DE956097C - Verfahren zur Gewinnung eines Kallikrein-Inaktivators - Google Patents

Description

• Verfahren zur Gewinnung eines Kallikrein-Inaktivators Zur Gewinnung eines Kallikrein-Inaktrivators aus Lymph- und Ohrspeicheldrüsen sowie dem Pankreas von. Rindern und; aus Blut wurde ein Verfahren entwickelt, das darin besteht, daß man die frischen Organe oder das Blutserum mit saurem verdünntem Alkohol 4n der Wärme extrahiert, die Extrakte im Vakuum einengt und mit Äther ausschüttelt, aus der wäßrigen Phase den Inaktivator mit Alkohol, Aceton oder einem anderen mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel ausfällt, den Niederschlag in verdünnter Essigsäure löst, ixnwirksame Begleitstoffe durch Einstellung schwach alkalischer Reaktion entfernt und den Inaktivator erneut mit Alkohol, Aceton oder einem anderen mit Wasser nvischbaren organischen Lösungsmittel ausfällt.
• Es wurde nun gefunden, daß der Inaktivator nach dem gleichen Verfahren bei guter Ausbeute auch aus anderen Organen isoliert werden kann, z. B. aus Leber, Milz oder Colostrum.
• Bleispiel i iooo g Rinderleber werden im Fleischwolf zerkleinert und zweimal mit je 5 1 Aceton behandelt. Das Aceton wird durch Absaugen weitgehend entfernt und das noch feuchte Material 2 bis 3 Stunden mit i2oo ccm Essigsäure und 28oo ccm g6°/aigem Alkohol bei 5o° extrahiert. Die alkoholische Lösung enthält 60o ooo Inaktivatoreinheiten. Der Extrakt wird im Vakuum auf etwa i2oo ccm ein geengt und mit demselben Volumen Äther ausgeschüttelt, wobei dunkle Farbstoffe sowie Reste von Fett in Lösung gehen. Die wäßrige Phase wird nun mit Aceton versetzt und der entstehende Niederschlag abzentrifugiert und in verdünnter Essigsäure gelöst. Man bringt mit Ammoniaklösung auf schwach alkalische Reaktion, zentrifugiert einen unwirksamen Niederschlag ab, und fällt den Inaktivator mit der fünffachen. Menge Alkohol. Ausbeute iio ooo Inaktivatoreinheiten in i,i g Trockenpulver nach Trocknung mit Äther. Beispiel e iooo g Rindermilz werden im Fleischwolf zerkleinert und zweimal mit je 5 1 Aceton behandelt. Weiterverarbeitung wie für Leber angegeben. Der essigsaure alkoholische Extrakt enthält 95 000 Inaktivatoreinheiten. Die Ausbeute nach der Fällung mit Alkohol und Äthertrocknung beträgt 41 ooo Inaktivatoreinheiten in 0,q_ g. Beispdel3 iooo ccm Rindercolostrurn vom ersten Tag werden mit iooo ccm destilliertem Wasser verdünnt: Nach Zugabe von i20 ccm Eisessig und 460o ccm Alkohol wird i Stunde lang bei 5o° extrahiert. Im alkoholischen Filtrat befinden sich 4000Inaktivatoneinheiten. Die Weiterverarbeitung erfolgt wie bei Leber angegeben. Die Ausbeute nach Fällung mit Alkohol und Äthertrocknung beträgt 220o Inaktivatoreinheiten in o,2 g.

Claims (1)

1. PATENTANSPRUCH: Verfahren zur Gewinnung eines Kallikrein-Inaktivators nach Patent 950 959, dadurch gekennzeichnet, daß an Stelle der in der Hauptpatentanmeldung genannten Lymph- und Ohrspeicheldrüsen sowie Pankreas von Rindern und Blut andere Organe von Wiederkäuern, wie Leber, Milz oder das Colostrum, als Ausgangsstoffe verwendet werden.