CZ301017B6 - Lécivo pro snížení rizika vertebrální nebo nevertebrální zlomeniny kosti u cloveka a rizika osteoporózy - Google Patents
Lécivo pro snížení rizika vertebrální nebo nevertebrální zlomeniny kosti u cloveka a rizika osteoporózy Download PDFInfo
- Publication number
- CZ301017B6 CZ301017B6 CZ20004134A CZ20004134A CZ301017B6 CZ 301017 B6 CZ301017 B6 CZ 301017B6 CZ 20004134 A CZ20004134 A CZ 20004134A CZ 20004134 A CZ20004134 A CZ 20004134A CZ 301017 B6 CZ301017 B6 CZ 301017B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- bone
- pth
- months
- cortical
- vertebral
- Prior art date
Links
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 title claims abstract description 52
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 title claims abstract description 30
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 title claims description 21
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 title abstract description 13
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 claims abstract description 234
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 claims abstract description 227
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 claims abstract description 227
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 claims abstract description 181
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 24
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims abstract description 24
- 101001135770 Homo sapiens Parathyroid hormone Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 101001135995 Homo sapiens Probable peptidyl-tRNA hydrolase Proteins 0.000 claims abstract description 16
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 102000058004 human PTH Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 claims abstract description 9
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 claims abstract description 9
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 claims abstract description 9
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 claims description 4
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000123 anti-resoprtive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 290
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 91
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 81
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 71
- OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N teriparatide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CNC=N1 OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N 0.000 description 54
- 238000000034 method Methods 0.000 description 53
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 41
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 39
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 39
- 210000001624 hip Anatomy 0.000 description 36
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 32
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 29
- 206010041569 spinal fracture Diseases 0.000 description 28
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 27
- 210000002758 humerus Anatomy 0.000 description 23
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 23
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 23
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 23
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 22
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 22
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 21
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 21
- 230000008859 change Effects 0.000 description 19
- 239000000463 material Substances 0.000 description 18
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 17
- 230000037118 bone strength Effects 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 15
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 15
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 14
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 13
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 230000010072 bone remodeling Effects 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 10
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 10
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 10
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 8
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 7
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 7
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 description 7
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 7
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 7
- 230000008416 bone turnover Effects 0.000 description 7
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 7
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 7
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 7
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 7
- 102100036893 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000000707 wrist Anatomy 0.000 description 6
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 5
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 5
- 206010061363 Skeletal injury Diseases 0.000 description 5
- 108010049264 Teriparatide Proteins 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 5
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 5
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-methyl-PhOH Natural products CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 5
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 5
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 5
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108700020797 Parathyroid Hormone-Related Proteins 0.000 description 4
- 102000043299 Parathyroid hormone-related Human genes 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 4
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 4
- 230000001089 mineralizing effect Effects 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 210000000614 rib Anatomy 0.000 description 4
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 4
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 4
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 3
- 238000000305 Fourier transform infrared microscopy Methods 0.000 description 3
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 3
- 238000003957 acoustic microscopy Methods 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000011444 antiresorptive therapy Methods 0.000 description 3
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 3
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 3
- 230000008468 bone growth Effects 0.000 description 3
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 3
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 3
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 3
- 210000003275 diaphysis Anatomy 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 210000000501 femur body Anatomy 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 description 3
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 3
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 3
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 3
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 3
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GMRQFYUYWCNGIN-ZVUFCXRFSA-N 1,25-dihydroxy vitamin D3 Chemical compound C1([C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=CC=C1C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-ZVUFCXRFSA-N 0.000 description 2
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 2
- 101001135732 Bos taurus Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 2
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 2
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000000038 Hypoparathyroidism Diseases 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 102000006461 Parathyroid Hormone Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010058828 Parathyroid Hormone Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102100032256 Parathyroid hormone/parathyroid hormone-related peptide receptor Human genes 0.000 description 2
- 101710180613 Parathyroid hormone/parathyroid hormone-related peptide receptor Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000021017 Weight Gain Diseases 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 230000018678 bone mineralization Effects 0.000 description 2
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 2
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 2
- 229940069978 calcium supplement Drugs 0.000 description 2
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 2
- 210000001564 haversian system Anatomy 0.000 description 2
- 210000003692 ilium Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 2
- 238000009806 oophorectomy Methods 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 210000002320 radius Anatomy 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 229960005460 teriparatide Drugs 0.000 description 2
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 2
- ZOWOHMFPXMYFKJ-WBTWNKCNSA-N (4S)-4-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-aminopropanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]hexanoyl]amino]acetyl]amino]hexanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3R)-1-[[(1S)-1-carboxyethyl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CN=CN1 ZOWOHMFPXMYFKJ-WBTWNKCNSA-N 0.000 description 1
- WPRAXAOJIODQJR-UHFFFAOYSA-N 1-(3,4-dimethylphenyl)ethanone Chemical compound CC(=O)C1=CC=C(C)C(C)=C1 WPRAXAOJIODQJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- WSJYDTGMIVULJI-UHFFFAOYSA-N 2-fluoro-2h-chromene Chemical compound C1=CC=C2C=CC(F)OC2=C1 WSJYDTGMIVULJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGCKGOZRHPZPFP-UHFFFAOYSA-N Alizarin Natural products C1=CC=C2C(=O)C3=C(O)C(O)=CC=C3C(=O)C2=C1 RGCKGOZRHPZPFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000027502 Ankle fracture Diseases 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 description 1
- 206010005963 Bone formation increased Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 1
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 1
- 235000012905 Brassica oleracea var viridis Nutrition 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000581364 Clinitrachus argentatus Species 0.000 description 1
- 241000777300 Congiopodidae Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- ZAHDXEIQWWLQQL-IHRRRGAJSA-N Deoxypyridinoline Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCC[N+]1=CC(O)=C(C[C@H](N)C([O-])=O)C(CC[C@H](N)C(O)=O)=C1 ZAHDXEIQWWLQQL-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010016454 Femur fracture Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010016997 Forearm fracture Diseases 0.000 description 1
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N GnRH Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020100 Hip fracture Diseases 0.000 description 1
- 206010020462 Humerus fracture Diseases 0.000 description 1
- 208000037147 Hypercalcaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- 201000002980 Hyperparathyroidism Diseases 0.000 description 1
- 206010058359 Hypogonadism Diseases 0.000 description 1
- 238000004971 IR microspectroscopy Methods 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061599 Lower limb fracture Diseases 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 1
- 208000029725 Metabolic bone disease Diseases 0.000 description 1
- VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N Methyl methacrylate Chemical compound COC(=O)C(C)=C VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061291 Mineral deficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000006670 Multiple fractures Diseases 0.000 description 1
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108010021717 Nafarelin Proteins 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004067 Osteocalcin Human genes 0.000 description 1
- 108090000573 Osteocalcin Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 208000002500 Primary Ovarian Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 108010050808 Procollagen Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 208000027790 Rib fracture Diseases 0.000 description 1
- 101100243745 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) ptb1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 1
- 208000007271 Substance Withdrawal Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 206010049514 Traumatic fracture Diseases 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 206010048049 Wrist fracture Diseases 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- HFVAFDPGUJEFBQ-UHFFFAOYSA-M alizarin red S Chemical compound [Na+].O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)C2=C1C=C(S([O-])(=O)=O)C(O)=C2O HFVAFDPGUJEFBQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940124325 anabolic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 230000003262 anti-osteoporosis Effects 0.000 description 1
- 229940125681 anticonvulsant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000000386 athletic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 238000007470 bone biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000037176 bone building Effects 0.000 description 1
- 230000004094 calcium homeostasis Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003109 clavicle Anatomy 0.000 description 1
- 238000009535 clinical urine test Methods 0.000 description 1
- 108010049937 collagen type I trimeric cross-linked peptide Proteins 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 150000001896 cresols Chemical class 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 206010013663 drug dependence Diseases 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 238000009547 dual-energy X-ray absorptiometry Methods 0.000 description 1
- 230000004821 effect on bone Effects 0.000 description 1
- 210000001513 elbow Anatomy 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 229940091249 fluoride supplement Drugs 0.000 description 1
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 1
- 210000000245 forearm Anatomy 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 210000004349 growth plate Anatomy 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 210000001981 hip bone Anatomy 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000148 hypercalcaemia Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 1
- 210000001930 leg bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001078 lithium Drugs 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 208000018769 loss of vision Diseases 0.000 description 1
- 231100000864 loss of vision Toxicity 0.000 description 1
- 210000001699 lower leg Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 125000003717 m-cresyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(O*)=C([H])C(=C1[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000010198 maturation time Effects 0.000 description 1
- 230000005226 mechanical processes and functions Effects 0.000 description 1
- QZIQJVCYUQZDIR-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine hydrochloride Chemical compound Cl.ClCCN(C)CCCl QZIQJVCYUQZDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- FSBTYDWUUWLHBD-UDXTWCDOSA-N nafarelin acetate hydrate Chemical compound O.CC(O)=O.C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 FSBTYDWUUWLHBD-UDXTWCDOSA-N 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000011587 new zealand white rabbit Methods 0.000 description 1
- 235000003170 nutritional factors Nutrition 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000001009 osteoporotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000849 parathyroid Effects 0.000 description 1
- 108010073230 parathyroid hormone (1-38) Proteins 0.000 description 1
- 108010054971 parathyroid hormone-related protein (1-34) Proteins 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 229940067107 phenylethyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 230000010938 positive regulation of bone remodeling Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 206010036601 premature menopause Diseases 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 229940086546 synarel Drugs 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000001694 thigh bone Anatomy 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 238000003325 tomography Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 1
- 235000005282 vitamin D3 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011647 vitamin D3 Substances 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 1
- 229940021056 vitamin d3 Drugs 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/29—Parathyroid hormone, i.e. parathormone; Parathyroid hormone-related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
- A61P3/14—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis for calcium homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/18—Drugs for disorders of the endocrine system of the parathyroid hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Orthopedics, Nursing, And Contraception (AREA)
Abstract
Použití parathyroidního hormonu obsahujícího sekvenci aminokyseliny 1-34 lidského parathyroidního hormonu pro prípravu léciva pro snížení rizika vertebrální nebo nevertebrální zlomeniny kosti u cloveka s rizikem osteoporózy, kdy parathyroidní hormon je subjektu podáván bez soubežného podávání antiresorpcního cinidla jiného než vitamin D nebo vápník, v denních dávkách od 20 .mi.g.
Description
Léčivo pro snížení rizika vertebrální nebo nevertebrální zlomeniny kostí u člověka a rizika osteoporózy
Oblast techniky
Vynález se tyká způsobu zvyšovaní houževnatosti a tuhosti kostí a snižování pravděpodobnosti a/nebo závažnosti lomu kostí podáváním parathyroidního hormonu. Specielně se vynález týká způsobu zvyšování houževnatosti a tuhosti kostí v místech potenciálního nebo častého úrazu, ío jako je kyčel nebo osten páteře u lidí ohrožených nebo trpících osteoporózou. Zejména se vynález týká způsobu snižování případů lomu páteře, snižování případů vícenásobných lomů páteře, snižování závažností lomů páteře a/nebo snižování případů nepáteřních lomů.
Dosavadní stav techniky
Stávající činidla jako estrogen, bifosfonáty, fluorid nebo kalcitonin mohou zabraňovat ztrátě kostní hmoty a vyvolat hmotnostně 3% až 5% nárůst kostní hmoty vyplňováním prostoru přestavby kostí, avšak tvorba kostí není tím významně podpořena. Uchování kostí inhibici pře20 měny kostí nemůže být dostatečnou ochranou proti nebezpečí lomu u pacientů, u kterých došlo již k významné ztrátě kostní hmoty. Anabolika, která zvyšují pevnost kostí podporováním tvorby kostí mohou přednostně zajišťovat lepší ochranu před lomem u pacientů s rozvinutou osteoporózou.
Parathyroidní hormon (PTH) je sekretovaným 84 aminokyselinovým produktem savčí štítné žlázy, který řídí hladinu vápníku v séru působením na různé tkáně, včetně kostí. N-zakončení 34 aminokyselin hovězího a lidského PTH CPTHC 1-34)) se považuje za biologický ekvivalent plné délky hormonu. Jiné aminoterminální fragmenty PTH (včetně například 1-31 a 1-38), nebo PTHrP (peptid/protein odvozený od PTH) nebo analogy jednoho nebo obou, které aktivují recep30 tor PTH/PTHrP (receptor PTH1), vykazují podobné biologické účinky na kostní hmotu, ačkoli míra takových účinků může kolísat.
Studie na lidech s různými formami PTH ukázaly anabolický účinek na kosti a vyvolaly okamžitě zájem o jeho použití pro léčení osteoporózy a souvisejících kostních onemocnění. Významné anabolické účinky PTH na kosti, včetně stimulace tvorby kostí, která se projevuje zřetelným nárůstem kostní hmoty a/nebo pevnosti, byly předvedeny na četných zvířecích modelech a na lidech.
Obecně se předpokládá, že podáváním PTH lidským a odpovídajícím zvířecím modelům má záporný vliv na kortikální kosti. Skutečně přírodně se vyskytující zvyšování endogenního PTH, ke kterému dochází při nemoci hyperparathyroidismus, vede ke ztenčování kortikální kosti doprovázenému nárůstem pojiv a hmoty trabekuiámí kosti. Minulé studie naznačují, že když se Haverssova kortikální kost (vyskytující se u lidí a vyšších savců) přestavuje pod vlivem PTH, dochází k takové redistribuci kosti, že klesá hmotnost a pevnost kortikální kosti, zatímco hmot45 nost a pevnost trabekuiámí kosti se zvyšuje. Například v publikovaných klinických studiích podávání PTH, hmotnost kortikální kosti po ošetření exogenním PTH klesala a tyto poznatky vyvolaly znepokojení, že ošetřování PTH hmotnost a pevnost kortikální kosti snižuje. Jednou starostí, vyvolanou takovými studiemi, je, že díky ubývání kortikální kosti dojde ke ztrátě celkové hmotnosti kortikálních kosterních kostí. To má velký klinický význam, neboť u osteoporózy znamená větší úbytek trabekuiámí kosti ve srovnání s úbytkem kortikální kosti, že mechanické zatížení přenáší převážně zbývající kortikální kost. Pokračující ubývání kortikální kosti by zvyšovalo nebezpečí lomu. Proto je důležité, aby terapeutické činidlo pro osteoporózu uchovávalo nebo zvětšovalo zbývající kortikální kosti subjektu.
Účinky PTH na kortíkální kost byly předmětem zkoumání zvířat s Haversovou přestavbou kostí, jako jsou psi, fretky, ovce a opice, avšak počty vzorků jsou obvykle příliš malé pro spolehlivé statistické analýzy. Dopad změn, vyvolaných léčbou PTH, na mechanické vlastností kortíkální kosti u takových zvířat zůstává neznámý. Publikované studie hlodavců ukázaly zvýšenou hmot5 nost kortíkální kosti během podávání PTH, avšak ztrátu této přednosti po vynechání PTH. Kortikální kost hlodavců má však zřetelně odlišnou strukturu oproti Haversové kortíkální kosti a přestavuje se povrchovým apozičním tvořením a resorpcí, spíše než intrakortikální přestavbou stavebních jednotek kosti. Kromě toho technologická omezení biomechanických testů na poměrně krátkých kostech hlodavců vyvolává artefakty měření, když činidlo jako PTH, změní geometrii io kosti k jejímu zesílení. Takové artefakty činí extrapolaci odezvy kortíkální kosti krysy na lidi nebo jiná zvířata s osteonální přestavbou nespolehlivou. Proto stávající údaje pro zvířata podobná člověku, podléhající Haversové přestavbě kostí, naznačují, že PTH může mít škodlivý vliv na kortíkální kost, způsobující zřetelný pokles kostní hmoty ochuzováním kortíkální kosti.
Důsledkem byla běžná domněnka týkající se vlivu PTH, že pacienti potřebují průběžné nebo postupné léčení antiresorptivy k minimalizaci úbytku kostí vyvolanému PTH. Ve skutečnosti byl tento model základem pro klinické studie žen. Například klinické studie používaly PTH u postmenopauzálních žen se souběžnou terapii kalcitoninem nebo estrogenem nebo u premenopauzálních žen, beroucích agonist GnRH, Synarel pro endometriózu. Protichůdné účinky estrogenů
2o a PTH na kortíkální přeměnu kostí prakticky znemožnily pozorovat účinky právě PTH během kombinační terapie těmito dvěma činidly.
Úkolem vynálezu je tedy potřeba vyvinout způsob používání PTH ke zvyšování pevnosti a tuhosti kostí u lidí a zvířat vykazujících Haversovou přestavbu kostí a ke snížení výskytu lomů
2$ kostí těchto živočichů. Kromě toho je úkolem vynálezu vyvinout způsob zvyšování kvality a množství kortíkální kosti.
Podstata vynálezu
Způsob zvyšování houževnatosti a tuhosti kosti v místech potenciálního nebo skutečného úrazu jedince, který to potřebuje, spočívá podle vynálezu v tom, že se podává subjektu účinné množství parathyroidního hormonu (PTH).
Vynález se týká způsobu zvyšování houževnatosti a tuhosti kosti, především kortíkální kosti a/nebo snižování výskytu a/nebo závažnosti lomu podáváním PTH. Zvláště se vynález týká způsobu zvyšování houževnatosti a tuhosti kosti v místě potenciálního nebo skutečného úrazu. Zvýšení houževnatosti a/nebo tuhosti kosti se může projevit řadou cest známých pracovníkům v oboru, jako je například zvýšení minerální hustoty kosti, zvýšení obsahu minerálů v kosti, zvět40 šováním práce do lomu. V jednom provedení se vynález týká výskytu nebo závažnosti páteřových a/nebo nepáteřových lomů. Způsobu podle vynálezu je možno použít ke snížení nebezpečí takových lomů nebo k léčení takových zlomenin. Obzvláště může způsob podle vynálezu snižovat výskyt páteřových a/nebo nepáteřových lomů, snižovat výskyt několikanásobných lomů páteře a zlepšování kvality kostí.
Způsob může zvýšit houževnatost a tuhost v místech potenciálního úrazu, jako je kyčel nebo osten páteře osoby s osteoporózou nebo v jiném místě majícím abnormálně nízkou hmotu kostí nebo špatnou strukturu kostí. Způsob může také zvyšovat houževnatost nebo tuhost v místě skutečného úrazu, jako je zlomenina, například v kyčli nebo v páteři. Preferovaným subjektem pro způsob podle vynálezu je žena nebo muž s nebezpečím osteoporózy nebo mající osteoporózu, s výhodou postmenopauzální žena a je nezávislý na souběžné terapii náhrady hormonu (PTH), estrogenem nebo ekvivalentní léčbou nebo antiresorpční léčbou. Vynález se také týká způsobu, pri kterém pacient dostává jako doplněk kale i um a/nebo vitamín D.
Parathyroidní hormon, jako jsou N-koncové aminokyseliny 1-34 rekombinantního lidského parathyroidního hormonu, se může podávat buď cyklicky nebo přerušovaně. S výhodou zahrnuje cyklické podávání PTH dva nebo několik přestavbových cyklů a s vysazením PTH najeden nebo několik přestavbových cyklů. Způsobem podle vynálezu zvýšená houževnatost a/nebo tuhost kosti může přetrvat několik přestavbových cyklů, nebo až několik let po posledním podání parathyroidního hormonu.
Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení pomocí přiložených obrázků.
io
Seznam obrázků na výkresech
Obr. IA a 1B ukazuje, že BMD (bone minerál density = hustota minerálů v kosti) a BMC (bone 15 minerál content = obsah minerálů v kosti) v osovém dříku stehenní kosti (kortikální kosti) (A) a v sousedství stehenní kosti (mrížkovité kostí + kortikální kosti) (B) je významně větší u zvířat ošetřených PTH než u kontrolních zvířat při obou dávkách.
Na ose x je vždy dávka PTH (1-34) v gg/kg/den, a na druhém obr. IA je na oxe y plocha X 20 v mm2 a na druhém obr. 1B je na ose y projektovaná plocha v cm2.
Obr. 2A až 2D ukazuje účinky PTH na mechanickou pevnost a moment setrvačnosti průřezu (CSMI) v kortikální kosti osového dříku stehenní kosti.
Na ose x je vždy dávka PTH0-34) v gg/kg/den.
Na obr. 2AA znamenají prázdné sloupce maximální sílu a šrafované sloupce pevnost.
Na obr. 2BB znamenají prázdné sloupce tuhost a šrafované sloupce modul pružnosti.
Na obr. 2CC znamenají prázdné sloupce práci do poruchy a Šrafované sloupce houževnatost.
Na obr. 2DD znamenaj í prázdné sloupce CSMI.
Obr. 3 ukazuje procentové změny DX A obsahu minerálů v celém tělese kosti u kontrolní a ošetřované skupiny.
Na ose x jsou měsíce, na ose y procentová změna.
Obr. 4A až 4C ukazuje procentovou změnu rozměrů DXA páteřního ostnu u kontrolní a ošetřované skupiny v lumbálním obratli 2-4 plochy kosti (A), obsahu minerálů v kosti (B) a hustoty minerálů v kosti (C).
Na ose x jsou měsíce, na ose y procentová změna.
Obr. 5A a 5B ukazuje nárůst kostní hmoty (A) a pevnosti kosti (B) v lumbálním obratli primátů ošetřovaných parathyroidním hormonem.
Na ose x obr. 5A jsou měsíce ošetření, na ose y procentová změna BMC od začátku zkoušky. Obr. 6Aa6B ukazuje nárůst pevnosti kyčelního krčku (A) a konstantní pevnosti střední části kosti pažní (B) u primátů ošetřovaných parathyroidním hormonem.
Obr. 7 ukazuje aktivací rychlosti tvoření kosti na nitrokostním a okostičním povrchu osového dříku stehenní kostí.
Na ose x je rychlost tvoření kosti BFR/BS.
_ 3
Obr. 8 ukazuje histogramovou analýzu posunu voxelové hustoty kosti v lumbálním obratli způsobeného ošetřováním PTH ve srovnání s kontrolou. Patrný je nárůst hustoty kortikální části kosti po vysazení ošetření PTH.
Na ose x je hustota (mg/cm3), na ose y je pravděpodobnost.
Pevná čára platí pro ošetřování drogou, přerušovaná pro Ovx, čerchovaná pro odejmutí drogy.
V prvním oddíle je houbovitá kost, ve šrafovaném oddíle nestabilní a ve třetím oddíle kortikální io kost.
Obr, 9 ukazuje nárůst lumbálního ostnu BMD během 23 měsíců ošetřování pacientů buď 20 pg/kg/den PTH nebo 40 pg/kg/den PTH ve srovnání s kontrolami ošetřovanými placebem.
Na ose x jsou měsíce, na ose y procentová změna.
Obr. 10 ukazuje nárůst stehenní kosti a kyčelního krčku BMD během 24 měsíčního ošetřování pacientů buď 20 pg/kg/den PTH nebo 40 pg/kg/den PTH ve srovnání s kontrolami ošetřovanými placebem.
Na ose x jsou měsíce, na ose y procentová změna.
Vynález se týká způsobu zvyšování houževnatosti a tuhosti kosti v místech potenciálního nebo skutečného úrazu jedince, který to potřebuje, přičemž se podle vynálezu podává jedinci účinné množství parathyroidního hormonu. Způsobu lze použít ke zvýšení tuhosti a/nebo houževnatosti v místech potenciálních úrazů nebo v místě skutečného úrazu. Za úraz se zde považuje zlomenina, chirurgický zákrok, náhrada pojivá a ortopedické procesy. Zvyšování houževnatosti a/nebo tuhosti kostí zahrnuje obecně zvyšování hustoty minerálů kortikální kosti, zvyšování pevnosti kosti a zvyšování odolnosti kosti vůči zatížení. Snižování výskytu zlomenin obecně zahrnuje sni30 žování pravděpodobnosti aktuálního výskytu lomu u daného subjektu ve srovnání s neošetřenou kontrolní populací.
Pokud jde o pojmy, znamená „ultimate force“ maximální sílu, kterou vzorek kosti vydrží; tuhostí („stiffeness“) se míní sklon lineární části křivky zatížení-deformace a práce do poruchy („work to failure“) je definována jako plocha pod křivkou zatížení-deformace před vznikem lomu. Každá z těchto veličin se dá měřit a vypočítat způsoby běžnými ve studiu kostí. Tyto parametry jsou strukturálními vlastnostmi, které závisejí na vnitřních materiálových vlastnostech a geometrii a lze je zjišťovat způsoby popsanými v práci Turner CH, Burr DB („Basic biomechanical raeasureroents of bone: název „Bone“ 14, str. 595 až 608, 1993). Maximální síla, tuhost a práce do poruchy může být normalizována k získání vnitřních materiálových vlastností jako je pevnost, modul pružnosti a houževnatost, které jsou nezávislé na velikosti a tvaru. Zde se pevností (ultimate strenght) míní maximální síla, kterou může vzorek vydržet; modul pružnosti vyjadřuje vnitřní tuhost materiálu a houževnatost znamená odolnost do lomu vztaženého na jednotku objemu. Každá z těchto veličin může být zjištěna způsoby známými v oboru. Pevnost femorální kosti, jak je zde uváděna, může být měřena v kyčelním krčku nebo na osovém dříku za použití typického tříbodového nebo čtyřbodového ohybu na vnější straně.
Úrazy kostí
Způsob pudle vynálezu je výhodný pro jedince, kteří mohou utrpět nebo už utrpěli úraz jedné nebo několika kostí. Způsob může být výhodný pro savce, jako jsou lidi, koně, psi a kočky, zejména lidé. Kostní úrazy mohou být problémem u závodních koní a psů a také u domácích zvířat. Lidé mohou utrpět různé úrazy kostí, způsobené například nehodou, lékařským zákrokem, nebo chorobou. U mladých je kostním úrazem pravděpodobně zlomenina, lékařský zákrok k napravení zlomeniny, nebo náprava spojů nebo poškozených spojovacích tkání, například při atletice. Jiné typy kostních úrazů, jako jsou úrazy způsobené osteoporózou, degenerativní chorobou kostí (jako je arthritis nebo osteoarthritis), nebo sekundární stavy související s léčbou jiných systemických stavů (například glukokortikoidní osteoporóza, popáleniny nebo transplantace orgánů) se vyskytují spíše u starších lidí.
Přednostně se vynález týká lidí, zejména žen, při ohrožení osteoporózou nebo trpících osteoporózou. Rizikové faktory pro osteoporózu jsou v oboru známy a zahrnují hypogonádní stavy u mužů a žen nezávisle na věku, podmínkách, chorobách nebo drogách, které vyvolávají hypogonadismus, faktorech výživy spojených s osteoporózou (nejběžněji nízká hladina vápníku nebo vitamínu D), kouření, alkoholu, drogách spojených s ubýváním kostí (jako jsou glukokortikoidy, thyroxin, heparin, lithium a antikonvulzanty), ztráta vidění vytvářející disposici k pádům, odhadu vzdálenosti, znehybnění, chronická hospitalizace nebo upoutání na lůžku, nebo jiné systemické poruchy, které mohou být přičítány zvýšenému ohrožení osteoporózou. Indikace a doložení osteoporózy jsou v oboru známy a příkladně se uvádí radiologický výskyt alespoň jedné tlakové zlomeniny obratle, nízká hmotnost kostí (typicky alespoň 1 směrodatná odchylka od průměrné normální hodnoty za mlada) a/nebo bezúrazové zlomeniny.
Osteoporóza může vést například k obřadovým nebo neobratlovým lomům. Příklady neobratlových lomů jsou lom kyčelního krčku, zlomenina dístálního předloktí, zlomenina proximální kosti pažní, zlomenina zápěstí, zlomenina kosti vřetení, zlomenina kotníku, zlomenina kosti stehenní, zlomenina žebra, nohy, pánve nebo jejich kombinace. Způsobu podle vynálezu je možno použít k potlačení rizika takových lomů nebo k léčení takových zlomenin. Nebezpečí lomu se zmenšuje a léčení zlomeniny se napomáhá zvýšením pevnosti a/nebo tuhosti kosti, například v kyčli a/nebo v ostnu páteře. Typickou ženou, ohroženou osteoporózou, je postmenopauzální žena nebo pre25 menopauzální, hypogonádní žena. Hlavním subjektem je postmenopauzální žena a ošetřování nezávisí na souběžné náhradní hormonální terapii (HRT), terapií estrogenem nebo jeho ekvivalentem nebo antiresorpční terapii. Způsob podle vynálezu může být příznivý pro subjekty v jakémkoli stádiu osteoporózy, avšak obzvláště pro starší lidi a lidi v pokročilém věku.
Vynález představuje způsob obzvláště účinný pro prevenci nebo snížení výskytu zlomenin u subjektu ohrožených osteoporózou nebo při její progresi. Způsob podle vynálezu může snížit výskyt obřadových a/nebo neobratlových lomů, snížit závažnost obratlového lomu, sn.žit výskyt vícenásobného obratlového lomu a zlepšit kvalitu kostí. Podle jiného provedení může být vynález vhodný pro pacienty s nízkou kostní hmotou nebo před zlomeninou a u lidí s nebezpečím budoucích vícenásobných kosterních lomů, jako jsou pacienti, u kterých osteoporóza páteře může rychle postupovat.
Jiní jedinci mohou být také ohroženi úrazem kostí nebojím trpí a mohou využít výhod způsobu podle vynálezu. Například mohou velmi rozmanití jedinci, ohrožení jednou nebo několika s hora definovanými zlomeninami, předejít chirurgickému zákroku následujícímu po kostním úrazu, nebo mohou být podrobeni ortopedickému zákroku, který manipuluje s kostí v kosterním místě s abnormálně nízkou kostní hmotou nebo špatnou strukturou kostí nebo s deficitem minerálů. Například může způsob podle vynálezu napomáhat při opětném získaní funkce po chirurgickém zákroku jako je náhrada kloubů (například kolene nebo kyčle) nebo po vyztužení páteře nebo po jiných zákrocích, které znehybňují kosti nebo kostru. Způsob podle vynálezu může také napomáhat zotavení z ortopedických procedur, které manipulují s kostmi v místech abnormálně nízké kostní hmoty nebo Špatné struktury kostí, což jsou procesy zahrnující chirurgické rozdělení kosti, včetně osteotomie, náhrady kloubů, kde úbytek struktury kosti vyžaduje restruktulizaci například s vytvořením výstelky kloubní jamky kosti stehenní a prevence posunu protézy. Mezi vhodné subjekty pro využívání vynálezu patří jedinci trpící hypoparathyroidismem nebo vybočením páteře, kteří mohou podléhat úrazům souvisejícím se sníženou činností příštítných tělísek nebo s progresivním vybočením páteře.
Houževnatost a tuhost kosti
Způsob podle vynálezu snižuje nebezpečí úrazu nebo pomáhá zotavování po úrazu zvyšováním houževnatosti a/nebo tuhosti kosti. Obecně je houževnatost nebo tuhost kosti dána hmotností a pevností kortikální, trabekulámí a houbovité kosti. Způsob podle vynálezu může zajistit míru houževnatosti, tuhosti, hmotnosti a/nebo pevnosti kostí jako má normální populace nebo i vyšší. S výhodou zajišťuje vynález zvýšené úrovně oproti úrovním pocházejícím z úrazu nebo zvyšujícím nebezpečí úrazu. Zvýšení houževnatosti a/nebo tuhosti snižuje nebezpečí nebo pravděpodobnost lomu ve srovnání s neošetrenou kontrolní populací.
io
Zvýší—li se určité charakteristiky kosti, zajistí se zvýšení houževnatosti a/nebo tuhosti kosti. Mezi takové charakteristiky patří hustota minerálů v kosti (BMD), obsah minerálů (BMC), aktivační frekvence nebo rychlost tvoření kosti, trabekulámí číslo, trabekulámí tloušťka, trabekulámí a jiné spoje, periosteální a endokortikální stavba kosti, kortikální porozita, plocha průřezu kosti a hmot15 nost kosti, odolnost vůči zatížení a/nebo práce do lomu. Zvýšení jedné nebo několika těchto charakteristik je výhodným výsledkem způsobu podle vynálezu.
Jestliže se zhorší některé vlastnosti kosti, jako je prostor kostní dřeně a modul pružnosti, zajistí se zvýšení houževnatosti a tuhosti kosti. Mladší kost (houževnatější a tužší) má krystality, které jsou obecně menší než krystality starší kosti. Tedy obecně zmenšování kostních krystalitů zvyšuje houževnatost a tuhost kosti a může snižovat výskyt zlomenin. Kromě toho zrání krystalitů kosti může zajišťovat další žádoucí vlastností kosti, včetně zvýšené houževnatosti a tuhosti kosti a/nebo může snižovat výskyt zlomenin. Snížení jedné nebo několika těchto charakteristik je výhodnou předností způsobu podle vynálezu.
Způsob podle vynálezu účinně zvyšuje houževnatost a/nebo tuhost každé z četných kostí. Například může způsob podle vynálezu zvyšovat houževnatost a/nebo tuhost kostí včetně kyČelní kosti jako je ilium, kostí nohy jako je stehenní kost, kost páteře jako je obratel nebo paže, jako je distální kost předloktí nebo proximální kost pažní. Tento nárůst houževnatosti a/nebo tuhosti může být patrný v celé kosti nebo může být lokalizován na určitou část kosti. Například může být houževnatost a/nebo tuhost stehenní kosti zvýšena zvýšením houževnatosti a/nebo tuhosti krčku nebo chocholíku stehenní kosti. Houževnatost a/nebo tuhost kyčle může být zvýšena zvýšením houževnatosti a/nebo tuhosti výčnělku ilia nebo ostnu ilia. Houževnatost a/nebo tuhost obratlů může být zvýšena zvýšením houževnatosti a/nebo tuhosti pedunkulu, ploténky nebo tělesa.
S výhodou jde o účinek na obratlech v určité oblasti páteře, jako jsou obratle krční, hrudní, bederní, křížové a/nebo kostrční. S výhodou jde o účinek na jeden nebo několik středních hrudních a/nebo horních bederních obratlů.
Zvýšení houževnatosti a/nebo tuhosti lze nalézt v každém typu kostí, nebo převážně u jednoho typu kostí. Mezi typy kostí patří houbovitá (mřížkovitá, trámcovitá nebo lamelámí) kost a kompaktní (kortikální nebo hustá) kost a lomový kalus. Způsob podle vynálezu zvyšuje s výhodou houževnatost a/nebo tuhost působením na mřížkoví tou nebo kortikální kost nebo na kortikální kost samotnou. Trámcovitá kost, ke které je připojena spojovací tkáň, může být způsobem podle vynálezu také vyztužena. Je například vhodné zajistit přídavnou houževnatost v místě napojení vaziva, šlachy a/nebo svalu.
Podle dalšího význaku vynálezu může zvýšení houževnatosti a/nebo tuhosti snižovat výskyt zlomenin. Zde může zvýšení houževnatosti a/nebo tuhosti zahrnovat snížení výskytu lomů obratlů, snížení závažných zlomenin, snížení výskytu středně závažných zlomenin, snížení výskytu so neobratlových zlomenin, snížení výskytu mnohočetných zlomenin nebo jejich kombinace. Parathyroidní hormon
Jako účinnou složku může prostředek nebo roztok obsahovat plnou délku 84 aminokyselinové formy parathyroidního hormonu, obzvláště lidskou formu hPTH (1-84), získanou rekombinačně peptidovou syntézou nebo extrakcí z lidských tekutin (například americký patentový spis číslo
208 041), Sekvence aminokyselin pro hPTH (1-84) popsal Kimura a kol. (Biochem. Biophys.
Res. Comm. 114, (2 ), str. 493 ).
Prostředek nebo roztok může také obsahovat jako účinnou složku fragmenty nebo varianty fragmentů lidské PTH, nebo krysí, vepřové nebo hovězí PTH, která má aktivitu lidské PTH zjištěnou na modelu osteoporózy kiys s odnětím vaječníku (Kimmel a kol., Endokrinology, 32 (4), str. 1577, 1993).
io Je žádoucí, aby fragmenty PTH obsahovaly alespoň prvních 28 N-koncových zbytků, jako jsou PTH0-28), PTH0-31), PTH (1-34), PTH(l-37), PTH(l-38) a PTH(Ml). Jako alternativy variant PTH se uvádějí l až 5 substitucí aminokyselin, které zlepšují stálost PTH a poločas životnosti, jako je náhrada zbytků methioninu v poloze 8 a/nebo 18 leucinem nebo jinou hydrofobní aminokyselinou, která zlepšuje stálost PTH vůči oxidaci a náhrada aminokyselin v oblasti 25-27 vůči trypsinu necitlivými aminokyselinami, jako je histidin nebo jiná aminokyselina, které zlepšují stálost PTH vůči proteáze. Jako jiné formy PTH se uvádějí PTHrP, PTHrP(l-34), PTHrP(l36) a analogy PTH nebo PTHrP, které aktivují receptor PTH1. Tyto formy PTH zahrnuje zde zásadně používaný termín „parathyroidní hormon“. Hormony lze získat známými rekombinantními nebo syntetickými způsoby (americký patentový spis 4 086 196 a 5 556 940).
Výhodným hormonem je lidský PTH0-34), známý také jako teriparatid. Stabilizované roztoky lidského PTH(l-34), například rekombinantního lidského PTH0-34), (rhPTH(l-34), kterých může být použito při způsobu podle vynálezu jsou popsány v přihlášce WO 99/29337. Krystalická forma PTH0-34), které může být použito podle vynálezu, je popsána v přihlášce
WO 99/31137.
Podávání parathyroidního hormonu
Parathyroidní hormon se může obvykle podávat parenterálně s výhodou subkutánní injekcí, způsoby a jako prostředky v oboru dobře známé, Stabilizované prostředky lidského PTH (1—34), kterých lze s výhodou podle vynálezu používat, jsou popsány v přihlášce WO 99/29337. Tato přihláška vynálezu také popisuje četné jiné formulace ke skladování a podávání parathyroidního hormonu. Stabilizovaný roztok parathyroidního hormonu může obsahovat stabilizační činidlo, pufrovací činidlo a konzervační látku.
Stabilizační činidlo, začleněné do roztoku nebo prostředku, obsahuje polyol, který zahrnuje sacharidy, s výhodou monosacharid nebo diasacharid, například glukózu, trehalózu, rafinozu nebo sacharózu; alkohol cukru, jako je například mannitol, sorbitol nebo inositol, a několikamocný alkohol, jako je glycerin nebo propylenglykol, nebo jejich směs. Výhodným polyolem je man40 nitol nebo propylenglykol. Koncentrace polyolu může být hmotnostně přibližně 1 až přibližně 20 %, s výhodou přibližně 2 až přibližně 10 %, vztaženo na roztok jako celek.
Použitým pufrovacím Činidlem v roztoku nebo prostředku podle vynálezu může být jakákoli kyselina nebo kombinace solí, která je farmaceuticky přijatelná a schopná udržet vodný roztok na hodnotě pH 3 až 7, s výhodou 3 až 6. Výhodné pufrovací systémy jsou například na acetátové, vinanové a citrátové bázi. Výhodnější pufrovací systémy jsou na acetátové nebo vinanové bázi, nejvýhodnější je acetátový pufr. Koncentrace pufru může být přibližně 2 až přibližně 500 mM, s výhodou přibližně 2 mM až 100 mM.
so Stabilizovaný roztok nebo prostředek podle vynálezu může také obsahovat konzervační látku přijatelnou pro parenterální podání. Takovými konzervačními látkami jsou například krezoly, benzyl alkohol, fenol, benzalkoniumchlorid, benzethoniumchlorid, chlorbutanol, fenylethylalkohol, methylparaben, propylparaben, thimerosal a fenylrtuťový nitrát a acetát. Výhodnou konzervační látkou je m-krezol nebo benzy (alkohol; nej výhodnější je m-krezol. Množství
Ί konzervační látky může být hmotnostně přibližně 0,1 až přibližně 2 %, s výhodou přibližně 0,3 až přibližně 1,0 %, vztaženo na roztok jako celek.
Stabilizovaný teriparatidový roztok může tedy obsahovat mannitol, acetát a m-krezol s před5 pokládaným poločasem životnosti 15 měsíců při teplotě 5 °C.
Prostředek parathyroidní ho hormonu může být případně ve formě prášku obsahujícího méně než hmotnostně 2 % vody, pocházející ze sušení vymrazováním sterilního vodného roztoku hormonu, připraveného smísením vybraného parathyroidního hormonu, pufrovacího činidla a konzervačio ního činidla, jak shora popsáno. Obzvlášť, výhodné pufrovací činidlo při přípravě lyofilizovaných prášků je na vinanové bázi. Obzvlášť výhodnými konzervačními prostředky jsou glycin, sacharóza, trehalóza a rafinóza.
Kromě toho může být parathyroidní hormon formulován spolu s typickými pufry a excipienty používanými v oboru ke stabilizaci a solubilizaci proteinů pro parenterální podávání. Vhodné farmaceutické nosiče ajejich formulace jsou popsány v literatuře (Martin, „Remingtone Pharmaceutical Sciences“ 15. vydání Mack Publishing Co. Easton, 1975). Parathyroidní hormon může být dodáván také plícemi, ústy, nosem, čípky nebo orálními prostředky.
Parathyroidní hormon je formulován k podávání dávky účinné ke zvýšení houževnatosti a/nebo tuhosti jedné nebo několika pacientových kostí nebo ke snížení pravděpodobnosti a/nebo závažnosti zlomenin kostí. S výhodou zajišťuje účinná dávka zlepšení struktury, hmotnosti a/nebo pevnosti kortikální kosti. Účinná dávka s výhodou snižuje výskyt lomů obratlů, snižuje výskyt mnohočetných lomů obratlů, snižuje závažnost lomů obratlů a/nebo snižuje výskyt neobratlových zlomenin. S výhodou dostává jedinec, léčený parathyroidním hormonem, také účinné dávky vápníku a vitaminu D, které mohou podpořit účinky hormonu. Účinná dávka parathyroidního hormonu je obvykle vyšší než přibližně 5 μg/kg/den ačkoli, zejména u lidí, může být vyšší než přibližně 10 až 40 μg/kg/den, nebo ještě vyšší k dosažení zvýšené houževnatosti a/nebo tuhosti, obzvláště kortikální kosti, nebo ke snížení výskytu zlomenin. Pacient, trpící hypoparathyroidiz30 mem, může potřebovat přídavné nebo vyšší dávky parathyroidního hormonu; takový jedinec také potřebuje náhradní hormonální terapii. Dávky, nutné pro náhradní terapii při hypoparathyroidizmu, jsou v oboru dobře známy. V některých případech je možno pozorovat příslušné účinky PTH při dávkách menších než přibližně 5 pg/kg/den nebo dokonce menších než přibližně 1 μg/kg/den.
Hormon se může podávat pravidelně (například jednou nebo vícekrát každého dne nebo týdne), přerušovaně (například nepravidelně během dne nebo týdne), nebo cyklicky (například pravidelně po několik dní nebo týdnů s následnou periodou bez podávání). S výhodou se PTH podává u osteoporotických pacientů jednou denně po dobu 1 až 7 dní s periodou 3 měsíců až 3 let. S výhodou zahrnuje cyklické podávání parathyroidního hormonu pro nejméně dva přestavbové cykly a vysazení parathyroidního hormonu pro alespoň jeden přestavbový cyklus. Jiným výhodným režimem je cyklické podávání, které zahrnuje podávání parathyroidního hormonu po dobu nejméně 12 až přibližně 24 měsíců a vysazení PTH po dobu nejméně 6 měsíců. Přednosti podávání parathyroidního hormonu zůstávají typicky zachovány po periodě podávání. Příznivé účinky podávání po dobu několika měsíců mohou přetrvat rok až dva nebo více let bez dodatečného podávání.
Použití prostředků parathyroidního hormonu
Vynález se týká také soupravy (kitu) obsahující uváděné farmaceutické prostředky k použití způ50 sobem podle vynálezu. Kit může obsahovat fiolu s prostředkem podle vynálezu a se vhodnými nosiči, buď v suchém nebo v tekutém stavu. Kit dále obsahuje instrukce ve vinětě nalepené na fiole a/nebo vložené do krabičky, v níž je fíola zabalena, k použití a podávání prostředků. Instrukce mohou být také vytištěny na krabičce, do které je fíola zabalena. Instrukce obsahují informace, jako je dostatečná dávka a podávání pro pracovníka podávajícího drogu. Předpokládá se, že pracovníkem je lékař, zdravotní sestra nebo obsluha, která smí podávat drogu.
Vynález se týká také farmaceutického prostředku včetně formulace jednoho nebo několika parathyroidních hormonů, jako je lidský PTH(l-84) nebo lidský PTH(l-34), a který je vhodný pro parenterální podávání. Podle vynálezu může být formulace jednoho nebo několika parathyroid5 nich hormonů, jako je lidský PTH(l-84) nebo lidský PTH0-34), použito k výrobě prostředků nebo léčiv vhodných k parenterálnímu podávání. Vynález se týká také způsobu výroby prostředí k u včetně formulace jednoho nebo několika parathyroidních hormonů, jako je lidský PTH0-84) nebo lidský PTH0-34), ve formě vhodné k parenterálnímu podání. Například tekuté nebo pevné prostředky lze vyrábět o sobě známým způsobem rozpouštění jednoho nebo několika parathyio roidních hormonů, jako je lidský PTH(l-84) nebo lidský PTH0-34), ve vhodném rozpouštědle, jako je voda, při vhodné hodnotě pH, včetně pufrů nebo jiných excipientů, například ve formě stabilizovaných roztoků, jak shora popsáno.
Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení pomocí přiložených obrázků.
Příklady provedeni vynálezu
Příklad 1
Zvýšení pevnosti a hustoty kostí po podání rhPTH( 1-34) králíkům
Experimentální postupy
Intaktní samičky novozélandských bílých králíků (HRP lne. Denver, Pa), jednoho z nejmenších zvířat vytvářejících stavební jednotky kostí intrakortikální přestavbou kostí, starých přibližně měsíců, o hmotnosti 3,25 až 3,75 kg, byly rozděleny podle střední tělesné hmotnosti do tří sku30 pin po 6 zvířatech. Dvě experimentální skupiny dostávaly biosyntetický PTH0-34) v dávkách nebo 40 pg/ml/kg/den. Kontrolní skupina dostávala l,0ml/kg/den okyselené 0,9M solanky obsahující 2 % teplem inaktivovaného králičího séra. PTH(l-34) nebo nosič byly injektovány jednou denně subkutánní injekcí každý pátý den v týdnu po dobu 140 dní. Králíci měli po libosti laboratorní králičí píci obsahující 0,5 % vápníku a 0,41 % fosforu a vodu.
Výběr dávek se zakládal na předběžných studiích ukazujících (1), že po jediné injekci PTH( 1- 34) při 100 pg/kg se zvýšil obsah vápníku v séru a poklesl zpět na základní úroveň po 24 hodinách, zatímco jedinou dávkou 50 pg/kg se obsah vápníku v séru vrátil na základní úroveň po 24 hodinách, (2) opakované injekce 20 pg/kg F'TH(l-34) vedly k přechodnému zvýšení vápníku v séru s návratem na základní úroveň během 6 až 24 hodin a (3) PTH(l-34) při < 5 pg/kg nezměnil histomorfometrii povrchu kostí.
Před usmrcením byla podána dvojitá dávka alizarinu i.m. (Sigma, St. Louis) při 20 mg/kg 55. a 63. dne a sada dvojitých kalceinových dávek s.c. (Sigma, St. Louis) při 5 mg/kg 15. a 7. dne.
Králíci byli uspáni oxidem uhličitým ve statistickém pořadí, přibližně 3 až 6 hodin po poslední injekci k získání krve srdeční punkcí a pak byli zabiti pentobarbitálem sodným (100 mg/kg), injektovaným i.p. Vyjmula se pravá pažní kost, obě stehenní kosti, lumbální obratle (L3-L5) a pravé kosti holenní.
Krevní chemie
Vícekanálovou sérovou analýzou se měřily obsahy vápníku, fosforu, alkalické fosfatázy, kreatininu a dusíku v moči.
n
Histomorfometrie
Histomorfometrická měření se prováděla na kortikální kosti osového dříku holeně a na houbovité 5 kosti L3. Po usmrcení byly tyto kosti odebrány každému zvířeti a fixovány v 10% neutrálním pufrovaném formalinu po dobu 24 hodin. Tkáně byly dehydrovány v odstupňované sérii alkoholů (70 až 100%, 2 změny na stupeň vždy po 4 hodinách ve vakuu). Získané vzorky se umístily do xylenu a infiltrovaly methylmethakrylátem ve vakuu 138 kPa na 2 hodiny na stupeň při 24 infiltračním plánu v automatickém procesoru Shandon Hypercenter (Shandon Lípshaw, Pittsto burgh, PA). Vzorky byly uloženy do 2% DDK plastu se 0,2 % iniciátoru ( Delavare Diamond
Knives, Wilmington, DE). Diamantovou drátěnou pilou byly vyříznuty řezy z holení kosti po pm (Delavare Diamond Knives, lne., DE) a zbarveny Goldnerovým trichromem. Nezbarvené řezy, tlusté přibližně 80 pm, byly připraveny pro dynamickou histomorfometrii fluorchromových štítků. Sagittální řezy L3 byly rozřezány na mikrotomu Reichert-Jung 2050 (Magee Scientific is lne., Dexter, MI) po 5 pm a zbarveny McNelovým tetrachromem, nebo ponechány nezbarvené pro dynamickou hystomorfometrii.
Histomorfometrie se prováděla při zvětšení 150x Nikon fluorescenčním mikroskopem (Optiphot,
Nikon, Tokyo, Japonsko) a semiautomatickým digitalizačním systémem (Bioquant IV, R&M 20 Biometrics, Nashville, TN). Tvorba kostí a resorpce v periosteálním, endokortikálním a intrakorti kalním obalu se měřily v celém průřezu mid-diafysealových řezů holeně. Měření houbovité kosti se prováděla na ploše 6 mm2 uprostřed lumbálního obratle, 0,5 mm od okraje obklopujícího kortikální obal. Názvosloví je podle ASBMR Committee on histomorphometric nomemclature (Parfitt AM, Drezner MK, Florieux FH, Kaníš JA, Malluche H, Meunier PJ, Ott SM, Recker RR 25 1987 „Bone histomorphometry: standardization of nomenclature, symbols and units. Report
ASBMR Hísomorphometry Nomenclature Coromittee“ J. Bone Miner. Res, 2, str. 595 až 610).
Dynamické parametry byly měřeny na základě kalceinového štítku.
Měření kostní hmoty
Osový dřík stehenní kosti a čtyři lumbální obratle v roztoku 50 % ethanol /50 % solanka se snímaly na řezu kvantifikovanou počítačovou tomografií (QCT nebo pQCT) za použití 960A pQCT a analyzovaly se pomocí Dichto software version 5-1 (Norland/Stratec, Ft, Atkinson, Wl). Parametry plné tkáně byly měřeny včetně objemové kostní hustoty minerálů (vBMD, mg/cm3), plochy řezu (X-area, mm2) a obsahu minerálů (BMC, mg), pomocí voxel rozměrů 148x148x1200 pm. Objem lze vypočítat násobením plochy X tloušťkou plátku 1,2 mm. Pomocí periferální duální energetické absorpciometrie (pDEXA, Norland/Stratec) se snímal celý kyčelní krček vyoperovaného stehna v lázni 50 % ethanolu/50 % solanky. Po snímacích krocích 0,5x1,0 mm s prahem 0,04 se měřila zdánlivá hustota kostních minerálů (aBMD, g/cm2), projekční plocha (cm2) a obsah kostních minerálů (BMC, g).
Biomechanické zkoušky
Mechanické vlastnosti kostí se měřily na osovém dříku pravé stehenní kosti a tělísku L5. Kosti se vyřízly, zbavily spojovacích tkání, zavinuly se do gázy nasáklé isotonickou solankou a zmrazily se na -20 °C až do dne zkoušky. Před zkouškou se vzorky nechaly roztát 1 až 2 hodiny za teploty místnosti. Všechny vzorky se zkoušely až do poruchy v cirkulující vodné lázni o teplotě 37 °C pomocí zkušebního stroje (MTS Corp., Minneapolis, MN). Křivky závislosti deformace na zatížení se zaznamenávaly vynášecím systémem HP 7090A (Hewlet Packard, Camas, WA). Největší síla (maximální síla, kterou vzorec vydrží), tuhost (sklon lineární závislostí na křivce zatížení deformace) a práce do poruchy (plocha pod křivkou zatížení deformace před porušením) se měřily číslicovým systémem (Jandel Scientific, Corte Maděra, CA). Tyto parametry jsou strukturálními vlastnostmi, které závisejí na vnitrních vlastnostech materiálu a na geometrii (Turner CH, Burr DB „Basic biomechanical measurements of bone: a tutoriál“ Bone 14, str. 595 až 608,
1993). Hodnoty se normovaly k získání vnitřních materiálových vlastností, jako je pevnost (maximální napětí, které vzorek vydrží), modul pružnosti (vnitřní tuhost materiálu) a houževnatost (odolnost průřezu do lomu na jednotku objemu), které jsou nezávislé na velikosti a tvaru.
Pevnost stehenní kosti se měří tříbodovým ohybem. Kost se vloží do přípravku se zadní stranou směřující k zatěžovacímu tmu. Zatížení se aplikuje uprostřed mezi podporami vzdálenými 54 mm od sebe. Zatížení se aplikuje rychlostí 1 mm/s až do vzniku lomu. K normování údajů, získaných z křivky zatížení deformace, se vypočte pevnost v ohybu podle vzorce
Oj = FuLr/8I (1), kde oj je pevnost v ohybu, Fu je maximální síla do lomu, L je délka mezi podporami, r je poloměr ve směru zepředu-dozadu a I je moment setrvačnosti Id. Hodnota momentu setrvačnosti se vypočte za předpokladu eliptického průřezu stehenní kosti.
Průměrná kortikální tloušťka se vypočte z naměřených tloušťek ve všech čtyřech kvadrantech průřezu stehenní kosti párem digitálních měřidel na 0,01 mm s přesností 0,005 mm (Mitutoyo, Japonsko).
Modul pružnosti stehenní kosti (Ef) se vypočte z rovnice
Ef= (tuhost) *(L’/481) (2),
Houževnatost stehenní kosti (houževnatost^ se vypočte z rovnice houževnatostf = 3* (práce do poruchy)* r3/LI (3),
K mechanickým zkouškám pátého lumbálního obratle (L5) se pomocí Buehlerovy Isomet pomaluběžné pily (Buehler LTD, Evanston, IL) odkrojí rovnoběžně obě koncové ploténky tělesa obratle. Po resekci posteriomích procesů se změří mechanická pevnost L5 v tlaku. Stlačovací síla se aplikuje v rázové kontrole, s rychlostí křižáku 1 mm/s pomocí otočných desek k vyrovnání nerovnoběžnosti čel tělesa obratle. K normování získaných údajů z křivky závislosti zatížení deformace a k vyhodnocení vnitřních materiálových vlastností, které jsou nezávislé na geometrii kosti, se maximální napětí vypočte jako maximální síla dělená plochou průřezu.
Plocha průřezu (CSA) se vypočte jako
CSA = Trab/4 (4), kde a a b jsou šířky ve směru zepředu dozadu a napříč).
Modul pružnosti obratle (Ev) se vypočte jako
Ev = (tuhost) / (CSA)/h (5), kde h je kranio-kaudální výška tělesa obratle.
Houževnatost obratle (houževnatost) se vypočte jako houževnatost = (práce do poruchy) / (CSA* h) (6).
Akustická mikroskopie
Pomocí diamantové drátěné pily se vyříznou 500 pm tlusté řezy ze střední části pravé kosti pažní. Přesná tloušťka každého vzorku se změří mikrometrem (Mitutoyo, Japonsko) s rozlišením 1 pm.
Měření rychlosti zvuku se provedou pomocí řádkovacího akustického mikroskopu (UH3, Olym1 1 pus, Japonsko) způsobem, který popsali Hasekawa K, Turner CH, Reeker RR, Wu E, Burr DB („Elastic properties of osteoporotic bone measured by scanning acoustic microscopv Bone 16, str. 85 až 90, 1995). Tímto způsobem se dají měřit podrobné vnitřní mechanické vlastnosti ve zvoleném ohnisku. K vytváření akustického vlnění způsobem puls-echo se použije 50 MHz měniče (V-390, Panametrics, Waltham, MA). Čočky 50MHz vytvářejí akustický paprsek o průměru přibližně 60 pm. Vzorky se upevní ke dnu komůrky vyplněné vodou s konstantní teplotou (22 °C). Prodleva mezi akustickými vlnami, odraženými od vršku vzorků a od jejich spodku, se měří digitální osciloskopem (TDS 620, Tekronix, Beaverton, OR). Prodlevy se měří v pěti různých místech tak, že každé místo je od druhého vzdáleno více než 300 pm ve vnější kůre kosti io pažní. Rychlost zvuku se vypočte pro dvojnásobek tloušťky vzorků děleny průměrným trváním prodlevy. Měří se hmotnost (Ww) ve vlhkém stavu a ponořená hmotnost (Ws) v ethylalkoholu pomocí váhy (AJ100, Metller Instrument Corp., Heightstown, NJ). Hustota (ro) ve vlhkém stavu se vypočte podle Archimedova zákona:
t5 ro= (Ww/(Ww-Ws)} roETOH (7), kde roETOH je hustota alkoholu (0,789 g/cm3). Za předpokladu že dráha akustické vlny v kosti je homogenní, vypočte se součinitel pružností (C) reprezentující vnitřní tuhost vzorků
C = ro*v2 (8), kde roje hustota ve vlhkém stavu a v je rychlost zvuku.
Statistická analýza
Ke zjištění homogenity variance se použije Barlettovy analýzy. Je-li variance homogenní, použije se jednocestné ANOVA s Fisherovým testem PLSD pro statistické porovnání. Není—li variance homogenní, použije se Kruskal-Wallisovy neparametrické analýzy variance se statistickou analýzou pomocí Mann-Whitneyova U-testu. Statistická významnost byla připsána při p<0,05.
Výsledky jsou uvedeny jako střed ± SEM.
Výsledky
Tělesná hmotnost a biochemie
Králíci, ošetřování nosičem PTH(l-34) při 10 pg/kg/den, vykázali malé přírůstky tělesné hmotnosti po 140 dnech. Králíci, kterým byl podáván PTH(l-34) při 40 pg/kg/den, vykázali malý úbytem k tělesné hmotnosti 51 g, což představuje 1,4 ± 1,6% ztrátu tělesné hmotnosti během pokusu (tabulka I). Měření séra byla v normální fyziologické odezvě pro králíky, ačkoli byl pozo40 rován malý nárůst vápníku v séru a dusíku v moči. Alkalická fosfatáza v séru se zvýšila 2x při vyšší dávce PTH(l-34) (tabulka II).
Tabulka 1
Účinky PTH(l-34) na tělesnou hmotnost
| Kontrola | PTH(l-34> 10 pg/kg/den | PTHC1-34) 40 pg/kg/den | |
| počáteční tělesná hmotnost <kg> | 3,43 ± 0,08 | 3.42 ± 0,03 | 3,42 ! 0,08 |
| konečná tělesná hmotnost (kg) | 3,70 ± 0,05 | 3,51 ± 0,05 | 3,37 ± 0,10 |
| přírůstek hmotnosti | 0,26 ± 0+09 | 0,09 ± 0,05 | -0,05 ± 0,05* |
Hodnoty jsou vyjádřeny jako průměr ± SEM pro skupinu 6 králíků.
*p < 0,05 porovnán s kontrolou ío Tabulka II - Vliv PTH(l-34) na chemii séra
| Kontrola | PTH(l-34) 10 pg/kg/den | PTHC1-34) 40 pg/kg/den | |
| vápník (mg/dl) | 12,1 ± 0,3 | 12,6 ± 0,2 | 13,5 ± 0,3* |
| fosfát (mg/dl> | 4.7 ± 0.2 | 4,7 ± 0,2 | 5,5 ± 0,3 |
| a lkalická | |||
| fosfatáza (iu/1) | 24,7 ± 4,1 | 41,0 ± 8,1 | 49.8 ± 7,1* |
| kreatinin (mg/dl) | 1,9 ± 0,1 | 1,6 ± 0,1 | 1,8 ± 0.1 |
| dusík v moči (mg/dl) | 18,3 ± 0+3 | 19.1 ± 0,8 | 23.9 ±- 1.9 |
Hodnoty jsou vyjádřeny jako průměr! SEM pro skupinu 6 králíků.
*p<0,05 porovnán s kontrolou
Histomorfometrie
Tvorba kosti na periosteálním (Ps.MS/BS) a endokortikálním povrchu (Ec.MS/BS) osového dříku holeně se zvětšovala u skupin ošetřených ΡΤΗ(1-34). V tabulce III je vliv PTH0-34) na periosteální a endokortikální přestavbu kosti osového dříku holeně. Ps.MS/BS u skupiny s větší dávkou byla významně větší než u ostatních dvou skupin (p<0,001) a EC.MS/BS u skupiny s větší dávkou byla významně větší než u kontrolní skupiny (p<0,05). Souhlasně s nárůstem alkalické fosfatázy v séru, byly rychlosti tvorby kostí na každém povrchu (Ps.BFR/BS a Ec.ESFR/BS) významně větší u skupiny s větší dávkou než u dvou skupin (p<0,05). Rychlost ukládání minerá25 lů (M AR) se neměnila jak na periosteálním tak na endokortikálním obalu.
I 1
Intrakortikálně byl počet resorpčních míst (Rs.N/Ct.Ar) u králíků dostávajících PTH(l-34) v dávce 40 gg/kg/den významné větší než 7násobně ve srovnání s ostatními dvěma skupinami (p<0,05). V tabulce IV je vliv PTH(l-34) na intrakortikální přestavba kosti osového dříku holeně. Počet štítkovaných ostnů (L.On.N/Ct.Ar) u králíku dostávajících PTH0-34) při 40 gg/kg/den byl také podstatně zvětšen ve srovnání s ostatními dvěma skupinami (p<0,01 vůči kontrolní skupině, p<0,05 vůči 10 gg/kg/den). MAR byla významně větší u obou ošetřovaných skupin než u kontrolní skupiny (p<0,01), avšak nebyl významný rozdíl mezi skupinami ošetřovanými PTH. Rychlost tvorby kostí (BFR/BV) a aktivační frekvence (Ac.F) vzrostla (p<0,05 a p<0,01) u obou dávek.
io
Ačkoli se plocha kostí (B.Ar) zvětšila u obou dávek, významný rozdíl byl zjištěn pouze mezi skupinou s vyšší dávkou a kontrolní skupinou (p<0,01). Plocha kostní dřeně (Ma.Ar) po ošetření klesla, nelišila se však významně mezi třemi skupinami. Kortikální plocha (Ct.Ar) u skupiny s větší dávkou byla významně větší než u ostatních dvou skupin (p<0,0001 vůči kontrolní skupí15 ně, p<0,05 vůči skupině s nižší dávkou). Ct.Ar u skupiny s nižší dávkou byla rovněž významně vyšší než kontrolní (p<0,05). Podobné výsledky byly zjištěny v procentech Ct.Ar.
Kortikální porozita (Ct.Po) u králíků, dostávajících PTH(l-34) v dávce 10 gg/kg/den byla dvojnásobná než u kontrolní skupiny (p<0,05), zatímco Ct.Po u králíků dostává jích PTH0-34) v dávce 40 gg/kg/den byla 6x větší než u kontrolní skupiny (p<0,01). Porozity jsou však uvnitř endokortikálního oddílu a uvnitř této lokace není pravděpodobné, že by přispívaly k btomechanické pevnosti. Jelikož PTH také zvýšil plochu kortikální kosti, souhlasně s nárůstem momentu setrvačností průřezu.
V tabulce III, IV a V jsou hodnoty vyjadřovány jako středy ± SEM skupiny šesti králíků, *p<0,05 ve srovnání s kontrolou.
p<0,05 ve srovnání s PTH0-34) v dávce 10 gg/kg/den 'S*7
C i
a.
o
-H d
c?
d cr
Ή o
-H cr
H
TT r>
I c
Φ υ
§>
s
X o
tu íš 00 &
C!
*. d — (M <Ψ 2 Η -H rm *
X ř-( ž
F* u
X *
-p *
O os
4Í
Ό
| o | m d”' | 00 o Ó | Ό C> | wS o? | d CK? | W< o o |
| -H | -H | -H | -H | Ή | -H | Ή |
| d | 00 | σ\ | d | O t-» | eq | |
| r+T | r? | rO Ox | r* O | «Γ | d ΓΊ | o v o |
Γ* ΓΝ iq o — d σ\ X
Ό d Ο ο — Ό
-Η Ή -Η -Η # 41
W m
PU
CQ
CU θ' •Η d
Ο θ'
(μιη /μ ni Vy r) rychlost teorby endotortikilnl hosti Ec.BFR/BS 0.40 i 0.10 0,31 ± 0,10 0,72 ± 0,12*1 xr m
I 'eb
Λ
O tt *
xo
8.
O tt r*
Ch o
O*
| i | CM cT | # 2 o |
| -8 tn | tt xú *v | ·« s |
| CM | *n | |
| O* |
| * | * | * |
| 00 | Ví | Γ- |
| *Ί n | O* | cM |
| Ή | -H | tt |
| tt | 00 | |
| “s | 00 | * |
| w* | _-s | r*v |
| CM | m |
o tt *
o v
(M tt
CM *
v* tt
XO v
C ,«8 eb
| 1 o* | O | o n o | # 22 cT | # nC | * o vT | Ξτ | o | * CM | * XO |
| tt | tt | tt | •H | 41 | tt | •tt | tt | tt | tt |
| m | CM | \a | V) | r* | ΓΠ | m | CM | ||
| O | 8 θ' | tt v? | w xn **» | od* | to | cn m | CM | χΛ o |
Paranetry Zkratky Kontrola
| Ι*ΐ | Ό | a\ | o | |
| o | § | V) | CM | m |
| o* | OX | C? | o* | o |
| tt | tt | tt | tt | tt |
| tt | — | CM | Ch | |
| Ol | ||||
| O cf | O c? | ttT* | ** | o |
| m | r- | o | xn | |
| •wT* | o* | os | «> | |
| -H | tt | tt | tt | tt |
| OO^ | TM | r- | tt | tt |
| σΓ* | (Φ | xo* | xď | |
| CM | v> |
o ε
<
=í •o
I o
«Β
O ** es c
ε <
£
S procento korlikilní plochy •«τ
Ι*Ί t
c α» σ
ob *
CL
X o
rP
CN •H «λ
Ό
CN
| ** | , - | ++ M | ·* * | ||||
| * s- | So © rp | # Ό vP | rs θ' | W r* o cP | 5- | * Ό 2-x £ | |
| -H | “Η -H | -H | •H | Ή | Ή | -H | -H |
| Ό | r* | CN O | |||||
| CN | — r-~ | »n | tt | Ν’ | t | m | |
| CN | ·“ | cT | CN | V» |
rtm
C
Φ •Ό 'ob
| rP | e* cP »— | m o | m cP | CN | vo σ' | tn <=P | 1 | cT | 2S | o 00 |
| Ή | -H | -H | •H | -H | Ή | -H | H | m | 41 | |
| ΜΊ eP m | !** | 5 | £ | CN Γ-Ρ | rn. | <n | m s* | *n •\ | tt rP | *n *·< 00 m |
2· * 2 cn 2.
fO PN cP θ' -Η -Η *k 5
Ο O
| m | Ό cP | s- | <N O σ' | (N σ' | 'íř s |
| H | -H | -H | -H | m | •ft |
| CS | N· | <N | O | m | rř |
| trp | “*n | trP | -s | sp | |
| o |
m
Vp
-H r* σΡ rt
X rl
H >4
Aí ·>
<0 s
Λ σ
S x© ji xo θ'sp é a
| co X w | w E9 co | X 5 co | X P | > fc > | δ X S—/ | M e w |
| ó O | O | O | Ó | O | < “Nf | 2 |
£
X co
X cŽ
PL x
u
Λ
Φ fl $4 £
c
Í4
| 3 | 3 | 3 | |||
| Ό | |||||
| £ GB | n | w4 | |||
| 0 <0 | 3 | « | 0 | 3 | Η» |
| li *“· | Ό | r“4 | Φ | TJ | CS |4 |
| > *« | *4 | •8 | •P | <p4 | W |
| 9 0 | 0 | 0 | u | 0 | β |
| £ Φ | Φ | φ | 0 | Φ | Λ |
| p | -P | «3 | *g | ||
| *. » | 0) | 0 | ífl | ts | a |
* ~ > £ o p O Í4 o >
Í4 & U 3 Μ !
T
Ό houbovité kosti většina stavebních parametrů (OS/BS, Ob.S/BS, OV/TV a MS/BS) s ošetřováním PTH(l-34) vzrůstá. V tabulce V je vliv PTH(l-34) na přestavbu houbovité kosti třetího lumbálního obratle. U králíků dostávajících PTH(l-34) v dávce 40 gg/kg/den jsou tyto hodnoty podstatně vyšší než u ostatních dvou skupin (p<0,01 vůči kontrolní skupině a skupině s 10 pg/kg/den ve všech parametrech). Rychlost tvorby kostí (BFR/BS) také významně vzrůstá u králíků dostávajících PTH(l-34) v dávce 40 pg/kg/den ve srovnání s ostatními dvěma skupinami (p< 0,0001 vůči kontrolní skupině a skupině s 10 pg/kg/den). Ačkoli resorpce (ES/BS a Oc.S/BS) rostla u obou skupin, ošetřovaných PTH(l-34), pouze orodovaný povrch (ES/BS) byl u skupiny s vyšší dávkou významně větší než u kontrolní skupiny (p<0,001). Mezi třemi skupiio námi nebyl rozdíl v tloušťce osteoidu (O.Th). Přes patrnou zrychlenou přeměnu kosti se po ošetřování PTH(l-34) frakcionální objem kosti (BV/TV) neměnil. U žádné skupiny nebyla patrna tunelová resorpce a peritrabekulámí fibróza.
Měření hmotnosti kostí vBMD a BMC v osovém dříku stehenní kosti, hodnocené pQCT u skupiny se 40 pg/kg/den, byly významně vyšší než u ostatních dvou skupin (p<0,001 u vBMD a p<0,0001 u BMC vůči kontrolní skupině, p < 0,05 u v BMD a p < 0,01 u BMC vůči skupině s nižší dávkou) (obr. IA). vBMD a BMC u skupiny s 10 pg/kg/den byly rovněž významně vyšší než u kontrolní skupiny (p<0,05 u vBMD i BMC). Ačkoli plocha osového dříku stehenní kostí také vzrůstala v závislosti na dávce, významně vzrostla pouze u skupiny se 40 pg/kg/den (p< 0,05).
V závislosti na dávce vzrůstala aBMD a BMC v proximální stehenní kosti měřeno rtg. absorpciometrií (DXA nebo pDXA). Významné rozdíly byly jak u aBMD, tak BMC mezi kontrolní skupi25 nou a skupinou s lOgg/kg/den (p<0,05) stejně jako mezi kontrolní skupinou a skupinou se 40 gg/kg/den (p< 0,001) (obr. 1B). V ploše kostí nebyly shledány u tří skupin významné rozdíly.
Celkově ukazuje obr. 1, že BMD (bone minerál density =hustota minerálů v kosti) a BMC (bone minerál content = obsah minerálů v kosti) v ose dříku stehna (kortikální kosti) (A) a v proximální stehenní kosti (houbovitá kost + kortikální kost) (B) byly významně větší u zvířat ošetřených PTH než u kontrol při obou dávkách. Plocha kortikální kosti u osy dříku stehna při vyšší dávce je významně větší než u kontrol. V ploše proximální stehenní kosti nebyly mezí skupinami shledány významné rozdíly. Údaje jsou vyjádřeny jako průměry ± SEM. *P<0,05 ve srovnání s kontrolou +p<0,05 ve srovnání s PTH 10 gg/kg/den.
Mezi třemi skupinami nebyl významný rozdíl ve vBMD, BMC nebo v ploše kosti lumbálního obratle (L4) hodnoceno pQCT.
Biomechanické zkoušky
Strukturální vlastnosti osy dříku stehenní kostí, jako je maximální síla do lomu, tuhost a práce do lomu vzrůstaly v závislosti na dávce (obr. 2). Obr. 2 ukazuje účinek PTH na mechanickou pevnost a moment setrvačnosti průřezu (CSMI) v kortikální kosti stehenního osového dříku. Strukturní mechanické vlastnosti (prázdné sloupce) a CSMI rostou významně u skupiny s vyšší dáv45 kou, zatímco tuhost rostla významně u skupiny s nižší dávkou. Z vlastních materiálových vlastností (šrafované sloupce), rostl významně pouze modul pružností u skupiny s nižší dávkou v porovnání s kontrolní skupinou. Modul pružnosti u skupiny s vyšší dávkou významně poklesl ve srovnání se skupinou s nižší dávkou. Na obr. 2 jsou hodnoty vyjádřeny jako průměry ± SEM, * znamená P<0,05 ve srovnání s kontrolní skupinou a + znamená P<0,05 ve srovnání s dávkou so lOgg/kg/den.
V této studii a ve výsledcích uvedených na obr. 2 jsou všechny parametiy významně vyšší u králíků ošetřovaných PTH(l-34) v dávce 40 gg/kg/den než u kontrolní skupiny (p<0,01 pro maximální sílu do lomu a práci do lomu, p<0,05 pro tuhost). Tuhost u skupiny s nižší dávkou je rov55 něž významně vyšší než u kontrolní skupiny (p<0,05). Pokud jde o vnitřní materiálové vlastnosti,
CZ 301017 Bó je modul pružností významně nižší u králíků ošetřovaných 40 pg/kg/den než u králíků ošetřovaných 10 pg/kg/den p<0,01).
V tělese obratle nebyly shledány významné rozdíly mechanických vlastností lumbálních obratlů u žádné ze tří skupin.
Akustická mikroskopie
V rychlosti zvuku nebo v součiniteli pružnosti nebyly shledány významné rozdíly u žádné ze tří to skupin.
Diskuse
Kosterní odezva kortikální kosti na biosyntetický hPTH(l-34) zahrnuje jak přímou regulaci is materiálových vlastností, tak kompenzační regulaci biomechanických vlastností dlouhých kostí intaktních dospělých králičích samic. PTH(l-34) zvyšuje přeměnu kostí a kortikální porozitu a při dávce 40 pg/kg/den snižuje materiální modul pružnosti kortikální kosti. Snížený modul pružnosti však byl více než kompenzován zvýšenou apozicí kosti na periosteálním a endokortikálním povrchu, což se projevilo zlepšením strukturní pevnosti, tuhosti a práce do poruchy korti20 kální kosti králíků.
V této studii s intaktním i králičími samicemi se objem houbovité kosti lumbálního obratle po ošetření pTH(l-34) nezměnil, přes zřejmou zvýšenou přeměnu kosti. Předchozí použití jako osteopenického modelu, přítomnost intrakortíkální přestavby a krátká doba přestavby spolu s rychlým růstem králíků a brzké kosterní dospělosti (za 6 až 9 měsíců), vytvářela bázi pro selekci králíků jako modelu ve kterém se testovaly účinky přerušovaně podávaného PTH(l-34).
Králíci mohou vykazovat velkou rozmanitost hladiny vápníku v séru (10-16 mg/dl), avšak tyto hladiny nejsou přímo ovlivněny množstvím dietního vápníku, což je další předností modelu.
Ačkoli byly zaznamenány přechodné významné nárůsty přibližně 1 mg/ml u králíků ošetřovaných PTH(l-34) v dávce 40 pg/kg, byly skutečné hodnoty vždy ve známém fyziologickém rozmezí.
V této studií zvýšil biosyntetický hPTH(l-34) za 140 dní růst kostí intrakortikálně jak na perio35 steálním tak na endokortikálním povrchu. Intrakortíkální Ac.F vzrostl u skupiny s nižší dávkou
8násobně a u skupiny s vyšší dávkou 20násobně. To vedlo ke dvojnásobnému zvýšení kortikální porozity v holeni u skupiny s nižší dávkou a až ónásobnému zvýšení u skupiny s vyšší dávkou. Data z akustické mikroskopie ukazují, že pružnostní vlastnosti kostního materiálu samotného v pažní kosti nebyly ovlivněny, což naznačuje, že vnitřní kvalita kortikální kosti je normální.
Zvýšená porozita musela tedy vznikat na úkor mírného snížení modulu pružnosti, přičemž měření mechanických vlastností zahrnuje prostory kortexu.
Zvýšená kortikální porozita byla však více než kompenzována významným nárůstem MS/BS a BFR/BS jak na periosteálním tak na endokortikálním povrchu v osovém dříku holeně u skupiny s vyšší dávkou, což vedlo k významně zvýšené ploše kostí. To by zvýšilo moment setrvačnosti průřezu, který je úměrný tuhosti kosti v ohybu, jak tomu bylo u osového dříku stehenní kosti (obr. 2). Důsledkem těchto změn tvaru a materiálových vlastností bylo zlepšení mechanické pevnosti a tuhosti stehenní diafyzy ve srovnání s kontrolou, což překrývá potenciální Škodlivé mechanické účinky zvýšené kortikální porozity.
50
Závěr
Konstatuje se, že nárůst přeměny kosti a kortikální porozity po ošetření PTH( 1-34), je doprovázeno souběžným nárůstem kostí na periosteálním a endokortikálním povrchu. Výsledkem kombi55 nace tohoto jevu je zlepšení houževnatosti, pevnosti a tuhosti a práce do poruchy stehenní kosti.
i n
Příklad 2
Zvýšení pevnosti a hustoty kosti po podávání rhPTH(l-34) opicím Experimentální postup
Všeobecně
V této částí studie bylo použito volně žijících dospělých (s uzavřenými růstovými destičkami) primátů cynomolgus (Macaca fascicularis), vážících 2,77 ± 0,03 kg (střed ± směrodatná odchylka průměru [SEM]). Opice byly tři měsíce drženy v karanténě a pak se u nich začalo s dietou obsahující 0,3 % vápníku, 0,3 % fosfátu a 250 IU vitaminu D3/100 g s podáváním fluorované vody (1 ppm fluoridu) podle libosti. Obsah vápníku odpovídal 1734 mg vápníku/8373,6 J.
Po jednoměsíční dietě byla zvířata rozdělena do skupin po 21 nebo 22, simulované operována „sham“ nebo zbavena vaječníků. Jednou denně byly zahájeny subkutanní injekce nosiče (simulované operace a kontroly s odejmutými vaječníky OVX) nebo rhPTH(l-34) v dávce 1 pg/kg (PTH1) nebo 5 pg/kg (PTH5), 24 hodin po odnětí vaječníků. Zvířata byla ošetřována buď 18 měsíců (PTH1 a PTH5), nebo 12 měsíců, po nichž následovalo vysazení léčby (PTH1-W a PTH5-W).
Studované skupiny byly rozděleny jak uvedeno v tabulce VI
Tabulka VI
Studované skupiny studie primátů
| Skupina | Zkratka | Opice na začátku Cn«12B) | Opice v konečné analýze (n-121 |
| zdánlivě zbavené vaječníků, 18 měsíců nosiče | sham | 21 | 21 |
| zbavené vaječníků, 18 měsíců nosiče | OVX | 22 | 20 |
| zbavené vaječníků, 18 měsíců 1 ug rhPTH <1-34 >/kg/den | PTHl | 21 | 19 |
| zbavené vaječníků, 12 měsíců 1 jug rhPTHť1-34)/kg/den | PTHl-V | 21 | 20 |
| 6 měsíců nosiče zbavené vaječníků, 18 měsíců 5 pg rhPTH<1-34i/kg/den | PTH5 | 22 | 21 |
| zbavené vaječníků, 12 měsíců 5 pg rhPTHť1-34)/kg/den | PTH5-W | 21 | 20 |
| 6 měsíců nosiče |
Vzorky séra a moči se odebíraly 24 hodin po injekci nosiče nebo rhPTH(l-34) ve tříměsíčních intervalech. Vzorek pěti opic v každé skupině ošetřované rhPTH(l-34) byl použit pro farmakokinetiku se vzorkováním (pokaždé 0 až 220 minut) jako základny, 7,11 a 17 měsíců. V čase 0 a v šestiměsíčních intervalech se posuzovala kostra a osten kostní hmoty (L-2 až L-4) dvojitou io rentgenovou absorpciometrií (DXA); periferální kvantitativní počítačové rentgenové tomografie (pQCT) se použilo k posouzení kostní hmoty v osovém dříku a v distálních poloměrech a v proximální holeni. Biopsie kyčle byla prováděna pro histomorfometríi po 6 a 15 měsících. Všechna zvířata byla bezbolestně usmrcena po 18 měsících.
Biomechanické zkoušky se prováděly na lumbálních obratlech L-3 a L-4, na kyčelním krčku, na osovém dříku pažní kosti a na vzorcích kortikální kosti obrobené z diafyzy stehenní kosti (rozměry uvedeny v tabulce VII). Běžná statická a dynamická histomorfometrie se prováděla (rozměry uvedeny v tabulce XI) na osovém dříku pažní kosti, na lumbálním obratli L-2, na kyčelním krčku, na osovém dříku stehenní kostí, na poloměru osového dříku a na distálním poloměru.
Počáteční statistické analýzy porovnávaly všechny skupiny s kontrolami zbavenými vaječníků a zpracovaným nosičem. Údaje jsou vhodné pro dodatečné výzkumné analýzy ke zkoumání
závislosti na droze, účinků vysazení, interakcí mezi počátky a změnami v čase způsoby známými pracovníkům v oboru. Všechny studie se prováděly a hodnotily způsoby známými v oboru,
U některých experimentálních jedinců byla kortikální pažní kost zkoumána hístomorfometríí a infračervenou mikroskopií s polarizovanou Fourierovou transformací. Infračervená mikroskopie s polarizovanou Fourierovou transformací se prováděla adaptací známých metod pro takovou mikroskopii.
Studie modelování 3D konečnými prvky
Tyto studie určily modelovací data pomocí 3D konečných prvků na obratlech pokusných opic s dávkováním PTH po dobu 18 měsíců. Excisí získané obratle L-5 v roztoku 50 % ethanolu/50 % solanky z vaječníků zbavených (n=7) a PTH (n=7) skupin se sériově snímaly po 500 pm krocích kvantitativní počítačovou tomografií (QCT, Norland, Ft.Atkinson,WI) pomocí 70x70 pm pixelů. Každý z 500 pm řezů byl analyzován na objemovou hustotu minerálů v kostí (BMD, mg/cc), na obsah minerálů v kosti (BMC, mg), na plochu průřezu (plochu X), na objem houbovité kosti (BV/TV), na trabekulámí tloušťku (Tb, Th) a na pojivovou tkáň (hustotu uzlin, analýza podpory). Pixely v každém sériovém obrazci se zprůměrovaly na vytvoření voxelů 490x490x500 pm. Sériové obrazce se pak navrstvily a pro každou kost se vytvořila trojúhelníko20 vá povrchová síť pomocí algoritmu „kráčejících krychlí“ (například Lorensen a Cline „Marching cubes a high reso lution 3D surface construction a Igorithm“ Computer Graphics 21. str. 163 až 169, 1987). Nejhladší verze každé povrchové sítě byla pak použita k vytvoření tetrahedrální sítě pro 3D modelování konečnými prvky.
Modul pružnosti pro každý elementární čtyřstěn byl odvozen z původních hustot voxelů a materiálové vlastnosti ze svazku kortikální kosti odfrézované ze střední části stehenní kosti opic. Každá tetrahedrální síť se pootočila tak, ze spodní povrch každého obratle koincidoval s rovinou. Lineární analýza pružných napětí se pak provedla na každém modelu L-5, ve kterém bylo aplikováno zatížení 100 N na horní povrch středu kolmo k základové rovině, přičemž spodní povrch byl ve směru zatěžování upevněn. Vyhodnotily se výsledné obrysy osového napětí a rozdělení BMD a porovnány mezi PTH a zbavenými vaječníků. Při tomto rozlišení závisí hustota každého voxelů na rozsahu, ve kterém je každý voxel naplněn kostí oproti měkké tkáni.
Výsledky
Údaje rozdílů v textu jsou statisticky významné, p<0,05. Všechna zvířata dosáhla během studie 4% až 9% nárůstu počáteční tělesné hmotnosti nezávisle na ošetření.
Vyšetření séra a moči
Hladiny estradiolu v séru ve 3. a 18. měsíci byly pod 5 pg/ml u všech opic zbavených vaječníků. Když se porovnala homeostasa vápníku se simulovanými kontrolami, měly kontroly zbavené vaječníků nižší hladiny vápníku a fosfátu a 1,25 dihydroxyvitaminu D, avšak nelišily se endogenním PTH, cyklickým adenosinmonofosfátem (cAMP) v moči, vápníkem v moči, kreatininem v moči nebo močovým dusíku v séru, měřenými 24 hodin po poslední injekci. Zvířata, ošetřená rh(PTH(l-34), měla nižší fosfát v séru, nižší endogenní PTH a vyšší 1,25 dihydroxyvitamin D a cAMP v moči ve srovnání s jedinci zbavenými vaječníků. Zkoušky markéru sérové tvorby kostí ukázaly, že opice zbavené vaječníků měly nízký celkový obsah alkalické fosfatázy v séru (ALP) a osteokalcinu ve srovnání se simulovanými a rhPTH(l-34) uchované hladiny vedly zpět k simu50 lovaným hodnotám. Exkret močového C-telopeptidu (CrossLaps), použitý jako biochemický markér resorpce kostí, se rhPTH(l-34) nezměnil ve srovnání s kontrolami zbavenými vaječníků.
Hmotnosti kostí
Vlivem PTH (1-34) se významně zvětšila celková hmotnost kostry, vyjádřená jako celková BMC (obr. 3). Hustota minerálu (BMD) v kosti obratlového ostnu zůstávala stálá u kontrol zbavených vaječníků po 18 měsíců, zatímco simulované kontroly dosáhly přibližně 5 % nad základnou (obr. 4A - 4 C a 5 A ). Hormon rhPTH(l-34) zvýšil BMD ostnu o 7 až 14 % a obsah minerálů v celém těle (BMC, obr. 3) až o 6 % ve srovnání se základnou (obr. 4A-4C a 5A). Zvýšil se také obsah minerálů v kosti ostnu (obr. 5A). U primátů, ošetřovaných rhPTH(l-34), byla velikost těchto nárůstů významně vyšší než u kontrol zbavených vaječníků a dosáhla (PTH1) nebo překraío čovala (PTH5) hodnotu simulovaných kontrol. Hormon rh(PTH(l-34) nezměnil BMD osového dříku nebo distálního poloměru. Plocha průřezu osového dříku se zvýšila u skupiny PTH5 o 7 %. V proximální holeni nedošlo ke zvýšení plochy průřezu, avšak rh(PTH(l-34) zvětšil BMC a BMD ve srovnání s kontrolami zbavenými vaječníků. Šest měsíců po ošetřování se ošetřování vysadilo, BMD a BMC ve hrotu a v kyčelním krčku zůstaly vyšší než u kontrol zbavených vaječ15 níků beze změny v kortikálním osovém dříku kosti pažní.
Pevnost kostí
Hormon rh(PTH(l-34) zvýšil pevnost (Fy) v obratlech o 43 % (tabulky VII a Vílí, obr. 5B).
Hormon rh(PTH(l-34) zvýšil pevnost (f„) v kyčelním krčku až o 12 % (tabulky VII a IX, obr. 6A). rh(PTH(l-34) nezměnil rozměry kortikální diafyzy osového dříku pažní kosti (tabulky VII a X), nebo materiálové vlastnosti trámcových vzorků vyrobených ze střední části stehenní kosti (tabulky VII a IX, obr. 6B) ve srovnání s kontrolami zbavenými vaječníků. U zvířat, ošetřovaných rh(PTH(l-34) 12 měsíců s vysazením léčby na 6 měsíců, zůstaly hodnoty pevnosti kostí významně vyšší než u kontrol zbavených vaječníků (tabulky VII až X, obr. 5 B a 6A).
Tabulka VII
Proměnné veličiny z třetího a čtvrtého lumbálního obratle (L-3 a L-4), střední části pažní kosti, proximálního kyčelního krčku a ze vzorků stehenního trámce
| Proměnná | veličina | Jednotky | Popis |
| Lumbátní | obratle L*-3 a L-4 | ||
| A | mm2 | plocha průřezu | |
| Fu | N | síla na mezí kluzu je | |
| síla při deformaci 0,2 |
_ΟΊ _
| s | N/mm | sklon lineární části křivky síla-deformace Ctuhost) | ||
| σΥ | MPa | nez kluzu | ||
| Ε | MPa | modu1 pružnosti | ||
| Střední část | kosti | pa?n í | ||
| t. | mm | průměrná kort i ká1π í | ||
| Fu | N | max imálni síla, kterou vzorek snese | ||
| S | N/rara | sklon lineární části křivky síla-deformace <tuhost) | ||
| mJ/U | N-mra | plocha pod křivkou zat. í žen í -def ormace U=práce do púoruchy | ||
| Proximální kv | 'Čelní | krček | ||
| Fu | N | maximální síla, kterou vzorek snese | ||
| Diafyzikální | vzorkv trámce | |||
| σΥ | MPa | maximální napětí ípevnost) | ||
| E | Gpa | modul pružnosati | ||
| u | J/flp | houževnatost | ||
| F | maximální deformace |
Tabulka VIII
Biomechanické hodnoty pevnosti v ostnu ( lumbálních obratlů L-3 a L-4) primátů zbavených vaječníků po 18 měsících
| Proiěnné (jednotky)* | Shaa | Kontrola OVX PTB1 | PTHl-V | PTH5 | PTH5-V | |
| A (bb2 ) | „9Q,5±2.1b. | —86,7+2,3__88,3+2.0 | 90.9+2.3— | , 87,3±2,J | .82,8*2x1 | |
| Fvtfi)- | 1738+52 . | 1499+94« | 19i5+105° | 1899+73° | 2113±77«-°. | -1792*59° |
| S CVbb) | . 7312+319 . | . 5805+476s | -7701+474° | 7401±452° | 80l2±367° | .7074*314° |
| ovClípsa)___ | . 19,4±06- . | 17.3il.O | -21,9+1,3.°- | 21.1+0.8°- | ..24,6+1. ls°_ | -21,9+0,,9° |
| ε | 650*32,^ | 546+49 | 717±48° - | -659+42 | 759+36° | —698+41° |
Zkratky: OVX = zbavené vaječníků, PTH 1 = rh(PTH(l-34) 1 pg/kg po 18 měsících, PTH1-W = vysazení na 6 měsíců po ošetřování rh(PTH(l-34) 1 pg/k g po dobu 12 měsíců, PTH5 = rh(PTH(l-34) 5 pg/kg po 18 měsících, PTH5-W = vysazení na 6 měsíců po ošetřování rh(PTH(l-34) 5 pg/kg po dobu 12 měsíců, a popis proměnných je v tabulce IV. 1 b údaje vyjádřené jako průměr ± standardní chyba střední směrodatné odchylky (SEM) pro skupinu 0 statisticky významné ve srovnání s kontrolou OVX (p<0,05 ) s statisticky významné ve srovnání se simulovanou kontrolou (p< 0,05).
Tabulka IX
Biomechanické veličiny materiálových vlastností ekvivalentních velikostí vzorků trámce ze střední Částí stehenní kosti a biomechanické veličiny pevnosti kyčelního krčku primátů zbave25 ných vaječníků po 18 měsících
Proměnné Sham < jednotky)3
Kontrola OVX PTH1
| ouCMpa) | -ggg t Rb | =216. | ± | 5 | 222 | ± | 4 |
| E ÍGpa) | 7,2 +- 0,6 | -.16,4 | + | 0,4 | 17.1 | ± | 0,4 |
| u - - 5,9 ± 0,3 | 5,8 | ± | 0.4 | 6,1 | + | 0,4 | |
| Eu | 0.035 ± O,OO1 | -0.035 | 0,002 | 0,036 | ± | 0,002 | |
| Proximální | kyčelní krček----------- | ||||||
| Fu | 1288 ± 41 | ..1105 | + | 53s_ | 1235 | ± | 45°_ |
Pokračování tabulky IX
Proměnné FTHl-W PTH5 < jednotky)a
PTH5-V
Ou<Mna)214 ± 6 206 ± 6 .208 ± 6,
E ť^a) .16.6 ± 0.6--------- 15,4 *0,6*^-.15.,3 ·_±_£Κ·6* u <mJ/m3 )_ - _5.5 ± 0,4__,5.4 ± U.4 6,1 ± 0,4.
£u_--0,034 + 002- ,0,034 ± 0,002 0,038 ± 0,00*
Proximální kyčelní krcek
Fn,- .^ __- 1258 ž 52°___ 1362 ± 30°_ 1213 ± 42
Zkratky: OVX = zbavené vaječníku, PTHI = rh(PTH(l-34) 1 pg/kg po 18 měsících, PTHl-W = vysazení na 6 měsíců po ošetřování rh(PTH(l-34) 1 pg/kg po dobu 12 měsíců, PTH5 = 5 rh(PTH( 1-34) 5 pg/kg po 18 měsících, PTH5-W = vysazení na 6 měsíců po ošetřování rh(PTH(l-34) 5 pg/kg po dobu 12 měsíců, a popis proměnných je v tabulce IV. 1 b údaje vyjádřené jako průměr ± standardní chyba střední směrodatné odchylky (SEM) pro skupinu 0 statisticky významné ve srovnání s kontrolou OVX (p<0,05) 5 statisticky významně ve srovnání se simulovanou kontrolou (p< 0,05).
Tabulka X
2o Biomechanické veličiny kortikální kosti osového dříku pažní kosti primátů zbavených vaječníku po 18 měsících
| Proměnné ( jednotky)3· | Sham | Kontrola OVX | PTHI |
| t (mm) | —1,74 * 0.04b„ | ,.1,63 ± 0,03s_ | .,1,68 ± 0,03 „ |
| Fi, CH). | 725 > 26 | 636 ± 26 | . _654 + 23 — |
| S íN/mm)™ | .601 + 23 | -520 * 26 | 544 + 23 |
| 0 <mJ) | 1797 ± 85 | 1542 ± 92 | 164,1 ±, 13.7. |
Pokračování tabulky X
Pokračování tabulky X
| Proměnné ( jednotky)a | PTH1-V | PTH5 | PTH5-V |
| t (mm) | i,66 + U,O4 | _l,80 ± 0,04° | 1.72 ± 0,05 |
| (H). ... | 689 ± 23 | 680 ± 15s | 707 ! 24— |
| S (N/mm) | 573 + 20 | 548 + 18 | 573 ± |
| U (raJ) | _ | 1804 ± 99 | 1775 + 113™ |
Zkratky: OVX = zbavené vaječníku, PTH1 = rh(PTH(l-34) 1 gg/kg po dobu 18 měsíců, PTH1W = vysazení na 6 měsíců po ošetřování rh(PTH(l-34) 1 gg/kg po dobu 12 měsíců,
PTH5 = rh(PTH(l-34) 5 gg/kg po dobu 18 měsíců, PTH5-W = vysazení na 6 měsíců po ošetřování rh(PTH(l-34) 5 gg/k g po dobu 12 měsíců, a popis proměnných je v tabulce IV. 1 b údaje vyjádřené jako průměr ± standardní chyba střední směrodatné odchylky (SEM) pro skupinu 0 statisticky významné ve srovnání s kontrolou OVX (p<0,05) s statisticky významné ve srovnání se simulovanou kontrolou (p<0,05).
Histomorfometrie kosti
Ačkoli rychlosti přeměny byly vyšší u skupiny zbavené vaječníků než u simulované kontroly, nedošlo k vážnému úbytku objemu kostí v kyčelním výčnělku. Jelikož značený tetracyklin, podávaný šest měsíců, nebyl zjistitelný u žádného zvířete, byly v tomto časovém úseku měřeny jen statické parametry. Hodnoty statické a dynamické histomorfometrie 15 měsíců ukázaly, že ošetřování rhPTH(l-34) zvýšil o plochu houbovité kosti ve s rovnání s hodnotami jedinců zbavených vaječníků a zvýšení tvorby kostí bez zvýšení resorpčních hodnot ve srovnání s hodnotami naměřenými u kontrol zbavených vaječníků. Rychlost tvoření kostí se zvýšila progresivně s vyššími dávkami rhPTH(l-34). Ačkoli tvora houbovité kosti zůstala zvýšená ve srovnání s kontrolami zbavenými vaječníků po vysazení rhPTH(l-34) po 12 měsíčním ošetřování, tvorba a resorpce kostí se obrátila na hodnoty pro kontroly zbavené vaječníků a přeměna kostí zůstala vyšší než u simulovaných kontrol rhPTH(l-34) neovlivnil mineralizaci, aktivační frekvenci nebo periody přestavby kostí. Nebyly rozdíly v individuální kostní multicelulámí jednotce (BMU), založené na rovnováze mezi resorpcí a tvorbou. Souhrnně rhPTH(l-34) zvyšoval houbovitou kost selektivní stimulací tvorby kostí.
V kortikální části pažní kosti, kde rhPTH(l-34) nemodifikoval významně BMD nebo naměřené pevnosti kostí, stimuloval rhPTH(l-34) změny v periosteální, endosteální a intrakortikální části (tabulky XI a XII). Ačkoli nebyly rozdíly mezi celkovou plochou nebo dřeňovou plochou mezi skupinami, zvětšoval rhPTH(l-34) kortikální plochu a skupiny PTH5 a PTH5-W měly významně více kortikální kosti, značící zvýšený moment setrvačnosti a pevnost. Zvětšení plochy by se mohlo přičítat zvětšené tvorbě jak periosteálního, tak endosteálního povrchu (obr. 7).
Simulované ošetřené skupiny a skupiny PTH5. V měly snížené periostepální mineralizující povrchy ve srovnání s kontrolami zbavenými vaječníků a ostatními skupinami ošetřenými rhPTH(l34). Endokortikální mineralizující povrchy byly významně větší u kontrol zbavených vaječníků ve srovnání se simulované ošetřenými a rhPTH(l-34) nezvyšoval horní hodnoty kontroly zbave45 né vaječníků. V intrakortikální přestavbě bylo více míst u zvířat zbavených vaječníků a aktivační frekvence byla větší u skupin PTH1 a PTH5 zbavených vaječníků, než u simulované ošetřených kontrol nebo některé ze skupin s vysazeným podáváním. Bylo významně více značených osteonů na jednotku plochy u skupiny zbavené vaječníků ve srovnání se simulované ošetřenými kontrolami a rhPTH(l-34) je nezvýšil významně nad hodnoty skupiny zbavené vaječníků.
Intrakortikální porozita byla větší u skupin zbavených vaječníků, než u simulované ošetřených kontrol, nelišila se však mezi kontrolami zbavenými vaječníků a PTH1. PTH5 a PTH5-W zvýšily porozitu nad pozorovanou hodnotu u kontrol zbavených vaječníků. Hodnoty, pocházející ze studie s králíky, vyvolaly domněnku, že zvýšení porozity, doprovázené zvětšením kortikální ío kosti, může být strukturální odezvou k zachování biomechanických vlastností kosti ošetřované rhPTH(l-34). Mezi skupinami zbavenými vaječníků a ostatními skupinami nebyl rozdíl v tvořící periodě, šířce ostenoidu, šířce stěny nebo zrání osteoidu po 18 měsících.
Souhrnně nebyl rozdíl v rychlostí přeplněny mezi kontrolami zbavenými vaječníků a jakoukoli ís dávkou rhPTH(l-34). Simulované ošetřené kontroly měly nižší rychlost přeměny než kontroly zbavené vaječníků nebo zvířata ošetřovaná rhPTH(l-34). Když bylo podávání rhPTH(l-34) vysazeno na Šest měsíců, rychlosti přeměny významně poklesly, avšak naměřené BMD a mechanické pevnosti zůstaly vyšší než u kontrol zbavených vaječníků. Normální hodnoty šířky osteoidu a doby zrání intrakortikálně u všech skupin naznačují, že ošetřování nezpůsobilo žádnou závadu v normálním časování minerál izačního procesu. Normální hodnoty tloušťky stěny naznačují, že ošetřování nezměnilo normální rovnováhu mezi resorpcí a tvorbou na úrovni individuální BMU.
Tabulka XI
Histomorfometrické proměnné veličiny pro měření kortikální části pažní kosti
| Promčnnáa | Jednotky | Pop i s |
| Ac.F | cykly/rok | aktivační frekvence |
| BFR/BS-Ec | pm/den | rychlost tvorby kosti, týká se endokortikálního povrchu |
| BFR/BS.Ps | μια/den | rychlost tvorby kosti, týká se periosteálního povrchu |
| BFR/BV | %/rok | rychlost tvorby kosti, týká se objemu kosti |
| FP | dny | per i od a tv oř by |
I. na N/Ct.A #/mm3 počet osteonů značených fluorochromeni na jednotku kortikální plochy
| MAR | μα/den | rychlost lntrakortikálního ukládání minerálů |
| MAR.Ee | μη/den | rychlost endokortlkálního ukládání minerálů |
| MAR-Ps | μη/den | rychlost ukládání Minerálů na periosteálním povrchu |
| MS/BS.Ec | mineralizující endokortikáiní povrch vztažený k celému endokor- tikálnínu povrchu | |
| MS/BS.Ps | * | mineralizující endokortlkálni povrch vztažený k celému periosteálnírau povrchu |
| O.Vi | μη | šířka oseoidu |
| Rs.N/Ct.A | tt/mm2 | počet resorpčních míst na jednotki kortikální plochy |
| v.V* | μη | osteoidnf šířka |
| Ofllt | den | doba zrání ostenoldu |
| Po | * | porozita: procento plochy kosti zaujímané dutinami |
| B.Ar | mm2 | plocha kosti: celková plocha uvnitř períosteálního povrchu |
| Ct.Ar | mm2 | kortikální plocha; plocha kosti uvnitř períosteálního povrchu Cvčetně porozity) |
| Mc-Ar | mm2 | plocha medulární dutiny |
a Názvosloví doporučené v Journal of Bone and Minerál Research 1987.
Poznámky k tabulce XII
Zkratky: UVX = zbavené vaječníků, PTHI rh(PTH(l-34) 1 pg/kg po dobu 18 měsíců, PTH1-W = vysazení po ošetřování rh(PTH(l-34) 1 pg/kg po dobu 12 měsíců, PTH5 = 5 rh(PTH(l-34) 5 pg/kg po dobu 18 měsíců, PTH5-W - vysazení po ošetřování rh(PTH(l-34) 5 pg/kg po dobu 12 měsíců, a statisticky významné ve srovnání s kontrolou OVX (p<0,05) popis proměnných je v tabulce IV.2 údaje vyjádřené jako průměr ± standardní chyba střední směrodatné odchylky (SEM) pro skupinu
Tabulka XII
Kritická hísbonorfoaetrie osového dříku pažní kosti primátů zbavených válečníků po 18 Běsících (n=21)
| £ £ | !- -ti A Al | m A SO Ή ΓΟ γ- οΓ | S. -H OS A VS | rs r* * 41 H Ol | o A Ol v-» 41 m A .00 00 | o 41 S A © | « oo A o 41 tn 00 O | r* ’r O 41 rs sO o | tn *—* ‘o 4, Ol •3 | “Os A £ 41 m A 00 | SO A m 41 O m Ol | m A o 41 Ό A m | oo A O -H 2 o | A ,oc 41 04 A A o | tn A Ol -H o- A tn | OJ A -ti o A so | a Os Oj, .00 41 Ό 00 tn | « o A tn 41 m 00 © TT | sn «*. SO 41 ^r m rč |
| rt | Π | « oo | rt | < | |||||||||||||||
| A, | A .tn Os | a | so | m | rt_ | m | m | a | sr | O | Ol | ||||||||
| Γ- | o | t— | Os | θ' | m | T | Γ- | * | A | os | O | Tfc | A | Oi | A | O; | |||
| A | ví | A | A | A | A | Ol | Os | n | Os | m | A | sO | -T | ||||||
| m | H | VS | 41 | 41 | o | o | o | O | 41 | 41 | — | O | 41 | — | -v | 41 | 41 | 41 | |
| tA | ti | -T | Ή | Ol | O· | 41 | 41 | 41 | 41 | r- | O | 41 | 41 | 00 | 41 | 41 | so | tn | |
| X í—1 | o A | A «$· | OS Os | Os £4 | A | tn A | rs A | tn A | £ | A Q | O | A | «*> A | A tn | tn A | oo A | 00 r tn | A o | 00 |
| ČL | 00 | m | oo | 00 | o | o | TT | «Μ | m | o | so | sO | so | tn | n | 2 | |||
| Ol | o> | rt | tn | ||||||||||||||||
| « | A | M | A | rt | rt | β | A | tn | m | sj- | |||||||||
| I | Ά | o *-e | rr A | OO -Φ | «* | *o m * | o· A | SO | tn * | 2; | m A | m A | o- 5 | ř θ' | s | A .SO | A | Γ- P*í | |
| Ot | *ti | m | m | 41 | O | o | o | O | 41 | xr | o | o | 41 | O | 41 | 41 | 41 | ||
| Ή | Os | 41 | 41 | T | 41 | 41 | 41 | 41 | 41 | 41 | 41 | Ol | 41 | 41 | rr | o | tr | ||
| “T* | tn | A | o | Os | A | O | O | Ό | T | o- | SO | SO | 04 | so | ΡΠ | o | oo | ||
| F | A | so | A | τ' | A | A | A | A | f | 00 *1 | Os u » | ft | A | A | r 00 | 1 - so | |||
| a. | r*i | — | fC | τ’ | so | © | O | o | m | m | o | Ό | m | OJ | tn | rn | |||
| tn | Ol | ||||||||||||||||||
| Os | ^r | o | H | os | o- | so | Γ* | ||||||||||||
| ό | rn | VS o’ | rs A | o | F «fa | Ol | tn -¼ | vs A | í< | m r- * | o- SO R | 00 fi | A r- | Č | 00 o-.. | Os ví | a! m | orn' | |
| T | 41 | tn | 41 | o | o | O | o | 41 | tn | O | o | 41 | O | w | 41 | 41 | 41 | ||
| -H | -e | •ti | -H | 41 | -ti | 41 | 41 | Os | 41 | 41 | 41 | sO | 41 | -ti | 04 | *** | |||
| X | Os | fO | f*l | T | S0 | 00 | S0 | o | OS | $ | eo | m | \O | tn | 04 | so | so | ||
| f | A | 0© | A | A | rí | A | A | A | aI | £ | tn r | 04 t* | O- R | A | l-Č | s£ | |||
| r- | — | 00 | Os | sO | o | o | o | OJ | 00 | m | o | so | m | tn | m | ||||
| rs | Os | Os | Os | ||||||||||||||||
| rn | A o | 00 A | r~ A | A 2 | Ol tn | σ* •v | tn A | rs A | A 00 | A o | A | (*S A | A- «4 *n | 3 fa | o A | g | 3 ví | Γ4 OJ V | |
| ní | -H | Γ- | VI | 41 | © | © | o | O | 41 | 41 | o | O | 41 | 41 | 41 | 41 | |||
| X | -H | m | Η | 41 | T | 41 | 41 | 41 | 41 | Os | m | 41 | 41 | m | 41 | 41 | Ol | tn | r- |
| š | O | Ol | £ | A | m | O- | VI | A | A | O | «Η | sO | O- | n | 00 | A | |||
| > | O | s | r tn | A | A | o· | A | o | O | O | Ol | •rt OO | Aj | A | 04 | tn | », r- | ||
| o | sO | Ol | Os | o\ | Ό | ** | '© | o | n | --· | sfr | o | o | m | Ol | *n | m | ||
| u | Ό | ||||||||||||||||||
| rt | A | rt | « | « | « | • | so | rt | β | O | tn | Γ- | |||||||
| Γ- | o | Γ- | sO | r* | n | o | Τ- | Os | Os | Ol | Γ- | rí | sO | o | tn | A | o | ||
| 00 | 00 to | A | O | F | A | rs | η | T | tn | o | *“ | A | A | ví | xí | ||||
| m | rs | oí | -H | ol | © | o | o | so | ΓΊ | o | o | 41 m | o | 4J | 41 ? | 41 Ol | |||
| -H | 41 | 41 | 41 | rs | 41 | 41 | 41 | 41 | -H | 41 | 41 | 41 | 41 | 41 | Ol | ||||
| 5 | tn | oe | Os | m | r* | 00 | A | 00 | 04 | Os | o· | 04 | 04 | oo | Ol | o> | |||
| cw | A | Oj | A | w« h | oT | Ol _» | Φ1 * | A | A | 00 | V-*4 | tn | PO | »1 m | * Γ- | s tn | |||
| A | f*l | Ol | 00 | O | o | o | Ol | m | f*í | O | SD | Tř | “· | >n | m | ||||
| ώ | £ | o | < | ||||||||||||||||
| % Z | OT | OT CQ | > | Ϊ | a | tS | W w | Ort w | d | ||||||||||
| « ‘3 > | ífa 3 | £ co | 3 (fa ffl | 1 | CL (fa | c O J | & < 5 | $ Σ | 1 | 5 m | 5 OT s | £ ó | ž ta & | £ 0 £ | «1 £ o | £ | flQ | S 0 | í ó 2 |
Analýza histomorfometrií a mikroskopií v polarizovaném Fourier transformovaném infračerveném světle ukázala, že podávání PTH zlepšuje kvalitu kostí nahrazováním staré kosti (s velkými krystality) mladou kostí (obor krystalitu se sklonem k menším velikostem). Kromě toho po vysa5 zení PTH u opic dostávajících nízké dávky dochází k další přednosti, jelikož matrice se stává optimálně mineralizovanou a krystality dospívají. Data odvozená z histomorfometrie a Fourierovy transformační mikroskopie v infračerveném světle ukazují neočekávanou přednost kostní kvality kortikální kosti, když dochází k optimální mineralizací a minerální fáze dospívá.
Studie modelování 3D konečnými prvky
Zkoumání středního 500 pm tlustého plátku obratlů L-5 ukázalo 21% nárůst BMD pro PTH ve srovnání s jedinci zbavenými vaječníků, což bylo způsobeno 27% nárůstem BMC bez změny plochy průřezu. Analýza středu z PTH ukázala 73% nárůst BV/TV, což bylo způsobeno 30% ná15 růstem Tb.Th a 37% větším než Tb.N, ve srovnání s jedinci zbavenými vaječníků. Analýza spojitosti pro tuto oblast ukázala o 140% větší hustotu uzlin (objem uzlin/tkáň) a o 286 % spojů mezi uzlinami u PTH obratle.
Histogram analýzy rozdělení hustot kostních voxelů u PTH ukázal snížení podílu nízkých hustot (0-3 5 5 mg/cm3), nárůst středních hustot (356-380 mg/cm3), s malým účinkem na vysokou hustotu voxelů (887-1200 mg/cm3), ve srovnání s jedinci zbavenými vaječníků (obr. 8). Nejnápadnější byl posun k vyšší hustotě voxelů v kortikální části kostí následující po vysazení na šest měsíců (obr. 8).
Byl vypočten podíl prvků obřadové kosti (voxelů), který spadal do určitého oboru hodnot BMD. Šlo o následující zvolené obory BMD: nízké BMD 0-300 mg/cm3; střední BMD, 300700 mg/cm3; vysoké BMD 700-1000 mg/cm3; a kortikální BMD > 1000 mg/cm3 (tabulka XIII). Ve srovnání s kontrolami zbavenými vaječníků, ošetřování PTH významně snižovalo objem kostí s nízkým BMD a zvyšovalo objem kostí se středním BMD. Po vysazení PTH došlo k poklesu kosti se střední BMD a k nárůstu kosti s vysokým BMD, což naznačuje, že kost se středním BMD se stávala hustší.
Tabulka XIII
Procento objemu obratle L5 seřazené podle hodnot BMD (průměr ± SEM)
| BMD <30 | kortikílni | |||
| Ošetření | nízké | střední | vysoké | |
| zbavené vaječníků | 30,4±2,2 | 48,7+1,6 | 19,9+1,2 | 0,9+0,3 |
| PTH | 17,?±l,6x | 53,9+1,9* | 22,8+2,7 | 0,6+0,3 |
| PTH-V | 22,4±l,3x | 49,7+1,2 | 27,0±l,6* | 0,8+0,2 |
Tabulka XIV
BMC ve střední úrovni obratle L5 a efektivní obratlová deformace
| Ošetření | BMD | efektivní deformace obratle Cu3 |
| zbavené vaječníků | 37,2+1,6 | 701±64 |
| PTH | 47,4+1,5* | 447±36x |
| PTH-tf | 44,2+1.2* | 539+34* |
statisticky odlišné (p<0,05 podle Fisherova PLSD testu)
Hodnoty na obr. 8 ukazují, ze obratle L-5 opic cynotnolgus, ošetřovaných 18 měsíců PTH, odpovídají významnému nárůstu kostní hmoty, trabekulámí tloušťky a trabekulámí spojitosti s okrajovými účinky na vnější rozměry (plochy X) obratle. Analýza rozdělení kostních elementů v L-5 ukázala, že silně mineralizované oblasti kostí se mění naposled bez patrné sklerózy kostí. Spíše jde o porézní trabekulámí kost, která odpovídá nejvíce na PTH. Posun BMD vede k podstatné io redukci axiální deformace, což znamená mechanické zlepšení. Jak je zřetelně patrné z histogramů PTH a ovariektomie BMD, změnil PTH nízké voxely kostní hustoty na voxely střední hustoty bez významného vlivu na voxely vysoké hustoty.
Hodnoty v tabulce II ukazují, že BMC středem obratle jsou ošetřováním PTH významně zvětšeny is a příznivý účinek PTH zůstává zachován po šesti měsících vysazení. Průměrná mechanická deformace v obratlech se ošetřováním PTH snížila o 36 % a zůstávala 23 % pod OVX po vysazení PTH. Tato studie ukazuje, že vysazení ošetřování PTH na dobu šest měsíců nevedlo k resorpci nově vytvořené kosti, ale místo toho bylo příznivé rozdělení střední hustoty kosti do kosti nízké a vyšší hustoty. Toto přerozdělení vedlo k trvalému snížení deformace obratle a tedy k lepší mechanické funkci.
Diskuse
Tato studie na primátech ukázala, že PTH podávaný bez jiných léčiv, která by mohla ovlivnit kosti, zvýhodňuje jak kortikální, tak trabekulámí kosti ke zvýšení kostní hmoty celé kostry. Kromě toho vysazení podávání PTH nevedlo k významné ztrátě předností spojených s ošetřováním PTH v periodě nejméně dvou cyklů přestavby kostí,
V jiných pokusech k vyznačení účinku v kostech bylo použito náhradních markérů za předpokla30 du, že změny hodnot reflektují změny v kostní hmotě. Ačkoli existují publikovaná data pro lidi a primáty ukazující, že se jak tvorba tak resorpce markérů zvětšuje konsistentně s aktivací přestavby kostí, například během předčasné menopauzy nebo v aktivních chorobných stavech, považuje se vysoká přestavba kostí za indikativní pro úbytek kostí. V dospívání byla vysoká přestavba kostí během zrání lidské kostry méně studovaná, je však doprovázena anabolickým získáváním kostní hmoty. Takové jevy by byly podle běžného stavu techniky zcela neočekávané v drogové terapii osteoporózy. Nárůst markérů přestavby kostí je tudíž nekonsistentní se známým anabolickým účinkem PTH na zvýšení hmoty a pevnosti kostí, jak je doloženo daty v této studii.
_ 99
Data z 18—měsíční studie na opicích cynomolgus podporují následující neočekávané poznatky:
- celkový významný nárůst hmoty celé kostry,
- významný nárůst kostní hmoty a pevnosti v kyčelním krčku,
- nepozorované „kradení“ z kortikální kosti k nárůstu trabekulámí kosti. Nárůst kostní hmoty a pevnosti byl statisticky významný v místech obohacení pro jak kortikální kost (kyčelní krček) tak pro trabekulámí kost (lumbální obratel). V čistě kortikálních místech kosti io (ve střední části kostí stehenní) měl PTH sklon stabilizovat nebo mírně zvětšovat kostní hmotu a pevnost ve srovnání s kontrolami zbavenými vajeěníků, změny kostních markérů u opic zbavených vajeěníků (a u lidí) nereflektují příznivé, anabolické účinky PTH na kostru. Použití tělních tekutin od primátů v této studii připouští vývoj nových a hodnotnějších náhradních markérů,
- zachování nárůstu kostní hmoty a pevnosti po dobu nejméně dvou cyklů přestavby kostí po vysazení léčby.
Tato studie PTH na primátech se liší od publikovaných studií na opicích rhesus a cynomolgus v tom, že bylo použito velkého počtu vzorků k prokázání patřičné statistické průkaznosti k odhalení rozdílů, které mohly a nemusely být patrné v dřívějších studiích s daleko menším počtem vzorků; kontroly zahrnovaly jak primáty zbavené vajeěníků (použité v publikovaných studiích) tak simulované operované, avšak intaktní primáty. O takové kontrolní skupině nebyly zmínky v dřívějších studiích takového typu, takže některé přednosti PTH a zachování určitých opatření na úrovni simulované ošetřených kontrol ve srovnání se zvířaty zbavenými vajeěníků, byly vyhodnoceny poprvé.
Závěry
Tato 18-měsíční studie na dospělých plodných opicích cynomogulus Macaca fascicularis zbavených vajeěníků (OVX), zaručila účinnost a bezpečnost kostí po ošetřování rhPTH(l-34) po jak 12 měsících následovaných vysazením ošetřování na dobu šesti měsíců tak ošetřování po dobu 18 měsíců, rhPTH( 1-34) významně zvyšoval kostní hmotu a pevnost ostnu obratle a kyčelního krčku ve srovnání s kontrolami zbavenými vaječníku na úrovně rovnocenné nebo větší se simulované ošetřenými kontrolami. U opic zbavených vajeěníků ošetřovaných rhPTH(l-34) zůstaly mhy dynamické rovnováhy vápníku (vápník, fosfát, 1,25-di-hydroxyvitamin D v séru) zachovány jako u simulované ošetřených kontrol. Histomorfometrické hodnoty v séru a v moči, použité k posouzení přeměny kostí ukázaly, že rhPTH(l-34) zachoval rychlosti tvorby kostí rovnocenné nebo vyšší než u kontrol zbavených vaječníku, přičemž biochemické markéry resorpce kostí zůstaly rovnocenné s markéry u simulované ošetřených kontrol. U všech zvířat ošetřovaných rhPTH(l-34) po dobu 18 měsíců se farmakokinetické hodnoty neměnily s časem a k hromadění rhPTH(l-34) nedocházelo. Po 18 měsících se nevyskytla trvalá hyperkalcemie nebo ledvinová patologie. Nedošlo ke změně mineralizace nebo period přestavby. Čistý zisk obsahu kosterních minerálů pozorovaný s rhPTH(l-34) lze vysvětlit zvýšenou rychlostí tvorby kostí a tvarování povrchu kostí s nepatrným nebo se žádným účinkem na resorpci kostí. Došlo k významnému zvýšení obsahu minerálů v kostech, hustoty minerálů a biomechanických ukazatelů pevnosti, včetně houževnatosti a tuhosti v klinicky závažných místech, jako je osten páteře, kyčelní krček a proximální holeň.
rhPTH(l-34) zvyšoval rychlost přeměny v kortikální kosti osového dříku pažní kosti a v kosti vřetenní, neměnil však významně kostní hmotu nebo biomechanické ukazatele pevností ve srovnání kontrol jak zbavených vajeěníků, tak simulované ošetřených. Nárůst kortikální šířky a/nebo plochy kortikální kosti je však konsistentní s nárůstem momentu setrvačnosti průřezu kosti, což je měřítkem pevnosti a tuhosti. rhPTH(l-34) neovlivnil významně vlastní materiálové vlastnosti kortikální kosti. Tvorba endokortikální kosti byla stimulovaná, což zvětšilo kortikální šířku a intrakortikální porozitu. Zdá se, ze tyto změny porozity zodpovídají za zachování pružnosti kostí.
U opic bylo ošetřování 12 měsíců rhPTH(l-34) s vysazením léčby na šest měsíců spojeno s malým, leč se statisticky významným ziskem kostní hmoty a pevnosti v ostnu a v kyčelním krčku. Po vysazení nebyl pozorován žádný významný vliv na osový dřík kortikální kosti pažní kosti a kosti vřetenní. Kostní markéry a hystomorfometrie ukázaly sklon k návratu k nižším hodnotám přeměny naměřeným u simulované ošetřených kontrol.
Mechanické studie u hlodavců in vivo ukázaly, že geny, související s anabolickým vstupem rhPTH(l-34), se preregulují během jedné až šesti hodin a nárůst povrchu kostí lze zjistit již 24 hodin po první dávce při chybějícím účinku na resorpci. Zdá se, že rhPTH(l-34) rekrutuje osteoprogenitory v S-prostoru a stimuluje jejich diferenciací v osteoblastech, čímž rychle zvětšu15 je procento povrchů vytvářejících kost. Samotná nebo několikanásobná injekce rhPTH(l-34) během jedné hodiny stačí k vyvolání anabolického účinku na kosti. Podá—li se ekvivalentní dávka mladým krysám v podobě několikanásobné injekce během šesti nebo osmi hodin, anabolický účinek se rozšíří, což naznačuje, že k vyvolání anabolického účinku je třeba krátké, omezené exposice na rhPTH(l-34).
Souhrnně rhPTH(l-34) je anabolikem na kosti u opic a králíků zvětšujícím ukazatele kostní hmoty a biomechanické pevnosti v klinicky závažných místech, jako je osten lumbálního obratle a kyčelní krček, selektivní stimulací tvorby kosti. Zvýšení přeměny kostí, tvorby endokortikálního povrchu a porozity, zjištěné histomorfometrií v kortikálních místech, neměnilo kostní hmot25 nost nebo biomechanické ukazatele pevnosti kostí, ale zvyšovalo moment setrvačnosti průřezu kostí zvětšováním plochy a/nebo šířky kortikální kosti.
Tyto studie dokládají, že podávání receptorových aktivátorů parathyroidního hormonu, jako je rekombinantní lidský PTH(l-34), zlepšuje kvalitu kostí jak během ošetřování, tak po něm.
Podávání PTH jednou denně po dobu 18 měsíců, nebo stejných dávek po dobu 12 měsíců následovaným vysazením na dobu 6 měsíců, skutečně vykázaly výrazné z lepšení kvality kortikální pažní kosti, analyzované histomorfometrií a mikroskopií a infračervenou mikroskopií s polarizovanou Fourierovou transformací (FTIR). Tyto analýzy ukázaly, že podávání PTH zlepšuje kvalitu kostí nahražováním staré kosti (s velkými krystality) mladou kostí (s oborem krystalitů se sklo35 nem k menším krystalitům). Podávání PTH tudíž může zvyšovat kvalitu kortikální kosti, zlepšovat mineralizaci a zrychlovat mineralizaci a náhradu starých kostí novými kostmi.
Po vysazení PTH opicím, dostávajícím nízké dávky, vyplývá další výhoda, jelikož matrice se stává lépe mineralizovanou a krystality dospívají. To znamená, že při nízkých dávkách může mít
PTH přídavnou přednost během vysazovací fáze ošetřování podpořením mineralizace. Tyto hodnoty naznačují přednost ukončeného režimu ošetřování PTH následovaného periodou vysazení k dosažení zlepšené přednosti. Běžné definice kvality kostí toto hledisko zlepšené mineralizace neobsahují.
Ve starších studiích ošetřovací fáze PTH následované fází bez ošetřování byla fáze ošetřování kratší než jeden měsíc. Prodloužená, avšak konečná fáze ošetřování 18 až 24 měsíců následovaná periodou nejméně dvou cyklů přestavby kostí nebyla dosud zkoumána. Pokračující příznivý účinek u opic po vysazení ošetřování je ve výrazném rozporu s výsledky dosahovanými u hlodavců při dávkování PTH. Studie na krysách rovněž ukázaly, že po vysazení ošetřování se kosti rychle ztrácejí (Gunnes-Hey M. a Hock J.M., Bone 10, str. 447 až 452, 1989; Shen V,, J. Clin. Invest 91, str. 2479 až 2487, 1993; Shen V. a kol., Calcif. Tissue Int 50, str. 214 až 220,1992; a Mosekilde I. a kol., Bone 20, str. 429 až 437,1997).
Takový způsob usnadnění mineralizace kostí nebyl dosud pozorován a je neočekávaný, což otevírá nový způsob, kterým PTH zpevňuje a zvětšuje houževnatost kostí a může předcházet
7Í zlomeninám. Tento nový způsob zahrnuje usnadnění a řízení mineraiizace k zajištění houževnatějších a tužších kostí odolávajících lépe zlomeninám. Takové výhodné účinky vyžadují více než tvorbu nové matrice. Tyto poznatky znamenají, že PTH je příznivý pro pacienty se znehybnělými kostmi nebo kostrami nebo v kostrách s deficitem minerálů, za předpokladu, že je také přiměřené doplňování vápníku a vitaminu D.
Příklad 3 io Zvýšení pevnosti a hustoty kostí a snížení zlomenin podáváním rhPTH( 1-34) lidem
Počet jedinců:
rhPTH(l“34): 1093 kontrolovaných, 848 s ukončením. Placebo: 544 zúčastněných 447 s ukončením.
Diagnóza a zařazení ženy ve věku 30 až 85 let, kritéria: postmenopauzální minimálně 5 let, s minimem jedné střední nebo dvou mírných neúrazových zlomenin obratlů
Dávka a podávání: Testovaný produkt (slepý) rhPTH(l-34): 20 pg/den, subkutánně rhPTH(1-34): 40 pg/den, subkutánně Referenční terapie (slepá) materiál placebo studie k injektování
Trvání ošetřování: 25 rhPTH(l-34): 17 až 23 měsíců (s vyloučením šestiměsíční zabíhací fáze) Pacebo; 17 až 23 měsíců (s vyloučením šestiměsíční zabíhací fáze)
Kriteria hodnocení: osten páteře rtg; biologické markéry v séru (vápník, alkalická fosfatáza specifická pro kost, prokolagen I karboxy-terminálový propeptid); markéry v moči (vápník, N-telopeptid, volný deoxypyridinolin); 1,25-dihydroxyvitamin D; hustota kostních minerálů; osten, kyčel, zápěstí a celé tělo; výška; farmakokinetika populace; biopsie kostí (vybraná studovaná místa)
Charakteristika pacientů
KavRazané věk roky po menopauze odejmutí vaječníků děloha + O nebo 1 vajěóník i1 + 2 vaječnlky neznámo dřívějfií užívání léku prot1 osteoporoze základní spin BílD
Placebo (N-544)
98,9%
69rQ±7,0
20,9+8,5
23,8%
14,9%
0,82+0,17
PTH-20 (N=541)
98,9%
69,5+7,1
21,5+8,7
23,1%
15,5%
0,82+0,17
| PTH-40 | Hodnota |
| (N—552) | P |
| 98/% | 0,672 |
| 69,9+6,8 | 0,099 |
| 21/+8,2 | 0,273 |
| 21,6% | 0/82 |
| 58 | |
| 51 | |
| 10 | |
| 13,0% | 0,479 |
| 0,82+0,17 | >0,990 |
základní linie fx nespeclf1kováno
54(10,4%) 144(27.8%) 128 (24,7%) 75 (14,5%) 59(11,4%) 28 (5,4%) 13 (2,5%)
6(1,2%)
9(1,7%) (0,2%) (0,2%) 26
45(8,8%) 159 (31,1%) 128(25,0%) 67(13,1%) 49(9,6%) 31 (6,1%) 20(3,9%)
7(1,4%)
5(1,0%) (ty.2%) 29
54(10,1%) 169(31^6%) 125 (23,4%) 81 (15,1%) 45 (8/%) 21 (3,9%) 25 (4 7%) 10(1,9%) (0,6%) (0,4%) >0,990
Výsledky
Hodnoty z tohoto klinického pokusu s celkem 1637 ženami, ošetřovanými rekombinantním lid5 ským parathyroidním hormonem (1-34), rhPTH(l-34), 0,20 nebo 40 gg/kg/den a doplněné vitaminem D a vápníkem po dobu 18 až 24 měsíců ukázala výsledky uvedené v tabulkách XV až XIX.
Tabulka XV dokládá snížení počtu a závažnosti zlomenin obratlů po ošetřování PTH. Při porovío nání všech pacientek ošetřovaných PTH bylo celkové snížení počtu pacientek se zlomeninami obratlů 67% (p<0,001) s65% snížením (p<0,001) při 20 gg/den PTH v porovnání s placebo a 69% snížením při 40 gg/den PTH ve srovnání s placebo (tabulka XV). Při porovnání všech pacientek ošetřovaných PTH s placebo, je snížení počtu pacientek s vícenásobnou zlomeninou obratlů 81% (p<0,001) se 77% snížením (p<0,001) při 20 gg/den PTH ve srovnání s placebo a 86% snížením při 40 gg/den PTH ve srovnání s placebo. Při porovnání pacientek ošetřovaných PTH s placebo bylo celkové snížení počtu pacientek se středními nebo závažnými zlomeninami obratlů 84% (p<0,001), s 90% snížením (p<0,001) při 20 gg/den PTH ve srovnání s placebo a 78% snížení při 40 gg/den PTH ve srovnání s placebo (tabulka XV).
Tabulka XV
Vliv ošetřování PHT na počet a závažnost zlomenin obratlů
| Placebo <n**=448) | 20 jug/den PTH <n“444) | 40 pg/den PTH < n=434) | |
| Počet, a procento | 64 | 22 | 19 |
| pacientek s novými | <1.4,3 | <5,0 | <4,4 |
| zlomeninami obratlů | |||
| Počet a procento | 22 | 5 | 3 |
| pacientek se dvěna | <4,9 %)> | <í,í 2í> | <0,7 3Ω |
| nebo více novými | |||
| zlomeninami obratlů | |||
| Počet a procento | 42 | 4 | 9 |
| pacientek s novými | <9,4 | <0,9 %) | <2,1 30 |
| středním až závažnými | |||
| z1omen i nam i obratlů | XX |
* n = počet pacientek se základními a koncovými rtg. paprsky ** Mírné zlomeniny vedou ve více než 25 % ke snížení výšky obratlů (nebo ekvivalentní míry). Závažné zlomeniny způsobují ve více než 40 % ztrátu výšky obratlů (nebo ekvivalentním míry). Lomy jsou podle definice, kterou podal Genant a kol. (Vertebral fracture assessment io using a semiquantitative technique [Posuzování lomů obratlů pomocí semikvantitativní techniky], J. Bone & Min Res 8, str. 1 137 až 1148, 1993.
Tabulka XVI dokládá účinek ošetřování PTH na řadě zlomenin v různých neobratlových kostech v těle. Počet zlomenin zřetelně poklesl v kyčli, ve vřetenní kosti, v rameni, v pažní kosti, v žeb15 rech, v noze, v pánvi a v jiných místech (tabulka XVI). Pokles je statisticky významný, je-li pojímán jako snížení celkového počtu zlomenin pacientek ošetřovaných PTH ve srovnán i s pacientkami ošetřovanými placebo. Pokles je ještě významnější, je-li uvažován jako snížení celkového počtu zlomenin kyčle, vřetenní kosti, pažní kosti, žeber, nohy a pánve pacientek ošetřovaných PTH ve srovnání s pacientkami ošetřovanými placebo (tabulka XVI)
Tabulka XVI
Účinek ošetřování PTH na počet neobratlových zlomenin
| Hodnota.p | |||||||
| Placebo (N=544) | PTH-2Ó (N—541) | PTH-40 (N=552) | Overall | PTH-pbo* | 20-pbo | 40-pbo | |
| kyčel | 4 | 2 | 3 | 0,718 | 0,474 | 0,417 | 0/90 |
| i/řetennl kost | 13 | 7 | 10 | 0404 | 0236 | 0,180 | 0,504 |
| loket | 4 | 2 | 2 | 0/01 | 0,313 | 0,417 | 0,403 |
| pažní kost | 5 | 4 | 3 | 0,767 | 0,534 | 0,744 | 0,465 |
| Žebra | 10 | 5 | 5 | 0,277 | 0,109 | 0,184 | |
| noha | 4 | 1 | 4 | 0/74 | 0,474 | 0,181 | 0,983 |
| pánev | 3 | 1 | 0 | 0,171 | 0,076 | 0,319 | 0/81 |
| ostatní | 16 | 14 | 9 | 0/38 | 0,296 | 0,723 | 0,146 |
| celke· | 53 | 34 | 32 | 0/)24 | 0,007 | 0,036 | 0,015 |
| celkem v/o jiné | 41 | 21 | 24 | 0,013 | 0,003 | 0,010 | 0/25 |
* placebo (pbo)
Účinek PTH na obsah minerálů v kostech (BMC), hustoty minerálů (BMD) a plochy kostí se zjišťoval duální absorpciometrií energie (DEXA) a výsledky jsou uvedeny v tabulkách XVII až XIX. Podávání PTH způsobovalo zjevný nárůst BMC v lumbálních obratlech stehenní kosti ío a pánve, zápěstí a v celém těle pacientek (tabulka XVII). Ošetřování PTH způsobovalo významný nárůst BMD v lumbálním obratli, ve stehenní kosti a v pánvi (tabulka XVIII). Nárůsty v Iumbálním obratli, ve stehenní kosti a v pánvi byly statisticky významné s (p<0,001) (tabulka XVIII).
Plocha kostí po ošetřování PTH zjevně vzrostla v lumbálním obratli, ve stehenní kosti a v pánvi pacientek (tabulka XIX). Nárůsty v lumbálním obratli a v kyčelním krčku byly statisticky významné (tabulka XIX).
Účinek PTH na celé tělo, na kvantitu a kvalitu kostí, BMC je obzvlášť významný. Tento účinek na celé tělo naznačuje, že množství kostí v těle pacientek se zvyšuje. PTH vede nejenom pouze k přemisťování kostní hmoty z jedné části pacientova těla do druhé. Ošetřování zvyšuje PTH množství a kvalitu kostí v pacientově těle.
Obr. 9 a 10 ilustrují nárůst BMD lumbálního obratle a krčku mezi stehenní kosti a pánvi v závislosti na čase u pacientek ošetřovaných PTH a u pacientek ošetřovaných placebo. BMD lumbálního obratle pacientek vzrůstal trvale po dobu nejméně 18 měsíců s více méně významným nárůstem během následujících měsících. BMD stehenní kosti/kyčle pacientek zřetelně vzrůstal po dobu nejméně 18 měsíců a může růst po další trvání ošetřování PTH.
iň
Tabulka XVII
Vliv PTH na obsah minerálů v kosti vyjádřený jako procentová změna (SD) konečného stavu od začátečního stavu
| Placebo | PTH-20 | PTH-40 | Hodnota p | |
| osten lumbárniho obratle | 160(6,92) | 11,85 (8,83) | 16,62(11,1) | <0,001 |
| stehenn i kost/kýče1 | ||||
| celke· | -0/38(5.18) -0,51 (7>O6) | 3,50 (6.26) 2,99(/26) | 4;7S (6,70) | <0,001 <0,001 |
| krček | 5,80(8,71) | |||
| Lrochanter | 0,98 (14,97) | 5,68(15,58) | 6,53(15,33) | <0,001 |
| i ntertrochanter | -0,23(6,28) | 3,59(7,32) | 4,99(7,79) | <0,001 |
| Wardúv trojúhelník | 0,01 (14,75) | 5,36(14,78) | 8,86(17,02) | <0,001 |
| zápěst í | ||||
| ultradlstální | -167(7,44) | -0,25(6,53) | -1,88(7/)7) | 0,184 |
| 1/3 vřetennl kosti | -1,19(6,12) | -1,37(4,51) | -3,04(6,09) | 0/025 |
| celé tSlo | -0,74(4,76) | 1><4,48) | 2,28 (5r44) | <0,001 |
Tabulka XVIII
Vliv PTH na hustotu minerálů v kosti vyjádřený jako procentová změna (SD) konečného stavu i o od začátečního stavu
| Placebo | PTH-20 | PTH-40 Hodnota p | ||
| osten luabárního obratle | 1,13(5,47) | 9,70(7,41) | I3Z7<9,69) | <0,001 |
| steheflní kost/kyčel | ||||
| celke· | -1,01 (4,25) | 2,58(4,88) | 3,60(5/42) | <0,001 |
| krček | -0^69(5,39) | 2,79(5,72) | 5,06 (6,73) | <0,001 <0,001 |
| Lrochanter | -0/21 (6,30) | 3.50(6,81) | 4/40(7,45) | |
| i nterLrochanter | -1/29(4,53) | 2,62(5,52) | 3,98(5,96) | <0,001 |
| Wardúv trojúhelník | -0,80(11,73) | 4,19(11,93) | 7,85(13,24) | <0,001 |
| zápěstí ultradlstální | -1 89(7,98) | -0,05(7,14) | -1,76(7,20) | 0,108 |
| 1/3 vřetenní kosti | -1,22(3,37) | -1,94(4,07) | -3,17(4^2) | 0/001 |
Tabulka XIX
Vliv PTH na plochu kosti vyjádřený jako procentová změna (SD) konečného stavu od začátečního stavu
| Placebo | PTH-20 | PTH-40 | Hodnota p | |
| osten luntbárniho obratle | 0,46 (2,97) | 2,52(3,52) | 3,34 (3,72) | <0,001 |
| stehenní kost/kyčel | ||||
| celke· | 0,54(3/12) | 0^4 (3,16) | /05 (298) | 0,144 |
| krček | 0.04(42)0) | 0/7(4,91) | 0,81 (5,56) | 0,035 |
| Lrochanter | 0,95 (12,75) | 1,99(12,16) | 1,92(1130) | 0,197 |
| i ntertrochanter | 1,01 (5,17) | 1,01 (4,99) | 1/)1 (4/9) | 0,964 |
| Wardúv trojúhelník | 0,44 (7j60) | 1,13 (7.?4) | 0,99(8,06) | 0,309 |
| zápěstí | ||||
| ultradlstální | 0,25 (6,40) | -0,25 <6,00) | -0,39(4,80) | 0,653 |
| 1/3 vřetennt kosti | -0,02(5,73) | 0,52(340) | 0,01 (4,42) | 0^86 |
Uvedené hodnoty dokládají, že pacientky ošetřované PTH měly snížený poěet zlomenin. PTH snižoval PTH o více než 66 % poěet pacientek s dřívějšími lomy obratlů, které utrpěly nové zlomeniny obratlů. PTH snížil také o více než 78 % poěet pacientek s dřívějšími lomy obratlů, které utrpěly nové zlomeniny obratlů. Kromě toho snižoval PTH závažnost lomů obratlů s významným snížením o 78 % počtu pacientek se středními nebo závažnými zlomeninami. Pacientky dostávající PTH měly prospěch z významného snížení všech neobratlových zlomenin (včetně zlomenin kyčle, vřetenní kosti, zápěstí, pánve, nohy, pažní kosti, žeber nebo lokte) s významností p<0,007. Kvalita kostí rovněž vzrůstala. Pacientky s dřívějšími zlomeninami měly prospěch z významného zvýšení minerálního obsahu v kyčli, v ostnu a v celém těle. Tento nárůst io znamenal, že snížení zlomenin v těchto místech se může vyskytnout nejdříve po 12 měsíční terapii.
Diskuse
Tyto údaje o zlomeninách jsou prvními doklady o snižování zlomenin působením PTH u lidí. Tyto poznatky dokládají zlepšování kvality kostí a pevnosti kostí, podobně jako preklinické hodnoty shora uvedené. Tyto výsledky také ukazují přednosti kvality kostí a pevnosti v neobratlových místech. Poznatky o snižování počtu zlomenin ustálené během 18 až 23 měsíců ošetřování nebyly dosud pozorovány v klinických nebo preklinických studiích.
Otázka zda PTH samotný zvyšuje houževnatost a pevnost kostí ke zlepšení odolnosti proti lomu nebyla dosud u lidí testována. Publikovaná literatura konsistentně poukazovala na to, že PTH musí být podáván v kombinaci s anti-resorptivem nebo sestrogenem. Dřívější publikované klinické pokusy zahrnovaly příliš malou populaci pacientů k určení významného snížení zlome25 nin. V jedné studií nemohly být přednosti PTH samotného posouzeny, jelikož nebyly kontroly placebo. Ve druhé studii, používající obecně přijímanou definici zlomeniny, nebilo snižování zlomenin pozorováno.
Poznatek o snižování zlomenin v kombinovaných neobratlových místech je obzvlášť, neočeká30 váný ve světle obecného názoru, že PTH má negativní účinky v těchto místech. Obecné dogma má zato, že PTH bude zvětšovat kortikální porozitu a proto bude kosti zeslabovat obzvláště brzy po terapii. Dogma dále tvrdí, že místa kortikální kosti jsou ve velkém nebezpečí zlomení a PTH neposkytne žádnou výhodu ve snižování zlomenin v neobratlových místech. Dogma také má zato, že je nepravděpodobné, že PTH samotný je účinný a bude vyžadovat souběžnou anti35 resorptivní terapii k blokování negativních vlivů na kortikální kosti. Předkládaná data dokládají dříve nepozorované přednosti PTH poskytované pacientům dostávajícím doplňky vitaminu D a vápníku. Neočekávaně PTH zpevňuje kosti ke snížení počtu nových zlomenin u pacientů s rizikem mnohočetných zlomenin ostnu, při riziku přídavných neobratlových zlomenin, při riziku mírných až závažných dodatečných lomů ostnu a podobných.
Tato klinická studie na menopauzálních ženách ukázala obzvláštní přednosti ošetřování pacientek s nízkou dávkou (20 pg/den), jelikož dávka PTH (která při vysokých dávkách by mohla u některých pacientů vyvolávat vedlejší účinky) byla snížena, avšak prevence zlomenin a snížení lomů zůstalo zachováno a je podobná jako při vysoké dávce (40 pg/den). Hodnoty FT-IR pro opice poskytují možné, avšak neomezující mechanické vysvětlení. Studie na opicích ukazuje, že nízké dávky PTH zvyšovaly tvoření krystalů a urychlovaly mineralizaci kortikální kostí. Kromě toho opice s nízkou dávkou vykázaly přídavnou přednost po vysazení, neboť PTH zlepšoval minerální obsah kostí. Předkládaná data dokládají nový poznatek, že PTH, podávaný v nízkých dávkách pacientům dostávajícím doplňky vitaminu D a vápníku, je účinný v prevenci obřadových i neobratlových zlomenin. V rozporu s obecným názorem zpevňuje PTH kosti v neobratlových místech a brání tak novým zlomeninám nebo snižuje závažnost zlomenin, zřetelně zlepšením mineralizace a obsahem minerálů v kostech.
Vynález je popsán s odkazem na různá specifická provedení a techniky. Je však zřejmé, že jsou možné četné varianty a modifikace při zachování ducha a rozsahu vynálezu. Všechny publikace
-dl .
a přihlášky vynálezů v této specifikaci jsou indikativní pro pracovníky v oboru, pro které je vynález určen.
Průmyslová využitelnost
Účinná látka pro výrobu farmaceutického prostředku PTH pro jedince ohrožené osteoporózou ke zpevnění kostí a snížení nebezpečí zlomenin.
Claims (3)
- PATENTOVÉ NÁROKY1* Použití parathyroidního hormonu sestávajícího z posloupnosti aminokyselin 1-34 lidského parathyroidního hormonu pro výrobu léčiva pro současné snižování rizika obratlové i neobratlové zlomeniny kosti u postmenopausální ženy s rizikem vzniku osteoporózy a nebo trpící osteoporózou pro podávání podkožní injekcí uvedené ženě bez současného podávání antiresorpčního činid20 la jiného než vitamin D nebo vápník, v denní dávce 20 gg po alespoň 12 měsíců až 3 roky.
- 2. Použití podle nároku 1, ve kterém se denní dávka podává po alespoň 24 měsíců.
- 3. Použití podle kteréhokoli z předcházejících nároků, ve kterém uvedená žena trpí osteoporó25 zou.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US9715198P | 1998-08-19 | 1998-08-19 | |
| US9974698P | 1998-09-10 | 1998-09-10 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20004134A3 CZ20004134A3 (cs) | 2001-08-15 |
| CZ301017B6 true CZ301017B6 (cs) | 2009-10-14 |
Family
ID=26792729
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20004134A CZ301017B6 (cs) | 1998-08-19 | 1999-08-19 | Lécivo pro snížení rizika vertebrální nebo nevertebrální zlomeniny kosti u cloveka a rizika osteoporózy |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6977077B1 (cs) |
| EP (3) | EP2907522B1 (cs) |
| JP (5) | JP2002523375A (cs) |
| KR (1) | KR100454207B1 (cs) |
| CN (1) | CN1205997C (cs) |
| AR (1) | AR033639A1 (cs) |
| AT (1) | ATE231000T1 (cs) |
| AU (1) | AU746277B2 (cs) |
| BR (1) | BR9909445A (cs) |
| CA (1) | CA2325371C (cs) |
| CO (1) | CO5130020A1 (cs) |
| CY (2) | CY1113343T1 (cs) |
| CZ (1) | CZ301017B6 (cs) |
| DE (2) | DE69904918T2 (cs) |
| DK (4) | DK1059933T3 (cs) |
| DZ (1) | DZ2873A1 (cs) |
| EA (1) | EA003362B1 (cs) |
| ES (4) | ES2621653T3 (cs) |
| HK (3) | HK1030545A1 (cs) |
| HR (1) | HRP20000755A2 (cs) |
| HU (2) | HU1200430D0 (cs) |
| ID (1) | ID29039A (cs) |
| IL (2) | IL138829A0 (cs) |
| MY (1) | MY129227A (cs) |
| NO (2) | NO323984B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ507056A (cs) |
| PE (1) | PE20001089A1 (cs) |
| PL (1) | PL201688B1 (cs) |
| PT (4) | PT2266598T (cs) |
| TR (1) | TR200003455T2 (cs) |
| TW (1) | TW576747B (cs) |
| UA (1) | UA72205C2 (cs) |
| WO (1) | WO2000010596A1 (cs) |
Families Citing this family (40)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6770623B1 (en) * | 1997-12-09 | 2004-08-03 | Eli Lilly And Company | Stabilized teriparatide solutions |
| AR033639A1 (es) * | 1998-08-19 | 2004-01-07 | Lilly Co Eli | Uso de hormonas paratiroideas para preparar medicamentos para reducir el riesgo de fracturas oseas vertebrales o no vertebrales en seres humanos con riesgo de padecer o que padecen osteoporosis |
| US20040033950A1 (en) | 2000-09-26 | 2004-02-19 | Hock Janet M. | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures |
| WO2001022093A1 (en) * | 1999-09-20 | 2001-03-29 | Eli Lilly And Company | Method for monitoring treatment with a parathyroid hormone |
| US7247609B2 (en) | 2001-12-18 | 2007-07-24 | Universitat Zurich | Growth factor modified protein matrices for tissue engineering |
| CA2472472A1 (en) * | 2002-01-10 | 2003-07-24 | Osteotrophin Llc | Treatment of bone disorders with skeletal anabolic drugs |
| US8088734B2 (en) | 2003-01-21 | 2012-01-03 | Unigene Laboratories Inc. | Oral delivery of peptides |
| EP1667689A1 (en) * | 2003-09-19 | 2006-06-14 | Pfizer Products Inc. | Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin d derivatives and parathyroid hormone |
| US20060052305A1 (en) * | 2004-05-10 | 2006-03-09 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Method of treating osteoporosis using intranasal parathyroid hormone |
| US20060127320A1 (en) * | 2004-05-10 | 2006-06-15 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Method of delivering parathyroid hormone to a human |
| RU2006143544A (ru) * | 2004-05-10 | 2008-06-20 | Нэстек Фармасьютикал Кампани Инк. (Us) | Композиции и способ для облегченной чресслизистой доставки паратиреоидного гормона |
| US20060189533A1 (en) * | 2004-05-10 | 2006-08-24 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Stable pharmaceutical dosage forms of teriparatide |
| CA2566032A1 (en) | 2004-05-13 | 2005-12-01 | Alza Corporation | Apparatus and method for transdermal delivery of parathyroid hormone agents |
| US7648965B2 (en) | 2004-05-14 | 2010-01-19 | Unigene Laboratories Inc. | Method for fostering bone formation and preservation |
| US20060069021A1 (en) * | 2004-08-13 | 2006-03-30 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Compositions and methods for intranasal administration of inactive analogs of PTH or inactivated preparations of PTH or PTH analogs |
| WO2006073711A2 (en) * | 2005-01-06 | 2006-07-13 | Kuros Biosurgery Ag | Use of a matrix comprising a contrast agent in soft tissues |
| US8575101B2 (en) | 2005-01-06 | 2013-11-05 | Kuros Biosurgery Ag | Supplemented matrices for the repair of bone fractures |
| EP1879608A4 (en) * | 2005-05-11 | 2009-11-11 | Unigene Lab Inc | METHOD FOR STIMULATING BONE FORMATION AND PRESERVATION |
| US20070173447A1 (en) * | 2005-10-25 | 2007-07-26 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Method for treating osteoporosis by intranasal delivery of teriparatide with an anti-resorptive agent |
| WO2007059470A2 (en) * | 2005-11-10 | 2007-05-24 | Board Of Control Of Michigan Technological University | Black bear parathyroid hormone and methods of using black bear parathyroid hormone |
| US20080051332A1 (en) * | 2005-11-18 | 2008-02-28 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Method of modulating hematopoietic stem cells and treating hematologic diseases using intranasal parathyroid hormone |
| US20080119408A1 (en) * | 2006-07-07 | 2008-05-22 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Pth formulations for intranasal delivery |
| EP1961765A1 (en) * | 2006-12-08 | 2008-08-27 | Zealand Pharma A/S | Truncated PTH peptides with a cyclic conformation |
| ATE543520T1 (de) | 2007-04-13 | 2012-02-15 | Kuros Biosurgery Ag | Polymergewebeversiegelung |
| US20110137243A1 (en) * | 2007-09-06 | 2011-06-09 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Coating On A Balloon Device |
| US9457056B2 (en) * | 2007-12-04 | 2016-10-04 | Ben-Gurion University Of The Negev Research And Development Authority | Peptides comprising alternating hydrophobic and anionic amino acids for treatment of osteoporosis |
| CA2710798A1 (en) | 2007-12-28 | 2009-07-09 | Kuros Biosurgery Ag | Pdgf fusion proteins incorporated into fibrin foams |
| KR20190095552A (ko) * | 2009-09-09 | 2019-08-14 | 아사히 가세이 파마 가부시키가이샤 | 1회당 100∼200 단위의 ｐｔｈ가 주 1회 투여되는 것을 특징으로 하는, ｐｔｈ 함유 골다공증 치료/예방제 |
| AU2009356227A1 (en) | 2009-12-07 | 2012-06-21 | Michigan Technological University | Black bear parathyroid hormone and methods of using black bear parathyroid hormone |
| US9295663B2 (en) | 2010-07-14 | 2016-03-29 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Drug coated balloon with in-situ formed drug containing microspheres |
| WO2012111852A1 (ja) * | 2011-02-17 | 2012-08-23 | 帝人ファーマ株式会社 | 椎体骨折治療剤及びその評価方法 |
| EP2686027B1 (en) | 2011-03-16 | 2021-05-05 | Kuros Biosurgery AG | Pharmaceutical formulation for use in spinal fusion |
| US20140088014A1 (en) | 2011-06-07 | 2014-03-27 | Asahi Kasei Pharma Corporation | Freeze-dried preparation containing high-purity pth and method for producing same |
| US9700485B2 (en) | 2013-04-24 | 2017-07-11 | Corning Incorporated | Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients |
| AU2017214277B2 (en) * | 2016-02-01 | 2020-02-27 | Eli Lilly And Company | Parathyroid hormone – anti-RANKL antibody fusion compounds |
| EP3576774A4 (en) * | 2017-02-01 | 2020-10-07 | The Johns Hopkins University | PARATHYROID HORMONE AND REGENERATION OF DEGENERATIVE DISCS |
| JP6577683B2 (ja) * | 2017-09-22 | 2019-09-18 | 旭化成ファーマ株式会社 | 安定性に優れるテリパラチド含有液状医薬組成物 |
| CN111447943A (zh) | 2018-10-29 | 2020-07-24 | 旭化成制药株式会社 | 以按每周2次的频率给予特立帕肽或其盐为特征的骨质疏松症的预防或治疗方法 |
| EP4010360A1 (en) | 2019-08-09 | 2022-06-15 | Flagship Pioneering Innovations VI, LLC | Modulators of parathyroid hormone receptor (pthr1) |
| GB2590692A (en) * | 2019-12-24 | 2021-07-07 | Corthotec Ltd | Composition for improved bone fracture healing |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0873376A (ja) * | 1994-09-07 | 1996-03-19 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 骨粗鬆症治療薬 |
| JPH08310965A (ja) * | 1995-05-16 | 1996-11-26 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 骨癒合促進剤 |
| CZ182297A3 (cs) * | 1994-12-22 | 1998-01-14 | Astra Aktiebolag | Terapeutický přípravek pro inhalaci obsahující parathyroidní hormon, PTH |
| WO1998014478A1 (en) * | 1996-09-30 | 1998-04-09 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Continuous low-dose administration of parathyroid hormone or its agonist |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4086196A (en) | 1975-03-28 | 1978-04-25 | Armour Pharmaceutical Company | Parathyroid hormone |
| IL78342A (en) * | 1985-04-04 | 1991-06-10 | Gen Hospital Corp | Pharmaceutical composition for treatment of osteoporosis in humans comprising a parathyroid hormone or a fragment thereof |
| DE3935738A1 (de) | 1989-10-27 | 1991-05-08 | Forssmann Wolf Georg | Arzneimittel, enthaltend das humane parathormon-fragment (1-37) als aktiven wirkstoff |
| US5208041A (en) | 1991-05-23 | 1993-05-04 | Allelix Biopharmaceuticals Inc. | Essentially pure human parathyroid hormone |
| CA2126299C (en) | 1994-06-20 | 2000-12-12 | Gordon E. Willick | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis |
| EP0800405A4 (en) * | 1994-12-19 | 1998-11-11 | Beth Israel Hospital | CONTINUOUS ADMINISTRATION OF LOW DOSES OF HORMONE PARATHYRO DIENNE OR ITS AGONIST |
| EP1005359B1 (en) * | 1997-09-09 | 2005-06-15 | F. Hoffmann-La Roche Ag | FRACTURE HEALING USING PTHrP ANALOGS |
| ZA9811127B (en) | 1997-12-09 | 2000-07-11 | Lilly Co Eli | Stabilized teriparatide solutions. |
| AR033639A1 (es) | 1998-08-19 | 2004-01-07 | Lilly Co Eli | Uso de hormonas paratiroideas para preparar medicamentos para reducir el riesgo de fracturas oseas vertebrales o no vertebrales en seres humanos con riesgo de padecer o que padecen osteoporosis |
| US20040033950A1 (en) * | 2000-09-26 | 2004-02-19 | Hock Janet M. | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures |
| US6907597B1 (en) | 2000-10-13 | 2005-06-14 | Ati International Srl | Method and apparatus for constructing an executable program in memory |
| US6967759B2 (en) | 2001-12-31 | 2005-11-22 | Texas Instruments Incorporated | Pulse width modulation sequence generation |
| JP5796714B2 (ja) | 2012-01-13 | 2015-10-21 | 株式会社リコー | 定着装置及び画像形成装置 |
| EP2949301B1 (en) | 2014-05-27 | 2018-04-18 | The Procter and Gamble Company | Absorbent core with curved and straight absorbent material areas |
-
1999
- 1999-08-18 AR ARP990104133A patent/AR033639A1/es unknown
- 1999-08-18 DZ DZ990173A patent/DZ2873A1/xx active
- 1999-08-19 HU HUP1200430 patent/HU1200430D0/hu not_active Application Discontinuation
- 1999-08-19 ES ES10180447.4T patent/ES2621653T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 HU HU0101594A patent/HU230697B1/hu unknown
- 1999-08-19 KR KR10-2001-7002092A patent/KR100454207B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 CN CNB998083534A patent/CN1205997C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 US US09/647,278 patent/US6977077B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 DE DE69904918T patent/DE69904918T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 PE PE1999000839A patent/PE20001089A1/es not_active Application Discontinuation
- 1999-08-19 IL IL13882999A patent/IL138829A0/xx unknown
- 1999-08-19 PT PT101804474T patent/PT2266598T/pt unknown
- 1999-08-19 WO PCT/US1999/018961 patent/WO2000010596A1/en active IP Right Grant
- 1999-08-19 CO CO99052525A patent/CO5130020A1/es unknown
- 1999-08-19 DK DK99942350T patent/DK1059933T3/da active
- 1999-08-19 EA EA200001015A patent/EA003362B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 NZ NZ507056A patent/NZ507056A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 EP EP15152726.4A patent/EP2907522B1/en not_active Revoked
- 1999-08-19 CZ CZ20004134A patent/CZ301017B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 PT PT06027055T patent/PT1769804E/pt unknown
- 1999-08-19 PL PL343595A patent/PL201688B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 DE DE15152726.4T patent/DE15152726T1/de active Pending
- 1999-08-19 DK DK10180447.4T patent/DK2266598T3/en active
- 1999-08-19 UA UA2000095457A patent/UA72205C2/uk unknown
- 1999-08-19 PT PT15152726T patent/PT2907522T/pt unknown
- 1999-08-19 BR BR9909445-2A patent/BR9909445A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-08-19 PT PT99942350T patent/PT1059933E/pt unknown
- 1999-08-19 AT AT99942350T patent/ATE231000T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-08-19 CA CA002325371A patent/CA2325371C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 ES ES06027055T patent/ES2393200T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 ES ES99942350T patent/ES2190244T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 JP JP2000565916A patent/JP2002523375A/ja active Pending
- 1999-08-19 EP EP10180447.4A patent/EP2266598B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 ID IDW20010612A patent/ID29039A/id unknown
- 1999-08-19 EP EP99942350A patent/EP1059933B1/en not_active Revoked
- 1999-08-19 TR TR2000/03455T patent/TR200003455T2/xx unknown
- 1999-08-19 ES ES15152726.4T patent/ES2549551T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-19 DK DK15152726.4T patent/DK2907522T3/en active
- 1999-08-19 AU AU55750/99A patent/AU746277B2/en not_active Expired
- 1999-08-19 MY MYPI99003553A patent/MY129227A/en unknown
- 1999-08-19 DK DK06027055.0T patent/DK1769804T3/da active
- 1999-10-26 TW TW088114185A patent/TW576747B/zh not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-10-03 IL IL138829A patent/IL138829A/en unknown
- 2000-11-06 HR HR20000755A patent/HRP20000755A2/hr not_active Application Discontinuation
- 2000-11-24 NO NO20005947A patent/NO323984B1/no not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-02-14 HK HK01101056A patent/HK1030545A1/xx unknown
-
2005
- 2005-04-05 US US11/098,894 patent/US7163684B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2007
- 2007-06-11 NO NO20072983A patent/NO20072983L/no not_active Application Discontinuation
- 2007-10-04 HK HK07110798.6A patent/HK1102496A1/xx unknown
-
2010
- 2010-10-29 JP JP2010244314A patent/JP2011021035A/ja not_active Withdrawn
-
2012
- 2012-11-14 CY CY20121101096T patent/CY1113343T1/el unknown
-
2014
- 2014-03-25 JP JP2014061763A patent/JP6177718B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2014-10-03 JP JP2014204577A patent/JP2015028065A/ja not_active Withdrawn
-
2016
- 2016-01-18 HK HK16100519.4A patent/HK1212602A1/zh not_active IP Right Cessation
-
2017
- 2017-06-26 JP JP2017124301A patent/JP2017190332A/ja not_active Withdrawn
- 2017-10-13 CY CY20171101077T patent/CY1119552T1/el unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0873376A (ja) * | 1994-09-07 | 1996-03-19 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 骨粗鬆症治療薬 |
| CZ182297A3 (cs) * | 1994-12-22 | 1998-01-14 | Astra Aktiebolag | Terapeutický přípravek pro inhalaci obsahující parathyroidní hormon, PTH |
| JPH08310965A (ja) * | 1995-05-16 | 1996-11-26 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 骨癒合促進剤 |
| WO1998014478A1 (en) * | 1996-09-30 | 1998-04-09 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Continuous low-dose administration of parathyroid hormone or its agonist |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| BMJ 301 s. 314-318 (1990) * |
| Bone 17 (4, SUP 361p) s. 415S-329S (1995) * |
| Journal of Bone and Mineral Research 8 (9), s. 1097-1101 (1993 ) abstrakt * |
| Lancet 350, s. 550-555 (1997) * |
| Miner Electrolyte Metab 21 (1-3) s. 232-5 (1995) (abstrakt) * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7163684B2 (en) | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures | |
| US7351414B2 (en) | Method of reducing the risk of bone fracture | |
| US20050192227A1 (en) | Method for reducing the risk of cancer | |
| EP1295605A2 (en) | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures | |
| EP1769804A2 (en) | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures | |
| MXPA00009982A (en) | Method of increasing bone toughness and stiffness and reducing fractures |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20190819 |