EA027508B1 - Стабильная сухая композиция молочнокислых бактерий - Google Patents

Стабильная сухая композиция молочнокислых бактерий Download PDF

Info

Publication number
EA027508B1
EA027508B1 EA201490185A EA201490185A EA027508B1 EA 027508 B1 EA027508 B1 EA 027508B1 EA 201490185 A EA201490185 A EA 201490185A EA 201490185 A EA201490185 A EA 201490185A EA 027508 B1 EA027508 B1 EA 027508B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
composition
lactic acid
acid bacteria
cells
bacillus
Prior art date
Application number
EA201490185A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201490185A1 (ru
Inventor
Биргитте Иде
Original Assignee
Кр. Хансен А/С
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=46420203&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA027508(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Кр. Хансен А/С filed Critical Кр. Хансен А/С
Publication of EA201490185A1 publication Critical patent/EA201490185A1/ru
Publication of EA027508B1 publication Critical patent/EA027508B1/ru

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/38Other non-alcoholic beverages
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/152Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations containing additives
    • A23C9/1526Amino acids; Peptides; Protein hydrolysates; Nucleic acids; Derivatives thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/152Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations containing additives
    • A23C9/156Flavoured milk preparations ; Addition of fruits, vegetables, sugars, sugar alcohols or sweeteners
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/16Agglomerating or granulating milk powder; Making instant milk powder; Products obtained thereby
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G1/00Cocoa; Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/30Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/32Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G1/40Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds characterised by the carbohydrates used, e.g. polysaccharides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G1/00Cocoa; Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/30Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/32Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G1/42Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins
    • A23G1/423Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins containing microorganisms, enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G1/00Cocoa; Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/30Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/32Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G1/44Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing peptides or proteins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G9/00Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
    • A23G9/32Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G9/34Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds characterised by carbohydrates used, e.g. polysaccharides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G9/00Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
    • A23G9/32Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G9/36Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins
    • A23G9/363Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins containing microorganisms, enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G9/00Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
    • A23G9/32Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G9/38Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing peptides or proteins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/52Adding ingredients
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/065Microorganisms
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18Peptides; Protein hydrolysates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/19Dairy proteins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/20Reducing nutritive value; Dietetic products with reduced nutritive value
    • A23L33/21Addition of substantially indigestible substances, e.g. dietary fibres
    • A23L33/22Comminuted fibrous parts of plants, e.g. bagasse or pulp
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/04Preserving or maintaining viable microorganisms
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G2200/00COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents
    • A23G2200/02COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents containing microorganisms, enzymes, probiotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G2200/00COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents
    • A23G2200/06COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents containing beet sugar or cane sugar if specifically mentioned or containing other carbohydrates, e.g. starches, gums, alcohol sugar, polysaccharides, dextrin or containing high or low amount of carbohydrate
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23GCOCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G2200/00COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents
    • A23G2200/10COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents containing amino-acids, proteins, e.g. gelatine, peptides, polypeptides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/113Acidophilus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/123Bulgaricus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/125Casei
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/131Cremoris
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/137Delbrueckii
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/139Diacetylactis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/143Fermentum
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/147Helveticus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/157Lactis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/165Paracasei
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/173Reuteri
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/175Rhamnosus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/181Salivarius
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/21Streptococcus, lactococcus
    • A23V2400/249Thermophilus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/31Leuconostoc
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/31Leuconostoc
    • A23V2400/317Cremoris
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/31Leuconostoc
    • A23V2400/321Mesenteroides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/41Pediococcus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/41Pediococcus
    • A23V2400/427Pentosaceus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/51Bifidobacterium
    • A23V2400/515Animalis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/51Bifidobacterium
    • A23V2400/531Lactis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/51Bifidobacterium
    • A23V2400/533Longum
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/61Propionibacterium
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • C07K2319/01Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/09Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a nuclear localisation signal

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Pediatric Medicine (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Dairy Products (AREA)

Abstract

Изобретение относится к сухой стабильной композиции молочнокислых бактерий, содержащей от 10до 10КОЕ/г молочнокислых бактерий и защитные агенты для стабилизации композиции, причем композиция включает от 2 до 9 г сахарозы, от 1 до 3 г мальтодекстрина и от 0,75 до 2 г аскорбата Na на 1 г молочнокислых бактерий. Изобретение также относится к молочной смеси для детей, включающей порошковую молочную смесь, содержащую вышеуказанную композицию. Изобретение относится к пищевому продукту и пищевой добавке, содержащей композицию молочнокислых бактерий. Композиция имеет улучшенную устойчивость при хранении представляющих интерес клеток.

Description

Область, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области композиций для молочнокислых бактерий, к способу получения сухих композиций молочнокислых бактерий и к композициям, которые могут быть получены указанным способом.
Уровень техники
Клетки, такие как, например, микроорганизмы, участвуют в многочисленных промышленно релевантных процессах. Например, бактериальные культуры, в частности культуры бактерий, которые в целом классифицируются как молочнокислые бактерии (ЬАВ), существенны при получении всех кисломолочных продуктов, сыра и масла. Культуры таких бактерий могут именоваться заквасочными культурами, и они придают специфические признаки различным молочным продуктам, выполняя ряд функций.
Известно, что многие молочнокислые бактерии обладают пробиотическими свойствами (т.е. они оказывают благоприятный эффект на здоровье людей при употреблении в пищу). В большинстве случаев важной задачей является, чтобы микроорганизмы оставались жизнеспособными после продолжительного хранения для того, чтобы они оказывали свой благоприятный эффект после приема в пищу. Предпринимались попытки, при которых лиофилизированные бактерии смешивались с добавками, которые действуют в качестве влажных барьеров или в качестве протекторов, необходимых для замораживания клеток (так называемые криопротекторы). Различные типы добавок добавляли к микроорганизмам в попытках сделать их более устойчивыми.
Можно сказать, что для некоторых видов применения следует иметь композицию/состав очень устойчивых к хранению молочнокислых бактерий.
Например, если композиция ЬЛВ смешивается с молочным порошком для получения подходящей порошковой молочной смеси для грудных детей, то в целом необходима очень устойчивая при хранении композиция ЬЛВ, по существу, ввиду того, что сам продукт в виде порошковой молочной смеси для грудных детей обычно очень устойчив при хранении и может скармливаться грудным детям в течение достаточно длительного времени после действительной даты его выпуска. Соответственно, если грудной ребенок получает порошковую молочную смесь для грудных детей, например, через 30 недель (или позднее) после даты его выпуска, то очевидно, что композиция ЬЛВ, включенная в порошковую питательную смесь, должна быть достаточно устойчивой при хранении для поддержания жизнеспособности клеток ЬЛВ.
В Международном патенте \70 2010/138522А2 (АДуапсеД ВюпШпОоп Согрогайоп) описана композиция культуры клеток ЬАВ, которая, как указано, полезна для включения в порошковую молочную смесь для грудных детей. Предпочтительная композиция содержит альгинат, инулин, трегалозу и гидролизированный белок (см. табл. 1, абзац [0094]).
Можно сказать, что композиции ЬАВ табл.1 документа \70 2010/138522А2 содержат относительно большое количество того, что может быть названо защитными агентами, т.е. агента, который может помочь повышению устойчивости при хранении клеток молочнокислых бактерий.
Например, можно сказать, что композиции ЬАВ табл.1 документа \70 2010/138522А2 содержат относительно большое количество трегалозы.
В абзаце [0097] документа \70 2010/138522А2 указано: ЬасЮЪасШик Лс|ДорНДи5 (100 г замороженного концентрата из лабораторного продукта брожения) оттаивали при 37°С. Премикс белкового гидролизата (100 г, табл. 1)...
Как известно специалисту в данной области техники, клеточный концентрат ЬАВ, как описано в этом абзаце [0097], может часто содержать около 10% сухого вещества клеток. При таком исходном предположении можно сказать, что сушеная композиция ЬАВ, описанная в этом абзаце [0097], представляет собой композицию ЬАВ, которая содержит примерно в 10 раз больше защитных агентов, чем самих клеток ЬАВ, в соответствии с уровнем техники, можно сказать, что она представляет собой композицию ЬАВ с относительно большим количеством защитных агентов.
Проблема, связанная с такими композициями ЬАВ с относительно большим количеством защитных агентов, может состоять в том, что сушка их самих часто может быть достаточно трудной, например, без значительной инактивации релевантных клеток ЬАВ.
В документе \70 2010/138522А2 описаны способы сушки, например в абзаце [0097] описана композиция ЬАВ, которая, как описано выше, можно сказать представляет собой композицию ЬАВ с относительно большим количеством защитных агентов.
В абзаце [0081] документа \70 2010/138522А2 указано (выделения добавлены): Типичные способы консервирования биологически активных микроорганизмов, таких как живые или ослабленные организмы, включают комбинацию замораживания и вакуумных условий, которые могут привести к повреждению мембран и денатурации клеточных ингредиентов. В документах уровня техники речь идет об использовании более высоких величин вакуумного давления (например, менее чем 100 торр (приблизительно 0,13 атм), добавлении определенных криопротективных агентов, стадий концентрирования для получения густых растворов (сиропа) и/или более высоких исходных температур для предотвращения замораживания.
Можно сказать, что в данном абзаце [0087] документа \70 2010/138522А2 представлено краткое
- 1 027508 изложение сущности общих представлений уровня техники относительно подходящих для этих целей релевантных способов сушки.
Может быть уместным отметить то, что способ сушки, ясно и однозначно описанный в документе \νϋ 2010/138522А2, не включает, например, стадию замораживания для образования твердых замороженных частиц/пеллет.
В документе νθ 2010/138522А2 (Айуапсей ВюпЩгйюп Согрогайоп) описана композиция, содержащая альгинат, инулин, трегалозу и гидролизированный белок (см. табл. 1, абзац [0094]).
Однако еще есть потребность в усовершенствованных композициях, которые способны переносить повышенную влажность/высокую водную активность.
Краткое описание сущности изобретения
Проблема, которую предстоит разрешить в настоящем изобретении, относится к разработке нового способа получения сухой порошковой композиции, содержащей клетки молочнокислых бактерий (ЬАВ) и относительно большое количество защитных агентов, и к получению композиций, которые устойчивы при хранении в течение продолжительного времени во влажных условиях.
В предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г (колониеобразующих единиц на грамм) композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества представленных ниже защитных агентов представлены относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 6 до 9 г трегалозы, от 0,1 до 1 г инулина и от 0,5 до 3 г гидролизированного казеина и тем, что она не содержат соль альгиновой кислоты.
Делается ссылка на представленные в настоящем описании рабочие примеры, где демонстрируется, что устойчивость при хранении клеток ЬАВ ЬасЮЪасШш гйатпокик ЬОО®, которые имеются в продаже от компании СЬг. Нашей А/δ, Ноег8Йо1т, Эеитагк. значительно повышается в композиции по настоящему изобретению. Заявители также провели эксперименты с клетками ЬАВ Ь.са8е1 431® (ЬасЮЪасШш рагаса8е1 подвида рагасакеО, и была также продемонстрирована высокая устойчивость при хранении сухих композиций по настоящему изобретению.
Как показано в рабочих примерах в настоящем описании, новые композиции по настоящему изобретению обеспечивают повышенную устойчивость клеток при хранении. В частности, композиции более устойчивы при повышенной влажности/более высокой водной активности. Настоящее изобретение относится к композициям, содержащим ЬАВ, в порошковой молочной смеси для младенцев с водной активностью 0,3, причем логарифм потери активных клеток составляет меньше 2,5 при хранении при КН (относительной влажности) 30% при 35°С и тестировали после 13 недель хранения. Предпочтительно, логарифм потери активных клеток в композициях составляет меньше 2,5 после 17 недель хранения.
Как демонстрируется в примерах, в отношении устойчивости, по существу, не наблюдается различие между композициями, содержащими и не содержащими альгинат натрия. Однако в отличие от композиций без альгината натрия для композиций с альгинатом натрия, которые были подвергнуты термической обработке, термическая обработка оказала негативное воздействие на устойчивость.
Соответственно, один аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит относительно большое количество защитных агентов, как более подробно описано ниже. Предпочтительно, композиция не содержит соль альгиновой кислоты, такую как альгинат натрия, по причинам, более подробно объясненным ниже.
Как обсуждается в настоящем описании, сухие композиции по настоящему изобретению могут применяться, например, в порошковой молочной смеси для младенцев с высокой водной активностью (а„=0,3) или применения в других продуктах с высокой а„, подобных злакам, батончикам из мюслей или шоколаду.
Решение основано на том, что заявители провели интенсивную работу с многочисленными различными параметрами для сушки таких композиций и идентифицировали, что путем использования способа сушки по настоящему изобретению можно соответствующе высушить такие композиции эффективным образом, который может применяться в промышленном масштабе, с относительно большими количествами композиции ЬАВ, т.е. он может проводиться при относительно низких затратах, и сушка может выполняться в пределах относительно короткого периода времени (например, в пределах от 15 до 30 ч).
Как обсуждалось выше, способ сушки, ясно и однозначно описанный в документе νθ 2010/138522А2, не включает, например, стадию замораживания для образования твердых замороженных частиц/пеллет. Способ сушки по настоящему изобретению также включает другие стадии способа, которые отличаются от того, что ясно и однозначно описано в документе νθ 2010/138522А2.
Например, на стадии первичной сушки (е) способа по первому аспекту изобретения используется вакуумное давление от 0,7 до 2 миллибар (мбар) (что соответствует от 525 до 1500 мторр). Как обсужда- 2 027508 ется в настоящем описании, использование этого диапазона вакуумного давления от 0,7 до 2 мбар можно рассматривать как существенный элемент способа по изобретению. Как обсуждается в настоящем описании, только работая в пределах этого диапазона вакуумного давления от 0,7 до 2 мбар на стадии (е) можно обеспечить получение удовлетворительного способа сушки релевантных для настоящего изобретения ЬАВ.
Использование этого диапазона от 0,7 до 2 мбар на стадии (е) не описано и не предложено в документе \νϋ 2010/138522А2 или любом другом релевантном источнике уровня техники, известном заявителям.
Вкратце, заявители утверждают, что способ сушки по настоящему изобретению представляет значительное усовершенствование относительно способов сушки, ясно и однозначно описанных, например, в документе νθ 2010/138522А2.
Соответственно, первый аспект изобретения относится к способу получения сухой порошковой композиции, содержащей:
(ί) от 108 до 1014 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий (ЬАВ); и (ίί) некоторое количество защитного агента (агентов) от 2 до 40 г, причем количество защитного агента (агентов) представлено относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в сухой композиции, причем способ получения сухой порошковой композиции включает следующие стадии:
(a) ферментации с использованием клеток ЬАВ и сбора клеток для получения концентрата клеток ЬАВ, содержащего клетки ЬАВ и воду, причем концентрат содержит от 108 до 1014 КОЕ/г сухого вещества концентрата клеток молочнокислых бактерий (ЬАВ);
(b) смешивания подходящего количества защитного агента (агентов) с концентратом клеток ЬАВ для образования кашицеобразной суспензии, причем кашицеобразная суспензия содержит некоторое количество защитного агента (агентов) от 2 до 40 г, причем количество защитного агента (агентов) представлено относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в кашицеобразной суспензии, и количества и защитного агента (агентов), и клеток молочнокислых бактерий измеряются в виде сухого вещества в кашицеобразной суспензии;
(c) замораживания кашицеобразной суспензии для образования твердых замороженных частиц/пеллет;
(б) загрузки лотка замороженными частицами/пеллетами в количестве от 2 до 50 кг/м2 для получения релевантного для настоящего изобретения материала на лотке;
(е) первичной сушки материала на лотке при вакуумном давлении от 0,7 до 2 миллибар (мбар), при температуре материала, не настолько высокой, чтобы более чем 75% клеток ЬАВ инактивировались, и в течение периода времени, пока по меньшей мере 90% воды кашицеобразной суспензии стадии (Ь) ни будет удалено; и (ί) вторичной сушки материала стадии (е) при вакуумном давлении от 0,01 до 0,6 миллибар (мбар), при температуре материала, не настолько высокой, чтобы более чем 75% клеток ЬАВ инактивировались, и в течение периода времени, достаточного для снижения водной активности (а„) до менее чем 0,30, и, посредством этого, получения сухой композиции, содержащей:
(ί) от 108 до 1014 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий (ЬАВ); и (ίί) некоторое количество защитного агента (агентов) от 2 до 40 г, причем количество защитного агента (агентов) представлено относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в сухой композиции.
Термин защитный агент (агенты) следует в настоящем описании понимать как любой агент, который может помочь повысить устойчивость при хранении представляющих интерес клеток молочнокислых бактерий. В отношении сухой порошковой композиции и способа сушки такой порошковой композиции, описанных здесь, термин защитный агент (агенты) можно также рассматривать как обозначающий любые агенты, присутствующие в самой сухой порошковой композиции, которые сами по себе не представляют собой клетки молочнокислых бактерий (ЬАВ) как таковые.
Как понятно специалисту в данной области техники, в настоящем контексте термин причем количество защитного агента (агентов) представлено относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в сухой композиции означает, что если сухая порошковая композиция первого аспекта, например, содержит 2 г клеток молочнокислых бактерий, то сухая порошковая композиция должна также содержать от 4 до 8 0 г защитного агента (агентов), поскольку в соответствии со способом по первому аспекту требуется, чтобы содержалось от 2 до 40 г защитного агента (агентов) на 1 г клеток молочнокислых бактерий.
Аналогичным образом, как понятно специалисту в данном области, в настоящем контексте термин ниже все количества защитных агентов представлены относительно 1 г активных клеток молочнокислых бактерий в композиции означает, что если композиция, например, содержит 2 г клеток молочнокислых бактерий, то композиция должна, например, также содержать от 4 до 8 г сахарозы.
Поскольку композиция представляет собой сухую порошковую композицию, то для специалиста в данной области техники очевидно, что количества, представленные для отдельных компонентов (например, клеток молочнокислых бактерий и защитных агентов) композиции, измеряются в виде сухого вещества.
Композиция по настоящему изобретению может быть включена в подходящую упаковку, например
- 3 027508 флакон, коробку, ампулу, капсулу и т.д. Как было бы понятно специалисту в данной области техники в настоящем контексте, когда в настоящем описании делается ссылка на массу композиции (например, с использованием термина г композиции), то имеется ввиду масса самой композиции, т.е. не включая возможную массу подходящей упаковки.
Ниже варианты осуществления настоящего изобретения описаны только в качестве примера. Ниже описаны дополнительные сухие композиции, релевантные для настоящего изобретения, причем можно сказать, что каждая из них характеризуется определенными предпочтительными количествами защитных агентов.
Один аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 2 до 5 г сахарозы, от 1 до 3 г мальтодекстрина и от от 0,75 до 2 г аскорбата Να.
Второй аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 5 до 9 г сахарозы, от 1 до 3 г мальтодекстрина и от 0,75 до 2 г аскорбата Να.
Третий аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 3 до 6 г сахарозы, от 4 до 8 г трегалозы и от 0,0 (предпочтительно 0,1) до 0,5 г аскорбата Να.
Четвертый аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 0,5 до 3,5 г мальтодекстрина, от 0,0 (предпочтительно 0,1) до 0,5 г аскорбата Να, от 6 до 9 г трегалозы и от 0,1 до 0,5 г модифицированного крахмала.
Термин модифицированный крахмал хорошо известен специалисту в данной области техники, и специалисту в данной области техники известно, является ли определенный представляющий интерес агент модифицированным крахмалом или нет. Как известно специалисту в данной области техники, агенты в виде модифицированного крахмала, также называемые производными крахмала, получают физической, ферментативной или химической обработкой естественного крахмала. Подходящий для данного изобретения имеющийся в продаже модифицированный крахмал представляет собой имеющийся в продаже продукт в виде модифицированного крахмала Кешу НС-Р.
Пятый аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 6 до 9 г трегалозы, от 0,1 до 1 г инулина и от 0,5 до 3 г гидролизированного казеина.
Шестой аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 0,5 до 3,5 г мальтодекстрина, от 0,0 (предпочтительно 0,1) до 0,5 г аскорбата Να и от 2 до 5 г трегалозы.
Седьмой аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 2 до 5 г сахарозы, от 1,5 до 3,5 г мальтодекстрина и от 0,0 (предпочтительно 0,1) до 0,5 г аскорбата Να.
Восьмой аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 4,5 до 7,5 г сахарозы, от 2,5 до 5,5 г мальтодекстрина и от 0,0 (предпочтительно 0,1) до 0,5 г аскорбата Να.
Девятый аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относи- 4 027508 тельно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 2,5 до 5,5 г мальтодекстрина и от 0,0 (предпочтительно 0,1) до 0,5 г аскорбата Ыа и от 4,5 до 7,5 г трегалозы.
Десятый аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 1,5 до 4,5 г мальтодекстрина и от 0,0 (предпочтительно 0,1) до 0,5 г аскорбата Να и от 3 до 6 г трегалозы.
Одиннадцатый аспект изобретения относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 0,5 до 3 г мальтодекстрина и от 0,0 (предпочтительно, 0,1) до 0,5 г аскорбата Να м от 1 до 4 г трегалозы.
Результаты экспериментов продемонстрировали, что все описанные выше сухие композиции имеют очень хорошую устойчивость при хранении.
В целом, определенное предпочтительное промышленное применение композиции по настоящему изобретению, содержащей клетки молочнокислых бактерий (ЬЛВ), обычно зависело бы от конкретных характеристик рассматриваемых клеток.
Композиции можно вводить человеку, животному или рыбе в целях оздоровления. Это в целом наиболее уместно, если клетка обладает пробиотическими свойствами и особенно уместно, когда клетка представляет собой пробиотическую клетку ЬЛВ.
Соответственно, дополнительный аспект изобретения относится к способу введения клеток молочнокислых бактерий (ЬЛВ) человеку, животному или рыбе, включающему введение по меньшей мере одной сухой композиции по любому из описанных здесь отдельных аспектов сухой композиции.
Подробное описание изобретения
Сухая порошковая композиция.
Специалисту в данной области техники понятно, что представляет собой сухая композиция в настоящем контексте. Для количественного описания этого водная активность (а„) описанной здесь сухой порошковой композиции составляет менее чем 0,30. Предпочтительнее, водная активность (а„) описанной здесь сухой порошковой композиции составляет менее чем 0,25, еще предпочтительнее менее чем 0,20 и наиболее предпочтительно водная активность (а„) описанной здесь сухой порошковой композиции составляет менее чем 0,15. Опытному специалисту известно, как определить водную активность (а„) сухой композиции по настоящему изобретению.
Специалисту в данной области техники известно, как получить сухую композицию по настоящему изобретению. Получение сухой композиции по настоящему изобретению включает, например, смешивание клеточной культуры с защитным агентом. Вторая стадия включает сушку указанной смеси. Сушка может осуществляться сублимацией, распылительной сушкой, модифицированной распылительной сушкой и/или вакуумной сушкой. Возможны другие средства для сушки.
В случае лиофилизационной или вакуумной сушки, смесь предпочтительно формуют в пеллеты способами, которые известны в данной области техники. Одним способом может быть предоставление возможности каплям смеси падать на жидкий азот. Другой способ образования пеллет может представлять собой экструзию. Указанные пеллеты могут затем подвергаться сушке с использованием указанных выше способов сушки. Предпочтительно, композиции сушат, используя описанный здесь способ получения сухой порошковой композиции.
Сухие композиции могут быть представлены в порошкообразной форме.
Масса сухой композиции (например, называемая г композиции) в целом, зависит от различных факторов, таких как применение композиции (например, для получения порошковой молочной смеси для грудных детей, как обсуждается ниже).
Масса сухой композиции по изобретению может, например, составлять от 1 г до 1000 кг.
Например, если сухую композицию предстоит применять в качестве продукта для грудных детей, то сухую композицию в целом смешивают с молочным порошком и другими добавками для получения продукта в виде порошковой молочной смеси для грудных детей, содержащей клетки молочнокислых бактерий.
Как известно специалисту в данной области техники, получение порошковой молочной смеси для грудных детей может осуществляться в достаточно большом масштабе, например, смешиванием от 1 до 10 кг сухой композиции по настоящему изобретению с подходящим количеством молочного порошка и другими добавками.
Соответственно, может быть предпочтительно, чтобы масса сухой композиции по настоящему изобретению составляла от 50 г до 10000 кг, такую как, например, от 100 г до 1000 кг или от 1 до 5000 кг или от 100 до 1000 кг.
- 5 027508
Как очевидно для специалиста в данной области техники в настоящем контексте, для получения на стадии (ί) способа по первому аспекту сухой порошковой композиции с массой, например, 100 кг, необходимо использовать соответствующие большие количества концентрации клеток ЬАВ на стадии (Ь) первого аспекта и защитного агента (агентов) на стадии (с) первого аспекта.
Сухая порошковая композиция по изобретению может быть инкапсулирована, например, в желатиновую капсулу, или включена в смесь, например, в виде таблеток или пакетированных доз порошка, подлежащих растворению для приема внутрь. Этот аспект особенно уместен, если композицию предстоит применять в пищевой добавке.
Клетки молочнокислых бактерий.
Может быть предпочтительно, чтобы описанная здесь сухая порошковая композиция содержала от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий (ЬЛБ).
Клетка молочнокислых бактерий (ЬЛБ) может в принципе представлять собой любую пригодную представляющую интерес клетку ЬЛБ.
Предпочтительно, клетка ЬЛБ представляет собой пробиотическую клетку.
Выражение пробиотическая клетка обозначает класс клеток (например, микроорганизмов), который определяется как содержащий полезные бактерии пищевой продукт или пищевая добавка, которая оказывает благоприятное воздействие на человека или животное-хозяина путем улучшения микробного баланса в желудочно-кишечном тракте. Известные благоприятные эффекты включают повышение устойчивости колонизации к вредной микрофлоре вследствие потребления кислорода и продукции кислоты пробиотическими организмами. Пример эффективности пробиотически активных организмов в предотвращении избыточного роста потенциальных патогенов и, таким образом, диареи, показан в исследовании, где введение капсул, содержащих жизнеспособные пробиотически активные организмы, туристам, посещавшим Египет, привело к частоте защиты против диареи путешественников 39,4% (В1аск с1 а1. 1989). Обзор пробиотиков и их воздействий на людей и животных можно найти в публикациях Ри11ег, 1989 и 1994.
В настоящем контексте выражение молочнокислые бактерии обозначает группу грамположительных, каталаза-негативных неподвижных микроаэрофильных или анаэробных бактерий, которые сбраживают сахар (включая лактозу) с продукцией кислот, включая молочную кислоту в качестве преимущественно продуцируемой кислоты, уксусную кислоту, муравьиную кислоту и пропионовую кислоту. Ниже описаны ЬЛВ, предпочтительные для настоящего изобретения.
Наиболее промышленно полезные молочнокислые бактерии обнаруживаются среди вида Ьас1ососсик, вида 51гер1ососснк, вида ЕЩегососснк, вида Ьас1оЬасШик, вида ЕенсопокЮс, вида В1ПбоЬас1ег1нт, видов Ρτορίοηί и Ребюсоссик. Соответственно, в предпочтительном варианте осуществления молочнокислые бактерии выбраны из группы, состоящей из этих молочнокислых бактерий.
В предпочтительном варианте осуществления молочнокислые бактерии представляют собой молочнокислые бактерии, выбранные из группы, состоящей из Ьас1оЬасШик гйатпокик, Ьас1ососсик 1асйк подвида 1асйк, Ьас1ососсик 1асйк подвида сгетопк, Ьеисопок1ос 1асйк, Ьеисопок1ос текеШегспбек подвида сгетопк, Ребюсоссик рейокасеик, йасЮсоссик 1асйк подвида 1асйк Ьюуаг. б1асе1у 1асйк, йасЮЬасШнк саке1 подвида сакек §1тер1ососсик ШетшорйНик, ЕЩегососснк, такие как ЕЩегососснк Еаесит, ВбтбоЬаскегшт аттайк, ВбтбоЬаскегшт 1асйк, ВйтбоЬаскегшт 1опдит, ЙасЮЬасШик 1асйк, ЬаскоЬасШик йекейсик, ЬаскоЬасШик Еегтейит, ЬаскоЬасШик кайуагшк, ЬаскоЬасШик бе1Ьгиески подвида Ьи1дапсик и ЬаскоЬасШик ааборйбик. Внутри этой группы наиболее предпочтительной молочнокислой бактерией является ЬаскоЬасб1ик тйатпокик.
Композиция может содержать один или несколько штамм(ов) молочнокислой бактерии, которые могут быть выбраны из группы, включающей: ВВ-12® (ВйтбоЬаскетшт аттайк подвида 1асбк ВВ-40 12®), Ό8Μ 15954, АТСС 29682, АТСС 27536, Ό8Μ 13692 и Ό8Μ 10140, ЬА-5® (ЪаскоЬасШик ашборййик ЬА-5®), Ό8Μ 13241, ЬСС® (ЬаскоЬасШик тйатпокик ЬСС®), АТСС 53103, СР-1® (ЬаскоЬасШик гйатпокик СР-1®), АТСС 55826, РС-14® (ЬайоЬасШик геикеп РС-14®), АТСС 55845, Ь.саке1 431® (ЬаскоЬасй1ик рагасаке1 подвида рагасаке1 Ь.саке1 431®), АТСС 55544, Р19® (йасЮЬасШпк рагасаке1 Р19®), ΕΜΟ17806, ТН-4® (Зктеркососсик (йегторйбпк ТН-4®), Ό8Μ 15957, РСС® (ЬаскоЬасШик Ееттейит РСС®), ΝΜ02/31074, ЬР-33® (ЬаскоЬасШик рагасаке1 подвида рагасаке1 ЬР-33®), ССТСС Μ204012.
Культура ЬАВ может представлять собой смешанную культуру молочнокислых бактерий (ЬАВ) или чистую культуру молочнокислых бактерий (ЬАВ). Термин смешанная культура молочнокислых бактерий (ЬАВ) или культура ЬАВ обозначает смешанную культуру, которая содержит два или более различных видов ЬАВ. Термин чистая культура молочнокислых бактерий (ЬАВ) обозначает чистую культуру, которая содержит только один вид ЬАВ. Соответственно, в предпочтительном варианте осуществления культура ЬАВ представляет собой культуру ЬАВ, выбранную из группы, состоящей из этих культур.
Культура ЬАВ может промываться или не промываться перед смешиванием с защитными агентами. Если композиция содержит соль альгиновой кислоты, такую как альгинат натрия, часто необходимо промыть клетки деминирализованной водой перед добавлением защитных агентов во избежание образо- 6 027508 вания альгината кальция.
Защитный(ые) агент (агенты).
Используемый в настоящем описании термин защитный(ые) агент(ы) следует понимать как любое средство, которое может помочь повысить устойчивость при хранении представляющих интерес клеток молочнокислых бактерий. В отношении описанной здесь сухой порошковой композиции и способа сушки такой сухой порошковой композиции, термин защитный агент(ы) может также рассматриваться как любые средства как таковые, присутствующие в сухой порошковой композиции, которые не представляют собой молочнокислые бактерии (ЬАВ) как таковые.
Может быть предпочтительно, чтобы количество защитного агента (агентов) по пункту (и) первого аспекта составляло некоторое количество защитного агента (агентов) от 4 до 20 г, например от 5 до 15 г или от 6 до 12 г.
В предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере 30% (предпочтительнее по меньшей мере 50%, еще предпочтительнее по меньшей мере 70% (например, по меньшей мере 80% или по меньшей мере 90%) защитного средства (средств) по п.(п) первого аспекта представляют собой углеводороды.
Предпочтительно, углеводороды представляют собой сахариды, и предпочтительно сахариды представляют собой, например, сахарозу, мальтодекстрин, трегалозу и/или инулин.
В настоящем описании в рабочих примерах описана сушка композиции ЬАВ, где более чем 80% защитного средства (средств) представляют собой сахариды, поскольку композиция содержит 75,3 г трегалозы плюс 5,0 г инулина на 100 г всех защитных агентов, присутствующих в композиции.
Ниже обсуждены другие предпочтительные в настоящем изобретении сухие порошковые композиции ЬАВ, где более чем 70% защитного средства (средств) представляют собой сахариды. Без ограничения теорией, считается, что все описанные здесь композиции ЬАВ, в которых более чем 70% защитного средства (средств) представляют собой сахариды, обладают очень высокой устойчивостью при хранении, другими словами, путем использования (как описано здесь) относительно высоких количеств углеводородов (таких как, например, сахариды) в качестве защитных агентов, можно получить сухую порошковую композицию ЬАВ с коммерчески релевантной очень высокой устойчивостью при хранении (например, для использования в качестве компонента в порошковой молочной смеси для грудных детей).
Под используемым в настоящем описании термином грудной ребенок подразумевается человек в возрасте примерно от рождения до 12 месяцев. В настоящем контексте термин молочная смесь для грудных детей относится к композиции в жидкой или порошковой форме, которая удовлетворяет питательным потребностям грудного ребенка, являясь заменой человеческого молока. Эти смеси регулируются регламентами Европейского Союза и США, которые определяют уровни макроэлементов, витаминов, минеральных и других ингредиентов, для имитации питательных и других свойств человеческого грудного молока. Очевидно, что питательная смесь не должна содержать никаких потенциально аллергизирующих веществ. Таким образом, когда используется гидролизированный казеин, он предпочтительно должен быть гидролизирован так, чтобы более 90% пептидов имели молекулярную массу менее чем 1000 Дальтон, причем более 97% имели молекулярную массу менее чем 2000 Дальтон.
Используемый в настоящем описании термин дети определяется как люди в возрасте от более 12 месяцев до примерно 12 лет. Порошковые композиции по настоящему изобретению могут использоваться в молочной смеси для вскармливания грудных детей, молочной смеси для вскармливания грудных детей в возрасте старше 1 года, молочной смеси для вскармливания детей более старшего возраста и специальной молочной смеси, а также для продукта питания для детей в возрасте до 1 года и старше, предназначенного для улучшения микрофлоры их кишечника при одновременном обеспечении питания грудного ребенка или ребенка старше 1 года.
Защитный агент, пригодный для настоящего изобретения, представляет собой защитный агент, выбранный из группы, состоящей из: аскорбата №, модифицированного крахмала, гидролизированного казеина и альгината (например альгината натрия).
Альгиновая кислота, также называемая альгином или альгинатом, представляет собой анионный полисахарид, широко распространенный в клеточных стенках бурых водорослей. Альгинат присутствует в клеточных стенках бурых водорослей в виде кальциевой, магниевой и натриевой солей альгиновой кислоты. Альгиновая кислота образует растворимые в воде соли с одновалентными катионами, но осаждается после подкисления.
Альгинаты многих двухвалентных катионов, в частности Са2'. §т2+ и Ва2+, нерастворимы в воде и могут быть получены, когда ионы натрия ЫаА1§ замещаются двух- и трехвалентными катионами. Это свойство используется при выделении альгиновой кислоты из водорослей. Целью способа экстракции является получение сухого, порошкового альгината натрия. Соли кальция и магния не растворяются в воде; соль натрия растворима в воде.
Одновалентные соли альгиновой кислоты, такие как водородоальгинат (НА1д), альгинат калия (КА1д) и альгинат натрия (ЫаА1§), вследствие их физических и химических свойств, широко использовались пищевой, медицинской и фармацевтической промышленности. Напротив, альгинат кальция представляет собой нерастворимое в воде, желатинозное вещество кремового цвета, которое может быть соз- 7 027508 дано посредством добавления водного раствора хлорида кальция к водному раствору альгината натрия.
Когда предстоит использование композиции в порошковой молочной смеси для детей в возрасте до 1 года, то предпочтительно, чтобы она не содержала модифицированный крахмал или полисахариды, такие как альгинат натрия, поскольку альгинат натрия, который является продуктом, экстрагированным из водорослей, не утвержденным для использования в порошковой молочной смеси для грудных детей в возрасте до 1 года (молочной смеси для грудных детей). По этой причине для сравнения был получен ряд композиций без альгината и, как продемонстрировано в примерах, было обнаружено, что эти композиции проявляют достаточную устойчивость. Были проведены дополнительные эксперименты сравнения композиций с альгинатом и без него, и было обнаружено, что по существу нет различия между композициями с альгинатом и без него в отношении устойчивости.
Важные недостатки использования альгината, который представляет собой продукт, экстрагированный из водорослей, как описано выше, заключается в том, что имеется большой разброс данных от партии к партии в отношении вязкости и что продукт может содержать бактерии, и это значит, что необходимо применять некоторую обработку, например термическую обработку, для инактивации бактерий. Термическая обработка может представлять собой любую данную комбинацию температуры и времени удерживания, которая достигает логарифмического уменьшения в 6 раз или более (величины Р0, равной или превышающей 6), т.е. она может представлять собой термическую обработку партии в резервуаре под повышенным давлением с нагревательным кожухом, использование инжекции пара/конденсации в стерильных условиях непосредственно в раствор защитного агента (обе обработки в течение достаточно длительного периода времени при 110-121°С) или непрерывно через блок высокотемпературной обработки (короткой продолжительности при высокой температуре, т.е. 30 с при 132°С).
Эта обработка ведет к деполимеризации альгината, и термическая обработка в целом оказывает негативное воздействие на устойчивость для композиций с альгинатом натрия, как продемонстрировано в примере 9.
Таким образом, в отличие от принятого в данной области техники обычного представления о необходимости включения солей альгиновой кислоты, такой как альгинат натрия, в композиции для стабилизации и защиты живых бактерий при воздействии крайне неблагоприятных условий, по указанным выше причинам, имеет преимущества получение композиций, которые не содержат соли альгиновой кислоты, такие как альгинат натрия. Соответственно, композиции по настоящему изобретению предпочтительно не содержат соль альгиновой кислоты, такую как альгинат натрия.
В предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к сухой композиции, содержащей от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
(ί) от 6 до 9 г трегалозы, от 0,1 до 1 г инулина и от 0,5 до 3 г гидролизированного казеина, и тем, что она не содержит соль альгиновой кислоты.
В частности, композиция не содержит водородоальгинат, альгинат калия или альгинат натрия.
В особенно предпочтительном варианте осуществления, сухая композиция в соответствии с изобретением содержит 75-80% (мас./мас.) трегалозы, 3-10% (мас./мас.) инулина и 15-20% (мас./мас.) гидролизированного казеина и не содержит соль альгиновой кислоты, такую как альгинат натрия.
Очевидно, что все описание настоящего изобретения и формула изобретения в отношении композиций и способов включены в описанный выше предпочтительный вариант осуществления и в особенно предпочтительный вариант осуществления. В частности, изобретение относится к порошковой смеси, пищевому продукту или пищевой добавке для грудных детей, содержащей композицию в соответствии с описанными выше предпочтительным вариантом осуществления и особенно предпочтительным вариантом осуществления.
Изобретение, кроме того, относится к способу получения сухой композиции в соответствии с изобретением, причем способ получения сухой композиции включает следующие стадии:
(a) ферментации с использованием клеток ЬЛВ и сбора клеток для получения концентрата клеток ЬЛВ, содержащего клетки ЬЛВ и воду, причем концентрат содержит от 108 до 1014 КОЕ/г сухого вещества концентрата клеток молочнокислых бактерий (ЬЛВ);
(b) смешивания подходящего количества защитного агента (агентов) с концентратом клеток ЬЛВ для образования кашицеобразной суспензии, причем кашицеобразная суспензия содержит некоторое количество защитного агента (агентов) из от 6 до 9 г трегалозы, от 0,1 до 1 г инулина и от 0,5 до 3 г гидролизированного казеина и не содержит соль алгиновой кислоты, причем количество защитного агента (агентов) представлено относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в кашицеобразной суспензии, и количества и защитного агента (агентов), и клеток молочнокислых бактерий измеряются в виде сухого вещества в кашицеобразной суспензии;
(c) замораживания кашицеобразной суспензии для образования твердых замороженных частиц/пеллет;
- 8 027508 (б) загрузки лотка замороженными частицами/пеллетами в количестве от 2 до 50 кг/м2 для получения релевантного для настоящего изобретения материала на лотке;
(е) первичной сушки материала на лотке при вакуумном давлении от 0,7 до 2 миллибар (мбар), при температур материала, не настолько высокой, чтобы более чем 75% клеток ЬАВ инактивировались, и в течение периода времени, пока по меньшей мере 90% воды кашицеобразной суспензии стадии (Ь) ни будет удалено; и (ί) вторичной сушки материала стадии (е) при вакуумном давлении от 0,01 до 0,6 миллибар (мбар), при температуре материала, не настолько высокой, чтобы более чем 75% клеток ЬАВ инактивировались, и в течение периода времени, достаточного для снижения водной активности (а„) до менее чем 0,30, и, посредством этого, получения сухой композиции, содержащей:
(ί) от 109 до 1013 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий, причем композиция отличается тем, что она также содержит следующие количества защитных агентов (все количества защитных агентов представлены ниже относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в композиции):
от 6 до 9 г трегалозы, от 0,1 до 1 г инулина и от 0,5 до 3 г гидролизированного казеина, и тем, что она не содержит соль альгиновой кислоты.
По сравнению со способом, где композиция содержит альгинат натрия, смешивание на стадии Ь) облегчается, поскольку кашицеобразная суспензия имеет более низкую вязкость, и также легче проводить гранулирование на стадии с), и это значит, что частицы являются часто однородными и имеют соответствующий размер, как подробнее объясняется ниже в отношении стадии с), даже без стадии размола.
Добавление других соединений к композиции.
Сухая композиция по настоящему изобретению может содержать дополнительные соединения, представляющие интерес. Это могут быть, например, витамины (например, токоферол) или другие соединения, присутствие которых в конечной композиции может представлять интерес. Примерами таких соединений могут быть улавливатели влаги, такие как, например, картофельный крахмал.
Хотя предпочтителен способ сушки, описанный выше, существуют альтернативные способы, как описано выше. В зависимости от того, какой способ сушки предстоит использовать, может быть необходимым добавление модификатора вязкости. Если предполагается вакуумная ленточная сушка, то может быть необходимым увеличение вязкости. Напротив, если предполагается распылительная сушка, то может быть необходимым уменьшение вязкости.
Подходящими примерами модификаторов вязкости являются, например, вода (для уменьшения вязкости), пектин, прежелатинизированный крахмал, смолы (например акации, ксантана, смола кизельгура, смола рожкового дерева), глицеролы (например, глицерин); гликоли (например, полиэтиленгликоли, пропиленгликоли); воски растительного происхождения (например, карнаубы, риса, канделилла), не растительные воски (пчелиный воск); лецитин; растительные волокна; липиды и кремнеземы (например, диоксид кремния).
Применение композиции в соответствии с изобретением.
В целом, определенное предпочтительное промышленное применение содержащей клетки композиции по настоящему изобретению обычно зависело бы от определенных характеристик рассматриваемых клеток.
Композиции можно вводить человеку, животному или рыбе в целях оздоровления. Это в целом наиболее уместно, если клетка обладает пробиотическими свойствами, и особенно уместно, когда клетка представляет собой пробиотическую клетку ЬАВ.
Предпочтительной смесью по изобретению является форма в виде порошковой смеси для грудных детей, в которой композиция смешивается с молочным порошком. Как известно в данной области техники, молочный порошок может также содержать другие добавки.
Другое применение относится к применению композиции по настоящему изобретению в зерновых пищевых продуктах, таких как мюсли или другие пищевые продукты.
Соответственно, в дополнительных аспектах, изобретение относится к пищевому продукту, такому как зерновой продукт, батончики из мюсли, конфеты-батончики или шоколадные батончики, которые включают композиции в соответствии с изобретением. Оно может также использоваться в порошковых смесях (например, так называемых порошковых энергетических смесях для спортсменов), предназначенных для смешивания с напитками, такими как спортивные напитки или энергетические напитки.
В другом аспекте изобретение относится к пищевой добавке, содержащей сухую композицию по настоящему изобретению.
Ниже обсуждаются примеры дополнительных, пригодных для настоящего изобретения защитных агентов.
Защитные агенты, используемые в настоящем изобретении, в целом, представляют собой те, которые обычно используются в качестве, например, криодобавок в данной области техники, например сахариды, такие как трегалоза, лактоза, мальтоза, сахароза, раффиноза или глюкоза; мио-инозитол или дру- 9 027508 гие так называемые криопротекторы, такие как полиэтиленгликоль, диметилсульфоксид, глицерол или декстран. Предпочтительными защитными агентами являются сахароза и/или мальтодекстрин.
Могут также присутствовать другие добавки, например антиоксиданты, такие как аскорбат. В целях настоящего изобретения аскорбат может быть назван защитным агентом.
Как обсуждается в настоящем описании, преимущество описанного здесь нового способа получения сухой порошковой композиции заключается в том, что путем использования описанного здесь способа можно эффективно высушить такую композицию ЬАВ, содержащую относительно большое количество углеводородов (таких как, например, сахариды) в качестве защитных агентов.
Ферментация клеток ЬАВ для получения концентрата клеток ЬАВ. Стадия (а).
Как обсуждалось выше, стадия (а) способа первого аспекта формулируется следующим образом:
(а) Ферментации с использованием клеток ЬАВ и сбор клеток для получения концентрата клеток ЬАВ, содержащего клетки ЬАВ и воду, причем концентрат содержит от 108 до 1014 КОЕ/г сухого вещества концентрата клеток молочнокислых бактерий (ЬАВ).
Для специалиста в данной области техники ферментация с использованием представляющих интерес клеток ЬАВ, например, для их крупномасштабного получения/выращивания.
Как известно в данной области техники, сбор ферментирующих клеток в целом включает стадию центрифугирования для удаления релевантных частей среды ферментации и, посредством этого, получения концентрата ЬАВ.
Как известно в данной области техники, для получения клеток ЬАВ по настоящему изобретению на этой стадии можно иметь концентрат клеток ЬАВ примерно с 10% сухого вещества клеток, т.е. так называемый 10% концентрат. Остальную часть концентрата обычно составляет главным образом вода, т.е. в нем обычно содержится примерно 90% воды. Концентрат клеток ЬАВ может, конечно, иногда также содержать меньше воды, например примерно 50% воды. Обычно концентрат клеток ЬАВ на стадии (Ь) содержит по меньшей мере 10% (например, по меньшей мере 20% или по меньшей мере 50%) воды. В некоторых вариантах осуществления концентрат может содержать даже менее чем 10% сухого вещества, например, в диапазоне 5-10%, например примерно 5%.
В настоящем контексте, по существу, именно эта вода концентрата клеток ЬАВ удаляется способом сушки, описанным здесь, для получения описанной здесь сухой порошковой композиции ЬАВ.
После сбора клеток может быть предпочтительным включение лишней стадии промывания для удаления как можно большего количества только компонентов/соединений среды ферментации, т.е. для получения более чистого концентрата клеток ЬАВ, который, по существу, содержит только клетки ЬАВ.
Стадия (а) формулируется следующим образом: причем концентрат содержит от 108 до 1014 КОЕ/г сухого вещества концентрата клеток молочнокислых бактерий (ЬАВ). Термин сухое вещество в пределах термина КОЕ/г сухого вещества следует понимать в понимании специалиста в данной области в настоящем контексте, т.е. что концентрат ЬАВ содержит данное количество клеток ЬАВ относительно сухого вещества концентрата ЬАВ (т.е. не включая массу жидкости, присутствующей в концентрате ЬАВ).
При желании, может быть добавлена стадия замораживания концентрата ЬАВ, например, для его получения в форме твердых замороженных частиц/пеллет, и концентрат ЬАВ может содержаться в виде замороженного концентрата в течение некоторого периода времени перед оттаиванием и продолжением процесса стадией (Ь).
Альтернативно, способ может начинаться со стадии (Ь), например на основании имеющегося в продаже концентрата клеток ЬАВ.
Стадия (Ь). Смешивание защитного агента (агентов) с концентратом клеток ЬАВ.
Как обсуждалось выше, стадия (Ь) способа первого аспекта формулируется следующим образом:
(Ь) Смешивания подходящего количества защитного агента (агентов) с концентратом клеток ЬАВ для образования кашицеобразной суспензии, причем кашицеобразная суспензия содержит некоторое количество защитного агента (агентов) от 2 до 40 г, причем количество защитного агента (агентов) представлено относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в кашицеобразной суспензии, и количества и защитного агента (агентов), и клеток молочнокислых бактерий измеряются в виде сухого вещества в кашицеобразной суспензии.
Термин кашицеобразная суспензия следует понимать как в соответствии с пониманием его специалистом в данной области техники в настоящем контексте, т.е. как относительно густую суспензию твердых веществ в жидкости.
Для специалиста в данной области обычной практикой является смешивание подходящего количества защитного агента (агентов) с концентратом клеток ЬАВ для получения желаемой концентрации/количества защитного агента (агентов) в кашицеобразной суспензии.
Замораживание кашицеобразной суспензии для образования твердых замороженных частиц/пеллет.
Стадия (с).
Как обсуждалось выше, стадия (с) способа первого аспекта формулируется следующим образом:
(с) Замораживания кашицеобразной суспензии для образования твердых замороженных час- 10 027508 тиц/пеллет.
Для специалиста в данной области обычной практикой является проведение как таковой стадии замораживания кашицеобразной суспензии для образования твердых замороженных частиц/пеллет. Как известно в данной области техники, это может быть осуществлено использованием, например, жидкого азота, причем кашицеобразная суспензия замораживается использованием жидкого азота для получения твердых замороженных частиц/пеллет.
Как показано в описанном здесь рабочем примере, заявители тестировали различные размеры частиц замороженных частиц/пеллет, и было обнаружено, что слишком большие частицы не обеспечили удовлетворительных результатов сушки. Соответственно, в предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере 95% (предпочтительнее по меньшей мере 97%) замороженных частиц/пеллет на стадии (с) представляют собой частицы/пеллеты, которые способны проходить через сетку/сито с максимальным размером отверстий 10 мм.
Предпочтительнее по меньшей мере 95% (предпочтительнее по меньшей мере 97%) замороженных частиц/пеллет на стадии (с) представляют собой частицы/пеллеты, которые способны проходить через сетку/сито с максимальным размером отверстий 7,5 мм, предпочтительнее с максимальным размером отверстий 5 мм и наиболее предпочтительно с максимальным размером отверстий 3 мм.
Для специалиста в данной области обычной практикой является проведение просеивания релевантных частиц (в данном случае, замороженных частиц/пеллет) через сетку. Для специалиста в данной области обычной практикой является проведение тестирования, если определенный образец замороженных частиц/пеллет представляет собой образец, в котором по меньшей мере 95% (предпочтительнее по меньшей мере 97%) замороженных частиц/пеллет представляет собой образец замороженных частиц/пеллет, который способен проходить через сетку с данным максимальным размером отверстий.
Как известно в данной области техники, можно просто поместить определенный представляющий интерес образец замороженных частиц/пеллет на подходящую сетку и затем перемещать/встряхивать сетку адекватным образом до тех пор, пока ни прекратится прохождение через сетку дальнейшего значимого количества замороженных частиц/пеллет, если более чем 95% замороженных частиц/пеллет прошло через сетку, то представляющий интерес образец замороженных частиц/пеллет представляет собой образец, в котором по меньшей мере 95% замороженных частиц/пеллет представляют собой частицы/пеллеты, которые способны проходить через сетку с данным максимальным размером отверстий.
Стадия (ά). Загрузки лотка замороженными частицами/пеллетами.
Как обсуждалось выше, стадия (ά) способа первого аспекта формулируется следующим образом:
(ά) Загрузки лотка замороженными частицами/пеллетами в количестве от 2 до 50 кг/м2 для получения релевантного для настоящего изобретения материала на лотке.
В предпочтительном варианте осуществления лоток на стадии^) первого аспекта загружается замороженными частицами/пеллетами в количестве от 5 до 30 кг/м2 (например, замороженными частицами/пеллетами в количестве от 7 до 15 кг/м2).
В настоящем контексте можно использовать любой подходящий для настоящего изобретения лоток (лотки). Как известно, имеется несколько релевантных в данном контексте лотков, доступных для специалистов в данной области, причем некоторые из этих лотков также имеются в продаже.
Как понятно специалисту в данной области техники в настоящем контексте, лоток обычно загружается замороженными частицами/пеллетами таким образом, чтобы получить относительно равномерное распределение замороженными частицами/пеллетами в лотке, т.е. предпочтительно не все замороженные частицы/пеллеты должны располагаться, например только на одном краю лотка.
Например, для промышленного релевантного крупномасштабного получения относительно больших количеств сухой порошковой композиции по настоящему изобретению (например, от 100 до 10000 кг сухой порошковой композиции) обычно может быть предпочтительным одновременное использование нескольких (например, более чем 10 или более чем 100) лотков на стадии загрузки (ά), т.е. где на стадии (ά) загружается несколько (например, более чем 10 или более чем 100) лотков замороженными частицами/пеллетами в количестве от 2 до 50 кг/м2.
Стадия (е). Первичная сушка.
Как обсуждалось выше, стадия (е) способа первого аспекта формулируется следующим образом:
(е) Первичной сушки материала на лотке при вакуумном давлении от 0,7 до 2 миллибар (мбар), при температуре, не настолько высокой, чтобы более чем 75% клеток ЬАВ инактивировались, и в течение периода времени, пока по меньшей мере 90% воды кашицеобразной суспензии стадии (Ь) ни будет удалено.
В настоящем контексте можно использовать любую подходящую вакуумную сушилку. Как известно, существуют несколько вакуумных сушилок, доступных для специалистов в данной области техники, причем некоторые из этих вакуумных сушилок также имеются в продаже.
В предпочтительном варианте осуществления вакуумная сушилка представляет собой устройство, причем нагревание в устройстве представляет собой так называемый нагрев излучением. Как известно специалисту в данной области техники, нагрев излучением отличается от так называемого контактного нагрева. Как известно специалисту в данной области техники, нагрев излучением может достигаться,
- 11 027508 например, расположением термопластины вблизи (но не в непосредственном контакте) с лотком, содержащим подлежащий сушке материал. Другими словами, в отношении стадии первичной сушки (е), имеется пространство (т.е. вакуум) между термопластиной и лотком, т.е. нагрев лотка затем основан на нагреве излучением.
В предпочтительном варианте осуществления лоток располагается между двумя термопластинами, причем обе термопластины обеспечивают нагрев лотка излучением.
Например, для промышленного релевантного крупномасштабного получения относительно больших количеств сухой порошковой композиции по настоящему изобретению (например, от 100 до 10000 кг сухой порошковой композиции) обычно может быть предпочтительным одновременное использование нескольких (например, более чем 10 или более чем 100) лотков на стадии сушки (е), т.е. где на стадии (е) присутствуют несколько (например, более чем 10 или более чем 100) лотков, содержащих подлежащий сушке материал.
Вкратце, можно рассматривать эту стадию первичной сушки (е) как стадию, на которой осуществляется удаление того, что может быть названо свободной водой (т.е. в отличие от того, что может быть названо связанной водой). В настоящем контексте можно сказать, что эта свободная вода, удаляемая на этой стадии (е), представляет большую часть воды, присутствующей в концентрате клеток ЬЛБ стадии (а). Можно также сказать, что эту свободную воду можно легче удалить, чем связанную воду, которая, можно сказать, по существу, главным образом удаляется на последующей стадии вторичной сушки (ί) способа сушки по изобретению (дальнейшее обсуждение этой проблемы связанной воды смотрите ниже).
На данной стадии первичной сушки вакуумное давление составляет от 0,7 до 2 миллибар (мбар), это можно рассматривать как существенный элемент данной стадии первичной сушки (е). Как обсуждается в рабочих примерах в настоящем описании, заявители идентифицировали, что если на данной стадии первичной сушки (е) используется вакуумное давление, которое отличается от диапазона от 0,7 до 2 миллибар (мбар), то невозможно получить удовлетворительную сушку описанной здесь композиции ЬЛБ (т.е. с относительно большим количеством защитных агентов).
Вкратце, заявители идентифицировали, что если вакуумное давление составляет ниже 0,7 мбар, то можно сказать, что вода в концентрате ЬЛБ настолько холодная, что все замороженные частицы/пеллеты еще полностью заморожены в течение значительного периода времени данной стадии первичной сушки (е), т.е. можно сказать, что данная стадия (е) называлась бы в сущности на 100% так называемой стадией сушки замораживанием, т.е. где вода удаляется сублимацией. Заявители идентифицировали, что для удаления в сущности всей воды на данной стадии первичной сушки сублимацией в данном контексте не дает удовлетворительного результата.
Вкратце, заявители идентифицировали, что если вакуумное давление выше, чем 2 мбар, то можно сказать, что вода в концентрате ЬЛБ настолько относительно горячая, что значительная часть замороженных частиц/пеллет оттаивает (т.е. они больше не являются замороженными) в течение значительной части периода времени данной стадии первичной сушки (е), и заявители идентифицировали, что это не подходит для того, чтобы в настоящем контексте получить удовлетворительный конечный результат сушки.
Как известно специалисту в данной области, при давлении 2 мбар температура воды (т.е. льда) составляет -12°С, при давлении 1 мбар температура воды (т.е. льда) составляет -20°С и при давлении 0,7 мбар температура воды (т.е. льда) составляет -24°С.
В частности, в начале данной стадии первичной сушки (е) нормально, чтобы материал, подлежащий сушке, имел значительное количество воды, поскольку концентрат ЬЛБ стадии (а) часто содержит примерно, например, 90% воды и примерно 10% самих клеток ЬЛБ.
Соответственно, можно сказать, что, в частности, в начале данной стадии первичной сушки (е), в целом, именно температура воды как бы контролирует температуру подлежащего сушке материала.
Можно сказать, что заявители идентифицировали, что диапазон вакуумного давления от 0,7 до 2 мбар представляет собой как раз идеальный/оптимальный диапазон для сушки композиции ЬЛБ по настоящему изобретению (т.е. с относительно большим количеством защитных агентов).
Без ограничения теорией, причиной того, что данный диапазон вакуумного давления особенно благоприятен, может быть связана с тем, что при этом давлении температура воды адекватна для получения относительно ограниченного таяния замороженных частиц/пеллет стадии (с), но не происходит слишком большое таяние замороженных частиц/пеллет. Без ограничения теорией, можно сказать, что если происходит таяние ограниченного количества замороженных частиц/пеллет (т.е. переходят в жидкую форму), то, по меньшей мере, некоторые части воды могут быть удалены выпариванием.
Соответственно, предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения относится к тому, что ограниченное (например, от по меньшей мере 0,5 до максимум 5%, предпочтительнее от по меньшей мере 1 до максимум 4%) количество материала на стадии (е) представляет собой оттаявший жидкий материал (т.е. незамороженный материал). Кроме того, предпочтительно, чтобы это было так в течение значительно части (например в течение по меньшей мере 3 ч или в течение по меньшей мере 6 ч) периода времени стадии первичной сушки (е).
- 12 027508
Специалист в данной области способен визуально определить, представляет ли собой ограниченное количество материала на стадии (е) оттаявший жидкий материал (т.е. незамороженный материал) просто путем наблюдения того, что незамерзшая вода присутствует, например, на поверхностях замороженных частиц/пеллет.
Как обсуждалось выше, стадия (е) формулируется следующим образом:
При температуре, не настолько высокой, чтобы более чем 75% клеток ЬЛВ инактивировались.
Для специалиста в данной области обычной практикой является непрерывное измерение температуры самого материала в течение периода времени стадии (е). Обычно, в течение периода времени стадии (е), имеется один или несколько термометр(ов), просто вставленных в сам материал.
Как обсуждалось выше, можно сказать, что, в частности, в начале этой стадии первичной сушки (е), в целом, температура воды как бы регулирует температуру подлежащего сушке материала.
Как обсуждалось выше, при давлении от 0,7 до 2 миллибар (мбар), используемом на стадии (е), температура воды (т.е. льда) составляет примерно от -24 до -12°С. При этой относительно низкой температуре (т.е. от примерно -24 до 12°С), в целом, не происходит значительная инактивация клеток ЬЛБ.
Однако в конце периода времени стадии (е), может быть удалено, например, 97% так называемой свободной воды на стадии (е, т.е. в этот длительность стадии (е) потеря присутствующей воды значительно меньше, чем в начале периода времени стадии (е).
Соответственно, можно сказать, что, в частности, в конце периода времени стадии (е) очень важно, чтобы возможное воздействие нагрева лотка/материала достаточно контролировалось, т.е. так, чтобы температура материала не становилась слишком высокой.
В настоящем контексте опытному специалисту в целом известно, что может называться теплоустойчивостью представляющих интерес ЬЛВ по настоящему изобретению. Другими словами, было бы обычной практикой определение для представляющих интерес в контексте настоящего изобретения ЬЛВ того, какая максимальная температура материала должна быть, чтобы не получить слишком много инактивированных клеток ЬЛВ.
Например, когда клетки молочнокислых бактерий (ЬЛВ) по пункту (ίί) первого аспекта представляют собой клетки Ьас1оЬасШи8, то предпочтительно, чтобы температура материала стадий (е) и (ί) первого аспекта составляла температуру, которая не превышает 40°С.
Например, когда клетки молочнокислых бактерий (ЬЛВ) по пункту (ίί) первого аспекта представляют собой клетки ВШбоЬас1етшт аттаШ подвида 1ас(15. то считается, что температура может быть немного выше без слишком большой инактивации клеток, т.е. температура материала стадий (е) и (ί) первого аспекта составляет температуру, которая не повышается выше чем, например, 50°С.
Как очевидно в настоящем контексте, инактивация клеток ЬЛВ на стадии (е) и стадии (ί) предпочтительно должна быть как можно меньше.
Соответственно, предпочтительный вариант осуществления относится к стадии (е), где температура материала не повышается настолько, чтобы инактивировались более чем 50% клеток ЬЛВ, предпочтительнее, температура материала не повышается настолько, чтобы инактивировались более чем 25% клеток ЬЛВ, еще предпочтительнее температура материала не повышается настолько, чтобы инактивировались более чем 10% клеток ЬЛВ, и наиболее предпочтительно температура материала не повышается настолько, чтобы инактивировались более чем 2% клеток ЬЛВ.
В предпочтительном варианте осуществления первичная сушка стадии (е) первого аспекта проводится при вакуумном давлении от 1 до 2 миллибар (мбар), например от 1,1 до 1,7 миллибар (мбар).
В предпочтительном варианте осуществления при первичной сушке стадии (е) первого аспекта удаляется по меньшей мере 95% воды кашицеобразной суспензии, предпочтительнее удаляется по меньшей мере 97% воды кашицеобразной суспензии и наиболее предпочтительно удаляется по меньшей мере 98% воды кашицеобразной суспензии.
Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения относится к тому, в котором длительность стадии (е) первого аспекта составляет от 3 до 60 ч, предпочтительнее от 5 до 36 ч, еще предпочтительнее от 5 до 24 ч (такой как, например, от 7 до 15 ч).
Без ограничения теорией считается, что для промышленно рентабельного крупномасштабного производства может быть трудным должное выполнение стадии первичной сушки (е) менее чем за 3 ч. Без ограничения теорией, использование более чем 60 ч для стадии сушки (е) обычно было бы не оптимальным для промышленно рентабельного крупномасштабного производства.
Стадия (ί). Вторичная сушка.
Как обсуждалось выше, стадия (ί) способа первого аспекта сформулирована следующим образом:
(ί) Вторичной сушки материала стадии (е) при вакуумном давлении от 0,01 до 0,6 миллибар (мбар), при температуре, не настолько высокой, чтобы более чем 75% клеток ЬЛВ инактивировались, и в течение периода времени, достаточного для снижения водной активности (а„) до менее чем 0,30 и посредством этого получения сухой композиции, содержащей:
(ί) от 108 до 1014 КОЕ/г композиции клеток молочнокислых бактерий (ЬЛВ) и (ίί) некоторое количество защитного агента (агентов) от 2 до 40 г, причем количество защитного агента (агентов) представлено относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в сухой композиции.
- 13 027508
Как понятно специалисту в данной области техники, ряд технических проблем, обсужденных выше для стадии первичной сушки (е), может также быть соответственно релевантным в отношении стадии вторичной сушки (ί). Например, устройство вакуумной сушки, используемое на стадии (ί), часто такое же (или очень сходно) с устройством вакуумной сушки, используемым на стадии (е).
Вкратце, эту вторичную сушку (ί) можно рассматривать как стадию, на которой осуществляется удаление того, что можно назвать связанной водой (т.е. в отличие от того, что можно назвать свободной водой, которая в целом удаляется на стадии (е), см. обсуждение выше). Как известно специалисту в данной области техники, можно сказать, что связанную воду труднее удалить, чем свободную воду, и соответственно, на стадии (ί) используется больший вакуум (меньшее давление в мбар), по сравнению со стадией (е).
В предпочтительном варианте осуществления стадия вторичной сушки (ί) первого аспекта проводится при вакуумном давлении от 0,05 до 0,4 миллибар (мбар), таком как от 0,1 до 0,3 миллибар (мбар).
В настоящем контексте, давление примерно 0,2 мбар может иногда именоваться полным вакуумом.
Как обсуждалось выше, на стадии (е) и стадии (ί) предпочтительно должна быть как можно меньшая инактивация клеток ЬЛВ.
Соответственно, предпочтительный вариант осуществления относится к стадии (ί), где температура материала не повышается настолько, чтобы инактивировались более чем 50% клеток ЬЛВ, предпочтительнее, температура материала не повышается настолько, чтобы инактивировались более чем 25% клеток ЬЛВ, еще предпочтительнее температура материала не повышается настолько, чтобы инактивировались более чем 10% клеток ЬЛВ, и наиболее предпочтительно температура материала не повышается настолько, чтобы инактивировались более чем 2% клеток ЬЛВ.
Как обсуждалось выше относительно стадии (е), когда клетки молочнокислых бактерий (ЬЛВ) пункта (ίί) первого аспекта представляют собой клетки Ьас1оЪасШи8, то предпочтительно, чтобы температура материала стадий (е) и (ί) первого аспекта составляла температуру, которая не повышается выше 40°С.
Например, когда клетки молочнокислых бактерий (ЬЛВ) п.(н) первого аспекта представляют собой клетки ВтййоЪас1ейит аштайк подвида 1асЙ8, то считается, что температура может быть немного выше без получения слишком высокой инактивации клеток, т.е. температура материала стадий (е) и (ί) первого аспекта составляет температуру, которая не повышается выше, чем, например, 50°С.
Как обсуждалось выше, в конце периода времени стадии первичной сушки (е) может быть удалено, например, 97% так называемой свободной воды на этой стадии (е) - т.е. в конце стадии (е) присутствует значимо меньше воды, чем в начале периода времени стадии (е).
В соответствии с этим, очевидно, что во время стадии вторичной сушки (ί) присутствует относительно мало воды.
Соответственно, если на этой стадии вторичной сушки (ί) применяется какое-либо нагревание, например с использованием термопластин (например, для нагрева излучением, см. выше), то они в целом устанавливаются на температуру нагрева, которая очень близка к желаемой температуре самого материала (подлежащего сушке). Например, если температура самого материала (подлежащего сушке) на стадии (ί) должна составлять максимум, например, 37°С, то используемые, например, термопластины не устанавливаются на температуру, значительно превышающую эти 37°С.
Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения относится к варианту, где длительность стадии (ί) первого аспекта составляет от 3 до 60 ч, предпочтительнее от 5 до 36 ч, еще предпочтительнее от 5 до 24 ч (например, от 7 до 15 ч).
Без ограничения теорией, считается, что для промышленно рентабельного крупномасштабного производства может быть трудным должное выполнение стадии сушки (ί) менее чем за 3 ч. Без ограничения теорией, использование стадии сушки длительностью более чем 60 ч, было бы обычно не оптимальным для промышленно рентабельного крупномасштабного производства.
В предпочтительном варианте осуществления период времени стадии (ί) представляет собой период времени, достаточный для снижения водной активности (а„) до менее чем 0,25, предпочтительнее менее чем 0,20 и наиболее предпочтительно до менее чем 0,15.
Опытному специалисту известно, как определить водную активность (а„) сухой композиции по настоящему изобретению.
Другие необязательные стадии.
Как понятно специалисту в данной области техники, способ сушки первого аспекта, как обсуждено в настоящем описании, может включать дополнительные необязательные стадии.
В данном случае очевидной релевантной необязательной дополнительной стадией могла бы быть, например, должная упаковка на стадии (ί) полученной сухой порошковой композиции.
Как известно в данной области техники, упаковка может, например, представлять собой флакон, коробку, ампулу, капсулу и т.д.; предпочтительно, упаковка является водонепроницаемой для поддержания низкой водной активности сухой порошковой композиции.
Кроме того, очевидные релевантные необязательные дополнительные стадии включают использо- 14 027508 вание полученной на стадии (Г) сухой порошковой композиции ЬАВ для коммерческого релевантного использования.
Лишь в качестве примера видами коммерчески релевантного использования могло бы быть, например, применение в виде порошковой молочной смеси для грудных детей, причем сухая порошковая композиция ЬЛБ смешивается с молочным порошком, или использование для получения молочного продукта.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 показана устойчивость при хранении композиций Ь.саке1 431® в порошковой молочной смеси для грудных детей с а„ 0,3 и при температуре хранения 35°С;
на фиг. 2 - устойчивость при хранении шести молочной смеси для грудных детей с а„ 0,3 и при температуре хранения 35°С;
на фиг. 3 - устойчивость при хранении композиций Ь.саке1 431® в порошковой молочной смеси для грудных детей с а„ 0,3 и при температуре хранения 35°С;
на фиг. 4 - устойчивость при хранении композиций ЬСС® в порошковой молочной смеси для грудных детей с а„ 0,3 и при температуре хранения 35°С;
на фиг. 5 - устойчивость при хранении композиций Ь.саке1 431® в порошковой молочной смеси для грудных детей с а„ 0,3 и при температуре хранения 40°С;
на фиг. 6 - устойчивость при хранении композиций ЬСС® в порошковой молочной смеси для грудных детей с а„ 0,3 и при температуре хранения 40°С;
на фиг. 7 показана устойчивость при хранении композиций ЬСС® в порошковой молочной смеси для грудных детей с а„ 0,25 и при температуре хранения 35°С.
Примеры
Материалы и методы.
Промытый концентрат Ьас1оЬасШик гЬатпокик ЬСС® и Ьас1оЬасШик рагасаке! подвида рагасаке! Ь.саке! 431®, поставляемый компанией СЬг. Напкеп А/δ, Эептагк.
Трегалоза от компании СагдШ под названием Тгейа 16400.
Ферментативно гидролизированный казеин от компании ΌΜν 1п1егпаОопа1.
Альгинат Ыа от компании РМС ВюРо1утег: Мапиде1® ΌΜΒ.
Инулин от компании ΒΕΝΕΟ-ΟΚΑΡΤΙ: ОгаГО® СК.
Мальтодекстрин: С1иабех ΙΤ 12 от компании КоциеПе.
Аскорбат Ыа от компании ЫойЬеак! РЬагтасеийса1 дгоир Со.
Сахароза от компании ЫогФс διι^π: Сгапи1а1еб кидаг 550.
Кету НС-Р (прежелатинизированный рис) крахмал, сорт для детского питания от компании Вепеогету Νν.
Порошковая молочная смесь для грудных детей ЕпГаСго\у от компании Меаб 1оЬпкоп ЬСС, ЕуапкуП1е. ΙΝ.
Пример 1. Сушка композиции ЬАВ.
Клетки молочнокислых бактерий (ЬАВ) представляли собой имеющиеся в продаже ЬасФЬасШик се11 ЬСС®, получаемые от компании СЬг. Напкеп А/δ, Иептагк.
Аппарат вакуумной сушилки представлял собой устройство, в котором нагрев обеспечивался так называемым нагревом излучением. Лоток располагали между двумя термопластинами, причем обе термопластины обеспечивали нагрев лотка излучением.
Стадия (а).
Получали 1 кг концентрата клеток ЬАВ; он содержал около 10% сухого вещества клеток, т.е. так называемый 10% концентрат примерно с 90% воды.
Стадия (Ь).
кг смеси защитных агентов (смеси, содержащей 30 г альгината натрия; 50 г инулина, 753 г трегалозы и 167 г гидролизата казеина) смешивали с концентратом клеток ЬАВ.
Соответственно, получали кашицеобразную суспензию, которая содержала некоторое количество защитных агентов, составлявшее около 10 г, причем некоторое количество защитных агентов представлено относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в кашицеобразной суспензии, а количества и защитного агента (агентов), и клеток молочнокислых бактерий измеряются в виде сухого вещества в кашицеобразной суспензии.
Стадия (с).
Кашицеобразную суспензию замораживали для образования твердых замороженных частиц/пеллет.
Замораживание осуществляли, используя жидкий азот.
Стадия (ά).
Лотки загружали 10 кг/м2 замороженных частиц/пеллет для получения релевантного для настоящего изобретения материала на лотках.
Стадия (е).
Первичную сушку материала на лотке выполняли при различных величинах вакуумного давления,
- 15 027508 некоторые величины были в пределах диапазона вакуумного давления от 0,7 до 2 миллибар (мбар) (например, использовали давление 1,3 мбар), а некоторые выходили за пределы указанного диапазона (например, использовали давление 2,5 мбар).
Данную стадию выполняли при температуре материала, которая не повышалась выше 37°С.
При этой максимальной температуре инактивировалось значительно менее чем 50% клеток ЬЛВ. Данную стадию выполняли в течение некоторого периода времени, пока ни было удалено по меньшей мере 97% воды кашицеобразной суспензии стадии (Ь), что заняло около 12 ч.
Стадия (ί).
Вторичную сушку материала стадии (е) выполняли при вакуумном давлении 0,2 мбар.
Что касается стадии (е), то данную стадию также выполняли при температуре материала, не превышающей 37°С. Данную стадию выполняли в течение периода времени около 12 ч.
Результаты.
Таблица 1
Водная активность и выживаемость клеток после обработки при двух различных величинах давления
№ 1 № 2 № 3 № 4
Загрузка лотка 10 кг/м2 8 кг/м2 10 кг/м2 8 кг/м2
Температура нагрева 50°С 50°С 50°С 50°С
Максимальная температура продукта 32°С 32°С 40°С 32°С
Давление 2,5/0,2 мбар 2,5/0,2 мбар 2,5/0,2 мбар 1,3/0,2 мбар
Время сушки 23 часа 23 часа 23 часа 23 часа
Ам 0,29 0,25 0,25 0, 13
% активных клеток 34 26 34 40
Из табл. 1 видно, что внутри продуктов, сушеных при 2,5 мбар, водная активность выше, чем предпочтительная (меньше 0,15), тогда как образец, сушеный при 1,3 мбар, имеет предпочтительную водную активность. Кроме того, выживаемость клеток после обработки выше для образца, сушеного при 1,3 мбар, чем для образцов, сушеных при 2,5 мбар.
Таблица 2
Водная активность и выживаемость клеток после обработки при различных температурах
№ 5 № 6 № 7
Загрузка лотка 10 кг/м2 10 кг/м2 10 кг/м2
Температура нагрева 60°С 70°С 60°С
Максимальная температура продукта 32°С 32°С 37°С
Давление 1,3/0,2 мбар 1,3/0,2 мбар 1,3/0,2 мбар
Время сушки 31 час 24 часа 24 часа
Ам 0, 11 0,33 0, 12
% активных клеток 63 26 65
Из табл. 2 видно, что водная активность, а также выживаемость клеток после обработки находятся в неприемлемом диапазоне, когда температура сушки слишком высокая (70°С), в то время как нет разницы ни водной активности, ни выживаемости клеток после обработки при температуре сушка или 50, или 60°С. В обоих случаях величины находятся в приемлемом диапазоне.
В отношении этого примера можно сказать, что в данном случае существенным параметром, который варьировался, была величина вакуумного давления при первичной стадии сушке (е), где использовались различные величины вакуумного давления, некоторые из которых были в пределах диапазона вакуумного давления от 0,7 до 2 миллибар (мбар) (например, использовали давление 1,3 мбар), а некоторые выходили за пределы этого диапазона (например, при сушке использовали давление 2,5 мбар).
Экспериментальные результаты, по существу, продемонстрировали, что, когда использовали вакуумное давление за пределами диапазона от 0,7 до 2 мбар, то не была получена удовлетворительная сушка композиции ЬЛВ. Давление следует выбирать так, чтобы оно несколько превышало температуру перехода смеси по объясненным выше причинам. Температура перехода смеси, использованная в примере 1, составляла примерно -33°С. При 2,5 мбар эта температура составляла примерно 10,5°С, что значительно выше, чем температура перехода. Таким образом, результаты, представленные в табл. 1, демонстрируют, что больше подходит давление 1,3 мбар.
Когда вакуумное давление было в пределах диапазона от 0,7 до 2 миллибар (мбар) (например, дав- 16 027508 ление составляло 1,3 мбар), то можно было провести должную и эффективную сушку для получения композиции сухой смеси с водной активностью (а„) менее чем 0,15.
Выводы.
Результаты данного примера 1 в сущности продемонстрировали, что только работая в пределах диапазона вакуумного давления от 0,7 до 2 мбар на стадии (е), можно получить удовлетворительный способ сушки композиции ЬАВ по настоящему изобретению, содержащей относительно большое количество защитных агентов.
Пример 2. Размер замороженных частиц/пеллет стадии (с).
Эксперимент проводили, по существу, как описано в примере 1, но вакуумное давление на стадии (с) поддерживали на постоянном уровне примерно 1,3 мбар.
В данном эксперименте существенной переменной величиной был размер замороженных частиц/пеллет стадии (с).
Проводили эксперименты, где по меньшей мере 97% замороженных частиц/пеллет на стадии (с) представляли собой частицы/пеллеты, которые были способны проходить через сетку с максимальным размером отверстий с различными размерами.
Результаты.
Экспериментальные результаты, по существу, продемонстрировали, что когда размеры частиц/пеллет были больше 10 мм, то не был получен оптимальный результат сушки.
Но когда размеры частиц/пеллет были меньше 5 мм, то достигалась очень хорошая и эффективная сушка.
Выводы.
Результаты данного примера 2 в сущности демонстрируют, что в данном случае предпочтительно, чтобы по меньшей мере 95% (предпочтительнее по меньшей мере 97%) замороженных частиц/пеллет на стадии (с) представляют собой частицы/пеллеты, которые способны проходить через сетку с максимальным размером отверстий 10 мм (предпочтительно с максимальным размером отверстий 5 мм).
Пример 3. Сушка других композиций ЬАВ.
По существу повторяли пример 1, но с использование других клеток ЬАВ и других защитных агентов. Также оценивали сушку при величинах давления 0,9/0,2 мбар и температурах нагрева 32 и 37°С (для смесей с альгинатом и без него), и для обеих температур водная активность сухих продуктов составила меньше 0,15 после 24 ч сушки.
Смеси без альгината и смеси с сахарозой обрабатывали как №7, и это привело к получению сухих продуктов с водной активностью меньше 0,15 и выживанию клеток после обработки приблизительно 50%. Смесь с сахарозой привела к получению сухих продуктов с водной активностью меньше 0,3, но увеличением времени сушки можно значительно снизить водную активность.
На стадии (Ь) во всех экспериментах была получена кашицеобразная суспензия, которая содержала некоторое количество защитных агентов, составлявшее примерно от 6 до 15 г, причем количество защитных агентов представлено относительно 1 г клеток молочнокислых бактерий в кашицеобразной суспензии, а количество защитного агента (агентов) и клеток молочнокислых бактерий измеряются в виде сухого вещества в кашицеобразной суспензии.
Во всех экспериментах по меньшей мере 50% использованных защитных агентов представляли собой сахариды.
Выводы.
Результаты данного эксперимента 3, по существу, продемонстрировали то же, что в эксперименте 1, т.е. что только работая в пределах диапазона вакуумного давления от 0,7 до 2 мбар на стадии (е), можно получить удовлетворительный способ сушки релевантной для настоящего изобретения композиции ЬАВ, содержащей относительно большое количество защитных агентов. Точный диапазон вакуумного давления, подходящего для отдельной композиции, выбирают определением температуры перехода композиции, и ее корреляцией с таблицей давления водяного пара, как объясняется выше.
Можно сказать, что данный пример 3 подтвердил это заключение для различных композиций ЬАВ, которые могут характеризоваться как содержащие относительно большое количество сахаридов в качестве защитных агентов.
Пример 4. Получение смесей без альгината.
К одной части концентрата ЬОС® добавляли две части деминерализованной воды и концентрат центрифугировали до получения первоначального объема (приблизительно 1,27 хЮ11 активных клеток/г). Используемый ниже концентрат клеток содержал около 10% сухого вещества клеток, т.е. так называемый 10% концентрат.
Смесь 1. К 100 г промытого концентрата добавляли 30 г сахарозы, 17,5 г мальтодекстрина (О1иабех ΙΤ 12) и 13 г аскорбата Να. Смесь перемешивали до растворения добавок. Затем смесь подвергали вакуумной сушке.
Смесь 2. К 100 г промытого концентрата добавляли 70 г сахарозы, 17,5 г мальтодекстрина (О1иабех ΙΤ 12) и 13 г аскорбата Να. Смесь перемешивали до растворения добавок. Затем смесь подвергали ваку- 17 027508 умной сушке.
Смесь 3. К 100 г промытого концентрата добавляли 37,4 г сахарозы, 60 г трегалозы и 2,6 г аскорбата Να. Смесь перемешивали до растворения добавок. Затем смесь подвергали вакуумной сушке.
Контроль 1 (контрольная смесь). К 100 г промытого концентрата добавляли 6 г сахарозы, 3,5 г мальтодекстрина (О1ис1Йех ΙΤ 12) и 2,6 г аскорбата Να. Смесь перемешивали до растворения добавок. Затем смесь подвергали вакуумной сушке.
Если смеси сушатся в вакуумной ленточной сушилке, то может быть необходимым добавление небольшого количества желатинизирующего агента, например пектина, для получения соответствующей вязкости.
Пример 5. Испытание смесей ЬОО® без альгината в открытых мешках и в порошковой молочной смеси для грудных детей при 30°С.
Устойчивость продуктов испытывали в открытых мешках, хранившихся при 30°С и 30% относительной влажности, и при смешивании в порошковую молочную смесь для грудных детей с водной активностью 0,3. См. данные устойчивости в табл. 3 и 4. В качестве контроля использовали ЬОО®, содержащую 20% количества добавок в смеси 1, как указано выше в примере 4. Порошок увлажняли для получения водной активности 0,27-0,30.
Таблица 3
Хранение в открытых мешках, хранившихся при 30°С/30% относительной влажности
Смесь Начало Ьо§ активных клеток/г 1 неделя Ьо§ активных клеток/г 10 дней Ьо§ активных клеток/г 2 недели Ьо§ активных клеток/г 3 недели Ьо§ активных клеток/г Ьо§ потери 3 недели
Смесь 1 11,3 11,3 11,3 11,3 11,3 0
Смесь 2 11,0 11,0 11,0 11,0 11,0 0
Смесь 3 11,0 11,0 11,1 11,1 11,0 0
Контроль 1 11,5 11,4 - 11,2 11,0 0,5
Образцы измеряли проточной цитометрией (активные клетки/г).
Вывод.
Из табл. 3 видно, что самая высокая потеря % активных клеток была обнаружена в контроле 1. Путем увеличения количества защитных агентов на фактор 5 устойчивость значительно повышается (сравнение смеси 1 и контроля 1). Смеси 2 и 3 также продемонстрировали повышенную устойчивость.
Таблица 4
Устойчивость при хранении при 30°С в смеси ЕпГадго^ с а^ 0,3
Смесь Начало Бод КОЕ/г 9 недель Бод КОЕ/г 15 недель Бод КОЕ/г потери 9 недель Бод потери 15 недель
Смесь 1 11,4 10,9 11,1 0,5 0,3
Смесь 2 11,1 11,0 10,9 0,1 0,2
Смесь 3 11,2 10,8 10,7 0,4 0,5
Контроль 1 11,5 8,0 5,7 3,5 5,8
Мешки продували Ν2 и герметично укупоривали перед хранением.
Вывод.
Порошковая молочная смесь для грудных детей, полученная со смесями 1-3, имеет лучшую устойчивость, чем контроль 1.
Пример 6. Испытание смесей Ь.Рагасазе! подвида Рагаса§е1 Ь.сазе! 431® без альгината в порошковой молочной смеси для грудных детей при 35°С.
К одной части концентрата Ь.рагасазе! подвида Рагаса§е1 Ь.сазех 431® (ТС 431) добавляли две части деминерализованной воды и концентрат центрифугировали до первоначального объема (приблизительно 1,27х1011 активных клеток/г). Концентрат клеток, использованный ниже, содержал около 10% сухого вещества клеток, т.е. так называемый 10% концентрат.
Смесь 1ЬС 431. К 100 г промытого концентрата добавляли 30 г сахарозу, 17,5 г мальтодекстрина (О1исн.1ех ΙΤ 12) и 13 г аскорбата №. Смесь перемешивали до растворения добавок. После этого смесь гранулировали в жидком азоте перед ее вакуумной сушкой.
Смесь добавляли к порошковой молочной смеси для грудных детей, и устойчивость продукта испытывали в порошковой молочной смеси для грудных детей с водной активностью 0,3, хранившейся при 30% относительной влажности и 35°С. См. данные устойчивости в табл. 3. В качестве контроля исполь- 18 027508 зовали порошковую молочную смесь для грудных детей, содержащую РС 431 в контроле 1, как указано выше в примере 4.
Таблица 5
Устойчивость при хранении при 35°С в порошковой молочной смеси для грудных детей с а„ 0,3
Смесь Начало Ьод КОЕ/г 3 недели Ьо§ КОЕ/г 6 недель Ьо§ КОЕ/г 9 недель Ьо§ КОЕ/г 1ю§ потери 15 недель
Смесь 1ьс431 10,0 9,3 9,4 9,1 0,9
КОНТРОЛЬ 1ьс431 П,9 9,9 9,1 7,7 4,2
Мешки продували Ν2 и герметично укупоривали перед хранением.
Вывод.
Из табл. 5 и фиг. 1 видно, что для Ь.еа8е1 431® и при температуре хранения 35°С также самая высокая потеря % активных клеток обнаруживается в контроле 1. Путем увеличения количества защитных агентов на фактор 5, устойчивость Ь.еа8е1 431® также значимо увеличивается.
Пример 7. Испытание хранения при 35°С шести различных смесей Ь.рагаеа8е1 подвида рагаеазе1 Ь.еа8е1 431® без альгината в порошковой молочной смеси для грудных детей.
К одной части концентрата Ь.еа8е1 431® добавляли две части деминерализованной воды и концентрат центрифугировали до получения первоначального объема (приблизительно 1,27х1011 активных клеток/г). Концентрат клеток, использованный ниже, имел около 10% сухого вещества клеток, т.е. так называемый 10% концентрат. Смесь перемешивали до растворения добавок. После этого смесь гранулировали в жидком азоте перед ее вакуумной сушкой.
Композиция 1. К 1000 г промытого концентрата добавляли 753 г трегалозы, 191 г мальтодекстрина, 26 г аскорбата N и 30 г Кешу НС-Р.
Композиция 2. К 1000 г промытого концентрата добавляли 753 г трегалозы, 50 г инулина и 167 г гидролизированного казеина.
Композиция 3. К 1000 г промытого концентрата добавляли 366 г трегалозы, 213 г мальтодекстрина и 26 г аскорбата Ж.
Композиция 6. К 1000 г промытого концентрата добавляли 615 г трегалозы, 358 г мальтодекстрина и 26 г аскорбата Ж.
Композиция 7. К 1000 г промытого концентрата добавляли 459 г трегалозы, 267 г мальтодекстрина и 26 г аскорбата Ж.
Композиция 8. К 1000 г промытого концентрата добавляли 213 г трегалозы, 124 г мальтодекстрина и 26 г аскорбата Ж.
Различные композиции добавляли к порошковой молочной смеси для грудных детей и устойчивость продуктов испытывали в порошковой молочной смеси для грудных детей с водной активностью 0,3, хранившейся при 30% относительной влажности и 35°С в герметично укупоренных мешках после продувки Ν2. Данные устойчивости см. в табл.4 и на фиг. 2. В качестве контроля использовали порошковую молочную смесь для грудных детей, содержащую Ь.еа8е1 431®, в контроле 1, описанном выше в примере 4.
Таблица 6
Устойчивость при хранении (1од активных клеток/г) при 35°С в порошковой молочной смеси для грудных детей с а„ 0,3
Композиция 0 3 недели 5 недель 6 недель 9 недель 13 недель 17 недель
1 10,5 9,4 - 9,7 8,7 8,4 -
2 10,7 10,4 - 10 9,5 9,6 9,4
3 10,8 9,4 - 9 8,8 8,6 -
6 10,4 9,3 - 8,8 8,8 8 -
7 10,3 9,3 - 8,6 8,6 8 -
8 10,7 9,6 - 8,9 - 8,5 -
Контроль 1 12,0 9,0 7,8 - - - -
Вывод.
Из табл. 6 и фиг. 2 видно, что для Ь.еа8е1 431® и при температуре хранения 35°С самая большая потеря % активных клеток обнаруживается в контроле 1. Все испытанные композиции и, в частности, композиция 2 демонстрируют существенно улучшенную устойчивость.
Пример 8. Сравнение композиций с альгинатом и без него для Ь.рагаеа8е1 подвида рагаеазе1 (РС 431) и для ЬОО®
10% концентраты РОСт и Ь.рагаеазе! подвида рагаеазе! (РС 431) получали, как описано выше, и до- 19 027508 бавляли к композиции 2 или к композиции 2 альгинат (см. ниже). Использовали два различных концентрата Ι.ϋϋ® и два различных концентрата Ь.сазе1 431® для испытания воспроизводимости. Дополнительно получали две различные смеси, причем разница между двумя смесями состояло в том, что композиция 2 не содержала альгинат, тогда как композиция 2альгинат содержала 30 г альгината Ыа на 1 кг промытого концентрата. Смесь перемешивали до тех пор, пока ни растворялись добавки, и замораживали в жидком азоте. Затем смесь повергали вакуумной сушке.
Композиция 2альгинат. К 1000 г промытого концентрата добавляли 753 г трегалозы, 50 г инулина, 167 г гидролизированного казеина и 30 г альгината Ыа.
Таблица 7 а
Данные устойчивости при хранении (1од (КОЕ/г)) после хранения при 35°С в порошковой молочной смеси для грудных детей с 0,3 в герметично укупоренных мешках
0 недель 1 неделя 2 недели 3 недели 5 недель 6 недель
Композиция 2ьОО+альгинат № 11,2 - - 11 - 10,7
Композиция 2шо 11,0 - - 10,7 - 10,3
Композиция 2шо 11,0 - - 10,6 - 10,2
Композиция 2ьС43 1+альгинат № 10,3 - - 10 - 9,6
КОМПОЗИЦИЯ 2ьс 431 10,9 - - 10,2 - 9,8
КОМПОЗИЦИЯ 2 |с 431 10,7 - - 10,4 - 10,0
Таблица 7Ъ
Данные устойчивости при хранении (1од (КОЕ/г)) после хранения при 40°С в порошковой молочной смеси для грудных детей с 0,3 в герметично укупоренных мешках
0 недель 1 неделя 2 недели 3 недели
КОМПОЗИЦИЯ 2ц50+альгинат ]\[а 11,2 11 10,2 9,1
Композиция 2ьоо 11,0 10,8 10,0 8,9
КОМПОЗИЦИЯ 2| (-;о 11,0 10,7 9,7 8,7
КОМПОЗИЦИЯ 2ьс 431+альгинат N3 10,3 10,1 9,2 8,0
КОМПОЗИЦИЯ 2ьс431 10,7 - - 9,8
КОМПОЗИЦИЯ 2ьс431 10,9 10,4 9,4 8,6
Вывод.
Из табл. 7а и 7Ъ и на фиг. 3-6 демонстрируется, что в сущности нет различия между композициями с альгинатом Ыа или без него в отношении устойчивости.
Пример 9. Термическая обработка композиций Ι.ΟΟ® с альгинатом и без него.
Получали 10% концентраты Ι.ΟΟ® и добавляли к композиции 2 или к композиции 2альгинат, как описано выше в примере 8. Поскольку термическая обработка релевантна для получаемых в промышленном масштабе продуктов, то две композиции подвергали термической обработке для сравнения устойчивости композиций с альгинатом и без него. В качестве контроля использовали порошковую молочную смесь для грудных детей, содержащую Ι.ϋϋ® в контроле 1, описанном выше в примере 4.
Таблица 8
Данные устойчивости при хранении (1од (КОЕ/г)) после хранения при 35°С в порошковой молочной смеси для грудных детей с 0,25 в герметично укупоренных мешках
0 недель 3 недели 6 недель 9 недель 13 недель 17 недель
Композиция 2альгинат 11,1 11 10,9 10,9 10,7 10,6
Композиция 2 10,9 10,8 10,7 10,6 10,5 10,5
Композиция 2альгинат+нагревание 11,0 10,9 10,8 10,5 10,3 10,2
Композиция 2нагревание 10,8 10,8 10,6 10,5 - 10,4
Контроль 1 11,9 11,5 11,2 11,0 10,7 9,8
Вывод.
- 20 027508
Из табл. 8 и фиг. 7 видно, что для композиции с альгинатом натрия термическая обработка оказывает отрицательное воздействие на устойчивость.

Claims (13)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Стабильная сухая композиция молочнокислых бактерий, содержащая:
    (a) от 109 до 1013 КОЕ молочнокислых бактерий на грамм композиции и (b) защитные агенты в количестве, эффективном для стабилизации молочнокислых бактерий, причем композиция включает:
    (ΐ) от 2 до 9 г сахарозы на грамм молочнокислых бактерий;
    (й) от 1 до 3 г мальтодекстрина на грамм молочнокислых бактерий и (ΐΐΐ) от 0,75 до 2 г аскорбата Να на грамм клеток молочнокислых бактерий.
  2. 2. Сухая композиция по п.1, где молочнокислые бактерии относятся по меньшей мере к одному роду, выбранному из группы, включающей Ьас1ососсиз, 31гер1ососси§, Еп!егососсиз, Ьас1оЬасШи§, ЬеисопозЮс, Вик.1оЬас1епит. Ргорют и Ребюсоссиз.
  3. 3. Сухая композиция по п.2, где молочнокислые бактерии относятся по меньшей мере к одному виду, выбранному из группы, включающей ЬасФЬасШиз гйатпозиз, Ьас1ососсиз 1асПз подвида 1асйз, Ьас1ососсиз 1асйз подвида сгетопз, ВенсопозЮс 1асйз, ВенсопозЮс тезеШегоЛез подвида сгетопз, Ребюсоссиз реШозасеиз, ЬасФсоссиз 1асНз подвида 1асНз Ьюуаг б1асе!у1асйз, Ьас1оЬас111из сазе1 подвида сазе1, 31гер1ососсиз ШегторЬбиз, ЕШегососсиз, такие как ЕШегососсиз Гаесит, В1ЙбоЬас1егтт аштаНз, ВПк1оЬас1епит 1асйз, В1ЙбоЬас1епит 1опдит, 1 лс1оЬасП1из 1асНз, 1 .асюЬасШиз йеКейсиз, Вас1оЬасП1из ГегтепНнп, Вас1оЬасй1из зайуагшз, Вас1оЬасП1из бе1Ьгиескй подвида Ьи1дапсиз и Вас1оЬас|11пз атборЬбиз.
  4. 4. Сухая композиция по п.3, где молочнокислые бактерии относятся по меньшей мере к одному виду, выбранному из группы, включающей ВВ-12® (ВШбоЬасГегтт атшайз подвида 1асНз ВВ-12®), Ώ3Μ 15954; АТСС 29682, АТСС 27536, Ώ3Μ 13692 и Ώ3Μ 10140, ЬА-5® (ЬасЮЬасШиз ашборЬбиз ЬА-5®), Ώ3Μ 13241, ЬСС® (ЬасФЬасШиз гйатпозиз ЬСС®), АТСС 53103, СК-1® (ЬасФЬасШиз гйатпозиз СК1®), АТСС 55826, КС-14® (ЬасФЬасШиз геШеп КС-14®), АТСС 55845, Ь.сазе1 431® (Ьас!оЬас111из рагасазе1 подвида рагасазе1 Ь.сазе1 431®), АТСС 55544, Р19® (ЬасФЬасШиз рагасазе1 Р19®), ΕΜΘ-17806, ТН4® (8йер1ососсиз ШегторЬбиз ТН-4®), Ώ3Μ 15957, РСС® (ЬасФЬасШиз ГелтешНип РСС®), ΝΜ02/31074, ЬР-33® (ЬасФЬасШиз рагасазе1 подвида рагасазе1 ЬР-33®), ССТСС М204012.
  5. 5. Сухая композиция по п.1, масса которой составляет от 50 г до 10000 кг.
  6. 6. Сухая композиция по п.1, в которой молочнокислые бактерии стабильны при хранении при 30°С и 30% относительной влажности.
  7. 7. Сухая композиция по п.1, в которой водная активность (аЦ составляет менее 0,30.
  8. 8. Сухая композиция по п.1, изготовленная способом, включающим смешивание водного препарата молочнокислых бактерий с сахарозой, мальтодекстрином и аскорбатом Νη и сушку полученной смеси.
  9. 9. Сухая композиция по п.8, где смесь сушат при вакуумном давлении от 0,7 до 2 мбар.
  10. 10. Порошковая молочная смесь для грудных детей, содержащая композицию по п.1.
  11. 11. Молочная смесь для грудных детей в возрасте до 12 месяцев, молочная смесь для детей более старшего возраста или специальная смесь или продукт питания для детей в возрасте до 1 года и старше, включающая порошковую молочную смесь по п.10.
  12. 12. Пищевой продукт, содержащий композицию по п.1.
  13. 13. Пищевая добавка, содержащая композицию по п.1.
EA201490185A 2011-06-30 2012-06-30 Стабильная сухая композиция молочнокислых бактерий EA027508B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11172132 2011-06-30
EP11172697 2011-07-05
EP11191955 2011-12-05
PCT/EP2012/062787 WO2013001089A1 (en) 2011-06-30 2012-06-30 Novel compositions

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201490185A1 EA201490185A1 (ru) 2014-09-30
EA027508B1 true EA027508B1 (ru) 2017-08-31

Family

ID=46420203

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201490185A EA027508B1 (ru) 2011-06-30 2012-06-30 Стабильная сухая композиция молочнокислых бактерий

Country Status (9)

Country Link
US (2) US9308271B2 (ru)
EP (2) EP2730646B2 (ru)
CN (2) CN105996051B (ru)
BR (1) BR112013033565B1 (ru)
DK (2) DK2730646T4 (ru)
EA (1) EA027508B1 (ru)
HK (1) HK1191671A1 (ru)
IN (1) IN2014CN02447A (ru)
WO (1) WO2013001089A1 (ru)

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2730646B2 (en) 2011-06-30 2020-01-22 Chr. Hansen A/S Drying lactic acid bacteria and new compositions
DK3287518T3 (da) * 2012-08-20 2022-02-21 Chr Hansen As Fremgangsmåde til frysetørring af et bakterieholdigt koncentrat
DK2885395T3 (da) 2012-08-20 2020-11-30 Chr Hansen As Fremgangsmåde til frysetørring af et bakterieholdigt koncentrat
PL225613B1 (pl) 2013-10-08 2017-04-28 Zachodniopomorski Univ Tech W Szczecinie Sposób wytwarzania prozdrowotnego produktu spożywczego
PL225614B1 (pl) 2013-10-08 2017-04-28 Zachodniopomorski Univ Tech W Szczecinie Prozdrowotny produkt spożywczy
DK2990045T3 (en) * 2014-08-26 2017-02-13 Chr Hansen As Bifidobacterium animalis subsp. lactis for use in reducing abdominal pain in a postmenopausal woman
BR112017026298A2 (pt) * 2015-06-08 2018-09-11 Chr Hansen As produtos de bala de goma e de bala de marshmallow à base de glicerina com bactérias probióticas
AU2016297986B8 (en) 2015-07-29 2020-06-11 Advanced Bionutrition Corp. Stable dry probiotic compositions for special dietary uses
CA2994970A1 (en) * 2015-08-14 2017-02-23 Clearh2O, Inc. High throughput process for delivering semi-firm gel for poultry
CN106591211A (zh) * 2015-10-16 2017-04-26 镇江市天益生物科技有限公司 罗伊氏乳杆菌的低温驯化及其制备低温发酵乳的方法
CN106591163A (zh) * 2015-10-16 2017-04-26 镇江市天益生物科技有限公司 鼠李糖乳杆菌的低温驯化及其制备低温发酵乳的方法
US20190029311A1 (en) * 2015-12-17 2019-01-31 Cj Cheiljedang Corporation Coating method of lactic acid bacteria with increased intestinal survival rate
CN106418547A (zh) * 2016-10-09 2017-02-22 西安创客村电子商务有限责任公司 一种益生菌微胶囊及其制备方法
PL3554283T3 (pl) 2016-12-14 2021-04-19 Chr. Hansen A/S Wyroby w postaci cukierków piankowych na bazie gliceryny i białka z bakteriami probiotycznymi
CN108354952A (zh) * 2017-01-26 2018-08-03 丁大于 阴道注入物及其混合装置套组与使用方法
GB201708932D0 (en) * 2017-06-05 2017-07-19 Probi Ab Microbial compositions
CN107287136A (zh) * 2017-07-06 2017-10-24 齐鲁工业大学 一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法
CN107287121A (zh) * 2017-08-11 2017-10-24 洛阳泽达慧康医药科技有限公司 一种乳酸菌冻干保护剂及其制备方法和使用方法
CN107668211B (zh) * 2017-11-13 2021-08-10 海普诺凯营养品有限公司 一种增强免疫功能的婴幼儿配方羊奶粉及其制作方法
IT201800003128A1 (it) * 2018-02-28 2019-08-28 Propharma Soc A Responsabilita Limitata Semplificata Composizione probiotica
US20210392880A1 (en) 2018-10-26 2021-12-23 Danisco Us Inc Stable microbial composition and drying process
FR3097408B1 (fr) * 2019-06-24 2022-06-17 Inst Nat De La Rech Agronomique Inra Poudre fromageable, procédés pour la fabrication de cette poudre fromageable et d’une denrée alimentaire fromagère à partir de cette dernière
EP3839039A1 (en) * 2019-12-16 2021-06-23 4D Pharma Research Limited Providing bacterial biomass with improved storage stability
EP4225031A1 (en) 2020-10-06 2023-08-16 Danisco US Inc. Readily dispersible shelf-stable bioactive granules
EP4251729A1 (en) 2020-11-30 2023-10-04 Chr. Hansen A/S Stabilised lactic acid bacteria compositions
EP4251728A1 (en) 2020-11-30 2023-10-04 Chr. Hansen A/S Method for preparing bacterial products
CN113025540B (zh) * 2021-05-28 2021-10-01 中国食品发酵工业研究院有限公司 用于发酵大豆蛋白的乳酸菌菌剂、制备方法、发酵方法、具有增肌功能的发酵产物
JP7429076B1 (ja) 2023-04-04 2024-02-07 ウィステリア製薬株式会社 乳酸菌含有粉体、除菌剤、口腔ケア剤

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010138522A2 (en) * 2009-05-26 2010-12-02 Advanced Bionutrition Corporation Stable dry powder composition comprising biologically active microorganisms and/or bioactive materials and methods of making
US20110070334A1 (en) * 2009-09-20 2011-03-24 Nagendra Rangavajla Probiotic Stabilization

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0259739A1 (en) 1986-09-10 1988-03-16 Rhone-Poulenc Inc. Improved stability of freeze-dried cultures
EP1441027A1 (en) 2003-01-22 2004-07-28 Chr. Hansen A/S Storage stable frozen lactic acid bacteria
US7867541B2 (en) * 2003-04-14 2011-01-11 Mead Johnson Nutrition Company Compositions and methods of formulation for enteral formulas containing sialic acid
CN1569043A (zh) * 2003-07-17 2005-01-26 中国农业大学 一种包被乳酸菌微胶囊及其制备方法
US20070031475A1 (en) * 2003-09-26 2007-02-08 Nestec S.A. Nutritional composition with unsaturated fatty acids and trace elements
CN1306021C (zh) * 2003-11-03 2007-03-21 东北农业大学 一种双歧杆菌冻干粉的制备方法及其产品和用途
US20050100559A1 (en) 2003-11-07 2005-05-12 The Procter & Gamble Company Stabilized compositions comprising a probiotic
CN101193559A (zh) * 2005-04-13 2008-06-04 雀巢技术公司 具有益生菌的婴儿配方食品
CN100429980C (zh) * 2006-09-08 2008-11-05 肖雯娟 直投式酸奶发酵菌剂的生产方法
WO2008127567A1 (en) 2007-04-13 2008-10-23 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Novel nutritional food products for improved digestion and intestinal absorption
US20110200708A1 (en) 2008-10-31 2011-08-18 Orme Brian J A composition for activating and/or stabilizing micro-organisms
EP2216036A1 (en) * 2009-02-10 2010-08-11 Nestec S.A. Lactobacillus rhamnosus NCC4007, a probiotic mixture and weight control
US8425955B2 (en) * 2009-02-12 2013-04-23 Mead Johnson Nutrition Company Nutritional composition with prebiotic component
DK2398890T3 (en) 2009-02-23 2015-08-17 Chr Hansen As A process for preparing lactic acid bacterial preparation
CN102018038A (zh) * 2010-11-22 2011-04-20 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 一种添加DHA和Vc或其钠盐的酸奶及其制备方法
EP2730646B2 (en) 2011-06-30 2020-01-22 Chr. Hansen A/S Drying lactic acid bacteria and new compositions

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010138522A2 (en) * 2009-05-26 2010-12-02 Advanced Bionutrition Corporation Stable dry powder composition comprising biologically active microorganisms and/or bioactive materials and methods of making
US20110070334A1 (en) * 2009-09-20 2011-03-24 Nagendra Rangavajla Probiotic Stabilization

Also Published As

Publication number Publication date
CN105996051A (zh) 2016-10-12
EP2726597A1 (en) 2014-05-07
US20140255366A1 (en) 2014-09-11
BR112013033565B1 (pt) 2021-06-29
US9308271B2 (en) 2016-04-12
WO2013001089A1 (en) 2013-01-03
EP2730646B2 (en) 2020-01-22
CN103620021A (zh) 2014-03-05
DK2726597T3 (en) 2018-01-15
EP2726597B1 (en) 2017-11-15
HK1191671A1 (zh) 2014-08-01
DK2730646T3 (en) 2016-05-09
BR112013033565A2 (pt) 2017-02-07
US10792316B2 (en) 2020-10-06
CN103620021B (zh) 2016-06-08
EA201490185A1 (ru) 2014-09-30
US20160235105A1 (en) 2016-08-18
CN105996051B (zh) 2024-04-16
EP2730646B1 (en) 2016-04-06
IN2014CN02447A (ru) 2015-08-07
EP2730646A1 (en) 2014-05-14
DK2730646T4 (da) 2020-04-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA027508B1 (ru) Стабильная сухая композиция молочнокислых бактерий
JP2670691B2 (ja) 直接摂取するための再構成可能な乾燥生成物及びその製造方法
CN102482635B (zh) 具有增强稳定性和生存力的包被的脱水微生物
CN101530129B (zh) 冻干奶粉的生产方法
WO2007079147A2 (en) A delivery vehicle for probiotic bacteria comprising a dry matrix of polysaccharides, saccharides and polyols in a glass form and methods of making same
CN108113004A (zh) 高活性副干酪乳杆菌n1115即食型益生菌粉的制备方法
BR112018001784B1 (pt) Composições probióticas secas estáveis para usos dietéticos especiais, seu método de preparação e método de preparação de uma fórmula para bebês
ES2773069T5 (es) Procedimiento para la preparación de composición de microorganismos liofilizada
CN109953339A (zh) 一种适合航天员的益生菌营养制剂
CN109329699A (zh) 一种益生菌沙棘果泥胶冻及其制备方法
Sribounoy et al. Development of pelleted feed containing probiotic Lactobacillus rhamnosus GG and Jerusalem artichoke for Nile Tilapia and its biocompatibility studies
Haldar et al. Development of vacuum‐dried probiotic milk powder with Bacillus coagulans
Genevois et al. Bioconversion of pumpkin by-products in novel supplements supporting Lactobacillus casei
CN109402005B (zh) 一种益生菌发酵剂及其在发酵制备具有乙醇降解功能发酵乳中的应用
CN104642746B (zh) 一种饲用乳酸菌微丸的制备方法
EP2797438A2 (en) Methods for reducing microbial contamination of dryblended powdered nutritional compositions
KR102183361B1 (ko) 고소애 발효 분말을 이용한 환자 회복용 떡 및 그 제조방법
US6632458B1 (en) Food using γ-aminobutyric acid-enriched cruciferous plant
EP3524051A1 (en) Matricial microencapsulation compositions
CN110037157A (zh) 一种提高植物乳杆菌在口香糖制备及贮藏过程中稳定性的方法
JPH0856651A (ja) 乳酸菌の増殖方法およびそれを利用する乳酸菌パウダーの製造方法
CN106880035A (zh) 一种调节肠道菌群失调的复合肠内营养产品及其制备方法
JP3430146B2 (ja) ケール乾燥粉末を含有する血液浄化作用を有する食品
CN116507718A (zh) 稳定的乳酸菌组合物
Martins et al. Use of Legume Wastewater Extracts on the Storage Stability of Freeze-Dried Lactiplantibacillus plantarum WCFS1

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM