DE3218822C2

DE3218822C2 -

Info

Publication number: DE3218822C2
Application number: DE3218822A
Authority: DE
Inventors: Yoshiyuki Saitama Jp Tahara; Yasuhiro Niiza Saitama Jp Komatsu; Hiroyasu Ageo Saitama Jp Koyama; Reiko Hasuda Saitama Jp Kubota; Teruhito Tokio/Tokyo Jp Yamaguchi; Toshihiro Saitama Jp Takahashi
Original assignee: Nisshin Seifun Group Inc
Current assignee: Nisshin Seifun Group Inc
Priority date: 1981-05-18
Filing date: 1982-05-18
Publication date: 1990-10-18
Also published as: JPS57192340A; FR2505824A1; US4568765A; GB2098613B; DE3218822A1; JPH0128736B2; GB2098613A; FR2505824B1

Description

Die Erfindung betrifft Isoprenylaminderivate und deren Säureadditionssalze, die wertvolle Arzneimittel zur Bekämpfung von Virusinfektionen bei Wirbeltieren darstellen.

Es sind bereits verschiedene Substanzen bekannt, von denen behauptet wird, daß sie präventive oder lindernde Effekte bei Erkrankungen aufweisen, die durch Viren hervorgerufen werden, deren Wirt ein Wirbeltier ist, oder bei denen nachgewiesen wurde, daß sie in der Lage sind, die Symptome der Erkrankungen zu mildern durch signifikante Erhöhung der Antikörperaktivität in dem Tier. Zu den bisher beschriebenen Antivirotika gehören Interferon, Substanzen, die Interferon induzieren können, d. h. Induziermittel (Interferon-Induziermittel) und synthetische Substanzen, wie z. B. Amantadinhydrochlorid oder Methisazon, die direkt einen Inhibierungseffekt auf die Virusvermehrung ausüben. Bei Interferon handelt es sich um ein Glycoprotein mit Antiviren- und Antitumoraktivitäten, das in situ von den Zellen eines Wirbeltieres gebildet wird, wenn die Zellen mit einem Virus infiziert sind, und von dem bekannt ist, daß es bei der Therapie von infektiösen Virenerkrankungen sowie von Krebs wirksam ist. Zu bekannten Induziermitteln, die bei Wirbeltieren durch ein anderes Verfahren als die Virusinfektion die Bildung von Interferon induzieren, gehören natürliche hochmolekulare Substanzen, wie Doppelstrang-Ribonucleinsäure eines Bakteriophagus einer bestimmten Species oder synthetische hochmolekulare Substanzen, wie z. B. Doppelstrang-Ribonucleinsäure, für die ein typischer Vertreter Polyinosinsäure-Polycytidylsäure ist, oder niedermolekulare Induziermittel, wie Tiloron.

Bei der Herstellung von Interferon tritt jedoch das Problem auf, wie seine Reinigung durchzuführen ist, und in der Tat gibt es bis heute kein wirtschaftliches Verfahren zu seiner Herstellung. Andererseits sind konventionelle Interferon- Induziermittel bisher in der Praxis nicht angewendet worden, hauptsächlich wegen ihrer Toxizität. Synthetische Antivirenmittel, die direkt einen Inhibierungseffekt auf die Virusvermehrung ausüben, die derzeit im Handel erhältlich sind, weisen einen eher engen Anwendungsbereich bei durch Viren hervorgerufenen Erkrankungen auf, die durch Verabreichung dieser Agentien geheilt werden können, so daß man eifrig bemüht ist, neue synthetische Antivirenmittel zu finden.

Unter Berücksichtigung dieser Umstände wurden nun umfangsreiche Untersuchungen durchgeführt, um Verbindungen zu finden, die Interferon mit einem hohen Wirkungsgrad bilden können und darüber hinaus auf dem biologischen Niveau eine Antivirenaktivität aufweisen. Dabei wurden überraschend Verbindungen der nachstehend angegebenen allgemeinen Formel (I) und Säureadditionssalze davon gefunden, die eine ausgezeichnete Interferon induzierende Wirkung und gleichzeitig selbst im biologischen Test eine ausgezeichnete Antivirenaktivität aufweisen.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Isoprenylaminderivate der allgemeinen Formel

worin bedeuten:
n eine Zahl von 2 bis 10,
A und B einzeln jeweils ein Wasserstoffatom oder gemeinsam eine Einfachbindung, wobei dann, wenn n = 4, A und B eine Kombination der genannten beiden Fälle sein können,
R Wasserstoff, Benzoyl, Benzyl, niederes Alkyl oder niederes Acyl,
p die Zahl 2 oder 3 und
q die Zahl 2 oder 3,
sowie ihre Säurenadditionssalze.

Zur Herstellung der Isoprenylaminderivate der oben angegebenen allgemeinen Formel (I) und ihrer Säureadditionssalze kann das bekannte Verfahren angewendet werden, bei dem Isoprenylalkohol (z. B. Decaprenol, Solanesol, Phytol oder Geraniol) der allgemeinen Formel

worin A, B und n die oben angegebenen Bedeutungen haben, zuerst in ein entsprechendes Halogenid (z. B. in Geranylbromid, Solanesylbromid, Phytylbromid oder Decaprenylbromid) oder in einen entsprechenden Arylsulfonsäureester (z. B. in Decaprenyltosylat oder Solanesyltosylat) umgewandelt und dann das dabei erhaltene Halogenid oder der dabei erhaltene Ester in Gegenwart oder Abwesenheit einer Base reagieren gelassen wird mit einer Verbindung der allgemeinen Formel

worin R, p und q die oben angegebenen Bedeutungen haben.

Diese Reaktion wird in der Regel in einem organischen Lösungsmittel durchgeführt. Als organische Lösungsmittel in der Reaktion bevorzugt verwendbar sind übliche Lösungsmittel, wie Methanol, Äthanol, Chloroform, Isopropyläther, Benzol und Äthylacetat. Die Reaktion wird durchgeführt unter Verwendung eines großen Überschusses der Aminoverbindung der allgemeinen Formel (III) oder die Reaktion wird bei einer Temperatur innerhalb des Bereiches von Raumtemperatur bis zu 100°C in Gegenwart einer Base (wie z. B. Natrium- oder Kaliumhydroxid oder Natrium- oder Kaliumcarbonat) durchgeführt. Nach Beendigung der Reaktion kann das gewünschte Isoprenylaminderivat erhalten werden durch Behandeln der dabei erhaltenen Reaktionsflüssigkeit unter Anwendung üblicher Isolierungs- und Reinigungsverfahren, beispielsweise durch Extraktion, Konzentration, Säulenchromatographie oder Kristallisation.

Zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel (I), worin R Benzoyl, Benzyl, niederes Alkyl oder niederes Acyl bedeutet, kann ein anderes Verfahren angewendet werden, bei dem eine Verbindung der allgemeinen Formel

worin A, B, n, p und q die oben angegebenen Bedeutungen haben, unter den gleichen Reaktionsbedingungen wie oben hergestellt und die dabei erhaltene Verbindung dann in Gegenwart einer Base (wie z. B. eines tertiären Amins, wie Pyridin oder Triäthylamin) bei einer Temperatur von 0 bis 50°C mit einer Verbindung der allgemeinen Formel

R′COX (V)

worin R′ Methyl oder Phenyl und X ein Halogenatom bedeuten, reagieren gelassen wird unter Bildung einer Verbindung der allgemeinen Formel

worin R′ Methyl oder Phenyl bedeutet und A, B, n, p und q die oben angegebenen Bedeutungen haben, und die dabei erhaltene Verbindung mit einem Reduktionsmittel (wie z. B. Lithiumaluminiumhydrid) versetzt und in einem organischen Lösungsmittel reagieren gelassen wird. Bei der Reaktion als Lösungsmittel bevorzugt verwendbar sind Äther und Tetrahydrofuran. Die Reaktion wird vorzugsweise bei einer Temperatur innerhalb des Bereiches von Raumtemperatur bis zu 60°C durchgeführt. Nach Beendigung der Reaktion kann das gewünschte Isoprenylaminderivat hergestellt werden durch Behandeln der dabei erhaltenen Reaktionsflüssigkeit unter Anwendung üblicher Isolierungs- und Reinigungsverfahren, beispielsweise durch Extraktion, Konzentration, Säulenchromatographie und Kristallisation.

Ein Säureadditionssalz des auf diese Weise hergestellten Isoprenylaminderivats kann erhalten werden durch Mischen dieses Derivats in einem geeigneten Lösungsmittel (z. B. in Aceton oder Äthylacetat) mit der gewünschten Säure unter Bildung eines Salzes und Anwendung einer geeigneten Verfahrensmaßnahme, wie z. B. einer Konzentration oder Kristallisation, auf das Salz. Zu geeigneten Säureadditionssalzen, die in Arzneimitteln verwendet werden können, gehören beispielsweise diejenigen mit Chlorwasserstoffsäure, Essigsäure, Zitronensäure, Fumarsäure und Milchsäure.

Die Erfindung wird durch die nachstehenden Herstellungsbeispiele von erfindungsgemäßen Isoprenylaminderivaten näher erläutert.

Herstellungsbeispiel 1 N-Decaprenyltriäthylentetramin

Zu 100 ml einer Chloroformlösung, die 47,0 g Triäthylentetramin enthielt, wurden bei Raumtemperatur 100 ml einer Chloroformlösung, die 40 g Decaprenylbromid enthielt, über einen Zeitraum von 1 Stunde unter Rühren zugetropft und die Mischung wurde weitere 3 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsflüssigkeit wurde unter vermindertem Druck eingeengt und das Konzentrat wurde mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser und gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 41,1 g eines Konzentrats erhielt. Zu einer Lösung des auf diese Weise erhaltenen Konzentrats in Isopropyläther (100 ml) wurden 20 g Natriumcarbonat zugegeben. Zu der Mischung wurden unter Kühlen mit Eiswasser 30 ml Trifluoressigsäureanhydrid über einen Zeitraum von 1 Stunde unter Rühren zugetropft und die Mischung wurde weitere 3 Stunden lang gerührt, während mit Eiswasser gekühlt wurde. Die Reaktionsflüssigkeit wurde filtriert zur Abtrennung der unlöslichen Materialien und das Filtrat wurde unter vermindertem Druck eingeengt. Das Konzentrat wurde mit etwa 50 ml Benzol versetzt und unter vermindertem Druck weiter eingeengt. 43,9 g des Konzentrats wurden mit einem Benzol/Äthylacetat-Gemisch über eine mit 450 g Silicagel gefüllte Kolonne chromatographiert, wobei man 10,1 g N- Decaprenyl-N,N′,N′′,N′′′-tetratrifluoracetyltriäthylentetramin erhielt. Eine Mischung von 10,1 g des auf diese Weise erhaltenen N-Decaprenyl-N,N′,N′′,N′′′-tetratrifluoracetyltriäthylentetramins und 100 ml einer Äthanollösung von 10% Kaliumhydroxid wurde 1 Stunde lang unter Rückfluß erhitzt.

Die Reaktionsflüssigkeit wurde mit 300 ml Wasser versetzt und die Mischung wurde mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser und einer gesättigten Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man als öliges Produkt 9,5 g N-Decaprenyltriäthylentetramin der folgenden Formel erhielt

Nachstehend sind die gemessenen Werte der physikalischen Eigenschaften der Titelverbindung angegeben:
n _D ^28,0 = 1,5109
N.M.R. (δ-Wert in CDCl₃):
4,9-5,3 (10H, br)
3,20 (2H, d, J = 7 Hz)
2,72 (12H, s)
2,00 (36H, br)
1,60 (33H, s)
Elementaranalyse für D₅₆H₉₈N₄ · 2H₂O:
berechnet: C 77,90%; H 11,91%; N 6,49%;
gefunden: C 77,98%; H 11,75%; N 6,36%

Herstellungsbeispiel 2 N-Decaprenyl-N,N′,N′′,N′′′-tetrabenzyltriäthylentetramintetrahydroch-lorid

Zu 50 ml einer Chloroformlösung, die 5,0 g N-Decaprenyltriäthylentetramin enthielt, wie es in dem Herstellungsbeispiel 1 erhalten worden war, wurden 10 ml Pyridin zugegeben und unter Rühren wurden 30 ml einer Chloroformlösung, die 4,5 g Benzoylchlorid enthielt, über einen Zeitraum von 1 Stunde unter Kühlen auf einem Eisbad zugetropft und die dabei erhaltene Michung wurde weitere 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsflüssigkeit wurde mit Isopropyläther extrahiert und der Extrakt wurde mit Wasser, 5%iger Chlorwasserstoffsäure, einer 5%igen wäßrigen Natriumhydrogencarbonatlösung und einer gesättigten Kochsalzlösung in der genannten Reihenfolge gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Das Konzentrat (6,7 g) wurde mit einem Chloroform/Äthylacetat-Gemisch über eine mit 100 g Silicagel gefüllte Kolonne chromatographiert, wobei man 4,2 g N-Decaprenyl-N,N′,N′′,N′′′- tetrabenzoyltriäthylentetramin erhielt. Zu 50 ml einer wasserfreien Diäthylätherlösung des auf diese Weise erhaltenen N- Decaprenyl-N,N′,N′′,N′′′-tetrabenzoyltriäthylentetramins (4,2 g) wurden in kleinen Portionen bei Raumtemperatur 2,0 g Lithiumaluminiumhydrid zugegeben. Nach Beendigung des Zutropfens wurde die Mischung 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt und dann 3 Stunden lang unter Rühren zum Rückfluß erhitzt. Die Reaktionsflüssigkeit wurde mit 100 ml einer 10%igen wäßrigen Natriumhydroxidlösung versetzt und dann mit Isopropyläther extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser und einer gesättigten Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Das Konzentrat (3,8 g) wurde in 100 ml Aceton gelöst, mit einer Chlorwasserstoff-Äther-Lösung versetzt, um es schwach sauer zu machen, und dann unter vermindertem Druck zur Trockne eingeengt, wobei man 3,8 g N-Decaprenyl-N,N′,N′′,N′′′-tetrabenzyltriäthylentetramintetrahydroch-lorid der folgenden Formel erhielt

Nachstehend sind die gemessenen Werte für die physikalischen Eigenschaften der Titelverbindung angegeben:
Schmelzpunkt (F.): karamelartiger Zustand NMR (δ-Wert in CDCl₃) (freie Base)
7,13 (20H, s)
4,9-5,3 (10H, br)
3,46 (2H, s)
3,40 (6H, br-s)
2,90 (2H, d, J = 7 Hz)
2,2-2,6 (12H, m)
2,00 (36H, br)
1,60 (33H, s)
Elementaranalyse für C₈₄H₁₂₂N₄ · 4HCl · 3 /2H₂O:
berechnet: C 74,14%; H 9,55%; N 4,12%;
gefunden: C 74,32%; H 9,65%; N 4,11%

Herstellungsbeispiel 3 N-Geranyl-N,N′,N′′,N′′′-tetraäthyltriäthylentetramin

Zu 200 ml einer Chloroformlösung, die 60 g Triäthylentetramin enthielt, wurden unter Rühren 100 ml einer Chloroformlösung, die 20 g Geranylbromid enthielt, bei Raumtemperatur zugetropft und die Mischung wurde weitere 3 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wurde die Reaktionsflüssigkeit unter vermindertem Druck eingeengt, um das Chloroform daraus zu entfernen, und das Konzentrat wurde mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer 10%igen wäßrigen Natriumhydroxidlösung und einer gesättigten Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 21 g Konzentrat erhielt. Das Konzentrat wurde in 100 ml Benzol gelöst, mit 30 ml Essigsäureanhydrid und 10 g Natriumacetat versetzt und dann 4 Stunden lang unter Rühren zum Rückfluß erhitzt. Die Reaktionsflüssigkeit wurde in 300 ml einer 10%igen wäßrigen Natriumhydroxidlösung gegossen und dann mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer gesättigten Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Das Konzentrat (23,5 g) wurde durch Chromatographie mit einem Äthanol/Äthylacetat-Gemisch über eine mit 250 g Aluminiumoxid gefüllte Kolonne behandelt, wobei man 9,3 g öliges N-Geranyl-N,N′,N′′,N′′′-tetraacetyltriäthylentetramin erhielt.

Das dabei erhaltene N-Geranyl-N,N′,N′′,N′′′-tetraacetyltriäthylentetramin (9,3 g) wurde in 100 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran gelöst und bei Raumtemperatur wurde unter Rühren Lithiumaluminiumhydrid in kleinen Portionen zugegeben. Die Mischung wurde 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt und dann unter Rühren 3 Stunden lang zum Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde die Reaktionsflüssigkeit mit 5 ml einer 20%igen wäßrigen Natriumhydroxidlösung versetzt, zur Abtrennung von unlöslichen Materialien filtriert und dann wurde das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt. Das Konzentrat wurde mit Isopropyläther extrahiert, mit Wasser und einer gesättigten Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man als öliges Produkt 5,1 g N-Geranyl-N,N′,N′′,N′′′-tetraäthyltriäthylentetramin der Formel erhielt

Nachstehend sind die gemessenen Werte für die physikalischen Eigenschaften der Titelverbindung angegeben:
n _D²² = 1,4851
N.M.R. (δ-Wert in CDCl₃):
5,0-5,4 (2H, m)
3,10 (2H, d, J = 7 Hz)
0,8-2,9 (48H, m)
Elementaranalyse für C₂₄H₅₀N₄ · H₂O:
berechnet: C 69,85%; H 12,70%; N 13,58%;
gefunden: C 69,98%; H 12,81%; N 13,35%

Herstellungsbeispiel 4 N-Phytyl-N,N′,N′′,N′′′-tetraäthyltriäthylentetramin

Zu 200 ml einer Chloroformlösung, die 60 g Triäthylentetramin enthielt, wurden unter Rühren bei Raumtemperatur 100 ml einer Chloroformlösung, die 31 g Phytylbromid enthielt, über einen Zeitraum von 1 Stunde zugetropft und die Mischung wurde weitere 3 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung des Zutropfens wurde die Reaktionsflüssigkeit unter vermindertem Druck zur Entfernung des Chloroforms eingeengt und das Konzentrat mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer 10%igen wäßrigen Natriumhydroxidlösung und einer gesättigten Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 30 g eines Konzentrats erhielt. Das Konzentrat wurde in 100 ml Benzol gelöst, mit 30 ml Essigsäureanhydrid und 10 g Natriumacetat versetzt und die dabei erhaltene Mischung wurde 4 Stunden lang unter Rühren zum Rückfluß erhitzt. Nach Beendigung der Reaktion wurde die Reaktionsflüssigkeit in 300 ml einer 10%igen wäßrigen Natriumhydroxidlösung gegossen und dann mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit einer gesättigten Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Das Konzentrat (41 g) wurde durch Chromatographie mit einem Äthanol/Äthylacetat-Gemisch über eine mit 250 g Aluminiumoxid gefüllte Kolonne behandelt, wobei man 11 g öliges N-Phytyl-N,N′,N′′,N′′′-tetraacetyltriäthylentetramin erhielt. Das auf diese Weise erhaltene N-Phytyl-N,N′,N′′,N′′′- tetraacetyltriäthylentetramin (11 g) wurde in 100 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran gelöst und bei Raumtemperatur wurde unter Rühren Lithiumaluminiumhydrid in kleinen Portionen zugegeben. Die Mischung wurde 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt und dann 3 Stunden lang unter Rühren zum Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde die Reaktionsflüssigkeit mit 5 ml einer 20%igen wäßrigen Natriumhydroxidlösung versetzt, zur Abtrennung der unlöslichen Materialien filtriert und dann wurde das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt. Das Konzentrat wurde mit Isopropyläther extrahiert, mit Wasser und einer gesättigten Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man als öliges Produkt 7,3 g N-Phytyl-N,N′,N′′,N′′′-tetraäthyltriäthylentetramin der folgenden Formel erhielt

Nachstehend sind die gemessenen Werte der physikalischen Eigenschaften der Titelverbindung angegeben:
n _D²² = 1,4721
N.M.R. (δ-Wert in CDCl₃):
5,30 (1H, t, J = 7 Hz)
3,05 (2H, d, J = 7 Hz)
2,0-2,9 (20H, m)
0,8-2,0 (49H, m)
Elementaranalyse für C₃₄H₇₂N₄ · H₂O:
berechnet: C 73,58%; H 13,44%; N 10,10%;
gefunden: C 73,78%; H 13,51%; N 7,89%

Herstellungsbeispiel 5 N-Decaprenyldiäthylentriamin

Es wurden die gleichen Verfahrensmaßnahmen wie in dem Herstellungsbeispiel 1 durchgeführt zur Umsetzung von Decaprenylbromid mit Diäthylentriamin, wobei man N-Decaprenyldiäthylentriamin der nachstehend angegebenen Formel erhielt; die gemessenen Werte der physikalischen Eigenschaften dieser Verbindung sind in der weiter unten folgenden Tabelle I angegeben.

Herstellungsbeispiel 6 N-Solanesyltriäthylentetramintetrahydrochlorid

Es wurden die gleichen Verfahrensmaßnahmen wie in dem Herstellungsbeispiel 1 durchgeführt zur Umsetzung von Solanesylbromid mit Triäthylentetramin, wobei man N-Solanesyltriäthylentetramintetrahydrochlorid der nachstehend angegebenen Formel erhielt; die gemessenen Werte der physikalischen Eigenschaften dieser Verbindung sind in der weiter unten folgenden Tabelle I angegeben.

Herstellungsbeispiel 7 N-Decaprenyldipropylentriamintrihydrochlorid

Es wurden die gleichen Verfahrensmaßnahmen wie in dem Herstellungsbeispiel 1 durchgeführt zur Umsetzung von Decaprenylbromid mit Dipropylentriamin, wobei man N-Decaprenyldipropylentriamintrihydrochlorid der nachstehend angegebenen Formel erhielt; die gemessenen Werte der physikalischen Eigenschaften dieser Verbindung sind in der Tabelle I angegeben.

In den nachstehenden Tabellen stehen D für Decaprenyl, S für Solanesyl und Phy für Phytyl, wie in jeder chemischen Strukturformel angegeben.

Die physiologischen Effekte der erfindungsgemäßen Isoprenylaminderivate werden nachstehend näher erläutert.

1.) Effekt auf mit Vacciniavirus infizierte Mäuse

Gruppen zu jeweils 10 weiblichen ICR-Mäusen mit einem Gewicht von etwa 15 g wurden 0,1 ml einer verdünnten Lösung von Vacciniavirus an einer Stelle 2 cm von der Basis des Schwanzes entfernt intravenös injiziert. Am 8. Tag nach der Inokulation wurde die Anzahl der Defekte (krankhaften Veränderungen) in Form von kleinen Pocken auf der Schwanzoberfläche nach dem Anfärben des Schwanzes mit einer äthanolischen Lösung von 1% Fluoreszein und 0,5% Methylenblau gezählt. Jede in einer Surfactant-Lösung suspendierte Testverbindung wurde intraperitoneal in einer Menge von 50 mg/kg 24 Stunden vor der Inokulation des Virus an die Mäuse verabreicht, wodurch die Antivirus-Aktivität der Testverbindung beurteilt wurde an Hand der Inhibierung der Schwanzdefekte, berechnet in jeder Testgruppe im Vergleich zu einer Gruppe, der nur die Surfactant-Lösung verabreicht worden war. Die Rate der Schwanzdefektinhibierung jeder Testverbindung ist in der folgenden Tabelle II angegeben.

Tabelle II

2.) Antitumoraktivität

Gruppen, die jeweils aus 6 männlichen Balb/c-Mäusen mit einem Gewicht von etwa 20 g bestanden, wurden intraperitoneal 5 × 10⁵ Tumorzellen KN₇-8 verabreicht. Jede in einer Surfactant-Lösung suspendierte Testverbindung wurde den Mäusen 24 Stunden vor der Inokulation der Tumorzellen und am 2. Tag und am 5. Tag nach der Inokulation, insgesamt 3mal, intraperitoneal verabreicht (jedesmal in einer Menge von 30 mg/kg), und es wurde die Antitumor-Aktivität ermittelt, ausgedrückt durch die Anzahl der Überlebenden am 30. Tag nach der Inokulation. Die Anzahl der Überlebenden, bezogen auf jede Testverbindung, ist in der folgenden Tabelle III angegeben.

Tabelle III

3.) Humaninterferon-induzierende Aktivität (in vitro)

Nach dem Verfahren von Edward A. Havell et al. wurde die Interferon-Bildung induziert durch Behandeln von normalen Diploid- Zellen (Fibroplast), die von Menschen stammten, mit jeder Testverbindung (in Form einer Äthanollösung, verdünnt mit PBS (-), 25 n molare Suspension). Unter Anwendung des Radioisotopen-Mikroassay-Verfahrens von H. Ishitsuka et al. wurde die Interferonbildung gemessen an Hand der 3H-Uridin-Aufnahme- Inhibierungsrate. Die Rate der 3H-Uridin-Aufnahme-Inhibierung jeder Testverbindung wurde gemessen, wobei die in der folgenden Tabelle IV angegebenen Ergebnisse erhalten wurden.

Tabelle IV

4.) Anti-Vacciniavirus-Aktivität (in vitro)

Die Virus-Plaque-Bildungs-Inhibierungsrate einer Testverbindung wurde erhalten durch Behandlung von aus der Niere der afrikanischen grünen Meerkatze stammenden Verozellen mit der Testverbindungssuspension (die Verbindung in Form einer Äthanollösung wurde in der Hanks-Kulturflüssigkeit suspendiert, 50 n molare Konzentration) und der verdünnten Viruslösung. Es wurde die Inhibierungsrate der Testverbindung gemessen, wobei das in der folgenden Tabelle V angegebene Ergebnis erhalten wurde.

Tabelle V

5. Toxizität

Unter Verwendung von männlichen ddY-Mäusen mit einem Gewicht von 20 bis 25 g wurde durch intravenöse Verabreichung die LD₅₀-Dosis jeder Testverbindung bestimmt, wobei die in der folgenden Tabelle VI angegebenen Ergebnisse erhalten wurden.

Tabelle VI

Wie aus den vorstehenden Testergebnissen hervorgeht, weisen die erfindungsgemäßen aktiven Bestandteile (Wirkstoffe) eine die Interferonbildung induzierende Aktivität in vivo auf und gleichzeitig weisen sie eine geringe Toxizität auf bei einer ausgezeichneten Antiviren-Aktivität. Unter Berücksichtigung der Tatsache, daß nicht immer eine strikte Korrelation zwischen der Interferonbildungsaktivität und den einzelnen Antiviren-Aktivitäten bei den erfindungsgemäßen Wirkstoffen zu beobachten ist, wird auch die Möglichkeit in Erwärgung gezogen, daß die Antivirus-Aktivitäten dieser Wirkstoffe im biologischen Bereich nicht nur die Interferonbildung, sondern auch andere Abwehrmechanismen des Wirts betreffen. Als Humanerkrankungen, die durch Viren hervorgerufen werden, sind eine Reihe von Symptomen bekannt, wie z. B. die Herpesinfektionserkrankungen, wie Herpes simplex, Influenza und Masern.

Wenn nun die erfindungsgemäßen aktiven Bestandteile (Wirkstoffe) für die Verhinderung einer Virusinfektion und für die Behandlung von Virusinfektionserkrankungen eingesetzt werden, werden sie auf oralem Wege, durch Inhalieren oder auf ähnliche Weise sowie durch subkante, intramuskuläre und intravenöse Injektion an Patienten verabreicht. Je nach Zustand des Patienten, z. B. je nach Alter, Symptom und Art der Verabreichung des Wirkstoffes, wird der erfindungsgemäße aktive Bestandteil (Wirkstoff) in einer Dosie von 0,5 bis 20 mg/kg, vorzugsweise von 3 bis 5 mg/kg, mehrmals (2- bis 4mal) am Tag verabreicht.

Die erfindungsgemäßen aktiven Bestandteile (Wirkstoffe) können zu Präparaten für die Behandlung formuliert werden, beispielsweise zu Tabletten, Kapseln, Granulaten, Pulver, flüssigen Präparaten für die orale Verwendung, Augenlotionen, Supporitorien, Salben und Injektionspräparaten.

Wenn die erfindungsgemäßen Bestandteile (Wirkstoffe) oral verabreicht werden, können sie zu Tabletten, Kapseln, Körnchen (Granulat) oder Pulver verarbeitet werden. Diese festen Präparate für die orale Verwendung können üblicherweise verwendete Hilfsstoffe enthalten, wie z. B. Kieselsäurenanhydrid, Metakieselsäure, Magnesiumalginat, synthetisches Aluminiumsilicat, Lactose, Rohrzucker, Maisstärke, mikrokristalline Cellulose, hydroxypropylierte Stärke oder Glycin; und Bindemittel, wie z. B. Gummiarabicum, Gelatine, Traganth, Hydroxypropylcellulose oder Polyvinylpyrrolidon; Gleitmittel (Schmiermittel), wie z. B. Magnesiumstearat, Talk oder Siliciumdioxid; Desintegrationsmittel, wie z. B. Kartoffelstärke und Carboxymethylcellulosecalcium; oder Netzmittel, wie z. B. Polyäthylenglykol, Sorbitanmonooleat, Polyoxyäthylenhydriertes Rizinusöl und Natriumlaurylsulfate. Bei der Herstellung von weichen Kapseln können die erfindungsgemäßen aktiven Bestandteile (Wirkstoffe) insbesondere formuliert werden durch Auflösen oder Suspendieren derselben in Polyäthylenglykol oder üblicherweise verwendeten öligen Substraten, wie z. B. Sesamöl, Erdnußöl, Keimöl oder fraktioniertem Kokosnußöl, wie Miglyol®. Tabletten- oder Granulatpräparate können nach dem üblichen Verfahren beschichtet werden.

Flüssige Präparate für die orale Verwendung können in Form einer wäßrigen oder öligen Emulsion oder eines Sirups oder alternativ in Form eines trockenen Produkts, das vor der Verwendung mit einem geeigneten Vehiculum wieder aufgelöst werden kann, vorliegen. Zu diesen flüssigen Präparaten können üblicherweise verwendete Zusätze zugegeben werden, wie z. B. Emulgierhilfsmittel, sie Sorbitsirup, Methylcellulose, Gelatine und Hydroxyäthylcellulose; oder Emulgiermittel, wie z. B. Lecithin, Sorbitanmonooleat, Polyoxyäthylen-hydriertes Rizinusöl; nicht-wäßrige Vehicula, z. B. fraktioniertes Kokosnußöl, Mandelöl und Erdnußöl; oder Antiseptica, z. B. Methyl-p-hydroxybenzoat, Propyl-p-hydroxybenzoat oder Sorbinsäure. Außerdem können diese Präparate für die orale Verwendung erforderlichenfalls Konservierungsmittel, Stabilisatoren und ähnliche Zusätze enthalten.

Wenn die erfindungsgemäßen aktiven Komponenten (Wirkstoffe) in Form eines nicht-oralen Suppositoriums verabreicht werden, können sie unter Anwendung des üblichen Verfahrens unter Verwendung von oleophilen Substraten, wie z. B. Kakaoöl oder Witepsol® formuliert werden oder sie können in Form einer Rectumkapsel verwendet werden, die erhalten wird durch Einhüllen einer Mischung aus beispielsweise Polyäthylenglykol, Sasamöl, Erdnußöl, Keimöl und fraktioniertem Kokosnußöl in einer Gelatinefolie. Die Rectumkapseln können erforderlichenfalls mit wachsartigen Materialien beschichtet sein.

Wenn die erfindungsgemäßen aktiven Bestandteile (Wirkstoffe) in Form eines Injektionspräparats verwendet werden, können sie zu Präparaten einer Öllösung, einer emulgierten Lösung oder einer wäßrigen Lösung formuliert werden und sie können üblicherweise verwendete Emulgiermittel, Stabilisatoren oder ähnliche Zusätze enthalten.

Je nach Art der Verabreichung können die obengenannten Präparate die erfindungsgemäßen aktiven Bestandteile (Wirkstoffe) in einer Menge von mindestens 1%, vorzugsweise von 5 bis 50%, enthalten.

Die Verfahren der Verarbeitung der erfindungsgemäßen aktiven Bestandteile (Wirkstoffe) zu verschiedenen Präparaten werden in den nachstehenden pharmazeutischen Beispielen näher erläutert.

Pharmazeutisches Beispiel 1 Harte Kapselpräparate für die orale Verwendung

Ein Gemisch aus 25 g N-Decaprenyltriäthylentetramin und 7,5 g Polyoxyäthylen-Rizinusöl in Aceton wurde mit 25 g Kieselsäureanhydrid gemischt. Nach dem Verdampfen des Acetons wurde die Mischung mit 5 g Calciumcarboxymethylcellulose, 5 g Maisstärke, 7,5 g Hydroxypropylcellulose und 20 g mikrokristalliner Cellulose weiter gemischt und es wurden 30 ml Wasser zugegeben und durchgeknetet zur Herstellung einer körnigen Masse. Die Masse wurde unter Verwendung einer Pelletisiervorrichtung die mit einem Sieb mit einer Maschenweite von 0,70 mm (24 mesh B.S.) ausgestattet war, pelletisiert, wobei man Körnchen erhielt. Die Körnchen wurden bis auf einen Feuchtigkeitsgrad von weniger als 5% getrocknet und mit einem Sieb mit einer Maschenweite von 1,00 mm (16 mesh B.S.) gesiebt. Die gesiebten Körnchen wurden unter Verwendung einer Kapselfüllvorrichtung in eine Kapsel eingefüllt, so daß sie darin in einer Menge von 190 mg pro Kapsel enthalten waren.

Pharmazeutisches Beispiel 2 Weiches Kapselpräparat für die orale Verwendung

Es wurde eine homogene Lösung hergestellt durch Mischen von 50 g N-Decaprenyl-N,N′,N′′,N′′′-tetrabenzyltriäthylentetramintetrahydroch-lorid mit 130 g Polyäthylenglykol (Macrogol 400 g). Getrennt davon wurde eine Gelatinelösung hergestellt, die 93 g Gelatine, 19 g Glycerin, 10 g D-Sorbit, 0,4 g Äthyl- p-hydroxybenzoat, 0,2 g Propyl-p-hydroxybenzoat und 0,4 g Titanoxid enthielt und die als Kapselfilmbildungsagens verwendet wurde. Die vorher hergestellte Lösung wurde zusammen mit dem Kapselfilmbildungsagens mit einer flachen Stanzvorrichtung vom manuellen Typ behandelt, wobei man weiche Kapseln mit einem Inhalt von jeweils 180 mg erhielt.

Pharmazeutisches Beispiel 3 Injektionspräparate

Ein Gemisch aus 5 g N-Geranyl-N,N′,N′′,N′′′-tetraäthyltriäthylentetramin, einer geeigneten Menge Erdnußöl und 1 g Benzylalkohol wurde durch Zugabe von Erdnußöl auf ein Gesamtvolumen von 100 cm³ gebracht. Die Lösung wurde portionsweise in einer Menge von 1 cm³ unter aseptischen Arbeitsbedingungen in eine Ampulle gegossen, die dann versiegelt wurde.

Pharmazeutisches Beispiel 4 Injektionspräparate

Ein Gemisch aus 1,0 g N-Decaprenyltriäthylentetramin, 5,0 g hydrierter Rizinusöl-Polyoxyäthylen (60 Mol)-Äther, 20 g Propylenglykol, 10 g Glycerin und 5,0 g Äthylalkohol wurde mit 100 ml destilliertem Wasser gemischt und gerührt. Unter aseptischen Arbeitsbedingungen wurde die Lösung portionsweise in einer Menge von 1,4 ml in eine Ampulle gegossen, die dann versiegelt wurde.

Claims

1. Isoprenylaminderivate der allgemeinen Formel worin bedeuten:
n eine Zahl von 2 bis 10,
A und B einzeln jeweils ein Wasserstoffatom oder gemeinsam eine Einfachbindung, wobei dann, wenn n = 4, A und B eine Kombination der genannten beiden Fälle sein können,
R Wasserstoff, Benzoyl, Benzyl, niederes Alkyl oder niederes Acyl,
p die Zahl 2 oder 3 und
q die Zahl 2 oder 3,
sowie deren Säureadditionssalze.

2. N-Decaprenyl-triäthylentetramin.

3. N-Decaprenyl-N,N′,N′′,N′′′-tetrabenzyl-triäthylentetraminquadrohydro-chlorid.

4. N-Geranyl-N,N′,N′′,N′′′-tetraäthyl-triäthylentetramin.

5. N-Phytyl-N,N′,N′′,N′′′-tetraäthyl-triäthylentetramin.

6. N-Decaprenyl-diäthylentriamin.

7. N-Solanesyl-triäthylentetramin-quadrohydrochlorid.

8. N-Decaprenyl-dipropylentriamin-trihydrochlorid.

9. Pharmazeutisches Mittel, enthaltend mindestens eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 8 als Wirkstoff, gegebenenfalls in Kombination mit mindestens einem üblichen pharmazeutischen Träger und/oder Hilfsstoff.