CN109953339A - 一种适合航天员的益生菌营养制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明属于保健品技术领域，具体涉及一种适合航天员的益生菌营养制剂。该益生菌营养制剂包括乳双歧杆菌15％‑20％；植物乳杆菌8％‑12％；干酪乳杆菌10％‑15％；鼠李糖乳杆菌9％‑16％；低聚果糖25％‑30％；低聚木糖20％‑25％；所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。该产品针对航天员的特殊需求合理搭配菌群及益生元，冻干粉制备过程中添加自制保护剂提高各种微生物的活性，使得最终产品活性高、直达肠道，效果好，益生菌搭配益生元，繁殖高效。
Description
技术领域
本发明属于保健品技术领域，具体涉及一种适合航天员的益生菌营养制剂。
背景技术
益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。人体、动物体内有益的细菌或真菌主要有：酪酸梭菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、放线菌、酵母菌等。目前世界上研究的功能最强大的产品主要是以上各类微生物组成的复合活性益生菌，其广泛应用于生物工程、工农业、食品安全以及生命健康领域。
航天员是一类特殊人群，在极端太空环境工作，平时又要接受各种高强度的训练。由于航天特殊的作业环境和工作环境会对航天员的健康产生一定的不良影响，因此研究并开发出适合航天员食用的食品或保健品是对我国食品技术研究提出的新的要求。目前，航天肠道微生态变化及对机体的影响越来越受到航天生物医学工作者的关注。研究表明微生物在没有重力的环境中几天就会发生改变，一些细菌的基因表达途径发生改变，细菌的毒力变得更强。肠道是人体最大的细菌库，肠道菌群与人体健康具有密切关系。现有资料表明，不论是长期还是短期航天，所有航天员都发生程度不同的肠道菌群失调，这种失调的特点为厌氧菌为代表的“屏障”微生物种群数量降低，直至完全消失，在原籍菌的生长环境中出现过路菌剂条件致病菌，即发生肠道微生态失调的现象。据美俄的观察结果20人11次共96天的航天飞行，所有航天员均出现肠道微生态失调的现象，表现为双歧杆菌、乳杆菌数量减少，梭状芽胞杆菌含量增加。在阿波罗飞行中，航天员出现胃肠道功能失调的症状，但当时未对航天员的肠道菌群进行分析，推测很有可能是由于肠道微生态失调引起。我国首位航天员杨利伟着陆后第一次粪便(从结肠清洗到第一次排便的时间是98h)的微生物检测几乎检测不到双歧杆菌，证明航天飞行家中了结肠清洗后的肠道微生态失调。此后多次载人航天飞行过程中航天员的检测也发生了类似现象，表明无论飞行时间长短，都发生了肠道微生态失调的现象。航天员肠道菌群失调一方面会导致肠道内源性菌群易位，过路菌过度繁殖，肠道生理性细菌定植抵抗力减弱，致病菌入侵，人体免疫力降低；另一方面优惠引起消化功能失调，脂肪的消化吸收发生障碍，出现腹泻等疾病，消化道对营养素的吸收能力下降，出现贫血或血液蛋白含量降低，肠道内发酵异常，排气增多污染座舱环境。因此如何提高航天员肠道益生菌活性，增大肠道益生菌数量对航天员的工作具有重要作用。
目前较常采用的方法是通过在航天员训练过程中或航天作业过程中补充益生元、益生菌、合生元制剂等来补充或改变体内的益生菌数量和种类，从而达到改善航天员肠道微生态环境的目的。但是常用的普通益生菌制剂由于生物活性低、各菌群相互调配不合理，服用后益生菌不能迅速在到肠道内繁殖而无法达到改善肠道微生态的作用。
发明内容
为解决上述现有技术中的不足，不发明旨在提供一种适合航天员的益生菌营养制剂，该益生菌营养制剂生物活性较高，产品起效快，可直达肠道，迅速发挥作用。为实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现：
一种适合航天员的益生菌营养制剂，原料包括以下百分质量比的物质：
乳双歧杆菌15％-20％；
植物乳杆菌8％-12％；
干酪乳杆菌10％-15％；
鼠李糖乳杆菌9％-16％；
低聚果糖25％-30％；
低聚木糖20％-25％；
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。
做为优选技术方案，原料包括以下百分比的物质：
乳双歧杆菌16％-19％；
植物乳杆菌9％-11％；
干酪乳杆菌12％-14％；
鼠李糖乳杆菌10％-16％；
低聚果糖27％-29％；
低聚木糖21％-22％；
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。
做为优选技术方案，原料包括以下百分比的物质：
乳双歧杆菌15％-16％；
植物乳杆菌8％-10％；
干酪乳杆菌11％-12％；
鼠李糖乳杆菌10％；
低聚果糖29％-30％；
低聚木糖24％-25％；
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。
上述适合航天员的益生菌营养制剂，其中的菌种冻干粉制备方法为：(1)保护剂制备：将干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质；于洗净的桃胶中按质量比1:5-10先加纯净水，再加入与桃胶等质量的新鲜银耳，煮沸后熬制30-50min，冷却后超高压均质机均质，过50-100目筛；超微细化至100-300目，喷雾干燥后得干燥保护剂，备用；(2)菌种发酵：将乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌分别发酵培养18-72h后得菌悬液，向各菌悬液中分别加入步骤(1)制备的保护剂，摇动均匀，备用；(3)冷冻干燥：将各菌悬液放入液氮中迅速冷却后，真空冷冻干燥机进行干燥后制得双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉；(4)复配包装：称取配方质量的双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖乳杆菌冻干粉、低聚果糖、低聚木糖，混合均匀后包装即得所需益生菌营养制剂。
其中，所述步骤(1)中保护剂的制备过程中还包括将干制桃胶进行微波处理的步骤，具体处理方法为：干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质，离心去上清液留底层桃胶，放入微波炉中，调整微波剂量为0.5-1.0kw/kg，微波温度60-80℃，处理时间为10-15min。做为优选技术方案，上述桃胶加入新鲜银耳熬煮30-50min后还包括采用球磨机处理12-24h，过100-300目筛，喷雾干燥后得干燥保护剂。
做为优选技术方案，所述乳双歧杆菌培养过程中采用的发酵培养基为牛乳黄豆水培养基，具体制备方法为新鲜黄豆浸泡后捞出发芽培养3-5天，之后将发芽黄豆与新鲜黄豆按4:1的体积混合后，按料液质量比加水1:2-3加入纯净水熬煮40min后冷却后过滤，每1000ml黄豆水中加入30-50ml煮沸灭菌的牛乳，搅拌均匀即得乳双歧杆菌发酵培养基。
做为优选技术方案，所述步骤(2)菌种发酵过程中向菌悬液中加入保护剂的质量为与菌悬液的质量比为1:8-12。
做为优选技术方案，所述步骤(2)菌种发酵过程中向菌悬液中加入保护剂的质量为与菌悬液的质量比为1:10。
本发明采用乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌做为基础益生菌剂，用于调理航天员肠道微环境。配以低聚果糖，低聚木糖做为益生元，促进各种益生菌在肠道中的增殖，保证益生菌进入人体后具有较好的繁殖基础。为保证各种微生物具有较高的活力，本发明各种益生菌剂采用冷冻干燥制备而成，同时在冷冻干燥过程中采用自制的益生菌保护剂做为冷冻干燥过程的保护剂，可有效提高益生菌的活力，提高产品效力。未验证本发明保护剂的对益生菌的保护效果，申请人以四种益生菌为研究对象，研究了本发明的保护剂与常规保护剂对冷冻干燥过程中微生物存活率的影响，试验方法及研究结果如下：
试验方法：
细胞悬浮液的制备：液体培养基中培养好的菌液在冷冻离心机种离心收集的菌泥悬浮于原体积1/10的生理盐水中，最终菌悬液的浓度为108-109cfu/ml。
冷冻干燥：将悬浮液按0.5ml/份分装于灭菌瓶中，分别加入不同的保护剂后，放入液氮中冷冻，然后在真空度为10.67～12.00Pa条件下干燥约30h左右，知道样品温度达到室温为止。
储藏实验：冷冻干燥后的菌粉立即取出测定活菌数，其余真空保存隔绝空气并防止水分变化，然后分别储藏于4℃和25℃的恒温培养箱中，每隔一段时间取出计数。
活菌数测定：采用平板计数法，39℃厌氧培养48～72h，计平板上的菌落数。
存活率的测定：去待测菌粉0.2g，加入一定量的灭菌PBS缓冲液，室温静置复水20min，再进行活菌数测定。
干剂中菌的存活率＝品类干剂复水后活菌数/品类原有菌悬液的活菌数*100％；
每颗活菌粉的双歧杆菌活菌数＝瓶内干剂复水后活菌数/干剂的重量。
保护剂选择：以不加保护剂为空白对照试验，添加本发明的银耳桃胶保护剂做试验组，添加常规保护剂分别为10％麦芽糊精，10％可溶性淀粉，20％脱脂奶粉、20％脱脂奶粉+8％蔗糖、20％脱脂奶粉+1％甘油、20％脱脂奶粉+1％谷氨酸。
检测各菌种冷冻干燥后的存活率如表1所示。
表1不同保护剂作用下菌悬液冷冻干燥后各菌种存活率
由表1可知：添加本发明的冷冻干燥保护剂后四种益生菌的存活率明显提高，其中菌种存活率均高于80％，而采用其他菌种保护剂虽然能够明显增加冷冻干燥后菌种的存活率但其存活率都小于80％。由此可见，本发明制备的益生菌营养制剂具有较高的活性。
4℃条件下储存过程中乳双歧杆菌的成活率如表2所示。
表2 4℃条件下储存过程中乳双歧杆菌的成活率(％)
-表示未检测或未检出。
由表2可知，采用不同的冷冻保护剂处理后在4℃条件下储藏90天，试验组双歧杆菌存活率仍有50以上，而其他保护剂作用下其菌种活性降低到20％以下。
25℃条件下储存，乳双歧杆菌的成活率如表3所示。
表3 25℃储存条件下乳双歧杆菌的成活率
-表示未检测或未检出。
由表3可知，25℃条件下对不同保护剂作用后的菌种进行储藏，保藏30天其菌种活性均有明显的降低，而25℃条件下储藏30天试验组菌种活性仍有10％以上，而其他条件处理30天后菌种活性已无法测出。
本发明产品中储藏过程中活菌数如表4所示。
表4本发明终产品在不同条件下储藏90天后菌种活性
由表4可知，本发明产品储藏90天后仍具有较高的生物活性。
本发明具有以下有益效果：
活性高、直达肠道，效果好
本发明产品在冷冻干燥过程中采用桃胶、银耳熬制后制备冷冻保护剂。银耳、桃胶中含有多种黏性多糖，熬制后通过球磨机进行球磨，将各种大分子多糖分子破碎成小分子成分，海藻糖、氨基酸、维生素等可有效降低冷冻过程中冰晶粒度，减少冷冻过程对细胞的损伤。同时桃胶及银耳中的多种黏性物质可有效在细胞外形成保护膜，从而保护干燥过程细胞，降低干燥损伤，因此本发明最终产品的活性更高。产品中的各种成分细度小，可有效保护细胞，促进其直接进入肠道环境，降低胃内酸性成分对细胞的损伤，效果更好。
益生菌搭配益生元，繁殖高效
采用多种益生菌相互配合同时搭配生物活性益生元，使得益生菌进入肠道中可迅速适应肠道环境，促进肠道中益生菌的高效增殖。低聚果糖是一种天然活性物质，甜度为蔗糖的0.3-0.6倍，既保持了蔗糖的纯正甜味性质，又比蔗糖甜味清爽，具有调节肠道菌群，增殖双歧杆菌，促进钙的吸收，调节血脂，免疫调节，抗龋齿等保健功能的新型甜味剂，被誉为继抗生素时代后最具潜力的新一代添加剂——促生物质。低聚木糖是聚合糖类中增殖双歧杆菌功能最强的品种之一，它的功效性是其他聚合糖类的近20倍，人体胃肠道内没有水解低聚木糖的酶，所以其可直接进入大肠内优先为双歧杆菌所利用，促进双歧杆菌增殖同时产生多种有机酸，降低肠道PH值，抑制有害菌生长，使益生菌在肠道大量增殖。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步解释性说明，但本发明的保护范围并不仅限于此，所有本领域的技术人员以本发明的精神对本发明所做的等效的替换均落入本发明的保护范围。
实施例1
一种适合航天员的益生菌营养制剂，原料包括：
乳双歧杆菌15％-20％；
植物乳杆菌8％-12％；
干酪乳杆菌10％-15％；
鼠李糖乳杆菌9％-16％；
低聚果糖25％-30％；
低聚木糖20％-25％；
上述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。低聚果糖、低聚木糖均采用市售产品。
实施例2
一种适合航天员的益生菌营养制剂，原料包括：
乳双歧杆菌15％；植物乳杆菌12％；干酪乳杆菌15％；鼠李糖乳杆菌13％；低聚果糖25％；低聚木糖20％。
乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。
上述菌种冻干粉的制备方法如下：
(1)保护剂制备：将干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质，按质量比1:5-10加纯净水，加入与桃胶等质量的新鲜银耳，煮沸后熬制30-50min，冷却后超高压均质机均质，过50-100目筛；超微细化至100-300目，喷雾干燥后得干燥保护剂，备用；
(2)菌种发酵：将乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌分别发酵培养18-72h后得菌悬液，向各菌悬液中分别加入步骤(1)制备的保护剂，摇动均匀，备用；
(3)冷冻干燥：将各菌悬液放入液氮中迅速冷却后，真空冷冻干燥机进行干燥后制得双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖乳杆菌冻干粉；
(4)复配包装：称取配方质量的双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉、低聚果糖、低聚木糖，混合均匀后包装即得所需益生菌营养制剂。
实施例3
一种适合航天员的益生菌营养制剂，原料包括：
乳双歧杆菌18％；植物乳杆菌8％；干酪乳杆菌10％；鼠李糖乳杆菌16％；低聚果糖26％；低聚木糖22％。
乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌采用菌种冻干粉。菌种冻干粉的制备方法为：
(1)保护剂制备：将干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质，按质量比1:5-10加纯净水，加入与桃胶等质量的新鲜银耳，煮沸后熬制30-50min，采用球磨机处理12-24h，过100-300目筛，喷雾干燥后得干燥保护剂；
(2)菌种发酵：将乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌分别发酵培养18-72h后得菌悬液，向各菌悬液中分别加入步骤(1)制备的保护剂，摇动均匀，备用；
(3)冷冻干燥：将各菌悬液放入液氮中迅速冷却后，真空冷冻干燥机进行干燥后制得双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖乳杆菌冻干粉；
(4)复配包装：称取配方质量的双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉、低聚果糖、低聚木糖，混合均匀后包装即得所需益生菌营养制剂。
实施例4
一种适合航天员的益生菌营养制剂，原料包括：
乳双歧杆菌19％；植物乳杆菌9％；干酪乳杆菌12％；鼠李糖乳杆菌10％；低聚果糖27％；低聚木糖23％。
乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。菌种冻干粉的制备方法如下：
(1)保护剂制备：干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质，离心去上清液留底层桃胶，放入微波炉中，调整微波剂量为0.5-1.0kw/kg，微波温度60-80℃，处理时间为10-15min；之后按桃胶湿基质量比1:5-10加纯净水，加入与湿基桃胶等质量的新鲜银耳，煮沸后熬制30-50min，冷却后超高压均质机均质，过50-100目筛；超微细化至100-300目，喷雾干燥后得干燥保护剂，备用；
(2)菌种发酵：将乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌分别发酵培养24-72h后得菌悬液，向各菌悬液中分别加入步骤(1)制备的保护剂，摇动均匀，备用；
(3)冷冻干燥：将各菌悬液放入液氮中迅速冷却后，真空冷冻干燥机进行干燥后制得双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖乳杆菌冻干粉；
(4)复配包装：称取配方质量的双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉、低聚果糖、低聚木糖，混合均匀后包装即得所需益生菌营养制剂。
实施例5
一种适合航天员的益生菌营养制剂，原料包括：
乳双歧杆菌15％；植物乳杆菌10％；干酪乳杆菌11％；鼠李糖乳杆菌10％；低聚果糖30％；低聚木糖24％。
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。
(1)保护剂制备：干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质，离心去上清液留底层桃胶，放入微波炉中，调整微波剂量为0.5-1.0kw/kg，微波温度60-80℃，处理时间为10-15min；之后按桃胶湿基质量比1:5-10加纯净水，加入与湿基桃胶等质量的新鲜银耳，煮沸后熬制30-50min，冷却后超高压均质机均质，过50-100目筛；超微细化至100-300目，喷雾干燥后得干燥保护剂，备用；
(2)菌种发酵：将乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌分别发酵培养24-72h后得菌悬液，向各菌悬液中分别加入步骤(1)制备的保护剂，摇动均匀，备用；
乳双歧杆菌发酵：新鲜黄豆浸泡后捞出发芽培养3-5天，之后将发芽黄豆与新鲜黄豆按4:1的体积混合后，按料液质量比加水1:2-3加入纯净水熬煮40min后冷却后过滤，每1000ml黄豆水中加入30-50ml煮沸灭菌的牛乳，搅拌均匀即得乳双歧杆菌发酵培养基。将培养基分装入培养瓶中，高压灭菌后接种乳双歧杆菌，无氧条件发酵24-72h后制得乳双歧杆菌悬液备用；
植物乳杆菌发酵：蔗糖2％、大豆蛋白胨2.5％、酵母浸粉2.5％、无水乙酸钠0.5％、无水氯化钠0.01％、巯基乙酸钠0.02％、柠檬酸氢二铵0.2％、KH2PO40.2％、MnSO4.H2O0.05％、MgSO4.7H2O0.025％、L-半胱氨酸盐酸盐0.05％、吐温80 0.1％，增值因子5％，纯净水补足100％，分装后灭菌，接种植物乳杆菌，37℃条件下发酵18h，离心，加生理盐水后继续离心，弃上清液得菌悬液备用；
干酪乳杆菌发酵：10％酶水解脱脂鲜牛乳，0.5％葡萄糖，1.5％胰蛋白胨，0.3％酵母浸膏，0.1％NaHPO4-柠檬酸，纯净水补足100％，制备干酪乳杆菌液体培养基，接种干酪乳杆菌发酵培养20h，离心，加生理盐水后继续离心，弃上清液得菌悬液备用；
鼠李糖乳杆菌发酵：MRS培养基发酵鼠李糖乳杆菌制备鼠李糖乳杆菌菌悬液；
向上述四种菌悬液中加入步骤(1)制备的干燥剂保护剂；
(3)冷冻干燥：将各菌悬液放入液氮中迅速冷却后，真空冷冻干燥机进行干燥后制得双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖乳杆菌冻干粉；(4)复配包装：称取配方质量的双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖乳杆菌冻干粉、低聚果糖、低聚木糖，混合均匀后包装即得所需益生菌营养制剂。
实施例6
一种适合航天员的益生菌营养制剂，原料包括以下百分比的物质：
乳双歧杆菌16％；植物乳杆菌8％；干酪乳杆菌12％；鼠李糖乳杆菌10％；低聚果糖29％；低聚木糖25％。
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。菌种冻干粉的制备方法为：
(1)保护剂制备：干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质，离心去上清液留底层桃胶，放入微波炉中，调整微波剂量为0.5-1.0kw/kg，微波温度60-80℃，处理时间为10-15min；之后按桃胶湿基质量比1:5-10加纯净水，加入与湿基桃胶等质量的新鲜银耳，煮沸后熬制30-50min，冷却后超高压均质机均质，过50-100目筛；超微细化至100-300目，喷雾干燥后得干燥保护剂，备用；
(2)菌种发酵：将乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌分别发酵培养24-72h后得菌悬液，向各菌悬液中分别加入步骤(1)制备的保护剂，摇动均匀，备用；
乳双歧杆菌发酵：新鲜黄豆浸泡后捞出发芽培养3-5天，之后将发芽黄豆与新鲜黄豆按4:1的体积混合后，按料液质量比加水1:2-3加入纯净水熬煮40min后冷却后过滤，每1000ml黄豆水中加入30-50ml煮沸灭菌的牛乳，搅拌均匀即得乳双歧杆菌发酵培养基。将培养基分装入培养瓶中，高压灭菌后接种乳双歧杆菌，无氧条件发酵24-72h后制得乳双歧杆菌悬液加入菌悬液质量1/8的菌种保护剂，备用；
植物乳杆菌发酵：蔗糖2％、大豆蛋白胨2.5％、酵母浸粉2.5％、无水乙酸钠0.5％、无水氯化钠0.01％、巯基乙酸钠0.02％、柠檬酸氢二铵0.2％、KH2PO40.2％、MnSO4.H2O0.05％、MgSO4.7H2O0.025％、L-半胱氨酸盐酸盐0.05％、吐温80 0.1％，增值因子5％，纯净水补足100％，分装后灭菌，接种植物乳杆菌，37℃条件下发酵18h，离心，加生理盐水后继续离心，弃上清液得菌悬液，加入菌悬液质量1/8的菌种保护剂，备用；
干酪乳杆菌发酵：10％酶水解脱脂鲜牛乳，0.5％葡萄糖，1.5％胰蛋白胨，0.3％酵母浸膏，0.1％NaHPO4-柠檬酸，纯净水补足100％，制备干酪乳杆菌液体培养基，接种干酪乳杆菌发酵培养20h，离心，加生理盐水后继续离心，弃上清液得菌悬液，加入菌悬液质量0.1倍的干燥保护剂，备用；
鼠李糖乳杆菌发酵：MRS培养基发酵鼠李糖乳杆菌制备鼠李糖乳杆菌菌悬液，加入菌悬液1/12倍的干燥保护剂，备用；
(3)冷冻干燥：将各菌悬液放入液氮中迅速冷却后，真空冷冻干燥机进行干燥后制得双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉；(4)复配包装：称取配方质量的双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉、低聚果糖、低聚木糖，混合均匀后包装即得所需益生菌营养制剂。
实施例7
一种适合航天员的益生菌营养制剂，原料包括以下百分比的物质：
乳双歧杆菌20％；植物乳杆菌9％；干酪乳杆菌10％；鼠李糖乳杆菌11％；低聚果糖25％；低聚木糖25％。
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。
一种适合航天员的益生菌营养制剂，原料包括以下百分比的物质：
乳双歧杆菌16％；植物乳杆菌8％；干酪乳杆菌12％；鼠李糖乳杆菌10％；低聚果糖29％；低聚木糖25％。
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。菌种冻干粉的制备方法为：
(1)保护剂制备：干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质，离心去上清液留底层桃胶，放入微波炉中，调整微波剂量为0.5-1.0kw/kg，微波温度60-80℃，处理时间为10-15min；之后按桃胶湿基质量比1:5-10加纯净水，加入与湿基桃胶等质量的新鲜银耳，煮沸后熬制30-50min，冷却后超高压均质机均质，过50-100目筛；超微细化至100-300目，喷雾干燥后得干燥保护剂，备用；
(2)菌种发酵：将乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌分别发酵培养24-72h后得菌悬液，向各菌悬液中分别加入步骤(1)制备的保护剂，摇动均匀，备用；
乳双歧杆菌发酵：新鲜黄豆浸泡后捞出发芽培养3-5天，之后将发芽黄豆与新鲜黄豆按4:1的体积混合后，按料液质量比加水1:2-3加入纯净水熬煮40min后冷却后过滤，每1000ml黄豆水中加入30-50ml煮沸灭菌的牛乳，搅拌均匀即得乳双歧杆菌发酵培养基。将培养基分装入培养瓶中，高压灭菌后接种乳双歧杆菌，无氧条件发酵24-72h后制得乳双歧杆菌悬液备用；
植物乳杆菌发酵：蔗糖2％、大豆蛋白胨2.5％、酵母浸粉2.5％、无水乙酸钠0.5％、无水氯化钠0.01％、巯基乙酸钠0.02％、柠檬酸氢二铵0.2％、KH2PO40.2％、MnSO4.H2O0.05％、MgSO4.7H2O0.025％、L-半胱氨酸盐酸盐0.05％、吐温80 0.1％，增值因子5％，纯净水补足100％，分装后灭菌，接种植物乳杆菌，37℃条件下发酵18h，离心，加生理盐水后继续离心，弃上清液得菌悬液备用；
干酪乳杆菌发酵：10％酶水解脱脂鲜牛乳，0.5％葡萄糖，1.5％胰蛋白胨，0.3％酵母浸膏，0.1％NaHPO4-柠檬酸，纯净水补足100％，制备干酪乳杆菌液体培养基，接种干酪乳杆菌发酵培养20h，离心，加生理盐水后继续离心，弃上清液得菌悬液备用；
鼠李糖乳杆菌发酵：MRS培养基发酵鼠李糖乳杆菌制备鼠李糖乳杆菌菌悬液；
向上述四种菌悬液中加入步骤(1)制备的干燥剂保护剂；保护剂的质量为与菌悬液的质量比为1:10；
(3)冷冻干燥：将各菌悬液放入液氮中迅速冷却后，真空冷冻干燥机进行干燥后制得双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉；(4)复配包装：称取配方质量的双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉、低聚果糖、低聚木糖，混合均匀后包装即得所需益生菌营养制剂。
实施例8
一种适合航天员的益生菌营养制剂，原料包括以下百分比的物质：
乳双歧杆菌17％；植物乳杆菌10％；干酪乳杆菌13％；鼠李糖乳杆菌15％；低聚果糖25％；低聚木糖20％。
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。
菌种冻干粉的制备方法为：
(1)保护剂制备：干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质，离心去上清液留底层桃胶，放入微波炉中，调整微波剂量为0.5-1.0kw/kg，微波温度60-80℃，处理时间为10-15min；之后按桃胶湿基质量比1:5-10加纯净水，加入与湿基桃胶等质量的新鲜银耳，煮沸后熬制30-50min，冷却后超高压均质机均质，过50-100目筛；超微细化至100-300目，喷雾干燥后得干燥保护剂，备用；
(2)菌种发酵：将乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌分别发酵培养24-72h后得菌悬液，向各菌悬液中分别加入步骤(1)制备的保护剂，摇动均匀，备用；
乳双歧杆菌发酵：新鲜黄豆浸泡后捞出发芽培养3-5天，之后将发芽黄豆与新鲜黄豆按4:1的体积混合后，按料液质量比加水1:2-3加入纯净水熬煮40min后冷却后过滤，每1000ml黄豆水中加入30-50ml煮沸灭菌的牛乳，搅拌均匀即得乳双歧杆菌发酵培养基。将培养基分装入培养瓶中，高压灭菌后接种乳双歧杆菌，无氧条件发酵24-72h后制得乳双歧杆菌悬液备用；
植物乳杆菌发酵：蔗糖2％、大豆蛋白胨2.5％、酵母浸粉2.5％、无水乙酸钠0.5％、无水氯化钠0.01％、巯基乙酸钠0.02％、柠檬酸氢二铵0.2％、KH2PO40.2％、MnSO4.H2O0.05％、MgSO4.7H2O0.025％、L-半胱氨酸盐酸盐0.05％、吐温80 0.1％，增值因子5％，纯净水补足100％，分装后灭菌，接种植物乳杆菌，37℃条件下发酵18h，离心，加生理盐水后继续离心，弃上清液得菌悬液备用；
干酪乳杆菌发酵：10％酶水解脱脂鲜牛乳，0.5％葡萄糖，1.5％胰蛋白胨，0.3％酵母浸膏，0.1％NaHPO4-柠檬酸，纯净水补足100％，制备干酪乳杆菌液体培养基，接种干酪乳杆菌发酵培养20h，离心，加生理盐水后继续离心，弃上清液得菌悬液备用；
鼠李糖乳杆菌发酵：MRS培养基发酵鼠李糖乳杆菌制备鼠李糖乳杆菌菌悬液；
向上述四种菌悬液中加入步骤(1)制备的干燥剂保护剂；保护剂的质量为与菌悬液的质量比为1:10；
(3)冷冻干燥：将各菌悬液放入液氮中迅速冷却后，真空冷冻干燥机进行干燥后制得双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉；(4)复配包装：称取配方质量的双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖乳杆菌冻干粉、低聚果糖、低聚木糖，混合均匀后包装即得所需益生菌营养制剂。
Claims (9)
1.一种适合航天员的益生菌营养制剂，其特征在于，原料包括以下百分质量比的物质：
乳双歧杆菌 15％-20％；
植物乳杆菌 8％-12％；
干酪乳杆菌 10％-15％；
鼠李糖乳杆菌 9％-16％；
低聚果糖 25％-30％；
低聚木糖 20％-25％；
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。
2.如权利要求1所述的一种适合航天员的益生菌营养制剂，其特征在于，原料包括以下百分比的物质：
乳双歧杆菌 16％-19％；
植物乳杆菌 9％-11％；
干酪乳杆菌 12％-14％；
鼠李糖乳杆菌 10％-16％；
低聚果糖 27％-29％；
低聚木糖 21％-22％；
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。
3.如权利要求1所述的一种适合航天员的益生菌营养制剂，其特征在于，原料包括以下百分比的物质：
乳双歧杆菌 15％-16％；
植物乳杆菌 8％-10％；
干酪乳杆菌 11％-12％；
鼠李糖乳杆菌 10％；
低聚果糖 29％-30％；
低聚木糖 24％-25％。
所述乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌为菌种冻干粉。
4.如权利要求1-3任一所述的一种适合航天员的益生菌营养制剂，其特征在于，所述菌种冻干粉制备方法为：(1)保护剂制备：将干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质；之后于洗净的桃胶中先按质量比1:5-10加纯净水，再加入与桃胶等质量的新鲜银耳，煮沸后熬制30-50min，冷却后用超高压均质机均质，过50-100目筛；收集筛下物超微细化至100-300目，之后喷雾干燥后得干燥保护剂，备用；(2)菌种发酵：将乳双歧杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌分别发酵培养18-72h后得菌悬液，向各菌悬液中分别加入步骤(1)制备的保护剂，摇动混匀，备用；(3)冷冻干燥：将各菌悬液放入液氮中迅速冷却后，真空冷冻干燥机进行干燥后制得双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉；(4)复配包装：称取配方质量的双歧杆菌冻干粉、植物乳杆菌冻干粉、干酪乳杆菌冻干粉、鼠李糖冻干粉、低聚果糖、低聚木糖，混合均匀后包装即得所需益生菌营养制剂。
5.如权利要求4所述的一种适合航天员的益生菌营养制剂，其特征在于，所述步骤(1)中保护剂的制备过程中还包括将干制桃胶进行微波处理的步骤，具体处理方法为：干桃胶按料液质量比1:10-50加纯净水，浸泡48-72h，捞出，清洗干净黑色杂质，离心去上清液留底层桃胶，放入微波炉中，调整微波剂量为0.5-1.0kw/kg，微波温度60-80℃，处理时间为10-15min；之后于微波处理过的桃胶中先按质量比1:5-10加纯净水，再加入与桃胶等质量的新鲜银耳，煮沸后熬制30-50min，冷却后用超高压均质机均质，过50-100目筛；收集筛下物超微细化至100-300目，之后喷雾干燥后得干燥保护剂，备用。
6.如权利要求4所述的一种适合航天员的益生菌营养制剂，其特征在于，桃胶加入新鲜银耳熬煮30-50min后还包括采用球磨机处理12-24h，过100-300目筛，喷雾干燥后得干燥保护剂。
7.如权利要求4所述一种适合航天员的益生菌营养制剂，其特征在于，所述乳双歧杆菌培养过程中采用的发酵培养基为牛乳黄豆水培养基，具体制备方法为新鲜黄豆浸泡后捞出发芽培养3-5天，之后将发芽黄豆与新鲜黄豆按4:1的体积混合后，按料液质量比加水1:2-3加入纯净水熬煮40min后冷却后过滤，每1000ml黄豆水中加入30-50ml煮沸灭菌的牛乳，搅拌均匀即得乳双歧杆菌发酵培养基。
8.如权利要求4所述一种适合航天员的益生菌营养制剂，其特征在于，所述步骤(2)菌种发酵过程中向菌悬液中加入保护剂的质量为与菌悬液的质量比为1:8-12。
9.如权利要求8所述一种适合航天员的益生菌营养制剂，其特征在于，所述步骤(2)菌种发酵过程中向菌悬液中加入保护剂的质量为与菌悬液的质量比为1:10。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20190702 |