EA004882B1

EA004882B1 - Ингибитор натрий-водородного обмена типа 1(nhe-1)

Info

Publication number: EA004882B1
Application number: EA200201023A
Authority: EA
Inventors: Вейчао Джордж Чен; Эрик Дэвид Кокс; Энджел Гусман-Перес
Original assignee: Пфайзер Продактс Инк.
Priority date: 2000-04-28
Filing date: 2001-02-28
Publication date: 2004-08-26
Also published as: EE200200615A; WO2001083470A1; UA73348C2; HN2001000042A; HUP0300651A2; HRP20020851A2; JP2003531900A; IL152075A0; UY26680A1; TR200202439T2; SV2002000418A; SK14872002A3; AR028375A1; CN1225466C; OA12256A; CA2407535A1; MA26897A1; PA8513301A1; EA200201023A1; CO5221125A1

Abstract

Ингибитор NHE-1, способы применения ингибитора NHE-1 и фармацевтические композиции, содержащие ингибитор NHE-1. Ингибитор NHE-1, полезный для снижения поражения ткани в результате ишемии ткани.

Description

Предшествующий уровень техники

Данное изобретение относится к ингибитору натрий-водородного обмена типа 1 (ΝΗΕ-1).

Ишемическое повреждение миокарда может наблюдаться как у амбулаторного больного, так и во время операции и может приводить к развитию внезапной смерти, инфаркта миокарда или застойной сердечной недостаточности. В медицине существует потребность в предупреждении или минимизации ишемического повреждения миокарда, особенно инфаркта миокарда во время операции. Такое лечение, как ожидается, сохранит жизнь и может сократить пребывание в больнице, повысить качество жизни и сократить общие затраты здравоохранения на пациентов с повышенным риском.

Фармакологическая кардиопротекция уменьшила бы распространенность и прогрессирование инфаркта миокарда и дисфункции, встречающихся при данных хирургических операциях (во время операции). В дополнение к снижению повреждения миокарда и улучшению функции миокарда после ишемии у пациентов с ишемическим заболеванием сердца кардиопротекция также уменьшила бы распространенность заболеваний сердца и смертность, обусловленную инфарктом миокарда и дисфункцией, среди пациентов «с повышенным риском» (таких, кто старше 65 лет, кто не переносит физической нагрузки, имеет заболевание коронарных артерий, сахарный диабет, гипертензию), которым требуется экстракардиальная операция.

Механизм(ы), ответственный за повреждение миокарда, наблюдаемое после ишемии и реперфузии, до конца не понят.

В ряде публикаций сообщалось о применении производных гуанидина, полезных для лечения, например, аритмий.

В недавно опубликованной заявке на патент РСТ/1В 99/00206, опубликованной как XV 0 99/43663 2 сентября 1999, описание которой включено в данное описание путем ссылки, раскрывается ряд ингибиторов ΝΗΕ-1, включая [5циклопропил-1-(хинолин-5-ил)-1Н-пиразол-4карбонил]гуанидин. В публикации, кроме того, утверждается, что «предпочтительные соли непосредственно предшествующего соединения представляют моно- или димезилатные соли». Одна из групп предпочтительных соединений, которая включает соединения гидроксихинолина, описана в п.102 формулы изобретения опубликованной заявки. Некоторые из таких гидроксихинолиновых соединений могут существовать в нескольких таутомерных формах, таких как форма хинолона, как описано в данной заявке на патент. Кроме того, обычным способом переданная в США предварительная заявка с порядковым номером 60/162374 была подана 29 октября 1999 и касается кристаллических форм описанного выше ингибитора ΝΗΕ-1.

В заявке РСТ/1Р 97/04650, опубликованной 25 июня 1998, описаны соединения №[(замещенный пятичленный гетероарил)] гуанидина, полезные в качестве ингибиторов Να'/Η' обмена и следовательно эффективные для лечения различных заболеваний, таких как гипертензия, аритмия, стенокардия, инфаркт миокарда, артериосклероз и осложнения диабета.

Таким образом ясно, что имеется потребность в соединениях для лечения ишемии миокарда, случающейся в ходе операции, и продолжении исследований в данной области.

Краткое описание изобретения

Данное изобретение касается соединения формулы I

н его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства, при условии, что [5-циклопропил-1-(хинолин-5-ил)-1Н-пиразол-4-карбонил]гуанидин не включен.

Используемая в данном описании фраза «его пролекарство или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения или указанного пролекарства» включает условие, что [5циклопропил-1-(хинолин-5-ил)-1Н-пиразол-4карбонил]гуанидин не включен.

Данное изобретение также касается по существу чистого [5-циклопропил-1-(2-хинолон-5ил)-1Н-пиразол-4-карбонил] гуанидина или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения.

Альтернативно, указанное выше соединение называется [5-циклопропил-1-(2-хинолон-5ил)-1Н-пиразол-4-карбонил] гуанидином. Предпочтительная соль представляет хлористоводородную соль, а наиболее предпочтительно монохлористо-водородную соль.

Другим аспектом данного изобретения является способ лечения млекопитающего (например, человека), имеющего заболевание или состояние, опосредованное ΝΗΕ-1, введением млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа снижения поражения тканей (например, по существу предотвращения поражения тканей, индуцирование защиты тканей) вследствие ишемии, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине), нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Ишемические ткани, рассматриваемые индивидуально или в группе, предпочтительно представляют ткани сердца, мозга, печени, почки, легкого, кишки, скелетной мышцы, селезенки, поджелудочной железы, нерва, спинного мозга, ткань сетчатки, сосудистой сети или ткань кишечного тракта.

Особо предпочтительно, когда ишемическая ткань представляет сердечную ткань.

Особо предпочтительно вводить соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства для предотвращения ишемического повреждения миокарда в ходе хирургической операции.

Предпочтительно вводить соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства профилактически.

Ишемическое поражение может возникнуть во время трансплантации органа либо в орган, либо пациенту.

Предпочтительно соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства вводить до, во время и/или вскоре после операции на сердце или экстракардиальной операции.

В одном из аспектов данного изобретения соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения или указанного пролекарства применяется локально.

Предпочтительная дозировка соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства составляет приблизительно 0,01-100 мг/кг/день. Особо предпочтительная дозировка соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства составляет приблизительно 0,01-50 мг/кг/день.

Еще один аспект данного изобретения касается способа снижения поражения ткани миокарда (например, по существу предотвращения поражения ткани, индуцирования защиты ткани) во время операции (например, операции по имплантации шунта коронарной артерии (САБО), операции на сосудах, чрескожной трансполостной коронарной ангиопластики (РТСА), по трансплантации органов или во время других экстракардиальных операций), включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа снижения поражения тканей миокарда (например, по существу предотвращения поражения ткани, индуцирования защиты ткани) у пациентов, представляющих больных с текущим заболеванием сердца (острыми коронарными синдромами, например, инфарктом миокарда или нестабильной стенокардией) или с явлениями ишемии мозга (например, «ударом»), включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается хронического способа снижения поражения ткани миокарда (например, по существу предотвращения поражения ткани, индуцирования защиты ткани) у пациентов с диагностированным коронарным заболеванием сердца (например, предшествующим инфарктом миокарда или нестабильной стенокардией) или у пациентов с повышенным риском инфаркта миокарда (например, возраст >65 и два или более факторов риска, способствующих коронарному заболеванию сердца), включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа предотвращения ишемического поражения, включающего постоянное пероральное введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения сердечно-сосудистых заболеваний, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения артериосклероза, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения гипертензии, включаю5 щего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения аритмии, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения стенокардии (грудной жабы), включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения гипертрофии сердца, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количество соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения почечных заболеваний, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения осложнений диабета, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения рестеноза, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения пролиферативных клеточных заболеваний, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения злокачественных заболеваний, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения фиброзных заболеваний, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения гломерулярного нефросклероза, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения фиброза легких, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения цереброишемических расстройств, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения миокардиального удара, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения дисфункции миокарда, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения цереброваскулярных заболеваний, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фарΊ мацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Еще один аспект данного изобретения касается способа лечения гипертрофии органов или гиперплазии органов, включающего введение млекопитающему (например, женщине или мужчине) терапевтически эффективного количества соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.

Данное изобретение также касается фармацевтических композиций, которые содержат соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или разбавитель.

Данное изобретение также касается фармацевтических композиций для снижения поражения ткани в результате ишемии, которые содержат терапевтически эффективное количество соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или разбавитель.

Под термином «снижение» подразумевается, в добавление к по существу полному предотвращению, частичное предотвращение или предотвращение, которое хотя бы больше, чем то, которое было бы в результате неприменения соединения или применения плацебо, однако меньше 100%.

Термин «поражение в результате ишемии», применяемый в данном описании, относится к состояниям, напрямую связанным с уменьшением кровотока к ткани, например, вследствие тромба или закупорки кровеносных сосудов, через которые осуществляется кровоснабжение подлежащих тканей, что приводит, иначе говоря, к пониженному переносу кислорода к такой ткани, нарушению функционирования ткани, дисфункции ткани и/или некрозу. С другой стороны, когда кровоток или перфузия органа адекватны по количеству, переносимый кровью объем кислорода или усредненное значение перфузии органа может быть понижено, например, в окружающей среде с недостатком кислорода, так, что подача кислорода к ткани снижается и происходит нарушение функционирования ткани, дисфункция ткани и/или некроз ткани.

Применяемые в данном описании термины «подвергаемый лечению», «лечить» или «лечение» включают предотвращающее (например, профилактическое) и паллиативное лечение.

Выражение «фармацевтически приемлемая соль» относится к нетоксичным анионным солям, содержащим такие анионы, как (но не ограничиваясь ими) хлорид, бромид, иодид, сульфат, бисульфат, фосфат, ацетат, малеат, фума рат, оксалат, лактат, тартрат, цитрат, глюконат, метансульфонат(мезилат) и 4-толуолсульфонат.

Так как существует более чем один основной фрагмент, выражение может включать многоосновные соли (например, дисоли). Выражение также относится к нетоксичным катионным солям с такими катионами, как (но не ограничиваясь ими) натрий, калий, кальций, магний, аммоний или протонированный бензатин (Ν,Ν'дибензилэтилендиамин), холин, этаноламин, диэтаноламин, этилендиамин, мегламин (Νметилглюкамин), бенетамин (Ν-бензилфенетиламин), пиперазин или трометамин (2-амино-2гидроксиметил-1,3 -пропандиол).

Выражение «пролекарство» относится к соединениям, которые являются предшественниками лекарственного средства, подлежащего введению, высвобождая лекарственное средство ίη νίνο путем некоторого химического или физиологического процесса (например, пролекарство, доведенное до физиологического рН, или благодаря действию фермента преобразуется в желаемую форму лекарственного средства). Снова имеется условие, что [5-циклопропил-1(хинолин-5-ил)-1Н-пиразол-4-карбонил]гуанидин не включен.

Выражение «фармацевтически приемлемый» означает, что носитель, разбавитель, эксципиенты и/или соль должны быть совместимы с другими ингредиентами композиции и безвредны для реципиента.

Используемые здесь выражения «реакционно-инертный растворитель» и «инертный растворитель» относятся к растворителю или смеси растворителей, которые не взаимодействуют с исходными веществами, реагентами, промежуточными соединениями или продуктами таким образом, что неблагоприятно воздействует на выход желаемого продукта.

Понимается, что соединение данного изобретения может существовать в радиоактивномеченной форме, то есть соединение может содержать один или большее количество атомов, имеющих атомную массу или массовое число, отличающиеся от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Радиоизотопы водорода и углерода включают соответственно ²Н, ³Н и ¹⁴С. Соединение данного изобретения, которое содержит указанные радиоизотопы и/или другие радиоизотопы других атомов, входит в объем данного изобретения. Радиоизотопы тритий, то есть ³Н, и углерод-14, то есть ¹⁴С, особенно предпочтительны из-за легкости их получения и обнаружения. Соединение формулы I с радиоактивной меткой можно, как правило, получить известными специалистам в данной области способами. Такие соединения с радиоактивной меткой можно получить, выполняя процедуры, описанные ниже на схемах и/или в примерах, заменяя реактив, не помеченный радиоактивной меткой, на готовый, имеющийся в распоряжении реактив с радиоактивной меткой.

Другие особенности и преимущества будут очевидны из описания и формулы изобретения, которая описывает изобретение.

Подробное описание изобретения

Соединение формулы I представляет метаболит [5-циклопропил-1 -(хинолин-5-ил)-1Н-пиразол-4-карбонил]гуанидина в организме человека. Оно было идентифицировано в образцах плазмы человека, полученных после внутривенного введения [5-циклопропил-1-(хинолин-5ил)-1Н-пиразол-4-карбонил]гуанидина человеку.

Структура данного соединения была независимо подтверждена с помощью химического синтеза. В еще одном аспекте данного изобретения [5-циклопропил-1-(2-хинолон-5-ил)-1Нпиразол-4-карбонил]гуанидин можно получить, вводя [5-циклопропил-1-(хинолин-5-ил)-1Нпиразол-4-карбонил]гуанидин человеку и выделяя желаемый метаболит из плазмы. В альтернативном варианте, выделения метаболита из организма человека не требуется, так как он продуцируется ίη νίνο.

В общем случае соединение данного изобретения можно получить способами, аналогичными тем, что известны в области химии, особенно в свете раскрываемого способа, содержащегося в данном описании. Некоторые способы получения соединения данного изобретения представлены далее дополнительными признаками изобретения и проиллюстрированы следующей схемой реакции. Другие способы описаны в экспериментальном разделе.

Подробное описание синтетического аспекта изобретения следующее

Согласно приведенной выше схеме, соединение формулы ΙΑ (полученное, как описано у Саррк ΙΌ.; НашШоп С.С. ГСйеш.Бос. 1938,60,2104) растворяют в протонном растворителе, таком как этанол, и обрабатывают соответствующим восстановителем, таким как дигидрат хлорида олова. Полученную смесь перемешивают при температуре приблизительно от 0 до 115°С приблизительно в течение от 30 мин до 24 ч. Полученную смесь охлаждают приблизительно до 23°С и отфильтровывают. Образовавшееся твердое вещество очищают подходящим способом, таким как растирание с хлористо-водородной кислотой (например, водной 1М) приблизительно при 100°С в течение приблизительно 1 ч, охлаждают приблизительно до 23°С и отфильтровывают с получением соединения формулы II в виде его хлористоводородной соли. Альтернативно, соединение формулы II можно выделить из реакционной смеси в виде свободного основания, подщелачивая неорганическим основанием и экстрагируя с помощью подходящего органического растворителя. Соединение формулы II можно также выделить в виде других солей. Другие способы восстановления, с помощью которых можно выполнить такое восстановление, известны специалистам в данной области, такие как, например, каталитическая гидрогенизация.

Соединение формулы II диазотируют в хлористо-водородной кислоте и воде, используя нитрит натрия, приблизительно при 0°С в течение приблизительно от 15 мин до 2 ч. Полученный раствор соли диазония восстанавливают подходящим восстановителем, таким как дигидрат хлорида олова, в хлористо-водородной кислоте и воде приблизительно при температуре 0-23°С, приблизительно в течение 0,5-6 ч. Полученное твердое вещество собирают фильтрованием и очищают подходящим способом, таким как растирание с хлористо-водородной кислотой (например, водной, 1М) при температуре приблизительно 23°С в течение приблизительно 30 мин. Соединение формулы III собирают фильтрованием в виде его хлористо-водородной соли.

Альтернативно, соединение формулы III можно выделить из реакционной смеси в виде свободного основания, подщелачивая неорганическим основанием и экстрагируя с помощью подходящего органического растворителя. Соединение формулы III можно также выделить в виде других солей. Другие восстановители, с помощью которых можно выполнить такое превращение, известны специалистам в данной области.

Соединение формулы IV получают известными специалистам в данной области способами, такими как взаимодействие диалкилацеталя Ν,Ν-диалкилформамида, например диметилацеталя Ν,Ν-диметилформамида, со сложным эфиром 3-циклопропил-3-оксопропановой кислоты приблизительно при температуре 23-115°С в течение приблизительно 1-4 ч в присутствии кислотного катализатора или без него. Группы К¹ и К² представляют любую подходящую алкильную, циклоалкильную, циклоалкилалкильную или арилалкильную группу. Кроме того, две группы К² могут быть связаны вместе с образованием циклического фрагмента.

Соединение формулы IV подвергают взаимодействию с соединением формулы III в спиртовом растворителе, таком как этанол, приблизительно при температуре 23-115°С в течение приблизительно от 15 мин до 12 ч. Когда соединение формулы III используют в виде его хлористо-водородной соли, выгодно проводить реакцию в присутствии избытка ненуклеофильного основания, такого как триэтиламин. Соединение формулы V выделяют фильтрованием. Альтернативно, соединение формулы V можно выделить другими способами, такими как концентрирование, с последующим добавлением воды и экстракцией подходящим органическим растворителем. Альтернативно, соединение формулы V можно получить, используя соединение формулы III и другие соединения вместо соединения формулы IV, такие как соединения, в которых (Β²)₂Ν группа заменена на В²О группу.

Соединение формулы V подвергают гидролизу с основанием, таким как гидроксид натрия или лития, в подходящем растворителе, таком как вода и/или метанол, и/или ТГФ, приблизительно при 23 °С или при повышенной температуре, такой как температура кипения с обратным холодильником в течение приблизительно 0,5-12 ч. Кислоту формулы VI затем выделяют, например, удаляя органические растворители, подкисляя и фильтруя. Альтернативно, соединение формулы VI можно выделить из реакционной смеси, удаляя органические растворители, подкисляя и экстрагируя подходящим органическим растворителем.

Кислоту формулы VI подвергают взаимодействию с гуанидином в присутствии подходящего связующего вещества. Подходящим связующим веществом является то, которое преобразует карбоновую кислоту в химически активную форму, которая образует амидную связь при взаимодействии с амином.

Связующим веществом может быть реагент, который влияет на данную конденсацию при проведении процесса в одной емкости, где смешаны вместе карбоновая кислота и гуанидин. Типичными связующими реактивами являются гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)3 -этилкарбодиимида/гидроксибензотриазол (ЕОС/ НВТ), дициклогексилкарбодиимид(рСС)/гидроксибензотриазол(НВТ), 2-этокси-1 -этоксикарбонил-1,2-дигидрохинолин (ЕЕЭС) и диэтилфосфорилцианид. Взаимодействие проводят в инертном растворителе, предпочтительно апротонном растворителе, при температуре приблизительно от (-)20 до 50°С в течение приблизительно 1-48 ч в присутствии избытка гуанидина в качестве основания. Типичные растворители включают ацетонитрил, дихлорметан, диметилсульфоксид, диметилформамид, хлороформ и их смеси.

Связующим веществом также может быть вещество, превращающее карбоновую кислоту в активированный промежуточный продукт, ко торый выделяется и/или образуется на первой стадии и на второй стадии дает возможность взаимодействовать с гуанидином. Примерами таких связующих веществ и активированных промежуточных продуктов являются тионилхлорид или оксалилхлорид для образования хлорангидрида, цианурфторид для образования фторангидрида или алкилхлорформиат, такой как изобутил- или изопропилхлорформиат, или пропанфосфоновый ангидрид (ангидрид пропанфосфоновой кислоты, РРА) с третичным аминным основанием для образования смешанного ангидрида карбоновой кислоты, или карбонилдиимидазол для образования ацилимидазола. Если связующим веществом является оксалилхлорид, предпочтительно использовать небольшое количество диметилформамида в качестве сорастворителя с другим растворителем (таким как дихлорметан), чтобы катализировать образование хлорангидрида. Указанное активированное производное кислоты можно подвергнуть взаимодействию с подходящим основанием, смешивая вместе с промежуточным продуктом в подходящем растворителе. Подходящими комбинациями растворитель/основание являются, например, дихлорметан, диметилформамид или ацетонитрил или их смеси в присутствии избытка гуанидина в качестве основания. Другие подходящие комбинации растворитель/основание включают воду или (С1-С5)спирт или их смесь вместе с сорастворителем, таким как дихлорметан, тетрагидрофуран или диоксан, и основание, такое как гидроксид натрия, калия или лития в достаточном количестве, чтобы связать кислоту, высвобождаемую во время реакции. Применение таких связующих веществ и подходящий выбор растворителей и температур известны специалистам в данной области или могут быть легко определены из литературы в свете данного описания. Эти и другие типичные условия, используемые для сочетания карбоновых кислот, описаны в НоиЬеи \УеуГ т.ХУ, часть II, ЕЛУшъек Еб., С.Тйеппе Уег1ад, 1974, 81ийдай; М.Вобаизку, Рппс1р1е8 οί Рерйбе 8уи1йс818, 8ргшдегАег1ад, Вег1ш 1984; и Тке Рерйбез, Лиа1у818, 8уи1ке515 аиб Вю1оду (еб. Е.Сгозз и ^.Ме^еη1юΓе^). уок 1-5(Лсабеш1с Ргезз, ΝΥ 1979-1983).

В одном из воплощений изобретения, кислоту формулы VI активируют избытком тионилхлорида приблизительно при температуре кипения с обратным холодильником в течение приблизительно от 15 мин до 3 ч, а избыток тионилхлорида удаляют концентрированием. Полученный хлорангидрид объединяют с избытком гидрохлорида гуанидина и неорганическим основанием, таким как гидроксид натрия в тетрагидрофуране и воде. Реакционную смесь перемешивают обычным способом при 23°С или при повышенной температуре, такой как температура кипения с обратным холодильником, в течение приблизительно 0,5-6 ч. Соеди13 нение формулы I выделяют из данной реакционной смеси разнообразными путями. Например, реакционную смесь концентрируют для удаления ТГФ; водный слой подкисляют до рН 9 и твердое вещество собирают фильтрованием. Альтернативно, соединение формулы I можно выделить экстракцией органическим растворителем. Соединение формулы I можно преобразовать в соответствующую хлористоводородную соль, обрабатывая его раствор в метаноле хлористым водородом в простом эфире и собирая полученное твердое вещество фильтрованием или концентрированием. Другие соли можно получить аналогичными способами.

Специалисты в данной области признают, что можно также напрямую преобразовать соединение формулы V в соединение формулы I, обрабатывая соединение формулы V избытком гуанидина в инертном растворителе, таком как спиртовой растворитель, например этанол, или в отсутствии растворителя приблизительно при 60-150°С.

Специалистам в данной области будет очевидно, что соединение формулы I может существовать в нескольких таутомерных формах. Все такие таутомерные формы рассматриваются как часть данного изобретения. Например, все таутомерные формы карбонилгуанидинового фрагмента соединения формулы I включены в данное изобретение. Все таутомерные формы 2хинолонового фрагмента соединения формулы I, такие как 2-гидроксихинолиновая форма, также включены в данное изобретение.

Исходные вещества и реактивы для описанных выше соединений являются также легко доступными или их могут легко синтезировать специалисты в данной области, используя подходящие способы органического синтеза.

Кроме того, когда соединение данного изобретения образует метаболиты, гидраты или сольваты, они также входят в объем данного изобретения.

Некоторые из соединений (например, пролекарства) данного изобретения являются кислыми и образуют соль с фармацевтически приемлемым катионом. Большинство соединений данного изобретения имеют основную природу и образуют соль с фармацевтически приемлемым анионом. Все такие соли, включая дисоли, входят в объем данного изобретения и могут быть получены подходящими способами. Например, их можно получить простым контактом с кислотными и основными веществами, или в водной, или неводной, или частично водной среде. Соли извлекают либо фильтрованием, осаждением с растворителем, с последующим фильтрованием, выпариванием растворителя, либо, в случае водных растворов, лиофилизацией, как удобно.

Соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения или указанного пролекарства ингибирует транспортную систему обмена натрий/протон (Να'/Η') и, следовательно, полезно в качестве терапевтического или профилактического средства при заболеваниях, вызываемых ускорением транспортного обмена натрий/протон (Να'/Η'). например, при сердечнососудистых заболеваниях [например, артериосклерозе, гипертензии, аритмии (например, при ишемической аритмии, аритмии вследствие инфаркта миокарда, аритмии после РТСА или после тромбоза и т.д.), при стенокардии, гипертрофии сердца, инфаркте миокарда, сердечной недостаточности (например, при застойной сердечной недостаточности, острой сердечной недостаточности, гипертрофии сердца и т.д.), при рестенозе после РТСА, шоке (например, при геморрагическом шоке, эндотоксиновом шоке и т.д.)], при почечных заболеваниях (например, при сахарном диабете, диабетической нефропатии, ишемической острой почечной недостаточности и т.д.), при органических нарушениях, связанных с ишемией или ишемической реперфузией [(например, при нарушениях, связанных с ишемической реперфузией сердечной мышцы, при острой почечной недостаточности, или при нарушениях, вызванных хирургическим лечением, таким как операции по имплантации шунта коронарной артерии (САВС), операции на сосудах, трансплантация органов, экстракардиальные операции или чрескожная трансполостная коронарная ангиопластика (РТСА)], при цереброваскулярных заболеваниях (например, при ишемическом ударе, геморрагическом ударе и т.д.), при цереброишемических нарушениях (например, при нарушениях, связанных с церебральным инфарктом, при нарушениях в виде осложнений, вызванных кровоизлиянием в мозг, или при отеке мозга). Соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства можно также применять как средство для защиты миокарда во время операций по имплантации шунта коронарной артерии (САВС), операций на сосудах, во время чрескожной трансполостной коронарной ангиопластики (РТСА), трансплантации органов или экстракардиальных операций.

Соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства предпочтительно можно применять в качестве средств для защиты миокарда до, во время или после операций по имплантации шунта коронарной артерии (САВС), операций на сосудах, во время чрескожной трансполостной коронарной ангиопластики (РТСА), трансплантации органов или экстракардиальных операций.

Соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства предпочтительно можно применять в качестве средств для защиты миокарда у пациентов, представляющих больных с текущим заболеванием сердца (с острыми коронарными синдромами, например с инфарктом миокарда или нестабильной стенокардией) или с явлениями ишемии мозга (например, после удара).

Соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства предпочтительно можно применять в качестве средств для постоянной защиты миокарда у пациентов с диагностированным коронарным заболеванием сердца (например, с предшествующим инфарктом миокарда или нестабильной стенокардией) или у пациентов с повышенным риском инфаркта миокарда (например, возраст свыше 65 лет и два или более факторов риска, способствующих коронарному заболеванию сердца).

В дополнение к перечисленному, соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения или указанного пролекарства весьма примечательны благодаря их сильному ингибирующему эффекту на пролиферацию клеток, например, пролиферацию клеток фибробластов и пролиферацию клеток кровеносных сосудов гладкой мышцы. По этой причине соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения или указанного пролекарства являются ценными терапевтическими средствами, применяемыми при заболеваниях, при которых клеточная пролиферация представляет первичную или вторичную причину, и могут следовательно применяться в качестве противоатеросклеротических средств и в качестве средств против отдаленных осложнений диабета, злокачественных заболеваний, фиброзных заболеваний, таких как фиброз легких, фиброз печени или фиброз почек, против гломерулярного нефросклероза, гипертрофии органов или гиперплазии, в особенности гиперплазии или гипертрофии простаты, фиброза легких, осложнений диабета или рецидивирующей стриктуры после РТСА, или заболеваний, вызванных повреждением эндотелиальных клеток.

Эффективность соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства в качестве медицинских средств для лечения подробно описанных в данном описании заболеваний млекопитающих (таких как человек), например для защиты миокарда во время операции, или защиты миокарда у пациентов с текущим заболеванием сердца или явлениями ишемии мозга, или для постоянной кардиопротекции пациентов с диагностированным коронарным заболеванием сердца демонстрируется посредством активности соединения формулы I или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения в типичных условиях ίη νίίτο и других доклинических тестах по кардио протекции [см. тест ίη νίνο в публикации К1еш Н. и др., Спси1а1юп 92:912-917 (1995); тест на изолированном сердце в публикации 5>с1ю1х V. и др., Сагбюуа5си1аг Кекеагсй, 29:260-268 (1995); тест на антиаритмию в публикации УаыЦаке М. и др., Аш.к РЬу8ю1., 36:Н2430-Н2440 (1994); анализ ЯМР в публикации Ко1ке и др., ί. Т1югас.СагбюуахсЯнгд.. 112:765-775(1996)]. Такие тесты также обеспечивают средства, с помощью которых можно сравнить активности соединения формулы I или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства с активностями других известных соединений. Результаты такого сравнения применяют для определения уровней дозировок для млекопитающих, включая людей, при лечении таких заболеваний.

Измерение активности ингибирования ΝΗΕ1 человека

Методики измерения активности ΝΗΕ-1 человека и эффективности ингибитора основываются на методиках, опубликованных \Уа18оп и др., (1РЬу8ю1., 24: 6229-6238,1991), где измеряют восстановление внутриклеточного рН, опосредованное ΝΗΕ, после внутриклеточного подкисления. Так фибробласты, стабильно экспрессирующие ΝΗΕ-1 человека (СоипШоп Ь. и др., Мо1.Рйагшасо1., 44:1041-1045(1993), высевают на покрытые коллагеном 96 луночные планшеты (50000/лунка) и выращивают в питательных средах (ΌΜΕΜ с повышенным содержанием глюкозы, 10% фетальной бычьей сыворотки, 50 ед./мл пенициллина и стрептомицина) до конфлуентности. Конфлуентные планшеты инкубируют в течение 30 мин при 37°С с чувствительной к рН флуоресцентной пробой ΒСΕСΕ (5 мкмоль; Мо1еси1аг РгоЬе, Бадеме, ОК). Клетки, нагруженные Β6Ε6Ρ, инкубируют в течение 30 мин при 37°С в кислых насыщающих средах (70 мМ хлорида холина, 50 мМ ΝΗΟ1₊ 5 мМ КС1, 1 мМ МдС1₂, 1,8 мМ СаС1₂, 5 мМ глюкозы, 10 мМ ΗΕΡΕ8, рН 7,5) и затем помещают в спектрофотометр |Р1иоге8сеп1 Ипадшд Р1а1е Кеабег (Мо1еси1аг ОМсе8, СА)]. Флуоресценцию Β6Ε6Ρ наблюдают, применяя длины волн возбуждения и излучения 485 нм и 525 нм соответственно. Внутриклеточное подкисление инициируют быстрой заменой кислой насыщающей среды на восстановительную среду (120 мМ №С1, 5 мМ КС1, 1 мМ МдС1₂, 1,8 мМ СаС1₂, 5 мМ глюкозы, 10 мМ ΗΕΡΕ8, рН 7,5) ± тестируемое соединение и наблюдают как последовательное увеличение флуоресценции Β6Ε6Ρ, зависимое от времени. Эффективность ингибиторов ΝΗΕ-1 человека вычисляют по концентрации, которая снижает восстановление внутриклеточного рН на 50% (ТС₅₀). При таких условиях ингибиторы ΝΗΕ амилорид и НОЕ-642, известные по литературным данным, имели значения ГС50 для ΝΗΕ-1 человека 50 и 0,5 мкМ, соответственно. Соединение формулы I показа ло в представленном выше тесте значение 1С₅₀, равное 200 нМ.

Ранее сообщалось, что короткие периоды ишемии миокарда, сопровождаемые реперфузией коронарной артерии, защищают сердце от последующей тяжелой ишемии миокарда (Миггу и др., С1гси1а!юи 74:1124-1136, 1986). Это явление известно как ишемическое предкондиционирование (предадаптация).

Терапевтический эффект от соединений данного изобретения по предотвращению поражения тканей сердца, получаемого при ишемическом инсульте, можно продемонстрировать ίη νίίτο в соответствии с принципами, представленными в публикации Ьш и др. (Сатбюсакс. Кек., 28:1057-1061, 1994) и конкретно раскрытыми в данном описании. Кардиопротекцию, означающую уменьшение повреждений в миокарде во время инфаркта, можно индуцировать фармакологически, применяя агонисты аденозиновых рецепторов в изолированном, ретроградно перфузируемом сердце кролика, применяемом в качестве модели ίη νίίτο предкондиционирования (предадаптации) ишемии миокарда (Ь1и и др., С’агбюгакс. Кек., 28:10571061,1994). Тест ίη νίίτο, описанный ниже, показывает, что соединение, активное при проведении теста, может также фармакологически индуцировать кардиопротекцию, то есть уменьшать объем инфаркта миокарда при введении в изолированное сердце кролика. Эффекты от тестируемого соединения могут сравниться с ишемическим предкондиционированием (предадаптацией) и с эффектом от агониста аденозина А1/А3, ΑΡΝΕΑ (Ы⁶-[2-(4-аминофенил)этил] аденозин), которые, как было показано, фармакологически индуцируют кардиопротекцию в изолированном сердце кролика (Ьш и др., Сагбюгакс. Кек., 28:1057-1061,1994). Точная методология описана ниже.

Протокол, используемый для данных экспериментов, точно следует методике, описанной в публикации Ьш и др., С’агбюгакс. Кек., 28:1057-1061,1994). Самцов новозеландского белого кролика (3-4 кг) анестезировали пентобарбиталом натрия (30 мг/кг, внутривенно). После того, как достигали глубокой анастезии (определяемой по отсутствию глазомигательного рефлекса), животное интубировали и вентилировали 100% О₂, применяя аппарат искусственной вентиляции легких с давлением выше атмосферного. Проводили левостороннюю торакотомию, обнажая сердце, и вокруг выпуклой ветви левосторонней коронарной артерии неплотно прикрепляли петлю (2-0 шелк), приблизительно на расстоянии 2/3 по отношению к верхушке сердца. Сердце удаляли из груди и быстро (<30 с) устанавливали на аппарат Лангендорфа (ЬапдепбогГГ). Сердце ретроградно перфузировали нерециркулируемым образом модифицированным раствором Кребса (118,5 мМ №С1, 4,7 мМ КС1, 1,2 мМ М§§0₄, 1,2 мМ КН₂РО₄, 24,8 мМ

NаНСОз, 2,5 мМ СаС1₂ и 10 мМ глюкозы) при постоянном давлении 80 мм рт.ст. и температуре 37°С. При перфузии поддерживали рН 7,47,5, барботируя смесь 95% О2/5% СО2. Температуру сердца тщательно контролировали, используя нагретые резервуары для физиологического раствора и водяную рубашку не только вокруг тюбинга перфузионной системы, но и изолированного сердца. Частоту сердцебиений и давление в левом желудочке определяли через баллонный катетер из латекса, который вставляли в левый желудочек и подсоединяли с помощью тюбинга из нержавеющей стали к датчику давления. Баллонный катетер внутри желудочка раздували, чтобы обеспечить систолическое давление 80-100 мм рт. ст. и диастолическое давление <10 мм рт.ст. Общий коронарный кровоток также непрерывно контролировали, используя зонд, действующий в кровотоке, и нормализуя вес сердца.

Сердцу позволяли достичь равновесного состояния в течение 30 мин, после чего сердце должно показывать устойчивые значения давления в левом желудочке в пределах параметров, обозначенных выше. Если частота сердцебиений падала ниже 180 ударов/мин в любой момент до 30 мин периода региональной ишемии, сердце стимулировали (ускоряли) приблизительно при 200 ударов/мин для продолжения эксперимента. Ишемическое предкондиционирование (предадаптацию) индуцировали путем полного прекращения перфузии сердца (глобальная ишемия) в течение 5 мин, сопровождая реперфузией в течение 10 мин. Региональную ишемию обеспечивали, сжимая петлю вокруг ветви коронарной артерии. После 30 мин региональной ишемии петлю высвобождали и проводили реперфузию сердца дополнительно в течение 120 мин.

Фармакологическую кардиопротекцию индуцировали при вливании тестируемого соединения в предварительно определяемых концентрациях, начиная за 30 мин до 30 минутной региональной ишемии и продолжая до конца 120 минутного периода реперфузии. Сердца, в которые не вводили тестируемое соединение, не подвергали ишемическому предкондиционированию (предадаптации). Известное из литературы соединение ΑΡΝΕΑ(500 нМ) перфузировали через сердца (в которые не вводили тестируемое соединение) в течение 5 минутного периода, который заканчивался за 10 мин до 30 минутной региональной ишемии.

В конце 120 минутного периода реперфузии петлю на коронарной артерии сжимали и перфузировали через сердце 0,5% суспензию частиц флуоресцентного цинк-кадмиевого сульфата (1-10 мкМ) (Энке ЗаепбПс Согр. (Ра1о Α1ίο, СА)); она окрашивает весь миокард, кроме той области, которая является областью повышенного риска при развитии инфаркта («область повышенного риска»). Сердце удаляли из аппарата Лангендорфа (ЬапдспбогГГ). промокали досуха, заворачивали в алюминиевую фольгу и сохраняли в течение ночи при -20°С. На следующий день сердце разрезали на 2 мм поперечные срезы от верхушки до верхней части желудочков. Срезы окрашивали 1% раствором трифенилтетразолийхлорида (ТТС) в забуференном фосфатом физиологическом растворе, в течение 20 мин при 37°С. Затем ТТС подвергали взаимодействию с живой тканью (содержащей ΝΆΌ-зависимые дегидрогеназы), указанный краситель отличает живую (окрашивает в красный цвет) ткань и мертвую ткань (не окрашивает инфарктную ткань). Для каждого среза левого желудочка вычисляют инфарктную площадь (неокрашенная) и площадь (область) повышенного риска (никаких флуоресцентных частиц), применяя прокалиброванный анализатор изображения. Чтобы нормализовать различие между сердцами с ишемическим повреждением в области повышенного риска, данные выражали в виде отношения площади инфаркта к площади «области повышенного риска» (% ΙΛ/ΛΛΚ.). Все данные выражали в виде среднего значения ±стандартная ошибка и сравнивали статистически, применяя непараметрический критерий Мапи-^Ы1пеу с коррекцией ВоиГеттош для множественных сравнений. Результаты считались значимыми при р<0,05.

Результаты указанного выше теста ίη νίίτο можно применить для демонстрации того, что соединения данного изобретения индуцируют значительную кардиопротекцию по сравнению с контрольной группой.

Вводить соединение формулы Ι, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства можно любым способом, который доставит соединение формулы Ι, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства предпочтительно к требуемой ткани (например, к тканям печени и/или сердца). Такие способы включают пероральные, парентеральные, интрадуоденальные способы введения лекарственного средства и т.д. В общем случае соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения или указанного пролекарства вводятся в виде однократных (например, один раз в день) или многократных доз или в виде постоянного вливания, например, в изотоническом физиологическом растворе.

Соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения или указанного пролекарства полезно, например, для снижения или минимизации поражения, воздействуя непосредственно на любую ткань, которая может быть восприимчива к ишемическому/реперфузионному повреждению (например, на сердце, мозг, легкое, почку, печень, кишку, скелетную мышцу, сет чатку), благодаря, например, посредничеству ΝΗΕ-1, в результате ишемического явления (например, инфаркта миокарда). Активное соединение, следовательно, полезно для профилактического применения, чтобы предотвращать (например, в будущем или профилактически), ослаблять или задерживать поражение ткани (например, ткани миокарда) у пациентов с повышенным риском ишемии (например, ишемии миокарда).

В общем случае соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения или указанного пролекарства согласно данному изобретению вводится перорально или парентерально (например, внутривенно, внутримышечно, подкожно или интрамедуллярно). Также может быть показано местное применение, например, когда пациент страдает от желудочно-кишечных расстройств или всякий раз, когда лекарственное средство лучше прикладывать к поверхности ткани или органа, как определит штатный врач больницы.

Количество и выбор времени введения соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства будут, конечно, зависеть от субъекта, подвергаемого лечению, от серьезности заболевания, от способа введения и от показаний, предписанных врачом. Таким образом, из-за вариабильности от пациента к пациенту дозировки, приведенные ниже, представляют собой рекомендации, и врач может подбирать дозы лекарственного средства, чтобы достичь лечения, которое врач считает подходящим для пациента. Принимая во внимание уровень требуемого лечения, врач должен сбалансировать ряд факторов, таких как возраст пациента, наличие ранее существующей болезни, а также присутствие других заболеваний (например, сердечно-сосудистого заболевания).

Обычно применяется такое количество соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства, которое эффективно для защиты от ишемии. Предпочтительная дозировка составляет приблизительно 0,01-100 мг/кг/день соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства согласно данному изобретению. Особенно предпочтительная дозировка составляет приблизительно 0,01-50 мг/кг/день соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства согласно данному изобретению.

В одном из способов введения соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства можно вводить только до операции на сердце (например, в течение 24 ч перед операцией), во время или после операции на сердце (например, в течение 24 ч после операции), когда имеется риск ишемии миокарда. В особенно предпочтительном способе проводят вливание дозы насыщения (ударной дозы), содержащей приблизительно 1-300 мг, в течение периода времени приблизительно от 1 мин до 1 ч перед операцией, сопровождаемой постоянным вливанием приблизительно 1-100 мг/кг/день для поддержания в предоперационный, операционный и постоперационный периоды, включая, например, приблизительно от 2 до 7 дней постоперационного лечения. Соединение данного изобретения можно также вводить в постоянном ежедневном режиме.

Соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства обычно вводят в форме фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства, вместе с фармацевтически приемлемым наполнителем, носителем или разбавителем. Таким образом, соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства можно вводить в любой подходящей дозированной форме: пероральной, парентеральной, ректальной или трансдермальной.

Фармацевтическая композиция для перорального введения может быть в форме растворов, суспензий, таблеток, пилюль, капсул, порошков и т.п. Таблетки, содержащие различные эксципиенты, такие как цитрат натрия, карбонат кальция и фосфат кальция, применяют наряду с различными дезинтеграторами, такими как крахмал, предпочтительно картофельный или крахмал тапиоки, и некоторые комплексные силикаты, вместе со связующими реагентами, такими как поливинилпирролидон, сахароза, желатин и акация. Дополнительно для изготовления таблеток часто применяют смазки, такие как стеарат магния, лаурилсульфат натрия и тальк. Твердые композиции подобного типа также применяют в виде содержимого мягких и твердых желатиновых капсул; предпочтительные материалы в связи с этим также включают лактозу или молочный сахар, также как полиэтиленгликоли с высокой молекулярной массой. Когда требуются водные суспензии и/или эликсиры для перорального введения, соединения данного изобретения можно объединить с различными подсластителями, корригентами, красящими агентами, эмульгаторами и/или суспендирующими агентами, а также с такими разбавителями, как вода, этанол, пропиленгликоль, глицерин и подобные им различные их комбинации.

Для парентерального введения можно применять растворы, например, в кунжутном или арахисовом масле или в водном пропиленгликоле, также как стерильные водные растворы соответствующих водорастворимых солей. В такие водные растворы, в случае необходимости, можно ввести подходящий буфер и жидкий разбавитель, прежде всего обеспечивающий изотоничность с достаточным количеством физиологического раствора или глюкозы. Такие водные растворы особенно подходят для внутривенных, внутримышечных, подкожных и интраперитонеальных инъекций. В связи с этим, все применяемые стерильные водные средства легко можно получить стандартными способами, хорошо известными специалистам в данной области.

Для трансдермального (например, местного) введения готовят разбавленные стерильные водные или частично водные растворы (обычно с концентрацией приблизительно 0,1-5%), другими словами, подобные указанным выше растворам для парентерального введения.

Способы приготовления различных фармацевтических композиций с определенным количеством активного ингредиента известны, или будут очевидны в свете данного описания для специалистов в данной области. Например, способы приготовления фармацевтических композиций см. в публикации ИепипЦоЮ РйаттасеиИса1 8с1спес5. Маск РиЫМнпд Сотрапу, Еакег, Ра., 15-ое издание (1975).

Фармацевтические композиции согласно изобретению могут содержать, например, 0,0001-95% соединения формулы I, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства. В любом случае композиция или состав, которые нужно вводить, будут содержать количество, эффективное для лечения заболевания/состояния субъекта, которого лечат.

Соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения или указанного пролекарства в любом случае будут вводиться в подходящем составе. Следующие примеры составов приводятся только для иллюстрации, и их не следует считать ограничивающими объем настоящего изобретения.

В составах, которые представлены ниже, «активный ингредиент» представляет соединение формулы I, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства.

Состав 1. Желатиновые капсулы.

Твердые желатиновые капсулы получают, используя следующие ингредиенты:

Ингредиент Количество, мг/капсулу

Активный ингредиент 0,25-100

Крахмал, ΝΡ 0-650

Текучий порошок крахмала 0-50

Жидкий силикон 350 сантистоксов 0-15

Состав для таблеток готовят, используя указанные ниже ингредиенты: Состав 2. Таблетки.

Ингредиент Количество (мг/таблетку) Активный ингредиент 0,25-100

Целлюлоза, микрокристаллическая 200-650

Диоксид кремния, дымящий 10-650

Стеариновая кислота (81еага1 аеИ) 5-15

Компоненты смешивают и прессуют для образования таблеток.

Альтернативно, таблетки, каждая из которых содержит 0,25-100 мг активных ингредиентов, можно составить следующим образом.

Состав 3. Таблетки.

Ингредиент

Активный ингредиент

Крахмал

Целлюлоза, микрокристалличеКоличество, мг/таблетку 0,25-100 45 35 ская

Поливинилпирролидон (10% раствор в воде)4

Натрийкарбоксиметилцеллюлоза4,5

Стеарат магния0,5

Тальк1

Активный ингредиент, крахмал и целлюлозу пропускают через сито № 45 меш США и тщательно перемешивают. Раствор поливинил пирролидона смешивают с полученными по рошками, которые затем пропускают через сито № 14 меш США. Гранулы, полученные таким образом, сушат при 50-60°С и пропускают через сито № 18 США. Натрийкарбоксиметилцеллю лозу, стеарат магния и тальк, предварительно пропущенные через сито № 60 США, затем добавляют к гранулам, которые после смешивания прессуют на таблетировочной машине для получения таблеток.

Суспензии, каждая из которых содержит 0,25-100 мг активного ингредиента в 5 мл дозе, получают следующим образом

Состав 4. Суспензии.

Ингредиент	Количество,
мг/5 мл
Активный ингредиент	0,25-100
Натрийкарбоксиметилцеллюлоэа	50
Сироп	1,25
Раствор бензойной кислоты	0,10
Корригент	В дост. кол-ве
Краситель	В дост. кол-ве
Очищенная вода	До 5 мл

Активный ингредиент пропускают через сито № 45 меш США и смешивают с натрийкарбоксиметилцеллюлозой и сиропом до образования однородной пасты. Раствор бензойной кислоты, корригент и краситель разбавляют частью воды и добавляют при перемешивании.

Количество (вес.%) 0,25 25,75

74,00

Затем добавляют достаточное количество воды до получения требуемого объема.

Для аэрозоля готовят раствор, содержащий следующие ингредиенты.

Состав 5. Аэрозоль.

Ингредиент

Активный ингредиент Этанол

Пропеллент 22 (хлордифторметан)

Активный ингредиент смешивают с этанолом и смесь добавляют к части пропеллента 22, охлажденного до 30°С, и переносят в заправочное устройство. Затем требуемое количество подают в контейнер из нержавеющей стали и разбавляют остающимся пропеллентом. Затем блоки гидрораспределителя присоединяют к контейнеру.

Суппозитории готовят следующим образом.

Состав 6. Суппозитории.

Ингредиент Количество (мг/суппозиторий)

Активный ингредиент 250

Глицериды насыщенных 2000 жирных кислот

Активный ингредиент пропускают через сито № 60 меш США и суспендируют в глицеридах насыщенных жирных кислот, предварительно расплавленных, с использованием минимально необходимого тепла. Затем смесь отливают в пресс-форму для суппозиториев номинальной емкости 2 г и дают остыть.

Композицию для внутривенного применения готовят следующим образом.

Состав 7. Внутривенный раствор.

Ингредиент Количество

Активный ингредиент 25 мг

Изотонический физиологический раствор 1000 мл

Раствор указанных выше ингредиентов вводят пациенту внутривенно.

Общие экспериментальные методики

Спектры ¹Н ЯМР (300 и 400 МГц) регистрировали на спектрометре Уапаи ИиНу + 300 или 400 (Уапаи Со., Ра1о Л11о,СЛ), оснащенном двумя КР каналами, непрямым детектированием и градиентами импульсного поля (только по оси Ζ). Обычно спектры получали при температуре, близкой к комнатной (21°С), а для устанавливаемых образцов применяли стандартные программы автоблокировки и авторегулировки. Химические сдвиги сигналов выражали в миллионных долях в сторону слабого поля, относительно триметилсилана. Формы пиков обозначали следующим образом: с, синглет; д, дублет, т, триплет, кв, квадруплет; м, мультиплет; ш.с, широкий синглет. Резонансы, обозначенные как обмениваемые, в отдельном эксперименте ЯМР, когда образец встряхивали с несколькими каплями Э₂О в том же растворителе, не выявля лись. Масс-спектры химической ионизации при атмосферном давлении (АРС1М8) были получены на спектрометре Είδοηκ Р1аГогт II или М1стотакк ΖΜΌ (М1его8та88, Мапсйейег, и.К.). При описании интенсивности хлор- или бромсодержащих ионов соблюдалось предполагаемое соотношение интенсивностей (приблизительно 3:1 для ³⁵С1/³⁷С1-содержащих ионов и 1:1 для ⁷⁹Вг/⁸¹Вг-содержащих ионов), М основана на ³⁵С1 и ⁷⁹Вг. В некоторых случаях приводятся только репрезентативные пики ¹Н ЯМР и АРС1М8.

Хроматографию на колонке проводили либо с силикагелем Вакег 8Шса Сс1 (40 мкм) (Ι.Τ. Вакег, РЫШркЬитд, N.1.), либо с силикагелем 8Шса Се1 60 (ЕМ 8с1епсе5, ШЬЬйота, N.1.) на стеклянных колонках или на флеш-колонках 12,40 или 75 (Вю1аде)(Сйаг1о11е8уШе, УА) при пониженном давлении азота. Радиальную хроматографию проводили, применяя хроматотрон (Сйтота1о1топ), (Натлкоп, Ра1о А11о, СА). Если не оговорено иначе, применяли реактивы, имеющиеся в продаже. Обезвоженные диметилформамид, 2-пропанол, метанол, диметилсульфоксид, 1,2-дихлорэтан, тетрагидрофуран, толуол, дихлорметан и другие растворители для реакции поставлялись А16пс11 Сйет1еа1 Сотрапу (Мй^аикее, ХУщеощш).

Микроанализы проводили в аналитической лаборатории 8с11\уагхкорГ М1стоапа1уИса1 ЬаЬота1оту, ^ообыбе, ΝΥ. Термины «концентрированный в вакууме» и «удаленный в вакууме» относятся к удалению растворителя при пониженном давлении на роторном испарителе с температурой раствора меньше чем 90°С. Реакции, проводимые при «0-20°С» или «0-25°С», проводили при начальном охлаждении сосуда в изолированной ванне со льдом, которая позволяла поднимать температуру до комнатной в течение нескольких часов. Сокращение «мин» и «ч» означает «минут» и «час», соответственно.

Пример 1. Гидрохлорид 5-амино-2хинолона.

Раствор 5-нитро-2-хинолона (12,37 г, 65 ммоль) (полученный, как описано Саррк Ι.Ό.; НатШоп С.8. 1.Ат.Сйет.8ос. 1938,60,2104) в этаноле ЕЮН (176 мл) в атмосфере азота обрабатывали 8пС1₂-2Н₂О (73,4 г, 325 ммоль). Гетерогенной реакционной смеси давали перемешиваться при 23°С в течение 2 ч и нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 2 ч. Полученную гетерогенную смесь охлаждали до 23°С и отфильтровывали. Твердое вещество растирали с НС1 (1 М, водн., 78 мл, 78 ммоль) при температуре кипения с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждали до 23°С и отфильтровывали с получением 10,08 г желаемого продукта (выход 78%).

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-66) δ 6,42 (д, 1=10, 1Н), 6,71 (д, 1=7,6, 1Н), 6,81 (д, 1=8, 1Н),

7,27 (д, 1=8, 1Н), 8,04 (д, 1=10, 1Н), 11,71 (ш.с, 1Н).

АРС1М8 161 [М+1]⁺.

Пример 2. Гидрохлорид 5-гидразино-2-хинолона.

В раствор гидрохлорида 5-амино-2-хинолона (10,08 г, 51,2 ммоль) в НС1 (концентрированная, 42,7 мл) и Н₂О (18,2 мл) при 0°С добавляли по каплям раствор NаNО₂ (3,53 г, 51,2 ммоль) в Н2О (26,4 мл) при поддержании температуры ниже 5°С. Полученной суспензии красного цвета давали перемешиваться при 0°С в течение 1 ч.

В отдельной трехгорлой круглодонной колбе, оборудованной механической мешалкой, охлаждали до 0°С взвесь 8пС1₂-2Н₂О (25,41 г, 112,6 ммоль) в НС1 (концентрированная, 34,2 мл) и Н₂О (93,9 мл). В суспензию по каплям добавляли красную суспензию соли диазония, полученную, как описано выше, при поддержании температуры ниже 5°С. Реакционную смесь нагревали до 23°С и давали перемешиваться в течение 3 ч. Полученную суспензию отфильтровывали. Собранное твердое вещество растирали с НС1 (1 М водная, 61,4 мл, 61,4 ммоль) при 23°С в течение 30 мин. Твердое вещество собирали фильтрованием с получением 7,88 г желаемого продукта (выход 73%).

'|| ЯМР (400 МГц, ДМСО-66) δ 6,43 (д, 1=10, 1Н), 6,63 (д, 1=8, 1Н), 6,88 (д, 1=8, 1Н),

7,38 (т, 1=8, 1Н), 7,98 (д, 1=10, 1Н), 8,97 (ш.с, 1Н), 10,40 (ш.с, 1Н), 11,77 (ш.с, 1Н).

АРС1М8 176 [М+1]⁺.

Пример 3. Метил 5-циклопропил-1-(2-хинолон-5-ил)-1Н-пиразол-4-карбоксилат.

Раствор метил 3-циклопропил-2-(диметиламинометилен)-3-оксопропаноата (7,85 г, 39,8 ммоль) в ЕЮН (257 мл) обрабатывали в атмосфере азота триэтиламином (7,77 мл, 55,8 ммоль), затем гидрохлоридом 5-гидразино-2хинолона (7,88 г, 37,2 ммоль). Полученную гетерогенную реакционную смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 4 ч и охлаждали до 23°С. Бледножелтое твердое вещество, выпадающее в осадок, собирали фильтрованием с получением 5,06 г желаемого продукта (выход 44%).

'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-66) δ 0,59-0,73 (м, 4Н), 1,87 (м, 1Н), 3,79 (с, 1Н), 6,54 (д, 1=10, 1Н), 7,17 (д, 1=10, 1Н), 7,34 (д, 1=7,5, 1Н), 7,49 (д, 1=8, 1Н), 7,66 (т, 1=8, 1Н), 8,08 (с, 1Н), 12,10 (с, 1Н).

АРС1М8 310 [М+1]⁺.

Пример 4. 5-Циклопропил-1-(2-хинолон-5ил)-1Н-пиразол-4-карбоновая кислота.

Взвесь метил 5-циклопропил-1-(2хинолон-5-ил)-1Н-пиразол-4-карбоксилата (5,06 г, 16,4 ммоль) в ТГФ (81,8 мл) и МеОН (40,9 мл) обрабатывали ЬЮН (1 М водный, 81,8 мл, 81,8 ммоль) и нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 2,5 ч. Полученную гетерогенную смесь охлаждали до 23°С. МеОН и ТГФ удаляли в вакууме. Полу ченную взвесь охлаждали до 0°С и подкисляли до рН 3-4, применяя НС1 (концентрированную). Смесь отфильтровывали. Твердое вещество сушили с получением 4,94 г желаемого продукта (выход 100%).

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб) δ 0,58 (д, 1=4,4, 2Н), 0,б4 (д, 1=8, 2Н), 1,82 (м, 1Н), б,50 (д, 1=10, 1Н), 7,12 (д, 1=10, 1Н), 7,27 (д, 1=7,б, 1Н),

7,44 (д, 1=8,4, 1Н), 7,б0 (т, 1=8, 1Н), 7,97 (с, 1Н), 12,03 (ш.с, 1Н), 12,38 (ш.с, 1Н).

АРС1МЗ 29б [М+1]⁺.

Пример 5. Гидрохлорид [5-циклопропил-1(2-хинолон-5-ил)-1Н-пиразол-4-карбонил]гуанидина.

Раствор 5-циклопропил-1-(2-хинолон-5ил)-1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты (13,27 г, 45,0 ммоль) в ЗОС1₂ (б0 мл) нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 1 ч. Избыток ЗОС1₂ удаляли в вакууме. Остаток обрабатывали сухим (обезвоженным) толуолом и концентрировали в вакууме. Раствор твердого остатка в ТГФ (50 мл) обрабатывали раствором гидрохлорида гуанидина (15,47г, 1б2 ммоль) в №1ОН (2 М, водный, 1б2 мл, 324 ммоль) в атмосфере азота. Полученную смесь перемешивали при 23 °С в течение 2 ч. Затем реакционную смесь концентрировали в вакууме для удаления ТГФ. Водный слой охлаждали до 0°С и подкисляли до рН 9. Выпадающее в осадок бледно-желтое твердое вещество собирали с получением 11,41 г свободного основания желаемого соединения. Раствор твердого вещества в МеОН (700 мл) обрабатывали НС1 (1М в простом эфире, 84,9 мл, 84,9 ммоль). Объем растворителя уменьшали в вакууме. Полученный бледно-коричневый осадок собирали с получением 8,49 г (выход 51%). (Дополнительно продукт в виде свободного основания можно получить экстракцией водного слоя, используя ЕЮАс-ТГФ (1:1)).

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб) δ 0,51 (м, 2Н), 0,70 (дд, 1=2, 8,4, 2Н), 1,92 (м, 1Н), б,53 (дд, 1=1,б, 10, 1Н), 7,17 (д, 1=10, 1Н), 7,32 (д, 1=7, 1Н), 7,48 (д, 1=8,4, 1Н), 7,б4 (т, 1=8,2, 1Н), 8,34 (ш.с, 2Н), 8,б0 (ш.с, 3Н), 11,б4 (с, 1Н), 12,10 (с, 1Н).

АРС1МЗ 337 [М+1]⁺.

Пример б. Идентификация [5-циклопропил-1-(2-хинолон-5-ил)-1Н-пиразол-4-карбонил] гуанидина в образцах плазмы человека жидкостной хроматографией (ЖХ)/масс спектроскопией(МС)/МС и ЖХ/ЯМР.

Человеку (мужчинам и женщинам) внутривенно вводили моногидрат моногидрохлорида 5-циклопропил-1 -(хинолин-5ил)-1Н-пиразол4-карбонил]гуанидина. Образцы плазмы человека объединяли и осаждали белки двойным объемом ацетонитрила. После центрифугирования супернатант концентрировали на водяной бане в атмосфере Ν₂ при 40°С.

Аликвоты (по 100 мкл или 50 мкл) концентрированных образцов вносили в прибор БС/МЗ/МЗ, оборудованный колонкой (4,б х 150 мм) ΖογΕιχ Кх-С8, анализировали на массспектрометре РЕ Зс1ех АР1 2000 или Είηηί^αη БС’О и проверяли на детекторе УФ при 254 нм. Элюент из колонки разделяли так, чтобы 5% элюента направлялось на масс-спектрометр, а остальное количество приходилось на детектор УФ. Анализы выполняли, используя скорость потока подвижной фазы 1 мл/мин, причем подвижная фаза состояла из 5 мМ формиата аммония (рН 3,0) в качестве растворителя А и ацетонитрила в качестве растворителя В. Градиент отношения В/А включал значения от 5/95 до 40/б0 в течение 20 минутного периода после 3 мин периода начального удерживания. При таких условиях ЖХ метаболит обнаруживали при времени удерживания 11,8 мин ([5-циклопропил-1-(хинолин-5-ил)-1Н-пиразол-4-карбонил] гуанидин обнаруживали при 13,7 мин). Различие в 1б массовых единиц между [5циклопропил-1-(хинолин-5-ил)-1Н-пиразол-4карбонил] гуанидином (т/ζ 321) и метаболитом (т/ζ 337) из плазмы человека предполагает, что он образуется путем окисления. Ионный спектр продукта после БС/МЗ/МЗ протонированного метаболита при т/ζ 337 ([М+Н]⁺) свидетельствовал о наличии фрагментных ионов при т/ζ 278, 2б0, 250, 23б, 223 и 208.

Из указанного выше концентрированного образца экстракцией твердой фазы удаляли соли. Образец концентрировали до содержания приблизительно 5-10 мкг метаболита. 50 мкл данного образца вносили в прибор БС/ЯМР, оборудованный колонкой (4,б х 150 мм) ΖογΕι.χ Кх-С8, анализировали на ЯМР спектрометре (500 МГц) Вгикег и проверяли на детекторе УФ при 235 нм. Анализы выполняли, применяя скорость потока подвижной фазы 1 мл/мин, причем подвижная фаза состояла из 15 мМ дейтерированной водной муравьиной кислоты с установленным с помощью дейтерированного в И₂О гидроксида аммония рН 3,3, в качестве растворителя С, и ацетонитрила-бз, в качестве растворителя И. Градиент И/С включал значения от 5/95 до 20/80 в течение 17 мин периода после 3 мин периода начального удерживания. Требуемый метаболит был зафиксирован в пробе ЯМР, при использовании методики остановки потока на пике при 13,б мин. Протоннные ЯМР спектры и СОЗУ спектры метаболита человека содержали два дублета (б,б4 и 7,41 м.д.), которые были связаны друг с другом, но не с какимилибо другими пиками. Отсутствие пика при 8,92 м.д. в сторону слабого поля, который присутствует в [5-циклопропил-1-(хинолин-5-ил)-1Нпиразол-4-карбонил]гуанидине, предполагало, что месту окисления соответствует 2-положение хинолинового кольца. На основании этих данных определяли структуру метаболита в виде [5циклопропил-1-(2-хинолон-5-ил)-1Н-пиразол-4 карбонил] гуанидина. Сравнение спектра ¹Н ЖХ/ЯМР метаболита и синтетического стандарта гидрохлорида [5-циклопропил-1 -(2-хинолон-5-ил)1Н-пиразол-4-карбонил]гуанидина, полученного, как описано в примере 5, подтвердило установленную структуру.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы I его пролекарство или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения или указанного пролекарства при условии, что не включен [5 -циклопропил-1 -(хинолин-5-ил)-1Н-пиразол4-карбонил]гуанидин.
2. [5 -Циклопропил-1 -(2-хинолон-5-ил)-1Нпиразол-4-карбонил] гуанидин или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Способ снижения поражения ткани вследствие ишемии или гипоксии, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по п.1, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства.
4. Способ по п.3, где ткань представляет ткань сердца, мозга, печени, почки, легкого, кишки, скелетной мышцы, селезенки, поджелудочной железы, нерва, спинного мозга, ткань сетчатки, сосудистой сети или ткань кишечного тракта.
5. Способ по п.3, где количество соединения по п.1, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства составляет приблизительно от 0,01 до 50 мг/кг/день.
6. Способ по п.5, где млекопитающее представляет женщину или мужчину.
7. Способ по п.6, где указанная ткань представляет ткань сердца.
8. Способ по п.6, где указанная ткань представляет ткань мозга.
9. Способ по п.6, где указанная ткань представляет ткань печени.
10. Способ по п.6, где указанная ткань представляет ткань почки.
11. Способ по п.6, где указанная ткань представляет ткань легкого.
12. Способ по п.6, где указанная ткань представляет ткань кишки.
13. Способ по п.6, где указанная ткань представляет ткань скелетной мышцы.
14. Способ по п.6, где указанная ткань представляет ткань селезенки.
15. Способ по п.6, где указанная ткань представляет ткань поджелудочной железы.
16. Способ по п.6, где указанная ткань представляет ткань сетчатки.
17. Способ по п.6, где соединение вводят профилактически.
18. Способ по п.6, где соединение вводят перед операцией.
19. Способ по п. 6, где соединение вводят перед операцией на сердце.
20. Способ по п.6, где соединение вводят во время операции.
21. Способ по п.6 где соединение вводят во время операции на сердце.
22. Способ по п.6, где соединение вводят в течение 24 ч после операции.
23. Способ по п.6, где соединение вводят в течение 24 ч после операции на сердце.
24. Способ по п.6, где поражение ткани вследствие ишемии представляет ишемическое поражение и возникает во время трансплантации органа.
25. Способ по п.6, где соединение вводят для предотвращения ишемического повреждения миокарда в ходе хирургической операции.
26. Фармацевтическая композиция, которая содержит соединение по п.1, его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения или указанного пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или разбавитель.
27. Фармацевтическая композиция для снижения поражения ткани в результате ишемии или гипоксии, которая содержит терапевтически эффективное количество соединения по п.1, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения или указанного пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или разбавитель.
28. Способ по п.6, где соединение вводят до, во время и после операции.
29. Способ по п.6, где соединение вводят до, во время и после операции на сердце.
30. Способ продуцирования [5-циклопропил-1-(2-хинолон-5-ил)-1Н-пиразол-4-карбонил]гуанидина введением [5-циклопропил-1(хинолин-5-ил)-1Н-пиразол-4-карбонил]гуанидина человеку.