DEK0016934MA - - Google Patents
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Description
BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND
Tag der Anmeldung: 2. Februar 1953 Bekanntgemacht am 30. Mai 1956
DEUTSCHES PATENTAMT
Die Lymph- und Ohrspeicheldrüsen von Wiederkäuern enthalten einen Inaktivator des Pankreashormons
Kallikrein, der als Hemmstoff des KaMikreins, als Mittel zur Zufuhr großer Mengen von
inaktivem Kallikrein und als Hemmstoff von Fermenten eine therapeutische Bedeutung besitzt.
, Es ist bekannt, Präparate dieses Inaktivators herzustellen, indem man nach H. Kraut, E. K.
Frey und E. Werle (Hoppe-Seyler's, Zeitschrift
ιό ffür physiologische Chemie, 192, 1 ff., 1930) die getrockneten
Organe mit Wasser oder verdünnter ,Essigsäure extrahiert und den Inaktivator durch
Zusatz von Alkohol zu diesen Extrakten fällt.
Es wurde nun gefunden, daß man wesentlich reinere Präparate bei sehr guter Ausbeute erhalten
kann, wenn man die Extrakte zuerst mit Trichloressigsäure ,zwecks Fällung des Eiweißes versetzt
und dann bei schwach alkalischer Reaktion unwirksame Begleitstoffe durch Zusatz desselben Volumens'
an Alkohol ausfällt. Um an diese Behandlung die Ausfällung des Inaktivators mit größeren Alkoholmengen
anschließen zu können, muß man die Trichloressigsäure entfernen. Dies geschieht, indem
man die mit Essigsäure versetzten alkoholischen Lösungen im Vakuum auf etwa V20 ihres Volumens
eindampft und dann in bekannter Weise die Tri-
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K 16934 IVa/30h
. chloressigsäure mit Äther extrahiert. Nach Entfernung
der Trichloressigsäure gelingt die Fällung des Inaktivators durch Alkohol. Anschließend kann
man die den Inaktivator begleitendem Salze durch Ionenaustauscher entfernen und nochmals mit
Alkohol fällen. Die so erhaltenen Trockenpräparate enthalten nur noch ι bis 2 γ organischer Substanz
je Inaktivatoreinheit. Die Ausbeute, berechnet auf den Inaktivatorgehalt der getrockneten Organe, beträgt
rund 8o°/o.
iog getrocknete Ohrspeicheldrüsen von Rindern
werden mit 200 ecm n/so-Essigsäure extrahiert. In
180 ecm der filtrierten Extraktionslösung sind etwa 9000 Einheiten des „Kallikrein-Inaktivators . enthalten.
Diese Lösung wird mit 20 ecm" 25%iger Trichloressigsäurelösung versetzt und 30 Minuten
bei Zimmertemperatur stehengelassen. Dann wird filtriert und der Niederschlag verworfen. Das FiI-trat
versetzt man mit der gleichen Menge Alkohol und bringt es mit Ammoniak auf Ph8. Nach
iostündigem Stehen wird der Niederschlag abfiltriert
und verworfen, das Filtrat mit Essigsäure auf pH6 eingestellt und im Vakuum bei 45 ° bis zu
einem Volumen von. 20 ecm eingeengt. Die Lösung wird im Flüssigkeitsextraktor 8 Stunden mit Äther
extrahiert, dann mit der zehnfachen Menge Alkohol versetzt, 16 Stunden stehengelassen und der
Niederschlag abzentrifugiert. Das Filtrat wird verworfen. Der Niederschlag wird in 30 ecm Wasser
gelöst, die Lösung durch Ionenaustauscher entsalzt und anschließend- filtriert. Mit der zehnfachen -.r
Menge Alkohol wird der Inaktivator gefällt, der
Niederschlag nach iöstündigem Stehen abzentrifugiert,
mit Alkohol gewaschen und mit Äther getrocknet. Ausbeute: 0,015 E>
enthaltend etwa 7000 Inaktivatoreinheiten.
Claims (1)
- PATENTANSPRÜCHE:I.Verfahren zur Gewinnung eines Källikrein-Inaktivators aus tierischen Organen, z. B. Lymph- oder Ohrspeicheldrüsen von Wieder- " käuern, dadurch gekennzeichnet, daß man aus den wäßrigen oder essigsauren Drüsenextrakten die Eiweißkörper mit Trichloressigsäure aus-. fällt, die Lösungen des Inaktivators auf , schwach alkalische Reaktion bringt und mit dem ■ gleichen Volumen Alkohol versetzt, wodurch unwirksame Begleitstoffe ausgefällt werden, das Filtrat mit Essigsäure auf pH6 einstellt, im Vakuum einengt, ausäthert und den Inaktivator mit der zehnfachen Menge Alkohol ausfällt. .
'ν'· 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man den Inaktivator in Wasser löst, die begleitenden Salze durch Ionenaustauscher entfernt, die Lösung filtriert j und den Inaktivator erneut mit Alkohol aus-..... fällt. , -,; ·■·..-, ,,. . . -,,Angezogene Druckschriften:
Science, Bd. 112, S. 436 und437 (1950).© 609 528/514 5.56
Family
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