BG61613B1 - Щам моnаsсus рurрurеus-продуцент на пигмент и биоактивни продукти - Google Patents

Щам моnаsсus рurрurеus-продуцент на пигмент и биоактивни продукти Download PDF

Info

Publication number
BG61613B1
BG61613B1 BG98875A BG9887594A BG61613B1 BG 61613 B1 BG61613 B1 BG 61613B1 BG 98875 A BG98875 A BG 98875A BG 9887594 A BG9887594 A BG 9887594A BG 61613 B1 BG61613 B1 BG 61613B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
strain
monascus
monascus purpureus
lactose
pigment
Prior art date
Application number
BG98875A
Other languages
English (en)
Other versions
BG98875A (en
Inventor
Анна Куюмджиева
Jean-Noel Hallet
Валентин САВОВ
Таня Рашева
Original Assignee
Анна Куюмджиева
Jean-Noel Hallet
Валентин САВОВ
Таня Рашева
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Анна Куюмджиева, Jean-Noel Hallet, Валентин САВОВ, Таня Рашева filed Critical Анна Куюмджиева
Priority to BG98875A priority Critical patent/BG61613B1/bg
Priority to US08/493,691 priority patent/US5627068A/en
Publication of BG98875A publication Critical patent/BG98875A/bg
Publication of BG61613B1 publication Critical patent/BG61613B1/bg

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0089—Oxidoreductases (1.) acting on superoxide as acceptor (1.15)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A23L5/40—Colouring or decolouring of foods
    • A23L5/42—Addition of dyes or pigments, e.g. in combination with optical brighteners
    • A23L5/46—Addition of dyes or pigments, e.g. in combination with optical brighteners using dyes or pigments of microbial or algal origin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9728—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q1/00—Make-up preparations; Body powders; Preparations for removing make-up
    • A61Q1/02—Preparations containing skin colorants, e.g. pigments
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/42—Colour properties
    • A61K2800/43—Pigments; Dyes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52—Stabilizers
    • A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

Щамът моnаsсus рurрurеus 94-25, продуцент на пигменти и съпътстващи биологично активни вещества, е селекциониран при култивиране на хранителна среда на основата на отпадъци от млекопреработвателната промишленост. Той е подходящ за промишлено производство, при което се оползотворяват големи количества отпадъци от млечната индустрия чрез екологично чиста и безотпадъчна технология. Полученият пигментен продукт има супероксиддисмутазни и антиоксидантни свойства с приложими в хранително-вкусовата и козметичната промишленост.

Description

Област на техниката
Изобретението се отнася до щам Monascus purpureus, продуцент на пигменти и биоактивни продукти, които имат приложение в хранително-вкусовата промишленост.
Предшестващо състояние на техниката
Гъбите, принадлежащи към Monascus, са известни от хилядолетия в страните от Югоизточна Азия. Те са използвани във ферментативната промишленост при производството на червен ориз, червено соево сирене и червено оризово вино (1). Гъбите от род Monascus синтезират червени, жълти и оранжеви пигменти, характеризиращи се с термостабилност и добра оцветяваща способност, което определя широкото им приложение в хранително-вкусовата промишленост и козметиката (2).
За производството на пигменти се използват различни щамове - Monascus purpureus, Monascus anka, Monascus major, Monascus rubiginosus (3,4).
Тези микроорганизми са култивирани върху течни или твърди синтетични или комплексни субстрати. Най-често използваните хранителни среди са на базата на зърнени храни като ориз (5), овес, пшеница (6), като продължителността на култивиране е 14 - 18 дни. При тези условия се получават предимно водонеразтворими пигменти и в повечето случаи е необходима следферментационна химическа модификация (7). Частично решение на проблема за получаване на водоразтворими пигменти е култивиране на гъби, принадлежащи към род Monascus, върху хранителна среда - млечен или суроватъчен пермеат, отпадък от производството на млечни продукти (8).
Техническа същност
Целта на изобретението е да се синтезира щам микроорганизъм, принадлежащ към род Monascus, който усвоява лактоза, синтезира различни биоактивни продукти и е пригоден за осъществяване на мащабно производство.
Задачата се решава чрез селекциониране на щам продуцент, който има необходимите технологични качества и усвоява лактоза.
Полученият нов щам Monascus purpureus 94-25 е депозиран в Националната банка за промишлени микроорганизми и клетъчни култури под регистрационен N 2325 от 6.06.1993 г и има следната характеристика.
Щам Monascus purpureus 94-25 е изолиран от червен ориз след продължителна селекция и е охарактеризиран съгласно таксономичните критерии на Hawksworth u Pitt, 1983 (9).
Растеж на среда Чапек - Дрождев екстракт агар при 25°С - 7 дни. Monascus purpureus 94-25 образува колонии с диаметър 12-18 mm, с в грапава повърхност, понякога с малко въздушен растеж, бял или червеникав мицел. Образува клейстотеции и/или алейроконидии. На повърхността му се образуват малки капки червен ексудат. Обичайно се образува разтворим пигмент - оранжев или розов, отделящ се в агара около колонията. Понякога се наблюдава реверсия до бледо- или пастелно червено. На същата хранителна среда при температура 37°С за 7 дни Monascus purpureus 94-25 образува колонии с размер 15-22 mm в диаметър, подобни на описаните, но често със слаба пигментация.
Растеж на среда Малцов екстракт агар, при 25°С - 7 дни. Monascus purpureus 94-25 образува колонии с размер 15-22 mm в диаметър. Първоначално мицелът е бял, след това силно се пигментира в червено или оранжево. Образува клейстотеции и алейроконидии. Понякога ревертира до оранжев или тъмнооранжев.
Растеж на среда 25% Глицерол - Нитратен агар при 25°С - 7 дни. Monascus purpureus 94-25 образува колонии с размер 8-15 mm диаметър, обичайно нагънати, подобни на среда Чапек - Дрождев екстракт агар.
Морфологична характеристика: Monascus purpureus 94-25 образува обилен мицел, с неправилни, разклонени, хиалинни хифи, широки 3-5 pm, стените обикновено са с многобройни кристални оранжево - червени структури. Алейроконидиите възникват проединично или на къси верижки, главно треминално върху хифите. Понякога се образуват латерално или симподиално, с дебели гладки стени, обичайно 8 - 11 на брой и с размери 8-10 μπι. Клейстотециите са глободии, образуващи се върху отделна хифа с диаметър 25 - 45 до 60 2
Клейстотециите са слободии, образуващи сс върху отделна хифа с диаметър 25 - 45 до 60 - 70 pm. Преидиумът е хиалинен, състоящ се от хифи, оплетени в сак. Аскусите са пълни със спори. Аскоспорите са хиалинни, гладки, 4 - 8 на брой, с размери 4-5 pm.
Изразено полово размножаване на щам Monascus purpureus 94-25 се наблюдава на следната хранителна среда (g/Ι): глюкоза 40, КН2РО4 1.0, MgSO47H20 0.5, NaCl 0.5, NH4C1 0.5, FeSO47H20 0.01, ZnSO47H20 0.001, pH 6.0. Безполово размножаване се наблюдава на същата хранителна среда, но като азотен източник се използва 3 g/1 NaNO3 или KNO3. Температура на култивиране 30°С, продължителност
3-7 дни.
Толерантност към NaCl - щам Monascus purpureus 94 - 25 е толерантен към 6% NaCl.
Температура на растеж: минимална 14°С оптимална 34°С максимална 46°С
Прототрофност: Щам Monascus purpureus
- 25 е прототрофен.
Биохимична характеристика: Щам Monascus purpureus 94 - 25 се различава от други 5 известни щамове, принадлежащи към род Monascus по това, че окислява лактоза. На таблица 1 е дадена сравнителна характеристика на способността за асимилация на различни въглеродни източници на новия щам Monascus 10 purpureus 94-25 и известни щамове гъби, принадлежащи към род Monascus от различни колекции. Асимилационният тоест е проведен на течна хранителна среда в състав (g/Ι): КН2РО4 1.0. MgSO47H20 0.5, NaCl 0.5, NaNO3 3.0, FeSO4 15 7H20 0.01, ZnSO47H20 0.001, pH 6.0 и концентрация на въглеродния източник 40 g/1. Култивирането е проведено в Ерленмайрови колби от 500 ml с хранителна среда 100 ml на ротационен Шутел апарат при температура 30°С за 7 дни. Растежът е отчитан тегловно.
Таблица 1
Въглероден източник Щамове микроорганизми
Monascus purpureus 94-25 Monascus purpureus CBS 109.07 Monascus anka IFO 4478 Monascus ruber DSM 1561
Глюкоза + + + +
Лактоза + - - -
Фруктоза + + + +
Галактоза + + - -
Мелибиоза + + - -
Малтоза + + + +
Рафиноза + + + +
Захароза + + + -
Ксилоза + + + +
Ксилитол + + + +
Рибитол + + + +
Сорбитол + + + -
Еритритол + - - +
М-инозитол + - - +
Галактитол + + + +
Манитол + + + +
Глицерол + + + -
Етанол + + + -
Метанол + - - -
нокиселини (глутаминова киселина, аспаргинова киселина, треонин и триптофан в концентрация 0.01 0.1 %), а така също и сух млечен или суроватъчен пермеат в концентрация
0.1 - 2% (Таблица 2).
Изследваните галактопиранозиди (галактоза, мелибиоза, изопропил-р-О-тиогалактозид) и глицерин оказват синергичен ефект върху усвояването на лактоза, прибавени в концентрации 01 - 1.0%. Подобен ефект върху 5 усвояването на лактоза имат и различни амиТаблица 2
Хранителна следа с лактоза % асимилация на лактоза от щам Monascus purpureus 94-25
Без добавки : 32%
Смес от аминокиселини 0.1 % 68%
Сух пермеат 1 % 87%
Казеионв хидролизат 1 % 76%
Ферментация на въглеродни източници: Monascuc purpureus 94-25 не ферментира лактоза, малтоза, галактоза, рафиноза, захароза и глюкоза.
Новоизолираният щам Monascus purpureus 94-25 е култивиран на хранителна среда - ултрафилтрационен пермеат от мляко или суроватка, при температура 28-37°С, аерация 0.3 - 1/0 l.l/min, обороти 200 - 500, pH 4-7 в продължение на 2 - 4 дни. Като индуктори на лактозната асимилация се използват галактопиранозиди в концентрация 0.01 - 1.0% и различни аминокиселини в концентрация 0.01 - 0.1 %. Пигментната синтеза се стимулира от бетаин и меланоиди (0.01 - 1.0% меласа). В зависимост от компонентите на хранителната среда и условията на култивиране щамът продуцира биомаса и/или водоразтворими червени пигменти, и/или оранжеви кристали, и/или биоактивни продукти като липиди, метилкетони и инбихиботри на холестеролната биосинтеза.
Предимствата на новия щам се състоят в следното:
- селекционираният щам продуцент Monascus purpureus 94-25 е способен да натрупва пигменти в достатъчно количество за осъществяване на рентабилно производство;
- селекционираният щам продуцент Monascus purpureus 94-25 има способност да окислява лактоза и да синтезира комплекс биоактивни продукти (едноклетъчен протеин, пигменти, метилкетони, липиди и инхибитори) при култивиране на субстрати, отпадъци от производството на млечни продукти;
- получените пигменти се характеризират с висока супероксид дисмутазна и антиоксидантна активност и могат да намерят приложение като заместители на ензима супероксид дисмутаза в хранително-вкусовата промишленост и медицината;
- чрез използване на селекционирания щам Monascus purpureus 94-25 в крупно мащабно производство се оползотворява обемен отпадък от млечната индустрия и се създава безотпадна и екологично чиста технология.
Примери за изпълнение на изобретението
Изобретението се илюстрира със следните примери.
Пример 1. Използван е щам Monascus purpureus 94-25, поддържан върху твърда хранителна среда, със следния състав (g/Ι): глюкоза 20, пептон 10, малцов екстракт 5, агар 20, pH 6.0. Култивирането е осъществено при 30°С за 7 дни. Основната ферментация се осъществява на ферменторен апарат BioEngineering с работен обем 101, при температура 30°С, pH 6.0, обороти на разбъркване 300, аерация 0.3 l/1/min. Хранителната среда съдържа (g/ 1): лактоза 20, бетаин и меланоиди (меласа 0,1%), натриев глутамат 5.0, дрождев екстракт 1.0, MgSO47H20 0.5, КН2РО4 1.0, NaCl 0.5, pH 6.0. Инокулирането се осъществява с
48- часова вегетативна култура, получена на течна поддържаща среда. Максимално количество пигмент се регистрира на 72 h. Полученият продукт се отделя от биомасата чрез центрофугиране. Количеството на получения пигмент е 550 - 600 Оптически единици/mg сухо тегло.
Пример 2. Използван е щам Monascus purpureus 94-25. Култивирането е проведено при условията, описани в пример 1. Хранителната среда представлява пермеат от мляко или суроватка, получен след ултрафилтрация на апарат DDS с мембрани 5 kDa, със следната характеристика (g/Ι): лактоза 45-50, белтък 0.9 - 1.0, аминокиселини 0.5, азот 1.0 - 1.3, фосфор 2.0 - 2.5. Към псрмеата сс добавят поотделно галактоза, мелибиоза, глицерин в концентрация 0.6% и изопропил-Р-О-тиогалактозид - 0.1 %.Резултатите от различните ва5 рианти са представени в таблица 3. Култивирането продължава 72 h и полученият продукт се отделя от биомасата чрез центрофугиране. Следва изсушаване на филтрта чрез лиофилизация. Полученият продукт има следната характеристика: прахообразна, червена, разтворима във вода субстанция, съдържаща (mg/ g сухо вещество): пигмент 600 - 800 оптически единици, белтък 16.8, протеолитична активност 1.5 E/mg белтък.
Таблица 3
Въглероден източник Консумация на лактоза, % Пигментна продукция
ОЕ/mg сух продукт Отношение 500/400 nm
Лактоза 4,2% 30 580-640 1.46
Лактоза 4,2% Глицерин 0.6% 50 650-700 1.50
Лактоза 4.2% Галактоза 0.6% 58 720-780 1.58
Лактоза 4.2% Мелибиоза 0.6% 60 800-820 1.65
Лактоза 4.2% Изопропил-Р-Dтиогалактозид 0.1% 70 800-850 1.72
Получените пигменти са екстрахирани казват супероксид дисмутазна и антиоксиднаот културалната среда и пречистени с ТСХ и 4θ та активност (таблица 4). HPLC. Хроматографски чистите пигменти поТаблица 4.
Хроматографски чисти пигменти Супероксид дисмутазна активност, E/mg пигмент Антиоксидантна активност OE/mg пигмент
Червен 3.2 ± 0.15 100 ± 4
Оранжев 4.02 ± 0.10 130 ± 3
Жълт 4.36 ± 0.09 180 ± 2
Пример 3. Използван е щам Monascus purpureus 94-25. Условията на култивиране са описани в пример 1. Хранителната среда за основната ферментация има следния състав (g/l): КН2РО41.0, MgSO47H20 0.5, NaCl 0.5, (NH4)2SO4 5 0.5, pH 6.0. Като въглероден източник е използвана глюкоза с концентрация 20 g/l. Ферментационният процес продължава 72 h, като полученият продукт представлява едри оранжеви аморфни кристали. Културалната течност 10 се отделя чрез филтриране, полученият продукт се промива и изсушава чрез лиофилизация. Той има следната характеристика: прахообразна, оранжево оцветена субстанция, съдържаща 650-700 Оптически единици/mg сухо 15 вещество пигмент.
Пример 4. Използван е щам Monascus purpureus 94-25. Условията на култивиране са описани в пример 1. Хранителната среда за основната ферментация има следния състав (g/l): КН2РО4 1.0, MgSO47H20 0.5, NaCl 0.5, NH4C1 0.5, pH 6.0. Като въглероден източник е използвана лактоза с концентрация 20 g/l. Допълнително в различни варианти са добавени галактоза, мелибиоза, глицерин и изопропил-З-О-тиогалактозид в концентрация 0.6%. Полученият продукт представлява големи оранжеви аморфни кристали, които се отделят от културалната течност чрез филтриране, след което се промиват и сушат. Резултатите от различните варианти са представени в Таблица 5.
Таблица 5
Въглероден източник Консумация на лактоза Пигментна продукция
OE/mg сух продукт Отношение 500/400 nm
Лактоза 4,2% 35 540-580 0.710
Лактоза 4.2% Глицерин 0.6% 55 620-650 0.587
Лактоза 4.2% Галактоза 0.6% 64 700-750 0.420
Лактоза 4.2% Мелибиоза 0.6% 60 700-730 0.456
Лактоза 4.2% Изопропил-p-Dтиогалактозид 0,1 % 65 400-480 0.415
Пример 5. Използван е щам Monascus purpureus 94-25. Посевният материал за ферментационния процес се получава на течна хранителна среда със следния състав (g/l): лактоза 20, галактоза 8, КН2РО4 1.0, MgSO47H20 0.5, 45 NaCl 0.5, NaNO3 3.0, FeSO47H20 0.01, ZnSO47H20 0.001, pH 6.0. Култивирането се провежда в колби от 500 ml на ротационен Шутел апарат при температура 30°С за 24 h. Биосинтезата на метилкЕтони се осъществява на 50 хранителна среда със следния състав: суроватъчен или млечен пермсат, разреден 1:2 със съдържание на мастни киселини 0.7% (С6-С10) и втори вариант с добавка на 0.5 тМ смес от мастни киселини (С6,С8,С10). Култивирането е осъществено на ферменторен апарат BioEngineering с работен обем 10 1 и следните параметри на култивиране: обороти на разбъркване 300, аерация 0.5 l/1/min, продължителност на култивиране 48 h. Резултатите за количеството на получените метилкетони при трансформация на мастните киселини от гъбата са показани на таблица 6.
Таблица 6
Хранителна среда Метилкетони, 0/ /о Остатъчна концентрация на мастни киселини, % АСВ, g/l
Пермеат 1:2 0.45 0.15 2.45
Пермеат 1:2 + 0.66 0.08 3.63
0.5 шМ смес (С4-С.„) 0 10
Пример 6. Използван е щам Monascus purpureus 94-25 - червен и бял вариант. Условията на култивиране са описани в пример 1. Използвана е хранителна среда на Чапек - Докс със следния състав /g/1/тлюкоза 40, КН2Р04 1.0, MgSO47H20 0.5, NaCl 0.5, NH4C1 0.5, FeSO47H20 0.01, ZnSO47H20 0.001, pH 6.0. Освен тази хранителна среда е използван и млечен или суроватъчен пермеат със следната характеристика (g/Ι): лактоза 40 - 45, органичен азот 1.0, фосфор 2.0, аминокиселини 0,5, белтък 0.9. Допълнително се прибавят 8 (g/Ι) галактоза. Биосинтезата на биомаса и липиди е проследена в динамика. Резултатите за качествения и количествен състав на липидите и биомасата са показани в таблица 7.
Таблица 7
Време на култививиране, h Биомаса АСВ, % Белттък, % Тотално количество липиди, % Липиди, %
неутрални липиди фосфолипиди гликолипиди
24 1.62 48 13.12 81.34 10.22 8.44
48 2.54 50 44.22 81.35 9.02 9.02
72 3.48 50 63.12 81.45 10.44 8.11
Пример 7. Щам Monascus purpureus 9425 е култивиран при температура 28°С за 7 дни при следните условия: хранителна среда млечен или суроватъчен пермеат 100%. като добавка към него са използвани следните вещества (g/Ι): глицерин 20, галактоза 8, pH 6.5. Култивирането се осъществява на ферменторен апарат BioEngineering с работен обем 10 1, обороти на разбъркване 300, аерация 0.6 l/1/min, температура 30°С.При тези условия Monascus purpureus 94-25 процедира дехидромонаколин L, монаколин X и монаколин К. Културалната следа се екстрахира с етилацетат при кисело pH - 3. Слоят етилацетат се концентрира, след което се подлага на хроматографско разделяне, при което се поучават чисти фракции моноаколин X, L, К, инхибитори на холестеролОвата синтеза.

Claims (5)

  1. Патентни претенции
    1. Щам Monascus purpureus 94-25, регистриран в Национална банка за промишлени микроорганизми и клетъчни култури под регистрационен № 2325 от 06.06.1993 г, продуцент на биомаса, пигменти и биоактивни продукти.
  2. 2. Метод за получаване на червени и оранжеви пигменти, продуцирани от гъби от род Monascus, характеризиращ се с това, че като щам продуцент с използван щам Monascus purpureus 94-25, култивиран на хранителна среда, съдържаща 10 - 100% пермеат от мляко или суроватка, 0.01 - 1.0% вещества, индуциращи лактозната асимилация и пигментна биосинтеза, при температура 28-37°С, аерация 0.31 5 1/1/min, pH 4 - 7 за 2 - 4 дни.
  3. 3. Метод за получаване на биомаса и биоактивни продукти от гъби от род Monascus, характеризиращ се с това, че като щам продуцент е използван щам Monascus purpureus 94- 10 25, култивиран на хранителна среда 10 - 100% пермеат от мляко или суроватка и 0.1 - 1.0% вещества, стимулиращи лактозната асимилация и биосинтезата на биомаса и биоактивни вещества, при температура 28-37°С, аерация 15 0.3 1 1/1/min, pH 4- 7 за 2 - 4 дни.
  4. 4. Метод съгласно претенции 2 и 3, характеризиращ се с това, че като вещества, стимулиращи лактозната асимилация, се използват галактопиранозиди в концентрация 0.01 - 20 1.0% и различни аминокиселини в концентрация 0.01 - 0.1%.
  5. 5. Метод съгласно претенции 2 и 3, характеризиращ се с това, че като вещества, стимулиращи пигментната синтеза, се използват бетаин и меланоиди (0.01 - 1.0% меласа).
BG98875A 1994-06-24 1994-06-24 Щам моnаsсus рurрurеus-продуцент на пигмент и биоактивни продукти BG61613B1 (bg)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BG98875A BG61613B1 (bg) 1994-06-24 1994-06-24 Щам моnаsсus рurрurеus-продуцент на пигмент и биоактивни продукти
US08/493,691 US5627068A (en) 1994-06-24 1995-06-22 Monascus purpureus strain producer of pigments and by-products

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BG98875A BG61613B1 (bg) 1994-06-24 1994-06-24 Щам моnаsсus рurрurеus-продуцент на пигмент и биоактивни продукти

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG98875A BG98875A (en) 1996-01-31
BG61613B1 true BG61613B1 (bg) 1998-01-30

Family

ID=3925713

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG98875A BG61613B1 (bg) 1994-06-24 1994-06-24 Щам моnаsсus рurрurеus-продуцент на пигмент и биоактивни продукти

Country Status (2)

Country Link
US (1) US5627068A (bg)
BG (1) BG61613B1 (bg)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6046022A (en) 1996-09-30 2000-04-04 Peking University Methods and compositions employing red rice fermentation products
US7238348B2 (en) * 1996-09-30 2007-07-03 Beijing Peking University Wbl Corporation Ltd. Method of treatment of osteoporosis with compositions of red rice fermentation products
JP2003516952A (ja) 1999-12-14 2003-05-20 ユニリーバー・ナームローゼ・ベンノートシヤープ レッドイーストライスエキスを含有する整肌化粧料組成物
JP4522522B2 (ja) * 2000-01-28 2010-08-11 グンゼ株式会社 紅麹およびその製造法
FR2830757B1 (fr) * 2001-10-16 2004-10-08 Oreal Compositions pour la coloration de la peau proche du bronzage naturel contenant un filtre uv et un pigment du type monascus et utilisations
FR2830756B1 (fr) * 2001-10-16 2005-02-11 Oreal Compositions pour la coloration de la peau proche du bronzage naturel a base d'un pigment du type monascus et utilisations
FR2830755B1 (fr) * 2001-10-16 2004-10-08 Oreal Compositions pour la coloration de la peau proche du bronzage naturel a base d'un pigment du type monascus et d'un autobronzant mono ou polycarbonyle et utilisations
EP1302199A3 (fr) 2001-10-16 2004-07-28 L'oreal Compositions pour la coloration de la peau proche du bronzage naturel a base d'un pigment du type monascus et utilisations
TWI253468B (en) * 2004-05-25 2006-04-21 Taiwan Tobacco & Liquor Corp Method for producing beer-like and alcohol-free fermented beverage
CN100443585C (zh) * 2005-11-09 2008-12-17 朱兰琴 红曲霉菌株丹溪-3号
CN100443583C (zh) * 2005-11-09 2008-12-17 朱兰琴 红色红曲霉菌株丹溪-1号
CN100443584C (zh) * 2005-11-09 2008-12-17 朱兰琴 紫红曲菌株丹溪-2号
US20080102081A1 (en) * 2006-08-08 2008-05-01 ALEXIS Brian Preparations and applications for treatment of high cholesterol levels
KR101048032B1 (ko) * 2009-10-15 2011-07-13 성신여자대학교 산학협력단 천연 Ｓｔａｔｉｎ과 ＣｏＱ10 화합물이 강화된 약제학적 조성물
CN102617533B (zh) 2011-02-01 2014-08-27 北京北大维信生物科技有限公司 一种从红曲中分离的化合物、其制备方法及用途
CN107723320B (zh) * 2017-09-08 2020-09-18 广东科隆生物科技有限公司 一种直接制备晶体红曲橙色素的方法
CZ308411B6 (cs) * 2017-12-18 2020-08-05 Výzkumný ústav potravinářský Praha , v.v.i. Způsob produkce přírodních pigmentů v submerzních kulturách mikroskopické houby Monascus
CN108865610B (zh) * 2018-07-10 2021-10-22 贵州大学 一种对蒸馏型米酒增色增香的方法
US10590371B1 (en) * 2018-10-29 2020-03-17 Ying-Ling Huang Method and device for fermentation based on microbial asexual reproduction
CN114621878A (zh) * 2022-03-24 2022-06-14 劲牌有限公司 一种绿衣红心小曲及其在提升小曲白酒中乙酸乙酯含量的应用

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH606421A5 (bg) * 1976-06-02 1978-10-31 Nestle Sa
JPS55150898A (en) * 1979-05-11 1980-11-25 Sankyo Co Ltd Preparation of a new physiologically active substance mb-530b
US4418081A (en) * 1981-07-06 1983-11-29 The Quaker Oats Company Natural red coloring prepared from an oat substrate
US4418080A (en) * 1981-07-06 1983-11-29 The Quaker Oats Company Natural red coloring prepared from wheat and barley substrates

Also Published As

Publication number Publication date
BG98875A (en) 1996-01-31
US5627068A (en) 1997-05-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG61613B1 (bg) Щам моnаsсus рurрurеus-продуцент на пигмент и биоактивни продукти
Carvalho et al. Production of Monascus biopigments: an overview
Hadar et al. Chemical composition of the edible mushroom Pleurotus ostreatus produced by fermentation
JPH05508532A (ja) ゼアキサンチン及びゼアキサンチン含有組成物の製造
Manan et al. Monascus spp
CA1042375A (en) Fermentative removal of water-soluble carbohydrates in plant protein products
JP2024501297A (ja) 真菌バイオマスの生産
CN108795819B (zh) 一种复合微生物培养物及其在生产类胡萝卜素中的应用
KR100788764B1 (ko) 대두액을 이용한 발효조성물 및 이를 이용한 기능성 식품
EP1070136B1 (en) Strain of the microorganism penicillium oxalicum var. armeniaca and its application
JPH02124883A (ja) 抗酸化作用を有するイソフラボン誘導体およびその製造法
Asghari et al. Optimization of Monascus pigment production on date waste substrates using solid state fermentation
US5026641A (en) Bacteria culture and fermentation using the same
KR0133989B1 (ko) 버섯균주를 이용한 장류 및 그 제조방법
de Carvalho et al. Production of pigments
KR0177356B1 (ko) 모나스커스 색소의 생산성 증진 방법
RU2111253C1 (ru) Способ получения биомассы
Fahmia et al. Submerged-fermentation of brassica oleracea l. Capitata using lactobacillus plantarum to reduce anti-nutrient compound
AEM et al. Red yeast as a powerful stable biopigment producer under various growth conditions
EP0538050B1 (en) Process for producing streptovaricin C
RU2126831C1 (ru) Штамм гриба pleurotus ostreatus - продуцент белковой биомассы
US5210033A (en) Process for preparing and selecting hyperproducing microorganism strains used for the process for producing streptovaricin C
RU2053301C1 (ru) Пара штаммов гетероталличного гриба blakeslea trispora f - 674(+) и f-551(-), продуцирующая бета-каротин
KR100403146B1 (ko) 신규한 모나스커스 속 미생물, 이를 함유한 미생물제 및제조방법
DE2261270C3 (de) Verfahren zur Herstellung zellwändelysierender Enzymkomplexe, so erhältliche Enzymkomplexe und deren Verwendung