KR20220052918A - 치료제로서의 사이토톡신의 펩티드 접합체 - Google Patents

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KR20220052918A
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다니엘 리차드 마샬
조한나 마리에 첸거리
로버트 존 매과이어
로버트 에이. 볼크만
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싸이브렉사 2, 인크.
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Abstract

본 발명은 암과 같은 질환의 치료에 유용한 토포이소머라제 I 억제제와 같은 사이토톡신의 펩티드 접합체에 관한 것이다.

Description

치료제로서의 사이토톡신의 펩티드 접합체
본 발명은 암과 같은 질환의 치료에 유용한 토포이소머라제(topoisomerase) I 억제제와 같은 사이토톡신의 펩티드 접합체에 관한 것이다.
암은 세포 성장의 비정상적인 조절을 특징으로 하는 질환의 그룹이다. 암의 연간 발병률은 미국에서만 160만 명이 넘는 것으로 추정된다. 수술, 방사선, 화학 요법 및 호르몬이 암을 치료하는 데 사용되지만 미국에서는 여전히 두 번째 주요 사망 원인이다. 매년 약 600,000명의 미국인이 암으로 사망할 것으로 추정된다.
약제의 전신 투여에 의한 인간의 암 치료는 종종 암 세포의 특징인 제어되지 않는 복제를 늦추거나 종료함으로써 기능한다. 그러한 제제의 한 부류는 토포이소머라제 I 억제제이다. 토포이소머라제 1 효소는 초나선 DNA를 이완시키고 DNA 나선 제약조건을 완화하는 기능을 하고 전사 조절에 역할을 한다. 문헌[Li, M., Genomics Proteomics Bioinformatics 14(2016), 166-171] 참조. 토포이소머라제 I은 DNA 복제 및 전사의 동적 기능으로 인해 포유동물 시스템의 발달에 필수적이다. 그러나 전사 조절에서의 직접적인 역할로 인해 토포이소머라제 I 기능 장애는 비정상적인 세포 기능을 유발할 수 있다. 문헌[Li, M., Genomics Proteomics Bioinformatics 14(2016), 166-171] 참조. 따라서 암, 신경퇴행성 질환 및 자가면역 질환과 같은 여러 인간 질환은 토포이소머라제 I 조절 및 활성과 관련이 있다.
토포이소머라제 I의 억제제는 항암제로 개발되었으며 계속해서 개발되고 있다. 특히, 토포이소머라제 I 억제제는 결장직장암, 위암(gastric cancer) 및 기타 암의 치료에 널리 사용된다. 문헌[Ogitani, Bioorg. Med. Chem. Lett. 26 (2016), 5069-5072] 참조. 토포이소머라제 I 억제제가 암 치료에 유용하지만, 화합물은 또한 호중구감소증 및 중증 설사를 비롯한 부작용을 나타낸다. 이러한 병든 조직에 토포이소머라제 억제제를 우선적으로 전달하면 이러한 심각한 부작용을 피할 수 있다. 따라서, 병든 조직에 대한 토포이소머라제 I 억제제의 보다 선택적인 전달이 필요하다.
본 개시내용은 특히 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00001
여기서 구성성분 변수는 본 명세서에 정의된다.
본 개시내용은 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 추가로 제공한다.
본 개시내용은 또한 치료적 유효량의 본 개시내용의 화합물을 치료를 필요로 하는 인간 또는 다른 포유동물에게 투여함으로써 질환 또는 병태 (예를 들어, 암)를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 질환 또는 병태는 산성 또는 저산소성 질환 조직을 특징으로 한다.
본 개시내용은 또한 요법에 사용하기 위한 약제의 제조에서 본 명세서에 기재된 화합물의 용도를 제공한다. 본 개시내용은 또한 요법에 사용하기 위한 본 명세서에 기재된 화합물을 제공한다.
본 개시내용은 또한 본 개시내용의 화합물 및 이들 방법에 유용한 중간체의 합성 방법을 제공한다.
도 1은 랫트에서 5 mg/kg의 화합물 11의 단일 IV 용량 후 화합물 11 및 방출된 엑사테칸의 혈장 농도의 플롯을 보여준다(데이터는 평균 ± SEM으로 표현됨).
도 2는 마우스에서 10 mg/kg의 화합물 11의 단일 IP 용량 후 종양 및 골수에서 펩티드 농도의 플롯을 보여준다(데이터는 평균 ± SEM으로 표현됨).
도 3은 4일 동안 1일 1회 투여한 2.6 및 5.2 μmoles/kg의 화합물 11 (10, 20 mg/kg 콘주게이트에 해당) 또는 유리 엑사테칸 (1.15 및 2.3 mg/kg 엑사테칸에 해당)의 투여 후 종양 보유 누드 마우스의 대퇴골로부터 총 골수 카운트의 그래프를 보여준다(데이터는 평균 ± SEM으로 표현됨).
도 4a는 4일 동안 1일 1회 투여한 비히클 또는 5.2 μmoles/kg의 화합물 11 (20 mg/kg 콘주게이트에 해당) 또는 유리 엑사테칸 (2.3 mg/kg 엑사테칸에 해당)의 투여 후에 절제된 종양 보유 누드 마우스의 위를 보여준다.
도 4b는 4일 동안 1일 1회 투여한 5.2 μmoles/kg의 화합물 11 (20 mg/kg 콘주게이트에 해당) 또는 유리 엑사테칸 (2.3 mg/kg 엑사테칸에 해당)의 투여 후에 계내(in situ)의 종양 보유 누드 마우스의 위를 보여준다.
도 5a는 HCT116 결장직장 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 유리 엑사테칸 또는 화합물 11의 등몰량을 투여함으로써 초래되는 평균 종양 부피의 플롯을 보여준다. 동물에게 3주 동안 비경구내로 주당 4회 1일 1회 투여하였다.
도 5b는 HCT116 결장직장 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 유리 엑사테칸 또는 화합물 11의 등몰량을 투여하기 위한 카플란 마이어(Kaplan Meier) 생존 곡선을 나타낸다.
도 6a는 MKN45 HER2 음성 위암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 화합물 11의 단일 제제 효능을 보여준다. 동물에게 2주 동안 비경구내로 주당 4회 1일 1회 투여하였다.
도 6b는 MKN45 HER2 음성 위암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 유리 엑사테칸 또는 화합물 11의 등몰량을 투여하기 위한 카플란 마이어(Kaplan Meier) 생존 곡선을 나타낸다.
도 7a는 JIMT-1 HER2 중간 유방암 옆구리 종양을 보유하는 SCID 마우스에서 화합물 11을 투여함으로써 초래되는 평균 종양 부피의 플롯을 보여준다. 동물에게 3주 동안 비경구내로 주당 4회 1일 1회 투여하였다.
도 7b는 화합물 11이 투여된 JIMT-1 HER2 중간 유방암 옆구리 종양을 보유하는 SCID 마우스에서 체중의 퍼센트 변화의 플롯을 보여준다.
도 8a는 화합물 11이 투여된 MDA-MB-231 삼중 음성 유방암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 평균 종양 부피의 플롯을 보여준다. 동물에게 3주 동안 비경구내로 주당 4회 1일 1회 투여하였다.
도 8b는 화합물 11이 투여된 MDA-MB-231 삼중 음성 유방암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 0일차에 대한 체중의 변화 퍼센트의 플롯을 보여준다.
도 9a는 화합물 11 및 탈라조파립이 투여된 MDA-MB-231 삼중 음성 유방암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스의 평균 종양 부피의 플롯을 보여준다. 동물에게 화합물 11을 3주 동안 비경구내로 주당 4회씩 1일 1회 투여하고 탈라조파립을 18일 동안 1일 1회 경구 투여하였다.
도 9b는 화합물 11 및 탈라조파립이 투여된 MDA-MB-231 삼중 음성 유방암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 0일차에 대한 체중의 변화 퍼센트의 플롯을 보여준다.
도 10은 16시간에 걸쳐 10 mM의 글루타티온으로 처리하여 생성된 화합물 11 및 화합물 29의 분해 그래프를 보여준다. 도 10에 도시된 바와 같이, 화합물 29는 유사한 글루아티온 노출 하에 화합물 11보다 훨씬 빠르게 방출된다.
화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 본 명세서에 제공된다:
Figure pct00002
상기 식에서:
R7은 펩티드이고;
R8은 토포이소머라제 I에 결합하는 소분자 토포이소머라제 I 표적화 모이어티이고; 그리고
Q는 모이어티 R7 및 R8에 공유결합되는 링커이다.
또한 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 본 명세서에 제공된다:
Figure pct00003
상기 식에서:
R7은 약 6.0 미만의 pH를 갖는 산성 또는 저산소성 맨틀을 갖는 세포막을 가로질러 R8Q-를 선택적으로 전달할 수 있는 펩티드이고;
R8은 토포이소머라제 I에 결합하는 소분자 토포이소머라제 I 표적화 모이어티이고; 그리고
Q는 모이어티 R7 및 R8에 공유결합되는 링커이다.
화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 본 명세서에 제공된다:
Figure pct00004
상기 식에서:
R7은 펩티드이고;
R8은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되고:
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
Figure pct00012
Figure pct00013
및
Figure pct00014
Q는 모이어티 R7 및 R8에 공유결합되는 링커이다.
화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 본 명세서에 제공된다:
Figure pct00015
상기 식에서:
R7은 펩티드이고;
R8은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되고:
Figure pct00016
Figure pct00017
Figure pct00018
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
Figure pct00022
Figure pct00023
그리고
Q는 모이어티 R7 및 R8에 공유결합되는 링커이다.
화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 본 명세서에 제공된다:
Figure pct00024
상기 식에서:
R7은 펩티드이고;
R8은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되고:
Figure pct00025
Figure pct00026
Figure pct00027
Figure pct00028
Figure pct00029
Figure pct00030
Figure pct00031
Figure pct00032
및
Figure pct00033
Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되고
Figure pct00034
Figure pct00035
Figure pct00036
Figure pct00037
Figure pct00038
R1, R2, R3 , R4, R5, R6, R9, R10, R11, 및 R12 각각은 H, C1-4 알킬, C1-4 알케닐, C6-10 아릴, C3-10 사이클로알킬, 5-10 원 헤테로아릴, 4-10 원 헤테로사이클로알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택되고, 상기 C1-4 알킬, C1-4 알케닐, C6-10 아릴, C3-10 사이클로알킬, 5-10 원 헤테로아릴, 및 4-10 원 헤테로사이클로알킬, 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R3 및 R4는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R5 및 R6은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
R13은 H 또는 C1-6 알킬이고;
A는 H 또는 C1-4 알킬이고;
Ra1, Rb1, Rc1, 및 Rd1 각각은 H, C1-6 알킬, C2-6 알케닐, C2-6 알키닐, C1-6 할로알킬, OH, CN, NO2, 및 CO2CH3으로부터 독립적으로 선택되고; 상기 C1-6 알킬 및 C2-6 알케닐 각각은 OH, CN, NO2, 또는 CO2CH3으로 선택적으로 치환되고;
Figure pct00039
은 C6-10 아릴 또는 5-10 원 헤테로아릴이고; 상기 5-10 원 헤테로아릴은 적어도 하나의 고리 형성 탄소 원자 및 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 고리 형성 헤테로원자를 가지며;
고리 G는 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기이고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
[N, O, S]은 NH, O, 또는 S이고;
[N, O]은 NH 또는 O이고;
[C, N, O]은 CRXRY, NH, 또는 O이고; 그리고
각각의 RX 및 RY는 H 및 C1-4 알킬로부터 독립적으로 선택된다.
화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 본 명세서에 제공된다:
Figure pct00040
상기 식에서:
R7은 펩티드이고;
R8은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되고:
Figure pct00041
Figure pct00042
Figure pct00043
Figure pct00044
Figure pct00045
Figure pct00046
Figure pct00047
Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되고
Figure pct00048
Figure pct00049
Figure pct00050
Figure pct00051
Figure pct00052
및
Figure pct00053
R1, R2, R3 , R4, R5, R6, R9, R10, R11, 및 R12 각각은 H, C1-4 알킬, C1-4 알케닐, C6-10 아릴, 5-10 원 헤테로아릴, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택되고, 상기 C1-4 알킬, C1-4 알케닐, C6-10 아릴, 및 5-10 원 헤테로아릴 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하고;
또는 R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하고;
또는 R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하고;
또는 R3 및 R4는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하고;
또는 R5 및 R6은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하고;
R13은 H 또는 C1-6 알킬이고;
A는 H 또는 C1-4 알킬이고;
Ra1, Rb1, Rc1, 및 Rd1 각각은 H, C1-6 알킬, C2-6 알케닐, C2-6 알키닐, C1-6 할로알킬, OH, CN, NO2, 및 CO2CH3으로부터 독립적으로 선택되고, 상기 C1-6 알킬 및 C2-6 알케닐 각각은 OH, CN, NO2, 또는 CO2CH로 선택적으로 치환되고;
Figure pct00054
은 C6-10 아릴 또는 5-10 원 헤테로아릴이고; 상기 5-10 원 헤테로아릴은 적어도 하나의 고리 형성 탄소 원자 및 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 고리 형성 헤테로원자를 가지며;
[N, O, S]은 NH, O, 또는 S이고;
[N, O]은 NH 또는 O이고;
[C, N, O]은 CRXRY, NH, 또는 O이고; 그리고
각각의 RX 및 RY는 H 및 C1-4 알킬로부터 독립적으로 선택된다.
일부 구현예에서, Q의 좌측은 R8에 부착되고 Q의 우측은 R7에 부착된다.
일부 구현예에서, Q의 이황화물 모이어티의 황 원자는 R7의 시스테인 잔기의 일부이다.
본 명세서에 사용된 "펩티드"는 자연 발생 아미노산 잔기 및 선택적으로 하나 이상의 비자연 발생 아미노산으로 구성된 10-50개 아미노산 서열을 포함하는 표적화 모이어티를 지칭한다. 일부 구현예에서, R7의 펩티드는 20 내지 40개, 20 내지 30개 아미노산, 또는 30 내지 40개 잔기의 펩티드이다. 본 발명의 화합물에 사용하기에 적합한 펩티드는 환경적 pH 변화에 반응하여 형태적 변화 또는 이차 구조의 변화를 통해 세포막을 가로질러 삽입될 수 있는 것이다. 이러한 방식으로, 펩타이드는 산성 조직을 표적으로 하고 낮은 세포외 pH에 반응하여 세포막을 가로질러 극성, 세포 불투과성 분자를 선택적으로 전위할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드는 약 6.0 미만의 pH를 갖는 산성 또는 저산소성 맨틀을 갖는 세포막을 가로질러 접합된 모이어티 (예를 들어, R8Q-)를 선택적으로 전달할 수 있는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드는 약 6.5 미만의 pH를 갖는 산성 또는 저산소성 맨틀을 갖는 세포막을 가로질러 접합된 모이어티 (예를 들어, R8Q-)를 선택적으로 전달할 수 있는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드는 약 5.5 미만의 pH를 갖는 산성 또는 저산소성 맨틀을 갖는 세포막을 가로질러 접합된 모이어티 (예를 들어, R8Q-)를 선택적으로 전달할 수 있는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드는 약 5.0 내지약 6.0의 pH를 갖는 산성 또는 저산소성 맨틀을 갖는 세포막을 가로질러 접합된 모이어티 (예를 들어, R8Q-)를 선택적으로 전달할 수 있는 펩티드이다.
특정 구현예에서, R7의 펩티드는 세포막을 가로질러 전달될 페이로드 부분(예를 들어, R8Q-)에 대한 부착 부위를 형성할 수 있는 시스테인 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, R7은 R7의 시스테인 잔기를 통해 Q에 부착된다. 일부 구현예에서, 시스테인 잔기의 황 원자는 이황화물 결합 함유 링커 Q의 이황화물 결합의 일부를 형성할 수 있다.
pH에 기초하여 형태적으로 변화하고 세포막을 가로질러 삽입될 수 있는 적합한 펩티드는 예를 들어 미국 특허 제8,076,451호 및 제9,289,508호(이들 각각은 전문이 본원에 참고로 포함됨)에 기재되어 있다. 다른 적합한 펩티드는 예를 들어, 문헌[Weerakkody, 등, PNAS 110(15), 5834-5839(2013년 4월 9일)]에 기재되어 있으며, 이는 또한 전문이 참고로 본 명세서에 포함된다.
일부 구현예에서, R7은 다음의 서열:
ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWCG (서열번호 1; Pv1),
AEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADECG (서열번호 2; Pv2), 및
ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWDADECG (서열번호 3; Pv3);
Ac-AAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTKCG (서열번호 4; Pv4); 및
AAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTC (서열번호 5; Pv5) 중 적어도 하나를 포함하는 펩티드이고;
R7은 R7의 시스테인 잔기를 통해 Q에 부착된다.
일부 구현예에서, R7은 다음의 서열:
ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWCG (서열번호 1; Pv1),
AEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADECG (서열번호 2; Pv2), 및
ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWDADECG (서열번호 3; Pv3) 중 적어도 하나를 포함하는 펩티드이고,
R7은 R7의 시스테인 잔기를 통해 Q에 부착된다.
일부 구현예에서, R7은 서열 ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWCG (서열번호 1; Pv1)를 포함하는 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 서열 AEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADECG (서열번호 2; Pv2)를 포함하는 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 서열 ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWDADECG (서열번호 3; Pv3)를 포함하는 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 서열 Ac-AAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTKCG (서열번호 4; Pv4)를 포함하는 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 서열 AAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTC (서열번호 5; Pv5)를 포함하는 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 서열 ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWCG (서열번호 1; Pv1)를 포함하는 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 서열 AEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADECG (서열번호 2; Pv2)로 이루어진 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 서열 ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWDADECG (서열번호 3; Pv3)로 이루어진 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 서열 Ac-AAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTKCG (서열번호 4; Pv4)로 이루어진 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 서열 AAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTC (서열번호 5; Pv5)로 이루어진 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 표 1에 나타낸 서열번호: 6 내지 서열번호: 311로부터 선택된 적어도 하나의 서열을 포함하는 펩티드이다.
일부 구현예에서, R7은 표 1에 나타낸 서열번호: 6 내지 서열번호: 311로부터 선택된 서열로 이루어진 펩티드이다.
Figure pct00055
Figure pct00056
Figure pct00057
Figure pct00058
Figure pct00059
Figure pct00060
Figure pct00061
Figure pct00062
Figure pct00063
Figure pct00064
Figure pct00065
Figure pct00066
본 발명에 유용한 인용된 임의의 펩티드는 비-시스테인 잔기를 시스테인으로 대체하거나 시스테인 잔기를 N-말단 또는 C-말단에 부가함으로써 시스테인 잔기를 포함하도록 변형될 수 있다.
일부 구현예에서, R7의 펩티드는 형태적으로 제한된 펩티드이다. 형태적으로 제한된 펩티드는 예를 들어 거대환형 펩티드 및 스테이플드 펩티드를 포함할 수 있다. 스테이플드 펩티드는 펩티드 거대환을 형성하는 2개의 아미노산 측쇄 사이의 공유 결합에 의해 구속된 펩티드이다. 형태적으로 제한된 펩티드는 예를 들어 문헌[Guerlavais 등, Annual Reports in Medicinal Chemistry 2014, 49, 331-345; Chang 등, Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America　(2013),　110(36),　E3445-E3454; Tesauro 등, Molecules 2019, 24, 351-377; Dougherty 등, Journal of Medicinal Chemistry (2019), 62(22), 10098-10107; 및 Dougherty 등, Chemical Reviews (2019), 119(17), 10241-10287]에 기재되어 있으며, 이들 각각은 그 전체가 본원에 참고로 포함된다.
용어 "소분자 토포이소머라제 I 표적화 모이어티" 또는 "토포이소머라제 I 억제제"는 토포이소머라제 I에 결합하는 화학 기를 지칭한다. 소분자 토포이소머라제 I 표적화 모이어티는 토포이소머라제 I의 활성을 억제하는 화합물로부터 유래된 기일 수 있다. 토포이소머라제 억제제는 캄프토테신 및 이의 유도체 및 유사체, 예를 들어 오포테칸, 이리노테칸 (CPT-11), 실라테칸 (DB-67, AR-67), 코시테칸 (BNP-1350), 루르토테칸, 지마테칸 (ST1481), 벨로테칸 (CKD-602), 루비테칸, 토포테칸, 데룩스테칸, 및 엑사테칸을 포함한다. 토포이소머라제 억제제는 예를 들어 문헌[Ogitani, Bioorg. Med. Chem. Lett. 26 (2016), 5069-5072; Kumazawa, E., Cancer Chemother Pharmacol 1998, 42: 210-220; Tahara, M, Mol Cancer Ther 2014, 13(5): 1170-1180; Nakada, T., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2016, 26: 1542-1545]에 기재되어 있다.
모이어티 Q는 펩타이드, 및 그 접합체 또는 일부가 세포 내부에 있을 때 절단될 수 있는 토포이소머라제 I 억제제 사이의 테더 역할을 하는 R7과 R8을 공유적으로 연결하는 연결 기이다. 일부 구현예에서, Q는 1 내지 10개의 Rq 치환기로 선택적으로 치환되는 1 내지 40, 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 또는 1 내지 5개 사슬 원자의 사슬이고, 여기서 Q의 하나 이상의 사슬 탄소 원자는 산화되어 카보닐(C=O)을 형성할 수 있고, 여기서 하나 이상의 N 및 S 사슬 원자는 각각 선택적으로 산화되어 아민 옥사이드, 설폭사이드 또는 설포닐 기를 형성할 수 있고; 여기서
각각의 Rq은 OH, CN, -COOH, NH2, 할로, C1-6 할로알킬, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, C1-6 알킬티오, 페닐, 5-6 원 헤테로아릴, 4-6 원 헤테로사이클로알킬, C3-6 사이클로알킬, NH(C1-6 알킬) 및 N(C1-6 알킬)2로부터 독립적으로 선택되고, 상기 Rq의 C1-6 알킬, 페닐, C3-6 사이클로알킬, 4-6 원 헤테로사이클로알킬, 및 5-6 원 헤테로아릴은 각각 할로, OH, CN, -COOH, NH2, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, 페닐, C3-10 사이클로알킬, 5- 또는 6-원 헤테로아릴 또는 4-6 원 헤테로사이클로알킬로 선택적으로 치환되고; 그리고
2개의 Rq 기는 이들이 부착된 사슬 원자와 함께 페닐, 5-6 원 헤테로아릴, 4-6 원 헤테로사이클로알킬, 또는 C3-6 사이클로알킬 고리를 형성할 수 있다.
일부 구현예에서, Rq은 OH, CN, -COOH, NH2, 할로, C1-6 할로알킬, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, NH(C1-6 알킬) 및 N(C1-6 알킬)2로부터 독립적으로 선택된다.
일부 구현예에서, Q는 다음으로부터 선택된다:
Figure pct00067
Figure pct00068
Figure pct00069
Figure pct00070
Figure pct00071
및
Figure pct00072
.
일부 구현예에서, Q는 다음이다:
Figure pct00073
일부 구현예에서, Q는 다음이다:
Figure pct00074
.
일부 구현예에서, Q는 다음이다:
Figure pct00075
일부 구현예에서, Q는 다음이다:
Figure pct00076
일부 구현예에서, Q는 다음이다:
Figure pct00077
일부 구현예에서:
R1, R2, R3 , 및 R4 각각은 H 및 C1-4 알킬, 할로, CN, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택되고, 상기 C1-4 알킬은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-10 사이클로알킬 기 또는 4-10 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-10 사이클로알킬 기 또는 4-10 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R1 및 R4는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-10 사이클로알킬 기 또는 4-10 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-10 사이클로알킬 기 또는 4-10 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R2 및 R4는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-10 사이클로알킬 기 또는 4-10 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R3 및 R4는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-10 사이클로알킬 기 또는 4-10 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된다.
일부 구현예에서:
R1, R2, R3 , 및 R4 각각은 H 및 C1-4 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
또는 R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-10 사이클로알킬 기 또는 4-10 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-10 사이클로알킬 기 또는 4-10 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
또는 R3 및 R4는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-10 사이클로알킬 기 또는 4-10 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된다.
일부 구현예에서, R1 및 R2 각각은 H 및 메틸로부터 독립적으로 선택되고, 그리고 R3 , R4, R5, 및 R6 각각은 수소이다.
일부 구현예에서, R1, R2, R3, 및 R4 각각은 H 및 메틸로부터 독립적으로 선택되고, 그리고 R5, 및 R6 각각은 수소이다.
일부 구현예에서, R1 및 R2 각각은 H 및 메틸로부터 독립적으로 선택된다.
일부 구현예에서, R3 및 R4 각각은 H 및 메틸로부터 독립적으로 선택된다.
일부 구현예에서, R1 및 R2 각각은 H이다.
일부 구현예에서, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성한다.
일부 구현예에서, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-7 사이클로알킬 기를 형성한다.
일부 구현예에서, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로부틸 기를 형성한다.
일부 구현예에서, R3 및 R4 각각은 H이다.
일부 구현예에서, R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성한다.
일부 구현예에서, R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 1,2,3,4-테트라하이드로나프틸, 테트라하이드로푸라닐, 또는 테트라하이드로피라닐을 형성한다.
일부 구현예에서, R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-7 사이클로알킬 기를 형성한다.
일부 구현예에서, R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로헥실 기를 형성한다.
일부 구현예에서, R2 및 R4 각각은 H이다.
일부 구현예에서, R5 및 R6 각각은 H이다.
일부 구현예에서, R9, R10, R11, 및 R12 각각은 H 및 메틸로부터 독립적으로 선택된다.
일부 구현예에서, 본 발명의 화합물은 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이다:
Figure pct00078
상기 식에서:
R7은 펩티드이고;
R8은 토포이소머라제 I 억제제이고;
고리 Z는 모노사이클릭 C5-7 사이클로알킬 고리 또는 모노사이클릭 5-7 원 헤테로사이클로알킬 고리이고;
각각의 RZ는 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택되고;
또는 2개의 인접한 RZ는 이들이 부착된 원자에 함께 융합된 모노사이클릭 C5-7 사이클로알킬 고리, 융합된 모노사이클릭 5-7 원 헤테로사이클로알킬 고리, 융합된 C6-10 아릴 고리, 또는 융합된 6-10 원 헤테로아릴 고리를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
Ra1, Rb1, Rc1, 및 Rd1 각각은 H, C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐로부터 독립적으로 선택되고, 이들 각각은 할로, OH, CN, 및 NO2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고; 그리고
n은 0, 1, 2, 또는 3이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, R7은 서열번호: 1, 서열번호:2, 서열번호:3, 서열번호:4, 또는 서열번호:5의 서열을 포함하는 펩티드이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, R7은 Pv1, Pv2, Pv3, Pv4, 또는 Pv5이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, R7은 R7의 시스테인 잔기를 통해 코어에 부착되고, 식 II 내의 이황화물 모이어티의 황 원자 중 하나는 시스테인 잔기로부터 유래된다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, R8은 캄프토테신, 오포테칸, 이리노테칸 (CPT-11), 실라테칸 (DB-67, AR-67), 코시테칸 (BNP-1350), 루르토테칸, 지마테칸 (ST1481), 벨로테칸 (CKD-602), 루비테칸, 토포테칸, 데룩스테칸, 또는 엑사테칸이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, R8은 엑사테칸이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, R8은 N 원자를 통해 코어에 부착된다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, 고리 Z는 모노사이클릭 C5-7 사이클로알킬 고리이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, 고리 Z는 사이클로펜틸 고리이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, 고리 Z는 사이클로헥실 고리이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, 고리 Z는 사이클로헵틸 고리이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, 고리 Z는 모노사이클릭 5-7 원 헤테로사이클로알킬 고리이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, 고리 Z는 5-원 헤테로사이클로알킬 고리이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, 고리 Z는 6-원 헤테로사이클로알킬 고리이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, 고리 Z는 7-원 헤테로사이클로알킬 고리이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, 2개의 인접한 RZ는 이들이 부착된 원자에 함께 융합된 모노사이클릭 C5-7 사이클로알킬 고리, 융합된 모노사이클릭 5-7 원 헤테로사이클로알킬 고리, 융합된 C6-10 아릴 고리, 또는 융합된 6-10 원 헤테로아릴 고리를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, n은 0이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, n은 1이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, n은 2이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, n은 3이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 화합물은 화학식 (III), 화학식 (IV), 또는 화학식 (V)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이다:
Figure pct00079
R7, R8, RZ 및 n은 식 (II)에 대해 상기의 구현예 중 임의의 것에서와 같이 정의된다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 다음으로부터 선택된다:
Figure pct00080
Figure pct00081
Figure pct00082
Figure pct00083
및
Figure pct00084
또는 임의의 전술한 것의 약제학적으로 허용 가능한 염.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 다음으로부터 선택된다:
Figure pct00085
Figure pct00086
Figure pct00087
Figure pct00088
Figure pct00089
Figure pct00090
Figure pct00091
및
Figure pct00092
일부 구현예에서, 식 (IIA)을 갖는 화합물 또는 이의 염이 본 명세서에 제공된다:
Figure pct00093
상기 식에서:
Cy1은 C6-10 아릴 또는 5-10 원 헤테로아릴이고; 상기 5-10 원 헤테로아릴은 적어도 하나의 고리 형성 탄소 원자 및 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 고리 형성 헤테로원자를 가지며; 그리고 상기 C6-10 아릴 및 5-10 원 헤테로아릴 각각은 C1-4 알킬, 할로, OH, C1-6 알콕시, CN, 및 NO2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
그리고 R8, 고리 Z, RZ, 및 n은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.
일부 구현예에서, Cy1은 5-10 원 헤테로아릴이다. 일부 구현예에서, Cy1은 피리디닐이다. 일부 구현예에서, Cy1은 페닐이다.
일부 구현예에서, 화학식 (IIA)의 화합물은 다음의 구조를 갖는다:
Figure pct00094
또는 그의 염.
일부 구현예에서, 화학식 (IIA)의 화합물:
Figure pct00095
또는 그의 염이 본 명세서에 제공되고, 이는 본 발명의 화합물 (예를 들어, 화학식 (I)의 화합물 또는 식 (II))을 제조하는데 사용하기 위한 것이고, Cy1, R8, 고리 Z, RZ, Ra1, Rb1, Rc1, Rd1, 및 n은 본 명세서에서 정의된 바와 같다.
일부 구현예에서, 다음의 구조를 갖는 화합물:
Figure pct00096
또는 그의 염이 본 명세서에 제공되고, 이는 본 발명의 화합물 (예를 들어, 화학식 (I)의 화합물 또는 식 (II))의 제조에 사용하기 위한 것이다.
본 발명의 분자는 예를 들어 형광단, 방사성 동위원소 등과 같은 프로브로 태깅화될 수 있다. 일부 구현예에서, 프로브는 형광 프로브, 예컨대 LICOR이다. 형광 프로브는광 여기(예를 들어, 형광단) 시 빛을 재방출할 수 있는 임의의 부분을 포함할 수 있다.
아미노산은 다음과 같이 IUPAC 약어로 제시된다: 알라닌 (Ala; A), 아르기닌 (Arg; R), 아스파라긴 (Asn; N), 아스파르트산 (Asp; D), 시스테인 (Cys; C), 글루타민 (Gln; Q), 글루탐산 (Glu; E), 글리신 (Gly; G), 히스티딘 (His; H), 이소류신 (Ile; I), 류신 (Leu; L), 라이신 (Lys; K), 메티오닌 (Met; M), 페닐알라닌 (Phe; F), 프롤린 (Pro; P), 세린 (Ser; S), 트레오닌 (Thr; T), 트립토판 (Trp; W), 티로신 (Tyr; Y), 발린 (Val; V).
용어 "Pv1"은 ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWCG (서열번호:1)를 의미한다.
용어 "Pv2"는 AEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADECG (서열번호:2)를 의미한다.
용어 "Pv3"은 ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWDADECG (서열번호:3)를 의미한다.
용어 "Pv4"는 AcAAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTKCG (서열번호:4)를 의미한다.
용어 "Pv5"는 AAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTC (서열번호:5)를 의미한다.
본 발명의 화합물에서, 펩티드 R7은 시스테인 잔기와 같은 황 원자를 포함하는 아미노산 잔기에 의해 링커 Q 내의 이황화물 모이어티에 부착된다. 전형적으로, 펩티드 R7에 대한 부착점인 링커 Q의 이황화물 모이어티의 황 원자는 펩티드의 아미노산 잔기, 예를 들어 시스테인 잔기로부터 유래된다.
용어 "산성 및/또는 저산소성 맨틀"은 7.0 미만, 바람직하게는 6.5 미만의 pH를 갖는 문제의 병든 조직에서 세포의 환경을 지칭한다. 산성 또는 저산소 맨틀은 보다 바람직하게는 약 5.5의 pH를 가지며 가장 바람직하게는 약 5.0의 pH를 갖는다. 화학식 (I)의 화합물은 pH 의존적 방식으로 산성 및/또는 저산소 맨틀을 갖는 세포막을 가로질러 삽입하여 R8Q를 세포 내로 삽입하고, 이에 따라 이황화물 링커가 절단되어 유리 R8H를 전달한다. 화학식 (I)의 화합물은 pH 의존적이기 때문에, 세포를 둘러싸고 있는 산성 또는 저산소 맨틀의 존재 하에서만 세포막을 가로질러 우선적으로 삽입되고, 산성 또는 저산소성 맨틀을 갖는 "정상" 세포의 세포막을 가로질러 삽입되지는 않는다. 산성 또는 저산소 맨틀을 갖는 세포의 예는 암 세포이다.
펩티드 R7 또는 세포막을 통한 본 발명의 화합물의 삽입 방식 또는 펩티드 R7을 지칭하기 위해 본 명세서에 사용된 용어 "pH-민감성" 또는 "pH-의존성"은, 펩티드가 중성 pH에서 막 지질 이중층보다 산성 또는 저산소 맨틀을 갖는 세포막 지질 이중층에 대한 더 높은 친화도를 갖는다는 것을 의미한다. 따라서, 본 발명의 화합물은 세포막 지질 이중층이 산성 또는 저산소성 맨틀("병든" 세포)을 가질 때 세포막을 통해 우선적으로 삽입하여 R8Q를 세포 내부로 삽입하고(따라서 상기 기재된 바와 같이 R8H를 전달함), 그러나 맨틀(세포막 지질 이중층의 환경)이 산성 또는 저산소 상태가 아닌 경우("정상" 세포), 세포막을 통해 삽입되지 않는다. 이러한 우선적 삽입은 펩타이드 R7이 나선 배열을 형성하여 막 삽입을 용이하게 함으로써 달성되는 것으로 여겨진다.
명료함을 위해, 별도의 구현예의 맥락에서 기재된 본 발명의 특정 특징은 단일 구현예에서 조합하여 제공될 수도 있음이 추가로 인정된다(구현예는 다중 의존적 형태로 작성된 것처럼 조합되도록 의도됨). 역으로, 간결함을 위해, 단일 구현예의 맥락에서 기재된 본 발명의 다양한 특징은 또한 별도로 또는 임의의 적절한 하위 조합으로 제공될 수 있다. 따라서, 화학식 (I)의 화합물의 구현예로서 기재된 특징이 임의의 적합한 조합으로 조합될 수 있는 것으로 고려된다.
본 명세서의 다양한 위치에서, 화합물의 특정 특징은 그룹 또는 범위로 개시되어 있다. 이러한 개시는 그러한 그룹 및 범위의 구성원의 각각의 모든 개별 하위 조합을 포함하는 것으로 구체적으로 의도된다. 예를 들어, 용어 "C1-6 알킬"은 구체적으로 메틸, 에틸, C3 알킬, C4 알킬, C5 알킬 및 C6 알킬을 개별적으로 개시하도록 의도된다(제한 없이).
용어 "n-원"(여기서 n은 정수임)은 일반적으로 고리 형성 원자의 수가 n인 모이어티에서 고리 형성 원자의 수를 나타낸다. 예를 들어, 피페리디닐은 6-원 헤테로사이클로알킬 고리의 예이고, 피라졸릴은 5-원 헤테로아릴 고리의 예이며, 피리딜은 6-원 헤테로아릴 고리의 예이고, 그리고 1,2,3,4-테트라하이드로-나프탈렌은 10-원 사이클로알킬 기의 예이다.
본 명세서의 다양한 위치에서, 2가 연결기를 정의하는 변수가 기술될 수 있다. 각각의 연결 치환기는 연결 치환기의 전방 및 후방 형태 둘 다를 포함하는 것으로 구체적으로 의도된다. 예를 들어, -NR(CR'R'')n-은 -NR(CR'R'')n- 및 -(CR'R'')nNR-을 모두 포함하며 각 형태를 개별적으로 개시하기 위한 것이다. 구조에 연결 기이 필요한 경우, 해당 그룹에 대해 열거된 마쿠쉬(Markush) 변수는 연결 기로 이해된다. 예를 들어, 구조가 연결 기를 필요로 하고 해당 변수에 대한 마쿠쉬 그룹 정의가 "알킬" 또는 "아릴"을 열거하면 "알킬" 또는 "아릴"이 각각 연결 알킬렌 기 또는 아릴렌 기를 나타내는 것으로 이해된다.
용어 "치환된"은 원자 또는 원자 기가 다른 기에 부착된 "치환기"로서 수소를 공식적으로 대체함을 의미한다. 달리 명시되지 않는 한, 용어 "치환된"은 임의의 수준의 치환, 예를 들어 일치환, 이치환, 삼치환, 사치환 또는 오치환을 의미하며, 이러한 치환이 허용된다. 치환기는 독립적으로 선택되고, 치환은 화학적으로 접근가능한 임의의 위치에 있을 수 있다. 주어진 원자에서의 치환은 원자가에 의해 제한된다는 것을 이해해야 한다. 주어진 원자에서의 치환은 화학적으로 안정한 분자를 생성한다는 것을 이해해야 한다. 문구 "임의로 치환된"은 비치환 또는 치환을 의미한다. 용어 "치환된"은 수소 원자가 제거되고 치환기로 대체됨을 의미한다. 단일 2가 치환기, 예를 들어 옥소는 2개의 수소 원자를 대체할 수 있다.
용어 "Cn-m"은 종점을 포함하는 범위를 나타내며, 여기서 n 및 m은 정수이고 탄소수를 나타낸다. 예는 C1-4, C1-6 등을 포함한다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "알킬"은 직쇄 또는 분지형일 수 있는 포화 탄화수소 기를 지칭한다. 용어 "Cn-m 알킬"은 n 내지 m개의 탄소 원자를 갖는 알킬 기를 지칭한다. 알킬 기는 공식적으로 하나의 C-H 결합이 화합물의 나머지 부분에 대한 알킬 기의 부착점으로 대체된 알칸에 해당한다. 일부 구현예에서, 알킬 기는 1 내지 6개의 탄소 원자, 1 내지 4개의 탄소 원자, 1 내지 3개의 탄소 원자, 또는 1 내지 2개의 탄소 원자를 함유한다. 알킬 모이어티의 예는 화학 기 예컨대 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, 이소부틸, sec-부틸; 고급 동족체 예컨대 2-메틸-1-부틸, n-펜틸, 3-펜틸, n-헥실, 1,2,2-트리메틸프로필 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "알케닐"은 하나 이상의 이중 탄소-탄소 결합을 갖는 알킬 기에 해당하는 직쇄 또는 분지형 탄화수소 기를 의미한다. 알케닐 기는 공식적으로 하나의 C-H 결합이 화합물의 나머지 부분에 대한 알케닐 기의 부착점으로 대체된 알켄에 해당한다. 용어 "Cn-m 알케닐"은 n 내지 m개의 탄소를 갖는 알케닐 기를 지칭한다. 일부 구현예에서, 알케닐 모이어티는 2 내지 6, 2 내지 4, 또는 2 내지 3개의 탄소 원자를 함유한다. 알케닐 기의 예는 에테닐, n-프로페닐, 이소프로페닐, n-부테닐, sec-부테닐 등을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "알키닐"은 하나 이상의 삼중 탄소-탄소 결합을 갖는 알킬 기에 해당하는 직쇄 또는 분지형 탄화수소 기를 의미한다. 알키닐 기는 공식적으로 하나의 C-H 결합이 화합물의 나머지 부분에 대한 알킬 기의 부착점으로 대체된 알킨에 해당한다. 용어 "Cn-m 알키닐"은 n 내지 m개의 탄소를 갖는 알키닐 기를 지칭한다. 알키닐 기의 예는 에티닐, 프로핀-1-일, 프로핀-2-일 등을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 일부 구현예에서, 알키닐 모이어티는 2 내지 6, 2 내지 4, 또는 2 내지 3개의 탄소 원자를 함유한다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "알킬렌"은 2가 알킬 연결기를 지칭한다. 알킬렌 기는 공식적으로 2개의 C-H 결합이 화합물의 나머지 부분에 대한 알킬렌 기의 부착점으로 대체된 알칸에 해당한다. 용어 "Cn-m 알킬렌"은 n 내지 m개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌 기를 지칭한다. 알킬렌 기의 예는 에탄-1,2-디일, 에탄-1,1-디일, 프로판-1,3-디일, 프로판-1,2-디일, 프로판-1,1-디일, 부탄-1,4-디일, 부탄-1,3-디일, 부탄-1,2-디일, 2-메틸-프로판-1,3-디일 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
용어 "아미노"는 화학식 -NH2의 기를 지칭한다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "카보닐"은 -C(=O)- 기를 지칭하며, 이는 C(O)로도 표기될 수 있다.
용어 "시아노" 또는 "니트릴"은 화학식 -C≡N의 기를 지칭하며, 이는 -CN으로도 표기할 수 있다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "할로" 또는 "할로겐"은 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도를 지칭한다. 일부 구현예에서, "할로"는 F, Cl, 또는 Br로부터 선택된 할로겐 원자를 지칭한다. 일부 구현예에서, 할로 기는 F이다.
본 명세서에 사용된 용어 "할로알킬"은 하나 이상의 수소 원자가 할로겐 원자로 대체된 알킬 기를 지칭한다. 용어 "Cn-m 할로알킬"은 n 내지 m개의 탄소 원자 및 적어도 이상 내지 최대 {2(n 내지 m)+1}개의 할로겐 원자를 갖는 Cn-m 알킬 기를 지칭내며, 이는 동일하거나 상이할 수 있다. 일부 구현예에서, 할로겐 원자는 플루오로 원자이다. 일부 구현예에서, 할로알킬 기는 1 내지 6 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 갖는다. 할로알킬 기의 예는 CF3, C2F5, CHF2, CH2F, CCl3, CHCl2, C2Cl5 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 할로알킬 기는 플루오로알킬 기이다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용된 용어 "할로알콕시"는 화학식 -O-할로알킬의 기를 지칭하며, 여기서 할로알킬 기는 상기 정의된 바와 같다. 용어 "Cn-m 할로알콕시"는 n 내지 m개의 탄소를 갖는 할로알킬 기를 갖는 할로알콕시 기를 지칭한다. 할로알콕시 기의 예는 트리플루오로메톡시 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 할로알콕시 기는 1 내지 6, 1 내지 4, 또는 1 내지 3개의 탄소 원자를 갖는다.
용어 "옥소"는 탄소에 부착될 때 카보닐 기를 형성하거나, 헤테로원자에 부착되어 설폭사이드 또는 설폰 기, 또는 N-산화물 기를 형성하는 2가 치환기로서의 산소 원자를 지칭한다. 일부 구현예에서, 헤테로사이클릭 기는 1 또는 2개의 옥소(=O) 치환기로 선택적으로 치환될 수 있다.
고리 형성 N 원자와 관련하여 용어 "산화된"은 고리 형성 N-산화물을 지칭한다.
고리 형성 S 원자와 관련하여 용어 "산화된"은 고리 형성 설포닐 또는 고리 형성 설피닐을 지칭한다.
"방향족"이라는 용어는 방향족성(즉, (4n + 2)개의 비편재화된 π(pi) 전자를 가짐, 여기서 n은 정수임)을 갖는 하나 이상의 다중불포화 고리를 갖는 카보사이클 또는 헤테로사이클을 지칭한다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "아릴"은 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭(예를 들어, 2개의 융합 고리를 가짐)일 수 있는 방향족 탄화수소 기를 지칭한다. 용어 "Cn-m 아릴"은 n 내지 m개의 고리 탄소 원자를 갖는 아릴 기를 지칭한다. 아릴 기는 예를 들어 페닐, 나프틸 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 아릴 기는 6 내지 약 10개의 탄소 원자를 갖는다. 일부 구현예에서 아릴 기는 6개의 탄소 원자를 갖는다. 일부 구현예에서 아릴 기는 10개의 탄소 원자를 갖는다. 일부 구현예에서, 아릴 기는 페닐이다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "헤테로아릴" 또는 "헤테로방향족"은 황, 산소 및 질소로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자 고리 구성원을 갖는 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 방향족 헤테로사이클을 지칭한다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴 고리는 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자 고리 구성원을 갖는다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴 모이어티에서 임의의 고리 형성 N은 N-산화물일 수 있다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴은 탄소 원자를 포함하는 5 내지 14개의 고리 원자 및 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자 고리 구성원을 갖는다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴은 탄소 원자를 포함하는 5 내지 10개의 고리 원자 및 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자 고리 구성원을 갖는다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴은 5 내지 6개의 고리 원자 및 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자 고리 구성원을 갖는다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴은 5-원 또는 6-원 헤테로아릴 고리이다. 다른 구현예에서, 헤테로아릴은 8-원, 9-원 또는 10-원 융합된 바이사이클릭 헤테로아릴 고리이다.
5-원 헤테로아릴 고리는 5개의 고리 원자를 갖는 헤테로아릴 기이고, 여기서 1개 이상(예를 들어, 1, 2 또는 3개)의 고리 원자는 N, O 및 S로부터 독립적으로 선택된다.
6-원 헤테로아릴 고리는 6개의 고리 원자를 갖는 헤테로아릴 기이고, 여기서 1개 이상(예를 들어, 1, 2 또는 3개)의 고리 원자는 N, O 및 S로부터 독립적으로 선택된다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "사이클로알킬"은 고리화된 알킬 및 알케닐 기를 포함하는 비방향족 탄화수소 고리계(모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 폴리사이클릭)을 지칭한다. 용어 "Cn-m 사이클로알킬"은 n 내지 m개의 고리 구성원 탄소 원자를 갖는 사이클로알킬을 지칭한다. 사이클로알킬 기는 모노- 또는 폴리사이클릭(예를 들어, 2, 3 또는 4개의 융합된 고리를 가짐) 기 및 스피로사이클을 포함할 수 있다. 사이클로알킬 기는 3, 4, 5, 6 또는 7개의 고리 형성 탄소(C3-7)를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 사이클로알킬 기는 3 내지 6개의 고리 구성원, 3 내지 5개의 고리 구성원, 또는 3 내지 4개의 고리 구성원을 갖는다. 일부 구현예에서, 사이클로알킬은 모노사이클릭이다. 일부 구현예에서, 사이클로알킬 기는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭이다. 일부 구현예에서, 사이클로알킬 기는 C3-6 모노사이클릭 사이클로알킬 기이다. 사이클로알킬 기의 고리 형성 탄소 원자는 선택적으로 산화되어 옥소 또는 설피도 기를 형성할 수 있다. 사이클로알킬 기는 또한 사이클로알킬리덴을 포함한다. 일부 구현예에서, 사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실이다. 또한 사이클로알킬의 정의에는 사이클로알킬 고리에 융합된(즉, 공통 결합을 갖는) 하나 이상의 방향족 고리를 갖는 모이어티, 예를 들어 사이클로펜탄, 사이클로헥산 등의 벤조 또는 티에닐 유도체가 포함된다. 융합된 방향족 고리를 함유하는 사이클로알킬 기는 융합된 방향족 고리의 고리 형성 원자를 포함하는 임의의 고리 형성 원자를 통해 부착될 수 있다. 사이클로알킬 기의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 사이클로펜테닐, 사이클로헥세닐, 사이클로헥사디에닐 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 사이클로알킬 기는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 또는 사이클로헥실이다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "헤테로사이클로알킬"은 질소, 황, 산소 및 인으로부터 독립적으로 선택된 적어도 하나의 헤테로원자 고리 구성원을 가지며 4-10 고리 구성원, 4-7 고리 구성원, 또는 4-6 고리 구성원을 갖는 고리 구조의 일부로서 하나 이상의 알케닐렌 기를 함유하는 비-방향족 고리 또는 고리계를 지칭한다. 용어 "헤테로사이클로알킬"에는 모노사이클릭 4-, 5-, 6- 및 7-원 헤테로사이클로알킬 기가 포함된다. 헤테로사이클로알킬 기는 모노- 또는 바이사이클릭(예를 들어, 2개의 융합되거나 브릿징된 고리를 가짐) 또는 스피로사이클릭 고리계을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 헤테로사이클로알킬 기는 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 갖는 모노사이클릭 기이다. 고리 형성 탄소 원자 및 헤테로사이클로알킬 기의 헤테로원자는 선택적으로 산화되어 옥소 또는 설피도 기 또는 기타 산화된 연결(예를 들어, C(O), S(O), C(S) 또는 S(O)2, N-산화물 등) 또는 질소 원자는 사원화될 수 있다. 헤테로사이클로알킬 기는 고리 형성 탄소 원자 또는 고리 형성 헤테로원자를 통해 부착될 수 있다. 일부 구현예에서, 헤테로사이클로알킬 기는 0 내지 3개의 이중 결합을 함유한다. 일부 구현예에서, 헤테로사이클로알킬 기는 0 내지 2개의 이중 결합을 함유한다. 헤테로사이클로알킬의 정의에는 또한 헤테로사이클로알킬 고리에 융합된(즉, 공통 결합을 갖는) 하나 이상의 방향족 고리를 갖는 모이어티, 예를 들어 피페리딘, 모폴린, 아제핀 등의 벤조 또는 티에닐 유도체가 포함된다. 융합된 방향족 고리를 함유하는 헤테로사이클로알킬 기는 융합된 방향족 고리의 고리 형성 원자를 포함하는 임의의 고리 형성 원자를 통해 부착될 수 있다. 헤테로사이클로알킬 기의 예는 2-피롤리디닐; 모폴리눌; 아제티디닐; 및 피페라지닐이다.
특정 위치에서, 정의 또는 구현예는 특정 고리(예를 들어, 아제티딘 고리, 피리딘 고리 등)를 지칭한다. 달리 표시되지 않는 한, 이러한 고리는 원자의 원자가가 초과되지 않는 한 임의의 고리 구성원에 부착될 수 있다. 예를 들어, 아제티딘 고리는 고리의 임의의 위치에 부착될 수 있는 반면, 아제티딘-3-일 고리는 3-위치에 부착된다.
본 명세서에 기재된 화합물은 비대칭(예를 들어, 하나 이상의 입체중심을 가짐)일 수 있다. 거울상 이성질체 및 부분입체 이성질체와 같은 모든 입체 이성질체가 달리 표시되지 않는 한 의도된다. 비대칭적으로 치환된 탄소 원자를 함유하는 본 발명의 화합물은 광학 활성 또는 라세미 형태로 단리될 수 있다. 광학적으로 불활성인 출발 물질로부터 광학적으로 활성인 형태를 제조하는 것에 대한 방법은, 예를 들어 라세미 혼합물의 분할 또는 입체선택적 합성에 의해 당해 기술에 알려져 있다. 올레핀의 많은 기하 이성질체, C=N 이중 결합 등이 또한 본 명세서에 기재된 화합물에 존재할 수 있고, 이러한 모든 안정한 이성질체가 본 발명에서 고려된다. 본 발명의 화합물의 시스 및 트랜스 기하 이성질체가 기재되어 있고 이성질체의 혼합물로서 또는 분리된 이성질체 형태로서 단리될 수 있다.
화합물의 라세미 혼합물의 분할은 당업계에 공지된 임의의 수많은 방법에 의해 수행될 수 있다. 한 방법은 광학적으로 활성인 염 형성 유기 산인 키랄 분할 산을 사용하는 분별 재결정화를 포함한다. 분별 재결정화 방법에 적합한 분할제는 예를 들어 광학 활성 산, 예컨대 D 및 L 형태의 타르타르산, 디아세틸타르타르산, 디벤조일타르타르산, 만델산, 말산, 락트산 또는 다양한 광학 활성 캄포르설폰산 예컨대 β-캄포르설폰산이다. 분별 결정화 방법에 적합한 다른 분할제는 입체이성질체적으로 순수한 형태의 α-메틸벤질아민 (예를 들어, S 및 R 형태, 또는 부분입체이성질체적으로 순수한 형태), 2-페닐글리시놀, 노르에페드린, 에페드린, N-메틸에페드린, 사이클로헥실에틸아민, 1,2-디아미노사이클로헥산 등을 포함한다.
라세미 혼합물의 분할은 광학 활성 분할제(예를 들어, 디니트로벤조일페닐글리신)로 채워진 컬럼에서 용리에 의해 수행될 수도 있다. 적합한 용리 용매 조성은 당업자에 의해 결정될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 화합물은 (R)-배열을 갖는다. 다른 구현예에서, 화합물은 (S)-배열을 갖는다. 하나 이상의 키랄 중심을 갖는 화합물에서, 화합물 내의 각각의 키랄 중심은 달리 지시되지 않는 한 독립적으로 (R) 또는 (S)일 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 호변이성질체 형태를 포함한다. 호변이성질체 형태는 양성자의 동시 이동과 함께 단일 결합을 인접한 이중 결합으로 교환함으로써 생성된다. 호변이성질체 형태는 동일한 실험식 및 총 전하를 갖는 이성질체 양성자화 상태인 양성자성 호변이성질체를 포함한다. 양성자성 호변이성질체의 예는 케톤 - 엔올 쌍, 아미드 - 이미드산 쌍, 락탐 - 락팀 쌍, 엔아민 - 이민 쌍, 및 환상 형태를 포함하고, 여기서 양성자는 헤테로사이클릭 시스템의 2개 이상의 위치를 차지할 수 있고, 그 예는 1H- 및 3H-이미다졸, 1H-, 2H- 및 4H- 1,2,4-트리아졸, 1H- 및 2H- 이소인돌 및 1H- 및 2H-피라졸이다. 호변이성질체 형태는 평형 상태에 있거나 적절한 치환에 의해 한 형태로 입체적으로 고정될 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 중간체 또는 최종 화합물에서 발생하는 원자의 모든 동위원소를 포함할 수 있다. 동위 원소는 동일한 원자 번호를 갖지만 상이한 질량수를 갖는 원자를 포함한다. 예를 들어, 수소의 동위원소는 삼중수소와 중수소를 포함한다. 본 발명의 화합물의 하나 이상의 구성성분 원자는 천연 또는 비-천연 존재비의 원자의 동위원소로 대체되거나 치환될 수 있다. 일부 구현예에서, 화합물은 적어도 하나의 중수소 원자를 포함한다. 예를 들어, 본 개시내용의 화합물에서 하나 이상의 수소 원자는 중수소로 대체되거나 치환될 수 있다. 일부 구현예에서, 화합물은 2개 이상의 중수소 원자를 포함한다. 일부 구현예에서, 화합물은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개의 중수소 원자를 포함한다. 동위원소를 유기 화합물에 포함시키는 합성 방법은 관련 기술분야에 알려져 있다 (Deuterium Labeling in Organic Chemistry by Alan F. Thomas (New York, N.Y., Appleton-Century-Crofts, 1971; The Renaissance of H/D Exchange by Jens Atzrodt, Volker Derdau, Thorsten Fey and Jochen Zimmermann, Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 7744-7765; The Organic Chemistry of Isotopic Labelling by James R. Hanson, Royal Society of Chemistry, 2011). 동위원소로 표지된 화합물은 NMR 분광법, 대사 실험 및/또는 검정과 같은 다양한 연구에 사용할 수 있다.
중수소와 같은 더 무거운 동위원소로 대체하면 더 큰 대사 안정성, 예를 들어 생체 내 반감기 증가 또는 복용량 요건 감소로 인한 특정 치료 이점을 얻을 수 있으므로 일부 상황에서는 선호될 수 있다. (A. Kerekes 등 J. Med. Chem. 2011, 54, 201-210; R. Xu 등 J. Label Compd. Radiopharm. 2015, 58, 308-312).
본 명세서에 사용된 용어 "화합물"은 도시된 구조의 모든 입체 이성질체, 기하 이성질체, 호변이성질체 및 동위원소를 포함하는 것을 의미한다. 이 용어는 또한 예를 들어, 생물학적 과정(예를 들어, 대사 또는 효소 전환), 또는 이들의 조합을 통해 합성적으로 제조되는 방법에 관계없이 본 발명의 화합물을 지칭하는 것을 의미한다.
모든 화합물 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 물 및 용매(예를 들어, 수화물 및 용매화물)와 같은 다른 물질과 함께 발견되거나 단리될 수 있다. 고체 상태일 때, 본 명세서에 기재된 화합물 및 그의 염은 다양한 형태로 발생할 수 있고, 예를 들어 수화물을 비롯한 용매화물의 형태를 취할 수 있다. 화합물은 다형체 또는 용매화물과 같은 임의의 고체 상태 형태일 수 있으므로, 달리 명확하게 지시되지 않는 한, 화합물 및 그의 염에 대한 명세서의 언급은 화합물의 임의의 고체 상태 형태를 포괄하는 것으로 이해되어야 한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 화합물 또는 이의 염은 실질적으로 단리된다. "실질적으로 단리된"이란, 화합물이 그것이 형성되거나 검출된 환경으로부터 적어도 부분적으로 또는 실질적으로 분리됨을 의미한다. 부분적 분리는 예를 들어 본 발명의 화합물이 풍부한 조성물을 포함할 수 있다. 실질적인 분리는 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 97%, 또는 적어도 약 99중량%의 본 발명의 화합물, 또는 그의 염을 함유하는 조성물을 포함할 수 있다.
문구 "약제학적으로 허용 가능한"은 건전한 의학적 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이, 합리적인 이익/위험 비율에 상응하는 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 화합물들, 물질, 조성물 및/또는 복용 형태를 지칭하기 위해 본 명세서에서 사용된다.
본 명세서에 사용된 "주위 온도" 및 "실온"이라는 표현은 당업계에서 이해되며 일반적으로 온도, 예를 들어 반응 온도, 즉 반응이 수행되는 방의 온도, 예를 들어 약 20℃ 내지 약 30℃의 온도를 의미한다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함한다. 용어 "약제학적으로 허용 가능한 염"은 모 화합물이 존재하는 산 또는 염기 부분을 그의 염 형태로 전환시킴으로써 변형된 개시된 화합물의 유도체를 지칭한다. 약제학적으로 허용 가능한 염의 예는 아민과 같은 염기성 잔기의 무기 산 염 또는 유기 산 염; 카복실산과 같은 산성 잔기의 알칼리 또는 유기 염; 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 약제학적으로 허용 가능한 염은 예를 들어 무독성 무기산 또는 유기산으로부터 형성된 모 화합물의 무독성 염을 포함한다. 본 발명의 약제학적으로 허용 가능한 염은 염기성 또는 산성 모이어티를 함유하는 모 화합물로부터 통상적인 화학적 방법에 의해 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 이러한 화합물의 유리 산 또는 염기 형태를 물 또는 유기 용매, 또는 둘의 혼합물에서 화학량론적 양의 적절한 염기 또는 산과 반응시켜 제조할 수 있으며; 일반적으로 비-수성 매질 예컨대 에테르, 에틸 아세테이트, 알코올 (예를 들어, 메탄올, 에탄올, 이소-프로판올 또는 부탄올) 또는 아세토니트릴 (MeCN)이 바람직한다. 적합한 염의 목록은 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th　Ed., (Mack Publishing Company, Easton, 1985), p. 1418, Berge 등, J. Pharm. Sci., 1977, 66(1), 1-19 and in Stahl 등, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, (Wiley, 2002)]에서 발견될 수 있다. 일부 구현예에서, 본 명세서에 기재된 화합물은 N-산화물 형태를 포함한다.
합성
화합물의 염을 포함하는 본 발명의 화합물은 공지된 유기 합성 기술을 사용하여 제조할 수 있고 하기 반응식과 같은 다수의 가능한 합성 경로 중 임의의 것에 따라 합성할 수 있다.
본 발명의 화합물을 제조하기 위한 반응은 유기 합성 분야의 당업자에 의해 용이하게 선택될 수 있는 적합한 용매에서 수행될 수 있다. 적합한 용매는 반응이 수행되는 온도, 예를 들어 용매의 냉동 온도 내지 용매의 비등 온도 범위일 수 있는 온도에서 출발 물질(반응물), 중간체 또는 생성물과 실질적으로 비반응성일 수 있다. 주어진 반응은 하나의 용매 또는 하나 초과의 용매의 혼합물에서 수행될 수 있다. 특정 반응 단계에 따라, 특정 반응 단계에 적합한 용매는 당업자에 의해 선택될 수 있다.
본 발명의 화합물의 제조는 다양한 화학 기의 보호 및 탈보호를 수반할 수 있다. 보호 및 탈보호의 필요성 및 적절한 보호기의 선택은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 보호 기의 화학은 예를 들어 문헌[Kocienski, Protecting Groups, (Thieme, 2007); Robertson, Protecting Group Chemistry, (Oxford University Press, 2000); Smith 등, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 6th Ed. (Wiley, 2007); Peturssion 등, "Protecting Groups in Carbohydrate Chemistry," J. Chem. Educ., 1997, 74(11), 1297; 및 Wuts 등, Protective Groups in Organic Synthesis, 4th Ed., (Wiley, 2006)]에 기재되어 있다.
반응은 당업계에 공지된 임의의 적합한 방법에 따라 모니터링될 수 있다. 예를 들어, 생성물 형성은 분광 수단, 예컨대 핵자기 공명 분광법 (예를 들어, 1H 또는 13C), 적외선 분광법, 분광광도법 (예를 들어, UV-가시광), 질량 분광계 또는 크로마토그래피 방법 예컨대 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC) 또는 박층 크로마토그래피 (TLC)으로 모니터링될 수 있다.
하기 반응식은 본 발명의 화합물의 제조와 관련된 일반적인 지침을 제공한다. 당업자는 반응식에 보여진 제제가 본 발명의 다양한 화합물을 제조하기 위해 유기 화학의 일반적인 지식을 사용하여 변형되거나 최적화될 수 있음을 이해할 것이다.
화학식 (I)의 화합물은 예를 들어 하기 반응식에 예시된 바와 같은 공정을 사용하여 제조할 수 있다.
반응식 1: 카보네이트 및 카바메이트 연결 화합물의 합성
Figure pct00097
측면에 직교 이탈기가 있는 중간체 II는 친핵성 R8H 화합물과 반응하여 중간체 III을 생성할 수 있다. 그 다음 중간체 III은 최종 화합물을 얻기 위해 이황화물 교환 반응에 참여하는 펩티드(HS-R7)를 함유하는 티올과 반응할 수 있다. 적합한 이탈기는 하기에 기재되어 있다.
반응식 2: 티오 프로피오네이트 연결 접합체의 합성 1
Figure pct00098
이전에 설치된 이탈기 1 및 2가 있는 프로피오네이트 이황화물 IV는 친핵성 R8-H와 선택적으로 반응하여 V를 얻을 수 있다. 그 다음 이 화합물은 R7-SH와 반응하여 원하는 접합체를 제공할 수 있다.
반응식 3: 티오 프로피오네이트 연결 접합체의 합성 2
Figure pct00099
티오노에스테르 VI는 친핵성 R8-H와 반응하여 프로피오네이트 티올 VII를 얻을 수 있다. 이 화합물은 이황화물 교환 반응에 참여하여 중간체 VIII을 제공할 수 있다. 이 화합물을 R7-SH로 처리하여 원하는 접합체를 제공할 수 있다.
반응식 4: 파라 벤질 연결 접합체의 합성 1
Figure pct00100
파라 아미노벤질 알코올 IX의 알코올 기는 선택적으로 보호되어 중간체 X를 얻을 수 있다. 그 다음 이 중간체는 아닐린 위치에서 중간체 II와 반응하여 아릴 카바메이트 XI를 제공할 수 있다. 보호기는 제거되어 유리 알코올 XII를 얻을 수 있으며, 이는 활성화제로 처리되어 직교 이탈기를 함유하는 중간체 XIII을 제공할 수 있다. 중간체 XIII과 R8-H과의 반응은 중간체 XIV를 제공할 수 있고, 이어서 R7-SH로 처리하면 원하는 파라벤질 연결 접합체를 얻을 수 있다.
반응식 5: 파라 벤질 연결 접합체의 합성
Figure pct00101
4-머캅토 벤질 알코올 XV는 이황화물 교환 반응에서 반응하여 이탈기 2를 함유하는 4-머캅토 벤질 알코올 이황화물 XVI을 얻을 수 있다. 나머지 벤질 알코올은 적절한 카보닐 화합물로 처리하여 활성화된 화합물 XVII를 제공할 수 있다. 이 중간체는 추가로 친핵성 R8-H와 선택적으로 반응하여 중간체 XVIII을 제공할 수 있으며, 이는 R7-SH로 처리되어 원하는 접합체를 제공할 수 있다.
반응식 6: 오르토 벤질 연결 접합체의 합성
Figure pct00102
2-머캅토 벤질 알코올 XXIII은 이전에 기술된 바와 같이 반응하여 원하는 접합체를 얻을 수 있다.
반응식 7: 펩티드 접합체의 절단
Figure pct00103
R8-H를 방출하는 최종 화합물의 절단은 37℃에서 인큐베이션하면서 완충액에서 과량의 글루타티온(GSH)으로 화합물을 처리하여 달성할 수 있다. 원하는 시간 과정에서 역상 HPLC 분석을 사용하여 절단 과정을 추적한다.
펩티드 R7은 문헌[J.A.C.S., Vol. 85, pgs. 2149-2154 (1963)]에서 메리필드(Merrifield)에 의해 먼저 기재된 고체상 합성 방법을 사용하여 제조될 수 있지만, 다른 기술 분야에 알려진 방법이 사용될 수도 있다. 메리필드 기술은 잘 알려져 있으며 펩타이드 제조를 위한 일반적인 방법이다. 고체상 펩티드 합성을 위한 유용한 기술은 문헌["Principles of Peptide Synthesis" by Bodanszky, Springer Verlag 1984] 텍스트와 같은 여러 책에 기재되어 있다. 이 합성 방법은 고체 수지 입자에 공유 결합으로 결합된 성장하는 펩티드 사슬에 보호된 아미노산을 단계적으로 첨가하는 것을 수반한다. 이 절차에 의해, 시약 및 부산물이 여과에 의해 제거되므로 중간체를 정제할 필요가 없다. 이 방법의 일반적인 개념은 공유 결합에 의해 사슬의 첫 번째 아미노산이 고체 중합체에 부착된 후, 원하는 서열이 조립될 때까지 단계적으로 한 번에 하나씩 후속 보호된 아미노산을 추가하는 것에 달려있다. 마지막으로, 보호된 펩티드는 고체 수지 지지체에서 제거되고 보호기는 절단된다.
펩티드 R7은 또한 발효, 예를 들어 E. 콜라이의 변형에 의해 생성될 수 있다. E. 콜라이에서의 단백질 생산은 본 명세서에 개시된 R7 펩티드의 서열을 갖는 재조합 폴리펩티드를 생산하도록 조절될 수 있다. E. 콜라이에서의 재조합 폴리펩티드 생산은 다음 참고 문헌에 기재되어 있다: 문헌[Zhao, Q., Xu, W., Xing, L. 등 Recombinant production of medium- to large-sized peptides in Escherichia coli using a cleavable self-aggregating tag. Microb Cell Fact 15, 136 (2016); de Marco, Recombinant polypeptide production in E. coli: towards a rational approach to improve the yields of functional proteins; Microbial Cell Factories 2013, 12:101; 및 Kleiner-Grote G.M., Risse, J.M., Friehs, K; Secretion of recombinant proteins from E. coli; Eng. Life Sci. 2018, 18, 532-550, 이들 각각은 전문이 참고로 본 명세서에 포함된다].
아미노산은 임의의 적합한 중합체에 부착될 수 있다. 중합체는 사용된 용매에 불용성이어야 하고, 쉽게 여과할 수 있는 안정적인 물리적 형태를 가져야 하며, 첫 번째 보호된 아미노산이 공유 결합에 의해 단단히 연결될 수 있는 작용기를 함유해야 한다. 셀룰로스, 폴리비닐 알코올, 폴리메틸메타크릴레이트 및 폴리스티렌과 같은 다양한 폴리머가 이러한 목적에 적합하다.
사용 방법
암 또는 신경퇴행성 질환과 같은 질환의 치료에서 화학식 (I)의 화합물의 용도가 본 명세서에 제공된다. 본 발명의 또 다른 양태는 암 또는 신경퇴행성 질환과 같은 산성 또는 저산소성 질환 조직과 관련된 질환의 치료에서 화학식 (I)의 화합물의 용도이다. 저산소증과 산증은 암을 포함한 많은 질환 과정의 생리학적 지표이다. 암에서, 저산소증은 고형 종양 내 산성 환경의 발달을 담당하는 메커니즘 중 하나이다. 결과적으로, 수소 이온은 세포 내에서 정상적인 pH를 유지하기 위해 (예를 들어, 양성자 펌프에 의해) 세포에서 제거되어야 한다. 이러한 수소 이온의 배출의 결과로, 암 세포는 종종 정상 세포와 비교할 때 세포막 지질 이중층을 가로질러 증가된 pH 구배 및 세포외 환경에서 더 낮은 pH를 갖는다. 세포독성제의 효능 및 치료 지수를 개선하기 위한 한 가지 접근법은 이 생리학적 특성을 활용하여 건강한 조직을 통해 저산소 세포에 화합물을 선택적으로 전달하는 것이다.
본 발명의 치료 방법에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 치료 유효량은 단일 제제로서 또는 다른 형태의 요법, 예컨대 암의 경우 이온화 방사선 또는 세포독성제와 조합하여 투여될 수 있다. 조합 요법에서, 화학식 (I)의 화합물은 당업자에 의해 이해되는 바와 같이 다른 치료 방식 이전, 이와 동시에 또는 이후에 투여될 수 있다. 두 가지 치료 방법(단일 제제 또는 다른 형태의 요법과의 조합)은 일정 기간 동안 다중 용량 또는 치료를 포함하는 치료 과정으로 투여될 수 있다.
본 개시내용의 화합물을 사용하여 치료할 수 있는 암의 예는 결장직장암, 위암(gastric cancer), 골암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부암 또는 안구내 악성 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 항문부의 암, 위장암(stomach cancer), 고환암, 자궁암, 나팔관의 암종, 자궁내막의 암종, 자궁내막 암, 자궁경부의 암종, 질의 암종, 외음부의 암종, 호지킨 질환, 비-호지킨 림프종, 식도암, 소장암, 내분비계의 암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신의 암, 연조직의 육종, 요도암, 음경암, 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 급성 림프모구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병을 포함하는 만성 또는 급성 백혈병, 소아기의 고형 종양, 림프구성 림프종, 방광암, 신장암 또는 요도암, 신우의 암종, 중추신경계 (CNS)의 신생물, 원발성 CNS 림프종, 종양 혈관신생, 척축 종양, 뇌간 신경교종, 뇌하수체 샘종, 카포시 육종, 표피암, 편평 세포 암, T-세포 림프종, 석면에 의해 유도된 암을 비롯한 환경적으로 유도된 암, 및 상기 암의 조합을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
일부 구현예에서, 본 개시내용의 화합물로 치료가능한 암은 방광암, 골암, 신경교종, 유방암 (예를 들어, 삼중-음성 유방암), 자궁경부암, 결장암, 결장직장암, 자궁내막암, 상피암, 식도암, 유잉 육종, 췌장암, 담낭암, 위암, 위장 종양, 두경부암 (상부 기도소화 암), 장암, 카포시 육종, 신장암, 후두암, 간암 (예를 들어, 간세포 암종), 폐암 (예를 들어, 비-소세포 폐암, 선암종), 흑색종, 전립선암, 직장암, 신장 투명 세포 암종, 피부암, 위장암, 고환암, 갑상선암, 및 자궁암을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 개시내용의 화합물로 치료가능한 암은 흑색종 (예를 들어, 전이성 악성 흑색종), 신장암 (예를 들어, 투명 세포 암종), 전립선암 (예를 들어, 호르몬 불응성 전립선 선암종), 유방암, 삼중-음성 유방암, 결장암 및 폐암 (예를 들어, 비-소세포 폐암 및 소세포 폐암)을 포함한다. 추가로, 본 개시내용은 그의 성장이 개시내용의 화합물을 사용하여 억제될 수 있는 불응성 또는 재발성 악성종양을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 개시내용의 화합물을 사용하여 치료가능한 암은 고형 종양 (예를 들어, 전립선암, 결장암, 식도암, 자궁내막 암, 난소암, 자궁암, 신장암, 간암, 췌장암, 위암, 유방암, 폐암, 두경부암, 갑상선암, 교모세포종, 육종, 방광암, 등), 혈액암 (예를 들어, 림프종, 백혈병 예컨대 급성 림프모구성 백혈병 (ALL), 급성 골수형성 백혈병 (AML), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수형성 백혈병 (CML), DLBCL, 외투 세포 림프종, 비-호지킨 림프종 (재발성 또는 불응성 NHL 및 재발성 여포성 포함), 호지킨 림프종 또는 다발성 골수종) 및 상기 암의 조합을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
토포이소머라제 I 억제제(예를 들어, 엑사테칸)로부터 유도된 토포이소머라제 I 표적화 모이어티를 포함하는 본 발명의 화합물(예를 들어, 화학식 (I)의 화합물)은 토포이소머라제 I 억제제 자체에 비해 특정 치료 이점을 나타낼 수 있다. 예를 들어, 화학식 (I)의 화합물의 투여는 상응하는 토포이소머라제 I 억제제(예를 들어, 엑사테칸)의 투여와 비교하여 감소된 독성(예를 들어, 골수 또는 위 독성)을 나타낼 수 있다. 일부 구현예에서, 골수 독성은 대상체의 샘플로부터의 총 골수 카운트(예를 들어, 마우스 대퇴골의 총 골수 카운트)에 의해 측정된다. 일부 구현예에서, 골수 독성은 골수 조직에서 PAR화(PARylation)에 의해 측정된다. 일부 구현예에서, 골수 독성은 총 유핵 골수 세포에 따라 측정된다. 일부 구현예에서, 위 독성은 계내 및 생체외 모두에서 촬영된 대상체(예를 들어, 마우스)의 위 사진을 사용하여 평가된다.
특정 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 화학요법제, 표적화 암 요법, 면역요법 또는 방사선 요법과 조합하여 사용될 수 있다. 제제는 단일 투여 형태로 본 화합물과 조합될 수 있거나, 제제는 별개의 투여 형태로서 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 화학요법제, 표적화 암 요법, 면역요법 또는 방사선 요법은 예를 들어 상응하는 토포이소머라제 억제제(예를 들어, R8-H)와 조합하여 투여되는 경우와 비교하여 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 함께 투여될 때 감소된 골수 또는 위 독성을 나타냄으로써 환자에게 덜 독성이다.
적합한 화학요법제 또는 기타 항암제는 예를 들어, 알킬화제 (질소 머스타드, 에틸렌이민 유도체, 알킬 설포네이트, 니트로소우레아 및 트리아젠을 비제한적으로 포함함) 예컨대 우라실 머스타드, 클로르메틴, 사이클로포스파미드 (CytoxanTM), 이포스파미드, 멜팔란, 클로르암부실, 피포브로만, 트리에틸렌-멜라민, 트리에틸렌티오포스포르아민, 부설판, 카무스틴, 로무스틴, 스트렙토조신, 다카바진, 및 테모졸로마이드를 포함한다.
본 발명의 화합물과 조합하여 사용하기에 적합한 다른 제제는 다음을 포함한다: 선택적으로 카무스틴(BCNU) 및 시스플라틴과 같은 다른 화학요법 약물과 함께 다카바진(DTIC); DTIC, BCNU, 시스플라틴 및 타목시펜으로 구성된 "다트머스 레지멘"; 시스플라틴, 빈블라스틴 및 DTIC의 조합; 또는 테모졸로미드. 본 발명에 따른 화합물은 또한 인터페론 알파, 인터루킨 2 및 종양 괴사 인자(TNF)와 같은 사이토카인을 포함하는 면역요법 약물과 조합될 수 있다.
적합한 화학요법제 또는 기타 항암제는 예를 들어, 항대사물질 (엽산 길항제, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체 및 아데노신 탈아미노효소 억제제를 비제한적으로 포함함) 예컨대 메토트렉세이트, 5-플루오로우라실, 플록수리딘, 사이타라빈, 6-머캅토퓨린, 6-티오구아닌, 플루다라빈 포스페이트, 펜토스타틴, 및 젬시타빈을 포함한다.
적합한 화학요법제 또는 기타 항암제는 예를 들어, 특정 천연 생성물 및 그것의 유도체 (예를 들어, 빈카 알카로이드, 항종양 항생제, 효소, 림포카인 및 에피포도필로톡신) 예컨대 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 블레오마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, ara-C, 파클리탁셀 (TAXOLTM), 미트라마이신, 데옥시코포르마이신, 미토마이신-C, L-아스파라기나제, 인터페론 (특히 IFN-a), 에토포시드, 및 테니포시드를 포함한다.
본 발명의 화합물과 조합하여 투여될 수 있는 다른 세포독성제는 예를 들어, 나벨벤, CPT-11, 아나스트라졸, 레트라졸, 카페시타빈, 렐록사핀, 사이클로포스파미드, 이포사마이드, 및 드롤록사핀을 포함한다.
예를 들어, 에피도필로톡신과 같은 세포독성제; 항신생물성 효소; 토포이소머라제 억제제; 프로카바진; 미톡산트론; 백금 배위 착체 예컨대 시스-플라틴 및 카보플라틴; 생물학적 반응 조절제; 성장 억제제; 항호르몬 치료제; 류코보린; 테가푸르; 및 조혈 성장 인자가 적합하다.
다른 항암제(들)은 항체 치료제 예컨대 트라스투주맙 (헤르셉틴), 공동자극 분자 예컨대 CTLA-4, 4-1BB 및 PD-1에 대한 항체, 또는 사이토카인 (IL-10, TGF-α, 등)에 대한 항체를 포함한다.
다른 항암제는 또한 CCR2 및 CCR4를 포함하는 케모카인 수용체에 대한 길항제와 같은 면역 세포 이동을 차단하는 것을 포함한다.
다른 항암제에는 보조제(adjuvant) 또는 입양 T 세포 전이와 같은 면역계를 증강시키는 것도 포함된다.
본 발명의 화합물과 조합하여 투여될 수 있는 항암 백신은 예를 들어, 수지상 세포, 합성 펩티드, DNA 백신 및 재조합 바이러스를 포함한다.
본 발명의 화합물과 조합하여 사용하기에 적합한 다른 제제는 화학요법 조합 예컨대 폐암 및 다른 고형 종양에 사용된 백금계 이중체 (시스플라틴 또는 카보플라틴 플러스 젬시타빈; 시스플라틴 또는 카보플라틴 플러스 도세탁셀; 시스플라틴 또는 카보플라틴 플러스 파클리탁셀; 시스플라틴 또는 카보플라틴 플러스 페메트렉세드) 또는 젬시타빈 플러스 파클리탁셀 결합된 입자 (Abraxane®)을 포함한다.
본 발명의 화합물은 유방암 및 기타 종양의 치료를 위해 항호르몬제와 조합하여 효과적일 수 있다. 적합한 예는 타목시펜 및 토레미펜을 포함하지만 이에 제한되지 않는 항-에스트로겐 제제, 레트로졸, 아나스트로졸, 및 엑세메스탄을 포함하지만 이에 제한되지 않는 방향화효소 억제제, 아드레노코르티코스테로이드 (예를 들어, 프레드니손), 프로게스틴 (예를 들어, 메가스트롤 아세테이트), 및 에스트로겐 수용체 길항제(예를 들어, 풀베스트란트)이다. 전립선암 및 기타 암의 치료에 사용되는 적합한 항호르몬제는 또한 본 발명의 화합물과 조합될 수 있다. 이들은 플루타미드, 바이칼루타미드, 및 닐루타미드를 포함하지만 이에 제한되지 않는 항-안드로겐, 류프롤라이드, 고세렐린, 트립토렐린, 및 히스트렐린을 포함하는 황체형성 호르몬-방출 호르몬 (LHRH) 유사체, LHRH 길항제(예를 들어, 데가렐릭스), 안드로겐 수용체 차단제(예를 들어, 엔잘루타미드) 및 안드로겐 생산을 억제하는 제제(예를 들어, 아비라테론)를 포함한다.
본 발명의 화합물은 특히 표적 요법에 대해 일차 또는 후천적 내성이 발생한 환자에 대해 막 수용체 키나제에 대한 다른 제제와 조합되거나 순차적으로 투여될 수 있다. 이러한 치료제는 EGFR, Her2, VEGFR, c-Met, Ret, IGFR1, 또는 Flt-3에 대한 그리고 암 연관 융합 단백질 키나제 예컨대 Bcr-Abl 및 EML4-Alk에 대한 억제제 또는 항체를 포함한다. EGFR에 대한 억제제에는 게피티닙 및 에를로티닙이 포함되고, EGFR/Her2에 대한 억제제에는 다코미티닙, 아파티닙, 라피티닙 및 네라티닙이 포함되지만 이에 제한되지는 않는다. EGFR에 대한 항체는 세툭시맙, 파니투무맙 및 네시투무맙을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. c-Met의 억제제는 본 발명의 화합물과 조합하여 사용될 수 있다. 이들은 오나르툼주맙, 티반트닙, 및 INC-280를 포함한다. Abl (또는 Bcr-Abl)에 대한 제제는 이마티닙, 다사티닙, 닐로티닙, 및 포나티닙을 포함하고, Alk (또는 EML4-ALK)에 대한 것은 크리조티닙을 포함한다.
혈관신생 억제제는 본 발명의 화합물과 조합하여 일부 종양에서 효과적일 수 있다. 이들은 VEGF 또는 VEGFR에 대한 항체 또는 VEGFR의 키나제 억제제를 포함한다. VEGF에 대한 항체 또는 기타 치료 단백질에는 베바시주맙 및 아플리베르셉트가 포함된다. VEGFR 키나제의 억제제 및 기타 항혈관신생 억제제에는 수니티닙, 소라페닙, 악시티닙, 세디라닙, 파조파닙, 레고라페닙, 브리바닙, 및 반데타닙이 포함되지만 이에 제한되지 않는다.
세포내 신호전달 경로의 활성화는 암에서 빈번하며, 이러한 경로의 구성요소를 표적으로 하는 제제는 효능을 향상시키고 내성을 감소시키기 위해 수용체 표적화제와 조합되었다. 본 발명의 화합물과 조합될 수 있는 제제의 예는 PI3K-AKT-mTOR 경로의 억제제, Raf-MAPK 경로의 억제제, JAK-STAT 경로의 억제제, 및 단백질 샤페론 및 세포 주기 진행의 억제제를 포함한다.
PI3 키나제에 대한 제제는 토필라랄리십, 이데랄리십, 부팔리십을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 라파마이신, 시롤리무스, 템시롤리무스 및 에베롤리무스와 같은 mTOR의 억제제는 본 발명의 화합물과 조합될 수 있다. 다른 적합한 예는 베무라페닙 및 다브라페닙 (Raf 억제제) 및 트라메티닙, 셀루메티닙 및 GDC-0973 (MEK 억제제)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 하나 이상의 JAK의 억제제(예를 들어, 룩솔리티닙, 바리시티닙, 토파시티닙), Hsp90의 억제제(예를 들어, 타네스피마이신), 사이클린 의존적 키나제(예를 들어, 팔보시클립), HDAC의 억제제(예를 들어, 파노비노스타트), PARP의 억제제(예를 들어, 올라파립), 및 프로테아솜의 억제제(예를 들어, 보르테조밉, 카르필조밉)는 또한 본 발명의 화합물과 조합될 수 있다. 본 발명의 화합물과 조합될 수 있는 PARP 억제제의 추가 예는 탈라조파립이다.
이들 대부분의 화학요법제의 안전하고 효과적인 투여 방법은 당업자에게 공지되어 있다. 또한, 그들의 투여는 표준 문헌에 설명되어 있다. 예를 들어, 많은 화학요법제의 투여는 문헌["Physicians' Desk Reference" (PDR, 예를 들어, 1996 edition, Medical Economics Company, Montvale, NJ)]에 기술되어 있으며, 그 개시 내용은 전문이 제시된 것처럼 본 명세서에 참조로 포함된다.
화합물(치료제, 활성 성분, 약물 등)의 "치료 유효량"이라는 문구는 치료될 장애 또는 병태에 대해 임상적으로 허용 가능한 표준에 따라 증상을 완화하고 병태를 개선하거나 질환 상태의 발병을 늦추는 요법 또는 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화합물의 양을 지칭한다. 예를 들어, 치료적 유효량은 시험관내 검정, 생체내 동물 검정 또는 임상 시험에서 원하는 치료 효과를 갖는 것으로 입증된 양일 수 있다. 치료적 유효량은 많은 다른 인자 중에서 특정 복용 형태, 투여 방법, 치료 프로토콜, 치료될 특정 질환 또는 병태, 이익/위험 비율 등에 기초하여 변할 수 있다.
상기 치료적 유효량은 임상 시험, 동물 모델, 또는 시험관내 세포 배양물 검정으로부터 수득될 수 있다. 인간이 사용하기에 적합한 유효량은 동물 모델 또는 시험관내 세포 배양물 검정으로부터 결정된 유효량으로부터 계산될 수 있다는 것이 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌[Reagan-Shaw 등, FASEB J. 2008: 22(3) 659-61]에 의해 보고된 바와 같이, "μg/ml"(시험관내 세포 배양물 검정에 기초한 유효량) = "mg/kg 체중/일"(마우스에 대한 유효량). 또한, 마우스의 신진율이 인간보다 6배 빠르다는 사실에 기초하여 마우스의 유효량으로부터 인간에 대한 유효량을 계산할 수 있다.
화학식 (I)의 화합물을 세포독성제와 조합하여 사용하는 치료의 예로서, 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물은 또한 치료 유효량의 이온화 방사선 또는 세포독성제를 수반하는 치료 레지멘의 일부로서 암을 앓고 있는 환자에게 투여될 수 있다. 이 치료 요법의 맥락에서, 용어 "치료적으로 유효한" 양은 조합 요법에서 효과적인 것을 의미하는 것으로 이해되어야 한다. 암 치료 분야의 당업자는 최적의 치료 결과를 달성하기 위해 복용량을 조정하는 방법을 이해할 것이다.
유사하게, 비암성 질환 또는 병태(예를 들어, 심혈관 질환)의 치료를 위한 본 발명의 화합물의 적절한 복용량은 의학 분야의 숙련가에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "치료하는"은 화합물 또는 조성물을 투여받지 않은 대상체에 비해 대상체에서 산성 또는 저산소성 병든 조직, 예컨대 암, 뇌졸중, 심근경색증, 또는 장기간 신경퇴행성 질환을 수반하는 질환의 빈도를 감소시키거나, 발병을 지연시키거나, 증상의 진행을 감소시키는 화합물 또는 조성물의 투여를 포함한다. 이것은 대상체의 병태를 개선하거나 안정화하는 방식으로 병태의 증상, 임상 징후 또는 근본적인 병리를 역전, 감소 또는 정지시키는 것을 포함할 수 있다(예를 들어, 암에 대한 종양 성장의 퇴행, 또는 심근경색, 뇌졸중 등 심혈관 질환에서 심근 허혈 재관류 손상의 감소 또는 개선). "억제하는" 또는 "감소시키는"이라는 용어는 미처리 대조군 집단과 비교하여 집단에서 종양 성장을 억제하거나 감소시키는(예를 들어, 종양의 크기를 감소시키는) 방법과 관련하여 암에 사용된다.
본 명세서에서 언급된 모든 공보 (특허 포함)은, 예를 들어 본원에 기재된 개시내용과 관련하여 사용될 수 있는, 공보에 기재된 작제물 및 방법을 기재 및 개시하기 위한 목적으로 본원에 참조로 포함된다. 본문 전체에 걸쳐 논의된 공보는 본 출원의 출원일 이전의 공개를 위해서만 제공된다.
본 명세서에 몇 가지 유형의 범위가 개시되어 있다. 임의의 유형의 범위가 개시되거나 청구될 때, 그 의도는 범위의 종점뿐만 아니라 그 안에 포함된 임의의 하위 범위 및 하위 범위의 조합을 포함하여, 그러한 범위가 합리적으로 포함할 수 있는 각각의 가능한 수를 개별적으로 개시하거나 청구하는 것이다. 예를 들어, 활성 성분의 치료적 유효량의 범위가 개시되거나 청구되는 경우, 본 명세서의 개시내용과 일치하여 그러한 범위가 포함할 수 있는 모든 가능한 수를 개별적으로 개시하거나 청구하는 것이 의도이다. 예를 들어, 화합물의 치료적 유효량은 약 1 mg/kg 내지 약 50 mg/kg(대상체의 체중)의 범위일 수 있다는 개시에 의해.
제형, 복용 형태 및 투여
본 발명의 약제학적 조성물을 제조하기 위해, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 활성 성분으로서 통상적인 약제학적 배합 기술에 따라 약제학적 담체와 친밀한 혼합물로 조합되며, 담체는 예를 들어, 경구 또는 비경구 투여에 필요한 제제의 형태에 따라 다양한 형태를 취할 수 있다. 경구 복용 형태로 조성물을 제조할 때, 임의의 통상적인 약제학적 매질이 이용될 수 있고, 그 예는 예를 들어, 현탁액, 엘릭시르, 및 용액과 같은 경구 액상 체제의 경우에 물, 글리콜, 오일, 알코올, 풍미제, 보존제, 착색제, 등; 또는, 예를 들어, 분말, 캡슐, 및 정제와 같은 경구 고형 제제의 경우에 담체 예컨대 전분, 당, 희석제, 과립화제, 윤활제, 결합제, 붕해제 등일 수 있다. 투여가 용이하기 때문에, 정제 및 캡슐제는 가장 유리한 경구 복용량 단위 형태를 나타내며, 이 경우 고체 약제학적 담체가 분명히 사용된다. 원하는 경우, 정제는 표준 기술에 의해 당 코팅되거나 장용 코팅될 수 있다. 비경구의 경우, 담체는 일반적으로 멸균수를 포함하지만, 예를 들어 용해도를 돕거나 보존 목적으로 다른 성분이 포함될 수 있다. 주사 가능한 현탁액이 또한 제조될 수 있으며, 이 경우 적절한 액체 담체, 현탁제 등이 사용될 수 있다. 약제학적 및 의학 분야의 당업자는 치료될 특정 질환 또는 병태에 대해 본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 복용량을 쉽게 결정할 수 있을 것이다.
실시예
본원에서 사용된 바와 같이, 모든 약어, 기호 및 규약은 현대의 과학 문헌에 사용된 것과 일치한다. 예를 들어 문헌[Janet S. Dodd, ed., The ACS Style Guide: A Manual for Authors and Editors, 2nd Ed., Washington, D.C.: American Chemical Society, 1997] 참조. 다음 정의는 본 명세서에 사용된 용어 및 약어를 설명한다.
● 염수: 물 중 포화된 NaCl 용액
● DCM: 디클로로메탄
● TFA: 트리플루오로아세트산
● DIPEA: 디이소프로필에틸아민
● DMA: 디메틸아세트아미드
● DME: 디메톡시에탄
● DMF: 디메틸포름아미드
● DMSO: 메틸설폭사이드
● DTT: 디티오트레이톨
● MSD: 질량 spec 검출기
● Et2O: 에틸 에테르
● EtOAc: 에틸 아세테이트
● EtOH: 에틸 알코올
● HATU: O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
● HOBt: 1-하이드록시벤조트리아졸
● RP: 역상
● HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피
● IPA: 이소프로판올
● LAH: 리튬 수소화알루미늄
● N-BuLi: n-부틸 리튬
● LC-MS: 액체 크로마토그래피-질량 분광계
● LDA: 리튬 디이소프로필에틸아미드
● Me: 메틸
● MeOH: 메탄올
● MTBE: 메틸 t-부틸 에테르
● NMP: N-메틸파이롤리딘
● Ph: 페닐
● PNPC: 파라-니트로페닐클로로포르메이트
● RT 또는 rt: 실온
● SFC: 초임계 유체 크로마토그래피
● TBAI: 테트라부틸암모늄 아이오다이드
● TBME: tert-부틸메틸 에테르
● tBu: 삼차 부틸
● THF: 테트라하이드로푸란
● TEA: 트리에틸아민
● TMEDA: 테트라메틸에틸렌디아민
● GSH: 글루타티온
● GS: 황에 접합된 글루타티온
● LiOH: 수산화리튬
● DPPA: 디페닐 포스포릴 아지드
● Sn(Bu)2(라우레이트)2: 디부틸주석 디라우레이트
● PBS: 포스페이트 완충 식염수
● ACN: 아세토니트릴
● AcOH: 아세트산
● EEDQ: N-에톡시카보닐-2-에톡시-1,2-디하이드로퀴놀린
● DMAP: 4-디메틸아미노피리딘
● EDC: 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드
실시예에 사용된 출발 물질의 출처는 하기 표에 제시되어 있다.
Figure pct00104
Figure pct00105
Figure pct00106
Figure pct00107
Figure pct00108
사용된 HPLC 방법은 아래에 제시된다:
HPLC 방법
A: Sunfire C18 150x4.6mm; H2O/아세토니트릴 w/TFA 개질제(0.05%); 유량: 1ml/분; 파장 = 217 nM.
B: Ace Equivalence 250x4.6mm; H2O/아세토니트릴 w/TFA 개질제(0.05%); 유량: 1ml/분; 파장 = 217 nM.
A: Sunfire C18 150x30mm; H2O/아세토니트릴 w/TFA 개질제(0.05%); 유량: 30ml/분; 파장 = 217 nM.
질량 분광계 방법
Maldi-TOF(매트릭스 보조 레이저 탈착/이온화-비과시간) 질량 분광분석은 Applied Biosystems Voyager System 6268에서 측정되었다. 샘플은 AB Science 플레이트(Part# V700666)에서 α-시아노 하이드록시 신남산의 매트릭스로 준비되었다.
ESI(전기분무 이온화) 질량 분광분석은 1946 MSD가 있는 Agilent 1100 시리즈 LC-MS 또는 Waters Xevo Qtof 고해상도 MS에서 측정되었으며 둘 다 질량/전하 종(m/z=3)을 제공한다.
시스- S-(3-하이드록시부탄-2-일) 에탄티오에이트 (L-4 및 L-5)의 합성
Figure pct00109
물 (50 mL) 중 트랜스-2,3-디메틸옥시란 (5.0 g, 69.3 mmol)의 교반 용액에 티오아세트산 (5.8 mL, 76.2 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL)으로 켄칭하고 에틸 아세테이트 (200 mL)로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시킨 다음, 감압 하에서 증발시켜 시스-S-(3-하이드록시부탄-2-일) 에탄티오에이트를 오일성 화합물 (4.0 g, 조물질)로서 얻었다. MS m/z 149.0 [M+H]+.
시스 -3-머캅토부탄-2-올의 합성
Figure pct00110
THF (40 mL) 중 S-(3-하이드록시부탄-2-일) 에탄티오에이트 (4 g, 26.9 mmol)의 교반 용액에 리튬 수소화알루미늄 (THF 중 1M 용액) (27 mL, 26.9 mmol)을 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 점진적으로 실온으로 가온되도록 하고 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1N HCl로 천천히 켄칭하고 pH를 2-3으로 조정하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (50 mL)에서 추출하고 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 증발 제거하여 시스-3-머캅토부탄-2-올을 조(crude) 오일성 화합물로서 얻었다.
트랜스- S-(3-하이드록시부탄-2-일) 에탄티오에이트 (L-6 및 L-7)의 합성
Figure pct00111
물 (15 mL) 중 시스-2,3-디메틸옥시란 (1.0 g, 13.9 mmol)의 교반 용액에 티오아세트산 (1.1 mL, 15.6 mmol)을 실온에서 첨가하고 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 중탄산나트륨 용액 (10 mL)로 켄칭하고 에틸 아세테이트 (20mL)로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시킨 다음, 감압 하에서 증발시켜 트랜스-S-(3-하이드록시부탄-2-일) 에탄티오에이트를 황색 오일로서 얻었다 (0.7 g 조물질).
트랜스- 3-머캅토부탄-2-올의 합성
Figure pct00112
THF (10 mL) 중 트랜스-S-(3-하이드록시부탄-2-일) 에탄티오에이트 (700 mg, 4.72 mmol)의 교반 용액에 리튬 수소화알루미늄 (THF 중 1M 용액) (4.8 mL, 4.72 mmol)를 0℃에서 적가하고 동일한 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1N HCl로 켄칭한 다음, pH를 2-3으로 조정하였다. 반응 혼합물을 CH2Cl2 (10 mL)로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 다음 단계를 위해 직접 취하였다.
트랜스-S-(2-하이드록시사이클로헥실) 에탄티오에이트 (L-8 및 L-9)의 합성
Figure pct00113
물 (50.0 mL) 중 7-옥사바이사이클로[4.1.0]헵탄 (5.0 g, 51.0 mmol)의 용액에 티오아세트산 (4.92 mL, 61.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC (20% EtOAc/헥산)로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석하였다. 유기층을 분리하고 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하여 트랜스-S-(2-하이드록시사이클로헥실) 에탄티오에이트를 갈색 액체로서 얻었다 (3.8 g 조물질).
트랜스- 2-머캅토사이클로헥산-1-올의 합성
Figure pct00114
THF (20.0 mL) 중 트랜스-S-(2-하이드록시사이클로헥실) 에탄티오에이트 (3.8 g, 21.8 mmol)의 교반 용액에 THF (21.8 mL, 21.8 mmol) 중 1M LiAH4을 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 점진적으로 실온으로 가온되도록 하고 1시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC (20% EtOAc/Hex)로 모니터링하였다. 반응의 완료시, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 1.0 N HCl (30 mL)로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 CH2Cl2 (30.0 mL)에서 추출하였다. 유기층을 염수 용액 (30.0 mL)으로 세척하고, 다음 단계를 위해 취한 조 트랜스-2-설파닐사이클로헥산올을 농축하였다. (2.88 g, 조물질).
L로부터 중간체 I의 합성
Figure pct00115
중간체 I-1: (2R)-2-(2-피리딜디설파닐)프로판-1-올의 합성
Figure pct00116
N2로 탈기한 40 ml의 MeOH 중 2-(2-피리딜디설파닐)피리딘 (5.00 g, 22.7 mmol)에 (2R)-2-설파닐프로판-1-올 (0.75 g, 8.14 mmol)을 적가 방식으로 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 SiO2 플래시 칼럼 상에 직접 로딩하고 0-50% EtOAc/헥산으로 용리하여 1.17 g, 71% of (2R)-2-(2-피리딜디설파닐)프로판-1-올을 얻었다. MS m/z 202.1 [M+H]+.
중간체 I-2을 유사한 방식으로 L-2로부터 제조하였다.
중간체 I-3: [1-[(5-니트로-2-피리딜)디설파닐]사이클로부틸]메탄올의 합성
Figure pct00117
탈가스된 (N2) MeOH (100 mL) 중 5-니트로-2-[(5-니트로-2-피리딜)디설파닐]피리딘 (17.4 g, 56.0 mmol)의 용액에 (1-머캅토사이클로부틸)메탄올 (8.3 mL, 70.0 mmol) (N2로 탈가스됨)을 적가 방식으로 첨가하고 16시간 동안 실온에서 N2 분위기 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축 건조시켰다. 생성된 조물질을 30% EtOAc/헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 [1-[(5-니트로-2-피리딜)디설파닐]사이클로부틸]메탄올을 황색 액체 (9.0 g, 46% 수율)로서 얻었다. MS m/z 272.9 [M+H]+.
I-4 및 I-5: 3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-올 이성질체 1 및 이성질체 2의 합성
Figure pct00118
MeOH (15 mL) 중 2,2-디피리딜디설파이드 (520 mg, 2.35 mmol)의 교반 용액을 질소 가스로 5분 동안 퍼징하였다. CH2Cl2 (10 mL) 중 시스-3-머캅토부탄-2-올 (500 mg)의 질소 가스 퍼징된 용액을 0℃에서 상기에 첨가하였다. 반응 혼합물을 점진적으로 실온으로 가온되도록 하고 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하여 조 물질을 얻었고, 이를 30-40 % EA/헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 라세미 생성물을 키랄 Prep HPLC (CHIRALPAK IG; 100mm X 4.6mm X 3mic; 이동상: 0.1% DEA를 갖는 n헥산 :에탄올 80:20; 유량: 1.0 mL/분)로 분리하여 각각의 거울상이성질체를 분리하였다. 용매를 제거하여 (2S,3S)-3-(2-피리딜디설파닐)부탄-2-올* (140 mg, 이성질체-1) MS m/z 216.1 [M+H]+ 및 (2R,3R)-3-(2-피리딜디설파닐)부탄-2-올 (140 mg, 이성질체-2). MS m/z 216.1 [M+H]+를 얻었다.
I-6 및 I-7: 3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-올 이성질체 1 및 이성질체 2의 합성
Figure pct00119
MeOH (15 mL) 중 2,2-디피리딜디설파이드 (520 mg, 2.35 mmol)의 교반 용액을 질소 가스로 5분 동안 퍼징하였다. CH2Cl2 (10 mL) 중 시스-3-머캅토부탄-2-올 (500 mg)의 질소 가스 퍼징된 용액을 0℃에서 상기에 첨가하였다. 반응 혼합물을 점진적으로 실온으로 가온되도록 하고 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하여 조 물질을 얻었고, 이를 30-40 % EA/헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 라세미 생성물을 키랄 Prep HPLC (칼럼: CHIRALPAK IG (100mm X 4.6mm X 3mic) 이동상: 0.1% DEA를 갖는 n헥산:에탄올 (80:20) 유량: 1.0 mL/분)로 분리하여 각각의 거울상이성질체를 분리하였다. 용매를 제거하여 (2R,3S)-3-(2-피리딜디설파닐)부탄-2-올* (0.6 g, 이성질체-I) MS m/z 215.9 [M+H]+및 (2S,3R)-3-(2-피리딜디설파닐)부탄-2-올* (0.6 g, 이성질체-II) MS m/z 216.2 [M+H]+를 오일성 화합물로서 얻었다.
합성 중간체 I-6: 트랜스-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥산-1-올
Figure pct00120
MeOH (N2로 탈가스됨) (30 mL) 중 1,2-디(피리딘-2-일)디설판 (2.41 g, 10.9 mmol)의 용액에 트랜스-2-설파닐사이클로헥산올 (2.88 g, 21.0 mmol) (N2로 탈가스됨)을 적가하고 16시간 동안 실온에서 N2 분위기 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축 건조시켰다. 생성된 조물질을 30%의 EtOAc/헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥산-1-올을 황색 액체로서 얻었다.
Figure pct00121
키랄 분리를 0.1% 디에틸아민을 갖는 n-헥산: IPA (80:20)를 사용하는 chiralpak IG (100 mm X 4.6 mm X 3 mic)로 수행하여 (1R,2R)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥산올* 이성질체-1 (350 mg) 및 (1S,2S)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥산올* 이성질체-2 (400 mg)를 얻었다.
XXI로부터의 중간체 XV
Figure pct00122
중간체 XV-1: [4-(2-피리딜디설파닐)페닐]메탄올의 합성
Figure pct00123
AcOH : 에탄올의 혼합물 (5 mL, 1:10) 용매 중 1,2-디(피리딘-2-일)디설판 (2.68 g, 12.1 mmol)의 교반 용액을 N2 하에 탈가스하였다. 이어서 AcOH/에탄올 (5 mL) 용매의 혼합물 중 4-머캅토페닐)메탄올 (0.74 g, 5.2 mmol)을 20분에 걸쳐 적가하고 N2 분위기 하에 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응을 감압 하에서 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 60-70% EtOAc/헥산)로 정제하여 [4-(2-피리딜디설파닐)페닐]메탄올을 무색 액체로서 얻었다 (800 mg, 61% 수율).
중간체 I로부터의 카보네이트 이탈기 중간체 II
Figure pct00124
II-1: (4-니트로페닐) [(2R)-2-(2-피리딜디설파닐)프로필] 카보네이트의 합성
Figure pct00125
N2 하에 THF 중 (2R)-2-(2-피리딜디설파닐)프로판-1-올 (0.39 g, 1.94 mmol)에 피리딘 (0.16 mL, 1.94 mmol) 및 (4-니트로페닐) 카보노클로리데이트 (0.59 g, 2.91 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 N2 하에 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고 20 mL의 포화 NH4Cl로 켄칭하였다. 혼합물을 물 및 염수로 세척하고 유기층을 농축하였다. 조 혼합물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 0-50% EtOAc/헥산)로 정제하여 0.59 g, 83% of (4-니트로페닐) [(2R)-2-(2-피리딜디설파닐)프로필] 카보네이트를 얻었다. MS m/z 실측치 367.1 [M+H]+.
중간체 II-2 및 II-3을 II-1과 유사하게 합성하였다.
II-4: 4-니트로페닐((2R,3R)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00126
CH2Cl2 (2.0 mL) 중 (2R,3R)-3-(피리딘-2-일디설파닐) 부탄-2-올 (140mg, 0.651 mmol)의 교반 용액에 피리딘 (0.11 mL, 1.43 mmol), 4-니트로페닐 카보노클로리데이트 (150 mg, 0.781 mmol) 및 촉매량의 4-디메틸아미노피리딘을 실온에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 rt에서 48시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 CH2Cl2 (10 mL)로 희석하고 그 다음 물 (10 mL)으로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하여 조 물질을 얻었고, 이를 30-40% 에틸 아세테이트/헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 분획을 농축하여 조물질을 얻었고, 이것을 C18 역상 칼럼 상에서 추가로 정제하였다. 순수한 분획을 농축시켜 4-니트로페닐((2R,3R)-3-(피리딘-2-일디설파에닐)부탄-2-일) 카보네이트 (70 mg, 28 %)를 오일성 화합물로서 얻었다. MS m/z 381.0 [M+H]+.
II-5: 4-니트로페닐((2S,3S)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00127
CH2Cl2 (1.0 mL) 중 (2S,3S)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-올(80mg, 0.372 mmol)의 교반 용액에 피리딘 (0.066 mL, 0.818 mmol), 4-니트로페닐카보노클로리데이트 (89 mg, 0.446 mmol) 및 촉매량의 4-디메틸아미노피리딘을 실온에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 rt에서 48시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 CH2Cl2 (5 mL)로 희석하고 그 다음 물 (5 mL)으로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하여 조 표제 생성물을 얻었고, 이를 30-40% 에틸 아세테이트/헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 분획을 농축하여 조물질을 얻었고, 이것을 C18 역상 칼럼 상에서 추가로 정제하였다. 순수한 분획을 농축시켜 4-니트로페닐 ((2S,3S)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-일) 카보네이트 (140 mg, 58 %)를 오일성 화합물로서 얻었다. MS m/z 381,.0 [M+H]+.
II-6: 4-니트로페닐((2R,3S)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00128
CH2CL2 (10 mL) 중 (2R,3S)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-올 (0.4 g, 1.86 mmol)의 교반 용액에 피리딘 (0.36 mL, 4.09 mmol), 4-니트로페닐 카보노클로리데이트 (0.44 g, 2.32 mmol) 및 촉매량의 4-디메틸아미노피리딘을 0℃에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 CH2Cl2 (20 mL)로 희석하고 물 (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하여 조물질을 얻었고, 이것을 30-40% 에틸 아세테이트/헥산을 사용하는 실리카겔 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 화합물을 30 % EtOAc:헥산 중 혼합물로서 용리하였다. 분획을 농축시켜 조물질을 얻었고, 이를 C18 역상 칼럼 상에서 추가로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 제거하여 4-니트로페닐 ((2R,3S)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-일) 카보네이트 (0.17 g, 24.2 %)를 오일성 화합물로서 얻었다. MS m/z 381.0 [M+H]+.
II-7: 4-니트로페닐((2S,3R)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00129
CH2Cl2 (10 mL) 중 (2S,3R)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-올 (0.4 g, 1.86 mmol)의 교반 용액에 피리딘 (0.36 mL, 4.09 mmol), 4-니트로페닐 카보노클로리데이트 (0.44 g, 2.32 mmol) 및 촉매량의 4-디메틸아미노피리딘을 0℃에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 CH2Cl2 (20 mL)로 희석하고 물 (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하여 조물질을 얻었고, 이것을 30-40% 에틸 아세테이트/헥산을 사용하는 실리카겔 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 화합물을 30 % EtOAc:헥산 중 혼합물로서 용리하였다. 분획을 농축시켜 조물질을 얻었고, 이를 C18 역상 칼럼 상에서 추가로 정제하였다. 순수한 분획을 농축시켜 4-니트로페닐 ((2S,3R)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-일) 카보네이트 (0.18 g, 26 %)를 오일성 화합물로서 얻었다. MS m/z 381.0 [M+H]+.
II-8: (4-니트로페닐) [(1R,2R)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥실] 카보네이트의 합성
Figure pct00130
THF (3.0 mL) 중 (1R,2R)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥산올* (130.0 mg, 0.5 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (0.20 g, 1.5 mmol), 촉매량의 DMAP 및 4-니트로페닐 클로로포르메이트 (0.21 g, 0.10 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 rt에서 48시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC (20% EtOAc/Hex)로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응 혼합물을 물 (20.0 mL)로 켄칭하고 EtOAc (20.0 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 20-30%의 EtOAc/헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 4-니트로페닐 (4-니트로페닐) [(1R,2R)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥실] 카보네이트*를 황백색 고체 (89 mg, 40 % 수율)로서 얻었다. MS m/z 407.0 [M+H]+.
II-9: (4-니트로페닐) [(1S,2S)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥실] 카보네이트의 합성
Figure pct00131
THF (10.0 mL) 중 (1S,2S)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥산올* (0.42 g, 1.7 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (0.70g, 5.1 mmol), 촉매량의 DMAP 및 4-니트로페닐 클로로포르메이트 (0.69 g, 3.4 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 rt에서 48시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC (20% EtOAc/Hex)로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응 혼합물을 물 (20.0 mL)로 켄칭하고 EtOAc (20.0 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 20-30%의 EtOAc/헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 4-니트로페닐 (4-니트로페닐) [(1R,2R)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥실] 카보네이트*를 황백색 고체로서 얻었다 (250 mg, 35 % 수율). MS m/z 406.7 [M+H]+.
XIV로부터의 카보네이트 이탈기 중간체 XV
Figure pct00132
Figure pct00133
XV-1: (4-니트로페닐) [4-(2-피리딜디설파닐)페닐]메틸 카보네이트의 합성
Figure pct00134
CH2Cl2 (10 mL) 중 (4-(피리딘-2-일디설파닐)페닐)메탄올 (0.40 g, 1.60 mmol)의 교반 용액에 4-니트로페닐 클로로포르메이트 (0.65 g, 3.2 mmol), 피리딘 (0.25 mL, 3.20 mmol), 촉매량의 DMAP (0.005 g )을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 1.5 N HCl 용액으로 켄칭하였다. 유기층을 분리하고 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 농축하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 20-30%의 EtOAc/헥산)로 정제하여 (4-니트로페닐) [4-(2-피리딜디설파닐)페닐]메틸 카보네이트를 무색 액체로서 얻었다 (600 mg, 91% 수율); MS m/z 415.0 [M+H]+.
카보네이트 및 카바메이트 연결된 중간체 III
Figure pct00135
III-1: [(2S)-2-(2-피리딜디설파닐)프로필] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15 디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
Figure pct00136
2 mL의 무수 DMF 중 1-하이드록시벤조트리아졸 수화물 (8.64 mg, 0.0564 mmol),　미세 분쇄된 분자체 4 Å (50 mg)　(10S,23S)-23-아미노-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-5,9-디온;메탄설폰산 (25.0 mg, 0.0470 mmol) 및　피리딘 (0.0190 mL, 0.235 mmol)의 혼합물에 (4-니트로페닐) [(2S)-2-(2-피리딜디설파닐)프로필] 카보네이트 (19.0 mg, 0.0517 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 여과하고 용액을 농축하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-5% MeOH/DCM)로 정제하여 [(2S)-2-(2-피리딜디설파닐)프로필] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15 디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (29.0 mg, 수율: 93.0 %)을 얻었다. MS m/z 663.0 [M+H]+.
중간체 III-2 내지 III-9를 III-1과 유사하게 II-2 내지 II-9로부터 제조한다.
카보네이트 및 카바메이트 연결된 중간체 XVI
Figure pct00137
Figure pct00138
중간체 XVI-1을 III-1과 유사하게 XV-1로부터 제조한다.
4-니트로페닐 ( 트랜스- (3RS,4RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00139
단계 1: 라세미 트랜스-(4-하이드록시테트라하이드로푸란-3-일) 에탄티오에이트의 합성
Figure pct00140
물 (40.0 mL) 중 3,6-디옥사바이사이클로[3.1.0]헥산 (5.0 g, 0.051 mol)의 교반 용액에 티오아세트산 (4.98 mL, 0.069 mol)을 첨가하고 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC (20% EtOAc/헥산)로 모니터링하였다. 반응의 완료시, 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석하고 10% 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 분리하고 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이것을 20% EtOAc : n-헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물을 갈색 액체로서 얻었다 (4.0 g, 수율 42%). 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.35 - 4.28 (m, 2H), 4.02 - 3.98 (m, 1H), 3.81 - 3.73 (m, 2H), 3.69 - 3.62 (m, 1H), 2.37 (s, 3H).
단계 2: 라세미 트랜스-4-머캅토테트라하이드로푸란-3-올의 합성
Figure pct00141
건조 THF (20.0 mL) 중 라세미 트랜스-(4-하이드록시테트라하이드로푸란-3-일) 에탄티오에이트 (4.0 g, 24.7 mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 LAH (THF 중 1M) (27.1 mL, 27.1 mmol)을 적가 방식으로 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 점진적으로 실온으로 가온되도록 하고 2시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC (20% EtOAc : n-헥산)로 모니터링하였다. 반응의 완료시, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 1.0 N HCl (50 mL)로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 DCM (3 x 20 mL)에 추출하고, 유기층을 염수 용액 (20 mL)으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 부분적으로 증류시키고 그대로 다음 단계에서 사용하였다. (2.9 g, 조물질).
단계 3: 트랜스-(4RS,3RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-올 및 트랜스-(4SR,3SR)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-올의 합성
Figure pct00142
MeOH (N2로 탈가스됨) (10 mL) 중 2-(피리딘-2-일디설파닐)피리딘 (0.9 g, 21.7 mmol)의 용액에 4-설파닐옥솔란-3-올 (2.9 g, 24.1 mmol) (N2로 탈가스됨)을 적가하고 실온에서 질소 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축 건조시켰다. 생성된 조물질을 30%의 EtOAc : n-헥산을 사용하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 4-(피리딘-2-일디설파닐)옥솔란-3-올 (라세미 혼합물)을 황색 오일로서 얻었다. 이성질체를 키랄 분취 HPLC로 분리하였다.
키랄 분취 HPLC 조건:
칼럼: Chiralpak IA (250 mm X 20 mm X 5 mic)
이동상: 0.1% DEA를 갖는 EtOH (90:10)
유량: 19 mL/분
분할된 이성질체의 분리된 분획을 키랄 분취 HPLC로부터 수집하고 감압 하에서 증발시켜 표제 화합물을 이성질체 1 (600mg) 및 이성질체 2 (620 mg)로서 얻었다.
이성질체 1: (트랜스-(4RS,3RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-올): C9H11NO2S2에 대한 LC-MS m/z 계산치 229; 실측치 230 [M+H]+. 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.53 - 8.52 (m, 1H), 7.67 - 7.63 (m, 1H), 7.56 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.23 - 7.19 (m, 1H), 4.45 - 4.48 (m, 1H), 4.25 (t, J = 8.8Hz,1H), 4.12 (t, J = 6.8Hz,1H), 3.74 -3.67 (m, 2H), 3.48 - 3.41 (m, 1H).
이성질체 2: ( 트랜스-(4SR,3SR)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-올): C9H11NO2S2에 대한 LC-MS m/z 계산치 229; 실측치 230 [M+H]+. 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.54 - 8.53 (m, 1H), 7.68 - 7.64 (m, 1H), 7.56 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.23 - 7.20 (m, 1H), 4.49 - 4.45 (m, 1H), 4.25 (t, J = 7.6Hz,1H), 4.12 - 4.10 (m,1H), 3.74 - 3.67 (m, 2H), 3.47 - 3.44 (m, 1H).
이성질체의 절대 입체 화학을 선택적으로 할당하였다.
단계 4 : 4-니트로페닐 (트랜스-(3RS,4RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00143
DMF (10 mL) 중 트랜스-(3RS,4RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-올 (0.61g, 2.69 mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 DIPEA (1.45 mL, 8.08 mmol) 및 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (1.64 g, 5.38 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC (20% EtOAc : n-헥산)로 모니터링하였다. 반응의 완료시, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 켄칭하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 20-30%의 EtOAc : n-헥산을 사용하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 4-니트로페닐 (트랜스-(3RS,4RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일) 카보네이트를 황백색 고체로서 얻었다 (790 mg, 77% 수율). 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.50 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.67 - 7.59 (m, 2H), 7.36 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.15 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 5.44 - 5.43 (m, 1H), 4.40 - 4.25 (m, 2H), 4.03 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.92 - 3.86 (m, 1H), 3.85 - 3.79 (m, 1H); C16H14N2O6S2에 대한 LC-MS m/z 계산치 394; 실측치 395 [M+H]+.
4-니트로페닐 ( 트랜스- (3SR,4SR)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00144
DMF (10.0 mL) 중 트랜스-(3SR,4SR)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-올 (550 mg, 2.46 mmol)의 교반 용액에 질소 하에 DIPEA (1.32 mL, 7.38 mmol) 및 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (1.5 g, 4.92 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC (20% EtOAc : n-헥산)로 모니터링하였다. 반응의 완료시, 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 켄칭하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 20-30%의 EtOAc : n-헥산을 사용하는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 4-니트로페닐 (트랜스-(3SR,4SR)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일) 카보네이트를 황백색 고체로서 얻었다 (0.6 g, 70 % 수율). 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.85 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.68 - 7.59 (m, 2H), 7.35 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.14 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 5.44 - 5.43 (m, 1H), 4.40 - 4.25 (m, 2H), 4.03 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.92 - 3.86 (m, 1H), 3.85 - 3.79 (m, 1H); C16H14N2O6S2에 대한 LC-MS m/z 계산치 394; 실측치 395 [M+H]+.
4-니트로페닐 ( 트랜스- (1RS,2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜틸) 카보네이트의 합성
Figure pct00145
단계 1: 라세미 트랜스-(5-하이드록시사이클로펜탄-1-일) 에탄티오에이트의 합성
Figure pct00146
물 (30 mL) 중 6-옥사바이사이클로[3.1.0]헥산 (3.0 g, mmol)의 교반 용액에 티오아세트산 (3 mL, 39.2 mmol)을 실온에서 첨가하고 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 켄칭하고 에틸 아세테이트 (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축하여 라세미 트랜스-(5-하이드록시사이클로펜탄-1-일) 에탄티오에이트를 오일성 화합물로서 얻었다 (2.6 g, 조물질). C7H12O2S에 대한 LC-MS m/z 계산치 160.2; 실측치 143.3 [M+H - 17]+.
단계 2: 라세미 트랜스-2-머캅토사이클로펜탄-1-올의 합성
Figure pct00147
THF (20 mL) 중 라세미 트랜스-(5-하이드록시사이클로펜탄-1-일) 에탄티오에이트 (2.6 g, 16.2 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 질소 분위기 하에 LAH (1Min THF) (24 mL, 24.3 mmol)을 적가 방식으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 점진적으로 실온으로 가온되도록 하고 2시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC (20% EtOAc : n-헥산)로 모니터링하였다. 반응의 완료시, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 1N HCl 용액으로 켄칭하고 DCM에서 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 부분적으로 증발시키고 조 라세미 트랜스-2-머캅토사이클로펜탄-1-올을 다음 단계로 이월하였다 (1.9 g, 조물질).
단계 3: 트랜스-(1RS, 2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜탄-1-올 및 트랜스-(1SR, 2SR)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜탄-1-올의 합성
Figure pct00148
MeOH (10 mL) 중 2-(피리딘-2-일디설파닐)피리딘 (2.1 g, 9.65 mmol)의 용액에 질소 분위기 하에 라세미 트랜스-2-머캅토사이클로펜탄-1-올 (1.9 g, 16.1 mmol)을 적가 방식으로 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 점진적으로 실온으로 가온되도록 하고 16시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축 건조시켰다. 생성된 조물질을 실리카겔 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 화합물을 15 % EtOAc : n-헥산에서 용리하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 조합하고 감압 하에서 증발시켜 표제 화합물 (라세미 혼합물)를 황색 액체로서 얻었다. 이성질체를 키랄 분취 HPLC로 분리하였다.
키랄 분취 HPLC 조건:
칼럼: Chiralpak IA (250 mm X 20 mm X 5 mic)
이동상: 0.1% DEA를 갖는 EtOH (70:30)
유량: 19 mL/분
분리된 이성질체의 분리된 분획을 키랄 분취 HPLC로부터 수집하고 감압 하에서 증발시켜 표제 화합물을 이성질체 1 (300mg) 및 이성질체 2 (300 mg)로서 무색 오일로서 얻었다.
이성질체 1 (트랜스-(1RS, 2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜탄-1-올): C10H13NOS2에 대한 LC-MS m/z 계산치 227.34; 실측치 228.1 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.51 - 8.50 (m, 1H), 7.61 - 7.57 (m, 1H), 7.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.17 - 7.14 (m, 1H), 4.03 - 3.97 (m, 1H), 3.0 - 2.87 (m,1H), 2.11 - 2.02 (m, 3H), 1.75 -1.65 (m, 4H).
이성질체 2 (트랜스-(1SR, 2SR)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜탄-1-올): C10H13NOS2에 대한 LC-MS m/z 계산치 227.34; 실측치 228.1 [M+H]+. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.51 - 8.50 (m, 1H), 7.61 - 7.57 (m, 1H), 7.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.17 - 7.14 (m, 1H), 4.03 - 3.97 (m, 1H), 3.0 - 2.87 (m,1H), 2.11 - 2.02 (m, 3H), 1.75 - 1.65 (m, 4H).
이성질체의 절대 입체 화학을 선택적으로 할당하였다.
단계 4: 4-니트로페닐 ((1R,2R)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜틸)카보네이트의 합성
Figure pct00149
DMF (10 mL) 중 트랜스-(1RS,2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜탄-1-올 (0.3g, 1.34 mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 DIPEA (0.65 mL, 3.96 mmol) 및 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (0.8 g, 2.64 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 켄칭하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 실리카겔 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 화합물을 10 % EtOAc : n-헥산에서 혼합물로서 용리하였다. 분획을 증발 제거하여 조 화합물을 얻었고, 이를 역상 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 상기 생성물을 함유하는 분획을 감압 하에서 증발시키고 4-니트로페닐 (트랜스-(1RS,2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜틸) 카보네이트를 무색 오일 (305 mg, 59 %)로서 얻었다.
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.46 (d, J = 4.1Hz, 1H), 8.25 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.66 - 7.62 (m, 2H), 7.34 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 7.10 - 7.08 (m, 1H), 5.29 - 5.10 (m, 1H), 3.52 - 3.45 (m, 1H), 2.32 - 2.28 (m, 2H), 1.9 -1.76 (m, 4H). C17H16N2O5S2에 대한 LC-MS m/z 계산치 392.44; 실측치 393.0 [M+H]+.
4-니트로페닐 ( 트랜스- (1SR,2SR)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜틸) 카보네이트의 합성
Figure pct00150
DMF (10.0 mL) 중 (1SR,2SR)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜탄-1-올 (0.26 g, 1.14 mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 DIPEA (0.57 mL, 3.43 mmol) 및 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (0.7 g, 2.29 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (20.0 mL)로 켄칭하고 EtOAc (3 x10 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 실리카겔 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 화합물 10 % EtOAc : n-헥산에서 혼합물로서 용리하였다. 분획을 증발 제거하여 조 화합물을 얻었고, 이를 역상 칼럼 크로마토그래피 상에서 정제하였다. 상기 생성물을 함유하는 분획을 감압 하에서 증발시키고 4-니트로페닐 (트랜스-(1SR,2SR)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로펜틸) 카보네이트 (330 mg, 73.5 %)를 무색 오일로서 얻었다. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.46 (d, J = 4Hz, 1H), 8.25 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.66 - 7.62 (m, 2H), 7.34 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 7.10 - 7.08 (m, 1H), 5.29 - 5.10 (m, 1H), 3.52 - 3.45 (m, 1H), 2.32 - 2.28 (m, 2H), 1.9 -1.76 (m, 4H). C17H16N2O5S2에 대한 LC-MS m/z 계산치 392.44; 실측치 393.0 [M+H]+.
4-니트로페닐 ( 트랜스-(2RS, 3RS)- 3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00151
단계 1: 1aH, 2H, 7H, 7aH-나프토 [2, 3-b] 옥시렌의 합성
Figure pct00152
디클로로메탄 (2.00 ml) 중 1,4-디하이드로나프탈렌 (100 mg, 768 μmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 0℃에서 3-클로로벤젠-1-카보퍼옥소산 (199 mg, 1.5 eq., 1.15 mmol)을 적가로 첨가하고 16시간 동안 rt에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응물을 여과하고 디클로로메탄으로 추출하고, 중탄산나트륨 용액, 이어서 물 및 염수로 세척하였다. 2개의 층을 분리하고 조합된 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 증발시켜 조 생성물을 얻었고, 이것을 실리카겔 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 10% EtOAc 및 n-헥산에서 용리하였고, (생성물은 UV 불활성임), 분획을 수집하고 진공 하에 건조시켜 1aH,2H,7H,7aH-나프토[2,3-b]옥시렌 (85.0 mg, 581 μmol)를 오일성 화합물로서 얻었다.
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.14 (t, J = 3.2 Hz, 2H), 7.05 (t, J = 3.2 Hz, 2H), 3.48 (s, 2H), 3.32 (d, J = 17.6 Hz, 2H), 3.19 (d, J = 17.6 Hz, 2H).
단계 2: 라세미 [트랜스-(3-하이드록시-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 설파닐] (페닐) 메탄온의 합성
Figure pct00153
에톡시에탄 (4.00 mL) 중 1aH,2H,7H,7aH-나프토[2,3-b]옥시렌 (100 mg, 684 μmol)의 교반 용액에, 질소 분위기 하에 산화알루미늄 (1.00 g) (산성)을 첨가하였다. 용액을 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 티오벤조산 (482 mg, 5.1 eq., 3.49 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고 rt에서 24시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후 (반응의 진행을 TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 여과하고 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 이어서 물 및 염수 용액으로 세척하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 생성물을 20% EtOAc : n-헥산에서 용리하여 라세미 [트랜스-(3-하이드록시-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)설파닐](페닐)메탄온 (125 mg, 440 μmol)를 무색 액체로서 얻었다.
1HNMR (400 MHz, DMSO): δ 7.89 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.66 (t, 1H), 7.53 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.09 (m, 4H), 5.39 (s, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.42 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 3.12 (t, J = 16 Hz, 1H), 2.81 (t, J = 18.4 Hz, 2H).
단계 3: 라세미 트랜스-3-설파닐-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-올의 합성
Figure pct00154
메탄올 (3.00 mL) 중 [(3-하이드록시-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일)설파닐] (페닐) 메탄온 (115 mg, 404 μmol)의 교반 용액에 K2CO3 (113 mg, 2 eq., 809 μmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 0.5시간 동안 rt에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응물을 농축하여 (메탄올을 제거하고), 그리고 그 다음 pH가 2-3에 도달할 때까지 1N HCl 용액으로 산성화하여, 라세미 트랜스-3-설파닐-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올 (70.0 mg, 388 μmol)을 얻었고, 이를 다음 단계를 위해 그대로 사용하였다.
단계 4: 트랜스-(2RS, 3RS)-3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-올 및 트랜스-(2SR, 3SR)-3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-올의 합성
Figure pct00155
메탄올 (2.50 ml) 중 라세미 트랜스-3-설파닐-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올 (350 mg, 1.94 mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 2-(피리딘-2-일디설파닐)피리딘 (428 mg, 1 eq., 1.94 mmol)을 첨가하고 rt에서 16시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LC-MS로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응물을 농축킨 다음, DCM으로 희석하고, 물 그 다음 염수로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 수득된 조 생성물을 실리카겔 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 생성물을 20% EtOAc : 헥산에서 용리하였다. 생성물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물/ 아세토니트릴 중 10-20%의 0.1% 포름산)로 재정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 수집하고 진공 하에 증발 제거하여 3-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올 (350 mg, 1.21 mmol)을 황색 고체로서 얻었다. 이성질체를 키랄 분취 HPLC로 분리하였다.
1HNMR (400 MHz, DMSO): δ 8.44 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 3.2 Hz, 2H), 7.26 - 7.24 (m, 1H), 7.06 (s, 4H), 5.61 (s, 1H), 3.91 - 3.80 (m, 1H), 3.31 - 3.19 (m, 2H), 3.13 - 3.07 (m, 1H), 2.92 - 2.84 (m, 1H), 2.75 - 2.65 (m, 1H).
제조 조건:
칼럼: CHIRALPAK IA (250 mm X 420 mm X 5 mic)
이동상: 0.1% DEA를 갖는 n-헥산 : 에탄올 (50:50)
유량: 19 mL/분
이성질체를 분리하고 각각의 분획을 키랄 분취 HPLC로부터 수집하고 조합하고 증발시켜 각각의 이성질체를 얻었다. 이성질체 1을 먼저 수집하고 트랜스-(2RS, 3RS)-3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-올로서 할당하였다. 이성질체 2을 두 번째로 수집하고 트랜스-(2SR, 3SR)-3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-올로서 할당하였다. 이성질체의 절대 입체화학을 선택적으로 할당하였다.
단계 5: 4-니트로페닐 (트랜스-(2RS, 3RS)-3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 카보네이트의 합성
디메틸포름아미드 (3.00 ml, 38.7 mmol) 중 트랜스-(2RS, 3RS)-3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-올 (150 mg, 518 μmol)의 교반 용액에 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (315 mg, 2 eq., 1.04 mmol) 그 다음 N,N-디이소프로필에틸아민 (271 μL, 3 eq., 1.55 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후, 반응물을 물로 켄칭하고, DCM (3 x 5)로 추출하고, 조합된 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 증발시켜 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 플래시 칼럼 크로마토그래피 (0-40% EtOAc : n-헥산)으로 정제하고 또한 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 : ACN 중 10-50%의 0.1% 포름산)로 재정제하여, (트랜스-(2RS, 3RS)-3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 카보네이트 (133 mg, 293 μmol)를 황백색 고체로서 얻었다.
1HNMR (400 MHz, DMSO): δ 8.44 (d, 1H), 8.30 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.80 - 7.76 (m, 2H), 7.54 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.26 - 7.24 (m, 1H), 7.14 - 7.06 (m, 4H), 5.21 - 5.19 (m, 1H), 3.78 - 3.77 (m, 1H), 3.45 - 3.25 (m, 2H), 3.10 - 3.01 (m, 2H).
4-니트로페닐 ( 트랜스-(2SR,3SR)- 3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00156
디메틸포름아미드 (2.60 ml, 33.6 mmol) 중 트랜스-(2SR, 3SR)-3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-올 (130 mg, 449 μmol)의 교반 용액에 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (273 mg, 2 eq., 898 μmol) 그 다음 디이소프로필에틸아민 (13.0 mL, 3 eq., 74.6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후 (반응의 진행을 TLC로 모니터링함), 반응물을 물로 켄칭하고, DCM (3 x 5)로 추출하고, 조합된 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 증발시켜 조 생성물을 얻었고, 이를 플래시 칼럼 크로마토그래피 (0-40% EtOAc : n-헥산)로 정제하였다. 생성물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물: ACN 중 10-50%의 0.1% 포름산)로 재정제하여 4-니트로페닐 (트랜스-(2SR,3SR)-3-(피리딘-2-일디설파닐)-1, 2, 3, 4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 카보네이트 (30.0 mg, 66.0 μmol)를 황백색 고체로서 얻었다.
1HNMR (400 MHz, DMSO): δ 8.44 (d, 1H), 8.30 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.80 - 7.76 (m, 2H), 7.54 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.26 - 7.24 (m, 1H), 7.14 - 7.06 (m, 4H), 5.21 - 5.19 (m, 1H), 3.78 - 3.77 (m, 1H), 3.45 - 3.25 (m, 2H), 3.10 - 3.01 (m, 2H).
4-니트로페닐 ( 트랜스- (3RS,4RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)옥산-3-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00157
단계 1: 3,7-디옥사바이사이클로[4.1.0]헵탄의 합성
Figure pct00158
디클로로메탄 (20.0 mL) 중 3,6-디하이드로-2H-피란 (2.0 g, 23.8 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 3-클로로벤젠-1-카보퍼옥소산 (4.92 g, 1.2 eq., 28.5 mmol)을 천천히 나누어서 첨가하고 질소 분위기 하에 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 켄칭하고, 유기층을 분리하고 물 그 다음 염수로 세척하고 용액, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 증발시켜 표제 화합물 3,7-디옥사바이사이클로[4.1.0]헵탄 (1.00 g, 9.99 mmol)를 무색 오일로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : 4.03 - 3.94 (m, 2H), 3.55 - 3.49 (m, 1H), 3.46 - 3.41 (m, 1H), 3.35 (m, 1H), 3.18 (m, 1H), 2.00 (m, 2H).
단계 2: 라세미 [트랜스-(3-하이드록시테트라하이드로피란-4-일) 설파닐](페닐)메탄온의 합성:
Figure pct00159
에톡시에탄 (40 mL) 중 3,7-디옥사바이사이클로[4.1.0]헵탄 (1.00 g, 9.99 mmol)의 교반 용액에 실온에서 벤젠카보티오 S-산 (5.88 mL, 5 eq., 49.9 mmol) 그 다음 실란디온 (3.00 g, 5 eq., 49.9 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 출발 물질의 완료 시, 반응의 진행을 TLC로 모니터링하고, 반응물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 켄칭하고 그 다음 에틸 아세테이트 (2 x 10 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 그 다음 감압 하에서 증발시켜 조 생성물을 얻었고, 이를 플래시 칼럼 크로마토그래피 (0-30% EtOAc : n-헥산)로 정제하였다. 화합물을 20% EtOAc : n-헥산에서 용리하였다. 순수한 분획을 수집하고 증발시켜 라세미 [트랜스-(3-하이드록시테트라하이드로피란-4-일) 설파닐](페닐)메탄온 (2.0 g, 8.39 mmol)을 얻었다.
C12H14O3S에 대한 LC-MS m/z 계산치; 238.3, 실측치 239.1 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.43 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.09 (t, J = 17.2 Hz, 1H), 6.93 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.55 (dd, J = 4.0 Hz, 4.0 Hz, 1H), 3.37 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.28 - 3.24 (m, 1H), 3.22 - 3.18 (m, 1H), 3.01 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 2.83 (t, J = 12.4 Hz, 1H), 1.36 -1.27 (m, 1H), 1.27 (s, 2H).
단계 3: 라세미 트랜스- 4-설파닐옥산-3-올의 합성
Figure pct00160
디클로로메탄 (25 mL) 중 라세미 [트랜스-3-하이드록시테트라하이드로피란-4-일)설파닐](페닐)메탄온 (2.50 g, 10.5 mmol)의 교반 용액에 실온에서 하이드라진 수화물 (5.15 mL, 10 eq., 105 mmol)을 천천히 첨가하고 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였고, 반응의 완료시, 반응물을 1N HCl로 켄칭하여 pH를 2-3으로 조정하였다. 2개의 층을 분리하고 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 부분적으로 증발시켜 조 라세미 트랜스- 4-설파닐테트라하이드로피란-3-올을 얻었고, 이를 다음 단계에 사용하였다.
단계 4: 트랜스-(3RS,4RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로피란-3-올 및 트랜스-(3SR,4SR)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로피란-3-올의 합성
Figure pct00161
메탄올 (40 mL) 중 2-(피리딘-2-일디설파닐)피리딘 (1.85 g, 0.8 eq., 8.41 mmol)의 교반 용액에 라세미 트랜스- 4-설파닐테트라하이드로피란-3-올 ol (1.41 g, 10.5 mmol)의 교반 용액에 DCM을 0℃에서 첨가하고 그 다음 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 완료시, 완료된 반응물을 감압 하에서 증발시켜 조물질을 얻었고, 이것을 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 20% EtOAc : n-헥산에서 용리하였고, 순수한 분획을 수집하고 증발시켜 표제 생성물 4-(피리딘-2-일디설파닐)옥산-3-올 (라세미 혼합물)를 얻었다. 이성질체를 키랄 분취 HPLC로 분리하였다.
키랄 분취 HPLC 조건:
칼럼: CHIRALPAK IA (250 mm X 20 mm X 5 mic)
이동상: 0.1% DEA를 갖는 n-헥산 : IPA (90:10)
유량: 19 mL/분
이성질체를 분리하고 각각의 분획을 키랄 분취 HPLC로부터 수집하였다. 분획을 조합하고 증발시켜 각각의 이성질체를 얻었다.
(이성질체 1-350 mg, 이성질체 2 - 350 mg) C10H13NO2S2에 대한 LC-MS m/z 계산치; 243.34, 실측치 244 [M+H]+.
이성질체 1 (트랜스-(3RS,4RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로피란-3-올):
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.53 (s, 1H), 7.60 (t, J = 6.40 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.23 (t, J = 20.8 Hz, 1H), 4.28 - 4.06 (m, 1H), 3.94 (d, J = 12 Hz, 1H), 3.54 - 3.40 (m, 3H), 3.33 - 3.21 (m, 1H), 3.07 - 2.74 (m, 1H), 2.04 - 1.94 (m, 2H).
이성질체 2 (트랜스-(3SR,4SR)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로피란-3-올)
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.52 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.61 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.18 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.12 - 4.09 (m, 1H), 3.94 (d, J = 12 Hz, 1H), 3.53 - 3.47 (m, 1H), 3.47 - 3.37 (m, 1H), 3.25 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 2.80 - 2.73 (m, 1H), 1.96 -1.42 (m, 1H), 1.20 (d, J = 6.0 Hz, 2H).
이성질체의 절대 입체 화학을 선택적으로 할당하였다.
단계 5: 4-니트로페닐 (트랜스-(3RS,4RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로피란-3-일)카보네이트의 합성
DMF (8 mL) 중 (트랜스-(3RS,4RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로피란-3-올) (300 mg, 1.23 mmol)의 교반 용액에 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (750 mg, 2 eq., 2.47 mmol), 그 다음 그 다음 디-이소프로필에틸r아민 (644 μL, 3 eq., 3.70 mmol)을 실온에서 첨가하고 12시간 동안 교반하였다. 반응의 완료시, 반응물을 물과 DCM 사이에서 분할하였다. 유기층을 분리하고 염수 용액으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 증발시켜 조물질을 얻었고, 이것을 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 화합물을 혼합물로서 25% EtOAc : n-헥산에서 용리하였다. 혼합물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물/ ACN 중 0.1% 포름산의 10-60%)로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 조합하고 증발시켜 4-니트로페닐 (트랜스-(3RS,4RS)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로피란-3-일)카보네이트 (270 mg, 0.66 mmol)을 얻었다. C17H16N2O6S2에 대한 LC-MS m/z 계산치; 408.4, 실측치 409.1 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.46 (d, 1H), 8.28 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.64 - 7.52 (m, 2H), 7.41 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.09 (s, 1H), 4.87 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.25 - 4.18 (m, 1H), 3.91 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.52 - 3.42 (m, 1H), 3.20 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 2.21 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 1.98 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 1.25 (s, 1H).
4-니트로페닐 ( 트랜스- (3SR,4SR)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로피란-3-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00162
DMF (8 mL) 중 (트랜스-(3SR,4SR)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로피란-3-올) (340 mg, 1.40 mmol)의 교반 용액에 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (850 mg, 2 eq., 2.79 mmol) 그 다음 디-이소프로필에틸아민 (730 μL, 3 eq., 4.19 mmol)을 실온에서 12시간 동안 첨가하였다. 출발 물질의 완료 시, 반응 혼합물을 물과 DCM 사이에서 분할하였다. 유기층을 분리하고 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 증발시켜 조 생성물을 얻었고, 이를 플래시 칼럼 크로마토그래피 (0-40% EtOAc : n-헥산)으로 정제하였다. 원하는 생성물을 혼합물로서 용리하고 그 다음 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산/ACN의 10-50%)으로 재정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 조합하고 증발시켜 4-니트로페닐 (트랜스-(3SR,4SR)-4-(피리딘-2-일디설파닐)테트라하이드로피란-3-일) 카보네이트 (300 mg, 735 μmol)을 얻었다. C17H16N2O6S2에 대한 LC-MS m/z 계산치; 408.4, 실측치 409.1 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.46 (d, 1H), 8.28 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.66 - 7.58 (m, 2H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.09 (s, 1H), 4.87 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.25 - 4.22 (m, 1H), 3.91 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.52 - 3.42 (m, 2H), 3.20 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 2.21 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 1.98 - 1.95 (m, 1H).
4-니트로페닐 ( 트랜스- (1RS,2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐) 사이클로헵틸) 카보네이트의 합성
Figure pct00163
단계 1: 8-옥사바이사이클로[5.1.0]옥탄의 합성
Figure pct00164
디클로로메탄 (10 mL) 중 사이클로헵텐 (1.0 g, 10.4 mmol)의 교반 용액에 3-클로로벤젠-1-카보퍼옥소산 (2.15 g, 1.2 eq., 12.5 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고 그 다음 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 반응의 완료시, 반응 혼합물을 수성 포화 중탄산나트륨 용액으로 천천히 켄칭하고 혼합물을 약 30분 동안 격렬하게 교반하였다. 2개의 층을 분리하고, 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 증발시켜 원하는 생성물을 무색 액체 (700 mg, 6.24 mmol)로서 얻었다. 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.07 (s, 2H), 1.93 - 1.86 (m, 4H), 1.60 - 1.43 (m, 4H), 1.21 - 1.17(m, 2H).
단계 2: 라세미 [트랜스-(2-하이드록시사이클로헵틸)설파닐](페닐)메탄온의 합성
Figure pct00165
톨루엔 (60 mL) 중 8-옥사바이사이클로[5.1.0]옥탄 (3.00 g, 26.7 mmol)의 교반 용액에 실온에서 질소 분위기 하에 벤젠카보티오 S-산 (4.72 mL, 1.5 eq., 40.1 mmol), 이어서 2-메틸프로판-2-아미늄 클로라이드 (293 mg, 0.1 eq., 2.67 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다 (반응의 진행을 TLC로 모니터링함). 반응의 완료시, 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 켄칭하고 그 다음 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 증발시켜 조 생성물을 얻었고, 이것을 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 생성물을 20% EtOAc : n-헥산에서 용리하였고, 순수한 분획을 수집하고 증발시켜 표제 화합물 라세미 [트랜스-(2-하이드록시사이클로헵틸)설파닐](페닐)메탄온 (3.0 g, 12.0 mmol)을 얻었다. C14H18O2S에 대한 LC-MS m/z 계산치; 250.4, 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.96 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.57 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 7.4 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.88 - 3.85 (m, 1H), 3.81 - 3.77 (m, 1H), 2.09 - 2.05 (m, 1H), 2.04 - 1.62 (m, 8H), 1.55 - 1.53 (m, 2H).
단계 3: 라세미 트랜스-4-설파닐사이클로헵탄-3-올의 합성
Figure pct00166
실온에 있는 디클로로메탄 (25 mL) 중 라세미 [트랜스-(2-하이드록시사이클로헵틸)설파닐](페닐)메탄온 (2.80 g, 11.2 mmol)의 교반 용액에, 질소 분위기 하에 1,4-디설파닐부탄-2,3-디올 (173 mg, 0.1 eq., 1.12 mmol), 이어서 하이드라진 수화물 (1.37 mL, 2.5 eq., 28.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다 (반응의 진행을 TLC로 모니터링 함). 반응의 완료시, 반응 혼합물을 1N HCl로 켄칭하고 DCM (2 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 조합하고 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 유기층을 부분적으로 증발시켜 조 라세미 트랜스-4-설파닐사이클로헵탄-3-올을 얻었고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 4: 트랜스-(1RS, 2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헵탄-1-올및 트랜스-(1SR, 2SR)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헵탄-1-올의 합성
Figure pct00167
메탄올 (25 mL) 중 2-(피리딘-2-일디설파닐)피리딘 (1.73 g, 0.7 eq., 7.85 mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 0℃에서 DCM 중 라세미 트랜스-4-설파닐사이클로헵탄-3-올 (1.64 g, 11.2 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였고 반응물을 감압 하에서 증발시켰다. 조 생성물을 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 원하는 생성물을 20% EtOAc : n-헥산에서 용리하였다. 생성물을 혼합물로서 수집함에 따라, 이를 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산 : 아세토니트릴의 10-50%)로 재정제하여 라세미 트랜스-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헵탄-1-올 (1.5 g, 52%) (라세미 혼합물)을 얻었다. 이성질체를 키랄 분취 HPLC로 분리하였다.
(이성질체-1: 550 mg, 이성질체-2: 550 mg).
키랄 분취 HPLC 조건:
칼럼: CHIRALPAK IA (250 mm X 20 mm X 5 mic)
이동상: 0.1% DEA를 갖는 n-헥산 : IPA (90:10)
유량: 19 mL/분
이성질체를 분리하고 각각의 분획을 키랄 분취 HPLC로부터 수집하였다. 분획을 별도로 증발시켜 각각의 이성질체를 얻었다.
이성질체 1 (트랜스-(1RS, 2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헵탄-1-올):
LC-MS m/z 계산치 C12H17NOS2; 255.4, 실측치 256.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 8.49 (s, 1H), 7.56 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.17 (s, 1H), 3.51 (m, 1H), 2.75 - 2.73 (m, 1H), 2.08 - 1.95 (m, 2H), 1.82 - 1.67 (m, 4H), 1.57 - 1.25 (m, 4H).
이성질체 2 (트랜스-(1SR, 2SR)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헵탄-1-올):
LC-MS m/z 계산치 C12H17NOS2; 255.4, 실측치 256.2 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.50 (d, J = 4.40 Hz, 1H), 7.58 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 7.13 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 6.18 (s, 1H), 3.53 - 3.49 (m, 1H), 2.77 - 2.72 (m, 1H), 2.11 - 2.08 (m, 1H), 2.00 - 1.96 (m, 1H), 1.84 - 1.67 (m, 4H), 1.59 - 1.45 (m, 4H).
이성질체의 절대 입체 화학을 선택적으로 할당하였다.
단계 5: 4-니트로페닐 (트랜스-(1RS,2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐) 사이클로헵틸) 카보네이트의 합성
DMF (10 mL) 중 트랜스-(1RS, 2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헵탄-1-올 (500 mg, 1.96 mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (1.49 g, 2.5 eq., 4.89 mmol) 그 다음 디이소프로필에틸아민 (1.02 mL, 3 eq., 5.87 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 교반하였다. 반응의 완료시, 반응 혼합물을 물과 DCM 사이에서 분할하였다. 2개의 층을 분리하고 유기층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 증발시켜 조 생성물을 얻었고, 이를 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 생성물을 혼합물로서 23% EtOAc : n-헥산에서 용리하였다. 혼합물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물/ ACN 중 0.1% 포름산의 10-60%)로 재정제하여 표제 생성물 4-니트로페닐 (트랜스-(1RS,2RS)-2-(피리딘-2-일디설파닐) 사이클로헵틸) 카보네이트 (450 mg, 1.07 mmol))을 얻었다. C19H20N2O5S2에 대한 LC-MS m/z 계산치; 420.5, 실측치 421.3 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.45 (s, 1H), 8.27 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.73 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.62 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.09 (m, 1H), 5.04 - 5.03 (m, 1H), 3.22 (m, 1H), 2.15 - 2.00 (m, 3H), 1.87 - 1.79 (m, 2H), 1.72 - 1.63 (m, 4H), 1.54 - 1.49 (m, 2H).
4-니트로페닐 ( 트랜스- (1SR,2SR)-2-(피리딘-2-일디설파닐) 사이클로헵틸) 카보네이트의 합성
Figure pct00168
DMF (10 mL) 중 트랜스-(1SR,2SR)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헵탄-1-올 (580 mg, 2.27 mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (1.73 g, 2.5 eq., 5.68 mmol) 그 다음 디-이소프로필에틸아민 (1.38 mL, 3.5 eq., 7.95 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 완료시, TLC로 모니터링하고, 반응 혼합물을 물과 DCM 사이에서 분할하였다. 2개의 층을 분리하고 조합된 유기층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 증발시켰다. 조 생성물을 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 원하는 생성물을 혼합물로서 23 - 25% EtOAc : n-헥산에서 용리하였다. 생성물을 역상 칼럼 크로마토그래피 (물/ ACN 중 0.1% 포름산의 10-60%)로 재정제하여 표제 화합물 4-니트로페닐 (트랜스-(1SR,2SR)-2-(피리딘-2-일디설파닐) 사이클로헵틸) 카보네이트 (450 mg, 1.07 mmol))를 얻었다. C19H20N2O5S2에 대한 LC-MS m/z 계산치; 420.5, 실측치 421.3 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.46 (s, 1H), 8.27 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.76 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.66 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12 (m, 1H), 5.04 - 5.03 (m, 1H), 3.23 (m, 1H), 2.12 - 2.00 (m, 2H), 1.87 - 1.79 (m, 3H),1.63 - 1.49 (m, 6H).
4-니트로페닐 ( 트랜스- (1RS,2RS)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00169
단계 1: 1aH,2H,3H,7bH-나프토[1,2-b]옥시렌의 합성
Figure pct00170
디클로로메탄 (75 mL) 중 1,2-디하이드로나프탈렌 (2.0 g, 15.4 mmol)의 교반 용액에 포화 탄산수소나트륨의 포화 용액 (75 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 이러한 혼합물에 3-클로로벤젠-1-카보퍼옥소산 (5.30 g, 2 eq., 30.7 mmol)을 30분에 걸쳐 부분씩 첨가하였다. 첨가 후, 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반되도록 하였다. 반응을 TLC로 모니터링하였다. 그 후, 반응 완료, 2개의 층을 분리하고 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하여 1aH,2H,3H,7bH-나프토[1,2-b]옥시렌 (2.77 g)을 얻었다. 수득된 조물질을 다음 단계를 위해 임의의 추가 정제없이 직접 사용하였다.
단계 2: 라세미 [트랜스-(2-하이드록시-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-1-일)설파닐] (페닐) 메탄온의 합성
Figure pct00171
에톡시에탄 (20 mL) 중 1aH,2H,3H,7bH-나프토[1,2-b]옥시렌 (2.25 g, 15.4 mmol)의 교반 용액에 실란디온 (4.50 g, 74.9 mmol) 및 벤젠카보티오 S-산 (9.06 mL, 5 eq., 77.0 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반되도록 하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응 완료 후, 반응 혼합물을 포화 탄산나트륨 용액 (25 mL)으로 켄칭하고 에틸 아세테이트 (2 x 20mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물, 염수로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하여 조물질을 얻었고, 이것을 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 라세미 [트랜스-(2-하이드록시-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-1-일)설파닐] (페닐) 메탄온을 황색 액체로서 얻었다 (1.57 mg, 35.87%).
단계 3: 라세미 트랜스-1-설파닐-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올의 합성
Figure pct00172
디클로로메탄 (25.0 mL) 중 라세미 트랜스-[(2-하이드록시-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-1-일)설파닐](페닐)메탄온 (1.40 g, 4.92 mmol)의 교반 용액에 (2R,3R)-1,4-디설파닐부탄-2,3-디올 (144 mg, 0.19 eq., 935 μmol) 및 하이드라진 수화물 (60.4 μL, 0.25 eq., 1.23 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응을 TLC로 모니터링하였다. 반응 완료 후, 반응 혼합물을 HCl 용액 (pH=1~2)으로 켄칭하였다. DCM 층을 분리하고 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축하여 라세미 트랜스-1-설파닐-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올을 얻었고, 이를 다음 단계를 위해 그대로 사용하였다.
단계 4: 트랜스-(1RS,2RS)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올 및 트랜스-(1SR,2SR)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올의 합성
Figure pct00173
이성질체 1 트랜스 (1RS, 2RS) 이성질체 2 트랜스 (1SR, 2SR)
0℃에 있는 메탄올 (5 mL) 중 2-(피리딘-2-일디설파닐)피리딘 (867 mg, 0.8 eq., 3.94 mmol)의 교반 용액에. 여기에 이전의 단계에서 취한 DCM 중 라세미 트랜스-1-설파닐-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올을 적가하였다. 반응을 rt에서 16시간 동안 교반되도록 하였다. 반응을 LCMS 및 TLC로 모니터링하였다. 반응 완료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하여 조물질을 얻었고, 이것을 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 라세미 1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올을 황색 오일로서 얻었고, 이를 역상 칼럼 크로마토그래피로 추가 정제하여 무색 오일 (380 mg, 26.69%)을 얻었다. 수득한 라세미 생성물을 키랄 크로마토그래피로 분리하여 이성질체-1: 130 mg; 이성질체-2: 190 mg를 얻었다.
제조 조건:
칼럼: CHIRALPAK IA (250 mm X 420 mm X 5 mic)
이동상: 0.1% DEA를 갖는 n-헥산 : 에탄올 (50:50)
유량: 19 mL/분
이성질체-1(트랜스-(1RS,2RS)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올):
LC-MS m/z 계산치 C15H15NOS2; 289.4, 실측치 290.1 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.07(d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.61 - 7.57(m, 1H), 7.48 - 7.44 (m, 2H), 7.36 - 7.34 (m, 1H), 7.18-7.13 (m, 3H), 4.98 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.24 (m, 1H), 3.07-2.99 (m, 1H), 2.91-2.80 (m, 1H).
이성질체-2(트랜스-(1SR,2SR)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올)
LC-MS m/z 계산치 C15H15NOS2; 289.4, 실측치 290.1 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.55 (d, J=4.0 Hz, 1H), 7.77 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.58 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.37(d, J=8.4 Hz, 1H), 7.26-7.17 (m, 3H), 7.08 (d, J=7.2 Hz, 1H), 4.15 (d, J=8.0 Hz, 1H), 3.97-3.93 (m, 1H), 2.89 (d, J=4.8 Hz, 2H), 2.32-2.28 (m, 1H), 1.97-1.87 (m, 2H).
이성질체의 절대 입체 화학을 선택적으로 할당하였다.
단계 5. 4-니트로페닐 (트랜스-(1RS,2RS)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 카보네이트의 합성
N,N-디메틸포름아미드 (2.50 mL) 중 트랜스-(1RS,2RS)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올 (170 mg, 587 μmol)의 교반 용액에 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (447 mg, 2.5 eq., 1.47 mmol) 그 다음 디이소프로필에틸아민 (307 μL, 3 eq., 1.76 mmol)을 적가로 rt에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 12시간 동안 밀봉 튜브에서 교반하였다. 반응을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응 완료 후, 반응물을 물 (5 mL)과 DCM (5 mL) 사이에서 분할하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 증발시켜 조물질을 얻었고, 이것을 플래시 칼럼 크로마토그래피 (헥산 중 0-40% EA)로 정제하고 또한 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산/ACN의 10-70%)로 재정제하여 4-니트로페닐 (트랜스-(1RS,2RS)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 카보네이트 (70.0 mg, 154 μmol)를 무색 고무질 고체 (70 mg, 26.22%)로서 얻었다. C22H18N2O4S2에 대한 LC-MS m/z 계산치; 454.5, 실측치 455.3 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.73(d, J=20.4 Hz, 1H), 8.22(d, J=8.4 Hz, 2H), 7.67(s, 2H), 7.50(m, 1H), 7.32(d, J=8.4 Hz, 2H), 7.25-7.16(m, 4H), 5.51(s, 1H), 4.52(s, 1H), 3.01-2.85(m, 2H), 2.63(m, 1H), 2.26-2.22(m, 1H).
4-니트로페닐 ( 트랜스- (1SR,2SR)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 카보네이트의 합성
Figure pct00174
N,N-디메틸포름아미드 (1.50 mL) 중 트랜스-(1SR,2SR)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올 (120 mg, 415 μmol)의 교반 용액에 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (315 mg, 2.5 eq., 1.04 mmol) 그 다음 디이소프로필에틸아민 (217 μL, 3 eq., 1.24 mmol)을 적가로 rt에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 12시간 동안 밀봉 튜브에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응 완료 후, 반응물을 물 (5 mL)과 DCM (5 mL) 사이에서 분할하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 증발시켜 조물질을 얻었고, 이것을 플래시 칼럼 크로마토그래피 (헥산 중 0-40% EA)로 정제하고 또한 역상 칼럼 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산/ACN의 10-70%)로 재정제하여 4-니트로페닐 (트랜스-(1SR,2SR)-1-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-일) 카보네이트 (65.0 mg, 143 μmol))를 무색 고무질 고체 (65mg, 34.49%)로서 얻었다.
LC-MS m/z 계산치 C22H18N2O4S2; 454.5, 실측치 455.3 [M+H]+; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.55(m, 1H), 8.22(d, J=7.6 Hz, 2H), 7.69(s, 2H), 7.51(m, 1H), 7.32(d, J=7.6 Hz, 2H), 7.25-7.16(m, 4H), 5.51(s, 1H), 4.52(s, 1H), 3.01-2.86(m, 2H), 2.62(m, 1H), 2.26(m, 1H).
4-니트로페닐 ( 트랜스- 4-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥실) 카보네이트의 합성
Figure pct00175
단계 1: 트랜스-4-머캅토사이클로헥산-1-올의 합성
Figure pct00176
에탄올 (10 mL) 중 7-옥사바이사이클로[2.2.1]헵탄 (1.00 g, 10.2 mmol)의 교반 용액에 4-메틸벤젠-1-설폰산 (2.63 g, 1.5 eq., 15.3 mmol), 티오우레아 (1.16 g, 1.5 eq., 15.3 mmol)을 첨가하고 반응물을 24시간 동안 80℃로 가열시켰다. 이어서, 반응물을 실온으로 냉각시키고 50% 수성 수산화나트륨 용액 (1.30 g, 3.2 eq., 32.6 mmol)을 반응물에 첨가하고 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응의 완료 후, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에서 농축하고 10% H2SO4 용액으로 산성화시켰다. 이어서, 반응물을 DCM으로 추출하고 다음 단계를 위해 그대로 사용하였다.
단계 2: 트랜스-4-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥산-1-올의 합성
Figure pct00177
0℃에 있는 메탄올 (10.0 mL) 중 2-(피리딘-2-일디설파닐)피리딘 (1.60 g, 0.8 eq., 7.26 mmol)의 교반 용액에 (단계 1) 4-설파닐사이클로헥산-1-올 (1.20 g, 9.08 mmol)로부터의 유기층을 첨가하였다. 첨가의 완료 시, 반응물 실온에서 16시간 동안 교반되도록 하였다. 반응의 완료 후, 반응물을 농축시키고 조 생성물을 (0-40% EtOAc : n-헥산을 사용하는) 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 생성물을 얻었다. 생성물을 0.1% 포름산 및 ACN을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피로 재정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 수집하고 감압 하에서 농축하여 표제 생성물을 황색 오일로서 얻었다 (1.60 g, 73 % 수율). C11H15NOS2에 대한 LC-MS m/z 계산치 241; 실측치 242 [M+H] +.
단계 3: 4-니트로페닐 (트랜스-4-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥실) 카보네이트의 합성
N,N-디메틸포름아미드 (3 mL) 중 트랜스-4-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥산-1-올 (400 mg, 1.66 mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (907 mg, 1.8 eq., 2.98 mmol), 에틸비스(프로판-2-일)아민 (892 μL, 3 eq., 4.97 mmol)을 첨가하고 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응물을 물 (15 mL)로 켄칭하고 DCM (3 x 10 mL)로 추출하였다. 2개의 층을 분리하고 조합된 유기층을 물, 그 다음 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축하였다. 수득된 조 생성물을 플래시 칼럼 크로마토그래피 (0-30% EtOAc : n-헥산)으로 정제하였다. 생성물을 0.1% 포름산 및 ACN을 사용하는 역상 칼럼 크로마토그래피로 재정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 수집하고 감압 하에서 농축하여 4-니트로페닐 (트랜스-4-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥실) 카보네이트를 황색 오일로서 얻었다 (0.3 g, 73 % 수율). C18H18N2O5S2에 대한 LC-MS m/z 계산치 407; 실측치 407 [M+H] +; 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.49 - 8.42 (m, 1H), 8.26 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.71 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.65 - 7.60 (m, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.12 - 7.05 (m, 1H), 4.75 - 4.65 (m, 1H), 2.98 - 2.87 (m, 1H), 2.28 - 2.18 (m, 4H), 1.68 - 1.50 (m, 4H).
(2R)-3-메틸-2-(피리딘-2-일디설파닐) 부틸 4-니트로페닐 카보네이트의 합성
Figure pct00178
단계 1. 세슘 벤조일설파나이드의 합성
Figure pct00179
메탄올 (40.0 mL) 중 벤젠카보티오 S-산 (5.00 g, 36.2 mmol)의 교반 용액에 탄산세슘 (7.72 g, 1.1 eq., 39.8 mmol)을 10 내지 15분에 걸쳐, 질소 분위기 하에 나누어서 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 2시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후 (TLC로 판단함), 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 고체 잔류물을 10 mL의 아세톤으로 희석하고 백색 고체 (CsHCO3)을 여과 제거하였다. 이 공정을 2회 반복하여 모든 CsHCO3의 제거를 보장하였다. 그 다음 아세톤을 농축시켜 세슘 벤조일설파나이드 (9.50 g, 35.2 mmol)를 무색 고체로서 얻었다. 1HNMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.08 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.37 - 7.27 (m, 3H).
단계 2. (2R)-2-(벤조일설파닐)-3-메틸부탄산의 합성
Figure pct00180
N,N-디메틸포름아미드 (14.0 mL) 중 (2S)-2-브로모-3-메틸부탄산 (2.00 g, 11.0 mmol)의 교반 용액에 세슘 벤조일설파나이드 (2.98 g, 11.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 20시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였고, 반응의 완료 후, 반응 혼합물을 디에틸 에테르 (3 x 15 mL)로 희석하고 물 (3 x 15 mL)로 세척하였다. 에테르성 층을 분리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축하였다. 수득된 잔류물을 n-헥산으로부터 재결정화하여 (2R)-2-(벤조일설파닐)-3-메틸부탄산 (2.50 g, 10.5 mmol)를 오일성 화합물로서 얻었다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.93 (s, 1H), 7.92 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.69 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.55 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 4.14 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 2.30 - 2.22 (m, 1H), 1.01 - 0.89 (m, 6H).
단계 3. (2R)-3-메틸-2-설파닐부탄-1-올의 합성
Figure pct00181
에톡시에탄 (50.0 mL) 중 (2R)-2-(벤조일설파닐)-3-메틸부탄산 (2.50 g, 10.5 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 리튬알루미늄하이드라이드 (52.5 mL, 5 eq., 52.5 mmol)을 적가 방식으로 질소 분위기 하에 첨가하였다. 첨가의 완료 후, 빙욕을 제거하고 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC로 모니터링하였다. 출발 물질의 완료 후, 반응 혼합물을 빙욕에서 냉각시키고 1.0 N HCl (30 mL)로 0℃에서 켄칭하였다. 반응 혼합물을 DCM (20 mL)로 추출하고 LAH 환원으로부터 나머지 겔-유사 물질을 디에틸 에테르 (10 mL)으로 세척하였다. 조합된 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 다음 단계로 추가로 수행하였다.
단계 4. (2R)-3-메틸-2-(피리딘-2-일디설파닐) 부탄-1-올의 합성
Figure pct00182
MeOH (5 mL) 중 (2R)-3-메틸-2-설파닐부탄-1-올 (1.20 g, 9.98 mmol)의 교반 용액에 2-(피리딘-2-일디설파닐)피리딘 (1.76 g, 0.8 eq., 7.99 mmol)을 질소 분위기 하에 첨가하고 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LC-MS로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응물을 농축하고, 그리고 그 다음 DCM으로 추출하였다. 2개의 층을 분리하고 조합된 유기층을 물 그 다음 염수로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 증발시켰다. 조 생성물을 (12 g 칼럼을 사용하는) 실리카겔 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하고, 이것을 50% EtOAc : n-헥산에서 용리하였고 또한 역상 칼럼 크로마토그래피 (물/아세토니트릴 중 10-20%의 0.1% 포름산)로 재정제하였다. 상기 생성물을 함유하는 분획을 수집하고 진공 하에 증발 제거하여 표제 생성물을 얻었다. 생성물을 분취 HPLC로 재정제하였다.
분취 HPLC 조건:
칼럼: X-BridgeC-18 (250mm X 4.6mm X 5mic)
이동상(A): 물 중 0.1% 암모니아
이동상(B): 아세토니트릴
유량: 19 mL/분
구배 B: 0/10,12/60,22/95,25/95,27/10,30/10
분취 HPLC로부터 수집된 분획을 조합하고 증발시켜 표제 생성물 3-(피리딘-2-일디설파닐)-1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌-2-올 (350 mg, 1.21 mmol)을 황색 고체로서 얻었다. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.49 (d, J = 4 Hz,1H), 7.55 - 7.54 (m, 1H), 7.36 (d, J = 8.4 Hz,1H), 7.13 (t, J = 6.4Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 12.4 Hz, 1H), 3.66 - 3.60 (m, 1H), 2.75 - 2.70 (m, 1H), 2.01 - 1.92 (m, 1H), 1.10 - 1.01 (m, 7H).
단계 5. (2R)-3-메틸-2-(피리딘-2-일디설파닐) 부틸 4-니트로페닐 카보네이트의 합성
N,N-디메틸포름아미드 (2.50 mL) 중 (2R)-3-메틸-2-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-1-올 (800 mg, 3.49 mmol)의 교반 용액에 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (2.12 g, 2 eq., 6.98 mmol) 그 다음 디이소프로필에틸아민 (1.82 mL, 3 eq., 10.5 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응물을 물과 DCM 사이에서 분할하였다. 2개의 층을 분리하고 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 증발시켜 조 생성물을 얻었고, 이것을 플래시 칼럼 크로마토그래피 (0-40% EtOAc : n-헥산)로 정제하였다. 생성물을 역상 크로마토그래피 (물 중 0.1% 포름산/ACN의 10-70%)로 재정제하여 표제 생성물 (2R)-3-메틸-2-(피리딘-2-일디설파닐)부틸 4-니트로페닐 카보네이트 (600 mg, 1.52 mmol)를 무색 검으로서 얻었다. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.45 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz,1H), 7.63 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.08 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 4.59 - 4.48 (m, 2H), 3.08 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 2.21 - 2.13 (m, 1H), 1.14 - 1.06 (m, 6H).
단계 2로부터, (2R)-2-브로모-3-메틸부탄산을 사용하여 (2S)-3-메틸-2-(피리딘-2-일디설파닐) 부틸 4-니트로페닐 카보네이트를 합성하기 위해 동일한 절차를 수행하였다.
중간체 III-2로부터 실시예 2의 화합물의 합성
Figure pct00183
Pv2　(25.0 mg, 0.061 mmol; 자유 유동 고체로서),　[(2S)-2-(2-피리딜디설파닐)프로필] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (6.03 mg, 0.091 mmol)를 수용하고 있는 바이알에서, 1 mL의 CH3CN 및 0.5 mL의 물을 첨가하였다. 이것에 N-메틸 모폴린 (22.7 mg, 0.224 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-85% CH3CN/H2O+0.05% TFA, 15분)로 직접 정제하여 원하는 생성물　(13.0 mg, 수율: 47.0 %)을 얻었다.
실시예 1 및 3-9 (아래의 표 4 참조)의 화합물을 각각을 중간체 III-1 및 III-3 내지 III-9로부터 실시예 2의 화합물과 유사하게 합성하였다.
중간체 XVI-1로부터 실시예 10의 화합물의 합성
Figure pct00184
DMF 및 PBS을 30분 동안 N2 스트림을 사용하여 탈가스하였다. 별도의 바이알에　Pv2　(25.0 mg, 0.061 mmol; 자유 유동 고체로서),　[4-(2-피리딜디설파닐)페닐]메틸 N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (6.5 mg, 0.09 mmol),　1.5 mL의 DMF 및 0.5 mL의 PBS을 넣었다. 이것에 CH3CO2H (0.0347 mL, 0.606 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC (PrepSlope_4min, 30-100% CH3CN/H2O+0.05%TFA, 18분)로 정제하여 원하는 생성물　(3.0 mg, 수율: 10.7 %)을 얻었다.
본 발명의 화합물 및 분석 데이터는 아래에 제시되어 있다.
Figure pct00185
Figure pct00186
Figure pct00187
실시예 11: 화합물 11의 합성
Figure pct00188
단계 1. 2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥산-1-올의 합성
Figure pct00189
MeOH (N2로 탈가스됨) (30 mL) 중 1,2-디(피리딘-2-일)디설판 (15.2 g, 68.9 mmol)의 용액에 (1-머캅토사이클로부틸)메탄올 (11.4 g, 86.2 mmol) (N2로 탈가스됨)을 적가하고 16시간 동안 실온에서 N2 분위기 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축 건조시켰다. 생성된 조 물질을 30% EtOAC/헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 표제 화합물을 황색 액체로서 얻었다. 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.54-8.53 (m, 1H), 7.60-7.56 (m, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.17-7.14 (m, 1H), 3.38-3.34 (m, 1H), 2.62-2.57 (m, 1H), 2.11-2.02 (m, 1H), 1.75-1.74 (m, 2H), 1.61-1.60 (m, 1H), 1.42-1.24 (m, 4H).
표제 화합물을 키랄 분취 HPLC 조건을 거쳤다 (Chiralpak IG : 250 mm x 20 mm x 5 mic; 0.1% 디에틸아민을 갖는 n-헥산 : IPA (80:20); 19 mL/분; 25 oC (실온). (1R,2R)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥산-1-올 (4.5 g, 18.6 mmol)은 먼저 제1 (체류 시간: 3.9 분), 이어서 (1S,2S)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥산-1-올 (체류 시간: 11.3 분)을 용리하였다. 절대 입체화학은 단계 2의 생성물을 보고된 절대 입체화학을 갖는 키랄 물질과 비교함으로써 확인되었다 ([Monaco, M. R.; J. Am. Chem. Soc. 2014, 136, 49, 16982-16985] 참조).
단계 2. 4-니트로페닐 ((1S,2S)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥실) 카보네이트의 합성.
Figure pct00190
DMF (90.0 mL) 중 (1R,2R)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥산-1-올 (4.5 g, 18.6 mmol)의 용액에 DIPEA (10.3 mL, 56.0 mmol) 및 비스(4-니트로페닐) 카보네이트 (11.35 g, 27.3 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC (20% EtOAc/헥산)로 모니터링하였다. 반응의 완료 후, 반응 혼합물을 물 (20.0 mL)로 켄칭하고 EtOAc (20.0 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에서 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이것을 20-30% EtOAc/헥산을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물을 황백색 고체로서 얻었다 (5.0 g, 66% 수율). 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.44 (d, J = 4 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.61-7.57 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 7.08-7.05 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.85-4.74 (m, 1H), 3.03-2.92 (m, 1H), 2.28 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.20-2.12 (m, 1H), 1.85-1.62 (m, 3H), 1.45-1.25 (m, 3H). LC-MS m/z 계산된: 406.7; 실측치: 407.4 [M+H]+.
단계 3. [(1S,2S)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥실] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성.
Figure pct00191
10 mL의 건조 DMF 중 (10S,23S)-23-아미노-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-5,9-디온 메탄설폰산 (250 mg, 0.470 mmol)에 (1R,2R)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥산-1-올 (단계 2로부터; 191 mg, 0.470 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (122 mg, 0.941 mmol) 및 DMAP (115 mg, 0.941 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. LC-MS는 원하는 커플링 생성물이 형성되었음을 나타내었다. 그 다음 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 수성 NH4Cl, H2O, 및 염수로 세척하였다. 혼합물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 그리고 농축하였다. 조 잔류물을 0-5% MeOH/디클로로메탄을 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 240 mg의 원하는 생성물을 72.6% 수율 (240 mg)로 얻었다.
단계 4. Pv1 (화합물 11)과의 커플링
바이알에 Pv1 (275 mg,.0811 mmol)을 첨가하였고, 단계 3의 화합물 (74.1 mg, 0.105 mmol), 아세토니트릴 (10 mL) 및 물 (5 mL)을 첨가하였다. n-메틸모폴린 (0.303 g,.0030 mol)을 이러한 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. LC-MS는 원하는 커플링된 생성물이 형성되었음을 나타내었다.
반응 혼합물을 역상 HPLC (20-85% 아세토니트릴/물, Sunfire Prep C18 칼럼 (10 μm, 50x150 mm) 상의 0.5% 아세트산, 체류 시간: 7.022분)로 직접 정제하여 213 mg의 원하는 생성물을 68% 수율 (213 mg)로 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1291.6
실시예 12: 화합물 12의 합성
Figure pct00192
단계 1. [(1R,2R)-1-메틸-2-(2-피리딜디설파닐)프로필] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 1-하이드록시벤조트리아졸 수화물 (8.64 mg, 0.0564 mmol),　미세 분쇄된 분자체 4 Å (50 mg), 및　(10S,23S)-23-아미노-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-5,9-디온;메탄설폰산 (25.0 mg, 0.0470 mmol) 및　피리딘 (0.0190 mL, 0.235 mmol)의 혼합물에 [(1R,2R)-1-메틸-2-(2-피리딜디설파닐)프로필] (4-니트로페닐) 카보네이트 (19.7 mg, 0.470 mmol) (II-4: 4-니트로페닐((2R,3R)-3-(피리딘-2-일디설파닐)부탄-2-일) 카보네이트의 합성 참조)를 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 여과하고, 그리고 용액을 농축하였다. 그 다음 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-5% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (35.0 mg, 0.0517 mmol, 수율: 110 %)을 얻었다.
단계 2. 펩티드 Pv1 (화합물 12)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(50.0 mg, 14.7e-5 mol), [(1R,2R)-1-메틸-2-(2-피리딜디설파닐)프로필] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.013 g, 1.92e-5 mol),　2 mL의 ACN 및 1 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.060 mL, 0.000545 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-85% ACN/H2O+0.05% TFA, 13분; 체류 시간: 6.95분)로 직접 정제하여 화합물 12 (0.0350 g, 9.10e-6 mol, 수율: 61.8 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1281.9
실시예 13: 화합물 13의 합성
Figure pct00193
화합물 13을, 단계 2에서 ((1S,2S)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥실) 카보네이트를 ((1R,2R)-2-(피리딘-2-일디설파닐)사이클로헥실) 카보네이트로 대체하여 화합물 11과 유사하게 만들었다. Sunfire Prep C18 칼럼 (10 μm, 50x150 mm) (20-85% 아세토니트릴/물, 0.5% 아세트산); 체류 시간: 6.609 분. ESI (M+3H/3)3+: 1290.3
실시예 14: 화합물 14의 합성
Figure pct00194
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(1RS,2RS)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜틸] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 트랜스-(1RS,2RS)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜탄-1-올로서 할당된 라세미 트랜스-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜틸의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리될 제1 입체이성질체를 사용하여 화합물 11의 합성에 기재된 유사한 합성 방법에 따라 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(1RS,2RS)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (50 mg, 0.0941 mmol), DMAP (23.0 mg, 0.188 mmol),　및　(4-니트로페닐) [트랜스-(1RS,2RS)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜틸] 카보네이트 (40.6 mg, 0.103 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (35 μL, 0.188 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-5% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (33.0 mg, 0.0479 mmol, 수율: 50.9 %)을 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 14)과의 커플링
바이알에　펩티드 Pv1　(50.0 mg, 1.47e-5 mol),　[트랜스-(1RS,2RS)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.0124 g, 1.80e-5 mol),　2 mL의 ACN 및 1 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.060 mL, 0.000545 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-90% ACN/H2O+0.05% TFA, 16분; 체류 시간: 6.761분)로 직접 정제하여 화합물 14 (0.0360 g, 9.34e-6 mol, 수율: 63.3 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1286.3.
실시예 15: 화합물 15의 합성
Figure pct00195
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(1SR,2SR)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜틸] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(1SR,2SR)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜탄-1-올로 할당된 라세미 트랜스 -2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜틸의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리될 제2 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(1SR,2SR)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (50 mg, 0.0941 mmol), DMAP (23.0 mg, 0.188 mmol), 및 (4-니트로페닐) [트랜스-(1SR,2SR)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜틸] 카보네이트 (38.2 mg, 0.0974 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (35 μL, 0.188 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-5% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (29.0 mg, 0.0421 mmol, 수율: 44.8 %)을 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 15)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(50.0 mg, 1.47e-5 mol),　트랜스-[(1SR,2SR)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로펜틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.0124 g, 1.80e-5 mol),　2 mL의 ACN 및 1 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.060 mL, 0.000545 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-90% ACN/H2O+0.05% TFA, 16분; 체류 시간: 6.883분)로 직접 정제하여 화합물 15　(0.0280 g, 7.26e-6 mol, 수율: 49.3 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1285.9.
실시예 16: 화합물 16의 합성
Figure pct00196
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(3RS,4RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(3RS,4RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-올로서 할당된 라세미 트랜스-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-올의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리된 제1 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(3RS,4RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (50 mg, 0.0941 mmol), DMAP (23.0 mg, 0.188 mmol), 및 (4-니트로페닐) [트랜스-(3RS,4RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일] 카보네이트 (38.2 mg, 0.0969 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (35 μL, 0.188 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-5% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (40.0 mg, 0.0579 mmol, 수율: 61.6 %)를 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 16)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(50.0 mg, 1.47e-5 mol),　[트랜스-(3RS,4RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.0124 g, 1.80e-5 mol),　2 mL의 ACN 및 1 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.060 mL, 0.000545 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-80% ACN/H2O+0.05% TFA, 15분; 체류 시간: 6.633분)로 직접 정제하여 화합물 16　(0.0290 g, 7.52e-6 mol, 수율: 51.0 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1286.4.
실시예 17: 화합물 17의 합성
Figure pct00197
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-올로서 할당된 라세미 트랜스-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-올의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리될 제2 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (50 mg, 0.0941 mmol), DMAP (23.0 mg, 0.188 mmol), 및 (4-니트로페닐) [트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일] 카보네이트 (38.2 mg, 0.0969 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (35 μL, 0.188 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-5% MeOH/DCM)로 정제하여 [트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (31.0 mg, 0.0449 mmol, 수율: 47.7 %)를 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 17)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(50.0 mg, 1.47e-5 mol),　[트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로푸란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.0124 g, 1.80e-5 mol),　2 mL의 ACN 및 1 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.060 mL, 0.000545 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-85% ACN/H2O+0.05% TFA, 13분; 체류 시간: 6.670분)로 직접 정제하여 화합물 17　(0.0170 g, 4.41e-6 mol, 수율: 29.9 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1286.7.
실시예 18: 화합물 18의 합성
Figure pct00198
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(2RS,3RS)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(2RS,3RS)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-올로서 할당된 라세미 트랜스-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-올의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리된 제1 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(2RS,3RS)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (25 mg, 0.0470 mmol), DMAP (11.5 mg, 0.0941 mmol), 및　(4-니트로페닐) [트랜스-(2RS,3RS)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] 카보네이트 (32.1 mg, 0.0705 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (18 μL, 0.941 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (26.0 mg, 0.0346 mmol, 수율: 73.6 %)를 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 18)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6 mol), [트랜스-(2RS,3RS)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.00719 g, 9.58e-6 mol),　1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 65시간 동안 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-95% ACN/H2O+0.05% TFA, 20분; 체류 시간: 6.851분)로 직접 정제하여 화합물 18　(0.0080 g, 2.04e-6 mol, 수율: 27.7 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1307.4.
실시예 19: 화합물 19의 합성
Figure pct00199
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(2SR,3SR)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(2SR,3SR)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-올로서 할당된의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리될 제2 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(2SR,3SR)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (25 mg, 0.0470 mmol), DMAP (11.5 mg, 0.0941 mmol), 및　(4-니트로페닐) [트랜스-(2SR,3SR)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] 카보네이트 (32.1 mg, 0.0705 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (18 μL, 0.941 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 [트랜스-(2SR,3SR)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (10.0 mg, 0.0133 mmol, 수율: 28.3 %)를 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 19)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6 mol), [트랜스-(2SR,3SR)-3-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.010 g, 1.33e-5 mol),　1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 65시간 동안 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다.
반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-95% ACN/H2O+0.05% TFA, 20분; 체류 시간: 6.855)로 직접 정제하여 화합물 19　(0.0060 g, 1.33e-5 mol, 수율: 20.8 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1307.6.
실시예 20: 화합물 20의 합성
Figure pct00200
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(3RS,4RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-일] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(2RS,3RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-올로서 할당된 라세미 트랜스-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-올의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리된 제1 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(3RS,4RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (25 mg, 0.0470 mmol), DMAP (11.5 mg, 0.0941 mmol),　및　(4-니트로페닐) [트랜스-(3RS,4RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-일] 카보네이트 (23.1 mg, 0.0564 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (18 μL, 0.941 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 [트랜스-(3RS,4RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (30.0 mg, 0.0426 mmol, 수율: 90.5 %)를 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 20)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6 mol), [트랜스-(3RS,4RS)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.00779 g, 1.11e-5 mol), 1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 65시간 동안 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 30-85% ACN/H2O+0.05% TFA, 13분; 체류 시간: 6.380)로 직접 정제하여 화합물 20　(0.0060 g, 1.55e-6 mol, 수율: 21.0 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1292.3.
실시예 21: 화합물 21의 합성
Figure pct00201
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-일] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(2SR,3SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-올로서 할당된 라세미 트랜스-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-올의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리될 제2 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (25 mg, 0.0470 mmol), DMAP (11.5 mg, 0.0941 mmol),　및　(4-니트로페닐) [트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-일] 카보네이트 (23.1 mg, 0.0564 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (18 μL, 0.941 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 [트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (25.0 mg, 0.0355 mmol, 수율: 75.4 %)를 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 21)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6), [트랜스-(3SR,4SR)-4-(2-피리딜디설파닐)테트라하이드로피란-3-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.00779 g, 1.11e-5 mol),　1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 65시간 동안 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다.
반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-70% ACN/H2O+0.05% TFA, 17분; 체류 시간: 6.765분)로 직접 정제하여 화합물 21　(0.021 g, 5.42e-6 mol, 수율: 73.6 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1291.1.
실시예 22: 화합물 22의 합성
Figure pct00202
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(1RS,2RS)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵틸] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(1RS,2RS)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵탄-1-올로서 할당된 라세미 트랜스-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵탄-1-올의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리된 제1 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(1RS,2RS)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (25 mg, 0.0470 mmol), DMAP (11.5 mg, 0.0941 mmol),　및　(4-니트로페닐) [트랜스-(1RS,2RS)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵틸] 카보네이트 (23.7 mg, 0.0564 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (18 μL, 0.941 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (29.0 mg, 0.0405 mmol, 수율: 86.0 %)를 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 22)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6), [트랜스-(1RS,2RS)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.00792 g, 1.11e-5 mol),　1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 65시간 동안 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-70% ACN/H2O+0.05% TFA, 17분; 체류 시간: 6.868분)로 직접 정제하여 화합물 22　(0.020 g, 5.15e-6 mol, 수율: 69.9 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1296.3.
실시예 23: 화합물 23의 합성
Figure pct00203
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(1SR,2SR)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵틸] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(1SR,2SR)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵탄-1-올로서 할당된 라세미 트랜스-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵탄-1-올의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리될 제2 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(1SR,2SR)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (25 mg, 0.0470 mmol), DMAP (11.5 mg, 0.0941 mmol),　및　(4-니트로페닐) [트랜스-(1SR,2SR)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵틸] 카보네이트 (23.7 mg, 0.0564 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (18 μL, 0.941 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (31.0 mg, 0.0432 mmol, 수율: 91.9 %)를 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 23)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6), [트랜스-(1SR,2SR)-2-(2-피리딜디설파닐)사이클로헵틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.00792 g, 1.11e-5 mol),　1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 65시간 동안 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-88% ACN/H2O+0.05% TFA, 17분; 체류 시간 7.178분)로 직접 정제하여 화합물 23　(0.020 g, 5.15e-6 mol, 수율: 69.9 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1296.0.
실시예 24: 화합물 24의 합성
Figure pct00204
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-1-(1RS,2RS)-1-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(1RS,2RS)-1-(2-피리딜디설파닐) 테트랄린-2-올로서 할당된 라세미 트랜스-1-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-올의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리된 제1 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(1RS,2RS)-1-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (25 mg, 0.0470 mmol), DMAP (11.5 mg, 0.0941 mmol),　및　(4-니트로페닐) [트랜스-1-(1RS,2RS)-2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] 카보네이트 (32.1 mg, 0.0705 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (18 μL, 0.941 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (20.0 mg, 0.0266 mmol, 수율: 56.6 %)를 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (실시예 24)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6), [트랜스-1-(1RS,2RS)-1-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.0083 g, 1.11e-5 mol),　1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 65시간 동안 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-95% ACN/H2O+0.05% TFA, 20분; 체류 시간 6.968)로 직접 정제하여 화합물 24　(0.012 g, 3.06e-6 mol, 수율: 41.6 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1307.2
실시예 25: 화합물 25의 합성
Figure pct00205
단계 1. (4-니트로페닐) [트랜스-(1SR,2SR)-1-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] 카보네이트의 합성
표제 화합물을, 화합물 11의 합성에서 기재된 것과 유사한 합성 방법을 사용하여 트랜스-(1SR,2SR)-1-(2-피리딜디설파닐) 테트랄린-2-올로서 할당된 라세미 트랜스-1-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-올의 키랄 크로마토그래피 분리로부터 용리될 제2 입체이성질체로부터 합성하였다.
단계 2. [트랜스-(1SR,2SR)-1-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (25 mg, 0.0470 mmol), DMAP (11.5 mg, 0.0941 mmol),　및　(4-니트로페닐) [트랜스-(1SR,2SR)-1-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] 카보네이트 (32.1 mg, 0.0705 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (18 μL, 0.941 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (22.0 mg, 0.0293 mmol, 수율: 62.3 %)를 얻었다.
단계 3. 펩티드 Pv1 (화합물 25)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6), [트랜스-(1SR,2SR)-1-(2-피리딜디설파닐)테트랄린-2-일] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.0083 g, 1.11e-5 mol),　1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 65시간 동안 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-95% ACN/H2O+0.05% TFA, 20분; 체류 시간: 6.944)로 직접 정제하여 화합물 25　(0.013 g, 3.32e-6 mol, 수율: 45.0%)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1307.0
실시예 26: 화합물 26의 합성
Figure pct00206
단계 1. [트랜스-4-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥실] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (50 mg, 0.0941 mmol) 및　(4-니트로페닐) [4-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥실] 카보네이트 (상업적 트랜스-4-머캅토사이클로헥산-1-올로부터 합성됨) (42.1 mg, 0.103 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (35 μL, 0.188 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (45.0 mg, 0.0640 mmol, 수율: 68.1 %)를 얻었다.
단계 2. 펩티드 Pv1 (화합물 26)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6), [트랜스-4-(2-피리딜디설파닐)사이클로헥실] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.00777 g, 1.11e-5 mol),　1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 65시간 동안 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-95% ACN/H2O+0.05% TFA, 20분; 체류 시간: 6.593분)로 직접 정제하여 화합물 26　(0.028 g, 7.23e-6 mol, 수율: 98.2 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1291.0.
실시예 27: 화합물 27의 합성
Figure pct00207
단계 1. [(2S)-3-메틸-2-(2-피리딜디설파닐)부틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (50 mg, 0.0941 mmol) 및　[(2S)-3-메틸-2-(2-피리딜디설파닐)부틸] (4-니트로페닐) 카보네이트 (L-발린으로부터 합성됨, 문헌[J. Org. Chem. 1990,55, 2286-2288) 참조) (40.8 mg, 0.103 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (35 μL, 0.188 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (48.0 mg, 0.0695 mmol, 수율: 73.9 %)을 얻었다.
단계 2. 펩티드 Pv1 (화합물 27)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6 mol), [(2S)-3-메틸-2-(2-피리딜디설파닐)부틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.00764 g, 1.11e-5 mol),　1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 65시간 동안 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-95% ACN/H2O+0.05% TFA, 20분; 체류 시간: 6.773분)로 직접 정제하여 화합물 27　(0.024 g, 6.22e-6 mol, 수율: 84.4 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1286.8.
실시예 28: 화합물 28의 합성
Figure pct00208
단계 1. [(2R)-3-메틸-2-(2-피리딜디설파닐)부틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트의 합성
2 mL의 무수 DMF 중 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (50 mg, 0.0941 mmol) 및　(4-니트로페닐) (2R)-3-메틸-2-(2-피리딜디설파닐)부틸] 카보네이트 (D-발린으로부터 합성됨, 문헌[J. Org. Chem. 1990,55, 2286-2288] 참조) (40.8 mg, 0.103 mmol)의 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민 (35 μL, 0.188 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 30 mL의 포화 NH4Cl, 30 mL의 물, 및 20 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (0-3% MeOH/DCM)로 정제하여 표제 화합물 (41.0 mg, 0.0594 mmol, 수율: 63.1 %)을 얻었다.
단계 2. 펩티드 Pv1 (화합물 28)과의 커플링
바이알에 펩티드 Pv1　(25.0 mg, 7.37e-6), [(2R)-3-메틸-2-(2-피리딜디설파닐)부틸] N-[(10S,23S)-10-에틸-18-플루오로-10-하이드록시-19-메틸-5,9-디옥소-8-옥사-4,15-디아자헥사사이클로[14.7.1.02,14.04,13.06,11.020,24]테트라코사-1,6(11),12,14,16(24),17,19-헵타엔-23-일]카바메이트 (0.00764 g, 1.11e-5 mol),　1 mL의 ACN 및 0.5 mL의 물을 넣었다. 이것에 N-메틸모폴린 (0.030 mL, 0.000273 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 65시간 동안 rt에서 교반하였다.　LC-MS는 반응 완료를 나타내었다. 반응 혼합물을 역상 HPLC　(Waters SunfirePrep C18, PrepSlope_4 min, 20-95% ACN/H2O+0.05% TFA, 20분; 체류 시간: 6.708분)로 직접 정제하여 화합물 28　(0.012 g, 3.08e-6 mol, 수율: 41.8 %)를 얻었다. ESI (M+3H/3)3+: 1287.8.
실시예 29: 화합물 29의 합성
Figure pct00209
분석 방법 : 크로마토그래피 순도를, Merck Chromolith RP-18e 분석 HPLC 칼럼 (모놀리스, 50 × 2 mm) 및 다음의 분석 HPLC 방법을 사용하여 Agilent 1200 시리즈, 1100 시리즈 또는 6130 시리즈 LC/MS 시스템 상에서 결정하였다: 주입 부피 5 μL; 유량 1 mL/분; 5분에 걸쳐 0.05% AcOH (방법 A) 또는 0.05% TFA (방법 B)을 갖는 물 중 5→95% 아세토니트릴; l = 254, 220 또는 195 nm에서 Agilent 다이오드 어레이 검출기; 실온.
단계 1. N-((1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일)-3-(피리딘-2-일디설파에닐)프로판아미드의 제조
DMF (4 mL) 중 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 3-(피리딘-2-일디설파에닐)프로파노에이트 (180 mg, 0.576 mmol)의 용액을 고체 엑사테칸 메실레이트 [CAS: 169869-90-3] (80 mg, 0.150 mmol)에 첨가한 다음, 수성 PBS 완충액 (4 mL, pH=7.4, 50 mM)을 첨가하고 ~5분 동안 초음파처리하였다. 탁한 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반하고, 반응은 약 25% 완료된 것으로 결정되었다. 암모늄 아세테이트 (11 mg, 0.143 mmol)을 추가의 2 mL의 DMF과 함께 첨가하고, 생성된 혼합물을 주위 온도에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 TFA (80 mL, 0.98 mmol)으로 산성으로 만들고, 2 등분으로 나누었다. 각각의 개별 부분을 Redi-Sep C18 50 g 카트리지 상에서 정제하고 TFA (0.05% v/v)을 갖는 물 중 아세토니트릴 (5% 내지 95%)의 구배로 용리하였다. 조합된 분획을 냉동시키고 동결건조시켜 표제 화합물을 담황색 고체 (42 mg, 44%)로서 얻었다. 254 nm에서 HPLC 순도: 97%. 체류 시간: 2.50 분 (방법 A). MS 데이터, 633.2 (M+H)+.
단계 2. 펩티드 Pv1 (화합물 29)과의 커플링
고체 펩티드 Pv1 (168.4 mg, 0.0480 mmol)을 고체 N-((1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일)-3-(피리딘-2-일디설파에닐)프로판아미드 (30.5 mg, 0.0482 mmol)에 첨가하고 (~1 분) 동안 초음파처리함년서 DMF (2 mL)에 용해시키고 질소로 씻어내었다. 4-메틸모폴린 (20 mL, 0.182 mmol)을 첨가하고 용액을 주위 온도에서 18시간 동안 유지하였다. 용액을 아세트산 (17 mL, 0.296 mmol)으로 산성으로 만들고, Biotage C18 300A 25 g 역상 칼럼에 적용하고, TFA (0.05% v/v)을 갖는 물 중 아세토니트릴 (25% 내지 95%)의 구배로 용리하였다. 조합된 분획을 냉동시키고 동결건조시켜 담황색 고체를 얻었다. 생성물을 DMSO (3 mL)에 용해시키고 1 mL 부분의 용액을 Biotage C18 300A 25 g 역상 칼럼 상에서 개별적으로 정제하고, 암모늄 아세테이트 (10 mM)을 갖는 물 중 용액 (아세토니트릴/물/2-프로판올, 3/2/1)의 구배 (25% 내지 95%)로 용리하였다. 조합된 분획을 냉동시키고 동결건조시켜 담황색 고체를 얻었고, 이것을 0.4% TFA를 갖는 물/아세토니트릴 (2/1)에 용해시키고, 계량된 바이알에 전달하고 동결건조시켜 고체, 화합물 29 (128 mg, 66%)를 얻었다. 254 nm에서 HPLC 순도: >95%. 체류 시간: 3.19 min (방법 B) MS 데이터: 1900.6 (M+2H/2)2+, 1267.3 (M+3H/3)3+.
실시예 A. 성장 지연 검정
세포를 96 웰 흑색 벽-투명 바닥 플레이트 (Griener), 웰당 2500개 세포의 DLD-1 WT, FaDu, 및 웰당 5000개 세포의 HeLa, 및 웰당 3000개 세포의 HCT116에서 10% FBS를 함유하는 성장 배지 중에 분주하였다. 37℃, 5% CO2 인큐베이터로 돌아가기 전에 세포를 실온에서 60분 동안 부착되도록 하였다. 24시간 후, 배지를 제거하고 다양한 약물 농도를 함유하는 새로운 성장 배지로 교체하였다. 각 약물 농도를 3중으로 첨가하였다. 약물 처리되지 않은 대조군에는 성장 배지만 함유되었다. 세포를 인큐베이터로 되돌려 놓았다. 약물 첨가 96시간 후, 세포를 4% 파라포름알데히드로 20분 동안 고정하고 1 ug/mL에서 Hoechst로 염색하였다. 플레이트를 Cytation 5 자동 이미저(BioTek)에서 이미지화하고 CellProfiler(http://cellprofiler.org)를 사용하여 세포를 계수하였다. GraphPad Prism을 사용하여 퍼센트 세포 성장 지연을 계산하고 데이터를 플롯팅하였다.
Figure pct00210
실시예 B: 랫트 모델에서 화합물 11의 혈장 약동학
동물 투여
수컷 스프래그 다우리 랫트는 선적 전에 Envigo Labs에서 경정맥 캐뉼러 삽입 및 혈관 접근 버튼(VAB, Instech Labs Cat # VABR1B/22) 삽입을 받았다. 마그네틱 알루미늄 캡(Instech Labs Cat # Cat #VABRC)을 사용하여 경정맥 카테터의 접근 포트를 보호하여 연구 전에 4-5일 동안 옥수수 속대 깔개에서 케이지당 2마리의 동물을 수용할 수 있었다. 시트르산염 완충제 중 5% 만니톨의 비히클에서 제조된 5 mg/kg의 화합물 11의 단일 정맥내 용량을 랫트에게 투여하였다. 화합물 투여 후 1, 2, 4, 8, 24 및 30시간에, 급식된 랫트로부터 혈액(250μL)을 K2EDTA로 채워진 마이크로테이너에 수집하였다. 원심분리에 의해 혈장을 분리하고 100 μL 분취량을 드라이아이스 위의 96웰 폴리프로필렌 플레이트로 옮겼다. 샘플은 ELISA에 의한 총 펩타이드 정량화를 위해 처리되고 LC-MS/MS에 의해 엑사테칸이 방출될 때까지 -80℃에 보관되었다.
총 펩티드 혈장 농도의 ELISA 측정
96-웰 플레이트를 0.2 M 탄산염-중탄산염 완충액, pH 9.4에서 제조된 100μL/웰의 0.1 μM BSA 표지 펩티드로 코팅하고 4℃에서 밤새 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충액(PBS + 0.05% Tween 20)으로 4회 세척하고, 차단 완충액(PBS + 5% 분유 + 0.05% Tween 20)(300μL/웰)으로 실온에서 2시간 동안 인큐베이션하고 ELISA 세척 완충액으로 다시 4회 세척하였다. 동시에, 대조군 혈장 및 연구 혈장 샘플에서 2x 화합물 11 표준을 실온에서 30분 동안 Pv1 펩티드에 특이적인 1차 항체 1-10 ng/mL와 함께 사전 인큐베이션하였다. 사전 인큐베이션된 샘플을 100 μL/웰로 사전 코팅되고 사전 차단된 검정 플레이트에 첨가하고 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충액으로 4회 세척하고 100 μL/웰의 이차 염소 항-마우스 IgG HRP 항체(항체 희석제 중 1:5,000)와 함께 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충액으로 4회 세척하고 1분 동안 부드럽게 흔들면서 실온에서 100 μL/웰의 SuperSignal 기질과 함께 인큐베이션하였다. BioTek Cytation 5 플레이트 판독기에서 플레이트에서 발광성을 판독하였다.
엑사테칸 혈장 농도의 LC-MS/MS 측정
엑사테칸의 정량을 위해, 20 μL의 혈장 샘플을 폴리프로필렌 자동시료주입기 바이알에 추가하였다. 20 μL의 PPT-IS (ACN:H20(50:50)+1000ng/mL 내부 표준을 함유하는 0.5% FA) 및 20 μl의 희석제(ACN:H20(50:50)+0.5% FA)를 각 샘플에 첨가하였다. 120 μl의 ACN + 5% FA를 추가한다. 바이알에 캡을 씌우고 2분 동안 와동시켰다. 샘플을 3700 rpm에서 5-10분 동안 원심분리한 다음 액체 크로마토그래피 탠덤 질량 분광계(LC-MS/MS)을 통해 분석하였다.
도 1은 랫트에서 5 mg/kg의 화합물 11의 단일 IV 용량 후 화합물 11 및 방출된 엑사테칸의 혈장 농도의 플롯을 보여준다(데이터는 평균 ± SEM으로 표현됨). 도 1에 도시된 바와 같이, 0.002% 미만의 엑사테칸 탄두가 순환 30시간 후에 방출되었다. 도 1은 화합물 11이 적어도 30시간 동안 혈장에서 안정함을 입증한다.
실시예 C: 마우스 모델에서 화합물 11의 종양 및 골수 약동학
동물 투여
6주령 암컷 무흉선 누드 Foxn nu 마우스는 Taconic Labs(Cat# NCRNU-F)에서 얻었고 일회용 케이지 시스템(Innovive)의 Alpha-Dri 깔개에 케이지당 5마리를 수용하였다. 결장직장 암종에서 유래한 인간 HCT116 암 세포를 페놀 레드 없는 매트리겔에 1:1로 희석하고 100 μL에서 2.5x106개의 세포 밀도로 각 마우스의 왼쪽 옆구리에 피하 이식하였다. 이종이식편이 300 mm3의 최소 부피에 도달했을 때, 시트르산염 중 5% 만니톨의 비히클에서 제조된 10 mg/kg의 화합물 11의 단일 복강내 주사를 마우스에 투여하였다. 종양 및 골수 샘플을 화합물 투여 후 1, 2, 4, 8, 16, 24, 32 및 48시간에 급식된 마취 마우스로부터 수집하였다. 종양 및 골수의 총 펩티드 농도는 ELISA를 통해 결정되었다.
총 펩티드 조직 농도의 ELISA 측정
96-웰 플레이트를 0.2 M 탄산염-중탄산염 완충액(pH 9.4)에서 제조된 100μL/웰의 0.1 μM BSA 표지 펩티드로 코팅하고 4℃에서 밤새 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충액(PBS + 0.05% Tween 20)으로 4회 세척하고, 차단 완충액(PBS + 5% 분유 + 0.05% Tween 20)(300μL/웰)으로 실온에서 2시간 동안 인큐베이션하고 ELISA 세척 완충액으로 다시 4회 세척하였다. 동시에, 2x 화합물 11 표준물(각 조직 매트릭스 내) 또는 항체 희석제(PBS + 2% 분유 + 0.05% 트윈 20)로 희석된 샘플 종양 균질물 또는 골수 샘플을 실온에서 30분 동안 Pv1 펩티드에 특이적인 1차 항체 1-10 ng/mL와 함께 사전 인큐베이션하였다. 사전 인큐베이션된 샘플을 100 μL/웰로 사전 코팅되고 사전 차단된 검정 플레이트에 첨가하고 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충액으로 4회 세척하고 100 μL/웰의 이차 염소 항-마우스 IgG HRP 항체(항체 희석제 중 1:5,000)와 함께 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 ELISA 세척 완충액으로 4회 세척하고 1분 동안 부드럽게 흔들면서 실온에서 100 μL/웰의 SuperSignal 기질과 함께 인큐베이션하였다. BioTek Cytation 5 플레이트 판독기에서 플레이트에서 발광성을 판독하였다.
도 2는 마우스에서 10 mg/kg의 화합물 11의 단일 IP 용량 후 종양 및 골수에서 펩티드 농도의 플롯을 보여준다(데이터는 평균 ± SEM으로 표현됨). 도 2는 화합물 11이 종양을 효과적으로 표적화함을 입증한다.
실시예 D: 마우스 모델에서 골수 독성 연구
동물 투여
6주령 암컷 무흉선 누드 Foxn nu 마우스는 Taconic Labs(Cat# NCRNU-F)에서 얻었고 일회용 케이지 시스템(Innovive)의 Alpha-Dri 깔개에 케이지당 5마리를 수용하였다. 결장직장 암종에서 유래한 인간 HCT116 암 세포를 페놀 레드 없는 매트리겔에 1:1로 희석하고 100 μL에서 2.5x106개의 세포 밀도로 각 마우스의 왼쪽 옆구리에 피하 이식하였다. 이종이식편이 200 mm3의 최소 부피에 도달했을 때, 마우스에 비히클 또는 2.6 또는 5.2 μmol/kg의 비접합 엑사테칸(각각 1.15 또는 2.3 mg/kg 엑사테칸에 해당) 또는 화합물 11(각각 10 또는 20 mg/kg의 화합물 11에 해당)의 복강내 용량을 투여하였다. 화합물을 4일 동안 1일 1회 투여하였다.
골수 수집
종양을 보유하는 마우스는 마지막 용량 6시간 후에 경추 탈구에 의해 안락사되었다. 대퇴골을 제거하고 PBS + 2% 우태 혈청을 함유하는 5cc 주사기에 장착된 23-게이지 바늘로 뼈를 수세하여 골수를 50mL 원추형 튜브로 압출하였다. 골수를 부드러운 피펫팅으로 균질화하고 100 μm의 나일론 메쉬 필터를 통해 여과하고 세포를 4℃에서 5분 동안 1200rpm에서 원심분리하여 펠렛화하였다. 적혈구를 실온에서 2분 동안 3 mL의 용해 완충액으로 용해시켰다. PBS를 25 mL의 부피로 첨가하고 세포를 상기 기재된 바와 같이 원심분리에 의해 재펠릿화하였다. 세포 펠릿을 5 mL의 PBS에 현탁시키고 세포 수를 트립판 블루 배제에 의해 평가하였다. 4개의 독립적인 연구에서 얻은 세포 수를 평균화하고 플롯팅하였다.
도 3은 4일 동안 1일 1회 투여한 2.6 및 5.2 μmol/kg의 화합물 11 (10, 20 mg/kg 콘주게이트에 해당) 또는 유리 엑사테칸 (1.15 및 2.3 mg/kg 엑사테칸에 해당)의 투여 후 종양 보유 누드 마우스의 대퇴골로부터 총 골수 카운트의 그래프를 보여준다(데이터는 평균 ± SEM으로 표현됨). 화합물 11은 엑사테칸의 임상적 유용성을 제한하는 골수 독성을 나타내지 않았다.
실시예 E: 마우스 모델에서 위 독성 연구
동물 투여 및 위 영상화
6주령 암컷 무흉선 누드 Foxn nu 마우스는 Taconic Labs(Cat# NCRNU-F)에서 얻었고 일회용 케이지 시스템(Innovive)의 Alpha-Dri 깔개에 케이지당 5마리를 수용하였다. 결장직장 암종에서 유래한 인간 HCT116 세포를 페놀 레드 없는 매트리겔에 1:1로 희석하고 100 μL에서 2.5x106개의 세포 밀도로 각 마우스의 왼쪽 옆구리에 피하 이식하였다. 이종이식편이 300 mm3의 최소 부피에 도달했을 때, 마우스에 비히클 또는 5.2 μmol/kg의 비접합 엑사테칸(2.3 mg/kg 엑사테칸에 해당) 또는 화합물 11(20 mg/kg의 화합물 11에 해당)의 복강내 용량을 투여하였다. 화합물을 4일 동안 1일 1회 투여하였다. 마지막 용량 투여 6시간 후, 마우스를 경추 탈구로 안락사시키고 전체 검시를 수행하였다. 계내 및 생체 외에서 위 사진을 촬영하였다.
도 4a는 QDx4 투여한 비히클 또는 5.2 μmol/kg의 화합물 11 (20 mg/kg 콘주게이트에 해당) 또는 유리 엑사테칸 (2.3 mg/kg 엑사테칸에 해당)의 투여 후에 절제된 종양 보유 누드 마우스의 위를 보여준다. 도 4b는 4일 동안 1일 1회 투여한 5.2 μmol/kg의 화합물 11 (20 mg/kg 콘주게이트에 해당) 또는 유리 엑사테칸 (2.3 mg/kg 엑사테칸에 해당)의 투여 후에 계내(in situ)의 종양 보유 누드 마우스의 위를 보여준다. 화합물 11은 엑사테칸의 임상적 유용성을 제한하는 위 독성을 나타내지 않았다.
실시예 F: HCT116 결장직장암 모델에서 화합물 11의 효능
6주령 암컷 무흉선 누드 Foxn nu 마우스는 Taconic Labs(Cat# NCRNU-F)에서 얻었고 일회용 케이지 시스템의 Alpha-Dri 깔개에 케이지당 5마리를 수용하였다. 결장직장 암종에서 유래한 인간 HCT116 세포를 페놀 레드 없는 매트리겔에 1:1로 희석하고 100 μL에서 2.5x106개의 세포 밀도로 각 마우스의 왼쪽 옆구리에 피하 이식하였다. 이종이식편이 100-200 mm3의 평균 부피에 도달하면, 마우스를 그룹으로 무작위화하고 아래 표에 설명된 대로 처리하였다. 마우스에 비히클 또는 2.6 또는 5.2 μmol/kg의 비접합 엑사테칸(각각 1.15 또는 2.3 mg/kg 엑사테칸에 해당) 또는 화합물 11(각각 10 또는 20 mg/kg의 화합물 11에 해당)의 복강내(IP) 용량을 투여하였다. 용량은 시트르산염 완충액에서 5% 만니톨에 0.1 mg/μL의 DMSO 스톡을 희석하여 제조하고 3주 동안 12 mL/kg(25 g 마우스당 300 μL)의 부피로 QDX4를 투여하였다. 이종이식 종양을 캘리퍼스로 측정하고 타원체 부피에 대한 방정식을 사용하여 부피를 계산하였다: 부피 = π/6 x (길이) x (폭)2. 동물은 사망, 2000 mm3를 초과하는 종양 크기 또는 >20% 체중 감소로 인해 연구에서 제외되었다. 아래 표는 다양한 처리군의 투여 일정을 보여준다.
Figure pct00211
도 5a는 HCT116 결장직장 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 유리 엑사테칸 또는 화합물 11의 등몰량을 투여함으로써 초래되는 평균 종양 부피의 플롯을 보여준다. 동물에게 3주 동안 비경구내로 주당 4회 1일 1회 투여하였다. 도 5b는 HCT116 결장직장 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 유리 엑사테칸 또는 화합물 11의 등몰량을 투여하기 위한 카플란 마이어(Kaplan Meier) 생존 곡선을 나타낸다. 데이터는 평균 ± SEM으로 표현된다. 이들 데이터는 화합물 11이 전임상 결장직장암 모델에서 강력한 항종양 활성을 입증함을 입증한다.
실시예 G: MKN45 HER2 음성 위암 모델에서 화합물 11의 효능
6주령 암컷 무흉선 누드 Foxn nu 마우스는 Taconic Labs(Cat# NCRNU-F)에서 얻었고 일회용 케이지 시스템의 Alpha-Dri 깔개에 케이지당 5마리를 수용하였다. 위 암종에서 유래한 인간 MKN45 세포를 페놀 레드 없는 매트리겔에 1:1로 희석하고 100 μL에서 2x106개의 세포 밀도로 각 마우스의 왼쪽 옆구리에 피하 이식하였다. 이종이식편이 100-200 mm3의 평균 부피에 도달하면, 마우스를 그룹으로 무작위화하고 아래 표에 설명된 대로 처리하였다. 마우스에 비히클 또는 2.6 또는 5.2 μmol/kg의 비접합 엑사테칸(각각 1.15 또는 2.3 mg/kg 엑사테칸에 해당) 또는 화합물 11(각각 10 또는 20 mg/kg의 화합물 11에 해당)의 복강내(IP) 용량을 투여하였다. 용량은 시트르산염 완충액에서 5% 만니톨에 0.1 mg/μL의 DMSO 스톡을 희석하여 제조하고 2주 동안 12 mL/kg(25 g 마우스당 300 μL)의 부피로 QDX4를 투여하였다. 이종이식 종양을 캘리퍼스로 측정하고 타원체 부피에 대한 방정식을 사용하여 부피를 계산하였다: 부피 = π/6 x (길이) x (폭)2. 동물은 사망, 2000 mm3를 초과하는 종양 크기 또는 >20% 체중 감소로 인해 연구에서 제외되었다. 아래 표는 다양한 처리군의 투여 일정을 보여준다.
Figure pct00212
도 6a는 MKN45 HER2 음성 위암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 화합물 11의 단일 제제 효능을 보여준다. 동물에게 2주 동안 비경구내로 주당 4회 1일 1회 투여하였다. 도 6b는 MKN45 HER2 음성 위암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 유리 엑사테칸 또는 화합물 11의 등몰량을 투여하기 위한 카플란 마이어(Kaplan Meier) 생존 곡선을 나타낸다. 데이터는 평균 ± SEM으로 표현된다. 이들 데이터는 화합물 11이 전임상 위 모델에서 강력한 항종양 활성을 입증함을 입증한다.
도 6b. 카플란-마이어 분석은 사망 또는 연구 제외를 기반으로 한 생존율을 평가하는 데 사용되었다.
실시예 H: JIMT-1 HER2 중간 유방암 모델에서 화합물 11의 효능
5~6주령 암컷 NOD.SCID 마우스를 Beijing Anikeeper Biotech Co., Ltd(중국, 베이징)에서 입수하였다. 유방 암종에서 유래한 인간 J1MT-1 세포를 페놀 레드 없는 매트리겔에 1:1로 희석하고 100 μL에서 5x106개의 세포 밀도로 각 마우스의 왼쪽 옆구리에 피하 이식하였다. 이종이식편이 100 mm3의 평균 부피에 도달하면, 마우스를 그룹으로 무작위화하고 아래 표에 설명된 대로 처리하였다. 마우스에 비히클 또는 2.6 또는 5.2 μmol/kg의 화합물 11(각각 10 또는 20 mg/kg의 화합물 11에 해당)의 복강내(IP) 용량을 투여하였다. 용량은 시트르산염 완충액에서 5% 만니톨에 0.1 mg/μL의 DMSO 스톡을 희석하여 제조하고 3주 동안 12 mL/kg(25 g 마우스당 300 μL)의 부피로 QDX4를 투여하였다. 이종이식 종양을 캘리퍼스로 측정하고 타원체 부피에 대한 방정식을 사용하여 부피를 계산하였다: 부피 = π/6 x (길이) x (폭)2. 동물의 체중은 종양 부피 평가와 동시에 측정되었다. 동물은 사망, 2000 mm3를 초과하는 종양 크기 또는 >20% 체중 감소로 인해 연구에서 제외되었다. 아래 표는 다양한 처리군에 대한 투여 일정을 보여준다.
Figure pct00213
도 7a는 JIMT-1 HER2 중간 유방암 옆구리 종양을 보유하는 SCID 마우스에서 화합물 11을 투여함으로써 초래되는 평균 종양 부피의 플롯을 보여준다. 동물에게 3주 동안 비경구내로 주당 4회 1일 1회 투여하였다. 도 7b는 화합물 11이 투여된 JIMT-1 HER2 중간 유방암 옆구리 종양을 보유하는 SCID 마우스에서 체중의 퍼센트 변화의 플롯을 보여준다. 데이터는 평균 ± SEM으로 표현된다. 이들 데이터는 화합물 11이 전임상 유방 모델에서 강력한 항종양 활성을 입증함을 입증한다.
실시예 I: MDA-MB-231 삼중 음성 유방암 모델에서 화합물 11의 효능
3~4 주령 암컷 무흉선 누드 Foxn nu 마우스를 Envigo Lab에서 입수하였다. 유방 선암종에서 유래한 인간 MDA-MB-231 세포를 페놀 레드 없는 매트리겔에 1:1로 희석하고 100 μL에서 2x106개의 세포 밀도로 각 마우스의 왼쪽 옆구리에 피하 이식하였다. 이종이식편이 50-100 mm3의 평균 부피에 도달하면, 마우스를 그룹으로 무작위화하고 아래 표에 설명된 대로 처리하였다. 마우스에 비히클 또는 5, 10, 또는 20 mg/kg의 화합물 11의 복강내(IP) 용량을 투여하였다. 용량은 시트르산염 완충액에서 5% 만니톨에 0.1 mg/μL의 DMSO 스톡을 희석하여 제조하고 3주 동안 12 mL/kg(25 g 마우스당 300 μL)의 부피로 QDX4를 투여하였다. 이종이식 종양을 캘리퍼스로 측정하고 타원체 부피에 대한 방정식을 사용하여 부피를 계산하였다: 부피 = π/6 x (길이) x (폭)2. 동물의 체중은 종양 부피 평가와 동시에 측정되었다. 동물은 사망, 2000 mm3를 초과하는 종양 크기 또는 >20% 체중 감소로 인해 연구에서 제외되었다. 아래 표는 다양한 처리군의 투여 일정을 보여준다.
Figure pct00214
도 8a는 화합물 11이 투여된 MDA-MB-231 삼중 음성 유방암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 평균 종양 부피의 플롯을 보여준다. 동물에게 3주 동안 비경구내로 주당 4회 1일 1회 투여하였다. 도 8b는 화합물 11이 투여된 MDA-MB-231 삼중 음성 유방암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 0일차에 대한 체중의 변화 퍼센트의 플롯을 보여준다. 데이터는 평균 ± SEM으로 표현된다. 이들 데이터는 화합물 11이 전임상 유방 모델에서 강력한 항종양 활성을 입증함을 입증한다.
실시예 J: MDA-MB-231 삼중 음성 유방암 모델에서 화합물 11 및 탈라조파립의 조합 효능
3~4 주령 암컷 무흉선 누드 Foxn nu 마우스를 Envigo Lab에서 입수하였다. 유방 선암종에서 유래한 인간 MDA-MB-231 세포를 페놀 레드 없는 매트리겔에 1:1로 희석하고 100 μL에서 2x106개의 세포 밀도로 각 마우스의 왼쪽 옆구리에 피하 이식하였다. 이종이식편이 50-100 mm3의 평균 부피에 도달하면, 마우스를 그룹으로 무작위화하고 아래 표에 설명된 대로 처리하였다. 마우스에게 비히클 또는 5 mg/kg의 화합물 11의 복강내(IP) 용량을 단독으로 또는 0.33 mg/kg의 탈라조파립의 경구(PO) 용량과 조합하여 투여하였다. 용량은 시트르산염 완충액에서 5% 만니톨에 0.1 mg/μL의 DMSO 스톡을 희석하여 제조하였다. 화합물 11은 3주 동안 주당 QDX4로 12 mL/kg(25g 마우스당 300μL)의 부피로 투여되었고, 탈라조파립은 15일 동안 1일 1회 투여되었다. 이종이식 종양을 캘리퍼스로 측정하고 타원체 부피에 대한 방정식을 사용하여 부피를 계산하였다: 부피 = π/6 x (길이) x (폭)2. 동물의 체중은 종양 부피 평가와 동시에 측정되었다. 동물은 사망, 2000 mm3를 초과하는 종양 크기 또는 >20% 체중 감소로 인해 연구에서 제외되었다. 아래 표는 다양한 처리군의 투여 일정을 보여준다.
Figure pct00215
도 9a는 화합물 11 및 탈라조파립이 투여된 MDA-MB-231 삼중 음성 유방암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스의 평균 종양 부피의 플롯을 보여준다. 동물에게 화합물 11을 3주 동안 비경구내로 주당 4회씩 1일 1회 투여하고 탈라조파립을 18일 동안 1일 1회 경구 투여하였다. 도 9b는 화합물 11 및 탈라조파립이 투여된 MDA-MB-231 삼중 음성 유방암 옆구리 종양을 보유하는 누드 마우스에서 0일차에 대한 체중의 변화 퍼센트의 플롯을 보여준다.
실시예 K: 글루타티온 절단 연구
접합체의 20 mM 스톡을 100% DMSO에서 제조하였다. 이후에 스톡을 100 mm Tris(pH 7.5)로 희석하여 중간 희석액 500 μM을 얻은 다음, 100 mM의 Tris(pH 7.5)에 1:5로 추가 희석하여 최종 농도 100 μM의 접합체를 얻었다. 100 mM의 글루타티온은 H2O에서 사용하기 직전에 제조되었고 10 mM의 최종 글루타티온 챌린지 농도에 대해 챌린지 샘플에서 1:10으로 희석되었다. 샘플을 뒤집어서 혼합하고 37℃에서 최대 24시간 동안 인큐베이션하였다. 50 μL의 샘플을 0, 4 및 24시간에 실리콘화된 마이크로원심분리기 튜브에 분주하고 -80℃에서 즉시 냉동시켰다.
샘플을 해동하고 다음과 같이 추출하였다: 8 μL의 25% 인산에 이어, 117 μL의 100% 아세토니트릴/0.1% TFA를 각 샘플에 첨가하고 혼합하고 10분 동안 13000xG에서 원심분리하였다. 상청액을 0.2 mL의 HPLC 바이알에 피펫으로 넣고 Perkin Elmer Flexar HPLC 자동시료주입기에 놓았다. 다음 표에는 HPLC 조건이 요약되어 있다:
Figure pct00216
데이터는 화합물의 감소 백분율(절단된 접합체의 체류 시간 피크의 면적/시간 0에서 접합체의 체류 시간 피크의 면적) X 100을 계산하여 분석하였다.
도 10은 16시간에 걸쳐 10 mM의 글루타티온으로 처리하여 생성된 화합물 11 및 화합물 29의 분해 그래프를 보여준다. 도 10에 도시된 바와 같이, 화합물 29는 유사한 글루아티온 노출 하에 화합물 11보다 훨씬 빠르게 방출된다.
하기 표는 4시간 및 24시간에 측정된 화합물 11 내지 화합물 29에 대해 상기 기재된 10 mM의 글루타티온 노출 조건에 대한 분해 데이터를 요약한 것이다.
Figure pct00217
실시예 L: 혈장 안정성 연구
접합체의 20 mM 스톡을 100% DMSO에서 제조하였다. 이후에 스톡을 100 mM의 Tris(pH 7.5)로 희석하여 중간 희석액 500 μM을 생성한 다음, 랫트 혈장에 직접 1:5 희석하여 최종 농도 100 μM의 접합체를 생성하였다. 샘플을 뒤집어서 혼합하고 37℃에서 최대 24시간 동안 인큐베이션하였다. 50 μL의 샘플을 0, 4 및 24시간에 실리콘화된 마이크로원심분리기 튜브에 분주하고 -80℃에서 즉시 냉동시켰다.
샘플을 해동하고 다음과 같이 추출하였다: 8 μL의 25% 인산에 이어, 117 μL의 100% 아세토니트릴/0.1% TFA를 각 샘플에 첨가하고 혼합하고 10분 동안 13000xG에서 원심분리하였다. 상청액을 0.2 mL의 HPLC 바이알에 피펫으로 넣고 Perkin Elmer Flexar HPLC 자동시료주입기에 놓았다. 다음 표에는 HPLC 조건이 요약되어 있다:
Figure pct00218
데이터는 화합물의 감소 백분율(인큐베이션된 접합체의 체류 시간 피크의 면적/시간 0에서 접합체의 체류 시간 피크의 면적) X 100을 계산하여 분석하였다. 연구 결과는 아래 표에 나와 있다.
Figure pct00219
본 명세서에 기재된 것 외에 본 발명의 다양한 변형은 전술한 설명으로부터 당업자에게 명백할 것이다. 이러한 수정은 또한 첨부된 청구범위에 속하는 것으로 의도된다. 제한 없이 본 출원에 인용된 모든 특허, 특허 출원 및 공보를 포함하는 각각의 참고문헌은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
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of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 160 Asp Asp Asp Glu Asp Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp 1 5 10 15 Leu Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu His Gly Ala Leu Leu Val Asp 20 25 30 Ala Asp Glu Cys Thr 35 <210> 161 <211> 37 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 161 Asp Asp Asp Glu Asp Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala His Trp 1 5 10 15 Leu Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Gly Ala Leu Leu Val Asp 20 25 30 Ala Asp Glu Cys Thr 35 <210> 162 <211> 37 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 162 Asp Asp Asp Glu Asp Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala His Trp 1 5 10 15 Leu Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu His Gly Ala Leu Leu Val Asp 20 25 30 Ala Asp Glu Cys Thr 35 <210> 163 <211> 37 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 163 Asp Asp Asp Glu Asp Asn Pro 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Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (37)..(37) <223> Lys(rhodamine) <220> <221> MOD_RES <222> (38)..(38) <223> Cys(phalloidin) <400> 208 Ala Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp Leu 1 5 10 15 Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Glu Leu Ala Leu Leu Val Asp Ala 20 25 30 Asp Glu Gly Thr Lys Cys Gly 35 <210> 209 <211> 38 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 209 Ala Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp Leu 1 5 10 15 Phe Thr Asp Leu Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Leu Ala Leu Leu Val 20 25 30 Asp Ala Asp Glu Gly Thr 35 <210> 210 <211> 38 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 210 Ala Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Ala Trp Leu 1 5 10 15 Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Asp Ala 20 25 30 Asp Glu Gly Thr Cys Gly 35 <210> 211 <211> 38 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Synthetic polypeptide <400> 246 Ala Glu Asp Gln Asn Asp Pro Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp Leu 1 5 10 15 Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Gly 20 25 30 <210> 247 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 247 Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Phe Leu Phe 1 5 10 15 Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Asp Ala Asp 20 25 30 Glu Thr <210> 248 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 248 Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Phe Ala Arg Tyr Ala Asp Trp Leu Phe 1 5 10 15 Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Asp Ala Asp 20 25 30 Glu Thr <210> 249 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 249 Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Phe Ala Arg Tyr Ala Asp Phe Leu Phe 1 5 10 15 Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu 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Synthetic polypeptide <400> 260 Ala Cys Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp Leu 1 5 10 15 Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Asp Ala 20 25 30 Asp Glu Gly Thr 35 <210> 261 <211> 32 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 261 Ala Cys Glu Asp Gln Asn Pro Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp Leu 1 5 10 15 Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Asp Gly 20 25 30 <210> 262 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 262 Ala Cys Glu Asp Gln Asn Pro Tyr Trp Arg Ala Tyr Ala Asp Leu Phe 1 5 10 15 Thr Pro Leu Thr Leu Leu Asp Leu Leu Ala Leu Trp Asp Gly 20 25 30 <210> 263 <211> 27 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 263 Ala Cys Asp Asp Gln Asn Pro Trp Arg Ala Tyr Leu Asp Leu Leu Phe 1 5 10 15 Pro Thr Asp Thr Leu Leu Leu Asp Leu Leu 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Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 279 Ala Cys Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asn Trp Leu 1 5 10 15 Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asn Leu Ala Leu Leu Val Asp Ala 20 25 30 Asp Glu Gly Thr 35 <210> 280 <211> 36 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 280 Asp Asp Asp Glu Asp Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp 1 5 10 15 Leu Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu His Gly Ala Leu Leu Val Asp 20 25 30 Ala Asp Glu Thr 35 <210> 281 <211> 36 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 281 Asp Asp Asp Glu Asp Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp 1 5 10 15 Leu Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu His Gly Ala Leu Leu Val Asp 20 25 30 Ala Asp Glu Thr 35 <210> 282 <211> 37 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 282 Cys Asp Asp Asp Glu Asp Asn 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Gly Ala Leu Leu Val Asn 20 25 30 Ala Asn Glu Gly Thr 35 <210> 286 <211> 32 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 286 Ala Lys Glu Asp Gln Asn Asp Pro Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp 1 5 10 15 Leu Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Gly 20 25 30 <210> 287 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 287 Ala Glu Asp Gln Asn Pro Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp Leu Phe 1 5 10 15 Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Glu Leu Ala Leu Leu Val Cys Gly 20 25 30 <210> 288 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 288 Ala Lys Asp Asp Gln Asn Pro Trp Arg Ala Tyr Leu Asp Leu Leu Phe 1 5 10 15 Pro Thr Asp Thr Leu Leu Leu Asp Leu Leu Trp Cys 20 25 <210> 289 <211> 27 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 289 Ala Cys Glu Glu Gln Asn Pro Trp Arg Ala Tyr Leu Glu Leu Leu Phe 1 5 10 15 Pro Thr Glu Thr Leu Leu Leu Glu Leu Leu Trp 20 25 <210> 290 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 290 Ala Cys Asp Asp Gln Asn Pro Trp Ala Arg Tyr Leu Asp Trp Leu Phe 1 5 10 15 Pro Thr Asp Thr Leu Leu Leu Asp Leu 20 25 <210> 291 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 291 Cys Asp Asn Asn Asn Pro Trp Arg Ala Tyr Leu Asp Leu Leu Phe Pro 1 5 10 15 Thr Asp Thr Leu Leu Leu Asp Trp 20 <210> 292 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 292 Cys Glu Glu Gln Gln Pro Trp Ala Gln Tyr Leu Glu Leu Leu Phe Pro 1 5 10 15 Thr Glu Thr Leu Leu Leu Glu Trp 20 <210> 293 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 293 Cys Glu Glu Gln Gln Pro Trp Arg Ala Tyr Leu Glu Leu Leu Phe Pro 1 5 10 15 Thr Glu Thr Leu Leu Leu Glu Trp 20 <210> 294 <211> 37 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 294 Cys Asp Asp Asp Asp Asp Asn Pro Asn Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asn 1 5 10 15 Trp Leu Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asn Gly Ala Leu Leu Val 20 25 30 Glu Ala Glu Glu Thr 35 <210> 295 <211> 36 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 295 Cys Asp Asp Asp Asp Asp Asn Pro Asn Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Pro 1 5 10 15 Trp Leu Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Pro Gly Ala Leu Leu Val 20 25 30 Glu Ala Glu Glu 35 <210> 296 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 296 Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Phe Ala Arg Tyr Ala Asp Leu Leu Phe 1 5 10 15 Pro Thr Thr Leu Ala Trp 20 <210> 297 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 297 Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Leu Leu Phe 1 5 10 15 Pro Thr Thr Leu Ala Phe 20 <210> 298 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 298 Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Leu Leu Phe 1 5 10 15 Pro Thr Thr Leu Ala Trp 20 <210> 299 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 299 Lys Glu Asp Gln Asn Pro Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Leu Leu Phe Pro 1 5 10 15 Thr Thr Leu Trp 20 <210> 300 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 300 Ala Cys Glu Glu Gln Asn Pro Gln Ala Glu Tyr Ala Glu Trp Leu Phe 1 5 10 15 Pro Thr Thr Leu Leu Leu Leu Glu 20 <210> 301 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 301 Ala Ala Glu Glu Gln Asn Pro Trp Ala Arg Tyr Leu Glu Trp Leu Phe 1 5 10 15 Pro Thr Glu Thr Leu Leu Leu Glu Leu 20 25 <210> 302 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 302 Ala Lys Glu Glu Gln Asn Pro Trp Ala Arg Tyr Leu Glu Trp Leu Phe 1 5 10 15 Pro Thr Glu Thr Leu Leu Leu Glu Leu 20 25 <210> 303 <211> 38 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> Description of Unknown: Wild-type pH-sensitive membrane polypeptide <400> 303 Ala Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp Leu 1 5 10 15 Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Asp Ala 20 25 30 Asp Glu Gly Thr Gly Gly 35 <210> 304 <211> 38 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ala or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (2)..(2) <223> Ala, Asp or Cys <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> Gln or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (11)..(11) <223> Arg or Gln <220> <221> MOD_RES <222> (12)..(12) <223> Tyr or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (13)..(13) <223> Ala, Asp or Tyr <220> <221> MOD_RES <222> (14)..(14) <223> Asp, Asn, Glu, His, Lys, Ala or Trp <220> <221> MOD_RES <222> (15)..(15) <223> Trp or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (19)..(19) <223> Thr or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (20)..(20) <223> Pro, Gly or Ala <220> <221> MOD_RES <222> (24)..(24) <223> Leu or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (25)..(25) <223> Asp, Leu, Asn, Glu, His, Lys or Ala <220> <221> MOD_RES <222> (26)..(26) <223> Leu, Asp or Gly <220> <221> MOD_RES <222> (31)..(31) <223> Asp or Asn <220> <221> MOD_RES <222> (33)..(33) <223> Asp or Asn <220> <221> MOD_RES <222> (34)..(34) <223> Glu or Gln <220> <221> MOD_RES <222> (35)..(35) <223> Gly or Cys <220> <221> MOD_RES <222> (37)..(37) <223> Gly or Cys <400> 304 Xaa Xaa Glu Xaa Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Leu 1 5 10 15 Phe Thr Xaa Xaa Leu Leu Leu Xaa Xaa Xaa Ala Leu Leu Val Xaa Ala 20 25 30 Xaa Xaa Xaa Thr Xaa Gly 35 <210> 305 <211> 42 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> May or may not be present <220> <221> MOD_RES <222> (21)..(21) <223> May or may not be present <220> <221> MOD_RES <222> (29)..(29) <223> May or may not be present <220> <221> MOD_RES <222> (40)..(40) <223> May or may not be present <400> 305 Asp Ala Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp 1 5 10 15 Leu Phe Thr Thr Leu Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Leu Ala Leu Leu 20 25 30 Val Asp Ala Asp Glu Gly Thr Lys Gly Gly 35 40 <210> 306 <211> 38 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> Description of Unknown: Wild-type pH-sensitive membrane polypeptide <400> 306 Gly Gly Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp Leu 1 5 10 15 Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Asp Ala 20 25 30 Asp Glu Gly Thr Gly Gly 35 <210> 307 <211> 38 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Gly, Asp or Ala <220> <221> MOD_RES <222> (2)..(2) <223> Gly, Asp or Cys <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> Gln or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (11)..(11) <223> Arg or Gln <220> <221> MOD_RES <222> (12)..(12) <223> Tyr or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (13)..(13) <223> Ala, Asp or Tyr <220> <221> MOD_RES <222> (14)..(14) <223> Asp, Asn, Glu, His, Lys, Ala or Trp <220> <221> MOD_RES <222> (15)..(15) <223> Trp or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (19)..(19) <223> Thr or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (20)..(20) <223> Pro, Gly or Ala <220> <221> MOD_RES <222> (24)..(24) <223> Leu or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (25)..(25) <223> Asp, Leu, Asn, Glu, His, Lys or Ala <220> <221> MOD_RES <222> (26)..(26) <223> Leu, Asp or Gly <220> <221> MOD_RES <222> (31)..(31) <223> Asp or Asn <220> <221> MOD_RES <222> (33)..(33) <223> Asp or Asn <220> <221> MOD_RES <222> (34)..(34) <223> Glu or Gln <220> <221> MOD_RES <222> (35)..(35) <223> Gly or Cys <400> 307 Xaa Xaa Glu Xaa Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Leu 1 5 10 15 Phe Thr Xaa Xaa Leu Leu Leu Xaa Xaa Xaa Ala Leu Leu Val Xaa Ala 20 25 30 Xaa Xaa Xaa Thr Gly Gly 35 <210> 308 <211> 44 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> May or may not be present <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> May or may not be present <220> <221> MOD_RES <222> (22)..(22) <223> May or may not be present <220> <221> MOD_RES <222> (30)..(30) <223> May or may not be present <220> <221> MOD_RES <222> (40)..(40) <223> May or may not be present <220> <221> MOD_RES <222> (42)..(42) <223> Lys, Cys or absent <400> 308 Asp Gly Gly Glu Gln Asn Asp Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp 1 5 10 15 Trp Leu Phe Thr Thr Leu Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Leu Ala Leu 20 25 30 Leu Val Asp Ala Asp Glu Gly Cys Thr Xaa Gly Gly 35 40 <210> 309 <211> 38 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide,which is modified at the CYS, residue 37 of the peptide, with a S-S-linker attqached to the nitrogen of amino-phalloidin <400> 309 Ala Ala Glu Gln Asn Pro Ile Tyr Trp Ala Arg Tyr Ala Asp Trp Leu 1 5 10 15 Phe Thr Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Asp Ala 20 25 30 Asp Glu Gly Thr Cys Gly 35 <210> 310 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> modification of Cys residue 30 with a S-S linker attached to 2-amino phalloidin, Lys residue 29 modified with an alkyl linker attached to rhodamine, and Alanine residue 1 modified with a COCH3 group. <400> 310 Ala Glu Asp Gln Asn Pro Tyr Trp Ala Arg Tyr Asp Trp Leu Phe Thr 1 5 10 15 Thr Pro Leu Leu Leu Leu Asp Leu Ala Leu Leu Val Asp Cys Gly 20 25 30 <210> 311 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 311 Gly Leu Ala Gly Leu Ala Gly Leu Leu Gly Leu Glu Gly Leu Leu Gly 1 5 10 15 Leu Pro Leu Gly Leu Leu Glu Gly Leu Trp Leu Gly Leu Glu Leu Glu 20 25 30 Gly Asn

Claims (55)

  1. 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00220

    상기 식에서:
    R7은 펩티드이고;
    R8은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되고:
    Figure pct00221

    Figure pct00222

    Figure pct00223

    Figure pct00224

    Figure pct00225

    Figure pct00226

    Figure pct00227

    Figure pct00228
    및
    Figure pct00229

    Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되고:
    Figure pct00230

    Figure pct00231

    Figure pct00232

    Figure pct00233

    Figure pct00234

    R1, R2, R3 , R4, R5, R6, R9, R10, R11, 및 R12 각각은 H, C1-4 알킬, C1-4 알케닐, C6-10 아릴, C3-10 사이클로알킬, 5-10 원 헤테로아릴, 4-10 원 헤테로사이클로알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택되고, 상기 C1-4 알킬, C1-4 알케닐, C6-10 아릴, C3-10 사이클로알킬, 5-10 원 헤테로아릴, 및 4-10 원 헤테로사이클로알킬, 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
    또는 R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
    또는 R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
    또는 R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
    또는 R3 및 R4는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
    또는 R5 및 R6은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
    R13은 H 또는 C1-6 알킬이고;
    A는 H 또는 C1-4 알킬이고;
    Ra1, Rb1, Rc1, 및 Rd1 각각은 H, C1-6 알킬, C2-6 알케닐, C2-6 알키닐, C1-6 할로알킬, OH, CN, NO2, 및 CO2CH3으로부터 독립적으로 선택되고; 상기 C1-6 알킬 및 C2-6 알케닐 각각은 OH, CN, NO2, 또는 CO2CH3으로 선택적으로 치환되고;
    Figure pct00235
    은 C6-10 아릴 또는 5-10 원 헤테로아릴이고; 상기 5-10 원 헤테로아릴은 적어도 하나의 고리 형성 탄소 원자 및 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 고리 형성 헤테로원자를 가지며;
    고리 G는 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기이고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
    [N, O, S]은 NH, O, 또는 S이고;
    [N, O]은 NH 또는 O이고;
    [C, N, O]은 CRXRY, NH, 또는 O이고; 그리고
    각각의 RX 및 RY는 H 및 C1-4 알킬로부터 독립적으로 선택된다.
  2. 청구항 1에 있어서,
    R7은 펩티드이고;
    R8은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되고:
    Figure pct00236

    Figure pct00237

    Figure pct00238

    Figure pct00239

    Figure pct00240

    Figure pct00241

    Figure pct00242

    Figure pct00243

    Q는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되고
    Figure pct00244

    Figure pct00245

    Figure pct00246

    Figure pct00247

    Figure pct00248
    및
    Figure pct00249

    R1, R2, R3 , R4, R5, R6, R9, R10, R11, 및 R12 각각은 H, C1-4 알킬, C1-4 알케닐, C6-10 아릴, 5-10 원 헤테로아릴, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택되고, 상기 C1-4 알킬, C1-4 알케닐, C6-10 아릴, 및 5-10 원 헤테로아릴 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
    또는 R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하고;
    또는 R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하고;
    또는 R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하고;
    또는 R3 및 R4는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하고;
    또는 R5 및 R6은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하고;
    R13은 H 또는 C1-6 알킬이고;
    A는 H 또는 C1-4 알킬이고;
    Ra1, Rb1, Rc1, 및 Rd1 각각은 H, C1-6 알킬, C2-6 알케닐, C2-6 알키닐, C1-6 할로알킬, OH, CN, NO2, 및 CO2CH3으로부터 독립적으로 선택되고; 상기 C1-6 알킬 및 C2-6 알케닐 각각은 OH, CN, NO2, 또는 CO2CH로 선택적으로 치환되고;
    Figure pct00250
    은 C6-10 아릴 또는 5-10 원 헤테로아릴이고; 상기 5-10 원 헤테로아릴은 적어도 하나의 고리 형성 탄소 원자 및 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 고리 형성 헤테로원자를 가지며;
    [N, O, S]은 NH, O, 또는 S이고;
    [N, O]은 NH 또는 O이고;
    [C, N, O]은 CRXRY, NH, 또는 O이고; 그리고
    각각의 RX 및 RY는 H 및 C1-4 알킬로부터 독립적으로 선택되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  3. 청구항 1 또는 2에 있어서, R7은 약 6.0 미만의 pH를 갖는 산성 또는 저산소성 맨틀을 갖는 세포막을 가로질러 R8Q-를 선택적으로 전달할 수 있는 펩티드인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  4. 청구항 1 또는 2에 있어서, R7은 다음의 서열:
    ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWCG (서열번호: 1; Pv1);
    AEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADECG (서열번호: 2; Pv2);
    ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWDADECG (서열번호: 3; Pv3);
    Ac-AAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTKCG (서열번호: 4; Pv4); 및
    AAEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADEGTC (서열번호 5; Pv5);
    중 적어도 하나를 포함하는 펩티드이고, 그리고 R7은 R7의 시스테인 잔기를 통해 Q에 부착되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  5. 청구항 1 또는 2에 있어서, R7은 다음의 서열:
    ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWCG (서열번호: 1; Pv1),
    AEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADECG (서열번호: 2; Pv2), 및
    ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWDADECG (서열번호: 3; Pv3)
    중 적어도 하나를 포함하는 펩티드이고, R7은 R7의 시스테인 잔기를 통해 Q에 부착되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  6. 청구항 1 또는 2에 있어서, R7은 다음의 서열을 포함하는 펩티드인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염: ADDQNPWRAYLDLLFPTDTLLLDLLWCG (서열번호: 1; Pv1).
  7. 청구항 1 또는 2에 있어서, R7은 다음의 서열을 포함하는 펩티드인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염: AEQNPIYWARYADWLFTTPLLLLDLALLVDADECG (서열번호: 2; Pv2).
  8. 청구항 1 내지 7 중 어느 한 항에 있어서, Q는 다음인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00251
  9. 청구항 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서, R1, R2, R3, 및 R4 각각은 H, C1-4 알킬, C1-4 알케닐, C6-10 아릴, 5-10 원 헤테로아릴, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택되고, 상기 C1-4 알킬, C1-4 알케닐, C6-10 아릴, 및 5-10 원 헤테로아릴 각각은 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  10. 청구항 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-14 사이클로알킬 기 또는 4-14 원 헤테로사이클로알킬 기를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  11. 청구항 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 1,2,3,4-테트라하이드로나프틸, 테트라하이드로푸라닐, 또는 테트라하이드로피라닐을 형성하는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  12. 청구항 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  13. 청구항 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로헥실 기를 형성하는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  14. 청구항 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서, Q는 다음인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00252
  15. 청구항 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서, Q는 다음인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00253
    .
  16. 청구항 1 내지 15 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R2 각각은 H 및 메틸로부터 독립적으로 선택되고, 그리고 R3, R4, R5, 및 R6 각각은 H인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  17. 청구항 1 내지 15 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R2 각각은 H 및 메틸로부터 독립적으로 선택하는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  18. 청구항 1 내지 15 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R2 각각은 H인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  19. 청구항 1 내지 15 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-7 사이클로알킬 기를 형성하는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  20. 청구항 1 내지 15 중 어느 한 항에 있어서, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로부틸 기를 형성하는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  21. 청구항 1 내지 8 및 16 내지 20 중 어느 한 항에 있어서, R3 및 R4 각각은 H인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  22. 청구항 1 내지 8 및 16 내지 20 중 어느 한 항에 있어서, R2 및 R4 각각은 H인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  23. 청구항 1 내지 8 및 16 내지 20 중 어느 한 항에 있어서, R5 및 R6 각각은 H인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  24. 청구항 1 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, R9, R10, R11, 및 R12 각각은 H 및 메틸로부터 독립적으로 선택되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  25. 청구항 1 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, R9, R10, R11, 및 R12 각각은 H인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  26. 청구항 1 내지 25 중 어느 한 항에 있어서, R8은 다음인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00254
  27. 청구항 1에 있어서, 화학식 (II):
    Figure pct00255

    또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 가지며,
    R7은 펩티드이고;
    R8은 토포이소머라제 I 억제제이고;
    고리 Z는 모노사이클릭 C5-7 사이클로알킬 고리 또는 모노사이클릭 5-7 원 헤테로사이클로알킬 고리이고;
    각각의 RZ는 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택되고;
    또는 2개의 인접한 RZ는 이들이 부착된 원자에 함께 융합된 모노사이클릭 C5-7 사이클로알킬 고리, 융합된 모노사이클릭 5-7 원 헤테로사이클로알킬 고리, 융합된 C6-10 아릴 고리, 또는 융합된 6-10 원 헤테로아릴 고리를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고;
    Ra1, Rb1, Rc1, 및 Rd1 각각은 H, C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐로부터 독립적으로 선택되고, 이들 각각은 할로, OH, CN, 및 NO2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되고; 그리고
    n은 0, 1, 2, 또는 3인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  28. 청구항 27에 있어서, R7은 서열번호: 1, 서열번호:2, 서열번호:3, 서열번호:4, 또는 서열번호:5의 서열을 포함하는 펩티드인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  29. 청구항 27에 있어서, R7은 Pv1, Pv2, Pv3, Pv4, 또는 Pv5인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  30. 청구항 27 내지 29 중 어느 한 항에 있어서, R7은 R7의 시스테인 잔기를 통해 코어에 부착되고, 식 II 내의 이황화물 모이어티의 황 원자 중 하나는 시스테인 잔기로부터 유래되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  31. 청구항 27 내지 30 중 어느 한 항에 있어서, R8은 캄프토테신, 오포테칸, 이리노테칸 (CPT-11), 실라테칸 (DB-67, AR-67), 코시테칸 (BNP-1350), 루르토테칸, 지마테칸 (ST1481), 벨로테칸 (CKD-602), 루비테칸, 토포테칸, 데룩스테칸, 또는 엑사테칸인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  32. 청구항 27 내지 30 중 어느 한 항에 있어서, R8은 엑사테칸인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  33. 청구항 27 내지 31 중 어느 한 항에 있어서, R8은 N 원자를 통해 코어에 부착되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  34. 청구항 27 내지 33 중 어느 한 항에 있어서, 고리 Z는 모노사이클릭 C5-7 사이클로알킬 고리인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  35. 청구항 27 내지 33 중 어느 한 항에 있어서, 고리 Z는 사이클로펜틸 고리인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  36. 청구항 27 내지 33 중 어느 한 항에 있어서, 고리 Z는 사이클로헥실 고리인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  37. 청구항 27 내지 33 중 어느 한 항에 있어서, 고리 Z는 사이클로헵틸 고리인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  38. 청구항 27 내지 33 중 어느 한 항에 있어서, 고리 Z는 모노사이클릭 5-7 원 헤테로사이클로알킬 고리인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  39. 청구항 27 내지 33 중 어느 한 항에 있어서, 고리 Z는 5-원 헤테로사이클로알킬 고리인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  40. 청구항 27 내지 30 중 어느 한 항에 있어서, 고리 Z는 6-원 헤테로사이클로알킬 고리인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  41. 청구항 27 내지 30 중 어느 한 항에 있어서, 고리 Z는 7-원 헤테로사이클로알킬 고리인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  42. 청구항 27 내지 41 중 어느 한 항에 있어서, 2개의 인접한 RZ는 이들이 부착된 원자에 함께 융합된 모노사이클릭 C5-7 사이클로알킬 고리, 융합된 모노사이클릭 5-7 원 헤테로사이클로알킬 고리, 융합된 C6-10 아릴 고리, 또는 융합된 6-10 원 헤테로아릴 고리를 형성하고, 이들 각각은 C1-4 알킬, 할로, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, 및 NRc1C(O)NRc1Rd1로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  43. 청구항 27 내지 41 중 어느 한 항에 있어서, n은 0인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  44. 청구항 27 내지 41 중 어느 한 항에 있어서, n은 1인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  45. 청구항 27 내지 42 중 어느 한 항에 있어서, n은 2인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  46. 청구항 27 내지 42 중 어느 한 항에 있어서, n은 3인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  47. 청구항 27 내지 33 및 42 내지 46 중 어느 한 항에 있어서, 식 (III), 식 (IV), 또는 식 (V)을 갖는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00256

    Figure pct00257
    .
  48. 청구항 1에 있어서, 다음으로부터 선택되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00258

    Figure pct00259

    Figure pct00260

    Figure pct00261
    및
    Figure pct00262
  49. 청구항 1에 있어서, 다음으로부터 선택되는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00263

    Figure pct00264

    Figure pct00265

    Figure pct00266

    Figure pct00267

    Figure pct00268

    Figure pct00269
    및
    Figure pct00270
  50. 청구항 1 내지 49 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물.
  51. 암의 치료가 필요한 환자에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 환자에게 청구항 1 내지 49 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 치료적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  52. 청구항 51에 있어서, 상기 암은 방광암, 골암, 신경교종, 유방암, 자궁경부암, 결장암, 결장직장암, 자궁내막암, 상피암, 식도암, 유잉 육종(Ewing's sarcoma), 췌장암, 담낭암, 위암(gastric cancer), 위장 종양, 두경부암, 장암, 카포시 육종(Kaposi's sarcoma), 신장암, 후두암, 간암, 폐암, 흑색종, 전립선암, 직장암, 신장 투명 세포 암종, 피부암, 위장암(stomach cancer), 고환암, 갑상선암, 및 자궁암으로부터 선택되는, 방법.
  53. 청구항 51에 있어서, 상기 암은 유방암, 결장직장암, 및 위암으로부터 선택되는, 방법.
  54. 청구항 52 또는 53에 있어서, 상기 유방암은 삼중-음성 유방암인, 방법.
  55. 다음의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염:
    Figure pct00271
    .
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