EA014646B1 - Макроциклические ингибиторы вируса гепатита с - Google Patents

Abstract

Предложены ингибиторы HCV формулы (I)и их N-оксиды, аддитивные соли и стереохимически изомерные формы, где Rпредставляет собой частично ненасыщенную или полностью ненасыщенную 9-10-членную бициклическую гетероциклическую кольцевую систему, где указанная кольцевая система содержит один атом азота и где остальные члены кольца представляют собой атомы углерода; где указанная кольцевая система может быть необязательно замещена на любом атоме углерода или азота кольца одним, двумя или тремя заместителями, каждый независимо выбранный из Het и Салкила; и где заместители на любом атоме углерода гетероциклического кольца также могут быть выбраны из -OR, галогена; L представляет собой -О- или -O-CO-; Rпредставляет собой -ORили -NRSOR; Rи Rпредставляют собой водород или Cалкил; или Rи Rвместе могут образовывать Сциклоалкильное кольцо; n равен 3, 4, 5 или 6; р равен 2; арил представляет собой фенил, необязательно замещенный одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из галогена, Салкила, гидрокси, Салкокси, Het представляет собой 5- или 6-членное насыщенное, частично ненасыщенное или полностью ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, каждый независимо выбранный из азота, кислорода и серы, где кольцо необязательно конденсировано с бензольным кольцом, и где группа Het, в целом, может быть необязательно замещена; фармацевтические композиции, содержащие соединения (I), и способы получения соединений (I). Также предложены биодоступные комбинации ингибиторов HCV формулы (I) с ритонавиром.

Description

Настоящее изобретение относится к макроциклическим соединениям, обладающим ингибирующей активностью в отношении репликации вируса гепатита С (НСУ). Кроме того, оно относится к композициям, содержащим такие соединения в качестве активных ингредиентов, а также к способам получения указанных соединений и композиций.

Вирус гепатита С является главной причиной хронических заболеваний печени во всем мире, и он стал предметом широкого медицинского исследования. НСУ является членом семейства вирусов НауМпбае рода йерас1У1ги8, и является близко родственным роду Πανίνίπίδ. который включает ряд вовлеченных в заболевания человека вирусов, таких как вирус денге и вирус желтой лихорадки, и семейству вирусов животных ре811У1ги8, которое включает вирус бычьей вирусной диареи (ВУЭУ). НСУ представляет собой вирус с одноцепочечной положительной смысловой РНК с геномом приблизительно 9600 оснований. Геном содержит как 5', так и З'-нетранслируемые области, которые определяют вторичную структуру РНК, и центральную открытую рамку считывания, которая кодирует отдельный полипротеин приблизительно из 3010-3030 аминокислот. Полипротеин кодирует десять продуктов гена, которые образуются из полипротеина-предшественника посредством регулируемой серии ко- и посттрансляционных эндопротеолитических расщеплений, опосредуемых протеазами как организма хозяина, так и вируса. Структурные белки вируса включают основной нуклеокапсидный белок, и два оболочечных гликопротеина Е1 и Е2. Неструктурные (N8) белки определяют некоторые необходимые вирусные ферментативные функции (хеликаза, полимераза, протеаза), а также кодируют белки неизвестной функции. Репликацию вирусного генома опосредует РНК-зависимая РНК-полимераза, кодируемая неструктурным белком 5Ь (Ν85Β). В дополнение к полимеразе, было показано, что функции вирусной хеликазы и протеазы, кодируемых в бифункциональном белке N83, необходимы для репликации РНК НСУ. В дополнение к сериновой протеазе N83, НСУ также кодирует металлопротеиназу в области N82.

После первоначальной острой инфекции у большинства инфицированных индивидуумов развивается хронический гепатит, поскольку НСУ реплицируется предпочтительно в гепатоцитах, но не является непосредственно цитопатическим. В частности, отсутствие интенсивного Т-лимфоцитарного ответа и высокая способность вируса к мутациям, по-видимому, обеспечивает высокий уровень хронической инфекции. Хронический гепатит может прогрессировать в печеночный фиброз, приводящий к циррозу, заболеванию печени последней стадии, и в НСС (печеночно-клеточную карциному), что делает его основной причиной трансплантаций печени.

Существует 6 основных генотипов НСУ и более 50 подтипов, которые географически распределены по-разному. НСУ 1 типа представляет собой преобладающий генотип в Европе и США. Выраженная генетическая гетерогенность НСУ обладает высоким диагностическим и клиническим значением, являясь возможным объяснением трудностей в разработке вакцины и отсутствия ответа на лечение.

НСУ может передаваться через контакт с зараженной кровью или продуктами крови, например, после переливания крови или внутривенного применения лекарственного средства. Внедрение диагностических тестов, используемых для скрининга крови, вызвало тенденцию к понижению встречаемости посттрансфузионного заражения НСУ. Однако, учитывая медленное прогрессирование в заболевание печени последней стадии, существующие инфекции будут оставаться серьезной медицинской и экономической проблемой в течение десятилетий.

Современные способы лечения НСУ основаны на (пегилированном) интерфероне-альфа (1Ж-</.) в комбинации с рибавирином. Такая комбинированная терапия приводит к замедленному вирусологическому ответу более чем у 40% пациентов, инфицированных вирусами 1 генотипа, и приблизительно у 80% пациентов, инфицированных 2 и 3 генотипами. Помимо ограниченной эффективности НСУ 1 типа, комбинированная терапия обладает значительными побочными эффектами и является плохо переносимой многими пациентами. Основные побочные эффекты включают гриппоподобные симптомы, гематологические нарушения и нейропсихиатрические симптомы. Таким образом, существует необходимость в более эффективных, удобных и лучше переносимых способах лечения.

Недавно в качестве клинических кандидатов привлекли внимание два ингибитора, представляющие собой пептидомиметики протеазы НСУ, а именно В1Ь№2061, описанный в \УО 00/59929, и УХ-950, описанный в \УО 03/87092. Ряд аналогичных ингибиторов протеазы НСУ также описан в научной и патентной литературе. К настоящему времени стало очевидно, что постоянное введение В1Ь№2061 или УХ-950 приводит к селекции мутантных форм НСУ, которые являются резистентными к соответствующему лекарственному средству, так называемых резистентных к лекарственному средству мутантных форм. Резистентные к лекарственному средству мутантные формы обладают характерными мутациями в геноме протеазы НСУ, в частности, О168У, Ό168Α и/или А1568. Таким образом, для обеспечения пациенту замены требуются дополнительные лекарственные средства с другим характером резистентности, и в будущем, вероятно, станет общепринятой комбинированная терапия несколькими лекарственными средствами, даже в качестве лечения первой линии.

Опыт, связанный с лекарственными средствами против Н1У, и, в частности, с ингибиторами протеазы Н1У, далее показал, что субоптимальная фармакокинетика и комплексные схемы дозирования быстро приводят к непредусмотренным проблемам, связанным с режимом лечения. Это, в свою очередь, означает, что 24-часовая минимальная концентрация (минимальная концентрация в плазме) соответст

- 1 014646 вующих лекарственных средств в схеме лечения Ηΐν часто снижается ниже порога 1С₉₀ или ΕΩ₉₀ на большую часть дня. Полагают, что 24-часовой минимальный уровень по меньшей мере 1С₅₀ и, более реалистично, 1С₉₀ или ΕΌ₉₀, является необходимым для замедления возникновения резистентных к лекарственному средству мутантных форм. Достижение необходимой фармакокинетики и метаболизма лекарственного средства для обеспечения таких минимальных уровней представляет собой важную задачу при разработке лекарственного средства. То свойство предшествующих ингибиторов протеазы Ηί,'ν. что они являются исключительно пептидомиметиками с множеством пептидных связей, определяет фармакокинетические проблемы эффективных схем дозирования.

Существует необходимость в ингибиторах ΗСV, которые могут решить проблемы современной терапии ΗСV, такие как побочные эффекты, ограниченная эффективность, появление резистентности и проблемы, связанные с нарушением режима лечения.

Настоящее изобретение относится к ингибиторам репликации ΗСV, которые являются привлекательными не только с точки зрения их активности в качестве ингибиторов ΗΟν, но также вследствие их хорошей проницаемости в клетки и сопутствующей биодоступности.

Настоящее изобретение относится к ингибиторам репликации ΗСV, которые могут быть представлены формулой (I)

к их Ν-оксидам, аддитивным солям и стереохимически изомерным формам, где пунктирной линией показана необязательная двойная связь между атомами С7 и С8;

Я¹ представляет собой частично ненасыщенную или полностью ненасыщенную 9-10-членную бициклическую гетероциклическую кольцевую систему, где указанная кольцевая система содержит один атом азота, и где остальные члены кольца представляют собой атомы углерода; где указанная кольцевая система может быть необязательно замещена на любом атоме углерода или азота кольца одним, двумя или тремя заместителями, каждый независимо выбранный из Не! и С_1-балкила; и где заместители на любом атоме углерода гетероциклического кольца также могут быть выбраны из -ОЯ⁸, галогена;

Ь представляет собой -О- или -О-СО-;

Я² представляет собой -ОЯ⁶ или -NЯ^5а§ОρЯ⁸;

Я³ и Я⁴ представляют собой водород или С_1-6алкил;

η равен 3, 4, 5 или 6;

р равен 2;

Я^5а представляет собой водород;

Я⁸ представляет собой С_1-6алкил или С_3-7циклоалкил, необязательно замещенный С_1-6алкилом;

арил в качестве группы или части группы представляет собой фенил, необязательно замещенный одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из галогена, С_1-6алкила, гидрокси, С_1-6алкокси;

Не! в качестве группы или части группы представляет собой 5- или 6-членное полностью ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, каждый независимо выбранный из азота и серы, и где группа Не! может быть необязательно замещена одним, двумя или тремя заместителями, каждый независимо выбранный из группы, состоящей из С_1-6алкила, амино, моно- или диС_1-6алкиламино.

Соединения по настоящему изобретению являются необычными, поскольку, несмотря на их сниженную структурную гибкость, они представляют собой активные лекарственные средства против ΗСV. Это не соответствует распространенному в настоящее время мнению, которое предполагает меньшую активность лекарственных средств с менее гибкими макроциклическими кольцами.

Кроме того, соединения по настоящему изобретению, имеющие относительно низкую молекулярную массу, легко синтезировать, исходя из исходных веществ, которые являются коммерчески доступными или которые являются широко доступными с помощью известных в данной области способов синтеза.

Настоящее изобретение далее относится к способам получения соединений формулы (I), их Νоксидов, аддитивных солей и стереохимически изомерных форм.

Настоящее изобретение относится непосредственно к применению соединений формулы (I), их Νоксидов, аддитивных солей и стереохимически изомерных форм в качестве лекарственного средства.

Настоящее изобретение далее относится к фармацевтическим композициям, содержащим носитель

- 2 014646 и эффективное против вируса количество соединения формулы (I), как описано в настоящем описании. Фармацевтические композиции могут содержать комбинации приведенных выше соединений с другими средствами против НСУ. Настоящее изобретение далее относится к указанным выше фармацевтическим композициям для введения субъекту, страдающему инфекцией НСУ.

Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I) или его Ν-оксида, аддитивной соли или стереохимически изомерных форм для изготовления лекарственного средства для ингибирования репликации НСУ.

Как использовано выше и в дальнейшем, применяют следующие определения, если не указано иное.

Термин галоген означает фтор, хлор, бром и йод.

Термин полигалогенС1_-балкил в качестве группы или части группы, например, в полигалогенС_1-6 алкокси, определяют как С_1-6алкил, замещенный моно- или полигалогеном, в частности, С₁-₆алкил, замещенный одним, двумя, тремя, четырьмя, пятью, шестью или более атомами галогена, такой как метил или этил с одним или несколькими атомами фтора, например, дифторметил, трифторметил, трифторэтил. Предпочтительным является трифторметил. Также к нему относятся перфторС_1-6алкильные группы, которые представляют собой С_1-6алкильные группы, где все атомы водорода заменены атомами фтора, например, пентафторэтил. В случае определения полигалогенС_1-6алкила, когда к алкильной группе присоединено более одного атома галогена, атомы галогена могут быть одинаковыми или различными.

Как использовано в настоящем описании, С_1-4алкил в качестве группы или части группы определяет насыщенные углеводородные радикалы с линейной или разветвленной цепью, имеющие от 1 до 4 атомов углерода, например, такие как метил, этил, 1-пропил, 2-пропил, 1-бутил, 2-бутил, 2-метил-1пропил;

С_1-6алкил относится к С_1-4алкильным радикалам и высшим их гомологам, имеющим 5 или 6 атомов углерода, например, таким как 1-пентил, 2-пентил, 3-пентил, 1-гексил, 2-гексил, 2-метил-1-бутил, 2метил-1-пентил, 2-этил-1-бутил, 3-метил-2-пентил и т.п. Среди С_1-6алкилов представляют интерес С_1-4 алкилы.

Термин С_2-6алкенил в качестве группы или части группы определяет углеводородные радикалы с линейной или разветвленной цепью, имеющие насыщенные углерод-углеродные связи и по меньшей мере одну двойную связь и имеющие от 2 до 6 атомов углерода, например, такие как этенил (или винил), 1-пропенил, 2-пропенил (или аллил), 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил, 2-метил-2-пропенил, 2-пентенил, 3-пентенил, 2-гексенил, 3-гексенил, 4-гексенил, 2-метил-2-бутенил, 2-метил-2-пентенил и т.п. Среди С_2-6 алкенилов представляют интерес С2-4алкенилы.

Термин С_2-6алкинил в качестве группы или части группы определяет углеводородные радикалы с линейной и разветвленный цепью, имеющие насыщенные углерод-углердоные связи и по меньшей мере одну тройную связь и имеющие от 2 до 6 атомов углерода, например, такие как этинил, 1-пропинил, 2пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил, 3-бутинил, 2-пентинил, 3-пентинил, 2-гексинил, 3-гексинил и т.п. Среди С2-6алкинилов представляют интерес С2-4алкинилы.

К Сз_-7циклоалкилу относятся циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. Когда С_3-7циклоалкил замещен, в частности, арилом или Не!, он представляет собой циклопропил.

С_1-6алкандиил определяет двухвалентные насыщенные углеводородные радикалы с линейной или разветвленной цепью, имеющие от 1 до 6 атомов углерода, например, такие как метилен, этилен, 1,3пропандиил, 1,4-бутандиил, 1,2-пропандиил, 2,3-бутандиил, 1,5-пентандиил, 1,6-гександиил и т.п. Среди С_1-6алкандиилов представляют интерес С_1-4алкандиилы.

С1_-6алкокси означает С1_-6алкилокси, где С1_-6алкил является таким, как определено выше.

Как использовано в настоящем описании выше, группа (=0) или оксо образует карбонильную группу при присоединении к атому углерода, сульфоксидную группу при присоединении к атому серы и сульфонильную группу при присоединении двух указанных групп к атому серы. Когда кольцо или кольцевая система замещена группой оксо, атом углерода, с которым связана группа оксо, является насыщенным углеродом.

Двухвалентный радикал Ь может представлять собой -О- или -0-С0.

Радикал Не! представляет собой гетероцикл, как описано в данном описании и формуле изобретения. Не! представляет собой 5- или 6-членное полностью ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, каждый независимо выбранный из азота и серы, и где группа Не! может быть необязательно замещена одним, двумя или тремя заместителями, каждый независимо выбранный из группы, состоящей из С_1-6алкила, амино, моно- или диС_1-6алкиламино. Примеры Не! включают, например, пирролил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазинолил, изотиазинолил, тиазолил, изотиазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, триазолил (включая 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил), тетразолил, фуранил, тиенил, пиридил, пиримидил, пиридинизил, триазинил.

Каждый из радикалов Не! или К¹, приведенных в предыдущем или следующем абзаце, может быть необязательно замещен количеством и типом заместителей, упомянутым в определениях соединений формулы (I) или любой из подгрупп соединений формулы (I).

К¹ может представлять собой частично ненасыщенную или полностью ненасыщенную 9-12

- 3 014646 членную бициклическую гетероциклическую кольцевую систему, как описано в данном описании и формуле изобретения. Примеры указанной бициклической кольцевой системы включают, в частности, хинолинил (в частности, хинолин-4-ил), изохинолинил (в частности, изохинолин-1-ил), каждый из которых независимо необязательно является моно-, ди- или тризамещенным С_1-6алкилом, С_1-6алкокси, галогеном, -ΝΚ^'Κ.⁵¹’. арилом, Не!; и т.п.

Каждый арил является таким, как описано выше и предпочтительно представляет собой фенил, замещенный заместителями, описанными выше. Его применяют в равной мере с арилС_1-6алкилом, который, в частности, может представлять собой арилметил, например, бензил.

Следует отметить, что положения радикалов на любой молекулярной группе, используемой в определениях, могут быть любыми на такой группе, при условии, что она является химически стабильной.

Если не указано иное, радикалы, используемые в определениях переменных, включают все возможные изомеры. Например, пиридил включает 2-пиридил, 3-пиридил и 4-пиридил; пентил включает 1пентил, 2-пентил и 3-пентил.

Когда переменная встречается более одного раза в любом составляющем, каждое определение является независимым.

Как использовано далее в данном описании, термин соединения формулы (I) или настоящие соединения или сходные термины, подразумевает включение в него соединений формулы (I), любых их подгрупп, Ν-оксидов, аддитивных солей и стереохимически изомерных форм. Один вариант осуществления включает соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), описанных в настоящем описании, а также их Ν-оксиды, аддитивные соли и возможные стереоизомерные формы. Другой вариант осуществления включает соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), описанных в настоящем описании, а также их аддитивные соли и возможные стереоизомерные формы. Соединения формулы (I) имеют несколько центров хиральности и существуют в виде стереохимически изомерных форм. Как использовано в настоящем описании, термином стереохимически изомерные формы определяют все возможные соединения, состоящие из одних и тех же атомов, связанных одной и той же последовательностью связей, но имеющие различные трехмерные структуры, которыми соединения формулы (I) могут обладать, и которые не являются взаимозаменяемыми.

В случаях, когда для обозначения абсолютной конфигурации хирального атома в заместителе используют (Κ) или (8), обозначение осуществляют, учитывая целое соединение, а не заместитель в отдельности.

Если не указано или приведено иное, химическое обозначение соединения включает смесь всех возможных стереохимически изомерных форм, которыми может обладать указанное соединение. Указанная смесь может содержать все диастереомеры и/или энантиомеры основной молекулярной структуры указанного соединения. Подразумевают, что все стереохимически изомерные формы соединений по настоящему изобретению как в чистой форме, так и в смеси друг с другом, включены в объем настоящего изобретения.

Чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных соединений, как указано в настоящем описании, определяют как изомеры, по существу не содержащие других энантиомерных или диастереомерных форм, с одинаковой основной молекулярной структурой указанных соединений или промежуточных соединений. В частности, термин стереоизомерно чистый относится к соединениям или промежуточным соединениям, имеющим стереоизомерный избыток по меньшей мере от 80% (т.е. минимум 90% одного изомера и максимум 10% других возможных изомеров) вплоть до избытка стереоизомера 100% (т. е. 100% одного изомера и отсутствие других), более конкретно к соединениям или промежуточным соединениям, имеющим стереоизомерный избыток от 90% вплоть до 100%, более конкретно, имеющим стереоизомерный избыток от 94% вплоть до 100% и наиболее конкретно имеющим стереоизомерный избыток от 97% вплоть до 100%. Термины энантиомерно чистый и диастереомерно чистый следует понимать аналогично, однако относительно энантиомерного избытка и диастереомерного избытка, соответственно, в представляющей интерес смеси.

Чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных соединений по настоящему изобретению можно получать с применением известных в данной области способов. Например, энантиомеры можно разделять селективной кристаллизацией их диастереомерных солей с оптически активными кислотами или основаниями. Их примерами являются винная кислота, дибензоилвинная кислота, дитолуолвинная кислота и камфосульфоновая кислота. Альтернативно, энантиомеры можно разделять хроматографическими методами с использованием хиральных неподвижных фаз. Указанные стереохимически чистые изомерные формы также можно получать из соответствующих стереохимически чистых изомерных форм подходящих исходных веществ, при условии, что реакция проходит стереоспецифически. Предпочтительно, если требуется конкретный стереоизомер, указанное соединение синтезируют стереоспецифическими способами получения. В этих способах преимущественно используют энантиомерно чистые исходные вещества.

Диастереомерные рацематы соединений формулы (I) можно получать отдельно общепринятыми способами. Подходящие физические методы разделения, которые преимущественно можно использовать, представляют собой, например, селективную кристаллизацию и хроматографию, например, коло

- 4 014646 ночную хроматографию.

Для некоторых соединений формулы (I), их Ν-оксидов, аддитивных солей, сольватов и промежуточных соединений, используемых для их получения, абсолютная стереохимическая конфигурация не определена. Специалист в данной области сможет определить абсолютную конфигурацию таких соединений с использованием известных в данной области способов, например таких как рентгеновская дифракция.

Также подразумевают, что настоящее изобретение включает все изотопы атомов, встречающиеся в представленных соединениях. Изотопы включают атомы, имеющие одинаковые атомные номера, но разные массовые числа. В качестве общего и неограничивающего примера, изотопы водорода включают тритий и дейтерий. Изотопы углерода включают С-13 и С-14.

Как использовано в настоящем описании, термин пролекарство означает фармакологически приемлемые производные, такие как сложные эфиры, амиды и фосфаты, так что полученный продукт биотрансформации ίη νίνο производного представляет собой активное лекарственное средство, как определено в соединениях формулы (I). Ссылка Сообтап апб Сйтап (ТНе Рйаттасо1од1а1 Ваак о£ Тйегареийск, 8^4Ь еб, МсСга\\-НП1. Ιηΐ. Еб. 1992, ВюйапЦоттабоп о£ Тйегареибск, р 13-15), в которой в основном описаны пролекарства, включена в настоящее описание. Пролекарства предпочтительно обладают высокой растворимостью в воде, повышенной биодоступностью и они легко метаболизируются т νί\Ό в активные ингибиторы. Пролекарства соединения по настоящему изобретению можно получать, модифицируя функциональные группы, представленные в соединении таким образом, чтобы модифицированные соединения расщеплялись до исходного соединения, либо общепринятыми способами, либо ш νί\Ό.

Предпочтительными являются фармацевтически приемлемые пролекарства в виде сложных эфиров, которые гидролизуются т νίνΌ, и которые образованы из таких соединений формулы (I), которые имеют гидроксигруппу или карбоксильную группу. Гидролизуемый ш νί\Ό сложный эфир представляет собой сложный эфир, который гидролизуется в организме человека или животного с получением исходной кислоты или спирта. Подходящие фармацевтически приемлемые сложные эфиры в случае карбокси включают С1_-6алкоксиметиловые сложные эфиры, например, метоксиметиловый, С1_-6алканоилоксиметиловые сложные эфиры, например, пивалоилоксиметиловый, фталидиловые сложные эфиры, С_3-8циклоалкоксикарбонилоксиС1_-6алкиловые сложные эфиры, например, 1-циклогексилкарбонилоксиэтиловый; 1,3диоксолен-2-онилметиловые сложные эфиры, например, 5-метил-1,3-диоксолен-2-онилметиловый; и С_£-6 алкоксикарбонилоксиэтиловые сложные эфиры, например, 1-метоксикарбонилоксиэтиловый, которые могут быть образованы на любой карбоксигруппе соединений по настоящему изобретению.

Гидролизуемый ш νί\Ό сложный эфир соединения формулы (I), содержащего гидроксигруппу, включает неорганические сложные эфиры, такие как фосфатные сложные эфиры и α-ацилоксиалкиловые простые эфиры и сходные с ними соединения, которые в результате гидролиза сложного эфира ш νί\Ό расщепляются с получением исходной гидроксигруппы. Примеры α-ацилоксиалкиловых простых эфиров включают ацетоксиметокси и 2,2-диметилпропионилоксиметокси. Предпочтительные для выбора гидролизуемые ш νί\Ό образующие сложный эфир группы включают алканоил, бензоил, фенилацетил и замещенный бензоил и фенилацетил, алкоксикарбонил (с получением алкилкарбонатных сложных эфиров), диалкилкарбамоил и №(диалкиламиноэтил)-№алкилкарбамоил (с получением карбаматов), диалкиламиноацетил и карбоксиацетил. Примеры заместителей бензоила включают морфолино и пиперазино, связанные между атомом азота кольца и положением 3 или 4 бензоильного кольца через группу метилена.

Для терапевтического применения соли соединений формулы (I) представляют собой соли, в которых противоион является фармацевтически приемлемым. Однако соли кислот и оснований, которые не являются фармацевтически приемлемыми, также можно применять, например, для получения или очистки фармацевтически приемлемого соединения. Все соли, как фармацевтически приемлемые, так и не фармацевтически приемлемые, включены в объем настоящего изобретения.

Подразумевают, что фармацевтически приемлемые кислотно- и основно-аддитивные соли, как указано выше в настоящем описании, включают терапевтически активные нетоксичные кислотно- и основно-аддитивные солевые формы, которые могут образовывать соединения формулы (I). Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли удобно получать обработкой формы основания соответствующей кислотой. Соответствующие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогеноводороды, например, хлористо-водородная или бромисто-водородная кислота, серная, азотная, фосфорная и т.п. кислоты; или органические кислоты, например, такие как уксусная, пропионовая, гидроксиуксусная, молочная, пировиноградная, щавелевая (т.е. этандиовая), малоновая, янтарная (т.е. бутандиовая кислота), малеиновая, фумаровая, яблочная (т.е. гидроксибутандиовая кислота), винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая, салициловая, п-аминосалициловая, памовая и подобные кислоты.

Напротив, солевые формы можно преобразовывать в форму свободного основания обработкой соответствующим основанием.

Соединения формулы (I), содержащие кислотообразующий протон, также можно преобразовывать

- 5 014646 в их нетоксичные формы аддитивных солей металлов или аминов обработкой соответствующими органическими и неорганическими основаниями. Подходящие основные солевые формы включают, например, соли аммония, соли щелочных и щелочно-земельных металлов, например, соли лития, натрия, калия, магния, кальция и т.п., соли с органическими основаниями, например, соли с бензатином, Ν-метилΌ-глюкамином, гидрабамином, и соли с аминокислотами, например, такими как аргинин, лизин и т.п.

Как использовано выше в настоящем описании, термин аддитивная соль также включает сольваты, которые могут образовывать соединения формулы (I), а также их соли. Такие сольваты представляют собой, например, гидраты, алкоголяты и т. п.

Как использовано выше в настоящем описании, термин четвертичный амин определяет четвертичные соли аммония, которые могут образовывать соединения формулы (I) взаимодействием между основным азотом соединения формулы (I) и соответствующим способствующим образованию четвертичной соли агентом, например, таким как необязательно замещенный алкилгалогенид, арилгалогенид или арилалкилгалогенид, например, метилйодид или бензилйодид. Также можно использовать другие участвующие в реакции вещества с подходящими уходящими группами, такие как алкилтрифторметансульфонаты, алкилметансульфонаты и алкил-п-толуолсульфонаты. Четвертичный амин имеет положительно заряженный азот. Фармацевтически приемлемые противоионы включают хлор, бром, йод, трифторацетат и ацетат. Выбранный противоион можно вводить с использованием ионообменных смол.

Подразумевают, что формы Ν-оксидов представленных соединений включают соединения формулы (I), где один или несколько атомов азота окислены до так называемого Ν-оксида.

Понятно, что соединения формулы (I) могут обладать свойствами связывания металла, хелатирования, образования комплексов, и, таким образом, они могут существовать в виде комплексов с металлами или хелатов металлов. Подразумевают, что такие производные соединений формулы (I) с металлом включены в объем настоящего изобретения.

Некоторые соединения формулы (I) также могут существовать в их таутомерной форме. Несмотря на то, что такие формы явно не указаны в представленной выше формуле, подразумевают, что они включены в объем настоящего изобретения.

Как указано выше, соединения формулы (I) обладают несколькими центрами асимметрии. В целях более эффективного обозначения каждого из таких центров асимметрии, будут использовать систему нумерации, как указано в следующей структурной формуле.

(I)

Центры асимметрии находятся в положениях 1, 4 и 6 макроцикла, а также в атоме углерода 3' в группе пирролидина, или остатка пролина, имеющего группу -Ь-К¹. Каждый из таких центров асимметрии может находиться в их К или δ конфигурации.

Стереохимия в положении 1 предпочтительно соответствует стереохимии конфигурации Ьаминокислот, т.е. конфигурации Ь-пролина.

Соединения формулы (I) включают циклопропильную группу, как представлено в структурном фрагменте ниже:

где С₇ представляет собой углерод в положении 7 и атомы углерода в положении 4 и 6 представляют собой асимметричные атомы углерода кольца циклопропана.

Независимо от других возможных центров асимметрии в других сегментах соединений по настоящему изобретению, наличие двух центров асимметрии означает, что соединения могут существовать в качестве смесей диастереомеров, таких как диастереомеры соединений формулы (I), в которых атом углерода в положении 7 обладает син-конфигурацией относительно либо карбонила, либо амида, как представлено ниже.

- 6 014646

Один вариант осуществления относится к соединениям формулы (I), где атом углерода в положении 7 обладает син-конфигурацией относительно карбонила. Другой вариант осуществления относится к соединениям формулы (I), где конфигурация у атома углерода в положении 4 представляет собой К. Конкретная подгруппа соединений формулы (I) представляет собой соединения, где атом углерода в положении 7 обладает син-конфигурацией относительно карбонила и где конфигурация у атома углерода в положении 4 представляет собой К.

Соединения формулы (I) также включают остаток пролина. Предпочтительными являются соединения формулы (I), где заместитель в положении 1 (или 5') и заместитель -Ь-К¹ (в положении 3') находятся в транс-конфигурации. Особый интерес представляют собой соединения формулы (I), где положение 1 обладает конфигурацией, соответствующей Ь-пролину, и заместитель -Ь-К¹ находится в трансконфигурации относительно положения 1. Предпочтительно соединения формулы (I) обладают стереохимией, как указано в структуре формулы (Ка), как изображено ниже:

Один вариант осуществления настоящего изобретения относится к соединениям формулы (I) или формулы (Ка) или к любой подгруппе соединений формулы (I), где применяются одно или несколько из следующих условий:

(a) К³ и К⁴ оба представляют собой водород;

(b) Ь представляет собой -О-;

(c) двойная связь находится между атомами углерода 7 и 8.

Конкретная подгруппа соединений формулы (I) представляет собой соединения, соответствующие следующей структурной формуле:

Среди соединений формулы (КЬ), особый интерес представляют соединения, имеющие стереохимическую конфигурацию соединений формулы (Ка).

Двойная связь между атомами углерода 7 и 8 в соединениях формулы (I) или в любой подгруппе соединений формулы (I) может находиться в цис- или транс-конфигурации. Предпочтительно двойная связь между атомами углерода 7 и 8 находится в цис-конфигурации, как изображено в формуле (КЬ).

Другая конкретная подгруппа соединений формулы (I) представляет собой соединения, соответствующие следующей структурной формуле:

- 7 014646

Среди соединений формулы (Ι-с) особый интерес представляют соединения, имеющие стереохимическую конфигурацию соединений формулы (Ι-а).

В (Ι-а), (Ι-Ь) и (Ι-с), когда это применимо, Ь, п, К¹, Я², Я³ и Я⁴ являются такими, как описано в определениях соединений формулы (Ι) или любой из подгрупп соединений формулы (Ι), описанных в на стоящем описании.

Следует понимать, что определенные выше подгруппы соединений формулы (Ι-а), (Ι-Ь) или (Ι-с), а также любой другой подгруппы, определенной в настоящем описании, подразумевают также включение Ν-оксидов, аддитивных солей и стереохимически изомерных форм таких соединений.

Когда п равен 4, группа -СН₂-, заключенная в скобки с показателем п, соответствует бутандиилу в соединениях формулы (Ι) или в любой подгруппе соединений формулы (Ι). Когда п равен 5, группа -СН₂-, заключенная в скобки с показателем п, соответствует пентандиилу в соединениях формулы (Ι) или в любой подгруппе соединений формулы (Ι). Когда п равен 6, группа -СН₂-, заключенная в скобки с показателем п, соответствует гександиилу в соединениях формулы (Ι) или в любой подгруппе соединений формулы (Ι). Конкретные подгруппы соединений формулы (Ι) представляют собой такие соединения, где п равен 4 или 5.

Варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (Ι) или любую из подгрупп соединений формулы (Ι), где Ь представляет собой -0-, и Я¹ представляет собой хинолинил (в частности, хинолин-4-ил), изохинолинил (в частности, изохинолин-1-ил), каждый из которых независимо необязательно моно-, ди- или тризамещен С1-6алкилом, С1-6алкокси, галогеном, -ΝΚ.⁵'Κ^5Ι:ι. арилом, Не!; где арил или Не!, каждый независимо, необязательно замещен галогеном, С1-6алкилом, С_1-6 алкокси, амино, моно- или диС_1-6алкиламино.

Варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (Ι) или любую подгруппу соединений формулы (Ι), где Я¹ представляет собой хинолинил, необязательно замещенный 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из заместителей, указанных в качестве возможных заместителей бициклической кольцевой систем Я¹, как описано в определениях соединений формулы (Ι) или любой подгруппы соединений формулы (Ι).

Конкретные варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой такие соединения формулы (Ι) или любую подгруппу соединений формулы (Ι), где Я¹ представляет собой (6-4) радикал формулы

или, в частности, (6-4-а) радикал формулы

(6-5) радикал формулы где в радикалах (6-4)-(6-5), а также в (6-4-а):

каждый из Я^1Ь, Я^1Ь, Я^1е, Я^1Г независимо представляет собой любой из заместителей, выбранных из заместителей, приведенных в качестве возможных заместителей в бициклической кольцевой системах Я¹, как описано в определениях соединений формулы (Ι) или любой подгруппы соединений формулы (Ι).

Конкретный вариант осуществления настоящего изобретения представляют собой такие соединения формулы (Ι) или любую подгруппу соединений формулы (Ι), где Я¹ представляет собой (6-5-а) радикал формулы

где Я^1Г представляет собой водород, С_1-6алкил, амино, моно- или диС_1-6алкиламино.

- 8 014646

Варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), где

а) В² представляет собой -ОВ⁶, где В⁶ представляет собой водород, метил, этил или трет-бутил; или (Ь) В² представляет собой -ΝΗ§(=Θ)₂Κ⁸, где В⁸ представляет собой циклопропил или метилциклопропил.

Варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), где В³ и В⁴ оба представляют собой водород.

Варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), где η равен 4 или 5.

Варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), где В¹ представляет собой (е) изохинолинил (в частности, 1-изохинолинил), необязательно замещенный 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из заместителей, приведенных в качестве возможных заместителей бициклической кольцевой систем В¹, как описано в определениях соединений формулы (I) или любой подгруппы соединений формулы (I).

Конкретные варианты осуществления представляет собой такие варианты осуществления, где В¹ представляет собой (е-1) радикал формулы

где В^9а, В^9Ь, В^9с независимо друг от друга представляют собой любой из заместителей, выбранных из заместителей, приведенных в качестве возможных заместителей бициклической кольцевых систем В¹, как описано в определениях соединений формулы (I) или любой подгруппы соединений формулы (I); в частности,

В^9а может представлять собой арил или Не!, каждый из которых необязательно замещен любым из радикалов, приведенных в качестве заместителей арила или Не!, как описано в определениях соединений формулы (I) или любой подгруппы соединений формулы (I) (включая количество заместителей); конкретно, указанный арил или Не! может быть замещен 1, 2 или 3 (в частности, одним) С_1-6алкилом, амино, необязательно моно- или дизамещенным С_1-6алкилом;

В^9Ь может представлять собой С_1-6алкил, арил, Не!, галоген (например, бром, хлор или фтор);

В^9с может представлять собой С1-6алкокси.

В частности, В^9а в изохинолинильном радикале, указанном как (е-1) или (1-е-а), включает фенил, пиридил, тиазолил, оксазолил или пиразолил, каждый из которых необязательно замещен С1-6алкилом (например, метилом, этилом, изопропилом, трет-бутилом), амино или С_1-6алкиламино.

Варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), где В¹ представляет собой

I (М) где В^9а является таким, как определено для любой из групп или подгрупп соединений формулы (I); и В^9Ь представляет собой водород или галоген.

Следующие предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), где В¹ представляет собой я»

I

0-4) где В^9а представляет собой метокси, этокси или пропокси; и В^9Ь представляет собой водород, фтор, бром, хлор, йод, метил, этил или пропил.

Следующие варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), где В¹ представляет собой

- 9 014646 к®

ννν (е-5) где Я^9Ь представляет собой водород или галоген.

Предпочтительными среди подгрупп соединений вариантов осуществления, где Я¹ представляет собой радикал (Б-4)-(Б-5), (е-1)-(е-3), как указано выше, являются такие соединения в данных подгруппах, где Ь представляет собой -О-.

Варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), где (a) Я² представляет собой -ОЯ⁶, в частности, где Я⁶ представляет собой С_1-балкил, такой как метил, этил или трет-бутил, и предпочтительно, где Я⁶ представляет собой водород;

(b) Я² представляет собой -ΝΗ8(=Ο)2Ε^Χ. в частности, где Я⁸ представляет собой С1-6алкил, С₃С₇ циклоалкил, необязательно замещенный С_1-6алкилом, например, где Я⁸ представляет собой метил, циклопропил или метилциклопропил.

Следующие варианты осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), где (a) Я³ и Я⁴ оба представляют собой водород;

(b) Я³ и Я⁴ оба представляют собой С_1-6алкил.

Соединения формулы (I), имеющие в макроцикле двойную или одинарную связь (т.е. между атомами 7 и 8), соответствующие формуле (Σ-Б) или Ц-е), ниже, состоят из трех структурных элементов Р1, Р2, Р3. Структурный элемент Р1 дополнительно содержит Р1'-конец. В связывание структурных элементов Р1 с Р2, Р3 с Р2 и необязательно Р1 с Р1' вовлечено образование амидной связи. Связывание структурных элементов Р1, Р1', Р2 и Р3 с получением соединений В-Б) или Ц-е), можно проводить в любой приведенной последовательности. Одна из таких стадий включает циклизацию, посредством которой образуется макроцикл.

Соединения формулы (!-е) можно получать из соединения формулы (!-Ь) восстановлением двойной связи.

Подразумевают, что способы синтеза, описанные ниже в настоящем описании, применимы в равной степени для рацематов, стереохимически чистых промежуточных соединений или конечных продуктов, а также для любых смесей стереоизомеров. Рацематы или стереохимические смеси можно разделять на стереоизомерные формы на любой стадии в ходе синтеза. В одном варианте осуществления промежуточные соединения и конечные продукты обладают стереохимией, описанной выше в соединениях фор мулы Ц-а).

В одном варианте осуществления соединения В-Б) получают первоначальным образованием амидных связей и последующим образованием двойной связи между Р3 и Р1 с одновременной циклизацией в макроцикл.

В предпочтительном варианте осуществления соединения (I), где связь между С₇ и С₈ представляет собой двойную связь, которые представляют собой соединения формулы Ц-а), как определено выше, можно получать, как представлено на следующей схеме реакций:

Макроцикл можно образовывать через реакцию метатезиса олефинов в присутствии подходящего катализатора на основе металла, например, такого как катализатор на основе Яи, описанный М111ег, 8.1.,

- 10 014646

В1аск^с11. Н.Е., ОтиЬЬк, КН. 1. Ат. СЕет. 8ос. 118, (1996), 9606-9614; КтдзЬшу, 1.8., Нат1у, 1.Р.А., Вот1а1еЬи8, Р.1., Ноνеу6а, А.Н., 1. Ат. СЕет. 8ос. 121, (1999), 791-799; и Ниапд е! а1., 1. Ат. СЕет. 8ос. 121, (1999), 2674-2678; например, катализатор Нотеуба-СгиЬЬх.

Можно использовать стабильные на воздухе катализаторы рутения, такие как бис(трициклогексилфосфин)-3-фенил-1Н-инден-1-илиденрутенийхлорид (№о1у§1 М1®) или бис(трициклогексилфосфин)[(фенилтио)метилен]рутений(1У)дихлорид. Другие катализаторы, которые можно использовать, представляют собой катализаторы ОтиЬЬк, т.е. бензилиден-бис(трициклогексилфосфин)дихлоррутений и (1,3бис-(2,4,6-триметилфенил)-2-имидазолидинилиден)дихлор(фенилметилен)-(трициклогексилфосфин)рутений, соответственно. Особый интерес представляют собой катализаторы Нотеуба-СгиЬЬх первого и второго поколения, которые представляют собой дихлор(о-изопропоксифенилметилен)(трициклогексилфосфин)рутений(П) и 1,3-бис-(2,4,6-триметилфенил)-2-(имидазолидинилиден)дихлор(о-изопропоксифенилметилен)рутений, соответственно. Также для данной реакции можно использовать другие катализаторы, содержащие другие переходные металлы, такие как Мо.

Реакции метатезиса можно проводить в подходящем растворителе, например, таком как простые эфиры, например, ТГФ, диоксан; галогенированные углеводороды, например, дихлорметан, СНС1₃, 1,2дихлорэтан и т.п. В предпочтительном варианте осуществления реакцию метатезиса проводят в толуоле. Указанные реакции проводят при повышенных температурах в атмосфере азота.

Соединения формулы (I), где связь между С₇ и С₈ в макроцикле представляет собой одинарную связь, т.е. соединения формулы (Ι-е), можно получать из соединений формулы (Ι-б) восстановлением двойной связи С₇-С₈ в соединениях формулы (Ι-а). Восстановление можно проводить каталитической гидрогенизацией водородом в присутствии катализатора на основе благородного металла, например, такого как Р!, Р6, КЕ, Ки или никель Ренея. Интерес представляет КО на оксиде алюминия. Реакцию гидрогенизации предпочтительно проводят в растворителе, например, таком как спирт, такой как метанол, этанол, или простой эфир, такой как ТГФ, или их смеси. Также в растворители или смеси растворителей можно добавлять воду.

Группу К² можно связывать со структурным элементом Р1 на любой стадии синтеза, т. е. до или после циклизации, или до или после циклизации и восстановления, как описано в настоящем описании выше. Соединения формулы (I), где К² представляет собой -ИК^5аК^5Ь, -ИНК^5с, -ИН8О_рИК^5аК^5Ь, -ИК^5а§ОрК⁸, такие группы вместе представлены -ИК^2-аК^2-Ь, где указанные соединения представленные формулой (Ι-6-

1), можно получать сочетанием группы К² с Р1 посредством образования амидной связи между группами. Аналогично, соединения формулы (I), где К² представляет собой -ОК⁶, т.е. соединения (1-6-2), можно получать присоединением группы К² к Р1 посредством образования сложноэфирной связи. В одном варианте осуществления группы -ИК^2-аК^2-Ь или -ОК⁶ вводят на последней стадии синтеза соединений (I), как представлено на следующих схемах реакций, где О представляет собой группу:

Промежуточное соединение (III) можно сочетать с амином (ГУ-а) реакцией образования амида, такой как любая методика образования амидной связи, описанная в настоящем описании ниже. В частности, соединение (III) можно обрабатывать агентом сочетания, например, Ν,Ν'-карбонилдиимидазолом (СИк), ЕЕИф, ПИф, ЕИО или гексафторфосфатом бензотриазол-1-илокси-трис-пирролидинофосфония (коммерчески доступным как РуВОР®), в растворителе, таком как простой эфир, например, ТГФ, или галогенированный углеводород, например, дихлорметан, хлороформ, дихлорэтан, с последующим взаимодействием с требуемым соединением (IУ-а), предпочтительно после проведения реакции соединения (III) с агентом сочетания. Взаимодействие соединения (III) с соединением ПУ-а) предпочтительно проводят в присутствии основания, например, триалкиламина, такого как триэтиламин или диизопропилэтиламин, или 1,8-диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ен (ИВИ). Промежуточное соединение (III) также можно

- 11 014646 преобразовывать в активированную форму, например, активированную форму общей формулы С-СО-Ζ, где Ζ представляет собой галоген или остаток активного сложного эфира, например, Ζ представляет собой группу арилокси, такую как фенокси, п-нитрофенокси, пентафторфенокси, трихлорфенокси, пентахлорфенокси и т.п.; или Ζ может представлять собой остаток смешанного ангидрида. В одном варианте осуществления С-СО-Ζ представляет собой хлорангидрид (С-СО-С1) или смешанный ангидрид кислоты (С-СО-О-СО-Я или С-СО-О-СО-ОЯ, в последнем случае Я представляет собой, например, С1_-4алкил, такой как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, трет-бутил, изобутил или бензил). Активированную форму С-СО-Ζ подвергают взаимодействию с требуемым соединением (1У-а).

Активация карбоновой кислоты в соединении (III), как описано в указанных выше реакциях, может привести к реакции внутренней циклизации до промежуточного соединения азалактона формулы

где Ь, Я¹, Я³, Я⁴, η являются такими, как описано выше, и где стереогенные центры могут обладать стереохимической конфигурацией, как определено выше, например, как в соединении (Ι-а) или (1-Ь). Промежуточные соединения (ΙΙΙ-а) можно выделять из реакционной смеси с использованием общепринятых методов, и затем проводить взаимодействие выделенного промежуточного соединения (ΙΙΙ-а) с соединением (1У-а) или, дополнительно, можно проводить взаимодействие реакционной смеси, содержащей соединение (ΙΙΙ-а) с соединением ДУ-а) без выделения соединения (ΙΙΙ-а). В одном варианте осуществления, где реакцию с агентом сочетания проводят в несмешивающемся с водой растворителе, реакционную смесь, содержащую соединение (ΙΙΙ-а), можно промывать водой или слегка щелочной водой в целях удаления всех растворимых в воде побочных продуктов. Затем можно проводить взаимодействие полученного таким образом промытого раствора с соединением ДУ-а) без дополнительных стадий очистки. Выделение промежуточных соединений (ΙΙΙ-а), с другой стороны, может обеспечить определенные преимущества в том, что после необязательной дополнительной очистки можно проводить реакцию выделенного продукта с соединением (ГУ-а), получая в результате меньшее количество побочных продуктов и упрощая контроль за реакцией.

Промежуточное соединение (ΙΙΙ) можно подвергнуть сочетанию со спиртом ДУ-Ь) реакцией образования сложного эфира. Например, соединение (ΙΙΙ) и соединение ДУ-Ь) подвергают взаимодействию при одновременном удалении воды либо физически, например, при азеотропном удалении воды, или химически с использованием дегидратирующего агента. Промежуточное соединение (ΙΙΙ) также можно преобразовывать в активированную форму С-СО-Ζ, такую как активированные формы, указанные выше, и затем проводить реакцию со спиртом ЦУ-Ь). Реакции образования сложных эфиров предпочтительно проводят в присутствии основания, такого как карбонат щелочного металла или гидрокарбонат, например, гидрокарбонат натрия или калия, или третичный амин, такой как амины, приведенные в настоящем описании в отношении реакций образования амида, в частности, триалкиламин, например, триэтиламин. Растворители, которые можно использовать в реакциях образования сложного эфира, включают простые эфиры, такие как ТГФ; галогенированные углеводороды, такие как дихлорметан, СНС1₃; углеводороды, такие как толуол; полярные апротонные растворители, такие как ДМФА, ДМСО, ΌΜΑ; и подобные рас творители.

Соединения формулы (Ι), где Я² представляет собой водород, т.е. соединения (Ι-ά-4), можно получать из сложных эфиров (Ι-ά-2-а), которые представляют собой промежуточные соединения формулы (Ιά-2), где Я⁶ представляет собой С_1-4алкил, реакцией восстановления до соответствующих спиртов (Ι-ά-3), например, с комплексным гидридом металла, таким как Ь1А1Н₄ или ЫаВН₄, с последующим окислением мягким окислителем, например, МпО₂, с получением, таким образрм, промежуточных соединений (Ι-ά4).

(3-СН₂ОН

(1-4-2-а)

Соединения формулы (Ι) также можно получать взаимодействием промежуточного соединения (У) с промежуточными соединениями (У1-а)-(У1-е), как показано на представленной ниже схеме реакций, где различные радикалы имеют значения, указанные выше и С_1-4А1к представляет собой С_1-4алкандиил:

- 12 014646

X в соединении (νΐ-а) представляет собой гидроксигруппу или уходящую группу, такую как галогенид, например, бромид или хлорид, или арилсульфонильную группу, например, мезилат, трифлат или тозилат и т. п.

В одном варианте осуществления взаимодействие соединения (V) с соединением (νΐ-а) представляет собой реакцию О-арилирования, и X представляет собой уходящую группу. Данную реакцию можно проводить в соответствии со способами, описанными Е.М. §шйЬ е! а1. (Л. Меб. СНет. (1988), 31, 875-885). В частности, реакцию проводят в присутствии основания, предпочтительно сильного основания, в реакционно-инертном растворителе, например, в одном из растворителей, приведенных в отношении образования амидной связи.

В конкретном варианте осуществления взаимодействие исходного вещества (V) с соединением (VIа) проводят в присутствии основания, которое является достаточно сильным для удаления водорода из гидроксигруппы, например, гидрида щелочного или щелочно-земельного металла, такого как Ь1Н или гидрид натрия, или алкоксида щелочного металла, такого как метоксид или этоксид натрия или калия, трет-бутоксид калия, в реакционно-инертном растворителе, таком как биполярный апротонный растворитель, например, ΌΜΑ, ДМФА и т.п. Полученный в результате алкоголят подвергают взаимодействию с арилирующим агентом (VII), где X представляет собой подходящую уходящую группу, как указано выше. Преобразование соединения (V) в соединение (I) с использованием такого типа реакции Оарилирования не изменяет стереохимической конфигурации углерода, имеющего гидроксигруппу или группу -Ь-Я¹.

Альтернативно, взаимодействие соединения (V) с соединением (VI-;·!) также можно осуществлять по реакции Митсунобу (МйзипоЬи, 1981, §уп!Ье818, Лапиагу, 1-28; Яапо е! а1., Те!гаЬебгоп Ье!!., 1995, 36, 22, 3779-3792; КгсНпак е! а1., Те!гаЬебгоп Ье!!., 1995, 36, 5, 6193-6196; Я1сЬ!ег е! а1., Те!гаЬебгоп Ье!!., 1994, 35, 27, 4705-4706). Данная реакция включает обработку промежуточного соединения (V) соединением (УЕа), где X представляет собой гидроксил, в присутствии трифенилфосфина и активирующего вещества, такого как диалкилазокарбоксилат, например, диэтилазодикарбоксилат (ΌΕΑΌ), диизопропилазодикарбоксилат (ΩΜΩ) или подобные. Реакция Митсунобу изменяет стереохимическую конфигурацию углерода, имеющего гидроксигруппу или группу -Ь-Я¹.

Соединения формулы (I), где Ь представляет собой группу уретана (Ь представляет собой -ОС(=О)-ИЯ^5а-), можно получать взаимодействием соединения (V) с соединением (УВЬ) или (УЕс) в присутствии вещества для введения карбонила. Оно включает реагенты, такие как фосген или производные фосгена, такие как карбонилдиимидазол (СОЦ. В одном варианте осуществления соединение (V) подвергают взаимодействию с фосгеном, получая, таким образом, соответствующий хлорформиат, который при реакции с амином, Κ.'-ΝΗ₂ или Η-ΝΚ.^⁵³, приводит к карбаматам, т.е. Ь представляет собой -ОС(=О)NΗили -ОС(=О)NΚ^5а-. Взаимодействие хлорформиата с амином предпочтительно проводят с использованием таких растворителей и оснований, которые приведены в отношении образования амидной связи, описанного в настоящем описании ниже, в частности, таких, которые приведены в связи с взаимодействием соединения (III) с соединением (IV-;·!). Конкретные основания представляют собой карбонаты щелочных металлов или гидрокарбонаты, например, гидрокарбонат натрия или калия, или третичные амины, такие как триалкиламин, например, триэтиламин.

Реакция спирта (V) с кислотой (УЕб) приводит к сложным эфирам, т.е. Ь представляет собой -ОС(=О)-. Данную реакцию образования сложного эфира можно проводить с использованием способов, аналогичных способам, описанной для реакции соединения (III) и соединения (^-Ь). В частности, кислоту (УЕб) преобразуют в соответствующее вещество для ацилирования, например, ангидрид кислоты или галоидангидрид кислоты, например, хлорангидрид (Я¹-С(=О)С1).

Соединения формулы (I), где Ь представляет собой -О-С_1-4алкандиил-, можно получать реакцией образования простого эфира с соединением УЕе). Образование простого эфира можно проводить азеотропным удалением воды или химически, например, реакцией Вильямсона.

Альтернативно, в целях получения соединений формулы (I), сначала образуют амидную связь между структурными элементами Р2 и Р1, и затем присоединяют структурный элемент Р3 к группе Р1 в Р1Р2, с последующим образованием амидной связи между Р3 и группой Р2 в группе Р2-Р1-Р3 с одновременным замыканием кольца. Кроме того, Р1'-конец можно присоединять к структурному элементу Р1 на любой стадии синтеза соединений формулы (I), например, до или после связывания структурных элементов Р2 и Р1; до или после связывания структурного элемента Р3 с Р1; или до или после связывания

- 13 014646 структурных элементов Р3 и Р2 и одновременного замыкания кольца.

Другая альтернативная методика синтеза представляет собой образование амидной связи между структурными элементами Р2 и Р3, с последующим присоединением структурного элемента Р1 к Р3, и, наконец, с образованием амидной связи между Р1 и Р2 с одновременным замыканием кольца. Кроме того, Р1'-конец можно присоединять к структурному элементу Р1 на любой стадии синтеза соединений формулы (I), т.е., в данном случае, до или после связывания структурных элементов Р2 и Р3; до или после связывания структурных элементов Р1 и Р3; до или после связывания Р1 и Р2 с одновременным замыканием кольца.

Структурные элементы Р1 и Р3 можно связывать посредством образования двойной связи между атомами углерода 7 и 8, если необходимо, с последующим восстановлением двойной связи С₇-С₈. Образованный таким образом блок Р1-Р3 можно присоединять к структурному элементу Р2 и затем посредством образования амидных связей замыкать кольцо. В предпочтительном варианте осуществления структурный элемент Р1-Р3 не восстанавливают, а непосредственно присоединяют к Р2 и образуют кольцо с получением соединений (1-1).

Структурные элементы Р1 и Р3 в любом из предшествующих подходов можно связывать посредством образования двойной связи, например, реакцией метатезиса олефинов, описанной в настоящем описании ниже, или реакцией типа Виттига.

Отдельные структурные элементы сначала можно получать, и затем связывать друг с другом, или альтернативно, предшественники структурных элементов можно сочетать друг с другом и модифицировать на последующей стадии до требуемой молекулярной композиции.

Для того, чтобы избежать побочных реакций, функциональные группы каждого структурного элемента могут быть защищены.

Амидные связи можно образовывать с использованием стандартных способов, таких как способы, используемые для связывания аминокислоты в пептидном синтезе. Он включает связывание карбоксильной группы одного участвующего во взаимодействии вещества с аминогруппой другого участвующего во взаимодействии вещества при удалении воды с образованием соединяющей амидной связи. Образование амидной связи можно проводить взаимодействием исходных веществ в присутствии агента сочетания или преобразованием карбоксильной функциональной группы в активную форму, такую как активированный сложный эфир, смешанный ангидрид или хлорангидрид или бромангидрид карбоновой кислоты. Общее описание таких реакций сочетания и реагентов, используемых в них, можно найти в основных пособиях по химии пептидов, например, М. Войап^хку. Рерййе СйетШгу, 2ий геу. ей., 8ргтдег-Уег1ад, Вегйи, Сегтапу, (1993).

Примеры реакций сочетания с образованием амидной связи включают азидный способ, способ со смешанным ангидридом угольной-карбоновой кислоты (изобутилхлорформиатом), способ с карбодиимидом (дициклогексилкарбодиимидом, диизопропилкарбодиимидом или растворимым в воде карбодиимидом, таким как №этил-Ы'-[(3-диметиламино)пропил]карбодиимид), способ с активированным сложным эфиром (п-нитрофенильным сложным эфиром, Ν-гидроксиянтарным имидоэфиром), способ с реагентом Вудворда К, способ с 1,1-карбонилдиимидазолом (СЭ! или Ν,Ν'-карбонилдиимидазолом), способы с реагентами на основе фосфора или окислительно-восстановительные способы. Некоторые из указанных способов можно усилить добавлением подходящих катализаторов, например, добавлением 1гидроксибензотриазола, ΏΒυ (1,8-диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ена) или 4-ОМАР в способе с карбодиимидом. Следующими агентами сочетания являются гексафторфосфат (бензотриазол-1-илокси)трис(диметиламино)фосфония либо в чистом виде, либо в присутствии 1-гидроксибензотриазола или 4ЭМАР; или тетрафторборат 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-Ы,^№,№-тетраметилурония, или гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-М,^№,№-тетраметилурония. Реакции сочетания можно проводить или в растворе (жидкая фаза), или в твердой фазе.

Предпочтительно образование амидной связи проводят с использованием №этилоксикарбонил-2этилокси-1,2-дигидрохинолина (ЕЕОР) или №изобутилоксикарбонил-2-изобутилокси-1,2-дигидрохинолина (ПОР). В отличие от классических способов с ангидридами, для ЕЕОР и ПОР не требуется ни основания, ни низких температур реакции. Как правило, способ включает взаимодействие эквимолярных количеств карбоксильного и аминного компонента в органическом растворителе (можно использовать широкое множество растворителей). Затем добавляют ЕЕОР или ПЭР в избытке и смеси дают возможность перемешаться при комнатной температуре.

Реакции сочетания предпочтительно проводят в инертном растворителе, таком как галогенированные углеводороды, например, дихлорметан, хлороформ, биполярные апротонные растворители, такие как ацетонитрил, диметилформамид, диметилацетамид, ДМСО, НМРТ, простые эфиры, такие как тетрагидрофуран (ТГФ).

Во многих случаях, реакции сочетания проводят в присутствии подходящего основания, такого как третичный амин, например, триэтиламин, диизопропилэтиламин (ОГРЕА), Ν-метилморфолин, Νметилпирролидин, 4-ОМАР или 1,8-диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ен (ΏΒυ). Температура реакции может варьировать от 0 до 50°С, и время реакции может варьировать от 15 мин до 24 ч.

Для того чтобы избежать образования нежелательных связей, функциональные группы в структур

- 14 014646 ных элементах, которые связаны друг с другом, могут быть защищены. Соответствующие защитные группы, которые можно использовать, приведены, например, в Сгеепе, РгоЕесЦуе Сгоирк ίη Огдашс СйешЩгу, 1оЬп ^беу & 8опк, №\ν Уогк (1999) и ТЬе Рерйбек: Апа1ук1к, 8уп1Ьек1к, Вю1оду, Уо1. 9, Асабеш1с Ргекк, №\ν Уогк (1987).

Карбоксильные группы могут быть защищены как сложный эфир, который можно расщеплять с получением карбоновой кислоты. Защитные группы, которые можно использовать, включают 1) алкиловые сложные эфиры, такие как метиловый, триметилсилиловый и трет-бутиловый; 2) арилалкиловые сложные эфиры, такие как бензиловый и замещенный бензиловый; или 3) сложные эфиры, которые можно расщеплять мягким основанием или средствами для мягкого восстановления, такими как трихлорэтиловые и фенациловые сложные эфиры.

Аминогруппы могут быть защищены различными ^защитными группами, такими как:

1) ацильные группы, такие как формил, трифторацетил, фталил и п-толуолсульфонил;

2) группы ароматических карбаматов, такие как бензилоксикарбонил (СЬх или Ζ) и замещенные бензилоксикарбонилы, и 9-флуоренилметилоксикарбонил (Ртос);

3) группы алифатических карбаматов, такие как трет-бутилоксикарбонил (Вос), этоксикарбонил, диизопропилметоксикарбонил и аллилоксикарбонил;

4) группы циклических алкилкарбаматов, такие как циклопентилоксикарбонил и адамантилоксикарбонил;

5) алкильные группы, такие как трифенилметил, бензил или замещенный бензил, такой как 4метоксибензил;

6) триалкилсилил, такой как триметилсилил или 1.Ви-диметилсилил; и

7) содержащие тиольные группы, такие как фенилтиокарбонил и дитиасукциноил.

Представляющими интерес защитными группами амино являются Вос и Ртос.

Предпочтительно аминозащитную группу отщепляют перед следующей стадией сочетания. Удаление ^защитных групп можно проводить в соответствии с известными в данной области способами. Когда используют группу Вос, предпочтительными для выбора способами являются способ с трифторуксусной кислотой, в чистом виде или в дихлорметане, или с НС1 в диоксане или в этилацетате. Затем полученную соль аммония нейтрализуют либо до сочетания, либо ш κίΐι,ι с помощью основных растворов, таких как водные буферы, или третичные амины в дихлорметане или ацетонитриле, или диметилформамид. Когда используют группу Ртос, предпочтительными для выбора реагентами являются пиперидин или замещенный пиперидин в диметилформамиде, однако можно использовать вторичный амин. Удаление защитной группы проводят при температуре от 0°С до комнатной температуры, обычно приблизительно 15-25°С или 20-22°С.

Другие функциональные группы, которые могут препятствовать реакциям сочетания структурных элементов, также могут быть защищены. Например, гидроксильные группы могут быть защищены в виде бензиловых или замещенных бензиловых простых эфиров, например, 4-метоксибензилового простого эфира, бензоиловых или замещенных бензоиловых сложных эфиров, например, 4-нитробензоилового сложного эфира, или с помощью триалкилсилильных групп (например, триметилсилила или третбутилдиметилсилила).

Дополнительные аминогруппы могут быть защищены с помощью защитных групп, которые можно отщеплять селективно. Например, когда в качестве α-аминозащитной группы используют Вос, подходящими являются следующие защитные группы боковых цепей: п-толуолсульфонильные (тозильные) группы можно использовать для защиты дополнительных аминогрупп; бензиловые (Вп) простые эфиры можно использовать для защиты гидроксигрупп; и бензиловые сложные эфиры можно использовать для защиты дополнительных карбоксильных групп. Иными словами, когда для защиты α-амино выбирают Ртос, обычно подходящими являются защитные группы на основе трет-бутила. Например, Вос можно использовать для дополнительных аминогрупп; трет-бутиловые простые эфиры для гидроксильных групп и трет-бутиловые сложные эфиры для дополнительных карбоксильных групп.

Любую защитную группу можно удалить на любой стадии процесса синтеза, однако, предпочтительно, защитные группы любой функциональной группы, не вовлеченной в стадии реакции, удаляют после завершения образования макроцикла. Удаление защитных групп можно проводить любым способом, определяемым выбором защитных групп, хорошо известным специалистам в данной области.

Промежуточные соединения формулы (II) можно получать взаимодействием промежуточного соединения (У11) с алкенкарбоновой кислотой или ее производным (УШ), как представлено на следующей схеме реакций.

- 15 014646

Промежуточное соединение (VII) подвергают взаимодействию с алкенильной кислотой (УШ), используя реакционные методики образования амидной связи, как описано выше.

РС¹ представляет собой О-защитную группу, которая может представлять собой любую из групп, приведенных в настоящем описании, и, в частности, она представляет собой бензоильную или замещенную бензоильную группу, такую как 4-нитробензоил.

Взаимодействие соединения (VIII) с соединением (IX) приводит к промежуточным соединениям (X). Удаление защитных групп осуществляют, в частности, с использованием приведенных выше условий реакции. Например, когда РС¹ представляет собой бензоил или замещенный бензоил, указанную группу удаляют взаимодействием с гидроксидом щелочного металла (Ь10Н, №ЮН. К0Н), в частности, когда РС¹ представляет собой 4-нитробензоил, с Ы0Н, в водной среде, содержащей воду и растворимый в воде органический растворитель, такой как алканол (метанол, этанол) и ТГФ. Полученный спирт (XI) подвергают взаимодействию с промежуточными соединениями (УТ-аНУТ-е), как описано выше для взаимодействия соединения (У) с соединением (УТ-аХУГе), и данная реакция приводит к промежуточным соединениям (II).

Промежуточные соединения формулы (III) можно получать первоначальной циклизацией незамкнутого сложного эфира (XII) в макроциклический сложный эфир (XIII), который, в свою очередь, преоб-

Ь является таким, как определено выше, и РС² представляет собой защитную группу карбоксила, например, одну из защитных групп карбоксила, приведенных выше, в частности, С1-4алкиловый или бензиловый сложный эфир, например, метиловый, этиловый или трет-бутиловый сложный эфир. Преобразование соединения (X) в соединение (XI) представляет собой реакцию обмена и ее проводят, как описано выше. Группу РС² удаляют в соответствии со способами, также описанными выше. Когда группа РС¹ представляет собой С1-4алкиловый сложный эфир, ее удаляют щелочным гидролизом, например, с №0Н или предпочтительно Ь10Н, в водном растворителе, например, смеси С_1-4алканол/вода. Бензильную группу можно удалять каталитической гидрогенизацией.

В альтернативном способе синтеза промежуточные соединения (III) можно получать следующим образом:

- 16 014646

Группу РС¹ можно удалять с использованием известных в данной области способов, например, в случае метилового или этилового сложных эфиров, обработкой гидроксидом щелочного металла в водной среде, в случае трет-бутиловых сложных эфиров, слабой кислотой, и в случае бензиловых сложных эфиров, сильной кислотой, или каталитической гидрогенизацией. Когда Ь представляет собой радикал (а), данная последовательность реакций приводит к промежуточным соединениям (III). Также их можно получать удалением Ь, представляющего собой О-защитную группу, и преобразованием в простой эфир полученного таким образом спирта с помощью промежуточного соединения (VI-;·!). как описано выше.

Сначала промежуточные соединения (XIV) подвергают циклизации до макроциклического сложного эфира (XV), снятие защитных групп у соединения (XV) осуществляют путем удаления группы РС¹ с получением соединения (XVI), которое подвергают взаимодействию с промежуточными соединениями (УТ-а)-(У1-е) с получением промежуточных соединений (XIII), с последующим удалением защитной группы карбоксила РС² с получением промежуточных соединений (III). Циклизацию, удаление защитной группы РС¹ и РС² и сочетание с соединениями (УКаНУКе) можно проводить, как описано выше.

Группы К² можно вводить на любой стадии синтеза, либо в качестве последней стадии, как описано выше, либо ранее, до образования макроцикла. На представленной ниже схеме группа -ИК^2-аК^2-Ь является такой, как определено выше:

Ь и РС² являются такими, как определено выше, и Ь² представляет собой защитную группу азота

(РС, как определено выше) или Ь² представляет собой группу (Ь), где К³, К⁴ и η являются такими, как определено выше. Промежуточные соединения (ΧΙΧ-а) и (ΧΙΧ-Ь), где Ь¹ представляет собой группу (Ь), соответствуют промежуточным соединениям (II), и их можно далее обрабатывать, как описа но выше.

Сочетание структурных элементов Р1 и Р2

Структурные элементы Р1 и Р2 сочетают с использованием реакции образования амида в соответствии со способами, описанными выше. Структурный элемент Р1 может иметь защитную группу карбоксила РС² (как в (XУI-а) ) или он уже может быть связан с группой Р1' (как в ^^-^). Ь³ представляет собой гидрокси, -ОРС¹ или группу -Ь-К¹, как указано выше. Когда в какой-либо из представленных ниже схем реакций Ь³ представляет собой гидрокси, его можно защитить перед каждой стадией с образовани- 17 014646 ем группы -ОРС¹ и, если необходимо, затем снова удалить защитную группу до свободной гидрокси функциональной группы. Аналогично, функциональную гидроксигруппу можно преобразовать в группу -Ь-К¹.

В способе по указанной выше схеме циклопропиловую аминокислоту (ХХВа) или (ХХВЬ) сочетают с функциональной группой кислоты структурного элемента Р2 с использованием реакции образования амида, такой как стандартные условия сочетания пептидов, описанные выше. Получают промежуточные соединения (XVII) или (XXII). Некоторые из них соответствуют промежуточным соединениям (ХЕХ-а) или (ХГХ-Ь) на предыдущей схеме реакций. Удаление защитной группы кислоты в соединении (XVII), с использованием условий, соответствующих используемой защитной группе, с последующим сочетанием с амином ННК^2-аК^2-Ь (IV-;) или с НОК⁶ (Ш-Ь), как описано выше, снова приводит к промежуточным соединениям (ХХП), где -СОК² представляют собой амидную или сложноэфирную группы.

В одном варианте осуществления Ь² представляет собой группу (Ь) и указанные реакции включают сочетание Р1 с Р2-Р3, которое приводит к промежуточным соединениям (Х) или (II), указанным выше. В другом варианте осуществления Ь² представляет собой Ν-защитную группу РС, которая является такой, как определено выше, и реакция сочетания приводит к промежуточному соединению (ХХП-а), из которого можно удалить группу РС с получением промежуточных соединений (ХУП-а), которые представляют собой промежуточные соединения (ХУЛ), как описано выше, где Ь² представляет собой водород, с использованием условий реакции, также приведенных выше:

В одном варианте осуществления РС в данной реакции представляет собой группу ВОС. Когда, кроме того, Ь представляет собой гидрокси, исходное вещество представляет собой Вос-1гидроксипролин. В указанных выше схемах, группа Ь³ может представлять собой группу -О-РС¹, которую вводят в исходное вещество (ХХ), где Ь³ представляет собой гидрокси. В этом примере РС¹ выбирают таким образом, чтобы происходило селективное расщепление по группе РС.

Сочетание структурных элементов Р3 и Р2

Структурные элементы Р3 и Р2 связывают с использованием реакции образования амида в соответствии со способами, описанными выше для сочетания соединения (VII) с соединением (VIII). Основной процесс показан на представленной ниже схеме реакций, где Ь³ является таким, как определено выше, и Ь⁴ представляет собой группу -О-РС², или группу

- 18 014646

Когда Ь⁴ в соединении (XXIII) представляет собой группу -ОРС², РС² можно удалить и полученную кислоту можно подвергнуть сочетанию с циклопропиловыми аминокислотами (ХХГа) или (ХХГЬ), с образованием промежуточных соединений (XVII) или (XXII), где Ь² представляет собой радикал (Ь).

Структурные элементы Р1, Р1', Р2 и Р3, используемые для получения соединений формулы (I), можно получать, начиная с известных в данной области промежуточных соединений. Ряд таких способов синтеза описан более подробно в настоящем описании ниже.

Синтез структурных элементов Р2

Структурные элементы Р2 содержат группу пирролидина, замещенную группой -Ь-Κ¹. Группу Κ можно сочетать с кольцом пирролидина на любой подходящей стадии синтеза соединений в соответствии с настоящим изобретением. Один подход представляет собой первоначальное сочетание группы Κ¹ с пирролидиновым кольцом и последовательное добавление других требуемых структурных элементов, т.е. Р1 (необязательно с Р1'-концом) и Р3, с последующим образованием макроцикла. Другой подход состоит в сочетании структурных элементов Р2, не имеющих заместителя Κ¹, с каждым из Р1 и Р3, и добавлении группы Κ¹ либо до, либо после образования макроцикла.

Структурные элементы Р2 можно получать при взаимодействии производного гидроксипролина (XXV) с промежуточными соединениями ('У-аУСУ-е), как описано выше для синтеза (I), начиная с соединения (V). Данная реакция представлена ниже на схеме, где Ь⁵ представляет собой гидрокси или группу -ОРС², или Ь⁵ может представлять собой группу Р1, такую как группы (Ь) и (с), как описано выше, и где дополнительно группы Ь² и РС² являются такими, как указано выше. В одном варианте осуществления Ь² представляет собой РС, т.е. Ν-защитную группу

В одном варианте осуществления группа Ь² представляет собой группу РС, которая является третбутоксикарбонилом (Вос), Ь⁵ представляет собой гидрокси, и исходное вещество (XXV) является коммерчески доступным Вос-гидроксипролином или любой другой его стереоизомерной формой, например, Вос-1-гидроксипролином, в частности, его трансизомером.

Когда Ь⁵ в соединении (XXVI) представляет собой -ОРС², защитную группу карбоксила можно удалять в соответствии со способами, описанными выше, с образованием производных гидроксипролина (XXVII). В одном варианте осуществления Ь² представляет собой Вос, и Ь⁵ представляет собой -ОРС², где РС² является сложным низшим алкиловым эфиром, в частности, метиловым или этиловым сложным эфиром. Гидролиз сложных эфиров до кислоты можно проводить стандартными способами, например, кислотным гидролизом хлористо-водородной кислотой в метаноле или этаноле с гидроксидом щелочного металла, таким как №ОН, в частности, ЫОН.

Промежуточные соединения (У-а), (У-Ь), (У-с), (У!-б) и (УЕ-е) представляют собой известные в данной области соединения или их можно получать в соответствии с известными в данной области способами с использованием известных исходных веществ.

Промежуточные соединения (У-а), которые представляют собой производные хинолина, такие как соединения, где Κ¹ представляет собой радикал (6-1), (6-2), (6-3), (6-4), (6-4-а), (6-5) или (6-5-а), как описано выше, можно получать, как представлено ниже:

- 19 014646

Ацилирование Фриделя-Крафтса 3-метоксианилина (XXVIII), доступного либо коммерчески, либо с помощью известных в данной области способов, с использованием ацилирующего агента, такого как ацетилхлорид или подобные, в присутствии одной или нескольких кислот Льюиса, таких как трихлорид бора и трихлорид алюминия, в растворителе, таком как дихлорметан, приводит к соединению (XXIX). Сочетание соединения (XXIX) с 4-изопропилтиазол-2-карбоновой кислотой (XXX), предпочтительно в щелочных условиях, таких как пиридин, в присутствии активирующего агента для карбоксилатной группы, например, РОС1₃, с последующей циклизацией и дегидратацией в щелочных условиях, таких как трет-бутоксид калия в трет-бутаноле, приводит к производному хинолина (^-а-1). Его можно преобразовать в соединение (^-а-2), где ЬС представляет собой уходящую группу, например, взаимодействием соединения (VI-;·!-1) с галогенирующим агентом, например, фосфорилхлоридом или подобным, или арилсульфонилхлоридом, например, тозилхлоридом.

Замещенные анилины (XXVIII) коммерчески доступны или их можно получить из подходящей замещенной бензойной кислоты (XXXII), которую подвергают взаимодействию с дифенилфосфорилазидом при повышенной температуре, и затем обрабатывают С_1-4алканолом, в частности, трет-бутанолом, с получением С_1-4алкоксикарбониламинов, таких как соединение (XXXIII). Удаление защитной группы из соединения (XXXIII) приводит к замещенным анилинам (XXVIII).

(χχχιΐ) (ХХХИ1) (χχνιιΐ)

Альтернативно, замещенные анилины (XXVIII) можно получать из соответствующих замещенных нитробензолов восстановлением их элементарным цинком, оловом или железом в присутствии кислоты.

В указанном выше синтезе можно использовать множество карбоновых кислот с общей структурой (XXX). Такие кислоты либо коммерчески доступны, либо их можно получать с помощью известных в данной области способов. Пример получения производных 2-(замещенного)аминокарбоксиаминотиазола, следуя методике, описанной Вегб1кй1иа с( а1. ίη Сйет. Не1етосус1. Сошрб. (Еид1. ТтапД.) (1991), 427-433, показан на представленной ниже схеме реакций, которая иллюстрирует получение 2-карбокси4-изопропилтиазола (ХХХ-а):

Этилтиооксамат (XXXIV) подвергают взаимодействию с β-бромкетоном (XXXV) с получением сложного эфира тиазолилкарбоновой кислоты (XXXVI), который гидролизуют до соответствующей кислоты (ХХХ-а). Этиловый сложный эфир в таких промежуточных соединениях можно заменять другими защитными группами карбоксила РС², как определено выше.

Бромкетон (XXXV) можно получать из 3-метилбутан-2-она (ΜΙΚ) с помощью силилирующего агента (такого как ТМ8С1) в присутствии подходящего основания (в частности, ЬтНМОЗ) и брома.

Промежуточные соединения (XXVIII), имеющие заместитель метокси, где указанные промежуточные соединения соответствуют формуле (XXVIII-;), можно получать, как описано Βτονη е( а1. I. Меб. Сйет. 1989, 32, 807-826, или как показано на представленной ниже схеме.

Исходные вещества этилацетилацетат и этоксиметиленмалононитрил, которые являются коммерчески доступными, подвергают взаимодействию в присутствии подходящего основания, такого как этоксид натрия, и растворителя, такого как этанол и т.п. Данная реакция приводит к промежуточному соединению (XXXVI). Его гидролизуют, например, основанием, таким как гидроксид щелочного металла, например, ΝαΟΗ или Ь1ОН, в подходящем растворителе, таком как этанол/вода, с получением (XXXVII). Декарбоксилирование промежуточного соединения (XXXVII) до промежуточного соединения (XXXVIII) проводят при повышенной температуре до прекращения выделения газа, предпочтительно в присутствии

- 20 014646 основного растворителя, такого как хинолин. Метилирование промежуточного соединения (XXXУIII), в частности, метилирующим агентом, таким как Меф в присутствии подходящего основания (например, К₂С0₃) в подходящем растворителе (таком как ДМФА и т.п.) приводит к соединению (XXXIX). Его подвергают взаимодействию с реагентом Гриньяра, таким как МеМдВг, в присутствии подходящего растворителя (например, ТГФ), с последующим гидролизом, например, водным раствором НС1, с получением промежуточного соединения (XXУIII-а).

Синтез дополнительных карбоновых кислот (XXX), в частности, замещенных аминотиазолкарбоноваых кислот (ХХХ-Ь) представлен ниже:

(Χί) рЯ.1) (ХЫ1) ⁰ (ХХХ-Ь)

Тиомочевину (КЬИ) с различными алкильными заместителями К' можно получать взаимодействием соответствующего амина (КЪ) с трет-бутилизотиоцианатом в присутствии основания, такого как диизопропилэтиламин, в растворителе, таком как дихлорметан, с последующим удалением трет-бутильной группы в кислотных условиях. Последующая конденсация производного тиомочевины ^ΕΠ) с 3бромпировиноградной кислотой приводит к тиазолкарбоновой кислоте (ХХХ-Ь).

Соединения по настоящему изобретению или структурные элементы Р2, где гетероциклическая группа К¹ присоединена через азот кольца непосредственно к кольцу пирролидина, т.е. Ь представляет собой прямую связь в общей формуле (I), можно получать, например, с использованием реакции замещения, где подходящую уходящую группу на кольце пирролидина заменяют содержащей азот циклической группой. Это можно осуществлять на стадии структурного элемента или после сборки и/или циклизации структурных элементов. В одном способе производное пирролидина (У), (XI), ^^), (XXV) или любое промежуточное соединение, имеющее группу Ь³, которая представляет собой гидрокси, подвергают взаимодействию с вводящим уходящую группу реагентом, таким как галогенирующий агент, например, фосфорилхлорид или подобные, или арилсульфонилхлорид, например, с тозилхлоридом. Полученное таким образом промежуточное соединение затем подвергают взаимодействию с гетероциклом, имеющим азот в кольце, замещенный водородом (т.е. Ν-Н).

Соединения формулы (I), где Ь представляет собой прямую связь, и К¹ представляет собой кольцевую систему, соединенную с группой пирролидина через атом углерода, можно получать образованием кольца, исходя из гидрокси-соединений. Это можно осуществлять либо на стадии структурного элемента, либо после сборки и/или циклизации структурных элементов. Например, функциональную гидроксигруппу можно преобразовывать в уходящую группу, которая, в свою очередь, замещена цианогруппой. Эту цианогруппу, в свою очередь, можно далее преобразовывать в требуемые гетероциклы. Например, соединения, где производное тетразола присоединяют через атом углерода тетразольного кольца, удобно получать встраиванием тетразольной группы непосредственно в предшественник кольца пирролидина. Это можно осуществлять, например, конденсацией с последующим введением цианогруппы путем взаимодействия с азидным реагентом, таким как азид натрия. Производные триазола также можно встраивать непосредственно в предшественник содержащего азот кольца, например, преобразованием гидроксигруппы предшественника, содержащего азот кольца, в азидную группу с последующим взаимодействием циклоприсоединения 3+2 полученного азида с подходящим производным алкина.

Структурно разнообразные тетразолы для применения в указанных выше реакциях введения группы К¹ можно получать взаимодействием коммерчески доступных соединений нитрила с азидом натрия. Производные триазола можно получать взаимодействием соединения алкина и триметилсилилазида. Подходящие соединения алкинов либо коммерчески доступны, либо их можно получать, например, в соответствии с реакцией ЗоподакЫта, т.е. взаимодействием первичного алкина, арилгалогенида и триэтиламина в присутствии РбС1₂(РРй)₃ и СиГ как описано, например, А. Е1апдоуап, Υ.-Н. ^апд, Т.-Е Но, 0гд. Ье!!., 2003, 5, 1841-1844. Гетероциклический заместитель также можно модифицировать при присоединении к структурному элементу Р2 либо до, либо после связывания структурного элемента Р2 с другими структурными элементами.

Дополнительные альтернативы для получения соединений, где Ь представляет собой связь и К¹ представляет собой необязательно замещенный гетероцикл, можно найти, например, в \У0 2004/072243.

Синтез структурных элементов Р1

Циклопропановая аминокислота, используемая для получения фрагмента Р1, коммерчески доступна или ее можно получать с использованием известных в данной области способов.

Аминовинилциклопропилэтиловый сложный эфир (ΥΝ^) можно получать, следуя методике, описанной в \У0 00/09543, или как показано на представленной ниже схеме, где РС² представляет собой защитную группу карбоксила, как описано выше:

- 21 014646

Обработка коммерчески доступного или легко получаемого имина (ХЬШ) 1,4-дигалобутеном в присутствии основания приводит к соединению (ХЫУ), которое после гидролиза приводит к циклопропиловой аминокислоте (ХХПа), имеющей аллильный заместитель в син-конформации относительно карбоксильной группы. Разделение энантиомерной смеси (ХХПа) приводит к соединению (ХХПа-1). Разделение проводят с использованием известных в данной области методов, таких как ферментативное разделение; кристаллизация с хиральной кислотой; или химическое преобразование в производное; или посредством хиральной колоночной хроматографии. Промежуточные соединения (ХХПа) или (ХХПа-1) можно подвергнуть сочетанию с образованием соответствующих производных пролина, как описано выше.

Введение Ν-защитной группы РО и удаление РО² приводит к циклопропильным аминокислотам (ХХПс), которые преобразуют в амиды (ХХПЬ-1) или сложные эфиры (ХХПЬ-2), как показано в представленной ниже схеме реакций, где В^2-а, В^2-Ь и РО являются такими, как описано выше.

2-Ь

Взаимодействие соединения (ХХРс) с амином ДУ-а) представляет собой реакцию образования амида. Аналогичное взаимодействие с соединением ДУ-Ь) представляет собой реакцию образования сложного эфира. Обе реакции можно проводить в соответствии с описанными выше способами. Данная реакция приводит к промежуточным соединениям (ХХТ-б-1) или (ХХРб-2), из которых аминозащитную группу удаляют стандартными способами, такими как способы, описанные выше. Это, в свою очередь, приводит к требуемому промежуточному соединению (ХХЬЬ-1). Исходные вещества (ХХИс) можно получать из промежуточных соединений (ХХИа) первоначальным введением Ν-защитной группы РО с последующим удалением группы РО².

В частности, реакцию соединения (ХХИс) с соединением ДУ-а) проводят путем обработки аминокислоты агентом сочетания, например, Ν,Ν'-карбонилдиимидазолом (СИД или подобным, в растворителе, таком как ТГФ, с последующим взаимодействием с соединением ДУ-а) в присутствии основания, такого как 1,8-диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ен (ИБИ). Альтернативно, аминокислоту можно обрабатывать соединением ДУ-а) в присутствии основания, такого как диизопропилэтиламин, с последующей обработкой агентом сочетания, таким как гексафторфосфат бензотриазол-1-илокси-трис-пирролидинофосфония (коммерчески доступный как РуВОР®), для введения сульфонамидной группы.

Промежуточные соединения (ХХПЬ-1) или (ХХПЬ-2), в свою очередь, можно подвергнуть сочетанию с соответствующими производными пролина, как описано выше.

Синтез структурных элементов Р3

Структурные элементы Р3 являются коммерчески доступными или их можно получать в соответствии со способами, известными специалисту в данной области. На представленной ниже схеме показано получение структурных элементов Р3.

Сложный эфир (ХЬУ) можно преобразовать в соответствующую кислоту (IX) гидролизом в присутствии кислоты или основания. В³, В⁴ и η являются такими, как определено выше.

Сочетание соответствующего структурного элемента Р3 с группой Р2-Р1 или с группой Р2 отдельно

- 22 014646 можно проводить посредством образования амидной связи, как описано выше (реакция соединения (ΧΧΙΙΙ) с соединением (ΙΧ)).

Сочетание структурного элемента Р3 с группой Р1 отдельно (с Р1'-концом или без него) можно проводить посредством реакции метатезиса олефинов, как описано в настоящем описании выше.

Соединения формулы (Ι) можно преобразовать друг в друга в соответствии с известными в данной области реакциями преобразования функциональных групп.

Соединения формулы (Ι) можно преобразовывать в соответствующие формы Ν-оксидов в соответствии с известными в данной области способами преобразования трехвалентного азота в его форму Νоксида. Указанную реакцию Ν-окисления можно, особенно, проводить взаимодействием исходного вещества формулы (Ι) с подходящим органическим или неорганическим пероксидом. Подходящие неорганические пероксиды включают, например, пероксид водорода, пероксиды щелочных металлов или щелочно-земельных металлов, например пероксид натрия, пероксид калия; подходящие органические пероксиды могут включать пероксикислоты, например, такие как бензолкарбопероксокислота или замещенная галогеном бензолкарбопероксокислота, например 3-хлорбензолкарбопероксокислота, пероксоалкановые кислоты, например пероксоуксусная кислота, алкилгидропероксиды, например третбутилгидропероксид. Подходящие растворители представляют собой, например, воду, низшие спирты, например, этанол и т.п., углеводороды, например толуол, кетоны, например 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например дихлорметан, и смеси таких растворителей.

Стереохимически чистые изомерные формы соединений формулы (Ι) можно получать с применением известных в данной области способов. Диастереомеры можно разделять физическими методами, такими как селективная кристаллизация, и хроматографическими методами, например противоточное распределение, жидкостная хроматография и т. п.

Соединения формулы (Ι) можно получать в виде рацемических смесей энантиомеров, которые можно отделять друг от друга в соответствии с известными в данной области методами разделения. Рацемические соединения формулы (Ι), которые являются достаточно основными или кислыми, можно преобразовать в соответствующие диастереомерные солевые формы взаимодействием с подходящей хиральной кислотой, хиральным основанием, соответственно. Указанные диастереомерные солевые формы затем разделяют, например, селективной или фракционированной кристаллизацией, и энантиомеры выделяют из них с помощью щелочи или кислоты. Альтернативные методы разделения энантиомерных форм соединений формулы (Ι) включают жидкостную хроматографию, в частности, жидкостную хроматографию с использованием хиральной неподвижной фазы. Указанные стереохимически чистые изомерные формы также можно получать из соответствующих стереохимически чистых изомерных форм подходящих исходных веществ при условии, что реакция происходит стереоспецифически. Предпочтительно, если требуется конкретный стереоизомер, указанное соединение можно синтезировать стереоспецифическими способами получения. В таких способах преимущественно могут использоваться энантиомерно чистые исходные вещества.

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (Ι), как описано в настоящем описании, или соединение любой подгруппы соединений формулы (Ι), как описано в настоящем описании, и фармацевтически приемлемый носитель. Терапевтически эффективное количество в данном случае представляет собой количество, достаточное для профилактического воздействия на вирусную инфекцию, для стабилизации или уменьшения вирусной инфекции, и, в частности, вирусной инфекции НСУ, у инфицированных субъектов или субъектов, обладающих риском инфицирования. В следующем аспекте настоящее изобретение относится к способу получения фармацевтической композиции, как описано в настоящем описании, который включает однородное смешивание фармацевтически приемлемого носителя с терапевтически эффективным количеством соединения формулы (Ι), как описано в настоящем описании, или соединения любой подгруппы соединений формулы (Ι), как описано в настоящем описании.

Таким образом, для целей введения соединения по настоящему изобретению или любую их подгруппу можно составлять в различные фармацевтические формы. В качестве подходящих композиций можно назвать все композиции, обычно используемые для системного введения лекарственных средств. Для получения фармацевтических композиций по настоящему изобретению эффективное количество конкретного соединения, необязательно в форме аддитивной соли или комплекса с металлом, в качестве активного ингредиента смешивают в однородную смесь с фармацевтически приемлемым носителем, который может находиться в различных в формах в зависимости от требуемого препарата для введения. Желательно, чтобы фармацевтические композиции были представлены в единичной дозированной форме, в частности, для орального, ректального, подкожного введения или для парентеральной инъекции. Например, для получения композиций в оральной дозированной форме можно использовать любую обычную фармацевтическую среду, например, такую как вода, гликоли, масла, спирты и т. п. в случае оральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, лубриканты, связующие вещества, дезинтегрирующие вещества и т.п. в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Вследствие простоты введения, таблетки

- 23 014646 и капсулы представляют собой наиболее предпочтительные оральные единичные дозированные формы, в случае которых обычно используют твердые фармацевтические носители. В случае парентеральных композиций, носитель, как правило, содержит, стерильную воду, составляющую по меньшей мере большую его часть, хотя в него могут быть включены другие ингредиенты, например, для обеспечения растворимости. Например, можно получать инъецируемые растворы, в которых носитель содержит физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Также можно получать инъецируемые суспензии, в случае которых можно использовать подходящие жидкие носители, суспендирующие вещества и т.п. Также рассматривают препараты в твердой форме, которые необходимо превращать, непосредственно перед применением, в препараты в жидкой форме. В композициях, подходящих для чрескожного введения, носитель необязательно содержит усиливающее проникновение вещество и/или подходящее смачивающее вещество, необязательно в комбинации с подходящими добавками любой структуры в небольших пропорциях, которые не оказывают значительных неблагоприятных эффектов на кожу.

Соединения по настоящему изобретению также можно вводить посредством оральной ингаляции или инсуффляции с помощью способов и составов, используемых в данной области для введения таким способом. Таким образом, главным образом, соединения по настоящему изобретению можно вводить в легкие в форме раствора, суспензии или сухого порошка, где раствор является предпочтительным. Для введения представленных соединений пригодна любая система, сконструированная для доставки растворов, суспензий или сухих порошков посредством оральной ингаляции или инсуффляции.

Таким образом, настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, адаптированной для введения посредством ингаляции или инсуффляции через полость рта, содержащей соединение формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель. Соединения по настоящему изобретению можно вводить посредством ингаляции раствора в распыленных или пульверизованных дозах.

Особенно предпочтительным является составление приведенных выше фармацевтических композиций в единичную дозированную форму для простоты введения и единообразия дозирования. Как использовано в настоящем описании, единичная дозированная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз, где каждая единица содержит определенное количество активного ингредиента, вычисленное для обеспечения требуемого терапевтического эффекта, совместно с требуемым фармацевтическим носителем. Примерами таких единичных дозированных форм являются таблетки (включая таблетки с насечкой или таблетки, имеющие покрытие), капсулы, пилюли, суппозитории, пакеты с порошком, вафли, инъецируемые растворы или суспензии и т.п., и отдельные их типы.

Соединения формулы (I) обладают противовирусными свойствами. Вирусные инфекции и ассоциированные с ними заболевания, подвергаемые лечению с использованием соединений и способов по настоящему изобретению, включают инфекции, вызываемые НСУ и другими патогенными флавивирусами, такими как вирусы желтой лихорадки, лихорадки денге (типов 1-4), энцефалита Сент-Луис, японского энцефалита, энцефалита долины Муррей, вирус лихорадки западного Нила и Кунжин. Заболевания, обусловленные НСУ, включают прогрессирующий фиброз печени, воспаление и некроз, ведущие к циррозу, заболевание печени последней стадии и НСС; и, в случае других патогенных флавивирусов, заболевания включают желтую лихорадку, лихорадку денге, геморрагическую лихорадку и энцефалит. Более того, некоторые соединения по настоящему изобретению являются активными в отношении мутантных штаммов НСУ. Кроме того, некоторые соединения по настоящему изобретению обладают благоприятным фармакокинетическим профилем и обладают привлекательными свойствами с точки зрения биодоступности, включая приемлемое время полужизни, АИС (площадь под кривой) и максимальные значения, и лишены неблагоприятных эффектов, таких как недостаточное быстрое начало действия и задерживание в тканях.

Противовирусную активность соединений формулы (I) в отношении НСУ тестировали в клеточной системе репликона НСУ на основе ЬоЬтапи е1 а1. (1999) Заепсе 285:110-113, с дополнительными модификациями, описанными Кпедег е1 а1. (2001) 1оигпа1 о£ У1го1оду 75: 4614-4624, которые далее проиллюстрированы в разделе Примеры. Несмотря на то что такая модель не является полной моделью инфекции НСУ, она широко распространена в качестве наиболее надежной и эффективной модели автономной репликации РНК НСУ, доступной в настоящее время. Соединения, обладающие активностью против НСУ на данной клеточной модели, рассматривают в качестве кандидатов для дальнейшей разработки для лечения инфекции НСУ у млекопитающих. Следует понимать, что важно отличать соединения, которые специфично препятствуют функционированию НСУ, от соединений, которые оказывают цитотоксические или цитостатические эффекты на модели репликона НСУ и вследствие этого приводят к снижению РНК НСУ или концентрации связанного с ней репортерного фермента. В данной области известны способы анализа для оценки клеточной цитотоксичности на основе, например, активности митохондриальных ферментов с использованием флуорогенных окислительно-восстановительных красителей, таких как резазурин. Более того, существуют способы скрининга с подсчетом клеток, для оценки неселективного ингибирования активности связанного репортерного гена, такого как ген люциферазы светляков. Подходящие типы клеток можно адаптировать посредством стабильной трансфекции люциферазным репор- 24 014646 терным геном, экспрессия которого зависит от конститутивно активного промотора гена, и такие клетки можно использовать в качестве способа скрининга с подсчетом для устранения неселективных ингибиторов.

Вследствие их противовирусных свойств, в частности, их свойств, направленных против НСУ, соединения формулы (I) или любая их подгруппа, их №оксиды, аддитивные соли, четвертичные амины, комплексы с металлами и стереохимически изомерные формы, являются полезными для лечения индивидуумов, имеющих вирусную инфекцию, в частности, инфекцию НСУ, и для профилактики таких инфекций. Как правило, соединения по настоящему изобретению могут быть полезными для лечения теплокровных животных, инфицированных вирусами, в частности, флавивирусами, такими как НСУ.

Соединения по настоящему изобретению или любую их подгруппу, таким образом, можно использовать в качестве лекарственных средств. Указанное применение в качестве лекарственного средства или способ лечения включает системное введение инфицированным вирусом субъектам или восприимчивым к вирусным инфекциям субъектам количества, эффективного для борьбы с состояниями, обусловленными вирусной инфекцией, в частности, инфекцией НСУ.

Настоящее изобретение также относится к применению представленных соединений или любой их подгруппы для изготовления лекарственного средства для лечения или профилактики вирусных инфекций, в частности, инфекции НСУ.

Более того, настоящее изобретение относится к способу лечения теплокровного животного, инфицированного вирусом или обладающего риском инфицирования вирусом, в частности, НСУ, где указанный способ включает введение эффективного против вируса количества соединения формулы (I), как описано в настоящем описании, или соединения любой подгруппы соединений формулы (I), как описано в настоящем описании.

Также в качестве лекарственного средства в комбинированной терапии можно использовать комбинацию ранее известного соединения против НСУ, например, такого как интерферон-α (О-а), пегилированный интерферон-α и/или рибавирин, и соединения формулы (I). Термин комбинированная терапия относится к продукту, содержащему модулирующее (а) соединение формулы (I), и (Ь) необязательно другое соединение против НСУ, в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении инфекций НСУ, в частности, для лечения инфекций НСУ.

Соединения против НСУ включают средства, выбранные из ингибитора полимеразы НСУ, ингибитора протеазы НСУ, ингибитора другой мишени в жизненном цикле НСУ, и иммуномодулирующего средства, противовирусного средства и их комбинаций.

Ингибиторы полимеразы НСУ включают, но не ограничиваются ими, NΜ283 (валопицитабин), Р803, 1ТК-109, 1ТК-003, НСУ-371, НСУ-086, НСУ-796 и Р-1479.

Ингибиторы протеаз НСУ (ингибиторы N82^83 и ингибиторы №3-№4А) включают, но не ограничиваются ими, соединения АО02/18369 (см., например, стр. 273, строки 9-22 и со стр. 274, строки 4 до стр. 276, строки 11); ΒI^N-2061, УХ-950, С8-9132 (АСН-806), 8СН-503034, и 8СН-6. Следующие средства, которые можно использовать, представляют собой средства, описанные в XVО 98/17679, XVО 00/056331 (Уейех); XVО 98/22496 (РосЬе); ХХ'О 99/07734 (ВоеЬппдег ЬдеШета), АО 2005/073216, ХХ'О 2005073195 (МебМг) и структурно сходные средства.

Ингибиторы других мишеней в жизненном цикле НСУ, включают ингибиторы хеликазы N83; ингибиторы металлопротеиназ; ингибиторы на основе антисмысловых олигонуклеотидов, такие как ^^14803, АУТ-4065 и т.п.; к^РNΑ, такие как 8IРР^ΕX-140-N и т.п.; кодируемая вектором короткая шпилечная РНК (кйРNΑ); ДНКзимы; НСУ-специфичные рибозимы, такие как гептазим, РРР13919 и т.п.; ингибиторы проникновения, такие как НереХ-С, НиМах-НерС и т.п.; ингибиторы альфа-глюкозидазы, такие как целгосивир, ИТ-23 Ш и т.п.; КРЕ-02003002 и ΒIУN 401.

Иммуномодулирующие средства включают, но не ограничиваются ими; природные и рекомбинантные соединения изоформ интерферона, включая а-интерферон, β-интерферон, γ-интерферон, ω-интерферон и т.п., такие как Интрон А®, Роферон-А®, Канферон-А300®, Адваферон®, Инферген®, Гумоферон®, Сумиферон МР®, Альфаферон®, Щебета®, Ферон® и т.п.; модифицированные посредством полиэтиленгликоля (пегилированные) соединения интерферона, такие как РЕС интерферон-а-2а (Пегасис®), РЕС интерферон-а-2Ь (РЕС-Интрон®), пегилированный Ш№а-соп1 и т.п.; длительно действующие препараты и производные соединений интерферона, такие как конденсированный с альбумином альбуферон а и т.п.; соединения, которые стимулируют синтез интерферона в клетках, такие как резиквимод и т.п.; интерлейкины; соединения, которые усиливают развитие ответа Т-хелперов 1 типа, такие как 8СУ-07 и т.п.; агонисты ТОЬЬ-подобного рецептора, такие как СрС-10101 (актилон), исаторибин и т.п.; тимозин а-1; ΑNΑ-245; ΑNΑ-246; гистамина дигидрохлорид; пропагерманий; тетрахлордекаоксид; амплиген; IМР-321; КР№7000; антитела, такие как сивасир, ХТЬ-6865 и т.п.; и профилактические и терапевтические вакцины, такие как IηηоУас С, НСУ Е1Е2/МР59, и т.п.

Другие противовирусные средства включают, но не ограничиваются ими, рибавирин, амантадин, вирамидин, нитазоксанид; телбувидин; NОУ-205; тарибавирин; ингибиторы связывания собственных

- 25 014646 рибосом; вирусные ингибиторы широкого спектра, такие как ингибиторы ИМРЭН (например, соединения по И8 5807876, И8 6498178, И8 6344465, И8 6054472, ХХ'О 97/40028, ХХ'О 98/40381, ХХ'О 00/56331, и микофеноловая кислота и их производные, и включая, но не ограничиваясь ими, 7X^50, меримеподиб (VX-497), VX-148 и/или VX-944); или комбинации любых из указанных выше средств.

Таким образом, для борьбы с инфекциями или лечения инфекций ΗСV, соединения формулы (I) можно совместно вводить, например, с интерфероном-α (О-а), пегилированным интерфероном-а и/или рибавирином, а также с лекарственными средствами на основе антител, нацеленных против эпитопов ΗСV, малых интерферирующих РНК (δίΚΝΑ), рибозимов, ДНКзимов, антисмысловой РНК, низкомолекулярных антагонистов, например, протеазы N83, хеликазы N83 и полимеразы Νδ5Β.

Таким образом, настоящее изобретение относится к применению соединений формулы (I) или любой их подгруппы, как определено выше, для изготовления лекарственного средства, полезного для ингибирования активности ΗСV у млекопитающего, инфицированного вирусами ΗСV, где указанное лекарственное средство используют в комбинированной терапии, где указанная комбинированная терапия предпочтительно включает соединение формулы (I) и другое ингибирующее ΗСV соединение, например, (пегилированный) ΙΡΝ-α и/или рибавирин.

В другом аспекте предусмотрены комбинации соединения формулы (I), как описано в настоящем описании, и соединения против НУ. Последние предпочтительно представляют собой ингибиторы НУ, которые оказывают положительный эффект на метаболизм лекарственного средства и/или обладают фармакокинетикой, которая повышает биодоступность. Примером такого ингибитора НУ является ритонавир.

По существу, настоящее изобретение далее относится к комбинации, содержащей (а) ингибитор протеазы НСV Ν83/4α формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль; и (Ь) ритонавир или его фармацевтически приемлемую соль.

Соединение ритонавир и его фармацевтически приемлемые соли и способы их получения описаны в \УО 94/14436. Для предпочтительных дозированных форм ритонавира см. И8 6037157 и документы, цитированные в нем: И8 5484801, И8 08/402690, XVО 95/07696 и XVО 95/09614. Ритонавир имеет следующую формулу:

В следующем варианте осуществления комбинация, содержащая (а) ингибитор протеазы НСV Ν83/4α формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль; и (Ь) ритонавир или его фармацевтически приемлемую соль; дополнительно содержит дополнительное соединение против НСV, выбранное из соединений, как описано в настоящем описании.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ получения комбинации, как описано в настоящем описании, включающий стадию объединения ингибитора протеазы НСV Ν83/4α формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли и ритонавира или его фармацевтически приемлемой соли. Альтернативный вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу, где комбинация содержит одно или несколько дополнительных средств, как описано в настоящем описании.

Комбинации по настоящему изобретению можно использовать в качестве лекарственных средств. Указанное применение в качестве лекарственного средства или способ лечения включают системное введение инфицированным НСV субъектам количества, эффективного для борьбы с состояниями, обусловленными НСV и другими патогенными флавивирусами и пестивирусами. Таким образом, комбинации по настоящему изобретению можно использовать для изготовления лекарственного средства, полезного для лечения, профилактики инфекции или для борьбы с инфекцией или заболеванием, обусловленным инфекцией НСV у млекопитающего, в частности, для лечения состояний, обусловленных НСV и другими патогенными флавивирусами и пестивирусами.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрена фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию в соответствии с любым одним из вариантов осуществления, описанных в настоящем описании, и фармацевтически приемлемый эксципиент. В частности, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей:

(a) терапевтически эффективное количество ингибитора протеазы НСV Ν83/4α формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, (b) терапевтически эффективное количество ритонавира или его фармацевтически приемлемой соли, и (c) фармацевтически приемлемый эксципиент. Необязательно, фармацевтическая композиция дополнительно содержит дополнительное средство, выбранное из ингибитора полимеразы НСУ ингибито

- 26 014646 ра протеазы НСV, ингибитора другой мишени в жизненном цикле НСV, и иммуномодулирующее средство, противовирусное средство и их комбинации.

Композиции можно составлять в подходящие фармацевтические дозированные формы, такие как дозированные формы, описанные выше. Каждый активный ингредиент можно составлять отдельно и препараты вводить совместно или может быть предоставлен один препарат, содержащий оба ингредиента и, если желательно, дополнительные активные ингредиенты.

Как использовано в настоящем описании, подразумевается, что термин композиция включает продукт, содержащий указанные ингредиенты, а также любой продукт, к которому приводит, прямо или косвенно, комбинация указанных ингредиентов.

В одном варианте осуществления комбинации, представленные в настоящем описании, также можно составлять в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении НИ'. В таком случае, соединение общей формулы (I) или любой ее подгруппы, составляют в фармацевтическую композицию, содержащую другие фармацевтически приемлемые эксципиенты, и ритонавир составляют отдельно в фармацевтическую композицию, содержащую другие фармацевтически приемлемые эксципиенты. Удобно, чтобы указанные две отдельные фармацевтические композиции могли быть частями набора для одновременного, раздельного или последовательного применения.

Таким образом, отдельные компоненты комбинации по настоящему изобретению можно вводить раздельно в различное время в течение курса терапии или одновременно в формах раздельных комбинаций или одной комбинации. Таким образом, следует понимать, что настоящее изобретение относится ко всем таким схемам одновременного или поочередного лечения, и термин введение следует интерпретировать соответствующим образом. В предпочтительном варианте осуществления разделенные дозированные формы вводят приблизительно в одно время.

В одном варианте осуществления комбинация по настоящему изобретению содержит количество ритонавира или его фармацевтически приемлемой соли, которое является достаточным для клинического повышения биодоступности ингибитора протеазы НС' N83/4; формулы (I) по сравнению с биодоступностью, когда указанный ингибитор протеазы НС' N83/4; формулы (I) вводят отдельно.

В другом варианте осуществления комбинация по настоящему изобретению содержит количество ритонавира или его фармацевтически приемлемой соли, которое является достаточным для повышения по меньшей мере одной фармакокинетической переменной ингибитора протеазы НС' N83/4; формулы (I), выбранной из 1_!/2, С_т1П, С_т;х, С,.,. ЛИС через 12 ч или ЛИС через 24 ч, по сравнению с указанной по меньшей мере одной фармакокинетической переменной, когда ингибитор протеазы НС' N83/4; формулы (I) вводят отдельно.

Следующий вариант осуществления относится к способу повышения биодоступности ингибитора протеазы НС' N83/4;, включающему введение индивидууму, нуждающемуся в таком повышении, комбинации, как определено в настоящем описании, содержащей терапевтически эффективное количество каждого компонента указанной комбинации.

В следующем варианте осуществления, настоящее изобретение относится к применению ритонавира или его фармацевтически приемлемой соли в качестве средства для улучшения по меньшей мере одной фармакокинетической переменной ингибитора протеазы НС' N83/4; формулы (I), выбранной из ΐι_/2, С_тт, С_т;х, С,,, ЛИС через 12 ч или ЛИС через 24 ч; при условии, что указанное применение не проводят в организме человека или животного.

Как использовано в настоящем описании, термин индивидуум относится к животному, предпочтительно млекопитающему, наиболее предпочтительно человеку, который является объектом лечения, наблюдения или эксперимента.

Биодоступность определяют как долю введенной дозы, достигшую системного кровотока, 1_т представляет собой время полужизни или время, необходимое для снижения концентрации в плазме до половины ее исходного значения. С,, представляет собой равновесную концентрацию, т.е. концентрацию, при которой скорость введения лекарственного средства является равной скорости выведения. С_тш определяют как наименьшую (минимальную) концентрацию, измеряемую в ходе интервала при дозировании. С_т;х представляет собой наибольшую (максимальную) концентрацию, определяемую в ходе интервала при дозировании. ЛИС определяют как площадь под кривой концентрация в плазме-время за определенный период времени.

Комбинации по настоящему изобретению можно вводить человеку в диапазоне доз, конкретном для каждого компонента, представленного в таких комбинациях. Компоненты, находящиеся в указанных комбинациях, можно вводить совместно или по отдельности. Ингибиторы протеазы N83/4; формулы (I) или любая их подгруппа и ритонавир или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир, могут иметь уровни дозировок порядка от 0,02 до 5,0 г в сутки.

Когда ингибитор протеазы НС' N83/4; формулы (I) и ритонавир вводят в комбинации, подходящее массовое соотношение ингибитора протеазы НС' N83/4; формулы (I) и ритонавира находится в диапазоне приблизительно от 40:1 до приблизительно 1:15, или приблизительно от 30:1 до приблизительно 1:15, или приблизительно от 15:1 до приблизительно 1:15, как правило, приблизительно от 10:1 до при

- 27 014646 близительно 1:10 и более конкретно приблизительно от 8:1 до приблизительно 1:8. Также подходящими являются массовые соотношения ингибиторов протеазы НСУ N83/4; формулы (I) и ритонавира, находящиеся в диапазоне приблизительно от 6:1 до приблизительно 1:6, или приблизительно от 4:1 до приблизительно 1:4, или приблизительно от 3:1 до приблизительно 1:3, или приблизительно от 2:1 до приблизительно 1:2, или приблизительно от 1,5:1 до приблизительно 1:1,5. В одном аспекте количество ингибиторов протеазы НСУ N83/4;·! формулы (I) по массе равно или превышает количество ритонавира, где подходящее массовое соотношение ингибитора протеазы НСУ N83/4; формулы (I) и ритонавира находится в диапазоне приблизительно от 1:1 до приблизительно 15:1, как правило, приблизительно от 1:1 до приблизительно 10:1 и более конкретно приблизительно от 1:1 до приблизительно 8:1. Также являются подходящими массовые соотношения ингибитора протеазы НСУ N83/4; формулы (I) и ритонавира, находящиеся в диапазоне приблизительно от 1:1 до приблизительно 6:1, или приблизительно от 1:1 до приблизительно 5:1, или приблизительно от 1:1 до приблизительно 4:1, или приблизительно от 3:2 до приблизительно 3:1, или приблизительно от 1:1 до приблизительно 2:1, или приблизительно от 1:1 до приблизительно 1,5:1.

Как использовано в настоящем описании, термин терапевтически эффективное количество означает то количество активного соединения или компонента или фармацевтического средства, которое вызывает биологический или медицинский ответ, который включает смягчение симптомов заболевания, подлежащего лечению, в ткани, системе, у животного или человека, и которого добивается исследователь, ветеринар, врач или другой клиницист, с помощью настоящего изобретения. Поскольку настоящее изобретение относится к комбинациям, содержащим два или более средств, терапевтически эффективное количество представляет собой такое количество средств, взятых вместе, чтобы комбинированный эффект вызывал требуемый биологический или медицинский ответ. Например, терапевтически эффективное количество композиции, содержащей (а) соединение формулы (I) и (Ь) ритонавир, представляет собой количество соединения формулы (I) и количество ритонавира, которые, вместе взятые, обладают комбинированным эффектом, который является терапевтически эффективным.

Как правило, подразумевают, что противовирусное эффективное суточное количество может составлять от 0,01 до 500 мг/кг массы тела, более предпочтительно от 0,1 до 50 мг/кг массы тела. Может быть подходящим введение требуемой дозы в виде одной, двух, трех, четырех или более субдоз через соответствующие интервалы в течение суток. Указанные субдозы можно составлять в качестве единичных дозированных форм, например, содержащих от 1 до 1000 мг, и в частности, от 5 до 200 мг активного ингредиента на единичную дозированную форму.

Точная дозировка и частота введения зависят от конкретного используемого соединения формулы (I), конкретного подлежащего лечению состояния, тяжести подлежащего лечению состояния, возраста, массы, пола, выраженности нарушения и общего физического состояния конкретного пациента, а также других лекарственных средств, которые может принимать индивидуум, как хорошо известно специалистам в данной области. Более того, очевидно, что указанное эффективное суточное количество может быть снижено или повышено в зависимости от ответа подвергаемого лечению субъекта и/или в зависимости от оценки врача, назначающего соединения по настоящему изобретению. Эффективные диапазоны суточного количества, приведенные в настоящем описании выше, таким образом, являются только рекомендациями.

В соответствии с одним вариантом осуществления ингибитор протеазы НСУ N83/4; формулы (I) и ритонавир можно совместно вводить один или два раза в сутки, предпочтительно орально, где количество соединений формулы (I) на дозу составляет приблизительно от 1 до приблизительно 2500 мг, и количество ритонавира на дозу составляет от 1 до приблизительно 2500 мг. В другом варианте осуществления количества на дозу для однократного или двукратного суточного совместного введения составляют приблизительно от 50 до приблизительно 1500 мг соединения формулы (I) и приблизительно от 50 до приблизительно 1500 мг ритонавира. В другом варианте осуществления количества на дозу для однократного или двукратного суточного совместного введения составляют приблизительно от 100 до приблизительно 1000 мг соединения формулы (I) и приблизительно от 100 до приблизительно 800 мг ритонавира. В другом варианте осуществления количества на дозу для однократного или двукратного суточного введения составляют приблизительно от 150 до приблизительно 800 мг соединения формулы (I) и приблизительно от 100 до приблизительно 600 мг ритонавира. В другом варианте осуществления количества на дозу для однократного или двукратного суточного совместного введения составляют приблизительно от 200 до приблизительно 600 мг соединения формулы (I) и приблизительно от 100 до приблизительно 400 мг ритонавира. В другом варианте осуществления количества на дозу для однократного или двукратного суточного совместного введения составляют приблизительно от 200 до приблизительно 600 мг соединения формулы (I) и приблизительно от 20 до приблизительно 300 мг ритонавира. В другом варианте осуществления количества на дозу для однократного или двукратного суточного совместного введения составляют приблизительно от 100 до приблизительно 400 мг соединения формулы (I) и приблизительно от 40 до приблизительно 100 мг ритонавира.

Иллюстративные комбинации соединения формулы (I) (мг)/ритонавир (мг) для однократного или двукратного суточного дозирования включают 50/100, 100/100, 150/100, 200/100, 250/100, 300/100,

- 28 014646

350/100, 400/100, 450/100, 50/133, 100/133, 150/133, 200/133, 250/133, 300/133, 50/150, 100/150, 150/150, 200/150, 250/150, 50/200, 100/200, 150/200, 200/200, 250/200, 300/200, 50/300, 80/300, 150/300, 200/300, 250/300, 300/300, 200/600, 400/600, 600/600, 800/600, 1000/600, 200/666, 400/666, 600/666, 800/666, 1000/666, 1200/666, 200/800, 400/800, 600/800, 800/800, 1000/800, 1200/800, 200/1200, 400/1200, 600/1200, 800/1200, 1000/1200 и 1200/1200. Другие иллюстративные комбинации соединения формулы (I) (мг)/ритонавир (мг) для однократного или двукратного суточного дозирования включают 1200/400, 800/400, 600/400, 400/200, 600/200, 600/100, 500/100, 400/50, 300/50 и 200/50.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрено изделие, содержащее композицию, эффективную для лечения инфекций НСV или для ингибирования протеазы N83 НСV; и упаковочный материал, содержащий этикетку, на которой указано, что композицию можно использовать для лечения инфекции вирусом гепатита С; где композиция содержит соединение формулы (I) или любой ее подгруппы, или комбинацию, как описано в настоящем описании.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к набору или контейнеру, содержащему соединение формулы (I) или любой ее подгруппы, или комбинацию в соответствии с настоящим изобретением, включающую ингибитор протеазы НСV Ν83/4α формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и ритонавир или его фармацевтически приемлемую соль, в количестве, эффективном для применения в качестве стандарта или реагента в тесте или анализе для определения способности потенциальных лекарственных средств ингибировать протеазу НСV Ν83/4α, рост НОУ или того и другого. Этот аспект настоящего изобретения может быть применимым в фармацевтических исследовательских программах.

Соединения и комбинации по настоящему изобретению можно использовать в высокопроизводительных способах анализа мишени, таких как способы определения эффективности указанной комбинации для лечения НСV.

Примеры

Представленные ниже примеры предназначены для иллюстрации настоящего изобретения, а не для его ограничения.

Пример 1. Синтез 18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10

ю

Стадия А

К перемешиваемому раствору Вос-гидроксипролина 1 (5 г, 22 ммоль) в сухом ДМФА (200 мл) добавляли тозилат этилового эфира 1-амино-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты 2 (8 г, 24 ммоль) и диизопропилэтиламин (7 г, 54 ммоль). Полученный раствор охлаждали до 0°С, и затем добавляли НЛТИ (9 г, 24 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин в атмосфере азота, и затем при кт (комнатная температура) в течение 4 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (250 мл) и экстрагировали ЕЮАс (3x150 мл). Органические слои объединяли и промывали насыщенным раствором ΝαНСОз, водой и насыщенным раствором соли, сушили над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали. Очистка колоночной хроматографией (градиент ЭСМ к ЕЮАс) приводила к получению 7,7 г (97%) требуемого продукта 3: т/х=369 (М+Н)⁺.

Стадия В

- 29 014646

К раствору спирта 3 (7,7 г, 20,9 ммоль), паранитробензойной кислоты (5,23 г, 31,3 ммоль) и трифенилфосфина (8,22 г, 31,3 ммоль) в сухом ТГФ (200 мл), по каплям добавляли ΌΙΑΌ (6,34 г, 31,35 ммоль) при -20°С в атмосфере азота. Спустя 1 ч при -20°С, реакционной смеси давали нагреться до кт. Через 3 суток реакционную смесь фильтровали и осадок промывали ЕЮАс. Фильтрат разбавляли ЕЮАс и промывали водой, сушили (Мд§О₄), фильтровали и выпаривали. Очистка колоночной хроматографией (градиент ЕЮАс (от 0 до 10%) в СН₂С1₂) приводила к получению 8,45 г (78%) требуемого продукта 4 в виде бесцветного масла: т/х=518 (М+Н)⁺.

Стадия С

К перемешиваемому раствору Вос-защищенного производного пролина 4 (1,25 г, 2,17 ммоль) в СН2С12 (20 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (2,48 г, 21,7 ммоль). Спустя 30 мин при кт, реакционную смесь концентрировали и осадок распределяли между насыщенным раствором ЫаНСО₃ и ЕЮАс. Органический слой сушили (Мд§О₄), фильтровали и концентрировали с получением 0,9 г требуемого продукта 5 в виде бесцветного масла: ш/х=418 (М+Н)⁺.

Стадия Ό

К перемешиваемому раствору производного пролина 5 (734 мг, 1,76 ммоль) в сухом ДМФА (20 мл) добавляли ноненовую кислоту (330 мг, 2,11 ммоль) и диизопропилэтиламин (455 мг, 3,52 ммоль). Затем добавляли НАТи (802 мг, 2,11 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, затем при кт в течение 4 ч, затем разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали ЕЮАс (3x15 мл). Органические слои объединяли и последовательно промывали насыщенным раствором №НСО₃. водой и насыщенным раствором соли, сушили над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали. Очистка колоночной хроматографией (градиент ЕЮАс (от 0 до 20%) в ЭСМ) приводила к получению 950 мг (97%) требуемого продукта 6: т/х=556 (М+Н)⁺.

Стадия Е

К перемешиваемому раствору 6 (1,95 г, 3,51 ммоль) в ТГФ (30 мл) добавляли раствор гидроксида лития (300 мг, 7,02 ммоль) в воде (10 мл) при 0°С. Спустя 2 ч при 0°С, реакционную смесь подкисляли 1М НС1 (рН 6) и экстрагировали АсОЕ1. Органический слой промывали насыщенным раствором №1НСО₃, сушили (Мд§О₄), фильтровали и концентрировали с получением 1,3 г (91%) требуемого продукта 7 в виде бесцветного масла: т/х=407 (М+Н)⁺.

- 30 014646

К раствору спирта 7 (0,5 г, 1,23 ммоль), 2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-ола (0,48 г, 1,6 ммоль) и трифенилфосфина (0,45 г, 1,72 ммоль) в сухом ТГФ (15 мл) по каплям добавляли (0,37 г, 1,85 ммоль, 1,5 экв.) при -20°С в атмосфере азота. Спустя 1 ч при -20°С, реакционной смеси давали нагреться до кт. Через 20 ч смесь выливали в смесь лед/вода и экстрагировали ЕЮАс. Органические слои объединяли, промывали насыщенным раствором соли, сушили (Мд§О₄) и концентрировали при пониженном давлении. Очистка колоночной хроматографией (СН₂СуЕЮАс, 80:20) приводила к получению 535 мг (63%) требуемого продукта 8 в виде желтой пены: т/х=689 (М+Н)⁺.

Стадия С

Раствор соединения 8 (540 мг, 0,78 ммоль) и катализатор Ноуеуйа-СгиЬЬк 1 поколения (45 мг, 0,07 ммоль) в СН₂С1₂ (540 мл) перемешивали в атмосфере азота при 70°С в течение 19 ч. Реакционную смесь выпаривали и очищали флэш-хроматографией (градиент АсОЕ1 (от 0 до 20%) в СН₂С1₂) с получением 390 мг (76%) требуемого макроцикла 9: ш/х=661 (М+Н)⁺.

Стадия Н

К перемешиваемому раствору сложного эфира 9 (390 мг, 0,59 ммоль) в ТГФ (30 мл) и МеОН (20 мл) добавляли раствор гидроксида лития (1 г, 23,6 ммоль) в воде (15 мл). Спустя 16 ч при комнатной температуре, реакционную смесь гасили насыщенным раствором ΝΉ₄α, концентрировали при пониженном давлении, подкисляли до рН 3 1н. НС1 и экстрагировали СН₂С1₂, сушили (Мд§О₄) и выпаривали с получением 325 мг (84%) 18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10 в виде масла, которое медленно кристаллизовалось. Продукт перекристаллизовывали из простого эфира: ш/х=633 (М+Н)⁺.

Пример 2. Синтез №[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо3,16-диазатрицикло [14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-ил] карбонил](циклопропил)сульфонамида 11

Раствор карбоновой кислоты 10 (100 мг, 0,158 ммоль) и карбонилдиимидазола (38 мг, 0,237 ммоль) в сухом ТГФ (8 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 2 ч. Необязательно, при желании, производное азолактона может быть выделено. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли циклопропилсульфонамид (29 мг, 0,237 ммоль) и ΌΒυ (36 мг, 0,237 ммоль). Полученный раствор нагревали при 50°С в течение 5 ч. Затем реакционную смесь охлаждали при комнатной температуре и концентрировали при пониженном давлении. Осадок распределяли между СН2С12 и 1н. НС1, органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили (Мд§О₄) и выпаривали с получением 180 мг бесцветного масла. Очистка флэш-хроматографией (градиент ЕЮАс (от 0 до 20%) в ЭСМ) приводила к получению 90 мг (74%) указанного в заголовке продукта 11 в виде белого порошка: т/г=736 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (СБС1₃): 0,9-1,6 (м, 18Н), 1,80-1,96 (м, 3Н), 2,20-2,28 (м, 1Н), 2,37 (т, 1Н, 1=12 Гц), 2,45-2,72 (м, 4Н), 2,88-2,95 (м, 1Н), 3,20 (кв, 1Н, 1=6 Гц), 3,96 (с, 3Н), 4,0 (д, 1Н, 1=11 Гц), 4,11 (дд, 1Н, 1=3,8 Гц, 11

- 31 014646

Гц), 4,6 (т, 1Н, 1=8 Гц), 5,0 (т, 1Н, 1=10 Гц), 5,52 (ш.с, 1Н), 5,73 (дд, 1Н, 1=8 Гц, 18 Гц), 6,68 (с, 1Н), 7,05 (с, 1Н), 7,12 (дд, 1Н, 1=2,5 Гц, 9 Гц), 7,38 (д, 1Н, 1=2,5 Гц), 7,57 (с, 1Н), 7,94 (д, 1Н, 1=9 Гц), 10,23 (с, 1Н).

Пример 3. Синтез 18-[2-[2-(изопропиламино)тиазол-4-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15диоксо-3,16-диазатрицикло [14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 12

Указанное в заголовке соединение получали из 4-гидрокси-2-[2-(изопропиламино)тиазол-4-ил]-7метоксихинолина и промежуточного соединения 7 следуя методике (стадии Р-Н), описанной для 18-[2[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10: т/х=648 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (СБС1з): 1,01-1,41 (м, 12Н), 1,81-1,95 (м, 3Н), 2,11-2,30 (м, 3Н), 2,43 (м, 1Н), 2,55 (м, 1Н), 2,91 (м, 1Н), 3,47 (м, 2Н), 3,60 (м, 1Н), 3,94 (с, 3Н), 4,27 (м, 1Н) 4,78 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 5,52-5,70 (м, 3Н), 7,10 (д, 1Н, 1=8,6 Гц), 7,32 (с, 1Н), 7,45-7,52 (м, 2Н), 7,96 (д, 1Н, 1=8,6 Гц), 9,5 (с, 1Н).

Пример 4. Синтез №[[18-[2-[2-(изопропиламино)тиазол-4-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15диоксо-3,16-диазатрицикло [14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 13

Раствор 18-[2-[2-(изопропиламино)тиазол-4-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (12,54 мг, 0,083 ммоль) и карбонилдиимидазола (20 мг, 0,125 ммоль, 1,5 экв.) в сухом ТГФ (4 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 2 ч. Необязательно, при желании, производное азалактона может быть выделено. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли циклопропилсульфонамид (15 мг, 0,125 ммоль) и ΌΒϋ (19 мг, 0,125 ммоль). Полученный раствор нагревали при 50°С в течение 16 ч. Затем реакционную смесь охлаждали при комнатной температуре и концентрировали при пониженном давлении. Осадок распределяли между СН₂С1₂ и 1н. НС1, органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили (Мд§О₄) и концентрировали. Очистка флэш-хроматографией (градиент Е1ОЛс (от 0 до 50%) в ЭСМ) приводила к получению 45 мг (72%) указанного в заголовке продукта, который перекристаллизовывали из воды с получением 12 мг требуемого продукта в виде светложелтого порошка, т/х=751 (М+Н)⁺.

^!Н ЯМР (СБС1₃): 0,8-1,9 (м, 21Н), 2,17 (м, 1Н), 2,28-2,56 (м, 4Н), 2,65 (м, 1Н), 2,86, (м, 1Н), 3,55 (м, 1Н), 3,87 (м, 4Н), 4,10 (м, 1Н), 4,57 (м, 1Н), 4,94 (т, 1=9,5 Гц, 1Н), 5,43 (м, 2Н), 5,64 (м, 1Н), 6,92 (ш.с, 1Н), 6,98 (дд, 1=9,0 Гц, 3,0 Гц, 1Н), 7,28 (м, 2Н), 7,37 (с, 1Н), 7,80 (д, 1=9,0 Гц, 1Н).

Пример 5. Синтез 18-[1,3-дигидроизоиндол-2-илкарбонилокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло [14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 18

К раствору спирта 7 (300 мг, 0,738 ммоль), паранитробензойной кислоты (123 мг, 1 экв.) и трифенилфосфина (194 мг, 1 экв.) в сухом ТГФ (10 мл) по каплям добавляли (149 мг, 1 экв.) при -20°С в атмосфере азота. Спустя 1 ч при -20°С, реакционной смеси давали нагреться до кт. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли ЕЮАс и промывали водой, сушили (Мд§О₄), фильтровали и выпаривали. Очистка колоночной хроматографией (градиент ЕЮАс от 0 до 10% в СН₂С1₂) приводила к получению 200 мг (50%) требуемого продукта в виде бесцветного масла. ш/х=556 (М+Н⁺).

- 32 014646

К сложному эфиру паранитробензойной кислоты 14 (200 мг, 0,23 ммоль), растворенному в ТГФ (3 мл) и охлажденному до 0°С, добавляли моногидрат ЫОН (30 мг, 2 экв.), растворенный в воде (1 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, затем подкисляли разбавленным раствором НС1 (рН 6) и экстрагировали АсОЕ!. Органический слой экстрагировали насыщенным раствором NаΗСОз, промывали насыщенным раствором соли, сушили (Мд§О₄) и выпаривали. Полученное бесцветное масло сушили в высоком вакууме с получением 140 мг (98%) требуемого продукта в виде белого твердого вещества, 1П// 407 (М+Н⁺).

Спирт 15 (140 мг, 0,344 ммоль) и СТО (56 мг, 1 экв.) смешивали в ЭСМ (3 мл) и перемешивали при кт. Через 16 ч добавляли амин (45 мг, 2,5 экв.) и реакционную смесь перемешивали при кт до завершения реакции, определяемого ЖХ-МС. Затем реакционную смесь экстрагировали 1М раствором НС1 в воде, промывали насыщенным раствором соли, сушили, фильтровали и концентрировали. Очистка флэшхроматографией на силикагеле (Е!ОАс в ЭСМ от 0 до 20%) приводила к получению 50 мг требуемого продукта, ш/х=552 (М+Н⁺).

К диену 16 (50 мг, 0,091 ммоль), растворенному в дихлорэтане (9 мл, 0,01М), и в атмосфере Ν₂, добавляли катализатор Ноуеуба-СгиЬЬк 2 поколения (2,8 мг, 0,05 экв.). Реакционную смесь нагревали при 80°С с мембраной в атмосфере Ν₂ в течение ночи. Через 15 ч реакционную смесь концентрировали и очищали флэш-хроматографией на силикагеле (Е!ОАс от 0 до 20% в ЭСМ) с получением 30 мг (63%) требуемого продукта 17 в виде бесцветного масла. ш//=524 (М+Н⁺).

К раствору этилового эфира (30 мг, 0,057 ммоль) в МеОН/ТГФ (1/1) добавляли раствор моногидрата ЫОН 17 (98 мг, 2,292 ммоль) в воде (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 20 ч. Затем подкисляли разбавленной НС1 до рН 4-5 и экстрагировали Е!ОАс (3х). Органические слои объединяли, промывали насыщенным раствором соли, сушили над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали с получением 30 мг требуемого продукта 18 в виде бесцветного твердого вещества, ш//=496 (М+Н⁺).

Пример 6. Синтез №[18-[1,3-дигидроизоиндол-2-илкарбонилокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло [14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида 19.

Смесь карбоновой кислоты 18 (30 мг, 0,06 ммоль) и СТО (20 мг, 2 экв.) в сухом ТГФ (3 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч 30 мин в атмосфере азота. Необязательно, при желании, производное азалактона может быть выделено. Затем реакционную смесь охлаждали при комнатной температуре и добавляли циклопропилсульфонамид (15 мг, 2 экв.) и ΌΒυ (18 мг, 2 экв.).

- 33 014646

Реакционную смесь перемешивали при 50°С до завершения реакции, определенного с помощью ЖХ-МС. Затем реакционную смесь концентрировали, повторно растворяли в ЭСМ и экстрагировали 1М НС1, затем насыщенным раствором соли, сушили и концентрировали. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле приводила к получению требуемого продукта 19. т/х=599 (М+Н⁺).

Пример 7. Синтез 18-[2-(тиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 25.

Стадия А

К суспензии 3-метокси-2-метилбензойной кислоты (45,6 г, 274 ммоль) в сухом толуоле (800 мл) добавляли триэтиламин (42,4 мл, 302 ммоль). Получали прозрачный раствор. Затем медленно добавляли дифенилфосфорилазид (6рра) (65,4 мл, 302 ммоль) в толуоле (100 мл). Спустя 1 ч при комнатной температуре, реакционную смесь последовательно нагревали при 50°С в течение 0,5 ч, при 70°С в течение 0,5 ч и затем при 100°С в течение 1 ч. К полученному раствору добавляли !-ВиОН (30,5 г, 411 ммоль) в толуоле (40 мл) при 100°С и полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 7 ч. Раствор охлаждали до комнатной температуры, затем последовательно промывали водой, 0,5н. НС1, 0,5н. №ОН и насыщенным раствором соли, сушили (№ь8О₄) и выпаривали с получением 67 г требуемого продукта 20: т/х=237 (М)⁺.

Стадия В

К раствору №(трет-бутилоксикарбонил)-3-метокси-2-метиланилина (33) в дихлорметане (500 мл) добавляли ТФУК (40,7 мл, 548 ммоль). Спустя 2 ч при комнатной температуре, добавляли ТФУК (40,7 мл, 548 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем выпаривали летучие компоненты. Осадок растирали с толуолом (100 мл) и диизопропиловым эфиром (250 мл), отфильтровывали и промывали диизопропиловым эфиром (100 мл) с получением 56,3 г указанного в заголовке продукта 21 в виде соли ТФУК: ш/х=138 (М+Н)⁺. Соль ТФУК превращали в свободный анилин обработкой NаНСО₃.

Стадия С

К раствору 3-метокси-2-метиланилина (21, 25,4 г, 185 ммоль) в ксилоле (300 мл) по каплям добавляли раствор ВС1₃ (1,0 М в СН₂С1₂, 194 мл) с помощью канюли в течение 20 мин, в атмосфере аргона под давлением при 0°С. Температуру поддерживали при 0-10°С до завершения добавления. Спустя дополнительных 30 мин при 0°С, по каплям добавляли ацетонитрил (12,6 мл, 241 ммоль) в атмосфере аргона при 0°С. Спустя 30 мин при 0°С, полученную суспензию переносили в делительную воронку и разбавляли СН₂С1₂ (40 мл). Полученную смесь добавляли при 0°С в атмосфере аргона в течение 20 мин к суспензии А1С1₃ (25,9 г, 194 ммоль) в СН₂С1₂ (40 мл). Полученный оранжевый раствор нагревали на масляной бане при 70°С в токе азота в течение 12 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли ледяную воду и СН2С12. Полученную смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 6 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Через 12 ч рН доводили до 3 при 0°С 6н. №1ОН. Раствор экстрагировали СН₂С1₂, последовательно промывали водой, 1н. №1ОН и насыщенным раствором соли. Органический слой сушили (№₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Осадок растирали при комнатной температуре в диизопропиловом эфире (50 мл) в течение 0,5 ч. Затем суспензию охлаждали при 0°С, фильтровали, промывали небольшой частью диизопропилового эфира и сушили в высоком вакууме с получением 15,4 г (46%) требуемого продукта 22: т/х=180 (М+Н)⁺.

К перемешиваемому раствору 22 (200 мг, 1,12 ммоль) в СН₂С1₂ (10 мл) и сухом ДМФА (1 мл) добавляли ЕЭСТ (257 мг, 1,34 ммоль) и НОА! (152 мг, 1,12 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 суток. Затем реакционную смесь распределяли между СН2С12 и 1н. NаНСО₃. Органический слой последовательно промывали 1н. ΝΉ₄Ο и водой, сушили (№ь8О₄) и выпа

- 34 014646 ривали. Очистка флэш-хроматографией (градиент Ас0Е!/гептан, от 10:90 до 50:50) приводила к получению 62 мг (19%) требуемого продукта 23: ш/х=291 (М+Н)⁺.

Стадия Е. Синтез 4-гидрокси-7-метокси-8-метил-2-(тиазол-2-ил)хинолина (24).

К суспензии ацетофенона 23 (62 мг, 0,213 ммоль) в 1Вн0Н (5 мл) добавляли !Ви0К (50 мг, 0,448 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи и затем охлаждали при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли Ас0Е!, подкисляли КН80₄ и последовательно промывали водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушили (№₂80₄) и выпаривали с получением 43 мг (74%) требуемого продукта 24 в виде белого порошка: т/х=273 (М+Н)⁺.

Стадия Р. Синтез 18-[2-(тиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 25

Указанное в заголовке соединение получали из хинолина 24 и промежуточного соединения 7 следуя методике (стадии Р-Н), описанной для 18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10: т/х=605 (М+Н)⁺.

Пример 8. Синтез №[18-[2-(тиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16диазатрицикло [14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (26)

Указанное в заголовке соединение получали из 18-[2-(тиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 25 следуя методике, описанной для синтеза №[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11:

т/х=708 (М+Н)⁺.

Пример 9. Синтез 18-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (29).

К суспензии 4-изопропилтиазол-2-карбонилхлорида в диоксане (250 мл) добавляли раствор (2амино-4-метокси-3-метилфенил)(метил)кетона (22, 18,6 г, 104 ммоль) в диоксане (50 мл) в атмосфере азота. Спустя 2 ч при комнатной температуре, реакционную смесь концентрировали досуха. Затем осадок распределяли между водным раствором NаНС0₃ и Ас0Е!, органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили (№₂80₄) и выпаривали. Осадок растирали в диизопропиловом эфире, отфильтровывали и промывали диизопропиловым эфиром с получением 30,8 г (90 %) указанного в заголовке продукта 27: т/х=333 (М+Н)⁺.

- 35 014646

К суспензии 2'-[[(4-изопропилтиазол-2-ил)(оксо)метил]амино]-4'-метокси-3'-метилацетофенона (27, 30,8 г, 92,7 ммоль) в трет-бутаноле добавляли трет-бутоксид калия (21,8 г, 195 ммоль). Полученные реакционные смеси нагревали при 100°С в течение ночи. Затем реакционную смесь охлаждали при комнатной температуре и разбавляли простым эфиром (100 мл). Осадок отфильтровывали и промывали ЕьО с получением порошка (фракция А). Маточный раствор концентрировали в вакууме, растирали в простом эфире, фильтровали и промывали простым эфиром с получением порошка (фракция 2). Фракции 1 и 2 смешивали и выливали в воду (250 мл). рН полученного раствора доводили до 6-7 (контроль индикаторной бумагой для определения рН) с помощью 1н. НС1. Осадок отфильтровывали, промывали водой и сушили. Затем твердое вещество растирали в диизопропиловом простом эфире, отфильтровывали и сушили с получением 26 г (88%) указанного в заголовке продукта 28 в виде коричневатого твердого вещества: ш/х=315 (М+Н)⁺.

Стадия С. Синтез 18-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло [14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (29)

Указанное в заголовке соединение получали из хинолина 28 и промежуточного соединения 7 следуя методике (стадии Е-Н), описанной для 18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10: ш/х=647 (М+Н)⁺.

Пример 10. Синтез №[18-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,15диоксо-3,16-диазатрицикло [14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (30)

Указанное в заголовке соединение получали из 18-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8метилхинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло [14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (29) следуя методике, описанной для синтеза №[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11: ш/х=750 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (СБС1₃): 0,90-1,00 (м, 1Н), 1,1-1,2 (м, 4Н), 1,4 (д, 1=6,9 Гц, 6Н), 1,4-1,6 (м, 4Н), 2,15-2,25 (м, 1Н), 2,3-2,4 (м, 1Н), 2,45-2,55 (м, 2Н), 2,65 (с, 3Н), 2,6-2,7 (м, 2Н), 2,85-2,95 (м, 1Н), 3,15-3,5 (м, 7Н), 3,95 (д, 1=10,8 Гц, 1Н), 3,95 (с, 3Н), 4,1 (дд, 1=11,5 Гц, 1=3,8 Гц, 1Н), 4,6 (т, 1=8 Гц, 1Н), 5,0 (т, 1=9 Гц, 1Н), 5,5 (т, 1=3,14 Гц, 1Н), 5,7-5,8 (дд, 1=18,2 и 1=8,2 Гц, 1Н), 6,85 (с, 1Н), 7,02 (с, 1Н), 7,2 (д, 1=9,5 Гц, 1Н), 7,5 (с, 1Н), 7,85 (д, 1=9,5 Гц, 1Н), 10,5 (ш.с, 1Н).

Пример 11. Синтез 18-[7-метокси-2-(тиазол-2-ил)хинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (31)

Указанное в заголовке соединение получали из 4-гидрокси-7-метокси-2-(тиазол-2-ил)хинолина и промежуточного соединения 7 следуя методике (стадии Е-Н), описанной для 18-[2-[4-(изопропил)тиазол2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4карбоновой кислоты 10: ш/х=591 (М+Н)⁺.

Пример 12. Синтез №[18-[7-метокси-2-(тиазол-2-ил)хинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло [14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (32)

- 36 014646

Указанное в заголовке соединение получали из 18-[7-метокси-2-(тиазол-2-ил)хинолин-4-илокси]-

2.15- диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (31) следуя методике, описанной для синтеза №[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-

3.16- диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11: ιη/ζ=694 (М+Н)⁺.

^!Н ЯМР (СИС1₃): 0,90-1,5 (м, 9Н), 1,6-1,8 (м, 8Н), 2,1-2,4 (м, 2Н), 2,45-2,55 (м, 2Н), 2,6-2,7 (м, 1Н), 2,9-3 (м, 1Н), 3,9 (с, 3Н), 4,12 (дд, 1=11,6 Гц, 1=3,7 Гц, 1Н), 5,1 (т, 1=7,9 Гц, 1Н), 5,00 (т, 1=9 Гц, 1Н), 5,48 (т, 1=2,9 Гц, 1Н), 5,7 (дд, 1=18,2 Гц, 1=8,8 Гц, 1Н), 7 (ш.с, 1Н), 7,15 (дд, 1=9,1 Гц, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,4 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,5 (д, 1=3,2 Гц, 1Н), 7,59 (с, 1Н), 7,9 (д, 1=3,2 Гц, 1Н), 7,9 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 10,3 (ш.с, 1Н).

Пример 13. Синтез 18-[6-метокси-3-(пиразол-1-ил)изохинолин-1-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (33)

Указанное в заголовке соединение получали из 1-гидрокси-6-метокси-3-(пиразол-1-ил)изохинолина и промежуточного соединения 7 следуя методике (стадии Р-Н), описанной для 18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло [14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4карбоновой кислоты 10: ш/х=574 (М+Н)⁺.

Пример 14. Синтез №[18-[6-метокси-3-(пиразол-1-ил)изохинолин-1-илокси]-2,15-диоксо-3,16диазатрицикло [14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (34)

Указанное в заголовке соединение получали из 18-[6-метокси-3-(пиразол-1-ил)изохинолин-1илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (33) следуя методике, описанной для синтеза №[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11:

ιιι/ζ677 (М+Н)⁺.

Пример 15. Синтез 18-[7-метокси-2-(тиазол-4-ил)хинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (35)

Указанное в заголовке соединение получали из 4-гидрокси-7-метокси-2-(тиазол-4-ил)хинолина и промежуточного соединения 7 следуя методике (стадии Р-Н), описанной для 18-[2-[4-(изопропил)тиазол2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10: ιη/ζ=591 (М+Н)⁺.

Пример 16. Синтез №[18-[7-метокси-2-(тиазол-4-ил)хинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16диазатрицикло [14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (36)

- 37 014646

Указанное в заголовке соединение получали из 18-[7-метокси-2-(тиазол-4-ил)хинолин-4-илокси]-

2.15- диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (35) следуя методике, описанной для синтеза М-[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-

3.16- диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11: т/х=694 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (СБС1₃): 0,80-1,55 (м, 13Н), 1,80-1,98 (м, 3Н), 2,19-2,28 (м, 1Н), 2,30-2,40 (м, 1Н), 2,47-2,62 (м, 2Н), 2,63-2,75 (м, 2Н), 2,88-2,96 (м, 1Н), 3,97 (9с, 3Н), 4,02 (д, 1=11,5 Гц, 1Н), 4,11 (дд, 1=11,4 Гц, 1=3,8 Гц, 1Н), 4,60 (т, 1=7,9 Гц, 1Н), 5,00 (т, 1=9,5 Гц, 1Н), 5,49 (ш.с, 1Н), 5,70-5,77 (м, 1Н), 6,68 (с, 1Н), 7,12 (дд, 1=2,5 Гц, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,40 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,59 (с, 1Н), 7,96 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 8,35 (д, 1=2,1 Гц, 1Н),

8,94 (д, 1=2,1 Гц, 1Н), 9,2 (ш.с., 1Н).

Пример 17. Синтез 18-[8-бром-7-метокси-2-(тиазол-2-ил)хинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (41)

Стадия А

К раствору ΝΉ₄Ο (572 мг, 10,7 ммоль) в воде (5 мл) добавляли раствор 2-бром-1-метокси-3нитробензола (500 мг, 2,16 ммоль) в СН₃ОН (5 мл) и ТГФ (5 мл). Затем добавляли железо (325 меш, 601 мг, 10,7 ммоль) и полученную смесь нагревали до 70°С в атмосфере азота. Через 2,5 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через кизельгур, разбавляли АсОЕ1 и последовательно промывали насыщенным раствором №1НСО₃, в воде и насыщенным раствором соли. Органический слой сушили (Να₂8Ο₄) и выпаривали. Осадок растирали в СН₂С1₂, фильтровали с получением 390 мг (89%) требуемого продукта 37 в виде белого твердого вещества.

Стадия В

Промежуточное соединение 38 получали из 2-бром-м-анизидина (37) следуя методике, описанной для синтеза промежуточного соединения 22.

Стадия С

К суспензии хлорида тиазол-2-карбоновой кислоты · НС1 (1,5 экв., 68,8 ммоль) в сухом диоксане (500 мл) добавляли промежуточное соединение 38 (11,2 г, 45,9 ммоль) в атмосфере азота. Спустя 12 ч при комнатной температуре, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Затем добавляли простой эфир (200 мл) и полученную смесь охлаждали до 0°С. Осадок отфильтровывали и промывали простым эфиром с получением твердой фракции А. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Осадок распределяли между АсОЕ1 и 1н. МаНСОз, сушили (№₂8О₄) и выпаривали. Очистка колоночной хроматографией (гептан/АсОЕ1, 1:1) приводила к получению 9,8 г (60%) требуемого продукта 39 в виде желтого порошка: 111//=355, 357.

Стадия Ό. Синтез 8-бром-4-гидрокси-7-метокси-2-(тиазол-2-ил)хинолина (40)

- 38 014646 .0

ОН

Указанное в заголовке соединение получали из промежуточного соединения 39 следуя методике, описанной для синтеза 4-гидрокси-7-метокси-8-метил-2-(тиазол-2-ил)хинолина (24): 111//=337, 339.

Стадия Е. Синтез 18-[8-бром-7-метокси-2-(тиазол-2-ил)хинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (41)

Указанное в заголовке соединение получали из 8-бром-4-гидрокси-7-метокси-2-(тиазол-2-ил)хинолина (40) и промежуточного соединения 7 следуя методике (стадии Е-Н), описанной для 18-[2-[4(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10: т/х=670 (М+Н)⁺.

Пример 18. Синтез Ж[18-[8-бром-2-(тиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16диазатрицикло [14.3.0.0^4,6] нонадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (42)

Указанное в заголовке соединение получали из 18-[8-бром-7-метокси-2-(тиазол-2-ил)хинолин-4илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (41) следуя методике, описанной для синтеза Ж[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11:

ι/ζ=773 (М+Н)⁺.

ЯМР (СИС1₃): 0,90-0,98 (м, 1Н), 1,05-2,0 (м, 2Н), 1,27-1,58 (м, 9Н), 1,80-1,97 (м, 3Н), 2,18-2,24 (м, 1Н), 2,29-2,38 (м, 1Н), 2,48-2,62 (м, 2Н), 2,69-2,73 (м, 2Н), 2,88-2,94 (м, 1Н), 4,01 (д, 1=11,8 Гц, 1Н), 4,08 (с, 3Н), 4,12 (дд, 1=11,5 Гц, 1=3,6 Гц, 1Н), 4,61 (т, 1=7,9 Гц, 1Н), 5,00 (т, 1=9,5 Гц, 1Н), 5,47-5,60 (м, 1Н), 5,70-5,77 (м, 1Н), 6,69 (ш.с., 1Н), 7,24 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,55 (д, 1=3,2 Гц, 1Н), 7,59 (с, 1Н), 7,98 (д, 1=3,2 Гц, 1Н), 8,05 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 8,20 (ш.с, 1Н).

Пример 19. Синтез 18-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-14,14диметил-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (49).

Стадия А. Синтез (2-амино-3-хлор-4-метоксифенил)(метил)кетона (44)

С1

К раствору 2-хлор-3-метоксианилина 43 (20,6 г, 131 ммоль) в ксилоле (225 мл) медленно добавляли раствор ВС1₃ (1,0 М, 138 мл, 138 ммоль) в СН₂С1₂ в атмосфере азота. В ходе добавления проводили мониторинг температуры и ее держали ниже 10°С. Реакционную смесь перемешивали при 5°С в течение 0,5 ч. Затем добавляли сухой ацетонитрил (9,0 мл, 170 ммоль) при 5°С. Спустя 0,5 ч при 5°С, раствор переносили в делительную воронку и медленно добавляли при 5°С к суспензии А1С1₃ (18,4 г, 138 ммоль) в СН2С12 (80 мл). Спустя 45 мин при 5°С, реакционную смесь нагревали при 70°С в токе азота. После выпаривания СН₂С1₂ температуру реакционной смеси доводили до 65°С. Спустя 12 ч при 65°С, реакционную смесь охлаждали до 0°С, выливали на лед (200 г), медленно нагревали и кипятили с обратным холодильником в течение 7 ч. Спустя 2 суток при комнатной температуре, добавляли 6н. №1ОН (25 мл) и СН₂С1₂ (100 мл). Смесь фильтровали, фильтрат промывали СН₂С1₂. Органический слой удаляли и последовательно промывали водой, 1н. №1ОН и насыщенным раствором соли, сушили (№₂8О₄) и выпаривали. Осадок растирали в диизопропиловом эфире при 0°С, отфильтровывали и промывали диизопропиловым эфиром с получением 19,0 г (73%) указанного в заголовке продукта 44 в виде белого твердого вещества: ιιι/ζ 200 (М+Н)⁺.

Стадия В. Синтез 2'-[[(4-изопропилтиазол-2-ил)(оксо)метил]амино]-3'-хлор-4'-метоксиацетофенона

- 39 014646 (45)

Указанный в заголовке продукт 45 получали (79%) из (2-амино-3-хлор-4-метоксифенил)(метил)кетона (44) следуя методике, описанной для промежуточного соединения 39: т/х=353 (М+Н)⁺.

Стадия С. Синтез 8-хлор-4-гидрокси-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолина (46)

Указанный в заголовке продукт 46 получали (58%) из

2'-[[(4-изопропилтиазол-2-ил)(оксо)метил] амино]-3'-хлор-4'-метоксиацетофенона (45) следуя методике, описанной для 4-гидрокси-7-метокси-8метил-2-(тиазол-2-ил)хинолина (24): т/х=335 (М+Н)⁺.

Стадия Ό. Синтез 4,8-дихлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолина (47)

Раствор 8-хлор-4-гидрокси-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолина (46, 2,0 г, 5,973 ммоль) в РОС1₃ (10 мл) нагревали при 85°С в течение 30 мин. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Осадок выливали в ледяную воду (20 мл), рН доводили до 10 50% ЫаОН, и экстрагировали СН₂С1₂. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили (Мд§О₄), фильтровали и выпаривали с получением 2,05 г (97%) указанного в заголовке соединения 47 в виде желтого твердого вещества: ^/ζ = 353 (МН-Н)⁺.

Стадия Е. Синтез 1-трет-бутилового эфира 4-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]пирролидин-1,2-дикарбоновой кислоты (48)

К раствору Вос-транс-гидрокси-1-пролина (2,0 г, 5,66 ммоль) в сухом ДМФА (50 мл) добавляли №Н (60% в минеральном масле, 679 мг, 17,0 ммоль) в атмосфере азота. Спустя 30 мин при комнатной температуре, добавляли раствор 4,8-дихлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолина (47, 1,38 г,

5,94 ммоль) в сухом ДМФА (5 мл). Спустя 12 ч при комнатной температуре, реакционную смесь гасили разбавленной НС1 до рН 2, экстрагировали два раза ЕЮАс, промывали насыщенным раствором соли, сушили (Мд§О₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 3,2 г неочищенного продукта. Очистка флэш-хроматографией (градиент АсОЕ1/ОСМ, от 0:100 до 50:50) приводила к получению 2,35 г (75%) указанного в заголовке продукта 48: т//=549 (М+Н)⁺.

Стадия Р. Синтез трет-бутилового эфира 4-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин4-илокси]-2-(1-этоксикарбонил-2-винилциклопропилкарбамоил)пирролидин-1 -карбоновой кислоты (49)

- 40 014646

К перемешиваемому раствору 1-трет-бутилового эфира 4-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7метоксихинолин-4-илокси]пирролидин-1,2-дикарбоновой кислоты (48, 3,4 г, 6,20 ммоль) в сухом ДМФА (50 мл) добавляли тозилат этилового эфира (1Я,28)-1-амино-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты (2,23 г, 6,82 ммоль) и диизопропилэтиламин (2,70 мл, 17,1 ммоль). Затем добавляли НЛТИ (2,59 г, 6,82 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Спустя 30 мин при 0°С, реакционной смеси последовательно давали нагреться до комнатной температуры в течение 4 ч, затем разбавляли водой (150 мл) и экстрагировали ЕЮАс (3x150 мл). Органические слои объединяли и промывали насыщенным раствором NаНС0з, водой и насыщенным раствором соли, сушили (Мд§0₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очистка колоночной хроматографией (градиент Е!0Ас/СН₂С1₂, от 0:1 до 2:8) приводила к получению 3,0 г (70%) указанного в заголовке продукта 49: ш/х=685 (М+Н)⁺.

Стадия О. Синтез этилового эфира 1-[[4-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4илокси]пирролидин-2-карбонил]амино]-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты (50)

К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира 4-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7метоксихинолин-4-илокси]-2-(1-этоксикарбонил)-2-винилциклопропилкарбамоилпирролидин-1карбоновой кислоты (49, 0,7 г, 1,02 ммоль) в СН2С12 (8 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (2,0 мл). Спустя 2 ч при комнатной температуре, реакционную смесь концентрировали и осадок распределяли между насыщенным раствором NаНС0з и ЭСМ. Органический слой сушили (Мд§0₄), фильтровали и концентрировали с получением 580 мг (97%) указанного в заголовке продукта (50) в виде бесцветного масла: ш/х=585 (М+Н)⁺.

Стадия Н. Синтез этилового эфира 2,2-диметилнон-8-неновой кислоты (51)

К раствору диизопропиламина (1,33 мл, 9,46 ммоль) в сухом ТГФ (10 мл) добавляли 2,5 М раствор н-ВиЫ в гексане (3,79 мл, 9,48 ммоль) при -78°С в атмосфере азота. Через 15 мин медленно добавляли раствор этилизобутирата (1,0 г, 8,61 ммоль) в сухом ТГФ (5,0 мл). Спустя 30 мин при -78°С, по каплям добавляли раствор 7-бромгепт-1-ена (1,68 г, 9,47 ммоль) в НМРА (2,0 мл) и реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры. Через 16 ч реакционную смесь гасили разбавленной НС1, экстрагировали Ас0Е!, промывали насыщенным раствором соли, сушили (Мд§0₄), фильтровали и концентрировали. Очистка флэш-хроматографией (ОСМ/гептан, 2:8) приводила к получению 800 мг (44%) указанного в заголовке продукта (51) в виде бесцветного масла. ТСХ (ЭСМ/гексан 1/1): Я(=0,7.

Стадия Ι. Синтез 2,2-диметилнон-8-неновой кислоты (52)

Раствор этилового эфира 2,2-диметилнон-8-еновой кислоты (51, 800 мг, 3,77 ммоль) и Ы0Н (806 мг, 18,9 ммоль) в смеси ТГФ/МеОН/вода, 1:1:0,5, нагревали при 50°С в течение 2,5 ч. Затем дополнительно добавляли Ы0Н (1,60 г, 10 экв.). Через 15 ч реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. рН осадка доводили до 3 1н. НС1, экстрагировали СН2С12, промывали насыщенным раствором соли, сушили (Мд§0₄), фильтровали и концентрировали с получением 650 мг (94%) указанного в заголовке продукта (52) в виде бесцветного масла.

Стадия 1. Синтез этилового эфира 1-[[4-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4илокси]-1-(2,2-диметилнон-8-еноил)пирролидин-2-карбонил]амино]-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты (53)

- 41 014646

К раствору 2,2-диметилнон-8-еновой кислоты (52, 239 мг, 1,3 ммоль) в сухом СН₂С1₂ (10 мл) добавляли оксалилхлорид (165 мг, 2,6 ммоль) и 2 капли ДМФА. Спустя 3 ч при комнатной температуре, реакционную смесь концентрировали и совместно выпаривали с толуолом. Неочищенный хлорангидрид кислоты последовательно повторно растворяли в СН₂С1₂ и добавляли к перемешиваемому раствору этилового эфира 1-[[4-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]пирролидин-2-карбонил]амино]-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты (50, 380 мг, 0,65 ммоль) и триэтиламина (264 мкл,

1,95 ммоль) в СН₂С1₂ (30 мл). Через 1,5 ч полученный раствор последовательно промывали насыщенным раствором NаНСОз и насыщенным раствором соли, сушили (Мд§О₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией (градиент Е1ОАс/СН₂С1₂ от 0:1 до 2:8) приводила к получению указанного в заголовке продукта (53) в виде бесцветного масла (490 мг, 100%): т/х=751 (М+Н)⁺.

Стадия К. Синтез 18-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-14,14диметил-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (54)

Указанное в заголовке соединение получали из этилового эфира 1-[[4-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-1-(2,2-диметилнон-8-еноил)пирролидин-2-карбонил]амино]-2винилциклопропанкарбоновой кислоты (53) следуя методике (стадии С и Н), описанной для 18-[2-[4(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10: т/х=695 (М+Н)⁺.

Пример 20. Синтез №[18-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-14,14диметил-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (55)

Указанное в заголовке соединение получали из 18-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-14,14-диметил-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло-[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4карбоновой кислоты (54) следуя методике, описанной для синтеза №[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил] (циклопропил)сульфонамида 11: ш/х=798 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (СБС1₃): 0,96 (м, 1Н), 1,05-1,15 (м, 2Н), 1,17 (с, 3Н), 1,32 (с, 3Н), 1,23-1,36 (м, 7Н), 1,38 (д, 1=6,8 Гц, 6Н), 1,43-1,53 (м, 2Н), 1,75-1,94 (м, 3Н), 2,39 (м, 1Н), 2,56 (м, 3Н), 2,85-2,95 (м, 1Н), 3,20 (м, 1Н), 4,02 (с, 3Н), 4,15 (дд, 1=3,7 Гц, 1=11,6 Гц, 1Н), 4,23 (д, 1=11,6 Гц, 1Н), 4,73 (т, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,99 (т, 1=9,4 Гц, 1Н), 5,52 (м, 1Н), 5,80 (кв, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,08 (с, 1Н), 7,17 (м, 2Н), 7,54 (с, 1Н), 7,84 (д, 1=9,2 Гц, 1Н),

10,3 (с, 1Н).

Пример 21. Синтез 17-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,14диоксо-3,15-диазатрицикло[13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (56)

- 42 014646

Указанное в заголовке соединение получали из 8-хлор-4-гидрокси-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7метоксихинолина (46), окт-7-еновой кислоты и промежуточного соединения 5 следуя методике (стадии Ό-Н), описанной для 18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10: т/х=653 (М+Н)⁺.

Пример 22. Синтез №[17-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,14диоксо-3,15-диазатрицикло [13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (57)

Указанное в заголовке соединение получали из 17-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,14-диоксо-3,15-диазатрицикло[13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (56) следуя методике, описанной для синтеза №[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11: т/х=756 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (СБС1₃): 0,90-0,98 (м, 1Н), 1,05-2,0 (м, 2Н), 1,3-1,4 (м, 9Н), 1,5-1,6 (м, 2Н), 1,6-1,65 (м, 1Н), 1,75-1,9 (м, 5Н), 2,2-2,3 (м, 1Н), 2,3-2,4 (м, 1Н), 2,45-2,55 (м, 2Н), 2,6-2,7 (м, 1Н), 2,75-2,85 (м, 1Н), 3,153,25 (м, 1Н), 3,8 (д, 1=11,2 Гц, 1Н), 4,15 (с, 3Н), 3,25 (дд, 1=11,15 Гц, 1=4,5 Гц, 1Н), 4,7 (т, 1=7,1 Гц, 1Н), 5,2 (т, 1=10,4 Гц, 1Н), 5,5 (ш.с., 1Н), 5,6-5,7 (м, 1Н), 6,9 (ш.с., 1Н), 7,1 (с, 1Н), 7,21 (д, 1=9,5 Гц, 1Н), 7,6 (с,

1Н), 8 (д, 1=9,5 Гц, 1Н), 10,8 (ш.с., 1Н).

Пример 23. Синтез 17-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,14диоксо-3,15-диазатрицикло[13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (58)

Указанное в заголовке соединение получали из 4-гидрокси-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси8-метилхинолина (28), окт-7-еновой кислоты и промежуточного соединения 5 следуя методике (стадии Ό-Н), описанной для 18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10: т/х=633 (М+Н)⁺.

Пример 24. Синтез №[17-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,14диоксо-3,15-диазатрицикло [13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (59)

Указанное в заголовке соединение получали из 17-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,14-диоксо-3,15-диазатрицикло[13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (58) следуя методике, описанной для синтеза №[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11: т/х=736 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (СБС1₃): 0,90-1,01 (м, 1Н), 1,05-1,15 (м, 1Н), 1,15-1,45 (м, 5Н), 1,45 (д, 1=6,9 Гц, 6Н), 1,41,55 (м, 3Н), 1,6-1,8 (м, 2Н), 2,85-2,95 (м, 1Н), 2,15-2,25 (м, 2Н), 2,3-2,4 (м, 1Н), 2,45-2,55 (м, 1Н), 2,6-2,7 (м, 1Н), 2,65 (с, 3Н), 2,9-3 (м, 1Н), 3-3,1 (м, 1Н), 3,15-3,25 (м, 1Н), 3,85 (д, 1=10,8 Гц, 1Н), 3,95 (с, 3Н), 4,1 (дд, 1=11,3 Гц, 1=3,6 Гц, 1Н), 4,6 (т, 1=8,0 Гц, 1Н), 5,0 (т, 1=10,6 Гц, 1Н), 5,5 (т, 1=3,2 Гц, 1Н), 5,60-5,70 (м, 1Н), 6,75 (с, 1Н), 7,02 (с, 1Н), 7,2 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,5 (с, 1Н), 7,9 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 11 (ш.с., 1Н).

- 43 014646

Пример 25. Синтез №[17-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,14диоксо-3,15-диазатрицикло [13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбонил] -(1 -метилциклопропил)сульфонамида (60)

Указанное в заголовке соединение получали из 17-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8метилхинолин-4-илокси]-2,14-диоксо-3,15-диазатрицикло[13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (58) и 1-метилциклопропилсульфонамида следуя методике, описанной для синтеза Ν-[[18-[2-[4(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11: т/х=750 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (СИС1₃): 0,90-1,01 (м, 1Н), 1,05-1,15 (м, 1Н), 1,15-1,45 (м, 4Н), 1,45 (д, 1=6,9 Гц, 6Н), 1,4-1,5 (м, 3Н), 1,55 (с, 3Н), 1,6-1,8 (м, 2Н), 2,85-2,95 (м, 1Н), 2,15-2,25 (м, 2Н), 2,3-2,4 (м, 1Н), 2,45-2,55 (м, 1Н), 2,6-2,7 (м, 1Н), 2,65 (с, 3Н), 2,9-3,0 (м, 1Н), 3-3,1 (м, 1Н), 3,15-3,25 (м, 1Н), 3,85 (д, 1=10,8 Гц, 1Н), 3,95 (с, 3Н), 4,1 (дд, 1=11,3 Гц, 1=3,6 Гц, 1Н), 4,6 (т, 1=8,0 Гц, 1Н), 5,0 (т, 1=10,6 Гц, 1Н), 5,5 (т, 1=3,3 Гц, 1Н), 5,60-5,70 (м, 1Н), 6,75 (с, 1Н), 7,02 (с, 1Н), 7,2 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,5 (с, 1Н), 7,9 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 11 (ш.с., 1Н).

Пример 26. Синтез №[17-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,14диоксо-3,15-диазатрицикло [13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбонил] -(1 -метилциклопропил)сульфонамида (61)

Указанное в заголовке соединение получали из 17-[8-хлор-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7метоксихинолин-4-илокси]-2,14-диоксо-3,15-диазатрицикло[13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (56) и 1-метилциклопропилсульфонамида следуя методике, описанной для синтеза Ν-[[18-[2-[4(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11: т/х=770 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (СИС1₃): 0,90-0,98 (м, 1Н), 1,05-2,0 (м, 2Н), 1,3-1,4 (д, 1=6,9 Гц, 6Н), 1,45-1,55 (м, 2Н), 1,5 (с, 3Н), 1,55-1,7 (м, 2Н), 1,75-1,9 (м, 2Н), 1,9-2,1 (м, 2Н), 2,1-2,4 (м, 2Н), 2,4-2,5 (м, 2Н), 2,6-2,7 (м, 2Н), 3-3,1 (м, 1Н), 3,15-3,25 (м, 1Н), 3,3-3,4 (м, 1Н), 3,6-3,7 (м, 1Н), 3,9 (д, 1=11,6 Гц, 1Н), 4,05 (с, 3Н), 4,6 (т, 1=8,0 Гц, 1Н), 5,2 (т, 1=10,6 Гц, 1Н), 5,5 (ш.с., 1Н), 5,6-5,7 (м, 1Н), 6,9 (ш.с., 1Н), 7,1 (с, 1Н), 7,2 (д, 1=9,3 Гц,

1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,95 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 10,8 (ш.с., 1Н).

Пример 27. Синтез 17-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,14диоксо-3,15-диазатрицикло[13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (62)

Указанное в заголовке соединение получали из 4-гидрокси-2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7метоксихинолина, окт-7-еновой кислоты и промежуточного соединения 5 следуя методике (стадии Ό-Н), описанной для 18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,15-диоксо-3,16диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-карбоновой кислоты 10: т/х=619 (М+Н)⁺.

Пример 28. Синтез №[17-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,14-диоксо-

3,15-диазатрицикло [13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (63)

- 44 014646

Указанное в заголовке соединение получали из 17-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метокси-8-метилхинолин-4-илокси]-2,14-диоксо-3,15-диазатрицикло[13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбоновой кислоты (62) следуя методике, описанной для синтеза №[[18-[2-[4-(изопропил)тиазол-2-ил]-7-метоксихинолин-4илокси]-2,15-диоксо-3,16-диазатрицикло[14.3.0.0^4,6]нонадец-7-ен-4-ил]карбонил](циклопропил)сульфонамида 11: т/х=722 (М+Н)⁺.

'Н ЯМР (СБС1₃): 0,99-1,77 (м, 17Н), 1,94 (дд, 1=6,0 Гц, 1=9,7 Гц, 1Н), 2,12-2,26 (м, 2Н), 2,37 (дд, 1=7,3 Гц, 16,4 Гц, 1Н), 2,57-2,71 (м, 3Н), 2,96 (м, 1Н), 3,04 (м, 1Н), 3,22 (м, 1Н), 3,92 (м, 1Н), 3,96 (с, 3Н), 4,14 (дд, 1=3,7 Гц, 11,3 Гц, 1Н), 4,58 (т, 1=7,9 Гц, 1Н), 5,05 (т, 1=10,6 Гц, 1Н), 5,53 (м, 1Н), 5,66 (м, 1Н), 6,58 (с, 1Н), 7,06 (с, 1Н), 7,12 (дд, 1=2,5 Гц, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,37 (д, 1=2,5 Гц, 1Н), 7,56 (с, 1Н), 7,93 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 10,8 (ш.с., 1Н).

Пример 29. Синтез №[17-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,14-диоксо-

3,15-диазатрицикло [13,3,0,0^4,6]октадекан-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (64)

К раствору олефин-№[17-[2-(4-изопропилтиазол-2-ил)-7-метоксихинолин-4-илокси]-2,14-диоксо-

3,15-диазатрицикло[13,3,0,0^4,6]октадец-7-ен-4-карбонил](циклопропил)сульфонамида (63, 100 мг, 0,139 ммоль) в МеОН (3,0 мл), нагретом до 80°С, порциями добавляли сульфоногидразид 2,4,6триизопропилбензола (Τ^^8NНNН₂) и триэтиламин в течение нескольких часов. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Осадок распределяли между СН₂С1₂ и насыщенным раствором N;НСО₃, последовательно промывали 1н. НС1 и насыщенным раствором соли, сушили (Мд8О₄), фильтровали и выпаривали. Очистка флэш-хроматографией (градиент ЛсОЕ1/СН₂С1₂, от 0:1 до 1:9) с последующей перекристаллизацией из смеси изопропиловый эфир/петролейный эфир и препаративной ВЭЖХ, приводила к получению 6 мг (6%) указанного в заголовке продукта (59) в виде белого порошка: ιιιΖ/724 (М+Н)⁺.

'|| ЯМР (СБС1₃): 0,90-1,70 (м, 21Н), 1,95-2,03 (м, 2Н), 2,25-2,35 (м, 2Н), 2,63-2,68 (м, 2Н), 2,99 (м, 1Н), 3,22 (м, 1Н), 3,41 (м, 1Н), 3,96 (м, 5Н), 4,15 (д, 1=15 Гц, 1Н), 4,60 (т, 1=7,9 Гц, 1Н), 5,53 (м, 1Н), 6,57 (с, 1Н), 7,05 (с, 1Н), 7,12 (дд, 1=2,5 Гц, 9,1 Гц, 1Н), 7,38 (д, 1=2,5 Гц, 1Н), 7,5 (с, 1Н), 7,93 (д, I = 9,1 Гц, 1Н), 10,8 (ш.с., 1Н).

Пример 30. Синтез хиназолина в качестве структурного элемента Р2.

Метиловый эфир 2-(4-фторбензоиламино)-4-метокси-3-метилбензойной кислоты (65)

4-Фторбензойную кислоту (700 мг, 5 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл) и пиридине (2 мл). Добавляли метиловый эфир 2-амино-4-метокси-3-метилбензойной кислоты (878 мг, 4,5 ммоль) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч. Добавляли воду и смесь экстрагировали дихлорметаном. Органическую фазу сушили, фильтровали и выпаривали, полученный осадок очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью простой эфир-пентан 1:1, с получением чистого указанного в заголовке соединения (870 мг, 61%). М8 (М+Н⁺) 318.

2-(4-Фторбензоиламино)-4-метокси-3-метилбензойная кислота (66)

- 45 014646

К раствору метилового эфира 2-(4-фторбензоиламино)-4-метокси-3-метилбензойной кислоты (65) (870 мг, 2,7 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл), воде (7,5 мл) и метаноле (7,5 мл) добавляли ЫОН (1М, 4 мл). Смесь нагревали до 50°С в течение 4 ч. Затем добавляли воду (30 мл) и объем уменьшали в два раза. Подкисление уксусной кислотой с последующим фильтрованием приводило к получению чистого указанного в заголовке соединения (830 мг, 100%). М§ (М+Н⁺) 304.

2-(4-Фторфенил)-7-метокси-8-метилхиназолин-4-ол (67)

2-(4-Фторбензоиламино)-4-метокси-3-метилбензойную кислоту (66) (830 мг, 2,7 ммоль) нагревали до 150°С в формамиде (20 мл) в течение 4 ч. Избыток формамида удаляли дистилляцией. Добавляли воду и осажденный продукт отфильтровывали с получением чистого указанного в заголовке соединения (642 мг, 83%). М§ (М+Н⁺) 285.

Пример 31. Общий способ получения замещенных хиназолин-4-олов

К суспензии замещенного 2-аминобензамида [А] (1 экв.) в сухом ТГФ (60 мл) добавляли пиридин (2 экв.) и смесь охлаждали до 5°С. Медленно добавляли хлорангидрид [В] (1,25 экв.) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выпаривали при пониженном давлении и затем суспендировали в воде. Соединение оставляли в воде в течение нескольких часов, фильтровали и промывали холодной водой и диэтиловым эфиром. Продукт [С] сушили в вакууме. Выход: 90-100%. Когда используемый хлорангидрид [В] представлял собой гидрохлорид никотинилхлорида, использовали 2,5 экв. пиридина и смесь перемешивали в течение 2-3 суток при комнатной температуре, а не в течение ночи.

Образовавшийся амид [С] (1 экв.) добавляли к суспензии карбоната натрия (2,5 экв.) в смеси 1:1 воды и Е!ОН и смесь кипятили с обратным холодильником в течение двух часов. При пониженном давлении удаляли Е!ОН, добавляли 5% раствор лимонной кислоты и смесь оставляли на ночь. Продукт [И] выделяли фильтрованием, затем промывали водой и диэтиловым эфиром и сушили в вакууме.

Пример 32. 7-Метокси-8-метил-2-пиридин-3-илхиназолин-4-ол (68)

Следовали общему способу, описанному в примере 31, с использованием 2-амино-4-метокси-3метилбензамида в качестве производного бензамида и гидрохлорида никотинилхлорида в качестве хлорангидрида, с получением указанного в заголовке соединения (2,5 г, 92%), [М+Н]=268.

Пример 33. 7-Метокси-8-метил-2-пиридин-4-илхиназолин-4-ол (69)

Следовали общему способу, описанному в примере 31, с использованием 2-амино-4-метокси-3метилбензамида в качестве производного бензамида и гидрохлорида изоникотиноилхлорида в качестве хлорангидрида, с получением указанного в заголовке соединения (1,6 г, 60%), [М+Н]=268.

Пример 34. 7-Метокси-8-метил-2-этилхиназолин-4-ол (70)

Следовали общему способу, описанному в примере 31, с использованием 2-амино-4-метокси-3метилбензамида в качестве производного бензамида [А] и уксусного хлорангидрида в качестве хлорангидрида [В], с получением указанного в заголовке соединения (2,2 г, 100%).

Ή-ЯМР ДМСО-б₆ δ 1,2 (м, 3Н), 2,38 (с, 3Н), 2,6 (м, 2Н), 3,90 (с, 3Н), 7,18 (д, 2Н), 7,96 (д, 2Н), 11,88 (с, 1Н).

Пример 35. 7-Метокси-8-метил-2-(4-метоксифенил)хиназолин-4-ол (71)

- 46 014646

Следовали общему способу, описанному в примере 31 с использованием 2-амино-4-метокси-3метилбензамида в качестве производного бензамида [А] и 4-метоксибензойного хлорингидрида в качестве хлорангидрида [В], с получением указанного в заголовке соединения (5,5 г, 92%).

^!Н-ЯМР ДМСО-б₆ δ 2,38 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,92 (с, 3Н), 7,04 (д, 2Н), 7,20 (д, 1Н), 8,00 (д, 1Н), 8,20 (д, 2Н), 12,18 (с, 1Н).

Пример 36. 8-Метокси-2-фенилхиназолин-4-ол (72)

Следовали общему способу, описанному в примере 31 с использованием 2-амино-4-метокси-3метилбензамида в качестве производного бензамида [А] и бензоилхлорида в качестве хлорангидрида [В], с получением указанного в заголовке соединения (2,0 г, 80%), [М+Н]=253.

^!Н-ЯМР ДМСО-б₆ δ 3,97 (с, 3Н), 7,39-7,72 (м, 6Н), 8,19 (м, 2Н), 12,48 (с, 1Н).

Пример 37. 2-(3-Фтор-фенил)-7-метокси-8-метилхиназолин-4-ол (73)

Следовали общему способу, описанному в примере 31 с использованием 2-амино-4-метокси-3метилбензамида в качестве производного бензамида [А] и 3-фторбензоилхлорида в качестве хлорангидрида [В], с получением указанного в заголовке соединения (2,1 г, 73%), [М+Н]=271.

Пример 38. 2-(3,5-Дифторфенил)-7-метокси-8-метилхиназолин-4-ол (74)

Следовали общему способу, описанному в примере 31 с использованием 2-амино-4-метокси-3метилбензамид в качестве производного бензамида [А] и 3,5-дифторбензоилхлорида в качестве хлорангидрида [В], с получением указанного в заголовке соединения (2,1 г, 85%), [М+Н]=303.

Пример 39. 7-Метокси-8-метилхиназолин-4-ол (75)

Указанное в заголовке соединение получали в качестве бипродукта, когда реакцию циклизации, стадии [В]-[С], в общем способе проводили в ДМФА вместо ЕЮН.

Пример 40. Активность соединений формулы (I)

Анализ репликонов

Соединения формулы (I) исследовали на активность в отношении ингибирования репликации РНК НСУ в клеточном анализе. Анализ показал, что соединения формулы (I) обладали активностью против репликонов НСУ, функциональных в клеточной культуре. Клеточный анализ был основан на бицистронной экспрессирующей конструкции, как описано ЬоЬтапи е! а1. (1999) 8с1епсе, νοί 285, рр. 110-113 с модификациями, описанными Кпедег е! а1. (2001) 1оита1 о£ У1го1оду 75: 4614-4624, со стратегией скрининга множества мишеней. В сущности, способ был следующим. В анализе использовали стабильно трансфицированную клеточную линию НиЕ-7 1ис/пео (в дальнейшем в настоящем описании обозначаемую как Ний-Ьис). Данная клеточная линия содержит РНК, кодирующую бицистронную экспрессирующую конструкцию, содержащую участки №3-Ы85В НСУ типа 1Ь дикого типа, транслируемые с внутреннего сайта связывания рибосомы (ГКЕ8) вируса энцефаломиокардита (ЕМСУ), с предшествующим репортерным участком (ΕίΕ-люцифераза), и участком маркера селекции (пео^к, неомицинфосфотрансфераза). Концы конструкции составляли 5' и 3'-ЫТК (нетранслируемые области) из НСУ 1Ь типа. Сохранение культуры клеток с репликоном в присутствии С418 (пео^к) зависит от репликации РНК НСУ. Для скрининга противовирусных соединений используют стабильно трансфицированные репликоном клетки, которые экспрессируют РНК НСУ, которая реплицируется автономно и на высоком уровне, и которая кодирует, в частности, люциферазу. Клетки с репликоном помещали в 384-луночные планшеты в присутствии тестируемых и контрольных соединений, которые добавляли в различных концентрациях. После инкубации в течение трех суток определяли репликацию НСУ посредством анализа активности люциферазы (с ис

- 47 014646 пользованием стандартных субстратов и реагентов для анализа люциферазы и устройства для визуализации микропланшетов Регкт Е1тег У1е^Ьих™ и1!гаНТ8). Клетки с репликоном в контрольных культурах обладали высокой экспрессией люциферазы в отсутствии какого-либо ингибитора. Мониторинг ингибирующей активности соединения в отношении активности люциферазы проводили на клетках Нип-Ьис, получая кривую доза-ответ для каждого тестируемого соединения. Затем вычисляли значения ЕС₅₀, которые соответствуют количеству соединения, необходимому для снижения уровня выявляемой активности люциферазы на 50%, или более конкретно, способности генетически связанного с ней репликона РНК НСУ к репликации.

В представленной ниже табл. 1 перечислены соединения, которые получали в соответствии с любым из указанных выше примеров. Нумерация соединений соответствует номерам, указанным в примерах 1-29. Также представлена активность тестируемых соединений.

Таблица 1

Соединение №	Структурная формула	Εθ 50 мкм
57	V- о А / М	0.012
12	/ ΗΝ— нА λ п ►. ί Си АСА ‘А о β У* У	1.978
11	9 А А/ N , ААА ,,4 ί А \ О о /\ Часа	0.017
10	у— ΆΑ3 » Υ-сн ι /“Ч Н 0 / АС	5.045
13	ΗΝ-4 нА ’ Е 8 о χ-Ο.,^Ν А- 0 О К I | ί1—ΜΗ °гАС а	0.020
31	ЧА ρ °ν'Ά	4.941

- 48 014646

32	1) Ч 'ССТ8' 1 о о > «л· / ? ~~7 V 'гг-У^ ί’ н ό ν \ί^“	0.017
26	- Ν-<\ О о Λ-ΝΗ ? ? 7\ л 0 V V-. н о	0.004
63	О ί^Λ-Ν > ЛлТГч О э-ί гЛ а/ ΓΎ \ . ь о о л. ! О У~*НН |: и >- ·· 0 1 N 8 V.-. 0	0.024
33	лр0 (У^'\ ЫН ( '· СООН	6.103
34	луу>/ ° /'т 0 Ύ у 0®А Г ын г; Д-уО Д—0 О \/	0.040
29	I Г% ЛХ/' уО мд/ 1 СН	1.956
30	V- ..О. X ζ«;. .Ι} ид о °. у у °'Д<м /Д г°	0.006
41	οζ * А- Д ДО ЛХ -X ·\-ε ι н ? ΝΧ-Νχ .1 <—/ У X °н \ 0 ч	0.280

- 49 014646

42	/'Л .у V® '· I η ρ ο гу\ < >-» νν ο 4^ η ν> V ;, '-' _______.	0.002
64	'-ο <- Г V . ^-Η , Όζ У <г 4 ρ 5—ί Ω /7 \ 0 0 /\ <’ /?%>-' ν4 <* Η 0	0.067
35	Ο δ ή	1.631
36	.0. I/ ' 07 0 λ/χ - ° / ° О цд° ____ /Д Η ν	0.004
59	ρ Γλ ,*ν Ύ К ο	0.003
58	%Ο г ρ	1.595
	Ω α^' V— ч О-/ '--«. ' СН к>
56	ω0οα> 'ϊ	0.318
	О °'/ Ε 4Ο “
61	χ7 ρ	0.001
	Ότ,·,

- 50 014646

60	').....- ι 1ГА Ха о	0.014
54	У ψ нЧ О / |ί \ 0 \ о у-* II \ -сн	10
55	+ α X X Χ·Α ρ о К / Γ Λ ι> 0 0	0.198

Пример 31. Метаболическое блокирование ингибиторов протеазы НСУ И83/4а ίη νίίτο ритонавиром.

Соединение № 11 из табл. 1 тестировали в эксперименте метаболического блокирования с использованием 3 мкМ тестируемого соединения вместе с 10 мкМ ритонавира, действующего в качестве вспомогательного вещества.

Тестируемое соединение и ритонавир добавляли к микросомам печени человека (концентрация белка 1 мг/мл), суспендированным в калий-фосфатном буфере (рН 7,4), до конечных концентраций в реакционной смеси, составляющих 3 мкМ тестируемого соединения и 10 мкМ ритонавира. В параллельных реакциях без вспомогательного вещества, ритонавир не добавляли. Кипяченые микросомы печени человека использовали в контрольных экспериментах. После добавления (в соотношении 1:3) смеси кофакторов, состоящей из β-никотинамидадениндинуклеотидфосфата (β-ΝΑΌΡ, 0,5 мг/мл, 653,2 мкМ), Όглюкозо-6-фосфата (2 мг/мл, 7,1 мМ), глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (1,5 Ед/мл) в 2% ИаНСО₃, реакционную смесь инкубировали при 37°С в течение 30 или 120 мин, затем реакцию останавливали повышением температуры до 95°С. Концентрации тестируемых соединений определяли с использованием ВЭЖХ-МС.

Обобщенные результаты представлены в табл. 2, ниже. Величины представляют собой процентные количества тестируемого соединения, выявленные после указанного времени инкубации по сравнению с исходной концентрацией тестируемого соединения. Каждое значение представляет собой среднее значе ние для результатов двух независимых экспериментов.

Таблица 2

Соединение №	30’	120’
^Выявленного соединения	%Выявленного соединения
6«з κηβ·κπιτ*η»ικτα	Ритонавир	Бм КПМШТШкНОГО МММ№Я	Ритонавир
11	28	79	0	91

Эксперимент показывает практически полное блокирование метаболизма тестируемого соединения (3 мкМ) добавлением 10 мкМ ритонавира.

Claims (14)

1. Соединение формулы

- 51 014646 его Ν-оксид, аддитивная соль и стереохимически изомерная форма, где пунктирной линией обозначена необязательная двойная связь между атомами С7 и С8;

Я¹ представляет собой частично ненасыщенную или полностью ненасыщенную 9-10-членную би циклическую гетероциклическую кольцевую систему, где указанная кольцевая система содержит один атом азота и где остальные члены кольца представляют собой атомы углерода; где указанная кольцевая система может быть необязательно замещена на любом атоме углерода или азота кольца одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из Не! и С1_-6алкила; и где заместители на любом атоме углерода гетероциклического кольца также могут быть выбраны из -ОЯ⁸, галогена;

Ь представляет собой -О- или -О-СО-;

Я² представляет собой -ОЯ⁶ или -МК^5а§О_рЯ⁸;

Я³ и Я⁴ представляют собой водород или С1_-6алкил;

п равен 3, 4, 5 или 6;

р равен 2;

Я^5а представляет собой водород;

Я⁸ представляет собой С1_-6алкил или Сз_-7циклоалкил, необязательно замещенный С1_-6алкилом;

арил в качестве группы или части группы представляет собой фенил, необязательно замещенный одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из галогена, С1_-6алкила, гидрокси, С1_-6алкокси;

Не! в качестве группы или части группы представляет собой 5- или 6-членное полностью ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, каждый из которых независимо выбран из азота и серы, и где группа Не! может быть необязательно замещена одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из С1_-6алкила, амино, моно- или диС1-6алкиламино.

2. Соединение по п.1, где соединение имеет формулу (!-а)

3. Соединение по любому из пп.1, 2, где Я¹ представляет собой хинолинил (в частности, хинолин-4ил), изохинолинил (в частности, изохинолин-1-ил), каждый из которых независимо необязательно является моно-, ди- или тризамещенным С1-6алкилом, С1-6алкокси, галогеном, -МЯ^5аЯ^5Ь, арилом, Не!; где арил или Не!, каждый независимо, необязательно замещены галогеном, С1-6алкилом, С1_-6алкокси, амино, моно- или диС1-6алкиламино.

4. Соединение по п.3, где Я¹ представляет собой радикал формулы радикал формулы радикал формулы где в радикалах (Б-4), (Б-5), а также в (Б-4-а): каждый из Я^1Ь, Я^1Ь', Я^1е, Я^1Г независимо представляет собой любой из заместителей, выбранных из заместителей, приведенных в качестве возможных заместителей бициклических кольцевых систем Я¹, как указано в п.1.

5. Соединение по п.3, где Я¹ представляет собой радикал формулы

- 52 014646 где К^1Г представляет собой водород, С1_-6алкил, амино, моно- или диС1_-6алкиламино.

6. Соединение по любому из пп.1-5, где:

(a) К² представляет собой -ОК⁶, где К⁶ представляет собой водород, метил, этил или трет-бутил; или (b) К² представляет собой -МН§(=О)₂К⁸, где К⁸ представляет собой циклопропил или метилциклопропил.

7. Соединение по любому из пп.1-6, где К³ и К⁴, оба, представляют собой водород.

8. Соединение по любому из пп.1-7, где и равен 4 или 5.

9. Соединение по любому из пп.1-8, отличное от Ν-оксида или соли.

10. Комбинация для ингибирования репликации НСУ, содержащая:

(a) соединение, как определено в любом из пп.1-9, или его фармацевтически приемлемую соль и (b) ритонавир или его фармацевтически приемлемую соль.

11. Фармацевтическая композиция, содержащая носитель, и в качестве активного ингредиента эффективное против вируса количество соединения по любому из пп.1-9 или комбинации по п.10.

12. Применение соединения по любому из пп.1-9 или комбинации по п.10 для изготовления лекарственного средства для ингибирования репликации НСУ.

13. Способ получения соединения по любому из пп.1-9, где указанный способ включает получение соединения формулы (I), где связь между С₇ и С₈ представляет собой двойную связь, которое представляет собой соединение формулы (Ьй), посредством образования двойной связи между С₇ и С₈, в частности, с помощью реакции метатезиса олефинов, с одновременной циклизацией с образованием макроцикла, как показано на представленной ниже схеме и в случае необходимости получение его солевой формы взаимодействием свободной формы соединения формулы (I) с кислотой или основанием.

14. Способ получения соединения по любому из пп.1-9, где указанный способ включает получение соединения формулы (I), где К² представляет собой -ХК^5а§О_рК⁸, где указанная группа соответствует группе -ХК^2-аК^2-Ь, где указанное соединение соответствует формуле (Ί-ά-1), образованием амидной связи между промежуточным соединением (III) и Н-ЫК^2-аК^2-Ь (ЕУ-а), как показано на представленной ниже схеме, где С представляет собой группу и в случае необходимости получение его солевой формы взаимодействием свободной формы соединения формулы (I) с кислотой или основанием.

Евразийская патентная организация, ЕАПВ

Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2