EA018080B1 - Соединения, пригодные для лечения дегенеративных и воспалительных заболеваний - Google Patents

Соединения, пригодные для лечения дегенеративных и воспалительных заболеваний Download PDF

Info

Publication number
EA018080B1
EA018080B1 EA201170255A EA201170255A EA018080B1 EA 018080 B1 EA018080 B1 EA 018080B1 EA 201170255 A EA201170255 A EA 201170255A EA 201170255 A EA201170255 A EA 201170255A EA 018080 B1 EA018080 B1 EA 018080B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
diseases
cartilage
degradation
compound
disease
Prior art date
Application number
EA201170255A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201170255A1 (ru
Inventor
Кристель Жанн Мари Мене
Хавьер Блан
Original Assignee
Галапагос Нв
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Галапагос Нв filed Critical Галапагос Нв
Publication of EA201170255A1 publication Critical patent/EA201170255A1/ru
Publication of EA018080B1 publication Critical patent/EA018080B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4995—Pyrazines or piperazines forming part of bridged ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5386—1,4-Oxazines, e.g. morpholine spiro-condensed or forming part of bridged ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/541—Non-condensed thiazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к соединение формулы VIaили его фармацевтически приемлемой соли. Это соединение можно получать в виде фармацевтической композиции и можно использовать для предотвращения и лечения различных состояний у млекопитающих, включая людей, где состояния включают в качестве неограничивающего примера заболевания, включающие деградацию хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацию суставов, например остеоартрит; и/или состояния, включающие воспаление или иммунные ответы, такие как болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, заболевания, связанные с респираторной аллергией (например, астма, ринит), юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительные заболевания кишечника, болезненные состояния, обусловленные эндотоксином (например, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим, например, хронической сердечной недостаточности), заболевания, включающие нарушение ремоделирования хрящевой ткани (например, заболеваний, включающих анаболическую стимуляцию хондроцитов), врожденные мальформации хрящевой ткани, заболевания, связанные с повышенной секрецией IL6 и отторжением трансплантата (например, отторжение органного трансплантата), и пролиферативные заболевания.

Description

Область изобретения
Настоящее изобретение относится к соединениям, которые являются ингибиторами 1ЛК, семейства тирозинкиназ, которые включены в модуляцию деградации хрящевой ткани, дегенерацию суставов и к заболеваниям, включающим подобную деградацию и/или воспаление. Настоящее изобретение также относится к способам получения этих соединений, фармацевтических композиций, содержащих эти соединения, способам предупреждения и/или лечения заболеваний, включающих деградацию хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацию суставов, состояний, включающих воспаление или иммунные ответы, болезненных состояний, обусловленных эндотоксином, заболеваний, включающих нарушение ремоделирования хрящевой ткани (например, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов), врожденных мальформаций хрящевой ткани, заболеваний, ассоциированных с повышенной секрецией 1Ьб, пролиферативных заболеваний и отторжений при трансплантации (например, отторжение органного трансплантата); и/или способам предупреждения и/или лечения заболеваний, включающих деградацию хрящевой ткани, деградацию и/или воспаление суставов посредством введения соединения по изобретению.
Янус-киназы (1ЛК) представляют собой цитоплазматические тирозинкиназы, которые осуществляют передачу цитокинового сигнала с мембранных рецепторов к факторам транскрипции 8ТАТ. Описано четыре члена семейства 1ЛК: это 1ЛК1, 1ЛК2, 1ЛК3 и ΤΥΚ2. При связывании цитокина с его рецептором члены семейства 1ЛК ауто- и/или трансфосфорилируют друг друга с последующим фосфорилированием 8ТАТ. которые затем перемещаются в ядро для регулирования транскрипции. Внутриклеточную передачу сигнала 1АК-8ТАТ используют интерфероны, большинство интерлейкинов, а также ряд цитокинов и эндокринных фактров, таких как ЕРО, ТРО, ОН, О8М, Ь1Е, СЫТЕ, ОМ-С8Е, РЯЬ Уашсйепкег XV. с1 а1. (2008).
Комбинация генетических моделей и исследование низкомолекулярного ингибитора 1ЛК выявили терапевтические возможности некоторых 1ЛК. Исследования генетики человека и мыши подтверждают возможность использования 1ЛК3 в качестве мишени для подавления иммунного ответа (О'Бйеа 1. с1 а1. (2004)). Ингибиторы 1ЛК3 успешно подвергали клиническим исследованиям, первоначально по поводу отторжения органного трансплантата, но позднее также по поводу других иммуновоспалительных показаний, таких как ревматоидный артрит (ЯЛ), псориаз и болезнь Крона (ййр://с11П1са11г1а18.доу/).
ТУК2 является потенциальной мишенью при иммуновоспалительных заболеваниях, подтверждаемой исследованиями генетики человека и нокаутных мышей (Ьеуу Ό. аиб Ьоошщ С. (2007)).
1ЛК1 являются новой мишенью в области иммуновоспалительных заболеваний. Для передачи запускаемого цитокинами провоспалительного сигнала 1ЛК1 образует гетеродимер с другими 1ЛК. Таким образом, ингибирование 1ЛК1 и/или других 1ЛК, как ожидают, будет иметь терапевтическое преимущество для ряда воспалительных состояний, а также для других заболеваний, обусловленных 1ЛКопосредованной передачей сигнала.
Предпосылки изобретения
Хрящевая ткань представляет собой ткань, лишенную сосудов, в которой главный клеточный компонент представлен хондроцитами. Хондроциты в нормальном суставном хряще занимают приблизительно 5% объема ткани, в то время как внеклеточный матрикс заполняет оставшиеся 95% ткани. Хондроциты секретируют компоненты матрикса, в основном протеогликаны и коллагены, которые, в свою очередь, обеспечивают хондроцитам условия, подходящие для их выживаемости при механической нагрузке. В хрящевой ткани коллаген типа II вместе с белком - коллагеном типа IX образуют твердые фибриллоподобные структуры, которые обеспечивают хрящевую ткань большой механической прочностью. Протеогликаны могут абсорбировать воду и являются ответственными за эластичные и амортизирующие свойства хрящевой ткани.
Одним из функциональных значений хрящевой ткани в суставе является обеспечение правильного соединения костей друг с другом. Утрата суставного хряща, таким образом, влечет за собой трение костей друг о друга, что приводит к боли и потере подвижности. Деградация хрящевой ткани может иметь различные причины. При воспалительных артритах, таких как, например, ревматоидный артрит, деградация хрящевой ткани обусловлена секрецией воспаленными тканями (воспаленной синовиальной оболочкой, например) протеаз (например, коллагеназ). Деградация хрящевой ткани может также являться результатом повреждения хрящевой ткани, результатом травмы или хирургического вмешательства, или повышенной нагрузки или изнашивания. Способность хрящевой ткани к регенерации после подобных повреждений ограничена. Хондроциты в поврежденной хрящевой ткани часто проявляют сниженную синтезирующую активность хрящевой ткани (анаболическую) и/или повышенную деградирующую активность хрящевой ткани (катаболическую).
Дегенерация хрящевой ткани является отличительным признаком различных заболеваний, среди которых ревматоидный артрит и остеоартрит являются наиболее значимыми. Ревматоидный артрит (ЯА) представляет собой хроническое суставное дегенеративное заболевание, характеризующееся воспалением и деструкцией суставных структур. Если заболевание не контролируется, это приводит к существенной потере трудоспособности и боли вследствие потери функциональных свойств суставов и даже к преждевременной смерти. Целью терапии ЯА, таким образом, является не только замедление течения
- 1 018080 заболевания, но и достижение ремиссии, с целью прекращения суставной деструкции. Кроме того, тяжесть исхода заболевания, высокая распространенность КА (во всем мире поражено ~0,8% взрослого населения) означает высокие социально-экономические последствия (для обзора по КА заявители ссылаются на 8то1еи и 81стсг (20 03); Ьее и ХУстЫаИ (20 01); С1юу и Раиау1 (2001); О'Эе11 (2004) и Ейейеш (2003)).
Остеоартрит (также обозначаемый как ΘΑ или артрит изнашивания) представляет собой наиболее общую форму артрита и характеризуется утратой суставного хряща, что часто связано с гипертрофией кости и болью. Заболевание в основном поражает руки и суставы, несущие весовую нагрузку, такие как коленные, тазобедренные суставы и суставы позвоночника. Этот процесс истончает хрящевую ткань. Если вследствие истончения исчезла площадь поверхности, остеоартрит достигает степени I; если исчезла площадь поверхности тангенциальной зоны, остеоартрит достигает степени II. Существуют дополнительные степени дегенерации и деструкции, при которых затронуты глубокие и кальцинированные слои хрящевой ткани, граничащие с субхондральной костью. Для более подробного обзора по остеоартриту заявители ссылаются на \У1е1апб е1 а1., 2005.
Клинические проявления развития остеоартритного состояния представляют собой увеличенный размер сустава, боль, крепитацию и функциональную нетрудоспособность сустава, что приводит к боли и сниженной подвижности суставов. При дальнейшем развитии заболевания появляется боль в состоянии покоя. Если состояние остается без коррекции и/или лечения, сустав разрушается, что приводит к потере трудоспособности. Затем требуется реконструктивное хирургическое вмешательство с общим протезированием.
Терапевтические способы для коррекции участков поражения суставного хряща, возникающих в течение развития остеоартрита, разработаны, но до настоящего времени ни один из них не способен опосредовать регенерацию суставного хряща ίη Μΐι,ι и ίη νίνο.
Остеоартрит трудно поддается лечению. В настоящее время нет доступного средства, и лечение направлено на облегчение боли и предотвращение перехода сустава из пораженного состояния в деформированное. Общепринятые виды лечения включают применение нестероидных противовоспалительных лекарственных средств (Ν8ΑΙΌ). Хотя пищевые добавки, такие как хондроитин и глюкозамина сульфат рекомендованы как безопасные и эффективные варианты для лечения остеоартрита, недавнее клиническое испытание показало, что оба варианта лечения не снижали боль, связанную с остеоартритом (С1едд е1 а1., 2006). В совокупности, нет доступного лекарственного средства против остеоартрита, которое изменяет течение заболевания.
В тяжелых случаях может быть необходима замена сустава. Это особенно актуально для тазобедренных и коленных суставов. Если сустав сильно болит и не может быть заменен, его можно зафиксировать в заданном положении. Эта процедура снимает боль, но приводит к необратимой потере функции сустава, создавая затруднение при ходьбе и сгибании.
Другим возможным лечением является трансплантация культивированных аутологичных хондроцитов. В данном случае хрящевой клеточный материал берут у пациента, отправляют в лабораторию, где клеточный материал наращивают. Материал затем имплантируют в поврежденные ткани для покрытия тканевых дефектов.
Другое лечение включает внутрисуставную инстилляцию Ну1аи С-Е 20 (например, 8утт5С®. Нуа1даи®, Ατίζ®), средства, которое временно улучшает реологию синовиальной жидкости, что создает почти немедленное ощущение свободы движения и выраженное уменьшение боли.
Другие описанные способы включают применение сухожильного, надкостничного, фасциального, мышечного или перихондрального трансплантатов; имплантацию фибрина или культивированных хондроцитов; имплантацию искусственных матриксов, таких как коллаген, углеродная нить; введение электромагнитных полей. Все они показали минимальные и недостаточное действия, приводящие к образованию ткани низкого качества, которая не может ни выдержать нагрузку массой, ни обеспечить восстановление суставной функции с нормальной подвижностью.
Стимулирование анаболических процессов, блокирование катаболических процессов или комбинация этих двух процессов может приводить к стабилизации хрящевой ткани, и возможно, даже к аннулированию повреждения, и таким образом, предотвращению дальнейшего прогрессирования заболевания. Различные инициирующие факторы могут вызывать анаболическую стимуляцию хондроцитов. Инсулиноподобный фактор роста-1 (1СЕ-1) представляет собой преобладающий анаболический фактор роста в синовиальной жидкости и стимулирует синтез как протеогликанов, так и коллагена. Также показано, что члены семейства морфогенетического белка кости (ВМР), в частности ВМР2, ВМР4, ВМР6 и ВМР7, и члены семейства трансформирующего фактора роста-β человека (ТСЕ-β) могут индуцировать анаболическую стимуляцию хондроцитов (СйиЬ1П5кауа аиб Киейпет, 2003). Недавно установлено соединение, которое индуцирует анаболическую стимуляцию хондроцитов (И8 6500854; ЕР 1391211). Однако большинство этих соединений проявляют тяжелые побочные эффекты, и, таким образом, существует существенная необходимость в соединениях, которые стимулируют дифференциацию хондроцитов без этих побочных эффектов.
- 2 018080
Уапбед1ппк1е е! а1. (\У0 2005/124342) описали 1ЛК1 как мишень, ингибирование которой может иметь терапевтическую значимость при лечении некоторых заболеваний, включая ОА. 1АК1 относится к Янус-киназам (ТАК), семейству цитоплазматических тирозинкиназ, вовлеченных во внутриклеточную передачу сигнала, опосредованную цитокиновым рецептором. Семейство 1АК состоит из 4 членов: 1АК1, 1АК2, 1АК3 и ТУК2. 1АК участвуют во взаимодействии с цитокиновыми рецепторами, при связывании цитокинов, с последующей гетеродимеризацией цитокинового рецептора и общей рецепторной субъединицы (общая цепь гамма-с, др130). 1АК затем активируются посредством ауто- и/или трансфосфорилирования посредством других 1АК, что приводит к фосфорилированию рецептора и вовлечению и фосфорилированию членов семейства сигнальных трансдукторов и активаторов транскрипции (8ТЛТ). Фосфорилированные 8ТЛТ димеризуются и перемещаются в ядро, где они связываются с энхансерными областями генов, чувствительных к цитокинам. Нокаут гена 1АК1 у мышей показал, что 1АК1 принимает важное и не избыточное участие в период развития: мыши 1АК1-/- умерли в пределах 24 ч после рождения, и наблюдают значительное нарушение развития лимфоцитов. Кроме того, 1АК1 -/- клетки не реагировали или меньше реагировали на цитокины, которые используют II класс цитокиновых рецепторов, цитокиновые рецепторы, которые используют субъединицу гамма-с для передачи сигнала, и семейство цитокиновых рецепторов, которые используют субъединицу др130 для передачи сигнала (Робщ е! а1., 1998).
Различные группы включают передачу сигнала 1АК-8ТЛТ в биологию хондроцитов. Ы е! а1. (2001) показали, что онкостатин М индуцирует экспрессию генов ММР и Т1МР3 в первичных хондроцитах посредством активации путей передачи сигнала 1АК/8ТАТ и МАРК. 0как1 е! а1. (2003) показали, что опосредованное интерфероном-гамма ингибирование коллагена II в хондроцитах включает передачу сигнала 1АК-8ТАТ. [Б1-бета индуцирует катаболизм хрящевой ткани посредством снижения экспрессии компонентов матрикса и посредством индуцирования экспрессии коллагеназ и индуцибельной синтазы оксида азота (N082), которая опосредует продукцию оксида азота (N0). О1его е! а1., (2005) показали, что лептин и Ш-бета синергично индуцировали продукцию N0 или экспрессию N082 мРНК в хондроцитах, и что это останавливали посредством ингибитора 1АК. Ьедепбге е! а1. (2003) показали, что в артикулярных хондроцитах быка ГЬбДЬб рецептор индуцировал негативную регуляцию специфичных для матрикса хрящевой ткани генов коллагена II, аггрекановой структуры и связывающего белка, и что это было опосредовано передачей сигнала 1АК/8ТАТ. Таким образом, эти данные наблюдения предполагают участие киназы 1АК в гомеостазе хрящевой ткани и терапевтический потенциал для ингибиторов киназы 1АК.
Члены семейства 1АК вовлечены в дополнительные состояния, включающие миелопролиферативные нарушения (О'8иШуаи е! а1., 2007, Мо1. Iттиηо1. 44(10): 2497-506), в которых обнаружены мутации в 1АК2. Это показывает, что ингибиторы 1АК, в частности, 1АК2 можно также использовать при лечении миелопролиферативных нарушений. Дополнительно, семейство 1АК, в частности 1АК1, 1АК2 и 1АК3, связаны со злокачественными опухолями, в частности лейкемиями, например острым миелолейкозом (О'8иШуаи е! а1., 2007, Мо1. Iттиηо1. 44(10): 2497-506; Х1апд е! а1., 2008, 'Тбепййсайоп о£ котайс 1АК1 ти1а1юпк ίη рабегИк \νί11ι аси!е туе1о1б 1еикет1а В1ооб Ейк! Еббюп Рарег, опубликованной в интерактивном режиме 26 декабря 2007 г.; ^ОI 10, 1182/Ыооб-2007-05-090308) и острым лимфобластным лейкозом (МиШдЬап е! а1., 2009) или солидными опухолями, например лейомиосаркомой матки (Сопк1ап11пекси е! а1., 2007, Тгепбк ш Вюс11епнса1 8с1епсек 33(3): 122-131), раком предстательной железы (Тат е! а1., 2007, Впбк11 1оигпа1 о£ Сапсег, 97, 378-383). Эти результаты показывают, что ингибиторы 1АК, в частности 1АК1 и/или 1АК2, могут также быть полезны при лечении злокачественных опухолей (лейкемии и солидные опухоли, например лейомиосаркома матки, рак предстательной железы).
Кроме того, болезнь Кастлемена, множественная миелома, мезангиально-пролиферативный гломерулонефрит, псориаз и саркома Капоши развиваются, вероятно, вследствие повышенной секреции цитокина ^-6. биологические эффекты которого опосредованы внутриклеточной передачей сигнала 1АК8ТАТ (Те!киц Nака, №п1нго №кЫто!о апб Табатйки К1кЫто!о, Λπΐιπίίκ Век 2002, 4 (кирр1 3): 82338242). Этот результат показывает, что ингибитор 1ЛК может также найти применение при лечении указанных заболеваний.
Установлена связь с аутоиммунными заболеваниями для 1АК3 и Тук2. Мутации в 1АК3, а также в вышерасположенных компонентах передачи сигнала, рецепторной цепи гамма-с и рецептора Ш7 обусловливают, в совокупности, ~70% случаев тяжелого комбинированного иммунодефицита человека ('081еа е! а1., 2004). Отмечено, что 1ЛК1 взаимодействует с 1ЛК3 в передаче сигналов с рецепторной цепи гамма-с. Полиморфизмы Тук2 обнаружены при системной красной волчанке (8ЬЕ) (О'8иШуап е! а1., 2007, Мо1. Iттиηо1. 44(10): 2497-506). Таким образом, нацеливание на семейство 1ЛК может предоставить терапевтические возможности в области иммуновоспаления.
Существующие способы лечения не являются достаточными, и, таким образом, остается необходимость в определении дополнительных соединений, которые можно использовать при лечении заболеваний, включающих деградацию хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацию суставов, например остеоартрита; и/или состояний, включающих воспаление или иммунные ответы, такие как болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, заболеваний, связанных с респираторной аллергией (например, астма,
- 3 018080 ринит), юношеского идиопатического артрита, колита, воспалительных заболеваний кишечника, болезненных состояний, обусловленных эндотоксином (например, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующие, например, хронической сердечной недостаточности), заболеваний, включающих нарушение ремоделирования хрящевой ткани (например, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов), врожденных мальформаций хрящевой ткани, заболеваний, ассоциированных с повышенной секрецией 1Ьб, пролиферативных заболеваний и отторжения при трансплантации (например, отторжение органного трансплантата). Ингибиторы 1ЛК могут также найти применение при лечении пролиферативных заболеваний. В частности, ингибиторы 1ЛК нашли применение при лечении злокачественных опухолей, главным образом, лейкемий и солидных опухолей (например, лейомиосаркома матки, рак предстательной железы). Настоящее изобретение, таким образом, предоставляет соединения, способы их получения и фармацевтические композиции, включающие соединение по изобретению вместе с подходящим фармацевтическим носителем. Настоящее изобретение также относится к использованию соединения по изобретению в препарате лекарственного средства для лечения дегенеративных заболеваний суставов.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение основано на открытии того, что ингибиторы 1ЛК пригодны для лечения заболеваний, включающих деградацию хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацию суставов, например, остеоартрита; и/или состояний, включающих воспаление или иммунные ответы, такие как болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, заболеваний, связанных с респираторной аллергией (например, астма, ринит), юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительных заболеваний кишечника, болезненных состояний, обусловленных эндотоксином (например, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим, например, хронической сердечной недостаточности), заболеваний, включающих нарушение ремоделирования хрящевой ткани (например, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов), врожденных мальформаций хрящевой ткани, заболеваний, ассоциированных с повышенной секрецией 1Ьб, и отторжения при трансплантации (например, отторжение органного трансплантата). Ингибиторы 1ЛК могут также найти применение в лечении пролиферативных заболеваний. В частности, ингибиторы 1ЛК находят применение при лечении злокачественных опухолей, в частности, лейкемий и солидных опухолей (например, лейомиосаркомы матки, рака предстательной железы). Настоящее изобретение также относится к способам получения этих соединений, фармацевтических композиций, содержащих эти соединения и способам лечения заболеваний, включающих деградацию хрящевой ткани, деградацию и/или воспаление суставов посредством введения соединения по изобретению.
Таким образом, в первом аспекте настоящего изобретения предлагается соединение формулы У1а:
или его фармацевтически приемлемая соль.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, предназначенной для лечения, предотвращения или профилактики заболеваний, выбранных из группы, включающей пролиферативные заболевания, заболевания, связанные с деградацией хрящевой ткани, костной ткани, и/или деградацией суставов; и/или состояний, включающих воспаление или иммунные ответы, включающая фармацевтически приемлемый носитель и фармацевтически эффективное количество указанного выше соединения.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения заболевание, связанное с деградацией хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов, представляет собой остеоартрит; и состояния, включающие воспаление или иммунные ответы, представляют собой болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, астму, ринит, юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительные заболевания кишечника, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим хронической сердечной недостаточности, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов, врожденные мальформации хрящевой ткани, заболевания, ассоциированные с повышенной секрецией 1Ьб, и отторжение при трансплантации органного трансплантата.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к применению указанного выше соединения для лечения, предотвращения или профилактики заболеваний, выбранных из группы, включающей пролиферативные заболевания, заболевания, связанные с деградацией хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов; и/или состояний, включающих воспаление или иммунные ответы.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения заболевание, связанное с деградацией
- 4 018080 хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов, представляет собой остеоартрит; и состояния, включающие воспаление или иммунные ответы, представляют собой болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, астму, ринит, юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительные заболевания кишечника, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим хронической сердечной недостаточности, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов, врожденные мальформации хрящевой ткани, заболевания, ассоциированные с повышенной секрецией 1Ьб, и отторжение при трансплантации органного трансплантата.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к применению указанного выше соединения для получения лекарственного средства для лечения, предотвращения или профилактики заболеваний, выбранных из группы, включающей заболевания, связанные с деградацией хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов; и/или состояний, включающих воспаление или иммунные ответы.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения заболевание, связанное с деградацией хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов, представляет собой остеоартрит; и состояния, включающие воспаление или иммунные ответы, представляют собой болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, астму, ринит, юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительные заболевания кишечника, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим хронической сердечной недостаточности, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов, врожденные мальформации хрящевой ткани, заболевания, ассоциированные с повышенной секрецией 1Ьб, и отторжение при трансплантации органного трансплантата.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к применению указанного выше соединения для получения лекарственного средства для лечения пролиферативных заболеваний.
Подробное описание изобретения Определения
Следующие термины предназначены для определения значений, изложенных ниже, и являются полезными для понимания описания и предполагаемого объема по настоящему изобретению.
При описании изобретения, которое может включать соединения, фармацевтические композиции, содержащие такие соединения и способы применения таких соединений и композиций, следующие термины, если присутствуют, имеют следующие значения, если не указано иначе.
Фармацевтически приемлемый обозначает одобренный или заслуживающий одобрения федеральной регулирующей организацией или правительством государства, или соответствующей организацией в странах, отличных от Соединенных Штатов Америки, или тот, который перечислен в фармакопее США или в другой общепризнанной фармакопее для применения на животных, и более конкретно, на людях.
Фармацевтически приемлемая соль относится к соли соединения по изобретению, которая является фармацевтически приемлемой и которая содержит требуемую фармакологическую активность исходного соединения. В частности, такие соли являются нетоксичными, могут представлять собой неорганические или органические кислотно-аддитивные соли и основно-аддитивные соли. Конкретно, такие соли включают: (1) кислотно-аддитивные соли, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п.; или образованные с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая кислота, гексановая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этан-дисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 4хлорбензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, 4-толуолсульфоновая кислота, камфорсульфоновая кислота, 4-метилбицикло[2.2.2]-окт-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, третично-бутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гидроксинафтойная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота, и т.п.; или (2) соли, образованные, когда кислотный протон, представленный в исходном соединении, или заменен ионом металла, например ионом щелочного металла, щелочно-земельным ионом, или ионом алюминия; или координирует с органическим основанием, таким как этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, Ν-метилглюкамин и т.п. Соли дополнительно включают, только в качестве примера, натрий, калий, кальций, магний, аммоний, тетраалкиламмоний и т.п.; и когда соединение содержит основную функцию, соли нетоксичных органических или неорганических кислот, таких как гидрохлорид, гидробромид, соль винной кислоты, мезилат, ацетат, малеат, оксалат и т.п. Термин физиологически приемлемый катион обозначает нетоксичный, физиологически приемлемый катионный противоион кислой функциональной группы. Такие катионы иллюстрируются катионами натрия, калия, кальция, магния, аммония и тетраалкиламмония и т.п.
Фармацевтически приемлемая среда для лекарственного средства относится к разбавителю, адъюванту, эксципиенту или носителю, с которым вводят соединение по изобретению.
- 5 018080
Субъект включает людей. Термины человек, пациент и субъект в настоящем документе используют взаимозаменяемо.
Терапевтически эффективное количество обозначает количество соединения, которое при введении субъекту для лечения заболевания является достаточным для действия такого лечения на заболевание. Терапевтически эффективное количество может варьировать в зависимости от соединения, заболевания и его тяжести, и возраста, массы, и т.д. подлежащего лечению субъекта.
Предотвращение или предупреждение относятся к снижению риска приобретения или развития заболевания или нарушения перед проявлением болезни (т.е. когда по меньшей мере один из клинических симптомов заболевания не развивается у субъекта, который может быть подвержен действию средства, вызывающего заболевание или предрасположенного к заболеванию).
Термин профилактика относится к предупреждению, и относится к воздействию или способу, цель которых предупреждение, а не лечение или устранение заболевания. Неограничивающие примеры профилактических мер могут включать введение вакцин; введение гепарина с низкой молекулярной массой госпитализированным пациентам с риском развития тромбоза вследствие, например, потери подвижности; и введение противомалярийного средства, такого как хлорохин, перед посещением географических областей, в которых малярия является эндемическим заболеванием или если существует высокий риск заражения малярией.
Лечение или терапия любого заболевания или нарушение относится, в одном из вариантов осуществления, к улучшению состояния при заболевании или нарушении (т.е. остановке заболевания или уменьшению проявления, степени или тяжести по меньшей мере одного из клинических симптомов заболевания). В другом варианте осуществления лечение или терапия относится к улучшению по меньшей мере одного физического параметра, который может не быть явным для субъекта. В еще одном варианте осуществления лечение или терапия относится к модулированию заболевания или нарушения, или физически (например, стабилизацией явного симптома), физиологически (например, стабилизацией физического параметра), или и тем и другим. В дополнительном варианте осуществления лечение или терапия относится к замедлению прогрессирования заболевания.
Как применяют в настоящем документе термин состояние(я), вовлекающее воспаления относится к группе состояний, включающих ревматоидный артрит, остеоартрит, юношеский идиопатический артрит, псориаз, заболевания, связанные с респираторной аллергией (например, астма, ринит), воспалительные заболевания кишечника (например болезнь Крона, колит), состояния, обусловленные действием эндотоксина (например осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим, например, хронической сердечной недостаточности), и связанным с хрящевой тканью заболеваниям, таким как заболевания суставов. В частности, термин относится к ревматоидному артриту, остеоартриту, заболеваниям, связанным с респираторной аллергией (например, астмой) и воспалительным заболеваниям кишечника.
Как применяют в настоящем документе, термин состояние(я), вовлекающее иммунный ответ или аутоиммунные заболевания используют взаимозаменяемо и относят к группе заболеваний, включающих обструктивные заболевания дыхательных путей, включающие такие состояния, как СОРБ. астма (например эндогенная астма, экзогенная астма, пылевая астма, детская астма) в частности, хроническая или трудноизлечимая астма (например, астма с поздним началом и гиперчувствительность дыхательных путей), бронхит, включающих бронхиальную астму, системную красную волчанку (8ЬЕ), рассеянный склероз, сахарный диабет I типа и ассоциированные с ними осложнения, атопическую экзему (атопический дерматит), контактный дерматит и дополнительно экзематозный дерматит, воспалительное заболевание кишечника (например, болезнь Крона и язвенный колит), атеросклероз и боковой амиотрофический склероз. В частности, термин относится к СОРБ, астме, системной красной волчанке, сахарному диабету I типа и воспалительному заболеванию кишечника.
Как применяют в настоящем документе, термин отторжение трансплантата относится к острому или хроническому отторжению клеток, алло- или ксенотрансплантатов ткани или паренхиматозного органа, например панкреатических островков, стволовых клеток, костного мозга, кожной, мышечной ткани, ткани роговицы, нейрональной ткани, сердца, легких, комбинированных сердце-легкие, почек, печени, пищеварительного тракта, поджелудочной железы, трахеи или пищевода, или к реакциям трансплантат против хозяина.
Как применяют в настоящем документе, термин пролиферативное заболевание(я) относится к состояниям, таким как злокачественная опухоль (например, лейомиосаркома матки или рак предстательной железы), миелопролиферативным нарушениям (например, истинная полицитемия, идиопатические тромбоцитоз и миелофиброз), лейкоз (например, острый миелолейкоз и острый лимфобластный лейкоз), множественная миелома, псориаз, рестеноз, склеродермит или фиброз, в частности, термин относится к злокачественной опухоли, лейкозу, множественной миеломе и псориазу.
Как применяют в настоящем документе, термин злокачественная опухоль относится к злокачественному или доброкачественному росту клеток в коже или в органах тела, например, но без ограничения,
- 6 018080 в молочной железе, предстательной железе, легких, почках, поджелудочной железе, желудке или желудочно-кишечном тракте. Злокачественная опухоль имеет склонность проникать в близлежащие ткани и распространяться (метастазировать) в отдаленные органы, например в костную ткань, печень, легкие или мозг. Как применяют в настоящем документе, термин злокачественная опухоль включает и типы клеток, относящиеся к метастатической опухоли, такой как, но не ограничиваясь ими, меланома, лимфома, лейкемия, фибросаркома, рабдомиосаркома и мастоцитома и виды карциномы из тканей, такие как, но не ограничиваясь ими, колоректальный рак, рак предстательной железы, мелкоклеточный рак легких и немелкоклеточный рак легких, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак мочевого пузыря, злокачественная опухоль почки, рак желудка, глиобластома, первичная злокачественная опухоль печени, рак яичников, рак предстательной железы и лейомиосаркома матки.
Как применяют в настоящем документе, термин лейкемия относится к неопластическим заболеваниям крови и кроветворным органам. Такие заболевания могут вызывать расстройство функции костного мозга и иммунной системы, что делает хозяина очень восприимчивым к инфекциям и кровотечению. В частности, термин лейкоз относится к острому миелолейкозу (АМЬ) и острому лимфобластному лейкозу (АЬЬ).
Как применяют в настоящем документе, термин заболевания, включающие нарушение ремоделирования хрящевой ткани и конкретно заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов включают состояния, такие как остеоартрит, псориатический артрит, юношеский ревматоидный артрит, подагрический артрит, септический или инфекционный артрит, реактивный артрит, симпатическая рефлекторная дистрофия, альгодистрофия, синдром Титце или реберный хондрит, фибромиалгия, остеохондрит, неврогенный или невропатический артрит, артропатия, эндемичные формы артрита, такие как остеоартрит эндемический деформирующий, заболевание М5с1сш и заболевание Напб1доби; дегенерация, полученная в результате фибромиалгии, системная красная волчанка, склеродермия и анкилозирующий спондилит.
Как применяют в настоящем документе, термин врожденная мальформация(и) хрящевой ткани включает состояния, такие как наследственный хондролиз, хондродисплазии и псевдохондродисплазии, в частности, но не ограничиваясь ими, микротию, анотию, метафизарную хондродисплазию и связанные нарушения.
Как применяют в настоящем документе, термин заболевание(я), связанные с повышенной секрецией 1Ьб включает состояния, такие как болезнь Кастлемена, множественная миелома, псориаз, саркома Капоши и/или мезангиально-пролиферативный гломерулонефрит.
Соединение(я) по изобретению и равноценные термины нацелены на включение соединений формул, описанных ранее в настоящем документе, где термин включает фармацевтически приемлемые соли и сольваты, например гидраты и сольваты фармацевтически приемлемых солей, если контекст это позволяет. Аналогично, ссылка на промежуточные соединения, независимо от того, являются ли они сами заявленными, нацелены на включение их солей и сольватов, если контекст это позволяет.
Соединения
Настоящее изобретение основано на открытии того, что ингибиторы 1АК пригодны для лечения заболеваний, включающих деградацию хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацию суставов, например остеоартрита; и/или состояния, включающие воспаление или иммунные ответы, такие как болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, заболевания, связанные с респираторной аллергией (например, астма, ринит), юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительные заболевания кишечника, болезненные состояния, обусловленные эндотоксином (например осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим, например, хронической сердечной недостаточности), заболевания, включающие нарушение ремоделирования хрящевой ткани (например, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов), врожденные мальформации хрящевой ткани, заболевания, ассоциированные с повышенной секрецией 1Ьб, и отторжение при трансплантации (например, отторжение органного трансплантата). Ингибиторы 1АК могут также найти применение при лечении пролиферативных заболеваний. В частности, ингибиторы 1АК нашли применение при лечении злокачественных опухолей, главным образом, лейкемий и солидных опухолей (например, лейомиосаркомы матки, рака предстательной железы). В частности, заболевания, включающие деградацию хрящевой ткани, костной ткани и/или суставную деградацию и/или воспаление, например остеоартрит. Настоящее изобретение также относится к способам получения этих соединений, фармацевтических композиций, содержащих эти соединения, и способам лечения заболеваний, включающих деградацию хрящевой ткани, костной ткани и/или суставную деградацию, и/или воспаление посредством введения соединения по изобретению. Настоящие соединения могут являться ингибиторами одного или нескольких членов семейства 1АК; конкретно, соединения могут ингибировать активность одного или нескольких из 1АК1, 1АК2, 1АК3 и/или ТУК2.
Таким образом, в первом аспекте настоящее изобретение относится к соединению, представленному формулой У!а:
- 7 018080
или его фармацевтически приемлемой солью.
В одном из вариантов осуществления соединение представляет собой соединение 176 из табл. 1.
Фармацевтические композиции
При использовании в качестве фармацевтических средств соединения по изобретению, как правило, вводят в форме фармацевтической композиции. Такие композиции можно получать способом, хорошо известным в области фармацевтики, и композиции включают по меньшей мере одно активное соединение. Как правило, соединения по данному изобретению вводят в фармацевтически эффективном количестве. Количество фактически введенного соединения будет, как правило, определять врач, исходя из соответствующих условий, включающих состояние, подлежащее лечению, выбранный путь введения, конкретное введенное соединение, возраст, массу и реакцию отдельного пациента, тяжесть симптомов у пациента и т.п.
Фармацевтические композиции по изобретению можно вводить различными путями, включающими пероральный, ректальный, трансдермальный, подкожный, внутрисуставной, внутривенный, внутримышечный и интраназальный. В зависимости от предполагаемого пути доставки соединения по данному изобретению предпочтительно составляют в смесь, или в виде инъецируемых, или в виде оральных композиций, или в виде мазей, лосьонов или в виде пластырей - все для трансдермального введения.
Композиции для перорального введения могут быть в форме нерасфасованных жидких растворов или суспензий или нерасфасованных порошков. Чаще, однако, композиции выпускают в стандартных лекарственных формах для облегчения точного дозирования. Термин стандартные лекарственные формы относится к физически отдельным единицам, подходящим в качестве единых доз для человека и другого млекопитающего, где каждая единица содержит заданное количество активного материала, рассчитанного таким образом, чтобы получить надлежащий терапевтический эффект, и находится в сочетании с подходящим фармацевтическим эксципиентом, основой или носителем. Типичные стандартные лекарственные формы включают предварительно наполненные, с предварительно рассчитанным количеством, ампулы или шприцы жидких композиций или, в случае твердых композиций, пилюли, таблетки, капсулы или т.п. В таких композициях соединение фурансульфоновой кислоты представляет собой, как правило, минорный компонент (от приблизительно 0,1 до приблизительно 50 мас.% или предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 40 мас.%), где остальное представляет собой различные основы или носители и технологические добавки, полезные для создания необходимой дозируемой формы.
Жидкие формы, подходящие для перорального введения, могут включать подходящую водную или неводную основу с буферами, суспендирующими и диспергирующими средствами, красителями, ароматизаторами и т.п. Твердые формы могут включать, например, любой из следующих ингредиентов или соединений аналогичной природы: связывающее средство, такое как микрокристаллическая целлюлоза, трагакант или желатин; эксципиент, такой как крахмал или лактоза, средство для улучшения распадаемости таблеток, такое как альгиновая кислота, Примогель или кукурузный крахмал; смазочное средство, такое как стеарат магния; средство, улучшающее скольжение, такое как коллоидный диоксид кремния; подсластитель, такой как сахароза или сахарин; или ароматизатор, такой как перечная мята, метилсалицилат или апельсиновый ароматизатор.
Инъецируемые композиции, как правило, основаны на инъецируемом стерильном физиологическом растворе или физиологическом растворе, забуференном фосфатом, или других инъецируемых носителях, известных в данной области. Как и сказано ранее, активное соединение в таких композициях является, как правило, минорным компонентом, чаще представленным от приблизительно 0,05 до 10 мас.%, где остальное представлено инъецируемым носителем и т.п.
Трансдермальные композиции, как правило, составляют в смесь в виде мази или крема для местного применения, содержащих активный ингредиент(ы), как правило, в количестве в диапазоне от приблизительно 0,01 до приблизительно 20 мас.%, предпочтительно от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мас.%, предпочтительно от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мас.% и более предпочтительно от приблизительно 0,5 до приблизительно 15 мас.%. В случае составления в смесь в виде мази активные ингредиенты будут, как правило, комбинировать или с парафиновой или с водорастворимой мазевой основой. Альтернативно, активные ингредиенты можно составлять в смесь в виде крема, например с водножировой кремовой основой. Такие трансдермальные составы являются хорошо известными в данной
- 8 018080 области и, как правило, включают дополнительные ингредиенты для увеличения кожного проникновения, стабильности активных ингредиентов или состава. Все подобные известные трансдермальные составы и ингредиенты включены в объем по данному изобретению.
Соединения по изобретению можно также вводить посредством приспособления для трансдермального введения. Таким образом, трансдермальное введение можно выполнять, используя пластырь или резервуарного типа, или тип пластыря с пористой мембраной или вариантом твердого матрикса.
Компоненты для перорального введения, описанные выше, инъецируемые или местно вводимые композиции представлены только для примера. Другие материалы, а также способы получения и т.п. изложены в Рай 8 о! К.ешшд1ои'8 Рйаттасеийса1 Заеисек, 17(11 ебйюп. 1985, Маск РиЫкЫид Сотрапу, Еайоп, Реппку 1уаша, включенном в настоящее описание в качестве ссылки.
Соединения по данному изобретению можно также вводить в формах замедленного высвобождения или из систем доставки лекарственного средства замедленного высвобождения. Описание типичных материалов замедленного высвобождения можно найти в РепйпЦоп'к, Рйагтасеийса1 8с1епсе5.
Следующие примеры составов иллюстрируют типичные фармацевтические композиции, которые можно получать в соответствии с данным изобретением. Настоящее изобретение, однако, не ограничено следующими фармацевтическими композициями.
Состав 1. Таблетки
Соединение по изобретению можно смешивать в виде сухого порошка со связывающим средством сухим желатином в массовом отношении приблизительно 1:2. Незначительное количество стеарата магния добавляют в качестве смазочного средства. Смесь формируют в 240-270 мг таблетки (80-90 мг активного амидного соединения на таблетку) в таблеточном прессе.
Состав 2. Капсулы
Соединение по изобретению можно смешивать в виде сухого порошка с разбавителем крахмалом в массовом отношении приблизительно 1:1. Смесью можно заполнять 250 мг капсулы (125 мг активного амидного соединение на капсулу).
Состав 3. Жидкий
Соединение по изобретению (125 мг), можно смешивать с сахарозой (1,75 г) и ксантановой камедью (4 мг) и полученную в результате смесь можно смешать, пропускать через отверстия сита ϋ.8. № 10, и затем смешать с приготовленным заранее раствором микрокристаллической целлюлозы и натрийкарбоксиметилцеллюлозы (11:89, 50 мг) в воде. Бензоат натрия (10 мг), ароматизатор и краситель разбавляют водой и добавляют с перемешиванием. Надлежащее количество воды можно затем добавить с перемешиванием. Надлежащее количество воды затем добавляют для получения общего объема 5 мл.
Состав 4. Таблетки
Соединение по изобретению можно смешивать в виде сухого порошка со связывающим средством сухим желатином в массовом отношении приблизительно 1:2. Незначительное количество стеарата магния добавляют в качестве смазочного средства. Смесь формируют в 450-900 мг таблетки (150-300 мг активного амидного соединения) в таблеточном прессе.
Состав 5. Инъекция
Соединение по изобретению можно растворять или суспендировать в инъецируемой водной среде, забуференной стерильным физиологическим раствором, до концентрации приблизительно 5 мг/мл.
Состав 6. Местное
Стеариловый спирт (250 г) и медицинский вазелин (250 г) растапливают при приблизительно 75°С, и затем смесь соединения по изобретению (50 г), метилпарабена (0,25 г), пропилпарабена (0,15 г), лаурилсульфата натрия (10 г) и пропиленгликоля (120 г), растворенных в воде (приблизительно 370 г), добавляют и полученную в результате смесь перемешивают, пока она не застынет.
Способы лечения
Настоящие соединения можно использовать в качестве терапевтических средств для лечения у млекопитающих состояний, которые причинно связывают или приписывают нарушенной активности 1ЛК. В частности, состояния, связанные с нарушенной активностью одного или нескольких из 1ЛК1, 1ЛК2, 1ЛК3 и/или ΤΥΚ2. Таким образом, соединение по изобретению и фармацевтические композиции по данному изобретению нашли применение в качестве терапевтических средств для предотвращения и/или лечения заболеваний, включающих деградацию хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацию суставов, например остеоартрит; и/или состояний, включающих воспаление или иммунные ответы, такие как болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, заболеваний, связанных с респираторной аллергией (например, астма, ринит), юношеского идиопатического артрита, колита, воспалительных заболеваний кишечника, болезненных состояний, обусловленных эндотоксином (например, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим, например, хронической сердечной недостаточности), заболеваний включающих нарушение ремоделирования хрящевой ткани (например, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов), врожденных мальформаций хрящевой ткани, заболеваний, ассоциированных с повышенной секрецией 1Ь6, пролиферативных заболеваний и отторжений при трансплантации (например, отторжение органного трансплантата). Ингибиторы 1ЛК могут также найти применение при лечении пролиферативных заболеваний. В
- 9 018080 частности, ингибиторы 1ЛК нашли применение при лечении злокачественных опухолей, главным образом, лейкемий и солидных опухолей (например, лейомиосаркомы матки, рака предстательной железы). В частности, состояния выбирают из воспалительных состояний, состояний, связанных с деградацией хрящевой ткани и/или суставов у млекопитающих, включая людей. В другом варианте осуществления соединения и фармацевтические композиции по данному изобретению нашли применение в качестве терапевтических средств для предотвращения и/или лечения пролиферативных нарушений у млекопитающих, включая людей. В конкретном варианте осуществления соединение по изобретению и его фармацевтические композиции нашли применение в виде терапевтических средств для предотвращения и/или лечения злокачественной опухоли у млекопитающих, включая людей.
В дополнительных аспектах способ лечения относится к способам лечения млекопитающего, подверженного или пораженного состоянием, включающим иммунный ответ или аутоиммунное заболевание. Способы включают введение эффективного количества одной или нескольких фармацевтических композиций или соединения по изобретению, описанных в настоящем документе, для лечения состояния или предотвращения состояния. В конкретном варианте осуществления аутоиммунное заболевание выбирают из СОРЭ. астмы, системной красной волчанки, сахарного диабета I типа и воспалительных заболеваний кишечника.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению по изобретению для применения в лечении, предотвращении или профилактике состояния, включающего аутоиммунный ответ или аутоиммунное заболевание. В конкретном варианте осуществления аутоиммунное заболевание выбирают из СОВЭ, астмы, системной красной волчанки, сахарного диабета I типа и воспалительного заболевания кишечника.
В аспекте способа лечения данное описание раскрывает способ лечения, предотвращения или профилактики у млекопитающего, подверженного или пораженного заболеванием, включающим нарушение ремоделирования хрящевой ткани (например, состояние, связанное с анаболической стимуляцией хондроцитов или включающее анаболическую стимуляцию хондроцитов), например остеоартрит, псориатический артрит, юношеский ревматоидный артрит, подагрический артрит, септический или инфекционный артрит, реактивный артрит, симпатическую рефлекторную дистрофию, альгодистрофию, синдром Титце или реберный хондрит, фибромиалгию, остеохондрит, неврогенный или невропатический артрит, артропатию, эндемичные формы артрита, такие как остеоартрит эндемический деформирующий, заболевание М5с1сп1 и заболевание НаиШдоби; дегенерацию, полученную в результате фибромиалгии, системную красную волчанку, склеродермию и анкилозирующий спондилит, где способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения по изобретению, или одной или нескольких фармацевтических композиций или одного или нескольких соединений, описанных в настоящем документе.
В другом аспекте данное описание раскрывает соединение по изобретению, предназначенное для лечения, предотвращения или профилактики у млекопитающего, подверженного или пораженного заболеванием, включающим нарушение ремоделирования хрящевой ткани (например, состояние, связанное с анаболической стимуляцией хондроцитов или включающее анаболическую стимуляцию хондроцитов), например остеоартрит, псориатический артрит, юношеский ревматоидный артрит, подагрический артрит, септический или инфекционный артрит, реактивный артрит, симпатическую рефлекторную дистрофию, альгодистрофию, синдром Титце или реберный хондрит, фибромиалгию, остеохондрит, неврогенный или невропатический артрит, артропатию, эндемичные формы артрита, такие как остеоартрит эндемический деформирующий, заболевание М5с1сш и заболевание Напбфоби; дегенерацию, полученную в результате фибромиалгии, системную красную волчанку, склеродермию и анкилозирующий спондилит.
Настоящее описание раскрывает способ лечения врожденных мальформаций хрящевой ткани, включающих наследственный хондролиз, хондродисплазию и псевдохондродисплазию, в частности, но не ограничиваясь ими, микротию, анотию, метафизарную хондродисплазию и связанные нарушения, где способ включает введение эффективного количества одной или нескольких фармацевтических композиций или одного или нескольких соединений, описанных в настоящем документе.
В другом аспекте настоящее описание раскрывает соединение по изобретению, предназначенное для применения в лечении, предотвращении или профилактике врожденных мальформаций хрящевой ткани, включающих наследственный хондролиз, хондродисплазию и псевдохондродисплазию, в частности, но не ограничиваясь ими, микротию, анотию, метафизарную хондродисплазию и связанные нарушения.
В другом аспекте настоящее описание раскрывает способ лечения млекопитающего, подверженного или пораженного состоянием, включающим воспаление. В дополнительных аспектах способа лечения данное описание раскрывает способ лечения млекопитающего, подверженного или пораженного заболеванием и нарушениям, которые опосредованы или являются результатом воспаления, такие как, например ревматоидный артрит и остеоартрит, заболевания, связанные с респираторной аллергией (например, астма, ринит), юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительные заболевания кишечника, болезненные состояния, обусловленные эндотоксином (например, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим, например, хронической сердечной недостаточности) и связанные заболевания, вовлекающие хрящевую ткань, такую как хрящевая
- 10 018080 ткань суставов, где способ включает введение эффективного количества одной или нескольких фармацевтических композиций или одного или нескольких соединений, описанных в настоящем документе. В конкретном варианте осуществления состояние, включающее воспаление, выбирают из ревматоидного артрита, остеоартрита, заболевания, связанного с респираторной аллергией (например, астма) и воспалительных заболеваний кишечника. Способы включают введение эффективного количества одной или нескольких фармацевтических композиций или одного или нескольких соединений, описанных в настоящем документе, для лечения или предотвращения состояния.
В другом аспекте данное изобретение относится к соединению по изобретению для применения в лечении, предотвращении или профилактике состояния, включающего воспаление. В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению по изобретению для применения в лечении, предотвращении или профилактике заболевания и нарушения, которые опосредуют или являются результатом воспаления, такие как, например, ревматоидный артрит и остеоартрит, заболевание, связанное с респираторной аллергией (например, астма, ринит), юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительные заболевания кишечника, болезненные состояния, обусловленные эндотоксином (например, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим, например, хронической сердечной недостаточности), и связанные заболевания, вовлекающие хрящевую ткань, такую как хрящевая ткань суставов. В конкретном варианте осуществления состояние, включающее воспаление, выбирают из ревматоидного артрита, остеоартрита, заболевания, связанного с респираторной аллергией (например, астма), и воспалительных заболеваний кишечника.
В дополнительных аспектах способа лечения данное описание раскрывает способ лечения млекопитающего, подверженного или пораженного пролиферативным заболеванием, в частности, злокачественной опухолью (например, солидные опухоли, такие как лейомиосаркома матки или рак предстательной железы), лейкозом (например, ЛМЬ или ЛЬЬ), множественной миеломой и/или псориазом, где способы включают введение эффективного количества одной или нескольких фармацевтических композиций или одного или нескольких соединений, описанных в настоящем документе. В дополнительных аспектах способа лечения данное описание раскрывает способ лечения млекопитающего, подверженного или пораженного злокачественной опухолью (например, солидные опухоли, такие как лейомиосаркома матки или рак предстательной железы) и/или лейкозом.
В другом аспекте настоящее описание раскрывает соединение по изобретению для применения в лечении, предотвращении или профилактике пролиферативного заболевания, в частности, злокачественной опухоли (например, солидные опухоли, такие как лейомиосаркома матки или рак предстательной железы), лейкоза (например, ЛМЬ или ЛЬЬ), множественной миеломы и/или псориаза. В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению по изобретению для применения в лечении, предотвращении или профилактике злокачественной опухоли, (например, солидные опухоли, такие как лейомиосаркома матки или рак предстательной железы) и/или лейкоза.
В дополнительных аспектах способа лечения данное описание раскрывает способ лечения млекопитающего, подверженного или пораженного заболеваниями, связанными с гиперсекрецией 1Ьб, в частности, болезнью Кастлемена или мезангиально-пролиферативным гломерулонефритом, где способы включают введение эффективного количества одной или нескольких фармацевтических композиций или одного или нескольких соединений, описанных в настоящем документе.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению по изобретению для применения в лечении, предотвращении или профилактике заболеваний, связанных с гиперсекрецией 1Ьб, в частности, болезнью Кастлемена или мезангиально-пролиферативным гломерулонефритом.
В дополнительных аспектах способа лечения данное описание раскрывает способ лечения млекопитающего, подверженного или пораженного процессом отторжения трансплантата, где способы включают введение эффективного количества одной или нескольких фармацевтических композиций или одного или нескольких соединений, описанных в настоящем документе. В конкретном варианте осуществления изобретение относится к способам лечения отторжения органного трансплантата.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к соединению по изобретению для применения в лечении, предотвращении или профилактике процесса отторжения трансплантата. В конкретном варианте осуществления изобретение относится к способам лечения отторжения органного трансплантата.
В качестве дополнительного аспекта настоящие соединения предоставляют для применения в качестве фармацевтических, в частности, в лечении или предотвращении указанных выше состояний и заболеваний. Также представленным в настоящем документе является применение настоящих соединений в производстве лекарственных средств для лечения или предотвращения одного из указанных выше состояний и заболеваний.
Конкретная схема лечения по настоящему способу включает введение субъекту, страдающему от заболевания, включающего воспаление, эффективного количества соединения по изобретению в течение периода времени, достаточного для снижения уровня воспаления у пациента и предпочтительно завершения процессов, ответственных за указанное воспаление. Конкретный вариант осуществления способа включает введение эффективного количества соединения по изобретению субъекту, пациенту, страдающему от ревматоидного артрита или подверженному развитию ревматоидного артрита, в течение перио
- 11 018080 да времени, достаточного для уменьшения или предотвращения, соответственно, воспаления в суставах указанного пациента и предпочтительно завершения процессов, ответственных за указанное воспаление.
Дополнительная конкретная схема лечения по настоящему способу включает введение субъекту, страдающему от болезненного состояния, характеризующегося деградацией хрящевой ткани или суставов (например, остеоартрит), эффективного количества соединения по изобретению в течение периода времени, достаточного для уменьшения и предпочтительно завершения самоподдерживающихся процессов, ответственных за указанную деградацию. Конкретный вариант осуществления способа включает введение эффективного количества соединения по изобретению субъекту-пациенту, страдающему от остеоартрита или подверженному развитию остеоартрита, в течение периода времени, достаточного для уменьшения или предотвращения, соответственно, деградации хрящевой ткани в суставах указанного пациента и предпочтительно завершения самоподдерживающихся процессов, ответственных за указанную деградацию. В конкретном варианте осуществления указанные соединения демонстрируют анаболические и/или противокатаболические свойства в хрящевой ткани.
Уровни инъецируемой дозы заключаются в пределах от приблизительно 0,1 по меньшей мере 10 мг/кг/ч, все для от приблизительно 1 до приблизительно 120 ч и, в частности, от 24 до 9б ч. Предварительно заданный объем болюса от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мг/кг или более также можно вводить для достижения надлежащего плато концентрации. Максимальная общая доза не должна превышать приблизительно 2 г/сутки на от 40 до 80 кг массы пациента, являющегося человеком.
Для предотвращения и/или лечения хронических состояний, таких как дегенеративные состояния, схема лечения, как правило, растягивается на многие месяцы или годы, таким образом, для удобства и переносимости лечения пациентом предпочтительным является оральное дозирование. При оральном дозировании от одной до пяти и, в частности, от двух до четырех и, как правило, три оральные дозы в сутки представляют собой типичные схемы лечения. При использовании этих примеров дозирования каждая доза обеспечивает от приблизительно 0,01 до приблизительно 20 мг/кг соединения по изобретению, в частности, каждая доза обеспечивает от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мг/кг и конкретно, от приблизительно 1 до приблизительно 5 мг/кг.
Трансдермальные дозы, как правило, выбирают для обеспечения в крови сходных или более низких уровней, чем достигают при использовании доз инъекциями.
При использовании для предотвращения начала проявления воспалительного состояния, соединения по данному изобретению будут вводить пациенту с риском развития состояния, как правило, по совету и под наблюдением врача в дозировке, соответствующей уровню, описанному выше. Пациенты с риском развития конкретного состояния, как правило, включают пациентов, которые имеют семейный анамнез состояния, или тех пациентов, у которых посредством генетического тестирования или скрининга обнаружили подверженность развитию конкретного состояния.
Соединения по данному изобретению можно вводить как в виде отдельного активного средства, так и в сочетании с другими средствами, включающими другие соединения, которые показали такую же или схожую терапевтическую активность и которые определены как безопасные и эффективные при таком комбинированном введении. В конкретном варианте осуществления комбинированное введение двух (или более) средств допускает значимо более низкие дозы каждого используемого средства, тем самым снижая наблюдаемые побочные эффекты.
В одном из вариантов соединение по изобретению вводят совместно с другим терапевтическим средством для лечения и/или предотвращения заболевания, включающего воспаление; конкретные средства включают, но не ограничиваются ими, иммунорегуляторные средства, например азатиоприн, кортикостероиды (например, преднизолон или дексаметазон), циклофосфамид, циклоспорин А, такролимус, микофенолата мофетил, муромонаб-СЭ3 (ОКТ3, например Ог11тосо1опе®), АТС, аспирин, ацетоминофен, ибупрофен, напроксен и пироксикам.
В одном из вариантов соединение по изобретению вводят совместно с другим терапевтическим средством для лечения и/или предотвращения артрита (например, ревматоидного артрита); конкретные средства включают, но не ограничиваются ими, анальгетики, нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (Ν8ΑΙΌ8), стероиды, синтетические ΌΜΑΚΟ8 (например, но не ограничиваясь ими, метотрексат, лефлуномид, сульфасалазин, ауранофин, натрия ауротиомалат, пеницилламин, хлорохин, гидроксихлорохин, азатиоприн и циклоспорин) и биологические ΌΜΑΚΌ8 (например, но не ограничиваясь ими, Инфликсимаб, Этанерцепт, Адалимубаб, Ритуксимаб и Абатацепт).
В одном из вариантов соединение по изобретению вводят совместно с другим терапевтическим средством для лечения и/или предотвращения пролиферативных нарушений; конкретные средства включают, но не ограничиваются ими, метотрексат, лейковорин, адриамицин, пренизон, блеомицин, циклофосфамид, 5-фторурацил, паклитаксел, доцетаксел, винкристин, винбластин, винорелбин, доксорубицин, тамоксифен, торемифен, мегестрола ацетат, анастрозол, гозерелин, моноклональное антитело против НЕИ2 (например, Негсерйи™), капецитабин, ралоксифена гидрохлорид, ингибиторы ЕСЕИ (например, 1ге88а®, Тагсеуа™, ЕгЬйих™), ингибиторы УЕСЕ (например, Ауазйи™), ингибиторы протеасом (например, Уе1сайе™), Сйуес® или ингибиторы йзр90 (например, 17-ААС). Дополнительно, соединение по
- 12 018080 изобретению можно вводить в сочетании с другими видами терапии, включая в качестве неограничивающих примеров лучевую терапию или хирургическое вмешательство. В конкретном варианте осуществления пролиферативное нарушение выбирают из злокачественной опухоли, миелопролиферативного заболевания или лейкемии.
В одном из вариантов соединение по изобретению вводят совместно с другим терапевтическим средством для лечения и/или предотвращения аутоиммунных заболеваний, конкретные средства включают, но не ограничиваются ими, глюкокортикоиды, цитостатические средства (например, аналоги пурина), алкилирующие средства (например, азотистые иприты (циклофосфамид), нитрозомочевина, соединения платины и другие), антиметаболиты (например, метотрексат, азатиоприн и меркаптопурин), цитотоксические антибиотики (например, дактиномицин, антрациклины, митомицин С, блеомицин и митрамицин), антитела (например, моноклональные антитела против СЭ20. против СЭ25 или против СЭЗ (ОТК3), А1дат® и Тйутод1оЬи1ше®), циклоспорин, такролимус, рапамицин (сиролимус), интерфероны (например, ΙΡΝ-β), связывающие ΤΝΡ белки (например, инфликсимаб (Ремикейд), этанерцепт (Энбрел), или адалимумаб (Хумира)), микофенолат, Финголимод, Мириоцин.
В одном из вариантов соединение по изобретению вводят совместно с другим терапевтическим средством для лечения и/или предотвращения отторжения трансплантата, конкретные средства включают, но не ограничиваются ими, ингибиторы кальциневрина (например, циклоспорин или такролимус (РК506)), ингибиторы тТОР (например, сиролимус, эверолимус), антипролиферативные (например, азатиоприн, микофеноловая кислота), кортикостероиды (например, преднизолон, гидрокортизон), антитела (например, моноклональные антитела против рецептора 1Ь-2К.а, базиликсимаб, даклизумаб), поликлональные антитела против Т-клеток (например, глобулин против тимоцитов (АТС), глобулин против лимфоцитов (АЬС)).
В одном из вариантов соединение по изобретению вводят вместе с другим терапевтическим средством для лечения и/или предотвращения астмы, и/или ринита, и/или СОРЭ, конкретные средства включают в качестве неограничивающих примеров агонистов бета2-адренорецептора (например, сальбутамол, левальбутерол, тербуталин и битолтерол), эпинефрин (ингалируемый или таблетки), антихолинерические средства (например, ипратропия бромид), глюкокортикоиды (оральные или ингалируемые) длительно действующие в2-агонисты (например, салметерол, формотерол, бамбутерол и оральный альбутерол замедленного высвобождения), комбинации ингалируемых стероидов и длительно действующих бронхолитиков (например, флутиказон/салметерол, будесонид/формотерол), антагонистов и ингибиторов синтеза лейкотриена (например, монтелукаст, зафирлукаст и зилеутон), ингибиторы высвобождения медиаторов (например, кромогликат и кетотифен), биологические регуляторы ответа 1дЕ (например, омализумаб), противогистаминные средства (например, цетирезин, циннаризин, фексофенадин), сосудосуживающие средства (например, оксиметазолин, ксилометазолин, нафазолин и трамазолин).
Дополнительно, соединение по изобретению можно вводить в сочетании с видами терапии неотложной помощи, в случае астмы и/или СОРЭ, такие виды терапии включают введение кислорода или кислородно-гелиевой смеси, распыляемого сальбутамола или тербуталина (необязательно комбинированного с антихолинергическими (например, ипратропий), системными стероидами (оральным или внутривенным, например преднизон, преднизолон, метилпреднизолон, дексаметазон, или гидрокортизон), сальбутамолом для внутривенного введения, неспецифическими бета-агонистами, инъецируемыми или ингалируемыми (например, эпинефрин, изоэтарин, изопротеренол, метапротеренол), антихолинергическими средствами (IV или распыляемые, например гликопироллат, атропин, ипратропий), метилксантинами (теофиллин, аминофиллин, бамифиллин), анестетиками для применения в виде ингаляций, которые обладают эффектом бронходилататоров (например, изофлуран, галотан, энфлуран), кетамином, сульфатом магния для внутривенного ведения.
В одном из вариантов соединение по изобретению вводят совместно с другим терапевтическим средством для лечения и/или предотвращения ΙΒΌ, конкретные средства включают, но не ограничиваются ими, глюкокортикоидные (например, преднизон, будезонид) синтетические средства, модифицирующие заболевание, иммуномодулирующие средства (например, метотрексат, лефлуномид, сульфасалазин, мезалазин, азатиоприн, 6-меркаптопурин и циклоспорин) и биологические средства, модифицирующие заболевание, иммуномодуляторные средства (инфликсимаб, адалимумаб, ритуксимаб и абатацепт).
В одном из вариантов соединение по изобретению вводят совместно с другим терапевтическим средством для лечения и/или предотвращения 8ЬЕ, конкретные средства включают, но не ограничиваются ими, противоревматические лекарственные средства, модифицирующие заболевания (ΌΜΑΚΌ), такие как противомалярийные средства (например, плаквенил, гидроксихлорохин), иммуносупрессанты (например, метотрексат и азатиоприн), циклофосфамид и микофеноловая кислота; иммуносупрессивные лекарственные средства и анальгетики, такие как нестероидные противовоспалительные лекарственные средства, опиаты (например, декстропропоксифен и ко-кодамол), опиоиды (например, гирокодон, оксикодон, Μ8 контин или метадон) и трансдермальный пластырь с фентанилом - дурагезик.
В одном из вариантов соединение по изобретению вводят совместно с другим терапевтическим средством для лечения и/или предотвращения псориаза, конкретные средства включают, но не ограничи
- 13 018080 ваются ими, лекарственные средства для местного введения, такие как омывающие жидкости, увлажняющие средства, кремы, содержащие лекарственные средства, и мази, содержащие деготь, дитранол (антралин), кортикостероиды, такие как дезоксиметазон (Торюой), флуоцинонид, аналоги витамина Ό3 (например, кальципотриол), масло железного дерева и ретиноиды (этретинат, ацитретин, тазаротен), системные лекарственные средства, такие как метотрексат, циклоспорин, ретиноиды, тиогуанин, гидроксимочевина, сульфасалазин, микофенолата мофетил, азатиоприн, такролимус, сложные эфиры фумаровой кислоты или биологические препараты, так как Атеу1уе, Энбрел, Хумира, Ремикейд, Раптива и устекинумаб (блокатор 1Ь-12 и 1Ь-23). Дополнительно, соединение по изобретению можно вводить в сочетании с другими терапевтическими средствами, включая, в качестве неограничивающих примеров, фототерапию или фотохимиотерапию (например, псорален и ультрафиолетовые лучи спектра А (РИУА)).
Как будет очевидно специалисту, посредством совместного введения в рамки единой схемы лечения включают любые способы доставки двух или более терапевтических средств пациенту. Хотя два или более средств можно вводить одновременно в одном составе, это не является существенным. Средства можно вводить в различных составах и в различное время.
Общие синтетические способы
Общее
Соединения по изобретению можно получать из легкодоступных исходных материалов, используя следующие общие способы и процедуры. Следует понимать, что в случае, если используют типичные или предпочтительные условия процесса (т.е. температуры реакции, время, молярное соотношение вступающих в реакцию соединений, растворителей, давление и т.д.), также можно использовать другие условия процесса, если не указано иначе. Оптимальные условия реакции могут варьировать в зависимости от конкретных используемых в реакции средств или растворителя, но такие условия может определить специалист в данной области посредством общепринятых способов оптимизации.
Дополнительно, как будет очевидно специалистам в данной области, для защиты некоторых функциональных групп от участия в нежелательных реакциях могут потребоваться традиционные защитные группы. Выбор подходящей защитной группы для конкретной функциональной группы, а также условия, подходящие для защиты и удаления защиты, хорошо известны в данной области. Например, ряд защитных групп и их введение и удаление описывают в Т. Стееие аиб Р. С. М. Жак, РгсйесВпд Сгоирк ίη Огдашс ЗупШекк, Бесопб Εάίίίοη, \УПеу, №\ν Уотк, 1991 и цитируемые в них ссылки.
Для получения типичных бициклогетероарилов, которые перечислены в настоящем документе ранее, в деталях представлены следующие способы. Соединения по изобретению специалист в данной области органического синтеза может получить из известных или коммерчески доступных исходных материалов и реагентов.
Все реагенты являлись техническими и использовались в состоянии поставки, без дополнительной очистки, если не указано иначе. Коммерчески доступные безводные растворители использовали для реакций, проводимых в инертной атмосфере. Химически чистые растворители использовали во всех случаях, если не указано иначе. Хроматографию проводили на колонках с силикагелем 60 (35-70 мкм). Тонкослойную хроматографию осуществляли, используя планшеты, предварительно покрытые силикагелем Е-254 (толщина 0,25 мм). Спектры 1Н ЯМР записали на спектрометре Вгикег ΌΡΧ 400 ЯМР (400 МГц). Химические сдвиги (5) для спектров ЯМР 1Н представили в частях на миллион (м.д.) относительно тетраметилсилана (δ 0,00) или подходящего пика остаточного растворителя, т.е. СНС13 (δ 7,27), в качестве внутреннего источника сравнения. Множественность сигнала указывается как синглет (к), дублет (б), триплет (ΐ), квартет (с.|), мультиплет (т) и уширенный (Ьт). Константы взаимодействия (1) указываются в Гц. М§ спектры с распылением в электрическом поле получили на спектрометре ЬС/М8 Мютотакк р1а11отт. Колонка, используемая для всего анализа ЬСМ8: \Уа1егк Асцийу ИРЬС ВЕН С18 1,7 мкм, 2,1 мм Ш х 50 мм Ь (партия № 186002350)). Препаративная ВЭЖХ: \Уа1егк ХВпбде Ргер С18 5 мкм ΟΌΒ 19 мм Ш х 100 мм Ь (партия № 186002978). Во всех способах использовали градиент МеСЫ/Н2О. Н2О содержит или 0,1% ТЕА или 0,1% ΝΗ3.
- 14 018080
Список сокращений, используемых в экспериментальной части
ΌΟΜ Цихлорометан
ΌίΡΕΑ Ν, Ν- диизопропилэтиламин
МеСЫ Ацетонитрил
ВОС трет-Бутилоксикарбонил
ΌΜΡ Ν, Ν- диметилформамид
ТГА Трифторуксусная кислота
ТНР Тетрагидрофуран
ЯМР Ядерный магнитный резонанс
дмсо Диметилсульфоксид
ЦРРА Дифенилфосфорилазид
! ЬС-М8 Жидкостная хроматография-Масс-спектрометрия
М.д. Частей на миллион
ЕЬОАс Этилацетат
АРС1 Химическая ионизация при атмосферном давлении
КС Время удержания
8 Синглет
Ьг з Уширенный синглет
т Мультиплет
а Дублет
ΡάΟΙίάρρί [1,1'-Бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлоропалладий(II)
ТЕА Триэтиламин
Синтетическое получение соединений по изобретению
Соединение по изобретению можно получать по следующей схеме. Общий способ синтеза
Су1, Ь1, п1, К2а, К3Ь, К4Ь и К4с такие, как описано в настоящем документе.
Общее 1.1.1 1-(6-Бромпиридин-2-ил)-3-карбоэтокситиомочевина (2)
К раствору 2-амино-6-бромпиридина (1) (253,8 г, 1,467 моль) в ΌΟΜ (2,5 л), охлажденного до 5°С, добавляют этоксикарбонилизотиоцианат (173,0 мл, 1,467 моль) по каплям, в течение 15 мин. Затем реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры (20°С) и перемешивают в течение 16 ч. Испарение ίη уасио привело к образованию твердого вещества, которое можно получать фильтрацией, тщательно промывать бензином (3x600 мл) и подвергать воздушной сушке для предоставления (2). Тиомочевину как таковую можно использовать для следующей стадии без какого-либо очистки.
'|| (400 МГц, СОС13), δ: 12,03 (ушир.с, 1Н, ΝΗ), 8,81 (д, 1=7,8 Гц, 1Н, Н-3), 8,15 (ушир.с, 1Н, ΝΗ), 7,60 (т, 1=8,0 Гц, 1Н, Н-4), 7,32 (дд, 1=7,7 Гц, 1=0,6 Гц, 1Н, Н-5), 4,31 (кв., 1=7,1 Гц, 2Н, СН2), 1,35 (т, 1=7,1 Гц, 3Н, СН2).
- 15 018080
1.1.2 5-Бром-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-иламин (3)
Вг
К суспензии гидроксиламина гидрохлорида (101,8 г, 1,465 моль) в ЕЮН/МеОН (1:1, 900 мл) добавляют Ν,Ν-диизопропилэтиламин (145,3 мл, 0,879 моль) и смесь перемешивают при комнатной температуре (20°С) в течение 1 ч. 1-(6-Бромпиридин-2-ил)-3-карбоэтокситиомочевину (2) (89,0 г, 0,293 моль) можно затем добавлять и медленно нагревать смесь с обратным холодильником (примечание: для улавливания выделенного Н2§ требуется скруббер с раствором гипохлорита натрия). После 3 ч с обратным холодильником смеси давали охладиться и фильтровали для сбора выпавшего в осадок твердого вещества. Дополнительно продукт можно собрать испарением фильтрата ίη уасио, добавлением Н2О (250 мл) и фильтрацией. Комбинированные твердые вещества промывают последовательно с Н2О (250 мл), ЕЮН/МеОН (1:1, 250 мл) и Εΐ2Ο (250 мл), затем высушивают ίη уасио для получения производного триазолопиридина (3) в виде твердого вещества. Соединение может быть использовано как таковое для следующей стадии без какой-либо очистки.
Ή (400 МГц, ДМСО-й6) δ 7,43-7,34 (м, 2Н, 2 х ароматический-Н), 7,24 (дд, 1Н, 1=6,8 Гц 1=1,8 Гц, ароматический-Н), 6,30 (уушир., 2Н, ΝΠ2); т/ζ 213/215 (1:1, М+Н+, 100%).
1.1.3 Общий способ моноацилирования для получения промежуточного соединения (4)
К раствору 2-аминотриазолопиридина (3) (7,10 г, 33,3 ммоль) в сухом ίΉ,ί,’Ν (150 мл) при 5°С добавляют Εΐ3Ν (11,6 мл, 83,3 ммоль) с последующим добавлением надлежащего хлорангидрида (83,3 ммоль). Реакционной смеси затем дают охладиться до температуры окружающей среды и перемешивают до тех пор, пока не истратится исходный материал (3). Если необходимо, Εΐ3Ν (4,64 мл, 33,3 ммоль) и хлорангидрид (33,3 ммоль) можно добавить дополнительно, для обеспечения завершения реакции. После выпаривания растворителя ίη уасио остаток обрабатывают 7 N раствором аммиака в метаноле (50 мл) и перемешивают при температуре окружающей среды (в течение 1-16 ч) для гидролиза какого-либо бисацилированного продукта. Выделение продукта осуществляют посредством удаления летучих веществ ίη уасио с последующим титрованием Εΐ2Ο (50 мл). Твердое вещество можно собрать фильтрацией, промыть Н2О (2х50 мл), ацетоном (50 мл) и Εΐ2Ο (50 мл), затем высушить ίη уасио для получения требуемого ацильного промежуточного соединения (4). В некоторых случаях может потребоваться хроматография на колонке (бензинЕЮАс для получения чистых соединений.
Способ А.
1.1.4 Получение соединений по изобретению посредством сочетания διιζιιΚί (5)
Надлежащую бороновую кислоту (2 экв.) добавляют к раствору промежуточного соединения брома (4) в 1,4-диоксан/вода (5:1). В раствор добавляют К2СО3 (2 экв.) и РйС12йрр1 (5%). Полученную в результате смесь затем нагревают под действием электромагнитных волн при 140°С в течение 30 мин (эту реакцию можно также выполнять традиционным нагреванием на масляной бане при 90°С в течение 16 ч в атмосфере Ν2). Добавляют воду и раствор экстрагируют этилацетатом. Органические слои высушивают над Мд§О4 и выпаривают ίη уасио. Готовое соединение получают после очистки флэш-хроматографией.
Способ С.
где В4а, В4Ь, В4с, В3Ь и η1 такие, как описано в настоящем документе.
- 16 018080
Реакция алкилирования (общий способ)
Циклопропанкарбоновую кислоту [5-(4-гидроксифенил)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил]амид (1,1 экв.), полученную посредством способа А, и К2СО3 (5 экв.) (или АдСО3) растворяют в ΌΜΕ в атмосфере Ν2 и по каплям добавляют надлежащее алкилирующее средство (1,1 экв.). Полученную в результате суспензию нагревают при 50°С в течение 16 ч. По истечении этого времени реакцию завершают. Соединение экстрагируют ЕЮАс и водой, промывают насыщенным солевым раствором и высушивают под Мд§О4. Органические слои фильтруют и выпаривают. Готовое соединение выделяют посредством препаративной ВЭЖХ.
Препаративная ВЭЖХ:
\Уа1ег5 ХВпбде Ргер С18 5 мкм ОЭВ 19 мм ΙΌ х 100 мм Ь (партия № 186002978). Во все способах используют градиенты МеСНЩО. Н2О содержит или 0,1% ТЕА или 0,1% ΝΗ3.
Способ Е.
где К4а, К4Ь, К4с, К3Ь и и1 такие, как описано в настоящем документе.
Восстановительное аминирование (общий способ)
Надлежащий альдегид (2 экв.), анилиновое производное (1 экв.), полученные способом А и Т1(ОРг)4 смешивают и перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь разбавляют этанолом и добавляют №(ί.'Ν)ΒΗ3 (1 экв.). Полученный в результате раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавляют водой и фильтруют. Фильтрат промывают этанолом. Комбинированные растворимые фазы выпаривают под вакуумом. Готовое соединение выделяют препаративной ВЭЖХ.
Препаративная ВЭЖХ:
\Уа1ег5 ХВпбде Ргер С18 5 мкм ОЭВ 19 мм ΙΌ х 100 мм Ь (партия № 186002978). Во всех способах используют градиенты МеСНЩО. Н2О содержит или 0,1% ТЕА или 0,1% ΝΗ3.
Способ Е.
где Аг Ϊ8 Су1-Ь1-(СК4ЬК4с)и1-К3Ь; и
Су1, Ь1, и1, К3Ь, К4Ь и К4с такие, как описано в настоящем документе. №(5-Бром-[1,2,4]триазоло [ 1,5-а]пиридин-2-ил)ацетамид
К раствору 5-бром-2-аминотриазолопиридина (1 экв.) в сухом СН3С№ при 5°С добавляют Εΐ3Ν (2,5 экв.) с последующим добавлением ацетилхлорида (2,5 экв.). Реакционной смеси затем позволяют нагреться до температуры окружающей среды и перемешивают до тех пор, пока не израсходуется исходный материал. Если необходимо, дополнительно Εΐ3Ν (1 экв.) и хлорангидрид (1 экв.) добавляют для обеспечения полной реакции. После выпаривания растворителя 1и νасиο осадок обрабатывают 7 N раствором аммиака в метаноле и перемешивают при температуре окружающей среды (в течение 1-16 ч) для
- 17 018080 гидролиза какого-либо бис-ацилированного продукта. Выделение продукта осуществляют посредством удаления летучих веществ ίη уасио с последующим добавлением воды и экстракцией этилацетатом. Органическую фазу затем высушивают над Мд8О4, выпаривают ίη уасио. Соединение используют без дополнительной очистки.
Сочетание 8ιιζιι1<ί (общий способ)
Бороновую кислоту (2 экв.) добавляют к раствору Ы-(5-бром-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2ил)ацетамида в 1,4-диоксан/вода (5:1). К2СО3 (2 экв.) и Рб(брр£)С12 (5%) (брр£ = 1,1'Бис(дифенилфосфино)ферроцен) добавляют в раствор. Смесь, полученную в результате, затем нагревают в микроволновой печи (СЕМ Шзсоуег) в запаянной пробирке при 140°С в течение 30 мин.
Добавляют воду и раствор экстрагируют этилацетатом.
Органические слои высушивают над Мд8О4 и выпаривают ίη уасио.
Готовое соединение получают после очистки препаративной ВЭЖХ.
Аналитическая: \νηΑΓ5 Асс.|иЦу ИРЬС ВЕН С18 1,7 мкм, 2,1 мм ГО х 50 мм Ь (партия № 186002350). Препаративная ВЭЖХ:
Vаΐе^8 ХВЛбде Ргер С18 5 мкм ОЭВ 19 мм ГО х 100 мм Ь (партия № 186002978). Во всех способах используются градиенты МеСЫ/Н2О. Н2О содержит или 0,1% ТЕА или 0,1% ΝΗ3.
Способ Ь.
Ь. 1 Нуклеофильное ароматическое замещение (общий способ)
Р4аМ'к4а {5-[4-(6-хлорпиридин-3 -илметокси)фенил]-[1,2,4]триазоло [ 1,5-а]пиридин-2-ил}амид циклопропанкарбоновой кислоты, полученный способом С (1 экв.), соответствующий амин, (1,5 экв.) смешивают в ДМСО в запаянной пробирке. Реакцию подвергают нагреванию при 100°С в течение 24 ч. Поскольку все 8М удалены ЬСМ8, воду добавляют в реакционную смесь и органические вещества экстрагируют этилацетатом. Органический слой высушивают над Мд8О4 и выпаривают под вакуумом. Готовое соединение выделяют посредством препаративной ВЭЖХ.
Аналитическая: \νηΑΓ5 ЛссщНу ИРЬС ВЕН С18 1,7 мкм, 2,1 мм ГО х 50 мм Ь (партия № 186002350)
Препаративная ВЭЖХ: Vаΐе^8 ХВпбде Ргер С18 5 мкм ОЭВ 19 мм ГО х 100 мм Ь (партия № 186002978). Во всех способах используются градиенты МеСЫ/Н2О. Н2О содержит или 0,1% ТЕА или 0,1% ЫН3.
- 18 018080
Способ N.
N. 1 {5-[4-(нитриларилметокси)фенил]-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил}амид циклопропанкарбоновой кислоты
Рй(РРй3)4 (0,04 ммоль) добавляют к дегазированному раствору циклопропанкарбоновой кислоты {5[4-(галогенарил-3-илметокси)фенил]-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил}амид, полученной в способе В (0,24 ммоль) и Ζπ(ΟΝ)2 (0,24 ммоль) в ΌΜΕ (1 мл). Реакционную смесь подвергают микроволновому излучению (\У:150 ^; Т:150°С) в течение 30 мин. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой высушивают над Мд§О4, фильтруют и растворитель удаляют под вакуумом. Соединение очищают препаративной ВЭЖХ для получения продукта (30 до 50%) .
Синтез соединения по изобретению
Соединение 176: №(5-(4-((6-цианопиридин-3-ил)метокси)фенил)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2ил)циклопропанкарбоксамид
176.1 Синтез 5-[4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)феноксиметил]пиридин-2карбонитрила
К сложному эфиру 4-гидроксифенилбороновой кислоты и пинакола (25 г; 0,11 моль; 1,0 экв.) в ацетоне (250 мл) при комнатной температуре добавляют в атмосфере аргона 5-хлорметилпиридин-2карбонитрил (19 г; 0,12 моль; 1,1 экв.) и карбонат цезия (73,9 г, 0,22 моль; 2 экв.). Реакционную смесь нагревают в течение 4 ч с обратным холодильником. Затем смесь охлаждают до комнатной температуры, ацетон выпаривают. Добавляют воду (200 мл) и продукт экстрагируют ЕЮАс (3x200 мл). Органический слой высушивают над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют досуха. Осадок, полученный в результате, очищают хроматографией на силикагеле (полученный остаток:ЕЮАс 10:1) для получения целевого бороната в виде белого твердого вещества.
176.2: Синтез {5-[4-(6-цианопиридин-3-илметокси)фенил]-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2ил}амида циклопропанкарбоновой кислоты
5-[4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)феноксиметил]пиридин-2-карбонитрил (10 г, 0,03 моль, 1,1 экв.) добавляют к раствору (5-бром-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)амида циклопропанкарбоновой кислоты (7,6 г, 0,027 моль) в 1,4-диоксан/вода (4:1; 70 мл). К2СО3 (7,45, 0,054 моль, 2 экв.) и РйСЕйррГ (5%) добавляют к раствору. Полученную в результате смесь затем нагревают на масля
- 19 018080 ной бане при 90°С в атмосфере Ν2 до завершения (контролируют ЬСМБ). 1,4-Диоксан удаляют под вакуумом и добавляют вода/ЕЮАс и отфильтровывают твердое вещество. Полученное твердое вещество растворяют в метанол/ОСМ, сушат над Мд§04 и получают готовое соединение после очистки флэшхроматографией, элюируют чистым ЕЮАс с получением белого твердого вещества.
Полученное соединение представлено ниже в табл. I. Спектральные данные ЯМР типичных соединений по изобретению даны в табл. II.
Таблица I
№ соединения Структура Название Способ Μ\ν М8 Мез’(1
176 X О 9 λ II N Т4-(5-(4-((6-цианопиридин-3- ил)метокси)фенил)[1,2,4]триазоло[1:,5-а]пиридин-2ил)пиклопропанкарбоксамид Метод описан выше 410,44 411,0
Таблица II. Данные ЯМР типичных соединений по изобретению
№ соединения Данные ЯМР (δ)
176 ^-ЯМР (ДМСО) ; 11,01 (ушир., Йц ΝΗ), 8,99 (с Г 1Н, АгН), 8,16 (д, 1Н, АгН), 8,09 (д, 1Н, АгН), 8,04 (д, 2Н, АгН), 7,67 (м, 2Н, АгН), 7,27 (д, 1Н, АГН), 7,23 (Д, 2Н, АгН), 5,41 (с, 2Н, СН2) , 2,04 (ушир., 1Н, СН), 0,81 (м, 4Н, 2хСН2)
Биологические примеры
Пример 1. Анализы ίη νίίΓΟ
Пример 1.1 Анализы ингибирования 1АК1
Каталитический домен рекомбинантного 1АК1 человека (аминокислоты 850-1154; номер в каталоге 08-144) приобрели у Сагпа Вюзаепсез. 10 нг 1АК1 инкубировали с 12,5 мкг субстрата поли-СТ (номер в каталоге Бфта Р0275) в буфере для киназной реакции (конечные концентрации 15 мМ трис-НС1 рН 7,5, 1 мМ ΌΤΤ, 0,01% Т\\ееп-20. 10 мМ МдС12, 2 мкМ нерадиоактивных АТФ, 0,25 мкКи 33Р-гамма-АТФ (СЕ НеаИНсаге. номер в каталоге АН9968)) с наличием или отсутствием 5 мкл, содержащих тестируемое соединение или носитель (конечная концентрация ДМСО 1%), в суммарном объеме 25 мкл, в полипропиленовом 9б-луночном планшете (Огетег, У-образное дно лунок). После 45 мин при 30°С реакции остановили добавлением 25 мкл/лунка 150 мМ фосфорной кислоты. Все завершенные киназные реакции перенесли в предварительно промытые (75 мМ фосфорной кислотой) 9б-луночные фильтр-планшеты (номер в каталоге Регкш Е1тег 6005177), используя клеточный харвестер (Регкт Е1тег). Планшеты промыли б раз 300 мкл 75 мМ раствора фосфорной кислоты на лунку и нижнюю часть планшетов запечатали. Добавили 40 мкл/лунка Мюго8ст1-20, верхнюю часть планшетов запечатали, а считывание проводили, используя Торсонп! (Регк1п Е1тег). Киназную активность рассчитали, вычитая число импульсов в минуту (срт), полученное в присутствии положительного контроля ингибитора (10 мкМ стауроспорина), из срт, полученного в присутствии носителя. Способность тестируемого соединения ингибировать эту активность определили как
Процент ингибирования = ( (срт, определенное для образца, в котором присутствует тестируемое соединение, - срт, определенное для образца с положительным контролем ингибитора), деленное на (срт, определенное в присутствии носителя, - срт, определенное для образца с положительным контролем ингибитора)) · 100%.
Для соединений получили серии разведения дозы, позволяющие тестирование эффекта дозы при анализе 1АК1 и вычисление Ю50 для каждого соединения. Каждое соединение тестировали общепринятым способом при концентрации 20 мкМ с последующим серийным разведением 1/3, 8 значений (20 мкМ - б,б7 мкМ - 2,22 мкМ - 740 нМ - 247 нМ - 82 нМ - 27 нМ - 9 нМ) в ДМСО с конечной концентрацией 1%. При повышенной эффективности серий соединений получали больше разведений и/или снижали верхнее значение концентрации (например, 5, 1 мкМ).
Полуколичественная оценка:
- 20 018080 * >501 нМ ** 101-500 нМ *** 0,1-100 нМ
Таблица III. Значения 1С50 соединений по отношению к 1ЛК1
№ соединения ДАК1
176 * * *
Пример 1.2 Анализ ингибирования 1АК2
Каталитический домен рекомбинантного 1АК2 человека (аминокислоты 808-1132; номер в каталоге РУ4210) приобрели у [пуЦгодсп. 0,025 мЕд 1АК2 инкубировали с 2,5 мкг субстрата поли-СТ (номер в каталоге 81дта Р0275) в буфере для киназной реакции (конечные концентрации 5 мМ МОР8 рН 7,5, 9 мМ МдАс, 0,3 мМ ЕБТА, 0,06% Вгу и 0,6 мМ БТТ, 1 мкМ нерадиоактивных АТФ, 0,25 мкКи 33Р-гаммаАТФ (СЕ НсаИНсагс, номер в каталоге АН9968)), с наличием или отсутствием 5 мкл, содержащих тестируемое соединение или носитель (ДМСО в конечной концентрации 1%), в суммарном объеме 25 мкл, в полипропиленовом 96-луночном планшете (Сгешег, У-образное дно лунок). После 90 мин при 30°С реакции остановили добавлением 25 мкл/лунка 150 мМ фосфорной кислоты. Все завершенные киназные реакции перенесли в предварительно промытые (75 мМ фосфорной кислотой) 96-луночные фильтрпланшеты (номер в каталоге Регкш Е1тег 6005177), используя клеточный харвестер (Регкш Е1тег). Планшеты промыли 6 раз 300 мкл 75 мМ раствора фосфорной кислоты на лунку и нижнюю часть планшетов запечатали. Добавили 40 мкл/лунка М1сго8ст1-20, верхнюю часть планшетов запечатали и считывание проводили, используя Торсо1т1 (Регкш Е1тег). Киназную активность вычислили, вычитая число импульсов в минуту (срт), полученное в присутствии положительного контроля ингибитора (10 мкМ стауроспорина) из срт, полученного в присутствии носителя. Способность тестируемого соединения ингибировать эту активность определили как
Процент ингибирования = ((срт, определенное для образца, в котором присутствует тестируемое соединение, - срт, определенное для образца с положительным контролем ингибитора), деленное на (срт, определенное в присутствии носителя, - срт, определенное для образца с положительным контролем ингибитора)) · 100%.
Для соединений получили серии разведения дозы, позволяющие тестирование эффекта дозы в анализе 1АК2 и вычисление Κ.'50 для каждого соединения. Каждое соединение тестировали общепринятыми способами при концентрации 20 мкМ с последующим серийным разведением 1/3, 8 значений (20 мкМ 6,67 мкМ - 2,22 мкМ - 740 нМ - 247 нМ - 82 нМ - 27 нМ - 9 нМ) в ДМСО с конечной концентрацией 1%. При повышенной эффективности серий соединений получали больше разведений и/или снижали верхнее значение концентрации (например, 5, 1 мкМ).
Полуколичественная оценка:
# >501 нМ ## 101-500 нМ ### 1-100 нМ
Таблица ГУ. Значения Κ.'50 соединений по отношению к 1АК2
№ соединения ЙАК2
176 ###
Пример 1.3 Анализ ингибирования 1АК3
Каталитический домен рекомбинантного 1АК3 человека (аминокислоты 781-1124; номер в каталоге РУ3855) приобрели у Iην^ί^одеη. 0,025 мЕд 1АК3 инкубировали с 2,5 мкг субстрата поли-СТ (номер в каталоге 81дша Р0275) в буфере для киназной реакции (конечные концентрации 25 мМ Тп5 рН 7,5, 0,5 мМ ЕСТА, 0,5 мМ Ыа3УО4, 5 мМ Ь-глицеринфосфат, 0,01% 1п1ои Х-100, 1 мкМ нерадиоактивного АТФ, 0,25 мкКи 33Р-гамма-АТФ (СЕ НеаНйсаге, номер в каталоге АН9968)) с наличием или отсутствием 5 мкл, содержащих тестируемое соединение или носитель (ДМСО, конечная концентрация 1%), в суммарном объеме 25 мкл, в полипропиленовом 96-луночном планшете (Сгешег, У-образное дно лунок). После 105 мин при 30°С реакции остановили добавлением 25 мкл/лунка 150 мМ фосфорной кислоты. Все завершенные киназные реакции перенесли в предварительно промытые (75 мМ фосфорной кислотой) 96луночные фильтр-планшеты (номер в каталоге Регкш Е1тег 6005177), используя клеточный харвестер (Регкш Е1тег). Планшеты промыли 6 раз 300 мкл 75 мМ раствора фосфорной кислоты на лунку и нижнюю часть планшетов запечатали. Добавили 40 мкл/лунка М1сго8сш1-20, верхнюю часть планшетов запечатали, а считывание проводили, используя Торсона! (Регкш Е1тег). Киназную активность вычислили, вычитая число импульсов в минуту (срт), полученное в присутствии положительного контроля ингибитора (10 мкМ стауроспорина), из срт, полученного в присутствии носителя. Способность тестируемого соединения ингибировать эту активность определили как
Процент ингибирования = ((срт, определенное для образца, в котором присутствует тестируемое соединение, - срт, определенное для образца с положительным контролем ингибитора), деленное на
- 21 018080 (срт, определенное в присутствии носителя, - срт, определенное для образца с положительным контролем ингибитора)) · 100%.
Для соединений получили серии разведения дозы, позволяющие тестирование эффекта дозы в анализе 1АК3 и вычисление 1С50 для каждого соединения. Каждое соединение тестировали общепринятым способом при концентрации 20 мкМ с последующим серийным разведением 1/3, 8 значений (20 мкМ б,б7 мкМ - 2,22 мкМ - 740 нМ - 247 нМ - 82 нМ - 27 нМ - 9 нМ) в ДМСО с конечной концентрацией 1%. При повышенной эффективности серий соединений получали больше разведений и/или снижали верхнее значение концентрации (например, 5 мкМ, 1 мкМ). Полуколичественная оценка:
+ >501 нМ ++ 101-500 нМ +++ 1-100 нМ
Таблица V. Значения 1С50 соединений по отношению к 1АК3
№ соединения ЛАКЗ
176 + + +
Пример 1.4 Анализ ингибирования ТУК2
Каталитический домен рекомбинантного ТУК2 человека (аминокислоты 871-1187; номер в каталоге 08-147) приобрели у Сагпа Ыо5с1спсс5. 5 нг ТУК2 инкубировали с 12,5 мкг субстрата поли-ОТ (номер в каталоге 81дта Р0275) в буфере для киназной реакции (конечные концентрации 25 мМ Нерек рН 7,5, 100 мМ №1С1. 0,02 мМ Nа3VΟ4, 0,1% ΝΡ-40, 0,1 мкМ нерадиоактивного АТФ, 0,125 мкКи 33Р-гамма-АТФ (ОБ НеаИЪсаге, номер в каталоге АН9968)) с наличием или отсутствием 5 мкл, содержащих тестируемое соединение или носитель (ДМСО, конечная концентрация 1%), в суммарном объеме 25 мкл, в полипропиленовом 9б-луночном планшете (Огетег, ν-образное дно лунок). После 90 мин при 30°С реакции остановили добавлением 25 мкл/лунка 150 мМ фосфорной кислоты. Все завершенные киназные реакции перенесли в предварительно промытые (75 мМ фосфорной кислотой) 9б-луночные фильтр-планшеты (номер в каталоге Регкт Е1тег б005177), используя клеточный харвестер (Регкш Е1тег). Планшеты промыли б раз 300 мкл 75 мМ раствора фосфорной кислоты на лунку и нижнюю часть планшетов запечатали. Добавили 40 мкл/лунка М1сго8сш(-20, верхнюю часть планшетов запечатали, а считывание проводили, используя Торсоии! (Регк1и Е1тег). Киназную активность вычислили, вычитая число импульсов в минуту (срт), полученное в присутствии положительного контроля ингибитора (10 мкМ стауроспорина), из срт, полученного в присутствии носителя.
Способность тестируемого соединения ингибировать эту активность определили как
Процент ингибирования = ((срт, определенное для образца, в котором присутствует тестируемое соединение, - срт, определенное для образца с положительным контролем ингибитора), деленное на (срт, определенное в присутствии носителя, - срт, определенное для образца с положительным контролем ингибитора)) · 100%.
Для соединений получили серии разведения дозы, позволяющие тестирование эффекта дозы при анализе ТУК2 и вычисление 1С50 для каждого соединения. Каждое соединение тестировали общепринятым способом при концентрации 20 мкМ с последующим серийным разведением 1/3, 8 значений (20 мкМ - б,б7 мкМ - 2,22 мкМ - 740 нМ - 247 нМ - 82 нМ - 27 нМ - 9 нМ) в ДМСО с конечной концентрацией 1%. При повышенной эффективности серий соединений получали больше разведений и/или снижали верхнее значение концентрации (например, 5, 1 мкМ).
Полуколичественная оценка:
* >1001 нМ ** 501-1000 нМ *** 101-500 нМ **** 1-100 нМ
Таблица VI. Значения 1С50 соединений по отношению к ТУК2
№ соединения ΤΥΚ2
176 'к + * ★
Пример 2. Клеточный анализ
Пример 2.1 Анализ передачи сигнала 1АК-8ТАТ:
Клетки НеЬа поддерживали в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (ΌΜΕΜ), содержащей 10% инактивированную нагреванием эмбриональную сыворотку теленка, 100 Ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. Для трансфекции использовали клетки НеЬа при 70% смыкании монослоя. 20000 клеток в 87 мкл среды для культивирования клеток временно трансфицировали 40 нг р8ТАТ1(2)-репортерный ген люциферазы (Раиоткк), 8 нг репортерного гена Ьас2 в качестве внутреннего контроля репортерного гена, и 52 нг рВ8К, используя 0,32 мкл 1е!-РЕ1 (Ро1ур1ик) в качестве реагента трансфекции на лунку, в формате 9б-луночного планшета. После инкубации в течение ночи при 37°С 10% СО2 среду для трансфекции удалили. Добавляли 75 мкл ЭМЕМ + 1,5% инактивированную нагрева
- 22 018080 нием эмбриональную сыворотку теленка. 15 мкл соединения с 6,7х концентрацией добавляли в течение 60 мин и затем добавили 10 мкл О8М человека (Рсрго1се11) в конечной концентрации 33 нг/мл.
Все соединения тестировали с дублированием, начиная с 20 мкМ, с последующим серийным разведением 1/3, всего 8 доз (20 мкМ -6,6 мкМ - 2,2 мкМ - 740 нМ - 250 нМ - 82 нМ - 27 нМ - 9 нМ) в конечной концентрации 0,2% ДМСО.
После инкубации в течение ночи при 37°С, 10% СО2, клетки лизировали в 100 мкл буфера для лизиса/лунка (РВ8, 0,9 мМ СаС12, 0,5 мМ МдС12, 5% трегалоза, 0,025% тергитол ΝΡ9, 0,15% БСА).
мкл клеточного лизата использовали для определения активности β-галактозидазы, добавляя 180 мкл раствора βθ;·ι1 (30 мкл 0ΝΡ6 4 мг/мл + 150 мкл буфера для β-галактозидазы (0,06 М №2НРО4, 0,04 М №1Н;РО4, 1 мМ МдС12)) в течение 20 мин. Реакцию остановили добавлением 50 мкл 1 М №ьСО3. Оптическую плотность определили при 405 нм.
Люциферазную активность измеряли, используя 40 мкл клеточного лизата плюс 40 мкл 81еайу1|1е®, как описано у производителя (Регкт Е1тег), на Εηνίδίοη (Регкт Е1тег).
мкМ рапПАК ингибитора использовали в качестве положительного контроля (100% ингибирование). В качестве отрицательного контроля использовали 0,5% ДМСО (0% ингибирование). Положительный и отрицательный контроль использовали для расчета значения 'ζ' и 'процент ингибирования' (ΡΙΝ).
Процент ингибирования = ((флуоресценция, определенная в присутствии носителя, - флуоресценция, определенная для образца, в котором присутствует тестируемое соединение), деленное на (флуоресценция, определенная в присутствии носителя, - флуоресценция, определенная для образца без инициирующего фактора)) · 100%.
Значения ΡΙΝ графически изобразили для соединений, тестированных на эффект дозы и получили значения ЕС50.
Таблица VII.
* >1001 нМ ** 501-1000 нМ *** 101-500 нМ **** 1-100 нМ
Таблица VII. Значения ЕС50 передачи сигнала 1АК-8ТАТ
№ соединения ЕС50 (нМ)
176 ** А #
Пример 2.2. Анализ передачи сигнала О8МЛЬ-1в
О8М и ЕС-1в, как показывают, синергично повышают уровни ММР13 в клеточной линии хондросаркомы 8^1353 человека. Клетки пересевали в 96-луночный планшет из расчета 15000 клеток/лунка в объеме 120 мкл ЭМЕМ (^^одеи), содержащий 10% (об./об.) ЕВ8 и 1% пенициллин/стрептомицин (ЗпνίίΓο^η), инкубировали при 37°С 5% СО2. Клетки предварительно инкубировали с 15 мкл соединения в среде М199 с 2% ДМСО 1 ч перед инициированием реакции 15 мкл О8М и ^-1(^, для получения 25 нг/мл О8М и 1 нг/мл ГС-1 β, и уровни ММР13 измеряли в кондиционированной среде через 48 ч после инициирования реакции. Активность ММР13 измерили, используя анализ активности с иммобилизованным антителом. С этой целью 384-луночные планшеты (ΝϋΝ^ 460518, Мах18огЬ Ыаск) обрабатывали 35 мкл 1,5 мкг/мл раствором антител к ММР13 человека (Κ&Ό 8у5(етв, МАВ511) в течение 24 ч при 4°С. После 2-кратной промывки лунок с РВ8 + 0,05% Тгееи, оставшиеся центры связывания блокировали с 100 мкл 5% обезжиренного сухого молока (8аи(а ί.’Γΐιζ, вс-2325, В1ойо) в РВ8 в течение 24 ч при 4°С. Затем лунки промыли 2 раза с РВ8 + 0,05% Тгееи и добавили 35 мкл супернатанта культуры с разведением 1/10, содержащим ММР13 в 100-кратном разведенном блокирующем буфере, и инкубировали в течение 4 ч при комнатной температуре. Затем лунки промыли дважды с РВ8 + 0,05% Тгееи с последующей активацией ММР13 посредством добавления 35 мкл 1,5 мМ раствора ацетата 4-аминофенил-ртути (АРМА) (81дта, А9563) и инкубацией при 3-7°С в течение 1 ч. Лунки промыли снова с РВ8 + 0,05% Т\\ееп и добавили 35 мкл субстрата для ММР13 (Вюто1, Р-126, ОттММР флуорогенный субстрат). После инкубации в течение 24 ч при 37°С флуоресценцию вступившего в реакцию субстрата измерили в Регкт Е1тег \Уа11ас Ептыоп 2102 Мц1й1аЬе1 Реайег (длина волны возбуждения: 320 нм, длины волны излучения: 405 нм).
Процент ингибирования = ((флуоресценция, определенная в присутствии носителя, - флуоресценция, определенная для образца, в котором присутствует тестируемое соединение), деленное на (флуоресценцию, определенную в присутствии носителя, - флуоресценция, определенная для образца без инициирующего фактора)) · 100%.
* >1001 нМ ** 501-1000 нМ *** 1-500 нМ
- 23 018080
Таблица VIII. Значения ЕС50 для ММР13
Пример 2.3 Анализ пролиферации РВЬ
Лимфоциты периферической крови человека (РВЬ) стимулировали 1Ь-2 и пролиферацию измерили, используя анализ включения ВгйИ. РВЬ сначала стимулировали в течение 72 ч с РНА для индуцирования рецептора 1Ь-2, оставляли без питания в течение 24 ч для остановки клеточной пролиферации, с последующей стимуляцией 1Ь-2 еще в течение 72 ч (включая 24 ч на мечение ВгйИ). Клетки подвергали предварительной инкубации с тестируемыми соединениями в течение 1 ч перед добавлением 1Ь-2. Клетки культивировали в КРМ1 1640, содержащим 10% (об./об.) РВ8.
Пример 3. Модели ίη угуо
Пример 3.1 Модель С1А
3.1.1 Материалы
Полный адъювант Фрейнда (СРА) и неполный адъювант Фрейнда (1РА) приобрели у ИгТсо. Бычий коллаген типа II (СИ), липополисахарид (ЬР8) и Энбрел получили у Оюнйгех (Л'Иль-д'Або, Франция); 81дта (Р4252, Л'Иль-д'Або, Франция), \У11уе11 (25 мг шприц для инъекций, Франция) Асгок Огдашск (Пало-Альто, штат Калифорния), соответственно. Все другие используемые реагенты являлись чистыми, а все растворители имели степень чистоты для аналитических целей.
3.1.2 Животные
Крыс Иагк Адоий (самцы, в возрасте 7-8 недель) получили из Найав ЬаЬогаФпек (Мэсонс-Алфо, Франция). Крыс содержали при 12-часовом цикле чередования света и темноты (0700-1900). Температуру поддерживали при 22°С, едой и водой обеспечивали ай НЬйит.
3.1.3 Артрит, индуцированный коллагеном (СЧА)
За одни сутки до эксперимента получили раствор СИ (2 мг/мл) с 0,05 М уксусной кислотой и хранили при 4°С. Непосредственно перед иммунизацией равные объемы адъюванта ИРА) и СИ перемешали гомогенизатором в предварительно охлажденной стеклянной колбе на бане с ледяной водой. Дополнительное количество адъюванта и более длительная гомогенизация могли бы потребоваться, если бы эмульсия не сформировалась. 0,2 мл эмульсии ввели внутрикожно в основание хвоста каждой крысы в сутки 1, вторую внутрикожную бустер-инъекцию (2 мг/мл раствора СИ в 0,1 мл физиологическом растворе СРА) выполнили в сутки 9. Этот способ иммунизации изменили относительно опубликованных способов (81т§ е! а1., 2004; 1ои е! а1., 2005).
3.1.4 План исследования
Терапевтические эффекты тестируемых соединений тестировали на модели СЕА у крыс. Крыс случайным образом разделили на равные группы, и каждая группа содержала 10 крыс. Все крысы были иммунизированы в сутки 1 и вторично иммунизированы в сутки 9. Терапевтическое дозирование длилось с суток 16 до суток 30.
Группе отрицательного контроля вводили носитель (МС 0,5%), а группе положительного контроля Энбрел (10 мг/кг, 3х неделя, к.с). Представляющее интерес соединение, как правило, тестировали в 3 дозах, например, 3, 10, 30 мг/кг, р.о.
3.1.5 Клиническое исследование артрита
Артрит оценили согласно способу КИасЫ^ап 2006, Ьт е! а1. 2007 и Νίδΐιίάη е! а1. 2004. Припухлость каждой из четырех лап классифицировали, по оценке на артрит, следующим образом: 0 - нет симптомов; 1 - легкая, но определяемая краснота и припухлость одного типа сустава, такого как лодыжка или запястье, или очевидная краснота и припухлость, ограниченная отдельными пальцами, независимо от числа затронутых пальцев; 2 - умеренная краснота и припухлость двух или более типов суставов; 3 - сильная краснота и припухлость всей лапы, включая пальцы; 4 - максимально воспаленная конечность, включая множество суставов (максимальная суммарная клиническая оценка артрита 16 на животное) (Νίδΐιίάη е! а1., 2004) .
3.1.6 Изменение в массе тела (%) после проявления артрита
Клинически потерю массы тела связывают с артритом (8ΜΦη е! а1., 2005; АгдПек е! а1., 1998; Пай, 2004; ХУаЫпйй е! а1., 2004), таким образом, изменения в массе тела после проявления артрита можно использовать в качестве неспецифического ожидаемого результата для оценки на модели крысы эффекта терапии. Изменение в массе тела (%) после проявления артрита рассчитывали следующим образом:
Мыши: Массатапа,6.янадепя) - Масса
Масса тапа^д недетя)
Крысы' Масса тепа (4-я неделя) ~ Масса тела^_я недепЯ) | 00%
Масса тела недвлЯ)
3.1.7 Рентгенология
Для задних лап каждого отдельного животного сделали рентгеновские снимки. Каждому из сним
- 24 018080 ков присвоили идентификационный номер вслепую, случайным образом, и тяжесть эрозии костной ткани классифицировали по двум независимым оценкам по радиологической системе оценки Ларсена следующим образом: 0 - нормальный с неповрежденными контурами кости и нормальной суставной щелью; 1 - незначительное повреждение на поверхности любой одной или двух плюсневых костей, имеющих незначительную эрозию костной ткани; 2 - определенное начальное повреждение на поверхности любых трех-пяти плюсневых костей, имеющих эрозию костной ткани; 3 - среднее деструктивное повреждение на поверхности всех плюсневых костей, а также внутри любой одной или двух плюсневых костей, имеющих определенную эрозию костной ткани; 4 - тяжелое деструктивное повреждение во всех плюсневых костях, имеющих определенную эрозию костной ткани и по меньшей мере один из плюсневых суставов внутри полностью затронут эрозией, с сохранением некоторых частично сохраненных костных суставных контуров; 5 -калечащее повреждение без костных контуров. Эта система оценки является модификацией 8а1уеш1И1 е! а1., 2001; Викй е! а1., 2002; е! а1., 2004; 1ои е! а1., 2005.
3.1.8 Гистология
После рентгеновского анализа задние лапы мышей фиксировали в 10% формалине, забуференном фосфатом (рН 7,4), декальцифицировали с декальцификатором для тонкой гистологии гарИе Ьоие (ЬаЬота!опе8 ЕитоЫо) и залили парафином. Для обеспечения наиболее полной оценки артритических суставов получили по меньшей мере четыре серийных среза (5 мкм толщиной) и промежуток между каждыми сериями срезов составил 100 мкм. Срезы окрасили гематоксилином и эозином (Н&Е). Гистологические исследования на синовиальное воспаление и повреждения кости и хряща проводили двойным слепым исследованием. Для каждой лапы определяли четыре параметра, используя шкалу из четырех пунктов. Параметры представляли собой клеточную инфильтрацию, тяжесть поверхностного диффузного сосудистого кератита, эрозию хрящевой и костной ткани. Оценку проводили следующим образом: 1 - нормальный, 2 - слабо выраженный, 3 - умеренный, 4 - выраженный. Эти четыре оценки суммировали вместе и представили как дополнительную оценку, а именно, общая оценка НА.
3.1.9 Микрокомпьютерный томографический анализ (мкСТ) пяточной кости (кости пятки):
Деградация костной ткани, наблюдаемая при НА, встречается, в частности, в трубчатой кости и может быть выявлена анализом мкСТ (§1Ш8 ΝΑ е! а1., 2004; Ойе Ь. е! а1., ЕСТС Моп!геа1 2007). После сканирования и трехмерной объемной реконструкции пяточной кости деградацию кости измеряли как число присутствующих дискретных объектов на слайд, выделенных, компьютерным моделированием, перпендикулярно к продольной оси кости. Чем большей деградации подвержена кость, тем больше дискретных объектов измеряли. Проанализированы 1000 срезов, равномерно распределенных вдоль пяточной кости (промежутки приблизительно 10,8 мкм).
3.1.10 Результаты
Соединение 17б являлось эффективным во всех результатах, полученных при исследовании С1А крысы. Статистически значимое значение получено для 3 мг/кг по результатам клинической оценки и припухлости лапы.
Пример 3.2 Модель септического шока
Инъекция липополисахарида (ЬР8) вызывает быстрое высвобождение растворимого фактора некроза опухоли (ΤΝΡ-альфа) в периферическую кровь. Эту модель используют для анализа потенциальных блокаторов высвобождения ΤΝΡ ίη у1уо.
Шести самкам мыши ВАЬВ/с1 (20 г) на группу однократно ввели заданную дозировку, п/о. Через 30 мин ЬР8 (15 мкг/кг; серотип Е. со11 0111:В4) ввели и/п. Через 90 мин мышей подвергли эвтаназии и собрали кровь. Уровни циркулирующего ΤΝΡ-альфа определили, используя коммерчески доступные наборы ЕЬ18А. Дексаметазон (5 мкг/кг) использовали в качестве контрольного противовоспалительного соединения. Отобранные соединения тестировали в одной или многих дозах, например 3, и/или 10, и/или 30 мг/кг, п./о.
Соединение 17б показало статистически значимое снижение высвобождения ΤΝΡ (>50%) при 3, 10 и 30 мг/кг п./о.
Пример 3.3 Модель МАВ
Модель МАВ позволяет быстрое исследование модуляции посредством способов лечения, подобного НА воспалительного ответа (КасЫщап ЬМ. №11иге Рто!осо1§ (200б) 2512-2516: Со11адеп апЕЬобушбисеб аг1Пг1118). Мышам ЭВА/ί ввели в/в смесь тАЬ, направленную против коллагена II. Через сутки инициировали лечение соединением (носитель: 10% (об./об.) НР|3СЭ). Через трое суток у мышей, получивших и/п инъекцию ЬР8 (50 мкг/мышь), получили в результате быстрое проявление воспаления. Лечение соединением продолжали вплоть до 10 суток после инъекции тАЬ. Воспаление определяли, измеряя припухлость лапы и регистрируя клиническую оценку для каждой лапы. Суммарную клиническую оценку артрита четырех конечностей представили, чтобы показать тяжесть воспаления. Систему оценки применяют к каждой конечности, используя шкалу 0-4, где 4 соответствует наиболее тяжелому воспалению.
- Отсутствие симптомов
- Легкая, но определенная краснота и припухлость одного типа сустава, такого как лодыжка или запястье, или очевидная краснота и припухлость, ограниченная отдельными пальцами, независимо от числа затронутых пальцев
- 25 018080
- Умеренная краснота и припухлость двух или более типов суставов
- Тяжелая краснота и припухлость всей лапы, включая пальцы
- Максимально воспаленная конечность с вовлечением множества суставов
Соединение 176, дозированное п/о в 10 и 30 мг/кг статистически значимо снижало клиническую оценку при 30 мг/кг и статистически значимо снижало воспаление как при дозе 10, так и 30 мг/кг.
Пример 3.4 Онкологические модели
1п у1уо модели для обоснования эффективности низкомолекулярных соединений при миелопролиферативных заболеваниях, вызванных 1ЛК2, описаны ХУегшд е( а1. Сапсег Се11 13, 311, 2008 апб Сегой е( а1. Сапсег Се11 13, 321, 2008.
Пример 3.5 Модель ΙΒΌ на мыши
1п νίΙΐΌ и ш у1уо модели для обоснования эффективности низкомолекулярных соединений при ΙΒΌ описаны \νίΗζ е( а1. 2007.
Пример 3.6 Модель астмы на мыши
1п νί( го и ш у1уо модели для обоснования эффективности низкомолекулярных соединений при астме описаны №ак е( а1., 2008; 1р е( а1. 2006; Регшк е( а1., 2002; ^6^ζ е( а1., 2008.
Пример 4. Модели токсичности, ЭМРК и безопасности
Пример 4.1 Термодинамика растворения мг/мл раствора тестируемого соединения получают в 0,2 М фосфатном буфере рН 7,4 или 0,1 М цитратном буфере рН 3,0 при комнатной температуре в стеклянной пробирке.
Образцы подвергали вращению в Яо1а1ог бпуе 8ТЯ 4 (81иаг( ЗсхейШс, В1ЬЬу) на скорости 3,0 при комнатной температуре в течение 24 ч.
Через 24 ч 800 мкл образца переносят в пробирки Эппендорф и центрифугируют 5 мин при 14000 об./мин. 200 мкл супернатанта образца переносят затем в планшет МиНЕсгеепЯ 8о1иЬ11йу (М1Шроге, М88БВРС50) и супернатант фильтруют (10-12'' Нд) при помощи вакуумного коллектора в чистый полипропиленовый 96-луночный планшет с У-образным дном лунок Сгетег (номер в каталоге 651201). 5 мкл фильтрата разводят в 95 мкл (Р20) того же буфера, используемого для инкубации в планшете, содержащим образцы, являющиеся калибровочной кривой (Сгетег, номер в каталоге 651201).
Образцы, являющиеся калибровочной кривой для соединения, получают свежеприготовленными в ДМСО, исходя из 10 мМ основного раствора ДМСО, с фактором разбавления 2 в ДМСО (5000 мкМ) и затем дополнительно разбавляя ДМСО до 19,5 мкМ. 3 мкл из серии разведений, начиная от 5000 мкМ, затем переносят в 97 мкл смеси ацетонитрил-буфер (50/50). Диапазон конечной концентрации составляет от 2,5 до 150 мкМ.
Планшет запечатывают герметизирующей пленкой (МА96ЙЭ-048, \\л\лх.кте515.со.ик) и образцы измеряют при комнатной температуре на ЬСМ8 (ΖΡ 1525 от \Уа1ег5) в оптимальных условиях, используя ^иаиорΐ^т^ζе, для определения соответствующей массы молекулы.
Образцы анализируют на ЬСМ8 со скоростью потока 1 мл/мин. Растворителем А является 15 мМ аммиак, и растворитель В представляет собой ацетонитрил. Образец пропускают под спреем из положительных ионов на колонке ХВпбде С18 3,5 мкМ (2,1x30 мм) от \Уа1ег5. Градиент растворителя имеет общее время пробега 2 мин и заключается в пределах от 5% В до 95% В.
Области пиков анализируют при помощи пакета программного обеспечения МакНупх и площади пиков образцов отображают на графике относительно образцов, являющихся калибровочной кривой, для получения растворимости соединения.
Значения растворимости указывают в мкМ или мкг/мл.
Пример 4.2 Растворимость в воде
Исходя из 10 мМ основного раствора ДМСО, в ДМСО получают серийное разведение соединения. Серии разведений переносят в 96-луночный планшет ΝϋΝΡ МахйогЬ с Р-образным дном лунок (номер в каталоге 442404) и добавляют при комнатной температуре 0,2 М фосфатный буфер рН 7,4 или 0,1 М цитратный буфер рН 3,0.
Диапазон конечной концентрации располагался от 200 мкМ до 2,5 мкМ в 5 эквивалентных стадиях разведения. Конечная концентрация ДМСО не превышала 2%. 200 мкМ пирена добавляют в угловые точки каждого 96-луночного планшета, что служит ориентиром для калибровки оси Ζ на микроскопе.
Анализируемые планшеты запечатывали и инкубировали в течение 1 ч при 37°С, со встряхиванием при 230 об./мин. Планшеты затем анализируют под микроскопом белого света с получением индивидуальных изображений преципитата на концентрацию. Преципитат анализируют и преобразуют в число, которое отображают на графике. Первая концентрация, при которой соединение кажется полностью растворенным, является искомой концентрацией, однако истинная концентрация находится между этой концентрацией и одним шагом разведения выше.
Значения растворимости указывают в мкг/мл.
Пример 4.3 Связывание белков плазмы (равновесный диализ) мМ основного раствора соединения в ДМСО разбавляют с фактором 5 в ДМСО. Этот раствор дополнительно разбавляют в свежеразмороженной плазме человека, крысы, мыши или собаки (ВюЯес1ата1юп ГЫС) в конечной концентрации 10 мкМ и конечной концентрации ДМСО 0,5% (5,5 мкл в
- 26 018080
1094,5 мкл плазмы в 96-луночном РР-Ма51егЬ1оск (Сгетег, номер в каталоге 780285)).
Р1егсе Ке4 Эеу1се планшет со вставками (Тйегто8с1епййс, номер в каталоге 89809) получают и заполняют буферную камеру 750 мкл РВ8 и камеру для плазмы 500 мкл плазмы с известным количеством определяемого вещества. Планшет инкубируют в течение 4 ч при 37°С со встряхиванием при 230 об./мин. После инкубации 120 мкл содержимого из обеих камер переносят к 360 мкл ацетонитрила в 96луночный круглодонный РР планшет с глубокими лунками (М.тс. номер в каталоге 278743) и запечатывают крышкой из алюминиевой фольги. Образцы перемешивают и помещают в лед на 30 мин. Этот планшет затем центрифугируют 30 мин при 1200 об./мин при 4°С и супернатант переносят в 96 РР планшет с У-образным дном лунок (Сгетег, 651201) для анализа на ЬСМ8.
Планшет запечатывают герметизирующей пленкой (МА96КЭ-048, те^ет.к1пе515.со.ик) и образцы измеряют при комнатной температуре на ЬСМ8 (ΖΟ 1525 от \Уа1ег5) в оптимальных условиях, используя ОиапорНпихе для определения соответствующей массы молекулы.
Образцы анализируют на ЬСМ8 со скоростью потока 1 мл/мин. Растворителем А являлся 15 мМ аммиак, и растворителем В являлся ацетонитрил. Образец пропускали под спреем положительных ионов на колонке ХВп4де С18 3,5 мкМ (2,1x30 мм) от \Уа1ег5. Градиент растворителя имеет общее время пробега 2 мин и заключается в пределах от 5 до 95% В.
Площади пиков соединения в буферной камере и камере для плазмы, как полагали, составляли 100% соединения. Из этих результатов получили процент связывания с плазмой и отчет отправили в ЫМ8 как процент связывания с плазмой.
Растворимость соединения в конечной тестируемой концентрации в РВ8 проверили под микроскопом для проверки того, наблюдается ли выпадение осадка или нет.
Пример 4.4 Возможность удлинения интервала ОТ
Возможность удлинения интервала ОТ оценили в анализе фиксации потенциала НЕКО.
4.4.1 Традиционный способ фиксации потенциала целой клетки
Измерение показаний фиксации потенциала целой клетки проводили, используя усилитель ЕРС10, под контролем программного обеспечения Рике ν8.77 (НЕКА). Сопротивление серий представляло собой, как правило, менее чем 10 МОм и компенсировали более чем 60%, показания не учитывали утечку. Электроды получили на основе стеклянной пипетки ОС150ТЕ (Нагуаг4), сопротивление находилось между 2 и 3 МОм.
Внешний раствор для погружения содержал 135 мМ №С1, 5 мМ КС1, 1,8 мМ СаС12, 5 мМ глюкозу, 10 мМ НЕРЕ8, рН 7,4.
Внутренний раствор для микропипетки содержал 100 мМ К-глюконат, 20 мМ КС1, 1 мМ СаС12, 1 мМ М§012, 5 мМ №ьАТР, 2 мМ глютатион, 11 мМ ЕСТА, 10 мМ НЕРЕ8, рН 7,2.
Лекарственные средства перфузировали, используя систему для быстрой перфузии Вю1одю МЕУ9/ЕУН-9.
Все измерения проводили на клетках НЕК293, стабильно экспрессирующих каналы НЕКС. Клетки культивировали на 12-мм круглых покровных стеклах (Сегтап §1а55, Ве11со), закрепленных в камере для измерения, используя два платиновых стержня (Соо4Ге11о\у). Вызывают электрический ток в НЕКС, используя активирующие импульсы в +40 мВ в течение 1000 мс, с последующим затухающим импульсным током в -50 мВ в течение 2000 мс, исходный потенциал составлял -80 мВ. Импульсы применяли каждые 20 с и все эксперименты проводили при комнатной температуре.
4.4.2 Анализ данных
Значения 1С50 и 1С20 вычислили для каждого тестируемого соединения. Рассчитали кратное различие между 1С20 и концентрациями несвязанного тестируемого соединения Стах, полученными в соответствующих лечебных дозах, определенных посредством результатов, полученных на крысиной модели С1А.
Для кривых концентрация-эффект амплитуду пика затухающего тока измерили во время скачка напряжения на -50 мВ. Построение кривой значений концентрация-эффект выполнили, используя уравнение:
у=а+[(Ь-а)/(1+10{(1одс-х)4)] где а - минимальный эффект, Ь - максимальный эффект и 4 - коэффициент Хилла, это уравнение можно использовать для расчета как 1С50 (где у=50 и с является значением 1С50), так и 1С20 (где у=20 и с является значением 1С20). Для построения всех кривых использовали программное обеспечение СгарйРа4® Рг15т® (Сгарйра4® 8оП\хаге 1пс.).
В табл. IX ниже просуммированы результаты, полученные для выбранных тестированных соединений.
- 27 018080
Таблица IX
Соединение Доза Кратное различие
176 3 137
176 10 82
Различие в 100 или более раз указывает на низкую возможность удлинения интервала ЦТ. Поэтому можно видеть, что по сравнению с соединением 37 результат для соединения 176 показывает намного более низкую возможность удлинения интервала ЦТ.
Пример 4.5 Стабильность в микросомах мМ основного раствора соединения в ДМСО развели в 1000 раз в 182 мМ фосфатном буфере рН
7.4 в 96-луночном планшете с глубокими лунками (Сгешег, номер в каталоге 780285) и предварительно инкубировали при 37°С.
мкл деионизованной воды добавили в лунку полипропиленовой запоминающей электроннолучевой трубки, меченной двумерной кодировкой Иа1а Майтх (Ткегто 8с1еиййс) и предварительно инкубировали при 37°С.
Рабочий основной раствор глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа (С6РИН) получили в 182 мМ фосфатном буфере рН 7,4 и поместили в лед перед использованием. Кофактор, содержащий МдС12, глюкоза-6фосфат и NΑ^Р+ получили в деионизованной воде и поместили в лед перед использованием.
Получили конечный рабочий раствор, содержащий микросомы печени (Хеио1есй) представляющих интерес видов (человека, мыши, крысы, собаки), ранее описанный С6РИН и кофакторы, и эту смесь инкубировали не более 20 мин при комнатной температуре.
мкл предварительно нагретого разведения соединения добавили к 40 мкл предварительно нагретой воды в Майтх 1иЬе8 и добавили 30 мкл смеси с микросомой. Конечные концентрации в реакции представляли собой 3 мкМ соединения, 1 мг микросом, 0,4 Ед/мл СИРИН, 3,3 мМ МдС12, 3,3 мМ глюкозо-6фосфат и 1,3 мМ NΑ^Р+.
Для измерения процента сохранности соединения в нулевой момент времени добавили в лунку МеОН или ΑСN (1:1) до добавления смеси с микросомой. Планшеты запечатывали Майтх 8ерга 8еа1§ТМ (Майтх, номер в каталоге 4464) и встряхивали в течение нескольких секунд, чтобы гарантировать полное смешивание всех компонентов.
Образцы, в которых реакцию не останавливали, инкубируют при 37°С, 300 об./мин и после 1 ч инкубации реакцию останавливают МеОН или ΑСN (1:1).
После остановки реакции образцы перемешали и поместили в лед на 30 мин для осаждения белков. Затем планшеты центрифугировали 30 мин при 1200 об./мин при 4°С и супернатант перенесли в 96 РР планшет с У-образным дном лунок (Сгетег, 651201) для анализа на ЬСМ8.
Планшет запечатывали герметизирующей пленкой (МА96КИ-048, \\л\л\\кте515.со.ик) и образцы подвергли измерению при комнатной температуре на ЬСМ8 (ΖΟ 1525 от \Уа1ег5) в оптимальных условиях, используя ^иаиοрΐ^т^ζе, для определения соответствующей массы молекулы.
Образцы анализировали на ЬСМ8 со скоростью потока 1 мл/мин. Растворителем А являлся 15 мМ аммиак, и растворитель В представлял собой ацетонитрил, в зависимости от используемого раствора для остановки реакции. Образцы пропускали под спреем из положительных ионов на колонке ХВпбде С18
3.5 мкМ (2,1х30 мм) от \Уа1ег5. Градиент растворителя имеет общее время пробега 2 мин и заключается в пределах от 5% В до 95% В.
Площадь пика исходного соединения в начальный момент времени, как полагали, составляет 100% сохранности. Процент сохранности через 1 ч инкубации рассчитали от начального момента времени и вычислили как процент сохранности. Растворимость соединения в конечной тестируемой концентрации в буфере проконтролировали под микроскопом и представили результаты.
Данные по стабильности в микросомах выразили как процент общего количества соединения, оставшегося после 60 мин.
Таблица X. Стабильность в микросомах
№ соединения Человек (%) Крыса (%)
176 157,1 90,21
Пример 4.6. Проницаемость Сасо2
Двусторонние анализы Сасо-2 выполнили так, как описано ниже. Клетки Сасо-2 получили из европейской коллекции клеточных культур (ЕСАСС, са1 86010202) и использовали после 21-суточной культивации клеток в 24-луночных планшетах Тгаи^еП (Екйег ТКТ-545-020В).
2х105 клетки/лунка пересевали в среду для чашек Петри, состоящую из ИМЕМ + С1иΐаΜΑXI + 1% №АА + 10% ЕВ8 (Ее1а1С1оие II) +1% Реи/8йер. Среду меняли каждые 2-3 суток.
Тестируемые и контрольные соединения (пропранолол и родамин123 или винбластин, все приобретены у 81дта) получили в сбалансированном солевом растворе Хэнкса, содержащем 25 мМ НЕРЕ8 (рН
- 28 018080
7,4), и добавили или в апикальную (125 мкл) или в базолатеральную (600 мкл) камеры сборного планшета Тгап5\ус11. в концентрации 10 мкМ с конечной концентрацией ДМСО 0,25%.
мкМ Ьисйёг Ус11о\у (8Цта) добавили к донорскому буферу во все лунки, чтобы оценить целостность клеточных слоев мониторингом проникновения Ьисйёг Ус11о\\\ Поскольку Ьисйег Ус11о\у (ЬУ) не способен свободно проникать через липофильные барьеры, высокая степень передвижения ЬУ указывает на недостаточную целостность клеточного слоя.
После 1 ч инкубации при 37°С, подвергаясь встряхиванию в орбитальном шейкере при 150 об./мин, 70 мкл аликвот взяли и из апикальной (А), и из базальной (В) камер и добавили в 96-луночный планшет к 100 мкл раствора ацетонитрил:вода 50:50, содержащим аналитический внутренний стандарт (0,5 мкМ карбамазепин).
Ьисйег Ус11о\у измерили с 8рес!гатах Сетйи Х8 (Ех 426 нм и Ет 538 нм) в чистом 96-луночном планшете, содержащем 150 мкл жидкости с базолатеральной и апикальной сторон.
Концентрации соединения в образцах измерили высокоэффективной жидкостной хроматографией/масс-спектроскопией (ЬС-М8/М8).
Значения эффективной магнитной проницаемости (Рарр) вычислили из соотношения:
^арр “ [ ΟΟΘДИНвНИе ] акцептор конечный X ^/акцептор/ ( [Соединение] донор начальный х УДОНор)/Τ±ΙΚ! х Удонор/площадь поверхности X 60х10'6 см/с
V = объем камеры
Т1пс = время инкубации
Площадь поверхности = 0,33 см2.
Коэффициенты выведения как показателя активного выведения с апикальной поверхности клетки вычислили, используя соотношение Рарр В>А/Рарр А>В.
Использовали следующие критерии допустимости анализа: пропранолол: Рарр (А>В) значение >20 (х10-6 см/с)
Родамин 123 или винбластин: Рарр (А>В) значение <5 (х10-6 см/с) с коэффициентом выведения >5. Проницаемость ЬисгГег ус11о\у: <100 нм/с
Таблица XI. Показатель выведения в Сасо2
№ соединения Рарр А>В (х10ЪСМ/с) Коэффициент выведения
176 10,6 0,8
Пример 4.7 Фармакокинетическое исследование на грызунах
4.7.1 Фармакокинетическое исследование
Соединения составляют в смесь РЕС200/физиологический раствор или смесь РЕС400/ДМСО/физиологический раствор для внутривенного применения и в 0,5% метилцеллюлозе или 10-30% гидроксилпропил-в-циклодекстрине рН 3 или рН 7,4 для орального применения. Тестируемые соединения перорально дозированы в виде однократного питания через зонд в пищевод из расчета 5-10 мг/кг и дозированы в виде внутривенного болюса через хвостовую вену по 1 мг/кг. Каждая группа состоит из 3 крыс. Образцы крови собирали или через яремную вену, используя крыс с канюлями, или в ретроорбитальном синусе с литийгепарином в качестве противосвертывающего средства в моменты времени следующего диапазона: от 0,05 до 8 ч (внутривенный путь введения) и от 0,25 до 6 или 24 ч (пероральный путь введения). Образцы цельной крови центрифугировали 10 мин при 5000 об./мин и полученные в результате образцы плазмы хранили при -20°С до завершения анализа.
4.7.2 Определение величины уровней соединения в плазме
Концентрации плазмы каждого тестируемого соединения определили способом ЬС-М8/М8, в котором масс-спектрометр эксплуатируют в режиме положительного электрораспыления.
4.7.3 Определение фармакокинетических параметров
Фармакокинетические параметры рассчитали, используя νίηηοηΐίη® (РНагеЦЫ®, Ипйей).
Пример 4.8 7-суточное исследование токсичности на крысах
7-суточное оральное исследование токсичности с тестируемыми соединениями проводили на самцах крыс 8ргадис-ОаЮсу для оценки токсической активности и кинетики токсичности соединений, в суточных дозах 100, 300 и 500 мг/кг/день, питание через зонд, с постоянным объемом дозировки 5 мл/кг/дней.
Тестируемые соединения составляют в смесь в 30% (об./об.) НРвСЬ в очищенной воде. Каждая группа включала 5 основных самцов крысы, а также 3 дополнительных животных для кинетики токсичности. Четвертая группа получала 30% (об./об.) НРвСЬ только в воде, с той же частотой, объемом дозировки и тем же самым путем введения, и группа играла роль контрольной группы по носителю.
Цель исследования состояла в определении самой низкой дозы, которая не вызывает видимых нежелательных явлений (уровень, не вызывающий видимых нежелательных явлений - ΝΟΑΞΕ). Соединение 176 тестировали в соответствии с этим протоколом.
Уровни ΝΟΑΞΕ для соединения 176 оценили в 500 мг/кг.
- 29 018080
Специалистам в данной области следует понимать, что предшествующие описания по характеру являются иллюстративными и разъясняющими, предназначенными для иллюстрации изобретения и его предпочтительных вариантов осуществления. Посредством общепринятого экспериментирования специалист в данной области распознает соответствующие модификации и вариации, которые можно сделать без отклонения от сущности изобретения. Таким образом, изобретение предназначено для определения не описанием, изложенным выше, а следующими ниже пунктами формулы изобретения и их эквивалентами.
Ссылки
СНоу ЕН, Ранам 08. (2001). Ν Епд1 1 Меб. 344: 907-16.
СНиЬтккауа 8. апб Киейпег КЕ (2003), Кеди1айоп о! ок(еодешс рго(етк Ьу сНопбгосу(ек. ТНе Нкегпайопа1 _)оита1 о! ЬюсЬеткйу & се11 Ь1о1оду 35(9)1323-1340.
С1едд ΌΟ е( а1. (2006) N Епд1 1 Меб. 2006 354:795-808. С1исокатте, сНопбгснРп ки1!а(е, апб Не (\уо т сотЫпайоп Гог рашГи1 кпее ок(еоаг(Нп(к.
Е1гек1ет 08. (2003). Уинге. 423:356-61.
КасЫдЧап ЬМ. (2006) Со11адеп апйЬобу-тбисеб аг(НпРк, №(иге Рго(осо1к 2512-2516:
Ьее БМ, \\еп1Ь1а11 МЕ (2001). ЬапсеГ 358: 903-11.
Ьедепбге Р., ОибНЧа 1., Ри)о1 Ч-Р, Водбапо\ую/ Р. (2003) ЧАК/8ТАТ Ьи( по! ЕКК1/ЕКК2 ра(Н\уау теб1а(ек ш!ег1еикшд (1Ь)-6/ко1иЬ1е 1Ь-6К боуп-геди1айоп о! (уре II со11адеп, аддгесап соге, апб 1тк рго!ет (гапкспрйоп ш агйси1аг сНопбгосу(ек. I Βίο1 СНет. 278(5) 2903-2912.
Ь1 ХУС, ЬеНпабе Р., 2а!аги11аН М. (2001) Опсок(а(т М-тбисеб тайгх те(а11орго(етаке апб йккие шНЧЬйог о! те(а11орго(етаке-3 депек ехргеккюп т сНопбгосу!ек гецшгек _)апик ктаке/8ТАТ кЧдпаНпд ра(Н\уау. (2001) I 1ттипо1 166:3491-3498.
О'Ье11 Ж. (2004) ТНегареийс к!га!ед1ек Гог гНеита!о1б аг(Нп(к. N Епд1 I Меб. 350(25): 2591-602.
ОкакЧ М., Тап Ь., СНоу ВК, УокЫба Υ., СНеаН К8Е, Аигоп РЕ, Со1бгшд МВ. (2003), ТНе ТАТАсопаРтпд соге ргото(ег о! (Не (уре II со11адеп депе (СОЬ2А1) 1к (Не (агде( о! 1п(егГегоп-датта-теб1а(еб шЫЬйюп т Нитап сНопбгосу(ек: гес.|шгетеп( !ог 8ТАТ1а1рНа, 1АК1 апб 1АК2. ВюсНет I 369:103-115.
Ок(е Ь. е( а1., ЕСТС Моп1геа1 2007: А ЫдН (НгоидНри( те(Ноб о! теакиппд Ьопе агсННес(ига1 бк(игЬапсе т а типпе СЧА тобе1 Ьу пнсго-СТ тогрНоте(гу.
О(его М., Ьадо К., Ьадо Р., Соте/ Кето Л, Сиа1111о О. (2005). 81дпаШпд ра(Н\уау туоКеб ш п1(г1с ох1бе куп(Наке 1уре II асРгаРоп ш сНопбгосу(ек: купегдкйс еПсс( о! 1ер(1п \уНН т1ег1еикт-1. АйНпйк КекеагсН & ТНегару 7: К581-К591.
КобЧд 81, Мега/ МА, \УННе 1М, Ьатре РА, К11еу 1К, Аг(Ниг СО, Ктд КЬ, 8НееНап КСР, ΥΗ1 Ь., Рептса Ώ., ЧоНпкоп ЕМ, 8сНгеЧЬег КО. (1998), Окгирйоп о! Не Чак1 депе бетопк(га(ек оЬНда!огу апб попгебипбап( го1ек о! Не |акк т суНкте-тбисебЬю1одю гекропкек Се11 93: 373-383.
81тк NА е( а1., (2004) Тагдейпд ок(еос1ак(к \уНН хо1ебгошс асЧб ргегеп(к Ьопе бек(гисРоп т со11адептбисеб аг(Нг1(1к, Аг(НпРк КНеит. 50 2338-2346.
8то1еп 18, 81етег С. (2003). №1( Кеу Огад Оксоу. 2: 473-88.
Уегшд е( а1. (2008) Е!йсасу о! ТС101348, а ке1ес(|уе 1АК2 шЫЬйог, ш (геа(теп( о! а типпе тобе1 о! ЧАК2У617Р-тбисеб ро1усу(Нет1а уега, Сапсег Се11 13(4), 311-320.
Сегоп е( а1., (2008), 8е1есРге шЫЬйюп о! ЧАК2-бпгеп егу(Нго1б бШегепйайоп о! ро1усу(Нет1а уега ргодепйогк Сапсег Се11 13 (4), 321-30.
У1е1апб НА, МюНае1к М., КйксНЬаит В1, Кибо1рН1 КА. (2005). №1( Кеу Огад Оксоу. 4:331-44. Ок(еоагНпРк - ап ипЬеа(аЬ1е бкеаке?
\Уй(х е( а1. (2007), Мойке Мобе1к о! РчПаттаЮгу Во\уе1 Океаке, Абуапсеб Огад ОеНгегу КеуЧеук, 2007, 1073-1083.
Тат, Ь., МсС1упп, Ь.М., Тгаупог, Р., МикНедее, К., Ваг(1е((, 1.М.8., Ебуагбк, I. (2007), ВпРкН 1оита1 о! Сапсег, 97, 378-383.
Соп8(апйпекси е( а1., 2007, Тгепбк т ВюсНетюаЧ 8сЧепсек 33(3): 122-131
Текил Nака, ΝοπΡίΐΌ №кНипо(о апб Табатйки «кНиноЮ, АйНпйк Кек 2002,4 (кирр1 3): 8233-8242.
О'8Неа, Ч.Ч., Реки, М., Вопе, О.С., СНапдейап, Р.8., №(иге КеуЧеук, 2004, 555-564.
№11к е( а1. (2008) Мойке Мобе1к о! А11егдю Ак(Нта: Аси(е апб СНгошс А11егдеп СНа11епде, Океаке Мобе1к & МесНапктк, 213-220.
Чр е( а1. (2006) !п(ег1еик1п (ЧЬ)-4 апб !Б-13 ир-геди1а!е топосу(е сНетоа((гас(ап( рго(е1п-1 ехргеккюп ш Нитап ЬгопсЫа1 ерННеНа1 се11к: туо1уетеп1 о! р38 тйодеп-асйуа!еб рго(ет ктаке, ехйасе11и1аг кЧдпа1геди1а(еб ктаке 1/2 апб Чапик кЧпаке-2 Ьи( по! с-1ип ΝΉ2-(οπηιιι;ι1 ктаке 1/2 кЧдпаШпд ра(Н\уаук, С1т. Ехр. Iттиη, 162-172.
Регпк е( а1. (2002) 1АК-8ТАТ кЧдпайпд т ак(Нта I. С1т. РкекР 1279.
Киб1асх е( а1. (2008) ТНе 1АК-3 ЧпЫЬйог СР-690550 к а ро(еп( ап(ыпПатта(огу адеп( т а тигше тобе1 о! ри1топагу еокторНШа, Еиг I РНагтасо 154-161.
МиШдНап сС, 2Напд I., Нагуеу КС, СоШпк-Ипбегуооб ЧК, 8сНи1тап ВА, РЫШрк ЬА, ТакЧап 8К, ЬоН МЬ, 8и X, Ыи У., Оеу1бак М., А(1ак 8К, СНеп ЬМ, СПйогб КЧ, СегНагб 08, Сагго11 \УЬ, Кеатап СН, 8тНН М, Ооушпд ЧК, Нипдег 8Р УШтапе СЬ; (2009) ЧАК тиЧайопк т НЧдй-гкк сННбНооб асиЧе 1утрНоЬ1акРс
- 30 018080
1еикеш1а, РNΑ8 Мау 22. [ЕриЬ айеай оГ рг1Ш|.
Агдйез ГМ, Ьорех-Бопапо ЕГ. (1998) Са1аЬойс ргошПаштаГогу суГоктез. Сигг Орт С1т Νπϊγ МеГаЬ Саге. 1:245-51.
Виз1 КА, Еагтег КМ, ^а1кег 18, Кпкйат Β\ν. (2002) Иейисйоп о£ _)отГ тЙаттаГюп апй Ьопе егозюп ίη гаГ айщуапГ аг(Нг1(1Б Ьу ГгеаГтепГ \\ί11ι тГеЛеикт-17 гесерГог 1дС1 Ес Гизюп ргоГет. Аг1Нг1115 РНеит. 4б: 802-5.
Гои ΙΜ, 8Ыаи АЬ, С1еп 8Υ, -№апд СИ, 81ие11 ИВ, Тза1 С8, VII СЬ. (2005) ТЬготЬозропйт 1 аз ап еГГесйуе депе Гйегареийс з!га1еду т со11адеп-тйисей аИНг1(1з. АлЬпйз РНеит. 52:339-44.
№з1ийа К., Кот1уата Т., М|уа/ала 8., 81еп ΖΝ, ЕигитаГзи Т., Ио1 Н., ΥозЫйа А., Υатаηа Г., Υататига М., Мпониуа Υ., 1поие Н., АзаЬага Н. (2004) Н1зГопе йеасе1у1азе шЫЬйог зирргеззюп оГ аиГоапйЬойутеФаГей аг(Нг1(1з т писе У1а геди1айоп оГ р1бГЖ4а апй р21^АЕ1/С1р1) ехргеззюп. АЛйпйз Ркепт. 10: 33б5-7б.
Рай ЬС, ИоиЬепоГГ И. (2004) ИйеитаГо1й сасЬех1а: теГаЬойс аЬпогтаййез, тесйашзтз апй тГегуепйопз. ЯйеитаГо1оду; 10:1219-23.
8а1ует1ш Ό., Маххоп Е., Эндо Ь., 8еггато I., Эе 8агго А., Сарий АР., Сп//осгеа 8. (2001) Атейогайоп оГ |о1п( й1зеазе т а гаГ тойе1 оГ сойадеп-тйисей аййпйз Ьу М40403, а зирегох1йе й1зти1азе нитеНс. Аййпйз Кйеит. 44:2909-21.
81е1Гоп ИЬ, Ζе11е^ Г., Но ν4, Ропз Г., КозепГ1а1 А. (2005) №гуе дго\\Г11 ГасГог теФаГез 1урега1дез1а апй саскехк! т аиГойттипе аг(Нг111з. Рат 11б:8-1б.
81тз NΑ, Сгееп ГР, С1ай М, 8с11Нс( 8., МаЛт Ή, С111езр1е МТ, Иотаз Е. (2004) Тагдейпд озГеос1азГз \\ί11ι /о1ейгошс ас1й ргеуепГз Ьопе йезйисГюп т сойадеп-тйисей аг(Нг1(1з. Аг1Нг111з Кйеит., 50: 2338-4б.
\Vа1зт^ι11 Г., АЬай Ь., Ке1ау1аз Г., ИоиЬепоГГ И. (2004) Титог песгоз1з ГасГог-а1р1а ргойисйоп 1з аззосЬ аГей \\Ы1 1езз Ьойу се11 тазз т \уотеп \\Й11 гйеитаГо1й аг(Нг1(1з. Г КйеитаГоГ; 31:23-9.
К1асЫд1ап, Ь. М. Со11адеп апйЬойу-тйисей аИНг1(1з. (200б) №1Шге РгоГосо1з 1, 2512-б.
Ып Н8, Ни ΟΥ, С1ап НΥ, Ые\у ΥΥ, Ниапд НР, Ьерезсйеих Ь., ВазЛапеШ Е., Вагоп И., Ра\уай| С., С1етепГ-Ьасго1х Р. (2007) Апй-гйеитайс асОуШез оГ ЫзГопе йеасе1у1азе (НИАС) ЛйиЬйогз т у1уо т со11адеп-тйисей аЛйпйз т гойепГз. Вг Г РйагтасоГ Арг; 150 (7): 829-31.
Все публикации, включая в качестве неограничивающих примеров патенты и патентные заявки, процитированные в этом описании, включены в настоящий документ в качестве ссылки, как если бы каждая отдельная публикация была конкретно и индивидуально указана для включения посредством ссылки в рамках изобретения как полностью изложенная.
Из предшествующего описания различные вариации и изменения в композициях и способах по данному изобретению будут понятны специалистам в данной области. Все подобные модификации, входящие в объем прилагаемых пунктов формулы изобретения, предназначены для включения в объем настоящего изобретения.
Следует понимать, что факторы, такие как разная способность к проникновению в клетки у различных соединений, могут способствовать расхождениям в активности соединений в биохимических ίπ уйго исследованиях и исследованиях на уровне клеток.
По меньшей мере, некоторые химические названия соединений по изобретению, как указанные и изложенные в настоящей заявке, могут быть получены на автоматизированной основе посредством использования коммерчески доступного программного обеспечения по присваиванию названий химическим соединениям и не были проверены независимо. Типичные программы, выполняющие эту функцию, включают Ьехюйет паттд Гоо1 зо1й от Ореп Еуе 8оП\уаге, Гпс. и АиГопот 8ой^аге Гоо1 зо1й от МИЬ, Гпс. В случае если указанное химическое название и изображенная структура отличаются, то изображенная структура будет определяющей.
Химические структуры, представленные в настоящем документе, получили, используя или С1етЭга\у® или Ι8Ι8® /^ΒΑV. Любая свободная валентность, представленная на атоме углерода, кислорода или азота в структурах в настоящем документе, указывает на наличие атома водорода. Если в структуре находится хиральный центр, но не показано никакой специфической стереохимии для хирального центра, то структура включает оба энантиомера, связанных с хиральной структурой.

Claims (8)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (У!а) или его фармацевтически приемлемая соль.
  2. 2. Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения, предотвращения или профилактики заболеваний, выбранных из группы, включающей пролиферативные заболевания, заболевания, связанные с деградацией хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов; и/или состояний, включающих воспаление или иммунные ответы, включающая фармацевтически приемлемый носитель и фармацевтически эффективное количество соединения по п.1.
  3. 3. Фармацевтическая композиция по п.2, где заболевание, связанное с деградацией хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов, представляет собой остеоартрит; и состояния, включающие воспаление или иммунные ответы, представляют собой болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, астму, ринит, юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительные заболевания кишечника, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим хронической сердечной недостаточности, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов, врожденные мальформации хрящевой ткани, заболевания, ассоциированные с повышенной секрецией 1Ь6, и отторжение при трансплантации органа.
  4. 4. Применение соединения по п.1 для лечения, предотвращения или профилактики заболеваний, выбранных из группы, включающей пролиферативные заболевания, заболевания, связанные с деградацией хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов; и/или состояний, включающих воспаление или иммунные ответы.
  5. 5. Применение по п.4, где заболевание, связанное с деградацией хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов, представляет собой остеоартрит; и состояния, включающие воспаление или иммунные ответы, представляют собой болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, астму, ринит, юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительные заболевания кишечника, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим хронической сердечной недостаточности, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов, врожденные мальформации хрящевой ткани, заболевания, ассоциированные с повышенной секрецией 1Ь6, и отторжение при трансплантации органа.
  6. 6. Применение соединения по п.1 для получения лекарственного средства для лечения, предотвращения или профилактики заболеваний, связанных с деградацией хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов; и/или состояний, включающих воспаление или иммунные ответы.
  7. 7. Применение по п.6, где заболевание, связанное с деградацией хрящевой ткани, костной ткани и/или деградацией суставов, представляет собой остеоартрит; и состояния, включающие воспаление или иммунные ответы, представляют собой болезнь Крона, ревматоидный артрит, псориаз, астму, ринит, юношеский идиопатический артрит, колит, воспалительные заболевания кишечника, осложнения после шунтирования или хронические состояния, обусловленные эндотоксином, способствующим хронической сердечной недостаточности, заболевания, включающие анаболическую стимуляцию хондроцитов, врожденные мальформации хрящевой ткани, заболевания, ассоциированные с повышенной секрецией 1Ь6, и отторжение при трансплантации органа.
  8. 8. Применение соединения по п.1 для получения лекарственного средства для лечения пролиферативных заболеваний.
EA201170255A 2008-07-25 2009-07-24 Соединения, пригодные для лечения дегенеративных и воспалительных заболеваний EA018080B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US13592008P 2008-07-25 2008-07-25
US22068509P 2009-06-26 2009-06-26
PCT/EP2009/059605 WO2010010191A1 (en) 2008-07-25 2009-07-24 Novel compounds useful for the treatment of degenerative and inflammatory diseases.

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201170255A1 EA201170255A1 (ru) 2011-08-30
EA018080B1 true EA018080B1 (ru) 2013-05-30

Family

ID=41021059

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201170255A EA018080B1 (ru) 2008-07-25 2009-07-24 Соединения, пригодные для лечения дегенеративных и воспалительных заболеваний
EA201170257A EA018587B1 (ru) 2008-07-25 2009-07-24 ПРОИЗВОДНЫЕ 2-ЦИКЛОПРОПИЛКАРБОНИЛАМИНО-5-ФЕНИЛ[1,2,4]ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИДИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДЕГЕНЕРАТИВНЫХ И ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201170257A EA018587B1 (ru) 2008-07-25 2009-07-24 ПРОИЗВОДНЫЕ 2-ЦИКЛОПРОПИЛКАРБОНИЛАМИНО-5-ФЕНИЛ[1,2,4]ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИДИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДЕГЕНЕРАТИВНЫХ И ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Country Status (36)

Country Link
US (5) US8853240B2 (ru)
EP (2) EP2346864B1 (ru)
JP (2) JP5480261B2 (ru)
KR (2) KR101676391B1 (ru)
CN (2) CN102105471B (ru)
AR (1) AR072875A1 (ru)
AU (2) AU2009273143B2 (ru)
BR (2) BRPI0916659B8 (ru)
CA (2) CA2730762C (ru)
CL (1) CL2009001637A1 (ru)
CO (1) CO6361925A2 (ru)
CR (1) CR20110092A (ru)
CY (2) CY1113945T1 (ru)
DK (2) DK2361251T3 (ru)
DO (1) DOP2011000022A (ru)
EA (2) EA018080B1 (ru)
ES (2) ES2406691T3 (ru)
HK (2) HK1158635A1 (ru)
HR (2) HRP20130357T1 (ru)
IL (2) IL210262A (ru)
JO (1) JO3041B1 (ru)
MA (1) MA32551B1 (ru)
ME (1) ME02046B (ru)
MX (2) MX2011000756A (ru)
MY (1) MY157615A (ru)
NZ (1) NZ590646A (ru)
PE (1) PE20100152A1 (ru)
PL (2) PL2346864T3 (ru)
PT (2) PT2346864E (ru)
RS (2) RS52823B (ru)
SI (2) SI2361251T1 (ru)
SM (2) SMT201300051B (ru)
TW (1) TWI447118B (ru)
UY (1) UY32006A (ru)
WO (2) WO2010010190A1 (ru)
ZA (2) ZA201100396B (ru)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0719803D0 (en) 2007-10-10 2007-11-21 Cancer Rec Tech Ltd Therapeutic compounds and their use
JO3041B1 (ar) 2008-07-25 2016-09-05 Galapagos Nv مركبات جديدة مفيدة لمعالجة الأمراض التنكسية والالتهابية
BRPI1009637A2 (pt) 2009-06-05 2019-04-30 Cephalon, Inc composto, composição e uso de um composto
US20100331222A1 (en) * 2009-06-26 2010-12-30 Basf Se Process for producing cellulose beads from solutions of cellulose in ionic liquid
TWI462920B (zh) 2009-06-26 2014-12-01 葛萊伯格有限公司 用於治療退化性及發炎疾病之新穎化合物
JO3030B1 (ar) 2009-06-26 2016-09-05 Galapagos Nv مركب جديد مفيد لمعالجة الامراض التنكسية والالتهابات
US8877795B2 (en) 2010-05-07 2014-11-04 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Identification of stabilizers of multimeric proteins
WO2012000970A1 (en) 2010-07-01 2012-01-05 Cellzome Limited Triazolopyridines as tyk2 inhibitors
AR086042A1 (es) * 2011-04-28 2013-11-13 Galapagos Nv Compuesto util para el tratamiento de enfermedades degenerativas e inflamatorias y composicion farmaceutica
KR102427777B1 (ko) 2012-06-26 2022-08-01 델 마 파마슈티컬스 디안하이드로갈락티톨, 디아세틸디안하이드로갈락티톨, 디브로모둘시톨, 또는 그의 유사체 또는 유도체를 이용하여 유전학적 다형성이 있는 환자에 있어서 티로신-키나아제-억제제 내성 악성종양, ahi1 조절곤란 또는 돌연변이를 치료하는 방법
US9169214B2 (en) 2012-12-21 2015-10-27 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Compounds and compositions that bind and stabilize transthyretin and their use for inhibiting transthyretin amyloidosis and protein-protein interactions
CN103965114B (zh) * 2013-01-28 2016-01-06 苏州泽璟生物制药有限公司 氘代的苯基氨基嘧啶化合物以及包含该化合物的药物组合物
WO2014118388A1 (en) 2013-02-04 2014-08-07 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for assaying jak2 activity in red blood cells and uses thereof
WO2014202458A1 (en) * 2013-06-19 2014-12-24 Galapagos Nv Novel compounds and pharmaceutical compositions thereof for the treatment of inflammatory disorders
JP6820097B2 (ja) 2013-12-20 2021-01-27 サギメット バイオサイエンシーズ インコーポレイテッド 脂質合成の複素環式モジュレータ及びその組み合わせ
GB201402070D0 (en) * 2014-02-07 2014-03-26 Galapagos Nv Pharmaceutical compositions for the treatment of inflammatory disorders
GB201402071D0 (en) * 2014-02-07 2014-03-26 Galapagos Nv Novel salts and pharmaceutical compositions thereof for the treatment of inflammatory disorders
WO2016025129A1 (en) 2014-08-14 2016-02-18 Alhamadsheh Mamoun M Conjugation of pharmaceutically active agents with transthyretin ligands through adjustable linkers to increase serum half-life
TWI679205B (zh) 2014-09-02 2019-12-11 日商日本新藥股份有限公司 吡唑并噻唑化合物及醫藥
US20180002328A1 (en) 2015-01-28 2018-01-04 Jn Therapeutics Substituted imidazo[1, 2-a]pyridin-2-ylamine compounds, and pharmaceutical compositions and methods of use thereof
SG11201708181RA (en) * 2015-04-13 2017-11-29 Galapagos Nv Methods for the treatment of inflammatory disorders
PL3290418T3 (pl) * 2015-04-29 2019-11-29 Wuxi Fortune Pharmaceutical Co Ltd Inhibitory kinaz janusowych (jak)
AU2016257892A1 (en) * 2015-05-05 2017-11-09 Concert Pharmaceuticals, Inc. Deuterated filgotinib
CN105061420B (zh) * 2015-06-04 2017-09-05 南京旗昌医药科技有限公司 一种jak抑制剂的晶型及其制备方法和应用
CN104987333B (zh) * 2015-07-14 2017-01-11 苏州富士莱医药股份有限公司 一种Filgotinib的合成方法
WO2017012770A1 (en) 2015-07-23 2017-01-26 Ratiopharm Gmbh Acid addition salts of filgotinib
WO2017012771A1 (en) 2015-07-23 2017-01-26 Ratiopharm Gmbh Crystalline filgotinib sulfonic acid addition salts
WO2017012773A1 (en) 2015-07-23 2017-01-26 Ratiopharm Gmbh Solid forms of filgotinib free base
CN105198876B (zh) * 2015-09-18 2017-09-29 上海宣创生物科技有限公司 一种环丙烷甲酰胺衍生物h晶型及其制备方法
CN105198879B (zh) * 2015-09-18 2017-09-22 上海宣创生物科技有限公司 一种环丙烷甲酰胺衍生物c晶型及其制备方法
CN105218539B (zh) * 2015-09-18 2017-07-25 上海宣创生物科技有限公司 一种环丙烷甲酰胺衍生物b晶型及其制备方法
CN105198878B (zh) * 2015-09-18 2017-07-25 上海宣创生物科技有限公司 一种环丙烷甲酰胺衍生物f晶型及其制备方法
CN105198877B (zh) * 2015-09-18 2017-09-22 上海宣创生物科技有限公司 一种环丙烷甲酰胺衍生物g晶型及其制备方法
CN105198880B (zh) * 2015-09-18 2017-07-25 上海宣创生物科技有限公司 一种环丙烷甲酰胺衍生物a晶型及其制备方法
CN105111207B (zh) * 2015-09-18 2017-07-25 上海宣创生物科技有限公司 一种环丙烷甲酰胺衍生物d晶型及其制备方法
CN105111206B (zh) * 2015-09-18 2017-07-25 上海宣创生物科技有限公司 一种环丙烷甲酰胺衍生物e晶型及其制备方法
CN108349974B (zh) * 2016-02-02 2021-04-30 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种取代的吡啶酰胺类化合物及其应用
TWI712604B (zh) 2016-03-01 2020-12-11 日商日本新藥股份有限公司 具jak抑制作用之化合物之結晶
JP6978097B2 (ja) * 2016-07-26 2021-12-08 スーヂョウ ロングバイオテック ファーマシューティカルズ カンパニー リミテッドSuzhou Longbiotech Pharmaceuticals Co., Ltd. Ｊａｋ阻害剤としての複素環化合物、該化合物の塩類および治療への使用
JOP20190024A1 (ar) 2016-08-26 2019-02-19 Gilead Sciences Inc مركبات بيروليزين بها استبدال واستخداماتها
CN107880038B (zh) * 2016-09-30 2021-09-28 中国医药研究开发中心有限公司 [1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶类化合物及其制备方法和医药用途
JOP20190077A1 (ar) * 2016-10-10 2019-04-09 Array Biopharma Inc مركبات بيرازولو [1، 5-a]بيريدين بها استبدال كمثبطات كيناز ret
EA036903B1 (ru) * 2016-10-26 2021-01-13 Янссен Фармацевтика Нв Соединения конденсированных бициклических пиридинов и их применение в качестве модуляторов ampa-рецептора
AU2017350688B2 (en) * 2016-10-26 2021-04-01 Rapport Therapeutics, Inc. Fused azaheterocyclic compounds and their use as AMPA receptor modulators
EA039352B1 (ru) * 2017-01-19 2022-01-17 Сучжоу Лонгбайотек Фармасьютикалз Ко., Лтд. Соединение в качестве селективного ингибитора jak и его соли и терапевтическое применение
CN108341814B (zh) * 2017-01-23 2021-09-03 上海翔锦生物科技有限公司 Jak激酶抑制剂及其应用
GB201702603D0 (en) 2017-02-17 2017-04-05 Galápagos Nv Novel compositions and pharmaceutical compositions thereof for the treatment of inflammatory disorders
WO2018151815A1 (en) 2017-02-17 2018-08-23 Eidos Therapeutics, Inc. Processes for preparing ag-10, its intermediates, and salts thereof
WO2018167283A1 (en) 2017-03-17 2018-09-20 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the diagnosis and treatment of pancreatic ductal adenocarcinoma associated neural remodeling
WO2018189335A1 (en) 2017-04-13 2018-10-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the diagnosis and treatment of pancreatic ductal adenocarcinoma
US11427581B2 (en) 2018-01-31 2022-08-30 Zhuhai United Laboratories Co., Ltd. JAK inhibitor and use thereof
EP3759109B1 (en) 2018-02-26 2023-08-30 Gilead Sciences, Inc. Substituted pyrrolizine compounds as hbv replication inhibitors
CA3090545A1 (en) * 2018-02-28 2019-09-06 University Of Southern California Compositions and methods for modulating inflammatory and degenerative disorder
CN112218632A (zh) 2018-03-23 2021-01-12 文涵治疗有限公司 用ag10治疗ttr淀粉样变性的方法
EA202190561A1 (ru) 2018-08-17 2021-05-26 Эйдос Терапьютикс, Инк. Препараты ag10
RS65243B1 (sr) * 2018-08-23 2024-03-29 Zhuhai United Laboratories Co Ltd Jedinjenje [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridina kao inhibitor jak i njegova primena
US10815227B2 (en) 2018-08-27 2020-10-27 Cadila Healthcare Limited Processes for the preparation of filgotinib
WO2020092015A1 (en) 2018-11-02 2020-05-07 University Of Rochester Therapeutic mitigation of epithelial infection
WO2020097400A1 (en) * 2018-11-07 2020-05-14 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Imidazopyridine derivatives and aza-imidazopyridine derivatives as janus kinase 2 inhibitors and uses thereof
US11633399B2 (en) 2018-12-25 2023-04-25 Sol-Gel Technologies Ltd. Treatment of skin disorders with compositions comprising an EGFR inhibitor
KR20220045954A (ko) 2019-07-11 2022-04-13 이스케이프 바이오, 인크. Lrrk2 억제제들로서의 인다졸들 및 아자인다졸들
CN111892592B (zh) * 2019-08-06 2023-09-19 江苏柯菲平医药股份有限公司 Jak激酶抑制剂及其用途
CN111072655B (zh) * 2019-12-30 2021-12-10 深圳市坤健创新药物研究院 一种三氮唑并吡啶类化合物及其制备方法和药用组合物与应用
CA3169832A1 (en) * 2020-02-13 2021-08-19 Zhuhai United Laboratories Co., Ltd. Use of jak inhibitors in preparation of drugs for treatment of jak kinase related diseases
CA3166743A1 (en) * 2020-02-21 2021-08-26 Weiwei Mao Crystalline forms of jak inhibitor and uses thereof
AU2021267373A1 (en) 2020-05-06 2022-12-08 Ajax Therapeutics, Inc. 6-heteroaryloxy benzimidazoles and azabenzimidazoles as JAK2 inhibitors
CN111617318B (zh) * 2020-05-26 2021-12-10 南京市儿童医院 可注射型儿童骺板再生水凝胶的制备方法
CN114394965B (zh) * 2021-01-29 2023-09-12 深圳市乐土生物医药有限公司 三唑并吡啶类化合物及其制备方法与用途
AU2022388555A1 (en) 2021-11-09 2024-05-02 Ajax Therapeutics, Inc. 6-he tero aryloxy benzimidazoles and azabenzimidazoles as jak2 inhibitors
CN113773322B (zh) * 2021-11-10 2022-02-11 奥锐特药业(天津)有限公司 一种Filgotinib的制备方法
CN116496268A (zh) * 2022-01-18 2023-07-28 盛世泰科生物医药技术(苏州)有限公司 一种含环丙酰胺化合物及其应用
US11596612B1 (en) 2022-03-08 2023-03-07 PTC Innovations, LLC Topical anesthetics
US11746108B1 (en) * 2022-06-13 2023-09-05 Apm Therapeutics 1, Inc. Triazolopyridine polymorph A

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050222171A1 (en) * 2004-01-22 2005-10-06 Guido Bold Organic compounds
WO2007009773A1 (en) * 2005-07-21 2007-01-25 Novartis Ag Pyrazolo[1.5-a]pyrimidin-7-yl amine derivatives as protein kinase inhibitors
WO2008025821A1 (en) * 2006-08-30 2008-03-06 Cellzome Limited Triazole derivatives as kinase inhibitors
WO2008150015A1 (en) * 2007-06-05 2008-12-11 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterobicyclic compounds as kinase inhibitors
WO2009010530A1 (en) * 2007-07-18 2009-01-22 Novartis Ag Bicyclic heteroaryl compounds and their use as kinase inhibitors
WO2009017954A1 (en) * 2007-08-01 2009-02-05 Phenomix Corporation Inhibitors of jak2 kinase
WO2009027283A1 (en) * 2007-08-31 2009-03-05 Merck Serono S.A. Triazolopyridine compounds and their use as ask inhibitors
WO2009047514A1 (en) * 2007-10-10 2009-04-16 Cancer Research Technology Limited [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyridine and [1,2,4]triazolo[1,5-c]pyrimidine compounds and their use

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4058243B2 (ja) 1999-01-29 2008-03-05 中外製薬株式会社 軟骨形成促進剤およびインドリン−２−オン誘導体
EP1391211A1 (en) 2001-04-27 2004-02-25 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Chondrogenesis promoters
US6514989B1 (en) * 2001-07-20 2003-02-04 Hoffmann-La Roche Inc. Aromatic and heteroaromatic substituted 1,2,4-triazolo pyridine derivatives
WO2004072072A1 (en) 2003-02-14 2004-08-26 Pfizer Products Inc. Triazolo-pyridines as anti-inflammatory compounds
TWI221602B (en) * 2003-07-21 2004-10-01 Benq Corp Emergent disc-withdrawing apparatus
US20070004658A1 (en) 2004-06-21 2007-01-04 Nick Vandeghinste Method and means for treatment of osteoarthritis
MX2007002050A (es) 2004-08-18 2007-03-29 Pharmacia & Upjohn Co Llc Compuestos de triazolopiridina.
US7524860B2 (en) 2004-10-07 2009-04-28 Pfizer Inc. Antibacterial agents
ATE495743T1 (de) * 2006-12-01 2011-02-15 Galapagos Nv Triazolopyridinverbindungen zur behandlung von degenerations- und entzündungskrankheiten
US8811196B2 (en) * 2008-02-19 2014-08-19 Qualcomm Incorporated Providing remote field testing for mobile devices
US20090217316A1 (en) * 2008-02-22 2009-08-27 Binita Gupta Systems and Methods for Advertising Insertion Notification in a Real-Time Streaming Media Service
BRPI0909945A2 (pt) 2008-06-20 2015-07-28 Genentech Inc "composto, composição farmacêutica, método para tratar ou atenuar a gravidade de uma doença ou condição responsiva à inibição da atividade jak2 quinase em um paciente, kit para o tratamento de uma doença ou distúrbio responsivo à inibição da jak quinase"
WO2010010184A1 (en) 2008-07-25 2010-01-28 Galapagos Nv [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridines as jak inhibitors
WO2010010186A1 (en) * 2008-07-25 2010-01-28 Galapagos Nv Novel compounds useful for the treatment of degenerative and inflammatory diseases
WO2010010188A1 (en) 2008-07-25 2010-01-28 Galapagos Nv Novel compounds useful for the treatment of degenerative and inflammatory diseases.
WO2010010187A1 (en) 2008-07-25 2010-01-28 Galapagos Nv Novel compounds useful for the treatment of degenerative and inflammatory diseases
JO3041B1 (ar) * 2008-07-25 2016-09-05 Galapagos Nv مركبات جديدة مفيدة لمعالجة الأمراض التنكسية والالتهابية
WO2010010189A1 (en) 2008-07-25 2010-01-28 Galapagos Nv Novel compounds useful for the treatment of degenerative and inflammatory diseases
DE102009000543A1 (de) * 2009-02-02 2010-08-12 Evonik Degussa Gmbh Verfahren, Absorptionsmedien und Vorrichtung zur Absorption von CO2 aus Gasmischungen
CN103961977A (zh) * 2009-02-02 2014-08-06 巴斯夫欧洲公司 用于除去酸性气体的含有环状胺的吸收剂
BRPI1009637A2 (pt) 2009-06-05 2019-04-30 Cephalon, Inc composto, composição e uso de um composto
JO3030B1 (ar) 2009-06-26 2016-09-05 Galapagos Nv مركب جديد مفيد لمعالجة الامراض التنكسية والالتهابات
TWI462920B (zh) 2009-06-26 2014-12-01 葛萊伯格有限公司 用於治療退化性及發炎疾病之新穎化合物
US20130310340A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Method of treating muscular degradation
CN104379173A (zh) 2012-06-22 2015-02-25 加拉帕戈斯股份有限公司 用于治疗炎症的氨基三唑并吡啶及其药物组合物

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050222171A1 (en) * 2004-01-22 2005-10-06 Guido Bold Organic compounds
WO2007009773A1 (en) * 2005-07-21 2007-01-25 Novartis Ag Pyrazolo[1.5-a]pyrimidin-7-yl amine derivatives as protein kinase inhibitors
WO2008025821A1 (en) * 2006-08-30 2008-03-06 Cellzome Limited Triazole derivatives as kinase inhibitors
WO2008150015A1 (en) * 2007-06-05 2008-12-11 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterobicyclic compounds as kinase inhibitors
WO2009010530A1 (en) * 2007-07-18 2009-01-22 Novartis Ag Bicyclic heteroaryl compounds and their use as kinase inhibitors
WO2009017954A1 (en) * 2007-08-01 2009-02-05 Phenomix Corporation Inhibitors of jak2 kinase
WO2009027283A1 (en) * 2007-08-31 2009-03-05 Merck Serono S.A. Triazolopyridine compounds and their use as ask inhibitors
WO2009047514A1 (en) * 2007-10-10 2009-04-16 Cancer Research Technology Limited [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyridine and [1,2,4]triazolo[1,5-c]pyrimidine compounds and their use

Also Published As

Publication number Publication date
US20110190260A1 (en) 2011-08-04
AU2009273144B2 (en) 2013-10-31
PL2346864T3 (pl) 2013-08-30
US20100029709A1 (en) 2010-02-04
CA2730757A1 (en) 2010-01-28
IL210261A (en) 2017-03-30
BRPI0916659A2 (pt) 2019-03-12
CA2730762A1 (en) 2010-01-28
EP2346864A1 (en) 2011-07-27
IL210262A (en) 2014-09-30
US8242274B2 (en) 2012-08-14
US20170035738A1 (en) 2017-02-09
MY157615A (en) 2016-06-30
EA201170255A1 (ru) 2011-08-30
HRP20130357T1 (en) 2013-05-31
CN102105472B (zh) 2013-04-17
IL210262A0 (en) 2011-03-31
JO3041B1 (ar) 2016-09-05
CY1115569T1 (el) 2017-01-04
CR20110092A (es) 2011-03-16
BRPI0916862B8 (pt) 2021-05-25
CO6361925A2 (es) 2012-01-20
WO2010010190A1 (en) 2010-01-28
BRPI0916659B1 (pt) 2020-12-08
SMT201300051B (it) 2013-07-09
DK2361251T3 (da) 2014-07-21
JP2011529033A (ja) 2011-12-01
US9415037B2 (en) 2016-08-16
US8853240B2 (en) 2014-10-07
RS53406B (en) 2014-10-31
JP2011529032A (ja) 2011-12-01
DOP2011000022A (es) 2011-03-31
CN102105472A (zh) 2011-06-22
BRPI0916862B1 (pt) 2020-08-11
CY1113945T1 (el) 2016-07-27
PT2346864E (pt) 2013-04-04
JP5480261B2 (ja) 2014-04-23
TW201008939A (en) 2010-03-01
SI2346864T1 (sl) 2013-05-31
CL2009001637A1 (es) 2010-02-19
PE20100152A1 (es) 2010-03-24
UY32006A (es) 2010-02-26
WO2010010191A1 (en) 2010-01-28
HK1158634A1 (en) 2012-07-20
ZA201100396B (en) 2011-10-26
PL2361251T3 (pl) 2014-10-31
KR101711911B1 (ko) 2017-03-03
ME02046B (me) 2015-05-20
JP5559168B2 (ja) 2014-07-23
ZA201100472B (en) 2011-10-26
PT2361251E (pt) 2014-07-11
NZ590646A (en) 2011-11-25
ES2485913T3 (es) 2014-08-14
RS52823B (en) 2013-10-31
US20150150856A1 (en) 2015-06-04
US20120309784A1 (en) 2012-12-06
AU2009273143B2 (en) 2014-01-23
EP2346864B1 (en) 2013-03-06
ES2406691T3 (es) 2013-06-07
KR20110045020A (ko) 2011-05-03
HRP20140681T1 (hr) 2014-10-24
CN102105471A (zh) 2011-06-22
KR101676391B1 (ko) 2016-11-15
EA018587B1 (ru) 2013-09-30
AU2009273143A1 (en) 2010-01-28
AU2009273144A1 (en) 2010-01-28
US10206907B2 (en) 2019-02-19
BRPI0916659B8 (pt) 2021-05-25
MX2011000758A (es) 2011-02-23
SMT201400072B (it) 2014-09-08
MX2011000756A (es) 2011-03-21
EA201170257A1 (ru) 2011-08-30
SI2361251T1 (sl) 2014-09-30
TWI447118B (zh) 2014-08-01
EP2361251B1 (en) 2014-04-30
AR072875A1 (es) 2010-09-29
DK2346864T3 (da) 2013-05-13
CA2730762C (en) 2017-11-21
HK1158635A1 (en) 2012-07-20
IL210261A0 (en) 2011-03-31
CN102105471B (zh) 2014-10-15
EP2361251A1 (en) 2011-08-31
MA32551B1 (fr) 2011-08-01
BRPI0916862A2 (pt) 2016-02-10
KR20110053435A (ko) 2011-05-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA018080B1 (ru) Соединения, пригодные для лечения дегенеративных и воспалительных заболеваний
EA024743B1 (ru) Соединение, предназначенное для лечения дегенеративных и воспалительных состояний
TWI462920B (zh) 用於治療退化性及發炎疾病之新穎化合物
ES2774177T3 (es) Compuestos heterocíclicos y usos de estos
EA032596B1 (ru) Соли, способ их получения и их применение для лечения воспалительных заболеваний
KR102078069B1 (ko) 염증의 치료에 사용하기 위한 아미노트라이아졸로피리딘, 및 그의 약학 조성물
TWI469981B (zh) 用於治療退化性及發炎疾病之新穎化合物
KR20210005222A (ko) Rip1 억제 화합물 및 이를 제조하고 사용하는 방법
CN106132934B (zh) 治疗炎性病症的苯并咪唑衍生物及其医药组合物
KR20210006407A (ko) Rip1 억제 화합물 및 이를 제조하고 사용하는 방법
EA026390B1 (ru) ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ 7-(6-(2-ГИДРОКСИПРОПАН-2-ИЛ)ПИРИДИН-3-ИЛ)-1-((ТРАНС)-4-МЕТОКСИЦИКЛОГЕКСИЛ)-3,4-ДИГИДРОПИРАЗИНО[2,3-b]ПИРАЗИН-2(1Н)-ОНА, ИХ ТВЕРДЫЕ ФОРМЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
TW201336844A (zh) 可用於治療退化及發炎疾病之新穎化合物
JP7037483B2 (ja) ピリド［１，２－ａ］ピリミドン類似体、それらの結晶形、それらの中間体、及びそれらの製造方法
CN113677678A (zh) 用于治疗炎性障碍的新化合物及其药物组合物
CN113646305A (zh) 用于治疗炎性障碍的新化合物及其药物组合物
KR102511209B1 (ko) 벤즈이미다졸 유도체 및 염증 질환의 치료를 위한 그의 약학 조성물
CN113677679A (zh) 用于治疗炎性障碍的新化合物及其药物组合物
US20140213576A1 (en) Novel compound useful for the treatment of degenerative and inflammatory diseases
WO2023041905A1 (en) Aminopyridines as activators of pi3 kinase
EA041895B1 (ru) Новые соли и их фармацевтические композиции для лечения воспалительных заболеваний