EA003362B1 - Способ увеличения прочности и упругости кости и сокращения переломов - Google Patents
Способ увеличения прочности и упругости кости и сокращения переломов Download PDFInfo
- Publication number
- EA003362B1 EA003362B1 EA200001015A EA200001015A EA003362B1 EA 003362 B1 EA003362 B1 EA 003362B1 EA 200001015 A EA200001015 A EA 200001015A EA 200001015 A EA200001015 A EA 200001015A EA 003362 B1 EA003362 B1 EA 003362B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- pth
- bone
- risk
- parathyroid hormone
- osteoporosis
- Prior art date
Links
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 title claims abstract description 317
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 75
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 title description 37
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 claims abstract description 251
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 claims abstract description 245
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 claims abstract description 242
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 claims abstract description 196
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 claims abstract description 99
- OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N teriparatide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CNC=N1 OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims abstract description 47
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 claims abstract description 39
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims abstract description 37
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 37
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 36
- 101001135770 Homo sapiens Parathyroid hormone Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 101001135995 Homo sapiens Probable peptidyl-tRNA hydrolase Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 23
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 16
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 15
- 102000058004 human PTH Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 102100036893 Parathyroid hormone Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims abstract description 11
- 230000000123 anti-resoprtive effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 108010073509 parathyroid hormone (1-31) Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 108010073230 parathyroid hormone (1-38) Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 claims abstract 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract 6
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 claims description 73
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 21
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 15
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 15
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 14
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 14
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 10
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 4
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 abstract 6
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 abstract 6
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 abstract 6
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 abstract 6
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 abstract 6
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 abstract 6
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 abstract 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 81
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 74
- 238000009806 oophorectomy Methods 0.000 description 52
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 44
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 43
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 43
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 42
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 39
- 206010041569 spinal fracture Diseases 0.000 description 35
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 31
- 210000002758 humerus Anatomy 0.000 description 25
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 25
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 25
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 23
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 21
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 20
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 20
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 19
- 210000002436 femur neck Anatomy 0.000 description 19
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 18
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 18
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 18
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 16
- 230000008859 change Effects 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 15
- 230000037118 bone strength Effects 0.000 description 15
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 15
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 14
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 12
- 210000001624 hip Anatomy 0.000 description 12
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 12
- 210000004705 lumbosacral region Anatomy 0.000 description 11
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 11
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 11
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 10
- 210000003275 diaphysis Anatomy 0.000 description 10
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 10
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 9
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 9
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 230000004097 bone metabolism Effects 0.000 description 8
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 8
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 8
- 206010061363 Skeletal injury Diseases 0.000 description 7
- 210000001564 haversian system Anatomy 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 6
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 6
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 6
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 6
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 6
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 6
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 230000009772 tissue formation Effects 0.000 description 6
- 210000000707 wrist Anatomy 0.000 description 6
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 description 5
- 101000823237 Homo sapiens Reticulon-1 Proteins 0.000 description 5
- 102100022647 Reticulon-1 Human genes 0.000 description 5
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-methyl-PhOH Natural products CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 5
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 description 5
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 4
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 4
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 4
- 210000000614 rib Anatomy 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 3
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000002980 Hyperparathyroidism Diseases 0.000 description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 3
- 108010049264 Teriparatide Proteins 0.000 description 3
- 238000003957 acoustic microscopy Methods 0.000 description 3
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 3
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 3
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 3
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 210000001037 metacarpus Anatomy 0.000 description 3
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 3
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 3
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 210000002320 radius Anatomy 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RGCKGOZRHPZPFP-UHFFFAOYSA-N Alizarin Natural products C1=CC=C2C(=O)C3=C(O)C(O)=CC=C3C(=O)C2=C1 RGCKGOZRHPZPFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020462 Humerus fracture Diseases 0.000 description 2
- 206010058359 Hypogonadism Diseases 0.000 description 2
- 208000000038 Hypoparathyroidism Diseases 0.000 description 2
- 208000006670 Multiple fractures Diseases 0.000 description 2
- 102100032256 Parathyroid hormone/parathyroid hormone-related peptide receptor Human genes 0.000 description 2
- 101710180613 Parathyroid hormone/parathyroid hormone-related peptide receptor Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N [N].NC(N)=O Chemical compound [N].NC(N)=O PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- HFVAFDPGUJEFBQ-UHFFFAOYSA-M alizarin red S Chemical compound [Na+].O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)C2=C1C=C(S([O-])(=O)=O)C(O)=C2O HFVAFDPGUJEFBQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 2
- 230000004094 calcium homeostasis Effects 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 2
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 2
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 2
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 2
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 150000003892 tartrate salts Chemical class 0.000 description 2
- 229960005460 teriparatide Drugs 0.000 description 2
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 2
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- 208000027502 Ankle fracture Diseases 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 description 1
- 101001135732 Bos taurus Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- 206010010214 Compression fracture Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- ZAHDXEIQWWLQQL-IHRRRGAJSA-N Deoxypyridinoline Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCC[N+]1=CC(O)=C(C[C@H](N)C([O-])=O)C(CC[C@H](N)C(O)=O)=C1 ZAHDXEIQWWLQQL-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 101100499270 Drosophila melanogaster Diap1 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- 241000402754 Erythranthe moschata Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010016970 Foot fracture Diseases 0.000 description 1
- 206010016997 Forearm fracture Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 206010019114 Hand fracture Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N Methyl methacrylate Chemical compound COC(=O)C(C)=C VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004067 Osteocalcin Human genes 0.000 description 1
- 108090000573 Osteocalcin Proteins 0.000 description 1
- 102000006461 Parathyroid Hormone Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010058828 Parathyroid Hormone Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010034246 Pelvic fractures Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010050808 Procollagen Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 206010037802 Radius fracture Diseases 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 208000027790 Rib fracture Diseases 0.000 description 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000020339 Spinal injury Diseases 0.000 description 1
- 208000013201 Stress fracture Diseases 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 241000718541 Tetragastris balsamifera Species 0.000 description 1
- 208000026062 Tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 101100532066 Xenopus laevis rtn1-a gene Proteins 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 239000003263 anabolic agent Substances 0.000 description 1
- 229940124325 anabolic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000006053 animal diet Substances 0.000 description 1
- 229940125681 anticonvulsant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000000784 arm bone Anatomy 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000003150 biochemical marker Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 238000007470 bone biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000018678 bone mineralization Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 150000001896 cresols Chemical class 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000004821 effect on bone Effects 0.000 description 1
- HESCAJZNRMSMJG-KKQRBIROSA-N epothilone A Chemical compound C/C([C@@H]1C[C@@H]2O[C@@H]2CCC[C@@H]([C@@H]([C@@H](C)C(=O)C(C)(C)[C@@H](O)CC(=O)O1)O)C)=C\C1=CSC(C)=N1 HESCAJZNRMSMJG-KKQRBIROSA-N 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 229940091249 fluoride supplement Drugs 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- -1 for example Chemical class 0.000 description 1
- 210000000245 forearm Anatomy 0.000 description 1
- 238000009615 fourier-transform spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 210000000527 greater trochanter Anatomy 0.000 description 1
- 210000004349 growth plate Anatomy 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 238000011540 hip replacement Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000148 hypercalcaemia Effects 0.000 description 1
- 208000030915 hypercalcemia disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009802 hysterectomy Methods 0.000 description 1
- 210000003692 ilium Anatomy 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 1
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 1
- 210000001930 leg bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001078 lithium Drugs 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 208000018769 loss of vision Diseases 0.000 description 1
- 231100000864 loss of vision Toxicity 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 125000003717 m-cresyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(O*)=C([H])C(=C1[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000005226 mechanical processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000011587 new zealand white rabbit Methods 0.000 description 1
- 235000003170 nutritional factors Nutrition 0.000 description 1
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 1
- 229940126701 oral medication Drugs 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002990 parathyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 108700000288 parathyroid hormone (1-28) Proteins 0.000 description 1
- 210000003049 pelvic bone Anatomy 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 229940067107 phenylethyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- XEBWQGVWTUSTLN-UHFFFAOYSA-M phenylmercury acetate Chemical compound CC(=O)O[Hg]C1=CC=CC=C1 XEBWQGVWTUSTLN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 235000012976 tarts Nutrition 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003325 tomography Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/29—Parathyroid hormone, i.e. parathormone; Parathyroid hormone-related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
- A61P3/14—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis for calcium homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/18—Drugs for disorders of the endocrine system of the parathyroid hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Orthopedics, Nursing, And Contraception (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к способу для увеличения прочности и/или упругости костей и/или снижения вероятности и/или тяжести переломов костей с помощью введения паратиреоидного гормона. Способ может быть использован для увеличения прочности или упругости костной ткани в области возможной или реальной травмы, такой как травма верхней части бедренной кости или позвоночника, у пациента с риском остеопороза или страдающего остеопорозом. Способ по настоящему изобретению может уменьшить распространенность переломов позвоночника, уменьшить распространенность множественных переломов позвоночника, уменьшить тяжесть переломов позвоночника и/или уменьшить распространенность не связанных с позвоночником переломов.
Description
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к способам для увеличения прочности и/или упругости костей и/или сокращения вероятности и/или тяжести переломов костей путем введения паратиреоидного гормона (гормона паращитовидной железы). Более конкретно, настоящее изобретение относится к способу увеличения прочности или упругости костной ткани в месте возможной или реальной травмы, например, такой как травма таза или позвоночника, у пациента с риском остеопороза или страдающего остеопорозом. Более конкретно, настоящее изобретение относится к способу уменьшения распространенности перелома позвоночника, уменьшения распространенности множественных переломов позвоночника, уменьшения тяжести перелома позвоночника и/или уменьшения распространенности не связанных с позвоночников переломов.
Предпосылки изобретения
Существующие агенты, такие как эстроген, бисфосфонаты, фторид или кальцитонин могут предотвратить потери костной ткани и вызвать 3-5% увеличение массы костной ткани с помощью повторного заполнения восстанавливаемого пространства, но общее образование костной ткани значительно не стимулируется. Удерживание костной ткани путем ингибирования метаболизма костной ткани не может быть достаточной защитой от риска перелома для пациентов, которые уже имеют значительные потери костной ткани. Анаболические агенты, которые увеличивают прочность кости путем стимулирования формирования костной ткани, предпочтительно могут обеспечить лучшую защиту от переломов у пациентов с выраженным остеопорозом.
Паратиреоидный гормон (РТН) представляет собой продукт из 84 аминокислот, выделяемый паращитовидной железой млекопитающих, который контролирует уровни сывороточного кальция путем его воздействия на различные ткани, включая костную ткань. Ν-концевые 34 аминокислоты бычьего и человеческого РТН (РТН(1-34)) согласно оценкам являются биологически эквивалентами (полноразмерного) гормона. Другие аминоконцевые фрагменты РТН (включая, например, 1-31 и 1-38), или РТНгР (РТН-зависимый пептид/белок) или аналоги одного из них или обоих, которые активируют рецептор РТН/РТНгР (рецептор РТН1), как показано, проявляют подобные же биологические воздействия на массу костной ткани, хотя величина таких воздействий может быть различной.
Исследования на людях с различными формами РТН продемонстрировали анаболическое воздействие на костную ткань и вызвали значительный интерес к их использованию при лечении остеопороза и связанных с ним заболеваний костной ткани. Значительные анаболические воздействия РТН на костную ткань, включая стимуляцию формирования костной ткани, которая приводит к общему увеличению массы или/и прочности костной ткани, продемонстрированы на многих опытных животных и на людях.
Обычно предполагается, что введение РТН людям и соответствующим опытным животным обладает отрицательным воздействием на кортикальный слой костной ткани. На самом деле, происходящее естественным образом увеличение уровня эндогенного РТН, которое происходит при расстройственном гиперпаратироидизме, приводит к утончению кортикального слоя костной ткани, сопровождающемуся увеличением связности и массы губчатой костной ткани. Последние исследования показывают, что при восстановлении гаверсова кортикального слоя кости (обнаруженного у людей и высших млекопитающих) под действием РТН происходит перераспределение костной ткани, так что прочность и масса кортикального слоя уменьшается, в то время как масса и прочность губчатой костной ткани увеличивается. Например, в опубликованных клинических исследованиях введения РТН масса кортикального слоя костной ткани уменьшается после лечения экзогенным РТН, и эти факты вызывают озабоченность по поводу того, что лечение с помощью РТН будет приводить к уменьшению массы и прочности кортикального слоя костной ткани. Одной из проблем, возникающих при этих исследованиях, является то, что при этом может происходить общая потеря массы костной ткани скелета, связанная с потерями кортикального слоя костной ткани. Высокую клиническую важность представляет то, что, при остеопорозе более высокие потери губчатой костной ткани по сравнению с потерями кортикального слоя костной ткани означают, что механическая нагрузка ложится в основном на оставшийся кортикальный слой костной ткани. Продолжающиеся потери кортикального слоя костной ткани могут увеличивать риск перелома. По этой причине является важным, чтобы терапевтический агент для остеопороза поддерживал или увеличивал оставшийся у пациента кортикальный слой костной ткани.
Воздействие РТН на кортикальный слой костной ткани исследовалось на животных, но не на человеке, с гаверсовым восстановлением, таких как собаки, хорьки, овцы и обезьяны, но размеры выборок, как правило, являются слишком малыми для надежного статистического анализа. Воздействие изменений, вызванных лечением РТН, на механические свойства кортикального слоя костной ткани у таких животных остается неизвестным. Опубликованные исследования на грызунах демонстрируют увеличение массы кортикального слоя костной ткани при введении РТН, но потерю этого выигрыша после отмены лечения РТН. Однако кортикальный слой костной ткани у грызунов имеет структуру, совершенно отличную от гаверсова кортикального слоя костной ткани, и восстанавливается скорее путем поверхностного аппозиционного формирования и резорбции, чем путем интракортикального восстановления остеонов. Далее технологические ограничения на биомеханические исследования на относительно коротких костях грызунов приводят к артефактам при измерениях, когда агент, например РТН, изменяет геометрию кости, делая кость более толстой. Такие артефакты делают экстраполяцию реакций кортикального слоя костной ткани крысы на такие же слои костной ткани у людей или других животных с остеональным восстановлением ненадежными. Следовательно, существующие данные для животных, подобно людям, подвергающихся гаверсову восстановлению, указывает, что РТН может обладать побочным эффектом на кортикальный слой костной ткани, вызывая общие потери массы костной ткани из-за истощения кортикального слоя костной ткани.
Как следствие, популярным мнением относительно воздействия РТН является то, что пациенты требуют одновременного или последующего лечения от резорбции, чтобы свести к минимуму потери костной ткани, вызванные РТН. На практике эта модель была основой для нескольких клинических исследований на женщинах. Например, три клинических исследования использовали РТН для женщин в постменопаузальном периоде при одновременной терапии кальцитомином или эстрогеном, или для женщин в предменапаузальном периоде с использованием агониста СпКН, 8уиаге1, для эндометриоза. Противоположные воздействия эстрогена и РТН на метаболизм кортикального слоя костной ткани делает особенно сложным наблюдение воздействия именно РТН при объединенной терапии этими двумя агентами.
Остается необходимость в использовании РТН для увеличения крепости и упругости костей у людей и других животных, проявляющих гаверсово восстановление, и для понижения распространенности переломов костей у этих животных. Далее остается необходимость в способе для увеличения качества и количества кортикального слоя костной ткани.
Краткое описание изобретения
Настоящее изобретение включает способ увеличения прочности или/и упругости костной ткани, предпочтительно кортикального слоя костной ткани, или/и сокращения распространенности или/и тяжести переломов путем введения паратиреоидного гормона. Более конкретно, настоящее изобретение относится к способу увеличения прочности или упругости костной ткани в месте возможной или реальной травмы. Увеличение прочности или/и упругости костной ткани может проявляться различными путями, известными специалистам в данной области, например, такими как увеличение плотности минеральных веществ костной ткани, увеличение содержания минеральных веществ в костной ткани, увеличение работы до разрушения, и тому подобное. В одном из воплощений способ по настоящему изобретению сокращает распространенность или тяжесть переломов позвоночника или/и переломов, не связанных с позвоночником. Способ по настоящему изобретению может быть использован для уменьшения риска таких переломов или для лечения таких переломов. В частности, способ по настоящему изобретению может сократить распространенность перелома позвоночника или/и перелома, не связанного с позвоночником, уменьшить тяжесть перелома позвоночника, уменьшить распространенность множественных переломов позвоночника, улучшить качество костной ткани и тому подобное.
Настоящий способ может увеличить прочность или упругость на месте возможной травмы, например верхней части бедренной кости или позвоночника пациента с остеопорозом, или в другом месте, имеющем аномально низкую массу костной ткани или плохую структуру костной ткани. Настоящий способ может также увеличить прочность или упругость костной ткани в месте возможной травмы, например, такой как перелом таза или позвоночника. Предпочтительным субъектом для способа по настоящему изобретению является женщина или мужчина с риском, связанным с остеопорозом, предпочтительно женщина в постменопаузальном периоде, и являющийся независимым от одновременно проводимой гормон-заместительной терапии (НКТ), эстрогенной или эквивалентной терапии, или противорезорбционной терапии. В одном из воплощений пациент получает также дополнительное лечение в виде кальция или/и витамина Ό.
Паратиреоидный гормон, такой как рекомбинантный паратиреоидный гормон человека с Ν-концевыми аминокислотами 1-34, может вводиться либо циклически, либо с перерывами. Предпочтительно циклическое введение включает введение РТН в течение 2 или более циклов восстановления и отмену лечения РТН в течение одного или более циклов восстановления. Далее согласно способу настоящего изобретения увеличение прочности или/и упругости костной ткани может продолжаться в течение нескольких циклов восстановления или вплоть до нескольких лет после последнего введения паратиреоидного гормона.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1А и 1В демонстрируют, что ΒΜΌ (плотность минеральных веществ в костной ткани) и ВМС (содержание минеральных веществ в костной ткани) в срединной стержневой структуре бедренной кости (кортикальная костная ткань) (А) и в проксимальной части бедренной кости (губчатая костная ткань + кортикальная костная ткань) (В) являются значительно большими у животных, пролеченных РТН, чем у контрольных животных, при обеих дозах.
Фиг. от 2А до 2Ό демонстрируют воздействия РТН на механическую прочность и поперечный момент инерции (С8М1) в кортикальном слое костной ткани срединной стержневой структуры бедренной кости.
Фиг. 3 иллюстрирует процент изменения измеренных с помощью ΌΧΑ показателей содержания минеральных веществ в костной ткани в целом для контрольной и пролеченной групп.
Фиг. 4А-4С иллюстрируют процент изменения измеренных с помощью ΌΧΑ показателей позвоночника для контрольной и пролеченной групп в поясничных позвонках 2-4 для площади кости (А), содержания минеральных веществ в костной ткани (В), и плотности минеральных веществ в костной ткани (С).
Фиг. 5А и 5В иллюстрируют увеличение массы костной ткани (А) и прочности костной ткани (В) поясничных позвонков приматов, пролеченных паратиреоидным гормоном.
Фиг. 6А и 6В иллюстрируют увеличение прочности шейки бедра (А) и постоянной прочности средней части диафиза плечевой кости (В) у приматов, пролеченных паратиреоидным гормоном.
Фиг. 7 иллюстрирует активацию скоростей формирования костной ткани на эндостальной и периостальной поверхностях срединной стержневидной структуры плечевой кости.
Фиг. 8 иллюстрирует гистограммный анализ изменения плотности вокселов костной ткани в поясничном позвонке, являющегося результатом лечения РТН, по сравнению с контролем. Происходит увеличение плотности кортикального отдела кости после прекращения лечения РТН.
Фиг. 9 иллюстрирует увеличение ΒΜΌ поясничного отдела позвоночника в течение 23 месяцев лечения пациентов, либо 20 мкг/день РТН, либо 40 мкг/день РТН, по сравнению с контролями, пролеченными плацебо.
Фиг. 10 иллюстрирует увеличение ΒΜΌ бедренной кости и шейки бедра в течение 24 месяцев лечения пациентов либо 20 мкг/день РТН, либо 40 мкг/день РТН, по сравнению с контролями, пролеченными плацебо.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к способу увеличения прочности или/и упругости костной ткани или/и уменьшения распространенности переломов у пациента путем введения паратиреоидного гормона. Настоящий способ может быть использован для увеличения упругости или/и прочности в месте возможной травмы или в месте реальной травмы. Травма, как правило, включает перелом, хирургическую травму, замену сустава, ортопедические процедуры и тому подобное. Увеличение прочности или/и упругости костной ткани, как правило, включает увеличение плотности минеральных веществ в кортикальном слое костной ткани, увеличение прочности кости, увеличение сопротивления нагрузке и тому подобное. Уменьшение распространенности переломов, как правило, включает уменьшение возможной или реальной распространенности перелома у пациента по сравнению с не пролеченной контрольной группой.
Как используется здесь, термин предельная сила относится к максимальной силе, которую может выдержать образец костной ткани; упругость относится к крутизне линейной части кривой нагрузка-деформация; а работа до разрушения относится к площади под кривой нагрузка-деформация до разрушения. Каждый из этих параметров может быть измерен и вычислен с помощью методов, которые являются стандартными в области исследования костной ткани. Эти параметры представляют собой структурные свойства, которые зависят от внутренних свойств материала и геометрии и могут быть определены таким образом, как описано в Тигпег СН. Вигг ΌΒ 1993 Вакю ЫошесБап1са1 шеакитешейк Ьопек: а 1йопа1. Вопе 14:595-608, которая включена сюда в качестве ссылки. Предельная сила, упругость и работа до разрушения могут быть нормализованы для получения внутренних свойств материала, таких как предельное напряжение, модуль упругости и прочность, которые не зависят от размера и формы. Как он используется здесь, термин предельное напряжение относится к максимальному напряжению, которое образец может выдержать, модуль упругости относится к внутренней упругости материала; прочность относится к сопротивлению на излом на единицу объема. Каждый из этих параметров может быть определен с помощью методов известных в данной области.
Определение. Прочность бедренной кости, как она упоминается здесь, может быть измерена на шейке бедренной кости или в ее срединной стержневой структуре, как правило, используя трехточечный или четырехточечный изгиб в последнем месте.
Травма кости
Способ по настоящему изобретению представляет преимущество пациенту, который может страдать или страдает от травмы одной или нескольких костей. Способ может представлять преимущества для пациентов млекопитающих, таких как люди, лошади, собаки и кошки, в особенности люди. Травма кости может представлять проблему для беговых лошадей и собак, а также для домашних животных. Люди могут страдать от множества травм костей, вызванных, например, несчастным случаем, медицинским вмешательством, заболеванием или расстройством. У молодых людей травма костей наиболее вероятно будет вызываться переломом, медицинским вмешательством для лечения перелома, или лечением суставов или соедини003362 тельной ткани, поврежденных, например, во время физических упражнений. Другие типы травмы кости, такие как остеопороз, дегенеративное заболевание костной ткани (такое как артрит или остеоартрит), замена бедренного сустава или вторичные состояния, связанные с терапевтическим лечением других системных заболеваний (например, глюкокортикоидный остеопороз, ожоги или трансплантация органов), наиболее часто встречаются у пожилых людей.
Предпочтительные пациенты включают людей, предпочтительно женщин, с риском заболевания или с выраженным остеопорозом. Факторы риска для остеопороза известны в данной области и включают гипогонадальные состояния у мужчин и женщин, независимо от возраста, состояния, заболевания, или лекарственные средства, которые вызывают гипогонадизм, факторы питания, связанные с остеопорозом (низкий кальций или витамин Ό является наиболее распространенным), курение, алкоголь, лекарства, связываемые с потерями костной ткани (такие как глюкокортикоиды, тироксин, гепарин, литий, противосудорожные препараты, и тому подобное), потеря зрения, которая предрасполагает к падениям, космические полеты, иммобилизация, постоянная госпитализация или постельный режим, и другие системные заболевания, которые связываются с увеличенным риском остеопороза. Признаки, указывающие на присутствие остеопороза, известны в данной области и включают радиологическое доказательство, по меньшей мере, одного компрессионного перелома позвоночника, низкую массу костной ткани (как правило, по меньшей мере, 1 стандартное отклонение вниз от нормальных значений для молодых людей), или/и атравматические переломы.
Остеопороз может приводить, например, к переломам позвоночника или/и к переломам, не связанным с позвоночником. Примеры не связанных с позвоночником переломов включают перелом кисти, перелом предплечья, перелом проксимальной части плечевой кости, перелом лучевой кости, перелом лодыжки, перелом плечевой кости, перелом ребра, перелом стопы, перелом таза или их сочетание. Способ по настоящему изобретению может быть использован для уменьшения риска таких переломов или для лечения таких переломов. Риск перелома уменьшается, и заживление перелома облегчается путем увеличения прочности или/и упругости костной ткани, например, в тазу и/или в позвоночнике. Типичной женщиной с риском развития остеопороза является женщина в постменопаузальном периоде или женщина в предменапаузальном периоде, женщина, страдающая гипогонадизмом. Предпочтительным пациентом является женщина в постменопаузальном периоде, являющаяся независимой от сопутствующей гормон-заместительной терапии (НВТ), эстрогенной или эквивалентной терапии или противорезорбционной терапии. Способ по настоящему изобретению может предоставлять преимущество пациенту на любой стадии остеопороза, но особенно на ранней и поздней стадии.
Настоящее изобретение включает способ, эффективный, в особенности, для предотвращения или уменьшения распространенности переломов у пациента с риском остеопороза или его развития. Например, настоящее изобретение может уменьшить распространенность перелома позвоночника или/и перелома, не связанного с позвоночником, уменьшить тяжесть перелома позвоночника, уменьшить распространенность множественного перелома позвоночника, улучшить качество костной ткани и тому подобное. В другом воплощении, способ по настоящему изобретению может приносить преимущества пациентам с низкой массой костной ткани или с переломами в прошлом, в дальнейшем с риском множественных переломов скелетных костей, таким как пациенты, у которых спинальный остеопороз может быстро прогрессировать.
Способ по данному изобретению может быть с успехом применен для других пациентов с риском травмы костей или с травмами костей. Например, у множества пациентов с риском одного или нескольких переломов, указанных выше, проведение хирургических операций может привести к травме костей, или они могут подвергаться ортопедической процедуре, которая манипулирует костью в скелете с аномально низкой массой костной ткани или с плохой структурой костной ткани, или с дефицитом минеральных веществ. Например, восстановление функций после хирургической операции, такой как замена сустава (например, коленного или тазобедренного) или фиксация позвоночника, или других процедур, которые иммобилизуют кость или скелет, может быть улучшено благодаря способу по настоящему изобретению. Способ по настоящему изобретению может также облегчить восстановление после ортопедических процедур, которые манипулируют костью в области с аномально малой массой костной ткани или плохой структурой костной ткани, эти процедуры включают хирургическое разделение костей, включая остеотомии, замену сустава, где потеря структуры костной ткани требует, например, реструктуризации с образованием ацетабулярной полочки и предотвращения смещения протеза. Другие соответствующие субъекты для применения настоящего изобретения включают тех, кто страдает гиперпаратироидизмом или искривлением позвоночника, и кто может получать травму, связанную с гиперпаратироидизмом или развитием искривления позвоночника или вызванной ими.
Прочность и упругость костей
Способ по настоящему изобретению уменьшает риск травмы или помогает восста9 новлению после травмы путем увеличения прочности и/или упругости костной ткани. Как правило, прочность или упругость костей определяется массой и прочностью кортикального слоя и различных губчатых слоев костной ткани. Способ по настоящему изобретению может обеспечить уровни прочности, упругости, массы или/и крепости кости в пределах, характерных для нормальной популяции, или выше их. Предпочтительно настоящее изобретение обеспечивает повышенные уровни по сравнению с уровнями, существующими после травмы или связанными с риском получения травмы. Увеличение прочности и/или упругости сокращает риск или вероятность перелома по сравнению с не пролеченной контрольной популяцией.
Некоторые характеристики костной ткани при увеличении обеспечивают повышение прочности или/и упругости костей. Такие характеристики включают плотность минерального вещества в костной ткани (ΒΜΌ), содержание минерального вещества в костной ткани (ВМС), частоту активации или скорость формирования кости, трабекулярное число, толщину губчатого слоя, связность губчатого и других слоев, периостальное и эндокортикальное формирование костной ткани, пористость кортикального слоя, площадь поперечного сечения кости и массу кости, сопротивление нагрузке или/и работу до разрушения. Увеличение одной или нескольких из этих характеристик является предпочтительным результатом осуществления способа по настоящему изобретению.
Некоторые характеристики костей, такие как пространство для костного мозга и модуль упругости, когда они уменьшаются, обеспечивают повышенную прочность или/и упругость кости. Более молодая (более прочная и жесткая) костная ткань имеет кристаллиты, которые, как правило, меньше, чем кристаллиты в более старой костной ткани. Таким образом, общее уменьшение размера кристаллитов костной ткани увеличивает прочность и упругость костной ткани и может понизить распространенность переломов. Кроме того, созревание кристаллитов костной ткани может обеспечить дополнительные желательные характеристики костной ткани, включая увеличение прочности и упругости костной ткани, или/и могут понизить распространенность переломов. Уменьшение одной или нескольких из этих характеристик может быть предпочтительным результатом способа по настоящему изобретению.
Способ по настоящему изобретению является эффективным при увеличении прочности или/и упругости любой из нескольких костей. Например, настоящий способ может увеличить прочность или/и упругость костей, включая кость таза, например, подвздошную кость, кость ноги, такую как бедренная кость, кость позвоночника, такую как позвонок или кость руки, такую как дистальная часть кости предплечья или проксимальная часть плечевой кости. Это увеличение прочности или/и упругости может осуществляться по всей кости или локализоваться в определенных частях кости. Например, прочность или/и упругость бедренной кости может быть увеличена путем увеличения прочности или/и упругости шейки бедра или большого вертела бедренной кости. Прочность или/и упругость таза может быть повышена путем увеличения прочности или/и упругости подвздошного гребня или подвздошного остистого отростка. Прочность или/и упругость позвонка может быть увеличена путем увеличения прочности или/и упругости его ножек дуги, пластинки дуги или тела. Преимущественно влияние оказывается на позвонки определенных частей позвоночника, таких как шейные, грудные, поясничные, крестцовые или/и копчиковые позвонки. Предпочтительно воздействие происходит на один или несколько средних грудных или/и верхних поясничных поясков.
Увеличение прочности или/и упругости может быть обнаружено в каждом из типов костной ткани или преимущественно в одном из типов костной ткани. Типы костной ткани включают губчатую (различные типы губчатых тканей или пластинчатую) костную ткань и компактную (кортикальную или плотную) костную ткань и костную мозоль. Способ по настоящему изобретению предпочтительно увеличивает прочность или/и упругость при своем воздействии на губчатую и кортикальную костную ткань, или на одну только кортикальную костную ткань. Губчатая костная ткань, к которой прикреплена соединительная ткань, может также быть сделана более прочной или/и жесткой с помощью настоящего способа. Например, является преимуществом обеспечение дополнительной прочности на месте прикрепления связки, сухожилия или/и мышцы.
В другом аспекте настоящего изобретения увеличение прочности или упругости может уменьшить распространенность переломов. В этом аспекте, увеличение прочности или упругости может включать уменьшение распространенности переломов позвоночника, уменьшение распространенности тяжелых переломов, уменьшение распространенности переломов средней тяжести, уменьшение распространенности переломов, не связанных с позвоночником, уменьшение распространенности множественных переломов или их сочетания.
Паратиреоидный гормон
В качестве активного ингредиента, композиция или раствор могут включать полноразмерный паратиреоидный гормон, включающий 84 аминокислоты, в частности, гормона человека, йРТН (1-84), полученный либо рекомбинантным путем, либо путем пептидного синтеза или путем экстракции из телесной жидкости человека. См., например, патент США № 5208041, включенный сюда в качестве ссылки.
Последовательность аминокислот 11РТН (1-84) опубликована Кттига с1 а1. ίη Вюсйет. Вюрйук. Век. Сотт., 114(2):493.
Композиция или раствор могут также включать в качестве активного ингредиента фрагменты или варианты фрагментов РТН человека или РТН крысы свиньи или быка, которые имеют активность РТН человека, как определяется на модели остеопороза подвергнутых овариэктомии крыс, опубликованной К1тте1 е1 а1. Епйосгшо1оду, 1993, 32(4):1577.
Фрагменты паратиреоидного гормона желательно включают, по меньшей мере, первые 28 Ν-концевых остатков, такие как РТН(1-28), РТН(1-31), РТН(1-34), РТН(1-37), РТН(1-38) и РТН(1-41). Альтернативы в форме вариантов РТН включают от 1 до 5 аминокислотных замещений, которые увеличивают стабильность и время полужизни РТН, например, замещение метиониновых остатков в положениях 8 или/и 18 лейцином или другой гидрофобной аминокислотой, которая улучшает стабильность РТН в отношении окисления, и замещение аминокислот на участке 25-27 нечувствительными к трипсину аминокислотами, такими как гистидин или другая аминокислота, которая повышает стабильность РТН в отношении протеазы. Другие подходящие формы РТН включают РТНгР, РТНгР(1-34), РТНгР(1-36) и аналоги РТН или РТНгР, которые активируют рецептор РТН1. Эти формы РТН охватываются термином паратиреоидный гормон, который используется здесь в общем смысле. Гормоны могут быть получены путем известных рекомбинантных или синтетических методов, таких как те, которые описаны в патентах США № 4086196 и 5556940, включенных сюда в качестве ссылки.
Предпочтительным гормоном является РТН(1-34) человека, также известный как терипаратид. Стабилизированные растворы РТН(134) человека, такие как рекомбинантный РТН(134) человека (тйРТН(1-34)), которые могут быть использованы в настоящем способе, описаны в заявке на патент США серийный № 60/069075, включенной сюда в качестве ссылки. Кристаллические формы РТН(1-34) человека, которые могут быть использованы в настоящем способе, описаны в заявке на патент США серийный № 60/069875, включенной сюда в качестве ссылки.
Введение паратиреоидного гормона
Паратиреоидный гормон может, как правило, вводиться парентерально, предпочтительно путем подкожной инъекции, с помощью способов и композиций, хорошо известных в данной области. Стабилизированные препараты РТН(1-34) человека, которые могут с преимуществами использоваться в настоящем способе, описаны в заявке на патент США серийный № 60/069075, включенной сюда в качестве ссылки. Эта заявка на патент также описывает многочисленные другие композиции для хранения и введения паратиреоидного гормона. Стабилизи рованный раствор паратиреоидного гормона может включать стабилизирующий агент, буфер, консервант и тому подобное.
Стабилизирующий агент, включенный в раствор или композицию, включает полиол, который включает сахарид, предпочтительно моносахарид или дисахарид, например, глюкозу, трегалозу, раффинозу, или сахарозу, сахарный спирт, такой, например, как маннитол, сорбитол или инозитол, и многоатомный спирт, такой как глицерин или пропиленгликоль или их смеси. Предпочтительным полиолом является маннитол или пропиленгликоль. Концентрация полиола может находиться в пределах от около 1 до около 20 мас.%, предпочтительно от около 3 до 10 мас.% от всего раствора.
Буфер, используемый в растворе или композиции настоящего изобретения, может представлять собой любую комбинацию кислот или солей, которая является фармацевтически приемлемой и способна поддерживать водный раствор в диапазоне значений рН от 3 до 7, предпочтительно от 3 до 6. Пригодные для использования системы буферов представляют собой, например, источники ацетатов, тартратов или цитратов. Предпочтительными системами буферов являются источники ацетатов или тартратов, наиболее предпочтительным является источник ацетатов. Концентрация буфера может находиться в пределах от около 2 до около 500 мМ, предпочтительно от около 2 до 100 мМ.
Стабилизированный раствор или композиция по настоящему изобретению может также включать парентерально приемлемый консервант. Такие консерванты включают, например, крезолы, бензиловый спирт, фенол, бензалконийхлорид, бензэтонийхлорид, хлорбутанол, фенилэтиловый спирт, метилпарабен, пропилпарабен, тимеросал, нитрат и ацетат фенил ртути. Предпочтительный консервант представляет собой м-крезол или бензиловый спирт; наиболее предпочтительным является м-крезол. Количество используемого консерванта может находиться в пределах от около 0,1 до около 2 мас.%, предпочтительно от около 0,3 до около 1,0 мас.% от всего раствора.
Таким образом, стабилизированный раствор терипаратида может содержать маннитол, ацетат и м-крезол с предсказанным временем хранения в упаковке в течение более 15 месяцев при 5°С.
Композиции паратиреоидного гормона могут, если это желательно, быть представлены в форме порошка, содержащего не более чем 2 мас.% воды, который получают в результате сушки вымораживанием стерильного водного раствора гормона, приготовленного путем смешивания выбранного паратиреоидного гормона, буфера и стабилизирующего агента таким образом, как описано выше. Особенно полезным в качестве буфера при приготовлении лиофилизированных порошков является источник тар тратов. Особенно полезные стабилизирующие агенты включают глицин, сахарозу, трегалозу и раффинозу.
Кроме того, паратиреоидный гормон может быть приготовлен с типичными буферами и наполнителями, используемыми в данной области для стабилизации и солюбилизации белков для парентерального введения. Используемые в данной области фармацевтические носители и их препараты описаны в Магбп, Кеттдои'к Рбагтаееибса1 Заепсек, 1516 Еб.; Маск РиЫкЫид Со., Еайои (1975). Паратиреоидный гормон может также быть доставлен через легкие, рот, нос с помощью суппозитория или с помощью пероральных препаратов.
Паратиреоидный гормон приготавливают для введения дозы, эффективной для увеличения прочности и/или упругости одной или нескольких из костей пациента и/или для уменьшения вероятности и/или тяжести переломов костей. Предпочтительно эффективная доза обеспечивает улучшение структуры, массы и/или прочности кортикального слоя костной ткани. Предпочтительно эффективная доза уменьшает распространенность переломов позвоночника, понижает распространенность множественных переломов позвоночника, уменьшает тяжесть перелома позвоночника и/или уменьшает распространенность переломов, не связанных с позвоночником. Предпочтительно пациент, принимающий паратиреоидный гормон, также принимает эффективные дозы кальция и витамина Ό, что может усилить воздействие гормона. Эффективная доза паратиреоидного гормона, как правило, является выше чем около 5 мкг/кг/день, в частности, у людей, она может повышаться в пределах от около 10 до около 40 мкг/кг/день или до больших значений, когда это является эффективным для достижения повышенной прочности или упругости, в частности, кортикального слоя костной ткани или для уменьшения распространенности перелома. Пациент, страдающий гипопаратироидизмом, может нуждаться в дополнительных или более высоких дозах паратиреоидного гормона; такой пациент также нуждается в заместительной терапии с помощью этого гормона. Дозы, необходимые для заместительной терапии при гипопаратироидизме, известны в данной области. В некоторых случаях воздействия, обусловленные РТН, могут наблюдаться при дозах, меньших, чем около 5 мкг/кг/день, или даже меньших, чем около 1 мкг/кг/день.
Гормон может вводиться регулярно (например, один раз или несколько раз каждый день или каждую неделю), с промежутками (например, нерегулярно в течение дня или недели) или циклично (например, регулярно в течение определенного периода дней или недель, за которым следует период без введения). Предпочтительно РТН вводится по одному разу в день в течение 1-7 дней в течение периода, находяще гося в пределах от 3 месяцев вплоть до 3 лет, для пациентов, страдающих остеопорозом. Предпочтительно, циклическое введение включает введение паратиреоидного гормона в течение, по меньшей мере, 2 циклов восстановления и отмену введения паратиреоидного гормона в течение, по меньшей мере, 1 цикла восстановления. Другой предпочтительный режим циклического введения включает введение паратиреоидного гормона в течение, по меньшей мере, от около 12 до около 24 месяцев и отмену введения паратиреоидного гормона в течение, по меньшей мере, 6 месяцев. Как правило, преимущества введения паратиреоидного гормона продолжаются после периода введения. Преимущества от нескольких месяцев введения могут продолжаться в течение года или двух или более без дополнительного введения.
Использования композиций паратиреоидного гормона
Настоящее изобретение также предлагает набор, включающий представленные фармацевтические композиции и композиции, предназначенные для использования по способам настоящего изобретения. Набор может содержать флакон, который содержит композицию по настоящему изобретению и соответствующие носители, либо в сухой, либо в жидкой форме. Набор дополнительно включает инструкции в форме этикетки на флаконе или/и в форме вкладки, помещенной в коробку, в которой упакован флакон, для использования и назначения введения соединений. Инструкции могут быть также напечатаны на коробке, в которую упакован флакон. Инструкции содержат информацию, такую как подходящая дозировка, и информацию о введении, чтобы дать возможность работающему в данной области специалисту назначить лекарство. Ожидается, что специалист, работающий в данной области, представляет собой любого врача, медицинскую сестру или технического работника, который может назначить лекарство.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей композицию из одного или нескольких паратиреоидных гормонов, таких как РТН(1-84) человека или РТН(1-34) человека, и который является пригодным для парентерального введения. Согласно настоящему изобретению препарат из одного или нескольких паратиреоидных гормонов, таких как РТН(1-84) человека или РТН(134) человека, могут быть использованы для производства композиции или лекарственного средства, пригодного для парентерального введения. Настоящее изобретение также относится к способам для производства композиций, включающих препарат из одного или нескольких паратиреоидных гормонов, таких как РТН(1-84) человека или РТН(1-34) человека, в форме, которая является подходящей для парентерального введения. Например, жидкая или твердая композиция может быть изготовлена несколькими путями с использованием обычных технологий. Жидкая композиция может быть изготовлена путем растворения одного или нескольких паратиреоидных гормонов, таких как РТН(1-84) человека или РТН(1-34) человека, в соответствующем растворителе, таком как вода, при соответствующем значении рН, включающем буферы или другие наполнители, например, с образованием одного из стабилизированных растворов, описанных здесь выше.
Примеры, которые следуют далее, являются иллюстрацией настоящего изобретения и не предполагается, что они будут его ограничивать.
Примеры
Пример 1. Увеличение прочности и плотности костной ткани при введении г1РТН(1-34) кроликам.
Экспериментальные процедуры.
Самки интактных новозеландских белых кроликов (НКР 1пс. Эспусг. Ра.), одних из самых маленьких животных, которые формируют остеоны путем интракортикального восстановления, в возрасте примерно 9 месяцев и весящие 3,25-3,75 кг, сортируют по средней массе тела в 3 группы по 6 животных в каждой. Две экспериментальные группы получают биосинтетический РТН(1-34) в дозах 10 или 40 мкг/мл/кг/ день. Контрольная группа получает 1,0 мл/кг/день подкисленного 0,9М солевого раствора, содержащего 2% активированной нагревом сыворотки крови кролика. РТН(1-34) или носитель вводят с помощью одноразовых ежедневных подкожных инъекций по 5 дней в неделю в течение 140 дней. Кроликов кормят лабораторным кормом для кроликов, содержащим 0,5% Са и 0,41% Р, и дают воду аб НЬйит.
Выбор доз основывается на серии предварительных исследований, показывающих, что (1) после однократного введения РТН(1-34) при 100 мкг/кг уровень сывороточного кальция увеличивается и не возвращается к базовому уровню через 24 ч, при этом после единичной дозы в 50 мкг/кг уровень сывороточного кальция возвращается к базовому уровню в пределах 24 ч, (2) повторяющиеся инъекции по 20 мкг/кг РТН(1-34) приводят к временному росту уровня сывороточного кальция с возращением к базовому уровню через 6-24 ч и (3) РТН(1-34) при <5 мкг/кг не изменяет гистоморфометрические показатели поверхностей костей.
Набор двойных ализариновых меток (81дта, 8ΐ. Ьошк) вводят внутримышечно при 20 мг/кг в дни 55 и 63, и набор двойных кальцеиновых меток (81дта, 8ΐ. Ьошк) вводят подкожно при 5 мг/кг в дни 15 и 7 перед забоем. Кроликов подвергают анестезии с помощью СО2 в случайной последовательности примерно через 3-6 ч после последней инъекции, чтобы получить кровь с помощью пункции сердца, а затем забивают с помощью пентобарбитала на трия (100 мг/кг) в виде внутрибрюшинной инъекции. Удаляют правую плечевую кость, обе бедренные кости, поясничные позвонки (Ь3-Ь5) и правую большеберцовую кость.
Химия крови.
Сывороточные уровни кальция, фосфата, щелочной фосфатазы, креатинина и азота в мочевине измеряют с помощью компьютеризированного многоканального анализа сыворотки крови.
Гистоморфометрия.
Гистоморфометрические измерения проводят на кортикальном слое костной ткани из срединной стержневой структуры большеберцовой кости и на губчатой костной ткани из Ь3. После забоя эти кости удаляют из каждого животного и фиксируют в 10% растворе формалина при нейтральном рН, полученном с помощью добавления буфера, в течение 24 ч. Ткани обезвоживают в ряде спиртовых растворов с различными концентрациями (70-100%, 2 изменения на каждую ступень, каждая в течение 4 ч в вакууме). Затем образцы помещают в ксилол и инфильтрируют метилметакрилатом в вакууме при 20 фунтах на квадратный дюйм (1240 г/см2) по 2 ч/стадия и согласно 24-часовому графику инфильтрации в автоматическом устройстве для обработки 811апбоп НурегсеШег (8йапбои Ыркйате, РйкЬигдй, РА). Образцы погружают в 2% ΌΌΚ-пласт с 0,2% инициатора (Эе1а^аге Э1атопб Кшуек, \УПттд1оп. ΌΕ). Поперечные срезы больше берцовой кости нарезают с толщиной 80 мкм с использованием алмазной проволочной пилы (Эе1а\уаге Э1атопб Кшуек, 1пс., ΌΕ) и окрашивают с помощью трихрома Гольднера. Неокрашенные срезы толщиной 80 мкм обрабатывают для динамической гистоморфометрии флюорохромных меток. Сагиттальные срезы Ь3 нарезают на микротоме КекйегНипд 2050 (Мадее 8с1еибйс 1пс., Эех1ег, ΜΙ) с толщиной 5 мкм и окрашивают с помощью тетрахрома Макнила или оставляют неокрашенными для динамической гистоморфометрии.
Гистоморфометрию производят при увеличении 150х с использованием флуоресцентного микроскопа №коп (Ор11рПо1. №коп, Токуо, 1арап) и полуавтоматической системы аналогоцифрового преобразования (Вюс.|иап1 IV, К&М Вютебтск, №1к11уШе, ΤΝ). Формирование костной ткани и ее резорбция в периостальных, эндокортикальных и интракортикальных оболочках измеряется по всей площади среза среднедиафизарных срезов большеберцовой кости. Измерения на губчатом веществе костной ткани проводят в пределах участка площадью 6 мм2 в центре поясничного позвонка, на расстоянии 0,5 мм от края окружающей кортикальной оболочки. Номенклатура приведена в соответствие с гистоморфометрической номенклатурой
А8ВМК СотииНее (Рагби АМ, _Эгехпег ΜΚ,
Е1опеих ЕН, Кашк 1А, Ма11ис1е Н, Меишег РЕ
Об 8М, Кескег КК 1987 Вопе 1иЧотог17 рйотейу: 5ΐ;·ιηά;·ΐΓάίζ;·ιΙίοη о£ потепс1а!иге, кутЬо1к, апб ишк. Керой о£ 1Не А8ВМК Нк1отогрйотейу Ыотепс1а1иге СоттЫее. ЕВопе Мшег. Кек. 2:595-610). Динамические параметры измеряют по отношению к уровню кальцеина.
Измерения массы костной ткани.
Среднюю часть бедренной кости и четвертого поясничного позвонка в 50% этаноле/солевом растворе сканируют по поперечному сечению с использованием количественной компьютерной томографии (ОСТ или рОСТ), используя 960А рОСТ и используя для анализа программное обеспечение ОюЫе. версию 5.1 (Ыог1апб/81га1ес, Е1. А1кшкоп, XVI). Измеряются параметры всей ткани, включая объемную плотность минеральных веществ в костной ткани (νΒΜΌ, мг/см3), площадь поперечного сечения (Х-Агеа, мм2), и содержание минеральных веществ в костной ткани (ВМС, мг), используя вокселы с размерами 148 х 148 х 1200 мкм. Объем может быть вычислен путем умножения значения Х-Агеа на толщину среза в 1,2 мм. Целую шейку бедра из вырезанной бедренной кости в ванне из 50% этанола/солевого раствора сканируют с использованием периферийного поглощения рентгеновских лучей с двумя энергиями (рЭЕХА, Ыог1апб/81га1ес). В частности, измеряют видимую плотность минеральных веществ в костной ткани (аВМЭ, г/см2), площадь проектированной поверхности (см2) и содержание минеральных веществ в костной ткани (ВМС, г) с использованием шагов сканирования 0,5 х 1,0 мм и порог 0,04.
Биомеханические исследования.
Механические свойства костей измеряются на срединной стержневой структуре правой бедренной кости и на теле Б5. Кости иссекают, очищают от соединительной ткани, заворачивают в марлю, смоченную изотоническим солевым раствором, и замораживают при -20°С до начала исследований. Перед исследованиями образцы оттаивают в течение 1-2 ч при комнатной температуре. Все образцы исследуют до разрушения в водяной ванне с циркуляцией воды при 37°С с использованием сервогидравлического испытательного устройства МТ8 810 (МТ8 Согр., М1ппеаро1к, ΜΝ). Кривые нагрузка-деформация записываются с использованием системы построения графиков измерений НР 7090А (Не\\1е11 Раскагб, Сатак, νΑ). Предельная сила (максимальное усилие, которое выдерживают образцы), упругость (крутизна линейной части кривой нагрузка-деформация) и работа до разрушения (площадь под кривой нагрузка-деформация до разрушения) измеряются с использованием системы аналого-цифрового преобразования (1апбе1 8с1епййс, Сойе Мабега, СА). Эти параметры представляют собой структурные свойства, которые зависят от внутренних свойств материала и геометрии. Тигпег СН,
Вшт ΌΒ 1993 Ваис Ьютесйашса1 теакитетепк Ьопе: а 1и1опа1. Вопе М:595-608. Данные нормализуют для получения внутренних свойств материала, таких как предельное напряжение (максимальное напряжение, которое могут выдержать образцы), модуль упругости (внутренняя упругость материала) и прочность (сопротивление на излом единичного объема), которые не зависят от размера и формы.
Определение. Прочность бедренной кости измеряют в средней части с использованием трехточечного изгиба. Бедренную кость закрепляют, при этом передняя часть находится напротив приспособления для приложения нагрузки. Нагрузка прикладывается к средней точке между двух опор, которые расположены на расстоянии 54 мм друг от друга. Ячейка с нагрузкой перемещается со скоростью 1 мм/с до тех пор, пока не происходит разрушение. Для нормализации полученных данных из кривой нагрузка-деформация, предельное напряжение изгиба вычисляется из предельной силы по формуле σί=ΕυΕτ/8Ι (1) где σ£ обозначает напряжение перелома при изгибе;
Еи представляет собой предельную силу;
Б представляет собой длину между опорами;
г представляет собой радиус в направлении спереди назад; и
I представляет собой момент инерции.
Определение. Значение для момента инерции вычисляется в предположении, что поперечные сечения бедренной кости являются эллиптическими.
Средняя толщина кортикального слоя костной ткани вычисляется из измерений толщины, проводимых в каждом из четырех квадрантов среза бедренной кости с помощью пары численных калибров, с точностью до 0,01 мм и с ошибкой ±0,005 мм (Мйи1оуо, 1араи).
Модуль упругости бедренной кости (Е£) вычисляют с использованием следующего уравнения:
Е£=(упругость)-(Б3/481) (2)
Прочность бедренной кости (Прочность) также вычисляют с использованием следующего уравнения:
Прочность£ = 3-(работа до разрушения)-г2/Б1 (3)
Для механических исследований пятого поясничного позвонка (Б5) обе концевые пластины тела позвонка отрезаются параллельно с использованием низкооборотной пилы ВиеЫет Поте! (ВиеЫет БТЭ, Еνаηкΐοη, 1Б). После исключения последующих процессов механическая прочность Б5 измеряется при сжатии. Сжимающая нагрузка прикладывается при «ударном» контроле, при скорости ползунка 1 мм/с через качающуюся пластинку для корректировки непараллельного расположения лице19 вых сторон тела позвонка. Для нормировки данных, полученных из кривой нагрузкадеформация, и для оценки внутренних свойств материала, которые не зависят от геометрии кости, предельное напряжение вычисляется как предельная сила, деленная на полную площадь поперечного сечения.
Площадь поперечного сечения (С8А) вычисляется как
С8А=паЬ/4 (4) где а и Ь представляют собой ширину в направлениях вперед - назад и от центра - наружу соответственно.
Модуль упругости позвонка (Еу) вычисляется как
Еу=(упругость)/(С8А/й) (5) где 11 представляет собой высоту тела позвонка в направлении от головы до хвоста.
Прочность позвонка (Прочность,,.) вычисляется как
Прочностьу=(работа до разрушения )/(С8А-й) (6)
Акустическая микроскопия.
Поперечные срезы толщиной 500-мкм вырезают из средней части диафиза правой плечевой кости с использованием алмазной проволочной пилы. Точная толщина каждого образца измеряется с использованием микрометра (ΜίЮоуо, 1арап) с разрешением 1 мкм. Измерения скорости звука проводятся с использованием сканирующего акустического микроскопа (ИН3, О1утриз, 1арап) с помощью способа, описанного ранее Назеда^а К, Титег СН, Кескег КК, Уи Е, Вигг ΌΒ 1995 Е1азйс ргорегйез о£ оз1еорогойс Ьопе теазигеб Ьу зеапптд асонзбе ткгозеору, Вопе 16:85-90. Используя эту методику, могут быть проведены детальные измерения внутренних механических свойств в заданной фокальной точке. 50 МГц преобразователь (У-390, Раиатебтез, УаИйат, МА) используют для генерации акустических волн в импульсно-эховом режиме. 50 МГц линза дает акустический луч диаметром примерно 60 мкм. Образцы закрепляют на дне камеры, заполненной водой при постоянной температуре (22°С). Время задержки между акустическими волнами, отраженными от верхней части образцов, и волнами, отраженными от нижней части образцов, измеряют с использованием цифрового осциллографа (ТО 8 620, Текйошх, Веауейои, ОК). Времена задержки измеряются в пяти различных позициях, так что каждая позиция находится на расстоянии, большем, чем 300 мкм от других позиций направленного наружу кортикального слоя плечевой кости. Скорость звука вычисляется как удвоенная толщина образцов, деленная на среднее время задержки. Влажную массу (У„) и массу в погруженном состоянии (XV,,) в 100% этиловом спирте измеряют с использованием весов (АЛ00, Мей1ег 1пз1гнтеп1 Согр., Не1дй1з1о^п, N1). Влажную плотность (р) вычисляют с использованием закона Архимеда:
Р={(У«/(У«-У,)}-рЕТОН (7) где рЕТОН представляет собой плотность спирта (0,789 г/см3).
Предполагая, что путь акустической волны в костной ткани является однородным, вычисляется коэффициент упругости (С), представляющий собой внутреннюю упругость образцов:
С=р-у2 (8) где р представляет собой влажную плотность; и ν представляет собой скорость звука. Статистический анализ.
Анализ по Бартлету используют для исследования гомогенности разброса. Если разброс является гомогенным, применяют односторонние тесты АЛОУА с РЬБЛ по Фишеру для апостериорного сравнения. Когда разброс не является гомогенным, используют непараметрический анализ разброса Крускала-Уоллиса с апостериорным анализом, использующим Итесты Манна-Уитни. Статическую значимость приписывают при р<0,05. Результаты представляют как среднее ±8ЕМ.
Результаты
Масса тела и биохимия.
Кролики, пролеченные носителем РТН(134) при 10 мг/кг/день, демонстрируют незначительные увеличения массы тела в течение 140 дней. Кролики, получавшие РТН(1-34) при 40 мкг/кг/день, проявляют небольшое увеличение массы тела в 51 г, представляющие собой 1,4 ± 1,6% потери массы тела во время эксперимента (табл. 1). Измеренные значения сывороточных показателей находятся в пределах нормальной физиологической реакции для кроликов, хотя и замечены небольшие увеличения уровня кальция и азота мочевины в сыворотке. Уровень сывороточной щелочной фосфатазы увеличивается в два раза при более высокой дозе РТН(134) (табл. 2).
Таблица 1
Воздействия РТН(1-34) на массу тела
| Контроль | РТН(1-34) 10 мкг/кг/день | РТН(1-34) 40 мкг/кг/день | |
| Начальная масса тела, кг | 3,43±0,08 | 3,42±0,08 | 3,42±0,08 |
| Конечная масса тела, кг | 3,70±0,05 | 3,51±0,05 | 3,37±0,10 |
| Увеличение массы тела, кг | 0,26±0,09 | 0,09±0,05 | -0,05±0,05* |
Данные представлены как среднее ±8ЕМ для 6 кроликов на группу.
*Р<0,05 по сравнению с контролем Таблица 2
Воздействия РТН(1-34) на химию сыворотки крови
| Контроль | РТН(1-34) 10 мкг/кг/день | РТН(1-34) 40 мкг/кг/день | |
| Кальций, мг/дл | 12,1±0,3 | 12,6±0,2 | 13,5±0,3* |
| Фосфат, мг/дл | 4,70±0,2 | 4,7±0,2 | 5,5±0,3 |
| Щелочная фосфатаза, и.е./л | 24,7±4,1 | 41,0±8,1 | 49,8±7,1* |
| Креатинин, мг/дл | 1,9±0,1 | 1,6±0,1 | 1,8±0,1 |
| Азот мочевины, мг/дл | 18,3±0,3 | 18,1±0,8 | 23,9±1,9 |
Данные представлены как среднее ±8ЕМ для 6 кроликов на группу.
*Р<0,05 по сравнению с контролем.
Гистоморфометрия.
Формирование костной ткани на периостальной (РюМ8/В8) и эндокортикальной (Ес.М8/В8) поверхностях срединной стержневой структуры большеберцовой кости у пролеченных РТН(1-34) групп возрастает (табл. 3). РюМ8/В8 у группы с более высокой дозой значительно больше, чем у других 2 групп (р<0,001), и Ес.М8/В8 у группы с более высокой дозой значительно больше, чем у контрольной группы (р<0,05). В соответствии с увеличением уровня сывороточной щелочной фосфатазы, скорости формирования костной ткани на каждой поверхности (РюВЕЯ/В8 и Ес.ВЕЯ/В8) гораздо выше у группы с более высокой дозой, чем у других 2 групп (р<0,05). Скорость аппозиции минеральных веществ (МАЯ) не изменяется ни на периостальной, ни на эндокортикальной оболочке.
Интракортикально, количество областей резорбции (ЯюЫ/С1.Аг) у кроликов, которым давали РТН(1-34) при 40 мкг/кг/день, значительно, в 7 раз, больше, чем у других 2 групп (р<0,05) (табл. 4). Количество меченых остеонов (Е.Оп.Ы/СЕАг) у кроликов, которым давали РТН(1-34) при 40 мкг/кг/день, также значительно возрастает по сравнению с другими 2 группами (р<0,01 по сравнению с контрольной группой, р<0,05 по сравнению с группой, получающей 10 мкг/кг/день). МАЯ является значительно большим у обеих пролеченных групп, чем у контрольной группы (р<0,01), но не существует значительной разницы между группами, пролеченными РТН. Скорость формирования костной ткани (ВЕЯ/ВУ) и частота активаций (Ас.Е) возрастает (р<0,05 и р<0,01 соответственно) при обеих дозах.
Хотя площадь поверхности костной ткани (В.Аг) увеличивается при обеих дозах, значительная разница обнаружена только между группой с более высокой дозой и контрольной группой (р<0,01). Площадь поверхности костного мозга (Ма.Аг) уменьшается после лечения, но не различается значительно для всех трех групп. Однако площадь поверхности кортикального слоя (СйАг) у группы с более высокой дозой является значительно большей, чем у других 2 групп (р<0,0001 по сравнению с контрольной группой, р<0,05 по сравнению с группой с меньшей дозой). СЕЛг у группы с более низкой дозой также является значительно более высокой, чем у контроля (р<0,05). Подобные результаты обнаружены и для % СЕАг.
Пористость кортикального слоя (СЕРо) у кроликов, которым давали РТН(1-34) при 10 мкг/кг/день, вдвое больше, чем у контрольной группы (р<0,05), в то время как СЕРо у кроликов, которым давали РТН(1-34) при 40 мкг/кг/день, в 6 раз больше, чем у контрольной группы (р<0,01). Однако пористый слой находится в эндокортикальном отделе и, при таком расположении является маловероятным, что он вносит какой-либо вклад в биомеханическую прочность, поскольку РТН также увеличивает площадь поверхности кортикального слоя костной ткани, что согласуется с увеличением поперечного момента инерции.
Таблица 3
Воздействия РТН(1-34) на периостальное и эндокортикальное восстановление костной ткани в срединной стержневой структуре большеберцовой кости
| Параметры | Аббревиатура | Контроль | РТН(1-34) 10 мкг/кг/день | РТН(1-34) 40 мкг/кг/день |
| Поверхность эндокортикального остеоида | Ес.О8/В8(%) | 8,8±6,0 | 13,7±10,5 | 20,2±5,8 |
| Толщина эндокортикального остеоида | Ес.О.Тй (мкм) | 7,4±2,4 | 3,7±2,3 | 8,1±0,9 |
| Скорость периостальной аппозиции минеральных веществ | РюМАЯ (мкм/день) | 0,33±0,17 | 0,38±0,08 | 0,66±0,14 |
| Скорость эндокортикальной аппозиции минеральных веществ | Ес.МАЯ (мкм/день) | 1,33±0,22 | 0,79±0,16 | 1,32±0,15 |
| Периостальная поверхность минерализации | Р5.М8/В8 (%) | 3,8±1,9 | 8,2±2,1 | 22,3±2,7*7 |
| Эндокортикальная поверхность минерализации | Ес.М8/В8(%) | 26,4±6,6 | 32,6±8,2 | 57,7±10,4*ς |
| Скорость периостального формирования костной ткани | РюВЕЯ/В8 мкм3/мкм2 /год | 0,02±0,02 | 0,03±0,01 | 0,16±0,05*ς |
| Скорость эндокортикального формирования костной ткани | Ес.ВЕЯ/В8 мкм3/мкм2/год | 0,40±0,10 | 0,31±0,10 | 0,72±0,12*ς |
Данные представлены как среднее ±8ЕМ для 6 кроликов на группу. *Р<0,05 по сравнению с контролем.
'Р<0.05 по сравнению с РТН(1-34) при 10 мкг/кг/день.
Таблица 4
Воздействия РТН(1-34) на интракортикальное восстановление костной ткани в срединной стержневой структуре большеберцовой кости
| Параметры | Аббревиатура | Контроль | РТН(1-34) 10 мкг/кг/день | РТН(1-34) 40 мкг/кг/день |
| Количество областей резорбции | Ιδ.Ν/Οΐ.ΆΓ (#/тт2) | 0,014±0,013 | 0,013±0,004 | 0,097±0,036*ς |
| Количество меченых остеонов | ЕОпА/С1.Аг (#/тт2) | 0,011±0,006 | 0,027±0,006 | 0,215±0,094*ς |
| Толщина остеоида | О.Т11 (мкм) | 4,92±0,59 | 5,42±0,30 | 5,16±0,27 |
| Скорость аппозиции минеральных веществ | МАК (мкм/день) | 1,19±0,20 | 1,56±0,13* | 1,60±0,12* |
| Скорость формирования костной ткани | ВЕК/ВУ (%/год) | 0,5±0,3 | 8,5±2,9* | 21,4±3,8* |
| Частота активаций | Ас.Е (#/тт2/год) | 1,8±1,0 | 15,1±5,0* | 43,8±10,5*ς |
| Площадь поверхности костной ткани | В.Аг(тт2) | 29,1±1,3 | 33,3±1,9 | 37,8±2,7* |
| Площадь поверхности костного мозга | Ма.Аг(тт2) | 12,7±0,7 | 11,9±1,0 | 10,7±1,0 |
| Площадь поверхности кортикального слоя | С1.Аг(тт2) | 16,4±0,9 | 21,3±1,2* | 27,1±2,0*ς |
| Процент площади поверхности кортикального слоя | %СРАг(%) | 56,4±1,5 | 64,2±1,6* | 71,6±1,5*1 |
Данные представлены как среднее ±8ЕМ для 6 кроликов на группу. *Р<0,05 по сравнению с контролем.
1Р<0,05 по сравнению с РТН(1-34) при 10 мкг/кг/день.
Таблица 5
Воздействия РТН(1-34) на восстановление губчатой костной ткани третьего поясничного позвонка
| Параметры | Аббревиатура | Контроль | РТН(1-34) 10 мкг/кг/день | РТН(1-34) 40 мкг/кг/день |
| Объем костной ткани | ВУ/ТУ (%) | 27,5±1,4 | 30,5±3,4 | 27,9±3,2 |
| Толщина губчатого слоя | ТЬ.Т11 (мкм) | 124,8±7,3 | 147,4±3,4 | 27,9±3,2 |
| Разрушенная поверхность | Е8/В8 (%) | 0,5±0,3 | 1,4±0,3 | 2,6±0,7* |
| Поверхность остеокластов | Ос.8/В8 (%) | 0,4±0,2 | 0,9±0,3 | 1,3±0,3 |
| Поверхность остеоидной ткани | О8/В8 (%) | 5,2±1,3 | 7,2±1,2 | 27,7±3,8*ς |
| Поверхность остеобластов | ОЬ.8/В8 (%) | 1,4±0,6 | 1,3±0,6 | 15,3±5,6*ς |
| Толщина слоя остеоидов | О.Т11 (мкм) | 5,2±0,5 | 5,3±0,5 | 4,4±0,2 |
| Объем остеоидов | ОУ/ТУ (%) | 0,10±0,02 | 0,13±0,03 | 0,46±0,07*ς |
| Скорость аппозиции минеральных веществ | МАК (мкм/день) | 1,3±0,2 | 1,5±0,1 | 1,7±0,1 |
| Поверхность минерализации | М8/В8 (%) | 4,4±1,4 | 4,7±1,9 | 24,2±1,5*ς |
| Скорость формирования костной ткани | ВЕК/В8 (мкм3/мкм2/год) | 19,7±5,3 | 38,5±8,9 | 153±15,6*ς |
Данные представлены как среднее ± 8ЕМ для 6 кроликов на группу. *Р<0,05 по сравнению с контролем.
1Р<0,05 по сравнению с РТН(1-34) при 10 мкг/кг/день.
В губчатой костной ткани большинство параметров, характеризующих формирование (Θ8/Β8, ОЬ.8/В8, ОУ/ТУ, и Μ8/Β8), возрастают при лечении РТН(1-34) (табл. 5). Те из кроликов, которым давали РТН(1-34) при 40 мкг/кг/день, имели все параметры, значительно превышающие параметры других 2 групп (р<0,01 по сравнению как с контрольной группой, так и с группой, получающей 10 мкг/кг/день, по всем параметрам). Скорость формирования костной ткани (ВЕК/В8) также значительно возрастает у кроликов, которым давали РТН(1-34) при 40 мкг/кг/день, по сравнению с другими 2 группами (р<0,0001 по срав нению как с контрольной группой, так и с группой, получающей 10 мкг/кг/день). Хотя резорбция (Е8/В8 и Ос.8/В8) возрастает у обеих пролеченных РТН(1-34) групп, только (Е8/В8) у группы с более высокой дозой разрушенная поверхность становится значительно большей, чем у контрольной группы (р<0,001). Не существует разницы в толщине остеоидного слоя (О.Т11) среди всех трех групп. Несмотря на доказательство ускоренного метаболизма костной ткани, доля объема костной ткани (ВУ/ТУ) не изменяется после лечения РТН(1-34). Туннелизованная резорбция и перитрабекулярный фиброз не наблюдаются ни в одной из групп.
Измерения массы костной ткани.
νΒΜΌ и ВМС в средней части бедренной кости, оцениваемые с помощью рОСТ в группе, получающей 40 мкг /кг/день, являются значительно более высокими, чем у других 2 групп (р<0,001 по νΒΜΌ и р<0,0001 по ВМС по сравнению с контрольной группой, р<0,05 по νΒΜΌ и р<0,01 по ВМС по сравнению с группой с более низкой дозой) (фиг. 1А). νΒΜΌ и ВМС в группе, получающей 10 мкг/кг/день, также являются значительно более высокими, чем в контрольной группе (р<0,05 как по νΒΜΌ, так и по ВМС). Хотя площадь поверхности костной ткани в средней части бедренной кости также увеличивается в зависимости от дозы, значительно она увеличивается только в группе, получающей 40 мкг/кг/день (р<0,05).
ηΒΜΌ и ВМС в проксимальной части бедренной кости, измеренные с помощью измерения поглощения рентгеновских лучей на двух длинах волн (ΌΧΑ или ρΌΧΑ), увеличиваются в зависимости от дозы. Значительные отличия присутствуют как в ηΒΜΌ. так и в ВМС между контрольной группой и группой, получающей 10 мкг/кг/день (р<0,05), а также между контрольной группой и группой, получающей 40 мкг/кг/день (р<0,001) (фиг. 1В). Не обнаружено каких-либо значительных различий в площади кости среди всех трех групп.
В среднем, фиг. 1 показывает, что ΒΜΌ (плотность минеральных веществ в костной ткани) и ВМС (содержание минеральных веществ в костной ткани) в срединной стержневой структуре бедренной кости (кортикальная костная ткань) (А) и в проксимальной части бедренной кости (губчатая костная ткань + кортикальная костная ткань) (В) являются значительно более высокими у животных, пролеченных РТН при обеих дозах, чем у контроля. Площадь поверхности кортикального слоя костной ткани в срединной стержневой структуре бедренной кости кроликов, пролеченных при более высокой дозе, является значительно более высокой, чем у контроля. Не было замечено никаких значительных различий между группами по площади поверхности костной ткани проксимальной части бедренной кости. Данные представлены как среднее ±8ΕΜ. *Р<0,05 по сравнению с контролем.1Р<0,05 по сравнению с РТН при 10 мкг/кг/день.
Нет никаких значительных различий между группами по νΒΜΌ, ΒΜС или площади поверхности костной ткани у поясничного позвонка (Ь4) при оценке с помощью рОСТ, среди всех трех групп.
Биомеханическое исследование.
Структурные свойства срединной стержневой структуры бедренной кости, такие как предельная сила, упругость и работа до разрушения, увеличиваются в зависимости от дозы (фиг. 2). Фиг. 2 показывает воздействия РТН на механическую прочность и поперечный момент инерции (ί.'8ΜΙ) кортикальной костной ткани в срединной стержневой структуре бедренной кости. Структурные механические свойства (заштрихованные столбики) и С8ΜI значительно возрастают у группы, получавшей более высокую дозу, в то время как упругость значительно возрастает также у группы, получавшей более низкую дозу. Из внутренних свойств материала (темные столбики), только модуль упругости значительно увеличивается в группе, получавшей более низкую дозу, по сравнению с контролем. Модуль упругости в группе, получавшей более высокую дозу, значительно увеличивается по сравнению с группой, получавшей более низкую дозу. На фиг. 2 данные представлены как среднее ± 8ΕΜ. * указывает Р<0,05 по сравнению с контролем; и Ι указывает Р<0,05 по сравнению с 10 мкг/кг/день.
В этом исследовании и у результатов, представленных на фиг. 2, все параметры являются значительно более высокими у кроликов, которым давали РТН(1-34) при 40 мкг/кг/день, чем у контрольной группы (р<0,01 для предельной силы и работы до разрушения, р<0,05 для упругости). Упругость в группе, получавшей более низкую дозу, также является значительно более высокой, чем у контрольной группы (р<0,05). Из внутренних свойств материала, модуль упругости является значительно меньшим у кроликов, которым давали 40 мкг/кг/день, чем у тех, которым давали 10 мкг/кг/день (р<0,01).
В теле поясничного позвонка не обнаружено каких-либо значительных различий по механическим свойствам среди всех трех групп.
Акустическая микроскопия.
Не существует каких-либо различий в скорости звука или по коэффициенту упругости для всех трех групп.
Обсуждение.
Реакция кортикальной костной ткани скелета на биосинтетический БРТН(1-34) включает как прямую регуляцию свойств материала, так и компенсаторную регуляцию биомеханических свойств длинных костей у интактных взрослых самок кроликов. РТН(1-34) увеличивает метаболизм костной ткани и пористость кортикального слоя и при дозе 40 мкг/кг уменьшает модуль упругости материала кортикальной костной ткани. Однако уменьшение модуля упругости более чем компенсируется путем увеличения отложения костной ткани на периостальной и эндокортикальной поверхностях, что приводит к значительному улучшению структурной прочности, упругости и работы до разрушения кортикальной костной ткани у кроликов.
В этих исследованиях с использованием интактных кроликов, объем губчатой ткани поясничного позвонка не изменяется после лечения РТН(1-34), несмотря на доказательства увеличения метаболизма костной ткани. Использование в прошлом в качестве модели нарушения остеогенеза, присутствия интракортикального восстановления и короткого периода восстановления, вместе с быстрым ростом кроликов и ранним созреванием скелета (к 6-9 месяцам), составляют основу для выбора кролика в качестве модели, на которой могут исследоваться воздействия РТН(1-34), вводимого с перерывами.
Кролики могут проявлять широкий разброс сывороточных уровней кальция (10-16 мг/дл), но эти уровни не зависят непосредственно от количества кальция в корме, что является другим преимуществом модели. Хотя временные значительные повышения, примерно 1 мг/мл, зарегистрированы у кроликов, пролеченных РТН(1-34) при 40 мкг/кг, реальные значения всегда находились в известном физиологическом диапазоне.
В настоящем исследовании биосинтетический ЬРТН(1-34) в течение 140 дней увеличивает скорость формирования костной ткани интракортикально, а также на периостальной и эндокортикальной поверхностях. Интракортикальные значения Ле.Р увеличиваются в группе, получавшей более низкую дозу, в 8 раз, и в группе, получавшей более высокую дозу, в 20 раз. Это ведет к 2-кратному увеличению пористости кортикальной костной ткани в большеберцовой кости в группе, получавшей более низкую дозу, и к 6-кратному увеличению в группе, получавшей более высокую дозу. Данные акустической микроскопии показывают, что упругие свойства самого материала костной ткани в плечевой кости остаются без изменений, указывая на то, что внутреннее качество кортикальной костной ткани является нормальным. Следовательно, увеличение пористости должно учитываться при небольшом уменьшении модуля упругости при измерениях свойств материала, который включает участки в кортикальном слое костной ткани.
Однако увеличение пористости кортикальной костной ткани более чем компенсируется из-за значительного увеличения М8/В8 и ВЕЯ/В8, как на периостальной, так и эндокортикальных поверхностях в срединной стержневой структуре большеберцовой кости в группе, получавшей более высокую дозу, что приводит к значительному увеличению площади поверхности костной ткани. Это будет увеличивать поперечный момент инерции, который пропорционален изгибной жесткости кости, как происходит в срединной стержневой структуре бедренной кости (фиг. 2). Следствием этих изменений в форме и свойствах материала является улучшение механической прочности и упругости диафиза бедренной кости по сравнению с контролем, тем самым, компенсируются потенциально вредные механические эффекты увеличения пористости кортикальной костной ткани.
Вывод.
В качестве вывода, увеличение метаболизма костной ткани и пористости кортикальной костной ткани после лечения РТН(1-34) сопровождается сопутствующим увеличением кости на периостальной и эндокортикальной поверхностях. Сочетание этих явлений приводит к увеличению прочности, предельного напряжения, упругости и работы до разрушения бедренной кости.
Пример 2. Увеличение прочности и плотности костей при введении тйРТН(1-34) обезьянам.
Экспериментальные процедуры
Общая часть.
Фаза исследований на живых объектах использует диких, взрослых (закрытые ростовые пластинки) приматов циномолгус (Масаса Га5С1еи1ап8), весящих 2,77±0,03 кг (среднее ± стандартное отклонение от среднего [8ЕМ]). Обезьян выдерживают на карантине в течение 3 месяцев, затем содержат на диете, включающей 0,3% кальция, 0,3% фосфата и 250 МЕ, витамина Ό3/100 г диеты и дают фторированную воду (1 миллионная доля фторида) ай 11Ьйиш. Содержание кальция соответствует 1734 мг кальция/2000 калорий. Через 1 месяц диеты животных сортируют по группам из 21 или 22, подвергают ложной операции или овариэктомии. Ежедневные однократные подкожные инъекции носителя (контроль после ложной операции и овариэктомии) или г11РТН(1-34). при 1 мкг/кг (РТН1) или 5 мкг/кг (РТН5), начинаются через 24 ч после овариэктомии. Животных лечат либо в течение 18 месяцев (РТН1 и РТН5), либо в течение 12 месяцев с последующей отменой лечения (РТШ-№ и РТН5-М
Исследуемые группы разделяются так, как показано в табл. 6.
Таблица 6
Исследуемые группы для исследования на приматах
| Группа | Аббревиатура | Обезьяны в начале (п=128) | Обезьяны при конечном анализе (п=121) |
| Ложная овариэктомия, 18 месяцев, носитель | Ложный | 21 | 21 |
| Овариэктомия 18 месяцев, носитель | ονχ | 22 | 20 |
| Овариэктомия 18 месяцев, 1 мкг гЕРТН(1-34)/ кг/день | РТН1 | 21 | 19 |
| Овариэктомия 12 месяцев, 1 мкг гЕРТН(1-34)/ кг/день, 6 месяцев, носитель | 1>ТП1-\\' | 21 | 20 |
| Овариэктомия 18 месяцев, 5 мкг гЕРТН(1-34)/ кг/день | РТН5 | 22 | 21 |
| Овариэктомия 12 месяцев, 5 мкг гЕРТН(1-34)/кг/ день, 6 месяцев, носитель | РТН5-№ | 21 | 20 |
Образцы крови и мочи отбирают в течение 24 ч после инъекции носителя или гйРТН(1-34) с 3-месячными интервалами. Случайную выборку из 5 обезьян в каждой пролеченной гйРТН(1-34) группе используют для изучения фармакокинетики с выборочными исследованиями (занимающими от 0 до 240 мин каждый раз) на базовом уровне, на 1, 11 и 17 месяце. В момент времени 0 и через 6-месячные интервалы исследуют массу костной ткани скелета в целом и позвоночника (от Ь-2 до Ь-4) с помощью измерения поглощения рентгеновских лучей с двумя различными энергиями (ΌΧΑ); периферийная количественная компьютерная рентгеновская томография (рОСТ) используется для оценок массы костной ткани в средней части и в дистальной части лучевой кости, и в проксимальной части большеберцовой кости. Биопсии подвздошной кости берут на 6 и 15 месяце для гистоморфометрии. Всех животных подвергают эвтаназии через 18 месяцев.
Биомеханические тесты проводятся на поясничных позвонках от Ь-3 до Ь-4, на шейке бедра, на средней части плечевой кости и на образце кортикальной костной ткани, выточенной из диафиза бедренной кости (измеренные значения определены в табл. 7). Обычные статические и динамические гистоморфометрические исследования осуществляют (измеренные значения описаны в табл. 11) на средней части плечевой кости, на поясничном позвонке Ь-2, на шейке бедра, на средней части бедренной кости, на средней части лучевой кости и на дистальной части лучевой кости. Начальные статистические анализы сравнивают все группы с контрольными группами, пролеченными носителем, подвергнутыми овариэктомии. Данные являются пригодными для дополнительного диагностического анализа с целью исследования зависимости от дозы, эффектов отмены лечения, взаимодействий между различными эффектами и изменений со временем с помощью методов, известных специалистам в данной области. Все исследования проводятся и определяются с помощью методов, известных специалистам в данной области.
Для определенных объектов эксперимента, кортикальная костная ткань из плечевой кости исследуется с помощью гистоморфометрии и с помощью поляризационной инфракрасной Фурье-микроскопии.
Инфракрасная Фурье-микроскопия проводится с помощью адаптации известных методов для такой микроскопии.
Модельные исследования с помощью трехмерного метода конечных элементов.
Эти исследования определяют данные моделирования с помощью трехмерного метода конечных элементов по позвонкам обезьян из исследования с введением РТН в течение 18 месяцев. Иссеченные позвонки Ь-5 в растворе 50% этанола/солевого раствора из подвергнутых овариэктомии (п=7) и пролеченных РТН (п=7) групп последовательно сканируются с шагом по 500 мкм с помощью количественной компьютерной томографии (ОСТ. ΝοιΊαηά. Ρί. ΛίΚίπδοη. VI), с использованием пикселов 70x70 мкм. Каждый из 500 мкм поперечных срезов анализируют на объемную плотность минеральных веществ в костной ткани (ΒΜΌ, мг/см3), содержание минеральных веществ в костной ткани (ВМС, мг), площадь поперечного сечения (ХАгеа), объем губчатой костной ткани (ВУ/ТУ), толщину губчатого слоя (ТЬ.Тй) и связность (плотность узелков, анализ связей). Пикселы в каждом последовательном сканировании усредняются с образованием вокселов - объемных элементов 90x490x500 мкм. Результаты последовательных сканирований затем собирают и генерируют треугольную поверхностную сетку для каждой кости с использованием алгоритма шагсйтд сиЬек (см., например, Ьогепкеп и Сйпе 1987 Магсйщд сиЬек, а й1дй гехойФоп 3Ό щгГасе сопМгисбоп а1догййш. Сошри1ег ОгарйЮ5 21, 163-169). Сглаженная версия каждой поверхностной сетки затем используется для генерирования тетраэдральной сетки для моделирования с помощью трехмерного метода конечных элементов.
Модуль Юнга для каждого тетраэдрально го элемента получают из исходной плотности вокселов и свойств материала из цилиндра из кортикальной костной ткани, полученного вытачиванием из диафиза бедренной кости обезьян. Каждая тетраэдральная сетка поворачивается таким образом, чтобы нижняя поверхность каждого позвонка выровнялась с плоскостью. Затем производят анализ линейных упругих напряжений для модели каждого Ь-5, в котором распределенная нагрузка 100 Н прикладывается к центру верхней поверхности, перпендикулярно к нижней плоскости, в то время как нижняя поверхность фиксируется в направлении нагрузки. Получающиеся аксиальные распределения деформаций оцениваются как представляющие собой распределения ΒΜΌ, и производится сравнение между группами, пролеченными РТН и подвергнутыми овариэктомии. При этом разрешении плотность каждого воксела зависит от степени, до которой каждый воксел заполнен костной тканью в противоположность мягкой ткани.
Результаты.
Данные о различиях в тексте являются статистически значимыми р<0,05. Все животные набирают от 4 до 9% от начальной массы тела во время исследований, независимо от лечения.
Измерения в крови и в моче.
Сывороточные уровни эстрадиола на 3 и месяце составляют меньше 5 пг/мл у всех подвергнутых овариэктомии обезьян. Когда измеренные значения гомеостаза кальция сравнивают с подвергнутыми ложным операциям кон31 трольными животными, подвергнутые овариэктомии контрольные животные имеют более низкие сывороточные уровни кальция и фосфата и 1,25-дигидроксивитамина Ό, но не отличаются по уровням эндогенного РТН, циклического аденозинмоно-фосфата (цАМФ) в моче, кальция в моче, креатинина в моче или сывороточного азота мочевины, измеренным через 24 ч после последнего введения. Животные, пролеченные г6РТН(1-34), имеют более низкий уровень сывороточного фосфата, более низкий уровень эндогенного РТН и более высокие уровни 1,25дигидроксивитамина Ό и цАМФ в моче по сравнению с животными, подвергнутыми овариэктомии. Исследования сывороточных уровней маркера формирования костной ткани показывают, что подвергнутые овариэктомии обезьяны имеют низкий общий сывороточный уровень щелочной фосфатазы (ЛЬР) и остеокальцина по сравнению с животными, подвергнутыми ложной операции, и г6РТН(1-34) возвращает уровни назад к значениям для животных, подвергнутых ложный операции. Экскреция Стелопептида в моче (СгоккЬарк), которую используют как биохимический маркер резорбции костной ткани, не изменяется под действием г6РТН(1-34) по сравнению с контрольными животными, подвергнутыми овариэктомии.
Масса костной ткани.
Общая масса костной ткани скелета, представленная как общее ВМС тела, существенно увеличивается под действием РТН(1-34) (фиг. 3). Плотность минерального вещества в костях позвоночника (ΒΜΌ) остается стабильной у подвергнутых овариэктомии контрольных животных в течение 18 месяцев, в то время как подвергнутые ложной операции контрольные животные прибавляют примерно 5% по сравнению с базовым уровнем (фиг. 4А-4С и 5А). г6РТН(1-34) увеличивает ΒΜΌ позвоночника на 7-14%, а содержание минеральных веществ во всем теле (ВМС, фиг. 3) вплоть до 6% по сравнению с базовым уровнем (фиг. 4А-4С и 5А).
Содержание минеральных веществ в костях позвоночника также увеличивается (фиг. 5А). У приматов, пролеченных г6РТН(1-34), величина этого увеличения является значительно большей, чем у подвергнутых овариэктомии контрольных животных, и сравнима с (РТН1) или превосходит (РТН5) эти уровни для животных, подвергнутых ложной операции. г6РТН(1-34) не изменяет ΒΜΌ срединной стержневой или дистальной структуры лучевой кости. Площадь поперечного сечения срединной стержневой структуры увеличивается на 7% в группе, пролеченной РТН5. В проксимальной части большеберцовой кости нет увеличения площади поперечного сечения, но г6РТН(1-34) увеличивает ВМС и ΒΜΌ по сравнению с подвергнутыми овариэктомии контрольными животными. Через шесть месяцев после отмены лечения, ΒΜΌ и ВМС в позвоночнике и в шейке бедра остаются более высокими, чем у подвергнутых овариэктомии контрольных животных, при этом без изменений в кортикальном слое срединной стержневой структуры плечевой кости.
Прочность костей.
г6РТН(1-34) увеличивает прочность (Ру) у позвонков вплоть до 43% (табл. 7 и 8, фиг. 5В). г6РТН(1-34) улучшает прочность шейки бедра (Г,) вплоть до 12% (табл. 7 и 9, фиг. 6А). г6РТН(1-34) не изменяет измеренных значений в кортикальном слое диафиза срединной стержневой структуры плечевой кости (табл. 7 и 10) или свойства материалов цилиндрических образцов, изготовленных из диафиза бедренной кости (табл. 7 и 9, фиг. 6В), по сравнению с подвергнутыми овариэктомии контрольными животными. У животных, пролеченных г6РТН(1-34) в течение 12 месяцев, с последующей отменой лечения в течение 6 месяцев, измеренные значения прочности костей остаются значительно более высокими, чем у подвергнутых овариэктомии контрольных животных (табл. 7-10, фиг. 5В и 6А).
Таблица 7
Переменные, регистрируемые для третьего и четвертого поясничных позвонков (Ь-3 и Ь-4), срединной стержневой структуры плечевой кости, проксимальной части шейки бедра и цилиндрических образцов бедренной кости
| Переменная | Единицы | Описание |
| Поясничные позвонки, Ь-3 и Ь-4 | ||
| А | мм2 | Площадь поперечного сечения |
| Ру | Н | Выходная сила представляет собой силу за вычетом 0,2% |
| 8 | Н/мм | Крутизна линейной части на кривой сила-смещение (упругость) |
| σν | МПа | Выходное напряжение |
| Е | МПа | Модуль Юнга |
| Срединная стержневая структура плечевой кости | ||
| ΐ | мм | Средняя толщина кортикального слоя |
| Ри | Н | Предельная сила представляет собой максимальную силу, которую образец может выдержать |
| 8 | Н/мм | Крутизна линейной части на кривой сила-смещение (упругость), здесь - упругость |
| мдж/Е | Н-мм | Площадь под кривой нагрузка - смещение (Е = работа до разрушения) |
| Проксимальная часть шейки бедра | ||
| Ри | Н | Предельная сила представляет собой максимальную силу, которую образец может выдержать |
| Цилиндр. образцы из диафиза бедренной кости бедренной кости | ||
| Пи | МПа | Предельное напряжение |
| Е | ГПа | Модуль Юнга |
| и | Дж/м3 | Прочность |
| £и | Предельная деформация |
Таблица 8 Биомеханические измерения прочности позвоночника (поясничные позвонки, объединенные Ь-3 и Ь-4) подвергнутых овариэктомии приматов на 18 месяце
| Переменная (единицы)а | Ложный | Контроль ОУХ | РТН1 | РТ111-А' | РТН5 | РТН5-\ |
| А (мм2) | 90,5±2,1ь | 86,7±2,3 | 88,3±2,0 | 90,9±2,3 | 87,3±2,7 | 82,8±2,1 |
| ру(Н) | 1738±52 | 1499±94к | 1915±105° | 1899±73° | 2113±77 к° | 1792±59° |
| 8 (Н/мм) | 7312±319 | 5805±476к | 7701±474° | 7401±452° | 8012±367° | 7074±314° |
| Пу (МПа) | 19,4±0,6 | 17,3±1,0 | 21,9±1,3° | 21,1±0,8° | 24,6±1,1 к° | 21,9±0,9° |
| Е (МПа) | 650±32 | 546±49 | 717±48° | 659±42 | 759±36° | 698±41° |
Аббревиатуры: ОУХ=подвергнутые овариэктомии; РТН 1=гйРТН( 1-34) 1 мкг/кг в течение 18 месяцев;
РТН1-\=отмена в течение 6 месяцев после лечения гйРТН(1-34) 1 мкг/кг в течение 12 месяцев; РТН5=гйРТН(1-34) 5 мкг/кг в течение 18 месяцев; РТН5-\=отмена в течение 6 месяцев после лечения гйРТН(1-34) 5 мкг/кг в течение 12 месяцев а См. табл. 4,1 для описания переменных ь Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение от среднего (8ЕМ) на группу ° Статистически значимые по сравнению с контролями ОУХ (р<0,05) к° Статистически значимые по сравнению с ложными контролями (р<0,05)
Таблица 9
Биомеханические измерения свойств материалов цилиндрических образцов эквивалентного размера из диафиза бедренной кости и биомеханическое измерение прочности шейки бедра подвергнутых овариэктомии приматов на 18 месяце
| Переменная (единицы)а | Ложный | Контрольный ОУХ | РТН1 | РТН1-\ | РТН5 | РТН5-\ |
| Пи (МПа) | 222±5° | 216±5 | 222±4 | 214±6 | 2063±6 | 208±6 |
| Е (ГПа) | 17,2±0,6 | 16,4±0,4 | 17,1±0,4 | 16,6±0,6 | 15,4±0,6к | 15,3±0,6к |
| и (мдж/м3) | 5,9±0,3 | 5,8±0,4 | 6,1±0,4 | 5,5±0,4 | 5,4±0,4 | 6,1±0,4 |
| £и | 0,035±0,001 | 0,035±0,002 | 0,036±0,002 | 0,034±0,002 | 0,034±0,002 | 0,038±0,002 |
| Верхняя шейка бедра | ||||||
| Ри | 1288±41 | 1105±53к | 1235±45° | 1258±52° | 1362±30° | 1213±42 |
Аббревиатуры: ОУХ=подвергнутые овариэктомии; РТН1=гйРТН(1-34) 1 мкг/кг в течение 18 месяцев
РТН1-\=отмена в течение 6 месяцев после лечения гйРТН(1-34) 1 мкг/кг в течение 12 месяцев; РТН5=гйРТН(1-34) 5 мкг/кг в течение 18 месяцев; РТН5-\=отмена в течение 6 месяцев после лечения г11РТН(1-34) 5 мкг/кг в течение 12 месяцев а См. табл. 4,1 для описания переменных.
ь Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение от среднего (8ЕМ) на группу ° Статистически значимые по сравнению с контролями ОУХ (р<0,05) к° Статистически значимые по сравнению с ложными контролями (р<0,05)
Таблица 10
Биомеханические измерения кортикального слоя костной ткани из срединной стержневой структуры плечевой кости подвергнутых овариэктомии приматов на 18 месяце
| Переменная (единицы)3 | Ложный | Контрольный ονχ | РТН1 | РТН1-А' | РТН5 | РТН5-А' |
| 1 (мм) | 1,74±0,04ь | 1,63±0,038 | 1,68±0,03 | 1,66±0,04 | 1,80±0,04° | 1,72±0,05 |
| Ри (Н) | 725±26 | 636±26 | 654±23 | 689±23 | 680±158 | 707±24 |
| 8 (Н/мм) | 601±23 | 520±26 | 544±23 | 573±20 | 548±18 | 573±24 |
| и (мдж) | 1797±85 | 1542±92 | 1641±137 | 1751± 84 | 1804±99 | 1775±113 |
Аббревиатуры: ОУХ=подвергнутые овариэктомии; РТН1=тйРТН (1-34) 1 мкг/кг в течение 18 месяцев;
РТН1-^=отмена в течение 6 месяцев после лечения тйРТН(1-34) 1 мкг/кг в течение 12 месяцев; РТН5=тйРТН(1-34) 5 мкг/кг в течение 18 месяцев; РТН5-^=отмена в течение 6 месяцев после лечения г11РТН(1-34) 5 мкг/кг в течение 12 месяцев а См. табл. 4,1 для описания переменных ь Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение от среднего (8ЕМ) на группу ° Статистически значимые по сравнению с контролям ΟνΧ (р<0,05) 80 Статистически значимые по сравнению с ложными контролями (р<0,05)
Гистоморфометрия костной ткани.
Хотя скорости метаболизма у подвергнутых овариэктомии животных больше, чем у контрольных животных, подвергнутых ложной операции, значительных потерь объема костной ткани подвздошного гребня нет. Поскольку тетрациклиновая метка, которую дают на 6 месяце, не детектируется у многих животных, для этого момента времени измеряются только статические параметры. Данные статической и динамической гистоморфометрии на 15 месяце, показывают, что лечение тйРТН(1-34) увеличивает площадь губчатой костной ткани по сравнению с подвергнутыми овариэктомии животными и повышает формирование костной ткани без измеренных значений резорбции, повышенных по сравнению с измеренными значениями у контрольных животных, подвергнутых овариэктомии. Скорость формирования костной ткани последовательно возрастает с увеличением доз тйРТН(1-34). Хотя слой губчатой костной ткани остается увеличенным по сравнению с контрольными животными, подвергнутыми овариэктомии, после отмены введения тйРТН(1-34) после 12 месяцев лечения, формирование и резорбция костной ткани являются обратными тому, что наблюдается у контрольных животных, подвергнутых овариэктомии, и метаболизм костной ткани остается более высоким, чем у контрольных животных, подвергнутых ложной операции. тйРТН(1-34) не влияет на минерализацию, частоту активации или периоды восстановления. Не существует изменений на уровне многоклеточной единицы костной ткани (ВМИ) между резорбцией и формированием. В итоге, тйРТН(1-34) увеличивает губчатую костную ткань путем селективной стимуляции формирования костной ткани.
В кортикальной костной ткани плечевой кости, где тйРТН(1-34) не изменяет значительно измеренные значения ВМБ или прочности кости, тйРТН(1-34) стимулирует изменения в пе риостальном, эндостальном и интракортикальном отделах (табл. 11 и 12). Хотя не существует различий по общей площади поверхности или медуллярной площади поверхности между группами, тйРТН(1-34) увеличивает площадь поверхности кортикального слоя, и группы, пролеченные РТН5 и РТН5-\У. имеют значительно больше кортикальной костной ткани, предполагая увеличение поперечного момента инерции, параметров прочности. Увеличение площади поверхности может быть объяснено увеличением формирования, как на периостальной, так и на эндостальной поверхностях (фиг. 7).
Группы контрольных животных, подвергнутых ложной операции, и животных, пролеченных РТН5-^, имеют пониженную минерализацию периостальных поверхностей по сравнению с контрольными животными, подвергнутыми овариэктомии, и другими группами, пролеченными тйРТН(1-34). Минерализация эндокортикальных поверхностей является значительно больше у контрольных животных, подвергнутых овариэктомии, по сравнению с животными, подвергнутыми ложной операции, и уровни тйРТН(1-34) не увеличиваются выше значений у контрольных животных, подвергнутых овариэктомии. При интракортикальном восстановлении у подвергнутых овариэктомии животных имеется больше областей резорбции, и частота активации является большей у подвергнутых овариэктомии и пролеченных РТН1 и РТН5 групп, чем у контрольных животных, подвергнутых ложной операции или у групп с отменой лечения. Имеется значительно больше меченых остеонов на единицу площади поверхности у контрольных животных, подвергнутых овариэктомии, по сравнению с контрольными животными, подвергнутыми ложной операции, и тйРТН(1-34) не увеличивает их количество значительно выше значений для контрольных животных, подвергнутых овариэктомии.
Пористость интракортикального слоя является большей у подвергнутых овариэктомии животных, чем у животных, подвергнутых ложной операции, но не существует различий между контрольными животными, подвергнутыми овариэктомии, и животными, пролеченными РТН1. РТН5 и РТН5-А увеличивают пористость выше той, которую наблюдают у контрольных животных, подвергнутых овариэктомии. Данные исследований на кроликах выдвигают гипотезу о том, что увеличение пористости, сопровождающееся увеличением кортикального слоя костной ткани, может быть структурной реакцией для поддержания биомеханических свойств костной ткани, пролеченной гйРТН (1-34). Не существует различий между животными, подвергнутыми овариэктомии, и другими группами по периоду формирования, ширине остеоида, ширине стенки или по созреванию остеоидов на 18 месяце.
В итоге, не существует различий в скоростях метаболизма между контрольными живот ными, подвергнутыми овариэктомии, и животными, пролеченными любой дозой гйРТН(1-34). Контрольные животные, подвергнутые ложной операции, имеют более низкую скорость метаболизма, чем либо контрольные животные, подвергнутые овариэктомии, либо животные, пролеченные гйРТН(1-34). Когда введение гйРТН(134) отменяют на 6 месяцев, скорости метаболизма значительно уменьшаются, но ΒΜΌ и измеренные значения биомеханической прочности остаются более высокими, чем у контрольных животных, подвергнутых овариэктомии. Нормальные значения для ширины остеоидов и времени их созревания в кортикальном слое костной ткани для всех групп указывают, что лечение не вызывает никакого воздействия на нормальный ход процесса минерализации. Нормальные значения для ширины стенки показывают, что лечение не изменяет нормального баланса между резорбцией и формированием на уровне индивидуального ΒΜυ.
Таблица 11
Гистоморфометрические переменные для измерений кортикального слоя плечевой кости
| Переменнаяа | Единицы | Описание |
| Ас.Е | циклы/год | Частота активаций |
| ВРР/В8.Ес | мкм/день | Скорость формирования костной ткани по отношению к эндокортикальной поверхности |
| ΒΕΚ/ΒδΈδ | мкм/день | Скорость формирования костной ткани по отношению к периостальной поверхности |
| ВЕР/ВУ | % год | Скорость формирования костной ткани по отношению к объему костной ткани |
| ЕР | дни | Период формирования |
| Ь Οη.Ν/СйА | №/мм2 | Число меченных флюорохромом остеонов на единицу площади поверхности кортикального слоя |
| МАР | мкм/день | Скорость аппозиции минеральных веществ в кортикальном слое |
| МАВ.Ес | мкм/день | Скорость аппозиции минеральных веществ на эндокортикальной поверхности |
| МАР.Рк | мкм/день | Скорость аппозиции минеральных веществ на периостальной поверхности |
| М^ШЗ.Ес | % | Минерализация эндокортикальной поверхности, нормированная на общую поверхность эндокортикальной поверхности |
| Μδ/Βδ.Ρκ | % | Минерализация периостальной поверхности, нормализованная на общую площадь периостальной поверхности |
| Ο.Αΐ | МКМ | Ширина остеона |
| Κκ.Ν/СйА | №/мм2 | Число областей резорбции на единицу площади поверхности кортикального слоя |
| Α/Αί | мкм | Ширина остеональной стенки |
| ош1 | дни | Время созревания остеоидов |
| Ро | % | Пористость, процент площади костной ткани, занятая отверстиями |
| Β.Ατ | мм2 | Площадь поверхности костной ткани, общая площадь внутри периостальной поверхности |
| СЕАг | мм2 | Площадь кортикального слоя, площадь костной ткани внутри периостальной поверхности (включая пористость) |
| Мс.Аг | мм2 | Площадь поверхности медуллярного отверстия |
Номенклатура является такой, которая рекомендована кита! о£ Ьоие апб Мшега1 Рекеатсй, 1987
Таблица 12
Гистоморфометрия кортикальной костной ткани из срединной стержневой структуры плечевой кости подвергнутых овариэктомии приматов на 18 месяце (п=121)
| Переменная | Ложный | ОУХ | РТН1 | РТ\'1-\\' | РТН5 | РТ115-\\' |
| Ас.Р | 1,85±1,87а,с | 6,06±3,31 | 7,69±4,96 | 3,05±2,15а | 8,70±3,97 | 2,05±1,46а |
| ΒΡΚ/Βδ.Εε | 7,08±3,80 | 20,93±19,23 | 18,14±13,95 | 14,89±10,32 | 34,04±19,01 | 12,73±16,33а |
| ΒΡΚ/ΒδΤδ | 3,79±3,07 | 9,12±7,58 | 8,53+10,54 | 3,60±3,84а | 8,99±5,81 | 5,79±4,05 |
| ΒΡΚ/Βν | 2,13+2,06а | 9,16±5,37 | 9,23±5,93 | 4,39±3,48а | 12,93±5,94а | 2,21±1,73а |
| РР | 82,73±41,06 | 65,94±19,79 | 63,44±10,02 | 64,94±11,99 | 81,97±95,63 | 88,63±52,90 |
| Ε.Οη.Ν/θ!.Α | 0,28±0,27а | 1,03±0,52 | 1,26±0,71 | 0,50±0,36а | 1,45±0,47а | 0,38±0,26а |
| ΜΑΗ | 0,91±0,33а | 1,07±0,19 | 0,98±0,12а | 1,06±0,27 | 1,03±0,23 | 0,85±0,28а |
| ΜΑΚ.^ | 0,48±0,19а | 0,75+0,25 | 0,66±0,15 | 0,66±0,16 | 0,75±0,14 | 0,63±0,17 |
| ΜΑΚΕδ | 0,62±0,24 | 0,69±0,23 | 0,89±0,95 | 0,54±0,15а | 0,66±0,17 | 0,82±0,15 |
| Μδ/Βδ^ | 3,09±6,49а | 20,99±18,04 | 25,19±17,14 | 11,74±14,41а | 40,47±24,68а | 8,93±15,39а |
| Μδ/ΒδΓκ | 1,81±3,59а | 10,03±10,49 | 8,59±5,73 | 3,86±4,83а | 11,00±9,63 | 2,30±3,76а |
| О.ГС1 | 3,77±0,92 | 4,04±0,91 | 3,66±0,67 | 3,96+0,83 | 3,94±1,13 | 3,76±0,83 |
| Κδ.Ν/Οΐ.Α | 0,12±0,17а | 0,21±0,13 | 0,28±0,18 | 0,12±0,07а | 0,43±0,26а | 0,19±0,18 |
| ГС.ГС1 | 63,23±13,61 | 68,63±15,09 | 61,36±7,79 | 63,12±17,35 | 65,28±9,43 | 63,82±8,31 |
| от! | 4,58±1,26а | 3,87±1,04 | 3,76±0,70 | 3,86±0,74 | 6,45±13,85 | 5,07±2,65 |
| Ро | 1,32±0,60а | 2,61±1,40 | 4,65±4,78 | 2,23±1,60 | 6,78±4,23а | 6,40±4,22а |
| Β.Ατ | 53,12±5,50 | 52,82±7,09 | 54,22±5,97 | 54,94±6,55 | 55,81±6,24 | 58,16±8,79а |
| 0!.Ατ | 37,40±3,75 | 35,35±5,04 | 37,61±3,86 | 38,10±4,83 | 40,96±4,30а | 40,83±5,80а |
| Με.Ατ | 15,72±4,07 | 17,47±4,22 | 16,61±3,77 | 16,84±3,74 | 14,85±4,72а | 17,34±6,05 |
Аббревиатуры: ОУХ=подвергнутые овариэктомии
РТН1=тйРТН(1-34) 1 мкг/кг в течение 18 месяцев
РТН1-\=отмена после лечения тйРТН(1-34) 1 мкг/кг в течение 12 месяцев
РТН5=тйРТН(1-34) 5 мкг/кг в течение 18 месяцев
РТН5-\=отмена после лечения тйРТН(1-34) 5 мкг/кг в течение 12 месяцев а Статистические значимые значения по сравнению с ОУХ контролями (р<0,05) Ь См. табл. 4,2 для описания переменных с Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение от среднего (δΕΜ) на группу
Анализ с помощью гистоморфометрии и поляризационной инфракрасной Фурьемикроскопии показывает, что введение РТН улучшает качество костной ткани путем замены старой костной ткани (большие кристаллиты) на молодую костную ткань (кристаллиты разных размеров, имеющих тенденцию к уменьшению размера). Далее при отмене введения РТН обезьянам, получавшим низкие дозы, существует дополнительное преимущество, поскольку матрикс становится оптимально минерализованным, и кристаллиты созревают. Данные, полученные с помощью гистоморфометрии и инфракрасной Фурье-микроскопии, показывают неожиданное преимущество в качестве костной ткани для кортикальной костной ткани, поскольку происходит оптимальная минерализация и минеральная фаза созревает.
Модельные исследования с помощью трехмерного метода конечных элементов.
Исследование 500 мкм среза из средней части Ь-5 демонстрирует 21% увеличение ΒΜΌ для групп, пролеченных РТН, по сравнению с группами, подвергнутыми овариэктомии, что связано с 27% увеличением ВМС без изменений в площади поперечного сечения. Анализ центральной части из группы, пролеченной РТН, демонстрирует 73% увеличение ВУ/ТУ, что вызвано 30% увеличением ТЬ.Т11 и ТЬ.И. большим на 37% по сравнению с группами, подвергнутыми овариэктомии. Анализ связности для этой области демонстрирует плотность пересечений на 140% большую (пересечение/объем ткани) и связность между узелками, большую на 286%, для позвонков, пролеченных РТН.
Анализ гистограммы распределения вокселов костной ткани для групп, пролеченных РТН, демонстрирует увеличение доли низких плотностей (0-355 мг/с3), увеличение доли средних плотностей (356-880 мг/с3) и очень небольшое воздействие на вокселы с высокой плотностью (887-1200 мг/с3), по сравнению с группами, подвергнутыми овариэктомии (фиг. 8). Наиболее неожиданным является сдвиг в сторону вокселов с большей плотностью костной ткани в отделе кортикальной костной ткани, который следует после отмены лечения в течение 6 месяцев (фиг. 8).
Вычисляют долю элементов костной ткани позвонка (вокселов), которые попадают в определенный диапазон значений ΒΜΌ. Выбранные диапазоны значений ΒΜΌ представляют собой следующие: низкие ΒΜΌ, 0-300 мг/с3; средние ΒΜΌ, 300-700 мг/с3; высокие ΒΜΌ, 700-1000 мг/с3 и кортикальные ΒΜΌ, >1000 мг/с3 (табл. 13). По сравнению с контрольными животными, подвергнутыми овариэктомии, лечение РТН значительно понижает объем костной ткани с низкими ΒΜΌ и увеличивает объем костной ткани со средними ΒΜΌ. После отмены лечения РТН, происходит уменьшение объема костной ткани со средними ΒΜΌ и увеличение объема костной ткани с высокими ΒΜΌ, указывая на то, что костная ткань со средними значениями ΒΜΌ становится более плотной.
Таблица 13
Проценты объема позвонка Ь5, сгруппированные по значениям ΒΜΌ (среднее±8ЕМ)
| Лечение | Низкие ΒΜΌ, % | Средние ΒΜΌ, % | Высокие ΒΜΌ, % | ΒΜΌ кортикального слоя, % |
| Овариэктомия | 30,4±2,2 | 48,7±1,6 | 19,9±1,2 | 0,9±0,3 |
| РТН | 17,7±1,6* | 58,9±1,9* | 22,8±27 | 0,6±0,3 |
| РТН-\\' | 22,4±1,3* | 49,7±1,2 | 27,0±1,6* | 0,8±0,2 |
Таблица 14
| ВМС для среднего уровня позвонка Ь5 и э( | )фективная деформация позвонка | |
| Лечение | ВМС, мг | Эффективная деформация (и-деформация) |
| Овариэктомия | 37,2±1,6 | 701±64 |
| РТН | 47,4±1,5* | 447±36* |
| РТН-\ | 44,2±1,2* | 539±34* |
* статически отличные (р<0,05 согласно тесту ΡΌ8Ό по Фишеру)
Данные, собранные на фиг. 8, показывают, что позвонок Ь-5 от обезьян циномолгус, пролеченных в течение 18 месяцев РТН, соответствуют значительным увеличениям массы костной ткани, толщины слоя губчатой ткани и связности губчатой ткани с небольшими воздействиями на внешние параметры (Х-Агеа) позвонка. Анализ распределения элементов костной ткани в Ь-5 демонстрирует, что сильно минерализованные области костной ткани изменяются меньше всего без каких-либо доказательств склерозирования костной ткани. Скорее, наибольшую реакцию на РТН проявляет пористая губчатая костная ткань. Сдвиг в распределении ΒΜΌ ведет к значительному сокращению аксиальной деформации, указывая на улучшение механических свойств. Как ясно показано на гистограммах значений ΒΜΌ для групп, пролеченных РТН и подвергнутых овариэктомии, РТН преобразует вокселы костной ткани с низкой плотностью в вокселы со средней плотностью без какого-либо значительного влияния на вокселы с высокой плотностью.
Данные, представленные в табл. 2, показывают, что значения ВМС в средней части позвонков значительно увеличиваются благодаря лечению РТН, и полезный эффект от РТН остается через 6 месяцев после отмены лечения. Средняя механическая деформация позвонка уменьшается на 36% благодаря лечению РТН и остается на 23% ниже, чем для групп ОУХ после отмены лечения РТН. Это исследование показывает, что отмена лечения РТН в течение 6 месяцев не приводит к резорбции вновь сформировавшейся костной ткани, но вместо этого происходит выгодное перераспределение костной ткани со средней плотностью в костную ткань с более низкой и более высокой плотностью. Это перераспределение приводит к продолжению понижения деформации в позвонках и, таким образом, улучшает механическую функцию.
Обсуждение.
Это исследование на приматах демонстрирует, что РТН, который дают в отсутствие других лекарственных средств, которые могут повлиять на костную ткань, полезен как для кортикальной, так и для губчатой костной ткани, с целью увеличения общей массы костной ткани скелета. Более того, отмена лечения РТН не приводит к значительным потерям преимуществ, связанных с лечением РТН, в течение периода, по меньшей мере, из 2 циклов восстановления.
Суррогатные маркеры использовались в других исследованиях, чтобы показать активность в костной ткани, и они предполагали, что изменения значений отражают изменения в массе костной ткани. Хотя существуют опубликованные данные на людях и приматах, которые показывают, что как формирование, так и резорбция маркеров увеличивается в соответствии с активированием метаболизма костной ткани, например, во время раннего менопаузального периода или в состояниях активного заболевания, высокий метаболизм рассматривается как показатель потерь костной ткани. В юности высокий метаболизм во время созревания скелета человека менее хорошо изучен, но он сопровождается анаболическим увеличением массы костной ткани. Согласно литературным данным, такое явление было бы совершенно неожиданным при лекарственной терапии остеопороза. Таким образом, как показывают данные настоящих исследований, повышение уровня маркеров метаболизма костной ткани не согласуется с известным анаболическим воздействием РТН на увеличение массы и прочности костной ткани.
Данные этих 18-месячных исследований на обезьянах циномолгус подтверждают следующие неожиданные открытия:
- Общее значительное увеличение общей массы скелета.
- Значительное увеличение массы и прочности костной ткани в шейке бедра.
- Отсутствие доказательств похищения кортикальной костной ткани для увеличения губчатой костной ткани.
Увеличения массы и прочности костной ткани являются статистически значимыми в областях, обогащенными либо кортикальной костной тканью (шейка бедра), либо губчатой костной тканью (поясничные позвонки). В областях с чисто кортикальной костной тканью (средняя часть диафиза бедренной кости) существует тенденция к стабилизации или небольшому увеличению массы и прочности костной ткани под действием РТН по сравнению с контрольными животными, подвергнутыми овариэктомии.
- Изменения уровней маркеров костной ткани у обезьян (и людей), подвергнутых овариэктомии, не отражают полезных анаболических воздействий РТН на скелет. Использование телесных жидкостей от приматов в настоящих исследованиях делает возможной разработку новых и более надежных суррогатных маркеров.
- Удержание прибавки в массе и прочности костной ткани в течение, по меньшей мере, 2 циклов восстановления после отмены лечения.
Эти исследования приматов, пролеченных РТН, отличаются от опубликованных исследований на резус-макаках и обезьянах циномолгус, в них используются большие размеры выборок, чтобы обеспечить соответствующую статистическую мощность с целью выявления различий, которые могут не быть очевидными в предыдущих, более ограниченных исследованиях; контроли включают как приматов, подвергнутых овариэктомии (используемых в опубликованных исследованиях), так и подвергнутых ложной операции, но интактных приматов. О последней контрольной группе не сообщалось ранее при исследованиях этого типа, так что некоторые преимущества РТН и сопоставление определенных измеренных значений с уровнями у контрольных животных, подвергнутых ложной операции, в сравнении со значениями для животных, подвергнутых овариэктомии, оцениваются впервые.
Выводы.
Эти 18-месячные исследования на взрослых, диких, подвергнутых овариэктомии (ОУХ) обезьянах циномолгус, Масаса ГаксюЫагк, доказали эффективность и безопасность для костей последствий лечения тйРТН(1-34), либо в течение 12 месяцев с последующей отменой лечения на 6 месяцев, либо лечения в течение 18 месяцев. тйРТН(1-34) существенно повышает массу и прочность костной ткани позвоночника и шейки бедра по сравнению с контрольными животными, подвергнутыми овариэктомии, до уровней, эквивалентных или превышающих эти уровни у контрольных животных, подвергнутых ложной операции. У обезьян, подвергнутых овариэктомии и пролеченных тйРТН(1-34), измерения гомеостаза кальция (сывороточный кальций, фосфат и 1,25-дигидроксивитамин Ό) сопоставляются с такими измерениями для контрольных животных, подвергнутых ложной операции. Измерения крови, мочи и гистоморфометрии, используемые для оценки метаболизма костной ткани, показывают, что тйРТН (1-34) поддерживает скорости формирования, эквивалентные или более высокие, чем такие уровни контрольных животных, подвергнутых овариэктомии, в то время как уровень биохимических маркеров резорбции костной ткани остаются эквивалентными таким уровням у контрольных животных, подвергнутых ложной операции. У всех животных, пролеченных тйРТН(1-34) в течение вплоть до 18 месяцев, фармакокинетические измеренные значения не изменяются со временем, и накопления тйРТН(1-34) не происходит. Не существует доказательств постоянной гиперкальцемии или патологии почек после 18 месяцев лечения. Не существует изменений в минерализации или периодах восстановления. Общая прибавка в содержании минеральных веществ в костях скелета, наблюдаемая при введении тйРТН(1-34), может быть объяснена повышенной скоростью формирования костной ткани и поверхности формирования костной ткани при небольшом влиянии на резорбцию костной ткани или при его отсутствии. Существует значительное увеличение содержания минеральных веществ в костной ткани, плотности минеральных веществ в костной ткани и биомеханически измеренных значений прочности, включая прочность и упругость, в клинически значимых областях, таких как позвоночник, шейка бедра и проксимальная часть большеберцовой кости.
тйРТН(1-34) увеличивает скорость метаболизма кортикальной костной ткани срединной стержневой структуры плечевой кости и лучевой кости, но не изменяет значительно массу костной ткани или биомеханические измеренные значения прочности по сравнению с контрольными животными, подвергнутыми либо овариэктомии, либо ложной операции. Однако увеличение ширины кортикального слоя или/и площади поверхности кортикального слоя костной ткани согласуется с поперечным моментом инерции, измерением прочности и упругости. тйРТН(1-34) не оказывает значительного воздействия на внутренние свойства материала кортикальной костной ткани. Стимулируется эндокортикальное формирование костной ткани, при этом увеличивается ширина кортикального слоя и пористость кортикального слоя. Видимо, эти изменения пористости являются от ветственными за поддержание эластичности костной ткани.
У обезьян 12 месяцев лечения г6РТН(1-34) с последующей отменой на 6 месяцев ассоциируются с меньшими, но все еще значительными прибавками в массе и прочности костной ткани в позвоночнике и шейке бедра. После отмены лечения не отмечается какого-либо значительного влияния на кортикальную костную ткань срединной стержневой структуры плечевой кости и лучевой кости. Маркеры костной ткани и гистоморфометрия демонстрируют тенденцию к возвращению к низким значениям метаболизма, измеренным у контрольных животных, подвергнутых ложной операции.
Механистические исследования ίη νίνο на грызунах показывают, что гены, ассоциированные с анаболическим действием г6РТН(1-34), являются активированными в пределах от 1 до 6 ч, и увеличение поверхностей формирования костной ткани может быть замечено в пределах 24 ч после первой дозы и при отсутствии заметных воздействий на резорбцию. г6РТН(1-34), видимо, пополняет число остеопрогениторов в 8-фазе и стимулирует их дифференциацию в остеобласты, тем самым быстро увеличивая процент поверхностей формирования костной ткани. Однократные и многократные введения г6РТН(1-34) могут производиться в пределах 1часового периода для индуцирования анаболического эффекта в костной ткани. Однако когда эквивалентная доза вводится молодым крысам в виде многократных инъекций в течение 6 или 8 ч, анаболический эффект исчезает, что говорит о том, что краткое, ограниченное по времени взаимодействие с г6РТН(1-34) требуется для индуцирования анаболического эффекта.
В итоге, г6РТН(1-34) является анаболиком по отношению к костной ткани обезьян и кроликов, увеличивая измеренные значения массы и биомеханической прочности костной ткани в клинически значимых областях, таких как поясничный отдел позвоночника и шейка бедра, путем селективной стимуляции формирования костной ткани. Увеличение метаболизма костной ткани, формирования эндокортикальной поверхности и пористости, обнаруживаемые с помощью гистоморфометрии в кортикальных областях, не изменяют массу костной ткани или биомеханические измеренные значения прочности костной ткани, но увеличивают поперечный момент инерции путем увеличения площади поверхности или/и ширины кортикального слоя костной ткани.
Эти исследования демонстрируют, что введение активаторов рецепторов паратиреоидных гормонов, таких как рекомбинантный РТН(1-34) человека, улучшает качество костной ткани, как во время, так и после лечения. В самом деле, введение РТН по одному разу в день в течение 18 месяцев или при таких же дозах в течение 12 месяцев с последующей 6 месячной фазой отмены лечения демонстрирует четкое улучшение качества кортикальной костной ткани плечевой кости, как показывает анализ с помощью гистоморфометрии и поляризационной инфракрасной Фурье-спектроскопии (ЕТ1К). Этот анализ доказывает, что введение РТН улучшает качество костной ткани путем замены старой костной ткани (большие кристаллиты) молодой костной тканью (набор кристаллитов с разбросам по размерам и с тенденцией к малым размерам). Таким образом, введение РТН может увеличить качество кортикальной костной ткани, улучшить минерализацию и ускорить минерализацию и замену старой костной ткани новой костной тканью.
Далее при отмене лечения РТН у обезьян, которым давали низкие дозы, существует дополнительное преимущество, поскольку матрикс становится минерализованным более оптимально, и кристаллиты созревают. То есть при низких дозах РТН может иметь дополнительные преимущества во время фазы отмены лечения путем усиления минерализации. Эти данные указывают на преимущества ограниченного во времени режима лечения с помощью РТН, за которым следует период отмены лечения с целью получения увеличенного преимущества. Существующие в настоящее время определения качества костной ткани не включают эти аспекты улучшенной минерализации.
В более ранних исследованиях фазы лечения с помощью РТН, за которой следует фаза без лечения, фаза лечения составляла менее чем месяц. Более продолжительная, но ограниченная по времени фаза лечения из 18-24 месяцев, за которой следует период, по меньшей мере, из циклов восстановления, ранее не исследовалась. Продолжающееся преимущество у приматов после отмены лечения явно контрастирует с результатами, достигнутыми на грызунах при введении РТН. Исследования на крысах однородно показали, что костная ткань быстро теряется вслед за отменой лечения. Сиппекк-Неу, М. апб Носк, 1. Μ. (1989) Βθ№ 46 10: 447-452; 811еп. V. е1 а1. (1993) 1. С11п 1пуе81 91: 2479-2487; 811еп. V. е1 а1. (1992) Са1с1Г. Т188ие 1п1. 50: 214-220; апб \1оьек11бе. Ь. е1 а1. (1997) Βθ№ 20: 429-437.
Такой способ усиления минерализации костной ткани ранее не наблюдался и является неожиданным, представляя собой новый способ, с помощью которого РТН укрепляет и упрочняет костную ткань и может предотвратить переломы. Этот новый способ включает усиление и регуляцию минерализации с целью создания более прочной, более упругой, более устойчивой к переломам кости. Такие преимущественные воздействия требуют большего, чем формирование нового матрикса. Эти открытия указывают, что РТН имеет преимущества у пациентов с иммобилизованными костями или скелетами или со скелетами с дефицитом минеральных веществ, при условии, что существует так же адекватное дополнительное лечение кальцием и витамином Ό.
Пример 3. Увеличение прочности и плотности костной ткани и уменьшение переломов при введении гйРТН(1-34) людям.
Количество пациентов: гйРТН(1-34): 1093 включено в список, 848 прошли лечение. Плацебо: 544 включено, 447 прошли лечение.
Диагноз и критерии включения: Женщины в возрасте от 30 до 85 лет в постменопаузальном периоде в течение минимум 5 лет, с минимум одним умеренным или двумя средними атравматическими переломами позвоночника.
Дозировка и введение: Исследуемый продукт (вслепую) гйРТН(1-34); 20 мкг/день, вводят подкожно гйРТН(1-34): 40 мкг/день, вводят под кожно. Сравнительная терапия (вслепую): Материал плацебо исследований для инъекций.
Длительность лечения: гйРТН(1-34): 17-23 месяцев (исключая 6-месячную начальную фазу). Плацебо: 17-23 месяцев (исключая 6месячную начальную фазу).
Критерии оценки: Рентген позвоночника; сывороточные биологические маркеры (кальций, специфичная к костной ткани щелочная фосфатаза, проколлаген 1 пропептид с карбоксиокончанием); маркеры для мочи (кальций, Νтелопептид, свободный деоксипиридинолин); 1,25-дигидрокси-витамин Ό; плотность минерального вещества в костной ткани: позвоночник, бедро, запястье и общая для тела высота; фармакокинетика в популяции; биопсия костной ткани (выбранные области для исследования).
Характеристика пациента
| Плацебо (N=544) | РТН-20 (N=541) | РТН-40 (N=552) | значение Р | |
| Кавказской группы | 98,9% | 98,9% | 98,4% | 0,672 |
| Возраст | 69,0±7,0 | 69,5±7,1 | 69,9±6,8 | 0,099 |
| Годы после менопаузы | 20,9±8,5 | 21,5±8,7 | 21,8±8,2 | 0,273 |
| Гистерэктомия | 23,8% | 23,1% | 21,6% | 0,682 |
| Матка + 0 или 1 яичник | 57 | 51 | 58 | |
| Матка + 2 яичника | 61 | 57 | 51 | |
| Неизвестно | 11 | 17 | 10 | |
| Предыдущее использование лекарств от остеопороза | 14,9% | 15,5% | 13,0% | 0,479 |
| Исходная ВМЭ позвоночника, позвонков | 0,82±0,17 | 0,82±0,17 | 0,82±0,17 | >0,990 |
| Исходное # фиксир. | >0,990 | |||
| 0 | 54 (10,4%) | 45 (8,8%) | 54 (10,1%) | |
| 1 | 144 | 159 (31,1%) | 169 (31,6%) | |
| 2 | 128 | 128 (25,0%) | 125 (23,4%) | |
| 3 | 75 (14,5%) | 67 (13,1%) | 81 (15,1%) | |
| 4 | 59 (11,4%) | 49 (9,6%) | 45 (8,4%) | |
| 5 | 28 (5,4%) | 31 (6,1%) | 21 (3,9%) | |
| 6 | 13 (2,5%) | 20 (3,9%) | 25 (4,7%) | |
| 7 | 6 (1,2%) | 7 (1,4%) | 10 (1,9%) | |
| 8 | 9 (1,7%) | 5 (1,0%) | 3 (0,6%) | |
| 9 | 1 (0,2%) | 0 | 2 (0,4%) | |
| 10 | 1 (0,2%) | 1 (0,2%) | 0 | |
| Не указано | 26 | 29 | 17 |
Результаты.
Данные этого клинического исследования включают в целом 1637 женщин, пролеченных рекомбинантным паратиреоидным гормоном человека (1-34), гйРТН(1-34) при 0, 20, или 40 мкг/день с дополнительным введением и витамина Ό и кальция в течение 18-24 месяцев, представленные результаты изложены в табл. 15-19.
Табл. 15 иллюстрирует данные, представляющие уменьшение при лечении РТН числа и тяжести переломов позвоночника. При сравнении всех пациентов, пролеченных РТН, с плацебо общее уменьшении по числу пациентов составляет 67% (р<0,001), при этом уменьшение составляет 65% (р<0,001) при введении 20 мкг/день РТН по сравнению с плацебо, и уменьшение составляет 69% при 40 мкг/день РТН по сравнению с плацебо (табл. 15). Сравнивая всех пролеченных РТН пациентов с плацебо, общее уменьшение по числу пациентов с множественными переломами позвоночника составляет 81% (р<0,001), при этом уменьшение по сравнению с плацебо составляет 77% (р<0,001) при введении 20 мкг/день РТН, и уменьшение по сравнению с плацебо составляет 86% при введении 40 мкг/день РТН. Сравнивая всех пролеченных РТН пациентов с плацебо, общее уменьшение по числу пациентов с переломами позвоночника от средней тяжести до тяжелых составляет 84% (р<0,001), при этом уменьшение по сравнению с плацебо составляет
90% (р<0,001) при введении 20 мкг/день РТН, и 78% при введении 40 мкг/день РТН (табл. 15).
уменьшение по сравнению с плацебо составляет
Таблица 15
Влияние лечения РТН на количество и тяжесть переломов позвоночника
| Плацебо(п*=448) | РТН, 20 мкг/день (п=444) | РТН, 40 мкг/день (п=434) | |
| Число и процент пациентов с новыми переломами позвоночника | 64 (14,3%) | 22 (5,0%) | 19 (4,4%) |
| Число и процент пациентов с 2 или более новыми переломами позвоночника | 22 (4,9%) | 5 (1,1%) | 3 (0,7%) |
| Число и процент пациентов с новыми переломами, от средней тяжести до тяжелых ** | 42 (9,4%) | 4 (0,9%) | 9 (2,1%) |
*п = число пациентов с рентгенографией позвоночника как в начале, так и в конце ** Перелом средней тяжести приводит к потерям более чем 25% высоты позвоночника (или эквивалентной меры). Тяжелый перелом приводит к потерям более чем 40% высоты позвоночника (или эквивалентной меры). Переломы определяются согласно Сепап! е1 а1. (1993) νοΓίϋΙπίΐΙ ГгасШге аззеззшеп! изтд а 8еш1циап1йа11Уе 1ес11шс|ие: I. Вопе & Мт Кез 81137-1148
Табл. 16 иллюстрирует влияние лечения РТН на количество переломов различных костей, не связанных с позвоночником, в теле. Количество переломов заметно уменьшается в верхней части бедренной кости, лучевой кости, лодыжке, плечевой кости, ребрах, ступне, тазу и других местах (табл. 16). Уменьшение является статистически значимым, если рассматривать его как уменьшение общего количества перело мов у пролеченных РТН пациентов по сравнению с пациентами, пролеченными плацебо. Уменьшение является еще более значимым, если его рассматривать как уменьшение общего числа переломов верхней части бедра, лучевой кости, лодыжки, плечевой кости, ребер, ступни и таза у пролеченных РТН пациентов по сравнению с пациентами, пролеченными плацебо (табл. 16).
Таблица 16
Влияние лечения РТН на количество переломов, не связанных с позвоночником
| Значения Р | |||||||
| Плацебо (N-544) | РТН-20 (N=541) | РТН-40 (N=552) | Общее | РТН-рЬо* | 20-рЬо | 40-рЬо | |
| Бедро | 4 | 2 | 3 | 0,718 | 0,474 | 0,417 | 0,690 |
| Лучевая кость | 13 | 7 | 10 | 0,404 | 0,236 | 0,180 | 0,504 |
| Лодыжка | 4 | 2 | 2 | 0,601 | 0,313 | 0,417 | 0,403 |
| Плечевая кость | 5 | 4 | 3 | 0,767 | 0,534 | 0,744 | 0,465 |
| Ребра | 10 | 5 | 5 | 0,277 | 0,109 | 0,197 | 0,184 |
| Ступня | 4 | 1 | 4 | 0,374 | 0,474 | 0,181 | 0,983 |
| Таз | 3 | 1 | 0 | 0,171 | 0,076 | 0,319 | 0,081 |
| Другие | 16 | 14 | 9 | 0,338 | 0,296 | 0,723 | 0,146 |
| Общее | 53 | 34 | 32 | 0,024 | 0,007 | 0,036 | 0,015 |
| Общее без другие | 41 | 21 | 24 | 0,013 | 0,003 | 0,010 | 0,025 |
*Плацебо (рЬо)
Влияние РТН на содержание минеральных веществ в костной ткани (ВМС), плотность минеральных веществ в костной ткани (ВМЭ), и площадь кости определяют с помощью измерения поглощения рентгеновских лучей с двумя различными энергиями (ΌΕΧΑ), и результаты изложены в табл. 17-19. Введение РТН вызывает очевидное увеличение ВМС в поясничном отделе позвоночника, в бедре и тазу, в запястье пациента и во всем теле пациента (табл. 17). Лечение РТН вызывает значительное увеличение ВМЭ в поясничном отделе позвоночника, бедре и в тазу пациента (табл. 18). Увеличения в поясничном отделе позвоночника, бедре и тазу являются статистически значимыми с р<0,001 (табл. 18). Площадь кости, заметно увеличивается при лечении РТН для поясничного отдела позвоночника, бедра и таза пациента (табл. 19). Увеличения являются статистически значимыми для спинного отдела позвоночника и шейки бедра (табл. 19).
Влияние РТН на меру качества и количества костной ткани в теле в целом, ВМС, является особенно значительным. Это влияние на тело в целом указывает на то, что количество костной ткани в теле пациента увеличивается. РТН не приводит только к перемещению массы костной ткани от одной части тела пациента к другой. Вместо этого, лечение РТН увеличивает количество и качество костной ткани в теле пациента.
Фиг. 9 и 10 иллюстрируют увеличение от времени ВМЭ в поясничном отделе позвоночника и ВМЭ в бедре/шейке бедра, соответственно, для пролеченных РТН и принимавших плацебо контрольных пациентов. ВМЭ поясничного отдела позвоночника пациента временно увеличивается в течение, по меньшей мере, около 18 месяцев, при этом наблюдается менее существенное увеличение, или вообще никакого, в течение последующих месяцев. ВМЭ бедра/таза пациента заметно возрастает в течение, по меньшей мере, 18 месяцев, и может возрастать при дальнейшем продолжении лечения РТН.
Таблица 17
Влияние РТН на содержание минеральных веществ в костной ткани, представленное как конечный процент изменения (произвольное время) от исходного уровня
| Плацебо | РТН-20 | РТН-40 | Значение р | |
| Поясничный отдел позвоночника | 1,60 (6,92) | 11,85 (8,83) | 16,62(11,1) | 0,001 |
| Бедро/тазобедренный сустав | ||||
| Общее | -0,38 (5,18) | 3,50 (6,26) | 4,78 (6,70) | <0,001 |
| Шейка | -0,51 (7,06) | 2,99 (7,26) | 5,80 (8,71) | <0,001 |
| Вертел | 0,98 (14,97) | 5,68 (15,58) | 6,53 (15,33) | <0,001 |
| Межвертельная линия | -0,23 (6,28) | 3,59 (7,32) | 4,99 (7,79) | <0,001 |
| Треугольник Варда | 0,01 (14,75) | 5,36 (14,78) | 8,86 (17,02) | <0,001 |
| Запястье | ||||
| Ультрадистальн. часть (пястье) | -1,67 (7,44) | -0,25 (6,53) | -1,88 (7,97) | 0,184 |
| 1/3 лучевой кости | -1,19 (6,12) | -1,37 (4,51) | -3,04 (6,09) | 0,025 |
| Тело в целом | -0,74 (4,76) | 1,30 (4,48) | 2,28 (5,44) | <0,001 |
Таблица 18 Влияние РТН на плотность минеральных веществ в костной ткани, представленное как конечный процент изменения (произвольное время) от исходного уровня
| Плацебо | РТН-20 | РТН-40 | Значение р | |
| Поясничный отдел позвоночника | 1,13 (5,47) | 9,70 (7,41) | 13,7 (9,69) | <0,001 |
| Бедро/тазобедренный сустав | ||||
| Общее | -1,01 (4,25) | 2,58 (4,88) | 3,60 (5,42) | <0,001 |
| Шейка | -0,69 (5,39) | 2,79 (5,72) | 5,06 (6,73) | <0,001 |
| Вертел | -0,21 (6,30) | 3,50 (6,81) | 4,40 (7,45) | <0,001 |
| Межвертельная линия | -1,29 (4,53) | 2,62 (5,52) | 3,98 (5,96) | <0,001 |
| Треугольник Варда | -,80 (11,73) | 4,19 (11,93) | 7,85 (13,24) | <0,001 |
| Запястье Ультрадистальн. часть (пястье) | -1,89 (7,98) | -0,05 (7,14) | -1,76 (7,20) | 0,108 |
| 1/3 лучевой кости | -1,22 (3,37) | -1,94 (4,07) | -3,17 (4,62) | 0,001 |
Таблица 19 Влияние РТН на площадь поверхности кости, представленное как конечный процент изменения (произвольное время) от исходного уровня
| Плацебо | РТН-20 | РТН-40 | Значение р | |
| Поясничный отдел позвоночника | 0,46 (2,97) | 2,52 (3,52) | 3,34 (3,72) | <0,001 |
| Бедро/тазобедренный сустав | ||||
| Общее | 0,54 (3,02) | 0,84 (3,16) | 1,05 (2,98) | 0,144 |
| Шейка | 0,04 (4,60) | 0,27 (4,91) | 0,81 (5,56) | 0,035 |
| Вертел | 0,95 (12,75) | 1,99 (12,16) | 1,92 (11,30) | 0,197 |
| Межвертельная линия | 1,01 (5,17) | 1,01 (4,99) | 1,01 (4,89) | 0,964 |
| Треугольник Варда | 0,44 (7,60) | 1,13 (7,34) | 0,99 (8,06) | 0,309 |
| Запястье Ультрадистальн.часть(пястье) | 0,25 (6,40) | -0,25 (6,00) | -0,39 (4,80) | 0,653 |
| 1/3 лучевой кости | -0,02 (5,73) | 0,52 (3,40) | 0,01 (4,42) | 0,586 |
В итоге данные, представленные выше, имеют меньше переломов. В частности лечение показывают, что пациенты, пролеченные РТН, РТН уменьшает более чем на 66% количество пациентов, у которых раньше были переломы позвоночников, и которые страдают от новых переломов позвоночника. Лечение РТН также уменьшает более чем на 78% количество пациентов, у которых раньше были переломы позвоночников и которые страдают от новых множественных переломов позвоночника. Кроме того, РТН уменьшает тяжесть переломов позвоночника, со значительным уменьшением на 78% числа пациентов с тяжелыми переломами или переломами средней тяжести. Пациенты, принимающие РТН, выигрывают от значительного уменьшения всех переломов, не связанных с позвоночником (включая переломы верхней части бедра, лучевой кости, запястья, таза, стопы, плечевой кости, ребер или лодыжки) со значимостью на уровне р<0,007. Качество костной ткани также увеличивается. Пациенты, имевшие ранее переломы, выигрывают от значительного увеличения содержания минеральных веществ в бедренной кости, позвоночнике и в теле в целом. Это увеличение указывает, что уменьшение переломов в этих местах может произойти уже через 12 месяцев терапии.
Обсуждение.
Настоящие данные по переломам являются первыми данными по уменьшению переломов у людей с помощью РТН. Настоящие открытия демонстрируют улучшение в качестве костной ткани и в прочности костей, подобно преклиническим данным, изложенным выше. Эти результаты также показывают выигрыши в качестве и прочности костной ткани в областях, не связанных с позвоночником. Обнаружение уменьшения количества переломов, имевших место во время 18-23-месячного периода лечения, ранее не было обнаружено в клинических или преклинических исследованиях.
Вопрос о том, один ли РТН увеличивает прочность и крепость костей для повышения сопротивления переломам, не был ранее исследован на людях. Все опубликованные литературные данные вместе убеждают, что РТН должен даваться в сочетании с противорезорбционным агентом или с эстрогеном. Предыдущие опубликованные клинические исследования включают популяции пациентов, слишком малые для определения значимого восстановления после переломов. В одном исследовании преимущества РТН самого по себе не могли бы быть оценены, поскольку не существовало контрольной группы с плацебо. Во втором исследовании, использовавшем повсеместно принятое определение перелома, не было обнаружено уменьшения переломов.
Открытие сокращения переломов в различных местах, не связанных с позвоночником, является особенно неожиданным в свете распространенного предположения о том, что РТН имеет отрицательное влияние в таких областях. Распространенная догма утверждает, что РТН будет увеличивать пористость кортикальной костной ткани и поэтому ослаблять кость, особенно на ранних стадиях терапии. Далее эта догма утверждает, что области кортикальной костной ткани имеют высокий риск перелома, и что РТН не будет давать выигрыша в уменьшении переломов в местах, не связанных с позвоночником. Эта догма также утверждает, что РТН сам по себе вряд ли будет эффективным и будет требовать совместной противорезорбционной терапии, чтобы блокировать отрицательные воздействия на кортикальную костную ткань. Представленные данные демонстрируют незамеченные ранее преимущества введения РТН пациентам, принимающим дополнительное лечение в виде витамина Ό и кальция. Неожиданно, РТН упрочняет костную ткань с уменьшением количества новых переломов у пациента с риском множественных переломов позвоночника, с риском дополнительных переломов, не связанных с позвоночником, с риском дополнительных переломов позвоночника от средней тяжести до тяжелых и тому подобное.
Клинические исследования на женщинах в постменопаузальном периоде показывают особенные преимущества от лечения пациентов низкими дозами (20 мкг/день), поскольку доза РТН (который при высоких дозах мог бы демонстрировать побочные эффекты у некоторых пациентов) уменьшается, но предотвращение перелома и уменьшение перелом остается и является подобным тем, которые отмечаются при высокой дозе (40 мкг/день). Данные по ΡΤ-ΙΚ исследований на обезьянах указывают возможное, но не ограничивающее механистическое объяснение. Исследования на обезьянах показывают, что РТН при низких дозах увеличивает образование кристаллитов и ускоряет минерализацию кортикальной костной ткани. Кроме того, обезьяны при низких дозах демонстрируют дополнительные преимущества после отмены лечения, поскольку РТН увеличивает содержание минеральных веществ в костной ткани. Настоящие данные демонстрируют новое открытие, что РТН, вводимый при низких дозах, пациентам, принимающим дополнительное лечение в виде витамина Ό и кальция, является эффективным для предотвращения переломов, как позвоночника, так и не связанных с позвоночником. В противоположность популярному утверждению, РТН упрочняет костную ткань в местах, не связанных с позвоночником, с целью предотвращения новых переломов или уменьшения тяжести переломов, видимо путем улучшения минерализации и повышения содержания минеральных веществ в костной ткани.
Настоящее изобретение описывается с упоминанием различных конкретных и предпочтительных воплощений и способов. Однако должно быть понятно, что множество вариаций и модификаций может быть сделано, оставаясь при этом в духе и рамках настоящего изобретения. Все публикации и заявки на патенты в этой в настоящем описании являются показательными для уровня среднего специалиста в области, к которой относится настоящее изобретение
Claims (17)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Способ для одновременного уменьшения риска перелома костей как позвоночника, так и не связанных с позвоночником, у человека с риском развития остеопороза или имеющего остеопороз, включающий введение указанному человеку паратиреоидного гормона без одновременного введения противорезорбционного агента иного, чем витамин Ό или кальций при ежедневной дозе от 20 до 40 мкг.
- 2. Применение паратиреоидного гормона, состоящего из последовательности аминокислот 1-34 паратиреоидного гормона человека для производства лекарственного средства для одновременного уменьшения риска перелома костей как позвоночника, так и не связанных с позвоночником, у женщины в постменопаузальном периоде с риском развития остеопороза или имеющую остеопороз, где указанное лекарственное средство вводят указанной женщине без одновременного введения противорезорбционного агента иного, чем витамин Ό или кальций при ежедневной дозе от 20 до 40 мкг в течение, по меньшей мере, от около 12 месяцев и до 3 лет.
- 3. Применение по п.2, отличающееся тем, что указанная ежедневная доза составляет 20 мкг.
- 4. Применение по п.2, отличающееся тем, что указанная ежедневная доза вводится, по меньшей мере, в течение около 24 месяцев.
- 5. Применение по п.2, отличающееся тем, что указанное лекарственное средство содержится внутри упаковочного материала и указанный упаковочный материал содержит печатный материал, который указывает, что указанное лекарственное средство эффективно для одновременного уменьшения риска перелома костей как позвоночника, так и не связанных с позвоночником, у женщины в постменопаузальном периоде с риском развития остеопороза или имеющую остеопороз, когда его вводят указанной женщине таким образом, что указанный паратиреоидный гормон вводится без одновременного введения противорезорбционного агента иного, чем витамин Ό или кальций при ежедневной дозе от 20 до 40 мкг, по меньшей мере, в течение от около 12 месяцев и до 3 лет.
- 6. Применение паратиреоидного гормона для производства лекарственного средства для уменьшения риска перелома костей как позвоночника, так и не связанных с позвоночником, у пациента - человека с риском развития остеопороза или имеющего остеопороз, где указанный паратиреоидный гормон вводят указанному пациенту без одновременного введения противорезорбционного агента иного, чем витамин Ό или кальций при ежедневной дозе от 20 до 40 мкг.
- 7. Применение паратиреоидного гормона для производства лекарственного средства для усиления кортикального слоя кости у пациента человека с риском развития остеопороза или имеющего остеопороз, где указанный паратиреоидный гормон вводят указанному пациенту без одновременного введения противорезорбционного агента иного, чем витамин Ό или кальций при ежедневной дозе от 20 до 40 мкг.
- 8. Применение по п.6 или 7, отличающееся тем, что указанный пациент - человек имеет риск развития остеопороза или остеопороз, происходящий от обусловленного возрастом гипогонадального состояния.
- 9. Применение по п.8, отличающееся тем, что указанный пациент-человек является женщиной в постменопаузальном периоде.
- 10. Применение по любому из пп.2-9, отличающееся тем, что указанный пациентчеловек имеет остеопороз.
- 11. Применение по любому из пп.2-10, отличающееся тем, что указанное лекарственное средство вводят, по меньшей мере, в течение от около 12 месяцев и до 3 лет.
- 12. Применение по п.6, отличающееся тем, что указанная ежедневная доза составляет 20 мкг.
- 13. Применение по п.6, отличающееся тем, что указанная ежедневная доза вводится, по меньшей мере, в течение около 24 месяцев.
- 14. Применение по п.6, отличающееся тем, что указанное лекарственное средство содержится внутри упаковочного материала и указанный упаковочный материал содержит печатный материал, который указывает, что указанное лекарственное средство эффективно для уменьшения риска перелома костей как позвоночника, так и не связанных с позвоночником, у пациента-человека с риском развития остеопороза или имеющего остеопороз, когда его вводят указанному пациенту таким образом, что указанный паратиреоидный гормон вводится без одновременного введения противорезорбционного агента иного, чем витамин Ό или кальций при ежедневной дозе от 20 до 40 мкг.
- 15. Применение по любому из пп.6-14, отличающееся тем, что указанный паратиреоидный гормон выбран из РТН(1-31), РТН(1-34), РТН(1-37), РТН(1-38), РТН(1-41) и РТН (1-84).
- 16. Применение по п.15, отличающееся тем, что указанный паратиреоидный гормон представляет собой РТН(1-34) человека.
- 17. Применение по п.15, отличающееся тем, что указанный паратиреоидный гормон представляет собой РТН(1-84) человека.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US9715198P | 1998-08-19 | 1998-08-19 | |
| US9974698P | 1998-09-10 | 1998-09-10 | |
| PCT/US1999/018961 WO2000010596A1 (en) | 1998-08-19 | 1999-08-19 | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA200001015A1 EA200001015A1 (ru) | 2001-02-26 |
| EA003362B1 true EA003362B1 (ru) | 2003-04-24 |
Family
ID=26792729
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA200001015A EA003362B1 (ru) | 1998-08-19 | 1999-08-19 | Способ увеличения прочности и упругости кости и сокращения переломов |
Country Status (32)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6977077B1 (ru) |
| EP (3) | EP2266598B1 (ru) |
| JP (5) | JP2002523375A (ru) |
| KR (1) | KR100454207B1 (ru) |
| CN (1) | CN1205997C (ru) |
| AR (1) | AR033639A1 (ru) |
| AT (1) | ATE231000T1 (ru) |
| AU (1) | AU746277B2 (ru) |
| BR (1) | BR9909445A (ru) |
| CA (1) | CA2325371C (ru) |
| CO (1) | CO5130020A1 (ru) |
| CY (2) | CY1113343T1 (ru) |
| CZ (1) | CZ301017B6 (ru) |
| DE (2) | DE15152726T1 (ru) |
| DK (4) | DK2266598T3 (ru) |
| DZ (1) | DZ2873A1 (ru) |
| EA (1) | EA003362B1 (ru) |
| ES (4) | ES2393200T3 (ru) |
| HR (1) | HRP20000755A2 (ru) |
| HU (2) | HU230697B1 (ru) |
| ID (1) | ID29039A (ru) |
| IL (2) | IL138829A0 (ru) |
| MY (1) | MY129227A (ru) |
| NO (2) | NO323984B1 (ru) |
| NZ (1) | NZ507056A (ru) |
| PE (1) | PE20001089A1 (ru) |
| PL (1) | PL201688B1 (ru) |
| PT (4) | PT2907522T (ru) |
| TR (1) | TR200003455T2 (ru) |
| TW (1) | TW576747B (ru) |
| UA (1) | UA72205C2 (ru) |
| WO (1) | WO2000010596A1 (ru) |
Families Citing this family (40)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6770623B1 (en) * | 1997-12-09 | 2004-08-03 | Eli Lilly And Company | Stabilized teriparatide solutions |
| DZ2873A1 (fr) * | 1998-08-19 | 2003-12-15 | Lilly Co Eli | Procédé pour augmenter la dureté et la rigidité osseuse. |
| US20040033950A1 (en) | 2000-09-26 | 2004-02-19 | Hock Janet M. | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures |
| WO2001022093A1 (en) * | 1999-09-20 | 2001-03-29 | Eli Lilly And Company | Method for monitoring treatment with a parathyroid hormone |
| US7247609B2 (en) | 2001-12-18 | 2007-07-24 | Universitat Zurich | Growth factor modified protein matrices for tissue engineering |
| EP1531855A4 (en) * | 2002-01-10 | 2009-07-22 | Osteotrophin Llc | TREATMENT OF BONE DISEASES WITH SKELETTAL ANABOLIKA |
| US8088734B2 (en) | 2003-01-21 | 2012-01-03 | Unigene Laboratories Inc. | Oral delivery of peptides |
| KR20060058133A (ko) * | 2003-09-19 | 2006-05-29 | 화이자 프로덕츠 인코포레이티드 | 2-알킬리덴-19-노르-비타민 ｄ 유도체 및 부갑상선호르몬의 조합을 포함하는 약학 조성물 및 방법 |
| US20060189533A1 (en) * | 2004-05-10 | 2006-08-24 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Stable pharmaceutical dosage forms of teriparatide |
| CA2567056A1 (en) * | 2004-05-10 | 2005-12-08 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of parathyroid hormone |
| US20060052305A1 (en) * | 2004-05-10 | 2006-03-09 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Method of treating osteoporosis using intranasal parathyroid hormone |
| US20060127320A1 (en) * | 2004-05-10 | 2006-06-15 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Method of delivering parathyroid hormone to a human |
| US7556821B2 (en) | 2004-05-13 | 2009-07-07 | Alza Corporation | Apparatus and method for transdermal delivery of parathyroid hormone agents |
| US7648965B2 (en) | 2004-05-14 | 2010-01-19 | Unigene Laboratories Inc. | Method for fostering bone formation and preservation |
| US20060069021A1 (en) * | 2004-08-13 | 2006-03-30 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Compositions and methods for intranasal administration of inactive analogs of PTH or inactivated preparations of PTH or PTH analogs |
| WO2006073711A2 (en) | 2005-01-06 | 2006-07-13 | Kuros Biosurgery Ag | Use of a matrix comprising a contrast agent in soft tissues |
| US8575101B2 (en) | 2005-01-06 | 2013-11-05 | Kuros Biosurgery Ag | Supplemented matrices for the repair of bone fractures |
| EP1879608A4 (en) * | 2005-05-11 | 2009-11-11 | Unigene Lab Inc | METHOD FOR STIMULATING BONE FORMATION AND PRESERVATION |
| US20070173447A1 (en) * | 2005-10-25 | 2007-07-26 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Method for treating osteoporosis by intranasal delivery of teriparatide with an anti-resorptive agent |
| CA2628945A1 (en) * | 2005-11-10 | 2007-05-24 | Board Of Control Of Michigan Technological University | Black bear parathyroid hormone and methods of using black bear parathyroid hormone |
| US20080051332A1 (en) * | 2005-11-18 | 2008-02-28 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Method of modulating hematopoietic stem cells and treating hematologic diseases using intranasal parathyroid hormone |
| US20080119408A1 (en) * | 2006-07-07 | 2008-05-22 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Pth formulations for intranasal delivery |
| EP1961765A1 (en) * | 2006-12-08 | 2008-08-27 | Zealand Pharma A/S | Truncated PTH peptides with a cyclic conformation |
| DK2136850T3 (da) | 2007-04-13 | 2012-04-10 | Kuros Biosurgery Ag | Polymervævforsegling |
| US20110137243A1 (en) * | 2007-09-06 | 2011-06-09 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Coating On A Balloon Device |
| US9457056B2 (en) * | 2007-12-04 | 2016-10-04 | Ben-Gurion University Of The Negev Research And Development Authority | Peptides comprising alternating hydrophobic and anionic amino acids for treatment of osteoporosis |
| WO2009083544A2 (en) | 2007-12-28 | 2009-07-09 | Kuros Biosurgery Ag | Pdgf fusion proteins incorporated into fibrin foams |
| KR20190095552A (ko) * | 2009-09-09 | 2019-08-14 | 아사히 가세이 파마 가부시키가이샤 | 1회당 100∼200 단위의 ｐｔｈ가 주 1회 투여되는 것을 특징으로 하는, ｐｔｈ 함유 골다공증 치료/예방제 |
| BR112012013725A2 (pt) | 2009-12-07 | 2017-01-10 | Univ Michigan Tech | paratormônio de urso preto e métodos de usar o paratormônio de uso preto. |
| US9295663B2 (en) | 2010-07-14 | 2016-03-29 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Drug coated balloon with in-situ formed drug containing microspheres |
| WO2012111852A1 (ja) * | 2011-02-17 | 2012-08-23 | 帝人ファーマ株式会社 | 椎体骨折治療剤及びその評価方法 |
| EP2686027B1 (en) | 2011-03-16 | 2021-05-05 | Kuros Biosurgery AG | Pharmaceutical formulation for use in spinal fusion |
| KR20150116467A (ko) | 2011-06-07 | 2015-10-15 | 아사히 가세이 파마 가부시키가이샤 | 고순도 ｐｔｈ 함유 동결 건조 제제 및 그의 제조 방법 |
| US9700485B2 (en) | 2013-04-24 | 2017-07-11 | Corning Incorporated | Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients |
| US11492386B2 (en) | 2016-02-01 | 2022-11-08 | Eli Lilly And Company | Parathyroid hormone-anti-RANKL antibody fusion compounds |
| US20190381341A1 (en) * | 2017-02-01 | 2019-12-19 | The Johns Hopkins University | Parathyroid hormone and regeneration of degenerative discs disease |
| US20200289621A1 (en) * | 2017-09-22 | 2020-09-17 | Asahi Kasei Pharma Corporation | Teriparatide-containing liquid pharmaceutical composition having excellent stability |
| ES3009869T3 (en) | 2018-10-29 | 2025-03-31 | Asahi Kasei Pharma Corp | An improved teriparatide dosage regimen for use in preventing or treating osteoporosis characterized by administering teriparatide or salt thereof twice a week |
| EP4010360A1 (en) | 2019-08-09 | 2022-06-15 | Flagship Pioneering Innovations VI, LLC | Modulators of parathyroid hormone receptor (pthr1) |
| GB2590692A (en) * | 2019-12-24 | 2021-07-07 | Corthotec Ltd | Composition for improved bone fracture healing |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0873376A (ja) * | 1994-09-07 | 1996-03-19 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 骨粗鬆症治療薬 |
| JPH08310965A (ja) * | 1995-05-16 | 1996-11-26 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 骨癒合促進剤 |
| WO1998014478A1 (en) * | 1996-09-30 | 1998-04-09 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Continuous low-dose administration of parathyroid hormone or its agonist |
| WO1999012561A2 (en) * | 1997-09-09 | 1999-03-18 | F. Hoffman-La Roche Ag | FRACTURE HEALING USING PTHrP ANALOGS |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4086196A (en) | 1975-03-28 | 1978-04-25 | Armour Pharmaceutical Company | Parathyroid hormone |
| IL78342A (en) | 1985-04-04 | 1991-06-10 | Gen Hospital Corp | Pharmaceutical composition for treatment of osteoporosis in humans comprising a parathyroid hormone or a fragment thereof |
| DE3935738A1 (de) | 1989-10-27 | 1991-05-08 | Forssmann Wolf Georg | Arzneimittel, enthaltend das humane parathormon-fragment (1-37) als aktiven wirkstoff |
| US5208041A (en) | 1991-05-23 | 1993-05-04 | Allelix Biopharmaceuticals Inc. | Essentially pure human parathyroid hormone |
| US5556940A (en) | 1994-06-20 | 1996-09-17 | National Research Council Of Canada | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis |
| JPH10511095A (ja) * | 1994-12-19 | 1998-10-27 | ベス イスラエル ディーコネス メディカル センター インコーポレイテッド | 副甲状腺ホルモン又はその作動薬の低用量継続投与 |
| EP1283035A3 (en) * | 1994-12-22 | 2003-03-19 | AstraZeneca AB | Therapeutic preparation for inhalation containing parathyroid hormone |
| ZA9811127B (en) | 1997-12-09 | 2000-07-11 | Lilly Co Eli | Stabilized teriparatide solutions. |
| DZ2873A1 (fr) * | 1998-08-19 | 2003-12-15 | Lilly Co Eli | Procédé pour augmenter la dureté et la rigidité osseuse. |
| US20040033950A1 (en) | 2000-09-26 | 2004-02-19 | Hock Janet M. | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures |
| US6907597B1 (en) | 2000-10-13 | 2005-06-14 | Ati International Srl | Method and apparatus for constructing an executable program in memory |
| US6967759B2 (en) | 2001-12-31 | 2005-11-22 | Texas Instruments Incorporated | Pulse width modulation sequence generation |
| JP5796714B2 (ja) | 2012-01-13 | 2015-10-21 | 株式会社リコー | 定着装置及び画像形成装置 |
| EP2949301B1 (en) | 2014-05-27 | 2018-04-18 | The Procter and Gamble Company | Absorbent core with curved and straight absorbent material areas |
-
1999
- 1999-08-18 DZ DZ990173A patent/DZ2873A1/xx active
- 1999-08-18 AR ARP990104133A patent/AR033639A1/es unknown
- 1999-08-19 DK DK10180447.4T patent/DK2266598T3/en active
- 1999-08-19 DK DK99942350T patent/DK1059933T3/da active
- 1999-08-19 TR TR2000/03455T patent/TR200003455T2/xx unknown
- 1999-08-19 PT PT15152726T patent/PT2907522T/pt unknown
- 1999-08-19 DE DE15152726.4T patent/DE15152726T1/de active Pending
- 1999-08-19 WO PCT/US1999/018961 patent/WO2000010596A1/en not_active Ceased
- 1999-08-19 NZ NZ507056A patent/NZ507056A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 AU AU55750/99A patent/AU746277B2/en not_active Expired
- 1999-08-19 MY MYPI99003553A patent/MY129227A/en unknown
- 1999-08-19 DK DK15152726.4T patent/DK2907522T3/en active
- 1999-08-19 IL IL13882999A patent/IL138829A0/xx unknown
- 1999-08-19 ES ES06027055T patent/ES2393200T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 ES ES10180447.4T patent/ES2621653T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 EP EP10180447.4A patent/EP2266598B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 CN CNB998083534A patent/CN1205997C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 HU HU0101594A patent/HU230697B1/hu unknown
- 1999-08-19 PT PT06027055T patent/PT1769804E/pt unknown
- 1999-08-19 PE PE1999000839A patent/PE20001089A1/es not_active Application Discontinuation
- 1999-08-19 KR KR10-2001-7002092A patent/KR100454207B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 EP EP15152726.4A patent/EP2907522B1/en not_active Revoked
- 1999-08-19 DK DK06027055.0T patent/DK1769804T3/da active
- 1999-08-19 CA CA002325371A patent/CA2325371C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 EP EP99942350A patent/EP1059933B1/en not_active Revoked
- 1999-08-19 CO CO99052525A patent/CO5130020A1/es unknown
- 1999-08-19 JP JP2000565916A patent/JP2002523375A/ja active Pending
- 1999-08-19 US US09/647,278 patent/US6977077B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 ES ES99942350T patent/ES2190244T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 PT PT101804474T patent/PT2266598T/pt unknown
- 1999-08-19 AT AT99942350T patent/ATE231000T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 BR BR9909445-2A patent/BR9909445A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-08-19 HU HUP1200430 patent/HU1200430D0/hu not_active Application Discontinuation
- 1999-08-19 UA UA2000095457A patent/UA72205C2/ru unknown
- 1999-08-19 HR HR20000755A patent/HRP20000755A2/hr not_active Application Discontinuation
- 1999-08-19 DE DE69904918T patent/DE69904918T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 ES ES15152726.4T patent/ES2549551T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 PL PL343595A patent/PL201688B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 PT PT99942350T patent/PT1059933E/pt unknown
- 1999-08-19 CZ CZ20004134A patent/CZ301017B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 EA EA200001015A patent/EA003362B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 ID IDW20010612A patent/ID29039A/id unknown
- 1999-10-26 TW TW088114185A patent/TW576747B/zh not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-10-03 IL IL138829A patent/IL138829A/en unknown
- 2000-11-24 NO NO20005947A patent/NO323984B1/no not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-04-05 US US11/098,894 patent/US7163684B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2007
- 2007-06-11 NO NO20072983A patent/NO20072983L/no not_active Application Discontinuation
-
2010
- 2010-10-29 JP JP2010244314A patent/JP2011021035A/ja not_active Withdrawn
-
2012
- 2012-11-14 CY CY20121101096T patent/CY1113343T1/el unknown
-
2014
- 2014-03-25 JP JP2014061763A patent/JP6177718B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2014-10-03 JP JP2014204577A patent/JP2015028065A/ja not_active Withdrawn
-
2017
- 2017-06-26 JP JP2017124301A patent/JP2017190332A/ja not_active Withdrawn
- 2017-10-13 CY CY20171101077T patent/CY1119552T1/el unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0873376A (ja) * | 1994-09-07 | 1996-03-19 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 骨粗鬆症治療薬 |
| JPH08310965A (ja) * | 1995-05-16 | 1996-11-26 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 骨癒合促進剤 |
| WO1998014478A1 (en) * | 1996-09-30 | 1998-04-09 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Continuous low-dose administration of parathyroid hormone or its agonist |
| WO1999012561A2 (en) * | 1997-09-09 | 1999-03-18 | F. Hoffman-La Roche Ag | FRACTURE HEALING USING PTHrP ANALOGS |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| DATABASE WPI Section Ch, Week 199706 Derwent Publications Ltd., London, GB; Class B04, AN 1997-061733, XP002127206 & JP 08310965 A (CHUGAI PHARM CO LTD.), 26 November 1996 (1996-11-26), abstract * |
| EJERSTED C. ET AL.: "HUMAN PARATHYROID HORMONE (1-34) AND (1-84) INCREASE THE MECHANICAL STRENGHT AND THICKNESS OF CORTICAL BONE IN RATS." JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH, vol. 8, no. 9, September 1993 (1993-09), pages 1097-1101, XP000857986, NEW YORK, US, page 1100, right-hand column, paragraph 3 - page 1101, left-hand column, paragraph 1 * |
| HIRANO T. ET AL.: "ANABOLIC EFFECTS OF HUMAN BIOSYNTHETIC PARATHYROID HORMONE FRAGMENT (1-34), LY333334, ON REMODELING AND MECHANICAL PROPERTIES OF CORTCAL BONE IN RABBITS." JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH, vol. 14, no. 4, April 1999 (1999-04), pages 536-545, XP000857985, NEW YORK, US, the whole document * |
| JEROME C.P. ET AL.: "EFFECT OF TREATMENT FOR 3 MONTHS WITH HUMAN PARATHYROID HORMONE 1-34 PEPTIDE IN OVARIECTOMIZED CYNOMONGOLUS MONKEYS (MACACA FASCICULARIS)." BONE, vol. 17. no. 4 SUPPL., October 1995 (1995-10), pages 415S-420S, XP000857980, NEW YORK, US, page 415S, paragraphs 2, 3 - page 416S, paragraphs 1, 2 page 418S, paragraphs 3, 4 - page 419S, paragraphs 1-3 * |
| LINSAY R. ET AL.: "RANDOMISED CONTROLLED STUDY OF EFFECT OF PARATHYROID HORMONE ON VERTEBRAL-BONE MASS AND FRACTURE INCIDENCE AMONG POSTMENOPAUSAL WOMEN ON OESTROGEN WITH OSTEOPOROSIS." THE LANCET, vol. 350, 23 August 1997 (1997-08-23), pages 550-555, XP002127205, LONDON, GB, page 555, left-hand column, paragraph 4 * |
| PATENT ABSTRACTS OF JAPAN vol. 1996, no. 07, 31 July 1996 (1996-07-31) & JP 08073376 A (ASAHI CHEM IND CO LTD.), 19 March 1996 (1996-03-19) abstract * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EA003362B1 (ru) | Способ увеличения прочности и упругости кости и сокращения переломов | |
| US7351414B2 (en) | Method of reducing the risk of bone fracture | |
| CA2383574A1 (en) | Method for reducing the risk of cancer | |
| EP1295605A2 (en) | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures | |
| EP1769804B1 (en) | hPTH(1-34) for use in preventing or reducing the incidence or severity of vertebral and / or non vertebral fracture in a male human | |
| HK1037333A (en) | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures | |
| HK1212602B (en) | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures | |
| MXPA00009982A (en) | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures | |
| HK1030545B (en) | Use of parathyroide hormone consisting of aminoacid sequence 1-34 of human parathyroid hormone for reducing the risk of both vertebral and non vertebral bone fracture | |
| HK1102496B (en) | Hpth(1-34) for use in preventing or reducing the incidence or severity of vertebral and / or non vertebral fracture in a male human |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AZ BY KG TJ TM |
|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): MD |
|
| MH4A | Revocation of a eurasian patent in part |
Designated state(s): RU |
|
| ND4A | Extension of term of a eurasian patent | ||
| MK4A | Patent expired |
Designated state(s): AM RU |
|
| MK4A | Patent expired |
Designated state(s): KZ |