DK149957B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af s-adenosyl-methionin-estere - Google Patents
Analogifremgangsmaade til fremstilling af s-adenosyl-methionin-estere Download PDFInfo
- Publication number
- DK149957B DK149957B DK405382A DK405382A DK149957B DK 149957 B DK149957 B DK 149957B DK 405382 A DK405382 A DK 405382A DK 405382 A DK405382 A DK 405382A DK 149957 B DK149957 B DK 149957B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- sam
- compounds
- solution
- salts
- esters
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/26—Psychostimulants, e.g. nicotine, cocaine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
Description
i 149957
Den foreliggende opfindelse angår en analogi fremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte S-adenosylmethionin-e-stere med den nedenfor angivne formel II, og fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i krav l's kende-5 tegnende del anførte.
S-adenosylmethionin (SAM) vides at være en forbindelse, som er tilstede i alle levende organismer, og som deltager i et stort antal biologiske processer af fundamental betydning, eftersom SAM er den væsentlige donor for methylgrupper i or-10 ganismen.
Det vides ligeledes, at SAM indtil 1975 ikke har haft nogen praktisk anvendelse på grund af den extreme instabilitet.
Fra og med 1975 har der været offentliggjort et antal patentskrifter (USA patentskrifterne nr. 3 893 999, 3 954 726 15 og 4 057 686) med relation til bestemte SAM-salte, som gan ske uventet har vist stabilitetskarakteristika, der gør det muligt at fremstille farmaceutiske formuleringer til anvendelse inden for adskillige områder af den humane terapi.
Selv om man således har afklaret et af de negative aspekter 20 ved SAM, har disse salte imidlertid stadig ikke løst det an det problem, som er forbundet med dette produkt, nemlig dets lave kapacitet med hensyn til passage igennem cellebarrierer, som medfører, at organismen har vanskeligt ved at absorbere forbindelsen, i særdeledhed når denne indgives oralt.
25 Med den foreliggende opfindelse er der nu tilvejebragt en analogi fremgangsmåde til fremstilling af en hidtil ukendt klasse af forbindelser, som har den nedenfor viste almene formel II, og disse forbindelser har overraskende vist sig at besidde en lige så høj grad af farmakologisk virkning 30 som den, der er kendt fra SAM-saltene, og at besidde en lige så stor eller større stabilitet, også ved forhøjede temperaturer, samt en større biotilgængelighed.
2 Ϊ49957
Ikke mindst dette sidste kendetegn gør det muligt at fremstille farmaceutiske formuleringer til oral anvendelse, som er særdeles værdifulde inden for den humane terapi.
De omhandlede estere har den almene formel (II) 5 hvori R er en lineær eller forgrenet alifatisk gruppe med 1-6 carbonatomer, A- er en ækvivalent af en generisk anion af en stærk uorganisk eller organisk syre med en pK-værdi på under 2,5, m er 1, og 10 n kan variere fra 0-4, idet n fortrinsvis er 3.
Det har også vist sig, at stabiliteten af de hidtil ukendte forbindelser med formel II påvirkes væsentligt af antallet af syreækvivalenter, som er bundet til hvert molekyle. Nærmere bestemt gælder det, at den maksimale 15 stabilitet opnås, når n er 3.
U9957 3 I den efterfølgende tabel 1 er anført stabilitetsdata, sammenlignet med SAM, for visse estere med formel II i vandig opløsning ved 100 °C for forskellige pH-værdi-er, idet n overalt er 3.
5 TABEL 1 pH i op- Tempera- % dekomponering efter R løsningen tur 15 min 30 min 60 min 240 min H 2 100 °C 80 lbO 100 100 H 3 100 °C 90 100 100 100 10 H 4 100 °C 100 100 100 100 CH3 2 100 °C 5 10 21 75 CH3 3 100 °C 6 13 25 100 CH3 4 100 °C 8 18 40 100 C2H5 2 100 °C 2 4 8 35 15 C2H5 3 100 °C 3 6 13 55 C2H5 4 100 °C 5 9 19 80 C4Hg 2 100 °C 2 4 8 30 C4Hg 3 100 °C 3 6 12 52 C4Hg 4 100 °C 4 9 17 75 20 Esterne med formel II er stabile i ubegrænsede tidsrum i tør tilstand ved 45 °C.
Som indledningsvis anført udmærker de hidtil ukendte estere med formel II sig ved det overordentligt nyttige aspekt, der ligger i deres evne til at kunne passere igen-25 nem cellebarierer.
De i tabel 2 angivne værdier påpeger dette vigtige træk ved de nye produkter.
U9957 4 I det første forsøg, der er kendt som "intestinale sække" (in situ), blev 2 mg af hvert produkt, der skulle afprøves, sammen med 1 ml af en fysiologisk opløsning anbragt i intestinale sække tilvejebragt i rotter under etherbedøvelse.
5 Rotterne blev dræbt efter 2 timers forløb, og residualind- holdet af sækken (omgivende væg + indhold) blev analyseret.
I det andet forsøg anvendtes tarmdele, hvis inderside var vendt udefter, inkuberet ved 37 °C i overensstemmelse med Krebs Ringer overfor en ekstern produktkoncentration på 10 10'4 M.
Produkterne blev alle behandlet med I^SO^ til opnåelse af salte, hvori n er 3.
TABEL 2
Produktabsorption 15 Afprøvet tarme med indersiden i sække udad R λ af dosis nmol/h/mg væg H 5 0,009
Ch3 55 0,078 20 C2H5 59 0,061 C3H? 61 0,045 C4H9 65 0,037 C5Hi;l 68 0,025 C6H13 67 0,023 25 De omhandlede SAM-estere kan fremstilles ud fra et vil kårligt SAM-salt fremstillet ved kendte metoder. Fortrinsvis anvender man sulfatsaltet.
Man fremstiller en opløsning med en koncentration på mellem 1 og 3?ό (fortrinsvis 2%) af koncentreret svovlsyre i den 5 149967 vandfrie alkohol, hvormed syren skal forestre SAM.
Til denne opløsning sætter man under omrøring en tilstrækkelig mængde SAM-sulfat til at opnå en slutkoncentration af SAM-ioner på mellem 10 og 100 g/1, fortrinsvis 50 g/1.
5 Når man anvender en alkohol med en lav molekylvægt, opnår man en klar opløsning, hvorimod man opnår en suspension, når man anvender en alkohol med en høj molekylvægt.
I afhængighed af den anvendte alkohol opvarmer man under tilbagesvaling i 10 - 20 timer. Når reaktionen er forløbet 10 til ende, opnår man i alle tilfælde en klar opløsning.
Foruden SAM-esteren indeholder den afsluttende reaktions-blanding små tiloversblevne mængder af SAM (op til et maksimum på 5¾) og produkter af SAM, der er fremkommet ved termisk nedbrydning, i variable mængder i overensstem-15 melse med den anvendte alkohol.
Forholdene går fra en esteromdannelse på 80¾ og en mængde af nedbrydningsprodukter på 20°ό, når der er tale om en methylester, til en omdannelse på 50¾ og en mængde af nedbrydningsprodukter på 50?i, når der er tale om alkoholer 20 med 5-6 carbonatomer.
Reaktionsblandingen afkøles, og man tilsætter en tilsvarende mængde t^O (eller man ekstraherer med T^O, hvis alkoholen ikke er blandbar med HgO).
Man fjerner den overskydende svovlsyre ved at indstille 25 pH til 3 ved tilsætning af en basisk ionbytterharpiks på 0H"-form (AMBERLITE® IRA 401 eller AMBERLITE® IRA 93).
Ionbytterharpiksen filtreres fra og sendes til regenerering .
6 1*9967 Når der er tale om alkoholer, som kan blandes med vand, afdampes alkoholen under vakuum.
Hvis mængden af resterende SAM i opløsningen, som er opnået på denne måde, overskrider 15K, koges opløsningen i 5 20 minutter med henblik på at destruere den resterende SAM.
Man indstiller pH-værdien til 6,5 under omrøring, hvorefter man leder opløsningen igennem en kolonne indeholdende en svagt sur ionbytterharpiks på H+-form (AMBERLITE^ 10 IRC 50 eller CG 50), som på forhånd er vasket med H2O, idet man overholder de følgende parametre for driften af kolonnen: forholdet imellem diameteren og højden af harpiks-fyldningen skal være 1:10; 15 der påfyldes 20 g SAM-ester pr. liter harpiks, og strømningen skal være 1 kolonnevolumen pr. time.
Derefter vaskes kolonnen med 1 kolonnevolumen H2O og 0,1 N eddikesyre, indtil pH i eluatet er 3. Derpå vaskes kolonnen med yderligere 1 volumen vand.
23 SAM-esteren elueres med 0,1 N svovlsyre (eller med en an den stærk syre, hvis man ønsker et andet salt).
Den således opnåede opløsning koncentreres under vakuum til 50 g/1.
Man filtrerer den koncentrerede opløsning med aktiveret 25 trækul (1/10 af SAM-esteren), og man indstiller syresam mensætningen til den krævede værdi (3-5 ækvivalenter, fortrinsvis 4 ækvivalenter) ved tilsætning af koncentreret H2S0^ (eller en anden stærk syre), hvorpå man lyophi-liserer opløsningen.
149957 7
Opfindelsen illustreres nærmere ved de følgende eksempler.
EKSEMPEL 1
En mængde SAM-sulfat, der svarer til 1 kg SAM-ioner, opløses i 20 liter methanol, der indeholder 2 volumen-% kon-5 centreret svovlsyre. Opløsningen opvarmes under tilbagesvaling i 16 timer. Den afkøles og fortyndes med 20 liter destilleret vand.
Derefter behandles opløsningen med AMBERLITE^RA 93 ion-bytterharpiks (på forhånd aktiveret med 2 N natriumhy-10 droxid og vasket indtil neutral reaktion) indtil pH-vær- dien er 3. Der anvendes omkring 15 liter ionbytterharpiks.
Blandingen filtreres og vaskes med destilleret vand. Derefter afdampes methanolen under vakuum. Opløsningen koges i 20 minutter med henblik på at fjerne de sidste spor af 15 ikke-omsat SAM, hvorefter den afkøles.
Der fremstilles en kolonne indeholdende AMBERLITE®IRV 50 ionbytterharpiks på H+-form indeholdende 40 liter harpiks aktiveret med 100 liter 0,5 N svovlsyre og vasket indtil neutral reaktion. Den tidligere opnåede opløsning neutra-20 liseres til pH 6,5 ved hjælp af 2 N natriumhydroxid og ledes igennem kolonnen med en hastighed på 40 liter/time.
Kolonnen vaskes med 40 liter vand.
Der ledes en 0,1 N eddikesyreopløsning igennem kolonnen, 149957 8 indtil eluatet udviser en pH-værdi på 3 (omkring 200 liter) efterfulgt af 40 liter destilleret vand.
Der elueres med 60 liter 0,1 N svovlsyre. Eluatet koncentreres under vakuum (35 °C, 30 mm Hg) til et volumen på 5 omkring 10 liter, hvorefter der tilsættes 50 g aktiveret trækul. Blandingen filtreres, og opløsningen titreres.
Der tilsættes en mængde koncentreret svovlsyre, som er tilstrækkelig til at opnå et molært forhold imellem SAM-methylester og svovlsyre på 1:2, hvorefter opløsningen 10 lyophiliseres.
Der opnås 820 g produkt, hvis sammensætning er følgende: - SAH-methylester 66,8¾ - H2S04 31,7¾ - H20 1,5¾ 15 dette svarer til et udbytte på 54,7¾ med hensyn til SAM- ioner.
Når produktet analyseres ved højtryksvæskechromatografi (kolonne: PARTISlfrlO SCX, eluent: 0,1 M ammoniumformiat, pH 4, 20¾ methanol, strømningshastighed: 1 ml/min), udvi-20 ser det et enkelt udsving med en retentionstid på 580 sekunder.
Produktet blev identificeret ved sine UV- og NMR-spektre med følgende resultater: UV-spektrum: 25 Ved pH 4: absorptionsmaksimum ved 258 nm med ζ. = 14040, ved pH 1: absorptionsmaksimum ved 256 nm med £, = 13500.
149957 9 NMR-spektrum:
Ved 3 p.p.m: singlet fra !a-CH j-gruppen, ved 3,7 p.p.m.j singlet fra R-C-O-CH^-gruppen.
H
Hvis den støkiometriske sammensætning inden lyophiliserin-5 gen indstilles til et forhold imellem SAM-methylester og svovlsyre på 1:1,5 eller 1:2,5, og opløsningen derefter lyophiliseres, opnås de følgende respektive salte: - SAM-methylester . 1,5 H2S04 . 0,5H20 - SAM-methylester . 2,5 H2S04 . 0,5H20 10 Hvis IRC 50-kolonnen elueres med saltsyre i stedet for med svovlsyre, opnås følgende salte: - SAM-methylester . 3 HC1 . 0,5H20 - SAM-methylester . 4 HC1 . 0,5H20 - SAM-methylester . 5 HC1 . 0,5H20.
15 Tilsvarende kan man ved at anvende methansulfonsyre opnå de tilsvarende methansulfonater.
De analytiske data for disse salte er anført i den følgende tabel: 149957 10 ε ο ,—I Ι-^ΟΟΉΙΛΟΟΙΛΟΟΜ}· Ό II CM ι—I νΟ ΙΛ Ον Ρ- ΙΛ s? CMCMCMCMCMCMi-li-H Μ
ι—I X
UJ α.
jJMiHCvJrHiAONONVO m øOvor^OOCMCJvCO ΙΛ X) „„•.•»•'Λ·'·'·' r* - < ιΛ 'Λ 'Λ ιΛ ΙΛ Λ- O' 1-1
□ ιΗ -Η >-1 Ή 1-1 CM
«ι-tn 5= 44 CO VO CM <f θ’ Ή ^Λ 133 1-1 φΟιΛΟΟΟΌΙΛΟΟΟ ΙΛ Q Λ^ΛΛΙ'^Λ·' ** Οϊ-^-ιΛΌνΟίΛίΛΟΟΟΝ •’Ί QJ - .—I I—I 1—I ηΗ ίΗ <Ν ί-1 ω
X
4J οο ' ιλ α\ ο r* ιλ ΐ" σν σ'
øf^.f^.lAI^COO'CO^t IN
-Ο»*·.»»·'·'*' ·* c <t- ΙΛ CM ιΛ <) ΙΛ —ΙΟ θ' XJ I—I —I —I >—I '—I —I '—ι <—i ti- Ζ ο9 44
0Ο\-4--ΙιΛ^ΗΙΛΙΛΓΛ CM
cr*vovococoo\c0'5i· ιλ ΟΙ·'·''··'*'*·'''' * 0^)-ιλ£Μιλ·ϊ)·ιλ·-ιο σ' £4 ι—II—Il—Ιι—11-11-11—ΙΉ ω
XI
-η ο ιλ ιλ o tn en tn <t i'' o
I—I CM I—I I—ICMiAO ΙΛΟ 1ΛΟ Ή Ή CM
OX OO OX O CM O CM O CM. Ο O OO OO - *£ , MDlA vO CM Ό ιΛ \0 X VO X UJ X VO CM Ό CM U) CM
con, z: xx z z ιλ zm z ιλ xx xx xx •He [— Ο Ο ιΛ O' ο - oo- O'- Ό ΙΛ ΟιΛ <t ΙΛ ¢4 F CM· CM- CM· CM O CM O NO ΙΛ- Mf- <T- -,-Ι η ΧΙΛΧΟ ΧΙΛΧ· Χ· Χ· XO XO XO Q. ·|Γ Ό - Ό· Ό - ΌΙΛ Ό <f ΌιΛ O'· CO· Ή ·
£ rH CM t—| ΓΛ ι—I ΙΛ ι—I ι—I Η Η —I ι-Η ι—I vf CM ΙΛ CMVO
u u tn o tn u tn ο u u o ο o o in o tn o in ΙΛ ΙΛ -- o o o
,-l CM CM ΓΛ ΙΛ ΓΛ CM <f CM 1Λ CM
• □ ·ο ο · · .· · x *x *χ Μ CM 04 CM Μ CM t4 ¢4 (4 ί-ιΙΛί4ΐΛ{4ΐΛ mx ojx ωχ ωο ωο ωο ω - ω - ω ·- 4-1 ΙΛ 44 ΙΛ 44 ΙΛ 44CM4JCM44CM440 4->0 440 ω - ω - ω - ωχ ωχ ωχ ω· ω· ω· ωο ωο ωο ο uj ν ιλ ο ιλ ωχ ωχ ωχ ι-4· ιΗ· ,—I · ι—I — ι—I — ι—I — ι—I ΓΛ ι—11 ΙΛ ι—I ΙΛ _j 0Λ4τ>,<*>,4ί>>ο >· ο >· α >· ο >· ο >- ο lj 44 χ ο χ ο χ ο χ · χ χ · χιη χ m xtn 0Q ιΗ 43 in 4Jtn 4Jtn 4Ji-l 4J1-I 44 ·Η 44 ΙΛ 44 ΙΛ 44 ΓΛ a: co (DCMCDCMiDCMajcj ωο ωο ωχ ωχ ωχ ι- tn ε χ XX XX XX XX XX χο χο χο 149957 11 EKSEMPEL 2
Man følger den samme procedure som beskrevet i eksempel 1, idet der anvendes absolut ethanol indeholdende 2¾ svovlsyre .
5 Der opnås en SAM-ethylester med formlen: SAM-ethylester. 2H2S04· 0,5HZ0 UV-spektrum: ved pH 4: absorptionsmaksimum ved 258 nm med £. = 14040 10 ved pH 1: absorptionsmaksimum ved 256 nm med £. = 13500 NMR-spektrum: ved 1,25 p.p.m.: triplet fra R-CH^-gruppen ved 3 p.p.m.: singlet fra $-CH^-gruppen ved 4,2 p.p.m.: kvartet fra R-jj-0-CH2-R-gruppen Når produktet analyseres ved højtryksvæskechromatografi 15 under de i eksempel 1 beskrevne betingelser, giver det et enkelt udslag med en retentionstid på 600 sekunder.
Ligesom i eksempel 1 er det muligt at opnå en hel række salte, nærmere bestemt: - SAM-ethylester. 1,5H2S04· 0,5H20 20 - SAM-ethylester. 2,5H2S04· 0,5H20 - SAM-ethylester. 3HC1. 0,5H20 - SAM-ethylester. 4HC1. 0,5H20 - SAM-ethylester. 5HC1. 0,5H20 - SAM-ethylester. 3CH^S0^H. 0,5M20 25 - SAM-ethylester. 4CH^S0^H. 0,5H20 - SAM-ethylester. 5CH^S0-jH. 0,5H20.
149957 12
Alle disse salte har UV- og NMR-spektre, der er identiske med spektrene for det ovennævnte salt.
EKSEMPEL 3
Man følger den i eksempel 1 beskrevne procedure, idet der 5 anvendes n-butanol indeholdende 2% svovlsyre.
Der opnås omgående en suspension, som omdannes til en klar opløsning ved opvarmning under tilbagesvaling.
Herved opnås en SAM-n-butylester med formlen: SAM-n-butylester. 2H2S0^. 0,5H20 10 UV-spektrum: ved pH 4: absorptionsmaksimum ved 258 nm med £, = 14040 ved pH 1: absorptionsmaksimum ved 256 nm med 6. = 13500.
NMR-spektrum: ved 0,9 p.p.m.: triplet karakteristisk for R-CH^-gruppen 15 ved 3 p.p.m.: singlet fra §-CH^-gruppen ved 4,1 p.p.m.: kvartet karakteristisk for R-C-O-CH2-R- y gruppen.
Når produktet analyseres ved højtryksvæskechromatografi under de i eksempel 1 beskrevne betingelser, giver det 20 et enkelt udslag med en retentionstid på 650 sekunder.
Hele rækken af salte fra eksemplerne 1 og 2 blev opnået under de samme betingelser som beskrevet ovenfor.
Ved at anvende n-pentanol og n-hexanol i stedet for butanol opnåedes SAM-n-pentyl- og n-hexylesterne.
U9957 13
Den efterfølgende tabel angiver de analytiske data for SAM-esterne fra eksempel 2 og 3.
149957 14 ε o μ cm r— ια co vf
II CM nH Ή CD O
CM CM CM CM CM
uT*
CO ιΛ CM ιΛ IA
Jr? rH CO Ά CM O' CJ ·> Λ * μ r C ‘A --r ·=* •'t Ά 3 rH r-H Ή rH Ή (Λ <1- O® i) <D O' vo o' Mt Ά C Ή 00 ιΛ CM O'
Or,* — - — g ιΑ· <) -st -vf >Λ
g ι-l rH ι-Η rH rH
XI
CM '“I "A ΙΛ -£ CM o r- <r cm -0 - - - - -
c ΙΑ IA cm CM CM
3 i—! ,—i i—i ’—! —I
Z “- SS jj 0 0\ o IA Ό Ή
C CM o I"- -d" CM
01 r ^
jP fA rA CM CM CM
0 —I —I —I —I 1—1
XI
o ο ο o
CM O CM CM CM
x CM x = = u\ x ΙΛ 1Λ ιΛ - ΙΛ 0-000
O
( ! I ·
(A fA IA IA tA
tn m tn tn in
IA fA IA IA IA
r-ί rH rH rH rH
O o O O O
.JC Ό \0 Ό Ό Ό 03 Z Z Z Z 2 •H r—i O CM <t Ό 00
Ll 0 IA fA fA IA IA
•η e x x x x X
q. u r— oo O' o rH
E O 1-1 rH rH CM CM
Ld U— CJ t_3 O CJ C_3 °cm ο ο ο
X CM CM CM
Ο. ιΛ X X X
CM - ΙΛ ΙΛ ΙΛ X O ---
1Λ O O O
O <t <f · O <f O <t • tn o tn o -j cm tn cm tn
ox cm x CM
tn CM x CM x
CM CM CM
X
CM h · (4 · 0 f4 03 ¢4 . 4J 0 H-> 0
(4 03 4J 03 -P
0 0 0 0 0 4J 1-4 0 rH 0
0 0 5- rH >- rH
ø ø n. >. -u >. rH rH o 4J C X
0 >- ¢4 3 0 ω
XX CL X Ω. X
C -P I I I I
•H 0 C C C C
X I I I I I
¢4 s ε x x x o c <c c < < u_ tn tn tn tn tn 149957 15
Biologisk rapport
Alle forbandelserne ifølge opfindelsen er afprøvet i et bredspektret farmakologisk undersøgelsesprogram, og i alle tilfælde har disse forbindelser udvist særdeles interessante aktivitets- og toxicitets-karakte-5 ristika.
Det viste sig, at aktiviteten af de omhandlede forbindelse i det væsentlige afhænger af disse forbindelsers evne til at frigøre SAM+-ioner i organismen og af disse ioners evne til at virke som donorer for methylgrupper som det 10 naturlige substrat for et stort antal transmethylase-en- zymer, der katalyserer fundamentale reaktioner i lipid-, protid- og glucocid-metabolismen.
De omhandlede forbindelsers betydning kan således i det væsentlige udledes af det faktum, at de gør S-adenosyl-15 methionin absolut stabil, hvorved det bliver muligt at udnytte denne forbindelses transmethylerende virkning i den menneskelige organisme 100% uden risiko for dannelse af toxiske nedbrydningsprodukter, som udviser en skadelig virkning på de biologiske processer, der aktiveres af SAM+-20 ionerne.
Forbindelsernes betydning skyldes også deres evne til at gøre SAM i stand til at passere igennem cellebarierer og derved gøre denne forbindelse særdeles biotilgængelig.
Toxicitet 25 Man har bestemt den akutte toxicitet hos mus, og i alle tilfælde opnåedes følgende værdier: LD^q ved oral administration ^ 3 g/kg LD^0 ved intravenøs administration > 1 g/kg.
Undersøgelser af tolerancen og den kroniske toxicitet 30 blev gennemført på rotter af stammerne Wistar og Sprague- 149957 16
Dowley, idet man indgav forbindelserne i doser på 20 mg/kg pr. dag i 12 måneder. Ued behandlingens afslutning udviste de forskellige organer og systemer ingen patologiske ændringer.
5 Man har udført teratogenese-forsøg på kaniner. Ued indgivelse af saltene i doser, som var 10 gange større end den maksimale terapeutiske dosis, konstaterede man ikke nogen teratogen virkning eller misdannende virkning på fostrene eller på de terminale fostre.
10 Intravenøse indgivelser af doser på op til 200 mg/kg bevirkede ikke nogen pyrogene manifestationer hos kaniner.
En venøs administration på 40 mg/kg til kaniner og rotter bevirker ingen ændringer i trykket i halspulsåren eller i hjerte- og respirationsfrekvensen, og der iagttages heller 15 ingen ændringer i elektrocardiogrammets form.
Den lokale tolerance ved intramuskulære injektioner, også efter gentagne indgivelser i 30 - 60 dage, og ved intravenøse injektioner i den marginale vene i det ydre øre hos kaniner har vist sig at være fremragende.
20 Farmakologi
En lang række forsøg udført på rotter har vist, at de hidtil ukendte forbindelser ifølge opfindelsen udviser en meget betragtelig beskyttende og helbredende virkning på steatosis hepatis induceret ved hjælp af en hyperlipid-25 hyperprotein-diæt i overensstemmelse med metoden beskrevet af Handler, og på steatosis induceret ved akut alkoholfor giftning og ved hjælp af andre toxiske midler, også når der indgives doser på 10 mg/kg SAM+.
Med hensyn til hyperlipidæmi hos rotter, eksempelvis in-30 duceret med Triton S, har de omhandlede produkter udvist 149957 17 en meget iøjnefaldende hypolipedæmisk virkning, som, i relation til den anvendte dosis, dvs. 10 mg/kg (igen udtrykt i SAM+), var meget mere intens end i det tilfælde, hvor der anvendtes andre medikamenter med hypolipidæmisk 5 virkning.
Hos kyllinger, som er gjort atherosclerotiske ved indgivelse af diæter beriget med cholesterol og fructose, kan en parenteral indgivelse af forbindelserne ifølge opfindelsen i doser på 10 mg/kg reducere forekomsten af chole-10 sterolemi og på favorabel måde modificere de læsioner, som iagttages hos kontroldyr med hensyn til den torakale og abdominale aorta og de små kar i hjernens basis.
Med hensyn til phosphorlipid-metabolismen har det eksperimentelt vist sig, at der sker en forøgelse af mængde af 15 phosphatidylcholin i hjernevævet hos rotter med ikke-kom- penseret steatosis. En tydelig forøgelse i indholdet af phosphatidylcholin kunne også bestemmes på bekostning af de hæmatiske oi-lipoproteiner i eksperimentelle ændringer fremkaldt af β/α-lipoprotein-forholdene.
20 Alle disse forsøg har klart vist, at de omhandlede forbindelser har en helbredende virkning ved ændringer af lipid-metabolismen. En yderligere række af forsøg udført på rotter har vist, at en indgivelse på 1 mg/kg bevirker en akkumulering af de glycogene reserver på lever- og muskel-25 niveau, hvilket er eftervist ved såvel histokemiske metoder som ved kvantitative bestemmelser. I eksperimentelt fremkaldt diabetes induceret med alloxan har den mængde insulin, som er påkrævet for at bringe glykæmi-værdier-ne tilbage til normalt niveau, kunnet reduceres b'etrag-30 teligt ved indgivelser svarende til 0,5 mg/kg SAM+.
Denne række af forsøg har udvist en klart positiv virkning af forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen på giycosidmetabolismen.
149957 18
Endelig har man behandlet rotter med eksperimentelt induceret hypodisproteinæmi med SAM-estere i mængder på 10 mg/kg. Det viste sig, at disse produkter bevirker, at-de totale proteinæmi-værdier vender tilbage til normale ni-5 veauer, idet der sker en væsentlig forøgelse af albuminniveauet, og således udviser de omhandlede forbindelser en bemærkelsesværdig protein-anabolisk virkning.
Disse og andre forsøg har eftervist den kurative aktivitet af de omhandlede forbindelser overfor forstyrrelser i pro-10 tid-metabolismen.
Sammenfattende kan det på basis af de ovenfor beskrevne farmakologiske forsøg og på basis af mange andre forsøg, som har gjort det muligt at klarlægge virkningen af de omhandlede forbindelser på alle niveauer i den menneske-15 lige organisme, siges, at de omhandlede forbindelsers virkning er klinisk fastslået inden for hepatologien, når der er tale om akutte og kroniske leverforgiftninger, inden for neurologien, når der er tale om den antidepressi-ve virkning, og inden for osteologien, når.der er tale om 20 rhenmatoid arthritis.
Forbindelsernes virkning inden for et antal andre områder af den humane terapi er for øjeblikket under udforskning.
Forbindelserne har også ganske uventet udvist en betragtelig antiinflammatorisk og analgetisk virkning.
25 Forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen kan indgives o- ralt, eller de kan indgives ved intramuskulær eller intravenøs injektion. Da forbindelserne imidlertid udmærker sig ved en større intestinal absorption end SAM, er de specielt nyttige til fremstilling af farmaceutiske formuleringer 30 til oral anvendelse.
149957 19
Blandt de andre mulige indgivelsesformer kan anføres stikpiller, væsker til okular installation, aerosoler og salver til topisk påføring.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
IT23940/81A IT1139974B (it) | 1981-09-11 | 1981-09-11 | Derivati della s-adenosilmetionina,processo per la preparazione e composizioni terapeutiche che li contengono come principio attivo |
IT2394081 | 1981-09-11 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DK405382A DK405382A (da) | 1983-03-12 |
DK149957B true DK149957B (da) | 1986-11-03 |
DK149957C DK149957C (da) | 1987-06-15 |
Family
ID=11211012
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK405382A DK149957C (da) | 1981-09-11 | 1982-09-10 | Analogifremgangsmaade til fremstilling af s-adenosyl-methionin-estere |
DK349085A DK155332C (da) | 1981-09-11 | 1985-08-01 | Analogifremgangsmaade til fremstilling af s-adenosylmethionin-derivater |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK349085A DK155332C (da) | 1981-09-11 | 1985-08-01 | Analogifremgangsmaade til fremstilling af s-adenosylmethionin-derivater |
Country Status (25)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4558122A (da) |
EP (1) | EP0074555B1 (da) |
JP (1) | JPS5857397A (da) |
AT (1) | ATE14884T1 (da) |
AU (1) | AU564577B2 (da) |
CA (1) | CA1213886A (da) |
CS (1) | CS241123B2 (da) |
DE (1) | DE3265425D1 (da) |
DK (2) | DK149957C (da) |
ES (1) | ES8403494A1 (da) |
FI (1) | FI74290C (da) |
GR (1) | GR76720B (da) |
HU (1) | HU186117B (da) |
IL (1) | IL66713A (da) |
IT (1) | IT1139974B (da) |
MX (1) | MX5670A (da) |
NO (1) | NO153397C (da) |
NZ (1) | NZ201824A (da) |
PL (1) | PL141706B1 (da) |
PT (1) | PT75516B (da) |
RO (1) | RO85286B (da) |
RU (1) | RU2041235C1 (da) |
SU (1) | SU1340592A3 (da) |
YU (1) | YU43092B (da) |
ZA (1) | ZA826408B (da) |
Families Citing this family (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IT1169773B (it) * | 1983-08-24 | 1987-06-03 | Bioresearch Spa | Processo per la produzione di sali stabili della solfo-adenosil-l-metionina |
CA1291092C (en) * | 1988-03-11 | 1991-10-22 | Donald A. Poole | Easy opening gable top carton |
IT1229514B (it) * | 1989-01-30 | 1991-09-03 | Farmhispania S A A Montme | Glicoconiugati anfifilici sintetici per impiego neurologico. |
JPH02290896A (ja) * | 1989-04-28 | 1990-11-30 | Fuji Kagaku Kogyo Kk | 新規なs―アデノシルメチオニン誘導体 |
US5180714A (en) * | 1990-10-31 | 1993-01-19 | Health Research, Inc. | Adenosine compounds for the treatment of diseases caused by parasitic protozoa |
US8642581B1 (en) | 2000-02-11 | 2014-02-04 | Brian D. Halevie-Goldman | Compositions and methods for the production of S-adenosylmethionine within the body |
US6649753B2 (en) * | 2001-06-07 | 2003-11-18 | Orchid Chemicals & Pharmaceuticals Ltd. | Stable salts of S-adenosyl-L-methionine (SAMe) and the process for their preparation |
US20040116351A1 (en) * | 2002-12-06 | 2004-06-17 | Fast Balance, Inc. | Method for enhancing the natural reward system for exercise |
US20050272687A1 (en) * | 2004-06-08 | 2005-12-08 | Hebert Rolland F | Stable S-adenosyl-l-methionine |
US20090012036A1 (en) * | 2005-05-24 | 2009-01-08 | Hebert Rolland F | Stable S-adenosyl-L-methionine |
ITMI20060629A1 (it) * | 2006-03-31 | 2007-10-01 | Daniele Giovannone | Composizioni solide orali a base di s-adenosilmetionina e processo per il loro ottenimento |
JP2008013509A (ja) * | 2006-07-07 | 2008-01-24 | Fujifilm Corp | S−アデノシルメチオニンの保存方法 |
ITMI20071374A1 (it) * | 2007-07-10 | 2009-01-11 | Gnosis Spa | Sali stabili di s-adenosilmetionina e processo per il loro ottenimento. |
US20100004191A1 (en) * | 2008-07-01 | 2010-01-07 | Rolland F Hebert | Compositions of S-adenosyl-L-methionine. |
EP2601527A1 (en) | 2010-08-05 | 2013-06-12 | Cellzome AG | Methods for the identification of methyltransferase interacting molecules and for the purification of methyltransferase proteins |
ES2824807T3 (es) | 2013-01-16 | 2021-05-13 | Hebert Sam E Llc | Sales de indol-3-propionato estables de S-adenosil-L-metionina |
WO2015028927A1 (en) * | 2013-08-25 | 2015-03-05 | Mahesh Kandula | Compositions and methods for the treatment of metabolic diseases |
ES2667704T3 (es) | 2015-10-05 | 2018-05-14 | Tetra Laval Holdings & Finance S.A. | Una unidad aplicadora para aplicar una tapa sobre un recipiente |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2969353A (en) * | 1957-02-06 | 1961-01-24 | Merck & Co Inc | Process for the preparation of "active methionine" and products obtained thereby |
DE1803978C2 (de) * | 1968-10-18 | 1985-05-02 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur Gewinnung von S-Adenosyl-l-methionin und S-Adenosyl-l-ethionin |
IE37913B1 (en) * | 1972-08-02 | 1977-11-09 | Bioresearch Sas | Salt of s-adenosyl-l-methionine |
IE39517B1 (en) * | 1973-06-27 | 1978-10-25 | Bioresearch Sas | Double salts of s-adenosyl-l-methhionine |
US4028183A (en) * | 1973-06-27 | 1977-06-07 | Bioresearch Limited | Process of preparing double salts of S-adenosyl-L-methionine |
JPS5320998B2 (da) * | 1974-06-13 | 1978-06-29 | ||
FR2275220A1 (fr) * | 1974-06-21 | 1976-01-16 | Merieux Inst | Procede d'obtention de sels organiques de la s.adenosyl-l-methionine. nouveaux sels organiques obtenus des medicaments comprenant un ou plusieurs nouveaux sels obtenus |
AR221676A1 (es) * | 1974-07-12 | 1981-03-13 | Bioresearch Sas | Procedimiento para la preparacion de sales estables sulfonicas y/o sulfuricas de la s-adenosil-l-metionina,particularmente utiles como donadores especificos de metilo para las reacciones bioquimicas de transferencia del grupo ch3;asi como tambien las reacciones fundamentales en el metabolismo lipilico,protilico y glucidico |
GB2001976B (en) * | 1977-08-03 | 1982-03-10 | Yamasa Shoyu Kk | S-adenosyl-l-methionine compositions and production thereof |
GB2064523B (en) * | 1979-12-04 | 1983-06-29 | Kanegafuchi Chemical Ind | Stable composition of s-adenosyl-l-methionine |
JPS5699499A (en) * | 1980-01-10 | 1981-08-10 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | Composition containing s-adenosyl-l-methionine, and its preparation |
JPS56145299A (en) * | 1980-04-11 | 1981-11-11 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | Purification of s-adenosyl-l-methionine |
JPS57156500A (en) * | 1981-03-23 | 1982-09-27 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | Composition containing s-adenosyl-l-methionine and its preparation |
-
1981
- 1981-09-11 IT IT23940/81A patent/IT1139974B/it active
-
1982
- 1982-08-30 AT AT82107970T patent/ATE14884T1/de not_active IP Right Cessation
- 1982-08-30 DE DE8282107970T patent/DE3265425D1/de not_active Expired
- 1982-08-30 EP EP82107970A patent/EP0074555B1/en not_active Expired
- 1982-09-01 ZA ZA826408A patent/ZA826408B/xx unknown
- 1982-09-02 US US06/414,044 patent/US4558122A/en not_active Expired - Lifetime
- 1982-09-03 IL IL66713A patent/IL66713A/xx not_active IP Right Cessation
- 1982-09-06 NZ NZ201824A patent/NZ201824A/en unknown
- 1982-09-06 PT PT75516A patent/PT75516B/pt not_active IP Right Cessation
- 1982-09-08 AU AU88135/82A patent/AU564577B2/en not_active Ceased
- 1982-09-09 GR GR69247A patent/GR76720B/el unknown
- 1982-09-09 CA CA000411119A patent/CA1213886A/en not_active Expired
- 1982-09-09 RO RO108604A patent/RO85286B/ro unknown
- 1982-09-10 CS CS826560A patent/CS241123B2/cs unknown
- 1982-09-10 YU YU2046/82A patent/YU43092B/xx unknown
- 1982-09-10 FI FI823142A patent/FI74290C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-09-10 JP JP57156930A patent/JPS5857397A/ja active Granted
- 1982-09-10 PL PL1982238201A patent/PL141706B1/pl unknown
- 1982-09-10 DK DK405382A patent/DK149957C/da not_active IP Right Cessation
- 1982-09-10 NO NO823088A patent/NO153397C/no unknown
- 1982-09-10 SU SU823494860A patent/SU1340592A3/ru active
- 1982-09-10 ES ES515613A patent/ES8403494A1/es not_active Expired
- 1982-09-10 HU HU822908A patent/HU186117B/hu not_active IP Right Cessation
-
1985
- 1985-08-01 DK DK349085A patent/DK155332C/da not_active IP Right Cessation
-
1987
- 1987-02-09 RU SU874028951A patent/RU2041235C1/ru active
- 1987-03-23 MX MX567087A patent/MX5670A/es unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DK149957B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af s-adenosyl-methionin-estere | |
US4997976A (en) | Use of 1,3-butanediol acetoacetate in parenteral oral nutrition | |
FI63037B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara stbila sulfonater av s-adenosyl-l-metionin | |
US4465672A (en) | Stable S-adenosylmethionine salts, the process for their preparation, and therapeutic compositions which contain them as active principle | |
FI72525B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara stabila s-adenocylmetioninsalter. | |
US4749707A (en) | Citric acid salt of (+) vinpocetine | |
EP0346882B1 (en) | Hydroxyalkylcysteine derivative and expectorant containing the same | |
CH664561A5 (it) | Estere dell'acetil carnitina, procedimento per la sua preparazione e composizioni farmaceutiche che lo contengono. | |
DE2858078C2 (de) | 2-Chlorethylnitrosoharnstoffe, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Zubereitungen | |
US3002978A (en) | Glyceryl pyrrolidone carboxylates | |
CH635102A5 (de) | Verfahren zur herstellung neuer heterocyclischer verbindungen. | |
US2891890A (en) | Method of treating parkinsonism | |
Caccamese et al. | Revision of the stereochemical assignment of a cyclobutane derivative from chalcone photodimerization via X-ray diffraction analysis | |
EP0318357A2 (en) | 1,3-Butanediol acetoacetate and its use in parenteral and oral nutrition | |
EP0232227A1 (en) | Phosphorylalkanolamide derivatives of L-carnitine and pharmaceutical compositions containing same | |
US3184383A (en) | New derivative of gitoxin, the use and preparation thereof | |
US3487046A (en) | Novel pyrazolidone derivatives substituted on the 4 position with a phenolhcho-polyamine ion exchange resin | |
CN1785991B (zh) | 一种抗炎解毒木犀草素类衍生物及其制备方法 | |
DD222593A5 (de) | Verfahren zur herstellung von triazolo-pyrimidin-derivaten | |
JPS59204167A (ja) | ヒドロキノン誘導体およびその製法 | |
CN104434929B (zh) | 闭花木酮的o-(哌嗪基)乙基衍生物在制备抗急性肾衰药物中的应用 | |
CN115785094B (zh) | 苄基取代α-咔啉化合物或其药用盐、其药物组合物及其制备方法和用途 | |
US3790558A (en) | Pyrazolidone derivatives substituted on the 4 position with pectin or algin | |
US3629282A (en) | 3 5-dioxo - 1 2 - diphenyl-4-n-butyl-4-polyoxyethylene pyrazolidines | |
CN1847236B (zh) | 7,8-二羟基-2-氧代-2h-苯并吡喃类衍生物及合成方法和医药用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PBP | Patent lapsed |