DK151253B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 2-benzylphthalazin-4-yleddikesyrederivater - Google Patents

Description

151253

Den foreliggende opfindelse angårenanalogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 2-benzyl-phthalazin-4--yleddikesyrederivater, nærmere betegnet sådanne derivater, som har den egenskab at hæmme enzymet aldosereductase in vivo.

5

Enzymet aldosereductase er ansvarligt for den katalytiske omdannelse af aldoser, f.eks. glucose og galactose til de tilsvarende aldi= toler, f.eks. henholdsvis sorbit og galactit. Alditoler gennemtræn-ger cellemembraner dårligt og når de først er dannet, er de tilbøje- 2 151253 lige til kun at blive fjernet ved yderligere metabolisme. Som følge heraf er alditoler tilbøjelige til at akkumulere i celler, hvor de er dannet og forårsage en stigning i indre osmotisk tryk, som kan være tilstrækkelig til at ødelægge eller skade funktionen af celler-5 ne selv. Desuden kan forøgede alditolniveauer resultere i abnormale niveauer af deres metabolitter, der selv kan skade cellefunktioner. Enzymet aldosereductase har imidlertid en forholdsvis lav substrat= affinitet, dvs. det er kun effektivt i nærværelse af forholdsvis store koncentrationer af aldose. Disse store koncentrationer af al= 10 dose er til stede ved de kliniske betingelser for diabetes (for meget glucose) og galactosemia (for meget galactose). Som følge heraf er inhibitorer for enzymet aldosereductase nyttige til reduktion eller forebyggelse af udviklingen af de perifere virkninger af diabe= tes eller galactosemia, som kan skyldes delvist akkumulering af sor= 15 bit henholdsvis galactit. Disse perifere virkninger er f.eks. macu= lar ødem, katarakt, retinopati eller skadet nerveledning.

Det er kendt at l-benzyl-2-oxoquinol-4-ylalkansyrederivater er in= hibitorer for enzymet aldosereductase (gb- patent nr. 1.502.312). Det 20 har nu vist sig at visse 2-benzyl-l-oxophthalazin-4-yleddikesyrede= rivater defineret i det følgende, uventet også er inhibitorer af enzymet aldosereductase. Denne konstatering er særlig overraskende i betragtning af de mange forskelle mellem 2-oxoquinolin og l-oxo= phthalazinringsystemerne. De beslægtede phthalazinderivater 2-ben= 25 zyl- og 2-(2-pyrid-2-ylethyl)-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddi= kesyre sammen med deres methyl og ethylestere er kendt og deres virkninger på blods størkningssystem er omtalt (Sh. Feldeak m.fl., Khim.Farm.Zh., 1970, 4, 22-26, Chemical Abstracts, 1970, 73, 77173), men i modsætning til forbindelserne fremstillet ifølge den foreliggende opfin-30 delse, der er defineret nedenfor er ingen af disse kendte phthala= zinderivater inhibitorer for aldosereductase in vivo i orale doser på 100 mg/kg eller mindre.

Ifølge opfindelsen fremstilles 2-benzyl-phtalazin-4-yleddikesyre-35 derivater med formlen: , CHoCO.R1 ?5 t ^ X ly ii^r 7Jb I J 1 aJ 1 l8 I i2 3 151253 hvor R1 er et hydroxy eller benzcyloxyradikal eller et C1_Zj-alkoxy= radikal, der eventuelt bærer et N-morpholino eller di-C, ,-alkyla- n «2 Λ C I. 4 minoradikal, og substituenterne R , R , RH og B? på benzenringen A er valgt blandt en af følgende kombinationer: 5 o 3 4 a) R er fluor eller methoxy, R er hydrogen, R er chlor, brom eller 5 jod og R er hydrogen eller halogen,

. 2 3 5 L

b) R , R og R^er hydrogen og R er brom eller jod, 10 p o e c) R er hydrogen ' eller fluor, R og R3 er ens eller forskellige halogen atomer, og R^ er hydrogen, og O Λ 4 d) R er hydrogen eller fluor, R3 og R4 er ens eller for- 15 e c skellige halogen atomer, og R er hydrogen, og 2 3 5 e) . R er hydrogen, R og R uafhængigt af hinanden er fluor ellerchlor, 4 og R er chlor, brom eller jod, 20 6 7 8 og hvorpå benzenringen B, R , R og R uafhængigt er valgt blandt 6 7 hydrogen, halogen, C^_ 4-alkyl og C^_ 4~alkoxy, eller R og R tilsammen udgør et C, .-alkylendioxydiradikal, forudat at mindst en af 6 7 8 ^ R , R og R er hydrogen, og X er oxygen eller svovl, eller et farmaceutisk anvendeligt baseadditionssalt af en forbindelse af formlen I, 25 2 hvor R er hydroxy, eller et farmaceutisk anvendeligt syreadditionssalt af en forbindelse af formlen I, hvor R^ er et C^_ ^alkoxyradikal, som bærer et N-morpholino eller di-C^_4-alkylaminoradikal.

3Q Forbindelserne af formlen I er derivater af l,2-dihydro-l-oxo-(el ler-thioxo)-phthalazin-4-yleddikesyre, der nummereres i den foreliggende beskrivelse som følger: ch2co2h 35

B I 2 II

7 Vy

X

hvor X er oxygen eller svovl.

* 151253

Det vil forstås at forbindelserne af formlen I kan udvise tautome= risme til dannelse af en struktur af formlen: CH.CO.R1 R3 R6 ^ X I R4 5 B Å la R^VY \CH2^\j^\R3 R8 X R2 10 og det forstås at den foreliggende opfindelse omfatter tautomere af formlen I (endo-tautomer) eller af formlen la (exo-tautomer) eller blandinger deraf.

En særlig værdi for R-^ eller R , hvor den er et halogenatom, er 15 f.eks. et fluor, chlor, brom eller Jodatom og især et chlor eller bromatom.

6 7 S

En særlig værdi for R , R' eller R når den er et halogenatom, er f.eks. et fluor, chlor, brom eller Jodatom, en særlig værdi 20 når den er et C-^^-alkylradikal,er f.eks. et methylradikal og når den er et C^^-alkoxyradikaljer det f.eks. et methoxy eller ethoxy= radikal.

En særlig værdi for R1 når den er C^^-alkoxyradikaljer f.eks.

25 methoxy eller ethoxyradikal og når den er et C .-alkoxyradikal, j_—ij.

som bærer et N-morpholino eller di-C^_^-alkylaminoradikal, er det f.eks. et 2-(N-morpholino)ethoxy eller 2-(N,N-dimethylamino)ethoxy= radikal.

6 7 30 En særlig værdi for R og R når de tilsammen udgør et C^_^-alky= lendioxydiradikal, er f.eks. et methylendioxy, ethylendioxy eller isopropylidendioxydiradikal.

Særlige kombinationer af R2, R3, R4 og R3, der er af speciel inte-35 resse, er,når benzenringen A f.eks. er et 2-fluor-4-brom-, 2-fluor- 4-chlor-, 2-fluor-4-Jod-, 2-fluor-4,5-d.ibrom-, 2-methoxy-4-chlor-, 4-brom-, 4-Jod-, 3,5-dichlor, 3-chlor-4-brom-, 3,4-dichlor-, 3 >4-dibrom- eller et 3,5-dichlor-4-brom-phenylradikal.

6 7 8 40 Særlige kombinationer af R , R og R , der har speciel interesse, er f.eks. når benzenringen B er usubstitueret eller bærer et 6- 5 151253 fluor, 6-chlor, 6-methyl, 7-fluor, 7-chlor, 7-methyl, 7-methoxy, 8-fluor, 8-methyl eller 8-ethoxyradikal eller et 6,7-dichlor eller 6,7-methylendioxydiradikal.

5 Et særligt baseadditionssalt af en forbindelse af formlen I, hvor R1 er et hydroxyradikal, er f.eks. et alkalimetal eller Jordalkali= metalsalt, f.eks. et natrium, kalium, calcium eller magniumsalt, et aluminium eller ammoniumsalt eller et salt af en organisk base, som giver en farmaceutisk anvendelig kation, f.eks. et salt af tri= 10 ethanolamin.

Et særligt syreadditionssalt af en forbindelse af formlen I, hvor R1 er et C-^-alkoxyradikal, som bærer et N-morpholino eller di-C= ^_^-alkylaminoradikal, er f.eks. et hydrohalogenid, f.eks. et hy= 15 drochlorid eller hydrobromid eller et sulfat.

Specielle grupper forbindelser, der særlig foretrækkes omfatter de forbindelser af formlen I, hvori: 20 1) R1 er et hydroxyradikal, 2 ·* κ 4 2) R er et fluorradikal, R og R^ er hydrogen og R er et chlor, brom eller jod atom, •z Λ 25 3) R^ og R begge uafhængigt af hinanden er chlor, brom eller jod- 2 5 atomer, og R og R er hydrogen, c «7 o 4) R , R' og R er hydrogen eller 30 5) X er oxygen og i hver af grupperne (1)-(5) resten af R1, R^, R^, R^, R^, R^, R^, R® og X har enhver af de ovenfor definerede værdier eller de der er defineret i enhver anden gruppe sammen med de farmaceutiske 35 salte deraf, afhængende af karakteren af R1.

Specielle forbindelser fremstillet ifølge opfindelsen er beskrévet i de følgende eksempler og af' disse foretrækkes følgende: 6 151253 2-( 2-fluor-4-brombenzyl) -1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre, 2-( 2-f luor-4- jodbenzyl) -1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre, og 2-(3-chlor-4-brombenzyl)-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddike= syre sammen med de farmaceutisk anvendelige baseadditionssalte deraf.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at man a) omsætter en forbindelse af formlen: CH-CO.R1 ρβ T ^

B l III

AkSA

k8 'o med et halogenid af formlen: il5

HalCHg A yIV

AAi5 hvor Haler chlor, brom ellæ jod, i nærværelse af en egnet base, b) til fremstilling af en forbindelse af formlen 1/ hvor R^ er hydroxy, hydrolyserer en ester af formlen;.

6 CH2CO RS

_>5 R"rArVcH2HTVR4 v r8 x 2)=/ 3

ΈΓ' \R

9 hvor R er et C1_4alkoxyradikal eller et radikal af formlen; 7 151253 _/Η5

-OCH2 /Λ r4 VI

ΈΓ R3 c) omsætter en forbindelse med formlen: CO R1

B O VII

R7 R 0 eller en geometrisk isomer deraf med en hydrazin af formlen; R5 H2N.NH-CH2 —^A 'y R VI11

rVV

d) til fremstilling af en forbindelse af formlen I, hvor X er oxygen, og R1 er hydroxy eller C-j^-alkoxy, katalytisk dekomponerer en diazoketon med formlen: i COCHN, Y TCHi/TyR4 R2 ' 'R3 i nærværelse af en forbindelse af formlen QH, hvor Q er hydroxy eller C^^-alkoxy, 8 151253 e) til fremstilling af en forbindelse af formlen I, hvor benzenringen B bærer et C^_4-alkoxyradikal, omsætter en forbindelse af formlen X, hvor benzenringen bærer en halogen-substituent, med et alkalimetal Cj^-alkoxid, og hvorefter, 5 når der kræves en forbindelse af formlen I, hvori R^ er andet end hydroxy, en forbindelse af formlen I,hvori R^ er hydroxy eller et reaktionsdygtigt derivat deraf, bringes til at reagere med en forbindelse af formlen R^H, hvor R1^ har samme betydning som R1 bortset fra hydroxy, 10 under anvendelse af kendte forestringsmetoder, og hvorefter, når der kræves en forbindelse af formlen I, hvori X er svovl, en forbindelse af formlen I, hvori X er oxygen, thieres under anvendelse af kendte thieringsmetoder, og hvorefter, når der kræves et farmaceutisk anvendeligt salt, en forbindelse af 15 1 formlen I, hvori R er hydroxy, bringes til at reagere med en base, som giver en farmaceutisk anvendelig kation, eller en forbindelse af formlen I, hvori R1 er C^^-alkoxy, som bærer et N-morpholino- eller di-N,N-C^_4-alkylaminoradikal, bringes til at reagere med en syre, som giver en farmaceutisk anvende- on lig anion, og hvori X, benzenringene A og B og subs ti tuenterne derpå har enhver af de betydninger, der er defineret ovenfor.

Fremgangsmåde (a) udføres fortrinsvis i et opløsningsmiddel eller for-tyndingsmiddel, f. eks. ethanol, dimethylformamid, dimethylsulphoxid eller vand og fremskyndes bekvemt ved opvarmning i intervallet, f.eks. 40-110°C.

En særlig egnet base er f.eks. et alkalimetalhydrid, carbonat, hydro-30 xid eller C^_4~alkoxid, f.eks. natrium eller kaliumhydrid, carbonat, hydroxid, methoxid eller ethoxid, idet det vil forstås, at når der anvendes et hydrid er et ikke vandigt opløsningsmiddel, f.eks. dimethyl-formamid eller dimethylsulphoxid nødvendig, og når der anvendes et alkoxid anvendes fortrinsvis en C^_4-alkanol, f.eks. methanol eller 35 ethanol som opløsningsmiddel.

9 151253

Det er klart, at når der i fremgangsmåden anvendes en forbindelse af formlen III, hvor R1 er et hydroxyradical, er det nødvendigt at mindst to molærækvivalenter af basen er tilstede, da det første mo= lærækvivalent reagerer med carboxylsyreradikalet i en sådan forbindelse. Til en sådan forbindelse af formlen III foretrækkes det desuden at anvende et hydroxylisk opløsningsmiddel ved fremgangsmåden for at ledsagende produktion af den tilsvarende ester formindskes.

Hydrolysen ifølge fremgangsmåde (b) udføres i nærværelse af syre eller base, f.eks. i nærværelse af mineralsyre, f.eks. saltsyre eller et alka-limethaljydroxid eller carbonat, f.eks. natrium eller kaliumhydroxid eller carbonat. Et alkalimetalcarbonat foretrækkes, når benzenringen B bærer en labil substituent, f.eks. et 8-fluorradikal. Hydrolysen udføres i nærværelse af vand,og et opløsningsmiddel eller fortyn-15 dingsmiddel, f.eks. eddikesyre, methanol, ethanol eller dioxan kan også være tilstede. Hydrolysen kan udføres ved stuetemperatur, f.eks. ved 18-25°C, men fremskyndes bekvemt ved opvarmning f.eks. til 35-110°C.

Fremgangsmåde (c) udføres fortrinsvis i et vandigt fortyndingsmiddel 2Q eller opløsningsmiddel, f.eks. vandig dioxan, ethanol eller dime=, thylformamid og i nærværelse af en base, f.eks. natrium eller kali= umbicarbonat. Fremgangsmåden udføres også bekvemt ved opvarmning til 40-110°C.

25 Den nødvendige katalysator til fremgangsmåde (d) kan tilvejebringes med f.eks. kolloidt sølv eller sølvbenzoat og anvendes især i nærværelse af en base, f.eks. triethylamin, pyridin eller s-collidin. Fremgangsmåden udføres fortrinsvis i nærværelse af et fortyndingsmiddel eller opløsningsmiddel, f.eks. vand, en C-^-alkanol, f.eks. methanol eller ethanol, tetrahydrofuran eller dioxan og udføres bekvemt ved anven-30 delse af et overskud af forbindelsen af formlen Q.H. eventuelt sammen med tetrahydrofuran eller dioxan.

Fremgangsmåden kan fremskyndes ved opvarmning f.eks. ved opvarmning til en temperatur i intervallet 40-110°C.

10 151253 ' Reaktionen i fremgangsmåde (e) udføres fortrinsvis i et opløsningsmiddel eller fortyndingsmiddel, f.eks. i et overskud af den tilsvarrende C^_^-alkanol, f.eks. methanol eller ethanol og kan fremskyndes ved opvarmning til f.eks. 40-110°C eller bekvemt ved reaktionsbehand-5 lingens kogepunkt.

Udgangsmaterialerne kan i almindelighed fremstilles på standardmetoder indenfor den het er ocykliske kemi, der er velkendte, f.eks. som beskrevet af N R Patel i "The Chemistry of Heterocyclic Compounds" bind 27 udgivet af Int^rscience, New York. Typiske for disse frem-10 gangsmåder fer de der anvendes til. fremstilling af diazaketoneme af formlerne IX, dér kræves til fremgangsmåde (d) og er vist i skema 1, hvori de anvendte reagenser er følgende: (i) n-BuLi, Et20 eller (MeOCH2)2, -10-0°C.

(ii) diethoxylat, 0-5°C.

(iii) H+/H20/dioxan, 90-100°C.

15 (iv) K2C03/KMh04/H20, 100°C.

(v) H2NNH2, H20, 90-100°C.

(vi) som fremgangsmåde (a).

(vii) S0(Hal.)2, (Hal. = Cl eller Br) eller (C0C1)2· 20 (viii) overskud af CH2N2/Et20, 2 og hvori for overskuelighedens skyld de individuelle radikaler R -8 R ikke er vist.

11 151253 ,, (ni- ør <^ /Me Me' Me · Me Me

Me XII

(iii)

v/ ?02H j°2H

ffYi

^A^o2h νγΗ XIV

t(iv) <ν1)

CH I f 2H

__/Λ OX, (vii) ^ ^ CO·Hal·

XIII

(viii) CO.CH.N2

Skema 1 ix i2 151253 I mange tilfælde er det bekvemt at omdanne syren af formlen XIV til dens methylester, f.eks. ved reaktion af dens natriumsalt med methyl= jodid i dimethylformamid før udførelse af alkyleringen med benzyl= halogenid [trin(vi)]. Denne modifikation er beskrevet i eksemplerne 5 8, 9 og 31-34 og nødvendiggør en sædvanlig hydrolyse til den tilsva rende syre efter alkyleringen og før trin (vii) udføres.

Det.vil forstås at afhængende af karakteren af substituenterne, der skal indføres i benzenringen B kan enten 2-acyltoluolen XI eller 2-10 —phenyloxazolin XII derivaterne være de mest egnede udgangsmaterialer. Det vil ligeledes forstås,at det kan være bekvemt at undgå isolerin_ gen og rensningen af flere af mellemprodukterne i skema 1, f.eks. lithium-ogoxalatoderivaterne fremstillet i trin (i) og (ii). Ved udførelse af fremgangsmåde (d) ovenfor er det på lignende måde be-15 kvemt at fremstille diazoketon IX in situ ud fra syrehalogenidet XIII.

Udgangsmaterialerne af formel III til fremgangsmåde (a) kan fås ved analogi med fremgangsmåde (c), dvs. ved reaktion af en forbindelse 20 af formel VII med hydrazinhydrat, og derpåjhvis der ønskes en forbindelse af formel III,hvori er andet end et hydroxyradikal, omdan nelse af phthalazin-4-yleddikesyreproduktet som den frie syre eller syrechloridet til den ønskede ester på sædvanlige velkendte måder.

25 Nogle af udgangsmaterialerne af formel VII kan fås af det tilsvarende substituerede phtalsyreanhydrid med formlen:

fB li XV

30 * Ja b ved kondensation med eddikesyreanhydrid, f.eks. i nærværelse af na= trium eller kaliumacetat og i et overskud af kogende eddikesyrean= hydrid. De kan imidlertid alle fås ved en Wittig-reaktion mellem det 35 ønskede phthalsyreanhydrid af formel XV og (carbethoxymethylen)tri= phenylphosphoran i et passende opløsningsmiddel, f.eks. l,2-dimeth= oxyethan eller tetrahydrofuran, idet reaktionen bekvemt fremskyndes ved opvarmning, f.eks. til reaktionsblandingens kogepunkt. Det vil forstås at i nogle tilfælde kan produktet fra Wittig-reaktionen være 40 den geometriske isomer af formlen: 151253 r1-cos.

Η%ίί?Ν/\ B P VIIa

«''tV

R° .0 og ikke den,der er vist i formel VII. Alternativt kan dannes en blanding af begge de geometriske isomere. Enhver isomer eller en blanding deraf kan anvendes i fremgangsmåde (c). Det skal også bemærkes, Q 7 6 at når R og en af R' Og R er hydrogen, giver Wittig-reaktionen stil- 5 lingsisomere afhængende af hvilket af de to carbonylradikaler i 8 phthalsyreanhydridet .-XV, der reagerer. Når R er andet end hydrogen dominerer en enkelt stillingsisomer, dvs. den der dannes ved reaktion

O

af carbonylradikalet, der er længst fra R .

10 De farmaceutisk anvendelige salte, der er defineret ovenfor kan fremstilles på sædvanlige måder ved reaktion med den ønskede base eller syre, som giver en farmaceutisk anvendelig kation eller anion.

Den egenskab at hæmme enzymet aldosereductase kan påvises ved føl-15 gende standardlaboratoriumprøve. Rotter gøres diabetiske ved dosering med streptozotocin og doseres derefter dagligtmed forsøgsforbindelsen i 5 dage. Dyraiedræbes så,og øjenlinserne og hoftenerverne fjernes. Efter en standardoparbejdningsmetode bestemmes det resterende sorbitniveau i hvert væv ved gas-væskekromatografi efter 20 omdannelse til polytrimethylsilylderivateme. Hæmning af aldosereductase in vivo bedømmes så ved at sammenligne de resterende sorbit= niveauer i væv fra den doserede diabetiske gruppe rotter med niveauerne hos en ikke doseret gruppe diabetiske rotter og ikke doseret normal gruppe rotter.

25

Alternativt kan anvendes en modificeret prøve ved hvilken de strep= tozotocininducerede diabetiske rotter doseres dagligt med forsøgsforbindelsen i 2 dage. Efter 2-4 timer fra den sidste dosis,dræbes dyrene og hoftenerverne fjernes og bedømmes for resterende sorbit-30 niveau, som ovenfor beskrevet.

Aktive forbindelser i enhver af disse prøver reducerer resterende sorbitniveauer til niveauer, der svarer til de i normale ikke-dose-rede rotter. I almindelighed frembringer forbindelserne af formel 14 ' ' 151253 på 100 mg/kg eller mindre. Til illustration frembragte 2-(2-fluor~ 4-brombenzyl)-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre således et resterende sorbitniveau i hoftenerven på ca. 60% af det der fremkom i en kontrol af ikke-doserede rotter efter oral dosering af 10 5 mg/kg i 5 dage. Der blev ikke sporet nogen åbenlyse giftige eller andre uønskede virkninger med forbindelserne af formel I i doser på 100 mg/kg ved ovennævnte prøver.

Den egenskab at hæmme enzymet aldosereductase kan også påvises in LO vitro. Renset aldosereductase isoleres således på den måde af okselinser. Den procentiske hæmning af dette enzyms evne in vitro til at reducere aldoser til polyvalente alkoholer,og især til at reducere glucose til sorbit, forårsaget af en forsøgsforbindelse, bestemmes så under anvendelse af standardspectrophotometriske metoder.

L5 Ved denne prøve viser de forbindelser af formel I, hvori R^" er et hydroxyradikal betydelig hæmning af enzymet aldosereductase i en kon- —8 -6 centration i intervallet 10” til 10 M eller mindre. Til illustration havde f.eks. 2-(2-fluor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-oxophthala= —8 zin-4-yleddikesyre en Kj. på 2,0 x 10 M.

20 Når en forbindelse fremstillet ifølge opfindelsen anvendes til at frenbringe en virkning på enzymet aldosereductase i varmblodede dyr kan den administreres først og fremmest oralt i en daglig dosis på 2 til 50 mg/kg, hvilket hos mennesket er ækvivalent med en total daglig dosis i inter-25 vallet 20 til 750 mg pr. menneske indgivet i opdelte doser om nødvendigt.

Forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen kan administreres i form af farmaceutiske præparater, der · omfatter en forbin-30 delse af fortie 1 I eller et ' farmaceutisk •'anvendeligt salt deraf sammen- med et. farmaceutisk '·’ anvendeligt ' - fortyndingsmiddél eller-bærestof·» Særligt foretrukne farmaceutiske præparater er de, der er i en form 35 egnet til oral administration, f.eks. tabletter, kapsler, suspensioner eller opløsninger, der kan fås på sædvanlige metoder og eventuelt kan indeholde sædvanlige fortyndingsmidler, bærestoffer eller andre hjælpestoffer. Andre foretrukne præparater er de, som er i en form eenet til narenteral administration, f.eks. sterile iniicerba- 15 151253 rektal administration, f.eks. suppositorier. Doseringsformerne vil i almindelighed indeholde fra 10 mg til 250 mg af en forbindelse af formel I eller en ækvivalent mængde af et farmaceutisk anvendeligt salt deraf pr. dosisenhed.

5 Præparaterne kan også indeholde et eller flere andre midler,. der, kan : have en nyttig virkning ved behandlingen af diabetes eller galactosemia, f.eks. et hypoglytø&misk middel, såsom tolbutamid.

10 Flere af forbindeIsemerfremstillet ifølge opfindelsen har foruden de aldosere= . ductasehæmmende egenskaber antiflamatoriske/analgetiske egenskaber af den type,der haves af ikke-steroide antiinflammatoriske midler, såsom indomethacin, naproxen og ketoprofen. Forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen kan derfor desuden være - nyttige til behandling af smer-15 tefulde inflammatoriske ledsygdomme, såsom rheumatoidarthritis, oste= oarthritis og ankylosisspondylitis. I denne forbindelse forudses det, at de kan administreres primært oralt i en daglig dosis i intervallet 10-150 mg/kg. De antiinflammatoriske egenskaber kan påvises ved velkendte standardlaboratoriumprøver med rotter. F.eks. giver 2-(2-20 fluor-4-brombenzyl)-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre og 2-(3-chlor-4-brombenzyl)-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre begge anledning til betydelig hæmning af carageenininduceret ødem ved den prøve, der er udviklet af Winter m.fl. [Proceedings of the Society of Experimental Biology (New York), 1962, 111, 554] uden no-25 get tegn på åbenlys toksicitet.

Opfindelsen illustreres af følgende eksempler, hvori: · (i) alle inddampninger blev udført ved roterende fordampning i vakuum 30 med mindre andet er anført, (ii) alle operationer blev udført ved stuetemperatur med mindre andet er anført og stuetemperatur er i intervallet 18-26°C, 35 (iii) petroleumsether (kogepunkt 60-80°C) omtales som "petrol (60-80)" og andre petroleumsetherfraktioner tilsvarende, (iv) smeltepunkter af eddikesyrerer i mange tilfælde forbundet med dekomponering, 40 16 1.51253 (vi) udbytter, hvor disse er anført skal tjene til illustration og repræsenterer ikke nødvendigvis det maksimalt opnåelige.

Eksempel 1.

5 2,0 g l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre blev sat til en op løsning af 0,9 g natriumhydroxid i 50 ml methanol. Der fremkom en klar opløsning ved svag opvarmning, og den blev behandlet med 2,6 g 4-brombenzylbrornid. Blandingen blev så opvarmet under tilbagesvaling i 3 timer og derpå inddampet. Remanensen blev behandlet med 60 ml 10 vand, og den fremkomne opløsning blev ekstraheret med ether (3 x 60 ml). Den vandige fase blev så syrnet til pH 2 med koncentreret saltsyre, og den sure blanding blev ekstraheret med 150 ml ethylacetat. Ekstrakterne blev vasket med 50 ml vand, tørret (MgSO^) og inddampet. Det fremkomne faste stof blev omkrystalliseret af en 1:4 v/v-blanding 15 af ethylacetat og petrol (60-80) til dannelse af 2-(4-brombenzyl)- l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre (0,6 g), smeltepunkt 179-181°C.

Eksempel 2.

20

En blanding af 11,5 g ethyl-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat og natriumhydrid (2,7 g, 50% w/w dispersion i mineralolie) i 125 ml dimethylformamid blev omrørt ved 60°C i 1 time under nitrogen. Den fremkomne opløsning blev afkølet til stuetemperatur, og derefter blev 25 der tilsat 15,0 g 4-brom-3-chlorbenzylbromid, og blandingen blev om-rørt ved 60°C i 2 timer. Efter afkøling til 25°C blev reaktionsblandingen hældt i 500 ml vand. Den fremkomne vandige blanding blev ekstraheret med 400 ml ethylacetat. Ekstrakterne blev vasket med vand, tørret (MgSO^) og inddampet til dannelse af et fast stof, der blev 30 krystalliseret af propan-2-ol til dannelse af ethyl-2-(3-chlor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat (7,3 g), smeltepunkt 142-145°C.

Eksempel 3-4.

35

Ved anvendelse af lignende fremgangsmåder som beskrevet i eksempel 2, fremkom følgende forbindelser af formlen: CH2C02Et f~\

a\) XVIII

i7 151253 hvori ringen B er usubstitueret, af ethyl-l,2-dihydro-2-oxophthal= azin-4-ylacetat og det ønskede bromid med formlen:

5 Br-CH2-XIX

10 Eks, Substituenter på Udbytte Smp. Omkrystallisations-benzolringen A (%) (°C) opløsningsmiddel

3 x3,4-dichlor 40 139-141 i-PrOH

4 2-fluor-4-brom 60 114 EtOH

15 x 3/4-dichlorbenzylchlorid anvendt som udgangsmateriale.

Eksempel 5.

En opløsning af 7,0 g ethyl-2-(3-chlor-4-brombenzyl)-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat i 70 ml ethanol indeholdende 7,0 g kalium= hydroxid blev opvarmet under tilbagesvaling i 30 minutter. Opløsningen blev så hældt i 250 ml vand, og den vandige opløsning blev ekstraheret med ether (2 x 150 ml). Den vandige fase blev syrnet til pH 2 25 med koncentreret saltsyre. Det faste stof, der således blev udfældet, blev fraskilt, vasket med vand, tørret i vakuum og derefter omkrystalliseret af en 6:2:3 v/v/v-blanding af toluen, propan-2-ol og petrol (60-80) til dannelse af 2-(3-chlor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-oxo= phthalazin-4-yleddikesyre (3,9 g), smeltepunkt 186°C.

30

Eksempel 6-7.

Under anvendelse af lignende fremgangsmåder som beskrevet i eksempel 5, fremkom følgende forbindelser af formlen: 35 ch2co2h

(b || I __, XX

Wv*-/r\ 18 151253 hvori ringen B er usubstitueret, ved hydrolyse af den tilsvarende ethylester af f oml en (1) :

Eks, Substituenter på Udbytte Smp. Omkrystallisations- benzolringen A (.%) (°C) . opløsningsmiddel

6 3,4-dichlor 60 175-176 toluOl-i-PrOH

(2:1) 7 2-fluor-4-brom 64 x184-185 methanol KDenne forbindelse kan krystallisere i polymorfe former, dvs. en form med smeltepunkt 184-185°C (af methanol indeholdende noget vand) 5 og en fom med smeltepunkt 180-182°C (af to krystallisationer af tør methanol).

Eksempel 8.

10 En omrørt blanding af 1,9 g 2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-methoxy-l,2-di= hydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyre i 10 ml thionylchlorid inde= holdende 0,1 ml dimethylformamid blev opvarmet under tilbagesvaling i 3 timer. Den fremkomne opløsning blev så inddampet. Remanensen blev opløst i tør toluol, og opløsningen inddampet. Denne procedure 15 blev udført tre gange til dannelse af 2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-meth= oxy-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyrechlorid i et hoved= sageligt kvantitativt udbytte som et fast stof, der havde et tilfreds= stillende IR spektrum.

20 En opløsning af ovenstående syrechlorid i 50 ml tør tetrahydrofuran blev sat dråbevis til en omrørt opløsning af diazomethan i 200 ml tør ether afkølet til 0°C /fremstillet som beskrevet af J.A. Moore (0r= ganic Syntheses 1961, 41, 16) af bi s-(N-methyl-N-nitroso)terephtha= lamid (10 g)7· Efter endt tilsætning blev blandingen omrørt yderligere 25 og fik lov at opvarme til stuetemperatur i løbet af 2 timer. Blandin= gen blev så fraskilt ved filtrering. Remanensen blev vasket med 20 ml tør tetrahydrofuran, og de forenede vaskevæsker og filtrat blev ind= dampet til dannelse af 2-(3,4-dichlorbenzyl)-4-(a-diazo)acetyl-7-methoxy-1,2-dihydro-l-oxophthalazin som et fast stof, der blev anvendt 30 uden rensning eller karakterisering.

19 151253

En opløsning af 0,2 g sølvbenzoat i 1 ml triethylamin blev langsomt dråbevis sat til en opløsning af ovennævnte 4-(α-diazo)acetylderivat i 50 ml absolut ethanol og 30 ml tetrahydrofuran og opvarmet under tilbagesvaling. (Efter hver tilsætning skete der brusning, og denne 5 fik lov at dø hen, før der blev tilsat yderligere opløsning). Efter endt tilsætning blev reaktionsblandingen omrørt yderligere og opvar= met under tilbagesvaling i 30 minutter og derpå filtreret, medens den var varm. Filtratet blev inddampet, og den fremkomne remanens opløst i 200 ml ethylacetat. Ethylacetatopløsningen blev vasket med 10 vand (3 x 100 ml), tørret (MgSO^) og inddampet. Remanensen blev ren= set ved kromatografi på silica (100 g) under anvendelse af en stigen= de koncentration af ethylacetat i toluol som eluant. Derved fremkom af de rigtige fraktioner [bedømt ved tyndtlagskromatografi(TLC) på silicaplader under anvendelse af ethylacetat-toluol (1:3 v/v) som 15 eluant] 0,9 g ethyl-2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-methoxy-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat, smeltepunkt 129-130°C.

Det nødvendige udgangsmateriale blev fremstillet som følger: 20 (a) En blanding af 10,0 g 7-methoxy-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4- ylcarboxylsyre, 15,0 g natriumbic arbonat og 15,P ml methyljodid i 200 ml tør dimethylformamid blev omrørt ved stuetemperatur i 16 timer. Blandingen blev så hældt i 600 ml vand. Det udfældede faste stof blev fraskilt, vasket først med vand og derpå kold methanol og der= 25 efter omkrystalliseret af methanol til dannelse af 8,6 g methyl-7-methoxy-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylat, smeltepunkt 222-225°C.

(b) En opløsning af 8,29 g af methylesteren fremstillet ovenfor i 30 200 ml tør dimethylformamid blev behandlet med natriumhydrid (1,75 g

50% w/w dispersion i mineralolie). Blandingen blev omrørt ved 60°C

1 en time, afkølet til stuetemperatur, og der blev tilsat 7,0 g 3,4-dichlorbenzylchlorid. Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer og derpå hældt i 600 ml vand. Det dannede faste stof blev fra= 35 skilt, vasket med vand, tørret i vakuum og derpå omkrystalliseret af en 1:3 v/v blanding af propan-2-ol og petrol (60-80) til dannelse af 9,0 g methyl-2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-methoxy-l,2-dihydro-l-oxophtha= lazin-4-ylcarboxylat, smeltepunkt 144-146°G.

20 151253 (c) En opløsning af 9,0 g af ovenfor fremstillede methylester i 100 ml ethanol og 100 ml vand indeholdende 10,0 g kaliumhydroxid blev op= varmet under tilbagesvaling i 4 timer. Den fremkomne opløsning blev så fortyndet med 200 ml vand og syrnet til pH 2 med koncentreret salt= 5 syre. Det derved udskilte faste stof blev fraskilt, vasket med vand, tørret i vakuum og omkrystalliseret af en 1:1 v/v blanding af propan- 2-ol og dimethylformamid til dannelse af 6,1 g 2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-methoxy-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyre, smeltepunkt 238-240°C. [7-methoxy-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyre 10 fremkom som et fast stof, smeltepunkt 229-230°C, ved fremgangsmåden ifølge Vaughan m.fl. (J.Amer.Chem.Soc. 1946, 68, 1314)].

Eksempel 9 15 Ved anvendelse af samme fremgangsmåde som beskrevet i eksempel 8 men ved at gå ud fra 2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-chlor-l,2-dihydro-l-oxo= phthalazin-4-yl-carboxylsyre (A) fremkom i et udbytte på 8%, ethyl- 2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-chlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat som et fast stof med et tilfredsstillende MR spektrum.

20

Det nødvendige carboxylsyrederivat (A) som udgangsmateriale fremkom ved anvendelse af en lignende metode (a)-(c), som den der er beskrevet for udgangsmaterialet i eksempel 8, men ved at gå ud fra 7-chlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyre (B). De nødvendige mellem= 25 produkter havde følgende smeltepunkter: fra trin (a): methyl-7-chlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarbox= ylat, smeltepunkt 255-257 C (omkrystalliseret af 2:1 v/v methanol: dimethylformamid), fra trin (b): methyl-2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-30 chlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylat, smeltepunkt 178-180°C [omkrystalliseret af 1:3 v/v propan-2-ol: petrol (60-80)] fra trin (c): 2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-chlor-l,2-dihydro-l-oxophthala= zin-4-ylcarboxylsyre, smeltepunkt 260-262°C (omkrystalliseret af 1:1 v/v methanol: dimethylformamid).

35 [carboxylsyren (B) fremkom som et fast stof, smeltepunkt 24l-243°C, på lignende måde som fremgangsmåden ifølge Vaughan m.fl. (J.Arner. Chem.Soc. 1946, 68, 1314), men ved at gå ud fra 4-chlor-2-methylace= tophenol].

2i 151253

Eksempel 10-11

Ved at anvende en lignende metode som beskrevet i eksempel 5 men ved at gå ud fra den ønskede ethylester fremkom følgende syrer: (Eksempel 10) : 2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-methoxy-l,2-dihydro-l-oxo= phthalazin-4-yleddikesyre, smeltepunkt 198-200°C (omkrystalliseret 5 af propan-2-ol), udbytte 50$. (Eksempel 11): 2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-chlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre, smeltepunkt 203-205°C [omkrystalliseret af 1:1 v/v propan-2-ol : petrol (60-80)], udbytte 43$.

10 Eksempel 12-13

Ved at anvende en lignende fremgangsmåde som beskrevet i eksempel 2 fremkom under anvendelse af det ønskede benzylbromid eller chlorid følgende estere: (Eksempel 12): ethyl-2-(2-fluor-4-chlorbenzyl)-1,2-15 dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat, smeltepunkt 102°C (omkrystalli= seret af petrol (60-80) og derpå af ethanol], udbytte 45$.(Eksempel 13): ethyl-2-(2-fluor-4-iodbenzyl)-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat, smeltepunkt 113°C [omkrystalliseret af petrol (60-80), udbytte 50$].

20

Eksempel 14-16

Ved at anvende en lignende fremgangsmåde som beskrevet i eksempel 5, men ved at gå ud fra den ønskede ethylester fremkom følgende sy= 25 rer: (Eksempel 14): 2-(2-fluor-4-chlorbenzyl)-l,2-dihydro-l-oxophthal= azin-4-yleddikesyre, smeltepunkt 193-194°C (omkrystalliseret af 3:1 v/v ethanol:vand), udbytte 63$. (Eksempel 15): 2-(2-fluor-4-iodben= zyl)-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre, smeltepunkt 189°C, omkrystalliseret af 3:1 v/v ethanol:vand), udbytte 55$.(Eksempel 16) 30 K. 2-(3-chlor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-thioxophthalazin-4-yleddi= kesyre, smeltepunkt 197-199°C (omkrystalliseret af propan-2-ol), ud= bytte 25$.

[*Hydrolyse udført med vandig methanolisk natriumhydroxidopløsning 35 under tilbagesvaling i 10 minutter].

Eksempel 17 22 151253 oxophthalazin-4-ylacetat og 2,5 g phosphorpentasulfid i 100 ml xylol blev omrørt og opvarmet under tilbagesvaling i 1 time. Reakti= onsopløsningen blev så afkølet til stuetemperatur, 25 ml ethylacetat blev tilsat, og blandingen blev filtreret gennem 20 g kromatografisk 5 'silica, og det fremkomne filtrat blev inddampet, og det tilbageblevne faste stof blev omkrystalliseret af ethanol til dannelse 1,1 g ethyl- 2- (3-chlor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-thioxophthalazin-4-ylacetat, smeltepunkt 124-126°C.

10 Eksempel 18 2,5 g 3-chlor-4-brombenzylhydrazin blev sat til en omrørt blanding af 3- οχο-ΔΙ,α-phthalaneddikesyre (også betegnet phthalideneddikesyre) (1,92 g) og 2,0 g natriumbicarbonat i 50 ml dioxan og 25 ml vand.

15 Blandingen blev så opvarmet under tilbagesvaling i 3 timer, afkølet til stuetemperatur og hældt i 200 ml vand. Den vandige opløsning blev ekstraheret med ether (3 x 100 ml), og den vandige fase blev syrnet med koncentreret saltsyre til pH 2. Det faste stof, som aflej= redes, blev opsamlet, vasket godt med vand, tørret i vakuum og derpå 20 omkrystalliseret 2 gange af en blanding af toluol, isopropanol og petrol (60-80) (6:2:3 v/v/v) til dannelse af 0,23 g 2-(3-chlor-4-brombenzyl)-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre, smeltepunkt 184-186°C.

25 Eksempel 19-24

Ved anvendelse af en lignende fremgangsmåde som beskrevet i eksem= pel 2 men ved at anvende det ønskede benzylbromid af formel XIX fremkom følgende forbindelser af formel XVIII, hvori ringen B er 30 usubstitueret: 23 151253

Eksempel Substituenter på Udbytte Smelte- Omkrystallisa- benzolringen A (%) punkt ( C) tionsopløsningsmiddel

5 19 3,4-dibrom 44 140-142 i-PrOH

20 2-fluor-4,5- 21 129-130 EtOAc dibrom - - XO 21 3,5-dichlor 36 100-101 EtOAc

22 3,5-dichlor- 19 146-147 EtOH

4-brom

23 2-methoxy-4- 22 138 i-PrOH

15 chlor 24 4-0od 43 106-107 i-PrOH/petrol 1:3 (60-80) > 20

Eksempel 25-26 2,29 g ethyl-4-methyl-3-oxo-Ala-phthalanacetat blev opvarmet og omrørt under tilbagesvaling i 200 ml toluol mider dråbevis tilsæt= 25 ning af en opløsning af 1,9 g 3,4-dichlorbenzylhydrazin i 50 ml toluol. Blandingen blev yderligere opvarmet under tilbagesvaling i 3 timer, afkølet og inddampet. Den faste rest blev omkrystalliseret af 1:2 v/v isopropanol og petrol (60-80) til dannelse af ethyl-2-(3,4-dichlorbenzyl)-8-methyl-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat (eksempel 25) (1,4 g), smeltepunkt 134-137 g C.

På lignende måde men ved at gå ud fra ethyl-4-fluor-3-oxo-Ala-phthalanacetat fremkom ethyl-2-(3,4-dichlorbenzyl)-8-fluor-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat (eksempel 26), smeltepunkt 177-35 178°C. [omkrystalliseret af 1:2 v/v isopropanol/petrol (60-80)] i et udbytte på 37%.

På lignende måde men ved at gå ud fra en 1:1 blanding af 5-methyl- mm d »vi λ 7 _ Λ Π λ/ »sVi 4*V> λΊ «ιλλ λ λ4·« ·4* ·Ρν> μ τλΙ^λτλ λ ίλ Π · Ί Τ—ν I ομΗ ί ν» η* βτ 24 151253 ethyl-6-methyl- og 7-methyl-2-(3,4-dichlorbenzyl)-1,2-dihydro-l-ox9phthalazin-4-ylacetat (eksempel 27), smeltepunkt 120-122°C (omkrystallisation af isopropanol) i et udbytte på 33%.

De nødvendige udgangsmaterialer blev fremstillet som følger: 5 En opløsning, af 7,35 g 3-fluorphthalsyreanhydrid og 17,5 g (carb= ethoxymethylen)triphenylphosphoran i 200 ml tør 1,2-dimethoxyethan blev omrørt og opvarmet under tilbagesvaling i en atmosfære af nitrogen i 16 timer. Opløsningsmidlet blev så inddampet, og remanensen adsorberet på kromatografisk silicagel (20 g). Denne silicagel blev 10 så sat ovenpå en søjle af samme silicagel (300 g), og søjlen blev elueret med toluol. Eluatet blev styret ved TLC (Si02gel : eluant 9:1 v/v toluol/ethylacetat), og de første fraktioner indeholdende UV synligt materiale blev forenet og inddampet. Det fremkomne faste stof blev omkrystalliseret af isopropanol til dannelse af 2,3 g 4-15 fluor-3-oxo-41oc-phthalanacetat, smeltepunkt 101-103°C, som kræves til eksempel 26.

På lignende måde fremkom ethyl-4-methyl-3-oxo-41a-phthalanacetat (der kræves til eksempel 25) som et fast stof, smeltepunkt 84-76°C, 20 i et udbytte på 56% efter omkrystallisation af isopropanol, idet der blev gået ud fra 3-methylphthalsyreanhydrid.

På lignende måde fremkom 1:1 blandingen af ethyl-5-methyl- og 6-methyl-3-οχο-Δ la-phthalanacetat (der kræves til eksempel 27) i et 25 udbytte på 40% som et fast stof, smeltepunkt 84-86°C,(omkrystallise= ret af isopropanol), idet der blev gået ud fra 4-methylphthalsyrean= hydrid.

Eksempel 28-30 30

Ved anvendelse af en lignende fremgangsmåde som beskrevet i eksempel 2 fremkom følgende forbindelser af det ønskede substituerede l,2-di= hydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat og 2-fluor-4-brombenzylhydrazin: 35 Eksempel 28; ethyl-2-(2-fluor-4-brombenzyl)-8-fluor-1,2-dihydro-l-oxophthalazin- 25 151253 4-ylacetat, smeltepunkt 128-130°C. [omkrystalliseret af 1:3 v/v isopropanol/petrol (60-80)] i et udbytte på 36%.

Eksempel 29: 5 ethyl-2-(2-fluor-4-brombenzyl)-8-methyl-l,2-dihydro-l-oxophthalazin- 4-ylacetat, smeltepunkt 120-122°C [omkrystalliseret af 1:3 v/v iso= propanol/petrol (60-80)] i et udbytte på 43%.

Eksempel 30: 10 ethyl-2-(2-fluor-4-brombenzyl)-6,7-methylendioxy-l,2-dihydro-l-oxo= phthalazin-4-ylacetat, smeltepunkt 163-165°C (omkrystalliseret af ethylacetat) i et udbytte på 56%.

15 De nødvendige udgangsmaterialer fremkom på følgende måde: (i) Ethvl-8-methyl-1.2-dihydro-l-oxophthalazin-4-vlacetat (til eksem= BSLiff·?.

20 En opløsning af 3,5 g ethyl-4-methyl-3-oxo-Aloc-phthalanacetat i 100 ml ethanol blev omrørt og opvarmet under tilbagesvaling under dråbevis tilsætning af hydrazinhydrat (15 ml af en 1M opløsning i ethanol). Efter endt tilsætning blev blandingen yderligere omrørt og opvarmet under tilbagesvaling i 3 timer og fik derpå lov at afkø= 25 le til stuetemperatur. Det faste stof, som aflejredes, blev opsamlet og vasket godt med petrol (60-80) og omkrystalliseret af isopropanol/ petrol (60-80) til dannelse 1,0 g ethyl-8-methyl-l,2-dihydro-l-oxo= phthalazin-4-ylacetat, smeltepunkt 197-199°C.

30 (ii) Ethyl-8-fluor-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat (til eksem= pel 28)

Denne ester fremkom som et fast stof, smeltepunkt 207-210°C, (om= krystalliseret af ethylacetat) i et udbytte på 51% af ethyl-4-fluor-35 3-oxo-Ala-phthalanacetat og hydrazinhydrat ved anvendelsen af den metode, der er beskrevet ovenfor i (i).

(iii) Ethyl-6.7.-methylendioxy-1,2-dihvdro-l-oxophthalazin-4-ylacetat 26 151253

Denne ester fremkom som et fast stof, smeltepunkt 226-228°C, i et udbytte på 70% af ethyl-5,6-methylendioxy-3-oxo-Ala-phthalanacetat 5 (A) og hydrazinhydrat. Phthalanacetatet (A) fremkom selv som et fast stof, smeltepunkt 189-191°C (omkrystalliseret af ethanol) i et ud= bytte på 64% ud fra 4,5-methylendioxyphthalsyreanhydrid under anven= delse af en fremgangsmåde analog med den, der er beskrevet for de tilsvarende mellemprodukter i eksemplerne 25-27. (Denne fremgangsmå= 10 de er baseret på fremgangsmåden ifølge Knight og Porter, Tetrahedron Letters, 1977, 4543-4547).

Eksempel 31-54 15 Ved at anvende en analog fremgangsmåde til den, der er beskrevet i eksempel 8, fremkom følgende estere af formlen XVIII af de tilsvarende udgangsmaterialer: 20 Eksempel Substitu= Substitu= Udbytte Smelte= Omkrystallisations= enter- på . enter-på (%) punkt opløsningsmiddel ringen B ringen A (· C) '

31 . 7-fluor 3,4- 26 ... 160-162 i-PrOH

25 dichlor 32 6,7-3,4- 70K 204-205 CHCl,/EtOAc dichlor . dichlor ^(1:2)

' 33 6-chlor 3,4- .10 143-146 EtOH

dichlor .

34 6-fluor 2-fluor- 60* 121-123 EtOH

,30 4-broæ x: Diazomethan udviklet af bis(N-methyl-N-nitroso)terephthalamid ved den forbedrede fremgangsmåde ifølge Moore og Reed (Organic 35; Syntheses, Collected. Vol. 5, side 351-355).

De nødvendige phthalazin-4-ylcarboxylsyrer som udgangsmaterialer fremkom som følger: 40 (i) 2-(3.4-dichlorbenzyl)-7-fluor-1.2-dihvdro-l-oxophthalazin-4- ylcarboxylsyre 27 151253 7-fluor-l, 2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyre (fremkommet som et fast stof, smeltepunkt 24l-243°C, i et udbytte på 52% på lignende måde som ifølge Vaughan m.fl. J.Arner.Chem.Soc. 1946, 68, 1314) blev omdannet til sit natriumsalt og bragt til at reagere med jodmethan 5 ved fremgangsmåden, der er beskrevet i afsnit (a) i eksempel 8 til dannelse af den tilsvarende methylester som et fast stof, smelte= punkt 234-237°C, (omkrystalliseret af 3:1 v/v methanol/dimethylform= amid) i et udbytte på 68%. Denne ester blev så alkyleret med 3,4-dichlorbenzylchlorid ved fremgangsmåden, der er beskrevet i afsnit 10 (b) i eksempel 8, til dannelse af me thyl-2-( 3,4-dichlorb'enzyl)-7- fluor-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylat, smeltepunkt 147-149°C. [Omkrystalliseret af 1:1 v/v toluol/petrol (60-80)] i et ud= bytte på 68%. Denne ester blev så hydrolyseret under anvendelse af en blanding af vandig kaliumcarbonat og dioxan under anvendelse af 15 fremgangsmåden i eksempel 36 til dannelse af 2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-fluor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyre som et fast stof, smeltepunkt 222-224°C (omkrystalliseret af isopropanol) i et udbytte på 87%.

20 (ii) 2-(3.4-dichlorbenzyl)-6.7-dichlor-l.2-dihydro-l-oxophthalazin- 4-ylcarboxvlsvre.

Denne syre fremkom på analog måde som i afsnit (i) ovenfor, og de relevante mellemprodukter, smeltepunkter, opløsningsmidler og udbyt= 25 ter var følgende: 6,7-dichlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyre, smelte= punkt 294-296°C, (omkrystalliseret af DMF), udbytte 42%, tilsvaren= de methylester: smeltepunkt 234-236°C, (omkrystalliseret af DMF), 30 udbytte 51%.

Methyl-2-(3»4-dichlorbenzyl)-6,7-dichlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin- 4-ylcarboxylat, smeltepunkt 155-156°C (omkrystalliseret af DMF), ud= bytte 85%.

35 2-(3«4-dichlorbenzyl)-6,7-dichlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyre, smeltepunkt 240-242°C (omkrystalliseret af ethanol), udbytte 62%.

28 1 5 1 2 5 3 (iii) 2-(3,4-dichlorbenzyl)-6-chlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin--4-vicarboxylsvre,

En opløsning af butyllithium i hexan (165 ml af en 1,6 M opløsning) 5 blev langsomt sat til en omrørt opløsning af 2-(4-chlorphenyl)-4,4-dimethyl-2-oxazolin (50,0 g fremstillet ved fremgangsmåden ifølge Meyers m.fl. J.Org.Chem., 1974, 39, 2787) i 600 ml natriumtørret ether holdt ved -5 til 0°C og under en atmosfære af tør argon. 0m= røring blev fortsat ved denne temperatur i 30 minutter efter endt 10 tilsætning, og opløsningen blev så sat langsomt til en omrørt opløs= ning af 326 ml tør diethyloxalat i 500 ml ether holdt ved 0°C. Luft og vand blev udelukket under overførslen ved anvendelse af en atmos= fære af tør argon. Reaktionsblandingen blev yderligere omrørt efter endt tilsætning, og fik lov at opvarme til stuetemperatur i løbet af 15 en time. Den etheriske blanding blev så vasket med vand (2 x 150 ml), tørret (MgSO^) og inddampet under reduceret tryk (10 mmHg), indtil alt overskud af diethyloxalat var fjernet. Remanensen blev opløst i 500 ml dioxan, og opløsningen blev sat til 500 ml 5N saltsyre. Blan= dingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 18 timer, inddampet til 20 det halve rumfang, og den resterende opløsning filtreret. Filtratet blev indstillet til pH 8 ved tilsætning af hydrazinhydrat, og opløs= ningen blev opvarmet til 90°C i 30 minutter og.derpå syrnet til pH 4 med koncentreret saltsyre. Blandingen blev afkølet, og det faste stof, som udskilte sig, blev opsamlet ved filtrering, vasket med vand 25 (2 x 500 ml.) og tørret i vakuum over phosphorpentoxid til dannelse af 21,0 g 6-chlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyre.

Denne-syre blev suspenderet i 250 ml DMF, og blandingen blev behand= let med 21,0 g natriumbicarbonat og 40 ml jodmethan. Den forenede 30 blanding blev omrørt natten over og derefter fortyndet med 250 ml vand. Det faste stof, som aflejrede sig, blev opsamlet, vasket med vand (2 x 200 ml) og omkrystalliseret af 2:1 v/v isopropanol/DMF til dannelse af 17,0 g methyl-6-chlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin- 4-ylcarboxylat, smeltepunkt 248-250°C.

35

Denne ester blev så bragt til at reagere med 3,4-dichlorbenzylchlorid på analog måde som beskrevet i afsnit (i) og (ii) ovenfor. Der frem= kom så methyl-2-(3,4-dichlorbenzyl)-6-chlor-l,2-dihydro-l-oxophthala= zin-4-ylcarboxylat, smeltepunkt 168-170°C (omkrystalliseret af tolu= 40 151253 29 ol) i et udbytte på 45%. Denne ester blev så hydrolyseret som beskre= vet i afsnit (i) ovenfor til dannelse af 2-(3,4-dichlorbenzyl)-6- t chlor-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylsyre, smeltepunkt 222-223°C (omkrystalliseret af ethanol) i et udbytte på 60%.

5 (iv) 2-(2-fluor-4-brombenzyl)-6-fluor-l.2-dihydro-l-oxophthalazin- 4-vlcarboxylsyre.

Denne syre^fremkom på analog måde som i afsnit (iii) ovenfor, og de 10 relevante mellemprodukter, smeltepunkter, opløsningsmidler og udbyt= ter er følgende:

Methyl-6-fluor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylcarboxylat, smelte= punkt 221-223°C (omkrystalliseret af 2:1 v/v methanol/DMF), udbytte 15 15%.

Methyl-2-(2-fluor-4-brombenzyl)-6-fluor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin- 4-ylcarboxylat, smeltepunkt 131-134°C (omkrystalliseret af methanol), udbytte 51%.

20 2-(2-fluor-4-brombenzyl)-6-fluor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yl= carboxylsyre, smeltepunkt 210-211°C (omkrystallaiserét af isopropa= nol), udbytte 70%.

25 Eksempel 35

Under anvendelse af en lignende fremgangsmåde som beskrevet i eksem= pel 17 fremkom ethyl-2-(2-fluor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-thioxo= phthalazin-4-ylacetat, smeltepunkt 97-99°C (omkrystalliseret af etha= 30 nol) i et udbytte på 22% ved thiering af ethyl-2-(2-fluor-4-bromben= zyl)—1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat.

Eksempel 36-39 35 En blanding af 1,5 g kaliumcarbonat, 16 ml vand, 50 ml dioxan og 1,0 g ethyl-2-(2-fluor-4-brombenzyl)-8-fluor-1,2-dihydro-l-oxophthalazin- 4-ylacetat blev opvarmet under tilbagesvaling i 24 timer og derefter inddampet. Remanensen blev opløst i 100 ml vand, og opløsningen va= sket med ether (2 x 100 ml). Den vandige fase blev syrnet til pH 2 30 151253 ved tilsætning af koncentreret saltsyre. Det faste stof, som dannedes, blev opsamlet ved filtrering, vasket med vand og omkrystalliseret af en 7:1:5 v/v/v blanding af toluol/isopropanol/petrol (60-80) til dan= nelse af 0,5 g 2-(2-fluor-4-brombenzyl)-8-fluor-l,2-dihydro-l-oxo= 5 phthalazin-4-yleddikesyre (eksempel 36), smeltepunkt 173-175°C.

Ved at anvende en analog fremgangsmåde og gå ud fra de ønskede ethyl= estere fremkom følgende eddikesyrederivater: 10 Eksempel 37: 2-(3,4-dichlorbenzyl)-7-fluor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddike= syre, smeltepunkt 201-202°C [omkrystalliseret af 1:2 v/v ethylacetat/ petrol (60-80)]»udbytte 90%.

15

Eksempel 38: 2-(3,4-dichlorbenzyl)-6,7-dichlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yl= eddikesyre, smeltepunkt 204-205°C (omkrystalliseret af 5:1 v/v me= 20 thanol/DMF), udbytte 76%.

Eksempel 39: 2-(3,4-dichlorbenzyl)-6-chlor-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddei= 25 kesyre, smeltepunkt 208-209°C (omkrystalliseret af isopropanol), ud= bytte 55%.

Eksempel 40-52 30 Ved at anvende en lignende fremgangsmåde som beskrevet i eksempel 5 fremkom følgende eddikesyrederivater af formel i ved hydrolyse af de tilsvarende ethylestere med kaliumhydroxid: 35 31 151253

Eksempel Substitu= Substitu= Udbytte Smelte= Omkrystallisa= ent på enter på (%) punkt tionsopløsnings= ring B ring A ' (°C) middel 5· 4o ingen 4-jod 64 178-180 i-PrOH/petrol (60-80) (1:2)

41 ingen 3,4-di= 61 187-189 i-PrOH

brom

42 ingen 2-fluor- 71 184-186 i-PrOH

4,5-di= iU brom

43 ingen 3,5-di= 60 219-220 i-PrOH

chlor-4- brom

44 ingen 2-meth= 55 183-184 i-PrOH

oxy-4- 15 chlor 45 8-fluor 3,4-di= 68 143-145 EtOAc/toluol chlor (1:2) 6- methylK 3,4-di= 1

46 + chlor y 43 182-184 i-PrOH

7- methyl 3,4-di= (

20 ** chlor J

47 8-methyl 2-fluor- 37 195-197 i-PrOH/petrol 4-brom (60-80) (1:2) 48 8-methyl 3,4-di= 44 203-205 i-PrOH/petrol chlor (60-80) (1:2)

49 6,7- 2-fluor- 70 209-210 i-PrOH

methyl= 4-brom endioxy

50 6-fluor 2-fluor- 72 187-188 i-PrOH

4-brom

51 8-ethoxy* 3,4-di= 65 204-206 i-PrOH

chlor 30 x 1:2 blanding af 6-methyl og 7-methylderivaterne.

36X exo-tautomer ifølge NMR.

På lignende måde fremkom 2-(2-fluor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-35 thioxophthalazin-4-yleddikesyre (eksempel 52) som et fast stof, smel^ tepunkt 194-196°C (omkrystalliseret af methanol) i et udbytte på 30% ved hydrolyse af den tilsvarende ethylester med vandig methanolisk natriumhydroxidopløsning.

40 = 32 151253

Eksempel 55 1,8 g ethyl-2- (3 , 4-dichlorbenzyl)-8-fluor-1,2-dihydro-l-oxophthala= zin-4-ylacetat blev sat til en opløsning af 1,5 g natrium i 150 ml tør ethanol. Den fremkomne opløsning blev opvarmet under tilbagesva= ling i 3 timer og derpå inddampet. 100 ml vand blev sat til remanen= 5 sen, og det fremkomne faste stof blev opsamlet ved filtrering og tørret til dannelse af 0,5 g ethyl-2-(3,4-dichlorbenzyl)-8-ethoxy-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat.

Eksempel 54 10 10 ml acetylchlorid blev sat til 150 ml omrørt methanol til dannelse af en opløsning af hydrogenchlorid i methanol og methylacetat. 2,1 g 2-(2-fluor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre blev sat til denne opløsning, og blandingen blev opvarmet under til= 15 bagesvaling i 18 timer og derpå afkølet til stuetemperatur. Det fa= ste stof, som udkrystalliserede, blev fraskilt ved filtrering og om= krystalliseret af methanol til dannelse af 1,4 g 2-(2-fluor-4-brom= benzyl)-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat, smeltepunkt 151-153° C.

20

Eksempel 55-57

En opløsning af 1,65 g 2-(2-fluor-4.brombenzyl)-l,2-dihydro-l-oxo= phthalazin-4-ylacetylchlorid [fremstillet in situ ved opvarmning af 25 1,6 g af den tilsvarende syre under tilbagesvaling med 2,5 ml oxa= lylchlorid og 0,1 ml DMF i 30 ml tør benzol i 3 timer og derpå ind= dampe blandingen azeotropisk med tør toluol] blev fremstillet i 20 ml methylenchlorid. Denne opløsning blev så sat dråbevis til en is= afkølet omrørt opløsning af 1,5 N-(2-hydroxyethyl)morpholin og 2 ml 30 triethylamin i 100 ml methylenchlorid. Den omrørte blanding fik så lov at nå stuetemperatur i løbet af 18 timer, blev derpå vasket med vand (2 x 100 ml) og derpå ekstraheret med 2’x 50 ml 2N saltsyre.

Syreekstrakterne blev vasket med ether (2 x 100 ml) og de etheriske ekstrakter kasseret. Den vandige fase blev gjort basisk til pH 10 med 35 kaliumcarbonet og blev så ekstraheret med ethylacetat (2 x 100 ml). Disse ekstrakter blev vasket med vand(2 x 100 ml), tørret (MgSO^) og inddampet til dannelse af et fast stof, der blev krystalliseret af petrol (80-100) til dannelse af 0,5 g 2-(N-morpholino)ethyl-2-(2- 151253 33 fluor-4-brombenzyl)-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylacetat (eksempel 55), smeltepunkt 99-100°C.

Ved på lignende måde at gå ud fra 2-(N,N-dimethylamino)ethanol, hen= 5 holdsvis benzylalkohol fremkom:

Eksempel 56: 2-(N,N-dimethylamino)ethyl-2-(2-fluor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-10 oxophthalazin-4-ylacetat, smeltepunkt 75-77°C [omkrystalliseret af petrol (80-100)] i et udbytte på 16%, og eksempel- 57: 15 benzyl-2-(2-fluor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-ylace= tat, smeltepunkt 105-107°C [omkrystalliseret af petrol (80-100)] i et udbytte på 50%. Denne ester blev isoleret af den første fase.

20 Eksempel 58

En opløsning af natriummethoxid (25 ml af en 1,0M opløsning i metha= nol) blev sat til en opløsning af 9,87 g 2-(2-fluor-4-brombenzyl)- l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yleddikesyre i 300 ml methanol, og blan= 25 dingen blev opvarmet til sit kogepunkt. Methanol fik så lov at koge bort, indtil blandingens rumfang var ca. 100 ml. 150 ml isopropanol blev derefter tilsat efterfulgt af petrol (60-80),indtil blandingen var netop uklar. Blandingen fik så lov at afkøle til stuetemperatur. Det faste stof, som dannedes, blev fraskilt ved filtrering, blev 30 inddampet med toluol (2 x 400 ml) og derefter:vasket med 300 ml ether til dannelse af 6,5 g natrium-2-(2-fluor-4-brombenzyl)-l,2-dihydrΟΙ, oxophthalazin-4-yl acetat, smeltepunkt 244-247°G.

Eksempel 59 35 3,5 g 2-fluor-4-brombenzylhydrazin blev sat til en omrørt blanding af 1,92 g 3-οχο-Δ-Ι,α-phthalaneddikesyre og 2,0 g natriumbicarbonat i 40 ml dioxan og 15 ml vand. Blandingen blev omrørt og opvarmet under tilbagesvaling i 3 timer og så koncentreret i vakuum for at 40 .. - .. ........... .

151253 34 uopløseligt materiale blev fjernet ved filtrering. Filtratet blev syrnet med koncentreret saltsyre til pH 2. Det faste stof, som aflejredes, blev opsamlet, vasket godt med vand, tørret i vakuum og derpå omkrystalliseret to gange af methanol til dannelse af 2-5 (2-fluor-4-brombenzyl)-1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yl-eddikesyre (0,24 g), smeltepunkt 182-184°C.

Det som udgangsmateriale anvendte hydrazinderivat blev fremstillet som følger: 10

Til en omrørt opløsning af 75 ml hydrazinhydrat i 400 ml ethanol opvarmet under tilbagesvaling blev sat en opløsning af 40 g 2-fluor-4-brombenzylbromid i 100 ml 1,2-dimethoxy= ethan dråbevis i løbet af to timer. Efter endt tilsætning 15 blev opløsningen omrørt og opvarmet under tilbagesvaling i yderligere en time. Opløsningsmidlet blev afdampet, og remanensen blev ekstraheret med methylenchlorid (2 x 300 ml). Ekstrakterne blev vasket med saltvand (3 x 200 ml), tørret (MgSO^) og inddampet. Remanensen blev destilleret til dan-20 nelse af 15,0 g 2-fluor-4-brombenzylhydrazin, smeltepunkt 94-97°C ved 0,3 mm Hg tryk, som var tilstrækkelig rent til yderligere reaktioner.

Eksempel 60 -25 0,9 g 2-fluor-4-brombenzyl-2-(2-fluor-4-brombenzyl)-l,2-di= hydro-l-oxophthalazin-4-yl-acetat blev opløst i 40 ml ethanol indeholdende 2,0 g kaliumhydroxid, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 90 minutter. Opløsningsmidlet 30 blev afdampet, Og der blev tilsat 100 ml vand. Den fremkomne klare opløsning blev syrnet med koncentreret saltsyre til pH 2. Det faste stof, som udskiltes, blev fraskilt ved filtrering, vasket godt med vand og tørret i vakuum til dannelse af 0,35 g 2-(2-fluor-4-brombenzyl)-l,2-dihydro-l-oxo= 35 phthalazin-4-yl-eddikesyre, smeltepunkt 181-183°C (efter to omkrystallisationer af methanol).

Udgangsmaterialet blev fremstillet som følger: 151253 35 2,0 g l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yl-eddikesyre blev sat til en opløsning af 4,0 g kaliumcarbonat i 50 ml dimethyl= formamid. 6,0 g 2-fluor-4-brombenzylbromid blev så sat til opløsningen, og blandingen blev omrørt ved 50-70°C i 15 ti-5 mer. Den fremkomne opløsning blev hældt i 400 ml vand. Det faste stof, som udfældedes, blev fraskilt, vasket godt med vand, tørret i vakuum og opløst i ethylacetat. Den fremkomne opløsning blev filtreret gennem en søjle af tør kromatografisk silicagel (50 g) og fraktioner opsamlet. Mere ethylacetat •j^q blev så ledet gennem søjlen, og de fraktioner, der indeholdt den vigtigste ikke-polære komponent [som påvist ved tyndtlagskromato-grafi (Si02:toluen/EtOAc, 3:1 v/v)] blev forenet og inddampet.

Det fremkomne faste stof blev omkrystalliseret to gange af propan- 2-ol til dannelse af 1,1 g 2-fluor-4-brombenzyl-2-(2-fluor-4-^5 brombenzyl) -1,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yl-acetat, smeltepunkt 125-127°C (blødgøres ved 85°C).

Eksempel 61 20 2,0 g l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yl-eddikesyre blev sat til en opløsning af 0,9 g netriumhydroxid i 70 ml ethanol indeholdende 10 ml vand. Blandingen blev opvarmet, indtil der fremkom en klar opløsning, og blev så behandlet med 3,0 g 4-brom-2-fluorbenzyl= bromid og opvarmet under tilbagesvaling i tre timer. Opløsnin-25 gen blev så inddampet, og remanensen blev behandlet med vand og ekstraheret med ether (3 x 80 ml). Den vandige fase blev syrnet til pH 2 med koncentreret saltsyre. Det faste stof, som udfældedes, blev opsamlet ved filtrering, vasket to gange med vand og omkrystalliseret af methanol til dannelse af 0,45 g 2-(4-brom-2-30 fluorbenzyl)-l,2-dihydro-l-oxophthalazin-4-yl-eddikesyre, smeltepunkt 183-185°C.

Note: Denne forbindelse kan krystallisere i polymorfe former,

d.v.s en form med smeltepunkt 184-185°C (af methanol inde-35 holdende noget vand) og en form med smeltepunkt 180-182°C

(af to krystallisationer af tør methanol).

36 151253

Eksempel 62

Natriumhydrid (0,5 g, 50% w/w dispersion i mineralolie) blev sat til en omrørt opløsning af 2,32 g ethyl-l,2-dihydro-l-oxophthala= zin-4-yl-acetat i 50 ml dimethylformamid. Blandingen blev omrørt 5 ved stuetemperatur i 90 minutter, hvorefter brusningen var ophørt.

En opløsning af 2,0 g 3,4-dichlorbenzylchlorid i 5 ml dimethyl= formamid blev derefter tilsat, og den fremkomne blanding blev omrørt ved stuetemperatur i tre timer. Reaktionsblandingen blev hældt i 400 ml vand. Det faste stof, som aflejredes, blev opsam-10 . let ved filtrering, vasket med vand, lufttørret og omkrystalliseret to gange af propan-2-ol til dannelse af 2,1 g ethyl-2-(3,4-dichlorbenzy1)-1,2-dihydro-1-oxophthalaz in-4-y1-acetat, smeltepunkt 139-141°C.

15 Aldosereductase hæmningsegenskaber af repræsentative phthalazin- 4-yleddikesyrer.

Prøvemetoder : a) Hanrotter (110-130 g, Alderley Park stammen, specifikt patogen-20 fri ) gøres diabetiske på kendt måde ved dosering med streptozoto-cin, efterlades i 2 uger og kontrolleres så for alvorlig gluco-suri. Grupper på 6 dyr doseres så oralt daglig med forsøgsforbindelsen i 5 dage. Dyrene dræbes så, og deres hoftenerver udtages hurtigt. Vævsprøverne vejes og kulhydratmateriale ekstraheres med ko-25 gende vand, hvortil der er sat en kendt mængde a-methyl-d-mannosid for at tjene som indre standard. Proteinagtigt materiale fjernes ved Somogyis metode (J.Biol. Chem. 1945, 41, 367), og de proteinfrie opløsningerlyofiliseres. Det tilbageblevne kulhydratmateriale omdannes så til det tilsvarende polytrirae.thylsilylderivat ved an-30 , vendelse af metoden ifølge Bently m.fl. (Biochem. Biophys. Res.

Comm. 1963, 11, 14) og tilbageværende sorbitmængder bestemmes ved gas-væske-kromatografi på en 2,5% SE-52/80-100 mesh diatomite-C— søjle (forbehandlet med syre og derpå sileret med dichlormethyl-silan) ved 185°C. Haamning af aldosereductase bedømmes så ved sam-35 menligning af de tilbageblevne sorbitmængder i væv fra den doserede diabetiske gruppe rotter med maangderne fra en gruppe diabetiske rotter, der kun har fået doseret hjælpestof. Den prøve er kendt som 5 dages prøven.

37 - 151253 b) Grupper på 6 med streptozoticin inducerede diabetiske rotter doseres to gange oralt, idet der er 17 timer mellem doserne. Efter 2-4 timer fra den sidste dosis dræbes dyrene og hoftenerverne 5 udtages og bedømmes for tilbageværende sorbit under anvendelse af fremgangsmåde (a) ovenfor. Denne prøve er kendt som 2 dages prøven.

Eorsøgsforbindelserne anses for aktive i enten prøvemetode (a) eller (b), hvis de reducerer sorbitmængden i hoftenerven med mindst 25% af mængden i diabetiske rotter, der har fået doseret hjælpestof, i en oral dosis på 100 mg/kg eller mindre.

Resultater:

Under anvendelse af enten fremgangsmåde (a) eller (b) blev opnået følgende virkninger på sorbitmængder i hoftenerv.e under anvendelse af repræsentative phthalazin-4-yleddikesyrederivater med formlen! ^CO.

2o fTlfl ^ N ^ ch2-^ 151253 38

Substituen- Substituen- Oral do-Reduktioii* ter på ring ter på ring R1 X dis (mg/ % Prøve B A _kg)__ ingen 4-Br- OH 0 50 36 5 dag ingen 4-1- OH 0 100 66 2 dacr 20 32 9 ingen 3-Cl-4-Br OH 0 50 80 5 dag 20 33 10 31 2 dag ingen 2—F—4—Br OH S 100 66 20 36 2 dag ingen 3,4-Cl2 0H 0 20 37 5 dag 7-MeO 3/4-Cl2 OH O 50 33 5 dag 7-Cl 3,4-Cl2 OH O 100 55 2 dag ingen 3-Cl-4-Br OH S 20 67 10 40 5 dag ingen 2-F-4-C1 OH O 50 83 20 65 5 dag 10 45 ingen 2-F-4-Br 0(CH0) O 100 91 2 dag ΙΟ ingen 2-F-4-Br OCH2Ph O 100 73 2 dag ingen 2-F-4-I OH 0 100 93 50 81 2 dag 25 76 39 151253

Substituen- Substituen- Oral do- Reduktion ter på ring ter på ring R1 X sis (mg/ % Prøve _§___A____ker) ____ ingen 3,4-Br2 OH 0 50 84 20 79 5 dag 10 59 7- F 3,4-Cl2 OH O 10.0 42 2 dag 6’-Cl 3,4-Cl2 OH O 20 37 2 dag ingen 3,5-Cl2 OH O 100 72 50'. 62 2 dag 8- F 3,4-Cl2 OH O 100 59 2 dag ingen 2-MeO-4-Cl OH O 100 44 2 dag 6- Me** 3,4-Cl2 OH O loo 78 2 dag + 7- Me ingen 2-F-4-Br OH O 20 86 10 72 5 dag ingen 2-F^4’-Br OMe O 100 73 2 dag ingen 2-F-4-Br OEt O 50 65 2 dag 8- Me 3,4-03-2 OH O 100 59 2 dag

Noter; 4* %reduktion af hoftenerve sorbitmængde sammenlignet med ikke ·> doserede diabetiske kontrolrotter (p^-^0,1 i reglen ·£ 0,01) 1:1 blanding af 6-methyl og 7-methylderivater,

Til sammenligning frembringer den strukturelt lignende forbin- en i7tr 1 _ 1 O —r? i* ϊη τγΛ v/λ— 1 f lin 1 a r; i r ·ι/4·.χτ1 i Vqc trr*ia

Claims (2)

151253 2% stigning (ved 200 mg/kg p.o.) og en 12% stigning (ved 100 mg/kg p.o.) i hoftenerve sorbitmængden sammenlignet med kontroldyr. Patentkrav.

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 2-benzyl-phtala-zin-4-yleddikesyrederivater med den almene formels ch2co R1 R5 B I N I A 1 hvor R1 er et hydroxy- eller benzoyloxyradikal eller et C.^- alkoxyfadikal, der eventuelt bærer et N-morpholino- eller di- 2 3 4 5 C1-4-alkylaminoradikal, og substituenterne R , R , R og R på benzenringen A er valgt blandt en af følgende kombinationeri a) R2 er fluor eller methoxy, R2 er hydrogen, R4 er chlor, 5 brom eller jod, og R er hydrogen eller halogen, 2 3 5 4 b) R , R og R er hydrogen, og R er brom eller jod, 2 3 5 c) R er hydrogen eller fluor, R og R er ens eller for- 4 skellige halogenatomer, og R er hydrogen, 2 3 4 dj R er hydrogen eller fluor, R og R er ens eller for- 5 skellige halogenatomer, og R er hydrogen, og 2 3 5 e) R er hydrogen, R og R uafhængigt af hinanden er fluor 4 eller chlor, og R er chlor, brom eller jod, 151253 oxygen eller svovl, eller et farmaceutisk anvendeligt baseadditionssalt af en forbindelse af formlen I, hvor R1 er hydroxy, eller et farmaceutisk anvendeligt syreadditionssalt af en forbindelse af formlen I, hvor R^ er et C^_^-alkoxy-radikal, som bærer et N-morpholino- eller di-C^^-alkylamino-radikal, kendetegnet ved, at man a) omsætter en forbindelse af formlen; ch2co R1 ΝνίΝγνΝ I b 11 I in I8 i h med et halogenid af formlen:' R5 Hal CH2 ^ IV hvor Hal er chlor, brom eller jod, i nærværelse af en egnet base, b) til fremstilling af en forbindelse af formlen I, hvor R1 er hydroxy, hydrolyserer en ester af formlen: Cp2C0.R9 ryyS _/ 151253 hvor R9 er et C-^-alkoxyradikal eller et radikal af formlen: R5 / Yv 4 VI -0CH2-Å y—R ir ^i5 c) omsætter en forbindelse med formlen: XO.R1 NVJiiSs^r \ VI1 ,^V R8 0 eller en geometrisk isomer deraf med en hydrazin af formlen: n5 J) 4 h2n.nh-CH2-<1 A y-R VIII d) til fremstilling af en forbindelse af formlen I, hvor X er oxygen, og R1 er hydroxy eller C^^-alkoxy, katalytisk dekompo-nerer en diazoketon med formlen: Re coch*, γγ^Ι β> nærværelse af en forbindelse af formlen QH, hvor Q er hydroxy eller C^_^-alkoxy, 151253 e) til fremstilling af en forbindelse af formlen I, hvor benzenringen B bærer et C^^-alkoxyradikal, omsætter en forbindelse af formlen I, hvor benzenringen bærer en halogensubstituent, med et alkalimetal C^_4-alkoxid, c og hvorefter, når der kræves en forbindelse af formlen I, hvori 0. i R er andet end hydroxy, en forbindelse af formlen I, hvori R er hydroxy eller et reaktionsdygtigt derivat deraf, bringes til at reagere med en forbindelse af formlen R^H, hvor R"^ har samme betydning som R^ bortset fra hydroxy, under anvendelse af 10 kendte forestringsmetoder, og hvorefter, når der kræves en forbindelse af formlen I, hvori X er svovl, en forbindelse af formlen I, hvori X er oxygen, thieres under anvendelse af kendte thi-eringsmetoder, og hvorefter, når der kræves et farmaceutisk anvendeligt salt, en forbindelse af formlen I, hvori r}~ er hydro-15 xy, bringes til at reagere med en base, som giver en farmaceutisk anvendelig kation, eller en forbindelse af formlen I, hvori R1 er C^_^-alkoxy, som bærer en N-morpholino- eller di-N,N-C^-4-alkylaminoradikal, bringes til at reagere med en syre, som giver en farmaceutisk anvendelig anion. 20

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at benzenringen A i udgangsmaterialet er et 2-fluor-4-bromphenyl-, 3-chlor-4-bromphenyl- eller 2-fluor-4-jodphenylradikal, benzenringen B er usubstitueret, X er oxygen og R1- er hydroxy.