DE69031481T2

DE69031481T2 - Verfahren zur Gewinnung von Ginkgoliden aus Ginkgoblättern und ihre Reinigung

Info

Publication number: DE69031481T2
Application number: DE69031481T
Authority: DE
Inventors: Wie Jong Kwak; Key Bong Oh; Hwa Kun Park
Original assignee: Sunkyung Industries Ltd
Current assignee: SK Discovery Co Ltd
Priority date: 1989-06-16
Filing date: 1990-06-14
Publication date: 1998-02-19
Anticipated expiration: 2010-06-15
Also published as: KR910000173A; DE69031481D1; EP0402925A2; US5089636A; KR940002795B1; EP0402925A3; JPH0324084A; JP2511558B2; EP0402925B1

Description

Verfahren zur Gewinnung von Ginkgoliden aus Ginkgoblättern und ihre Reinigung

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Isolierung der wirksamen physioaktiven Substanzen, der Ginkgolide, aus den Blättern des Ginkgo-Baumes und zu ihrer Reinigung in großem Maßstab.
Es ist bekannt, daß es viele wirksame physioaktive Substanzen gibt, die im Ginkgo- Baum enthalten sind: die Phenolverbindungen Ginkgel, Bilobal, Ginkgolinsäure usw. in der Frucht, Cyanoglucoside, Aminosäuren usw. in den Samen, aromatische Verbindungen, besonders Phenolverbindungen, Flavonoidglucoside und einfache Flavonoide - Kampferol, Guercetin, Isochamnetin, Lutedin usw. - Terpenoidverbindungen, Ginkgolide und Bilobalid usw. in den Blättern.
Speziell für die Terpenoidverbindungen unter den genannten in den Blättern des Ginkgo-Baumes vorhandenen Verbindungen wurden zunächst die Lactonverbindungen von S. Furukawa 1929 identifiziert (Sci. Papers Inst. Phys. Chem. Res. Tokyo [7.27, 1932]). Die Ginkgolide wurden als erstes aus den Wurzeln des Ginkgo-Baumes von K. Nakanishi 1961 isoliert (Pure Appl. Chem. 1.89 (1961], Tetrahedron Letter, 4.299 1961]), und ihre Strukturen wurden herausgefunden und als Ginkgolid A, B, C und M bezeichnet. 1961 bestätigten K. Okabe et al. das Vorhandensein der Ginkgolide auch in den Blättern des Ginkgo-Baumes (J. Chem. Soc. [5] 2201 [1961]).
Danach wurde ein anderes Ginkgolid, Ginkgolid J, von K. Weing 1981 identifiziert (Lieb. Ann. Chem. 521 bis 526 [1981]), und dessen chemische Strukturformel ist folgende:
In der obigen Strukturformel sind
Jüngst wurde gefunden, daß durch ihre kompetitive Reaktion mit Blutplättchen aktivierendem Faktor (PAF, PAF-Acether, AGEPC) solche Ginkgolide Wirkungen auf viele durch PAV-Acether induzierte Krankheiten, wie Asthma, Bronchitis, Dementia senilis, Allergie, Herzkrankheiten, durch Organverpflanzung erzeugten Schock, rheumatische Erkrankungen usw., und auf einen anderen breiten Bereich von Kreisauferkrankungen haben (P. Braguet, Drug of the Future, 12, 643, 1981).
Gemäß der EP-A-0 086 315 wird ein wäßriger Ketonextrakt der Blätter des Ginkgo- Baumes mit Ammoniumsulfat und einem in Wasser unlöslichen aliphatischen Keton vereinigt, die abgetrennte Ketonphase konzentriert und dann mit einem wäßrigen Alkanol verdünnt, angesäuert und mit Hilfe eines Vinylpyrrolidonpolymers behandelt. Ein ähnliches Verfahren ist in der DE-A-2 117 429 beschrieben, gemäß welchem anstelle der Behandlung mit Vinylpyrrolidonpolymer eine Behandlung mit einer Bleihydroxidsuspension durchgeführt wird.
J. Chem. Soc, (C), Seite 2204 (1967) zeigt ein Verfahren zur Isolierung von Ginkgoliden durch Vereinigen des wäßrigen Extraktes der Blätter des Ginkgo-Baumes mit Aktivkohle zum Absorbieren der Ginkgolide, wonach die Aktivkohle mit Aceton extrahiert wird, welches konzentriert wird, um Kristalle zu erhalten. Gemäß Liebigs Ann. Chem. 758, Seite 167 (1972) wird der wäßrige Extrakt der Blätter des Ginkgo-Baumes mit Essigester extrahiert, welcher konzentriert wird. Das Konzentrat wird in Ethanol aufgelöst, und die erhaltene Lösung wird dann chromatographisch getrennt. Liebigs Ann. Chem. 521 (1987) und 1772 (1986) isolieren beide die erwünschten Komponenten aus den Blättern des Ginkgo-Baumes durch Adsorption an einem Ionenaustauscherharz und Desorption mit Aceton. Ginkgolides-Chemistry, Biology, Pharmacology and Clinical Perspectives, 1988, J. R. Prous Science Pub. S. A., Seite 40 erwähnt Säulenchromatographie unter Verwendung von Chloroform für die Isolierung von reinen Ginkgoliden.
Doch bislang wurde keine Methode zur Isolierung von Ginkgoliden aus den Blättern des Ginkgo-Baumes gefunden, da eine kleine Menge an Ginkgoliden in den Blättern des Ginkgo- Baumes vorhanden und es schwierig ist, sie zu isolieren.
Folglich ist die Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein Verfahren zum Isolieren der wirksamen physioaktiven Substanzen, der Ginkgolide, aus den Blättern des Ginkgo-Baumes und zur Reinigung derselben in hoher Ausbeute zu bekommen.
Es folgt eine detaillierte Beschreibung der vorliegenden Erfindung.
Die vorliegende Erfindung ist ein Verfahren zur Gewinnung von Ginkgoliden aus den Blättern des Ginkgo- Baumes, welches durch eine Reihe von Verfahrensstufen folgendermaßen gekennzeichnet ist.
a) Man stellt den pH-Wert einer wäßrigen Lösung eines Extraktes der Blätter des Ginkgo- Baumes auf den Bereich von 1 bis 9 ein, indem man eine alkalische wäßrige Lösung zugibt,
b) extrahiert die wäßrige, wie oben behandelte Lösung mit niedermolekularen Acetaten, niedermolekularen Ketonen oder Benzolen, trennt die Lösung in eine wäßrige Lösungsschicht und eine organische Lösungsschicht, entwässert und trocknet die organische Lösungsschicht, und
c) stellt den pH-Wert der wäßrigen Lösungsschicht, die in dem obengenannten Verfahren b abgetrennt wurde, auf den Bereich von 1 bis 3 ein, indem man eine saure wäßrige Lösung zugibt, extrahiert die obengenannte Schicht mit niedermolekularen Ethern, Chloroform oder Dichlormethan, entwässert und trocknet den erhaltenen Extrakt,
d) löst das in dem obenerwähnten Verfahren b erhaltene trockene Pulver und den in dem obenerwähnten Verfahren c erhaltenen Rückstand in einem niedermolekularen Alkohol,
e) setzt eine wäßrige Lösung von Bleiacetat zu der in dem obengenannten Verfahren d erhaltenen Lösung zu, entfernt den Niederschlag, konzentriert das Filtrat und erhält ein gemischtes Pulver von Ginkgoliden,
f) reinigt das erhaltene Pulvergemisch von Ginkgoliden, indem an
I) entweder das obengenannte Pulvergemisch durch eine Adsorptionssäule von aktivierter Kohle und Kiesegel unter Verwendung eines Lösungsmittelgemisches von niedermolekularen Ketonen und niedermolekularen Alkoholen schickt und den erhaltenen Rückstand durch Um kristallisation unter Verwendung eines wasserfreien Alkohols und einer wäßrigen Acetonlösung trennt,
II) oder indem man das obenerwähnte Pulvergemisch in niedermolekularen Ketonen oder niedermolekularen Alkoholen auflöst, destilliertes Wasser zu der erhaltenen Lösung zugibt, die so behandelte Lösung zentrifugiert und dann den erhaltenen Rückstand durch Umkristallisieren unter Verwendung von wasserfreiem Alkohol und einer wäßrigen Acetonlösung trennt.
Bei der vorliegenden Erfindung wird die wäßrige Lösung eines Extraktes der Blätter des Ginkgo-Baumes hergestellt, indem man ein Trockenpulver der Blätter des Ginkgo-Baumes in niedermolekularen Alkoholen oder niedermolekularen Ketonen bei einer Temperatur von 50 bis 100 ºC während 5 bis 6 h extrahiert.
Es folgt eine detailliertere Beschreibung der vorliegenden Erfindung:
Zunächst wird ein Pulver von getrockneten und pulverisierten frischen Blättern des Ginkgo- Baumes in eine wäßrige Lösung von niedermolekularen Alkoholen oder niedermolekularen Ketonen gegeben und dann bei einer Temperatur von 50 bis 100 ºC während 5 bis 6 h extrahiert. Das so erhaltene Filtrat wird mit einer geeigneten Menge von Tetrachlorkohlenstoff vermischt, welcher wasserunlöslich ist, dann gerührt und abgetrennt.
Der pH-Wert der oben abgetrennten wäßrigen Lösung wird auf den Bereich von 1 bis 9 durch Zugabe einer wäßrigen Natriumhydroxidlösung eingestellt, dann mit niedermolekularen
Ketonen, niedermolekularen Acetaten oder Benzol extrahiert, welche wasserunlöslich sind, dann durch Zugabe von wasserfreien Sulfaten, Calciumcarbonat oder Phosphaten entwässert und dann durch Druckerniedrigung getrocknet.
Der pH-Wert der verbleibenden wäßrigen Lösungsschicht in dem obenerwähnten Verfahren wird auf den Bereich von 1 bis 3 durch Zugabe von verdünnter Salzsäure eingestellt, und dann wird mit einem in Wasser unlöslichen niedermolekularen Ether, Chloroform oder Dichlormethan extrahiert. Die so erhaltene organische Lösungsmittelschicht wird durch Drucksenkung getrocknet und dann mit dem Pulver in dem obenerwähnten Verfahren vermischt.
Das in dem obengenannten Verfahren erhaltene Pulver wird in einer wäßrigen Lösung von niedermolekularen Alkoholen aufgelöst und dann mit Hexan oder Cyclohexan getrennt, um die restlichen Lipidsubstanzen freizusetzen. Zu dem so erhaltenen Filtrat wird eine wäßrige Lösung von Bleiacetat zugegeben. Das so behandelte Filtrat wird gerührt und stehengelassen, der so gebildete Niederschlag wird abfiltriert. Durch Konzentrieren und Trocknen des so erhaltenen Filtrates erhält man ein Pulvergemisch mit einem hohen Gehalt an Ginkgoliden.
Um das nach der vorliegenden Erfindung erhaltene Pulvergemisch weiter zu reinigen, wird das erwähnte Pulvergemisch durch eine Adsorptionssäule von Aktivkohle und Kieselgel unter Verwendung eines Lösungsmittelgemisches niedermolekularer Ketone und niedermolekularer Alkohole geschickt, wobei man eine Freisetzung der restlichen Phenosubstanzen bekommt. Das durch die Asorptionssäule geschicke Filtrat wird durch Verdampfen getrocknet, dann in einer kleinen Menge von wasserfreiem Ethanol gelöst und bei niedriger Temperatur stehengelassen. So wird ein weißer amorpher Feststoff erhalten.
Anstelle dieses Reinigungsverfahrens kann das obenerwähnte Pulvergemisch in einer wäßrigen Acetonlösung aufgelöst und dann zentrifugiert werden. Das so erhaltene Pulver wird in einem Alkohol gelöst. Durch Zugabe einer wäßrigen Acetonlösung und anschließendes Stehenlassen bei niedriger Temperatur werden so weiße kristalline Ginkgolide erhalten.
Der in dem obenerwähnten Verfahren erhaltene weiße Feststoff ist ein Gemisch, das ein Ginkgolid A, B und C und eine sehr kleine Menge von Ginkgolid M und J ohne phenolische Substanzen umfaßt. Die betreffenden Ginkgolide können durch Trennungsumkristallisation unter Verwendung eines Lösungsmittelgemisches von Aceton und Wasser isoliert werden und durch Dünnschichtchromatographie oder Flüssigkeitschromatographie und kemmagnetisches Wasserstoff-Resonanzspektrum identifiert werden.
Um die vorliegende Erfindung in weiteren Einzelheiten zu beschreiben, werden die folgenden Beispiele angegeben:

Beispiel 1

Zu 50 l einer 10%igen wäßrigen Acetonlösung werden 10 kg getrocknetes Pulver der Blätter des Ginkgo-Baumes zugegeben. Das Gemisch wird zweimal 5 h bei 80 ºC mit einem Gegenstromfluß extrahiert und dann filtriert.
Das Filtrat wird auf 11 konzentriert und dann dreimal mit 2 l Tetrachlorkohlenstoff auf einmal extrahiert, wobei man eine Freisetzung des restlichen Chlorophylls bekommt. Der pH- Wert der restlichen wäßrigen Lösungsschicht wird durch Zugabe einer wäßrigen 1 N-Natronlauge auf 7,5 eingestellt. Die wie oben behandelte wäßrige Lösungsschicht wird fünfmal jeweils mit 3 l Ethylacetat extrahiert, dann werden die Ethylacetatextrakte mit Natriumsulfat entwässert, sodann konzentriert und getrocknet.
Der pH-Wert der verbleibenden, nach dem obengenannten Verfahren erhaltenen wäßrigen Lösungsschicht wird durch Zugabe von wäßriger 1 N-Salzsäurelösung auf 3 eingestellt. Die wie oben behandelte wäßrige Lösungsschicht wird fünfmal mit jeweils 3 l Ethylether extrahiert, dann entwässert und durch Druckerniedrigung getrocknet. Das so erhaltene Pulver wird mit durch das obengenannte Verfahren erhaltenem Pulver vermischt. Dabei bekommt man 120 g gelbes festes Pulver.
Das obengenannte gelbe feste Pulver wird in 150 ml Ethanol aufgelöst, dann mit einer wäßrigen Lösung von Bleiacetat und 15 g Aktivkohle vermischt, dann gerührt und filtriert. Das Filtrat wird durch Drucksenkung getrocknet; dabei werden 90 g Pulvergemisch mit einem hohen Gehalt an Ginkgoliden erhalten.
100 g der so erhaltenen festen Substanz werden in 100 ml Aceton und Methanol im Verhältnis von 15 : 1 gegeben, und dann läßt man durch eine Adsorptionssäule, die mit 50 g Aktivkohle und 1 kg Kieselgel gefüllt ist, gehen, wobei man eine Freisetzung der restlichen Phenolsubstanzen und Verunreinigungen erhält. Die durch die Adsorptionssäule geschickte Lösung wird durch Verdampfen getrocknet. Dabei erhält man 18 g weißliches Pulver.
Das obengenannte weißliche Pulver wird vollständig in 50 ml wasserfreiem Ethanol bei 60 ºC aufgelöst, und dann läßt man bei niedriger Temperatur 10 h stehen. Dabei bekommt man 10 g weiße amorphe Kristalle, reine Ginkgolide.
Ginkgolide werden durch Dünnschichtchromatographie [Kieselgel; Cyclohexan-Ethylacetat (50 : 50) als Lösungsmittel; Acetanhydridbesprühung, die nach Erhitzen eine schwach orangefarbene Fluoreszenz bei 365 nm ergibt] identifiziert. Die obengenannten Ginkgolide sind ein Gemisch, das Ginkgolide A, B und C und eine sehr kleine Menge von Ginkgoliden J und M umfaßt. Jedes Ginkgolid kann durch trennende Umkristallisation mit einer 50 %igen wäßrigen Acetonlösung isoliert werden.

Beispiel 2

Zu 50 l Ethylacetat werden 10 kg getrocknetes Pulver der Blätter des Ginkgo-Baumes zugegeben. Das Gemisch wird zweimal 6 h bei 80 ºC mit einem Gegenstromfluß extrahiert und dann filtriert.
Das Filtrat wird vollständig konzentriert, dann mit 5 l 20 %igem Methanol vermischt, dann gerührt und bei 50 ºC stehengelassen und dann filtriert, wobei man unlösliche Substanzen loswird. Das Filtrat wird zweimal mit jeweils 2 l Cyclohexan extrahiert, wobei man Lipidsubstanzen loswird. Der pH-Wert der restlichen wäßrigen Lösungsschicht wird durch Zugabe von wäßriger 1 N-Natronlauge auf 7,5 eingestellt. Die wie oben behandelte wäßrige Lösungsschicht wird fünfmal mit jeweils 3 l Wasser und fünfmal mit jeweils 3 l gesättigtem Methylethylketon extrahiert, dann werden die Ketonextrakte mit wasserfreiem Natriumsulfat entwässert, dann konzentriert und getrocknet.
Der pH-Wert der nach dem obenbeschriebenen Verfahren erhaltenen verbleibenden wäßrigen Lösungsschicht wird durch Zugabe von wäßriger 1 N-Salzsäurelösung auf 2,5 eingestellt. Die wie oben behandelte wäßrige Lösungsschicht wird dreimal mit jeweils 3 l Chloroform extrahiert, dann entwässert und getrocknet. Das so erhaltene feste Pulver wird mit dem durch das obige Verfahren erhaltenen Pulver vermischt. Dabei bekommt man 1 25 g gelbes festes Pulver.
Das obengenannte gelbe feste Pulver wird in 150 ml Ethanol aufgelöst, dann mit einer wäßrigen Lösung von Bleiacetat vermischt, sodann gerührt und stehengelassen und filtriert, wobei man den gebildeten Niederschlag abtrennt. Das Filtrat wird konzentriert und getrocknet. Dabei bekommt man 60 g Pulvergemisch mit einem hohen Gehalt an Ginkgoliden.
100 g des wie oben erhaltenen Pulvers werden in 200 ml Aceton aufgelöst. Zu der so erhaltenen Lösung werden 800 ml destilliertes Wasser langsam unter Rühren zugesetzt. Die so gebildete weißliche kolloidale Flüssigkeit wird zentrifugiert.
Nach dem Zentrifugieren wird die obenschwimmende Flüssigkeit entfernt, und die restlichen Substanzen werden durch Druckverminderung getrocknet. Dabei bekommt man 65 g braunes festes Pulver.
Das obengenannte feste Pulver wird in 50 ml 30 %igem Methanol bei 60 ºC vollständig aufgelöst und dann bei einer niedrigen Temperatur 12 h stehengelassen. Dabei bekommt man 17,5 g weiße amorphe Kristalle, reine Ginkgolide.
Die Anlyse durch Flüssigkeitschromatographie (Säule: Waters µ - Bondapak C&sub1;&sub8;, Länge: 30 cm, Durchmesser: 3,9 m, Temperatur: 25 ºC, Lösungsmittel: Gemisch von Wasser, Methanol und Tetrahydrofuran im Verhältnis von 15 : 20 : 10, Fließgeschwindigkeit 1,5 ml/min, Sensor: UV 220 nm) der obengenannten Ginkgolide zeigt, daß die Ginkgolide ein Gemisch von 35 % Ginkgolid A, 45 % Ginkgolid B, 12 % Ginkgolid C und 3 % anderen sind.
Durch die Trennungsumkristallisation der obengenannten Ginkgolide mit wasserfreiem Ethanol und 50 %iger wäßriger Acetonlösung wird jedes Ginkgolid rein erhalten.

Beispiel 3

Zu 50 l Methanol werden 10 kg Trockenpulver der Blätter des Ginkgo-Baumes zugegeben. Das Gemisch wird zweimal 6 h bei 10 ºC mit Gegenstromfluß extrahiert und dann filtriert.
Das Filtrat wird auf 5 l konzentriert und dann zweimal mit jeweils 2 l Tetrachlorkohlenstoff extrahiert, wobei man die organische Lösungsmittelschicht abtrennt. Der pH der restlichen wäßrigen Lösungsschicht wird durch Zugabe von wäßriger 1 N-Natronlauge auf 8,5 eingestellt. Die wie oben behandelte wäßrige Lösungsschicht wird fünfmal mit jeweils 3 l Benzol getrennt, und dann wird die so erhaltene Benzolschicht mit Ammoniumsulfat entwäßsert und getrocknet. Der pH-Wert der verbleibenden wäßrigen Lösungsschicht wird durch Zugabe von wäßriger 1 N-Salzsäurelösung auf 2,0 eingestellt. Die wie oben behandelte wäßrige Lösungsschicht wird dreimal mit jeweils 2 l Dichlormethan extrahiert, und die so erhaltene organische Lösungsmittelschicht wird entwässert und getrocknet. Das so erhaltene Pulver wird mit dem durch das obengenannte Verfahren erhaltenen Pulver vermischt. Dabei erhält man 70 g braunes Pulver.
Das obengenannte braune Pulver wird in 120 ml Ethanol aufgelöst, dann mit einer wäßrigen Bleiacetatlösung vermischt, dann gerührt und stehengelassen und filtriert, wobei man eine Abtrennung des gebildeten Niederschlages bekommt. Das Filtrat wird konzentriert und getrocknet. Dabei erhält man 55 g Pulvergemisch mit einem hohen Gehalt an Ginkgoliden.
100 g des wie oben erhaltenen Pulvers werden in 200 ml Aceton aufgelöst. Zu der so erhaltenen Lösung werden 800 ml destilliertes Wasser langsam unter Rühren zugegeben. Die so gebildete weißliche kolloidale Flüssigkeit wird zentrifugiert.
Nach dem Zentrifugieren wird die obenschwimmende Flüssigkeit entfernt, und die verbleibenden Substanzen werden durch Druckerniedrigung getrocknet. Dabei erhält man 65 g braunes festes Pulver.
Das obengenannte feste Pulver wird in 50 ml 30 %igem Methanol bei 60 ºC vollständig aufgelöst und dann bei einer niedrigen Temperatur 12 h stehengelassen. Dabei erhält man 17,5 g weiße amorphe Kristalle, reine Ginkgolide.
Die Analyse durch Flüssigkeitschromatographie (Säule: Waters µ - Bondapak C&sub1;&sub8;, Länge: 30 cm, Durchmesser: 3,9 m, Temperatur: 25 ºC, Lösungsmittel: Gemisch von Wasser, Methanol und Tetrahydrofuran im Verhältnis von 15 : 20 :10, Fließgeschwindigkeit 1,5 ml/min, Sensor: UV 220 nm) der obengenannten Ginkgolide zeigt, daß die Ginkgolide ein Gemisch von 35 % Ginkgolid A, 45 % Ginkgolid B, 12 % Ginkgolid C und 3 % anderen sind.
Durch die Trennungsumkristallisation der obengenannten Ginkgolide mit wasserfreiem Ethanol und 50 %iger wäßriger Acetonlösung wird jedes Ginkgolid rein erhalten.
Die Analysenergebnisse für jedes reine Ginkgolid sind folgende:
Ginkgolid A [Schmelzpunkt: 308 ºC, kemmagnetisches Wasserstoff-Resonanzspektrum (100 MHz, ppm): 1.20 (s), 1.45 (d), 2.0-2.5 (m), 2.60 (dd), 2.99 (dd), 3.44 (g), 5.05 (s), 5.13 (t), 5.38 (s), 6.20 (s), Infrarotadsorptionsspetrum (ν CO: 1802, 1116, 1164 cm&supmin;¹, ν OH: 3551, 3453 cm&supmin;¹)],
Ginkgolid B [Schmeltzpunkt: 300 ºC, kernmagnetisches Wasserstoff-Resonanzspektrum (100MHz, ppm): 1.22 (s), 1.44 (d), 2 - 2.1 (m), 3.36 (g), 4.55 (d), 5.10 (d), 5.49 (s), 5.11 (s), 6.21 (s), Infrarotadsorptionsspektrum (ν CO: 1195, 1180 cm&supmin;¹, ν OH: 3054 cm&supmin;¹)], (ν CO: 1195, 1180 cm&supmin;¹, ν OH: 3054 cm&supmin;¹)],
Ginkgolid C [Schmelzpunkt: 300 ºC, kernmagnetisches Wasserstoff-Resonanzspektrum (100 MHz, ppm): 1.32 (s), 1.45 (d), 2.14 (d), 3.36 (g), 4.53 (d), 4.13 (dd), 5.05 (d), 5.53 (s), 5.61 (d), 6.30 (s), Infrarotadsorptionsspektrum (ν CO: 1185, 1163 cm&supmin;¹, ν OH: 3519, 3529 cm&supmin;¹)].

Claims

1. Verfahren zur Gewinnung von Ginkgoliden aus den Blättern des Ginkgo-Baumes, gekennzeichnet durch eine Reihe von Stufen, in denen man

a) den pH-Wert einer wäßrigen Lösung eines Extraktes der Blätter des Ginkgo- Baumes auf den Bereich von 1 bis 9 einstellt, indem man eine alkalische wäßrige Lösung zugibt,

b) die wäßrige, wie oben behandelte Lösung mit niedermolekularen Acetaten, niedermolekularen Ketonen oder Benzolen extrahiert, die Lösung in eine wäßrige Lösungsschicht und eine organische Lösungsschicht trennt, die organische Lösungsschicht entwässert und trocknet und

c) den pH-Wert der wäßrigen Lösungsschicht, die in dem obengenannten Verfahren b abgetrennt wurde, auf den Bereich von 1 bis 3 einstellt, indem man eine saure wäßrige Lösung zugibt, die obengenannte Schicht mit niedermolekularen Ethern, Chloroform oder Dichlormethan extrahiert, den erhaltenen Extrakt entwässsert und trocknet,

d) das in dem obenerwähnten Verfahren b erhaltene trockene Pulver und den in dem obenerwähnten Verfahren c erhaltenen Rückstand in einem niedermolekularen Alkohol löst,

e) eine wäßrige Lösung von Bleiacetat zu der in dem obengenannten Verfahren d erhaltenen Lösung zusetzt, den Niederschlag entfernt, das Filtrat konzentriert und ein gemischtes Pulver von Ginkgoliden erhält,

f) das erhaltene Pulvergemisch von Ginkgoliden reinigt, indem man

I) entweder das obengenannte Pulvergemisch durch eine Adsorptionssäule von aktivierter Kohle und Kieselgel unter Verwendung eines Lösungsmittelgemisches von niedermolekularen Ketonen und niedermolekularen Alkoholen schickt und den erhaltenen Rückstand durch Umkristallisation unter Verwendung eines wasserfreien Alkohols und einer wäßrigen Acetonlösung trennt,

II) oder indem man das obenerwähnte Pulvergemisch in niedermolekularen Ketonen oder niedermolekularen Alkoholen auflöst, destilliertes Wasser zu der erhaltenen Lösung zugibt, die so behandelte Lösung zentrifugiert und dann den erhaltenen Rückstand durch Umkristallisieren unter Verwendung von wasserfreiem Alkohol und einer wäßrigen Acetonlösung trennt.

2. Verfahren nach Anspruch 1, bei dem die wäßrige Lösung eines Extraktes der Blätter des Ginkgo-Baumes durch Extrahieren eines Trockenpulvers der Blätter des Ginkgo- Baumes in niedermolekularen Alkoholen oder niedermolekularen Ketonen bei einer Temperatur von 50 bis 100 ºC während 5 bis 6 h hergestellt wird.

3. Verfahren nach Anspruch 1, bei dem die organische Lösungsmittelschicht in dem Verfahren b durch Zugabe von wasserfreien Sulfaten, Calciumcarbonat oder Phosphaten entwässert und getrocknet wird.