EA003398B1 - Лекарственный комплекс c полимерным носителем - Google Patents

Лекарственный комплекс c полимерным носителем Download PDF

Info

Publication number
EA003398B1
EA003398B1 EA200001217A EA200001217A EA003398B1 EA 003398 B1 EA003398 B1 EA 003398B1 EA 200001217 A EA200001217 A EA 200001217A EA 200001217 A EA200001217 A EA 200001217A EA 003398 B1 EA003398 B1 EA 003398B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
group
groups
lower alkyl
drug
compound
Prior art date
Application number
EA200001217A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200001217A1 (ru
Inventor
Хироси Сусаки
Казухиро Иноуе
Хироси Куга
Original Assignee
Дайити Фармасьютикал Ко., Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дайити Фармасьютикал Ко., Лтд. filed Critical Дайити Фармасьютикал Ко., Лтд.
Publication of EA200001217A1 publication Critical patent/EA200001217A1/ru
Publication of EA003398B1 publication Critical patent/EA003398B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Сложные лекарственные препараты, полезные в качестве DDS-соединений, общей формулыA-R-NH-Y-CH-O-CO-Q(где А представляет полимер, служащий носителем лекарственного соединения; R представляет спейсер, включающий одну аминокислотную молекулу или включающий от 2 до 8 молекул аминокислот, связанных друг с другом с помощью пептидной связи; Y представляет необязательно замещенный фенилен и Q представляет остаток лекарственного соединения, такого как противоопухолевое средство). Соединения позволяют быстро и региоселективно высвобождать лекарственные соединения, такие как противоопухолевые или противовоспалительные средства, проявляя, таким образом, ожидаемое лекарственное действие без потери эффективности.

Description

Данное изобретение относится к комплексному лекарственному препарату (лекарственному комплексу), в котором носитель лекарственного соединения, такой как полисахаридные производные, и лекарственное соединение, такое как противоопухолевые средства, соединены друг с другом с помощью спейсера.
Описание предшествующего уровня
Противоопухолевые средства, используемые для лечения твердых опухолей, таких как опухоль легкого или опухоли органов пищеварения, и раковых заболеваний крови, таких как лейкемия, систематически вводятся посредством таких способов введения, как внутривенный или пероральный способ введения, затем распределяются в определенные сайты опухолей и ингибируют или подавляют пролиферацию раковых клеток, проявляя свое терапевтическое действие. Однако систематически вводимые противоопухолевых средства из крови быстро поступают в печень и ретикулоэндотериальные органы или быстро выводятся в мочу и, соответственно, их концентрации в крови могут со временем снижаться, что приводит к недостаточному поступлению этих лекарственных средств в сайты опухолей. Кроме того, обычно используемые противоопухолевые средства обладают невысокой селективностью доставки в сайты опухолей (невысокой опухолевой селективностью) и, следовательно, противоопухолевые средства однородно распределяются в различных тканях и клетках всего организма и действуют как цитотоксины и в отношении нормальных клеток и тканей, что очень быстро приводит к проблемам проявления побочных эффектов, например, в виде рвоты, гипертермии или алопеции. Следовательно, существует необходимость в разработке противоопухолевых средств, которые эффективно и селективно распределялись бы в сайты опухолей.
В качестве одного из решений этой проблемы был предложен способ, в котором полисахаридное производное, содержащее карбоксильные группы, использовалось в качестве носителя лекарственного соединения, а противоопухолевое средство связывалось с полисахаридным производством для замедления процесса выведения противоопухолевого средства из крови и для повышения его селективности в отношении тканей опухолей. Например, в международной заявке \¥О 94/19376 описывается лекарственный комплекс, в котором пептидная цепь (количество аминокислотных остатков: 18) связана с карбоксильной группой полисахарида, содержащего карбоксильные группы, и дополнительно с помощью пептидной цепи присоединяются доксорубицин, даунорубицин, митомицин С, блеомицин и т.п. Кроме того, в заявке на патент Японии 1араиеке Ра1еи1 Риббсабоп (КОКОКи) № (Не1) 7-84481/1995 описывается лекарственный комплекс, в котором ука занное выше противоопухолевое средство вводится в карбоксиметилированное манноглюкановое (таппод1исап) производное с использованием основания Шиффа или амидной связи между кислотами. Эти лекарственные комплексы обладают более выраженной противоопухолевой активностью, а также пониженной токсичностью и меньшими побочными эффектами по сравнению с самими противоопухолевыми средствами, которые связаны с носителями лекарственных соединений.
Опубликовано несколько сообщений, относящихся к лекарственным комплексам, в которых в качестве носителей лекарственного соединения используются полисахаридные производные, насыщенные гидроксильными группами, например, Векеагсбек оп ро1укассбапберерббе-бохогибюш сотр1ехек - Согге1абопк беВгееп 81аб1ППе8 оГ ро1укассбапбе сагпек ш б1ооб апб 1беб апбпеор1акбс асбу1бек (Лбк1гас1к оГ 10'1' Меебпд оГ 1арап 8ос1е1у оГ Эгид Иебуегу 8ук1ет, 279, 1994); Векеагсбек оп ро1укассбапбе-рерббебохогибют сотр1ехек - Рбагтасокшебск апб апбпеор1акбс асбуйу (Лбк1гас1к оГ 9'1' Аппиа1 Меебпд оГ 1арапеке 8ос1е1у Гог 1бе к!ибу оГ хепоЬюбск, 292, 1994); Абк1гас1к оГ 194Ь 8етшаг оГ Тгепбк т Векеагсб апб Иеуе1ортеп1 (бе1б бу 1бе огдашхабоп Гог Рбагтасеибса1 8аГе1у апб Векеагсб), Ό-9, 1995; Векеагсбек оп бгид бебуегу 1о 1итог бккие бу ро1укассбапбе сатегк (Абк1гас1к оГ 12'1' Со11о1б апб 1п1егГасе Тесбпо1оду 8утрокшт, Тбе Сбетюа1 8ос1е1у оГ 1арап, 51, 1995). Кроме того, в качестве технологии для связывания противоопухолевых средств с антителами и т. п. были разработаны реагенты, включающие п-аминобензилоксикарбонильную группу и пептидную группу (ОиЬочсб|к, О.М., Тебабебгоп Ье11., 38, 5257, 5261, 1997). Однако применение лекарственных комплексов, содержащих лекарственные носители, как описано выше, еще не известно.
Описание изобретения
Авторы данного изобретения провели всесторонние исследования лекарственных комплексов, в которых носитель лекарственного соединения, такой как полисахаридные производные, и лекарственное соединение, такое как противоопухолевые средства, соединены друг с другом через спейсер (промежуточное звено), включающий от 1 до 8 аминокислот, посредством чего получается лекарственный комплекс, который может селективно доставлять лекарственное соединение, такое как противоопухолевые средства, в определенные сайты в целевых тканях (1п1егпабопа1 Риббсабоп XVО 97/46260). Однако авторами было обнаружено, что скорость высвобождения лекарственного соединения из лекарственного комплекса, который включает спейсер, содержащий от 1 до 8 аминокислот, иногда не зависит от скорости ферментативного расщепления (гидролиза под действием пептидазы) спейсерного фрагмента, и ино гда на скорость высвобождения может влиять стерическая структура лекарственного соединения. В частности установлено, что эта тенденция является особенно выраженной, когда связующий фрагмент между реакционноспособной функциональной группой (например, аминогруппой) лекарственного соединения и спейсером имеет стерическое препятствие. Кроме того, при использовании таких лекарственных комплексов лекарственные соединения иногда высвобождаются посредством ферментативного расщепления спейсера, содержащего одну или несколько остаточных аминокислот, которые образуются из спейсера, что иногда вызывает неупорядоченное высвобождение лекарственного соединения.
Таким образом, предметом данного изобретения является лекарственный комплекс, полученный посредством связывания лекарственного соединения, такого как противоопухолевые средства и противовоспалительные средства, с носителем лекарственного соединения с помощью спейсера, содержащего от 1 до 8 аминокислот, который сайт-селективно распределяет активный ингредиент в сайты опухоли и т.п. и в котором скорость высвобождения лекарственного соединения, по существу, зависит от скорости ферментативного расщепления спейсерного фрагмента. Кроме того, другим предметом данного изобретения является лекарственный комплекс, в котором скорость высвобождения лекарственного соединения по существу не зависит от стерической структуры лекарственного соединения, и может быть достигнута такая скорость высвобождения лекарственного соединения, которая ожидается в соответствии со скоростью ферментативного расщепления спейсерного фрагмента.
Заявителями данного изобретения были проведены всесторонние исследования для достижения перечисленных выше объектов. В результате было установлено, что в лекарственных комплексах, образованных посредством связывания лекарственного соединения, такого как противоопухолевые средства и противовоспалительные средства, с носителем лекарственного соединения с помощью спейсера, включающего от 1 до 8 аминокислот, дополнительная вставка аминобензилоксикарбонильной группы и т. п. между спейсером и лекарственным соединением вызывает немедленный неферментативный гидролиз аминобензилоксикарбонильной группы после ферментативного гидролиза спейсерного фрагмента для высвобождения лекарственного соединения. Было также установлено, что в упомянутом выше лекарственном комплексе скорость высвобождения лекарственного соединения не зависит от стерической структуры лекарственного соединения, а, по существу, зависит от скорости ферментативного расщепления спейсерного фрагмента. Данное изобретение основано на этих открытиях.
Лекарственный комплекс данного изобретения отличается тем, что скорость высвобождения лекарственного соединения может регулироваться скоростью ферментативного расщепления спейсерного фрагмента, независимо от стерической структуры лекарственного соединения.
Таким образом, данное изобретение предоставляет лекарственный комплекс, представленный формулой (I)
А-В-ИН-У-СНг-О-СО-Р, где А представляет полимер в качестве носителя лекарственного соединения; В представляет спейсер, который является аминокислотой или олигопептидом, включающим от 2 до 8 аминокислот; Υ представляет фениленовую группу, которая может быть замещенной; и О представляет остаток лекарственного соединения. Лекарственный комплекс полезен, например, в качестве ΌΌ8 (йшд йеКусгу 5у51сш - системы доставки лекарственного соединения) соединения, обладающего ΌΌ8 функцией.
Согласно другому аспекту данного изобретения получено соединение формулы
Β'-ΝΗ-Υ-СНг-О-СО-Р, где В' представляет собой группу, которая включает одну аминокислоту или от 2 до 8 аминокислот, соединенных пептидными связями, и в которой Ν-конец защищен или не защищен; Υ представляет фениленовую группу, которая может быть замещенной; и О представляет остаток лекарственного соединения; и соединение формулы
Α-Β-ΝΗ-Υ-СНг-О-СО-Х, где А представляет полимер в качестве носителя лекарственного соединения; В - спейсер, который представляет аминокислоту или олигопептид, включающий от 2 до 8 аминокислот; Υ представляет фениленовую группу, которая может быть замещенной; и Х выбран из группы, включающей гидроксильную группу, -О-М, где М представляет защитную группу карбоксильной группы или уходящую группу. Эти соединения полезны в качестве синтетических промежуточных продуктов для получения указанного выше лекарственного комплекса.
В соответствии с предпочтительными воплощениями данного изобретения, получен указанный выше лекарственный комплекс, в котором носитель лекарственного соединения представляет полисахаридное производное, содержащее карбоксильные группы; указанный выше лекарственный комплекс, в котором В представляет спейсер, включающий от 2 до 8 аминокислот, соединенных пептидными связями; указанный выше лекарственный комплекс, в котором Υ представляет собой п-фениленовую группу, которая может быть замещенной; указанный выше лекарственный комплекс, в котором Υ является незамещенной п-фениленовой группой; указанный выше лекарственный комплекс, в котором полисахаридное производное, содержащее карбоксильные группы, представляет карбокси (С1-4)алкилдекстрановый многоатомный спирт; указанный выше лекарственный комплекс, в котором декстрановый многоатомный спирт является карбокси (С1-4)алкилдекстрановым многоатомным спиртом и представляет декстрановый многоатомный спирт, полученный обработкой декстрана в условиях, которые способствуют, по существу, его полному насыщению гидроксильными группами; указанный выше лекарственный комплекс, в котором карбокси (С1-4)алкилдекстрановый многоатомный спирт представляет карбоксиметилдекстрановый многоатомный спирт; указанный выше лекарственный комплекс, в котором лекарственное соединение представляет противоопухолевое средство или противовоспалительное средство; указанный выше лекарственный комплекс, в котором Α-Β-ΝΗ-Υ-ΟΗ2-Θ-ΟΘ- и аминогруппа лекарственного соединения соединены друг с другом; и указанный выше лекарственный комплекс, в котором лекарственное соединение представляет (18,98)-1-амино-9-этил5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н, 12Н-бензо [де]пирано [3',4':6,7]-индолизино [1,2Ь]хинолин-10,13-(9Н,15Н)дион.
Краткое описание рисунков
На фиг. 1 представлена диаграмма ГПХ (гельпроникающей хроматографии) лекарственного комплекса данного изобретения (пример 1).
На фиг. 2 представлен спектр поглощения ультрафиолетового излучения лекарственного комплекса данного изобретения (пример 1).
На фиг. 3 представлена диаграмма ГПХ лекарственного комплекса данного изобретения (пример 5).
На фиг. 4 представлен спектр поглощения ультрафиолетового излучения лекарственного комплекса данного изобретения (пример 5).
На фиг. 5 представлена диаграмма ГПХ лекарственного комплекса данного изобретения (пример 7).
На фиг. 6 представлен спектр поглощения ультрафиолетового излучения лекарственного комплекса данного изобретения (пример 7).
Наилучший способ осуществления изобретения
Лекарственный комплекс данного изобретения представлен формулой (I)
Α-Β-ΝΗ-Υ-ΟΗ2-Θ-ΟΘ-Ο.
В формуле О представляет остаток лекарственного соединения. Остаток лекарственного соединения, находящийся в лекарственном комплексе согласно данному изобретению, является главной частичной структурой, полученной из лекарственного соединения, которое используется для терапевтического лечения и/или профилактики заболеваний млекопитающих, в том числе людей, например, противоопухолевого средства, противовоспалительного средства, антибактериального средства или т.п., и этот термин означает остаток лекарственного соеди нения, содержащий, по меньшей мере, фрагмент, необходимый для проявления фармакологической активности лекарственного соединения. Однако лекарственное соединение, из которого получен остаток, не ограничивается перечнем, приведенным выше. В качестве лекарственного соединения могут использоваться любые соединения, которые содержат одну или несколько реакционноспособных функциональных групп, способных принимать участие в образовании связи с карбонильной группой группы, представленной формулой
Α-Β-ΝΗ-Υ-ΟΗ2-Θ-ΟΘ(например, аминогруппу, карбоксильную группу, гидроксильную группу, тиольную группу, группу сложного эфира и т.п.). Термин «лекарственное соединение», используемый в данном описании, включает также пролекарственное соединение, которое содержит как его часть основную структуру лекарственного соединения, обладающего фармакологической активностью, и фактически может воспроизводить это соединение ίη νίνο.
Термин «остаток лекарственного соединения», используемый в данном описании означает частичную структуру, полученную из лекарственного соединения и находящуюся в лекарственном комплексе после образования связи, подразумевая, что связь между карбонильной группой группы формулы
Α-Β-ΝΗ-Υ-ΟΗ2-Θ-ΟΘ-.
и остатком лекарственного соединения, образована в результате реакции реакционноспособной функциональной группы лекарственного соединения и карбоксильной группой группы формулы
Α-Β-ΝΗ-Υ-ΟΗ2-Θ-ΟΘΘΗ (например, в результате реакции конденсации с дегидратацией и т.п.). Например, когда лекарственное соединение представлено формулой
Ό-ΝΗ2, Ό-ΝΗ-Ό', Ό-ΘΗ или Ό-8Η, остаток лекарственного соединения представлен формулами
Ό-ΝΗ-, Ό-Ν(Ό')-, Ό-Θ- или Ό-8-, соответственно, и лекарственный комплекс, использующий эти лекарственные соединения, представлен формулами
Α-Β-ΝΗ-Υ-ΟΗ2-Θ-ΟΘ-ΝΗ-Ό.
Α-Κ-ΝΗ-Υ^Η2-Θ^Θ-Ν(Ό')-Ό,
Α-ΙΟ\ΙΙ-Υ-(Ί Ι.-Θ-ίΌ-Θ-Ι) или
Α-Κ-ΝΗ-Υ^Η2-Θ^Θ-8-Ό, соответственно. Однако тип связи между группой, представленной формулой
Α-Β-ΝΗ-Υ-ΟΗ2-Θ-ΟΘи остатком лекарственного соединения не ограничивается перечнем, приведенным выше.
В качестве лекарственного соединения могут предпочтительно использоваться, например, противоопухолевые средства, такие как доксорубицин, даунорубицин, митомицин С, блеомицин, циклоцитидин, винкристин, винбластин, метотрексат, платиновые противоопухолевые
Ί средства (цисплатин или его производные), таксол или его производные, камптотецин или его производные (противоопухолевые средства, описанные в выкладке Японской заявки (КОКА1) № (Не1) 6-87746/1994, предпочтительно (18,98)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[де]пирано [3',4': 6,7]индолизино [1,2-Ь]-хинолин-10,13-(9Н,15Н)дион, описанный в пункте 2 или т.п.). Кроме того, предпочтительными также является стероидальные противовоспалительные средства, такие как гидрокартизон сукцинат и преднизолон сукцинат, и нестероидальные противовоспалительные средства, такие как мефенамовая кислота, флуфенамовая кислота, диклофенак, ибупрофен и тиноридин.
В качестве фениленовой группы, представленной Υ, может использоваться о-фениленовая или п-фениленовая группа. Когда фениленовая группа является замещенной, тип, количество и положение заместителей конкретно не ограничивается. Примеры заместителей, которые могут находиться на кольце фениленовой группы, могут включать, например, низшие алкильные группы (то есть линейные или разветвленные С1-6-алкильные группы, циклические С3-6-алкильные группы и т.д. Это определение в дальнейшем применяется и к заместителям, содержащим фрагменты низших алкилов), группы галоген (низший алкил) (то есть хлорметильная группа или трифторметильная группа), группы гидрокси (низший алкил) (например, гидроксиметильная группа), низшие алкоксильные группы (например, метоксигруппа и этоксигруппа), низшие алкенильные группы (например, винильная группа и аллильная группа), низшие алкинильные группы (например, пропаргильная группа), гидроксильную группу, атомы галогенов (любой из атома фтора, атома хлора, атома брома и атома йода), карбоксильную группу, алкоксикарбонильные группы (например, метоксикарбонильная группа), алканоильные группы (например, ацетильная группа), галогеналканоильные группы (например, трифторацетильная группа), арильные группы (например, фенильная группа и нафтильная группа), аралкильные группы (например, бензильная группа), арилоксигруппы (например, феноксигруппа), аралкилоксигруппы (например, бензилоксигруппа), ароильные группы (например, бензоильная группа), гетероарильные группы (например, пиридильная группа и хинолильная группа), аминогруппу, моно- или ди-(низший алкил)аминогруппы, карбамоильную группу, нитрогруппу, цианогруппу, (низший алкил) сульфинильные группы, (низший алкил)сульфонильные группы, тиольную группу, (низший алкил)тиогруппы и т.п., и заместитель не ограничивается приведенным выше перечнем.
Когда фениленовая группа содержит два или несколько заместителей в кольце, заместители могут быть одинаковыми или разными.
Заместители могут дополнительно содержать одну или несколько функциональных групп. Конкретные примеры таких заместителей включают хлорфенильную группу, метилкарбамоильную группу, хлорбензильную группу, алкоксибензильные группы и т.п. Фениленовая группа, представленная Υ, предпочтительно является замещенной или незамещенной п-фениленовой группой, наиболее предпочтительно незамещенной п-фениленовой группой.
К представляет собой спейсер. Термин «спейсер», используемый в данном описании, означает частичную структуру лекарственного комплекса согласно данному изобретению, которая находится между полимером, представляющим собой носитель лекарственного соединения, и остатком лекарственного соединения, и представляет собой спейсер, включающий одну аминокислоту или от 2 до 8 аминокислот. Роль спейсера состоит в том, что он удерживает остаток лекарственного соединения на носителе лекарственного соединения в тканях и в крови, где лекарственное соединение не должно высвобождаться, и он подвергается ферментативному расщеплению для высвобождения лекарственного соединения в тканях, где лекарственное соединение должно высвобождаться (например, в тканях опухолей). В качестве спейсера может использоваться спейсер, содержащий одну аминокислоту или спейсер, содержащий от 2 до 8 аминокислот, соединенных пептидными связями. Спейсер представляет собой остаток одной аминокислоты, то есть остаток, полученный в результате удаления одного атома водорода и одной гидроксильной группы из аминогруппы и карбоксильной группы аминокислоты, соответственно, или остаток олигопептида, включающий от 2 до 8 аминокислот, соединенных пептидными связями, то есть остаток, полученный удалением одного атома водорода и одной гидроксильной группы из аминогруппы на Ν-конце и карбоксильной группы на С-конце олигопептида, соответственно. Спейсер располагается таким образом, чтобы образовывать пептидную связь с ΝΗ-Υ-СЩ-О-СОЮ на С-конце или на карбоксильной группе, когда спейсер включает одну аминокислоту.
Обычно связь между носителем лекарственного соединения, представленным А, и спейсером образуется с помощью пептидной связи между карбоксильной группой носителя лекарственного соединения и Ν-концом олигопептидного спейсера или аминогруппой, когда спейсер включает одну аминокислоту. Однако связь между спейсером и носителем лекарственного соединения не ограничивается упомянутой выше пептидной связью и может представлять собой другую химическую связь или связь, в которой используется один или несколько спейсеров. Например, когда один или несколько остатков производных дикарбоновых кислот (например, сукциновой кислоты) вводят ся в спейсер в качестве элементарных звеньев таким образом, что спейсер содержит карбоксильные группы на обоих концах, для образования связи может использоваться реакционноспособная аминогруппа носителя лекарственного соединения.
Предпочтительные спейсеры представляют собой остатки олигопептидов, включающих от 2 до 6 аминокислот. Виды аминокислот, составляющих спейсер, конкретно не ограничены и представляют собой, например, Ь- или Όаминокислоты, предпочтительно могут использоваться Ь-аминокислоты и β-аланин, ε-аминокапроновая кислота, γ-аминомасляная кислота и т.п., а также α-аминокислоты. Аминокислоты, отличные от α-аминокислот, предпочтительно располагаются вблизи носителя лекарственного соединения в спейсере.
В том случае, когда используется спейсер, включающий олигопептид, его аминокислотная последовательность конкретно не ограничивается. Предпочтительно используемые спейсеры включают, например, спейсер, представляющий собой остаток дипептида формулы -Х-Ζ-, где Х - остаток гидрофобной аминокислоты, а Ζ остаток гидрофильной аминокислоты; и -Х-Ζозначает остаток дипептида, образованного пептидной связью между гидрофобной аминокислотой (X) и гидрофильной аминокислотой (Ζ) на Ν-конце и на С-конце, соответственно, в которых один атом водорода и одна гидроксильная группа удалены из аминогруппы на Ν-конце и из карбоксильной группы на С-конце, соответственно, и спейсер, включающий остаток дипептида в качестве частичной пептидной последовательности. В качестве гидрофобной аминокислоты могут использоваться, например, фенилаланин, тирозин, лейцин и т.п., а в качестве гидрофильной аминокислоты могут использоваться, например, глицин, аланин и т. п.. Спейсер может содержать повторяющуюся последовательность дипептидных остатков (например, -Х-Ζ-Χ-Ζ-, -Χ-Ζ-Χ-Ζ-Χ-Ζ- и т.п.).
При использовании спейсера, содержащего такую дипептидную структуру, спейсер может подвергаться гидролизу в опухолевых сайтах или воспалительных сайтах, которые, как полагают, содержат большое количество пептидазы, для высвобождения лекарственного соединения с высокой концентрацией в сайтах в течение короткого промежутка времени. Соответственно, частичная структура, образованная в результате соединения спейсера, содержащего описанный выше пептид, и лекарственного соединения друг с другом, представляет собой предпочтительную частичную структуру лекарственного комплекса согласно данному изобретению. Когда в качестве остатка лекарственного соединения используется остаток противоопухолевого средства, активность которого зависит от концентрации этого противоопухолевого средства (то есть противоопухолевое средство проявляет более мощную противоопухолевую активность при более высокой концентрации этого средства: «концентрация-зависимое» противоопухолевое средство, например доксорубицин и т. д.), предпочтительно может использоваться спейсер, состоящий из указанного выше дипептидного остатка, представленного формулой -Χ-Ζ-, или спейсер, содержащий указанный выше дипептидный остаток в качестве частичной пептидной последовательности.
Когда в качестве остатка лекарственного соединения используется противоопухолевое средство, которому необходимо длительное время действия при определенной концентрации (например, метотрекат и т.д.), с помощью описанного выше спейсера иногда может быть получена повышенная противоопухолевая активность. Однако спейсеры не ограничиваются звеньями, в общем случае описанными выше, и подходящий спейсер следует выбирать с учетом характеристик фармакокинетики и токсичности противоопухолевого средства и т.п. Для карцином, проявляющих быструю пролиферацию, обычно предпочтительно выбирать описанный выше спейсер, способный высвобождать лекарственное соединение с высокой концентрацией в течение короткого промежутка времени. В частности, для скорости высвобождения лекарственного соединения в лекарственном комплексе согласно данному изобретения ферментативное расщепление спейсера представляет собой важную определяющую стадию («скоростьопределяющая стадия»). Соответственно, нужную скорость высвобождения можно легко получить подбором подходящего спейсера с учетом скорости его ферментативного расщепления.
Конкретные примеры олигопептидов, которые могут использоваться в качестве спейсера, представлены в табл. 1 выкладки Японской заявки № 11-92405/1999 (ΚΟΚΑΙ). Эти олигопептиды могут предпочтительно использоваться в качестве спейсера в соответствии с данным изобретением.
В качестве носителя лекарственного соединения, представленного А, могут использоваться синтетические полимеры и т.п., а также полисахаридные производные. Могут использоваться любые полисахаридные производные и синтетические полимеры, если они не проявляют токсичности в отношении живого организма и могут функционировать в качестве носителя лекарственного соединения. Например, в лекарственном комплексе данного изобретения могут использоваться любые полисахаридные производные и синтетические полимеры, которые традиционно использовались для получения лекарственных комплексов. Например, в лекарственном комплексе данного изобретения предпочтительно могут использоваться полисахаридные производные, содержащие карбоксиль ные группы, и наиболее предпочтительно могут использоваться полисахаридные производные, насыщенные гидроксильными группами (полисахаридные многоатомные спирты). Примеры синтетического полимера включают, например, полиэтиленгликоли; полиаминокислоты, такие как полиглютаминовые кислоты, полиаспаргиновые кислоты и полилизины; и производные поливинильных соединений, такие как N-(2гидроксипропил)метакриламидные производные.
В частности, могут использоваться любые полисахаридные производные, содержащие карбоксильные группы, если они представляют собой полисахариды и их производные, химически или биологически модифицированные, и содержат в молекулах карбоксильные группы. Например, могут использоваться такие полисахариды, как гиалуроновая кислота, пектиновая кислота, альгиновая кислота, хондроитин и гепарин; и такие полисахариды, как пуллулан (ри11и1ап), декстран, маннан, хитин, инулин, леван, ксилан, арабан, манноглюкан и хитозан, в которых все гидроксильные группы или часть гидроксильных групп введены с функциональными группами, содержащими карбоксильную группу.
Например, предпочтительно могут использоваться полисахаридные производные, содержащие карбокси (С1-4)алкилированные гидроксильные группы, или полисахаридные производные, содержащие гидроксильные группы, этерефицированные одной из карбоксильных групп многоосновной кислоты. Кроме того, могут также использоваться полисахаридные производные, полученные в результате насыщения гидроксильными группами перечисленных выше полисахаридов и последующего введения функциональных групп, содержащих карбоксильную группу. Термин «полисахаридное производное», используемый в данном описании, следует рассматривать в его широком смысле, который включает полисахаридные соединения, содержащие сахариды в качестве составляющих ингредиентов, и соединения, полученные в результате частичного или полного раскрытия кольца циклического сахаридного фрагмента полисахаридного соединения (например, многоатомные спирты и т.д.). Наряду с такими полисахаридными производными предпочтительно используются карбокси(С1-4)алкилдекстрановые многоатомные спирты, карбокси(С1-4) пуллановые многоатомные спирты и т.п. Подробные объяснения приведены ниже со ссылкой на примеры, в которых для получения лекарственного комплекса данного изобретения используются карбокси(С1-4)алкилдекстрановые многоатомные спирты. Однако носитель лекарственного соединения в лекарственном комплексе данного изобретения не ограничивается карбокси(С1-4)алкилдекстрановыми многоатомными спиртами.
Степень насыщения гидроксильными группами карбокси(С1-4)алкилдекстранового многоатомного спирта, используемого для получения носителя лекарственного соединения в соответствии с данным изобретением, конкретно не ограничена. Предпочтительно декстрановые многоатомные спирты, составляющие карбокси(С1-4)алкилдекстрановый многоатомный спирт, могут представлять собой многоатомные спирты, которые получены обработкой декстрана в условиях, позволяющих проводить, по существу, полное насыщение гидроксильными группами, и которые подвергались насыщению гидроксильными группами до такой степени, что могут использоваться для получения ΌΌ8соединений.
Сорт декстрана, используемый для получения карбокси(С1-4)алкилдекстранового многоатомного спирта, конкретно не ограничен, и декстран может содержать а-Э-1,6-мостики в любом количестве. Например, может использоваться декстран, содержащий а-Э-1,6-мостики в количестве 85% или более, 90% или более или 95% или более. Молекулярная масса декстрана конкретно не ограничена, например, может использоваться декстран с молекулярной массой от примерно 10000 до примерно 2000000, предпочтительно от примерно 50000 до примерно 800000. В качестве С1-4-алкильной группы, образующей карбокси-(С1-4)алкильную группу карбокси (С1-4)алкилдекстранового многоатомного спирта, может использоваться линейная или разветвленная С1-4-алкильная группа, в частности, метильная группа, этильная группа, нпропильная группа, изопропильная группа, нбутильная группа, втор-бутильная группа или т. п., предпочтительно может использоваться метильная группа.
Когда в качестве исходного материала используется декстран, он может обрабатываться последовательно избыточным количеством периодата натрия и боргидрида натрия для получения декстранового многоатомного спирта, по существу, до полного полиалкоголиза (полного насыщения алкоксильными группами). Однако способ полиалкоголиза не ограничивается способом, описанным выше, и может применяться любой способ, доступный для специалиста в данной области. Карбокси (С1-4)алкилирование может проводиться, например, взаимодействием галогенированной (С1-4)алкилкарбоновой кислоты, такой как хлоруксусная кислота, бромуксусная кислота, α-хлорпропионовая кислота, аметил-а-хлорпропионовая кислота, β-хлорпропионовая кислота, а-метил-в-хлорпропионовая кислота, α-хлормасляная кислота, β-хлормасляная кислота или γ-хлормасляная кислота, предпочтительна хлоруксусная кислота, с гидроксильными группами декстранового многоатомного спирта для осуществления частичного или полного карбокси (С1-4)алкилирования гидроксильных групп.
Например, декстрановый многоатомный спирт растворяют в инертном растворителе, который не принимает участия в реакции (например, вода, Ν,Ν-диметилформамид или диметилсульфоксид), и полученный раствор соединяют с галогенированной (С1-4)алкилкарбоновой кислотой или ее солью в присутствии основания (например, гидроксида натрия или гидроксида калия) и затем смесь оставляют для взаимодействия в течение периода времени, составляющего от несколько минут до несколько дней, при температуре в интервале от температуры, полученной при охлаждении на ледяной бане, до примерно 100°С. Степень карбокси (С1-4)алкилирования может легко контролироваться, например, посредством подбором подходящей температуры реакции карбокси(С1-4)алкилирования, количества галогенированной (С1-4)алкилкарбоновой кислоты или оснований, используемых в качестве реагентов, и такие способы хорошо известны специалистам. Степень карбокси(С1-4)алкилирования из расчета на одну гидроксильную группу декстранового многоатомного спирта, конкретно не ограничена и, например, степень из расчета на один составляющий сахаридный остаток может находиться в интервале от 0,01 до 2,0, предпочтительно от 0,1 до 1,0. Такими способами могут быть получены водные растворы карбокси(С1-4)алкилдекстранового многоатомного спирта в форме солей щелочных металлов, таких как соль натрия, соль калия и т. п.
Кроме полисахаридных производных в форме солей щелочных металлов, как описано выше, в качестве материала для носителя лекарственного соединения могут использоваться полисахаридные производные в форме солей органических аминов. Полисахаридные производные в форме солей органических аминов могут подвергаться растворению при высокой концентрации в органическом растворителе, который, по существу, не содержит воды, и соответственно применение такой соли иногда позволяет провести реакцию в неводной системе со значительным повышением эффективности реакции. В качестве соли органического амина могут применяться, например, соли алифатических аминов, таких как триэтиламин, триметиламин или триэтаноламин; соли алициклических и ароматических аминов, таких как Ν-метилпирролидин, Ν-метилпиперидин, Νметилморфолин или диметиламинопиридин; или четвертичные аммониевые соли, такие как хлорид тетраметиламмония или хлорид тетраэтиламмония.
Превращение натриевой соли полисахаридного производного в соответствующую соль органического амина может осуществляться с использованием ионообменной смолы или т.п. Например, натриевая соль карбоксиметилдекст ранового многоатомного спирта может растворяться в воде, вноситься в колонку, загруженную смолой Βίο-Чай ΑΟ50ν-Χ2 (200-400 меш, Н+ тип), и элюироваться водой и затем полученный раствор может соединяться с органическим амином, таким как триэтиламин, и подвергаться лиофилизации. Альтернативно, превращение можно также проводить в одну стадию, то есть растворением натриевой соли карбоксиметилдекстранового многоатомного спирта в воде с последующим пропусканием раствора через смолу триэтиламмониевого типа.
Лекарственный комплекс данного изобретения может быть получен, например, получением соединения, представленного формулой 4'-ΝΗ-Υ-ΟΗ2-0-00-0. где определения такие же, что и в формуле, представленной выше, соответствующим способом, удалением защитной группы, если нужно, и затем соединением аминогруппы на Ν-конце спейсера и карбоксильной группы карбометилдекстранового многоатомного спирта друг с другом посредством связи «кислота-амид». Например, пептидное соединение, содержащее защитную группу на Ν-конце, может соединяться с аминогруппой соединения ΝΗ2-Υ-0Η2-0Η через связь «кислота-амид», причем пептидная цепь может удлиняться, если нужно, и затем на гидроксильную группу может вводиться фрагмент СО-Х или С0-0. Когда вводится фрагмент СО-Х, Х может быть дополнительно превращен в О. В качестве реагента, используемого для введения фрагмента СО-Х, могут использоваться п-нитрофенилдикарбонат, п-нитрофенилхлорформиат (Χ соответствует ннитрофеноксигруппе), 1,1'-карбонилдиимидазол (X соответствует имидазоильной группе) и т.п. Для способа введения С0-0 фрагмента может использоваться С1-0’0-0, полученный взаимодействием О с фосгеном, Х-С0-0 (X соответствует п-нитрофеноксигруппе), полученный взаимодействием О с н-нитрофенилхлорформиатом и т.п. Когда В'-ХНА-СН2-0-СО-Х превращается в К'-ХНА-СН2-0-С0-Р, взаимодействует лекарственное соединение или лекарственное соединение, содержащее, если нужно, защитную группу, и в реакционную систему может добавляться основание, такое как триэтиламин и диизопропилэтиламин, или активатор, такой как 1-гидроксибензотриазол, в зависимости от видов Х и О. Затем защитная группа может быть удалена подходящим способом в зависимости от вида защитной группы с получением целевого продукта. Виды защитной группы и способы их удаления описаны, например, в публикации Τ.ν. Огееп апй Р.О.М. XV иК РгоЮсЧус Огоирк ίη 0тдашс 8уп111емй 2пй ей., Ιοίιη ΧνίΚν & δοηκ, 1пс. (1991). Например, когда используется третбутилкарбонильная группа, могут применяться кислоты, такие как трифторуксусная кислота, уксусная кислота и муравьиная кислота, предпочтительны относительно слабые кислоты, такие как муравьиная кислота. Когда использу15 ется тритильная группа, могут применяться кислоты, такие как уксусная кислота. Когда используется 9-фторенилметилкарбоксильная группа, могут применяться основания, такие как пиперазин.
Для образования связи «кислота-амид» могут использоваться агенты конденсации с дегидрированием, обычно применяемые для синтеза пептидных цепей, например, Ν,Ν'-дициклоалкилкарбодиимиды, такие как Ν,Ν'-дициклогексилкарбодиимид (ЭСС), карбодиимидные производные, такие как 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодимиид (ЕБАРС), производные бензотриазола, такие как 1-гидроксибензотриазол (НОВТ), 1-этоксикарбонил-2этокси-1,2-дигидроксихинолин (ЕЕБО) и т.п. Кроме того, реакция может также проводиться посредством метода активированного сложного эфира или метода галогенангидрида кислот.
Когда реакция проводится с использованием полисахаридного производного в неводной системе, могут использоваться любые органические растворители, если они, по существу, не содержат воды и могут растворять реагенты (соли органических аминов полисахаридного производного и Η-Κ-ΝΗ-Υ-СШ-О-СО-О в свободной форме или в форме соли: Н-К показывает, что Ν-конец не защищен). Например, предпочтительно могут использоваться Ν,Νдиметилформамид, диметилсульфоксид, ацетамид, Ν-метилпирролидон, сульфолан и т.п. Хотя количество остатка лекарственного соединения, которое вводится на носитель лекарственного соединения, конкретно не ограничено, количество должно быть подходящим образом выбрано в зависимости от вида остатка лекарственного соединения и с учетом фармакокинетики, эффективности и токсичности лекарственного комплекса. Обычно может быть выбран интервал значений примерно от 0,1 до 30% (мас.), предпочтительно примерно от 2 до 15% (мас.). Соотношение остатков лекарственного соединения, введенного на носитель лекарственного соединения, может быть легко определено, например, абсорбционным спектрометрическим анализом.
Дополнительные конкретные примеры способа получения лекарственного комплекса данного изобретения будут показаны в примерах. Квалифицированный специалист в данной области может получить лекарственный комплекс данного изобретения, который описывается приведенной выше общей формулой (I), исходя из представленного выше общего объяснения и подробного объяснения, приведенного в примерах, посредством подходящего подбора исходных материалов, реагентов и т. п. и, если нужно, введением соответствующих модификаций и изменений в условия реакций и процессов.
Лекарственный комплекс данного изобретения отличается тем, что комплексы могут специфически проявлять желательную фармакологическую активность на локальном сайте, таком как опухолевые сайты или воспалительные сайты, в зависимости от вида остатка лекарственного соединения (например, остатки лекарственных соединений, таких как противоопухолевые средства или противовоспалительные средства) и могут снижать токсичность, свойственную самому лекарственному соединению. Например, лекарственный комплекс, содержащий карбоксиметилдекстрановый многоатомный спирт в качестве фрагмента полисахаридного производного, обладает прекрасной проницаемостью через кровеносные сосуды, а также опухолевой селективностью и селективностью в отношении воспалительных сайтов.
Кроме того, лекарственный комплекс данного изобретения обладает отличительной особенностью, которая заключается в том, что когда спейсерный фрагмент подвергается ферментативному расщеплению под действием протеазы (пептидазы), уретановая связь аминобензилоксикарбониламида подвергается немедленному гидролизу. Согласно лекарственному комплексу данного изобретения, высвобожденное лекарственное соединение, таким образом, не содержит остаточной аминокислоты, полученной из спейсера, и эффективность самого лекарственного соединения не будет снижаться. Кроме того, лекарственный комплекс данного изобретения отличается тем, что подходящая скорость высвобождения лекарственного соединения может быть получена посредством подбора типа спейсера.
Лекарственное средство, включающее лекарственный комплекс данного изобретения, может в общем случае помещаться в пробирки и подобные емкости в форме лиофилизированного продукта или т. п. и поставляться для клинического применения в виде препаратов для парентерального введения, например для инъекций или капельных вливаний, которые растворяются перед применением. Однако форма фармацевтических препаратов лекарственного средства не ограничивается указанными формами. Для получения указанных выше фармацевтических препаратов могут использоваться фармацевтические добавки, доступные для данной области, например, солюбилизаторы, модификаторы рН, стабилизаторы и т. п. Хотя доза указанного выше лекарственного соединения конкретно не ограничена, доза должна определяться обычным способом с учетом дозы лекарственного соединения, которое образует остаток лекарственного соединения, количества остатка лекарственного соединения, введенного в лекарственный комплекс, состояния пациента, вида заболевания и т.п. Например, когда лекарственный комплекс, в который введено примерно 6% (мас.) остатка противоопухолевого средства, упомянутого в пункте 2 выкладки Японской патентной заявки (ΚΟΚΑΙ) № (Не1) 6
87746/94, вводится парентерально, примерно от 0,1 до 100 мг, предпочтительно примерно от 1 до 30 мг на м2 площади поверхности организма в день может обычно вводиться один раз в день и прием можно повторять предпочтительно каждые 3-4 недели.
Другой аспект данного изобретения предоставляет соединение данного изобретения общей формулы (II): Ρ'-ΝΗ-Υ-ίΉ2-Ο-ίΌ-0. где К' представляет собой группу, включающую одну аминокислоту или от 2 до 8 аминокислот, соединенных пептидными связями, в которой Ν-конец защищен или не защищен; Υ представляет собой фениленовую группу, которая может быть замещенной; и О представляет собой остаток лекарственного соединения. Предпочтительными являются соединения, в которых Υ представляет собой п-фениленовую группу, К' представляет группу формулы Н-С1у-С1у-Р11сС1у- или Н-С1у-С1у-С1у-Рйе-, и лекарственное соединение представляет собой (18,98)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4метил-1Н,12Н-бензо [де]-пирано [3',4':6,7]индолизино [1,2-Ь] хинолин-10,13-(9Н,15Н)дион.
Кроме того, данное изобретение предоставляет также соединение общей формулы (III): Α-Ρ,-ΝΗ-Υ-СЩ-О-СО-Х, где А представляет полимер в качестве носителя лекарственного соединения; К представляет спейсер, который является аминокислотой или олигопептидом, включающим от 2 до 8 аминокислот; Υ представляет собой фениленовую группу, которая может быть замещенной; Х выбран из группы, включающей гидроксильную группу, -О-М, где М - защитная группа карбоксильной группы или уходящая группа. Виды защитной группы карбоксильной группы конкретно не ограничены, и может использоваться любая защитная группа, если она доступна для специалиста. Кроме того, может использоваться любая уходящая группа, если она функционирует в качестве уходящей группы при замещении на карбонильном углероде, и примеры таких групп включают атомы галогенов, такие как атом хлора и атом брома, алкоксильные группы, такие как этоксигруппа, и арилсульфонилоксигруппы, такие как птолуолсульфонилоксигруппа и т.п. Символы, такие как Υ, 0 и К, в формулах (II) и (III) имеют те же значения, что и в описанной выше формуле (I). Эти соединения, представленные формулами (II) и (III), полезны в качестве синтетических промежуточных продуктов для получения лекарственного комплекса данного изобретения.
Примеры
Данное изобретение будет объяснено более подробно с помощью примеров, однако, область данного изобретения не ограничивается приведенными далее примерами.
В примерах степень карбоксиметилирования (степень замещения карбоксиметильными группами на сахаридный остаток в качестве образующего звена) определяют с помощью пре вращения натриевой соли карбоксиметилендекстранового многоатомного спирта в свободную кислоту, с последующим растворением свободной кислоты в 0,1Ν водном растворе гидроксида натрия и титрованием полученного раствора 0,1Ν соляной кислотой. Водный раствор натриевой соли карбоксиметилендекстранового многоатомного спирта вносят в колонку с ΒίοКаб ΑΟ50ν-χ2 (Н+) и пропущенный через колонку раствор лиофилизируют и используют в качестве образца. Образец растворяют в данном избыточном количестве 0,1Ν водного раствора гидроксида и титрируют 0,1Ν соляной кислотой с использованием фенолфталеина в качестве индикатора. Степень карбоксиметилирования определяют в соответствии с уравнением:
13,4(а-Ь)/[8-5,8(а-Ь)], где 8 количество собранного образца (мг), а - данное избыточное количество 0,1Ν водного раствора гидроксида натрия (мл),
Ь - количество 0,1 N соляной кислоты, необходимое для титрования (мл).
Количество введенного лекарства (мас.%) вычисляют из результатов абсорбционной спектрометрии (от 362 нм), используя характеристическую абсорбцию лекарственного соединения. Гелевое фильтрование проводят в следующих условиях: колонка, Т8К де1 С4000 Р^ХЬ, элюент: 0,1М №С1, объемная скорость потока 0,8 мл/мин, температура в колонке: 40°С.
ЭХ-8951 представляет собой лекарственное соединение: (18,98)-1-амино-9-этил-5-фтор2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо [де]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-Ь]хинолин10,13-(9Н,15Н)-дион, которое описано в пункте 2 выкладки Японской патентной заявки (ΚΟΚΑΣ) (Не1) № 6-87746/1994, и -СО-ЭХ-8951 показывает, что аминогруппа в 1-положении лекарственного соединения образует пептидную связь с карбонильной группой, представленной -СО-. Следует представлять, что ЭХ-8951 содержит лактоновое кольцо, которое существует в форме закрытого кольца или в форме открытого кольца или в форме их смеси. Звенья, образующие сахаридную цепь и показанные в представленных ниже схемах, вводятся с одной или двумя карбоксиметильными группами. Следует отметить, что эти составляющие звенья показаны в качестве примера составляющего звена сахаридной цепи и что фрагмент носителя лекарственного соединения лекарственного комплекса данного изобретения не образован повторением указанного составляющего звена. Номера соединений в примерах соответствуют номерам в приведенных далее схемах. Например, соединение 2а в примере 5 соответствует соединению 2а на схеме и представляет собой соединение, в котором пептидным фрагментом формулы в схеме является ССЕС (на схеме это показано как Рерббе = ССЕС).
Пример 1. Синтез комплекса карбоксиметилдекстрановый полиспирт-С1у-С1у-Рйе-С1уХН-р-СбН4-СН2-О-СО-ОХ-8951.
Декстран Т500 (20 г, Рйагтас1а, молекулярная масса 500К) растворяют в 0,1М уксусном буфере (рН 5,5, 2000 мл) и соединяют с водным раствором (2000 мл) периодата натрия (бб,0 г). Смесь перемешивают при 4°С в течение 10 дней с защитой от света. Затем смесь соединяют с этиленгликолем (14,0 мл) и перемешивают в течение ночи. рН Реакционной смеси доводят до 7 с помощью 8 М водного гидроксида натрия. К смеси добавляют боргидрид натрия (28 г), растворяют его и затем смесь перемешивают в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 5,5 с помощью уксусной кислоты при охлаждении льдом и полученную смесь перемешивают при 4°С в течение 1 ч. рН реакционной смеси доводят до 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают посредством сверхтонкой фильтрации (ультрафильтрации) с использованием мембраны Вютах-50. Остаточный раствор, который не пропускался через мембрану, лиофилизируют для получения декстранового многоатомного спирта (10,5 г). Молекулярная масса (гель-фильтрация, пуллулановый стандарт) полученного продукта равна 159 К.
Полученный декстрановый полиспирт (7,5 г) соединяют с раствором гидроксида натрия (31,5 г) в воде (225 мл) и растворяют при комнатной температуре. В раствор при охлаждении льдом добавляют монохлоруксусную кислоту (45 г), ее растворяют и смесь оставляют при комнатной температуре на ночь. После этого рН реакционной смеси доводят до 8 с помощью уксусной кислоты и обессоливают ультрафильтрацией с использованием мембраны Вютах-50. Остаточный раствор, который не пропускался через мембрану, лиофилизируют для получения натриевой соли карбоксиметилдекстранового многоатомного спирта (8,5 г). Молекулярная масса (гель-фильтрация, пуллулановый стандарт) полученного продукта равна 274К, степень его карбоксиметилирования равна 0,4.
1-Этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидрохинолин (989 мг) добавляют к смеси Вос-С1уС1у-Рйе-С1у-ОН (875 мг), 4-аминобензилового спирта (492 мг) и Ν,Ν,-диметилформамида (10 мл). Полученную смесь оставляют при перемешивании для взаимодействия при комнатной температуре в течение ночи и затем выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент: раствор дихлорметан : метанол = 9б:4), в результате получают 800 мг соединения (2).
Ή-ЯМР (ДМСО-б6) δ: 9,73 (с, 1Н), 8,38 (с, 1Н), 8,17 (д, 1Н, 1=7,2 Гц), 7,91-7,93 (м, 1Н), 7,56 (д, 2Н, 1=8,0 Гц), 7,24-7,26 (м, 4Н), 7,24 (д, 2Н, 1=8,0 Гц), 7,17-7,20 (м, 1Н), 4,50-4,54 (м, 1Н), 4,44 (с, 2Н), 3,66-3,94 (м, 3Н), 3,63 (дд, 1Н, 1=4,8, 16,7 Гц), 3,56 (д, 2Н, 1=5, 6 Гц), 3,09 (дд, 1Н, 1=4,8, 13,5 Гц), 2,83 (дд, 1Н, 1=9,6, 13,5 Гц),
1,38 (с, 9Н).
Смесь соединения (2) (465 мг), бис(4нитрофенил) карбоната (522 мг), диизопропилэтиламина (0,224 мл), 4-(диметиламино)пиридина (10,5 мг) и тетрагидрофурана (3 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 4 дней. После этого реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент: раствор дихлорметан : метанол = 99:1), в результате получают 205 мг соединения (3).
Ή-ЯМР (ДМСО-б6) δ: 9,88 (с, 1Н), 8,408,42 (м, 1Н), 8,31 (д, 2Н, 1=9,5 Гц), 8,27-8,28 (м,
1Н), 7,92-7,94 (м, 1Н), 7,67 (д, 2Н, 1=7,9 Гц), 7,55 (д, 2Н, 1=9,5 Гц), 7,41 (д, 2Н, 1=7,9 Гц), 7,24-7,26 (м, 4Н), 7,17-7,20 (м, 1Н), 6,93-6,95 (м, 1Н), 5,25 (с, 1Н), 4,50-4,53 (м, 1Н), 3,77-3,95 (м, 3Н), 3,61-
3,66 (м, 1Н), 3,55-3,57 (м, 2Н), 3,08 (дд, 1Н, 1=4,8, 13,5 Гц), 2,83 (дд, 1Н, 1=9,5, 13,5 Гц), 1,38 (с, 9Н).
Смесь соединения (3) (185 мг), метансульфоната ΌΧ-8951. (152 мг), 1-гидроксибензотриазола (54 мг), диизопропилэтиламина (0,093 мл) и Ν,Ν-диметилформамида (20 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 2 дней. После этого реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент: раствор дихлорметан : метанол = 96:4). Полученное твердое вещество желтого цвета дополнительно очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент: раствор дихлорметан : метанол = 97:3, содержащий 0,5% уксусной кислоты), в результате получают 130 мг соединения (4).
’Н-ЯМР (ДМСО-бе) δ: 9,84 (с, 1Н), 8,40-
8,41 (м, 1Н), 8,19 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 8,04 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 7,92-7,93 (м, 1Н), 7,74 (д, 1Н, 1=11,1 Гц), 7,63 (д, 2Н, 1=8,0 Гц), 7,37 (д, 2Н, 1=8,0 Гц),
7,32 (с, 1Н), 7,24-7,26 (м, 4Н), 7,16-7,20 (м, 1Н), 6,94-6,95 (м, 1Н), 6,48 (с, 1Н), 5,46 (д, 1Н, 1=16,7 Гц), 5,41 (д, 1Н, 1=16,7 Гц), 5,24-5,34 (м, 3Н), 5,08 (с, 2Н), 4,49-4,52 (м, 1Н), 3,92 (дд, 1Н, 1=5,6, 16,7 Гц), 3,85 (дд, 1Н, 1=5,6, 16,7 Гц), 3,78 (дд, 1Н, 1=5,6, 16,7 Гц), 3,63 (дд, 1Н, 1=4,8, 16,7 Гц), 3,54-3,56 (м, 1Н), 3,31-3,33 (м, 2Н), 3,08 (дд, 1Н, 1=4,8, 13,5 Гц), 2,83 (дд, 1Н, 1=10,3, 13,5 Гц),
2,38 (с, 3Н), 1,86-1,89 (м, 2Н), 1,37 (с, 9Н), 0,88 (т, 3Н, 1=7,2 Гц).
Мазз (ГАВ); т/е 797 (М+1).
Соединение (4) (98 мг) растворяют в трифторуксусной кислоте (1,5 мл) и оставляют на 1,5 ч. Реакционную смесь по каплям добавляют в эфир (30 мл), осадок собирают фильтрованием и промывают эфиром, в результате получают 100 мг соединения (5).
!Н-ЯМР (ДМСО-бб) δ: 9,86 (с, 1Н), 8,48-
8,61 (м, 2Н), 8,37 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 8,00-8,20 (м, 1Н), 7,75 (д, 1Н, 1=10,7 Гц), 7,66 (д, 2Н, 1=8,8 Гц), 7,41 (д, 2Н, 1=8,8 Гц), 7,37 (с, 1Н), 7,24-7,27 (м, 4Н), 7,17-7,19 (м, 1Н), 6,48 (с, 1Н), 5,72 (д, 1Н, 1=19,0 Гц), 5,33-5,48 (м, 3Н), 5,23-5,30 (м, 1Н), 5,08-5,11 (м, 2Н), 4,58-4,61 (м, 1Н), 3,84-
3,99 (м, 3Н), 3,71 (дд, 1Н, 1=4,9, 16,6 Гц), 3,56-
3,66 (м, 2Н), 3,22-3,30 (м, 1Н), 3,12-3,18 (м, 1Н), 3,09-3,11 (м, 1Н), 2,78-2,83 (м, 1Н), 2,46-2,57 (м, 1Н), 2,38 (с, 3Н), 2,18-2,23 (м, 1Н), 1,82-1,93 (м, 2Н), 0,90 (т, 3Н, 1=7,3 Гц).
Соединение (5) (95 мг) растворяют в воде (5 мл) и метаноле (10 мл). Раствор добавляют к раствору натриевой соли карбоксиметилдекстранового многоатомного спирта, полученной выше (600 мг), в воде (10 мл) и метаноле (20 мл). К полученной смеси добавляют раствори мый в воде карбодиимид (26 мг) и 1гидроксибензотриазол (15 мг) и затем рН раствора доводят до 7,0 с помощью 0,1Ν водного раствора гидроксида натрия. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, затем добавляют водорастворимый карбодиимид (13 мг) и оставляют для взаимодействия при комнатной температуре в течение ночи. В реакционную смесь добавляют воду (500 мл) и полученную смесь подвергают ультрафильтрации с использованием ультрафильтрационной мембраны 10К (ΡίΙΐΓοη Со.). рН остального раствора, который не пропускался через мембрану, доводят до 9 с помощью 0,1Ν водного раствора гидроксида натрия и раствор пропускают через фильтрационную мембрану (0,16 мкм, Ρίΐίτοη Со.). Пропущенный через мембрану раствор обессоливают посредством ультрафильтрации с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют, в результате получают 490 мг соединения (6). Это соединение растворяют в 0,1М водном растворе хлорида натрия и анализируют методом ГПХ (колонка: ТО8ОН Т8К Ое1 Р^-4000ХЬ, растворитель: 0,1М №С1, объемная скорость потока: 0,8 мл/мин). Результаты анализа методом ГПХ и спектр поглощения ультрафиолетового излучения (0,1М Тпз-буфер. рН 10,0, 0,20 мг/мл) соединения представлены на фиг. 1 и 2, соответственно. Содержание остатка лекарственного соединения в соединении определяют методом абсорбционной спектрофотометрии при 366 нм в растворе 0,1М Тпз-буфер (рН 10,0): ацетонитрил =7:3, и оно равно 2,3% (мас./мас.).
Пример 2. Высвобождение лекарственного соединения из лекарственного комплекса.
Лекарственный комплекс, полученный в примере 1, растворяют в Ме111 А (МеШ А фибросаркома мыши) гомогенате или в буфере при 37°С (378 мкг/мл). Спустя 20 ч, определяют количество высвобожденного ΌΧ-8951. Соединение, в котором спейсер и ΌΧ-8951 связаны друг с другом без п-аминобензилоксикарбонильной группы, получают и применяют в качестве сравнительного соединения. Результаты представлены в табл. 1. Количество высвобожденного лекарственного соединения выражают в процентах относительно количества лекарственного соединения, использованного в комплексе. Лекарственный комплекс данного изобретения быстро высвобождает лекарственное соединение в слабокислом гомогенате, но с трудом высвобождает лекарственное соединение в буфере. С другой стороны, сравнительное соединение высвобождает лекарственное соединение в небольшом количестве в слабокислом гомогенате, но не высвобождает его в буфере.
Таблица 1
Таблица 3
Реакционная система Соединение в примере 1 Сравнительное соединение
МеШ А гомогенат(рН 4,5) 37,7 0,106
МеШ А гомогенат(рН 5,5) 38,1 0,034
МеШ А гомогенат(рН 6,5) 4,25 0,000
Буфер (рН 4,5) 0,190 0,000
Буфер (рН 5,5) 0,178 0,000
Буфер (рН 6,5) 0,171 0,000
Буфер (рН 7,5) 0,138 -
Плазма крови мыши 0,186
- Не исследовался.
Пример 3. Максимальная толерантная доза (ΜΤΌ) лекарственного комплекса примера 1 для мыши с Ме111 А опухолью.
Клетки Ме111 А трансплантируют ВАЬВ/с мыши для получения Ме111 А опухоли. На 20-й день однократно вводят лекарственный комплекс примера 1. После введения измеряют массу тела, наблюдают токсическую гибель во времени и вычисляют максимальный коэффициент снижения массы тела и смертность, результаты представлены в табл. 2.
Дозу выражают из расчета на массу безводного свободного основания ΌΧ-8951. Небольшое снижение массы тела наблюдают при введении 2,5 мг/кг, токсическую гибель во всех случаях наблюдают при введении 10 мг/кг, и соответственно ΜΤΌ лекарственного комплекса примера 1 составляет от 5-7,5 мг/кг.
Таблица 2
Соединение Доза (мг/кг) В\\'1 тахя (%) [4ау1
Контроль 0 <0 0/2
Пример 1 30 17,9 [221 2/2
10 32,8 [261 2/2
2,5 2,2 [221 0/2
0,625 <0 0/2
0,156 <0 0/2
а Максимальный коэффициент снижения массы тела (числа в скобках соответствуют тем дням, когда наблюдался максимальный коэффициент снижения массы тела).
<0 означает, что снижения массы тела не наблюдалось.
ь Количество умерших мышей/количество использованных мышей.
Пример 4. Противоопухолевая активность лекарственного комплекса примера 1.
Клетки Ме111 А (фибросаркома Ме111 А мыши) трансплантируют ВАЬВ/с мыши для получения Ме111 А опухоли. На 7-й день после трансплантации вводят лекарственный комплекс примера I. Массу опухоли измеряют на 21-1 день для оценки ингибиторной активности в отношении опухоли и токсичности. Результаты представлены в табл. 3. В таблице * обозначает величину в опыте Дуннета (ПиппеГх [еМ) (*** р<0,001, ** Р<0,01), доза выражена из расчета на массу безводного свободного основания ΌΧ-8951, и ΙΒ - коэффициент уменьшения опухоли. Лекарственный комплекс примера 1 значительно снижает массу опухоли в зависимости от дозы.
Соединение Доза (мг/кг) Усредненное значение массы опухоли (г) ΙΒ (%) таха (%) [день1
Контроль 0 2,315±0,366 0 <0 0/6
Пример 1 (данного изобретения) 7,5 0,008±0,002*** 100 24,8 [151 2/6
5 0,019±0,004*** 99 2,9 [131 0/6
2,5 0,061±0,016*** 97 <0 0/6
1,25 0,610±0,180*** 74 0,3 [81 0/6
0,625 1,247±0,280** 46 <0 0/6
а Максимальный коэффициент снижения массы тела (числа в скобках соответствуют тем дням, когда наблюдался максимальный коэффициент снижения массы тела).
ь Количество умерших мышей/количество использованных мышей.
Пример 5. Синтез комплекса карбоксиметилдекстрановый полиспирт-О1у-О1у-Рйе-О1уN4-11-04.гС.’Н2-О-С.’О-ОХ-8951 с использованием муравьиной кислоты для удаления защитной группы.
Декстран Т500 (20 г, Рйагтааа, молекулярная масса: 500К) растворяют в 0,1М уксусном буфере (рН 5,5, 2000 мл) и соединяют с водным раствором (2000 мл) периодата натрия. Смесь перемешивают при 4°С в течение 10 дней с защитой от света. Затем к смеси добавляют этиленгликоль (14,0 мл) и полученную смесь перемешивают в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 7 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. К смеси добавляют боргидрид натрия (28 г), растворяют его и затем полученную смесь перемешивают в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 5,5 с помощью уксусной кислоты при охлаждении льдом и полученную смесь перемешивают при 4°С в течение 1 ч. рН смеси доводят до 7,5 с помощью 8М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают ультрафильтрацией с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, лиофилизируют, в результате получают декстрановый многоатомный спирт (полиспирт) (10,5 г). Молекулярная масса (гель-фильтрация, пуллулановый стандарт) полученного продукта равна 159К.
Полученный декстрановый многоатомный спирт (7,5 г) добавляют к раствору гидроксида натрия (31,5 г) в воде (225 мл), и растворяют его при комнатной температуре. К раствору при охлаждении льдом добавляют монохлоруксусную кислоту (45 г) , растворяют ее и смесь оставляют на ночь при комнатной температуре. рН реакционной смеси доводят до 8 с помощью уксусной кислоты и полученную смесь обессоливают ультрафильтрованием с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, лиофилизируют, в результате получают натриевую соль карбоксиметилдекстранового многоатомного спирта (8,5 г). Молекулярная масса (гельфильтрация, пуллулановый стандарт) полученного продукта равна 274К, степень карбоксиметилирования равна 0,4.
1-Этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидрохинолин (989 мг) добавляют к смеси Вос-С1уС1у-Р11е-С1у-ОН (875 мг), 4-аминобензилового спирта (492 мг) и Ν,Ν-диметилформамида (10 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи и затем выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент: раствор дихлорметан : метанол = 96:4), в результате получают 800 мг соединения 2а.
'Н-ЯМР (ДМСО-б6) δ: 9,73 (с, 1Н), 8,38 (с, 1Н), 8,17 (д, 1Н, 1=7,2 Гц), 7,91-7,93 (м, 1Н), 7,56 (д, 2Н, 1=8,0 Гц), 7,24-7,26 (м, 4Н), 7,24 (д, 2Н, 1=8,0 Гц), 7,17-7,20 (м, 1Н), 4,50-4,54 (м, 1Н), 4,44 (с, 2Н), 3,66-3,94 (м, 3Н), 3,63 (дд, 1Н, 1=4,8, 16,7 Гц), 3,56 (д, 2Н, 1=5,6 Гц), 3,09 (дд, 1Н, 1=4,8, 13,5 Гц), 2,83 (дд, 1Н, 1=9,6, 13,5 Гц),
1,38 (с, 9Н).
Смесь соединения 2а (465 мг), бис(4нитрофенил)карбоната (522 мг), диизопропилэтиламина (0,224 мл), 4-(диметиламино) пиридина (10,5 мг) и тетрагидрофурана (3 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 4 дней. После этого реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент: раствор дихлорметан : метанол = 99:1), в результате получают 205 мг соединения 3а.
'Н-ЯМР (ДМСО-бе) δ: 9,88 (с, 1Н), 8,40-
8,42 (м, 1Н), 8,31 (д, 2Н, 1=9,5 Гц), 8,27-8,28 (м, 1Н), 7,92-7,94 (м, 1Н), 7,67 (д, 2Н, 1=7,9 Гц), 7,55 (д, 2Н, 1=9,5 Гц), 7,41 (д, 2Н, 1=7,9 Гц), 7,24-7,26 (м, 4Н), 7,17-7,20 (м, 1Н), 6,93-6,95 (м, 1Н), 5,25 (с, 1Н), 4,50-4,53 (м, 1Н), 3,77-3,95 (м, 3Н), 3,61-
3,66 (м, 1Н), 3,55-3,57 (м, 2Н), 3,08 (дд, 1Н, 1=4,8, 13,5 Гц), 2,83 (дд, 1Н, 1=9,5, 13,5 Гц), 1,38 (с, 9Н).
Смесь соединения 3а (185 мг), метансульфоната ΌΧ-8951 (152 мг), 1-гидроксибензотриазола (54 мг), диизопропилэтиламина (0,093 мл) и Ν,Ν-диметилформамида (20 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 2 дней. Затем реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент : раствор дихлорметан : метанол = 96:4). Полученное твердое вещество желтого цвета очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент: раствор дихлорметан : метанол = 97:3, содержащий 0,5 % уксусной кислоты), в результате получают 130 мг соединения 4а.
'Н-ЯМР (ДМСО-бе) δ: 9,84 (с, 1Н), 8,40-
8,41 (м, 1Н), 8,19 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 8,04 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 7,92-7,93 (м, 1Н), 7,74 (д, 1Н, 1=11,1 Гц), 7,63 (д, 2Н, 1=8,0 Гц), 7,37 (д, 2Н, 1=8,0 Гц),
7,32 (с, 1Н), 7,24-7,26 (м, 4Н), 7,16-7,20 (м, 1Н), 6,94-6,95 (м, 1Н), 6,48 (с, 1Н), 5,46 (д, 1Н, 1=16,7 Гц), 5,41 (д, 1Н, 1=16,7 Гц), 5,24-5,34 (м, 3Н),
5,08 (с, 2Н), 4,49-4,52 (м, 1Н), 3,92 (дд, 1Н, 1=5,6, 16,7 Гц), 3,85 (дд, 1Н, 1=5,6, 16,7 Гц), 3,78 (дд, 1Н, 1=5,6, 16,7 Гц), 3,63 (дд, 1Н, 1=4,8, 16,7 Гц), 3,54-3,56 (м, 1Н), 3,31-3,33 (м, 2Н), 3,08 (дд, 1Н, 1=4,8, 13,5 Гц), 2,83 (дд, 1Н, 1=10,3, 13,5 Гц),
2,38 (с, 3Н), 1,86-1,89 (м, 2Н), 1,37 (с, 9Н), 0,88 (т, 3Н, 1=7,2 Гц)
Соединение 4а (200 мг) растворяют в муравьиной кислоте (4 мл) и оставляют на 2 ч. Реакционную смесь по каплям добавляют в эфир (40 мл). Осадок промывают эфиром, в результате получают 198 мг соединения 5а.
'Н-ЯМР (ДМСО-б6) δ: 9,90 (с, 1Н), 8,48-
8,50 (м, 1Н), 8,33-8,36 (м, 1Н), 8,27-8,30 (м, 2Н), 8,00-8,08 (м, 1Н), 7,74-7,76 (м, 1Н), 7,63 (д, 1Н, 1=8,2 Гц), 7,31-7,39 (м, 3Н), 7,21-7,25 (м, 5Н), 7,15-7,20 (м, 1Н), 5,43-5,48 (м, 2Н), 5,22-5,33 (м, 3Н), 5,08 (с, 2Н), 4,51-4,53 (м, 1Н), 3,93 (дд, 1Н, 1=5,5, 16,5 Гц), 3,80-3,90 (м, 2Н), 3,64-3,72 (м, 3Н), 3,20-3,25 (м, 1Н), 3,09-3,13 (м, 1Н), 3,07 (дд, 1Н, 1=4,1, 13,8 Гц), 2,81 (дд, 1Н, 1=10,1, 13,8 Гц),
2,37 (с, 3Н), 2,15-2,22 (м, 2Н), 1,82-1,88 (м, 2Н), 0,88 (т, 3Н, 1=7,3 Гц).
Соединение 5а (190 мг) растворяют в воде (5 мл) и метаноле (10 мл). Раствор добавляют к раствору натриевой соли карбоксиметилдекстранового многоатомного спирта, полученной в примере 1 (1,0 г), в воде (10 мл) и метаноле (5 мл). В полученную смесь добавляют 1гидроксибензотриазол (44 мг) и 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимид (39 мг) и рН раствора доводят до 7,0 с помощью 0,1 Ν водного раствора гидроксида натрия. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, затем добавляют 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (22 мг). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,75 ч, затем добавляют 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимид (11 мг) и оставляют при комнатной температуре на ночь. рН реакционной смеси доводят до 8,9 с помощью 0,1Ν водного раствора гидроксида натрия и полученную смесь обессоливают ультрафильтрацией с использованием мембраны Βίοтах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют. Полученный аморфный осадок очищают колоночной хроматографией [(8ер-Рак С картридж (\ναΝΐΈ Со.) и Βίο-Каб Α650\ν-Χ8 (Να' форма)] и дополнительно обессоливают с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют, в результате получают соединение 6а (700 мг). Это соединение растворяют в 0,1М водном растворе хлорида натрия и анализируют методом ГПХ (колонка: ТО8ОН Т8К Се1 Ρν-4000ΧΕ; растворитель: 0,1М водный раствор №С1, содержащий 20% ацетонитрила; объемная скорость потока: 0,8 мл/мин). Результаты анализа метода ГПХ и спектр по27 глощения ультрафиолетового излучения (0,1М Тпк буфер, рН 9,0, 0,10 мг/мл) соединения представлены на фиг. 3 и 4, соответственно. Содержание остатка лекарственного соединения в соединении определяют абсорбционной спектрофотометрией при 366 нм в растворе 0,1М Тпк-буфер (рН 10,0) : ацетонитрил =7:3, и оно равно 3,3% (мас./мас.).
Пример 6. Синтез комплекса карбоксиметилдекстрановый полиспирт-С1у-С1у-С1у-РйеНН-р-СбН4-СН2-О-СО-ЭХ-8951 с использованием муравьиной кислоты для удаления защитной группы.
Декстран Т500 (20 г, Рйаттас1а, молекулярная масса: 500К) растворяют в 0,1М уксусном буфере (рН 5,5, 2000 мл) и соединяют с водным раствором (2000 мл) периодата натрия. Смесь перемешивают при 4°С в течение 10 дней с защитой от света. Затем к смеси добавляют этиленгликоль (14,0 мл) и полученную смесь перемешивают в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 7 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. К смеси добавляют боргидрид натрия (28 г), растворяют его и смесь перемешивают в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 5,5 с помощью уксусной кислоты при охлаждении льдом и смесь перемешивают при 4°С в течение 1 ч. рН смеси доводят до 7,5 с помощью 8М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают ультрафильтрацией с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, лиофилизируют, в результате получают декстрановый многоатомный спирт (10,5 г). Молекулярная масса (гель-фильтрация, пуллулановый стандарт) полученного продукта равна 159К.
Полученный декстрановый многоатомный спирт (7,5 г) добавляют к водному раствору гидроксида натрия (31,5 г) в воде (225 мл), и растворяют его при комнатной температуре. К раствору при охлаждении льдом добавляют монохлоруксусную кислоту (45 г), растворяют ее и выдерживают смесь при комнатной температуре в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 8 с помощью уксусной кислоты и смесь обессоливают с помощью ультрафильтрации с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, лиофилизируют, в результате получают натриевую соль карбоксиметилдекстранового многоатомного спирта (8,5 г). Молекулярная масса (гель-фильтрация, пуллулановый стандарт) полученного продукта равна 274К, степень карбоксиметилирования равна 0,4.
1-Этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (571 мг) добавляют к смеси Вос-С1уС1у-С1у-Рйе-ОН (1000 мг), 4-аминобензилового спирта (324 мг), 1-гидроксибензотриазола (464 мг) и Ν,Ν-диметилформамида (10 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи и после этого выпа ривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент: раствор дихлорметан : метанол = 92:8), в результате получают соединение 2Ь (1220 мг).
Ή-ЯМР (ДМСО-66) δ: 9,91 (с, 1Н), 8,25 (д, 1Н, 1=3,7 Гц), 8,08-8,20 (м, 2Н), 7,54 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,25-7,29 (м, 4Н), 7,23 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,16-7,21 (м, 1Н), 6,95 (т, 1Н, 1=5,9 Гц), 5,08 (д, 1Н, 1=5,9 Гц), 4,62-4,67 (м, 1Н), 4,44 (д, 2Н, 1=5,9 Гц), 3,74 (дд, 1Н, 1=4,9, 5,4 Гц), 3,65 (дд, 1Н, 1=5,9, 16,6 Гц), 3,59 (д, 2Н, 1=5,4 Гц), 3,07 (дд, 1Н, 1=5,4, 13,7 Гц), 2,90 (дд, 1Н, 1=9,3, 13,7 Гц), 1,37 (с, 9Н).
Смесь соединения 2Ь (1,160 мг), бис(4нитрофенил)карбоната (1,303 мг), диизопропилэтиламина (0,555 мл), 4-(диметиламино)пиридина (26 мг) и тетрагидрофурана (0 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 4 дней. После этого реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент : раствор дихлорметан : метанол = 96:4), в результате получают соединение 3Ь (650 мг).
Ή-ЯМР (ДМСО-б6) δ: 10,07 (с, 1Н), 8,31 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 8,24-8,25 (м, 1Н), 8,09-8,12 (м, 2Н), 7,65 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,56 (д, 2Н, 1=8,8 Гц),
7,42 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,27-7,28 (м, 5Н), 7,18-
7,19 (м, 1Н), 6,95 (с, 1Н), 5,68-5,73 (м, 1Н), 5,25 (с, 2Н), 4,64-4,69 (м, 1Н), 3,58-3,79 (м, 6Н), 3,08 (дд, 1Н, 1=4,9, 13,7 Гц), 2,91 (дд, 1Н, 1=9,8, 13,7 Гц), 1,37 (с, 9Н).
Смесь соединения 3Ь (576 мг), метансульфоната ΌΧ-8951 (497 мг), 1-гидроксибензотриазола (113 мг), диизопропилэтиламина (0,303 мл) и Ν,Ν-диметилформамида (10 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После этого реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент: раствор дихлорметан : метанол = 92:8, содержащий 0,5% уксусной кислоты), в результате получают соединение 4Ь (290 мг).
Ή-ЯМР (ДМСО-б6) δ: 10,01 (с, 1Н), 8,24 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 8,09-8,13 (м, 2Н), 8,05 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 7,74 (д, 1Н, 1=10,7 Гц), 7,61 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,37 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,32 (с, 1Н),
7,24-7,27 (м, 4Н), 7,17-7,19 (м, 1Н), 6,94 (с, 1Н),
5,47 (д, 1Н, 1=16,1 Гц), 5,42 (д, 1Н, 1=16,1 Гц),
5,31 (д, 1Н, 1=19,5 Гц), 5,27-5,29 (м, 1Н), 5,24 (д, 1Н, 1=16,1 Гц), 5,09 (с, 2Н), 4,62-4,67 (м, 1Н), 3,73-3,78 (м, 2Н), 3,66 (д, 1Н, 1=5,4 Гц), 3,63 (д, 1Н, 1=5,4 Гц), 3,53-3,59 (м, 2Н), 3,23-3,27 (м, 2Н), 3,07 (дд, 1Н, 1=4,9, 13,7 Гц), 2,90 (дд, 1Н, 1=9,8, 13,7 Гц), 2,37 (с, 3Н), 2,17-2,23 (м, 2Н), 1,81-
1,90 (м, 2Н), 1,36 (с, 9Н), 0,89 (д, 1Н, 1=6,8 Гц).
Соединение 4Ь (200 мг) растворяют в муравьиной кислоте (4 мл) и оставляют на 2 ч. Реакционную смесь по каплям добавляют в эфир (40 мл). Осадок промывают эфиром, в результате получают 198 мг соединения 5Ь.
1Н-ЯМР (ДМСО-й6) δ: 10,06 (с, 1Н), 8,20-
8,41 (м, 3Н), 8,07 (д, 1Н, 1=8,7 Гц), 7,75 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 7,61 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,37 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,32 (с, 1Н), 7,21-7,30 (м, 5Н), 7,18-
7,20 (м, 1Н), 5,41-5,48 (м, 2Н), 5,23-5,33 (м, 3Н), 5,08 (с, 2Н), 4,62-4,65 (м, 1Н), 3,77 (с, 2Н), 3,723,76 (м, 1Н), 3,63 (дд, 1Н, 1=5,0, 16,5 Гц), 3,58-
3,60 (м, 1Н), 3,40 (дд, 1Н, 1=6,9, 13,7 Гц), 3,20-
3,23 (м, 1Н), 3,10-3,13 (м, 1Н), 3,06 (дд, 1Н, 1=5,0, 13,7 Гц), 2,90 (дд, 1Н, 1=9,6, 13,7 Гц), 2,37 (с, 3Н), 2,15-2,22 (м, 2Н), 1,84-1,90 (м, 2Н), 0,88 (д, 1Н, 1=6,9 Гц).
Соединение 5Ь (100 мг) растворяют в воде (5 мл) и метаноле (10 мл). Раствор добавляют к раствору натриевой соли карбоксиметилдекстранового многоатомного спирта, полученной в примере 1 (1,100 мг), в воде (10 мл) и метаноле (20 мл). В полученную смесь добавляют 1гидроксибензотриазол (15 мг) и 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимид (26 мг) и затем рН раствора доводят до 7,0 с помощью 0,1Ν водного раствора гидроксида натрия. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, затем добавляют 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимид (25 мг). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч, затем добавляют 1-этил-3(3-диметиламинопропил)карбодиимид (13 мг) и полученную смесь выдерживают при комнатной температуре в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 8,5 с помощью 0,1Ν водного раствора гидроксида натрия и затем полученную смесь обессоливают ультрафильтрацией с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют. Полученный аморфный продукт очищают колоночной хроматографией [(8ер-Рак С саПпйде (^а!егк Со.) и Βίο-Кай ЛС50\У-Х8 (№' Гогт)| и дополнительно обессоливают ультрафильтрацией с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют, в результате получают соединение 6Ь (405 мг).
Содержание остатка лекарственного соединения в соединении определяют абсорбционной спектрофотометрией при 366 нм в растворе 0,1М Тпк-буфер (рН 10,0) : ацетонитрил = 7:3, и оно равно 1,7 % (мас./мас.).
Пример 7. Синтез комплекса карбоксиметилдекстрановый полиспирг-61у-61у-МН-р-С(5Н4-СН2О-СО-ОХ-8951 с использованием муравьиной кислоты для удаления защитной группы.
Декстран Т500 (20 г, Рйагтас1а, молекулярная масса; 500К) растворяют в 0,1М уксусном буфере (рН 5,5, 2000 мл) и полученный раствор соединяют с водным раствором (2000 мл) периодата натрия. Смесь перемешивают при
4°С в течение 10 дней с защитой от света. Затем к смеси добавляют этиленгликоль (14,0 мл) и полученную смесь перемешивают в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 7 с помощью 8М водного раствора гидроксида натрия. К смеси добавляют боргидрид натрия (28 г), растворяют его и полученную смесь перемешивают в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 5,5 с помощью уксусной кислоты при охлаждении льдом и смесь перемешивают при 4°С в течение 1 ч. рН смеси доводят до 7,5 с помощью 8М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают ультрафильтрацией с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, лиофилизируют, в результате получают декстрановый многоатомный спирт (10,5 г). Молекулярная масса (гель-фильтрация, пуллулановый стандарт) полученного продукта равна 159К.
Полученный декстрановый многоатомный спирт (7,5 г) добавляют к водному раствору гидроксида натрия (31,5 г) в воде (225 мл) и растворяют его при комнатной температуре. К раствору при охлаждении льдом добавляют монохлоруксусную кислоту (45 г), растворяют ее и смесь выдерживают при комнатной температуре в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 8 с помощью уксусной кислоты и полученную смесь обессоливают ультрафильтрацией с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, лиофилизируют, в результате получают натриевую соль карбоксиметилдекстранового многоатомного спирта (8,5 г). Молекулярная масса (гель-фильтрация, пуллулановый стандарт) полученного продукта равна 274К, степень карбоксиметилирования равна 0,4.
1-Этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (4,05 г) добавляют к смеси Вос-С1у-С1уОН (2,3 г), 4-аминобензилового спирта (2,0 г), 1гидроксибензотриазола (3,29 г) и Ν,Ν-диметилформамида (20 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи и затем выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент: раствор дихлорметан : метанол =94:6), в результате получают соединение 2с (2,9 г).
!Н-ЯМР (ДМСО-Й6) δ: 9,75 (с, 1Н), 8,15 (с, 1Н), 7,54 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,23 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,07 (с, 1Н), 5,09 (т, 1Н, 1=8,6 Гц), 4,44 (д, 2Н, 1=8,6 Гц), 3,88 (с, 2Н), 3,60 (с, 1Н), 1,39 (с, 9Н).
Смесь соединения 2с (1,0 г), бис(4нитрофенил)карбоната (2,72 г), диизопропилэтиламина (1,17 мл), 4-(диметиламино)-пиридина (55 мг) и тетрагидрофурана (50 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 3 дней. Затем реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силика гель, элюент: раствор дихлорметан : метанол = 96:4), в результате получают соединение 3с (376 мг).
'Η-ЯМР (ДМСО-бб) δ: 9,92 (с, 1Н), 8,31 (д, 1Н, 1=9,3 Гц), 8,14-8,25 (м, 2Н), 7,65 (д, 2Н, 1=8,3 Гц),
7,56 (д, 2Н, 1=9,3 Гц), 7,41 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,05 (д, 1Н, 1=5,4 Гц), 5,25 (с, 2Н), 3,91 (д, 2Н, 1=4,9 Гц),
3,61 (д, 2Н, 1=5, 4 Гц), 1,40 (с, 9Н).
Смесь соединения 3с (338 мг), метансульфоната ΌΧ-8951 (400 мг), 1-гидроксибензотриазола (109 мг), диизопропилэтиламина (0,243 мл) и Ν,Ν-диметилформамида (20 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, элюент : раствор дихлорметан : метанол = 94:6, содержащий 0,5% уксусной кислоты), в результате получают соединение 4с (460 мг).
Ή-ЯМР (ДМСО-бе) δ: 9,84 (с, 1Н), 8,13-
8,15 (м, 1Н), 8,04 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 7,73 (д, 1Н, 1=10,7 Гц), 7,60 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,37 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,32 (с, 1Н), 7,04 (д, 1Н, 1=5,9 Гц),
6,48 (с, 1Н), 5,46 (д, 1Н, 1=16,1 Гц), 5,41 (д, 1Н, 1=16,1 Гц), 5,31 (д, 1Н, 1=19,0 Гц), 5,26-5,29 (м, 1Н), 5,24 (д, 1Н, 1=19,0 Гц), 5,08 (с, 2Н), 3,90 (д, 2Н, 1=4,9 Гц), 3,61 (д, 2Н, 1=5,9 Гц), 3,07-3,12 (м, 2Н), 2,37 (с, 3Н), 2,15-2,23 (м, 2Н), 1,83-1,92 (м, 2Н), 1,39 (с, 9Н), 0,89 (д, 1Н, 1=7,3 Гц).
Соединение 4с (100 мг) растворяют в муравьиной кислоте (4 мл) и оставляют на 2 ч. Реакционную смесь по каплям добавляют в эфир (40 мл). Осадок промывают эфиром, в результате получают соединение 5с (98 мг).
Ή-ЯМР (ДМСО-б6) δ: 10,02 (с, 1Н), 8,24-
8,30 (м, 3Н), 8,05-8,09 (м, 1Н), 7,73-7,76 (м, 2Н), 7,59 (д, 2Н, 1=6,6 Гц), 7,34-7,38 (м, 3Н), 6,51 (с, 1Н), 5,41-5,49 (м, 2Н), 5,24-5,31 (м, 3Н), 5,08 (с, 2Н), 3,95 (с, 2Н), 3,28 (с, 2Н), 3,07-3,14 (м, 2Н),
2,39 (с, 3Н), 2,14-2,28 (м, 2Н), 1,86-1,90 (м, 2Н), 0,90 (д, 1Н, 1=6,0 Гц).
Соединение 5с (95 мг) растворяют в воде (15 мл) и метаноле (15 мл). Раствор добавляют к раствору натриевой соли карбоксиметилдекстранового многоатомного спирта, полученной в примере 1 (1000 мг), в воде (15 мл) и метаноле (15 мл). В полученную смесь добавляют 1гидроксибензотриазол (28 мг) и 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимид (53 мг) и рН раствора доводят до 7,0 с помощью 0,1 Ν водного раствора гидроксида натрия. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, затем добавляют 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (26 мг). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч, затем добавляют 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (12 мг) и полученную смесь выдерживают при комнатной температуре в течение ночи. рН реакционной смеси доводят до 8,5 с помощью 0,1Ν водного раствора гидроксида натрия и обессоливают ультрафильтрацией с использованием мембраны Вютах-50. Ос тальной раствор, который не пропускался через мембрану, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют. Полученный аморфный продукт очищают колоночной хроматографией [8ер-Рак Сй сагбгбде (^а!ег§ Со.) и Вю-Каб ΑΟ50ν-Χ8 (Να' ίοηη)| и дополнительно обессоливают ультрафильтрацией с использованием мембраны Вютах-50. Остальной раствор, который не пропускался через мембрану, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют, в результате получают соединение 6с (588 мг). Это соединение растворяют в 0,1М водном растворе хлорида натрия и анализируют методом ГПХ (колонка: ТО8ОН Т8К Се1 Р^-4000ХЬ, растворитель: 0,1М водный раствор №С1, содержащий 20% ацетонитрил, объемная скорость потока: 0,8 мл/мин.). Результаты анализа методом ГПХ и спектр поглощения ультрафиолетового излучения (0,1М Тгй-буфер. рН 9,0, 0,12 мг/мл) соединения представлены на фиг. 5 и 6, соответственно. Содержание остатка лекарственного соединения в соединении определяют абсорбционной спектрофотометрией при 366 нм в растворе 0,1М Тгщ-буфер (рН 10,0) : ацетонитрил = 7:3, и оно равно 3,3% (мас./мас.).
Пример 8. Высвобождение лекарственного соединения из лекарственного комплекса.
Лекарственные комплексы, полученные в примерах 5, 6 и 7 растворяют, соответственно, в Ме111 А (фибросаркома Ме111 А мыши) гомогенате или буфере при 37°С (50 мкг/мл). Спустя 20 ч определяют количество высвобожденного ΌΧ8951. Соединение, в котором промежуточное звено и ΌΧ-8951 связаны друг с другом без раминобензилоксикарбонильной группы, получают и используют в качестве сравнительного соединения.
Результат представлен в табл. 4. Количество высвобожденного лекарственного соединения выражают в процентах от количества лекарственного соединения, используемого в лекарственном комплексе. Лекарственные комплексы примеров 5, 6 и 7 быстро высвобождали лекарственное соединение в слабо кислом гомогенате, но с трудом высвобождали его в буфере. С другой стороны, сравнительное соединение в небольшом количестве высвобождает лекарственное соединение в слабо кислом гомогенате, но не высвобождает в буфере.
Таблица 4
Прим. 5 Прим.6 Прим. 7 Сравнит. соединение
МеХЬ А гомогенат (рН 4,5) 110,69 15,48 0,44 0,85
МеХЬ А гомогенат (рН 5,5) 110,31 4,97 0,37 0,12
МеХЬ А гомогенат (рН 6,5) 42,71 1,78 0,55 0,01
Буфер (рН 4,5) 0,79 0,12 0,15 0,00
Буфер (рН 5,5) 0,71 0,19 0,12 0,00
Буфер (рН 6,5) 0,8 0,23 0,16 0,00
Плазма 0,13 0,51 0,12 0,00
Пример 9. Максимальная переносимая доза (МПД) лекарственных комплексов примеров 5, 6 и 7 в отношении мыши с Мс111 А опухолью.
Клетки Мс111 А трансплантируют ВАЬВ/с мыши для получения Мс111 А опухоли. На 13-й день однократно вводят лекарственные комплексы, полученные в примерах 5, 6 и 7. После введения измеряют массу тела, наблюдают токсическую гибель во времени и вычисляют максимальный коэффициент снижения массы тела и смертность, результаты представлены в табл.
5. Дозу выражают из расчета на массу безводного свободного основания ΌΧ-8951.
Таблица 5
Соединение Доза (мг/кг) ВЩЬшаха (%) [день] Кь
Контроль 0 <0 0/3
Пример 5 10 27,1 [181 3/3
5 28,6 [181 3/3
2,5 28,9 [201 3/3
1,25 5,0 [181 0/3
0,625 2,0 [141 0/3
Пример 6 10 27,1[181 3/3
5 24,0 [181 3/3
2,5 22,1 [201 0/3
1,25 2,4 [141 0/3
Пример 7 30 14,6 [161 3/3
20 14,2 [161 3/3
10 13,7 [161 3/3
5 25,4 [181 3/3
2,5 31,0 [211 3/3
а Максимальный коэффициент снижения массы тела (числа в скобках соответствуют тем дням, когда наблюдался максимальный коэффициент снижения массы тела).
<0 означает, что снижения массы тела не наблюдалось.
ь Количество умерших мышей/количество использованных мышей.
На основании дозы, при которой наблюдалось снижение массы тела и гибель, определяют МПД каждого комплекса, результаты представлены ниже.
Таблица 6
МПД (мг/кг)
Пример 5 1,25-2,5
Пример 6 2,5
Пример 7 <2,5
МПД лекарственного комплекса, полученного в примере 5, составляет примерно 1/3 от МПД лекарственного комплекса, полученного в примере 1 (см. пример 3). Результат, как установлено, соответствуют тому факту, что при использовании лекарственного комплекса, полученного в примере 1 (см. таблицу в примере 2), скорость высвобождения ΌΧ-8951 составляет примерно 1/3 от скорости высвобождения ΌΧ-8951 при использовании лекарственного комплекса, полученного в примере 5 (см. таблицу в примере 8).
Пример 10. Противоопухолевая активность комплексов, представленных в примерах 5 и 6.
Клетки Мс111 А трансплантируют ВАЬВ/с мыши для получения Мс111 А опухоли. На 7-й день после трансплантации однократно вводят лекарственные комплексы, представленные в примерах 1, 5 и 6, соответственно. На 21-й день измеряют массу опухоли для оценки ингибиторной активности в отношении опухоли и токсичности. Результаты представлены в табл. 7. В таблице * обозначает значения в опыте Дуннета (ΌιιπιΜ'δ 1ез() (*** Р<0,001, **Р<0,01, *Р<0,05), доза выражена из расчета на массу безводного свободного основания ΌΧ-8951, и Ж - коэффициент уменьшения опухоли. Лекарственные комплексы примеров 5 и 6 проявляют ингибиторную активность в отношении опухоли, которая зависит от применяемой дозы.
Кроме того, минимальная эффективная доза лекарственного комплекса, представленного в примере 5, составляет примерно 1/3 минимальной эффективной дозы лекарственного комплекса, представленного в примере 1. Результат, как установлено, соответствует тому факту, что подобное различие наблюдалось между скоростью высвобождения ΌΧ-8951 в противоопухолевых гомогенатах (см. таблицы в примерах 2 и 8) и МПД для мыши с Ме111 А опухолью (см. таблицы в примерах 3 и 9).
Таблица 7
Соединение Доза (мг/кг) Средняя масса опухоли (г) ИК (%) ВЩЬшаха (%) Г4ау1 Кь
Контроль 0 2,624±0,417 0 <0 0/6
Пример 1 7,5 0,005±0,003*** 100 26,1 [161 2/6
5 0,004±0,001*** 100 4,0 [131 0/6
2,5 0,031±0,014*** 99 <0 0/6
1,25 0,775±0,207*** 71 <0 0/6
0,625 1,489±0,215** 43 <0 0/6
Пример 5 1,875 0,011±0,003** 100 12,3 [131 0/6
1,25 0,010±0,004*** 100 <0 0/6
0,625 0,328±0,164*** 88 <0 0/6
0,3125 1,128+0,173*** 57 <0 0/6
0,15625 2,394±0,231 9 <0 0/6
Пример 6 2,5 0,012±0,004*** 100 25,9 [131 3/6
1,25 0,016+0,008*** 99 <0 0/6
0,625 0,272±0,066*** 90 <0 0/6
0,3125 1,419±0,163** 46 <0 0/6
0,15625 1,645±0,191* 37 <0 0/6
а Максимальный коэффициент снижения массы тела (числа в скобках соответствуют тем дням, когда наблюдался максимальный коэффициент снижения массы тела).
<0 означает, что снижения массы тела не наблюдалось. ь Количество умерших мышей/количество использованных мышей.
Промышленная применимость
Лекарственный комплекс данного изобретения может сайт-селективно доставлять лекарственное соединение, такое как противоопухолевые средства и противовоспалительные средства, к сайтам опухоли и т.п и быстро высвобождать лекарственное соединение на сайте. Кроме того, лекарственный комплекс отличается тем, что, несомненно, проявляет ожидаемую эффективность лекарственного соединения, поскольку аминокислота, полученная из спейсерного фрагмента, не остается в высвобожденном лекарственном соединении.

Claims (20)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Лекарственный комплекс формулы
    Α-Κ-ΝΗ-Υ-СЩ-О-СО-Р где А представляет карбокси(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт в качестве носителя лекарственного соединения; К представляет спейсер, который является аминокислотой или олигопептидом, включающим от 2 до 8 аминокислот; Υ представляет фениленовую группу, которая может быть замещенной низшими алкильными группами, циклическими С3-6алкильными группами, галоген(низший алкил) группами, хлорметильной группой или трифторметильной группой, гидрокси(низший алкил) группами, гидроксиметильной группой, низшими алкоксильными группами, метоксигруппой и этоксигруппой, низшими алкенильными группами, винильной группой и аллильной группой, низшими алкинильными группами, пропаргильной группой, гидроксильной группой, атомами галогенов, любым из атома фтора, атома хлора, атома брома и атома йода, карбоксильной группой, алкоксикарбонильными группами, метоксикарбонильной группой, алканоильными группами, ацетильной группой, галогеналканоильными группами, трифторацетильной группой, арильными группами, фенильной группой и нафтильной группой, аралкильными группами, бензильной группой, арилоксигруппами, феноксигруппой, аралкилоксигруппами, бензилоксигруппой, ароильными группами, бензоильной группой, гетероарильными группами, пиридильной группой и хинолильной группой, аминогруппой, моно- или ди-(низший алкил)аминогруппами, карбамоильной группой, нитрогруппой, цианогруппой, (низший алкил)сульфинильными группами, (низший алкил)сульфонильными группами, тиольной группой, (низший алкил)тиогруппами, и О представляет остаток лекарственного соединения, причем низший алкил представляет собой С1-6-алкил.
  2. 2. Лекарственный комплекс по п.1, в котором К представляет спейсер, включающий от 2 до 8 аминокислот, соединенных пептидными связями.
  3. 3. Лекарственный комплекс по любому из пп.1 или 2, в котором Υ представляет пфениленовую группу, которая может быть замещенной.
  4. 4. Лекарственный комплекс по любому из пп.1 или 2, в котором Υ представляет незамещенную п-фениленовую группу.
  5. 5. Лекарственный комплекс по п.1, в котором декстрановый полиспирт, который образует карбокси(С1-4)алкилдекстрановый полиспирт, представляет собой декстрановый полиспирт, полученный обработкой декстрана в условиях, которые обеспечивают, по существу, его полный полиалкоголиз.
  6. 6. Лекарственный комплекс по п.5, в котором карбокси(С1-4)алкилдекстрановый поли спирт представляет карбоксиметилдекстрановый полиспирт.
  7. 7. Лекарственный комплекс по любому из пп.1-6, в котором лекарственное соединение представляет противоопухолевое средство или противовоспалительное средство.
  8. 8. Лекарственный комплекс по любому из пп.1-7, в котором лекарственное соединение, содержащее аминогруппу, присоединено к Α-КΝΗ-Υ-СЩ-О-СО- посредством аминогруппы.
  9. 9. Лекарственный комплекс по п.8, в котором лекарственное соединение представляет (18,98)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо [де]пирано [3',4':6,7] индолизино [1,2-Ъ] хинолин-10,13(9Н, 15Н)дион.
  10. 10. Лекарственный комплекс по п.9, в котором К представляет -С1у-С1у-Р11е-С1у-.
  11. 11. Лекарственный комплекс по п.9, в котором К представляет -С1у-С1у-С1у-Р11е-.
  12. 12. Система доставки лекарственного соединения формулы
    Α-Ε-ΝΗ-Υ-СНз-О-СО-О.
    где А представляет карбокси (С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт в качестве носителя лекарственного соединения; К представляет спейсер, который является аминокислотой или олигопептидом, содержащим от 2 до 8 аминокислот; Υ представляет фениленовую группу, которая может быть замещенной низшими алкильными группами, циклическими С3-6-алкильными группами, галоген(низший алкил)группами, хлорметильной группой или трифторметильной группой, гидрокси(низший алкил)группами, гидроксиметильной группой, низшими алкоксильными группами, метоксигруппой и этоксигруппой, низшими алкенильными группами, винильной группой и аллильной группой, низшими алкинильными группами, пропаргильной группой, гидроксильной группой, атомами галогенов, любым из атома фтора, атома хлора, атома брома и атома йода, карбоксильной группой, алкоксикарбонильными группами, метоксикарбонильной группой, алканоильными группами, ацетильной группой, галогеналканоильными группами, трифторацетильной группой, арильными группами, фенильной группой и нафтильной группой, аралкильными группами, бензильной группой, арилоксигруппами, феноксигруппой, аралкилоксигруппами, бензилоксигруппой, ароильными группами, бензоильной группой, гетероарильными группами, пиридильной группой и хинолильной группой, аминогруппой, моно- или ди-(низший алкил)аминогруппами, карбамоильной группой, нитрогруппой, цианогруппой, (низший алкил)сульфинильными группами, (низший алкил)сульфонильными группами, тиольной группой, (низший алкил) тиогруппами; О представляет остаток лекарственного соединения, причем низший алкил представляет собой С1-6-алкил.
  13. 13. Система доставки по п.12, в которой лекарственное соединение представляет (18,98)1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси4-метил-1Н,12Н-бензо[де]пирано[3',4':6,7]индолизино [1,2-Ь]хинолин-10,13(9Н,15Н)-дион.
  14. 14. Система доставки по п.13, в котором К представляет -С1у-С1у-РНе-С1у-.
  15. 15. Система доставки по п.13, в котором К представляет -С1у-С1у-С1у-РНе-.
  16. 16. Соединение формулы
    К'-МНА-СН2-О-СО-0 где К' представляет группу, которая включает одну аминокислоту или от 2 до 8 аминокислот, соединенных пептидными связями, и в которой Ν-конец защищен или не защищен; Υ представляет фениленовую группу, которая может быть замещенной низшими алкильными группами, циклическими С3-6-алкильными группами, галоген(низший алкил)группами, хлорметильной группой или трифторметильной группой, гидрокси(низший алкил)группами, гидроксиметильной группой, низшими алкоксильными группами, метоксигруппой и этоксигруппой, низшими алкенильными группами, винильной группой и аллильной группой, низшими алкинильными группами, пропаргильной группой, гидроксильной группой, атомами галогенов, любым из атома фтора, атома хлора, атома брома и атома йода, карбоксильной группой, алкоксикарбонильными группами, метоксикарбонильной группой, алканоильными группами, ацетильной группой, галогеналканоильными группами, трифторацетильной группой, арильными группами, фенильной группой и нафтильной группой, аралкильными группами, бензильной группой, арилоксигруппами, феноксигруппой, аралкилоксигруппами, бензилоксигруппой, ароильными группами, бензоильной группой, гетероарильными группами, пиридильной группой и хинолильной группой, аминогруппой, моно- или ди-(низший алкил)аминогруппами, карбамоильной группой, нитрогруппой, цианогруппой, (низший алкил)сульфинильными группами, (низший алкил)сульфонильными группами, тиольной группой, (низший алкил)тиогруппами; и О представляет остаток лекарственного соединения, причем низший алкил представляет собой С1-6-алкил.
  17. 17. Соединение по п.16, в котором Υ представляет незамещенную п-фениленовую группу, К' представляет группу формулы Н-61у-61уРНе-С1у- и лекарственное соединение представляет (18,98)-1 -амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[де]пирано [3',4':6,7]индолизино-[1,2-Ь]хинолин-10,13(9Н, 15Н)дион.
  18. 18. Соединение по п.16, в котором Υ представляет незамещенную п-фениленовую группу, К' представляет группу формулы Н-61у-61уС1у-РНе- и лекарственное соединение представляет (18,98)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[де]пирано [3',4':6,7]индолизино-[1,2-Ь]хинолин-10,13(9Н, 15Н)дион.
  19. 19. Соединение формулы
    А-К-Б1НА-СН2-О-СО-Х где А представляет карбокси(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт в качестве носителя лекарственного соединения; К представляет спейсер, который является аминокислотой или олигопептидом, включающим от 2 до 8 аминокислот; Υ представляет фениленовую группу, которая может быть замещенной низшими алкильными группами, циклическими С3-6-алкильными группами, галоген (низший алкил) группами, хлорметильной группой или трифторметильной группой, гидрокси (низший алкил) группами, гидроксиметильной группой, низшими алкоксильными группами, метоксигруппой и этоксигруппой, низшими алкенильными группами, винильной группой и аллильной группой, низшими алкинильными группами, пропаргильной группой, гидроксильной группой, атомами галогенов, любым из атома фтора, атома хлора, атома брома и атома йода, карбоксильной группой, алкоксикарбонильными группами, метоксикарбонильной группой, алканоильными группами, ацетильной группой, галогеналканоильными группами, трифторацетильной группой, арильными группами, фенильной группой и нафтильной группой, аралкильными группами, бензильной группой, арилоксигруппами, феноксигруппой, аралкилоксигруппами, бензилоксигруппой, ароильными группами, бензоильной группой, гетероарильными группами, пиридильной группой и хинолильной группой, аминогруппой, моно- или ди-(низший алкил)аминогруппами, карбамоильной группой, нитрогруппой, цианогруппой, (низший алкил)сульфинильными группами, (низший алкил)сульфонильными группами, тиольной группой, (низший алкил) тиогруппами, причем низший алкил представляет собой С1-6-алкил; и Х выбран из группы, включающей гидроксильную группу, -Ο-М, где М представляет защитную группу карбоксильной группы или уходящую группу.
  20. 20. Применение соединения по любому из пп.16-19 для получения лекарственного комплекса по любому из пп. с 1 по 9.
EA200001217A 1998-05-22 1999-05-21 Лекарственный комплекс c полимерным носителем EA003398B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP14091598 1998-05-22
PCT/JP1999/002681 WO1999061061A1 (fr) 1998-05-22 1999-05-21 Composites medicamenteux

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200001217A1 EA200001217A1 (ru) 2001-06-25
EA003398B1 true EA003398B1 (ru) 2003-04-24

Family

ID=15279786

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200001217A EA003398B1 (ru) 1998-05-22 1999-05-21 Лекарственный комплекс c полимерным носителем

Country Status (12)

Country Link
US (1) US6835807B1 (ru)
EP (1) EP1080732A4 (ru)
JP (1) JP4560210B2 (ru)
KR (1) KR100581443B1 (ru)
CN (1) CN1250293C (ru)
AU (1) AU3733399A (ru)
CA (1) CA2333321A1 (ru)
EA (1) EA003398B1 (ru)
HK (1) HK1040052B (ru)
NO (1) NO20005913L (ru)
TW (1) TWI253935B (ru)
WO (1) WO1999061061A1 (ru)

Families Citing this family (88)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW527183B (en) 1996-06-06 2003-04-11 Daiichi Seiyaku Co Drug complex
WO2000025825A1 (fr) * 1998-10-30 2000-05-11 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Composes dds et procede de dosage de ces composes
AU2001267831A1 (en) * 2000-06-29 2002-01-08 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. DDS compound and process for the preparation thereof
TWI313609B (en) * 2001-08-21 2009-08-21 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Pharmaceutical composition for inhibiting the metastasis or preventing the recurrence of malignant tumor
EP1572242B1 (en) * 2002-12-13 2014-04-16 Immunomedics, Inc. Immunoconjugates with an intracellularly-cleavable linkage
US7282590B2 (en) * 2004-02-12 2007-10-16 The Research Foundation Of State University Of New York Drug conjugates
EP1718667B1 (en) * 2004-02-23 2013-01-09 Genentech, Inc. Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates
JP2009508852A (ja) * 2006-01-23 2009-03-05 クワンジュ インスティチュート オブ サイエンス アンド テクノロジー 薬理活性物質と粘膜粘着性高分子とが共有結合されたコンジュゲート及びこれを用いた薬理活性物質の経粘膜運搬方法
CN1973902B (zh) * 2006-12-12 2010-11-10 东北师范大学 以人参多糖为载体的抗肿瘤药物阿霉素复合物及制备方法
EP2279006B1 (en) 2008-04-22 2014-10-22 FIDIA FARMACEUTICI S.p.A. Therapeutic use of pharmaceutical preparations containing antitumoral drugs bound to hyaluronic acid in the treatment of neoplasias
BR112012026213B1 (pt) 2010-04-15 2021-12-28 Medimmune Limited Compostos de pirrolobenzodiazepinas, conjugado das mesmas, composição farmacêutica compreendendo o conjugado e uso do mesmo para o tratamento de uma doença proliferativa
US9895449B2 (en) 2010-05-25 2018-02-20 Syndevrx, Inc. Polymer-conjugated MetAP2 inhibitors, and therapeutic methods of use thereof
CN107141410B (zh) 2010-05-25 2022-12-09 辛德弗雷克斯公司 聚合物缀合的MetAP2抑制剂及其应用的治疗方法
KR101877598B1 (ko) 2011-10-14 2018-07-11 메디뮨 리미티드 피롤로벤조디아제핀 및 그의 컨주게이트
PT2773671T (pt) 2011-11-04 2021-12-14 Zymeworks Inc Geração de anticorpo heterodimérico estável com mutações no domínio fc
WO2013177481A1 (en) 2012-05-25 2013-11-28 Immunogen, Inc. Benzodiazepines and conjugates thereof
KR102584005B1 (ko) * 2012-10-11 2023-09-27 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 글리신아미드 화합물의 제조 방법
PT2839860T (pt) 2012-10-12 2019-07-29 Medimmune Ltd Pirrolobenzodiazepinas e conjugados das mesmas
ES2703151T3 (es) 2012-10-12 2019-03-07 Adc Therapeutics Sa Conjugados de anticuerpos de pirrolobenzodiazepinas
SI2906296T1 (en) 2012-10-12 2018-06-29 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
NZ707486A (en) 2012-10-12 2018-09-28 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine - anti-psma antibody conjugates
HUE035694T2 (en) 2012-10-12 2018-05-28 Adc Therapeutics Sa Pirrolobenzodiazepine anti-CD22 antibody conjugates
ES2660029T3 (es) 2012-10-12 2018-03-20 Medimmune Limited Conjugados de anticuerpo-pirrolobenzodiazepinas
EP2906250B1 (en) 2012-10-12 2018-05-30 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine-anti-psma antibody conjugates
JP6272230B2 (ja) * 2012-10-19 2018-01-31 第一三共株式会社 親水性構造を含むリンカーで結合させた抗体−薬物コンジュゲート
EA031585B1 (ru) 2012-12-21 2019-01-31 Медимьюн Лимитед Пирролобензодиазепины и их конъюгаты
CN105246894A (zh) 2012-12-21 2016-01-13 斯皮罗根有限公司 用于治疗增殖性和自身免疫疾病的非对称吡咯并苯并二氮杂卓二聚物
NZ710745A (en) 2013-03-13 2019-03-29 Genentech Inc Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
JP6444902B2 (ja) 2013-03-13 2018-12-26 メドイミューン・リミテッドＭｅｄＩｍｍｕｎｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ ピロロベンゾジアゼピン及びその結合体
CN105142674B (zh) 2013-03-13 2018-11-13 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓和其结合物
AU2014250983B2 (en) 2013-04-10 2019-04-11 Syndevrx, Inc. MetAP2 inhibitors and methods of treating obesity
GB201317982D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EP3054983B1 (en) 2013-10-11 2019-03-20 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
EP3054985B1 (en) 2013-10-11 2018-12-26 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
WO2015052535A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
RU2743077C2 (ru) 2013-12-25 2021-02-15 Дайити Санкио Компани, Лимитед Конъюгат анти-trop2 антитело-лекарственное средство
CN105829346B (zh) * 2014-01-31 2019-08-23 第一三共株式会社 抗her2抗体－药物偶联物
US10550190B2 (en) 2014-04-04 2020-02-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Phosphate based linkers for intracellular delivery of drug conjugates
ES2859648T3 (es) 2014-04-10 2021-10-04 Daiichi Sankyo Co Ltd Conjugado anticuerpo-fármaco anti-HER3
WO2015155976A1 (ja) 2014-04-10 2015-10-15 第一三共株式会社 抗ｈｅｒ２抗体－薬物コンジュゲート
GB201406767D0 (en) 2014-04-15 2014-05-28 Cancer Rec Tech Ltd Humanized anti-Tn-MUC1 antibodies anf their conjugates
US10188746B2 (en) 2014-09-10 2019-01-29 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
GB201416112D0 (en) 2014-09-12 2014-10-29 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
AU2015352545B2 (en) 2014-11-25 2020-10-15 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201506402D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
GB201506389D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
ES2938186T3 (es) 2015-06-29 2023-04-05 Daiichi Sankyo Co Ltd Procedimiento de fabricación selectiva de un conjugado anticuerpo-fármaco
US10800826B2 (en) 2015-10-05 2020-10-13 Merck Sharp & Dohme Corp. Antibody peptide conjugates that have agonist activity at both the glucagon and glucagon-like peptide 1 receptors
WO2017062271A2 (en) 2015-10-06 2017-04-13 Merck Sharp & Dohme Corp. Antibody drug conjugate for anti-inflammatory applications
WO2017100553A1 (en) 2015-12-10 2017-06-15 Syndevrx, Inc. Fumagillol derivatives and polymorphs thereof
CN108697807B (zh) 2016-01-11 2021-11-26 辛德弗雷克斯公司 代谢功能障碍引起的肿瘤的治疗
GB201601431D0 (en) 2016-01-26 2016-03-09 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines
WO2017132103A2 (en) 2016-01-29 2017-08-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Phosphonate linkers and their use to facilitate cellular retention of compounds
GB201602359D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
GB201602356D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
GB201607478D0 (en) 2016-04-29 2016-06-15 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
GB201617466D0 (en) 2016-10-14 2016-11-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
CA3046293A1 (en) 2016-12-12 2018-06-21 Daiichi Sankyo Company, Limited Combination of antibody-drug conjugate and immune checkpoint inhibitor
EP3572428A4 (en) 2017-01-17 2020-12-30 Daiichi Sankyo Company, Limited ANTI-GPR20 ANTIBODY AND ANTI-GPR20 ANTIBODY MEDICINAL CONJUGATE
RS61795B1 (sr) 2017-02-08 2021-06-30 Adc Therapeutics Sa Konjugati pirolobenzodiazepin antitela
GB201702031D0 (en) 2017-02-08 2017-03-22 Medlmmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
WO2018192944A1 (en) 2017-04-18 2018-10-25 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine conjugates
EP3612234B1 (en) 2017-04-20 2024-03-13 ADC Therapeutics SA Combination therapy with an anti-axl antibody-drug conjugate
TW202330036A (zh) 2017-05-15 2023-08-01 日商第一三共股份有限公司 抗體-藥物結合物之製造方法
MX2019015042A (es) 2017-06-14 2020-08-06 Adc Therapeutics Sa Regimen de dosificacion.
AU2018316532B2 (en) 2017-08-18 2022-11-24 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine conjugates
WO2019044947A1 (ja) 2017-08-31 2019-03-07 第一三共株式会社 抗体－薬物コンジュゲートの改良製造方法
CN117838881A (zh) 2017-08-31 2024-04-09 第一三共株式会社 制备抗体-药物缀合物的新方法
GB201803342D0 (en) 2018-03-01 2018-04-18 Medimmune Ltd Methods
GB201806022D0 (en) 2018-04-12 2018-05-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EP4257611A3 (en) 2018-05-18 2024-03-06 Glycotope GmbH Anti-muc1 antibody
AU2019311077A1 (en) 2018-07-23 2021-02-25 Heidelberg Pharma Research Gmbh Use of anti-CD5 antibody drug conjugate (ADC) in allogeneic cell therapy
AU2019366819A1 (en) 2018-10-26 2021-06-03 Syndevrx Inc. Biomarkers of MetAP2 inhibitors and applications thereof
MX2021012961A (es) 2019-04-24 2021-11-25 Heidelberg Pharma Res Gmbh Conjugados de anticuerpo y farmaco de amatoxina y usos de los mismos.
GB201908128D0 (en) 2019-06-07 2019-07-24 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
CN110339181A (zh) * 2019-07-02 2019-10-18 中国药科大学 一种基于点击反应的pH响应型纳米制剂及其制法和应用
KR20220052918A (ko) 2019-07-10 2022-04-28 싸이브렉사 2, 인크. 치료제로서의 사이토톡신의 펩티드 접합체
JP2022541747A (ja) 2019-07-10 2022-09-27 サイブレクサ ３，インコーポレイテッド 治療薬としての微小管標的化剤のペプチドコンジュゲート
CA3160557A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 Innate Pharma Treatment of cancer
WO2022043256A1 (en) 2020-08-23 2022-03-03 Cobiores Nv Synergistic combinations of anticancer drugs linked to a tetrapeptidic moiety and immunotherapeutic agents
AU2021387795A1 (en) 2020-11-25 2023-06-01 Innate Pharma Treatment of cancer
AU2021405744A1 (en) 2020-12-22 2023-08-03 Cobiores Nv Compounds comprising a tetrapeptidic moiety
WO2022167664A1 (en) 2021-02-07 2022-08-11 Cobiores Nv Compounds comprising a tetrapeptidic moiety
US11806405B1 (en) 2021-07-19 2023-11-07 Zeno Management, Inc. Immunoconjugates and methods
WO2023194539A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Heidelberg Pharma Research Gmbh Methods of improving the therapeutic index of amatoxin-antibody conjugates
WO2023227660A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Innate Pharma Nectin-4 binding agents
WO2024121632A1 (en) 2022-12-09 2024-06-13 Crispr Therapeutics Ag Use of anti-cd117 antibody drug conjugate (adc)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0687746A (ja) * 1992-07-16 1994-03-29 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 抗腫瘍剤
WO1994019376A1 (en) * 1993-02-26 1994-09-01 Drug Delivery System Institute, Ltd. Polysaccharide derivative and drug carrier
WO1997046260A1 (en) * 1996-06-06 1997-12-11 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Drug complexes

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2081025A1 (en) 1991-02-21 1992-08-22 Kazuhiro Inoue Carboxymethylmannoglucans and derivatives thereof
US6214345B1 (en) * 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
JPH0784481A (ja) 1993-06-26 1995-03-31 Ricoh Co Ltd 画像形成装置
CA2192725C (en) 1995-12-28 2004-04-20 Kenji Tsujihara Camptothecin derivatives
TW409058B (en) * 1996-06-06 2000-10-21 Daiichi Seiyaku Co Method for preparation of a drug complex
US6368598B1 (en) * 1996-09-16 2002-04-09 Jcrt Radiation Oncology Support Services, Inc. Drug complex for treatment of metastatic prostate cancer
CA2264227A1 (en) 1996-09-27 1998-04-02 Raymond A. Firestone Hydrolyzable prodrugs for delivery of anticancer drugs to metastatic cells
WO1998019705A1 (en) * 1996-11-05 1998-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Branched peptide linkers
JPH1171280A (ja) * 1997-06-26 1999-03-16 Tanabe Seiyaku Co Ltd 医薬組成物
JPH1192405A (ja) * 1997-09-19 1999-04-06 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 薬物複合体
WO2000025825A1 (fr) * 1998-10-30 2000-05-11 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Composes dds et procede de dosage de ces composes

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0687746A (ja) * 1992-07-16 1994-03-29 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 抗腫瘍剤
WO1994019376A1 (en) * 1993-02-26 1994-09-01 Drug Delivery System Institute, Ltd. Polysaccharide derivative and drug carrier
WO1997046260A1 (en) * 1996-06-06 1997-12-11 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Drug complexes

Also Published As

Publication number Publication date
EP1080732A4 (en) 2004-08-25
CN1250293C (zh) 2006-04-12
KR20010052385A (ko) 2001-06-25
WO1999061061A1 (fr) 1999-12-02
EA200001217A1 (ru) 2001-06-25
NO20005913L (no) 2001-01-22
NO20005913D0 (no) 2000-11-22
US6835807B1 (en) 2004-12-28
CN1310631A (zh) 2001-08-29
EP1080732A1 (en) 2001-03-07
TWI253935B (en) 2006-05-01
HK1040052A1 (en) 2002-05-24
AU3733399A (en) 1999-12-13
CA2333321A1 (en) 1999-12-02
KR100581443B1 (ko) 2006-05-23
HK1040052B (zh) 2006-09-15
JP4560210B2 (ja) 2010-10-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA003398B1 (ru) Лекарственный комплекс c полимерным носителем
US6291671B1 (en) Process for producing drug complexes
US6838450B2 (en) Drug complex
US7041818B2 (en) DDS compound and method for measurement thereof
CN109316605B (zh) 叶酸受体结合配体-药物偶联物
JP4420472B2 (ja) 薬物複合体
KR20200083605A (ko) 프로그램가능한 중합체성 약물
JP2018512376A (ja) 抗体薬物コンジュゲート
PL178132B1 (pl) Koniugat polimeryczny zawierający pochodne kamptotecyny, sposób jego wytwarzania, zawierająca go kompozycja farmaceutyczna, 20-0-acyloaminowa pochodna kamptotecyny i sposób jej wytwarzania
JP2009544749A (ja) 位置選択的にアミド化されたヒアルロン酸に基づく薬物送達システム
EP3381474A1 (en) Histone deacetylase inhibitors-based antibody drug conjugates (adcs) and use in therapy
JP2017529322A (ja) ポリオキサゾリン抗体薬物複合体
KR20040027972A (ko) 악성 종양의 전이 억제 또는 재발 방지를 위한 다당류콘쥬게이트를 함유하는 약제학적 조성물
JP2004504358A (ja) 抗腫瘍薬のポリマー複合体
CN111205350A (zh) 作为组蛋白脱乙酰酶抑制剂的大环硫代酸酯前体药物
US20200291079A1 (en) Engineering structurally defined non-saccharide glycosaminoglycan mimetics via a polyproline scaffold
RU2798981C2 (ru) Конъюгат антитела с аматоксином неприродного типа
JP2003034653A (ja) 最適化されたｄｄｓ化合物
KR20000016371A (ko) 약물복합체의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU