DK148807B - Fremgangsmaade til fremstilling af monacolin k - Google Patents
Fremgangsmaade til fremstilling af monacolin k Download PDFInfo
- Publication number
- DK148807B DK148807B DK073180AA DK73180A DK148807B DK 148807 B DK148807 B DK 148807B DK 073180A A DK073180A A DK 073180AA DK 73180 A DK73180 A DK 73180A DK 148807 B DK148807 B DK 148807B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- monascus
- sank
- ferm
- monacolin
- monacoline
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A22—BUTCHERING; MEAT TREATMENT; PROCESSING POULTRY OR FISH
- A22C—PROCESSING MEAT, POULTRY, OR FISH
- A22C25/00—Processing fish ; Curing of fish; Stunning of fish by electric current; Investigating fish by optical means
- A22C25/16—Removing fish-bones; Filleting fish
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
- C07D309/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D309/28—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D309/30—Oxygen atoms, e.g. delta-lactones
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af en cholesterolsynteseinhiberende forbindelse kaldet monacolin K med formlen: i 148807 H°yAy° k/O T ό
Fra beskrivelsen til dansk patentansøgning nr. 730/80 må det anses for kendt at fremstille monakolin K ved dyrkning af en stamme af arten Monascus ruber i et passende dyrkningssubstrat.
5
Det har nu vist sig, at fire hidtil ukendte stammer af arten Monascus ruber og fire udvalgte stammer tilhørende andre arter af slægten Monascus danner monacolin K i væs-10 entlige mængder.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er i overensstemmelse hermed ejendommelig ved, at man dyrker en eller flere af mikroorganismerne Monascus anka SANK 10171 (IFO 6540), 15 Monascus purpurous 148807 2 SANK 10271 (IFO 4513), Monascus ruber SANK 10671 (FERM 4958), Monascus vltreus SANK 10960 (FERM 4960),
Monascus paxii SANK 11172 (IFO 8201), Monascus ruber SANK 13778 (FERM 4959), Monascus ruber SANK 15177 (FERM 5 4956) eller Monascus ruber SANK 18174 (FERM 4957)·
Monascus ruber SANK 10671, Monascus ruber SANK 13778, 10 Monascus ruber SANK 15177 og Monascus ruber SANK 18174 er som nævnt alle nyligt isolerede mikroorganismer og er beskrevet •nedenfor. De øvrige mikroorganismer er kendte og er tidligere beskrevet. Alle er let tilgængelige fra IFO eller FERM ( The Fermentation Research Institute, Agency of 15 Industrial Science and Technology Ministry of Internatio nal Trade and Industry, Japan) således som angivet ved accessionsnumrene angivet i parentes.
De mikrobiologiske egenskaber af de hidtil ukendte mikro-20 organismer er følgende :
Monascus ruber SANK 15177 (FERM 4956)
Denne stamme isoleredes fra jord ved Tukimino, Yamato-byen, Kanagawa-præf ekturen, Japan og deponeredes den 25 27. april 1979 tinder accessionsnumret 4956 i Fermenta tion Research Institute.
Stammen gror udmærket på kartoffel-glukoseagarsubstrat ved 25°C og frembringer et opløseligt farvet materiale, 30 der har en gulligbrun til rødligbrun farve i substratet.
Den danner kleistothecia på det nedre lag af hyferne.
På havremelsagarsubstrat danner den et svagt brunfarvende materiale og vokser udmærket. Dannelsen af kleistothecia 35 er god, og kleistothecia er sfæriske med en diameter på 30 - 60 mikron og dannes på korte stilke. Disse stilke 148807 3 er næsten farveløse og forgrenede og af en størrelse på 25 - 60 x 3»5 - 5,0 mikron. Asci svinder hurtigt væk, og de er således vanskeligt at observere. Ascoporerne er farveløse og ellipsoide, og deres dimensioner er 4,5 5 -6,5x4,0-5,0 mikron; deres overflade er glat.
Conidia er sammenknyttet midtpuhktflyende og af størrelsen 7,0 - 10,0 x 6,0 - 10,0 mikron. Deres væv er itureven.
10 Skønt stammen vokser ved 37°C, ser man den bedste vækst mellem 23 og 30°C.
Monascus Ruber SANK 10671 (FERM 4958)
Denne stamme isoleredes fra jorden ved Shinagawa-ku, 15 Tokyo, Japan og deponeredes 27. april 1979 i Fermenta tion Research Institute under accessionsnr. 4958.
Væksten på kartoffel-glukose og havremelsagarsubstrat er ligesom væksten af stammen SANK 15177, bortset fra at 20 dens opløselige farve,- der fremkommer, er 'mørkrød. · ·
Diameteren af kleistothecia er 30 - 80 mikron, og stilkenes dimension er 30 - 70 x 3,0 - 5,0 mikron. Der ses ikke asci. Ascosporerne er farveløse og ellipsoide, og deres dimensioner er 4,5 - 6,5 x 4,0 - 5,0 mikron. Coni-25 dia er farveløs og pæreformede eller ovale, og deres dimensioner er 6,0 - 10,0 x 6,0 - 8,5 mikron.
Monascus ruber SAM 13778 (FERM 4959)
Denne stamme isoleredes fra jorden ved Inawashirocho, 30
Nagata, Yama-gun, Fukushima-præfekturen, Japan og anbragtes 27. april 1979 i Fermentation Research Institute under accessionsnr. 4959. 1 Væksten på kartoffel-glukose-agar og havremelsagarsub strat er lig med væksten af SANK 15177, bortset fra at den opløseligt frembragte farve er svag rødligbrun 148807 4 til rødligbrun. Kleistothecia har en diameter på 35 -75 mikron, og stilkenes dimension er 30 - 70 x 3,5 - 5,0 mikron. Der ses ikke asci. Åseosporerne er farveløse og ellipsoide, og deres dimensioner er 4,5 - 6,0 x 5 4,0-5,0 mikron. Deres overflade er glat. Dimensionerne på conidia er 7,0 - 10,0 x 6,0 - 10,0 mikron.
Monascus ruber SAM 18174 (FERM 4957)
Denne stamme isoleredes fra jord ved Shakotancho, Sha-10 kotan-gun, Shiribeshi Shicho, Kokkaido-præfekturen,
Japan og anbragtes 27„ april 1979 i Fermentation Research Institute under accessionsnr. 4957.
Væksten på kartoffel-glukose-agar og havremelsagarsub-15 strat er lig med væksten af SANK 15177, bortset fra at det frembragte farvede, materiale er svagt lyserødt. Kleistothecia har en diameter på 20 - 70 mikron, og stilkenes dimensioner er 20 - 60 x 3,0 - 5,0 mikron.
Der ses ikke asci. Ascosporerne er farveløse og ellip-20 soide, og deres dimensioner er 5,0 - 7,0 x 4,0 - 5,5 mikron; deres overflade er glat. Conidia er midtpunktflyende knyttet sammen, og de er farveløse, og de fleste af dem er pæreformede og med dimensionerne 6,0 - 9,5 x 6,0 - 10,0 mikron.
25
Baseret på de ovenfor nævnte egenskaber identificeredes disse mikroorganismer alle som stammer af Monascus ruber van Tieghem. 1 2 3 4 5 6
Mikrobiologiske egenskaber af Monascus ruber er omtalt 2 i følgende litteratur : Takada, Transactions of the 3 . Micological Society of Japan £, 125 - 130 (1969) (Mate 4 rials for the Fungus Flora of Japan (7)) og van Tieghem, 5
Bull. Soc. Botan. France, ^1, 227 (1884).Ascosporefrem- 6 stilling af arten er blevet omtalt af Cole et al i
Canadian Journal of Botany, 46, 987 (1968), "Conidium 148807 5 ontogeny in hyphomycetes. The imperfect . state of Monascus ruber and its meristem arthrospores"..
Monacolin K frembringes ved at dyrke den udvalgte 5 mikroorganisme i en dyrkningsbouillon under aerobe be tingelser, idet man anvender samme metoder, som er velkendte af fagmanden til dyrkning af svampe eller andre mikroorganismer. For eksempel kan den udvalgte stamme af Monascus først dyrkes på et passende substrat, og heref-10 ter kan de frembragte mikroorganismer opsamles og podes i og dyrkes på et andet dyrkningssubstrat for at frembringe det ønskede monacolin K; dyrkningssubstrat anvendt for opformering af mikroorganismerne og dyrkningssubstratet, der anvendes til fremstilling af m.onacolin K, kan være 15 det samme eller et andet substrat.
Et hvilket som * helst, velkendt dyrkningssubstrat til dyrkning af svampe kan anvendes, forudsat at det indeholder, som velkendt, de nødvendige nærings-20 stoffer, specielt en assimilerbar carbonkilde og en assi-milerbar nitrogenkilde. Eksempler på velegnede kilder for assimilerbart carbon er glukose, maltose, dextrin, stivelse lactose, sucrose og glycerol. Af disse kilder foretrækkes specielt glukose, glycerol og stivelse til fremstil-25 ling af monacolin K. Eksempler på velegnede kilder for assimilerbar nitrogen er pepton,kødekstrakt,gay,gærekstrakt, sojabønnemel,jordnøddemel, majsstøbevaske, risskaller og uorganiske nitrogenkilder. Af disse nitrogenkilder foretrækkes specielt pepton. Når man fremstiller monacolin k, 30 kan et uorganisk salt og/eller et metalsalt eventuelt sættes til dyrkningssubstratet. Eventuelt kan yderligere en mindre mængde tungmetal også tilsættes.
Mikroorganismerne dyrkes fortrinsvis under aerobe betin-35 gelser, idet man anvender velkendte dyrkningsmetoder, for eksempel fast kultur, rystekulturer eller kulturer 148807 6 under gennemluftning og omrøring. Mikroorganismerne gror inden for et bredt temperaturområde f.eks. fra 7 til 40° C, men specielt til fremstilling af monacolin K er det mest foretrukne dyrkningstemperatur inden for 5 20 - 30°C.
Under dyrkningen af mikroorganismerne kan produktionen af rønacolin K kontrolleres ved at udtage prøver af dyrkningssubstratet og måle den fysiologiske aktivitet 10 af nonacolin K i dyrkningssubstratet ved de neden for beskrevne metoder. Dyrkningen kan herefter fortsætte, indtil en væsentlig akkumulering af m.onacolin K er opnået i dyrknings substratet, på hvilket tidspunkt ironacolin K herefter kan isoleres og udvindes fra dyrkningssubstratet 15 og mikroorganismecellerne ved en hvilkensomhelst kombi nation af isoleringsmetoder, idet man udvælger den foretrukne med hensyn til fysiske og kemiske egenskaber af forbindelsen. For eksempel kan en eller flere af følgende isoleringsmetoder anvendes : ekstraktion af væsken fra 20 dyrkningsbouillonen med et hydrofilt opløsningsmiddel (som f .eks. diethyler,. ethylacetat, chloroform eller benz en), ekstraktion af organismen med et hydrofilt opløsningsmiddel (såsom acetone eller en alkohol), opkoncentrering f.eks. afdampning af noget eller dele 25 af opløsningen under reduceret tryk; opløsning i et mere polært opløsningsmiddel (såsom acetone eller en alkohol); fjernelse af urenheder med et mindre polært opløsningsmiddel som f.eks. petroleumsæter eller hexanol); gelfiltrering gennem en søjle af et materiale som f.eks.
30 n Sephadex" ( handelsnavn for et materiale, der forhand les af Pharmacia, Co. Limited, U.S.A.); absorptiv kromatografi med aktiv carbon eller silicagel; og andre lignende metoder. Ved at anvende en passende kombination af disse metoder, kan det ønskede monacolin K isoleres 35 fra kulturbouillonen som en ren forbindelse.
148807 7
Det ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede monacolin K er karakteriseret ved følgende egenskaber :; 1. Farve og form : Farveløse nåle.
5
2. Smeltepunkt : 157 - 158°C
3. Elementaranalyse i 10 Fundet : C, 72,67%; H, 9,13%; O, 18,2%.
Beregnet : C, 71,25%; H, 8,97%; O, 19,78%.
4. Molekylvægt : 404 (ved massespektrometri).
15 5. Molekylformel : ^24^36^5* 6. Ultraviolet absorptionsspektrum (methanol) : max. ved 232, 238 og 246 pm.
20 7. Opløselighed ; Let opløselig i methanol, ethanol, acetone, ethylacetat, 'chlorofomn- og carbontetrachlorid.
Opløselig i benzen..
25-
Uopløselig i hexan og petroleumsæter.
3Q 8. Farvereaktion : Lyserød farve ved 50% v/v svovlsyre på et tyndt lags kromatografi på silicagel.
148807 8 9. Tyndtlagskromatografi : R^værdi = 0,45 (silicagel ^25k (Merck & Co., Ltd.) : 0,25 min tyk, flergangs (x3) fremkaldelse med 7 : 3 rum- 5 fangsblanding af methylen- chlorid og ethylacetat og behandling med jod eller 30% _ v/v svovlsyre).
10 Forbindelsen er neutral og uopløselig i neutrale eller sure vandige substrater. Den kan imidlertid omdannes til en sur forbindelse ved behandling med alkali, og denne . sure forbindelse er opløselig i vand. Den sure forbindelse kan ekstraheres med ethylacetat eller chloroform ved 15 sure pH-værdier og vil genomdannes til monacolin K ved afdampning af opløsningsmidlet.
Den fysiologiske virkning af monacolin K kan efterprøves og bestemmes kvantitativt ved følgende in vivo og 20 in vitro forsøg, der kan anvendes til at styre produkt tionen af monacolin · K under forløbet af fremgangsmåden . ifølge opfindelsen.
In vivo forsøg med kaniner 25 I dette forsøg måles monacolin K’s evne til at reduce re cholesterolniveauerne i kaninblod. De anvendte dyr vejede fra 2,5 til 3,0 kg. Ved forsøgets begyndelse opsamledes blod fra en vene i hver kanins øre, og man målte cholesterolniveauet i blods er urnet ved almindeligt an-30 vendte metoder. En forudbestemt mængde monakolin K eller en monacolin K-holdig dyrkningsbouillon administreres herefter oralt kontinuerligt i fra 1 til 5 dage, og cholesterolniveauet i blodserumet måles på forskellige .tidspunktér efter administreringen. Styrken af monacolin 35 K eller monacolin K-holdig dyrkningssubstrat kan be stemmes kvantitativt fra blodcholesterolniveauerne opnået inden og efter administreringen af monacolin K.
9 148807
In vitro forsøg med rottelever Råt enzym fra rottelever omsættes med radioaktivt eddikesyre i 60 minutter ved 37°C. Den radiaktive cholesterol, der er således biosyntetiserat, forsæbes,og herefter 5 udfældes der med digitonin. Radioaktiviteten måles for at bestemme mængden af produceret cholesterol. Fremgangsmåden gentages, bortset fra at monacolin K eller monaco-lin-K-holdig dyrkningsbouillon tilsættes ved begyndelsen af omsætningen, og mængden af biosyntetiseret kolesterol 10 bestemmes atter, hvorved man får et kvantitativ mål for den hæmmende virkning af Monacolin K (Bricker et al,
The Journal of Biological Chemistry, 247. 4914 (1972)).
Dette forsøg er særlig værdifuld som en hurtig og let metode til at kontrollere monacolin K produktionen under 15 den omhandlede dyrkningsproces ifølge opfindelsen.
Monacolin K's evne til at sænke blod- og leverkolesterolniveauerne er undersøgt i forskellige in vivo forsøg. 1 2 3 4 5 6
Reduktion af blod- og leverkolesterolniveauer i rotter 2
De anvendte dyr var rotter af Wistar Imamichi-stammen, 3 der hver havde en legemsvægt på ca 300 g. Forsøgene ud 4 førtes på grupper af rotter, idet hver gruppe bestod af 5 5 dyr. Hvert dyr injiceredes intravenøst med 400 mg/kg 6 "Triton" WR-1339 ( handelsnavn for et materiale, der vides at forøge blodcholesterolniveauet) , medens man samtidig indgav 10 mg/kg atonacolin K enten peroralt eller intraperitonealt. 20 timer efter peroraladministrering-30 en eller 14 timer efter intraperitonealadministreringen aflivedes rotterne ved afblødning, og blodet og leveren omsamledes, og cholesterolniveauerne heraf bestemtes ved almindelige metoder. Man fandt herved, at blodcholesterolniveauet var blevet reduceret ved 22,4%, når det drejede 35 sig om peroral administrering, og med 23,9%, når det drejede sig om intraperitoneal administrering i forhold til kontrolgruppen af dyr, der havde fået "Triton"WR-1339.
U8807 10
Levercholesterolniveauerne var blevet reduceret med 16,7% i dyrene, til hvilke man havde administreret monacolin K peroralt.
5 Reduktion af blodcholesterolniveauerne hos kaniner
De anvendte dyr var kaniner, der havde en kropsvægt mellem 2,7 og 2,9 kg. Hver kanin fik peroralt 1 mg/kg monacolin K to gange dagligt (morgen og aften) kontinu-10 erligt i 5 dage. Inden administreringen og ved 3 eller 5 dage efter administreringen opsamledes blod fra en ørevene,og ch-olesterolniveauerne i blodserumet bestem tes. Herved fandt man,at cfelesterolniveauerne 3 og 5 dage efter administreringen af ironacolin K var hen-15 holdsvis 15 og 29% mindre end niveauet inden monacolin K-administreringen.
Det viste'sig,at monacolin K giver 50% hæmning af chol-sterolbiosyntesen ved en koncentration på 0,002 pg/ml 20 i forsøg, hvor eddikesyre omsættes med enzym fra rotte lever. Man har fundet, at monacolin-K hæmmer HMG-CoA reduktasen, der er det hastighedskontrollerende enzym i chlæsterolbiosyntesen, og at det i konkurrence hæmmer substratet HMG-CoA, og at det har en Ki-værdi på 5,3 x 25 lCT^M. Ki-værdien er hæmningskonstanten og specielt dissociationskonstanten af det enzymhæmmende kompleks.
Værdien fås som produktet af enzymkoncentrationerne og inhibitorerne divideret med koncentrationen af det enzymhæmmende kompleks.
30
Ikke alene har monacolin K en værdifuld hæmmende virkning på jcholesterolbiosyntesen, men det'har også en meget lav toksicitet hvilket gør anvendelsen heraf særdeles attraktiv ved behandling af hyperkolesteraemi.
35 Den akutte toksicitet (LD^q) af monacolin K i mus er 1 g/kg legemsvægt eller mere.
148807 11
Monacolin K kan administreres peroralt eller parenteralt i form af en kapsel, tablet, injicerbar præparat eller i andre velkendte formuleringer, skønt det normalt foretrækkes at administrere det peroralt. Dosis vil variere 5 af patientens alder og legemsvægt og sygdommens tilstand, men sædvanligvis er den daglige dosis hos voksne fra 0,5 til 50 mg, enten i en enkelt dosis eller i 2 eller 3 opdelte doser. Imidlertid kan også højere doser anvendes, dersom det er nødvendigt, i betragtning af forbindelsens 10 lave toksicitet.
Opfindelsen illustreres nærmere i efterfølgende eksempler.
15 Eksempel 1 300 1 af et dyrkningssubstrat med en pH på 7,4 før steriliseringen og indeholdende 1,5 vægt/rumfangpr ocent opløselig stivelse, 1,5 vægt/rumfangprocent glycerin, 2 vægt/rumfangprocent fiskemel og 0,2 vægt/rumfangprocent 20 calciumcarbonat udhældes i en 600 1 forgæringsbeholder og tilsåedes med organismen Monascus ruber SANK 18174 (FERM 4957). Dyrkningen af organismen udførtes i 120 timer ved 27°C med en gennemluftningshastighed på 300 1 per minut, og omrøring med 190 omdrejninger pr. minut.
25 Kulturbouillonen filtreredes i en filterpresse, hvilket gav 290 1 filtrat og 60 kg (vådvægt) af organismen.
Filtratets pH blev justeret til 4,0 ved tilsætning af 6N saltsyre, og derefter estraheredes filtratet med 400 30 1 ethylacetat. Extrakten koncentreredes, tørredes over vandfrit natriumsulfat, hvorefter man inddampede til tørhed, hvilket gav 95 g af et olieagtigt produkt.
Organismen'( der havde 2,5 gange så megen aktivitet som filtratet) extraheredes to gange, hver gang med 100 1 35 af en 80 rumfang/rumfangprocent vandig methanol. Methå- nolen afdampedes fra extrakten, og remanensen extrahe- .
12 1A 800 7 re’des to gange, hver gang med 100 1 ethylacetat. De forenede extrakter koncentreredes, tørredes over vandfrit natriumsulfat og inddampedes derefter til tørhed, hvilket gav 128 g af et olieagtigt produkt. Dette sloges sammen 5 med remanensen fra filtratet af dyrkningsbouillonen.
De herved fremkomne 223 g olieagtigt produkt adsorberedes i en søjle, der indeholdt 3 kg silicagel ('Wakogel "C-200), som tidligere havde været behandlet med benzen. Søjlen 10 elueredes først med 10 1 benzol og så med 180 1 af en 4:1 rumfangsblanding methylenchlorid og ethylacetat.. Den aktive fraktion blev fordampet til tørhed, hvorved man fik 30 g af et olieagtigt produkt, der adsorberedes på en søjle, der indeholdt 450 g silicagel (Wakogel C-200), som 15 tidligere havde været behandlet med hexan.
Søjlen elueredes først med 2 1 hexan, herefter med 30 1 af en 9:1 rumfangsblanding af hexan og acetone, og dernæst med 30 1 af en 4:1 rumfangsblanding af hexan og 20 acetone. Den aktive fraktion koncentreredes, og bund faldet frafiltreredes. Filtratet inddampedes til tørhed, hvorved man fik 4 g af et olieagtigt produkt, der adsorberedes på en søjle, der indeholdt 96 g silicagel OWako-gel"C-200), . der forud var behandlet med hexan. Søjlen 25 elueredes først med 500 ml hexan og derefter med 6 1 9:1 rumgangsblanding af hexan og acetone. Den aktive fraktion inddampedes til tørhed, hvorved man fik 521 mg af. et olieagtigt produkt, som blev adsorberet på en søjle indeholdende 30 g silicagel ("Wakogel" C-200), som 30 forud var behandlet med benzen. Søjlen blev først elue- ret med 10 ml benzen og dernæst med 100 ml 95:5 rumgangs-. blanding af benz.en og ethylacetat og endelig med 900 ml af en 4:1 rumfangsblanding af benzen og ethylacetat. Den aktive fraktion koncentreredes., hvorved man fik 92 mg 35 farveløse krystaller, der ved omkrystallisation med vandig acetone gav 54 mg monacolin K i form af farveløse nåle.
13 148607
Eksempel 2-8 300 1 af et dyrkningssubstrat, med en pH på 6,0 inden steriliseringen og indeholdende 2 vægt/rumgangsprocent glukose, 2 vægt/rumgangsprocent pepton ("Kyokuto"-5 fabrikat, der forhandles af Kyokuto Seiyaku KK, Japan) og 0,3 vægt/rumfangsprocent · maj sstøbevæske udhældes i en 600 1 forgæringsbeholder og tilsåedes med en af de i Tabel 1 anførte mikroorganismer. Dyrkningen af mikroorganismerne fortsatte i 96 timer ved 27°C med en 10 gennemluftningshastighed på 300 1 pr. minut og omrøring med 190 omdrejninger pr. minut.
Efter dette tidsrum udtoges 1 ml dyrkningsbouillon, og der extraheredes med ethylacetat indstillet til en pH-15 værdi på 3-4. Ekstrakten optoges i 0,2 ml af reaktionsblandingen beskrevet af M Kuroda, Y. Hazama-Shimada og A. Endo i Biochim. and Biophys. Acta., 486 (1977)» side 254 - 259 ("Inhibition of Sterol Synthesis by Citrinin in a Cell-free System from Rat Liver and Yeast") 20 og A. Endo, M. Kuroda og Y. Tsujita i Journal of Antibio tics, publiceret af Japanese Antibiotics Research Association, 2£ No. 12 (December 1976), side 1346 - 1348, og hæmningsprocenterne af cholesterolbiosyntesen bestemtes. Resultaterne angives i Tabel 1 som aktivitetsenheder 25 hæmning pr. ml dyrkningsbouillon, idet 50% hæmning af cholesterolbiosyntesen er lig med 1 enhed/ml.
148807 14 TABEL 1
Eks« Organisme Hæmningsaktivi- nr. tet, enheder/ml 2 Monascus purpurous SANK 10271 120 3 Monascus ruber SANK 10671 120 4 Monascus vitreus SANK 10960 150 5 Monascus paxii SANK 11172 120 6 Monascus ruber SANK 13778 440 7 Monascus ruber SANK 15177 2,400 8 Monascus ruber SANK 18174 20,000 148807 15
Disse resultater viser, at meget væsentlige mængder af monacolin K produceres af de omhandlede mikroorganismer.
Eksempel 9 ^ Fremgangsmåden beskrevet i eksempel 2-8 gentoges, bortset fra at den anvendte mikroorganisme var Monascus anka SANK 10171, og prøver af dyrkningssubstratet blev fjernet efter 96 timer 168 timer 216 timer og 288 10 timers dyrkning. Hæmningsaktiviteten måltes ved den samme prøve, som anvendtes ved eksemplerne 2-8, og var henholdsvis 110, 100, 30 og 80 enheder/ml.
Eksempel 10-17 15 300 1 af et flydende dyrkningssubstrat med en pH-værdi på 5,5 inden steriliseringen og indeholdende 5 vægt/ rumfangsprocent glukose, 0,5 vægt/rumfangsprocent maj-søbevæske, 2 vægt/rumfangsprocent pepton (Kyokuto) og 0,5 vægt/rumfangsprocent ammoniumchlorid udhædtes i en 20 600 1 dyrkningstank. En af de i Tabel 2 anførte stammer indpodedes i substratet og dyrkedes i 120 timer. Dette gentoges hver for sig for hver af de andre stammer.
Efter hver dyrkning filtreredes substratet gennem en 25 filterpresse, der gav en våd myceliakage i de mængder, der er vist i Tabel 2 og et filtrat. pH-værdien i filtratet indstilledes til 4,0 ved tilsætning af 6N saltsyre, hvorefter man extraherede med 400 1 ætylacetat. Extraktet, der udgjorde ca 400 1, kondenseredes ved ind-30 dampning under reduceret tryk og tørredes over vandfri natriumsulfat. Den kondenserede ekstrakt kondenseredes yderligere, hvorefter man inddampede til tørhed, hvilket gav en olie i en mængde, der er angivet i Tabel 2 som "mængde af ekstrakt fra bouillon".
Samtidig extraheredes myceliékagen, der havde ca 2 - 3 gange aktiviteten af det tilsvarende filtrat, to gange, 35 148807 16 hver gang med 100 1 af 80 rumfang/rumfang vandig methanol. Ekstrakten kondenseredes og tørredes over vandfrit natri-umsulfat. Den kondenserede ekstrakt kondenseredes yderligere og inddampedes til tørhed, hvilket gav en olie i en 5 mængde, der er vist i Tabel 2 som "mængde af ekstrakt fra myceliekagen".
De fremkomie olier fra henholdsvis filtrat og myceliekagen sloges sammen og adsorberedes herefter på en søjle 10 silicagel (3 kg "Wakogel" C-200, fremstillet med benzen), der herefter elueredes med 10 1 benzen og 180 1 af en 4:1 rumfangsblanding af methylenchlorid og ethylacetat.
Den aktive del fra elueringen kondenseredes og inddampedes til tørhed, hvilket gav en olie i en mængde, der er 15 angivet i Tabel 2 under "Fraktion 1". Denne olie adsorberedes på en søjle indeholdende 340 til 450 g silicagel ("Wakogel" C-200, der forud var behandlet med hexan), og mængden til silicagel svarende til 1 g pr. 65 mg olie. Herefter elueredes denne søjle med 1,5 - 2 1 hexan, der-20 næst med 23 - 30 1 af en 9:1 rumfangsblanding hexan og acetone og til slut med 23 - 30 1 af en 4 : 1 rumfangsblanding af hexan og acetone.
Den aktive fraktion fra denne eluering kondeseredes, og 25 krystallerne, der udfældede, frafiltreredes. Den fremkomne remanens kondenseredes yderligere og inddampedes til tørhed, hvorved man fik en olie i en mængde, der er vist i Tabel 2 under "Fraktion 2". Denne fraktion adsorberedes på en søjle indeholdende 18 - 135 g silicagel ("Wakogel" 30 C-200, der forud var behandlet med hexan), idet mængden af silicagel svarede til 1 g pr. 42 mg olie. Søjlen blev så elueret først med 100 - 750 ml hexan og dernæst med 1,2 -9 1 af en 9 : 1 rumfangsblanding af hexan og acetone. Den aktive fraktion fra denne eluering kondenseredes og ind-35 dampledes til tørhed, hvilket gav en olie i en mængde, der er vist i Tabel 2 under "Fraktion 3"· Denne olie adsorbe- 148807 17 redes på en søjle indeholdende 6 - 45 g silicagel "Wakogel" C-200, der forud var behandlet med benzen), idet mængden af silicagel svarede til 1 g pr. 17 mg olie. Søjlen elueredes herefter med 15 - 100 ml benzen, 5 dern st med 15 - 100 ml af en 95 : 5 rumfangsblanding af benzen og ethylacetat og endelig med 120 - 1,200 ml af en 4 : 1 rumfangsblanding af benzen og ethylacetat.
Den aktive fraktion kondenseredes, hvilket gav de i Tabel 2 angivne mængder af rå krystaller monacolin K.
10 Disse rå krystaller omkrystalliseredes fra vandig acetone, hvilket gav omkrystalliserede krystaller i form af farveløse nåle, hvis mængder er angivet i Tabel 2.
ua807 18
CO
M
0
0 R
Ό 0 0
&0<Η·ϋ-Ρ^ . CM HfACMHCMOCO
R 0 Q) X! hO Ο Ο Ο Η H CM Η H
8 H Øw CMCMCMCMCMCMCMCM
!§ S U ø-p to P 0 0X0 0) XJ (0 >)&0 hot) a 0^-* vO-cfintnOINCnin
R -P XI &0 Η Η H CM CM CM H CM
83 W 0 øv_^ HHHHHHHH
SX ί·Η 0<MH
+3 R 0 X O dø H
MR 0H^ vOtNOOChHinHCn r -p r η ω co oo oo co σ> σ\ σν σ\ 8 ra «η 3w Μχ ο 0 ,□
• I
CM 0 0 Η Η τ5 H ø'-' „ pq&oøboho vo in in H oo tn co cm m fl ο ox . in in in vo m vo m vo eh s a
rH
IN
CM O
O H VO
H tN (T\ CM CD IN -Ϊ
H VO O IN IN IN IN
C-WOHH1NHH
η £ η h m in oo
O 3 W rH rH rH iH
S g “ MCQCQCQCQ
CO R 3
0 R 0 ·Η R in R
øpCDRHØØO) ,¾ R ,Ω -P * ,Ω ,Ω ,Ω 0 R00 ·Η 0000
g 0PJr!>P4RRR
ø 00000000 -P 22222230 cq οοοοοοοο øøøøøøøø øøøøøøøø rrrpjsrrr οοοοοοοο
SSSSSSSSS
ø ·
Xi R OHCMmO-invOIN
W R i HHHHHHHH
Claims (2)
148807 TABEL 2 (fortsat) Eks. Fraktion Monacolin K nr. 1 2 3 Rå krystaller Omkrystalli- 5 (g) (g) (»g) (-S) f£eWStal" 10 22 0,9 102 9,3 0,8 11 23 1,3 113 10,4 1,1 10 12 22 0,75 98 8,9 0,8 13 25 1,1 110 10,7 1,2 15 14 24 2,2 121 12,0 1,6 15 28 1,65 216 14,2 6,3 16 26 1,8 235 24,4 9,8 20 17 29 5,7 765 135,0 81,0
1. Fremgangsmåde til fremstilling af monacolin K ved dyrkning af en stamme af slægten Monascus, kende-30 tegnet ved, at den dyrkede stamme er en eller flere af Monascus anka SANK 10171 (IFO 6540), Monascus purpurous SANK 10271 (IFO 4513), Monascus ruber SANK 10671 (FERM 4958), Monascus vitreus SANK 10960 (FERM 4960), Monascus paxii SANK 11172 (IFO 8201), Monascus 35 ruber SANK 13778 (FERM 4959), Monascus ruber SANK 15177 (FERM 4956) eller Monascus ruber SANK 18174 (FERM 4957).
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5792779A JPS55150898A (en) | 1979-05-11 | 1979-05-11 | Preparation of a new physiologically active substance mb-530b |
| JP5792779 | 1979-05-11 | ||
| KR1019800001707A KR830002329B1 (ko) | 1979-05-11 | 1980-04-29 | 모나콜린 k의 제조방법 |
| KR800001707 | 1980-04-29 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK73180A DK73180A (da) | 1980-11-12 |
| DK148807B true DK148807B (da) | 1985-10-07 |
| DK148807C DK148807C (da) | 1986-04-28 |
Family
ID=26399012
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK73180A DK148807C (da) | 1979-05-11 | 1980-02-20 | Fremgangsmaade til fremstilling af monacolin k |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4323648A (da) |
| JP (1) | JPS55150898A (da) |
| KR (1) | KR830002329B1 (da) |
| AT (1) | AT372975B (da) |
| AU (1) | AU534647B2 (da) |
| BE (1) | BE882325A (da) |
| CA (1) | CA1129795A (da) |
| CH (1) | CH645891A5 (da) |
| DE (2) | DE3006215A1 (da) |
| DK (1) | DK148807C (da) |
| ES (1) | ES489751A0 (da) |
| FR (1) | FR2456141A1 (da) |
| GB (1) | GB2049664B (da) |
| IE (1) | IE49749B1 (da) |
| IT (1) | IT1133075B (da) |
| NL (1) | NL8001697A (da) |
| SE (2) | SE467975B (da) |
Families Citing this family (33)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5925599B2 (ja) * | 1979-02-20 | 1984-06-19 | 三共株式会社 | 新生理活性物質モナコリンｋおよびその製造法 |
| ES8105781A1 (es) * | 1979-07-27 | 1981-06-16 | Sankyo Co | Un procedimiento para la preparacion de sales y esteres, de monacolina k utiles como agentes antitlipercolesteremicos. |
| US4444784A (en) * | 1980-08-05 | 1984-04-24 | Merck & Co., Inc. | Antihypercholesterolemic compounds |
| US4351844A (en) * | 1980-02-04 | 1982-09-28 | Merck & Co., Inc. | Hypocholesterolemic hydrogenation products and process of preparation |
| JPS56142236A (en) | 1980-04-08 | 1981-11-06 | Sankyo Co Ltd | Ml-236a and mb-530a derivative |
| MX7065E (es) * | 1980-06-06 | 1987-04-10 | Sankyo Co | Un procedimiento microbiologico para preparar derivados de ml-236b |
| US4343814A (en) * | 1980-11-17 | 1982-08-10 | Merck & Co., Inc. | Hypocholesterolemic fermentation products |
| JPS5835144A (ja) * | 1981-08-27 | 1983-03-01 | Sankyo Co Ltd | Ｍｂ−５３０ｂ誘導体およびその製造法 |
| JPS5855443A (ja) * | 1981-09-25 | 1983-04-01 | Sankyo Co Ltd | オクタヒドロナフタリン誘導体およびその製造法 |
| US4678806A (en) * | 1986-09-02 | 1987-07-07 | Merck & Co., Inc. | Prodrugs of antihypercholesterolemic compounds |
| US4865977A (en) * | 1987-03-13 | 1989-09-12 | Shell Oil Company | Increasing monascus pigment production |
| DE3801588A1 (de) * | 1988-01-21 | 1989-08-10 | Hoechst Ag | Verfahren zur herstellung von farbstoffen und/oder wirkstoffen in der wasserarmen, sterilen wirbelschicht |
| KR960004032B1 (ko) * | 1992-10-26 | 1996-03-25 | 롯데제과주식회사 | 신균주 모나스커스 앵카 732y3(kccm10014) |
| HU210867B (en) * | 1992-11-04 | 1995-10-30 | Biogal Gyogyszergyar | Method for extraction and purification of mevinolin from culture medium |
| BG61613B1 (bg) * | 1994-06-24 | 1998-01-30 | Анна Куюмджиева | Щам моnаsсus рurрurеus-продуцент на пигмент и биоактивни продукти |
| US7238348B2 (en) | 1996-09-30 | 2007-07-03 | Beijing Peking University Wbl Corporation Ltd. | Method of treatment of osteoporosis with compositions of red rice fermentation products |
| US6046022A (en) * | 1996-09-30 | 2000-04-04 | Peking University | Methods and compositions employing red rice fermentation products |
| US6258361B1 (en) | 1996-10-21 | 2001-07-10 | Akio Yoshihara | Agent for recovering hematopoietic function and processed food both containing treated product of peanut seed coats |
| US6391583B1 (en) | 1998-12-18 | 2002-05-21 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method of producing antihypercholesterolemic agents |
| US20020197274A1 (en) * | 2001-04-19 | 2002-12-26 | Ming-Shi Shiao | Lithospermic acid-containing composition |
| WO2003020218A2 (en) * | 2001-08-30 | 2003-03-13 | Taipei-Veterans General Hospital | Salvianolic acid b |
| KR100379075B1 (en) * | 2002-03-07 | 2003-04-08 | Jinis Biopharmaceuticals Co | Method for producing low cholesterol animal food product and food product therefrom |
| TWI262949B (en) * | 2002-08-15 | 2006-10-01 | Food Industry Res & Dev Inst | Monascus purpureus mutants and their use in preparing fermentation products having hypotensive activity |
| DE102004062386B4 (de) * | 2003-12-24 | 2010-06-24 | Food Industry Research And Development Institute | Monacolin K-Biosynthese-Gene |
| KR100710500B1 (ko) * | 2005-05-18 | 2007-04-24 | 고려대학교 산학협력단 | 홍국균을 이용한 모나콜린 ｋ 생산방법 |
| US20120171285A1 (en) * | 2007-06-01 | 2012-07-05 | Opheim Joar A | Substances for reducing occurrence of major cardiac events comprising omega-3 polyunsaturated fatty acid or derivatives thereof and high-monacolin k content red yeast rice extract |
| US20120172425A1 (en) * | 2007-06-01 | 2012-07-05 | Opheim Joar A | Red yeast rice extract high in monacolin k content |
| US20100119600A1 (en) | 2007-06-01 | 2010-05-13 | Joar Opheim | Substances for reducing occurrence of major cardiac events comprising red yeast rice extract and omega-3 polyunsaturated fatty acid or derivative thereof |
| US20120171311A1 (en) * | 2007-06-01 | 2012-07-05 | Opheim Joar A | Substances for reducing occurrence of major cardiac events comprising epa or derivatives thereof, optionally, dha or derivatives thereof and monacolin k |
| CN101317660B (zh) * | 2008-06-23 | 2012-10-24 | 谢键泓 | 一种提高红曲洛伐他汀在水中溶解度的方法及应用 |
| CN102625705B (zh) * | 2009-04-08 | 2015-05-06 | 南洋理工学院 | 包含他汀类药物的植物提取物及其制备技术和用途 |
| CN116083252B (zh) * | 2023-04-12 | 2023-06-27 | 北京一品堂医药科技有限公司 | 一种高产降脂天然莫拉可林k的红曲米发酵制备方法 |
| CN116925926B (zh) * | 2023-07-14 | 2024-02-02 | 中国农业大学 | 富硒红色红曲霉发酵生产洛伐他汀的方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5612114B2 (da) * | 1974-06-07 | 1981-03-18 | ||
| JPS5925599B2 (ja) * | 1979-02-20 | 1984-06-19 | 三共株式会社 | 新生理活性物質モナコリンｋおよびその製造法 |
| IL60219A (en) * | 1979-06-15 | 1985-05-31 | Merck & Co Inc | Hypocholesteremic fermentation products of the hmg-coa reductase inhibitor type,their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
-
1979
- 1979-05-11 JP JP5792779A patent/JPS55150898A/ja active Pending
-
1980
- 1980-02-20 DK DK73180A patent/DK148807C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 DE DE19803006215 patent/DE3006215A1/de active Granted
- 1980-02-20 SE SE8001338A patent/SE467975B/sv not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 CH CH136780A patent/CH645891A5/de not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 DE DE3051097A patent/DE3051097C2/de not_active Expired - Lifetime
- 1980-03-04 GB GB8007240A patent/GB2049664B/en not_active Expired
- 1980-03-19 BE BE0/199871A patent/BE882325A/fr not_active IP Right Cessation
- 1980-03-19 AT AT0148280A patent/AT372975B/de not_active IP Right Cessation
- 1980-03-20 ES ES489751A patent/ES489751A0/es active Granted
- 1980-03-20 CA CA348,220A patent/CA1129795A/en not_active Expired
- 1980-03-20 FR FR8006203A patent/FR2456141A1/fr active Granted
- 1980-03-20 IE IE577/80A patent/IE49749B1/en not_active IP Right Cessation
- 1980-03-21 AU AU56678/80A patent/AU534647B2/en not_active Expired
- 1980-03-21 NL NL8001697A patent/NL8001697A/nl not_active Application Discontinuation
- 1980-03-21 IT IT67445/80A patent/IT1133075B/it active
- 1980-04-04 US US06/137,821 patent/US4323648A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-04-29 KR KR1019800001707A patent/KR830002329B1/ko active
-
1987
- 1987-04-09 SE SE8701483A patent/SE468482B/sv not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IT1133075B (it) | 1986-07-09 |
| DE3006215A1 (de) | 1980-11-27 |
| IE800577L (en) | 1980-11-11 |
| SE468482B (sv) | 1993-01-25 |
| IT8067445A0 (it) | 1980-03-21 |
| IE49749B1 (en) | 1985-12-11 |
| FR2456141B1 (da) | 1983-11-18 |
| DE3051097C2 (da) | 1990-02-08 |
| FR2456141A1 (fr) | 1980-12-05 |
| ES8104409A1 (es) | 1981-04-16 |
| CH645891A5 (de) | 1984-10-31 |
| BE882325A (fr) | 1980-09-19 |
| AT372975B (de) | 1983-12-12 |
| NL8001697A (nl) | 1980-11-13 |
| SE8701483D0 (sv) | 1987-04-09 |
| AU534647B2 (en) | 1984-02-09 |
| DE3006215C2 (da) | 1989-01-05 |
| CA1129795A (en) | 1982-08-17 |
| SE8701483L (sv) | 1987-04-09 |
| KR830002875A (ko) | 1983-05-31 |
| ATA148280A (de) | 1983-04-15 |
| AU5667880A (en) | 1980-11-13 |
| US4323648A (en) | 1982-04-06 |
| ES489751A0 (es) | 1981-04-16 |
| GB2049664B (en) | 1983-01-12 |
| DK148807C (da) | 1986-04-28 |
| GB2049664A (en) | 1980-12-31 |
| DK73180A (da) | 1980-11-12 |
| SE467975B (sv) | 1992-10-12 |
| KR830002329B1 (ko) | 1983-10-22 |
| SE8001338L (sv) | 1980-11-12 |
| JPS55150898A (en) | 1980-11-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK148807B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af monacolin k | |
| CA1129794A (en) | Antihypercholesteraemic agent, monacolin k, and its preparation | |
| US3983140A (en) | Physiologically active substances | |
| US4049495A (en) | Physiologically active substances and fermentative process for producing the same | |
| FI67231B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av en hypokolesteremisk foerening | |
| NO156210B (no) | Fremgangsmaate til fremstilling av monacolin k derivater. | |
| JPS5822120B2 (ja) | ３−０−（β−Ｄ−グルクロノピラノシル）−ソ−ヤサポゲノ−ルＢ | |
| US5276055A (en) | Antibiotic agents | |
| NL8204904A (nl) | Dihydro- en tetrahydromonacolin l, metaalzouten en alkylesters daarvan, alsmede werkwijze voor het bereiden ervan. | |
| JP3026864B2 (ja) | 新規セスキテルペン誘導体 | |
| JPS5840475B2 (ja) | 新生理活性物質ｍｌ−２３６ａおよびその製造法 | |
| DK165990B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af carboxylsyren af en cholesterolsynteseinhiberende forbindelse kaldet monacolin k eller salte deraf | |
| JPS6113798B2 (da) | ||
| JPS6320215B2 (da) | ||
| JPH0532656A (ja) | デカリン系化合物 | |
| JPH04321698A (ja) | 生理活性物質ｍ６１２４及びその製造方法 | |
| JPS6324518B2 (da) | ||
| WO1995018142A1 (en) | Wf15604 substances | |
| KR20010025876A (ko) | 페니실리움 속(Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ.)Ｆ70614(ＫＣＴＣ 8918Ｐ)와 α-글루코시다제 저해제 | |
| JPS5889187A (ja) | Ｎｏ１４−ａ物質およびその製造法 | |
| JPS58209986A (ja) | 抗生物質ホスホノクロリンおよびその製造法 | |
| JPS6210998B2 (da) | ||
| JPH10139771A (ja) | 新規化合物ａｍ６９２７及びその製法 | |
| JPH0479639B2 (da) | ||
| JPH0717905A (ja) | Ｑ−６９１６化合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUP | Patent expired |