DE3836618C2 - Verfahren zur Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen - Google Patents

Verfahren zur Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen

Info

Publication number
DE3836618C2
DE3836618C2 DE3836618A DE3836618A DE3836618C2 DE 3836618 C2 DE3836618 C2 DE 3836618C2 DE 3836618 A DE3836618 A DE 3836618A DE 3836618 A DE3836618 A DE 3836618A DE 3836618 C2 DE3836618 C2 DE 3836618C2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
cyclodextrin
glucosyl
branched
cyclodextrins
maltose
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
DE3836618A
Other languages
English (en)
Other versions
DE3836618A1 (de
Inventor
Shoichi Kobayashi
Katsuhiko Mikuni
Mitsuru Monma
Toshiya Takano
Kozo Hara
Hitoshi Hashimoto
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
National Food Research Institute
Original Assignee
Ensuiko Sugar Refining Co Ltd
National Food Research Institute
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ensuiko Sugar Refining Co Ltd, National Food Research Institute filed Critical Ensuiko Sugar Refining Co Ltd
Publication of DE3836618A1 publication Critical patent/DE3836618A1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE3836618C2 publication Critical patent/DE3836618C2/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/20Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of an exo-1,4 alpha-glucosidase, e.g. dextrose
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C08ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08BPOLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0009Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
    • C08B37/0012Cyclodextrin [CD], e.g. cycle with 6 units (alpha), with 7 units (beta) and with 8 units (gamma), large-ring cyclodextrin or cycloamylose with 9 units or more; Derivatives thereof
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/16Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of an alpha-1, 6-glucosidase, e.g. amylose, debranched amylopectin

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen.
Die Herstellung von verzweigten Cyclodextrinen und deren Verwendung und Entwicklung sind aufgrund ihrer exzellenten physikalischen Eigenschaften wie einer hohen Löslichkeit im schnellen Fortschritt begriffen, und bekannt sind bis jetzt Verfahren zur Herstellung von einfach verzweigten Cyclodextrinen mit einem einfach verzweigten Dextrin wie α-1,4-Glucan und Panose an ihren jeweiligen Cyclodextrinringen gebunden, und mehrfach verzweigte Cyclodextrine mit zwei Verzweigungen von Malto-Oligosacchariden wie Glucose, Maltose und Maltotriose an ihren Cyclodextrinringen gebunden, z. B. Diglucosyl-Cyclodextrin mit zwei Glucosemolekülen an demselben Cyclodextrinring, Dimaltosylcyclodextrin mit zwei Maltosemolekülen an demselben Cyclodextrinring, und Glucosyl oder Maltosylcyclodextrin mit Glucose- oder Maltoseverzweigungen an demselben Cyclodextrinring.
Diese Cyclodextrine werden dadurch hergestellt, daß man ein Cyclodextrin synthetisierendes Enzym auf verzweigte Dextrine einwirken läßt, oder eine Mischung von einem α-1,4 Glucan wie Maltose oder Maltotriose oder einem verzweigten Dextrin wie Panose mit einem Cyclodextrin auf ein spaltendes Enzym einwirken läßt. Ein weiteres Verfahren zur Herstellung von verzweigten Cyclodextrinen ist bekannt, wobei eine Mischung von Malto- Oligosylfluorid oder Glucosylfluorid mit einem Cyclodextrin unter Einwirkung eines spaltenden Enzyms umgesetzt wird.
Einfach verzweigte Cyclodextrine mit einer Verzweigung zeigen bessere Löslichkeitseigenschaften als die ursprünglichen Cyclodextrine und können in einem breiteren Anwendungsgebiet verwendet werden. Jedoch besteht, da solche einfach verzweigten Cyclodextrine mit einer Verzweigung, zum Beispiel einfach verzweigtes β-Cyclodextrin, von Amylasen von Aspergillus oryzae (Taka-Amylase) angegriffen werden, ein steigender Bedarf für Cyclodextrine, die hochresistent gegenüber solchen Enzymen sind, und nach Verfahren für deren Herstellung. Im einzelnen besteht ein starker Bedarf an mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen, da diese sehr schwer von Amylasen angegriffen werden und hervorragende Löslichkeitseigenschaften zeigen. Jedoch bezieht die Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen, wie sie bis jetzt durchgeführt wurde, lediglich die Umwandlung von verzweigten Teilen von herkömmlich hergestellten mehrfach Maltosyl-verzweigten Cyclodextrinen in Glucosylgruppen durch Abspalten mit Glucoamylase ein. Daneben sind die Ausbeuten an mehrfach Maltosyl- verknüpften Cyclodextrinen bei herkömmlichen Verfahren sehr niedrig und lediglich im Höchstfall 22,3%. Folglich ist bis jetzt kein effizientes Verfahren zur Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen entwickelt worden.
Bis jetzt sind verschiedene Verfahren zur Herstellung, ausgehend von Maltose, Maltotriose, Panose und Cyclodextrinen, von Maltosyl-Cyclodextrinen, Maltotriosyl-Cyclodextrinen, Panosyl-Cyclodextrinen und Dimaltosyl- Cyclodextrinen unter Verwendung von umgekehrten Synthesereaktionen von Spaltungsenzymen wie Pullulanase und, auf Grundlage solcher Entdeckungen, die Herstellung von einfach oder mehrfach verzweigten Cylodextrinen erreicht worden.
Im weiteren ist bekannt, daß mehrfach verzweigte Cyclodextrine wie Glucosyl-Cyclodextrin, Maltosyl-Cyclodextrin aus Malto-Oligosaccharid und Glucosyl-Cyclodextrinen durch umgekehrte Synthesereaktionen von spaltenden Enzymen gebildet werden. Darüber hinaus ist bekannt, daß verzweigte Anteile, die an solche Cyclodextrine gebunden sind, in Glucosylgruppen unter der Einwirkung von Glucoamylase zerschnitten werden können.
Aus EP-A-0 307 534 ist ein Verfahren zur Herstellung eines heterogen mehrfach verzweigten Cyclodextrins bekannt, wobei die verzweigte Struktur gebildet wird aus einer Kombination der Glucose-Einheiten und der Maltooligosaccharideinheiten, die an den Cyclodextrinring gebunden sind. Das mehrfach verzweigte Cyclodextrin kann erhalten werden durch umgekehrte Reaktion eines Spaltungsenzyms wie Pullulanase oder Isomylase auf eine Mischung aus einem Glucosyl-Cyclodextrin und einem Malto- Oligosaccharid. Das Glucosyl-Cyclodextrin wiederum kann hergestellt werden durch Auftrennung einer nach Reaktion eines Cyclodextrins mit Maltose und Pullulanase erhaltenen Reaktionsmischung mittels reversed-phase- Chromatographie und anschließende enzymatische Umsetzung des auf diese Weise isolierten Maltosyl-Cyclodextrins in Gegenwart von Glucoamylase. Nach Abtrennung der gebildeten Glucose erhält man einfach glucosylverzweigtes Cyclodextrin. Setzt man in diesem Schritt statt Glucoamylase Takaamylase allein oder in Kombination mit Glucoamylase ein, so lassen sich Diglycosyl-β und γ- Cyclodextrin herstellen.
Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist daher, ein Verfahren zur Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen zu liefern.
Um dieses Ziel zu erreichen, wurde im ersten Schritt Maltose mit einem Cyclodextrin entsprechend herkömmlichen Verfahren gemischt, wobei man Maltosyl-Cyclodextrin durch die umgekehrte Synthesereaktion eines Spaltungsenzyms (debranching enzym) erhielt. Nach Abtrennung der Reaktionsmischung in Maltose und Cyclodextrinkomponenten (verzweigte und unverzweigte Cyclodextrine) wurden die Cyclodextrinkomponenten der Einwirkung von Glucoamylase unterzogen, wobei man ein Glucosyl- Cyclodextrin, das nicht der Einwirkung des Spaltungsenzyms unterzogen war, und ein nicht umgesetztes Cyclodextrin erhielt. Nach Abtrennung und Entfernung der gebildeten Glucose wurden die Cyclodextrinkomponenten wiederum mit Maltose gemischt und der Einwirkung eines spaltenden Enzyms und Glucoamylase unterzogen. Überraschenderweise wurde als Ergebnis gefunden, daß über 70% des anfänglich vorhandenen Cyclodextrins in ein verzweigtes Cyclodextrin durch die drei Reaktionen umgewandelt worden war, und daß die Umwandlung in ein mehrfach Glucosyl-verzweigtes Cyclodextrin Werte von 35% und höher erreichte. Die Aufgabe der Erfindung wurde entsprechend auf der Basis dieser Untersuchungen gelöst.
Die obige und weitere Aufgaben und Merkmale der vorliegenden Erfindung werden im folgenden durch die Beschreibung unter Bezug auf die beigefügte Zeichnung erläutert, wobei diese Zeichnung ein Flußdiagramm darstellt, das eine Ausführungsform des Verfahrens der vorliegenden Erfindung verdeutlicht. Bei der vorliegenden Erfindung ist es selbstverständlich, daß der Ausdruck "verzweigte Cyclodextrine" sich ganz allgemein auf Cyclodextrine mit einer Verzweigung wie Glucose und Maltose an deren Cyclodextrinringen beziehen und der Ausdruck mehrfach verzweigte Cyclodextrine sich auf Cyclodextrine bezieht, die zwei oder mehrere Verzweigungen am jeweiligen Cyclodextrinring aufweisen. Wenn ein Cyclodextrin eine Art von Verzweigungen, deren Anzahl größer als 2 ist, aufweist, dann soll es das mehrfach Glucosyl-verzweigte Cyclodextrin genannt werden, bei dem der Typ an Verzweigungen zwischen den Ausdrücken "mehrfach" und "Cyclodextrin" genannt wird. Besonders im Fall von Cyclodextrin mit Verzweigungen, die in Typ und Zahl begrenzt sind, werden sie im folgenden beispielhaft als Diglucosyl-Cyclodextrin, Glucosyl und Maltosyl-Cyclodextrin genannt. In dem weiter unten angegebenen Schema werden Cyclodextrin, Glucosyl-Cyclodextrin, Maltosyl- Cyclodextrin, Glucose, Maltose usw. als CD, G₁-CD, G₂-CD, G₁, G₂ usw. abgekürzt.
Das vorliegende Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, daß die am Ende mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrine durch eine Kombination der umgekehrten Synthesereaktion des Spaltungsenzyms mit der Hydrolysereaktion von Glucoamylase hergestellt werden. Genauer gesagt liefert die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen, das dadurch gekennzeichnet ist, daß ein Cyclodextrin mit einem verzweigten Saccharid oder Sacchariden, ausgewählt aus Malto-Oligosacchariden gemischt wird, wobei ein verzweigtes Cyclodextrin durch die umgekehrte Synthesereaktion eines spaltenden Enzyms hergestellt wird. Nach Abtrennung der (des) Saccharide(s) zum Verzweigen wird das verzweigte Cyclodextrin der Cyclodextrinkomponenten in ein Glucosyl-Cyclodextrin unter der Einwirkung von Glucoamylase umgewandelt. Darauf werden ein nicht umgesetztes Cyclodextrin und Glycosyl- Cyclodextrin miteinander mit den Sacchariden zum Verzweigen gemischt und in ein mehrfach verzweigtes Cyclodextrin unter der Einwirkung von einem spaltenden Enzym umgesetzt, und auf diese Weise wird eine solche Abfolge von Reaktionen wiederholt, um den Gehalt an verzweigtem Cyclodextrin zu steigern.
Je größer die Anzahl der Wiederholung der umgekehrten Synthesereaktion des Spaltungsenzyms, die Einwirkung von Glucoamylase, ist, desto höher ist der Gehalt an mehrfach Glucosyl-verzweigtem Cyclodextrin und gegebenenfalls wird die gesamte Menge des Cyclodextrins in das mehrfach Glucosyl-verzweigte Cyclodextrin umgewandelt.
Abb. 1 zeigt eine Ausführungsform des Verfahrens der vorliegenden Erfindung, das in einem breiteren Anwendungsbereich gegebenenfalls verwendet werden kann. In bezug auf Stufe 1 von Fig. 1 kann jedes spaltende Enzym wie eine kommerziell erhältliche Pullulanase als enzymatisches Material verwendet werden. Ein Membranreaktor, der Gebrauch von nicht immobilisierten Enzymen macht, kann bei der vorliegenden Erfindung verwendet werden, jedoch sind immobilisierte Enzyme für ein kontinuierliches Verfahren vorteilhaft.
In bezug auf Stufe (2) in Fig. 1 kann jedes Material, das zur Trennung der Cyclodextrinkomponenten und Saccharide zum Verzweigen, wie ODS, Ionenaustauscherharze und Aktivkohle geeignet ist, zur Säulentrennung verwendet werden. Da jedoch die Säulentrennung die Verwendung eines Lösungsmittels, das eine Erniedrigung der Substratkonzentrationen mit sich bringt, erforderlich macht, werden bessere Ergebnisse erhalten, wenn Konzentratoren wie eine Hyperfiltrationsmembran und mehrfach wirksame Verdampfer an geeigneten Bereichen der Anlage vorgesehen sind. Wenn eine ODS-Säule verwendet wird, ist es bevorzugt, eine Ethanolelution zur Abtrennung der Cyclodextrinkomponenten durchzuführen, um die Leistungsfähigkeit der Säule beizubehalten. Jedoch wird dabei Gebrauch gemacht von einer losen (loose) Hyperfiltrationsmembran zur gleichzeitigen Entfernung von Ethanol und Wasser aus dem System.
In bezug auf Stufe (3) der Fig. 1 können sowohl freie als auch immobilisierte enzymatische Materialien als Enzym verwendet werden, jedoch werden vorteilhaft die immobilisierten Enzyme in kontinuierlichen Systemen verwendet. In bezug auf die Arten des verwendeten enzymatischen Materials können kommerziell erhältliche Rohmaterialien oder veredelte Materialien verwendet werden. Die Zuckerkomponenten aus Schritt (3) schließen nicht umgesetztes Cyclodextrin, Glucosyl-Cyclodextrin und Glucose ein, die entfernt werden können oder nicht. Aus diesem Grund kann Stufe (4), wenn möglich, ausgelassen werden.
Wenn die Glucose nicht entfernt wird, steigt der Gehalt an Glucose so, daß sich eine Erniedrigung der Aktivität ergibt, wenn es sich um ein System vom kontinuierlichen Typ handelt. Aus diesem Grunde kann die Glucose, wenn der Glucosegehalt einen vorher festgelegten Wert erreicht, aus dem Produkt an der Anlage zur Wiederverwendung der Maltose [(2)-(1)] unter Verwendung eines Fließbettabtrennungssystems wie zur Abtrennung von GF benutzt abgetrennt werden. Daneben kann dieses System ebenso zur Abtrennung von Cyclodextrin und Nichtcyclodextrinkomponenten (Oligosaccharide wie Glucose und Maltose) verwendet werden. Als Saccharide zum Verzweigen können Maltose, Maltosesirup und eine Mischung von Maltose mit Maltotriose wie "Oligotose" sowohl als Sirup oder Pulversirup mit Maltooligosacchariden verwendet werden. Die Cyclodextrine, die als Ausgangsmaterial verwendet werden können, können α-, β- oder γ-Cyclodextrin oder eine Mischung davon und Cyclodextrinpulversirup sein.
Wenn Maltose als Saccharid zum Verzweigen verwendet wird, ändert sich die Zuckerkomponente in den entsprechenden Schritten wie im folgenden zusammengestellt.
1) G₂+CD → G₂+CD+G₂-CD,
2) G₂+CD+G₂-CD → G₂
(zurück zu Schritt (1) nach Konzentration auf einen vorher festgelegten Wert)
und → CD+G₂-CD,
3) CD+G₂-CD → G₁+CD+G₁-CD,
4) G₁+CD+G₁-CD → G₁ und → CD+G₁-CD
(wiederum zurück zu Schritt (1) nach Konzentration auf einen vorher festgelegten Wert).
Durch diesen Zyklus wechselt die Zuckerkomponente insgesamt, ausgedrückt durch
CD →→ G₁-CD →→ (G₁)n-CD (n=2 und 3).
Wenn G₁+CD+ G₁-CD zu Schritt (1) in Abwesenheit von Schritt (4) und nach Konzentration auf einen vorher festgelegten Wert zurückgeführt wird, wird die Zuckerkomponente schließlich
G₁+(G₁)n-CD (n=1, 2 und 3).
Aus diesem Grund können Produkte unter Beibehaltung der Glucose erhalten werden, oder die Glucose kann in der letzten Stufe entfernt werden.
Es ist möglich, Produkte mit verschiedenen Gehalten an (G₁)n-CD (n=1, 2 und 3) durch Wahl der Anzahl der Zyklen herzustellen.
Entsprechend der vorliegenden Erfindung können die mehrfach Glucosyl- verzweigten Cyclodextrine einfach in großen Mengen durch eine Kombination der umgekehrten Synthesereaktion des Spaltungsenzyms mit der Hydrolysereaktion von Glucoamylase hergestellt werden, und so können deren Produkte bei niedrigen Kosten bereitgestellt werden. Daneben können aufgrund ihrer exzellenten physikalischen Eigenschaften wie Löslichkeit, die Produkte in weiten Anwendungsbereichen inklusive für Nahrungsmittel, medizinische und kosmetische Industrie verwendet werden. Im übrigen haben die entsprechend der vorliegenden Erfindung hergestellten Produkte einen höheren Gehalt an verzweigtem Cyclodextrin als die herkömmlichen Produkte, die Maltosyl-Cyclodextrin enthalten. Im besonderen sind die mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrine aufgrund ihrer Stabilität vorteilhaft, so daß sie durch Amylasen nur schwer angegriffen werden. Hierbei sei angemerkt, daß die Cyclodextrine mit einer unterschiedlichen Zahl von Glucoseverzweigungen, die in dem Produkt der vorliegenden Erfindung enthalten sind, gegebenenfalls im einzelnen zur weiteren Verwendung isoliert werden können.
Die vorliegende Erfindung wird genauer, aber nicht ausschließlich unter Bezug auf die folgenden Beispiele erläutert.
Beispiel 1
Eine Zuckerflüssigkeit mit α-Cyclodextrin und Maltose in einem Gewichtsverhältnis von 1 : 5 und auf eine Substratkonzentration von 60% und einen pH von 5,0 eingestellt, wurde durch eine Säule mit immobilisiertem Enzym bei 65°C über sechs Stunden zirkuliert, wobei teilweise veredelte Pullulanase auf einem Keramikträger durch die Silan-Kupplungsmethode immobilisiert worden war, und wurde im Anschluß in eine ODS-Säule, gehalten auf Raumtemperatur, zur Abtrennung der Maltose geleitet. Die Temperatur wurde auf 70°C zur Elution der Cyclodextrinkomponenten gesteigert. Das Eluat wurde durch eine Säule aus kommerziell erhältlicher immobilisierter Glucoamylase geführt und im Anschluß daran wurde es wiederum durch die ODS-Säule auf gleiche Weise wie oben geführt, um die Glucose zu entfernen, wobei eine Zuckerflüssigkeit mit 52,0% α-Cyclodextrin, 40,6% Glucosyl-α-Cyclodextrin und 7,4% Diglucosyl-α-Cyclodextrin erhalten wurde. Diese Zuckerflüssigkeit wurde durch eine Hyperfiltrationsmembran konzentriert und Maltose zu dem Konzentrat in einem Gewichtsverhältnis von 5 : 1 hinzugefügt, das wiederum auf eine Substratkonzentration von 60% eingestellt wurde. Im Anschluß wurde das Produkt wiederum der Pullulanase-, der Säulen-, Glucoamylase- und Säulenbehandlung unterzogen, wobei eine zweite Zuckerflüssigkeit mit 33,2% α-Cyclodextrin, 44,0% Glucosyl-α-Cyclodextrin und 22,8% Diglucosyl-α- Cyclodextrin erhalten wurde.
Auf gleiche Weise wie oben wurde eine dritte Zuckerflüssigkeit erhalten, die 25,5% α-Cyclodextrin, 37,2% Glucosyl-α-Cyclodextrin und 37,3% Diglucosyl-α-Cyclodextrin enthielt.
Hierbei sei angemerkt, daß die Zuckeranalyse durch HPLC unter den folgenden Bedingungen durchgeführt wurde: Säule - NH₂, 5 µ; Eluent - 50% Acetonitril; und Flußgeschwindigkeit - 0,8 ml.
Beispiel 2
Die Verfahrensschritte wurden auf gleiche Weise wie in Beispiel 1 durchgeführt, mit der Ausnahme, daß α-Cyclodextrin gegen β-Cyclodextrin ausgetauscht wurde, wobei eine erste Zuckerlösung mit 66,7% β-Cyclodextrin, 26,0% Glucosyl-β-Cyclodextrin, 7,0% Diglucosyl-β- Cyclodextrin und 0,3% Triglucosyl-β-Cyclodextrin; eine zweite Zuckerlösung mit 44,5% β-Cyclodextrin, 34,7% Glucosyl-β-Cyclodextrin, 16,7% Diglucosyl-β-Cyclodextrin und 4,1% Triglucosyl-β-Cyclodextrin; und eine dritte Zuckerlösung mit 29,7% β-Cyclodextrin, 34,9% Glucosyl-β- Cyclodextrin, 24,5% Diglucosyl-β-Cyclodextrin und 10,9% Triglucosyl-β- Cyclodextrin erhalten wurden.
Beispiel 3
Die gleichen Verfahrensschritte wurden durchgeführt wie in Beispiel 1 mit der Ausnahme, daß α-Cyclodextrin durch γ-Cyclodextrin ersetzt wurde, wobei eine erste Zuckerlösung mit 63,8% γ-Cyclodextrin, 28,0% Glucosyl-γ- Cyclodextrin, 8,0% Diglucosyl-γ-Cyclodextrin und 0,2% Triglucosyl-γ- Cyclodextrin; eine zweite Zuckerlösung mit 40,7% γ-Cyclodextrin, 35,9% Glucosyl-γ-Cyclodextrin, 18,7% Diglucosyl-γ-Cyclodextrin und 4,7% Triglucosyl-γ-Cyclodextrin; und eine dritte Zuckerlösung mit 25,9% γ-Cyclodextrin, 36,9% Glucosyl-γ-Cyclodextrin, 26,9% Diglucosyl-γ- Cyclodextrin und 10,3% Triglucosyl-γ-Cyclodextrin erhalten wurden.

Claims (1)

  1. Verfahren zur Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen, dadurch gekennzeichnet, daß es umfaßt In-Kontakt-bringen eines Spaltungsenzyms mit einer Mischung aus Maltose oder einer Substanz enthaltend ein Malto-Oligosaccharid wie Maltose mit einem Cyclodextrin, wobei man ein Reaktionsprodukt erhält, aus dem ein verzweigtes Cyclodextrin abgetrennt wird; Umwandeln des verzweigten Cyclodextrins in Glucosyl-Cyclodextrin unter der Einwirkung einer Glucoamylase, die im Anschluß mit Maltose oder einer Substanz, die Malto- Oligosaccharide wie Maltose enthält, gemischt wird, und aufeinanderfolgend Einwirkenlassen des Spaltungsenzyms und der Glucoamylase auf die resultierende Mischung.
DE3836618A 1988-05-13 1988-10-27 Verfahren zur Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen Expired - Fee Related DE3836618C2 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP63114778A JPH0698012B2 (ja) 1988-05-13 1988-05-13 複分岐グルコシルーサイクロデキストリンの製法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE3836618A1 DE3836618A1 (de) 1989-11-16
DE3836618C2 true DE3836618C2 (de) 1994-11-24

Family

ID=14646448

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE3836618A Expired - Fee Related DE3836618C2 (de) 1988-05-13 1988-10-27 Verfahren zur Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen

Country Status (6)

Country Link
US (1) US4931389A (de)
JP (1) JPH0698012B2 (de)
DE (1) DE3836618C2 (de)
DK (1) DK173098B1 (de)
FR (1) FR2631342B1 (de)
GB (1) GB2218418B (de)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5043436A (en) * 1986-11-20 1991-08-27 Kurita Water Ind., Ltd. Substrate for measurement of alpha-amylase activity
AU642253B2 (en) 1990-04-16 1993-10-14 Trustees Of The University Of Pennsylvania, The Saccharide compositions, methods and apparatus for their synthesis
EP0481038B1 (de) 1990-04-16 2002-10-02 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Saccharidzusammensetzungen, Verfahren und Apparate zu deren Synthese
US6518051B1 (en) * 1991-04-11 2003-02-11 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Saccharide compositions, methods and apparatus for their synthesis
JP3122203B2 (ja) * 1991-11-13 2001-01-09 塩水港精糖株式会社 新規ヘテロ分岐シクロデキストリンおよびその製造方法
DE4204315A1 (de) * 1992-02-13 1993-08-19 Consortium Elektrochem Ind Cyclodextringlycoside und verfahren zu ihrer herstellung
JP3078923B2 (ja) * 1992-04-08 2000-08-21 塩水港精糖株式会社 新規分岐シクロデキストリンおよびその製造方法
US5665585A (en) * 1992-09-03 1997-09-09 Alko-Yhiot Oy Recombinant production of glucoamylase P in trichoderma
DE4325057C2 (de) * 1993-07-26 1996-10-17 Consortium Elektrochem Ind Verfahren zur Herstellung von verzweigten Cyclodextrinen

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6192592A (ja) * 1984-10-12 1986-05-10 Norin Suisansyo Shokuhin Sogo Kenkyusho 分岐サイクロデキストリンの製造方法
JPS61287901A (ja) * 1985-06-17 1986-12-18 Nikken Kagaku Kk 新規分岐α―サイクロデキストリンの製造方法
JPS62106901A (ja) * 1985-11-05 1987-05-18 Nikken Kagaku Kk ジグルコシル−β−サイクロデキストリンおよびその製造方法
JPH0635481B2 (ja) * 1986-01-14 1994-05-11 日研化学株式会社 ジグルコシル−α−サイクロデキストリンおよびその製造方法
JPS6474997A (en) * 1987-09-17 1989-03-20 Nat Food Res Complex branched cyclodextrin and production thereof

Also Published As

Publication number Publication date
DK173098B1 (da) 2000-01-10
FR2631342B1 (fr) 1993-06-25
DK603088D0 (da) 1988-10-28
FR2631342A1 (fr) 1989-11-17
DE3836618A1 (de) 1989-11-16
JPH01287104A (ja) 1989-11-17
GB8821318D0 (en) 1988-10-12
JPH0698012B2 (ja) 1994-12-07
DK603088A (da) 1989-11-14
US4931389A (en) 1990-06-05
GB2218418A (en) 1989-11-15
GB2218418B (en) 1991-06-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE3020614C2 (de) Verfahren zur Gewinnung von Cyclodextrinen
US4668626A (en) Method for the preparation of branched cyclodextrins
DE3689607T2 (de) Cyclodextrin absorbierendes Material und seine Verwendung.
DE202017007248U1 (de) Abtrennung von Oligosacchariden aus der Fermentationsbrühe
DE202017007249U1 (de) Abtrennung von Oligosacchariden aus der Fermentationsbrühe
DE2840503A1 (de) Material zur reversiblen fixierung biologischer makromolekuele, verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung
DE3836618C2 (de) Verfahren zur Herstellung von mehrfach Glucosyl-verzweigten Cyclodextrinen
DE2560532C2 (de)
DE2108748B2 (de) Verfahren zur Herstellung von als Oligoglucosylfruktosen bezeichneten Oligosaecharid-Ge mischen
DE3886484T2 (de) Heterogen vielfältig verzweigte Cyclodextrine und Verfahren zu deren Herstellung.
DE69017345T2 (de) Verfahren zur Herstellung von Cellobiose.
DE4429018C2 (de) Verfahren zur Herstellung eines Enzyme immobilisierenden Trägers, Träger aus regeneriertem porösen Chitosan in Teilchenform und Verwendung des Trägers
DE2909093C2 (de)
DE3438664A1 (de) Verfahren zur herstellung pulverfoermiger kristalliner maltose
EP1141370B1 (de) Alpha-1,4-glucanketten enthaltende polysaccharide sowie verfahren zu ihrer herstellung
EP0255691A2 (de) Enzymatische Synthese von Cyclodextrinen mit alpha-Glucosylfluorid als Substrat für Cyclodextrin-alpha (1-4)glucosyl-transferase
CH649302A5 (de) Moranolin-derivate und verfahren zu deren herstellung.
DE2226581C3 (de) Verfahren zur Herstellung von Maltose
EP0985733B1 (de) Verfahren zur Herstellung von Cyclodextrin
DE69329122T2 (de) Verzweigte Cyclodextrine und Verfahren zu ihrer Herstellung
DE69720604T2 (de) Verfahren zur Herstellung von verzweigten Cyclodextrinen
DE69315735T2 (de) Verfahren zur Herstellung von verzweigtem Cyclodextrin
DE19545478C2 (de) Verfahren zur Herstellung von Gamma-Cyclodextrin
DE3788908T2 (de) Verfahren zur Herstellung von Zuckern aus Stärke.
DE4325057C2 (de) Verfahren zur Herstellung von verzweigten Cyclodextrinen

Legal Events

Date Code Title Description
8110 Request for examination paragraph 44
D2 Grant after examination
8364 No opposition during term of opposition
8327 Change in the person/name/address of the patent owner

Owner name: DIRECTOR OF NATIONAL FOOD RESEARCH INSTITUTE, MINI

8339 Ceased/non-payment of the annual fee