JP2005102559A - 新菌株及び該菌株によるγ−アミノ酪酸(GABA)の大量生産方法 - Google Patents
新菌株及び該菌株によるγ−アミノ酪酸(GABA)の大量生産方法 Download PDFInfo
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Abstract
【解決手段】 乳酸菌の新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(Lactobacillus paracasei NFRI(7415))が課題解決に有効であることを見出した。
【選択図】 なし
Description
しかしながら、大量に生産されるといっても需要からみるとまだ多いとは言えないので、さらに大量にGABAを生産する手法の開発が望まれている。
すなわち、本発明は
(1) γ−アミノ酪酸を多量に生産する新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(寄託番号FERM P−19506)、
(2)鮒寿司由来であることを特徴とする(1)記載の新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(寄託番号FERM P−19506)、
(3) 新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(寄託番号FERM P−19506)を培地中のグルタミン酸濃度が50mM以上として培養することを特徴とするγ−アミノ酪酸の生産方法、
(4) 新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(寄託番号FERM P−19506)を培養して生産されたγ−アミノ酪酸を含有する食品、
(5) 新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(寄託番号FERM P−19506)を発酵菌とする発酵食品
に関する。
また、本発明のLb.paracasei NFRI(7415)は分離源として鮒寿司からのものでこの点も特徴である。
1)培地および培養方法
培地は以下の2種類を使用した。
培養後、培養液の濁度を分光光度計で測定した。600nmの吸光度により、乳酸菌の増殖度とした。培養液は遠心分離(8,000rpm、10分)をおこない、上清液を容器に移し、上清のpHを測定した。菌体は、0.85%塩化ナトリウム水溶液で、洗浄と遠心分離を2回繰り返し、上清を除き、菌体重量を測定した。
乳酸菌培養後、遠心分離で得た培地の上清1mlを75%(v/v)エタノールで5mlとし、ロータリーエバポレーターで減圧下約40℃で濃縮乾固させた。これを希釈液(0.15%クエン酸三リチウム、1.98%クエン酸、1.2%塩化リチウム、2%β-チオジグリコール、0.01%n-カプリル酸)5mlで希釈し、0.45μmメンブレンフィルターでろ過し、アミノ酸分析用サンプルとした。ヤナコ アミノ酸分析装置(LC-11A型)で、遊離アミノ酸を測定した。
Lb.brevis NFRI(7340)およびLb.paracasei NFRI(7415)の、GABAを高濃度に生産する培養条件について検討した。
1)GABAを高濃度に生産するグルタミン酸濃度の検討
10mM、50mM、100mM、500mMの濃度のグルタミン酸ナトリウム添加MRS培地をつくり、Lb.brevis NFRI(7340)は30℃で5日間、Lb.paracasei NFRI(7415)は8日間培養した。1日または2日ごとに、増殖度、菌体重量、pH、上清のGABAを測定した。
培養温度を変えたときのGABA生産能について検討した。50mMグルタミン酸ナトリウム添加APT培地にLb.brevis IFO 3960を接種し、6日間培養した。1日ごとに、増殖度、菌体重量、pH、上清のGABAを測定した。Lb.paracasei NFRI(7415)は、100mMグルタミン酸ナトリウム添加MRS培地で6日間培養した。増殖度、菌体重量、pH、上清のGABAを測定した。
1)ハイミノリを35℃24時間浸漬後、15分間蒸煮した。
2)1)の発芽玄米を20gずつシャーレにとり、乳酸菌Lb.paracasei NFRI(7415)が入った滅菌水5mlを振り混ぜ、30℃の恒温器で6日間保温した。
3)滅菌水の条件は、
a.水5ml
b.乳酸菌を添加した滅菌水5ml
c.乳酸菌とグルタミン酸ナトリウム(50mM)が入った滅菌水5ml
の3種類おこなった。
4)2日目、4日目、6日目に玄米を恒温器から取り出し、48時間凍結乾燥させ、粉末とした。
5)粉末サンプル2.5gをファルコンチュ−ブに入れ、75%エタノ−ルで抽出し、遠心分離を
おこなったのち、上清をとり、濃縮乾固させて希釈液で溶かして遊離アミノ酸を測定した。
1)乳酸菌Lb.paracasei NFRI(7415)の前培養を行い、遠心分離(8,000rpm、10分)ののち、上清液を除いた。
2)菌体は、0.85%塩化ナトリウム水溶液で、洗浄と遠心分離を2回繰り返し、湿菌体をヨーグルトのスターターとした。
3)白米、玄米、発芽玄米の粉末をそれぞれ1g用意した。
4)牛乳50mlに砂糖2gを加えて50℃くらいまで加熱したのち、40℃に冷ましたところで湿菌体0.1gと各種粉を加えてよく混ぜた。
5)37℃で24時間と48時間培養後、pHと遊離アミノ酸を測定した。
1)パン生地の組成は、小麦粉(強力粉)100g、砂糖5g、食塩2g、酵母(イースト)4gであり、酵母の代替として乳酸菌を使用した。
2)前培養した菌Lb.paracasei NFRI(7415)3.9gを水に溶かしておき、最終容量を69mlとした。
3)試料は、乳酸菌のみを入れた生地、乳酸菌とグルタミン酸ナトリウム1%を加えた生地とした。
4)ピンミキサー(National社製)を用いて25℃で3分間混捏した。発酵は30℃で24〜48時間おこなった。
格段に多いことがわかる。
Claims (5)
- γ−アミノ酪酸を多量に生産する新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(Lactobacillus paracasei NFRI(7415)) (寄託番号FERM P−19506)。
- 鮒寿司由来であることを特徴とする請求項1記載の新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(Lactobacillus paracasei NFRI(7415)) (寄託番号FERM P−19506)。
- 新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(Lactobacillus paracasei NFRI(7415)) (寄託番号FERM P−19506)を培地中のグルタミン酸濃度が50mM以上として培養することを特徴とするγ−アミノ酪酸の生産方法。
- 新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(Lactobacillus paracasei NFRI(7415)) を培養して生産されたγ−アミノ酪酸を含有する食品。
- 新菌株ラクトバチルス パラカゼイNFRI(7415)(Lactobacillus paracasei NFRI(7415)) (寄託番号FERM P−19506)を発酵菌とする発酵食品。
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