4-bromo-6-metil-piridin-2-carboxílico (253 mg, 0,996 mmol) en etanol (100 ml), se le añadió gota a gota H2SO4 (2 ml). La mezcla se calentó a 70 ºC durante 16 h antes de diluirse cuidadosamente con NaHCO3 acuoso saturado. La mezcla se extrajo tres veces con éter dietílico. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó sobre placas preparativas de TLC con 3:2 heptano:EA para proporcionar éster etílico de ácido 4-bromo6-metil-piridin-2-carboxílico (105 mg) en forma de un aceite de color amarillo pálido; CL-EM: tR = 0,85 min, [M+1]+ = 244,22.

d) Se preparó clorhidrato del ácido 4-Isobutil-6-metil-piridin-2-carboxílico, partiendo de éster etílico del ácido 4bromo-6-metil-piridin-2-carboxílico, siguiendo los procedimientos proporcionados en las etapas d) a f) para la preparación de ácido 6-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico; CL-EM: tR = 0,58 min; [M+1]+ = 194,08; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,01 (d, J = 6,3 Hz, 6 H), 2,04-2,16 (m, 1 H), 2,80 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 3,09 (s, 3 H), 7,56 (s, 1 H), 8,04 (s, 1 H), 9,74 (s a, ~1 H).

Ácido 6-Isobutil-4-metoxi-piridin-2-carboxílico (clorhidrato)

a) A una solución agitada de ácido 6-cloro-4-metoxipiridin-2-carboxílico (5,00 g, 26,7 mmol) en etanol (75 ml), se le añadió clorotrimetilsilano (15 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h antes de evaporar el disolvente. El residuo restante se secó al vacío, proporcionando éster etílico de ácido 6-cloro-4metoxi-2-carboxílico (5,95 g) en forma de un aceite de color amarillo pálido ; CL-EM: tR = 0,85 min; [M+1]+ = 215,97; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,44 (t, J = 7,0 Hz, 3 H), 3,94 (s, 3 H), 4,48 (c, J = 7,0 Hz, 2 H), 7,01 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,61 (d, J = 2,0 Hz, 1 H).

b) El compuesto del título se preparó partiendo de éster etílico de ácido 6-cloro-4-metoxi-2-carboxílico siguiendo los procedimientos de las etapas d) a f) de la preparación de ácido 6-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico; CL-EM: tR = 0,51 min; [M+1]+ = 210,31; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,04 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 2,21-2,32 (m, 1 H), 3,27 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 4,20 (s, 3 H), 7,12 (s, 1 H), 7,83 (s, 1 H).

Ácido 6-(1-Etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-carboxílico

a) Se preparó éster metílico del ácido 6-cloro-4-metoxi-2-carboxílico (1,89 g) de manera análoga al éster etílico de ácido 6-cloro-4-metoxi-2-ácido carboxílico, partiendo de ácido 6-cloro-4-metoxipiridin-2-carboxílico (2,00 g; 10,7 mmol); CL-EM**: tR = 0,48 min; [M+1]+ = 202,23; RMN 1H (CDCl3): ∀ 3,95 (s, 3 H), 4,01 (s, 3 H), 7,03 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 2,3 Hz, 1 H).

b) Una solución de éster metílico del ácido 6-cloro-4-metoxi-2-carboxílico (2,63 g, 13,0 mmol) en dioxano (150 ml) se desgasificó y se puso en una atmósfera de argón antes de añadir Pd(dppf) (109 mg, 133 !mol). A esta mezcla, se le añadió gota a gota bromuro de 1-etil-propilzinc (50 ml de una solución 0,5 M en THF, 25,0 mmol). La mezcla se agitó a 76 ºC durante 15 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo dos veces con EA. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante MPLC sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de EA en heptano para proporcionar éster metílico del ácido 6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-carboxílico (450 mg) en forma de un aceite de color amarillo pálido; CL-EM**: tR = 0,46 min; [M+1]+ = 238,34.

c) Una solución de éster metílico del ácido 6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-carboxílico (450 mg, 1,90 mmol) en HCl ac. al 25% se agitó a 65 ºC durante 18 h. La mezcla se concentró y se secó, proporcionando el compuesto del título (592 mg) en forma de una sal de clorhidrato; CL-EM**: tR = 0,38 min; [M+1]+ = 224,32.

N-Hidroxi-5-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxamidina

a) Una solución de éster isopropílico de ácido 5-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (655 mg, 2,78 mmol, preparado de manera análoga al éster etílico correspondiente) en NH3 7 N en metanol (40 ml) se agitó en un vial cerrado herméticamente a 75 ºC durante 72 h. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se disolvió de nuevo en NH3 7 N en metanol. La solución resultante se agitó de nuevo a 75 ºC durante 24 h. El disolvente se evaporó, proporcionando la amida de ácido 5-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico en bruto (535 mg); CL-EM: tR = 0,80 min; [M+1]+ = 193,01. Este material se disolvió en DCM (20 ml) y se añadió piridina (1,08 g, 11,13 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 min antes de añadir gota a gota anhídrido del ácido trifluoroacético (1,75 g, 1,18 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se diluyó con DCM

(100 ml), se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (3 x 50 ml) y salmuera (50 ml). El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante MPLC sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de EA en heptano para proporcionar 5-isobutil-4-metil-piridin-2carbonitrilo (106 mg) en forma de un aceite de color amarillo pálido; CL-EM: tR = 0,96 min; [M+1]+ = 175,03.

b) A una solución de 5-isobutil-4-metil-piridin-2-carbonitrilo (106 mg, 608 !mol) en metanol (3 ml), se le añadió trietilamina (123 mg, 1,22 mmol) y clorhidrato de hidroxilamina (63 mg, 913 !mol). La mezcla se agitó a 75 ºC durante 18 h antes de concentrarse. El residuo se disolvió en NaHCO3 acuoso (pH 7-8) y se extrajo con DCM (6 x 50 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre MgSO4, se filtraron, se concentraron y se secaron, proporcionando el compuesto del título (155 mg) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 0,67 min, [M+1]+ = 208,01; RMN 1H (CD3OD): ∀ 0,97 (d, J = 6,8 Hz, 6 H), 1,84-1,96 (m, 1 H), 2,37 (s, 3 H), 2,58 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 7,67 (s, 1 H), 8,26 (s, 1 H).

3-Etil-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo

El compuesto del título se preparó partiendo de 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzaldehído siguiendo los procedimientos de la bibliografía (A. K. Chakraborti, G. Kaur, Tetrahedron 55 (1999) 13265-13268); CL-EM: tR = 0,90 min; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,24 (t, J = 7,6 Hz, 3 H), 2,26 (s, 3 H), 2,63 (c, J = 7,6 Hz, 2 H), 5,19 (s, 1 H), 7,30 (s, 2 H).

3-Cloro-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo

El compuesto del título se preparó partiendo de 2-cloro-6-metil-fenol disponible en el mercado de manera análoga a los procedimientos de la bibliografía (véase 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo); CL-EM: tR = 0,85 min. RMN 1H (CDCl3): ∀ 2,33 (s, 3 H), 6,10 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,53 (d, J = 1,8 Hz, 1 H).

4-Hidroxi-3-metoxi-5-metil-benzonitrilo

El compuesto del título se preparó partiendo de 2-hidroxi-3-metoxi-tolueno disponible en el mercado de manera análoga a los procedimientos de la bibliografía (véase 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo); CL-EM: tR = 0,84 min. RMN 1H (CDCl3): ∀ 2,27 (s, 3 H), 3,93 (s, 3 H), 6,24 (s, 1 H), 6,97 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 7,12 (s, 1 H).

3-Cloro-4-hidroxi-5-metoxi-benzonitrilo

El compuesto del título se preparó partiendo de 3-cloro-4-hidroxi-5-metoxi-benzaldehído disponible en el mercado de manera análoga a los procedimientos de la bibliografía (véase 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo); CL-EM: tR = 0,82 min; RMN 1H (CDCl3): ∀ 3,98 (s, 3 H), 6,36 (s, 1 H), 7,04 (s, 1 H), 7,34 (s, 1 H).

4-Hidroxi-2-metoxi-benzonitrilo

El compuesto del título se preparó partiendo de 4-hidroxi-2-metoxi-benzaldehido disponible en el mercado de manera análoga a los procedimientos de la bibliografía (véase 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo); CL-EM: tR = 0,74 min. RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 3,84 (s, 3 H), 6,47 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 6,54 (s, 1 H), 7,49 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 10,6 (s, 1H).

4,N-Dihidroxi-3,5-dimetil-benzamidina

El compuesto del título se preparó partiendo de 4-hidroxi-3,5-dimetil-benzonitrilo disponible en el mercado de acuerdo con los procedimientos de la bibliografía (por ejemplo, E. Meyer, A. C. Joussef, H. Gallardo, Synthesis 2003, 899-905); RMN 1H (CD3OD): ∀ 7,20 (s, 2H), 2,20 (s, 6H).

3-Etil-4,N-dihidroxi-5-metil-benzamidina

El compuesto del título se preparó partiendo de 2-etil-6-metil-fenol disponible en el mercado siguiendo los procedimientos de la bibliografía (G. Trapani, A. Latrofa, M. Franco, C. Altomare, E. Sanna, M. Usala, G. Biggio, G. Liso, J. Med. Chem. 41 (1998) 1846-1854; A. K. Chakraborti, G. Kaur, Tetrahedron 55 (1999) 13265-13268; E. Meyer, A. C. Joussef, H. Gallardo, Synthesis 2003, 899-905); CL-EM: tR = 0,55 min; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 9,25 (s a, 1H), 7,21 (s, 2H), 5,56 (s, 2H), 2,55 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,15 (s, 3H), 1,10 (t, J = 7,6 Hz, 3H).

4,N-Dihidroxi-3-metil-5-propil-benzamidina

El compuesto del título se preparó partiendo de 2-metil-6-propil-fenol disponible en el mercado de manera análoga a los procedimientos de la bibliografía (por ejemplo, B. Roth y col. J. Med. Chem. 31 (1988) 122-129; y bibliografía citada para 3-etil-4,N-dihidroxi-5-metil-benzamidina); CL-EM: tR = 0,54 min; [M+1]+ = 209,43; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 0,90 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,48-1,59 (m, 3 H), 2,19 (s, 3 H), 2,56 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 7,37 (s, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 9,34 (s, 1 H).

3-Cloro-4,N-dihidroxi-5-metil-benzamidina

El compuesto del título se preparó partiendo de 2-cloro-6-metil-fenol disponible en el mercado de manera análoga a

los procedimientos de la bibliografía (por ejemplo, B. Roth y col. J. Med. Chem. 31 (1988) 122-129; y bibliografía citada para 3-etil-4,N-dihidroxi-5-metil-benzamidina); 3-cloro-4-hidroxi-5-metil-benzaldehido: CL-EM: tR = 0,49 min; [M+1]+ = 201,00; RMN 1H ∀ 2,24 (s, 2 H), 2,35 (s, 4 H), 5,98 (s a, 1 H), 7,59 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 7,73 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 9,80 (s, 1 H); 3-cloro-4,N-dihidroxi-5-metil-benzamidina: RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 2,21 (s, 3 H), 5,72 (s a, 2 H), 7,40 (s, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 9,29 (s a, 1 H), 9,48 (s a, 1 H).

rac-4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-3,5-dimetil-benzamidina

a) A una solución de 3,5-dimetil-4-hidroxi-benzonitrilo (5,0 g, 34,0 mmol) en THF (40 ml), se le añadió rac-(2,2dimetil-[1,3]dioxolan-4-il)-metanol (4,49 g, 34,0 mmol), seguido de trifenilfosfina (13,4 g, 50,9 mmol). La mezcla se enfrió con un baño de hielo antes de añadir gota a gota DEAD (8,87 g, 50,9 mmol, 23,4 ml de una solución al 40% en tolueno). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, el disolvente se retiró al vacío y el residuo se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 99:1 a 92:8 de heptano:EA para proporcionar rac-4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-3,5-dimetil-benzonitrilo (7,20 g) en forma de un aceite de color amarillo pálido; CL-EM: tR = 0,99 min, [M+1]+ = no detectado.

b) A una solución de terc-butilato potásico (6,18 g, 55,1 mmol) en metanol (125 ml), se le añadió clorhidrato de hidroxilamina (5,74 g, 82,7 mmol). A esta solución, se le añadió una solución rac-4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4ilmetoxi)-3,5-dimetil-benzonitrilo (7,20 g, 27,6 mmol) en metanol (40 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante 72 h antes de retirar el disolvente al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC prep. (XBridge Prep C18, 30 x 75 mm, 5 !m, acetonitrilo al 2-95% en agua que contenía 0,5% de NH3acuoso saturado) para proporcionar el compuesto del título (4,85 g) en forma de un sólido amarillo pálido; CL-EM: tR = 0,67 min, [M+1]+ = 295,06; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,43 (s, 3 H), 1,48 (s, 3 H), 2,29 (s, 6 H), 3,76-3,81 (m, 1 H), 3,83-3,88 (m, 1 H), 3,93-3,99 (m, 1 H), 4,17-4,23 (m, 1 H), 4,47-4,54 (m, 1 H), 5,02 (s a, 1 H), 7,28 (s, 2H).

(S)-4-(2,2-Dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-3,5-dimetil-benzamidina

El compuesto del título se preparó de manera análoga a rac-4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-3,5dimetil-benzamidina usando (S)-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-il)-metanol; CL-EM: tR = 0,67 min, [M+1]+ = 295,01.

(R)-4-(2,2-Dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-3-etil-N-hidroxi-5-metil-benzamidina

El compuesto del título se preparó de manera análoga a rac-4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-3,5dimetil-benzamidina, partiendo de 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo y (R)-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-il)-metanol; CL-EM**: tR = 0,46 min, [M+H]+ = 309,23; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 1,17 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,33 (s, 3 H), 1,38 (s, 3 H), 2,25 (s, 3 H), 2,57-2,69 (m, 2 H), 3,73-3,84 (m, 3 H), 4,12 (t, J = 7,0 Hz, 1 H), 4,39-4,45 (m, 1 H), 5,76 (s a, 2 H), 7,34 (s, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 9,47 (s, 1 H).

(R)-3-Cloro-4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-5-metil-benzamidina

Se obtuvo el compuesto del título en forma de un aceite incoloro (1,39 g) de manera análoga a rac-4-(2,2-dimetil[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-3,5-dimetil-benzamidina, partiendo de 3-cloro-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo y L#,∃-isopropiliden glicerol; CL-EM: tR = 0,66 min, [M+H]+ = 314,96.

(R)-4-(2,2-Dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-3-metoxi-5-metil-benzamidina

El compuesto del título se obtuvo en forma de un aceite de color beige (1,16 g) de manera análoga a rac-4-(2,2dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-3,5-dimetil-benzamidina, partiendo de 4-hidroxi-3-metoxi-5-metilbenzonitrilo y L-#,∃-isopropilidenglicerol; CL-EM: tR = 0,65 min, [M+H]+ = 311,0.

(R)-3-Cloro-4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-5-metoxi-benzamidina

El compuesto del título se preparó de manera análoga a rac-4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-3,5dimetil-benzamidina, partiendo de 3-cloro-4-hidroxi-5-metoxi-benzonitrilo y L-#,∃-isopropilidenglicerol; CL-EM: tR = 0,42 min, [M+H]+ = 331,17; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 1,30 (s, 3 H), 1,34 (s, 3 H), 3,86 (s, 3 H), 3,87-3,93 (m, 2 H), 4,004,12 (m, 2 H), 4,36 (quint., J = 5,8 Hz, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 7,32 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,34 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 9,71 (s, 1 H).

(R)-4-(2,2-Dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-2-metoxi-benzamidina

El compuesto del título se obtuvo en forma de un aceite de color beige (2,46 g) de manera análoga a rac-4-(2,2dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-3,5-dimetil-benzamidina, partiendo de 4-hidroxi-2-metoxi-benzonitrilo y L#,∃-isopropiliden glicerol; CL-EM: tR = 0,62 min, [M+H]+ = 296,97.

(S)-4-(3-Amino-2-hidroxipropoxi)-3-etil-5-metilbenzonitrilo

a) A una solución de 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo (5,06 g, 31,4 mmol) en THF (80 ml), se añadieron PPh3 (9,06 g, 34,5 mmol) y (R)-glicidol (2,29 ml, 34,5 mmol). La mezcla se enfrió a 0 ºC antes de añadir DEAD en

tolueno (15,8 ml, 34,5 mmol). La mezcla se agitó durante 18 h mientras se calentaba a ta. El disolvente se evaporó y el producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 7:3 de heptano:EA para proporcionar 3-etil-5-metil-4-oxiranilmetoxi-benzonitrilo (5,85 g) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 0,96 min; [M+42]+ = 259,08.

b) El epóxido anterior se disolvió en NH3 7 N en metanol (250 ml) y la solución se agitó a 65 ºC durante 18 h. El disolvente se evaporó, proporcionando el (S)-4-(3-amino-2-hidroxipropoxi)-3-etil-5-metilobenzonitrilo en bruto (6,23 g) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 0,66 min; [M+1]+ = 235,11.

N-((S)-3-[2-Etil-4-(N-hidroxicarbamimidoil)-6-metil-fenoxi]-2-hidroxi-propil)-2-hidroxi-acetamida

a) A una solución de (S)-4-(3-amino-2-hidroxipropoxi)-3-etil-5-metilbenzonitrilo (6,23 g, 26,59 mmol) en THF (150 ml), se le añadieron ácido glicólico (2,43 g, 31,9 mmol), HOBt (4,31 g, 31,9 mmol) y clorhidrato de EDC (6,12 g, 31,9 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas antes de diluirse con NaHCO3 acuoso saturado y se extrajo dos veces con EA. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante CC con DCM que contenía 8% de metanol, proporcionando (S)-N-[3-(4-ciano-2-etil-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2-hidroxi-acetamida (7,03 g) en forma de un aceite de color amarillo CL-EM: tR = 0,74 min; [M+1]+ = 293,10; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,25 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 2,32 (s, 3 H), 2,69 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,48-3,56 (m, 3 H), 3,70-3,90 (m, 3 H), 4,19 (s, a, 3 H), 7,06 (m, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 H).

b) El nitrilo anterior se convirtió a N-hidroxi-benzamidina de acuerdo con los procedimientos de la literatura (por ejemplo, E. Meyer, A. C. Joussef, H. Gallardo, Synthesis 2003, 899-905); CL-EM: tR = 0,51 min; [M+1]+ = 326,13; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 1,17 (t, J = 7,4 Hz, 3 H), 2,24 (s, 3H), 2,62 (c, J = 7,4 Hz, 2 H), 3,23 (m, 1 H), 3,43 (m, 1 H), 3,67 (m, 2 H), 3,83 (s, 2 H), 3,93 (m, 1 H), 5,27 (s a, 1 H), 5,58 (s a, 1 H), 5,70 (s, 2 H), 7,34 (s, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,67 (m, 1 H), 9,46 (s a, 1H).

(S)-2-Hidroxi-N-{2-hidroxi-3-[4-(N-hidroxicarbamimidoil)-2,6-dimetil-fenoxi]-propil}-acetamida

El compuesto del título se preparó de manera análoga a N-((S)-3-[2-etil-4-(N-hidroxicarbamimidoil)-6-metil-fenoxi]-2hidroxi-propil)-2-hidroxi-acetamida; CL-EM: tR = 0,23 min, [M+1]+ = 312,25.

N-((S)-3-[2-Etil-4-(N-hidroxicarbamimidoil)-6-metil-fenoxi]-2-hidroxi-propil)-2-hidroxi-acetamida

a) A una solución de 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo (5,06 g, 31,4 mmol) en THF (80 ml), se añadieron PPh3 (9,06 g, 34,5 mmol) y (R)-glicidol (2,29 ml, 34,5 mmol). La mezcla se enfrió a 0 ºC antes de añadir DEAD en tolueno (15,8 ml, 34,5 mmol). La mezcla se agitó durante 18 horas mientras se calentaba a temperatura ambiente. El disolvente se evaporó y el producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 7:3 de heptano:EA para proporcionar 3-etil-5-metil-4-oxiranilmetoxi-benzonitrilo (5,85 g) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 0,96 min; [M+42]+ = 259,08.

b) El epóxido anterior se disolvió en NH3 7 N en metanol (250 ml) y la solución se agitó a 65 ºC durante 18 h. El disolvente se evaporó, proporcionando (S)-4-(3-amino-2-hidroxipropoxi)-3-etil-5-metilbenzonitrilo (6,23 g) en bruto en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 0,66 min; [M+1]+ = 235,11.

c) A una solución de (S)-4-(3-amino-2-hidroxipropoxi)-3-etil-5-metilbenzonitrilo (6,23 g, 26,59 mmol) en THF (150 ml) se le añadieron ácido glicólico (2,43 g, 31,9 mmol), HOBt (4,31 g, 31,9 mmol) y clorhidrato de EDC (6,12 g, 31,9 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas antes de diluirse con NaHCO3 acuoso saturado y se extrajo dos veces con EA. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante CC con DCM que contenía 8% de metanol, proporcionando (S)-N-[3-(4-ciano-2-etil-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2-hidroxi-acetamida (7,03 g) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 0,74 min; [M+1]+ = 293,10; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,25 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 2,32 (s, 3 H), 2,69 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,48-3,56 (m, 3 H), 3,70-3,90 (m, 3 H), 4,19 (s, a, 3 H), 7,06 (m, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 H).

d) El nitrilo anterior se convirtió al compuesto del título de acuerdo con los procedimientos de la bibliografía (por ejemplo, E. Meyer, A. C. Joussef, H. Gallardo, Synthesis 2003, 899-905); CL-EM: tR = 0,51 min; [M+1]+ = 326,13; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 1,17 (t, J = 7,4 Hz, 3 H), 2,24 (s, 3H), 2,62 (c, J = 7,4 Hz, 2 H), 3,23 (m, 1 H), 3,43 (m, 1 H), 3,67 (m, 2 H), 3,83 (s, 2 H), 3,93 (m, 1 H), 5,27 (s a, 1 H), 5,58 (s a, 1 H), 5,70 (s, 2 H), 7,34 (s, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,67 (m, 1 H), 9,46 (s a, 1H).

(S)-N-(3-[2-Cloro-4-(N-hidroxicarbamimidoil)-6-metil-fenoxi]-2-hidroxi-propil)-2-hidroxi-acetamida

El compuesto del título se obtuvo en forma de una cera de color beige (1,1 g) de manera análoga a N-((S)-3-[2-etil-4(N-hidroxicarbamimidoil)-6-metil-fenoxi]-2-hidroxi-propil)-2-hidroxi-acetamida, partiendo de 3-cloro-4-hidroxi-5-metilbenzonitrilo; CL-EM: tR = 0,48 min, [M+H]+ = 331,94.

(S)-2-Hidroxi-N-(2-hidroxi-3-[4-(N-hidroxicarbamimidoil)-2-metoxi-6-metil-fenoxi]-propil)-acetamida

El compuesto del título se obtuvo en forma de un aceite rojizo (1,3 g) de manera análoga a N-((S)-3-[2-etil-4-(Nhidroxicarbamimidoil)-6-metil-fenoxi]-2-hidroxi-propil)-2-hidroxi-acetamida, partiendo de 4-hidroxi-3-metoxi-5-metilbenzonitrilo; CL-EM: tR = 0,49 min, [M+H]+ = 327,98.

4-(2,2-Dimetil-[1,3]dioxan-5-ilmetoxi)-3-etil-N-hidroxi-5-metil-benzamidina

A una solución de 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzonitrilo (480 mg, 2,98 mmol) en THF (10 ml) se le añadieron trifenilfosfina (1,17 g, 4,47 mmol) y (2,2-dimetil-[1,3]dioxan-5-il)-metanol (478 mg, 3,28 mmol). La mezcla se enfrió a 4 ºC antes de añadir DEAD (1,94 g, 4,47 mmol, 2,05 ml de una solución al 40% en tolueno). Se continuó agitando a 4 ºC durante 15 min, después a temperatura ambiente durante 1 h. El disolvente se retiró al vacío y el producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 9:1 de heptano:EA para proporcionar 4-(2,2-dimetil[1,3]dioxan-5-ilmetoxi)-3-etil-5-metil-benzonitrilo (240 mg) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 1,04 min; [M+1+CH3CN]+ = 330,97. A una solución de este material (240 mg, 829 !mol) en metanol (5 ml), se le añadió clorhidrato de hidroxilamina (86 mg, 1,24 mmol) y NaHCO3 (104 mg, 1,24 mmol). La mezcla se agitó a 60 ºC durante 5 h antes de diluirse con EA y se lavó con agua. El extracto orgánico se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró, proporcionando el compuesto del título (280 mg) en forma de un aceite de color amarillo pálido; CL-EM: tR = 0,72 min; [M+1+CH3CN]+ = 323,01.

Ácido 3-etil-4-[(S)-2-hidroxi-3-(2-hidroxi-acetilamino)-propoxi]-5-metil-benzoico

a) A una solución de H2SO4 enfriada con hielo (150 ml) en agua (250 ml), se le añadió 2-etil-6-metilanilina (15,0 g, 111 mmol). La solución se trató con hielo (150 g) antes de añadir gota a gota una solución de NaNO2 (10,7 g, 155 mmol) en agua (150 ml) e hielo (50 g). La mezcla se agitó a 0 ºC durante 1 h. Se añadió 50% de H2SO4 acuoso (200 ml) y se continuó la agitación a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla se extrajo con DCM, y los extractos ogánicos se secaron sobre MgSO4 y se evaporaron. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 9:1 de heptano:EA para proporcionar 2-etil-6-metil-fenol (8,6 g) en forma de un aceite carmesí; CL-EM: tR = 0,89 min; RMN 1H (CDCl3): ∀ 7,03-6,95 (m, 2H), 6,80 (t, J =7,6 Hz, 1H), 4,60 (s, 1H), 2,64 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,24 (t, J = 7,6 Hz, 3H).

b) Una solución de 2-etil-6-metil-fenol (8,40 g, 61,7 mmol) y tetraamina de hexametileno (12,97 g, 92,5 mmol) en ácido acético (60 ml) y agua (14 ml) se calentó a 115 ºC. El agua se retiró por destilación a 117 ºC y se recogió con un aparato Dean-Stark. Después, el separador de agua se reemplazó por un condensador de reflujo y la mezcla se calentó a reflujo 3 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (100 ml) y se extrajo con EA. El extracto orgánico se lavó con NaHCO3 acuoso saturado, se secó sobre MgSO4 y se evaporó. El sólido restante se disolvió en EA y se trató con heptano para iniciar la cristalización. Se recogió el material sólido y se secó, proporcionando 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzaldehído (3,13 g) en forma de un polvo cristalino e incoloro, RMN 1H (CDCl3): ∀ 9,83 (s, 1H), 7,58-7,53 (m, 2H), 5,30 (s a, 1H), 2,69 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,32 (s, 3H), 1,28 (t, J = 7,6 Hz, 3H).

c) A una solución de 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzaldehído (25,0 g, 152 mmol) en acetonitrilo (250 ml), se le añadió K2CO3 (42,1 g, 305 mmol) seguido de bromuro de bencilo (26,0 g, 152 mmol). La suspensión se agitó a 60 ºC durante 18 h. La mezcla se diluyó con agua (150 ml) y EA (150 ml). Se separó el extracto orgánico y la fase acuosa se extrajo una vez más con EA (100 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (150 ml) y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 9:1 de heptano:EA para proporcionar 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzaldehído (27,2 g) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 1,09 min; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 1,19 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 2,35 (s, 3 H), 2,70 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 4,90 (s, 2 H), 7,37-7,41 (m, 1 H), 7,42-7,46 (m, 2 H), 7,49-7,52 (m, 2 H), 7,65-7,69 (m, 2 H), 9,92 (s, 1 H).

d) A una solución de 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzaldehído (25,0 g, 98,3 mmol) en acetona (500 ml), se le añadió KMnO4 (20,2 g, 127,8 mmol). La mezcla se calentó (45 ºC). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h antes de filtrarse sobre filtros de vidrio. El filtrado transparente e incoloro, se concentró, se diluyó con agua y se acidificó con HCl ac. 2 N, luego se extrajo dos veces con EA. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, el filtrado se concentró y se secó, proporcionando ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metilbenzoico (19,2 g) en forma de un sólido amarillo pálido; CL-EM: tR = 1,00 min; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 1,13-1,22 (m, 3 H), 2,32 (s, 3 H), 2,64-2,72 (m, 2 H), 4,87 (s, 2 H), 7,34-7,56 (m, 5 H), 7,69 (m, 2 H), 12,66 (s a, 1 H).

e) A una suspensión de ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzoico (10,0 g, 37,0 mmol) en tolueno (150 ml), se le añadió N,N-dimetilformamida di-terc-butil acetal (22,6 g, 111 mmol). La mezcla se calentó a reflujo 24 h antes de añadir otra porción de N,N-dimetilformamida di-terc-butil acetal (22,6 g, 111 mmol). El reflujo se continuó durante 24 horas más, después se añadió otra porción de N,N-dimetilformamida di-terc-butil acetal (22,6 g, 111 mmol). La mezcla se calentó a reflujo de nuevo durante 24 horas antes de enfriarla a temperatura ambiente, se diluyó con EA y se lavó con una solución acuosa saturada de Na2CO3. El extracto orgánico se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 9:1 de heptano:EA para proporcionar éster terc-butílico del ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzoico (9,02 g) en forma de un aceite de color amarillo pálido; CL-EM: tR = 1,17 min.

f) A una solución de éster terc-butílico del ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzoico (9,02 g, 27,6 mmol) en THF

(50 ml) y etanol (50 ml), se le añadió Pd/C (400 mg, Pd al 10%). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 24 h en una atmósfera de 0,1 MPa (1 bar) de H2. El catalizador se retiró por filtración, el filtrado se concentró, se disolvió de nuevo en THF (50 ml) y etanol (50 ml), y se trató de nuevo con Pd/C (400 mg, Pd al 10%). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 24 h en una atmósfera de 0,1 MPa (1 bar) de H2. El catalizador se retiró de nuevo mediante filtración y el filtrado se concentró y se secó, proporcionando éster terc-butílico del ácido 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzoico (7,13 g) en forma de un aceite de color amarillo pálido; CL-EM: tR = 1,01 min; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,28 (t, J = 7,8 Hz, 3 H), 1,61 (s, 9 H), 2,30 (s, 3 H), 2,67 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 5,13 (s a, 1 H), 7,67 (s, 1 H), 7,69 (s, 1 H).

g) Se preparó éster terc-butílico del ácido 3-etil-4-[(S)-2-hidroxi-3-(2-hidroxi-acetilamino)-propoxi]-5-metilbenzoico (5,94 g) partiendo del éster terc-butílico del ácido 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzoico anterior (6,53 g, 27,6 mmol), siguiendo los procedimientos proporcionados para N-((S)-3-[2-etil-4-(N-hidroxicarbamimidoil)-6-metilfenoxi]-2-hidroxi-propil)-2-hidroxi-acetamida; CL-EM: tR = 0,87 min; [M+H]+ = 368,11; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,17 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,53 (s, 9 H), 2,28 (s, 3 H), 2,66 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,17-3,26 (m, 1 H), 3,38-3,46 (m, 1 H), 3,653,75 (m, 2 H), 3,83 (d, J = 5,5 Hz, 2 H), 3,91-3,97 (m, 1 H), 5,28 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 5,54 (t, J = 5,5 Hz, 1 H), 7,59 (s, 1 H), 7,60 (s, 1 H), 7,68 (t, J = 5,5 Hz, 1 H).

h) A una solución enfriada (0 ºC) de éster terc-butílico del ácido 3-etil-4-[(S)-2-hidroxi-3-(2-hidroxi-acetilamino)propoxi]-5-metil-benzoico (5,94 g, 16,2 mmol) en DCM (100 ml), se le añadió TFA (5 ml). La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 2 h. La mezcla se concentró, se disolvió en acetonitrilo/agua (6 ml) y se separó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (2,20 g) en forma de un polvo de color blanco; CL-EM: tR = 0,41 min; [M+H]+ = 312,18.

Hidrazida de ácido 4-benciloxi-3,5-dimetil-benzoico

El compuesto del título se preparó de manera análoga a hidrazida del ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzoico como se describe a continuación; CL-EM: tR = 0,78 min; [M+1]+ = 271,19; RMN 1H (CDCl3): ∀ 2,30 (s, 6 H), 3,86 (s a, 2 H), 4,82 (s, 2 H), 7,30-7,50 (m, 7 H), 7,58 (s a, 1 H).

Hidrazida de ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzoico

a) A una solución de 3-etil-4-hidroxi-5-metil-benzaldehído (34,9 g, 0,213 mol, preparada, partiendo de 2-etil-6metil-fenol de acuerdo con la bibliografía citada para 3-etil-4,N-dihidroxi-5-metil-benzamidina) en MeCN (350 ml), se le añadieron K2CO3 (58,7 g, 0,425 mol) y bromuro de bencilo (36,4 g, 0,213 mol). La mezcla se agitó a 60 ºC durante 2 h antes de enfriarse a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo dos veces con EA. Los extractos orgánicos se lavaron con agua y se concentraron, proporcionando 4-benciloxi-3-etil-5-metilbenzaldehído (45 g) en bruto en forma de un aceite naranja. RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,29 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 2,40 (s, 3 H), 2,77 (c, J = 7,8 Hz, 2 H), 4,90 (s, 2 H), 7,31-7,52 (m, 5 H), 7,62 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 7,66 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 9,94 (s, 1 H).

b) A una mezcla de 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzaldehído (132 g, 0,519 mol) y 2-metil-2-buteno (364 g, 5,19 mol) en terc-butanol (1500 ml), se le añadió una solución de dihidrato de NaH2PO4 (249 g, 2,08 mol) en agua (1500 ml). A esta mezcla, se le añadió en porciones NaClO2 (187,8 g, 2,08 mol). La temperatura de la mezcla de reacción se mantuvo por debajo de 30 ºC y se observó desprendimiento de gas. Después de completar la adición, la mezcla bi-fásica de color naranja se agitó bien durante 3 horas antes de diluirse con TBME (1500 ml). La fase orgánica se separó y se lavó conuna solución acuosa al 20% de NaHS (1500 ml) y agua (500 ml). Después, la fase orgánica se extrajo tres veces con NaOH acuoso 0,5 N (1000 ml), la fase acuosa se acidificó con HCl acuoso al 25% (500 ml) y se extrajo dos veces con TBME (1000 ml). Estos extractos orgánicos se combinaron y evaporaron a sequedad para proporcionar ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzoico; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 1,17 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 2,31 (s, 3 H), 2,67 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 4,86 (s, 2 H), 7,34-7,53 (m, 5 H), 7,68 (s, 2 H), 12,70 (s, 1 H).

c) Se convirtió ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzoico en hidrazida del ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzoico siguiendo la etapa c) de la preparación de hidrazida del ácido 4-aliloxi-3,5-dimetil-benzoico; CL-EM: tR = 0,82 min, [M+1]+ = 285,44.

Éster terc-butílico del ácido 3-[4-(N-Hidroxicarbamimidoil)-2,6-dimetil-fenil]-propiónico

a) A una solución enfriada en hielo de éster metílico del ácido 4-hidroxi-3,5-dimetil-benzoico (7,52 g, 41,7 mmol) en DCM (250 ml) y piridina (10 ml), se le añadió anhídrido de ácido trifluormetansulfónico (13,0 g, 45,9 mmol) durante un período de 20 min. Después de completar la adición, se retiró el baño de hielo y la reacción se agitó durante 1 h más a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con DCM (150 ml), se lavó con ácido cítrico acuoso al 10% seguido de salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante FC sobre gel de sílice, eluyendo con 9:1 de heptano:EA para proporcionar éster metílico del ácido 3,5dimetil-4-trifluormetansulfoniloxi-benzoico (11,8 g) en forma de agujas finas e incoloras; CL-EM: tR = 1,08 min.

b) A una solución agitada del triflato anterior (11,8 g, 37,8 mmol) en DMF seco (155 ml) se le añadieron

secuencialmente trietilamina (7,6 g, 75,6 mmol), acrilato de terc-butilo (48,4 g, 378 mmol), DPPP (779 mg, 1,89 mmol) y Pd(OAc)2 (424 mg, 1,89 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó a 115 ºC durante 18 h antes de añadir otra porción de DPPP (160 mg, 0,39 mmol) y Pd(OAc)2 (80 mg, 0,36 mmol). Se continuó agitando durante 4 h a 115 ºC antes de enfriar la mezcla a temperatura ambiente, se diluyó con éter dietílico (350 ml) y se lavó con HCl acuoso 1 N, seguido de una solución acuosa saturada de NaHCO3. El extracto orgánico se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante FC sobre gel de sílice, eluyendo con

4:1 de heptano:EA para proporcionar éster metílico del ácido 4-(2-terc-butoxicarbonil-vinil)-3,5-dimetil-benzoico (11,21 g) en forma de un sólido incoloro; CL-EM: tR = 1,09 min.

c) A una solución de éster metílico del ácido 4-(2-terc-butoxicarbonil-vinil)-3,5-dimetil-benzoico (11,2 g, 38,6 mmol) en etanol (50 ml) y THF (50 ml), se le añadió Pd/C (1,0 g, Pd al 10%). La mezcla se agitó durante 16 h a temperatura ambiente bajo 0,25 MPa (2,5 bares) de H2. El catalizador se filtró y el filtrado se concentró y secó a HV, proporcionando éster metílico del ácido 4-(2-terc-butoxicarbonil-etil)-3,5-dimetil-benzoico (10,8 g) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 1,08 min.

d) A una solución de éster metílico del ácido 4-(2-terc-butoxicarbonil-etil)-3,5-dimetil-benzoico (10,8 g, 37,0 mmol) en etanol (100 ml) se le añadió una solución acuosa 2 M de LiOH (50 ml) a 0 ºC. La mezcla turbia se agitó a 0 ºC durante 30 min, después a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se diluyó con una solución acuosa al 10% de ácido cítrico y se extrajo tres veces con éter dietílico. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El residuo sólido se suspendió en éter dietílico/heptano, se agitó a temperatura ambiente y se filtró. Se repitió el procedimiento de suspensión en éter dietílico/heptano. El material sólido se recogió y se secó a HV, proporcionando ácido 4-(2-terc-butoxicarbonil-etil)-3,5-dimetil-benzoico (5,09 g) en forma de un polvo cristalino blanco; CL-EM: tR = 0,95 min, [M+1]+ = 279,14; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,47 (s, 9 H), 2,30-2,40 (m, 2 H), 2,39 (s, 6 H), 2,94-3,03 (m, 2 H), 7,75 (s, 2 H).

e) A una suspensión de ácido 4-(2-terc-butoxicarbonil-etil)-3,5-dimetil-benzoico (8,00 g, 28,7 mmol) en isopropanol (100 ml), se le añadió HOBt (4,27 g, 31,6 mmol), seguido de clorhidrato de EDC (6,34 g, 33,1 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 1 h, se le añadió amoníaco acuoso al 25% (16,1 ml). Se continuó agitando durante 30 min antes de evaporar el isopropanol a presión reducida. La solución restante se diluyó con acetato de isopropilo (200 ml), se lavó tres veces con una solución acuosa aproximadamente 0,5 N de NaHCO3 (100 ml), seguido de agua (50 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se secó, proporcionando éster terc-butílico del ácido 3-(4-carbamoil-2,6-dimetil-fenil)-propiónico (7,5 g) en forma de un sólido blanquecino.

f) A una solución enfriada con hielo de éster terc-butílico del ácido 3-(4-carbamoil-2,6-dimetil-fenil)-propiónico (7,00 g, 25,2 mmol) y trietilamina (7,66 g, 75,7 mmol) en DCM (100 ml), se le añadió lentamente anhídrido trifluoracético (6,06 g, 28,8 mmol) de manera que la temperatura de reacción se mantuvo por debajo de los 15 ºC. La solución de color amarillo claro se agitó a temperatura ambiente durante 1 h antes de lavarla dos veces con agua (100 ml) y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cristalización en metanol para proporcionar éster terc-butílico del ácido 3-(4-ciano-2,6-dimetil-fenil)-propiónico (4,2 g) en forma de un sólido de color blanco, RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,48 (s, 9 H), 2,33-2,37 (m, 2 H), 2,38 (s, 6 H), 2,94-3,01 (m, 2 H), 7,31 (s, 2 H).

g) Una solución de éster terc-butílico del ácido 3-(4-ciano-2,6-dimetil-fenil)-propiónico (4,1 g, 15,8 mmol), clorhidrato de hidroxilamina (1,65 g, 23,7 mmol) y trietilamina (3,20 g, 31,6 mmol) en metanol (40 ml) se calentó a reflujo durante 2 h antes de retirar el disolvente al vacío. El residuo se recogió en acetato de isopropilo (50 ml) y se lavó dos veces con agua (50 ml). El extracto orgánico se secó sobre MgSO4, se filtró, se evaporó y secó, proporcionando éster terc-butílico del ácido 3-[4-(N-hidroxicarbamimidoil)-2,6-dimetil-fenil]-propiónico (4,4 g) en forma de un sólido de color blanco.

Éster terc-butílico del ácido 3-[2-etil-4-(N-hidroxicarbamimidoil)-6-metil-fenil]-propiónico

El compuesto del título se preparó de manera análoga a éster terc-butílico del ácido 3-[4-(N-hidroxicarbamimidoil)2,6-dimetil-fenil]-propiónico; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,26 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 2,34-2,41 (m, 5 H), 2,70 (c, J = 7,8 Hz, 2 H), 2,94-3,01 (m, 2 H), 4,85 (s a, 1 H), 7,28 (s, 1 H), 7,32 (s, 1 H).

Ácido 3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-propiónico

a) A una solución de ácido 5-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (246 mg, 1,07 mmol) y DIPEA (415 mg, 3,21 mmol) en DMF (4 ml), se le añadió PyBOP (589 mg, 1,13 mmol) a 0 ºC. La mezcla se agitó durante 15 min a 0 ºC antes de añadir éster terc-butílico del ácido 3-[2-etil-4-(N-hidroxicarbamimidoil)-6-metil-fenil]-propiónico (328 mg, 1,07 mmol) y se continuó agitando durante 1 hora a 0 ºC. La reacción se detuvo añadiendo agua, la mezcla se diluyó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 y se extrajo dos veces con EA. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron, proporcionando el intermedio de éster hidroxi-amidina en bruto; CL-EM: tR = 1,10 min, [M+H]+ = 482,27. Este material se disolvió en dioxano (10 ml) y la mezcla se agitó a 80 ºC durante 15 h. El disolvente se evaporó y el producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 7:3 de heptano:EA para proporcionar éster terc-butílico del ácido 3-{2-etil-4-[5(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-propiónico (420 mg) en forma de un aceite

incoloro; CL-EM: tR = 1,26 min, [M+H]+ = 464,34.

b) El éster terc-butílico anterior (437 mg, 0,943 mmol) se disolvió en HCl ac. 6 N y la mezcla se agitó a 65 ºC durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el residuo restante se lavó con EA y se secó a HV, proporcionando el compuesto del título (371 mg) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 1,10 min, [M+H]+ = 408,21; RMN 1H (D6-DMSO): ∀ 0,93 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,23 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,91 (hept, J = 6,8 Hz), 2,37-2,43 (m, 5 H), 2,44 (s, 3 H), 2,62 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 2,74 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 2,91-2,98 (m, 2 H), 7,75 (s, 1 H), 7,76 (s, 1 H), 8,16 (s, 1 H), 8,53 (s, 1 H), 10,26 (s a, 1 H).

Ejemplo 1

N-((S)-3-{2-etil-4-[5-(6-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2hidroxi-acetamida

A una solución de ácido 6-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (100 mg, 0,435 mmol) y DIPEA (169 mg, 1,31 mmol) en DMF (5 ml), se le añadió TBTU (210 mg, 0,653 mmol) a 0 ºC. La mezcla se agitó durante 15 min a 0 ºC antes de añadir N-((S)-3-[2-etil-4-(N-hidroxicarbamimidoil)-6-metil-fenoxi]-2-hidroxi-propil)-2-hidroxi-acetamida (170 mg, 0,522 mmol). Se continuó agitando a 0 ºC durante 1 h. La reacción se detuvo añadiendo agua. La mezcla se diluyó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 y se extrajo con EA y dos veces con DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron, proporcionando el intermedio de éster de hidroxi-amidina en bruto. Este material se disolvió en dioxano (5 ml) y la mezcla se agitó a 80 ºC durante 24 h. El disolvente se evaporó y el producto en bruto se purificó sobre placas preparativas de TLC con DCM que contenían 10% de NH3 7 N en metanol, seguido de HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (21 mg) en forma de un aceite de color amarillo pálido; CL-EM: tR = 1,00 min, [M+H]+ = 483,26; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,99 (d, J = 6,8 Hz, 6 H), 1,29 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 2,21 (hept, J = 6,8 Hz, 1 H), 2,36 (s, 3 H), 2,48 (s, 3 H), 2,72 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 2,79 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 3,47-3,55 (m, 1 H), 3,74-3,92 (m, 3 H), 4,16-4,24 (m, 3 H), 7,18 (s, 1 H), 7,23 (t a, J = 5,8 Hz, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,99 (s, 1 H).

Ejemplo 2

2-Etil-4-[5-(4-isobutil-6-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenol

A una solución de ácido 4-isobutil-6-metil-piridin-2-carboxílico (480 mg, 2,09 mmol) y DIPEA (810 mg, 6,27 mmol) en DMF (20 ml), se le añadió PyBOP (1150 mg, 2,21 mmol) a 0 ºC. La mezcla se agitó durante 15 min a 0 ºC antes de añadir 3-etil-4,N-dihidroxi-5-metil-benzamidina (429 mg, 2,21 mmol) y la agitación se continuó durante 1 h a 0 ºC. La reacción se detuvo añadiendo agua y la mezcla se diluyó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 y se extrajo dos veces con EA. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron, proporcionando el intermedio de éster de hidroxi-amidina; CL-EM: tR = 0,90 min, [M+H]+ = 370,16. Este material se disolvió en dioxano (10 ml) y la mezcla se agitó a 80 ºC durante 15 h. El disolvente se evaporó y el producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 7:3 de heptano:EA para proporcionar el compuesto del título (112 mg) en forma de un aceite de color púrpura pálido; CL-EM: tR = 1,12 min, [M+H]+ = 352,17.

Ejemplo 3

(S)-3-{2-Etil-4-[5-(4-isobutil-6-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-propan-1,2-diol

A una solución de 2-etil-4-[5-(4-isobutil-6-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenol (41 mg, 0,116 mmol) en isopropanol (3 ml) y NaOH ac. 3 N (0,4 ml), se le añadió (S)-3-cloro-1,2-propandiol (66 mg, 0,577 mmol). La mezcla se agitó a 65 ºC durante 16 h antes de añadir otra porción de (S)-3-cloro-1,2-propandiol (66 mg, 0,577 mmol) y NaOH ac. 3 N (0,4 ml). Se continuó agitando a 65 ºC durante 24 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo repetidamente con éter dietílico. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó sobre TLC preparativa usando DCM:metanol

9:1 para proporcionar el compuesto del título (16 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 1,02 min, [M+H]+ = 426,17.

Ejemplo 4

(S)-1-Amino-3-{2-etil-4-[5-(4-isobutil-6-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-propan-2-ol

a) A una solución de 2-etil-4-[5-(4-isobutil-6-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenol (79 mg, 0,224 mmol) en THF (6 ml) se le añadieron (R)-(+)-glicidol (25 mg, 0,335 mmol) y trifenilfosfina (88 mg, 0,335 mmol). La mezcla se agitó y se enfrió a 0 ºC antes de añadir DEAD (58 mg, 0,335 mmol, en forma de una solución al 40% en tolueno). La mezcla se calentó a a temperatura ambiente y la agitación se continuó durante 4 horas. Se añadió otra porción de (R)-(+)-glicidol (8 mg, 0,112 mmol), trifenilfosfina (30 mg, 0,112 mmol) y DEAD (19 mg, 0,112 mmol). Se continuó agitando durante 4 h antes de evaporar el disolvente. El producto en bruto se purificó sobre TLC preparativa usando 7:3 de heptano:EA para proporcionar 2-[3-((S)-3-etil-5-metil-4-oxiranilmetoxi-fenil)[1,2,4]oxadiazol-5-il]-4-isobutil-6-metil-piridina (46 mg) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 1,17 min, [M+H]+ = 408,19.

b) El epóxido anterior (46 mg, 0,114 mmol) se disolvió en NH3 7 N en metanol (10 ml) y la mezcla se agitó a 45 ºC durante 16 h en un recipiente cerrado herméticamente. El disolvente se evaporó y el producto en bruto se purificó mediante TLC preparativa usando DCM que contenía 6% de NH3 7 N en metanol, proporcionando el compuesto del título (38 mg) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 0,88 min, [M+H]+ = 425,24.

5 Ejemplo 5

N-((S)-3-{2-etil-4-[5-(4-isobutil-6-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2

hidroxi-acetamida

A una solución de (S)-1-amino-3-{2-etil-4-[5-(4-isobutil-6-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}propan-2-ol (36 mg, 86 !mol), HOBt (14 mg, 103 !mol) y ácido glicólico (8 mg, 103 !mol) en THF (3 ml), se le añadió 10 EDC HCl (20 mg, 103 !mol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h antes de diluirla con una solución acuosa saturada de NaHCO3 y se extrajo dos veces con EA. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante TLC preparativa usando DCM que contenía 11% de metanol, proporcionando el compuesto del título (36 mg) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 0,98 min, [M+H]+ = 483,21; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,98 (d, J = 6,3 Hz, 6 H), 1,31 (t, J =

15 7,5 Hz, 3 H), 1,97-2,08 (m, 1 H), 2,38 (s, 3 H), 2,59 (d, J = 6,8 Hz, 2 H), 2,69-2,78 (m, 5 H), 2,81 (s a, 1 H), 3,42 (s a, 1 H), 3,48-3,57 (m, 2 H), 3,74-3,93 (m, 2 H), 4,17-4,25 (m, 3 H), 7,05 (s a, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 7,94 (s, 2 H).

Ejemplo 6

4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-2,6-dimetil-fenol

20 El compuesto del título se preparó de manera análoga al Ejemplo 2, partiendo de ácido 6-isobutil-4-metoxi-piridin-2carboxílico y 4,N-dihidroxi-3,5-dimetil-benzamidina; CL-EM: tR = 1,01 min, [M+H]+ = 354,28; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,99 (d, J = 6,8 Hz, 6 H), 2,19-2,28 (m, 1 H), 2,35 (s, 6 H), 2,78 (d, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,98 (s, 3 H), 4,96 (s, 1 H), 6,85 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,70 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,88 (s, 2 H).

Ejemplos 7 a 10

Los siguientes Ejemplos se prepararon de manera análoga a los Ejemplos previos partiendo de 4-[5-(6-isobutil-4metoxi-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-2,6-dimetil-fenol.

Ejemplo

preparado de manera análoga al Ejemplo R CL-EM tR [min] [M+H]+

7

4 0,98* 427,04

8

4 0,98* 427,02

9

5 0,86* 485,26

10

5 0,85* 485,21

Ejemplo 10

RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,99 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 2,16-2,27 (m, 1 H), 2,36 (s, 6 H), 2,78 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 3,47-3,71 (m, 2 H), 3,72-3,92 (m, 4 H), 3,98 (s, 3 H), 4,14-4,23 (m, 3 H), 6,86 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,15 (t, J = 5,3 Hz), 7,69 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,88 (s, 2 H).

5 Ejemplo 11

2-Etil-4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenol

El compuesto del título se preparó de manera análoga al Ejemplo 2 , partiendo de ácido 6-isobutil-4-metoxi-piridin-2carboxílico y 3-etil-4,N-dihidroxi-5-metil-benzamidina; CL-EM: tR = 1,11 min, [M+H]+ = 368,12; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,99 (d, J = 6,8 Hz, 6 H), 1,32 (t, J = 7,8 Hz, 3 H), 2,24 (hept, J = 6,8 Hz), 2,35 (s, 3 H), 2,73 (c, J = 7,8 Hz, 2 H), 2,78

10 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 3,98 (s, 3 H), 5,02 (s, 1 H), 6,85 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 7,70 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 7,89 (s, 2 H).

Ejemplos 12 a 17

Los siguientes Ejemplos se prepararon de manera análoga a los Ejemplos previos partiendo de 2-etil-4-[5-(6-isobutil4-metoxi-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenol.

Ejemplo

preparado de manera análoga al Ejemplo R CL-EM tR [min] [M+H]+

12

3 1,01 442,12

13

3 1,01 442,11

14

4 1,02* 441,26

15

4 0,86 441,27

16

5 0,96 499,11

17

5 0,97 499,19

Ejemplo 17

RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,99 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 2,18-2,28 (m, 1 H), 2,37 (s, 3 H), 2,73 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 2,78 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 3,01 (s a, 1 H), 3,46-3,56 (m, 2 H), 3,74-3,93 (m, 3 H), 3,98 (s, 3 H), 4,16-4,24 (m, 3 H), 6,86 (s, 1 H), 7,08 (s a, 1 H), 7,70 (s, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,91 (s, 1 H).

5 Ejemplo 18

4-[5-(6-Isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,3,4]oxadiazol-2-il]-2,6-dimetil-fenol

a) A una solución de ácido 6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-carboxílico (270 mg, 1,10 mmol), hidrazida del ácido 4benciloxi-3,5-dimetil-benzoico (327 mg, 1,21 mmol) y DIPEA (455 mg, 3,52 mmol) en DCM (15 ml), se le añadió PyBOP (858 mg, 1,65 mmol) a 0 ºC. La mezcla se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente, la reacción 10 se diluyó con éter dietílico y se lavó con una solución acuosa 1 N de NaOH, seguido de una solución ac. 1 M NaH2PO4. El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró, proporcionando el intermedio de hidrazida en bruto; CL-EM: tR = 1,00 min, [M+H]+ = 462,23. Este material (1,13 g) se disolvió en DCM (15 ml) y piridina (1 ml) y la mezcla se enfrió a 0 ºC antes de añadir gota a gota anhídrido trifluormetansulfónico (1,38 g, 4,89 mmol). La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se continuó agitando durante 16 h. La reacción se

15 detuvo, añadiendo 3-dimetilamino-1-propilamina (50 mg, 0,49 mmol). La mezcla se lavó dos veces con NaH2PO4 acuoso 1 N seguido de agua, se secó sobre Na2SO4, se filtró y concentró. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 4:1 de heptano:EA para proporcionar 2-[5-(4-benciloxi-3,5-dimetilfenil)-[1,3,4]oxadiazol-2-il]-6-isobutil-4-metoxi-piridina (414 mg) en forma de un aceite de color amarillo; CL-EM: tR = 1,15 min, [M+H]+ = 444,21.

20 b) Se disolvió el éter bencílico anterior (414 mg, 0,934 mmol) en THF (5 ml) y metanol (5 ml) antes de añadir Pd/C (200 mg, Pd al 10%). La suspensión se hidrogenó a temperatura ambiente en una atmósfera de 0,1 MPa (1 bar) de H2 durante 72 h. El catalizador se retiró por filtración y el filtrado se concentró y secó, proporcionando el compuesto del título (308 mg) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 0,77* min, [M+H]+ = 354,30; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,01 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 2,19-2,30 (m, 1 H), 2,36 (s, 6 H), 2,76 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 3,97 (s, 3

25 H), 5,07 (s, 1 H), 6,80 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,66 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,88 (s, 2 H).

Ejemplos 19 a 24

Se prepararon los ejemplos siguientes partiendo del Ejemplo 18 de manera análoga a los Ejemplos anteriores.

Ejemplo

preparado de manera análoga al Ejemplo R CL-EM tR [min] [M+H]+

19

3 0,91* 428,18

20

3 0,98 428,16

21

4 0,84* 427,07

22

4 0,84* 427,04

(continuación)

Ejemplo

preparado de manera análoga al Ejemplo R CL-EM tR [min] [M+H]+

23

5 0,78* 489,25

24

5 0,78 489,24

Ejemplo 20

RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,99 (d, J = 6,8 Hz, 6 H), 2,15 (s a, 1 H), 2,19-2,27 (m, 1 H), 2,39 (s, 6 H), 2,78 (d, J = 7,3 Hz, 2 5 H), 3,82-3,97 (m, 5 H), 3,98 (s, 3 H), 4,13-4,20 (m, 1 H), 6,86 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,70 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,91 (s, 2 H).

Ejemplo 25 2-Etil-4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,3,4]oxadiazol-2-il]-6-metil-fenol

El compuesto del título se preparó de manera análoga al Ejemplo 18, partiendo de ácido 6-isobutil-4-metoxi-piridin-210 carboxílico e hidrazida del ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzoico; CL-EM: tR = 1,04 min, [M+H]+ = 368,33.

Ejemplos 26 a 31

Los siguientes Ejemplos se prepararon partiendo del Ejemplo 25 de manera análoga a los Ejemplos anteriores.

Ejemplo

preparado de manera análoga al Ejemplo R CL-EM tR [min] [M+H]+

26

3 0,94* 442,24

27

3 1,00 442,11

28

4 0,88* 441,26

29

4 0,87* 441,25

30

5 0,80* 499,26

(continuación)

Ejemplo

preparado de manera análoga al Ejemplo R CL-EM tR [min] [M+H]+

31

5 0,80* 499,26

Ejemplo 31

RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,01 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 2,19-2,28 (m, 1 H), 2,39 (s, 3 H), 2,70-2,79 (m, 5 4 H), 3,49-3,58 (m, 1 H), 3,76-3,93 (m, 4 H), 3,97 (s, 3 H), 4,18-4,25 (m, 3 H), 6,82 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,07 (s a, 1 H), 7,66 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,91 (s, 1 H).

Ejemplo 32 2-Etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenol

El compuesto del título se preparó de manera análoga al Ejemplo 2, partiendo de ácido 5-isobutil-4-metil-piridin-210 carboxílico y 3-etil-4,N-dihidroxi-5-metil-benzamidina; CL-EM: tR = 1,12 min, [M+H]+ = 352,12.

Ejemplos 33 a 36

Se prepararon los siguientes Ejemplos partiendo del Ejemplo 32 de manera análoga a los Ejemplos anteriores.

Ejemplo

preparado de manera análoga al Ejemplo R CL-EM tR [min] [M+H]+

33

3 1,02 426,12

34

3 1,01 426,45

35

4 0,86 425,46

36

5 0,98 483,16

15 Ejemplo 33

RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,00 (d, J = 6,8 Hz, 6 H), 1,32 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,89-2,01 (m, 1 H), 2,10 (t a, J = 5,8 Hz, 1 H), 2,40 (s, 3 H), 2,47 (s, 3 H), 2,63 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 2,72-2,80 (m, 3 H), 3,81-3,98 (m, 4 H), 4,13-4,20 (m, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 8,55 (s, 1 H).

Ejemplo 36

RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,99 (d, J = 6,8 Hz, 6 H), 1,29 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,94 (hept, J = 6,8 Hz), 2,36 (s, 3 H), 2,46 (s, 3 H), 2,62 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 2,72 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,37 (s a, 1 H), 3,47-3,55 (m, 1 H), 3,64 (s a, 2 H), 3,74-3,92 (m, 3 H), 4,16-4,24 (m, 3 H), 7,16 (t, J = 5,3 Hz, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 8,53 (s, 1 H).

Ejemplo 37

3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-N-metil-propionamida

A una solución de ácido 3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-propiónico (40 mg 89 !mol) en DMF (5 ml), se le añadió DIPEA (35 mg, 268 !mol). La mezcla se enfrió a 0 ºC antes de añadir PyBOP (51 mg, 98 !mol). La mezcla se agitó a 0 ºC durante 15 min antes de añadir metilamina (58 !l de una solución 2 M en THF). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h, se diluyó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 y se extrajo dos veces con EA. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó sobre placas de TLC preparativa usando 1:4 de heptano:EA para proporcionar el compuesto del título (35 mg) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 1,10 min, [M+H]+ = 421,25; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,00 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,89-2,00 (m, 1 H), 2,34-2,41 (m, 2 H), 2,44 (s, 3 H), 2,47 (s, 3 H), 2,63 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 2,76 (c, J = 7,8 Hz, 2 H), 2,85 (d, J = 4,5 Hz, 3 H), 3,06-3,13 (m, 2 H), 5,38 (s a, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 8,55 (s, 1 H).

Ejemplo 38

3-{2-Etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-N-(2-hidroxi-etil)-propionamida

El compuesto del título se preparó de manera análoga al Ejemplo 37 usando etanolamina; CL-EM: tR = 1,02 min, [M+H]+ = 451,23; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,00 (d, J = 6,3 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,89-2,01 (m, 1 H), 2,37-2,45 (m, 6 H), 2,47 (s, 3 H), 2,63 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 2,73-2,81 (m, 2 H), 3,07-3,14 (m, 2 H), 3,44-3,50 (m, 2 H), 3,73-3,79 (m, 2 H), 5,84 (s a, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 8,55 (s, 1 H).

Ejemplo 39

N-(2-amino-etil)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-propionamida

a) Se preparó éster terc-butílico del ácido [2-(3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6metil-fenil}-propionilamino)-etil]-carbámico de manera análoga al Ejemplo 37, mediante acoplamiento de ácido (2amino-etil)-carbámico con éster terc-butílico del ácido 3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol3-il]-6-metil-fenil}-propiónico; CL-EM: tR = 1,14 min, [M+H]+ = 550,33.

b) Una solución de la amina protegida con terc-butiloxicarbonilo anterior (44 mg, 80 !mol) en HCl 4 M en dioxano (5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el producto en bruto se purificó sobre placas de TLC preparativa usando DCM que contenía 4% de NH3 7 N en metanol, proporcionando el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 0,89 min, [M+H]+ = 450,21.

Ejemplo 40

Ácido 3-(3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-propionilamino)propiónico

a) Se preparó éster terc-butílico del ácido 3-(3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6metil-fenil}-propionilamino)-propiónico de manera análoga al Ejemplo 37 mediante acoplamiento de clorhidrato de éster terc-butílico del ácido 3-amino-propiónico con ácido 3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-propiónico; CL-EM: tR = 1,18 min, [M+H]+ = 535,33.

b) Una solución del éster terc-butílico anterior (40 mg, 75 !mol) en HCl 4 M en dioxano (5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h antes de evaporar el disolvente. Se purificó el producto en bruto sobre placas de TLC preparativa usando 9:1 de DCM:metanol para proporcionar el compuesto del título (23 mg) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 1,03 min, [M+H]+ = 479,30; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,99 (d, J = 6,3 Hz, 6 H), 1,26 (t, J = 7,8 Hz, 3 H), 1,87-1,98 (m, 1 H), 2,34-2,41 (m, 5 H), 2,43-2,51 (m, 5 H), 2,61 (d, J = 6,8 Hz, 2 H), 2,68-2,77 (m, 2 H), 3,01-3,09 (m, 2 H), 3,39-3,61 (m, 2 H), 6,34 (s a, 1 H), 7,82 (s, 1 H), 7,84 (s, 1 H), 8,06 (s, 1 H), 8,52 (s, 1 H).

Ejemplo 41

2-Etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,3,4]oxadiazol-2-il]-6-metil-fenol

El compuesto del título se preparó de manera análoga al Ejemplo 18 partiendo de ácido 5-isobutil-4-metil-piridin-2carboxílico e hidrazida del ácido 4-benciloxi-3-etil-5-metil-benzoico; CL-EM: tR = 1,07 min, [M+H]+ = 357,18.

Ejemplos 42 a 44

Se prepararon los siguientes Ejemplos partiendo del Ejemplo 41 de manera análoga a los Ejemplos anteriores.

Ejemplo

preparado de manera análoga al Ejemplo R CL-EM tR [min] [M+H]+

42

3 0,96 426,15

43

4 0,83 425,27

44

5 0,92 483,23

Ejemplo 42

RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,00 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,94 (hept, J = 6,5 Hz, 1 H), 2,40 (s, 3 H), 2,45 (s, 3 H), 2,61 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 2,76 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,81-3,98 (m, 4 H), 4,15-4,21 (m, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 8,12 (s, 1 H), 8,50 (s, 1 H).

10 Ejemplo 45

2-Etil-4-[5-(6-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenol

Se obtuvo el compuesto del título (30 mg) en forma de un aceite de color amarillo pálido de manera análoga al Ejemplo 2, partiendo de ácido 6-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (100 mg, 435 !mol) y 3-etil-4,N-dihidroxi-5-metilbenzamidina (85 mg, 435 !mol); CL-EM: tR = 1,13 min, [M+H]+ = 352,28.

15 Ejemplo 46

(S)-3-{2-Etil-4-[5-(6-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-propan-1,2-diol

Se obtuvo el compuesto del título (32 mg) en forma de un aceite incoloro de manera análoga al Ejemplo 3 partiendo del Ejemplo 45 (30 mg, 85 !mol); CL-EM: tR = 1,07 min, [M+H]+ = 426,49; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,98 (d, J = 6,8 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 2,22 (hept, J = 7,0 Hz, 1 H), 2,38 (s, 3 H), 2,45 (s a, 1 H), 2,47 (s, 3 H), 2,75 (c, J = 7,5

20 Hz, 2 H), 2,79 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 3,00 (s a, 1 H), 3,80-3,96 (m, 4 H), 4,13-4,20 (m, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 7,99 (s, 1 H).

Ejemplo 47

2-{2-Etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etanol

A una solución del compuesto del Ejemplo 32 (1,00 g, 2,85 mmol) en isopropanol (10 ml) y NaOH acuoso 3 M (3 ml),

25 se le añadió 2-bromo-etanol (1,42 g, 11,4 mmol). La mezcla se agitó a 60 ºC durante 24 h antes de añadir otra porción de 2-bromo-etanol (176 mg, 1,41 mmol). Se continuó agitando a 60 ºC durante 6 h. La mezcla se diluyó con EA y se lavó con agua. Los extractos orgánicos se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 4:1 de heptano:EA a 3:1 para proporcionar el compuesto del título (900 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 1,10 min, [M+H]+ = 396,09.

Ejemplo 48

2-{2-Etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etilamina

a) Una solución del compuesto del Ejemplo 47 (900 mg, 2,28 mmol) y trietilamina (322 mg, 3,18 mmol) en DCM (20 ml) se enfrió a 0 ºC antes de añadir cloruro de metansulfonilo (313 mg, 2,73 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 90 min. La mezcla se diluyó con DCM y se lavó con agua. El extracto orgánico se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante CC sobre gel de sílice, eluyendo con 1:1 de heptano:EA para proporcionar éster 2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etílico del ácido metansulfónico (1,10 g) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 1,16 min, [M+H]+ = 474,02.

b) Una solución del éster de ácido metansulfónico anterior (318 mg, 671 !mol) en NH3 7 N en metanol (10 ml) se agitó en un vial cerrado herméticamente a 60 ºC durante 27 h. El disolvente se evaporó y el producto en bruto se purificó sobre placas de TLC preparativa con 9:1 de DCM:metanol para proporcionar el compuesto del título (220 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 0,86 min, [M+H]+ = 395,08.

Ejemplo 49

Ácido 1-(2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etil)-azetidin-3carboxílico

Una solución de éster 2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etílico de ácido metansulfónico (300 mg, 633 !mol), éster metílico del ácido azetidin-3-carboxílico (218 mg, 1,84 !mol) y trietilamina (129 mg, 1,26 mmol) en etanol (10 ml) se agitó en un vial cerrado herméticamente a 80 ºC durante 96 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con NaOH acuoso 3 M y se agitó de nuevo a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se acidificó añadiendo de HCl acuoso y después se extrajo con EA (2 x 25 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante HPLC preparativa, proporcionando el compuesto del título (170 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 0,90 min, [M+H]+ = 479,10; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,98 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,282 (t, J = 7,0 Hz, 3 H), 1,93 (hept, J = 7,0 Hz, 1 H), 2,38 (s, 3 H), 2,45 (s, 3 H), 2,61 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 2,73 (c, J = 7,3 Hz, 2 H), 3,71-3,82 (m, 2 H), 3,97-4,08 (m, 1 H), 4,19-4,27 (m, 2 H), 4,37-4,62 (m, 2 H), 4,73-4,97 (m, 2 H), 7,87 (s, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 8,53 (s, 1 H).

Ejemplo 50

Ácido 3-(2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etilamino)-propiónico

Una solución de clorhidrato de éster etílico de ∃-alanina (88 mg, 570 !mol) en etanol (2 ml) se filtró sobre PL-HCO3 MP SPE de intercambio iónico. El intermedio éster de ácido metansulfónico del Ejemplo 48 (90 mg, 190 !mol) y trietilamina (77 mg, 760 !mol) se añadieron al filtrado y la mezcla se agitó en un vial cerrado herméticamente a 80 ºC durante 18 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y el disolvente se evaporó. El éster etílico de ácido 3(2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etilamino)-propiónico en bruto se disolvió en etanol (2 ml) y NaOH acuoso 1 N (2 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se neutralizó añadiendo HCl ac. 1 N, el disolvente se retiró al vacío y el residuo se separó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (24 mg) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 0,90 min, [M+H]+ = 466,79; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,00 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,30 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,90-1,99 (m, 1 H), 2,38 (s, 3 H), 2,46 (s, 3 H), 2,60-2,68 (m, 4 H), 2,73 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,20-3,27 (m, 2 H), 3,27-3,33 (m, 2 H), 4,074,15 (m, 2 H), 7,92 (s, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 8,08 (s, 1 H), 8,54 (s, 1 H).

Ejemplo 51

N-(2-{2-Etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etil)-2-hidroxi-acetamida

A una solución del compuesto del Ejemplo 48 (50 mg, 127 !mol) en THF (2 ml) y DMF (2 ml), se le añadió clorhidrato de EDC (27 mg, 139 !mol), HOBt (19 mg, 139 !mol), DIPEA (25 mg, 190 !mol) y ácido glicólico (11 mg, 139 !mol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h antes de concentrarse y separarse mediante HPLC prep. para proporcionar el compuesto del título (32 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 1,05 min, [M+H]+ = 453,08; RMN 1H (CDCl): ∀ 1,00 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,89-2,00 (m, 1 H), 2,37 (s, 3 H), 2,47 (s, 3 H), 2,63 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 2,73 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,75-3,83 (m, 2 H), 3,93-3,99 (m, 2 H), 4,23 (s, 2 H), 7,03-7,15 (m, 1 H), 7,94 (s, 2 H), 8,09 (s, 1 H), 8,55 (s, 1 H).

Ejemplo 52

N-(2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etil)-2-metilaminoacetamida

A una solución del compuesto del Ejemplo 48 (50 mg, 127 !mol) en THF (2 ml) y DMF (2 ml), se le añadió

clorhidrato de EDC (27 mg, 139 !mol), HOBt (19 mg, 139 !mol), DIPEA (25 mg, 190 !mol) y BOC-sarcosina (26 mg, 139 !mol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h antes de concentrarse. El residuo se disolvió en HCl 4 M en dioxano (2 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, se concentró y se separó mediante HPLC prep. para proporcionar el compuesto del título (23 mg) en forma de un aceite rojizo; CL-EM: tR = 0,89 min, [M+H]+ = 466,05.

Ejemplo 53

(2-{2-Etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etil)-amida de ácido etansulfónico

Una solución del intermedio éster de ácido metansulfónico del Ejemplo 48 (25 mg, 53 !mol) y sal potásica de etansulfonamida (16 mg, 106 !mol) en DMF (2 ml) se agitó a 60 ºC durante 18 h. La mezcla se concentró y se separó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (5 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 1,14 min, [M+H]+ = 487,14.

Ejemplo 54

Amida de ácido N-(2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etil)-N',N'dimetil-sulfámico

A una solución del compuesto del Ejemplo 48 (100 mg, 253 !mol) y DIPEA (39 mg, 304 !mol) en acetonitrilo (2 ml), se le añadió cloruro de N,N-dimetilsulfamoilo (40 mg, 279 !mol). La mezcla se agitó a 60 ºC durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el producto en bruto se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (47 mg) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 1,16 min, [M+H]+ = 502,17; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,00 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,32 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,89-2,01 (m, 1 H), 2,39 (s, 3 H), 2,47 (s, 3 H), 2,63 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 2,75 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 2,89 (s, 6 H), 3,51 (c, J = 5,3 Hz, 2 H), 3,98 (t, J = 5,0 Hz, 2 H), 4,75 (t, J = 6,0 Hz, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 8,55 (s, 1 H).

Ejemplo 55

2-{2-Etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-propan-1,3-diol

A una solución del compuesto del Ejemplo 32 (100 mg, 285 !mol) en acetonitrilo (2 ml), se le añadió K2CO3 (56 mg, 427 !mol), seguido de cloromalonato de dimetilo (57 mg, 341 !mol). La mezcla se agitó a 65 ºC durante 18 h. La mezcla se diluyó con EA y se lavó con agua. El extracto orgánico se concentró y el producto en bruto se purificó sobre placas de TLC preparativa usando 4:1 de heptano:EA para proporcionar éster dimetílico del ácido 2-{2-etil-4[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-malónico (95 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 1,17 min, [M+H]+ = 482,01. Este material (95 mg, 197 !mol) se disolvió en etanol (10 ml) y se trató con NaBH4 (60 mg, 1,58 mmol). La mezcla se agitó a 60 ºC durante 1 h antes de detener la reacción con agua. La mezcla se extrajo dos veces con EA y los extractos combinados se concentraron. El producto en bruto se purificó sobre placas de TLC usando 1:1 de heptano:EA para proporcionar el compuesto del título (44 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 1,02 min, [M+H]+ = 426,01; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,00 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,95 (hept, J = 6,3 Hz, 1 H), 2,08 (t a, J = 5,5 Hz, 2 H), 2,42 (s, 3 H), 2,47 (s, 3 H), 2,63 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 2,80 (c, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,91-4,05 (m, 4 H), 4,19 (quint, J = 4,5 Hz, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 8,55 (s, 1 H).

Ejemplo 56

2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoximetil}-propan-1,3-diol

2-{3-[4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxan-5-ilmetoxi)-3-etil-5-metil-fenil]-[1,2,4]oxadiazol-5-il}-5-isobutil-4-metil-piridina (200 mg) se obtuvo en forma de un aceite incoloro de manera análoga al Ejemplo 1 partiendo de 4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxan-5ilmetoxi)-3-etil-N-hidroxi-5-metil-benzamidina (281 mg, 871 !mol) y ácido 5-isobutil-4-metil-piridin-2-carboxílico (200 mg, 871 !mol); CL-EM: tR = 1,24 min, [M+H]+ = 480,20. Este material (200 mg, 417 !mol) se disolvió en HCl 4 M en dioxano (5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. El disolvente se evaporó y el producto en bruto se purificó sobre TLC preparativa usando 1:1 de heptano:EA para proporcionar el compuesto del título en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 1,06 min, [M+H]+ = 440,05; RMN 1H (CDCl3): ∀ 1,00 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,90-2,00 (m, 1 H), 2,27-2,35 (m, 1 H), 2,39 (s, 3 H), 2,47 (s, 3 H), 2,63 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 2,75 (c, J = 7,8 Hz, 2 H), 3,94-4,04 (m, 4 H), 4,05 (d, J = 5,5 Hz, 4 H), 7,94 (s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 8,55 (s, 1 H).

Ejemplo 57

(S)-1-{2-Etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-3-metilamino-propan-2-ol

a) A una solución del compuesto del Ejemplo 32 (315 mg, 896 !mol) en isopropanol (10 ml) y NaOH ac. 3 N (2 ml), se le añadió (R)-epiclorohidrina (249 mg, 2,69 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18

h antes de añadir otra porción de (R)-epiclorohidrina (249 mg, 2,69 mmol). Se continuó agitando a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla se diluyó con EA y se lavó con agua. El extracto orgánico se concentró y el producto en bruto se purificó sobre placas de TLC preparativa usando 7:3 de heptano:EA para proporcionar 2-[3((S)-3-etil-5-metil-4-oxiranilmetoxi-fenil)-[1,2,4]oxadiazol-5-il]-5-isobutil-4-metil-piridina (233 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 1,18 min, [M+H]+ = 408,09.

b) Una solución del intermedio epóxido anterior (20 mg, 49 !mol) en 41% de metilamina en agua (2 ml) y DMF (0,5 ml) se agitó a 80 ºC durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el producto en bruto se separó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (6 mg) en forma de un aceite rojizo; CL-EM: tR = 0,89 min, [M+H]+ = 439,07.

Ejemplo 58

1-{2-Etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-3-((2S)-2-hidroxi-etilamino)propan-2-ol

Una solución del intermedio epóxido del Ejemplo 57 (etapa a, 25 mg, 61 !mol) y etanolamina (19 mg, 18 !mol) en etanol (5 ml) se agitó a 60 ºC durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el producto en bruto se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (9 mg) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 0,87 min, [M+H]+ = 469,12.

Ejemplo 59

((2S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-amidade ácido etansulfónico

Una solución del intermedio epóxido del Ejemplo 57 (etapa a, 25 mg, 61 !mol) y sal potásica etansulfonamida (27 mg, 184 !mol) en DMF (2 ml) se agitó a 60 ºC durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el producto en bruto se purificó sobre HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (8 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 1,07 min, [M+H]+ = 517,12.

Ejemplo 60

Éster metílico del ácido 3-((2S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metilfenoxi}-2-hidroxi-propilamino)-propiónico

Una solución del intermedio epóxido del Ejemplo 57 (etapa a, 150 mg, 368 !mol), clorhidrato de éster metílico de ∃alanina (113 mg, 736 !mol) y trietilamina (93 mg, 920 !mol) en metanol (5 ml) se agitó a 60 ºC durante 20 h. El disolvente se retiró al vacío y el producto en bruto se purificó sobre placas de TLC preparativa usando DCM:metanol

10:1 para proporcionar el compuesto del título (53 mg) en forma de un aceite incoloro; CL-EM: tR = 0,92 min, [M+H]+ = 511,18.

Ejemplo 61

Ácido 3-((2S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxipropilamino)-propiónico

Una solución del compuesto del Ejemplo 60 (53 mg, 101 !mol) en etanol (1 ml) y NaOH acuoso 1 M (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. El etanol se evaporó, la solución restante se neutralizó añadiendo de HCl acuoso 1 N y la mezcla se separó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (23 mg) en forma de un sólido de color blanco; CL-EM: tR = 0,88 min, [M+H]+ = 497,08; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,98 (d, J = 6,5 Hz, 6 H), 1,27 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,93 (hept, J = 7,0 Hz, 1 H), 2,34 (s, 3 H), 2,44 (s, 3 H), 2,60 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 2,652,83 (m, 4 H), 3,18-3,40 (m, 4 H), 3,82-3,96 (m, 2 H), 4,52-4,61 (m, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 8,06 (s, 1 H), 8,51 (s, 1 H).

Ejemplo 62

(S)-3-(2-Etil-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metil-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-propan-1,2-diol

Se preparó 2-{(R)-3-[4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-3-etil-5-metil-fenil]-[1,2,4]oxadiazol-5-il}-6-(1-etil-propil)-4metil-piridina (42 mg) mediante acoplamiento y ciclización de ácido 6-(1-etil-propil)-4-metil-piridin-2-carboxílico (67 mg, 323 !mol) con (R)-4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-3-etil-N-hidroxi-5-metil-benzamidina (130 mg, 420 !mol), tal como se describió en el Ejemplo 1. Este material se disolvió en dioxano (5 ml) y HCl acuoso 2 M (1 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se concentró y el producto en bruto se purificó sobre TLC preparativa usando DCM que contenía 10% de NH3 7 N en metanol para proporcionar el compuesto del título (25 mg) en forma de un vidrio amarillo pálido; CL-EM**: tR = 0,80 min, [M+H]+ = 440,27; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,85 (t, J = 7,3 Hz, 6 H), 1,32 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,79 (quint, J = 7,3 Hz, 4 H), 2,40 (s, 3 H), 2,49 (s, 3 H), 2,72-2,83 (m, 4 H), 3,82-4,00 (m, 5 H), 4,13-4,21 (m, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 8,00 (s, 1 H).

Ejemplo 63

N-[(S)-3-(2-Etil-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metil-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2hidroxi-acetamida

Se preparó el compuesto del título (35 mg) mediante acoplamiento y ciclización de ácido 6-(1-etil-propil)-4-metil

5 piridin-2-carboxílico (67 mg, 323 !mol) y N-((S)-3-[2-etil-4-(N-hidroxicarbamimidoil)-6-metil-fenoxi]-2-hidroxi-propil)2-hidroxi-acetamida (137 mg, 420 !mol), tal como se describió en el Ejemplo 1; CL-EM*: tR = 1,01 min, [M+H]+ = 497,23; RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,85 (t, J = 7,5 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,79 (quint, J = 7,0 Hz, 4 H), 2,38 (s, 3 H), 2,49 (s, 3 H), 2,70-2,80 (m, 3 H), 3,48-3,56 (m, 2 H), 3,75-3,93 (m, 3 H), 4,18-4,24 (m, 3 H), 7,11 (t, J = 5,5 Hz, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 8,00 (s, 1 H).

10 Ejemplos 64 a 68

Los siguientes Ejemplos se prepararon de manera análoga al Ejemplo 62, partiendo de ácido 6-(1-etil-propil)-4metoxi-piridin-2-carboxílico y la 4-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-N-hidroxi-benzamidina adecuada.

Ejemplo

Ra Rb Rc CL-EM**

tR [min]

[M+H]+

64

H CH3 CH2CH3 0,78 456,32

65

H CH3 Cl 0,78 462,17

66

H CH3 OCH3 0,75 458,29

67

H OCH3 Cl 0,77 478,18

68

OCH3 H H 0,68 444,21

Ejemplo 64

RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,87 (t, J = 7,3 Hz, 6 H), 1,33 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,79 (quint, J = 7,3 Hz, 4 H), 2,09 (t a, J = 5,3 Hz, 1 H), 2,41 (s, 3 H), 2,72-2,81 (m, 4 H), 3,82-3,94 (m, 2 H), 3,94-3,97 (m, 2 H), 3,99 (s, 3 H), 4,14-4,20 (m, 1 H), 6,85 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,71 (d,J = 2,3 Hz, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 7,92 (s, 1 H).

20 Ejemplos 69 a 72

Los Ejemplos siguientes se prepararon de manera análoga al Ejemplo 62 partiendo de ácido 6-(1-etil-propil)-4metoxi-piridin-2-carboxílico y el 2-hidroxi-N-{2-hidroxi-3-[4-(N-hidroxicarbamimidoil)-fenoxi]-propil}-acetamida 25 adecuado.

Ejemplo

Ra Rb Rc CL-EM**

tR [min]

[M+H]+

69

H CH3 CH2CH3 0,75 513,80

70

H CH3 CH3 0,73 499,22

71

H CH3 Cl 0,75 519,25

72

H CH3 OCH3 0,72 515,20

Ejemplo 69

RMN 1H (CDCl3): ∀ 0,86 (t, J = 7,5 Hz, 6 H), 1,31 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,78 (quint, J = 7,3 Hz, 4 H), 2,38 (s, 3 H), 2,712,79 (m, 3 H), 2,92 (s a, 1 H), 3,45-3,56 (m, 2 H), 3,76-3,81 (m, 1 H), 3,84 (dd, J = 9,5, 6,3 Hz, 1 H), 3,90 (dd, J = 9,5, 4,8 Hz, 1 H), 3,99 (s, 3 H), 4,19-4,24 (m, 3 H), 6,85 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,07 (t, J = 5,3 Hz), 7,71 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,91 (s, 1 H).

Ejemplo 73

4-{5-[6-(1-Etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-2-metil-6-propil-fenol

Se preparó el compuesto del título (3 mg) mediante acoplamiento y ciclización de clorhidrato de ácido 6-(1-etilpropil)-4-metoxi-piridin-2-carboxílico (64 mg, 246 !mol) y 4,N-dihidroxi-3-metil-5-propil-benzamidina (54 mg, 259 !mol) como se ha descrito en el Ejemplo 1; CL-EM**: tR = 0,88 min, [M+H]+ = 396,29.

Ejemplo 74

N-((2S)-3-{2-etil-4-[3-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-5-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2hidroxi-acetamida

Se preparó el compuesto del título (32 mg) mediante acoplamiento y ciclización de N-hidroxi-5-isobutil-4-metil-piridin2-carboxamidina (40 mg, 193 !mol) con ácido 3-etil-4-[(S)-2-hidroxi-3-(2-hidroxi-acetilamino)-propoxi]-5-metilbenzoico (60 mg, 193 !mol) tal como se describió en el Ejemplo 1; CL-EM: tR = 0,95 min, [M+H]+ = 482,86.

Ejemplo 75: Ensayo GTPγS para determinar los valores CE50

Se llevaron a cabo los ensayos de adhesión GTPγS en placas microtituladoras de 96 receptáculos (Nunc, 442587) en un volumen final de 200 !l, usando preparaciones de membrana de células CHO que expresan el receptor S1P1 humano recombinante. Las condiciones de Ensayo son 20 mM de Hepes (Fluka, 54461), 100 mM de NaCl (Fluka, 71378), 5 mM de MgCl2 (Fluka, 63064), 0,1% de BSA (Calbiochem, 126609), 1 !M de GDP (Sigma, G-7127), 2,5% de DMSO (Fluka, 41644), 50 pM 35S-GTPγS (Amersham Biosciences, SJ1320). El pH es 7,4. Los compuestos de ensayo se disolvieron y diluyeron en 100% de DMSO y se pre-incubaron a temperatura ambiente durante 30 min en 150 !l del buffer de ensayo anterior, en ausencia de 35S-GTPγS. Después de adición de 50 !l de 35S-GTPγS, el ensayo se incubó durante 1 h a temperatura ambiente. El ensayo se determinó mediante transferencia de la mezcla de reacción a una placa Multiscreen (Millipore, MAHFC1H60) usando un cosechador de células de Packard Biosciences, y las placas se lavaron con 10 mM de Na2HPO4/NaH2PO4 (70%/30%) enfriado con hielo, se secaron y sellaron en el fondo después de adición de 25 !l de MicroScint20 (Packard Biosciences, order# 6013621), sellado en la parte superior. Se midió el 35S-GTPγS unido a membrana con un TopCount de Packard Biosciences.

CE50 es la concentración de agonista induciendo 50 % de adhesión 35S-GTPγS máxima específica. La adhesión específica se determina mediante sustracción de adhesión no específica de adhesión máxima. Adhesión máxima es la cantidad de cpm unido a la placa Multiscreen en presencia de 10 !M de S1P. La adhesión no específica es la cantidad de adhesión en ausencia de un agonista en el ensayo. Los valores CE50 de los compuestos de los Ejemplos 2, 6, 7, 8, 11, 14, 15, 21, 22, 28, 29, 45 y 60 no han sido medidos. Han sido medidas las actividades agonisticas (valores CE50) de los otros compuestos ejemplificados. El valor EC50 medido del compuesto del Ejemplo 43 fue superior a 10 !M. Los valores CE50 de todos los otros compuestos ejemplificados están en el rango de 0,2 a 7600 nM con un promedio de 345 nM. Las actividades agonisticas de algunos compuestos de Fórmula (I) se exhiben en la Tabla 1.

Tabla 1:

Compuesto del Ejemplo

CE50 [nM]

1

1,2

10

2,7

17

2,3

33

7,2

34

9,1

40

3,3

50

5,1

51

8,8

55

4,7

58

11,2

59

11,9

61

2,3

62

2,2

65

9,4

69

3,1

70

2,8

71

0,8

72

8,8

74

9,0

Ejemplo 76: Determinación de la Eficacia In vivo

La eficacia de los compuestos de Fórmula (I) se determina midiendo la circulación de linfocitos después de la

5 administración oral de 3 a 30 mg/kg de un compuesto de Fórmula (I) a ratas normotensas macho Wistar. Los animales se se alojaron en condiciones de aclimatación controlada con un ciclo de 12 h-de luz/oscuridad, y tenían libre acceso a comida normal para rata y agua bebible. La sangre se recogió antes y después de 3, 6 y 24 h de la administración del fármaco. La sangre completa se sometió a hematología usando Advia Hematology system (Bayer Diagnostics, Zürich, Switzerland).

10 Todos los datos se presentan como promedio ± SEM. Los análisis estadídicos se llevan a cabo mediante análisis de variación (ANOVA) usando Estadística (StatSoft) y el procedimiento Student-Newman-Keuls para múltiples comparaciones. La hipótesis nula se descarta cuando p < 0,05.

Como ejemplo, la Tabla 2 muestra el efecto sobre el conteo de linfocitos 6 horas después de administración oral de 10 mg/kg de algunos compuestos de Fórmula (I) a ratas macho Wistar normotensas en comparación con un grupo

15 de animales tratados con un solo vehículo. El conteo de linfocitos después de 6 horas de la administración oral ha sido medido para 7 de los compuesos ejemplificados (Tabla 2) y están en el rango de -35 % a -74% con el promedio de -64%.

Tabla 2:

Compuesto del Ejemplo

Conteo de Linfocitos

1

-74%

5

-67%

17

-66%

34

-70%

36

-74%

40

-35%

55

-65%*

* 3 h después de la administración.

Claims (15)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de Fórmula (I),

   Fórmula (I)

   en la que A representa

   en las que los asteriscos indican el enlace que está unido al grupo piridina de Fórmula (I); R1 representa metilo, etilo o metoxi; R2 representa hidrógeno; y R3 representa alquilo C2-5 o alcoxi C1-4; o R1 representa alquilo C2-5 o alcoxi C1-4; R2 representa hidrógeno; y R3 representa metilo o etilo; o R1 representa metilo, etilo, o metoxi; R2 representa alquilo C3-5; y R3 representa hidrógeno;

   15 R4 representa hidrógeno; R5 representa hidrógeno, alquilo C1-3 o metoxi; R6 representa -CH2-(CH2)n-CONR61R62, 1-(3-carboxi-azetidinil)-3-propionilo, 1-(2-carboxi-pirrolidinil)-3-propionilo, 1-(3-carboxi-pirrolidinil)-3-propionilo, hidroxi, hidroxi-alcoxi C2-4, di-(hidroxi-alquilo C1-2)-alcoxi C1-2, 2,3-dihidroxipropoxi, -OCH2-(CH2)n-NR61R62, 2-[(ácido azetidin-3-carboxílico)-1-ill-etoxi, 2-[(éster de alquilo C1-5 de ácido

   20 azetidin-3-carboxílico)-1-il]-etoxi, 2-[(ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]-etoxi, 2-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]-etoxi, -OCH2-CH(OH)-CH2-NR61R62, 3-[(ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-2hidroxipropoxi, 3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-2-hidroxipropoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]-propoxi, 2-hidroxi-3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]propoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin-2-carboxílico)-1-il]-propoxi, 2-hidroxi-3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido

   25 pirrolidin-2-carboxílico)-1-il]-propoxi, -OCH2-(CH2)n-NHSO2R63, -OCH2-CH(OH)-CH2-NHSO2R63, -OCH2-(CH2)n-NHCOR64, o -OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR64; R61 representa hidrógeno, metilo, etilo, 2-hidroxietilo, carboximetilo, 1-(alquilcarboxi C1-5)metilo, 2-carboxietilo, 2(alquilcarboxi C1-5)etilo, 2-aminoetilo, o 2-metiloamino-etilo; R62 representa hidrógeno, o metilo;

   30 R63 representa alquilo C1-3, metilamino, etilamino, o dimetilamino; R64 representa hidroximetilo, 2-hidroxietilo, aminometilo, metilaminometilo, 2-aminoetilo, o 2-metilaminoetilo; n representa el número entero 1 ó 2; y R7 representa hidrógeno, metilo o cloro;

   o sales del mismo.

   35 2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que A representa

   en las que los asteriscos indican el enlace que está unido al grupo piridina de Fórmula (I);

   o sales del mismo.
2. 3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que A representa

   en la que el asterisco indica el enlace que está unido al grupo piridina de Fórmula (I);

   o sales del mismo.

3. 4.

   Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R1 representa metilo o metoxi, R2 representa hidrógeno y R3 representa alquilo C2-4 o alcoxi C1-3; o sales del mismo.

4. 5.

   Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R1 representa alquilo C2-4 o alcoxi C1-3, R2 representa hidrógeno y R3 representa metilo; o sales del mismo.

5. 6.

   Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R1 representa metilo, R2 representa alquilo C4 y R3 representa hidrógeno; o sales del mismo.

6. 7.

   Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que al menos uno de R5 y R7 representa un grupo distinto de hidrógeno; o sales del mismo.

7. 8.

   Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R5 representa alquilo C1-3 o metoxi, y R7 representa metilo o cloro; o sales del mismo.

8. 9.

   Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que R6 representa -CH2-(CH2)n-CONR61R62, 1-(3-carboxi-azetidinil)-3-propionilo, 1-(2-carboxi-pirrolidinil)-3-propionilo, 1-(3-carboxi-pirrolidinil)-3propionilo, di-(hidroxi-alquilo C1-2)-alcoxi C1-2, 2,3-dihidroxi-propoxi, -OCH2-(CH2)n-NR61R62, 2-[(ácido azetidin-3carboxílico)-1-il]-etoxi, 2-[(éster de alquilo C1-5 de ácido 2-[(ácido 2-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-3carboxílico)-1-il]-etoxi, -OCH2-CH(OH)-CH2-NR61R62, 3-[(ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-2-hidroxipropoxi, 3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido azetidin-3-carboxílico)-1-il]-2-hidroxipropoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido carboxílico)-1-il]-propoxi, 2hidroxi-3-[(éster de alquilo C1-5 de ácido pirrolidin-3-carboxílico)-1-il]-propoxi, 2-hidroxi-3-[(ácido pirrolidin-2carboxílico)-1-il]propoxi, 2-hidroxi-3-[(éster de alquilo pirrolidin-2-carboxílico)-1-il]-propoxi, o -OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR64;

   o sales del mismo.

9. 10.

   Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que R6 representa 2,3dihidroxi-propoxi o -OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR64; o sales del mismo.

10. 11.

    Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado entre grupo que consiste en:

    N-((S)-3-{2-etil-4-[5-(6-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2-hidroxiacetamida; N-((S)-3-{2-etil-4-[5-(4-isobutil-6-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2-hidroxiacetamida; 2-hidroxi-N-((R)-2-hidroxi-3-(4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-2,6-dimetilfenoxi}-propil)acetamida; 2-hidroxi-N-((S)-2-hidroxi-3-{4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-2,6-dimetilfenoxi}-propil)acetamida; N-((S)-3-{2-etil-4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2-hidroxiacetamida; (S)-3-{4-[5-(6-isobutil-4-metoxi-piridin-2-il)-[1,3,4]oxadiazol-2-il]-2,6-dimetil-fenoxi}-propano-1,2-diol; (R)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxil-propano-1,2-diol; (S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-propano-1,2-diol;

    N-((S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2-hidroxiacetamida; 3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-N-(2-hidroxi-etil)-propionamida; y ácido 3-(3-{2-etil-4-(5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenil}-propionilamino)-propiónico;

    o sales de dichos compuestos.
11. 12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado entre grupo que consiste en:

    2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etilmina; ácido 3-(2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etilamino)-propiónico; N-(2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-etil)-2-hidroxiacetamida; 2-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-propano-1,3-diol; (S)-1-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-3-(2-hidroxi-etilamino)-propan2-ol; ((S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-amida de ácido etansulfónico; ácido 3-((S)-3-{2-etil-4-[5-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propilamino)propiónico; (S)-3-(2-etil-4-(5-[6-(1-etil-propil)-4-metil-piridin2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-propan-1,2-diol; N-[(S)-3-(2-etil-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metil-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2hidroxi-acetamida; (S)-3-(2-etil-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-propano-1,2-diol; (S)-3-(2-cloro-4-(5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-propano-1,2-diol; N-[(S)-3-(2-etil-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxipiridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2hidroxi-acetamida; N-[(S)-3-(4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-2,6-dimetil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2hidroxi-acetamida; N-[(S)-3-(2-cloro-4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxipiridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]-2hidroxi-acetamida; N-[(S)-3-(4-{5-[6-(1-etil-propil)-4-metoxi-piridin-2-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-2-metoxi-6-metil-fenoxi)-2-hidroxi-propil]2-hidroxi-acetamida; y N-((2S)-3-{2-etil-4-[3-(5-isobutil-4-metil-piridin-2-il)-[1,2,4]oxadiazol-5-il]-6-metil-fenoxi}-2-hidroxi-propil)-2-hidroxiacetamida;

    o sales de dichos compuestos.

12. 13.

    Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un portador farmacéuticamente aceptable.

13. 14.

    Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o la composición de acuerdo con la reivindicación 13, para su uso como un medicamento.

14. 15.

    Uso del compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en la prevención o tratamiento de enfermedades o trastornos asociados con un sistema inmunológico activado.

15. 16.

    Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1a 12, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en la la prevención o tratamiento de enfermedades o trastornos seleccionados del grupo que consiste en rechazo al transplante de órganos tales como, riñón, hígado, corazón, pulmón páncreas, cornea y piel; enfermedad de injerto contra huésped ocasionada por transplante de células madre; síndromes autoinmunes que incluyen artritis reumatoide, esclerosis múltiple, enfermedad inflamatoria del intestino tal como enfermedad de Crohn y colitis ulcerativa, psoriasis, artritis psoriásica, tiroiditis tal como tiroiditis de Hashimoto, uveoretinitis; enfermedades atópicas tales como rinitis, conjuntivitis, dermatitis; asma; diabetes de tipo I; enfermedades autoinmunes post-infecciosas que incluyen fiebre reumática y glomerulonefritis postinfecciosa; cánceres sólidos y metástasis tumorales.