ES2347601T3 - Bacteria acido lactica que puede producir acido gamma-aminobutirico (gaba). - Google Patents
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Abstract
Bacteria ácido láctica que pertenece al género Lactobacillus, que puede producir ácido γ-aminobutírico bajo condiciones de coexistencia de ácido láctico y sal común en un medio en el momento de inicio del cultivo, en la que la bacteria ácido láctica es la cepa de Lactobacillus rennini KG-34 (nº de registro de depósito NITE BP-177) y KG-43 (nº de registro de depósito NITE BP-309).
Description
Bacteria ácido láctica que puede producir ácido
\gamma-aminobutírico (GABA).
La presente invención se refiere a una bacteria
ácido láctica que pertenece al género Lactobacillus, que
puede producir ácido \gamma-aminobutírico (al que
se hará referencia a continuación en la presente memoria como
"GABA"), incluso bajo condiciones en las que el ácido láctico
existe en un medio al principio del cultivo, y a un procedimiento
para producir un medio de cultivo que comprende el ácido
\gamma-aminobutírico utilizando el mismo.
El GABA es un aminoácido que habitualmente llama
la atención, ya que posee efectos fisiológicos tales como un efecto
hipotensor, un efecto diurético y un efecto tranquilizante. Ya que
los alimentos que contienen GABA se limitan a algunos vegetales,
tés, arroz y similares, y su contenido es también pequeño, se
proponen algunos procedimientos para producir GABA que utilizan
bacterias ácido lácticas de fermentación del GABA (por ejemplo,
véase las referencias de patentes 1 a 3). Como dichas bacterias
ácido lácticas que producen GABA se conocen Lactobacillus
hilgardii, Lactococcus lactis subespecie cremoris,
Lactococcus lactis subespecie lactis, Enterococcus
casseliflavus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum,
Streptococcus thermophilus y similares, que poseen la capacidad
de producir GABA a partir del ácido L-glutámico o de
una sal del ácido L-glutámico mediante una reacción
de decarboxilación.
Sin embargo, ya que estas bacterias lácticas
necesitan componentes caros tales como polvo de suero de leche,
leche desnatada, caseína y peptona para el medio, la productividad
según el punto de vista del coste, no es buena (por ejemplo, véase
la Referencia de patente 1 ó 4). Asimismo, cuando la salsa de soja
koji o el gluten como material barato se degrada con un ácido
o con una enzima o koji, y la glutamina eluida se convierte
en ácido glutámico mediante glutaminasa para utilizarse como medio,
la sal común generada por la neutralización o la sal común añadida
como medida antipulocional cuando tiene lugar la degradación
enzimática, inhibe la producción de GABA de las bacterias ácido
lácticas. Aunque se ha informado de diversas bacterias ácido
lácticas productoras de GABA tolerantes a diversas salinidades, la
concentración de sal óptima común para la fermentación de GABA es
una marcada alta salinidad de entre 12,5 y 18% (por ejemplo, véase
la Referencia de patente 5). Cuando se considera la promoción de una
dieta de régimen para intentar que sea hipocalórica, para evitar las
enfermedades relacionadas con el estilo de vida, los alimentos y los
condimentos que poseen un contenido alto común de sal, no son
deseables. Además, ya que existe una posibilidad de esperar una
actividad hipotensora del GABA, su combinación con una concentración
alta común de sal, pierde el significado original.
A partir de lo expuesto anteriormente, para
producir GABA mediante una bacteria ácido láctica, aunque es ideal
utilizar material barato tal como koji y gluten degradándolo
bajo una concentración salina baja, ésta baja concentración común de
sal presenta el problema de que las cepas salvaje causan polución.
La polución tiene lugar en una etapa temprana del cultivo, y cuando
se produce un alcohol o el pH disminuye como resultado, el
crecimiento de las bacterias lácticas que producen GABA no puede
obtenerse. Por lo tanto, no puede obtenerse una cantidad suficiente
del GABA objetivo. Como medio para evitar la polución por estas
cepas salvajes a una concentración salina baja común, existe un
procedimiento que utiliza etanol, ácido acético y ácido láctico, que
es utilizado frecuentemente de forma general como antisépticos
alimentarios. Sin embargo, aunque el etanol y el ácido acético
suprimen los contaminantes, también suprimen las bacterias del ácido
láctico productoras de GABA. Por otra parte, ya que las bacterias
del ácido láctico producen ácido láctico ellas mismas, poseen una
resistencia más alta al ácido láctico que otras bacterias.
De acuerdo con esto, aunque en el contexto de la
presente invención se ha considerado la utilización del ácido
láctico como antiséptico, existe un nuevo problema, que las
bacterias del ácido láctico que producen GABA no pueden crecer
cuando se añade ácido láctico al principiar el cultivo en presencia
de sal común, o pueden crecer, pero no producen GABA.
Referencia 1 de patente:
JP-A-2000-210075
Referencia 2 de patente:
JP-A-2004-215529
Referencia 3 de patente:
JP-A-2005-102559
Referencia 4 de patente: Patente japonesa nº
3426157
Referencia 5 de patente: Patente japonesa nº
2704493
Higuchi et al., J. Bacteriol., Vol 179,
nº10, 3362-3364, da a conocer el aislamiento de la
cepa "E1" de Lactobacillus que produce GABA.
Los problemas de la presente invención consisten
en proporcionar una bacteria ácido láctica que pueda producir GABA
bajo condiciones coexistentes de ácido láctico y sal común en el
medio cuando empieza el cultivo, y proporcionar un procedimiento
para producir una mezcla de cultivos que comprende GABA.
Con la finalidad de resolver los problemas
anteriormente mencionados, en el contexto de la presente invención
se llevaron a cabo intensos estudios y encontraron como resultado
que los problemas pueden resolverse aislando una bacteria ácido
láctica a partir de la soja no refinada, que puede producir GABA,
incluso bajo condiciones coexistentes de ácido láctico y sal común
al principio del cultivo y utilizándolo para llevar a cabo la
presente invención.
A saber, la presente invención se refiere a los
siguientes ítems (1) a (3):
- (1)
- Una bacteria ácido láctica que pertenece al género Lactobacillus, que puede producir ácido \gamma-aminobutírico bajo condiciones coexistentes de ácido láctico y sal común, en un medio al principio del cultivo en el que la bacteria ácido láctica es Lactobacillus rennini (cepas KG-34 y KG-43).
- (2)
- Una bacteria ácido láctica que pertenece al género Lactobacillus, que puede producir ácido \gamma-aminobutírico bajo condiciones coexistentes del 1 al 4% de ácido láctico y de 8 al 12% de sal común, en un medio, al principio del cultivo, y
- (3)
- Un procedimiento para producir una mezcla de cultivo que comprende un ácido \gamma-aminobutírico, en el que se cultiva la bacteria láctica descrita anteriormente (1) o (2), después de llevar a cabo la inoculación en un medio que contiene ácido L-glutámico y/o sus sales.
Según la presente invención, puede
proporcionarse un procedimiento para producir de forma estable GABA,
utilizando materiales baratos sin provocar la inhibición de la
fermentación por las cepas salvajes. Debe tenerse en cuenta que las
formas de realización que se relacionan con las cepas distintas de
las KG-34 y KG-43, son sólo ejemplos
comparativos.
La figura 1 muestra un árbol genealógico
molecular de las cepas de Lactobacillus rennini
KG-34, KG-43, S1,
KG-31, KG-64,
KG-18-4 y
KG4-14-1.
La bacteria ácido láctica relacionada con la
presente invención es una cepa que pertenece al género
Lactobacillus, tal como se ha indicado anteriormente, y por
ejemplo, puede utilizarse una bacteria ácido láctica aislada de la
soja no refinada. Las cepas mencionadas anteriormente de
Lactobacillus rennini de la presente invención tienen la
capacidad de producir GABA bajo unas condiciones de coexistencia del
ácido láctico y de la sal común en el medio, al comienzo del
cultivo, y en una forma preferida de realización, pueden producir
GABA bajo unas condiciones de coexistencia de entre 1 a 4% de ácido
láctico y de entre 8 y 12% de sal común, en el que la cepa de
Lactobacillus rennini es KG-34 o
KG-43 anteriormente mencionadas.
La cepa KG-34 de
Lactobacillus rennini se depositó el 7 de febrero de 2006 en
el National Institute of Technology and Evaluation (NITE), NITE
Patent Microorganisms Depositary (NPMD) (código postal
292-0818; 2-5-8,
Kazusa Kamatari, Kisarazu, Chiba, Japón) (número de depositario NITE
p-177), habiéndose transferido a la International
Depositary Authority el 1 de septiembre de 2006, basándose en el
Tratado de Budapest (número de depósito NITE
BP-177).
Asimismo, la cepa KG-43 del
Lactobacillus rennini se depositó internacionalmente el 31 de
enero del 2007, en el National Institute of Technology en Evaluation
(NITE), NITE Patent Microorganisms Depositary (NPMD) (código postal
292-0818; 2-5-8,
Kazusa Kamatari, Kisarazu, Chiba, Japón), basándose en el Tratado de
Budapest (número de aceptación NITE ABP-309).
El aislamiento de una bacteria ácido láctica a
partir de una soja no refinada se llevó a cabo mediante el
procedimiento siguiente, a saber: 25 g de una soja no refinada se
sometieron al tratamiento gástrico, añadiendo una cantidad apropiada
del líquido así obtenido a un medio MRS-SOYTONE
(caldo MRS al 5,5%, Bactosoytone al 0,5%, glutamato sódico al 0,5%,
sal común al 8%, ácido láctico aditivo alimentario al 5%, pH (5,1) y
se cargó en tubo Durham, realizándose un cultivo estático a 30ºC. Un
medio de cultivo en el cual la generación de gas en el tubo Durham
se confirmó, se diluyó apropiadamente con el medio
MRS-SOYTONE, extendiéndose en un medio
MRS-SOYTONE agar, seguido por el cultivo a 30ºC
durante 7 días en AnaeroPack Kenki (Mitsubishi Gas Chemical Co.,
Inc). Las colonias únicas así obtenidas se inocularon otra vez en el
medio NRS-SOYTONE cargado con el tubo de Durham,
seleccionándose las cepas en las que se confirmó la generación de
gas.
Se aislaron siete cepas KG-34,
KG-43, S1, KG-31,
KG-64, KG-18-4 y
KG4-14-1 mediante el procedimiento
anterior. Entre las 7 cepas, se examinaron las propiedades
bacteriológicas de las dos cepas KG-34 y
KG-43, mostrándose los resultados en la Tabla 1.
Como un control comparativo, se describieron también datos de
Lactobacillus rennini DMSZ 20253 como la cepa estándar de
Lactobacillus rennini. Puede apreciarse que la cepa estándar
Lactobacillus rennini DMSZ 20253 no produce GABA, ya que no
posee la capacidad de descarboxilación del ácido glutámico.
\vskip1.000000\baselineskip
Además, las secuencias nucleótidas completas de
16S ADNr (gen 16S ADNr) de las cepas KG-34,
KG-43, S1, KG-31,
KG-64, KG-18-4 y
KG4-14-1 de la bacteria ácido
láctica Lactobacillus rennini de la presente invención, se
determinaron mediante el procedimiento siguiente.
Cada una de las cepas KG-34,
KG-43, S1, KG-31,
KG-64, KG-18-4 y
KG4-14-1 de la bacteria ácido
láctica Lactobacillus rennini de la presente invención, se
inocularon en el medio MRS-Soytone (caldo MRS al
5,5%, Soytone al 0,5%, NaCl al 8%, glutamato sódico al 0,5%, pH 5,1)
y cultivaron a 30ºC durante 4 días. Se utilizó GenTorukun^{TM}
(para las levaduras) (Takara Bio) para la extracción del ADN
genómico. La región completa del 16S ADNr se dividió en tres
fragmentos y se amplificó mediante PCR utilizando el ADN genómico
extraído como matriz. Secuenciando los fragmentos respectivos y
uniéndolos, se obtuvo la secuencia regional completa. Se utilizó al
ciclador MP Térmico Yakara como el ciclador térmico, y el
Secuenciador de ADN ABI Prism 377 (Applied Biosystems) como el
secuenciador del ADN. Las secuencias nucleótidas respectivas del 16S
ADNr así obtenidas se muestran en
SEC ID nº 1 y 2.
SEC ID nº 1 y 2.
Se llevó a cabo la recuperación de la homología
de las especies que se consideraban próximas a las bacterias, a
partir de las secuencias nucleótidas obtenidas del 16S ADNr. Se
preparó un árbol genealógico molecular mediante un procedimiento de
conexión vecinal con las especies estrechamente relacionadas,
utilizando las secuencias nucleótidas de 16S ADNr. Se llevó a cabo
el estudio de las especies estrechamente relacionadas y de los
grupos de asignación clasificatoria. Como resultado de la
recuperación mediante NCBI-BLAST, las bacterias
mostraron la máxima homología (aproximadamente 99,5%) con el 16S
ADNr de Lactobacillus rennini, formando idéntica agrupación
de Lactobacillus rennini en el árbol genealógico. Se juzgó a
partir de los resultados que esta bacteria era Lactobacillus
rennini. El árbol genealógico preparado de esta forma se muestra
en la figura 1.
Aunque la bacteria ácido láctica de la presente
invención posee la capacidad de producir GABA a partir del ácido
L-glutámico o de una sal de ácido
L-glutámico en ausencia de sal común y ácido
láctico, puede también producir GABA incluso bajo unas condiciones
coexistentes de entre 1 a 4% de ácido láctico y entre 8 y 12% de sal
común en el medio al principio del cultivo (véase el Ejemplo 2).
Adicionalmente, además del tiempo de comienzo del cultivo, puede
producir GABA bajo condiciones coexistentes de entre 0 a 4% de ácido
láctico y entre 0 a 12% de sal común en el medio.
El procedimiento de la presente invención para
producir una mezcla de cultivos que incluye GABA, es un
procedimiento en el que una mezcla de cultivos que comprende GABA se
produce inoculando una bacteria ácido láctica que posee las
propiedades anteriormente mencionadas en un medio que contiene ácido
L-glutámico y/o sus sales y cultivando los mismos.
Como bacteria que va a utilizarse en la presente invención, aunque
se utilice una especie aislada a partir de la soja no refinada,
cultivada y subcultivada, esta misma especie contenida en la soja no
refinada puede utilizarse como tal o aislándola nuevamente. Además,
puede utilizarse cualquiera de las células liofilizadas, cepas
crioconservadas y caldos líquidos de cultivo.
Es necesario que el medio que va a utilizarse en
la presente invención contenga ácido glutámico para producir GABA.
Como ácido glutámico que va a estar contenido en el medio, aunque el
ácido L-glutámico es químicamente preferible como
tipo de aminoácido, puede ser el ácido glutámico o el glutamato
sódico como agente aditivo alimentario que se utilice como
condimento, otras sales del ácido glutámico, y además, el obtenido
hidrolizando una proteína alimentaria con un ácido o una enzima.
Además, los alimentos que contienen ácido glutámico libre tal como
un condimento, un producto marino procesado, y un tomate, pueden
utilizarse como tales. En relación con esto, cuando se obtiene una
mezcla de cultivos que comprende además una gran cantidad de GABA,
es necesario utilizar un medio que contenga una cantidad aún más
grande de ácido glutámico.
\newpage
También, además del ácido glutámico
anteriormente mencionado, es preferible, para el crecimiento de la
bacteria ácido láctica, que el medio que va a utilizarse en la
presente invención contenga por lo menos uno de los azúcares tales
como glucosa, fructosa, y maltosa, alimentos que contengan vitaminas
y minerales, tales como extracto de levadura y extracto de carne, o
koji o digestos de koji. Adicionalmente, pueden
asimismo utilizarse aditivos alimentarios tales como un agente
emulsificante, un agente estabilizante y un agente que ajuste el pH.
Ejemplos de koji y de digestos de koji que pueden
utilizarse en el medio, incluyen hidrolizados proteicos, preparados
dejando que un hongo koji reaccione con ellos, o enzimas del
hongo koji reaccionen con uno o dos o más materiales tratados
mediante desnaturalización, seleccionados a partir de cereales tales
como trigo, cebada, centeno, cebada perlada, trigo prensado o
cebada, quinoa, mijo italiano, mijo japonés, mijo, arroz y maíz, y
habas tales como las de soja, habas adzuki, haba de riñón, altramuz,
haba de cuenta de collar y haba de lente. Resultan preferidas la
salsa de soja, la soja no refinada, miso, hidrolizados
proteicos de semillas y similares.
La inoculación de la bacteria ácido láctica en
la presente invención, se lleva a cabo cultivando el
Lactobacillus renninia anteriormente mencionado capaz de
producir GABA, a una temperatura de entre 25 y 35ºC, y de 48 a 96
horas, utilizando un medio que contiene una fuente de ácido
glutámico, sal común y una fuente de carbono, y que posee un pH
inicial de entre 4,0 y 7,0, e inoculando el cultivo de siembra de la
bacteria ácido láctica resultante en un volumen de aproximadamente
entre 1/1.000 y 1/10, basado en el volumen del principal medio de
cultivo.
Aunque el tamaño y calidad del material del
dispositivo que puede utilizarse en el cultivo de la presente
invención no está limitado, con tal de que pueda lavarse, esté
térmicamente esterilizado y pueda utilizarse para la producción de
alimentos, resulta preferido que posea una estructura higiénica tal
que pueda ser difícilmente contaminado por varios gérmenes. Con
respecto a las condiciones del cultivo, la temperatura de éste es
entre 20 y 40ºC, preferentemente entre 25 y 35ºC, y el pH inicial es
preferentemente entre 4,0 y 7,0, basado en las propiedades
bacteriológicas de la bacteria ácido láctica (véase Tabla 1). Con
respecto al período de cultivo, es necesario que sea suficiente en
el tiempo, de modo que la fuente del ácido glutámico tal como el
ácido L-glutámico y/o sus sales, puedan convertirse
en la concentración deseada de GABA. Por ejemplo, resulta preferido
un período de tiempo entre 1 y 4 semanas.
De esta forma, puede obtenerse una mezcla de
cultivos que incluye GABA, que posee amplias aplicaciones como
material en bruto de alimentos procesados y similares. Por ejemplo,
también puede utilizarse la mezcla de cultivos que comprende GABA
obtenido mediante el procedimiento de la presente invención, como un
material de refuerzo del GABA, añadiéndolo directamente a varios
condimentos y alimentos y bebidas.
Además, puede también utilizarse aumentando el
contenido de GABA mediante etapas de tratamiento tales como
compresión, filtración, concentración y secado. Como etapa de
filtración anteriormente mencionada, puede llevarse a cabo
utilizando un dispositivo general de
compresión-filtración para utilizarlo en el
procesamiento alimentario que utiliza filtro, tela para filtro, o
similares, y ayuda de filtros para la utilización del alimento,
pudiendo utilizarse la tierra de diatomeas, la celulosa y el carbón
activado. Para la etapa de concentración, pueden utilizarse
dispositivos tales como un concentrador al vacío, un concentrador de
presión reducida, un alambique de destilación, y un concentrador de
congelación, y también puede utilizarse un procedimiento en el que
la humedad en el medio de cultivo se evapora simplemente mediante
calentamiento. Asimismo, como etapa de secado, resulta preferido
llevarla a cabo mediante pulverización o mediante congelación
mediante un procedimiento eficiente e higiénico. Además, para
obtener una mezcla de cultivo en la que el contenido de GABA esté
todavía aumentado, puede también utilizarse, además de las etapas
mencionadas, una cromatografía líquida.
Tratando la mezcla de cultivos que comprende
GABA de esta forma, pueden obtenerse comestibles líquidos o en polvo
que comprenden GABA. Formulándolos en varios artículos alimentarios
o llevando a cabo su procesamiento secundario, pueden obtenerse
fácilmente condimentos, o alimentos o bebidas en los que el GABA
esté reforzado. En el procesamiento secundario, pueden contenerse
componentes que se utilizan generalmente en los alimentos, tales
como excipientes, edulcorantes, engrosantes, proteínas, péptidos,
lípidos, polisacáridos, azúcares y sales.
En esta conexión, la medida del contenido de
GABA en la mezcla de cultivo así obtenida y en los condimentos y en
los alimentos y bebidas suplementados con la mezcla del cultivo,
puede llevarse a cabo utilizando instrumentos para análisis, tales
como una cromatografía líquida de alta resolución y un analizador de
aminoácidos, un reactivo analítico que utilice enzimas y
similares.
Aunque lo expuesto a continuación describe la
presente invención con mayor detalle haciendo referencia a ejemplos,
la presente invención no está limitada por ellos.
\vskip1.000000\baselineskip
Cantidades apropiadas de muestras que iban a
ensayarse, se recuperaron a partir de varios tipos de alimentos
fermentados, y una cantidad apropiada de cada muestra se añadió a un
medio MRS-SOYTONE (caldo MRS al 5,5%, Bactosoytone
al 0,5%, glutamato sódico al 0,5%, sal común al 8%, ácido láctico
aditivo alimentario al 5%, pH 5,1) y se cargó con un tubo Durham,
realizándose un cultivo estático a 30ºC. Un medio de cultivo en el
cual la generación de gas en el tubo Durham se confirmó, se diluyó
apropiadamente con el medio MRS-SOYTONE,
extendiéndose en un medio MRS-SOYTONE agar, seguido
por el cultivo a 30ºC durante 7 días en AnaeroPack Kenki (Mitsubishi
Gas Chemical Co., Inc). Las colonias únicas así obtenidas se
inocularon otra vez en el medio MRS-SOYTONE cargado
con el tubo de Durham, midiéndose el GABA en las muestras en las
cuales la generación de gas fue confirmada. En esta conexión, las
cepas aisladas a partir de la misma fuente de aislamiento se
sometieron a identificación individual para evitar la selección de
dos o más de la misma cepa. Se midió el GABA mediante un analizador
L-8800 de aminoácidos de alta resolución, fabricado
por Hitachi, Ltd. Como resultado, se reveló que las cepas
KG-34, KG-43, S1,
KG-31, KG-64,
KG-18-4 y
KG4-14-1 estaban produciendo GABA.
En esta conexión, las propiedades fisiológicas de la cepa
KG-34 y KG-43 se muestran en la
Tabla 1, y las secuencias 16S ADNr de la cepa KG-34
y KG-43 se muestran en SEC ID nº 1 y 2. Las
secuencias 16S ADNr de la cepa KG-34 y de la cepa
KG-43 coincidieron con la otra el 100%.
\vskip1.000000\baselineskip
Utilizando un medio en el que se cambió a un 8%
o a un 12% la sal común, y el ácido láctico de adición alimentaria a
un 0%, 1% o 4%, basado en un medio MRS-Soytone
(caldo MRS al 5,5%, Soytone al 0,5%, glutamato sódico al 0,5%, pH
5,1), cargado con un tubo Durham, se confirmaron las productividades
del GABA de las cepas KG-34, KG-43,
S1, KG-31, KG-64,
KG-18-4 y
KG4-14-1, bajo la condición que la
sal común y el ácido láctico se encontraban en el medio al principio
del cultivo. Además, en ese caso, se llevó a cabo la comparación con
las bacterias ácido lácticas convencionalmente conocidas que
producen GABA, mostrándose los resultados en la Tabla 2.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Después de añadir 160 ml de agua caliente a 70 g
de gluten de trigo y 100 g de soja koji, y añadiendo
ulteriormente como glutaminasa 5 ml de un caldo de cultivo obtenido
mediante 36 horas de cultivo en aireación-agitación
de Candida famata km^{-1} (FERM P-8897)
(composición del medio: 6% de glucosa, 1% de extracto de levadura,
0,1% de dihidrogenofosfato potásico, 0,1% de sulfato magnésico, pH
5,5, temperatura del cultivo 30ºC), la degradación del gluten y la
conversión de la glutamina formada por la degradación al ácido
glutámico, se llevaron a cabo a 50ºC durante 24 horas. Después de
añadir sal común al producto de degradación obtenido de esta forma
para tener una concentración final del 8%, y añadiendo
posteriormente ácido láctico como aditivo alimentario, para obtener
una concentración final del 1%, seguido por una disminución de la
temperatura hasta llegar a 30ºC, se inocularon las cepas
KG-34 o KG-43 de Lactobacillus
rennini, con una densidad de aproximadamente 10^{6}
células/ml, cultivándose durante 7 días a 30ºC con agitación suave.
Cada una de las dos mezclas de cultivo así obtenidas, se filtró para
obtener un líquido claro. El contenido en GABA del líquido de
cultivo en el cual la cepa KG-34 se inoculó, fue de
13,0 mg/ml, y de 19,5 mg/ml en el caso de KG-43.
Como control, aunque se llevó a cabo un idéntico ensayo utilizando
una cepa productora de GABA de Lactobacillus brevis NBRC
3345, conocida convencionalmente, la concentración de GABA del
líquido claro obtenido finalmente fue de 2,0 mg/ml. Por tanto, no se
llevó a cabo suficiente producción de GABA.
\vskip1.000000\baselineskip
Según la presente invención, puede
proporcionarse un procedimiento para producir establemente GABA,
utilizando materiales económicos sin provocar la inhibición de la
fermentación por las cepas salvajes.
<110> Kikkoman Corporation
\vskip0.400000\baselineskip
<120> Bacteria Lactobacillus con
productividad de ácido gamma-aminobutírico
\vskip0.400000\baselineskip
<130> P06105600
\vskip0.400000\baselineskip
<150> JP 2006-043836
\vskip0.400000\baselineskip
<151>
2006-02-21
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatentIn versión 3.3
\vskip1.000000\baselineskip
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<210> 1
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<211> 1526
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<212> ADN
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<213> Lactobacillus rennini
KG34(NITE BP-177)
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<400> 1
\newpage
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<210> 2
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<211> 1526
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<212> ADN
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<213> Lactobacillus rennini
KG43(NITE ABP-309)
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<400> 2
Claims (3)
1. Bacteria ácido láctica que pertenece al
género Lactobacillus, que puede producir ácido
\gamma-aminobutírico bajo condiciones de
coexistencia de ácido láctico y sal común en un medio en el momento
de inicio del cultivo, en la que la bacteria ácido láctica es la
cepa de Lactobacillus rennini KG-34 (nº de
registro de depósito NITE BP-177) y
KG-43 (nº de registro de depósito NITE
BP-309).
2. Bacteria ácido láctica según la
reivindicación 1, que puede producir ácido
\gamma-aminobutírico bajo condiciones de
coexistencia de 1 a 4% de ácido láctico y de 8 a 12% de sal común en
un medio, en el momento de inicio del cultivo.
3. Procedimiento para producir una mezcla de
cultivos, que comprende un ácido
\gamma-aminobutírico, en el que la bacteria ácido
láctica descrita en la reivindicación 1 ó 2, se cultiva después de
inocularla en un medio que contiene ácido
L-glutámico y/o sus sales.
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