DK161024B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af cephalosporinderivater - Google Patents

Description

DK 161024 B

Den foreliggende opfindelse angår en anal ogi fremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte cephalosporinderivater med formlen 5 N-t-C-<U-NH-j-^ // \\ II R3 (1) i-)\ 2 J—01 H2-N ^OR & CH2—N CH3 COcP R4 10 2 3 hvori R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner 4 methyl eller ethyl, og R betegner methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, allyl, 2-butenyl, 3-butenyl, 2-hydroxy-ethyl, 3-hydroxypropyl, 2-(dimethylaminojethyl, pyridylmethyl, 15 pyridylethyl, benzyl eller phenethyl, samt non-toxiske, farmaceutisk acceptable salte eller sol vater deraf. Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er karakteriseret ved det i krav l's kendetegnende del angivne.

GB patentbeskrivelse nr. 1.399.086 indeholder en almen beskrivelse omfattende et stort antal cephalosporiner med formlen 20 R-<jj-CO-NH-——r

25 COOH

hvori R er hydrogen eller en organisk gruppe, Ra er en etheri-ficerende monovalent organisk gruppe bundet til oxygenet gennem 30 et carbonatom, B er^> S eller ^>S-+0, og P er en organisk gruppe. 2-aminothiazol-4-yl-gruppen er imidlertid ikke identificeret som en R-substituent, og der er ingen eksempler, hvori P er en kvaternær ammoniummethylgruppe af den type, som er indeholdt og beskrevet heri i forbindelserne med formel (I). US patentskrift 35 nr. 3.971.778 og deraf ved deling fremkomne patenter nr.

4.024.133, 4.024.137, 4.064.346, 4.033.950, 4.079.178, 4.091.209, 4.092.477 og 4.093.803 har tilsvarende indhold.

2

DK 161024 B

US patentskrift nr. 4.278.793 indeholder en almen beskrivelse omfattende et stort antal cephalosporinderivater med formlen R4

5 S

N-1—C-C-NH--r r COOR3 10 hvori variabierne Rp R2, Rg, Rp X og A inkluderer almene definitioner af de tilsvarende substituenter på de her omhandlede forbindelser med formel (I). I de 20 spalter med definitioner på de forskellige substituentgrupper, i den 78 sider lange tabel med 15 strukturformler og de 225 eksempler, findes der imidlertid ingen omtale af, at A kan være en kvaternær ammoniummethyl-gruppe af den type, som er indeholdt og beskrevet heri i forbindelserne med formel (I). GB patentbeskrivelse nr. 1.604.971 svarer dertil og har et i det væsentlige identisk indhold. Bekendtgjort GB patentansøg-20 ning nr. 2.028.305 A indeholder, selv om den tilsyneladende ikke er formelt beslægtet, den samme brede, almene beskrivelse, men eksemplificerer kun A som hydrogen.

US patentskrift nr. 4.278.671 omhandler 7-[2-(2-aminothiazol- 4-yl)-2-(syn)-methoxyi mi noacetami do]cephalospori nderi vater med 25 formi en -f) 30 [L 1 Jl

N)CH

COOH

hvori R2NH er en eventuelt beskyttet aminogruppe, og Rg er 35 hydrogen eller "resten af en nucleofil forbindelse". Udtrykket "resten af en nucleofil forbindelse” er defineret bredt, og det er o dernæst anført, at R "alternativt kan være en kvaternær ammoniumgruppe". Pyridinium, forskelligt substitueret pyridinium, quino- 3

DK 161024 B

li nium, pi col i nium og lutidinium er omhandlet som mulige kvaternære ammoniumgrupper. Der er ingen antydning af, at den kvaternære ammoniumgruppe kan være af den type, som er omhandlet og beskrevet heri i forbindelserne med formel (I). GB patentbeskrivel-5 se nr. 1.581.854 svarer dertil og har i det væsentlige identisk indhold. Andre patentskrifter tilhørende samme patenthaver, som ikke er formelt beslægtede, men som har lignende indhold, omfatter US patentskrift nr. 4.098.888 og ved deling fremkomne US patenter nr. 4.203.899, 4.205.180 og 4.298.606, samt GB patent-10 skrift nr. 1.536.281.

Offentliggjort GB patentansøgning nr. 2.040.921 omhandler cephalosporinderivater med formlen NH-

,. A

w, rf Ί .i X-i-co« rVVL.' 20 ib &£> 2 l3

R

n fo hvori R og R er Cj al kyl eller-, sammen med det carbonatom, 25 hvortil de er bundne, danner en C- 7-cykloalkylidenring, og R*, 2 3 ^ R og R betegner alle en CJ4-al kylgruppe.

Mere specielt omhandler den forliggende opfindelse cephalospori nderivater med formlen 30 I ' N-T- C-C-ΝΗί-f > fi\ a i r3 H2N XSX XOR2 <y CH2—N-CH3 COCp R4 hvori R^ og R^, som kan være ens eller forskellige, betegner 35 4 4

DK 161024 B

methyl eller ethyl, og R betegner methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, allyl, 2-butenyl, 3-butenyl, 2-hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, 2-(dimethyl ami no)ethyl, pyri dylmethyl, pyri dyl-ethyl, benzyl eller phenethyl, samt non-toxiske, farmaceutisk accep-5 table salte deraf, samt fremgangsmåder til fremstilling deraf. Inden for opfindelsens rammer falder også solvaterne (herunder hydrater) af forbindelserne med formel (I), samt de tautomere former af forbindelserne med formel (I), f.eks. 2-aminothiazolin-4-yl-formen af 2-ami nothi azol-4-yl-delen.

10 Som vist i strukturformlen har forbindelserne med formel (I) syn- eller Z-konfiguration med hensyn til alkoxyimi no-gruppen.

Fordi forbindelserne er geometriske isomere, kan noget af anti-iso-meren også være til stede. Den foreliggende opfindelse omfatter forbindelser med formel (I) indeholdende mindst 90% af syn-isome-15 ren. Fortrinsvis er forbindelserne med formel (I) syn-isomere, som er i det væsentlige uden de tilsvarende anti-i somere.

De non-toxiske, farmaceutisk acceptable syreadditionssalte af forbindelserne med formel (I) omfatter saltene med saltsyre, hydro-genbromidsyre, myresyre, salpetersyre, svovlsyre, methansulfon-20 syre, phosphorsyre, eddikesyre og trifluoreddikesyre, samt andre syrer, som har været anvendt inden for penicillin- og cephalosporin-området.

Forbindelserne med formel (I), udviser høj antibakteriel aktivitet over for forskellige gram-positive og gram-negative bakterier, og de er 25 værdifulde i behandlingen af bakterielle infektioner i dyr og mennesker. Forbindelserne med formel (I) kan formuleres til parenteral brug på konventionel måde under anvendelse af kendte farmaceutiske bærere og excipienter, og de kan foreligge på enhedsdosisform eller i multi-dosis beholdere. Præparaterne kan være i form af opløsninger, suspensioner 30 eller emulsioner i olieagtige eller vandige vehikler, og kan indeholde konventionelle dispergerings-, suspenderings- eller stabiliseringsmidler. Præparaterne kan også være i form af et tørt pulver til rekonstituering før brug, f.eks. med sterilt, pyrogenfrit vand. Forbindelserne med formel (I) kan også formuleres som suppositorier under anvendelse af 35 konventionelle suppositoriegrundlag, såsom cacaosmør eller andre glyce-rider. De omhandlede forbindelser kan, om ønsket, administreres i kombination med andre antibiotika, såsom penicilliner eller andre cephalospo-riner.

DK 161024 B

5 Når præparaterne tilvejebringes på enhedsdosisformer, vil de fortrinsvis indeholde fra ca. 50 til ca. 1500 mg af den aktive bestanddel med formel (I). Dosis af forbindelserne med formel (I) er afhængig af faktorer, såsom patientens vægt og alder samt af syg-5 dommens art og alvorlighed, og bestemmelsen heraf er en lægelig opgave. Dosis for behandling af et voksent menneske vil imidlertid fortrinsvis være i området fra ca. 500 til ca. 5000 mg pr. dag, afhængigt af frekvensen og administreringsvejen. Ved intramuskulær eller intravenøs administrering til en voksen person vil en total 10 dosis på fra ca. 750 til ca. 3000 mg pr. dag i opdelte doser normalt være tilstrækkelig, selv om højere daglige doser af nogle af forbindelserne kan være ønskelige i tilfælde af Pseudomonas infektioner.

De foretrukne forbindelser med formel (I) er sådanne, hvori p O 4 R er methyl, R er methyl eller ethyl, og R er methyl, ethyl, 2- 15 hydroxyethyl, 2-(dimethylamino)ethyl, allyl eller pyridylmethyl. Særligt 2 3 4 foretrukne forbindelser er sådanne, hvori R og R er methyl, og R er methyl, 2-hydroxyethyl eller allyl. Den mest foretrukne forbindelse er p o 4 den, hvori R , R og R er methyl. I den primære vurdering af de omhandlede forbindelser blev de minimale i nhibitori ske koncentra-20 ti oner (MIC-værdier) af forbindelserne bestemt ved hjælp af dob-belt-serie-agar fortyndingsmetoden i Mueller-Hinton agar over for 32 stammer af testorganismer i seks grupper.. De geometriske middelværdier for MIC, som blev bestemt ved de»me test, er vist i tabel (I).

6 DK 161024 B

— o *“· V.

— 1· li) to r Ol Λ ω cm co in r^-O « χ—' ---—---- ί α) ω ε ω Ε ~ <ο /^ν ο ο cn σ> +j ’ m ·- to to to tt ιο Λ CD Ο Ο Ο τ- <Μ U - s~\ Ο ~ g> S 10 ^____. - I s' 2 ε 2 «

w ε w S

^ 5 8 2 S « 2 Λ «ο Ο w w § ro .

O ^ o o o o 0) g ® w 0J O to o o - ·- ε -

1 ---__ § ® O

·> c C

— 3 α Q) 05 Q) £- Ό C · ® — 2 '•oo'cfi^r^ c T ^ o co f in to c

m Λ ω - o o o o — n)iS

S V i'-'' 00 -χ ^ ^ v V o ti S £ ,'_ co o o o o oio u t w v i. ' Τ'

^+j O s- 0) Τ' E

2 __ pi® ε ® ε —-----—___ c £ c pro O ε (B C m ^ ® o Ή m ij ® . <0 £ w 2 « ° — " lo w υ /~s x-x to n to n w ,n r” co ta •in ------ C- cm ^ — + ^ o <i oo cf in w ^ _+j ^ « co Ϊ S - ‘o £ ^ ® ^ j? £ o υ *- « __l 3 u ^ ' ® ® g® o ui « g ^

* . ω ε ^ ε I S

? «i n > § g § Ϊ ^ ro 1 co > g ’S ^ “ S " JL ε v— <D ^ r— t— •H+jCC'JWt— m O in --^--- p ιο <u ' tu v—' ro tu ,7 -H r- t- r N ftl C 'vi W *- JQ * |_

Om - 5ω,ιη,:=°ω ~ ω ^ 8 S .Ε Ξ £ C s Ό C- ' I r n r ® Dl o cc+Jro+fP3c = .!: ^ S; 8 ---ϋο^ε^εδε c c °L . 0- .0) a)a)<Di_(i>t-tnu> q.clUd.Uclcl~ "åJ <u α -* c (0 ® § *- « S o — Vi v-v u« Φ ^

Ό <U Π3 -Q Π3 JD — — O

.E qj r- n o cf oo 7 7 7 7 7 7 *~ J3 Π) s~\ /-~\ /~\ C- ^ ++1111^ 9 <2“ OOOOOOro U- Vw/ s—' V-/ V-X S—/ w 7

DK 161024 B

Absorptionen af den mest foretrukne forbindelse (la) (fremstillet i eksempel 1) bestemtes i mus efter en enkelt intramuskulær injektion af testforbindelsen (opløst i 0.1M phosphatpuffer, pH 7) i en dosis på 20 mg/kg. Blodprøver opsamledes fra de orbitale sinus i 05 heparinicerede kapillærrør og undersøgtes i Mueller-Hinton medium under anvendelse af Morganella Morganii A9695 som testorganisme.

Blod koncentrationerne ved forskellige tidsintervaller, halveringstiderne (t, ) og arealerne under kurven (AUC) er vist i tabel (II).

"έ 10

Tabel II

Muse-blodspejlsværdier af forbindelse (la)

Blod koncentrationer 10 14 15 (pg/ml) 20 12 til minutter 30 8,8 efter 40 7,5 administrering 50 4,7 60 4,4 20 90 1,5 120 0,74

S

(minutter) 24 25 ----

AUC

pg.time/ml 10 30 In vitro aktiviteten af den mest foretrukne forbindelse (la) over for 31 stammer af "kredsende" bakterier bestemtes i agar, og resultaterne er vist i tabel (III).

35 8

DK 161024 B

Tabel IH

In vitro aktivitet af forbindelse (la) over for "kredsende11 bakterier

Geometrisk middelværdi af MIC

05 Testorganisme (pg/ml) S. pyogenes (6 stammer) 0,013 S. pneumoniae (6) 0,013 N. gonorrhoeae (4) 0,013 10 N. meningitidis (5) 0,016 H. influenzae (7) 0,013 (ampicillin-sensitiv) H. influenzae (3) 0,20 (ampicil I in-resistent) 15

Opfindelsen angår anal ogifremgangsmåder til fremstilling af forbindelserne med formel (I). Der er to basale fremgangsmåder til omdannelse af en let tilgængelig udgangs-cephaloporin til en 20 anden cephalosporin med andre substituenter på 7- og 3-stillingen.

Man kan først fjerne 7-substituenten og erstatte den af den ønskede 7-substituent, og dernæst indføre den ønskede 3-substituent.

.X

Alternativt kan man først indføre den ønskede 3-substituent og derefter ændre 7-substituenten. Forbindelserne med formel (I) kan 25 fremstilles ved hjælp af begge fremgangsmåder, og begge falder inden for opfindelsens rammer, idet det dog foretrækkes at indføre den ønskede 7-substituent først, og dernæst indføre den ønskede 3-substituent. Den foretrukne fremgangsmåde er vist nedenfor i reaktionsskema 1, mens den alternative fremgangsmåde er vist i 30 reaktionsskema 2. Forkortelsen "Tr" betyder tritylgruppen (triphe-nylmethyl), som er en foretrukken aminobeskyttende gruppe. Forkortelsen "Ph" betyder phenylgruppen. -CH(Ph)2-delen er derfor benzhydrylgruppen, som er en foretrukken carboxyl beskyttende gruppe.

35 9

DK 161024 B

Reaktionsskema X r i " C — COOC^Hi- jCSk.

TrHN xs . R2x 10 N/ m——<-C--COOC~Hc ru,

TrHN7^ S/ 0R

15 OH~ /,ΤΓ'Γ" Τγη/Ν ^ X°R‘

h2n^_/SN

25 2 \ <V> ry Ν'^ί>1χ:H2C1 COOCH(Ph)2

V

30 i

Qc TrhN s — I

35 COOCH(Ph)2

Nal \ /

DK 161024B

10

N—τ-C-CONH--S' S 'N

//TI. I (VII ,

Tr HN^ s ^ ^OR2 σ N'\^^'CH21 05 ' ' COCX:H(Ph)2 /r3 i. ch3-n^ ^R4 ^ 2. Afblokering

V

15 g /ΠΓΙ~εοΝΗ~τΓ Ί a, 20 H2N s/ \or2 COC~J I 4

R

25 . Reaktionsskema 2

S

PhCH2CONH-i-S' *N

(VIII )

30 N\j^CH2OH

• COOCH(Ph)2 PC15 35 pyridin Ψ

DK 161024 B

11

PhCH2CONH-j-r^S "'"l (IX ) $ n\^ch2ci COOCH(Ph)« 05 1

Nal

10 V

PhCH2CONH-j-< Ί (X) 15 Jr'~n-^Kn2i COOCH(Ph)2 20 /K3 ψ 25

PhCH2CONH-r S Pr3 (XI) ' Å Θ| /—N\j^H2—CH3 30 COOCH (Ph) 2 r4

Deacylering 35 Ψ 12

DK 161024 B

η2νί—r j9 3 r^R (XII) λ-Nv _®l Οκ CH2-N-CH3 05 COOCH (Ph) 2 R4

TV

10

V

15 f O I0 R (XIII> A s b\ 2 ® 20 TrHN XSX XOR2 (y -N-CH3 COOCH(Ph)2 R4 ^ Afblokering

- V

30 . c /J«Xl TU ®i 111 h2n xs7 xor2 o7 nCH2“ Ϊ- ch3 C00^ I 4

K

35

DK 161024 B

13

Selv om de ovenstående reaktionsskemaer viser foretrukne fler-trinsfremgangsmåder til fremstilling af forbindelserne med formel (I), vil det kunne indses, at andre udgangsmaterialer og fremgangsmåder kan anvendes til fremstilling af mellemprodukterne, som 5 anvendes i nøgletrinnet for hvert reaktionsskema. Nøgletrinnet i reaktionsskema 1 er således omsætningen af forbindelse (VII) med den tertiære amin. Forbindelse (VII) kan i sig selv fremstilles ved hjælp af andre fremgangsmåder. Tilsvarende er nøgletrinnet i reaktionsskema 2 acyleringen af forbindelse (XII) med forbindelse (IV).

10 Både forbindelse (XII) og (IV) kan fremstilles ved hjælp af andre fremgangsmåder.

Fremgangsmåde a) ifølge opfindelsen til fremstilling af forbindelser med formlen

15 U

N-T-C-C-NH-i-f ^ ,T) AA , Al m h2n N)ir & CH2 n—ch3 CO(P R4 20 2 3 hvori R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner methyl eller ethyl, og R4 betegner methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, ally!, 2-butenyl, 3-butenyl, 2-hydroxy-ethyl, 3 - hydroxy propy 1, 2-(dimethyla'mino)ethyl, pyri dyl methyl, 25 pyridylethyl, benzyl eller phenethyl, samt non-toxiske, farmaceutisk acceptable salte og sol vater deraf, omfatter, at man omsætter en forbindelse med formlen 30 ro π r 'ί <xiv>

B2HNX\g/ ^OR2 <y CH2I

COOB1 2 1 35 hvori R har den ovenfor anførte betydning, B betegner en kon- ό ventionel carboxyl beskyttende gruppe, og B betegner en konventionel aminobeskyttende gruppe, med en tertiær amin med formlen

DK 161024 B

14

CIL-H<Z

3 4 3 4 5 hvori R og R har de ovenfor anførte betydninger, til fremstilling af en forbindelse med formlen N--8-NH-i-^ C) 3 ίο jTfK ' Π I p®i <xv> T)R2 <y -h2-N-CH3 COOB1 ^4 hvorefter man fjerner alle beskyttende grupper ved hjælp af kon- 15 ventionelle midler.

Omsætningen udføres i et ikke-vandigt organisk opløsningsmiddel, såsom methylenchlorid, chloroform, ethylether, hexan, ethylacetat, tetrahydrofuran, acetonitril og lignende, eller blandinger af sådanne opløsningsmidler. Omsætningen udføres hensigts- 20 mæssigt ved en temperatur fra ca. -10°C til ca. +50°C, idet det normalt foretrækkes at udføre omsætningen ved stuetemperatur.

Mindst ét mol af den tertiære amin bør anvendes pr. mol forbindelse (XIV), og det foretrækkes normalt at anvende fra ca. 50% til ca.

100% overskud af den tertiære amin.

25 Carboxyl beskyttende grupper, der er egnede til anvendelse som B* ved ovennævnte omsætning, er velkendte for fagmanden og omfatter aral kylgrupper, såsom benzyl, p-methoxybenzyl, p-nitro-benzyl og diphenylmethyl (benzhydryl), alkylgrupper, såsom t-butyl, halogenalkylgrupper, såsom 2,2,2-trichlorethyl, og andre 30 carboxyl beskyttende grupper, som er beskrevet i litteraturen, f.eks. i GB patentskrift nr. 1.399.086. Det foretrækkes at anvende carboxyl beskyttende grupper, der let fjernes ved behandling med syre. Særligt foretrukne carboxyl beskyttende grupper er benzhydryl- og t-butyl-delene.

35 Aminobeskyttende grupper, der er egnede til anvendelse som 2 B , er også velkendte i teknikken og medtager tri tyl gruppen og acylgrupper, såsom chloracetyl. Aminobeskyttende grupper, der let fjernes ved behandling med syre, f.eks. tritylgruppen, foretræk- 15

DK 161024B

kes.

Fremgangsmåde b) ifølge opfindelsen til fremstilling af forbindelser med formlen 5 ri"—^—t~0 f (i> /\s/ \or2 S- CH3 CO.P A4 10 hvori R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner methyl eller ethyl, og R4 betegner methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, ally!, 2-butenyl, 3-butenyl, 2-hydroxy-ethyl, 3-hydroxypropyl, 2-(dimethylamino)ethyl, pyridylmethyl, 15 pyridylethyl, benzyl eller phenethyl, samt non-toxiske, farmaceutisk acceptable salte og sol vater deraf, omfatter, at man acylerer en forbindelse med formlen H0N-i-f η Λ 20 1 P r3 (XVI ) λ—Θ| θ' CH--N-CH- I 1 1 L 2 COOB·*· ^4 i 25 eller et N-silyl-derivat deraf, hvori B er hydrogen eller en kon- 3 4 venti one! carboxyl beskyttende gruppe, og R og R har de ovenfor anførte betydninger, med et acylerende derivat af en syre med formi en

N—"T C-COOH

Jl \ IL (xvii) B1HN^Sx/ Nss'OR1 2 hvori B er en konventionel aminobeskyttende gruppe, og R har 35 den ovenfor anførte betydning, til fremstilling af en forbindelse med 2 formlen 16

DK 161024 B

n—p-c—H—nh-]—rN // \\ 1. If (XV)

05 B2HN/^s^ ^OR2 ' 0V~ \^CH2~N-CH

1 1 2 I 3 COOB-1· ^4 hvorefter man fjerner alle beskyttende grupper.

De acylerende derivater af syren med formel (XVII) inkluderer 10 syrehalogeniderne (og især syrechloridet), blandede syreanhydrider (såsom syreanhydriderne dannet med pivalinsyre eller et halogen-formiat, såsom ethylchlorformiat), samt aktiverede estere (såsom kan dannes med N-hydroxybenztriazol i nærværelsen af et kondensations-middel, såsom dicyklohexylcarbodiimid). Acyleringen kan også ud-15 føres ved anvendelse af den frie syre af forbindelsen med formel (XVII) i nærværelsen af et kondensationsmiddel, såsom dicyklohexylcarbodiimid, carbonyldiimidazol eller et isoxazoliumsalt. Som her anvendt omfatter udtrykket "acylerende derivat" af syren med formel (XVII) selve den frie syre i nærværelse af et kondensations-20 middel, såsom ovenfor beskrevet. Det foretrukne acylerende derivat af syren med formel (XVII) er syrechloridet, fortrinsvis anvendt i nærværelsen af et syrebindende middel (og især et tertiær amin syrebindende middel, såsom triethylamin, dimethylanilin eller py-ridin).

25 Når acyleringen udføres med et syrehalogenid, er det muligt at anvende et vandigt reaktionsmedium, men et ikke-vandigt medium foretrækkes. Når syreanhydrider, aktiverede estere eller den frie syre i nærværelsen af et kondensationsmiddel anvendes til acylerin-gen, bør reaktionsmediet være ikke-vandigt. Særligt foretrukne 30 opløsningsmidler til acyleringsreaktionen er halogenerede carbon-hydrider, såsom methylenchlorid og chloroform, men tertiære amider, såsom dimethylacetamid eller dimethylformamid, kan anvendes, lige som andre konventionelle opløsningsmidler, såsom tetrahydro-furan, acetonitril og lignende.

35 Acyleringsreaktionen kan udføres ved en temperatur fra ca.

-50°C til ca. +50°C. Den udføres dog fortrinsvis ved eller under stuetemperatur og mest foretrukkent fra ca. -30°C til ca. 0°C. Det 17

DK 161024 B

foretrækkes sædvanligvis at acylere forbindelsen med formel (XVI) med cirka en støkiometrisk mængde af acyleringsmidlet med formel (XVII), selv om et lille overskud (f.eks. 5-25%) af acyleringsmidlet kan anvendes.

05 Det foretrækkes, at forbindelsen med formel (XVI) acyleres i form af dens N-silyl-derivat (når der anvendes et ikke-vandigt reaktionsmedium). Dette foretages hensigtsmæssigt in situ ved blot at tilsætte et passende silyleringsmiddel (f.eks. Ν,Ο-bistrimethyl-silylacetamid) til opløsningen af forbindelse (XVI) før tilsætningen 10 af acyleringsmidlet med formel (XVII). Det foretrækkes at anvende cirka 3 mol silyleringsmiddel pr. mol forbindelse (XVI), selv om dette dog ikke er kritisk. Silylforbindelsen fjernes let efter acyle-ring ved tilsætning af vand.

De tertiære aminer med formlen 15 R3 CHq-N<^ \ 4 20 som anvendes til fremstillingen af forbindelserne med formel (I), er kommercielt tilgængelige eller fremstilles let ved hjælp af i og for sig kendte fremgangsmåder.

Præparationseksempel 1 25 N-r—C-COOC-H,.

JJl (III)

TrHN^^ ^OR2 30 Ethyl-(Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-acetat (I I la)

En blanding af ethyl-(Z)-2-hydroxyimino-2-(2-tritylamino-thia-Zol-4-yl)acetat (II) (5,00 g, 10,9 mmol), CH^I (2,04 ml, 32,8 .mmol) og (4,54 g, 32,8 mmol) i tør dimethylsulfoxid (DMSO) (100 ml) omrørtes ved stuetemperatur natten over og hældtes dernæst i 35 vand (250 ml). Det dannede bundfald opsamledes ved filtrering, vaskedes med vand og tørredes til dannelse af titelforbindelsen (5,15 g, kvantitativt udbytte). Smp. 115°C (dek.).

18

DK 161024B

NMR: fiCDCI3 ppm 1,32 (3H, t), 3,98, (3H, s), 4,30 (2H, q), 6,42 (1H, s), 7,2 (1H, m), 7,25 (15H, s).

Forbindelse (111b) fremstilledes ved hjælp af den ovenfor beskrevne almene fremgangsmåde, men under erstatning af methyliodid med ethyliodid.

(1)

Litteratur v 1

Forbindelse Udbytte (%) Smp. (°C) Smp. (°C) (I I la) methyl 100 115° ca. 120° (dek.) (dek.) (I I Ib) ethyl 67 97-98° * '* Esteren hydrolyseredes uden isolering (1) Tetrahedron, 34, 2233 (1978)

Præparationseksempel 2

N-t—C-COOH

Ji. (W)

TrmjSs' OR2 (Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)eddikesyre (IVa)

Den i præparationseksempel 1 fremstillede ethylester (I I la) (6,00 g, 12,7 mmol) i ethanol (120 ml) behandledes med 2N NaOH (12,7 ml) ved stuetemperatur natten over. Reaktionsblandingen indstilledes på pH-værdi 8 ved tilsætning af pulveriseret tøris, og opløsningsmidlet afdampedes under reduceret tryk. Remanensen opløstes I vand (100 ml), og opløsningen gjordes sur med IN HCI til pH-værdi 2 og ekstraheredes dernæst med ethylacetat (3 x 50 ml).

De forenede ekstrakter vaskedes med en mættet vandig NaCI-opløs-ning, tørredes og inddampedes. Remanensen krystalliseredes fra ethyl acetat-hexan til dannelse af 5,56 g (udbytte 98%) af titelforbindelsen. Smp. 138-143°C (dek.).

DK 161024 B

19 ΓΠΓΙ NMR: 6^u^*3 ppm 3,89 (3H, s), 6,52 (IH, s), 7,2 (15H, s).

Forbindelser (IVb) fremstilledes ved hjælp af den ovenfor anførte almene fremgangsmåde.

05 Smp, Litteratur v J

Forbindelse R^ Udbytte (%) (°C, dek.) Smp. (°C dek.) (IVa) methyl 98 138-143 ca. 140 (IVb) ethyl 85 140-145 ikke rapporteret 10 ^ Tetrahedron, 34, 2233 (1978)

Præparationseksempel 3

Benzhydryl-3-hydroxymethyl-7-phenylacetamido-3-cephem-4-carboxy-15 lat (VIII)

Til en omrørt suspension af phosphatpuffer (pH 7, 162,5 ml) og hvedeklid (20 g, tør) ved stuetemperatur sattes 7-phenylacet-amidocephalosporansyre, natriumsalt (5 g, 12,1 mmol) i én portion. Reaktionsforløbet måltes ved HPLC, indtil hydrolysen var komplet (5 20 timer). Suspensionen filtreredes til fjernelse af hvedekliddet, og filtratet afkøledes til 5-10°C til ekstraktionsesterificering. Methylen-chlorid (32 ml) sattes til den afkølede opløsning, efterfulgt af en 0,5 M opløsning af diphenyldiazomethan i methylenchlorid (24 ml). pH-værdien indstilledes til 3,0 med 28% phosphorsyre. Efter 1 time 25 hævedes reaktionsblandingens temperatur til 20°C. Heptan (56 ml) tilsattes langsomt, og den resulterende krystallinske titelforbindelse genvandtes ved filtrering. Udbyttet af titelforbindelsen var 3,0 g (50%).

30 Præparationseksempel 4

Benzhydryl-7-amino-3-chlormethyl-3-cephem-4-carboxylat (V)

Til en opslæmning af PCI,. (8,3 g, 40 mmol) i CH2CI2 (100 ml) sattes pyridin (3,2 g, 40 mmol), og blandingen omrørtes i 20 minutter ved 20°C. Til blandingen sattes benzhydryl-3-hydroxymethyl-7-35 phenylacetamido-3-cephem-4-carboxylat som fremstillet i præpara tionseksempel 3 (5,1 g, 10 mmol) under omrøring ved -40°C, i én portion. Blandingen omrørtes ved -10°C i 15 minutter og henstod

DK 161024 B

20 ved -10°C til -15°C i 7 timer. Til den afkølede opløsning (-20°C) sattes propan-1,3-diol (10 ml)/ og blandingen henstod ved -20°C i 16 timer og dernæst ved stuetemperatur i 20 minutter under omrøring. Den resulterende opløsning vaskedes med isvand (2 x 20 ml) 05 og mættet vandig NaCI (10 ml), tørredes over MgSC>4 og koncentreredes i vakuum. Den gummiagtige remanens (12 g) opløstes i en blanding af CHCIg og n-hexan (2:1), og underkastedes kromatografi under anvendelse af en silicagelsøjle (200 g) og det samme opløsningsmiddel som elueringsmiddel. Fraktioner indeholdende titelfor-10 bindeisen afdampedes i vakuum, og remanensen tritureredes med n-hexan, hvilket gav titelforbindelsen (2,1 g, 51%), der smeltede ved >110°C (dek.).

IR: vRBr 3400, 2800, 1785, 1725 cm"1.

EtOH

15 UV: λ 265 nm (E1% 160).

max 1cm

DMSO-d + CDCI 3,69 (2H, s), 4,43 (2H, s), 5,09 NMR: δ 6 3 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,24 (1H, d, J

Ppm = 4,5 Hz), 6,87 (IH, s), 7,3 (10H, 20 ^ m).

Præparationseksempel 5

Benzhydryl-3-chlormethyl-7-[(Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylaminothia- zol-4-yl)acetam?do]-3-cephem-4-carboxylat (Via) 25

Benzhydryl-7-amino-3-chlormethyl-3-cephem-4-carboxylat som fremstillet i præparationseksempel 4 (2,29 g, 5,52 mmol) i CH^CN (57 ml) behandledes med bis(trimethylsilyl)acetamid (BSA, 4,09 ml, 16,6 mmol) ved stuetemperatur i 50 minutter til dannelse af en klar opløsning. Til opløsningen sattes en syrechloridopføsning, der var 30 fremstillet ud fra (Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)- eddikesyre (IVa) (2,04 g, 4,60 mmol) og PCI^ (1,15 g, 5,52 mmol) i methylenchlorid (20 ml). Blandingen omrørtes ved stuetemperatur i 30 minutter, hældtes i koldt vand (200 ml) og ekstraheredes med ethylacetat (3 x 100 ml). De kombinerede ekstrakter vaskedes med 35 vandig NaCI, tørredes og inddampedes. Den tiloversblevne sirup (4 g) kromatograferedes successivt pi en silikagelsøjle (150 g) ved

DK 161024 B

21 eluering med 10:1 og 3:1 blandinger af toluen og ethylacetat. Fraktionerne indeholdende den ønskede forbindelse kombineredes og af-dampedes, hvilket gav 2,61 g (68%) af (Via) som et amorft pulver.

NMR : 6CDCI3 ppm 3,50 (2H, s), 4,02 (3H, s), 4,33 (2H, s), 05 4,98 (1H, d), 5,87 (1H, q), 6,65 (IH, s), 6,90 (1H, s), 7,3 (25 H, m).

Præparationseksempel 6

Benzhydryl-3-iodmethyl-7-f(Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylaminothia-10 zol-4-yl)acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (Vila)

En blanding af 3-chlormethyl-derivatet som fremstillet i præparationseksempel 5 (Via) (1,50 g, 1,79 mmol) og Nal (1,34 g, 8,93 mmol) i methylethylketon (30 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 1 time. Efter afdampning af opløsningsmidlet opløstes remanensen i 15 ethylacetat (100 ml) og vaskedes med vand, vandig Na2S2<D3 og vandig NaCI, tørredes og inddampedes, hvilket gav titelforbindelsen (Vila) (1,47 g, 89%) som et amorft pulver.

NMR : 6CDCI3 ppm 3,55 (2H, ABq), 4,00 (3H, s), 4,25 (2H, s), 4,97 (1H, d), 5,80 (1H, q), 6,65 (1H, 20 s), 6,90 (IH, s), 7,3 (25H, m).

Præparationseksempel 7

Benzhydryl-3-chlormethyl-7-r(Z)-2-ethoxy?m?no-2-(2-tritylam?nothia-zol-4-yl)acetam?do]-3-cephem-4-carboxylat (VIb) 25 Til en opløsning af (Z)-2-ethoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4- -yl)eddikesyre (IVb) (1,095 g, 2,4 mmol) i dichlormethan (20 ml) sattes phosphor-pentachlorid (500 mg). Efter omrøring i 1 time ved stuetemperatur sattes blandingen i én portion til en isafkølet opløsning af forbindelse (V) (1,083 g, 2,4 mmol) og BSA (1 ml) i di-30 chlormethan (20 ml). Efter omrøring i 0,5 time hældtes reaktionsblandingen i 10% vandig NaHCO^ (200 ml) og ekstraheredes med CHCIg (100 ml). Ekstrakten vaskedes med vand, tørredes over MgSO^ og inddampedes under reduceret tryk. Remanensen kromato-graferedes på en silikagelsøjle. Eluering med CHCI3 gav (Vlb) som 35 et amorft pulver, 1,76 g (86%).

rr\ri NMR : 6 u^l3 ppm 1,40 (3H, t, CH2CH3), 3,53 (2H, ABq, 2-CH2), 4,37 (2H, s, -CHgCl), 4,60 (2H,

DK 161024 B

22 q, -CHgCHg), 4,90 (1H, d, 6-H), 5,89 (1H, d, 7-H), 6,88 (1H, s, thiazol-H), 6,91 (1H, s, benzhydryl-CH).

05 Præparationseksempel 8

Diphenylmethyl-7-[(Z)-2-ethoxvimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-acetam?do]-3-iodmethyl-3-cephem-4-carboxylat (VIIb)

En blanding af (Vlb) som fremstillet i præparationseksempel 7 (1,07 g, 1,25 mmol) og Nal (562 mg, 2,75 mmol) i acetone (20 ml) 10 omrørtes i 1 time. Blandingen filtreredes og filtratet hældtes i vand og ekstraheredes med ethylacetat. Det organiske lag vaskedes successivt med 5% vandig Na^^Og, vand og mættet vandig NaCl, tørredes over MgSO^ og inddampedes, hvilket gav 1,04 g (89%) af forbindelse (VI Ib).

15- NMR : 6^uu,3 ppm 3,55 (2H, q, 2-CH2), 4,27 (2H, s, CH2Q, 5,02 (1H, d, 6-H), 5,87 (1H, d, 7-H), 6,68 (1H, s, thiazolring H), 6,93 (1H, s, benzhydryl-CH).

20 Eksempel 1 7-[(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(trimethy!-ammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (la)

En 1 M opløsning af trimethylamin i diethylether (1 ml, 1 mmol) sattes til en omrørt suspension af benzhydryl-3-iodmethyI-7-[(Z)-2-25 -methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamido]-3-cephem-4- -carboxylat (Vila) (468 mg, 0,5 mmol) i diethylether (30 ml), og blandingen omrørtes i 1,5 time. Det udfældede kvaternære salt (XVa) opsamledes ved filtrering (410 mg, 82% udbytte), og trifluor-eddikesyre (TFE) (3 ml) tilsattes. Denne blanding omrørtes i 1,5 30 time ved stuetemperatur og inddampedes dernæst til tørhed under reduceret tryk under 20°C. Remanensen tritureredes med ether, og det udfældede TFE-salt opsamledes ved filtrering (udbytte 365 mg), opløstes i en lille smule methanol og kromatograferedes på en kolonne af HP-20 harpiks (1,8 x 20 cm). Kolonnen elueredes med vand 35 (ca. 1 liter) og dernæst med 30% vandig methanol (0,5 I). Det methanoliske eluat inddampedes under reduceret tryk under 40°C, og remanensen frysetørredes til dannelse af den rå titelforbindelse

DK 161024 B

23 2 3 (udbytte 129 mg). Forholdet af Δ /Δ -isomere ? det rå produkt var 1:2, bestemt ved HPLC. Produktet rensedes ved HPLC ("Lichrosorb RP-18", 8 x 300 mm) elueret med 1/100M NH4H2PC>4 (pH 7,2):CH3OH = 85:15. HPLC-eluatet kromatograferedes pi en kolonne af HP-20 05 (1,8 x 15 cm) til fjernelse af det uorganiske salt. Kolonnen eluere- des med vand (0,5 I) og dernæst med 30% vandig methanol (0,5 I).

Det methanoliske eluat inddampedes under reduceret tryk under 40°C, og remanensen frysetørredes til dannelse af titelforbindelsen (la) som et amorft pulver. Udbytte 75 mg (33%, baseret på (Vila)).

10 Produktet dekomponerede gradvist over 160°C. Skønnet renhed 80%.

KBr IR: υ cm"1 3600-3000, 1775, 1660, 1610, 1540, 1350, 1030. max phosphatpuffer (1/15IVI, pH 7) 15 UV: λ nm(e) 235 (15.700), 257 max (15.400).

NMR: δ°2° ppm 3,25 (9H, s, N+(CH3)3), 4,10 (3H, s, OCH3), 5,47 (1H, d, 4Hz, 6-H), 5,96 (1H, d, 4Hz, 7-H), 7,10 (1H, s, thiazol-H).

20

Eksempel 2 7-f(Z)-2-(2-aminothiazo1-4-y1)-2-methoxyiminoacetamido1-3-rN,N-di- methy1-N-(2-hydrox.yeth,yT)ammonium1methy1-3-cephem-4-carbox.y1at (lb) 25 o

Den almene fremgangsmåde i eksempel 1 gentoges, bortset fra at den dér anvendte trimethylamin erstattedes af en ækvimolær mængde Ν,Ν-dimethylethanolamin. Det rå produkt havde et Δ :Δ - -forhold pi 1:2. Efter rensning opnåedes titelforbindelsen i 17% udbytte og dekomponerede over 160°C. Skønnet renhed 90%.

30

Eksempel 3 7-f(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyim?noacetamidol-3-(N,N-di- methyl-N-allylammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (le)

Den almene fremgangsmåde i eksempel 1 gentoges, bortset fra 35 at den dér anvendte trimethylamin erstattedes af en ækvimolær 2 3 mængde Ν,Ν-dimethylallylamin. Det rå produkt havde et Δ :Δ -for-

DK 161024 B

24 hold pi 1:4:5. Efter rensning opnåedes titelforbindelsen i 14% udbytte og dekomponerede over 150°C. Skønnet renhed 80%'.

Eksempel 4 05 7-f(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetam?do]-3-[N,N-di- methyl-N-(3-pyridylmethyl)ammonium]methyl-3-cephem-4-carboxylat (Id)

Den almene fremgangsmåde i eksempel 1 gentoges, bortset fra at den dér anvendte trimethylamin erstattedes af en ækvimolær 10 mængde 3-(dimethylaminomethyl)pyridin. Det ra produkt havde et 2 3 o o Δ :Δ -forhold på 1:4:3. Efter rensning opnåedes titelforbindelsen i 17% udbytte og dekomponerede over 170°C. Skønnet renhed 75%.

Eksempel 5 15 7-r(Z)-2-(2-aminoth?a2ol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido1-3-[N,N-di- methyl-N-(2-dimethylamjnoethyl)ammonium]methyl-3-cephem-4-carb-oxylat (le)

Den almene fremgangsmåde i eksempel 1 gentoges, bortset fra at den dér anvendte trimethylamin erstattedes af en ækvimolær 20 mængde 1,2-bis(dimethylamino)ethan. Det rå produkt havde et ' Δ :Δ -forhold på 1:1. Efter rensning opnåedes titelforbindelsen i 14% udbytte og dekomponerede over 150°C. Skønnet renhed 65%.

Eksempel 6 25 7-r(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido1-3-(N,N-di- methyl-N-ethvlammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (If)

Den almene fremgangsmåde i eksempel 1 gentoges, bortset fra at den dér anvendte trimethylamin erstattedes af en ækvimolær mængde Ν,Ν-dimethylethylamin. Det rå produkt havde et Δ :Δ - 30 -forhold pi 1:1. Efter rensning opnåedes titelforbindelsen i 15% udbytte og dekomponerede over 150°C. Skønnet renhed 77%.

Eksempel 7 7-r(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(N, N-di-35 ethyl-N-methylammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (I g)

Den almene fremgangsmåde i eksempel 1 gentoges, bortset fra at den dér anvendte trimethylamin erstattedes af en ækvimolær

DK 161024 E

25 2 3 o mængde diethylamin. Det rå produkt havde et Δ :Δ -forhold på 1:1.

Efter rensning opnåedes titelforbindelsen i 10% udbytte og dekompo-nerede over 150°C. Skønnet renhed 65%.

05 Eksempel 8 7-[(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-(trimethyl-ammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (Ih)

Den almene fremgangsmåde i eksempel 1 gentoges, bortset fra at benzhydryl-3-iodmethyl-7-[(Z)-2-methoxy?mino-2-(2-tritylamino-10 thiazol-4-yl)acetamido]-3-cephem-4-carboxylatet (Vila) erstattedes af en ækvimolær mængde af den tilsvarende ethoxyimino-forbindelse (VIIb) (fremstillet i præparationseksempel 8). Det rå produkt havde et Δ :Δ -forhold på 3:1. Efter rensning opnåedes titelforbindelsen i 3% udbytte og dekomponerede over 150°C. Skønnet renhed 70%.

15

Spektraldata for forbindelserne fra eksempel 2-8 (a) Infrarøde spektre (Kbr)

Alle produkterne gav lignende infrarøde spektre: 1770-1775 cm"1 (β-lactam C = 0), 1660 cm"1 (CONH), 1610 cm'1 (COO-).

20 (b) Ultraviolette spektre (1/15 M phosphatpuffer; pH 7)

Alle produkterne, bortset fra produktet fra eksempel 4, udviste lignende spektre: 235 nM (ε 15.700-16.400), 257 nM (ε 15.400-16.000). Forbindelsen fra eksempel 4 udviste: 235 nM (ε 17.600), 25 255 nM (ε 18.600, sh), 260 nM (ε 19.000), 266 nM (ε 17.900, sh).

(c) NMR-spektre (θ£θ) 30 35

DK 161024B

26

Kemiske skifteværdier (dpm)

For-

bindel- 6-H 7-H

- se ifølge N -CH °-°Η3 (1Η, d, (1H, d, thiazol-H

eksempel (s) (3H, s) 4-5 Hz) 4-5 Hz) (IH, s) Andre 2 3,20 (3H) 4,10 5,46 5,90 7,10 3.25 (3H) 3 3,08 (3H) 4,10 5,46 7,10 5,6-6,4 3.15 (3H) (4H, m,

10 7-H, CH

= ch2) 4 3,04 (3Η) 4,09 5,45 5,94 7,06 4,75 3,21 (3Η) (2H, s,

PyrCH„) 7,66 c 15 - (1H,d-d, 8&4 Hz,

Pyr-H) 8,12 (IH, d, 8 Hz,

Pyr-H) 8,74 20 (2H, s,

Pyr-H) 5 3,18 (3H) 4,10 5,45 5,90 7,10 2,50 3.25 (3H) (6H, s, n(ch3)2) pc 6 3,10 (3Η) 4,10 5,45 5,90 7,10 1,48 3.15 (3Η) (3H, t 7 Hz, ch2ch3) 7 3,05 (3Η) 4,10 5,44 5,95 7,10 1,45 (6H, t, 7 Hz, 30 CH2CH3) 8 3,25 (9H) — 5,50 5,97 7,10 1,45 (3H, t 7 Hz, ch2ch3) 35

DK 161024 B

27 2 3

Det har vist sig, at både Δ :Δ -forholdet og udbyttet af produktet kan forbedres, såfremt filtratet fra det oprindeligt udfældede kvaternære salt (XV) får lov at henstå i et kort tidsrum og genfiltreres gennem lejet af oprindeligt udvundet forbindelse (XV), 05 især såfremt dette genfiltreringstrin gentages adskillige gange.

Udbyttet kan også forøges noget, såfremt en lille smule af den oprindelige tertiære amin-reaktant sættes til dette filtrat. Dette er vist i det følgende eksempel, som er en variation af eksempel 1.

10 Eksempel 9 7- f (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl )-2-methoxyiminoacetamido1 -3-(trimethyl-ammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (la)

En opløsning af trimethylamin (1 M opløsning i ether, 10 ml) sattes i én portion til en omrørt opløsning af iodid-forbindelsen 15 (Vila) (4,68 g, 5 mmol) i ether (500 ml). Blandingen omrørtes i 10 minutter, og det udfældede kvaternære salt (XVa) opsamledes ved filtrering og vaskedes med en lille smule ether. Filtratet og vaskevæskerne forenedes og henstod ved stuetemperatur i yderligere 10 minutter, og det andet bundfald, som udskilte, opsamledes ved fil-20 trering på samme tragt, hvorpå det første bundfald holdtes som et leje. Filtratet filtreredes tre gange på samme måde med 10 minutters intervaller til frembringelse af det kvaternære salt (XVa) (3,58 g, 72% fra Vila). Til det endelige filtrat sattes en opløsning af trimethylamin (1M opløsning i ether, 2 ml), og den samme genfiltre-25 ringsoperation gentoges tre yderligere gange med 10 minutters intervaller til dannelse af yderligere XVa (0,56 g, 11%). Til det resulterende filtrat sattes yderligere 1 M trimethylaminopløsning (1 ml), og genfiltreringsoperationen gentoges yderligere to gange med 10 minutters intervaller til dannelse af et tredie udbytte af (XVa) 30 (0,134 g, 2,7%). Det totale udbytte af (XVa) var 4,27 g (86%).

En blanding af (XVa) (4,20 g, 4,22 mmol), anisol (1 ml) og TFE (40 ml) omrørtes i 1,5 timer ved stuetemperatur. Blandingen inddampedes under reduceret tryk under 20°C, og den mørke remanens tritureredes med isopropylether (300 ml) til fældning af 35 TFE-saltet (3,50 g), der opsamledes ved filtrering og tørredes under reduceret tryk. TFE-saltet opløstes i methanol (50 ml), behandledes med en lille smule trækul og filtreredes. Filtratet kon- 28

DK 161024 B

centreredes under reduceret tryk, og natrium-2-ethylhexanoat (1 M opløsning i ethylacetat, 15 ml) sattes til koncentratet- Blandingen fortyndedes med ethylacetat (300 ml) til fældning af den rå titelforbindelse (2,36 g, skønnet renhed 50%), der opsamledes ved filtre-05 ring, vaskedes med en lille smule ethylacetat og tørredes. Forholdet af Δ -isomer til Δ -isomer i det rå produkt var 1:4 (HPLC, "Lichro-sorb RP-18; mobil fase, 1/100 M ammoniumphosphatpuffer, pH 7 -CHgOH, 90:10; retentionstid, A2-isomer 6' 54", Δ^-isomer 8' 29").

Det rå produkt (2,36 g) opløstes i en lille smule vand og ren-10 sedes under anvendelse af HPLC (Waters Associates, System 500, PrepPAK 500/C^g; mobil fase, 7% methanol). HPLC-eluatet indeholdende produktet koncentreredes under reduceret tryk under 35°C, og koncentratet frysetørredes til dannelse af titelforbindelsen.

Udbytte 959 mg (42%, baseret på iodidet (Vila). Amorft pulver.

15 Skønnet renhed 80% (ved HPLC). Forholdet af Δ^-isomer til Δ^-iso-mer var 1:17. Produktet dekomponerede gradvist over 160°C.

20 25 30 35

Claims (3)

1. Anal ogi fremgangsmåde til fremstilling af cephalosporinderivater med den almene formel 5 0 S-t-C--ϋ-mT\ I R3 (ϊ) //^ v ,__1 ΘΙ \nR2 CK CH—N —CH H„N XS 0R T Λ 1 I J 10 cot^ R 2 3 hvori R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner methyl eller ethyl, og R^ betegner methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, allyl, 2-butenyl, 3-butenyl, 2-hydroxy-15 ethyl, 3-hydroxypropyl, 2-(dimethylamino)ethyl, pyridy1methyl, pyridylethyl, benzyl eller phenethyl, samt non-toxiske, farmaceutisk acceptable salte og sol vater deraf, KENDETEGNET ved, AT man a) omsætter en forbindelse med formlen 20 f| /S \ r~o-a—NHi—Γ (XIV) B2HN^\S/ \qR2 ch2i COOB1 25 2. hvori R har den ovenfor angivne betydning, B betegner en kon- ventionel carboxyl beskyttende gruppe, og B betegner en konventionel aminobeskyttende gruppe, med en tertiær amin med den almene formel 30 «3 CH,-N<^ J \ 4 35 hvori R og R har de ovenfor angivne betydninger, til fremstilling af en forbindelse med formlen 4 DK 161024 B , - COOB ,14 5 ·K hvorefter man fjerner alle beskyttende grupper ved hjælp af konventionelle midler, og/eller om ønsket omdanner forbindelsen med formel (I) til et non-toxisk, farmaceutisk acceptabelt salt eller solvat deraf, eller b) acylerer en forbindelse med formlen 10 'VT'f'Y Pr3 <xv1) CH2—CH3

15 COOB1 r4 eller et N-silyl-derivat deraf, hvori B* betegner hydrogen eller en konventionel carboxyl beskyttende gruppe, og R3 og R4 har de ovenfor angivne betydninger, med et acylerende derivat af en syre med 20 formi en n—T-C-COOH // \\ II B2mj'S-/^ ^OR2 25 2. hvori B er en konventionel aminobeskyttende gruppe, og R har den ovenfor angivne betydning, til fremstilling af en forbindelse med formlen 30 “-jrfi-®-"TY"5"! ^r3 ' (»> // \\L L I θ (

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af forbindelser med formlen 5 »-rC--i!--NH-|-3 (I ) IZI ©I ^-OR2 <y CH2—N —CH3 cocØ R4 10 1 2 3 hvori R betegner hydrogen, R betegner methyl, R betegner methyl eller ethyl, og R4 betegner methyl, ethyl, 2-hydroxyethy1, 2- (dimethylamino)ethyl, allyl eller pyridylmethyl, eller et non--toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt eller sol vat 15 deraf, KENDETEGNET ved, AT man omsætter en blanding af benz-hydryl-7-amino-3-chlormethyl-3-cephem-4-carboxylat og bis-(tri-methylsilyl)acetamid, med et syrechlorid af (Z)-2-methoxyimino-2--(2-tritylaminothiazol-4-yl)-eddikesyre i et organisk opløsningsmiddel til dannelse af det tilsvarende 3-chlørmethyl-3-cephem-derivat, 20 hvorefter man omsætter dette 3-chlormethyl-3-cephem-derivat med et alkalimetaliodidsalt i et organisk opløsningsmiddel til dannelse af det tilsvarende 3-iodmethyl-3-cephem-derivat, yderligere omsætter dette 3- iodmethyl-3-cephem-derivat i et organisk opløsningsmiddel med trimethylamin eller Ν,Ν-dimethylethanolamin eller Ν,Ν-dimethylallyl- 25 amin eller 3-(dimethylamino-methyl)pyridin eller 1,2-bis(dimethyl -amino)ethan eller Ν,Ν-dimethylethyl-amin eller diethylmethylamin, til dannelse af det tilsvarende kvaternære salt, og endelig afblokerer det kvaternære salt til dannelse af 7-[(Z)-2-(2-ami nothi azol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(trimethyl-30 ammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (la) eller 7-[(Z)-2-(2-ami nothi azol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[N,N-di -methyl-N-(2-hydroxyethyl)ammonium]methyl-3-cephem-4-carboxylat (Ib) 35 eller 7-[(Z)-2-(2-ami nothi azol-4-yl)-2-methoxyimi noacetamido]-3-[N,N-di - methyl-N-allylammonium]methyl-3-cephem-4-carboxylat (Ic) eller DK 161024B 7-[(Z)-2-(2-aminothi azol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[N,N-di -methyl-N-(3-pyridylmethyl)ammonium]methyl-3-cephem-4-carboxylat (Id) eller 5 7-[(Z)-2-(2-ami nothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[N,N-di - methyl-N-(2-dimethylaminoethyl)ammonium]methyl-3-cephem-4-carb-oxylat (le) eller 7-[(Z)-2-(2-ami nothi azol-4-yl)-2-methaxyimi noacetamido]-3-[N,N-di -10 methyl-N-ethylammonium]methyl-3-cephem-4-carboxylat (If) eller 7-[(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]~3-[N,N-di-ethyl-N-methylammonium]methyl-3-cephem-4-carboxylat (Ig) og/eller om ønsket omdanner forbindelserne (la) til (Ig) til et non-15 -toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt eller solvat deraf.

2 A / \0R2 dV ^TCVl2— I?-CH3 b^hn or i 1 L COOB hvorefter man fjerner alle beskyttende grupper ved hjælp af konventionelle midler, og/eller om ønsket omdanner en forbindelse med formel (I) til et non-toxisk, farmaceutisk acceptabelt salt eller 35 DK 161024 B solvat deraf.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af forbinde! sen 7-[(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3--(trimethylammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (Ih), KENDETEG-20 NET ved, AT man omsætter en blanding af benzhydryl-7-amino-3--chlormethyl-3-cephem-4-carboxylat og bi s(trimethylsilylJacetamid med et syrechlorid af (Z)-2-ethoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yI)--eddikesyre i et organisk opløsningsmiddel til dannelse af det tilsvarende 3-chlormethyl-3-cephem-derivat, dernæst omsætter dette 25 3-chlormethyl-3-cephem-derivat med et al kalimetal ioidsalt til dannelse af det tilsvarende 3-iodmethyl-3-cephem-deriyat, dernæst yderligere omsætter dette 3-iodmethyl-3-cephem-derivat med trimethylamin i et organisk opløsningsmiddel til dannelse af det tilsvarende kvaternære salt, og endelig afblokerer dette kvaternære salt til dannelse af 30 titel forbi ndel sen (Ih). 35