CN101389751B - 能够生产γ-氨基丁酸的乳酸菌 - Google Patents

能够生产γ-氨基丁酸的乳酸菌 Download PDF

Info

Publication number
CN101389751B
CN101389751B CN2007800062256A CN200780006225A CN101389751B CN 101389751 B CN101389751 B CN 101389751B CN 2007800062256 A CN2007800062256 A CN 2007800062256A CN 200780006225 A CN200780006225 A CN 200780006225A CN 101389751 B CN101389751 B CN 101389751B
Authority
CN
China
Prior art keywords
gaba
acid
lactic acid
milk
lactobacillus
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN2007800062256A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101389751A (zh
Inventor
半谷吉识
佐藤五雄
下条亮
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kitsu Kou Man K K
Original Assignee
Kitsu Kou Man K K
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kitsu Kou Man K K filed Critical Kitsu Kou Man K K
Publication of CN101389751A publication Critical patent/CN101389751A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101389751B publication Critical patent/CN101389751B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/005—Amino acids other than alpha- or beta amino acids, e.g. gamma amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

本发明提供了即使在培养开始时在培养基中共同存在乳酸和食盐的条件下仍然能够生产γ-氨基丁酸(GABA)的乳酸菌，以及生产含有GABA的培养混合物的方法。具体来说，可以通过从未精制的酱油中分离即使在培养开始时在培养基中共同存在乳酸和食盐的条件下仍然能够生产GABA的乳酸菌凝乳酶乳酸杆菌(Lactobacillus rennini)，并在将乳酸菌接种到含有L-谷氨酸和/或其盐的培养基中之后对其进行培养，来获得含有GABA的培养混合物。

Description

能够生产γ-氨基丁酸的乳酸菌
技术领域
本发明涉及属于乳酸杆菌属(Lactobacillus)的乳酸菌，它们即使在培养开始时培养基中存在乳酸的情况下也能够生产γ-氨基丁酸(在后文称为“GABA”)，并还涉及了使用它们生产含有γ-氨基丁酸的培养混合物的方法。
发明背景
GABA是一种目前受到关注的氨基酸，因为它具有生理学效应例如降血压效应、利尿效应和镇定效应。由于含有GABA的食物仅限于一些蔬菜、茶、稻米等，并且其含量也低，因此提出了一些使用GABA发酵乳酸菌生产GABA的方法(例如参见专利参考文献1到3)。作为这样产生GABA的乳酸菌来说，已知的有希氏乳酸杆菌(Lactobacillus hilgardii)、乳酸乳球菌乳脂亚种(Lactococcus lactissubspecies cremoris)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactissubspecies lactis)、铅黄肠球菌(Enterococcus casseliflavus)、短乳酸杆菌(Lactobacillus brevis)、植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)等，它们具有从L-谷氨酸或L-谷氨酸盐通过脱羧反应生产GABA的能力。
但是，因为这些乳酸菌在培养基中需要昂贵的成分例如乳清粉、脱脂奶、酪蛋白和蛋白胨，因此从成本的角度来说生产力不好(例如参见专利参考文献1或4)。此外，当用酸降解或用酶或酒曲降解廉价的原料酱油曲或麦麸、并用谷氨酰胺酶将洗脱的谷氨酰胺转化为用作培养基的谷氨酸时，通过中和产生的食盐或在酶法降解时作为抗污染对策加入的食盐抑制了乳酸菌生产GABA。尽管已经报道了几种生产GABA的耐盐乳酸菌，但GABA发酵的最适食盐浓度非常高，从12.5％ 到18％的盐度(例如参见专利参考文献5)。当考虑到提倡有意低氯饮食的饮食生活以避免与生活方式有关的疾病时，食盐含量高的食品和调味剂是不合乎需要的。此外，由于GABA有预期降血压的活性方面，将它与高的食盐浓度相组合就失去了原本的意义。
根据上面的描述，对于使用乳酸菌生产GABA来说，尽管使用廉价的原料例如酒曲和麦麸、通过在低食盐浓度下将其降解是理想的，但低食盐浓度引起了由野生菌株造成污染的问题。污染发生在培养的早期阶段，并且当由此引起了乙醇的产生或pH的降低时，生产GABA的乳酸菌的生长受到了抑制。从而不能获得足够量的目的GABA。作为在低食盐浓度下防止被这些野生菌株污染的手段，使用一般经常用作食品防腐剂的乙醇、乙酸和乳酸是一种方法。但是，尽管乙醇和乙酸抑制了污染物，但它们也抑制了生产GABA的乳酸菌。另一方面，因为乳酸菌自身产生乳酸，它们比其它细菌对乳酸具有更高的抗性。
因此，尽管本发明的发明人已经考虑到了使用乳酸作为防腐剂，但又出现了新的问题，即当乳酸在存在食盐的情况下在培养开始时加入的话，生产GABA的乳酸菌不能够生长，或是能够生长但不产生GABA。
专利参考文献1：JP-A-2000-210075
专利参考文献2：JP-A-2004-215529
专利参考文献3：JP-A-2005-102559
专利参考文献4：日本专利No.3426157
专利参考文献5：日本专利No.2704493
发明公开内容
本发明要解决的问题
本发明的问题是提供能够在培养开始时在培养基中共同存在乳酸和食盐的条件下生产GABA的乳酸菌，以及提供生产含有GABA的培 养混合物的方法。
解决问题的手段
为了解决上面提出的问题，本发明的发明人进行了广泛的研究，结果发现可以通过从未精制的酱油中分离乳酸菌来解决问题，该乳酸菌即使是在培养开始时共同存在乳酸和食盐的条件下也能够产生GABA，并使用它实现了本发明。
就是说，本发明涉及下列(1)到(4)：
(1)属于乳酸杆菌属(Lactobacillus)的乳酸菌，其能够在培养开始时在培养基中共同存在乳酸和食盐的条件下产生γ-氨基丁酸；
(2)属于乳酸杆菌属(Lactobacillus)的乳酸菌，其能够在培养开始时在培养基中共同存在1％到4％乳酸和8％到12％食盐的条件下产生γ-氨基丁酸；
(3)上面(1)或(2)中的乳酸菌，其中所述乳酸细菌是凝乳酶乳酸杆菌(Lactobacillus rennini)；以及
(4)含有γ-氨基丁酸的培养混合物的生产方法，其中在上面的(1)到(3)任何一个中描述的乳酸菌在接种到含有L-谷氨酸和/或其盐的培养基中之后进行培养。
发明效果
根据本发明，可以提供使用廉价原料、在发酵不会被野生菌株引起抑制的情况下稳定地生产GABA的方法。
附图简述
图1显示了凝乳酶乳酸杆菌菌株KG34、KG43、S1、KG31、KG64、KG-18-4和KG4-14-1的分子系谱树。
本发明的最佳实施方式
本发明中涉及的乳酸菌是属于乳酸杆菌属(Lactobacillus)的菌株， 例如可以使用从未精制的酱油中分离的乳酸菌。本发明的乳酸菌具有在培养开始时在培养基中共同存在乳酸和食盐的条件下产生GABA的能力，并可以在共同存在1％到4％乳酸和8％到12％食盐的条件下生产GABA。优选乳酸菌是凝乳酶乳酸杆菌，乳酸菌的例子包括凝乳酶乳酸杆菌菌株KG34、凝乳酶乳酸杆菌菌株KG43等。
凝乳酶乳酸杆菌菌株KG34于2006年2月7日保藏于国家技术与评估研究所(NITE)(National Institute of Technology and Evaluation)的NITE专利微生物保藏部(NPMD)(NITE Patent MicroorganismsDepositary)(邮政编码292-0818；2-5-8，Kazusa Kamatari，Kisarazu，Chiba，Japan))(保藏号NITE P-177)，并且已经根据布达佩斯公约于2006年9月1日转移到国际保藏单位(International DepositaryAuthority)(保藏号NITE BP-177)。
同样，凝乳酶乳酸杆菌菌株KG43也已经根据布达佩斯公约于2007年1月31日国际保藏于国家技术与评估研究所(NITE)(NationalInstitute of Technology and Evaluation)的NITE专利微生物保藏部(NPMD)(NITE Patent Microorganisms Depositary)(邮政编码292-0818；2-5-8，Kazusa Kamatari，Kisarazu，Chiba，Japan))(接受号NITEABP-309)。
从未精制的酱油中分离乳酸菌按照下面的方法进行。即对25克未精制的酱油进行消化处理，取适量这样获得的液体加入到装在德汉(Durham)试管中的MRS-SOYTONE培养基中(5.5％MRS肉汤，0.5％细菌大豆蛋白胨，0.5％谷氨酸钠，8％食盐，5％食品添加剂乳酸，pH5.1)，在30℃进行静置培养。将证实了在德汉试管中产生了气体的培养基用MRS-SOYTONE培养基适当稀释，铺展在MRS-SOYTONE琼脂培养基上，然后在AnaeroPack Kenki(Mitsubishi Gas Chemical Co.，Inc)中于30℃培养7天。将这样获得的单个菌落再次接种到装在德汉试管中的MRS-SOYTONE培养基中，并选择被证实产生了气体的菌株。
通过上述方法分离到了7株菌株KG34、KG43、S1、KG31、KG64、KG-18-4和KG4-14-1。在这7株菌株中，检查了KG34和KG43这两株菌株的细菌学性质，结果显示在表1中。作为比较性的对照，作为凝乳酶乳酸杆菌标准菌株的凝乳酶乳酸杆菌DMSZ 20253的数据也描述在其中。可以看出，标准菌株凝乳酶乳酸杆菌DMSZ 20253不产生GABA，因为它不具有谷氨酸脱羧能力。
表1
  KG-34   KG-43   凝乳酶乳酸  杆菌  DMSZ 20253
  1.糖发酵   葡萄糖  半乳糖  山梨糖  蔗糖  麦芽糖  纤维二糖  海藻糖  乳糖   蜜二糖   棉子糖  松三糖醇  木糖  D-阿拉伯糖  L-阿拉伯糖  核糖  鼠李糖  果糖  甘油  赤藓糖醇   核糖醇   甘露糖醇   山梨糖醇  木糖醇  肌醇  D-葡萄糖胺  N-乙酰-D-葡萄糖  胺  苦杏仁苷苷  七叶苷   +  +  -  -  -  +  -  -  -  -  -  +  -  +  +  -  +  -  -  -   -   -  -  -  +  +  -  -   +  +  -  -  -  +  -  -  -  -  -  +  -  +  +  -  +  -  -  -   -  -  -  -  +  +  -  -   +  +  -  -  -  +  -  +  -  -  -  +  -  +  +  W  +  -  -  -   -  -  -  -  +  +  +  -
  2.生长温度  (℃)   5  15  20  25  30  37  40  45   -  -  +  +  +  +  +  -   -  W  W  +  +  +  -  -   -  -  +  +  +  +  +  -
  3.盐耐受性(％)   5  10  11  12  13  14  15  16   +  +  +  +  +  W  -  -   +  +  +  +  +  W  -  -   +  +  +  W  -  -  -  -
  4.起始pH   4  5  6  7  8  9   +  +  +  +  -  -   +  +  +  +  -  -   -  +  +  +  -  -
  5.脱羧能力   谷氨酸   天冬氨酸  赖氨酸   鸟氨酸   +   -  -   +   +   -  -   -   -   -  -   +
  6.其它   从葡萄糖产气   -   -   -
  移动性   -   -   -
  乳酸旋光   D   D   D
  精氨酸产氨   -   -   -
  孢子   -   -   -
  过氧化氢酶   -   -   -
  细胞壁中的二氨  基庚二酸   无   无   无
*w：弱但是+
此外，通过下面的方法测定了本发明的凝乳酶乳酸杆菌菌株KG34、KG43、S1、KG31、KG64、KG-18-4和KG4-14-1的乳酸菌的16S rDNA(16S rDNA基因)的完整的核苷酸序列。
每种乳酸菌凝乳酶乳酸杆菌菌株KG34、KG43、S1、KG31、KG64、KG-18-4和KG4-14-1被接种到MRS-Soytone培养基中(MRS肉汤5.5％， 大豆蛋白胨0.5％，NaCl 8％，谷氨酸钠0.5％，pH 5.1)，在30℃培养4天。使用GenTorukunTM(用于酵母)(Takara Bio)提取基因组DNA。16S rDNA的完整区域被分成三个片段，使用所提取的基因组DNA作为模板通过PCR来扩增。通过对相应的片段进行测序并将它们连接，获得了完整区域的序列。使用Takara热循环仪MP作为热循环仪，和ABI Prism 377 DNA测序仪(Applied Biosystems)被用作DNA测序仪。这样获得的相应的16S rDNA核苷酸序列被显示在SEQ ID NO：1和2中。
从获得的16S rDNA核苷酸序列对被认为与该细菌近缘的物种进行了同源性检索。使用16S rDNA核苷酸序列用近缘物种通过邻近连接方法(neighborhood connecting method)制备了分子系谱树。进行了近缘物种和指派分类组的研究。作为通过NCBI BLAST进行检索的结果，该细菌与凝乳酶乳酸杆菌的16S rDNA显示出最高的同源性(大约99.5％)，并在分子系谱树中形成了同样的凝乳酶乳酸杆菌簇。根据结果判断该细菌是凝乳酶乳酸杆菌。这样制备的系谱树显示在图1中。
尽管本发明的乳酸菌具有在不存在食盐和乳酸的情况下从L-谷氨酸和L-谷氨酸盐生产GABA的能力，但它即使在培养开始时在培养基中共同存在1％到4％乳酸和8％到12％食盐的条件下也能够产生GABA(参见实施例2)。此外，除了在培养开始时之外，它能够在培养基中共同存在0到4％的乳酸和0到12％食盐的条件下产生GABA。
本发明的生产含有GABA的培养混合物的方法是通过将具有上面提到的性质的乳酸菌接种到含有L-谷氨酸和/或其盐的培养基中、并对其进行培养以生产含有GABA的培养混合物的方法。当乳酸细菌被用于本发明时，尽管使用了从未精制的酱油中分离、培养和亚培养的物种，但未精制的酱油中包含的该同样的物种也可以直接或通过重新分离来使用。此外，可以使用冷冻干燥的细胞、低温保存的菌株和液体培养肉汤中的任何一种。
为了产生GABA，在本发明使用的培养基中必需含有谷氨酸。当谷氨酸被包含在培养基中时，尽管L-谷氨酸作为一种氨基酸在化学上是优选的，但是它可以是作为具有调味剂用途的食品添加剂的谷氨酸或谷氨酸钠、其它的谷氨酸盐和通过用酸或酶水解食物蛋白而获得的谷氨酸的任何一种。此外，含有游离谷氨酸的食品例如调味品、加工过的海产品和西红柿也同样可以使用。就此而言，在获得含有更大量GABA的培养混合物时，需要使用含有更大量谷氨酸的培养基。
另外，除了上面提到的谷氨酸之外，对于乳酸菌的生长来说，在本发明中使用的培养基优选还含有至少一种糖类例如葡萄糖、果糖和麦芽糖、含有维生素和矿物质的食品例如酵母提取物和肉类提取物、或酒曲和酒曲消化物。此外，食品添加剂例如乳化剂、稳定剂和pH调节剂也可以使用。可以用于培养基的酒曲和酒曲消化物的例子包括，使酒曲真菌或酒曲真菌的酶与一种或两种或多种选自谷类例如小麦、大麦、黑麦、珍珠麦、压碎的小麦或大麦、奎藜籽、粟、稗、黍、稻米和玉米以及豆类例如大豆、赤豆、芸豆、羽扇豆、玻璃豆(glass bean)、扁豆的变性处理过的原料进行反应而制备的蛋白水解产物。酱油、未精制的酱油、味噌、豆类等的蛋白水解产物等是优选的。
使用含有谷氨酸源、食盐和碳源、起始pH为4.0到7.0的培养基，将上面提到的能够产生GABA的凝乳酶乳酸杆菌在25到35℃下培养48到96小时，并将获得的乳酸菌种子培养物以主培养基体积的大约1/1,000到1/10的体积进行接种，由此进行了本发明的乳酸菌的接种。
尽管对于可以用于本发明培养的装置的大小和材料的质量没有限制，只要它可以清洗和热灭菌并能够用于生产食物就行，但是优选它具有卫生的结构，使得它难以被各种病菌污染。对于培养条件来说，基于乳酸菌的细菌学性质(参见表1)，培养温度从20到40℃，优选从25到35℃，起始pH优选从4.0到7.0。对于培养时间来说，必需进 行足够长的时间，使得谷氨酸源例如L-谷氨酸和/或其盐可以被转化成所需浓度的GABA。例如从1到4周的时间是优选的。
通过这种方式，可以获得含有GABA的培养混合物，它作为被加工的食品等的原材料具有广泛的应用。例如，使用通过本发明的方法获得的含有GABA的培养混合物作为GABA强化原料直接添加到各种不同调味品和食品和饮料中，也是可能的。
此外，也可以通过处理步骤例如压缩、过滤、浓缩和干燥以增加GABA的含量来使用它。对于上面提到的过滤步骤来说，可以使用用于食品加工用途的一般压滤装置来进行，所述装置使用了滤器、滤布等，并可以使用用于食品用的助滤剂例如硅藻土、纤维素和活性炭。对于浓缩步骤来说，可以使用装置例如真空浓缩器、减压浓缩器、蒸馏釜和冷冻浓缩器，也可以使用培养混合物中的水分通过简单加热而蒸发的方法。另外，对于干燥步骤来说，优选通过有效和卫生的方法进行喷雾干燥或冷冻干燥。此外，为了获得其中GABA含量进一步增加的培养混合物，除了上面提到的步骤之外还可以使用液相层析或方法。
通过这样处理含有GABA的培养混合物，可以获得含有GABA的液体和粉末食品。通过将它们配制成各种不同的食物中或对它们进行二次加工，可以容易地获得其中强化了GABA的调味剂或食品和饮料。在二次加工中，可以包含通常用于食品中的成分，例如赋形剂、甜味剂、增稠剂、蛋白、肽、脂类、多糖、糖和盐。
就此而言，在这样获得的培养混合物和补充了培养混合物的调味品和食品和饮料中测定GABA的含量，可以使用用于分析的仪器例如高效液相色谱和氨基酸分析仪、使用酶的分析试剂等来进行。
尽管下面将参考实施例对本发明进行进一步详细的描述，但本发 明不限于此。
实施例
实施例1
<乳酸菌的获得>
从各种种类的发酵食品收集适当量的待测样品，并将适量的每种样品加入到装在德汉试管中的MRS-SOYTONE培养基中(5.5％MRS肉汤，0.5％细菌大豆蛋白胨，0.5％谷氨酸钠，8％食盐，5％食品添加剂乳酸，pH 5.1)，在30℃进行静置培养。将被证实在德汉试管中产生了气体的培养基用MRS-SOYTONE培养基适当稀释，铺展在MRS-SOYTONE琼脂培养基上，然后在AnaeroPack Kenki(MitsubishiGas Chemical Co.，Inc)中于30℃培养7天。将这样获得的单个菌落再次接种到装在德汉试管中的MRS-SOYTONE培养基中，测量被证实产生了气体的样品中的GABA。就此而论，从同样的分离源分离到的菌株进行分别的鉴定，以避免选择两个或多个同样的菌株。GABA通过Hitachi，Ltd.制造的高效氨基酸分析仪L-8800进行测量。结果表明菌株KG34、KG43、S1、KG31、KG64、KG-18-4和KG4-14-1都产生GABA。就此而论，菌株KG34和菌株KG43的生理学性质被显示在表1中，菌株KG34和菌株KG43的16S rDNA序列被显示在SEQ ID NO：1和2中。菌株KG34和菌株KG43的16S rDNA序列彼此之间100％一致。
实施例2
<盐抗性和乳酸抗性的证实>
在装在德汉试管中的MRS-Soytone培养基(5.5％MRS肉汤，0.5％大豆蛋白胨，0.5％谷氨酸钠，pH 5.1)的基础上，使用其中食盐被改变到8％或12％、食品添加剂乳酸改变到0％、1％或4％的培养基，在食盐和乳酸在培养开始时存在于培养基中的条件下，证实了菌株KG34、KG43、S1、KG31、KG64、KG-18-4和KG4-14-1的GABA生产力。此外，在该情况下，进行了与常规已知的产生GABA的乳酸菌的比较，结果显示在表2中。
表2
*L.：乳酸杆菌    **○：产生GABA
La.：乳球菌      △：可以生长但是不产生GABA
E.：肠球菌       ×：不生长
S.：链球菌
实施例3
<含有GABA的培养混合物(调味品)的生产方法>
通过在70克小麦麦麸和100克酱油曲中加入160ml温水，在其中再加入通过对无名假丝酵母(Candida famata)km-1(FERM P-8897)进行36个小时的通气搅拌培养(培养基组成：葡萄糖6％，酵母提取物1％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.1％，pH 5.5，培养温度30℃)获得培养液5ml作为谷氨酰胺酶，在50℃下用24小时进行麦麸的降解和将降解形成的谷氨酰胺转化为谷氨酸。在向这样获得的降解产物中加入食盐到终浓度8％并进一步加入食品添加剂乳酸到终浓度1％、接着将温度降低到30℃之后，以大约106个细胞/ml的密度接种凝乳酶乳酸杆菌菌株KG34或菌株KG43，在30℃下轻柔搅拌培养7天。将每个这样获得的培养混合物过滤以获得澄清的液体。接种有菌株KG34的培养液体的GABA含量是13.0mg/ml，在KG43的情况下是19.5mg/ml。作为对照，尽管使用了常规已知的产生GABA的菌株短乳酸杆菌NBRC 3345进行了同样的试验，但最终获得的澄清液体中GABA的浓度是2.0mg/ml。因此，没有进行充分的GABA生产。
尽管已经参考具体的实施方案对本发明进行了详细的描述，但对于本技术领域的专业技术人员来说，显然可以对其进行各种不同的改变和修饰而不背离本发明的精神和范围。
本申请基于2006年2月21日提交的日本专利申请(日本专利申请No.2006-043 836)，其全部内容在此引为参考。所有在此引用的参考文献整体引为参考。
工业实用性
根据本发明，可以提供使用廉价的原料而没有野生菌株对发酵造成抑制的情况下稳定地生产GABA的方法。
<110>龟甲万株式会社
<120>能够生产γ-氨基丁酸的乳酸菌
<130>SCT083647-00
<150>JP 2006-043836
<151>2006-02-21
<160>2
<170>PatentIn version 3.3
<210>1
<211>1526
<212>DNA
<213>Lactobacillus rennini KG34(NITE BP-177)
<400>1
gtttgatcct ggctcaggac gaacgctggc ggcgtgccta atacatgcaa gtcgcacgca 60
caaccgttaa cctgatcctg cttgcaggtg acgttaatgg acgtgagtgg cggacgggtg 120
agtaacacgt gggtaaccaa ccctgaagcg ggggataacc tttggaaaca gaggctaata 180
ccgcatagtt tatcgcgacc tcctggtcgc aataataaag acggcttcgg ctgtcacttc 240
aggacagacc cgcggcgtat tagctagttg gtgggataaa ggcctaccaa ggcgatgata 300
cgtagccgac ctgagagggt aatcggccac attgggactg agacacggcc caaactccta 360
cgggaggcag cagtagggaa tcttccacaa tggacgcaag tctgatggag caacgccgcg 420
tgagtgaaga agggtttcgg ctcgtaaaac gctgttgttg gagaagaacc gggggtagag 480
taactgttat ccccttgacg gtatccaacc agaaagccac ggctaactac gtgccagcag 540
ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttgt ccggatttat tgggcgtaaa gcgagcgcag 600
gcggtttttt aagtctgatg tgaaagcctt cggcttaacc gaagaagggc atcagaaact 660
gagaagcttg aggacagaaa aggaaagtgg aactccatgt gtagcggtga aatgcgtaga 720 
tatatggaag aacaccagtg gcgaaggcgg ctttctggtc tgttactgac gctgaggctc 780
gaaagtatgg ggagcgaaca ggattagata ccctggtagt ccataccgta aacgatgaat 840
gctaagtgtt ggagggtttc cgcccttcag tgctgcagct aacgcattaa gcattccgcc 900
tggggagtac gaccgcaagg ttgaaactca aaggaattga cgggggcccg cacaagcggt 960
ggagcatgtg gtttaattcg aagcaacgcg aagaacctta ccaggtcttg acatcctttg 1020
accgctgtcg agagacagtt tgcccttcgg ggccaaagtg acaggtggtg catggttgtc 1080
gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc cttatgacta 1140
gttgccagca tttagttggg cactctagtg agactgccgg tgacaaaccg gaggaaggtg 1200
gggatgacgt caaatcagca tgcccctgat gacctgggct acacacgtgc tacaatggtc 1260
gggacaacga gtagcgcgcc cgcgagggtt agctaatctc taaaaaccga tctcagttcg 1320
gattgcaggc tgcaactcgc ctgcatgaag ccggaatcgc tagtaatcgc ggatcagcat 1380
gccgcggtga atccgttccc gggccttgta cacaccgccc gtcacaccat gagagtttgt 1440
aacacccaaa gccggtgggg caacccttcg gggagctagc cgtctaaggt gggacagatg 1500
attggggtga agtcgtaaca aggtaa                                      1526
<210>2
<211>1526
<212>DNA
<213>Lactobacillus rennini KG43(NITE ABP-309)
<400>2
gtttgatcct ggctcaggac gaacgctggc ggcgtgccta atacatgcaa gtcgcacgca 60
caaccgttaa cctgatcctg cttgcaggtg acgttaatgg acgtgagtgg cggacgggtg 120
agtaacacgt gggtaaccaa ccctgaagcg ggggataacc tttggaaaca gaggctaata 180
ccgcatagtt tatcgcgacc tcctggtcgc aataataaag acggcttcgg ctgtcacttc 240
aggacagacc cgcggcgtat tagctagttg gtgggataaa ggcctaccaa ggcgatgata 300 
cgtagccgac ctgagagggt aatcggccac attgggactg agacacggcc caaactccta 360
cgggaggcag cagtagggaa tcttccacaa tggacgcaag tctgatggag caacgccgcg 420
tgagtgaaga agggtttcgg ctcgtaaaac gctgttgttg gagaagaacc gggggtagag 480
taactgttat ccccttgacg gtatccaacc agaaagccac ggctaactac gtgccagcag 540
ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttgt ccggatttat tgggcgtaaa gcgagcgcag 600
gcggttttt taagtctgatg tgaaagcctt cggcttaacc gaagaagggc atcagaaact 660
gagaagcttg aggacagaaa aggaaagtgg aactccatgt gtagcggtga aatgcgtaga 720
tatatggaag aacaccagtg gcgaaggcgg ctttctggtc tgttactgac gctgaggctc 780
gaaagtatgg ggagcgaaca ggattagata ccctggtagt ccataccgta aacgatgaat 840
gctaagtgtt ggagggtttc cgcccttcag tgctgcagct aacgcattaa gcattccgcc 900
tggggagtac gaccgcaagg ttgaaactca aaggaattga cgggggcccg cacaagcggt 960
ggagcatgtg gtttaattcg aagcaacgcg aagaacctta ccaggtcttg acatcctttg 1020
accgctgtcg agagacagtt tgcccttcgg ggccaaagtg acaggtggtg catggttgtc 1080
gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc cttatgacta 1140
gttgccagca tttagttggg cactctagtg agactgccgg tgacaaaccg gaggaaggtg 1200
gggatgacgt caaatcagca tgcccctgat gacctgggct acacacgtgc tacaatggtc 1260
gggacaacga gtagcgcgcc cgcgagggtt agctaatctc taaaaaccga tctcagttcg 1320
gattgcaggc tgcaactcgc ctgcatgaag ccggaatcgc tagtaatcgc ggatcagcat 1380
gccgcggtga atccgttccc gggccttgta cacaccgccc gtcacaccat gagagtttgt 1440
aacacccaaa gccggtgggg caacccttcg gggagctagc cgtctaaggt gggacagatg 1500
attggggtga agtcgtaaca aggtaa                                      1526 
序列表
<110>龟甲万株式会社
 
<120>能够生产γ-氨基丁酸的乳酸菌
 
<130>SCT083647-00
 
<150>JP 2006-043836
<151>2006-02-21
 
<160>2
 
<170>PatentIn version 3.3
 
<210>1
<211>1526
<212>DNA
<213>Lactobacillus rennini KG34(NITE BP-177)
 
<400>1
gtttgatcct ggctcaggac gaacgctggc ggcgtgccta atacatgcaa gtcgcacgca 60
caaccgttaa cctgatcctg cttgcaggtg acgttaatgg acgtgagtgg cggacgggtg 120
agtaacacgt gggtaaccaa ccctgaagcg ggggataacc tttggaaaca gaggctaata 180
ccgcatagtt tatcgcgacc tcctggtcgc aataataaag acggcttcgg ctgtcacttc 240
aggacagacc cgcggcgtat tagctagttg gtgggataaa ggcctaccaa ggcgatgata 300
cgtagccgac ctgagagggt aatcggccac attgggactg agacacggcc caaactccta 360
cgggaggcag cagtagggaa tcttccacaa tggacgcaag tctgatggag caacgccgcg 420
tgagtgaaga agggtttcgg ctcgtaaaac gctgttgttg gagaagaacc gggggtagag 480
taactgttat ccccttgacg gtatccaacc agaaagccac ggctaactac gtgccagcag 540
ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttgt ccggatttat tgggcgtaaa gcgagcgcag 600
gcggtttttt aagtctgatg tgaaagcctt cggcttaacc gaagaagggc atcagaaact 660
gagaagcttg aggacagaaa aggaaagtgg aactccatgt gtagcggtga aatgcgtaga 720
tatatggaag aacaccagtg gcgaaggcgg ctttctggtc tgttactgac gctgaggctc 780
gaaagtatgg ggagcgaaca ggattagata ccctggtagt ccataccgta aacgatgaat 840
gctaagtgtt ggagggtttc cgcccttcag tgctgcagct aacgcattaa gcattccgcc 900
tggggagtac gaccgcaagg ttgaaactca aaggaattga cgggggcccg cacaagcggt 960
ggagcatgtg gtttaattcg aagcaacgcg aagaacctta ccaggtcttg acatcctttg 1020
accgctgtcg agagacagtt tgcccttcgg ggccaaagtg acaggtggtg catggttgtc 1080
gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc cttatgacta 1140
gttgccagca tttagttggg cactctagtg agactgccgg tgacaaaccg gaggaaggtg 1200
gggatgacgt caaatcagca tgcccctgat gacctgggct acacacgtgc tacaatggtc 1260
gggacaacga gtagcgcgcc cgcgagggtt agctaatctc taaaaaccga tctcagttcg 1320
gattgcaggc tgcaactcgc ctgcatgaag ccggaatcgc tagtaatcgc ggatcagcat 1380
gccgcggtga atccgttccc gggccttgta cacaccgccc gtcacaccat gagagtttgt 1440
aacacccaaa gccggtgggg caacccttcg gggagctagc cgtctaaggt gggacagatg 1500
attggggtga agtcgtaaca aggtaa                                      1526
 
<210>2
<211>1526
<212>DNA
<213>Lactobacillus rennini KG43(NITE ABP-309)
 
<400>2
gtttgatcct ggctcaggac gaacgctggc ggcgtgccta atacatgcaa gtcgcacgca 60
caaccgttaa cctgatcctg cttgcaggtg acgttaatgg acgtgagtgg cggacgggtg 120
agtaacacgt gggtaaccaa ccctgaagcg ggggataacc tttggaaaca gaggctaata 180
ccgcatagtt tatcgcgacc tcctggtcgc aataataaag acggcttcgg ctgtcacttc 240
aggacagacc cgcggcgtat tagctagttg gtgggataaa ggcctaccaa ggcgatgata 300
cgtagccgac ctgagagggt aatcggccac attgggactg agacacggcc caaactccta 360
cgggaggcag cagtagggaa tcttccacaa tggacgcaag tctgatggag caacgccgcg 420
tgagtgaaga agggtttcgg ctcgtaaaac gctgttgttg gagaagaacc gggggtagag 480
taactgttat ccccttgacg gtatccaacc agaaagccac ggctaactac gtgccagcag 540
ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttgt ccggatttat tgggcgtaaa gcgagcgcag 600
gcggttttt taagtctgatg tgaaagcctt cggcttaacc gaagaagggc atcagaaact 660
gagaagcttg aggacagaaa aggaaagtgg aactccatgt gtagcggtga aatgcgtaga 720
tatatggaag aacaccagtg gcgaaggcgg ctttctggtc tgttactgac gctgaggctc 780
gaaagtatgg ggagcgaaca ggattagata ccctggtagt ccataccgta aacgatgaat 840
gctaagtgtt ggagggtttc cgcccttcag tgctgcagct aacgcattaa gcattccgcc 900
tggggagtac gaccgcaagg ttgaaactca aaggaattga cgggggcccg cacaagcggt 960
ggagcatgtg gtttaattcg aagcaacgcg aagaacctta ccaggtcttg acatcctttg 1020
accgctgtcg agagacagtt tgcccttcgg ggccaaagtg acaggtggtg catggttgtc 1080
gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc cttatgacta 1140
gttgccagca tttagttggg cactctagtg agactgccgg tgacaaaccg gaggaaggtg 1200
gggatgacgt caaatcagca tgcccctgat gacctgggct acacacgtgc tacaatggtc 1260
gggacaacga gtagcgcgcc cgcgagggtt agctaatctc taaaaaccga tctcagttcg 1320
gattgcaggc tgcaactcgc ctgcatgaag ccggaatcgc tagtaatcgc ggatcagcat 1380
gccgcggtga atccgttccc gggccttgta cacaccgccc gtcacaccat gagagtttgt 1440
aacacccaaa gccggtgggg caacccttcg gggagctagc cgtctaaggt gggacagatg 1500
attggggtga agtcgtaaca aggtaa                                      1526

Claims (3)

1.属于乳酸杆菌属(Lactobacillus)的乳酸菌，其能够在培养开始时在培养基中共同存在乳酸和食盐的条件下产生γ-氨基丁酸，其中的乳酸菌是以保藏号NITE BP-177保藏的凝乳酶乳酸杆菌株KG-34或以保藏号NITE BP-309保藏的凝乳酶乳酸杆菌株KG-43。
2.权利要求1的乳酸菌，其能够在培养开始时在培养基中共同存在1％到4％乳酸和8％到12％食盐的条件下产生γ-氨基丁酸。
3.生产含有γ-氨基丁酸的培养混合物的方法，其中将权利要求1或2所描述的乳酸菌在接种到含有L-谷氨酸和/或其盐的培养基中之后进行培养。
CN2007800062256A 2006-02-21 2007-02-21 能够生产γ-氨基丁酸的乳酸菌 Expired - Fee Related CN101389751B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2006043836 2006-02-21
JP043836/2006 2006-02-21
PCT/JP2007/053223 WO2007097374A1 (ja) 2006-02-21 2007-02-21 γ-アミノ酪酸生産能を有する乳酸菌

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101389751A CN101389751A (zh) 2009-03-18
CN101389751B true CN101389751B (zh) 2011-09-07

Family

ID=38437412

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2007800062256A Expired - Fee Related CN101389751B (zh) 2006-02-21 2007-02-21 能够生产γ-氨基丁酸的乳酸菌

Country Status (8)

Country Link
US (1) US8202710B2 (zh)
EP (1) EP1988155B1 (zh)
JP (1) JPWO2007097374A1 (zh)
CN (1) CN101389751B (zh)
CA (1) CA2638783A1 (zh)
ES (1) ES2347601T3 (zh)
TW (1) TW200811288A (zh)
WO (1) WO2007097374A1 (zh)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011193858A (ja) * 2010-03-24 2011-10-06 National Agriculture & Food Research Organization γ−アミノ酪酸含有飼料とその製造方法、並びにそれを用いた家畜の飼育方法
CN102108370B (zh) * 2010-12-02 2013-03-06 中国农业大学 利用乳酸菌生产γ-氨基丁酸的半连续发酵方法
CN102754835B (zh) * 2012-07-24 2013-11-13 华南农业大学 一种富含γ-氨基丁酸的檀香叶提取液及其制备方法
CN104789610B (zh) * 2015-05-05 2018-03-23 华东理工大学 一种乳酸菌在生产γ‑氨基丁酸中的应用
KR101761710B1 (ko) * 2015-08-27 2017-07-26 (주)마린바이오프로세스 Gaba를 함유한 발효소금 및 이의 제조방법
KR101761711B1 (ko) * 2015-08-27 2017-07-26 (주)마린바이오프로세스 Gaba를 함유하고 나트륨이 저감된 발효소금 및 이의 제조방법
AU2017234120B2 (en) * 2016-03-14 2024-06-20 Holobiome, Inc. Modulation of the gut microbiome to treat mental disorders or diseases of the central nervous system
CN106036914A (zh) * 2016-06-06 2016-10-26 山东水晶生物科技股份有限公司 一种助眠保健品及制备方法
CN107125569B (zh) * 2017-05-27 2020-07-07 江南大学 一种通过乳酸菌发酵改善糙米蒸煮性能的方法
CN107937311B (zh) * 2017-12-20 2021-05-28 光明乳业股份有限公司 一株高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法
CN114875104B (zh) * 2022-03-02 2023-08-29 广州市巴菲巴健康产业有限公司 一种桑叶酵素原液及其制备方法和应用
CN116042483B (zh) * 2023-02-17 2023-07-18 佛山科学技术学院 一株具有产γ-氨基丁酸的乳酸肠球菌FSUH-1及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1392262A (zh) * 2002-06-08 2003-01-22 江南大学 一种食品功能因子γ－氨基丁酸的制备方法
CN1673351A (zh) * 2005-03-07 2005-09-28 浙江大学 产γ－氨基丁酸的短乳杆菌及其用途

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2704493B2 (ja) 1994-02-18 1998-01-26 京都府 発酵食品の製造方法
JP4332247B2 (ja) 1999-01-21 2009-09-16 大洋香料株式会社 γ−アミノ酪酸高生産能を有する乳酸菌、及びその乳酸菌を使用したγ−アミノ酪酸高含有発酵食品とその製造法。
JP3426157B2 (ja) 1999-04-27 2003-07-14 株式会社バイオアルビン研究所 乳酸発酵食品の製造方法
JP4968869B2 (ja) * 2001-06-13 2012-07-04 宝ホールディングス株式会社 γ−アミノ酪酸の製造方法
JP3849045B2 (ja) * 2001-12-17 2006-11-22 有限会社ヤスダヨーグルト γ−アミノ酪酸の生成方法
JP3860533B2 (ja) * 2002-10-15 2006-12-20 マルコメ株式会社 γ−アミノ酪酸高含有食品素材の製造方法
JP4344143B2 (ja) 2003-01-10 2009-10-14 キリンホールディングス株式会社 風味の良いｇａｂａ高含有乳酸菌発酵飲食品及び調味食品の製造法
JP4313615B2 (ja) * 2003-06-03 2009-08-12 ヒガシマル醤油株式会社 免疫賦活活性及びγ−アミノ酪酸産生能を有する新規乳酸菌、及びその利用。
JP2005065691A (ja) 2003-08-06 2005-03-17 Akita Prefecture γ−アミノ酪酸含有組成物並びにその製造法
JP2005102559A (ja) 2003-09-29 2005-04-21 Domer Inc 新菌株及び該菌株によるγ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）の大量生産方法
JP2005198578A (ja) * 2004-01-16 2005-07-28 Ehime Prefecture γ−アミノ酪酸の製造方法及びそれより得られる発酵液
JP2005312438A (ja) * 2004-03-29 2005-11-10 Marukome Kk γ−アミノ酪酸高含有食品素材及びその製造方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1392262A (zh) * 2002-06-08 2003-01-22 江南大学 一种食品功能因子γ－氨基丁酸的制备方法
CN1673351A (zh) * 2005-03-07 2005-09-28 浙江大学 产γ－氨基丁酸的短乳杆菌及其用途

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
TAKESHI HIGUCHI.Exchange of Glutamate and γ-Aminobutyrate in a Lactobacillus Strain.《JOURNAL OF BACTERIOLOGY》.1997,第179卷(第10期), *
夏江等.产γ-氨基丁酸的短乳酸杆菌菌株筛选及诱变.《浙江省生物化学与分子生物学学术交流会论文集》.2005, *

Also Published As

Publication number Publication date
US20090186388A1 (en) 2009-07-23
ES2347601T3 (es) 2010-11-02
WO2007097374A1 (ja) 2007-08-30
EP1988155A1 (en) 2008-11-05
CN101389751A (zh) 2009-03-18
EP1988155B1 (en) 2010-07-28
TW200811288A (en) 2008-03-01
TWI379003B (zh) 2012-12-11
US8202710B2 (en) 2012-06-19
JPWO2007097374A1 (ja) 2009-07-16
CA2638783A1 (en) 2007-08-30
EP1988155A4 (en) 2009-05-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101389751B (zh) 能够生产γ-氨基丁酸的乳酸菌
KR101516588B1 (ko) 바이오제닉 아민 분해 활성이 있는 바실러스 속 균주 및 이의 용도
KR101239624B1 (ko) 식물성 단백질 가수분해물의 제조방법
Mathias et al. Brewery waste reuse for protease production by lactic acid fermentation
KR20110031324A (ko) 고함량 글루타민산을 포함하는 이스트 추출물 및 그것의 제조방법
CN113957016B (zh) 一种枯草芽孢杆菌及利用枯草芽孢杆菌制备奶香型冬虫夏草发酵液的方法
Tominaga et al. Oceanobacillus soja sp. nov. isolated from soy sauce production equipment in Japan
CN108265019B (zh) 肠膜明串珠菌肠膜亚种、制备方法和应用
JP4618033B2 (ja) γ−アミノ酪酸豊富な食品の製造法及びγ−アミノ酪酸産生菌ラクトバシルス・カルバタスＫＭ１４株
KR20080040134A (ko) 유효미생물의 증식 촉진용 조성물 및 유효미생물의 증식촉진 방법
JP7492208B2 (ja) Ｇａｂａ及びオルニチンを高産生する新規乳酸菌、並びに当該乳酸菌を用いた経口組成物の製造方法
CN113999789B (zh) 一株产鲜味肽的嗜盐四联球菌及应用
CN117157385A (zh) 一株米曲霉za205及其应用
WO1999062347A1 (fr) Procede de production d&#39;assaisonnements liquides ayant la saveur de legumes marines dans une pate de son de riz salee
CN113801800A (zh) 一株酿酒酵母及其应用
CN113957019A (zh) 一种类诺卡氏菌、其分离方法和应用
CN105754975A (zh) 一种耐盐性蛋白酶的提取及缩短鱼露发酵时间的应用方法
CN116948915B (zh) 一株大豆发酵芽孢杆菌及其应用
CN114606138B (zh) 菌株和酶在制备保健酱油中的应用及制备方法
Hristoskova et al. Newly characterized butyrate producing Clostridium sp. strain 4A1, isolated from chickpea beans (Cicer arietinum L.)
KR20150088588A (ko) 신규한 감마아미노부티르산 고생산성 균주 락토바실러스 브레비스 cfm11 및 이의 용도
KR101460566B1 (ko) 혈전용해효소를 생산하는 싸카로마이세스속 ａｆｙ-1 균주 및 상기 균주를 포함하는 장류
CN115232759B (zh) 一株葡萄球菌及其应用
KR101971186B1 (ko) 비피도박테리움 애니멀리스 서브스페시스 락티스 HY8002와 비피도박테리움 아돌레센티스 HY8502의 유산균 조합을 이용한 진세노사이드 Rd가 강화된 발효홍삼 농축액의 제조방법
CN118086093A (zh) 一种燕窝源益生菌及其样菌发酵产物滤液的方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20110907

Termination date: 20140221