ES2285861T3

ES2285861T3 - Nuevo derivado de aminopentano opticamente activo.

Info

Publication number: ES2285861T3
Application number: ES99947940T
Authority: ES
Inventors: Fumio Soyaku Kenkyusyo YONEDA; Joseph Knoll; Hironori Soyaku Kenkyusyo OHDE; Masatoshi Soyaku Kenkyusyo SAKAE; Toshiaki Soyaku Kenkyusyo MOTO; Takashi Soyaku Kenkyusyo ANDO; Seiichiro Soyaku Kenkyusyo SHIMAZU; Kazue Soyaku Kenkyusyo TAKAHATA
Original assignee: Fujimoto Brothers Co Ltd
Current assignee: Fujimoto Brothers Co Ltd
Priority date: 1998-10-29
Filing date: 1999-10-15
Publication date: 2007-11-16
Anticipated expiration: 2019-10-15
Also published as: CN1131858C; EP1052259A1; WO2000026204A1; DK1052259T3; DE69935849T2; ATE360009T1; HK1032585A1; CA2317036C; IL136977A0; AU762995B2; EP1052259B1; CN1287554A; PT1052259E; DE69935849D1; JP4499208B2; JP2000136187A; CA2317036A1; KR20010033756A; US6391914B1; AU6124199A

Abstract

(-)-1-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentano representado por la siguiente fórmula y las sales de ácidos farmacéuticamente aceptables.

Description

Nuevo derivado de aminopentano ópticamente activo.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a un derivado de aminopentano ópticamente activo, (-)-1-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentano, que no contiene sustancialmente el isómero (+), y a las sales de ácido farmacéuticamente aceptables. Éstas son prometedoras como compuestos activos de una composición médica, especialmente, composición psicotrópica, composición antidepresiva para tratar enfermedad de Parkinson y/o enfermedad de Alzheimer.

Antecedentes de la invención

Los derivados de etilamina se sabe que tienen diversas acciones biológicas. Particularmente los derivados de etilaminas aromáticas se cree que son composiciones psicotrópicas esperanzadoras, debido a tienen la acción de liberación desplazando las catecolaminas de sus lugares de almacenamiento en el sistema nervioso central. Sin embargo, se apunta que esta composición tiene efectos secundarios de tipo estimulante tales como neurotoxicidad y comportamiento anormal, debido a que fácilmente provocan la liberación en exceso de catecolamina desde los lugares de almacenamiento, es decir vesículas sinápticas, y así sucesivamente. La continua administración de estas composiciones, que potencian la liberación en exceso de catecolamina, induce la disminución de receptores de catecolamina. Por consiguiente, la respuesta de pacientes a estas composiciones se reduce gradualmente y no se puede un efecto terapéutico suficiente.

El documento JP-A-059 578 describe derivados de fenilalquilamina sustituidos que tienen efecto antipsicótico sin provocar trastornos del sistema extrapiramidal.

Por otra parte, se han descrito derivados de fenetilamina novedosos en el documento WO 88/2254 como una composición psicotrópica y así sucesivamente. Se ha tenido especial atención a a estos derivados de fenetilamina, debido a que éstos muestran el efecto potenciador de actividad (efecto CAE), que es una acción recientemente descubierta para potenciar la liberación de catecolamina debido a la amplificación de la exocitosis dependiente del potencial de membrana, y que es diferente de la acción de liberación anteriormente mencionada desplazando la catecolamina de su almacenamiento [Life Sci., 58, 945 - 952 (1996)]. Sin embargo, estos compuestos no decidieron el incremento de la reacción intersticial que es un indicador del comportamiento anormal en la tarea de evasión condicionada. Por lo tanto, se ha requerido el desarrollo del fármaco de Cae de alta selectividad. Entonces, los inventores habían desarrollado compuestos novedosos que potencian la liberación de catecolamina por el efecto de CAE, y les encontraron útiles como una composición psicotrópica, antidepresivos, composición para el tratamiento de enfermedad de Parkinson y/o enfermedad de Alzheimer (documento EP.A-957080).

Los compuestos de amina orgánicos en el documento EA-957080 son compuestos racémicos constituidos por dos cantidades equimolares de isómeros ópticos (enantiómeros), debido a que tienen un carbono asimétrico. Como para los compuestos racémicos son mezclas de isómeros ópticos, uno de un par generalmente mostraron mayor actividad que el otro. Por lo tanto, las resoluciones ópticas de los isómeros se trató ensayaron mediante el uso de los procedimientos preparando las sales o derivados de de diastereómeros. Sin embargo, resulta que no es fácil llevar a cabo la resolución óptica de compuestos racémicos en el documento EA-957080 debido a sus propios sustituyentes flexibles.

El objeto de esta invención es obtener los isómeros ópticos respectivos a partir de los compuestos de amina orgánicos mediante el documento EA-957080 de al resolución óptica, y encontrar remedios útiles a partir de los isómeros ópticos mediante selección farmacológica. Además, la oferta de una composición médica tal como una composición psicotrópica, antidepresivos, composición para el tratamiento de enfermedad de Parkinson y/o enfermedad de Alzheimer son además el objeto de la invención.

Breve descripción de la invención

Siguiendo la invención, el objeto de la invención mencionado se logra mediante (-)-1-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentano ópticamente puro novedoso mostrado mediante la siguiente fórmula o las sales de ácido farmacéuticamente aceptables.

1

Los inventores han examinado la resolución óptica para obtener isómeros ópticamente puros a partir de compuestos racémicos que eran composición psicotrópica, antidepresivos, composición para el tratamiento de enfermedad de Parkinson y/o enfermedad de Alzheimer son además el propósito de la invención. Se ensayaron diversos procedimientos para obtener un compuesto ópticamente activo de los documentos en el documento EP-A-957080, y por último, se logró la resolución óptica mediante el procedimiento de cromatografía líquida de alta resolución usando una columna quiral descrita en el ejemplo 1. Este compuesto novedosos ópticamente activo o las sales de ácido se encontraron que muestran acciones psicotrópicas y antidepresivas mediante los efectos de CAE excelentes. particularmente (-)-1-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentano o las sales de ácido farmacéuticamente aceptables se encontró que muestran una alta actividad, y la invención se completó.

Nadie ha previsto si entre estos compuestos (-)-1-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentano no incluyendo sustancialmente la forma (+) mostró el efecto CAE excelente, o no. Debido a que un lote de compuestos descritos en el documento EP-A-957080, incluyendo 1-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentano, no están disponibles al público todavía, y el procedimiento de resolución óptica para estos compuestos de amina orgánicos racémicos y acciones farmacológicas de isómero óptico también han sido desconocidos.

Mejor modo de llevar a cabo la invención

Los compuestos en la invención es el enantiómero (-) de un cierto compuesto descrito en el documento JP 9/247445, y en esta memoria descriptiva la frase "que no incluyendo esencialmente el isómero (+)" significa su pureza óptica va a ser más del 80% de e. e., y deseablemente 90% de e. e. Las acciones farmacológicas de (-)-1-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentano, que no contiene sustancialmente el isómero (+), son mejores que los compuestos racémicos descritos en el documento EP-A-957080.

Los inventores concretamente proporcionan las sales con ácido inorgánico, farmacéuticamente aceptable que eran deseables, tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido metanosulfónico y así sucesivamente, o ácido orgánico tal como ácido glucónico, ácido tartárico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido málico, ácido mandélico y así sucesivamente.

El compuesto de la invención y las sales de ácido muestran acción farmacológica tal como acción psicotrópica que se debe al efecto potenciador de la actividad catecolaminérgica (efecto CAE). Además, los inventores son capaces de usarlos como una composición para el tratamiento de enfermedad de parkinson, antidepresivos y composición psicotrópica.

Cuando se miden las catecolaminas liberadas del tronco encefálico sumergido en solución de Krebs durante los períodos de reposo o electroestimulación, la liberación de catecolamina se incrementa significativamente con este compuesto solamente durante el período de electroestimulación, pero no en reposo. Esta acción del compuesto de la invención es mucho mayor que los compuestos racémicos descritos en el documento EP-A-957080. El isómero (+) muestra actividad así como el compuesto racémico. Además, aunque la administración con un eliminador de acrtecolamina, tetrabenazina, redujo la capacidad de aprendizaje de ratas, el compuesto de la invención muestra que mejora de manera significativa la capacidad de aprendizaje que se puntúan como reflejos de evasión condicionados, en dosis menores que el compuesto isómero (+) o racémico.

Estos experimentos pusieron de relieve que el compuesto de la invención tiene efecto potenciador de la actividad catecolaminérgica, que potencia la exocitosis debido a la estimulación relacionada con el potencial activo y liberación del transmisor es decir un incremento de la concentración de Ca^{2+} intracelular en las neuronas. Además, esta acción fisiológica, sin comportamiento anormal y supresión de amina en el terminal nervioso catecolaminérgico, es diferente de la acción de liberación de la composición conocida para desplazar la catecolamina.

Cuando se usan los compuestos de la invención o las sales de ácido farmacéuticamente aceptables como la medicina anterior, éstos se administran por vía oral o parenteral en forma de comprimidos, polvos, gránulos, cápsulas, jarabes, inyecciones o similares. aunque al dosis usada es variable, y dependiente de cada síntoma, edad, peso corporal y así sucesivamente, la dosis oral de adulto para estos compuestos está usualmente entre 0,1 y 100 mg/día. Además, se administran una vez o varias veces al día.

El compuesto de la invención se explica concretamente como sigue.

Ejemplo 1

Preparación de clorhidrato de (-)-1-benzofuran-2-il)-2-propilaminoheptano

La resolución óptica se llevó a cabo mediante el procedimiento de HPLC en las siguientes condiciones. Ciento quince \mul de 8 mg/ml de clorhidrato de (\pm)-1-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentano (compuesto racémico) se inyectó directamente en la HPLC.

HPLC: LC-6AD, Shimadzu, Kyoto, Japón.

Columna: CHIRALPACKAD 20 mm de diámetro x 250 mm (DAICEL).

Fase móvil: hexano : isopropanol : ácido trifluoroacético = 100 : 2 : 0,1.

Caudal: 12,0 ml/min.

Detector: detector SPD-10A tipo UV/VIS (280 nm), Shimadzu, Kyoto, Japón.

Temperatura: temperatura ambiente.

Aceite de (-)-1-benzofuran-2-il)-2-propilaminoheptano se disolvió en éter anhidro, y se añadió a una solución de éter saturado con clorhidrato para convertir la sal clorhidrato.

Punto de fusión: 165,0 - 166,0ºC.

IR: 3425, 2970, 2870, 2780, 2735, 2690, 2520, 2430, 1605, 1590, 1472, 1455, 1255, 1167, 942, 805, 777, 760 cm^{-1}.

Análisis elemental: como C_{16}H_{23}NO.HCl

	Calculado:	C: 68,19, H: 8,58, N; 4,97 (%)
	Encontrado:	C: 68,07, H: 8,48, N; 4,98 (%)

Pureza óptica: 93% de e. e.

Rotación específica: [\alpha]^{20}_{D} = - 4,08 (c = 4,0, metanol).

Ejemplo de referencia

Preparación de clorhidrato de (+)-1-benzofuran-2-il)-2-propilaminoheptano [Forma (+)]

Aceite de (+)-1-benzofuran-2-il)-2-propilaminoheptano obtenido en el ejemplo 1 se disolvió en éter anhidro, y se añadió a una solución de éter saturado con clorhidrato para convertir la sal clorhidrato.

Punto de fusión: 170,0 - 171,0ºC.

IR: 3425, 2970, 2870, 2790, 2735, 2700, 2515, 2425, 1607, 1590, 1472, 1455, 1250, 1175, 945, 802, 770, 760 cm^{-1}.

Análisis elemental: como C_{16}H_{23}NO.HCl

	Calculado:	C: 68,19, H: 8,58, N; 4,97 (%)
	Encontrado:	C: 67,90, H: 8,44, N; 4,98 (%)

Pureza óptica: 100% de e. e.

Rotación específica: [\alpha]^{20}_{D} = + 4,01 (c = 4,0, metanol).

Los resultados de estudios farmacológicos se muestran como sigue.

Ejemplo 2

Medición de aminas biogénicas liberadas del tronco encefálico de rata mediante electroestimulación

Se usó el procedimiento descrito en Life, 58, 2101 - 2114 (1996). Ratas machos de 280 - 350 g se atontaron mediante un golpe en la parte trasera de su cabeza, el tronco encefálico (peso medio aproximadamente 800 mg) se aisló y se sumergió en solución de Krebs oxigenada (95% de O_{2}, y 5% de CO_{2}) a 37ºC durante 30 minutos. Después, se añadieron 20 \mul de la solución de ^{3}H-noradrenalina (actividad específica de 1-[7,8-^{8}H]-noradrenalina: 30 - 50 Ci/mmol; Amersham) a la preparación y se designaron 45 minutos para la captación. La composición de la solución de Krebs fue como sigue en mmol/l: Na^{+} 137,4; K^{+} 5,9, Ca^{2+} 2,5, Mg^{2+} 1,2, Cl^{-} 120,2, H_{2}PO_{4}^{-} 1,2, HCO_{3}^{-} 25,0, SO 1,2 y glucosa 11,5, ácido ascórbico 0,3 y EDTA-2Na 0,03. Durante el período para la captación del transmisor marcado pargilina (12 mmol) estuvo presente en la solución de Krebs para inhibir la actividad de MAO.

Después de la captación de ^{3}H-noradrenalina, el tronco encefálico se fijó en un baño de órganos que contiene 5 ml de solución de Krebs (37ºC). El tronco encefálico se lavó después a una velocidad de 8 ml/min con solución de Krebs saturada con oxígeno que contenía 0,03 mmol/l de cocaína. Después de 100 minutos, la velocidad de infiltración se redujo a 4 ml/min y se modificó la solución de Krebs para que contuviera también 0,05 mmol/l de corticosterona. El experimento se llevó a cabo en la presencia de cocaína y corticosterona 8 en esta condición, el 86% de ^{3}H-noradrenalina no se metaboliza y se utiliza tanto en neuronas como las otras células). El fraccionamiento del infiltrado se llevó a cabo cada 3 minutos. Se determinó la adición de 1 ml de infiltrado a 5 ml de Aquasafe 300 P (Zinsser), y la cantidad de ^{3}H-noradrenalina liberada durante cada período de 3 minutos se determinó usando un contador de centelleo (Beckman LS-900). Las cantidades de serotonina y dopamina también se determinaron de la misma manera. El tronco encefálico se estimuló con pulsos rectangulares (3 Hz, 1 ms 60 V) durante 3 minutos. Al comienzo del experimento, los tres períodos de descanso de fracción se procesaron antes de la primera estimulación. Después se designaron siete períodos de descanso de fracción entre la estimulación. Los compuestos de la invención se disolvieron en tampón de infiltrado y se prepararon las soluciones de 0,5, 1, 2,5 y 5 \mug/ml. El tampón que contenía los compuestos de la invención se infiltraron durante 3 minutos antes de la electroestimulación. Los resultados se muestran en la Fig. 1.

Como se muestra en la Fig. 1, el compuesto de la invención se confirmó que potenciaba la liberación de noradrenalina, serotonina y dopamina mediante el incremento de la exocitosis, cuando se proporcionó electroestimulación a las células neuronales. Además, los efectos del compuesto de la invención se encontraron en menor dosis que la forma (+) y compuesto racémica, como se muestra en la tabla 1.

TABLA 1 Dosis mínima (\mug/ml) del compuesto de la invención que provoca la liberación de noradrenalina, opamina y serotonina del tronco encefálico estimulado eléctricamente

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Ejemplo 3

Los efectos sobre la tarea de evasión condicionada en la caja de lanzaderas

Se usó el procedimiento descrito en Life Sci., 58, 817 - 827 (1996). Se analizaron los efectos sobre el reflejo de evasión condicionada (CAR) en la caja lanzadera usando ratas machos y hembras (que pesan 200 - 220 g) cuyas capacidades de aprendizaje se redujeron mediante la administración de tetrabenazina. El instrumento se construyó, de acuerdo con el dispositivo descrito en Psychopharmacologia 10, 1 - 5 (1996). Las ratas machos y hembras (que pesan 200 - 220 g) se entrenaron para cruzar la barrera en las condiciones de estímulo (CS, destello de luz y sonidos de timbre). Si fracasaban al hacerlo, se castigaban con un choque en la pata (1 mA) que era un estímulo no condicionado (US). Si las ratas fracasaban para responder en 5 segundos a US, se anotó como un fallo de escape (EF). Además, el comportamiento no correspondiente a esta condición se anotó como una reacción (IR). Las ratas se entrenaron con 10 ensayos al día durante 5 días. Cada ensayo se llevó a cabo con un intervalo de 15 segundos. Se administró por vía subcutánea solución salina de tetrabenazina a una dosis de 1 mg/kg 1 hora antes del ensayo. después la solución de los compuestos de la invención se administró a dosis de 1, 2, 2,5 y 5 mg/kg s. c., de manera simultánea con tetrabenazina. Los números de CAR, EF e IR se contaron automáticamente usando el análisis de una vía de varianza (ANOVA). Los resultados se muestran en la Fig. 2.

Como se muestra en la Fig. 2, el compuesto de la invención mejoró significativamente la función aprendizaje reducida de las ratas administradas con tetrabenazina. El efecto del compuesto de la invención se observó en dosis mucho menor que el compuesto de isómero (+) o racémico, como se muestra en al Tabla 2. Se considera que estos compuestos pueden tener efectos antidepresivos, debido a que EF disminuyó significativamente. Además, el compuesto de la invención no cambió significativamente los IR que significa excitación en estimulación no condicionada y se relaciona con el comportamiento anormal, por lo tanto el compuesto no tiene excitación de tipo estimulante.

TABLA 2 Dosis mínima (mg/ml) del compuesto de la invención, la forma (+) o compuesto racémico que provoca reflejos de evasión condicionada (CAR) en ratas tratadas con tetrabenazina en la caja lanzadera

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Ejemplo 4

Medición de aminas biogénicas liberadas del tronco encefálico

Se usó el procedimiento descrito en Life, 56, 611 - 620 (1996). Después de que se decapitaran las ratas Wistar, se aislaron los tejidos del cerebro apropiados (striatum, sustancia nigra, tuberculum olfactorium, locus coeruleus y rafe) rápidamente y se sumergieron en solución de Krebs oxigenada (95% de O_{2}, y 5% de CO_{2}) a 37ºC. La composición de la solución de Krebs fue como sigue en mmol/l: NaCl 111; KCl 4,7, Ca^{2+} 2,5, MgSO_{4} 1,64, NaHCO_{3} 25, KH_{2}PO_{4} 1,2, glucosa 12 mg/l, ácido ascórbico y 20 mg/l de EDTA-2Na. Las preparaciones, sumergidas en un baño de órganos, fueron como sigue: 1) cuatro piezas de striatum (cada mitad), 2) cuatro piezas de sustancia nigra, 3) cuatro piezas de tuberculum olfactorium, 4) ocho piezas de locus coeruleus, 5) ocho piezas de de rafe. Después de incubar el tejido durante 20 minutos, se cambió la solución de Krebs. Después el tejido se sumergió durante 20 minutos en la solución de Krebs que contenía los compuestos de la invención, se cuantificó la amina biogénica liberada durante este período. Los compuestos de la invención, el isómero (+), el compuesto racémico y compuesto de control, se disolvieron respectivamente en solución salina, y se administraron por vía subcutánea 30 minutos antes de la disección de las muestras de cerebro. En el caso de noradrenalina y dopamina, las muestras se purificaron en microcolumnas (BHD Chemicals Ltd) cargada con 60 mg de alúmina de acuerdo con el procedimiento descrito en J. Pharmacol. Exp. Ther, 138, 360 - 372 (1962). En el caso de serotonina, las muestras se purificaron en 15 mg de microcolumnas de Sephadex G-10 (Pharmacia). Se cuantificaron la dopamina, noradrenalina y serotonina mediante cromatografía líquida de alta resolución (módulo de datos Waters 746) con detección electroquímica (detector electróquímico Waters 460). Se usó una columna Waters Resolve 5 \mu Spherical C_{18} 3,9 x 150 mm como columna de separación y trietanol amina - tampón fosfato (pH 5,2), que contiene 200 mg/l de octano sulfonato de sodio y 18 mg7l de EDTA-2Na con acetonitrilo al 6%, se usó como fase móvil. La cantidad de amina apropiada liberada durante 20 minutos se anotó como nmol/g de tejido. Las diferencias entre medias se ensayaron usando el ensayo de t de Students. El nivel significativo se estableció a P < 0,05. Los resultados se muestran en la Tabla 3.

Aunque los compuestos de la invención, el compuesto isómero y racémico respectivamente incrementaban la liberación de amina biogénica, los compuestos de la invención mostraron la eficacia a una concentración inferior a la de la forma (+) y el compuesto racémico, como se muestra en al tabla 3.

TABLA 3 Cantidad de aminas biogénicas liberadas de los tejidos del cerebro (nmol/g de tejido, 20 min)

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Ejemplo 5

Efecto de la monoamina oxidasa de tipo - B (MAO-B)

Después de que los ratones machos C57B1/6 se decapitaron, se aisló inmediatamente el cerebro entero. Las muestras de cerebro se pesaron, y se homogeneizaron en 0,2 mol/l de tampón fosfato potasio (pH 7,5) que contenía EDTA-2Na mediante un homogeneizador. Después de que el homogenato se centrifugara a 2.00 rpm, el sobrenadante se centrifugó a 18.000 rpm (40.000 g) durante 30 minutos. Se volvió a suspender el sedimento de la misma manera. Después, el sedimento se volvió a suspender en el tampón anterior para ser una solución de enzima. Todo el procedimiento se llevó a cabo a 4ºC.

Se mezclan el sustrato marcado con ^{14}C (^{14}C-feniletilamina) y la solución de enzima de ratones en un tubo de ensayo, se incubaron durante 30 minutos a 37ºC, y se detuvo la reacción con 20 \mul de 6 mol/l de HCl. Se extrajo el producto de reacción con tolueno - acetato de etilo (1 : 1), y se midió la radiactividad usando un contador de centelleo. Después, se calculó la actividad inhibidora de MAO-B. Los resultados se muestran en la Tabla 4. la actividad inhibidora de cada compuesto en 10^{-5} mol/l estaba por debajo del 50%, como se muestra en la Tabla 4. Esto sugería que el compuesto de la invención no tenía acción inhibidora de MAO-B.

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TABLA 4 Efectos inhibidores de MAO-B de cerebro de ratones en la concentración de 10^{-5} mol/l

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Ejemplo 6

Las afinidades a los receptores de \alpha_{1}, _{ }\alpha_{2}, \alpha_{1}, \alpha_{2}, 5-HT_{1} y 5-HT_{2}

Se preparó la solución del receptor como sigue. Después de que se decapitaron las ratas, el cerebro se aisló inmediatamente y se pesó. Después, se homogeneizaron las muestras de cerebro y después en diez volúmenes de 0,35 mol/l de sacarosa enfriada con hielo (pH 7,4) usando un homogeneizador de vidrio con un almirez de Teflón, que se removió por motores. El homogenato se centrifugó a 4ºC a 900 x g durante 10 minutos y el sobrenadante, además, se volvió a centrifugar a 4ºC a 22.000 x g durante 20 minutos. El precipitado se suspendió con la adición de 5 mmol/l de solución de tampón fosfato (pH 7,4). después de que la suspensión se incubará a 37ºC durante 30 minutos, la suspensión se volvió a centrifugar a 4ºC a 20.000 x g durante 20 minutos. El precipitado se volvió a suspender en 10 ml de 5 mmol/l de solución de tampón fosfato (pH 8,0) para que fuera la solución del receptor.

Se usó ^{3}H-prazocina como un ligando. ^{3}H-prazocina de 0,25 nmol/l, el compuesto de la invención y la solución del receptor, que se prepararon respectivamente en 5 mmol/l de tampón fosfato (pH 8), se colocaron en el tubo y la mezcla se incubó a 25ºC durante 90 minutos. Además, la unión no específica se evaluó con un valor de unión de ^{3}H-prazocina en presencia de 0,1 \mumol/l de prazocina. La unión de ensayo se llevó a cabo como sigue. Después la ^{3}H-prazocina unida (tipo de unión: B) al receptor, solamente el tipo de unión de ^{3}H-prazocina se recogió usando un separador B/F (Brandel, Estados Unidos) con un filtro de fibra de vidrio (tamaño de poro: 0,5 \mum, Whatman GF/C) y el tipo libre de prazocina (tipo libre: F) se retiraron. El filtro de fibra de vidrio que absorbe el tipo de unión de ^{3}H-prazocina, se lavó con solución salina enfriada con hielo y se transfirió a un vial. Después 10 ml de cóctel de centelleo se colocó, se midió la radiactividad. La afinidad de los compuestos de la invención al receptor \alpha_{1} se evaluó a partir de la velocidad de inhibición de unión entre receptor \alpha_{1} y el ligando.

Las afinidades de los compuestos de la invención a los receptores \alpha_{2}, D_{1}, D_{2}, 5-HT_{1} y 5-HT_{2} se determinaron respectivamente de la misma manera, mientras se usó 0,7 nmol/l de ^{3}H-rawolscina, 1,4 nmol/l de ^{3}H-SCH-23390, 2,0 nmol/l de espiperona, 2 nmol/l de ^{3}H-5-HT y 0,5 nmol/l de ^{3}H-ketanserina como cada ligando. Además, se usaron respectivamente 1 \mumol/l de yohimbina, 10 \mumol/l de /+)-butaclamol, 10 \mumol/l de haloperidol, 10 \mumol/l de 5-HT y 1 \mumol/l de ketanserina como sus compuestos de desplazamiento. Si la afinidad de un cierto compuesto a un cierto receptor es alta, la unión entre el radio ligando y el receptor se inhibe. Si la concentración de un cierto compuesto, que es necesario para la inhibición del 50% de unión entre el ligando y los receptores, es mayor que 10^{-6} mol/l, se considera generalmente que su compuesto no tiene la actividad suficiente para mostrar actividad fisiológica. el resultado se muestra en la Tabla 5.

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Los compuestos de la invención, isómero (+) y el compuesto racémico se mostró que no tenían la afinidad que era necesario para mostrar acción fisiológica, como se muestra en la Tabla 5.

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TABLA 5 Afinidad a receptores *

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Los resultados de los ensayos de seguridad se muestran a continuación.

Ejemplo 7

Selección de toxicidad usando hepatocito cultivado primario

Se prepararon los hepatocitos a partir de hígado de rata usando el procedimiento de infiltración de colagenasa y se preparó la suspensión de células que contenía 5 x 10^{5} células/ml. Después de cultivar durante 24 horas, se cambió el medio al medio de Willians E (GIBCO ERL) que contenía 10 ó 100 \mumol/l de los compuestos de la invención. Después de cultivar durante 24 horas, se midió la actividad de la lactato deshidrogenasa (LDH) liberada en el medio.

En los resultados, 100 \mumol/l del compuesto de la invención incrementaron ligeramente la liberación de LDH, pero 10 \mumol/l no lo incrementaron, como se muestra en la tabla 6.

TABLA 6 Control de porcentaje de la liberación de LDH del hepatocito cultivado primario por el compuesto de la invención, la forma (+) o compuesto racémico

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Ejemplo 8

Ensayo de toxicidad en ratones en una sola administración

Se observaron los síntomas generales de los ratones cada día durante dos semanas después de la administración del compuesto de la invención a la dosis de 100 mg/kg p. o. En los resultados, sobrevivieron uno de cada tres ratones.

Referencia a los dibujos

Figura 1. Esta figura muestra que el compuesto de la invención potencia la liberación de noradrenalina, dopamina y serotonina de tronco encefálico aislado mediante electroestimulación. “\sqcup” significa el tratamiento de este compuesto y "\cdot" significa electroestimulación.

Fig. 2. Esta figura muestra la eficacia del compuesto de la invención sobre la capacidad de aprendizaje reducida de ratas a las que se les administra tetrabenazina, cuando se usa la tarea de caja lanzadera.

Claims

1. (-)-1-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentano representado por la siguiente fórmula y las sales de ácidos farmacéuticamente aceptables.

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2. Una composición médica que incluye un compuesto de la reivindicación 1 como un compuesto activo, que se usa para potenciar la liberación de catecolamina en el sistema nervioso central.

3. Una composición médica que incluye el compuesto de la reivindicación 1 como un compuesto activo, que se usa como composición psicotrópica.

4. Una composición médica que incluye un compuesto de la reivindicación 1 como un compuesto activo, que se usa como antidepresivos.

5. Una composición médica que incluye un compuesto de la reivindicación 1 como un compuesto activo, que se usa para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.

6. Una composición médica que incluye un compuesto de la reivindicación 1 como un compuesto activo, que se usa para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.

7. Una composición médica que incluye un compuesto de la reivindicación 1, caracterizada porque la pureza óptica de (-)-1-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentano es especialmente más de 80% de e. e.

8. La composición de acuerdo con la reivindicación 7, caracterizada porque se usa para potenciar la liberación de catecolamina en el sistema nervioso central.

9. La composición de acuerdo con la reivindicación 7, caracterizada porque se usa como composición psicotrópica.

10. La composición de acuerdo con la reivindicación 7, caracterizada porque se usa como antidepresivos.

11. La composición de acuerdo con la reivindicación 7, caracterizada porque se usa para tratar la enfermedad de Parkinson.

12. La composición de acuerdo con la reivindicación 7, caracterizada porque se usa para tratar la enfermedad de Alzheimer.