TW200811288A - Lactic acid bacterium capable of producing gamma-aminobutyric acid - Google Patents
Lactic acid bacterium capable of producing gamma-aminobutyric acid Download PDFInfo
- Publication number
- TW200811288A TW200811288A TW096106231A TW96106231A TW200811288A TW 200811288 A TW200811288 A TW 200811288A TW 096106231 A TW096106231 A TW 096106231A TW 96106231 A TW96106231 A TW 96106231A TW 200811288 A TW200811288 A TW 200811288A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- lactic acid
- culture
- gaba
- lactobacillus
- salt
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/005—Amino acids other than alpha- or beta amino acids, e.g. gamma amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Description
200811288 九、發明說明: 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種即使於培養開始時的培養基中存在乳 酸的條件下亦可生產γ-胺基丁酸(以下稱為「GABA」)之屬 於乳酸桿菌屬(lactobacillus)之乳酸菌,進而係關於使用該 乳酸桿菌之含γ-胺基丁酸培養物之製造方法。 【先前技術】 GABA係因具有降低血壓作用、利尿作用、精神安定作 用等生理效果,而目前受到關注之胺基酸,但含GABA食 品僅限於一部分蔬菜及茶、米等,而且GABA之含量亦較 少,故現提出有若干利用GABA醱酵性乳酸菌之GABA製 造方法(例如,參照曰本專利文獻1〜3)。至於該等生產 GABA之乳酸菌,已知有希氏乳酸桿菌(Lactobacillus hilgardii)、乳酸乳球菌乳月旨亞種(1^(:1:〇〇〇(^118 13〇1^81^3卩· Cremoris)、乳酸乳球菌乳酸亞種(Lactococcus lactis subsp· Lactis)、赂黃腸球菌(£11161>000(:(:1180&88611;0&¥113)、短乳桿 菌(Lactobacillus brevis)、胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)、嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)等, 其具有藉由脫碳酸反應而由L-麩胺酸或L-麩胺酸鹽生產 GABA之能力。 但是,培養該等乳酸菌,因必須將乳清粉(whey powder)、脫月旨乳、酪蛋白、蛋白月東等高價成分作為培養 基,故自成本方面考慮生產性欠佳(例如,參照日本專利 文獻1或4)。又,以酸或者以酶、麴分解作為廉價材料之 118872.doc 200811288 醬油麴及麩質(gluten)麴’且利用麩醯胺酸 ^騎所溶出的 麩醯胺轉化成麵胺酸,並以上述麩胺酸作為 Μ &養基之情形 時,於中和時所產生的食鹽及酶分解時作為環保方案而添 加的食鹽,會抑制乳酸菌生產GABA。關於耐鹽性生產 GABA之乳酸菌,亦有若干報告,但GABA醱酵之最佳食 鹽濃度為12·5〜18%,屬於濃度極高之鹽(例如,灸 ^ Φ \ \ \ tj 專利文獻5 )。若考慮推行意圖減鹽的飲食生活以避免串上 生活習慣病,則含高鹽之食品或調味料並不理想。又, GABA具有所期待之降低血壓作用,但若將其與高濃度食 鹽組合,則會失去其本來的意義。 根據以上所述,於利用乳酸菌生產GABA時,較理想的 是以低鹽狀態下分解使用如麴及麩質之價廉材料,但於低 鹽下會出現野生菌造成污染之問題。污染係於培養初始階 段產生,其結果導致產生乙醇或者使pH降低,使可生產 GABA之乳酸菌的生長受到抑制,而無法獲得充分量之目 標GABA。防止該等於低鹽下由野生菌所導致之污染的方 法’有利用通常用作食品防腐劑之乙醇、醋酸、乳酸的方 法,然而乙醇、醋酸雖然可抑制污染菌,但亦會抑制生產 GABA之乳酸菌。另一方面,乳酸菌因自身會產生乳酸, 故對乳酸的耐受性較其他細菌更高。 因此,人們考慮將乳酸用作防腐劑,但若於食鹽存在下 開始培養時添加乳酸,則生產GABA之乳酸菌無法生長、 或者所生長者無法進行GABA生產,導致出現新問題。 【專利文獻1】日本專利特開2000-210075號公報 118872.doc 200811288 【專利文獻2】曰本專利特開2〇〇本215529號公報 【專利文獻3】日本專利特開2005-1025 59號公報 【專利文獻4】曰本專利第3426157號公報 【專科文獻5】日本專利第2 7 0 4 4 9 3號公報 【發明内容】 [發明所欲解決之問題] 本發明之課題在於提供,於培養開始時的培養基中共存
有乳酸與食鹽的條件下可生產GABA之乳酸菌、以及含 GABA培養物之製造方法。 [解決課題之技術手段] 本發明者們為解決上述課題而反覆進行努力研究,鈐果 發現:自醬醪中分離出即使於自培養開始時共存有乳酸與 食鹽的狀態下亦可生產GABA之乳酸菌,並可藉由利用該 乳酸菌解決上述問題,從而完成本發明。 即,本發明係關於以下(1)〜(4)。 (1)一種屬於乳酸桿菌屬之乳酸菌,其可於培養開始時的 培養基中共存有乳酸及食鹽的條件下,生產γ_胺基丁酸。 (勾一種屬於乳酸桿菌屬之乳酸菌,其可於培養&開始7夺的 培養基中共存有1〜4%之乳酸、及8〜12%之食鹽的條件下, 生產γ_胺基丁酸。 (3)如上述⑴或⑺項之乳酸g,其中乳酸㈣凝乳酸桿 (4)一種含γ_胺基丁酸培養物之製造方法,其特徵在於: 將上述(1)至(3)中任一項之乳酸菌接種於含有L-楚胺酸及/ 118872.doc 200811288 或其鹽類之培養基中,進行培養。 [發明之效果] 根據本發明,可提供一種使用廉價材料,不抑制野性菌 之酸酵而穩定生產GABA之方法。 【實施方式】 以下,詳細說明本發明。 本發明之乳酸菌,係屬於乳酸桿菌屬之菌株,例如可使 用自4 _中分離出之乳酸菌。本發明之乳酸菌,於培養開 始時的培養基中共存有乳酸與食鹽的條件下,具有生產 GABA之能力,可於共存有卜4%之乳酸及8〜12%之食鹽的 條件下生產GABA。該乳酸菌,較好的是凝乳酸桿菌,例 如滅乳酸桿函KG34株及凝乳酸桿菌KG43株等。 凝乳酸桿菌KG34株,係於2006年2月7曰移交獨立行政 法人製品評價技術基盤機構(NITE)專利微生物寄存中心 (NPMD)(郵政編碼292_0818曰本國千葉縣木更津市上總鐮 足2-5-8)進行國内寄存(受託碼號mTE p_177)(bcrc 910349) ’且於2006年9月1日移交至基於布達佩斯條約進 行國際寄存管理(受託號碼Μ1Έ BP_177)(BCRC 91〇349)。 又,凝乳酸桿菌KG43株,係於2007年1月31日移交至獨 立行政法人製品評價技術基盤機構(NITE)曰本專利微生物 寄存中心(NPMD)(郵政編碼292-0818曰本國千葉県木更津 市上總錄足2 - 5 - 8),基於布達佩斯條約進行國際寄存(收件 號碼 NITE ABP-309)(BCRC 910350)。 將乳酸菌自醬醪中分離,係採用如下之方法。即,將25 g 118872.doc 200811288 醬醪進行鐵胃處理,將所獲得液汁適量加入到置於杜罕氏 醱酵管(Durham tube)内之 MRS-SOYTONE 培養基(5.5% MRS 肉湯、0.5%5&〇1;〇8〇71:〇116、0,5%麩胺酸納、8%食鹽、 5%食品添加用乳酸pH 5.1)中,於3(TC下進行靜置培養。 以MRS-SOYTONE培養基將確認於杜罕氏醱酵管中有氣體 產生的培養液加以適當稀釋,進而將其塗佈於MRS-SOYTONE瓊月旨培養基上,置於AnaeroPack*kenki(三菱氣 體化學股份有限公司)中以30°C培養7天。將所獲得單株菌 再次接種到内置杜罕氏醱酵管的MRS-SOYTONE培養基 中,選取確認有氣體產生之菌。 以上述方 &*·Κ03 4、Κ043、81、Κ031、Κ064、Κ0-18-4、KG4-14-1株之7種株菌。於該等7株皆中,調查 KG34、KG43兩株之細菌學性質,將其結果示於表1。作為 比較對照,亦記載有作為凝乳酸桿菌標準菌之凝乳酸桿菌 DSMZ20253的資料。已知,標準菌凝乳酸桿菌DSMZ20253 不具有麩胺酸脫碳酸能力,因而無法生產GABA。 118872.doc 10- 200811288 [表l]
KG-34 KG-43 菌凝乳酸桿菌 DSMZ20253 1.糖的醱酵性 葡萄糖(glucose) + + + 半乳糖(galactose) + + + 山梨糖(sorbose) - - 一 蔗糖(sucrose) - - - 麥芽糖(maltose) - - - 纖維二糖 (cellobiose) + + + 海藻糖(trehalose) - - - 乳糖(lactose) - + 蜜二糖(melibiose) - - - 棉子糠(raffmose) - - - 松三糖 (melezitose) - - - 木糖(xylose) D-阿拉伯糖 + + + (D-arabinose) L-阿拉伯糖 (L-arabinose) + + + 核糖(ribose) + + + 鼠李糖(riiamnose) - - W 果糖(fructose) + + + 甘油(glycerol) - - - 赤蘚糖醇 (erythritol) - - - 核糖醇(ribitol) - - - 甘露醇(mannitol) - - - 山梨醇(sorbitol) - - 麵 木糖醇(xylitol) - - - 肌醇(inositol) - - - D-葡萄糖胺 (glucosamine) N-乙酿基-D-匍萄 + + + 糖胺(N-acetyl-D-glucosamine) + + + 苦杏仁素 (amygdalin) - - + 七葉苦(esculin) - - - 118872.doc -11 - 200811288
2·生長溫度〇C) 5 - - - 15 - W - 20 + W + 25 + + + 30 + + + 37 + + + 40 + - + 45 - - - 3·耐鹽性(%) 5 + + + 10 + + + 11 + + + 12 + + W 13 + + - 14 W W - 15 - - - 16 - - - 4.初始pH值 4 + + - 5 + + + 6 + + + 7 + + + 8 - - - 9 - _ - 5·脫碳酸能力 麵胺酸(glutamic + + acid) 天冬醯胺酸 (asparaginic acid) 離胺酸(lysine) - - - 鳥胺酸(ornithine) + - + 6.其他 由葡萄糖 產生氣體 運動性 - - 乳酸旋光性 D D D 由精胺酸 生成氨氣 孢子 - - 過氧化氫酶 (catalase) 細胞壁4之 二胺基庚二酸 無 無 無 *w :雖弱但為+ 又,依以下方法判定本發明之乳酸菌凝乳酸桿菌 KG34、KG43、SI、KG31、KG64、KG-18-4、KG4-14-1 株 118872.doc -12- 200811288 之16SrDNA(16SrDNA基因)之全鹼基序列。 將乳酸菌凝乳酸桿菌KG34、KG43、SI、KG31、 KG64、KG-18-4、KG4-14-1株植菌於 MRS-Soytone培養基 (MRS 肉湯 5.5%,Soytone 0.5%,NaCl 8%,麩胺酸鈉 0.5%,pH 5.1)中,以30°C培養4天。於基因組DNA之提取 中,使用Gen-TORUKUNTM(酵母用)(Takara生物股份有限 公司(TaKaRa Bio Inc.))。以提取的基因組DNA為模板,依 PCR法將16S rDNA的全部區域分成3部分進行放大。將各 片斷進行定序,藉由連接組合而獲得全區域之序列。温控 循環機,係使用Takara溫控循環機MP ; DNA定序儀,係使 用ABI稜鏡377DNA定序儀(Applied Biosystems公司)。將所 獲得之各16S rDNA之鹼基序列揭示於序列號1及2中。 對所獲得之16S rDNA之鹼基序列中之認為與本菌有親 緣關係之種進行同源性檢索,使用本菌與親緣種之16S rDNA的鹼基序列,藉由鄰接法製作分子系統樹,以研究 本菌的親緣種以及歸屬分類群。以NCBI BLAST進行檢索 之結果為:本菌與凝乳酸桿菌之16S rDNA序列顯示有最高 之同源性(約99.5%),系統樹亦形成與凝乳酸桿菌相同之 叢集(cluster)。根據該結果可判斷,本菌係凝乳酸桿菌。 所製作之系統樹示於圖1。 本發明之乳酸菌,具有於無食鹽及乳酸之存在下由L-麩 胺酸或L-麩胺酸鹽生產GAB A的能力,但於培養開始時之 培養基中共存有1〜4%之乳酸及8〜12%之食鹽的條件下,亦 可生產GABA(參照實施例2)。又,除培養開始時之外,於 118872.doc -13- 200811288 培養基中共存有0〜4%之乳酸及〇〜12%之食鹽的條件下,亦 可生產GABA。 本發明之含GABA之培養物之製造方法,係將具有上述 性質之乳酸菌接種於含有L-麩胺酸及/或其鹽類的培養基 中加以培養,製造含GABA之培養物的方法。本發明所使 用之乳酸菌’係使用自醬醪中分離培養再進行繼代培養 ' 者,可直接使用醬醪中所含之同種乳酸菌,或者重新將其 _ 分離後使用。又,可使用冷凍乾燥菌體、冷凍保存株、以 及液體培養液中之任意者。 為了生產GABA,本發明所使用之培養基中必須含有麩 ^酸(glutamic acidp培養基中所含有之麩胺酸,較好的 是作為化學上之一種胺基酸的^麵胺酸,亦可使用具有用 於调味料用途的食品添加物之楚胺酸或麵胺酸納、其他麵 胺酸鹽、進而以酸或酶使食品蛋白質水解而獲得之麵胺酸 中之任意者。又,亦可直接使用調味料、水產加工品、蕃 • 兹等含游離麵胺酸之食品。再者,於須獲得含有更多量 GABA之培養物之情形時,必入 、便用3有更多篁楚胺酸的 又,為使乳酸菌生長,本笋明 虹心办 不&明所使用之培養基,除上述 麩胺&L以外,較好的是含有: , 匈糖、果糖、麥芽糖等糖 貝或酵母卒取物、肉萃取物擘人铋a ^ .^ ^ 物專3維生素或礦物質的食 。口或含有麴及麴消化物等中之】種以上 用乳化劑或穩定劑、pH調整 "了使 中可栘田+私 ^寻K 〇口添加物。至於培養基 中了使用之麴以及麴消 例如可列舉··將小麥、大 118872.doc -14. 200811288 麥、黑麥、燕麥、麥片、藜麥、粟、稗、泰、米、玉米等 穀類,大豆、小豆、菜豆、羽扇豆…只豆、小扁豆等 豆類中之1種或2種以上原料進行改質處理,再使其與麵菌 相互作用而生成者,或者使麴菌酶作用而生成之蛋白質水 解物。較好的是,醬油、„、味嗜、豆類等蛋白質水解 本發明之礼酸菌之接種,係將上述具有gabA生產能力 的凝乳酸桿g置於含麩胺酸源、食鹽、及糖源之培養基 中,以25〜35°C、48〜96小時、初始阳為4 〇〜7〇之條件進 ^培養所獲得之種乳酸g,以_於本培養之培養基容 Ϊ,以1/1000〜1/10容量程度進行接種。 *於本發明中’可詩培養之裝置,可進行清洗或加熱殺 菌處理,若可用於食品製造,則較好的是製成無論大小或 材貝均難以混入雜菌之德:& 士矣、生 , ^ 囷之何生構仏。根據乳酸菌的細菌學性 質(參照表1),培養條件之培養溫度為2g〜贼、較好的是 Μ〜说,其初始pH較好的是4〇〜7〇。關於培養時間,2 須進行充分時間之培養’以將L麵胺酸及/或其鹽類等麵 胺酸源轉化為目標GABA濃度,例如較好的是Μ週。 以如此方式’可獲得具有廣泛用途的含gaba之培養物 作為加工食品等之原材料。例如,以本發明方法而獲得之 合GABA培養物可直接添加於各種調味料錢食物中 GABA增強原料。 Ύ 又’亦可藉由遷搾、滿:索 曲 慮浪縮、乾燥等處理步騾, 一步提高GAB A含量進杆刹田 ^丄 丁利用。作為上述過濾步驟,可使 II8872.doc -15· 200811288 用遽紙、遽布等通當之合σ 4 丁 m 、承之艮口口加工用之壓榨、 過濾、,亦可使用石夕藻土或纖維素、活性 ^又備進行 劑:濃縮步驟中,除可使用真空壤、縮機二助:慮 餾釜、冷凍濃縮機等設備以外,。、·’ 、蒸 培養物中水分蒸發之方法。又,乾=:早純藉由加熱使 祀诛步騾,較好 _ 由有效且衛生之方法進行喷霧乾燥或冷;東乾燥。進:: 了獲付GABA含量更高之培養物,除上述步驟 可 採用液體層析法等方法。 亦了 可藉由以如此方式處理含〇繼之培養物,而獲得人 GABA之液狀或粉末狀食品, 备 赤去、隹—, 田竹该4添加入各種食品 =::二:人加工’可容易地獲得⑽八經增強之調味料 或飲料食品n次加卫,可使其含有卿劑、料 料、增點劑、蛋白質、肽'脂質、多糖類、類等 通常食品巾所使用之成分。 -類4 再者’所獲得之培養物或加人有培養物之調味液、以及 飲食品中之GABA含量的測定’可使用高速液體層析儀、 胺基酸測定儀等分析儀器,或使用有酶之分析試劑等進 行。 ' 牛出實施例更詳細地說明本發明,但本發明並不 限定於任何該等實施例。 [實施例] (實施例1) <乳酸菌之獲得> 種曝酵食品中適量取樣被檢試料,適量加入到内置 118872.doc -16 - 200811288 杜罕氏醱酵管(Durham tube)之MRS-SOYTONE培養基(5·5% MRS 肉湯、0.5% bactosoytone、0.5%麩胺酸鈉、8%食鹽、 5%食品添加用乳酸pH 5.1)中,於30°C下進行靜置培養。 以MRS-SOYTONE培養基將確認於杜罕氏醱酵管内有氣體 產生之培養液進行適當稀釋,進而將其塗佈於MRS_ SOYTONE瓊脂培養基上,置於AnaeroPack Kenki(三菱氣 體化學股份有限公司)中以30°C培養7天。將所獲得之單株 菌再次接種到内置杜罕氏醱酵管之MRS-SOYTONE培養基 中,對確認有氣體產生之樣品進行GABA測定。再者,依 RAPD法對自同一分離源中所分離出的菌進行個體識別, 而不重複選擇同一種菌。以日立高速胺基酸分析計L _ 8 8 〇 〇 測定GAGA。由其結果可判明,KG34、KG43、S1、 KG31、KG64、KG-18-4、KG4-14-1株可生產 GABA。再 者,KG34株、KG43株之生理學性質示於表1,KG34株、 KG43株的16S rDNA序列示於序列號1及2。KG34株與 KG43株之16S rDNA序列係100%—致。 (實施例2) <耐鹽性、耐乳酸性之確認> 使用以内置杜罕氏醱酵管的MRS-Soytone培養基(5.5% MRS肉湯、0.5% Soytone、0.5%麩胺酸鈉、pH 5.1)為基 礎,且將食鹽含量變為8%及12%、食添用乳酸含量變為 0%、1 %及4%之而成之培養基,確認於培養開始時之培養 基中存在有食鹽及乳酸的條件下,KG34、KG43、S1、 KG31、KG64、KG-18-4、KG4-14-1 株之 GABA 生產性。 118872.doc •17、 200811288 又,此時,將其與中所周知之生產GABA之乳酸菌進行比 較,結果示於表2。 [表2] 菌 乳酸0% 乳酸1% 乳酸4% ~食鹽8% 食鹽12% ¥鹽8% 食鹽12% 食鹽8% 食鹽12%
希氏乳酸桿菌NBRC 15886 X 乳酸乳球菌乳脂亞種NBRC 100676 Δ 乳酸乳球菌乳酸亞種NBRC 12007 Δ 酪黃腸球菌NBRC 100478 Δ 克弗爾乳酸桿菌NBRC 15888 △ 短乳桿菌IAM 1082 Δ 短乳桿菌IAM1318 △ 短乳桿菌IAM 10075 Δ 短乳桿菌NBRC 3345 Δ 短乳桿菌NBRC 3960 Δ 短乳桿菌NBRC 12005 Δ 短乳桿菌NBRC 12520 Δ 短乳桿菌NBRC 13109 Δ 短乳桿菌NBRC 13110 Δ 胚芽乳酸桿菌NBRC 12006 Δ 胚芽乳酸桿菌NBRC 12519 Δ 嗜熱鏈球菌NBRC 13957 Δ
〇 0 〇 〇 〇 0 〇 〇 〇 〇 〇 〇 〇 Δ 〇 Δ 0 〇 〇 0 〇 〇 〇 △ 〇 0 〇 〇 〇 Δ Δ Δ 〇 〇 〇 Δ 〇 〇 〇 〇 〇 △ 凝乳酸桿菌KG-34 凝乳酸桿菌KG-43 凝乳酸桿菌S1 凝乳酸桿菌KG-31 凝乳酸桿菌KG-64 凝乳酸桿菌KG-18-4 凝乳酸桿菌KG-M-1 *L.:乳酸桿菌 **〇 : GABA生產 La.:乳酸乳球 △:生長但不生產GABA E.:腸球菌 X :不生長 S.:鏈球菌 (實施例3)
<含GABA培養物(調味液)之製造方法> 於70 g小麥麩質及1 00 g醬油麴中加入160 ml溫水,進而 添加5 ml無名假絲酵母菌(Candida famata)km-1 (FERM P-8897)經36小時通氣攪拌培養之培養液(培養基組成:葡 萄糖6%、酵母萃取物1%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂 0.1%、pH 5.5、培養溫度30°C)作為麩醯胺酸酶,於50X下 進行24小時的麩質分解以及藉由分解而產生的麩胺酸向麩 醯胺之變換。以終濃度成為8%之方式於所獲得之分解物 -18- 118872.doc 200811288 中添加食鹽,進而以終濃度成為1%之方式添加食品添加 用乳酸,然後降溫至30°C,以大致成為1〇6個/ml之方式將 凝乳酸桿菌KG34株及KG43株進行接種,一面於30°C下穩 定攪拌7天,一面進行培養。對所獲得之培養物進行過 濾,而獲得澄清之液體。接種有KG34株的培養液之GABA 含量為13.〇11^/1111,接種有1(:043株的培養液之0人6八含量 為19.5 mg/ml。以作為對照之中所周知之GABA生產菌短 乳桿菌NBRC3345進行同樣之試驗,但最終所獲得之澄清 液之GABA濃度為2.0 mg/ml,無法生產充分之GABA。 以上詳細說明或參照特定實施態樣說明了本發明,但該 業者應清楚,在不脫離本發明之精神及範圍内可進行各種 變更或修正。 本申請案係基於2006年2月21曰提出申請之日本專利申 請案(日本專利特願2006-043836)者,將其内容引用於此作 為參照。可引用全文作為此處所引用#之全部參照。 [產業上之可利用性] 根據本發明,可提供一種使用廉價材料,不抑制野性菌 之醱酵而穩定生產GABA之方法。 【圖式簡單說明】 圖1係表示凝乳酸桿菌KG34、KG43、SI、KG31、 KG64、KG-18-4、KG4-14-1株之分子系統樹。 118872.doc -19- 200811288 序列表 <110〉龜甲萬股份有限公司 <120〉具有γ-胺基丁酸生產能力之乳酸菌 <13〇> <140>096106231 <141>2007-02-16 <150> JP 2005-043836 <151 > 2006-02-21 <160> 2 <170> Patent In vorsion 3.3
<2tO> 彳 <211> 1526 <2t2> ONA <213〉乳酸菌屬KG34 (N丨TE BP—177)(BCRC910349)
<400> J gtttgatcct ggoto«m〇 gge^teccta ataoatgosa gtogoaoeo» 60
oaaoggttaa cctgatcctg cttgoog^t^ acgttaatgg aostgagtec oeeaoeggtg 120 aftaeoaoet (e^taaooao oogtsaagog eeegataaoo ttt^eaaaos gageotaata 180 cc^catagtt tatogcgaoo tootggtogo aata»taaag acggottcgg etgtoaettc 240 aggacafeGC egoggegtat tagctaettg ft^gataaa s^ootaccaa e^fatgate 300 ogtagccgac ctgagaggirt aatcegccac attcggactg agscacggGc caaectccta 360
Ggze^Ucng oaetaeggaa tcttccao&d tee&cgcaae tot^ategne oaaoecdgee 420 tgagtgaaea agggtttcgg £Pt£ttgtt£ gagaagaacc 480 taaotgttat cooatteaag gtatccaaoo aeaaaeocao ggotaaotao gt£〇oag〇3g 540 cc^cg^taat acgtaggtgg oaagoett^t oo^atttat tj^gogtaaa 600 gcggtttttt aagtetgatg tgaaagc&tt cggcttaacc gaagaagggc atcagaaact 660 g^gaaecttg agfaaflftgf iactccatet ct&ccgctgA h&tgtgtaga 720 tatstggaa^ aacaccastg gcgaa^scgc otttctggtc tgttactgao gct^aggoto 780 gwgtttig eeaeogaaca g^attd^ta ooati£t«£t ooataooeta aaoeatgaat 840 gctaagtett egasgetttQ cgoccttcai tgctgoagot aacsoattea goattoogoo 900 tgeg^afftao gaoogoaaes tteaaaotoa adggaattga ofiggesooe^ oaoaaeo^ 960
Cfagcatgt$ ^tttaattc^ aacicaacgeg aagaaeetta ceaggtcttf acatecttt^ 1020 «cogctgtcg agagaca^tt tgcoottcgg ggccaaattc ao&ggtggtc c&tgcttgto 1080 gtcagctcgt gtcgtgagAt gtteggttaa gtcccgcaac ^cgcaaco 1140 tttagttggg oaQtctaete a^otgocgg tgacsaaeos eaegaaggtg 1200 gggatgaogt oaaatoaecB tgooootgat eaooteggot aoaoaogtgo taoaatgAo 1260 ggeficaaoga ^tagcgc^cc cgcgagggtt agcta&tcto taaaaaccfa tctcagttcg 1320 gattscsfge tgcthctogo ctecatgeae ccega&tecc taetaategc g£etee|eat 1380 googoggtg8 9tccgttccc ggg郎ttet9 ¢3卯¢¢£¢¢0 g3g3£tttgt 1440 aacaoocaaa e〇〇egteE:£e caacoottoe eeeaeotaso oftotaasst ££gaoa(atg 1500 attsgggtga agtcgtaaoa aggtaa 1526
<210> 2 <211> 1526 <2I2> DNA <213> 乳酸菌屬KG43 (ΝΠΈ ABP-309)iBCRC 910350) li8872.doc 200811288 ^ttfatect ^ctcaggee f&acfct^c ggcgtcccta Ataeat^caa etcccftegca 60 caaocett«« cctgutccts cttgc^ggtg acgttaatgg 120 astaooaQSt ^taaooae coate&acc^ ^ggataaco tttEe»aaeo gnuoUztU 180
ccgoatagtt tatogogaoc tQotgetogQ aataataaae aoggottogg otetoaotto 240 aggaoagaoc ogoggostat tae〇taett£ eteegataaa g^ootaooaa ^o^atgsta 300 cgtagccgac ctgagaeeet aatoggooao attgggaotg agacacggcc caaacte&ta 360 eeggagcoac caetagcgaa tottoeacaa tesaogoaae totf&tcgac oaaoeoegcc 4Z0 t拥gt脚錤•ec^ttcgg ctcgtaaaac ccttttftts ga州脚6&咖480 taaatgttat ocoottgacg gtatccaacc ggctaactao gtgQoago^g 540 ccgogeteat soetaegtgg psagcgttgt c^gatttat teseoetaaa g〇ea£〇&〇9£ 600 gcggtttttt sa^totgatg tgaaatfQctt cgeottaaoc atoagaaaot 660 gBgBBgcttg ae^ac&(aaa a^gaaaetgg aaotoeatgt gtagcgct^a aatfc^taga 720 tat&t^gaae aaceeeagtg gcgaagecgg ctttctggtc tettactc&o gotgacgctc 780 £aaactat£{ f|a£c|flaca eeatt&gata oootfgtast ccataoc^ta aaogatfdAt 840 gotaagtgtt g辟肽gtttc cgccettoaf t职tgcftget 抽抽 900 tggggaetao escc^caaee tt£aaacto« «a^aatt^a oacaaEGESt 960 g^agoat^te etttadttog ^Q^Qgog «aeasootta ooagfftotts aoatoottte 1020 aocgot^tog a^agaoaett tfiooottogfi ggooaaagtf aeaget^gt^ Datfgttfte 1080 Ktoagctcet itegtgagat gtcccgcaac 囂agcgceace ettetgact& 1140 gtteccagca tttagttggc cactcta^tg egaetgc&cc t^acaaaccc gag£&»cgtg 1200 £geatgaeg;t caftate^gc» tgeocct^t c&cctgfg&t 12^0 gggaceac鈕gt9软舴gee e辟辟肽gtt祁ct抑tcto切瑚抑如辟tctcagttGg t320 gattgQa^eo teoaaotcec oteQatgeeg o〇eeaat〇£〇 tactaat〇£〇 fieatoaeoat 1380 cccgogfftca atoogttooo KKgoottKta oaoiooeooo ^toaoaooat (agagtttgt 1440 aacaccoaaa oaacoottog gggagetage egt&taaggt gggaoafats 1500 «ttggg^tsa a^tcstaeca Bg^taa 1526 2- 118872.doc
Claims (1)
- 200811288 十、申請專利範圍: 1· 屬,其可於培養開始時 之條件下,生產γ-胺基 一種乳酸菌,其係屬於乳酸桿菌 之培養基中、共存有乳酸及食鹽 丁酸。 2. -種乳酸菌’其係屬於乳酸桿菌屬,其可於培養開始時 之培養基中、共存有1〜4%乳酸、8〜12%食鹽之條件下^ 生產γ-胺基丁酸。 3·如請求項1或2之乳酸菌,其中乳酸菌為凝乳酸桿菌 {Lactobacillus rennini、。 4· 種含γ-胺基丁酸之培養物之製造方法,其特徵在於: 等如明求項1至3中任一項之乳酸菌接種於含l·麵胺酸及/ 或其鹽類之培養基中進行培養。118a72.doc
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006043836 | 2006-02-21 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW200811288A true TW200811288A (en) | 2008-03-01 |
TWI379003B TWI379003B (zh) | 2012-12-11 |
Family
ID=38437412
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW096106231A TW200811288A (en) | 2006-02-21 | 2007-02-16 | Lactic acid bacterium capable of producing gamma-aminobutyric acid |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8202710B2 (zh) |
EP (1) | EP1988155B1 (zh) |
JP (1) | JPWO2007097374A1 (zh) |
CN (1) | CN101389751B (zh) |
CA (1) | CA2638783A1 (zh) |
ES (1) | ES2347601T3 (zh) |
TW (1) | TW200811288A (zh) |
WO (1) | WO2007097374A1 (zh) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011193858A (ja) * | 2010-03-24 | 2011-10-06 | National Agriculture & Food Research Organization | γ−アミノ酪酸含有飼料とその製造方法、並びにそれを用いた家畜の飼育方法 |
CN102108370B (zh) * | 2010-12-02 | 2013-03-06 | 中国农业大学 | 利用乳酸菌生产γ-氨基丁酸的半连续发酵方法 |
CN102754835B (zh) * | 2012-07-24 | 2013-11-13 | 华南农业大学 | 一种富含γ-氨基丁酸的檀香叶提取液及其制备方法 |
CN104789610B (zh) * | 2015-05-05 | 2018-03-23 | 华东理工大学 | 一种乳酸菌在生产γ‑氨基丁酸中的应用 |
KR101761711B1 (ko) * | 2015-08-27 | 2017-07-26 | (주)마린바이오프로세스 | Gaba를 함유하고 나트륨이 저감된 발효소금 및 이의 제조방법 |
KR101761710B1 (ko) * | 2015-08-27 | 2017-07-26 | (주)마린바이오프로세스 | Gaba를 함유한 발효소금 및 이의 제조방법 |
CA3016911A1 (en) * | 2016-03-14 | 2017-09-21 | Holobiome, Inc. | Modulation of the gut microbiome to treat mental disorders or diseases of the central nervous system |
CN106036914A (zh) * | 2016-06-06 | 2016-10-26 | 山东水晶生物科技股份有限公司 | 一种助眠保健品及制备方法 |
CN107125569B (zh) * | 2017-05-27 | 2020-07-07 | 江南大学 | 一种通过乳酸菌发酵改善糙米蒸煮性能的方法 |
CN107937311B (zh) * | 2017-12-20 | 2021-05-28 | 光明乳业股份有限公司 | 一株高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法 |
CN114875104B (zh) * | 2022-03-02 | 2023-08-29 | 广州市巴菲巴健康产业有限公司 | 一种桑叶酵素原液及其制备方法和应用 |
CN116042483B (zh) * | 2023-02-17 | 2023-07-18 | 佛山科学技术学院 | 一株具有产γ-氨基丁酸的乳酸肠球菌FSUH-1及其应用 |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2704493B2 (ja) | 1994-02-18 | 1998-01-26 | 京都府 | 発酵食品の製造方法 |
JP4332247B2 (ja) | 1999-01-21 | 2009-09-16 | 大洋香料株式会社 | γ−アミノ酪酸高生産能を有する乳酸菌、及びその乳酸菌を使用したγ−アミノ酪酸高含有発酵食品とその製造法。 |
JP3426157B2 (ja) | 1999-04-27 | 2003-07-14 | 株式会社バイオアルビン研究所 | 乳酸発酵食品の製造方法 |
JP4968869B2 (ja) | 2001-06-13 | 2012-07-04 | 宝ホールディングス株式会社 | γ−アミノ酪酸の製造方法 |
JP3849045B2 (ja) * | 2001-12-17 | 2006-11-22 | 有限会社ヤスダヨーグルト | γ−アミノ酪酸の生成方法 |
CN1243101C (zh) * | 2002-06-08 | 2006-02-22 | 江南大学 | 一种食品功能因子γ-氨基丁酸的制备方法 |
JP3860533B2 (ja) * | 2002-10-15 | 2006-12-20 | マルコメ株式会社 | γ−アミノ酪酸高含有食品素材の製造方法 |
JP4344143B2 (ja) | 2003-01-10 | 2009-10-14 | キリンホールディングス株式会社 | 風味の良いgaba高含有乳酸菌発酵飲食品及び調味食品の製造法 |
JP4313615B2 (ja) | 2003-06-03 | 2009-08-12 | ヒガシマル醤油株式会社 | 免疫賦活活性及びγ−アミノ酪酸産生能を有する新規乳酸菌、及びその利用。 |
JP2005065691A (ja) * | 2003-08-06 | 2005-03-17 | Akita Prefecture | γ−アミノ酪酸含有組成物並びにその製造法 |
JP2005102559A (ja) | 2003-09-29 | 2005-04-21 | Domer Inc | 新菌株及び該菌株によるγ−アミノ酪酸(GABA)の大量生産方法 |
JP2005198578A (ja) * | 2004-01-16 | 2005-07-28 | Ehime Prefecture | γ−アミノ酪酸の製造方法及びそれより得られる発酵液 |
JP2005312438A (ja) * | 2004-03-29 | 2005-11-10 | Marukome Kk | γ−アミノ酪酸高含有食品素材及びその製造方法 |
CN1276077C (zh) * | 2005-03-07 | 2006-09-20 | 浙江大学 | 产γ-氨基丁酸的短乳杆菌及其用途 |
-
2007
- 2007-02-16 TW TW096106231A patent/TW200811288A/zh not_active IP Right Cessation
- 2007-02-21 ES ES07714723T patent/ES2347601T3/es active Active
- 2007-02-21 CN CN2007800062256A patent/CN101389751B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-02-21 CA CA002638783A patent/CA2638783A1/en not_active Abandoned
- 2007-02-21 WO PCT/JP2007/053223 patent/WO2007097374A1/ja active Application Filing
- 2007-02-21 US US12/279,266 patent/US8202710B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-02-21 EP EP07714723A patent/EP1988155B1/en not_active Not-in-force
- 2007-02-21 JP JP2008501740A patent/JPWO2007097374A1/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20090186388A1 (en) | 2009-07-23 |
CN101389751A (zh) | 2009-03-18 |
ES2347601T3 (es) | 2010-11-02 |
TWI379003B (zh) | 2012-12-11 |
CA2638783A1 (en) | 2007-08-30 |
CN101389751B (zh) | 2011-09-07 |
EP1988155B1 (en) | 2010-07-28 |
US8202710B2 (en) | 2012-06-19 |
EP1988155A4 (en) | 2009-05-06 |
JPWO2007097374A1 (ja) | 2009-07-16 |
WO2007097374A1 (ja) | 2007-08-30 |
EP1988155A1 (en) | 2008-11-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TW200811288A (en) | Lactic acid bacterium capable of producing gamma-aminobutyric acid | |
JP6523580B2 (ja) | 新規乳酸菌及びその用途 | |
KR102361556B1 (ko) | 유산균의 균체외 다당 및 그 용도 | |
Harun-ur-Rashid et al. | Probiotic characteristics of lactic acid bacteria isolated from traditional fermented milk “Dahi” in Bangladesh | |
JP6594911B2 (ja) | 乳酸菌、該乳酸菌由来の自然免疫活性化剤、感染症予防治療剤及び飲食品 | |
WO2021120597A1 (zh) | 一株降低生物胺的乳酸片球菌及其应用 | |
TW200847931A (en) | Flavor enhancer for food and drink, production method thereof, and food and drink comprising flavor enhancer | |
JP2013201936A (ja) | 乳酸発酵におけるアミン生成制御方法 | |
JP2022188291A (ja) | 乳酸菌用培地 | |
CA2789985A1 (en) | A method for producing a fermented food containing bifidobacteria | |
JP2004357535A (ja) | 免疫賦活活性及びγ−アミノ酪酸産生能を有する新規乳酸菌、及びその利用。 | |
US20100166912A1 (en) | Cheese-like food obtained from fermented soymilk and process for producing the same | |
Ummadi et al. | Use of protein hydrolysates in industrial starter culture fermentations | |
WO2004015125A1 (en) | Process for preparing peptides with anti-hypertensive properties | |
Siragusa et al. | Disruption of the gene encoding glutamate dehydrogenase affects growth, amino acids catabolism and survival of Lactobacillus plantarum UC1001 | |
WO1999062347A1 (fr) | Procede de production d'assaisonnements liquides ayant la saveur de legumes marines dans une pate de son de riz salee | |
JP3796463B2 (ja) | ビーフエキス様天然調味料およびその製造方法 | |
JP6968540B2 (ja) | 経口組成物 | |
JP2004057047A (ja) | 乳酸菌の生育促進剤及びその製造法 | |
CN113812600B (zh) | 一种两步酶解联合发酵制备奶味复合香基的方法 | |
JPH0799986A (ja) | ラクトバチリン酸高濃度含有菌体およびその製造方法 | |
Ng'ong'ola-Manani | Natural and lactic acid bacteria fermentations of pastes of soybeans and soybean-maize blends: effect on nutritional quality, microbial diversity, food safety and consumer acceptance | |
WO2005010170A2 (en) | Fermentation medium based on a highly hydrolized protein substrate |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees |