KR20010033756A

KR20010033756A - 신규의 광학 활성 아미노펜탄 유도체

Info

Publication number: KR20010033756A
Application number: KR1020007007280A
Authority: KR
Inventors: 조세프 크놀; 후미오 요네다; 히로노리 오데; 마사토시 사카에; 토시아끼 모토; 다카시 안도; 세이이치로 시마즈; 카츠에 다카하타
Original assignee: 후지모토 구니요시; 후지모토 쿄다이 가부시키가이샤
Priority date: 1998-10-29
Filing date: 1999-10-15
Publication date: 2001-04-25
Also published as: CN1287554A; ES2285861T3; DK1052259T3; PT1052259E; CN1131858C; HUP0004667A3; DE69935849D1; EP1052259A4; ATE360009T1; AU762995B2; AU6124199A; JP2000136187A; WO2000026204A1; SI20209A; HUP0004667A2; EP1052259A1; CA2317036A1; JP4499208B2; HK1032585A1; CA2317036C

Abstract

(I)

화학식 (I)로 표시되는, 실질적으로 (+)-이성체를 함유하지 않는 광학적으로 순수한 (-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄 및 그의 약리학적으로 허용가능한 산부가염을 포함하는 신규의 화합물을 제공한다. 이들은 신경전달물질인 카테콜아민의 유리작용을 조절적으로 증강하는 CAE 효과(Catecholaminergic Activity Enhancer 효과)가 우수하기 때문에, 향정신약, 파킨슨병, 우울병, 알츠하이머병의 치료약으로서 유용하다.

Description

신규의 광학 활성 아미노펜탄 유도체 {NOVEL OPTICALLY ACTIVE AMINOPENTANE DERIVATIVE}

에틸아민 유도체는 많은 생리 활성을 가진 것으로 알려져 있다. 특히, 방향족 에틸아민 유도체는 중추 신경계에 대한 카테콜아민 치환형 방출 촉진 효과를 가지고 있어 향정신약으로서 유망하다. 그러나, 시냅스 소포 등의 저장 부위로부터의 과잉의 카테콜아민의 방출이 일어나기 쉬워 각성제와 유사한 신경독성이나 행동 이상 등의 부작용이 지적되고 있다. 또한, 과잉의 카테콜아민의 방출을 촉진하는 약제의 연속 투여는 카테콜아민 수용체의 감소를 유도하고 환자의 약제에 대한 응답성을 저하시켜, 결과적으로 충분한 치료 효과를 얻을 수 없어 만족스럽지 않다.

한편, 국제공개 WO88/2254호에 신규의 페네틸아민 유도체가 향정신작용을 가진 것으로 개시되었다. 이 페네틸아민 유도체는 상기 카테콜아민 치환형 방출 촉진 효과와는 달리, 막전위 의존성 엑소사이토시스의 증강에 의한 카테콜아민 방출 촉진 효과라고 하는 새로운 기전에 근거한 카테콜아민 작동계의 활성 증강 효과 (Catecholaminergic Activity Enhancer 효과: CAE 효과)를 갖고 있어 주목되고 있다(Life Science, 58, 945-952 (1996)). 그러나, 그것으로도 행동 이상의 지표인 조건 회피 응답에서 볼 수 있는 시그날간 반응을 증가시키는 작용이 해결되지 않고, 또한 CAE 효과에 대한 높은 선택성을 갖는 약제의 개발이 요망되고 있는 바, 본 발명자들은 이 CAE 효과에 근거한 카테콜아민 유리 촉진 작용을 가지는 신규의 화합물을 개발하여 그것들이 향정신약, 항우울약, 항파킨슨병약 또는 항알츠하이머병약 등의 약제로서 유용함을 발견하였다(일본특허출원번호: 9/247445호).

일본특허출원 9/247445호의 유기 아민 화합물은 탄소 원자에 있어서, 부제 중심을 가지고 있어, 2종의 광학 이성체(에난티오머)의 혼합물인 라세미체이다.

일반적으로, 광학 이성체의 혼합물인 이러한 라세미체 화합물의 약리 작용은 (-) 또는 (+) 어느 한 쪽의 작용이 큰 경우가 빈번하며, 이러한 광학 이성체의 분할에는 디아스테레오머의 염이나 유도체로 유도하여 광학 분할하는 방법이 이용되고 있다. 그러나, 라세미체인 일본특허출원 9/247445호에 기재된 화합물은 유연한 (flexible) 치환기를 가지고 있기 때문에, 예상된 2종류의 광학 이성체를 이러한 광학 분할법에 의해 분할하는 것은 용이하게 달성할 수 없었다.

그래서, 일본특허출원 9/247445호에 기재된 유기 아민 화합물을 용이하게 광학 분할하고, 예측되는 2종류의 광학 이성체를 얻는 것, 및 이러한 광학 이성체의 약리 활성을 스크리닝하여 보다 유효한 의약 조성물을 제공하는 것이 본 발명의 목적이다. 또한, CAE 효과가 특히 우수한 향정신약, 항우울약, 항파킨슨병약 또는 항알츠하이머병약 등의 약제를 제공하는 것도 본 발명의 목적이다.

본 발명은 의약, 특히 향정신약, 항우울약, 항파킨슨병약 및 항알츠하이머병약으로서 유용한 신규의 광학 활성 아미노펜탄 유도체, 즉 실질적으로 (+)-이성체를 함유하지 않는 (-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄 및 그의 약리학적으로 허용가능한 산부가염에 관한 것이다.

발명의 개시

본 발명에 따르면, 상기 발명의 목적이 하기식으로 표시되는 광학적으로 순수하고, 신규한 (-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄 및 그의 약리학적으로 허용가능한 산부가염에 의해 달성될 수 있다.

본 발명자들은 라세미체인 향정신약, 항우울약, 항파킨슨병약 및 항알츠하이머병약 등의 의약으로부터 광학적으로 순수하고 유용한 에난티오머를 단리하는 연구를 계속하여 온 바, 일본특허출원 9/247445호의 화합물의 광학 활성체의 분리를 시도하고, 각종 광학 분할을 검토한 결과, 하기 실시예 1에 기재된 바와 같은 특정의 광학 활성 컬럼을 사용한 고속 액체 크로마토그래피(HPLC)을 사용하여 분할할 수 있었다. 이렇게 하여 수득된 신규의 광학 활성 유도체 및 그의 산부가염이 우수한 CAE 효과에 근거한 향정신작용, 항우울작용을 갖는 것을 발견하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

(-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄을 포함한 일본특허출원 9/247445호에 기재된 다수의 화합물은 현시점에서는 미공개의 화합물이고, 이러한 라세미체 유기 아민 화합물의 광학 분할법, 광학 이성체의 약리 작용은 알려져 있지 않기 때문에, 이들 중에서 실질적으로 (+)-체를 함유하지 않는 (-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄이 매우 우수한 CAE 효과를 가지는 것은 전혀 예기할 수 없는 것이다.

본 발명을 실시하기 위한 가장 바람직한 형태

본 발명의 화합물은 일본특허출원 9/247445호에 기재된 화합물 중 특정한 화합물인 (-)에난티오머이지만, 본원 명세서에 있어서, "실질적으로 (+)-이성체를 함유하지 않는다"는 말은 광학 순도 80%ee 이상인 것을 의미하고, 바람직하게는 90%ee 이상의 광학 순도인 것을 의도한다. 실질적으로 (+)-이성체를 함유하지 않는 (-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄은 일본특허출원 9/247445호의 명세서에 언급되어 있는 대응하는 라세미체에 비하여, 극히 우수한 약리 활성을 가지고 있다.

본원에서, 산부가염으로서는 약제학적으로 허용가능한 것이 바람직하고, 염산, 황산, 브롬화수소산, 아세트산, 메탄설폰산 등과 같은 무기산, 또는 글루콘산, 타르타르산, 말레산, 푸마르산, 석신산, 말산, 시트르산, 만델산 등의 유기산과의 염을 구체적인 예로서 들 수 있다.

본 발명의 화합물 및 그의 산부가염은 그들이 갖는 강력한 카테콜아민 활성 증강 작용(CAE 작용)의 결과로서 향정신작용 등의 약리 작용을 갖고, 항파킨슨병약, 항우울약, 향정신약 등의 의약으로서 사용할 수 있다.

랫트의 뇌간을 크렙스 용액에 침지하고, 정지 전위시 및 전기 자극시의 카테콜아민 방출량을 측정하면, 본 발명의 화합물은 정지시에는 방출량을 변화시키지 않고, 자극시에만 유의하게 증가시킨다. 본 발명의 화합물에 있어서, 이 작용은 CAE 활성 화합물로서 이미 일본특허출원 9/247445호 명세서에 언급되어 있는 라세미체인 화합물에 비해 매우 강한 것이다. 또한, (+)체에 있어서는, 라세미체와 동등 수준의 작용을 나타낸다. 또한, 랫트에게 카테콜아민 고갈제인 테트라베나진을 투여하여 학습 능력을 저하시킨 후 조건 회피 반응을 보면, 본 발명의 화합물의 이성체인 (+)체는 라세미체와 동등한 수준에서 랫트의 학습 능력을 유의하게 회복시켰다. 그러나, 본 발명의 화합물에 있어서는, (+)체나 라세미체에 비해 매우 낮은 용량에서 테트라베나진 투여 랫트에 있어서 조건 회피 반응, 즉 학습 능력을 유의하게 회복시킨다.

이러한 실험으로부터, 본 발명 물질의 작용은 활동 전위와 전달물질 방출에 관련된 자극, 즉 신경 세포내 Ca²⁺농도의 증가에 기인한 엑소사이토시스의 증강에 의한 카테콜아민 방출 촉진 작용인 것으로 판명되었다. 또한, 카테콜 치환형 유리 촉진제와 같은 행동 이상이나 카테콜아민 신경 종말의 아민 고갈을 유도시키지 않는, 생리적인 작용 기전을 가진 점이 종래의 화합물과는 다르다.

본 발명의 화합물 및 그의 약리학적으로 허용가능한 산부가염을 상기 의약으로서 사용하는 경우, 통상 담체, 부형제, 희석제, 용해보조제 등과 혼합하여 정제, 산제, 과립제, 캅셀제, 시럽제, 주사제 등의 형태로 경구적 또는 비경구적으로 안정하게 투여할 수 있다. 투여량은 환자의 증상, 연령, 체중 등에 따라 변화할 수 있으나, 통상 성인 1일 경구 투여로 0.1 내지 100mg의 범위에서, 1회 또는 수회에 걸쳐 투여할 수 있다.

이하에 본 발명의 화합물에 관하여 구체적으로 설명한다.

실시예 1

(-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄 염산염의 제조

40.8mg/ml의 (±)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄(라세미체) 115㎕를 직접 HPLC에 주입하였고 하기의 조건에서 광학 분할을 시행하였다.

HPLC: 시마즈(島津)제 LC-6AD형

컬럼: CHIRALPACK AD 20㎜ø×250㎜(DAICEL 화학공업제)

이동상: 헥산: 이소프로판올: 트리플루오로아세트산= 100: 2: 0.1

유량: 12.0ml/min

검출기: 시마즈(島津)제 SPD-10A 형 UV/VIS DETECTOR(280㎚)

온도: 실온

수득된 (-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄의 유상물을 무수 에탄올에 용해하였고, 냉각 하에서 염화수소로 포화된 에테르 용액을 가하여 염산염으로 변환시켜 (-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄 염산염을 수득하였다.

융점: 165.0 내지 166.0℃

IR: 3425, 2970, 2870, 2780, 2735, 2690, 2520, 2430, 1605, 1590,

1472, 1455, 1255, 1167, 942, 805, 770, 760 ㎝^-1

원소분석: C₁₆H₂₃NO·HCl로서

이론치 C: 68.19, H: 8.58, N: 4.97 (%)

실측치 C: 68.07, H: 8.48, N: 4.98 (%)

광학 순도: 93%ee

비선광도:=-4.08(c=4.0, 메탄올)

참고예

(+)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄 염산염((+)-이성체)의 제조

실시예 1의 광학 분할로 수득된 (+)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄의 유상물을 무수 에탄올에 용해하였고, 냉각 하에서 염화수소로 포화된 에테르 용액을 가하여 염산염으로 변환시켜 (+)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄 염산염을 수득하였다.

융점: 170.0 내지 171.0℃

IR: 3425, 2970, 2870, 2790, 2735, 2700, 2515, 2425, 1607, 1590,

1472, 1455, 1250, 1175, 945, 802, 770, 760 ㎝^-1

원소분석: C₁₆H₂₃NO·HCl로서

이론치 C: 68.19, H: 8.58, N: 4.97 (%)

실측치 C: 67.90, H: 8.44, N: 4.98 (%)

광학 순도: 100%ee

비선광도:=+4.01(c=4.0, 메탄올)

그 다음에, 약리 시험의 결과를 나타낸다.

실시예 2

전기 자극에 의한 활동 전위 상태에서의 랫트의 적출 뇌간으로부터의 생체 아민의 유리 작용

Life Science, 58, 2101-2114 (1996)에 기재된 방법을 사용하여, 체중 280 내지 350g의 수컷 랫트의 후두부를 강타하여 기절시켰고, 뇌간(평균중량 약 800mg)을 적출하여 95% O₂/5% CO₂로 통기시킨 37℃의 크렙스 용액에 30분간 침지한 후, 20㎕의³H-노르아드레날린(Amersham제 30-50Ci/mmol 1-[7,8-³H]노르아드레날린)을 검체에 가하여 45분간 방치하여³H-노르아드레날린을 섭취시켰다. 크렙스 용액의 조성(mmol/l)은 Na⁺137.4, K⁺5.9, Ca²⁺2.5, Mg²⁺1.2, Cl^-120.2, H₂PO₄ ^-1.2, HCO₃ ^-25.0, SO₄ ^2-1.0, 글루코오스 11.5, 아스코르브산 0.3, 및 EDTA-2Na 0.03으로 하였고, 표준 물질의 섭취기간 동안 MAO-B 활성을 저해하기 위하여 파르길린(12mmol)을 크렙스 용액에 가하였다.

³H-노르아드레날린을 섭취시킨 후, 뇌간을 5ml의 크렙스 용액(37℃)을 함유한 오르간 배드(organ bath)중에서 고정하였다. 그 다음에, 뇌간을 0.03mmol의 코카인을 함유하는 산소로 포화된 크렙스 용액으로 8ml/min의 속도로 세정하였다. 100분 후, 관류 속도를 4ml/min으로 감소시켰고, 또한 크렙스 용액을 0.05mmol의 코르티코스테론을 함유하는 것으로 변경하여 코카인과 코르티코스테론의 존재 하에서(이 상태에서는³H-노르아드레날린의 86%는 대사되지 않고 신경 내에도 신경 외에도 섭취되지 않는다)실험을 수행하였다. 관류액의 분별은 3분 마다 행하였고, 5ml의 Aquasafe 300 P(Zinsser제)에 관류액을 1ml 가하여, 3분간 방출된³H-노르아드레날린양을 신틸레이션 계수기(Beckmann제 LS-900형)로 측정하였다. 또한, 세로토닌 및 도파민에 관해서도 동일한 방식으로 측정하였다. 전기 자극(3Hz, 1ms, 60V)을 3분간 제공하였다. 실험 개시시에 최초의 전기 자극에 앞서 3회 분별의 휴지 기간을 두었다. 그 후, 7회의 분별의 휴지 기간을 자극과 자극 사이에 두었다. 본 발명의 화합물을 0.5, 1, 2.5, 5㎍/ml가 되도록 관류액 중에 용해하였다. 본 발명의 화합물을 첨가한 관류액은 전기 자극 전에 3분간 관류하였다. 결과를 도 1에 나타낸다.

도 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 화합물은 신경 세포가 전기 자극된 경우에 있어서, 노르아드레날린, 세로토닌 및 도파민의 유리를 촉진하여 엑소사이토시스를 증강하는 것으로 확인되었다. 또한, 표 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 화합물의 이러한 효과는 (+)-이성체 및 라세미체 보다도 매우 낮은 용량에서 발현하는 것으로 나타났다.

실시예 3

셔틀 박스에 있어서 랫트의 조건 회피 반응에 대한 작용

Life Science, 58, 817-827 (1996)에 기재된 방법을 사용하여, 테트라베나진 처리에 의해 학습 능력이 저하된 암수 랫트(200 내지 220g)의 셔틀 박스에 있어서 조건 회피 반응(Conditioned Avoidance Reflex: CARs)에 대한 작용을 검토하였다. 장치는 Psychopharmacologia, 10, 1-5 (1996)에 따라 조립하였고, 체중 200 내지 220mg의 암수 랫트를 사용하여 광 및 버저음에 의한 조건 자극(Conditioned Stimulus: CS)을 주고, 칸막이를 넘도록 훈련시켰다. 만약 실패할 경우, 무조건 자극(Unconditioned Stimulus: US)인 풋 쇼크(1mA)를 주었다. 랫트가 US에 대하여 5초 이내에 반응하지 않으면, 도피 실패(Escape Failure: EFs)로 하였다. 또한, 조건과 무관한 행동량을 시그날간 반응(Intersignal Reactions: IRs)으로 하였다. 테트라베나진을 생리식염액에 용해하여 실험 1시간 전에 1mg/kg의 용량으로 피하투여하였고, CARs, EFs 및 IRs를 자동적으로 측정하였다. 본 발명의 화합물을 생리식염액에 용해하여 테트라베나진괴 동시에 1, 2, 2.5 및 5mg/kg의 용량으로 피하투여하였다. 통계적 유의성은 일원배치분산분석에 의해 해석하였다. 결과를 도 2에 나타낸다.

도 2에 의하면 본 발명의 화합물은 테트라베나진 투여에 의해 유발된 학습 능의 저하를 유의하게 개선시켰고, 표 2에 나타난 바와 같이 본 발명의 화합물의 효과는 (+)-이성체 및 라세미체 보다도 매우 낮은 용량에서 발현하는 것으로 나타났다(CARs). 또한, 도피 실패(EFs)를 유의하게 저하시키기 때문에 항우울작용을 가질 것으로 기대할 수 있다. 또한, 흥분 작용을 나타내는 무조건 자극시의 행동 이상을 나타내는 반응(IRs)에서 유의차가 없기 때문에, 본 발명의 화합물에는 각성제와 같은 흥분 작용이 없는 것으로 나타났다.

실시예 4

뇌조직으로부터 방출된 생체 아민의 측정

Life Science, 56, 611-620 (1995)에 기재된 방법에 따라, Wistar계 랫트를 단두시킨 후, 즉시 뇌조직(선조체, 흑질, 후결절, 청반핵 및 봉선핵)을 적출하여 95% O₂/5% CO₂로 통기시킨 37℃의 크렙스 용액에 침지하였다. 크렙스 용액의 조성 (mmol/단위)은 NaCl 111, KCl 4.7, CaCl₂2.5, MgSO₄1.64, NaHCO₃25, KH₂PO₄1.2, 글루코오스 12, 아스코르브산, 및 20mg/l EDTA-2Na로 하였다. 선조체, 흑질 및 후결절은 4등분, 청반핵 및 봉선핵은 8등분으로 하여 항온조에 침지하였다. 목적하는 조직을 20분간 배양한 후, 크렙스 용액을 교체하였고, 본 발명의 화합물을 용해시킨 크렙스 용액에 조직을 20분간 침지하여, 그 시간 내에 방출된 모노아민의 양을 측정하였다. 본 발명의 화합물, 및 (+)-이성체, 라세미체의 대조물질을 생리식염액에 용해하여 뇌적출 30분 전에 피하 투여하였고, 노르아드레날린 및 도파민을 측정하기 위하여 J. Pharmacol. Exp. Ther., 138, 360-372 (1962)에 기재된 방법에 의하여 시료를 60mg의 알루미나를 함유한 마이크로컬럼(BDH Chemicals제)으로 정제하였으며, 세로토닌을 측정하기 위하여 시료 15mg을 세파덱스 G-10 마이크로컬럼 (Pharmacia제)으로 정제하였다. 도파민, 노르아드레날린, 세로토닌은 전기화학 검출기(Waters제 460형 ECD)가 장착된 고속 액체 크로마토그래피(Waters제 746형)에 의하여 측정하였다. 분리 컬럼은 Waters Resolve(5μ Spherical C18 3.9×150㎜)를 사용하였고, 이동상은 6% 아세토니트릴에 200mg/l 옥탄설폰산 나트륨, 18ml/l EDTA-2Na를 첨가한 pH 5.2의 트리에틸아민-인산 완충액을 사용하였다. 각각의 아민의 방출량은 20분간 방출된 nmol/g(조직)으로 하여 나타냈다. 평균치의 차는 Student's t-검정에 의해 검정하였고, 유의 수준은 p＜0.05로 하였다. 결과를 표 3에 나타낸다.

표 3에 나타난 바와 같이, 본 발명의 화합물, 그의 (+)-이성체 및 라세미체 어느 쪽에 있어서도 생체 아민의 유리가 인정되지 않았으나, 본 발명의 화합물은 (+)-이성체 및 라세미체 보다도 낮은 용량에서 작용이 인정되었다.

실시예 5

B형 모노아민옥시다제(MAO-B)에 대한 작용

수컷 마우스(C57BL/)를 단두하였고, 전뇌를 신속히 적출하여 중량을 측정한 후, 1.0% EDTA-2Na를 함유하는 0.2M 인산 칼륨 완충액(pH 7.5)을 가하였으며, 세포파쇄기로 균질화하였다. 그 후, 고속냉각원심기로 2000rpm으로 20분간 원심분리하였고, 그의 상등액을 분리용초원심기로 18,000rpm(40,000G)으로 30분간 원심분리하였다. 펠릿을 재현탁시켰고, 동일한 조건에서 초원심분리하였다. 수득된 펠릿을 상기 완충액으로 재현탁하여 이를 효소액으로 하였다. 모든 단계는 4℃에서 수행하였다.

¹⁴C 표지된 기질(¹⁴C-페닐에틸아민)과 마우스로부터 수득된 효소액을 튜브에서 혼합하였고, 37℃에서 30분간 배양한 후, 6N 염산 20㎕를 가하여 반응을 정지시켰다. 400㎕ 톨루엔-에틸 아세테이트(1:1)로 반응 생성물을 추출하였고, 액체 신틸레이션 계수기로 방사능을 측정하여 MAO-B의 활성을 산출하였다. 결과를 표 4에 나타낸다. 표 4에 나타난 바와 같이, 10^-5M에서 어떠한 화합물에 있어서도 저해율이 50% 이하였다. 이것으로 본 발명의 화합물이 MAO-B 저해 작용을 나타내지 않는 것으로 확인되었다.

실시예 6

신경 세포 수용체 α₁, α₂, D₁, D₂, 5-HT₁및 5-HT₂에 대한 친화성

수용체 용액은 하기와 같이 조제하였다. 랫트를 단두한 후, 즉시 뇌를 적출하여 중량을 측정하였다. 그의 중량의 10배량의 빙냉 0.32M 수크로오스 용액(pH 7.4)중에서 균질화시켰고(모터 회전식 테플론제 막자가 장착된 유리제 균질화기), 균질화된 용액을 만들어 4℃, 900×g로 10분간 원심분리하였다. 수득된 상등액을 4℃, 22000×g로 20분간 원심분리하였고, 침사를 5mM 인산 완충액(pH 7.4)을 가하여 현탁시켰다. 이 현탁액을 37℃에서 30분간 배양한 후, 다시 4℃, 20000×g로 20분간 원심분리하고, 그의 침사에 5mM 인산 완충액(pH 8.0) 10ml를 가하여 현탁시켜 수용체 용액으로 하였다.

리간드로서³H-프라조신을 사용하였고, 5mM 인산 완충액(pH 8.0)으로 조제한 0.25nM³H-프라조신, 본 발명의 화합물 및 수용체 용액을 튜브에 첨가하여 25℃에서 90분간 배양을 하였다. 또한, 0.1μM 프라조신의 공존하에서³H-프라조신의 결합치를 비특이적 결합으로 하였다. 반응은 다음과 같이 수행하였다. 수용체와 결합한³H-프라조신(결합형: B)과 유리형의³H-프라조신(유리형: F)을 B/F 분리 장치 (Brandel제)에서 유리 섬유 필터(공극 크기: 0.5㎛, Whatman제 GF/C)로 분리하여, 결합형만을 회수하였다. 유리 섬유 필터에 흡착된 결합형은 빙냉 생리식염액으로 세정하였고, 유리 섬유 필터를 바이알 병에 옮겼으며, 신틸레이션 칵테일 10ml를 첨가하여 방사능을 측정하였고, α₁수용체와 그의 리간드와의 결합저해율로부터 본 발명의 화합물의 친화성을 구했다.

α₂, D₁, D₂, 5-HT₁및 5-HT₂에 대한 친화성에 있어서는, 리간드 용액으로서 각각 0.7nM³H-로월신(rauwolscine), 1.4nM³H-SCH-23390 바운드, 2.0nM³H-스피페론, 2nM³H-5-HT 및 0.5nM³H-케탄세린(ketanserin)을 사용하였고, 디스플레이서 용액으로서 각각 1μM 요힘빈, 10μM (+)-부타클라몰, 10μM 할로페리돌, 10μM 5-HT 및 1μM 케탄세린을 사용하였으며, 동일한 방식으로 조작하여 각각의 수용체에 있어서 본 발명의 화합물의 친화성을 구했다. 수용체와의 친화성이 높은 경우, 리간드와 수용체와의 결합을 저해한다. 일반적으로는, 각각의 리간드와 수용체와의 결합을 50% 저해하는데 필요한 몰농도가 10^-6M 정도 이하인 경우에는 생리 활성을 발휘할 정도의 화합물은 아닌 것으로 여겨진다. 결과를 표 5에 나타낸다.

표 5에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물, 그의 (+)-이성체 및 라세미체 중 어느 것에 있어서도 생리 활성을 나타내는데 필요한 친화성은 인정되지 않았다.

이하, 안전성 시험의 결과를 나타낸다.

실시예 7

1차 배양 간세포를 이용한 독성 시험

콜라게나제 관류법에 의하여 랫트로부터 간세포를 채취하여, 5×10⁵세포/ml의 세포현탁액을 조제하였다. 24시간 배양을 행하였고, 배지를 본 발명의 화합물 100μM 및 10μM 함유한 윌리엄즈(William's) E 배지(GIBCO ERL)로 교환하였다. 교환후, 24시간 째에 배지 중에 방출된 젖산탈수소효소(LDH)의 측정을 행하였다. 그 결과, 표 6에 나타난 바와 같이 본 발명의 화합물은 100μM에 있어서, 약간의 LDH의 유리가 인정되었음에도 불구하고, 10μM에서는 LDH의 유리가 인정되지 않았다.

실시예 8

1회 투여에 있어서 마우스의 급성 독성 시험

마우스에 100mg/kg의 본 발명의 화합물 및 그의 이성체를 1회 경구 투여한 후, 2주간의 일반 증상을 관찰하였다. 그 결과, 어떠한 화합물에 있어서도 3례 중 3례 모두 생존하였다.

도면의 간단한 설명

도 1은 전기 자극에 의한 랫트의 적출 뇌간으로부터 노르아드레날린, 도파민 및 세로토닌의 유리에 미치는 본 발명의 화합물의 효과를 나타낸다. 도면 중에서 "└┘"은 본 발명의 화합물의 투여를 나타내고, "·"은 전기 자극을 나타낸다.

도 2는 셔틀 박스 중에서의, 테트라베나진 투여에 의해 학습 능력이 저하된 랫트에 있어서 본 발명의 화합물의 효과를 나타낸다.

Claims

하기 화학식으로 표시되는, (-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄 및 그의 약리학적으로 허용가능한 산부가염
제 1항의 화합물을 중추 신경계에 있어서 카테콜아민의 방출을 촉진시키기 위한 유효 성분으로서 함유하는 의약 조성물.
제 1항의 화합물을 유효 성분으로서 함유하는 향정신약용 의약 조성물.
제 1항의 화합물을 유효성분으로서 함유하는 항우울약용 의약 조성물.
제 1항의 화합물을 유효 성분으로서 함유하는 항파킨슨병약용 의약 조성물.
제 1항의 화합물을 유효 성분으로서 함유하는 항알츠하이머병약용 의약 조성물.
제 1항의 화합물을 유효 성분으로서 함유하는 의약 조성물에 있어서, (-)-1-(벤조푸란-2-일)-2-프로필아미노펜탄의 광학 순도가 80%ee 이상인 것을 특징으로 하는 의약 조성물.
제 7항에 있어서, 의약 조성물이 중추 신경계에 있어서 카테콜아민의 방출 촉진을 위하여 사용되는 것임을 특징으로 하는 의약 조성물.
제 7항에 있어서, 의약 조성물이 향정신약으로서 사용되는 것임을 특징으로 하는 의약 조성물.
제 7항에 있어서, 의약 조성물이 항우울약으로서 사용되는 것임을 특징으로 하는 의약 조성물.
제 7항에 있어서, 조성물이 항파킨슨병약으로서 사용되는 것임을 특징으로 하는 의약 조성물.
제 7항에 있어서, 조성물이 항알츠하이머병약으로서 사용되는 것임을 특징으로 하는 의약 조성물.